第一篇：1091例手術(shù)中冰凍切片病理診斷準(zhǔn)確性分析

內(nèi)容摘要： 作者：張劍虹 成日青 林媛媛 趙秀芳 張凡 劉軍超 張九鴻

作者：張劍虹 成日青 林媛媛 趙秀芳 張凡 劉軍超 張九鴻

【關(guān)鍵詞】 冰凍切片;病理診斷;準(zhǔn)確性

隨著臨床醫(yī)學(xué)手術(shù)水平的不斷提高，手術(shù)中要求送檢冰凍病理切片快速診斷的病例日益增多，臨床手術(shù)醫(yī)師對病理報告的依賴性也逐漸增加，快速病理冰凍診斷已成為指導(dǎo)臨床手術(shù)醫(yī)師確診和制訂合理手術(shù)方案的必需手段之一。然而手術(shù)中冰凍切片病理診斷受到很多因素的制約，準(zhǔn)確性很難達(dá)到與常規(guī)石蠟切片相一致的效果。為此我們收集我院病理科近兩年的冰凍切片資料1091例，分析探討冰凍切片診斷價值和準(zhǔn)確性及其影響因素，旨在不斷提高手術(shù)中病理診斷質(zhì)量，從而降低醫(yī)療事故隱患。1 材料與方法

選取我院2003.1～2005.12月的冰凍切片資料1091例，為防止制成的冰凍切片鏡下組織形態(tài)發(fā)生改變，送檢標(biāo)本要求用干紗布包裹或置于不加任何液體的潔凈容器內(nèi)及時送達(dá)病理科，病理醫(yī)師詳細(xì)檢查大體標(biāo)本后取肉眼確認(rèn)病變最明顯區(qū)域1～2塊組織，迅速置全自動恒冷切片機(jī)（英國產(chǎn)shandn as 620e型）上制作切片。每個組織塊切取兩張切片，厚4μm，經(jīng)酒精固定，he染色，普通光鏡（olympus bx51）下觀察，并經(jīng)2～3名醫(yī)師閱片后集體討論確診；如送檢組織不合格（凝血塊、壞死滲出物等），立即請手術(shù)醫(yī)師第二次取材送檢，冰凍殘余組織做常規(guī)石蠟切片，并與另外多處取材石蠟切片對照分析。2 結(jié)果

1091例冰凍組織分布在12個系統(tǒng)及組織，如女性生殖系統(tǒng)485例，占總例數(shù)44.4%，乳腺病變364例，占33.3%，甲狀腺58例，占5.3%，消化系統(tǒng)52例，占4.7%等。送檢最活躍的科室為婦科、產(chǎn)科，其次為普外科等，見表1。表1 1091例冰凍標(biāo)本在各系統(tǒng)分布情況石蠟證實(shí)良性病變775例，其中771例冰凍符合，冰凍準(zhǔn)確率96.9%；石蠟證實(shí)惡性病變286例，冰凍報告惡性281例，冰凍準(zhǔn)確率97.6%；石蠟證實(shí)交界性病變29例，冰凍報告交界性24例，冰凍準(zhǔn)確率82.8%。1091例冰凍標(biāo)本中，與石蠟切片報告相符的為1056例，冰凍切片總的診斷準(zhǔn)確率為96.8%，誤診14例，誤診率為0.13%，見表2。表2 1091例冰凍與石蠟切片診斷結(jié)果比較

討論

3.1 冰凍切片病理診斷病變的價值 冰凍在外科手術(shù)中應(yīng)用廣泛，術(shù)中冰凍可使外科醫(yī)生在手術(shù)中知曉病變性質(zhì)（良性、交界性、惡性），從而決定適當(dāng)?shù)氖中g(shù)方案。自1960年cryostat冷凍切片機(jī)在臨床病理應(yīng)用以來，隨著病理技術(shù)人員素質(zhì)的提高和切片設(shè)備的更新?lián)Q代，冷凍切片質(zhì)量與石蠟切片已相差無幾，使病理醫(yī)師對手術(shù)中冰凍切片診斷準(zhǔn)確率不斷提高。我院近年內(nèi)投資進(jìn)口大型衡冷柜式切片機(jī)，為冰凍切片的準(zhǔn)確性提供了必要的保障。所以目前冰凍切片為臨床快速確定診斷和決定手術(shù)范圍的一個重要依據(jù)，主要應(yīng)用價值體現(xiàn)在：1.決定病變的性質(zhì)，要求病理醫(yī)師在最短的時間內(nèi)確定送檢組織是腫瘤或是非腫瘤性病變，如為腫瘤則需再確定良性或惡性，因病變不典型而不能確定良性、惡性病變時，則提一個考慮性或傾向性意見供臨床考慮，或待石蠟切片再定。2.確定切除腫瘤的邊緣是否殘留腫瘤組織。我們遇到最多的是乳腺癌手術(shù)實(shí)施保乳治療時的上、下、左、右及基底五個切緣，如切緣發(fā)現(xiàn)癌組織，則需擴(kuò)大切除范圍，此時冰凍切片結(jié)果對臨床手術(shù)范圍起到了決定性作用。3.辨認(rèn)組織，如先天性巨結(jié)腸須證實(shí)手術(shù)切緣的腸壁內(nèi)是否有肌間神經(jīng)節(jié)細(xì)胞存在，如未見神經(jīng)節(jié)細(xì)胞則須再切腸管,直至查見肌間神經(jīng)節(jié)細(xì)胞為止。4.確定淋巴結(jié)有無癌轉(zhuǎn)移，手術(shù)醫(yī)師取局部淋巴結(jié)確定有無癌轉(zhuǎn)移以決定手術(shù)方案，對于存在淋巴結(jié)隱性癌轉(zhuǎn)移的病理尤其必要。5.頭面部惡性腫瘤手術(shù)確定切緣有無腫瘤組織殘留對于清掃范圍和擴(kuò)大切除的方向關(guān)系重大，因?yàn)轭^面部血管、神經(jīng)豐富，微小的損傷都會使面容受到影響，因此手術(shù)中需要多個方向取組織，確定有無腫瘤殘留。冰凍切片診斷可預(yù)防手術(shù)切除過度或不足，有的也可避免不必要的二次手術(shù)。有報道冰凍切片準(zhǔn)確率為94%～97%[1,2]，本組資料為96.8%，與 文獻(xiàn) 報道基本相符合。

第二篇：手術(shù)中冰凍切片病理檢查志愿書

接受手術(shù)中冰凍切片病理檢查志愿書

門診、住院科 室ID號住院號

姓名年齡性別職別單位

手術(shù)中冰凍切片病理檢查是將切下的病變組織在冰凍切片機(jī)中迅速冷凍后制成病理切片，由病理醫(yī)師即刻在顯微鏡下檢查，做出病現(xiàn)診斷，主要目的是：（1）幫助判斷病變的性質(zhì)。如：炎癥、腫瘤或其它性質(zhì)的病變；如果是腫瘤，則需進(jìn)一步判斷是良性還是惡性腫瘤。（2）幫助判斷切除腫瘤組織的邊緣是否有殘留的癌組織。（3）幫助辨認(rèn)手術(shù)切除組織。

（4）判斷手術(shù)切除的淋巴結(jié)中有無轉(zhuǎn)移的癌細(xì)胞。冰凍切片病理診斷結(jié)果作為術(shù)中會診意見提供給臨床醫(yī)生，臨床醫(yī)生將其作為重要的參考依據(jù)決定進(jìn)一步手術(shù)的方式和范圍。與常規(guī)石蠟包埋切片相比，冰凍切片診斷的局限性是：（1）冰凍切片質(zhì)量較差，診斷準(zhǔn)確率低于常規(guī)石蠟切片。（2）在做冰凍切片采取活檢組織時，有造成腫瘤種植的可能，特別是在甲狀腺和肺等實(shí)質(zhì)器官。（3）術(shù)中冰凍切片技術(shù)不適用于脂肪組織和骨組織。（4）某些疑難病例和交界性病例有時在石蠟切片診斷都很困難，需要做免疫組化和電鏡觀察，僅憑冰凍切片難以確定診斷，因而要延緩病理診斷。（5）冰凍切片取材局限，有時局部的組織不能代表整個標(biāo)本。因此，有的病例冰凍切片組織象和手術(shù)切除大標(biāo)本的石蠟切片組織象相差很遠(yuǎn)，甚至造成假陰性診斷。（6）病變組織在冷凍過程中不可避免地形成冰晶，以及組織處理和診斷時間緊迫等技術(shù)因素所限，“冰凍”診斷的準(zhǔn)確率有一定的局限性，有可能與最終的“常規(guī)”病理切片診斷不相符合，最后病理診斷應(yīng)以“常規(guī)病理診斷為準(zhǔn)”。

醫(yī)師簽名：年月日

我已仔細(xì)閱讀并了解上述關(guān)于“冰凍”切片病理診斷的作用及其局限性，同意對實(shí)施手術(shù)中切除的病變組織進(jìn)行冰凍切片快速病理檢查。

患者本人簽字：

代表簽字：（與患者關(guān)系：）

年月日

注：本志愿書除不能明辨是非、不能正確表達(dá)的傷病員可由法定代理人簽字外，均由傷病員本人簽字

第三篇：卵巢腫瘤術(shù)中快速冰凍切片病理診斷分析

卵巢腫瘤術(shù)中快速冰凍切片病理診斷分析

【摘要】 目的 探討卵巢腫瘤術(shù)中快速冰凍切片的診斷價值，總結(jié)經(jīng)驗(yàn)。方法 本次收集85例卵巢腫瘤患者作為研究對象，均為本院2009年3月～2013年9月收治，術(shù)中進(jìn)行快速冰凍切片病理診斷，并與術(shù)后常規(guī)石蠟切片進(jìn)行對照。結(jié)果 本組85例患者快速冰凍切片與術(shù)后石蠟切片對照，總確診率為95.3%（81/85）。其中良性腫瘤確診率為100%（58/58），交界性腫瘤確診率為80%（8/10），惡性腫瘤確診率為88%（15/17）。誤診4例，誤診率為4.7%。結(jié)論 病理醫(yī)生與臨床醫(yī)生在術(shù)前及術(shù)中密切溝通，從實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果、病史、手術(shù)觀察等多方面分析，最終做出診斷，為臨床醫(yī)師提供卵巢腫瘤性質(zhì)，有助于臨床醫(yī)師選擇適宜的手術(shù)方式，應(yīng)用快速冰凍切片病理診斷的方法是確定手術(shù)方式和切除范圍的最佳手段。

【關(guān)鍵詞】 卵巢腫瘤；快速冰凍切片；病理診斷；準(zhǔn)確性

卵巢腫瘤種類繁多，可分為良性、惡性、交界性腫瘤，在婦科常見疾病類型占較高病發(fā)率，術(shù)前不易確診，婦產(chǎn)科醫(yī)生在手術(shù)中如僅憑肉眼觀察，難以確定腫瘤性質(zhì)。因腫瘤性質(zhì)不同，在治療方案的選擇上也存在較大差異。所以手術(shù)過程中確定腫瘤性質(zhì)及制定合理的手術(shù)治療方案所進(jìn)行的行快速冰凍切片病理診斷是完全必要的，更是對生育機(jī)能是否保留對側(cè)卵巢及手術(shù)范圍的選擇具有決定性作用[1]。作者就本院病理科2009年3月～2013年9月卵巢病變術(shù)中快速冰凍切片病理診斷進(jìn)行回顧性分析，旨在提高卵巢腫瘤冰凍切片病理診斷的準(zhǔn)確性。資料與方法

1.1 一般資料 本次共選擇研究對象85例，年齡16～77歲，平均年齡（38.4±3.1）歲。均與WHO卵巢腫瘤組織學(xué)制定的相關(guān)分類標(biāo)準(zhǔn)符合，其中良性58例，交界性10例，惡性17例。術(shù)后均行常規(guī)石蠟切片病理診斷，與術(shù)中快速冰凍切片病理診斷對照。

1.2 方法 標(biāo)本均為術(shù)中送檢新鮮組織，由經(jīng)驗(yàn)豐富的病理醫(yī)師取材，術(shù)中仔細(xì)觀察腫物表面并逐層切開腫物，選代表性的部位取材，腫塊病變直徑2.5 cm的腫塊根據(jù)腫瘤情況酌取2～3塊，置標(biāo)本于涂有OCT包埋劑的凍頭上，恒溫冷凍切片機(jī)內(nèi)冰凍切片，HE染色、光鏡診斷。20 min發(fā)出冰凍報告，報告分為惡性腫瘤、良性腫瘤、交界性腫瘤及延遲診斷。冰凍報告發(fā)出后，將原冰凍剩余組織做石蠟切片，復(fù)習(xí)原冰凍切片及石蠟切片，將診斷分為三類：①確診：指冰凍切片診斷與石蠟切片診斷完全相同或良惡性原則一致。②描述性診斷（延遲診斷）：指冰凍切片不能明確診斷，需待石蠟切片最后診斷。③誤診：腫瘤良惡性診斷錯誤。分假陽性和假陰性（假陽性指良性誤診為惡性，假陰性指惡性誤診為良性）。結(jié)果

本組85例患者快速冰凍切片與術(shù)后石蠟切片診斷結(jié)果對照，總確診率為95.3%（81/85）。其中良性腫瘤確診率為100%（58/58）；交界性腫瘤確診率為80%（8/10），惡性腫瘤確診率為88%（15/17）。誤診4例，誤診率4.7%，85例冰凍切片確診81例，診斷符合率95.3%，見表1。2例交界性腫瘤的誤診原因，1例由于為取材不當(dāng)，另1例由于制片不良，加上讀片經(jīng)驗(yàn)不足，未考慮由于制片不良導(dǎo)致的假象及干擾因素；而2例惡性腫瘤的誤診原因，1例由于取材的局限性，送檢標(biāo)本的體積大，取材不夠準(zhǔn)確及不夠全面，局部癌變的區(qū)域未被發(fā)現(xiàn)；另1例為送檢組織過少，加上患者年齡年輕，診斷時過于保守。討論

從臨床治療的角度，術(shù)中冰凍切片病理診斷解決了手術(shù)過程中難以診斷其疾病良、惡性的問題。近年來，經(jīng)濟(jì)體制改革的迅猛發(fā)展顯著帶動了醫(yī)療科技水平，公眾對診療服務(wù)要求不斷提高，婦科卵巢腫瘤患者在臨床具有一定特殊性，及時明確診斷，并制定有效治療方案是保障預(yù)后，提高患者生存質(zhì)量，維護(hù)家庭和諧和社會安寧的關(guān)鍵。卵巢腫瘤種類繁多，臨床無法確診。卵巢腫瘤患者的治療中，手術(shù)治療是最常用的也是最重要的治療方法。而即使輔以B超，CT等檢查，卵巢腫瘤在術(shù)前不易確診，手術(shù)醫(yī)生憑其肉眼也無法判定腫瘤性質(zhì)。而術(shù)中快速冰凍切片作為一項(xiàng)快速組織學(xué)診斷手段，在臨床已普遍應(yīng)用。術(shù)中冰凍可以為婦科醫(yī)生在手術(shù)中提供病變性質(zhì)（良性、交界性、惡性），從而決定適當(dāng)?shù)氖中g(shù)方案。冰凍切片診斷可預(yù)防手術(shù)切除過度或不足，有的也可避免不必要的二次手術(shù)。

本次研究以快速冰凍切片在卵巢腫瘤臨床診斷中的應(yīng)用價值為重點(diǎn)，選取相關(guān)病例展開探討，結(jié)合本次選取患者年齡結(jié)構(gòu)示，平均年齡（38.4±3.1）歲，提示處于生育期、有活躍且旺盛生育功能的女性為卵巢腫瘤高發(fā)人群，與相關(guān)研究[3，4]結(jié)論一致。分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果，得出卵巢腫瘤采用快速冰凍切片診斷準(zhǔn)確性居較高水平，確診率為95.3%，與文獻(xiàn)報道冰凍切片診斷腫瘤的準(zhǔn)確率為94%～97%[2]接近。熟練掌握WHO卵巢腫瘤分類是具備開展快速冰凍切片診斷的病理醫(yī)生的基本要求。較高的確診率是臨床制定恰當(dāng)?shù)闹委煼桨傅目煽勘ＷC。

提高快速冰凍切片診斷卵巢腫瘤的準(zhǔn)確率在于以下幾個方面：①在手術(shù)前對卵巢腫瘤患者的CT、B超等常規(guī)檢查結(jié)果和各種臨床表現(xiàn)等方面病史及腫瘤分布情況進(jìn)行詳細(xì)掌握，并且在手術(shù)過程中及時和臨床醫(yī)師進(jìn)行溝通；②對送檢的冰凍標(biāo)本要認(rèn)真仔細(xì)的檢查確定病變部位和器官，要查看標(biāo)本的完整性，有無包膜，包膜破損否，與周圍組織有無粘連，切面為囊性、實(shí)性，還是囊實(shí)性，囊性區(qū)囊壁局部是否有乳頭，都要仔細(xì)查看，卵巢腫瘤往往體積大，較大的漿液性和粘液性腫瘤大體標(biāo)本特征常有明顯局部差異，盡可能知道最可能存在何種腫瘤或病變，做到心中有數(shù)；③冰凍切片的取材是非常重要的環(huán)節(jié)，取材局限是造成延遲診斷的主要原因，取材時應(yīng)仔細(xì)觀察標(biāo)本的切面，選取腫塊的實(shí)性區(qū)、囊壁增厚處及襯有豐富的乳頭狀突起的囊壁等處。實(shí)性區(qū)應(yīng)取灰白色魚肉區(qū)域及不同質(zhì)地和不同顏色區(qū)域，易發(fā)現(xiàn)上皮增生改變和癌變的區(qū)域；④優(yōu)良的冰凍切片是保證冰凍切片診斷正確的關(guān)鍵，必須要制作優(yōu)質(zhì)的冰凍切片，要防止冰晶的發(fā)生，把握最佳切片溫度，在冰凍組織的在速凍板上出現(xiàn)冰凍包埋劑周邊開始變白，最后中央透明消失，這時就得及時從速凍板上取下冷凍頭，固定切片機(jī)夾頭上并開始修組織塊，為最佳的切片溫度（-25～-23℃）和切片時間。冰凍切片中出現(xiàn)的空泡，大都是取材時標(biāo)本接觸到水的原因，應(yīng)盡量避免，若不小心接觸到水后，制片過程中要多用無水酒精沖洗即可。切片要做到組織平整、厚薄均勻一致，細(xì)胞染色清晰，對比染色好。⑤病理醫(yī)師要客觀、冷靜，充分了解患者病史、體征及各項(xiàng)術(shù)前檢查，診斷時要嚴(yán)格把握惡性腫瘤的診斷標(biāo)準(zhǔn)，嚴(yán)防假陽性診斷，以免造成過度手術(shù)，引起醫(yī)療糾紛或致殘等嚴(yán)重后果。但對部分特殊病例，特別是交界性腫瘤，并且年齡年輕的，有生育要求的患者，又確實(shí)難以明確診斷的，應(yīng)及時與臨床醫(yī)師溝通并講明情況，臨床醫(yī)師根據(jù)患者的具體情況決定手術(shù)方式。

總之，快速冰凍切片作為手術(shù)中病理診斷，在明確腫瘤的良、惡性、明確邊緣組織有無腫瘤組織、淋巴結(jié)是否有轉(zhuǎn)移，具有重大幫助和指導(dǎo)意義。病理科醫(yī)師只有緊密與臨床聯(lián)系，不斷更新專業(yè)知識，認(rèn)真總結(jié)經(jīng)驗(yàn)，才能提高冰凍切片診斷的準(zhǔn)確性，減少誤診，為臨床提供快速準(zhǔn)確的診斷，滿足廣大患者的需要。

參考文獻(xiàn)

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第四篇：冰凍切片快速病理診斷30年總結(jié)

冰凍切片快速病理診斷30年總結(jié)

秦皇島市腫瘤醫(yī)院病理科

康文喜 謝芳芳 王小聰 李英 郵編：066001

術(shù)中冰凍切片快速病理診斷是1818年由Pieter de Riemer首先創(chuàng)造發(fā)明的，1891年Halsted和Accarty將冰凍切片技術(shù)列為正式診斷方法。目前國內(nèi)外已將此項(xiàng)技術(shù)普遍應(yīng)用于臨床，解決手術(shù)中的病理診斷問題。并日益受到外科醫(yī)生和患者的歡迎和肯定。隨著冰凍切片技術(shù)和臨床外科手術(shù)的發(fā)展，要求做冰凍的病例逐年增多，截止到2012年10月份，本院病理科開展快速冰凍病理診斷30余年，共完成冰凍快速病理診斷1476例，積累了一定的經(jīng)驗(yàn)和教訓(xùn)，為了更進(jìn)一步提高冰凍快速病理診斷水平，提高冰凍診斷準(zhǔn)確率，降低誤診率，作者將30年來所有冰凍切片快速病理診斷病例進(jìn)行總結(jié)分析如下。1 材料和方法

1.1 一般資料

本組1476例大部分來自本院住院病人，小部分來自其他醫(yī)院。其中男897例，女579例，年齡最大81歲，最小5個月。1.2 病變部位

乳腺1052例，軟組織42例，胃33例，淋巴結(jié)33例，骨12例，腹膜9例，睪丸及附睪8例，甲狀腺47例，小腸15例，大腸25例，膀胱5例，脊椎5例，闌尾10例，膽道14例，陰莖19例，卵巢53例，腦及腦膜3例，前列腺3例，肝12例，腎26例，脊髓2例，喉2例，子宮42例，精索1例，縱隔1例，腹膜后1例，眼1例。

1.3 方法

本組1476例均采用德國進(jìn)口萊卡冰凍切片機(jī)切片，HE染色，普通光學(xué)顯微鏡觀察。

1.4 結(jié)果

1476例中，惡性腫瘤687例，良性腫瘤388例，瘤樣病變170例，炎癥202例，結(jié)核29例，確診1457例，未能確診15例，誤診4例。2.討

論

冰凍切片質(zhì)量差，最初很多著名的病理學(xué)家如Ewing、Brewer、Simpson等曾經(jīng)懷疑冰凍切片的準(zhǔn)確性，1960年Cryostat冰凍切片機(jī)正式應(yīng)用于臨床后，冰凍切片質(zhì)量有了很大提高，但和石蠟切片相比仍很遜色，對準(zhǔn)確的冰凍病理診斷帶來一定困難，尤其對年輕的病理科醫(yī)生來說難度較大，缺乏經(jīng)驗(yàn)的病理科醫(yī)生難以勝任此項(xiàng)工作，下面根據(jù)自己個人的經(jīng)驗(yàn)發(fā)表一點(diǎn)看法。

2.1 冰凍切片快速病理診斷的優(yōu)缺點(diǎn)：冰凍切片快速病理診斷的優(yōu)點(diǎn)是在手術(shù)過程中隨時取材，迅速做出準(zhǔn)確可靠的病理診斷，同時也減少了病人二次手術(shù)的痛苦。缺點(diǎn)是切片厚，細(xì)胞大，層次多，易造成錯覺。另外冰凍切片診斷要求報告快，沒有更多思考討論余地，一旦報錯，將造成嚴(yán)重的無法彌補(bǔ)的后果。

2.2 準(zhǔn)確率：本文對1476例冰凍切片進(jìn)行了統(tǒng)計分析，結(jié)果準(zhǔn)確率為98.7%，未能確診率為1.02%，誤診率為0.3%，與國內(nèi)報道相比準(zhǔn)確率相仿，而誤診率低于各家報道。

2.3 未能確診和誤診的原因：⑴

取材不當(dāng)：恰當(dāng)準(zhǔn)確的取材是正確診斷的必備條件，取材不當(dāng)就不可能得出正確的病理診斷。當(dāng)臨床切取腫物困難時，所送檢的腫物標(biāo)本不一定是腫物中心組織，很可能是腫物邊緣組織，這種組織大部分是腫物周圍的正常成分，或僅帶有少量腫物，此時應(yīng)多切幾個切面進(jìn)行觀察，在把握不足的情況下可多取幾塊組織做切片，以防漏診。⑵

切片質(zhì)量不佳：切片過厚，組織未能展平出現(xiàn)折疊，組織缺損，染色深淺不均等都直接影響診斷結(jié)果。因此，一張高質(zhì)量的冰凍切片要求厚度不得超過10微米，而且要平整，無折疊無破損，染色深淺適中。

圖1：乳腺冰凍切片

圖2：同一病例常規(guī)石蠟切片

⑶

病理醫(yī)師經(jīng)驗(yàn)不足：醫(yī)生經(jīng)驗(yàn)不足是誤診的重要原因，從事冰凍快速病理診斷的醫(yī)生，必須要經(jīng)過相當(dāng)長的時間訓(xùn)練和有足夠的石蠟切片診斷經(jīng)驗(yàn)方能勝任此項(xiàng)工作。2.4 冰凍切片快速病理診斷應(yīng)注意的幾個問題：⑴

甲狀腺腫物冰凍切片

濾泡性甲狀腺癌、胚胎型甲狀腺瘤和 Hurhle 氏細(xì)胞腺瘤的良惡性鑒別診斷在常規(guī)石蠟切片上均有一定難度，在冰凍切片上若想準(zhǔn)確的進(jìn)行鑒別則更加困難，為了防止誤診，有些知名的老專家主張?jiān)诨鶎訂挝坏牟±砜撇灰碎_展甲狀腺腫物的冰凍切片快速病理診斷。我們認(rèn)為，當(dāng)冰凍切片較難做出良惡性判斷時應(yīng)等石蠟切片確診，不要冒然發(fā)出良性或惡性的報告。另外在許多甲狀腺疾病中常常出現(xiàn)一種多形性大細(xì)胞，易與惡性腫瘤細(xì)胞相混淆，在冰凍切片診斷時應(yīng)特別注意。這種細(xì)胞與惡性腫瘤細(xì)胞不同之處是染色質(zhì)分布均勻，胞漿豐富，不見核分裂像。⑵

淋巴結(jié)

術(shù)中送淋巴結(jié)做冰凍快速病理檢查多用于確定有無癌轉(zhuǎn)移，以便手術(shù)醫(yī)生選擇手術(shù)方式和手術(shù)范圍。原發(fā)于淋巴結(jié)的惡性淋巴瘤一般不用冰凍切片方法進(jìn)行診斷，因?yàn)檎Ｎ疵撍牧馨图?xì)胞膨脹，體積大，加之切片厚，很難與惡性淋巴瘤瘤細(xì)胞進(jìn)行區(qū)別，在冰凍切片診斷淋巴結(jié)原發(fā)性惡性淋巴瘤時要格外慎重。⑶

骨：骨腫瘤冰凍切片快速病理診斷因涉及到截肢，病理科醫(yī)生的責(zé)任十分重大，應(yīng)慎之又慎。在診斷中一定要密切結(jié)合臨床及X線，特別是鏡下觀察，必須結(jié)合大體標(biāo)本的形態(tài)特點(diǎn)、取材部位認(rèn)真分析作出判斷。因骨腫瘤病理形態(tài)變化多端，送檢組織塊小常不能代表腫瘤病變?nèi)玻o良惡性判斷帶來非常大的困難，在確實(shí)無法肯定良惡性時，應(yīng)縫合切口，待石蠟切片確診后再做處理。

第五篇：冰凍切片中常見問題分析

冰凍切片中常見問題分析

鄭則欽

龐瑾昱

陳斌

【摘要】 目的 探討冰凍切片技術(shù)在臨床病理診斷中的應(yīng)用。方法 收集外科手術(shù)中冰凍診斷病例，應(yīng)用快速冰凍切片法、快速冰凍染色法等對冰凍診斷病例進(jìn)行分析。結(jié)論 冰凍切片技術(shù)中常見的問題及改進(jìn)；影響冰凍切片質(zhì)量的因素；冰凍切片在病理診斷中的作用。

【關(guān)鍵詞】 冰凍切片； 病理診斷

冰凍切片是借助低溫使組織凍結(jié)達(dá)到一定的硬度進(jìn)行切片的一種方法，是手術(shù)過程中采取活體標(biāo)本，進(jìn)行快速的組織學(xué)診斷的方法，其便捷的優(yōu)點(diǎn)，利于術(shù)中確診病變性質(zhì)，決定手術(shù)范圍，但由于各種原因，影響冰凍切片的質(zhì)量，拖延病理報告發(fā)出的時間，直接影響著病理診斷的及時性、準(zhǔn)確性，間接影響病人的預(yù)后。

材料與方法

1.材料：收集外科手術(shù)中冰凍診斷病例

2.方法：應(yīng)用快速冰凍切片法、快速冰凍染色法等

結(jié)

果 組織取材大小要適宜，約為1.5×1.5㎝,厚2㎜。2 壞死組織影響冰凍切片的完整性。3 冰凍時間根據(jù)組織的大小及性質(zhì)所決定。4 冰凍溫度一般設(shè)置在－18～－20℃。5 染液的酸堿度要適宜。1 組織取材對制片的影響 組織取材大?。航M織塊大小要適宜，冷凍切片機(jī)內(nèi)切片刀移動的范圍有一定的限制，超出其范圍時，易致切片不全。一般情況下，冰凍切片的組織大小為1.5×1.5㎝,厚2㎜。但卵巢腫瘤及脂肪組織可稍微大些。組織塊過大，切片時阻力過大，易產(chǎn)生皺折，刀痕，組織易崩碎，增加制片難度，影響診斷。如需在同一標(biāo)本托上放大于兩塊組織時，應(yīng)盡量凍成一個平面，與刀鋒平齊，以防切片不完整，發(fā)生漏診。若送檢組織過小，請預(yù)先速凍一冷臺面，再行包埋，利于制片。另外，包埋時，應(yīng)將組織平放在凍頭的中央。組織內(nèi)含過多的脂肪或壞死組織：脂肪或壞死組織較一般的組織冷凍的溫度要低些，當(dāng)活組織達(dá)到所需的溫度時，其還比較軟，從而影響切片的完整性和拖延冷凍報告發(fā)出的時間。組織塊過冷：組織冷凍過度易致切片破碎或呈粉沫狀，不能制作一張完整的切片。組織塊冷凍不均勻：在配合使用液氮時，組織塊放入液氮時不能保持水平狀態(tài)且液氮量不足的情況下，可產(chǎn)生此現(xiàn)象。凍頭的溫度不足：冷凍切片時要求凍頭的溫度保持在－25℃～－30℃左右，凍頭的溫度達(dá)不到要求時，組織很快回軟，也不能保證切片的完整。冷凍時間對制片的影響：根據(jù)組織塊的大小、性質(zhì)，確定冷凍時間，一般13～17s（使用液氮者），若組織較大或脂肪組織時間可適當(dāng)長些，而甲狀腺、腦組織和淋巴組織等冷凍的時間相對要短些。冷凍時間要嚴(yán)格掌握，時間過長，切片易脆碎，其處理方法是：切出完整平面后用戴乳膠手套的拇指按壓回溫，直到切片完整為止，反之，時間過短，則需繼續(xù)冷凍，直到組織不粘刀片出現(xiàn)完整切片為基準(zhǔn)。冷凍箱體工作溫度對制片的影響：一般組織設(shè)定為－18～－20℃。但對一些較特殊的組織標(biāo)本，溫度應(yīng)適當(dāng)調(diào)整，如脂肪成分較多的組織以－30～－35℃為宜，纖維腺瘤，子宮等為－20℃，淋巴結(jié)，甲狀腺為－18℃，切片時，表面玻璃機(jī)器蓋子不要打開過大，以免箱體回溫過快，影響制片。保持凍箱的溫度，做到每次做完冷凍切片應(yīng)關(guān)好冷凍箱的蓋子。染色對制片的影響：尤以細(xì)胞核的染色最為關(guān)鍵，在寒冷的冬季，室溫過低時，影響核的著色，可適當(dāng)加溫，用以增色，蘇木素的酸堿度應(yīng)適宜，經(jīng)常觀察其染液的ph值，過堿時應(yīng)及時更換，鹽酸酒精分化適度，時間控制到位，否則易造成核著色不佳，染色質(zhì)不清晰，影響診斷的準(zhǔn)確性。冰晶的形成對制片的影響：此原因主要取決于組織含水量的大小，尤以組織細(xì)胞水腫，淋巴結(jié)，縱隔腫瘤，卵巢腫瘤為甚，送檢取材過程中接觸水源，速凍過程中使用的液氮時間尚未控制好，同是造成冰晶形成的原因，其解決方法為，使用液氮時間上控制到位，保證一次凍透標(biāo)本，組織送檢取材時，盡量避開水源，如遇含水量高的標(biāo)本時，應(yīng)盡量用干紗布吸干水分后再行冷凍，避免由于冰晶形成出現(xiàn)診斷上的失誤。操作者的動作應(yīng)迅速。6 切片皺縮或卷縮：這也是影響切片質(zhì)量的重要因素之一。常見的原因有：①刀鋒變鈍。② 防卷板粘有異物，防卷板的作用是防止切片卷縮，但若粘有異物，切片時組織會被擠壓而縮在一起。③ 防卷板與刀鋒的位置不平行、不協(xié)調(diào)。④ 組織塊包埋不完全，缺乏支撐作用。

預(yù)防與處理的方法：① 注意檢查刀具，及時更換刀口，定期磨刀。② 保持防卷板的清潔，每做一例冷凍切片，均應(yīng)將刀口及防卷板拭擦干凈，防止切片的污染和切片皺縮。③ 調(diào)整刀、防卷板的位置，保證兩者平行，且防卷板比刀鋒前0.2㎜左右。④ 包埋組織應(yīng)完全，沒法切片者再滴加包埋膠。7 切片脫落：冷凍切片是利用溫度差（即玻片與組織切片的溫度差）將切片粘貼在玻片上，然后進(jìn)行固定、染色。下面幾種情況下可影響切片粘貼的牢固程度，而導(dǎo)致切片脫落：① 組織內(nèi)含過多的壞死組織。組織細(xì)胞壞死崩解后，局部的滲透壓升高，吸收水分，切片一經(jīng)固定，水分逸出，壞死組織失去支撐作用，染色時組織容易脫落。② 固定液濃度過低，這是最常見的原因。③ 載玻片不干凈。④ 切片太厚。

預(yù)防及處理方法：避免組織內(nèi)帶有壞死組織，條件允許者重新取材；若沒有組織可代替，切片固定時間長些，經(jīng)95％乙醇雙重固定后，用電吹風(fēng)將切片吹干（溫度不能過高，以防破壞組織結(jié)構(gòu)）然后再進(jìn)行染色且動作應(yīng)輕柔。② 定期更換固定液。一般每周更換一次，例數(shù)較多者，適當(dāng)增加次數(shù)；另外，每次做完冷凍，應(yīng)及時將盛固定液的瓶蓋蓋好，以防固定液揮發(fā)而降低其濃度。③ 保持載玻片干凈，平時應(yīng)將玻片蓋好，防止灰塵或其它異物的污染。若新購買的玻片較臟，洗滌過后才使用。④ 調(diào)好切片的厚度，切片厚度以5～7um較為合適（脂肪組織可稍為厚些）。組織塊脫落：冷凍切片一般要求在30min內(nèi)發(fā)出病理報告，以便手術(shù)醫(yī)生能盡快選擇手術(shù)方式。但若組織塊脫落，會拖延病理報告發(fā)出的時間，而耽誤病人的手術(shù)時間。常見原因有：① 凍頭在冷凍機(jī)內(nèi)放置時間過長，致使包埋膠還來不及滲到凍頭的底部便凝固了，導(dǎo)致包埋膠與凍頭粘連不緊，稍受外力的作用便脫落；② 凍頭上的包埋膠沖洗不干凈。

總之，對于冰凍切片的質(zhì)量因素主要有以上幾點(diǎn)。如果能正確對待以上幾方面的問題，冰凍切片的質(zhì)量方可得到保證，且能制備出一張質(zhì)量優(yōu)秀的切片，為明確病理診斷提供較為便利的客觀條件。