第一篇:細胞生物學實驗教學改革與研究
細胞生物學實驗教學改革與研究
摘要:進行了以開設“三性”實驗為內容的細胞生物學實驗教學改革。幾年的教學實踐表明,實驗教學的改革,提高了學生學習的積極性和主動性,培養了他們發現、分析和解決問題的能力。
關鍵詞細胞生物學實驗教學改革綜合性設計性探索研究性
中圖分類號:G642.423文獻標識碼:文章編號:
作者簡介:張子峰(1975-),男,江蘇無錫人,講師,碩士,主要研究方向:細胞生物學。
細胞生物學是生命科學領域重要的基礎學科,其對學生的生命科學知識、能力、素質的發展具有直接和長遠的影響。近年來,細胞生物學和遺傳學、分子生物學的聯系日趨密切,新理論、新概念、新技術層出不窮,使得細胞生物學理論發展非常迅速,然而目前細胞生物學實驗教學普遍滯后于理論課,存在著種種缺陷:實驗教學模式單調,學生處于被動地位,難以激發其積極性和主動性;實驗內容陳舊,多是驗證性實驗,難以培養學生的創新能力;實驗內容單
一、缺乏綜合性,不利于學生綜合素質的培養[1-3]。隨著教學形勢和任務的改變,這種教學模式的弊端畢顯無疑,嚴重影響了該學科教學質量的提高。
我們對細胞生物學實驗教學模式進行了改革探索,開設了“三性”實驗。所謂“三性”實驗,即綜合性、設計性和探索研究性實驗?!叭浴睂嶒灥拈_設著眼于學生在學習了一定的理論知識基礎上為他們創造一定的科學研究環境和條件,讓他們在研究某一問題的過程中融合所學知識,有目
的地自主學習,培養科學的思維方式,使其由“知”轉化為“用”,同時在用中學,獲得創新能力,提高自身的綜合素質。以此推進實驗教學改革,使實驗室和實驗教學真正成為實踐能力和創新能力的培養基地[4]。1“三性”實驗的教學思想和特點 1.1科研的初步訓練
一般實驗不要求學生查閱文獻、分析資料,也不要求學生設計實驗步驟,他們進實驗室后只是按教師的板書或者實驗教材上的步驟按部就班地完成操作,最后寫出一篇模式化的實驗報告。這種教學模式顯然不能培養學生的科研能力?!叭浴睂嶒瀯t要求學生查閱文獻,分析、匯總資料,在此基礎上設計實驗方案。從實驗室準備到實驗操作的每一個環節都要求學生自己完成,學生的科研能力得到了全程的訓練。1.2綜合能力的培養
一般實驗學生處于被動地位,實驗原理由教師介紹,實驗準備工作由教師完成,實驗操作步驟也是現成的,甚至實驗報告也是有模式可以套用的。在這種情況下,學生不會去主動思考,不會主動提出問題,更不可能去主動分析和解決問題?!叭浴睂嶒炇怯蓪W生自己全程實施的,從頭到尾會出現許多問題,這些都得學生自己想辦法去解決(教師只是提出指導性意見,具體由學生自己去解決)。在此過程中,學生發現、分析、解決問題的能力,乃至和其他同學的交流和協調能力得到了提高,培養了學生的綜合能力。
1.3科學思維的培養
一般實驗學生按章操作,他們不會去深入探討這個實驗的設計思路。實
驗不成功則把原因歸為自己操作不當,不會去思考實驗的影響因素有那些,不會去進行總結歸納,不會去進行實驗設計的調整。“三性”實驗則不但要求學生自己設計實驗思路,當實驗失敗后,還要求他們自己找出原因,進行調整,有時甚至是全面的調整。在調整過程中,學生的科學思維得到了訓練。
2“三性”實驗的實施 2.1“三性”實驗課題的選擇
“三性”實驗課題的選擇,要根據學生已掌握的知識基礎和已具備的實驗能力,最好結合教師自己的研究課題來確定。課題的深度和廣度都要有適當的考慮,還應該具有一定的實用性。如果選題太簡單,則不能達到訓練學生能力和思維的目的;選題太復雜,學生占用時間過多,而且會覺得無從下手,也挫傷了他們的積極性。所以選題要符合學生及實驗室的實際,使實驗能順利完成,使學生既長技能又有興趣,激發他們的創新思維和能力。我們根據學生、實驗室及教師三方面的實際情況,將“動物細胞的培養與觀察”作為綜合實驗的選題(學生自定培養細胞的種類);將教師自身研究課題的內容作為設計性實驗的選題范圍(學生在此范圍內自定題目與研究內容);探索研究性實驗課題則由學生自定(學生自身感興趣而確實有能力完成的研究內容)。2.2“三性”實驗的操作
為了不打亂正常的教學秩序,我們把“三性”實驗定在開設細胞生物學實驗學期的中間兩個月內完成,而具體的操作時間則根據每組學生的具體情況由他們自由安排?!叭浴睂嶒灧秩齻€階段來實施:第一階段,學生
根據選題,查閱文獻、分析匯總資料,在此基礎上設計實驗方案,并將實驗方案交教師審核,教師將意見反饋給學生,學生修改方案,直到方案切實可行。我們在學期開始就將開設“三性”實驗的選題方式和要求通知學生,要求他們利用課余時間查閱相關資料,了解所選課題的背景知識,著 [1] [2] 手考慮實驗方案的設計。在“三性”實驗開始操作前兩周提醒學生,必須在這兩周內向教師上交實驗方案,經教師指導完成實驗方案的設計。第二階段,學生進實驗室進行操作,包括實驗的準備,各種試劑的配制,實驗步驟的操作,最后得出結果。教師根據每組學生上報的實驗時間進行統籌安排,并在實驗設備和藥品試劑方面給學生以保障。第三階段,同組學生匯總結果,進
行總結討論(可以邀請教師參加,但應注意“學生為主體”的原則,立足于啟發引導,抓住關鍵時機進行指導)。最后,學生根據討論意見,完成一篇科研論文。
2.3“三性”實驗的管理模式
“三性”實驗實行學生自我管理的模式,將他們分為實驗小組,每組3-4人,每組推選1位組長,組長負責和教師溝通。每班成立一個班長負責制的實驗管理小組,成員為每小組的組長,負責安排相關同學配合教師完成以下工作:(1)實驗前領取實驗試劑和器具;(2)實驗過程中實驗室的水電、藥品安全、儀器使用和登記情況、清潔衛生;(3)實驗完成后整理實驗室。
2.4實驗論文的寫作
科學論文和實驗報告都是科學實驗的記錄和總結,但兩者要求不同。實
驗報告只要求報告實驗過程和結果,而科學論文則是總結科學實驗結果的文獻。大多數學生對如何寫科學論文感到無從下手,因此教師應該對他們進行指導。首先,教師應指導學生查閱資料的方法、相關資料的刊物名稱,并介紹幾篇與選題內容相關的論文范例。同時,教師要將科學論文的寫作要求詳細而清晰地告訴學生。學生科學論文要在教師的指導下反復修改,力求實驗結果詳實、完整,表達準確,分析清晰透徹。3“三性”實驗的評價
對學生“三性”實驗的評價應綜合考慮方案設計、實驗過程和課題論文3方面的因素給出成績。實驗設計方案和課題論文是按組為單位上交的,但要求對每位學生的分工予以說明,最后附上每位學生的總結、心得和自評報告。我們制定的評分標準如下表:
表1實驗評分標準
項目 標準 分值 查閱資料
方案設計
實驗操作
實驗結果
課題論文
平時表現
完整、全面
思路清晰、合理、有創意
規范、能分析解決問題
詳實、準確
格式規范、條理清楚、表達準確
積極主動、善于和教師同學交流協調 10 20 30 10 20 10
4“三性”實驗的教學效果
我們從2001級本科生開始開設“三性”實驗,截止到2005年第一學期,參加學生共計600人。我們對他們發出調查問卷600份,收回600份,結果如下:
表2“三性”實驗教學效果
內容 是()否()
1、你對“三性”實驗是否感興趣 578(96.33)22(3.67)
2、是否培養了動手能力及解決問題的能力 523(87.17)77(12.83)
3、是否激發了創新思維 516(86)84(14)
4、是否培養了科研能力 495(82.5)105(17.5)
5、是否培養了綜合素質 554(92.33)46(7.67)
從調查的結果來看,學生對實驗教學改革的認識和態度較為積極,具有教強的自主學習意識和探索精神,并希望自己的實踐能力和綜合素質得到較好的培養,而“三性”實驗的開設較好地達到了這一目的。5“三性”實驗實施過程中存在的問題及改進
“三性”實驗教學模式尚處于摸索階段,從教師和學生的思想認識到具體實施過程還存在著一系列問題。5.1學生的思想認識
從問卷調查結果來看,大多數學生對這一新型的教學模式感到興趣昂然,積極性和主動性很高,也的確在實驗中鍛煉他們的綜合能力。然而部分學生對“三性”實驗的重要性和意義認識不清,思維還停留在傳統實驗的模式中,碰到問題不主動去分析、解決,而是等待教師的解答或者依賴別的同學。因此,教師有必要在“三性”實驗中改革對學生考核方式。教師在考核時不僅僅要看學生的實驗設計和實驗論文,更要加強考核他們在實驗過程中的分析解決問題的能力以及和別的同學的交流和協調能力。5.2對教師的要求
“三性”實驗對教師的素質提出了更高的要求,要求教師理論知識較全面、豐富;要求教師對學科領域的研究進展有一定的了解;要求教師較全面的熟悉實驗的技術操作工作,能指導學生實驗。教師在實驗前要化更大的工夫去備課,明確實驗設計的目的和思路,預想實驗中可能出現的問題和對策,同時要熟練掌握實驗操作技術,能正確自如的指導學生。5.3實驗過程中實驗室的有序運行和管理
實驗過程中常出現藥品和儀器使用的混亂和短缺現象。教師和實驗室人員必須相互協作,密切配合,開始實驗前調試儀器,準備好學生所需的藥品,以保證實驗的正常運行。另外,要加強學生的自我管理,儀器和藥品必須有專人負責,使用要登記。
“三性”實驗的開設為學生提供了更多更廣闊的創新空間,能有效地提高學生的綜合素質。但是“三性”實驗在教學的內容、形式、實施操作等方面還存在著許多值得我們探討的問題。在以后的教學中,我們將繼續探索。
參考文獻
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第二篇:新形勢下細胞生物學教學改革與實踐(范文)
新形勢下細胞生物學教學改革與實踐
【摘要】為適應新形勢下的教學要求,圍繞大學生實踐和創新能力的培養,對細胞生物學教學進行了改革與實踐,實施了互動式教學模式、角色互換式教學模式、開放性課題培養模式和讀書報告教學模式,取得了明顯成效,為進一步提高大學生教學質量和人才培養水平提供參考。
【關鍵詞】細胞生物學教學改革教學實踐
【基金項目】2013教育部專業綜合改革試點項目、2012廣東省專業綜合改革試點項目。
【中圖分類號】G642 【文獻標識碼】A 【文章編號】2095-3089(2014)06-0161-02
細胞生物學對研究機體的結構與功能有重要的理論和實踐意義,是一門重要的必修的生命科學基礎課程。近幾十年來,細胞生物學發展迅速,已成為當代生命科學的前沿學科之一。因此細胞生物學的學習和實踐對生命科學領域的學生有著至關重要的意義。然而如何讓大學生學好細胞生物學是長期困擾教師的一個難題,細胞生物學本身抽象難懂,知識量大,發展迅猛,而當前的教學方法主要是灌輸式教學法,即教師講,學生聽,學生被動接受,學習興趣不濃、課堂氣氛沉悶。學生由于基礎理論掌握不佳,實踐和創新就沒有基礎支撐,就無法成為合格的高素質人才。因此近年來我校緊密結合國家和廣東省中長期教育規劃綱要精神,扎實推進人才培養模式改革,切實加強創新型應用型人才培養,服務地方經濟社會發展,而課程改革是創新型應用型人才培養的重要抓手。創新型應用型人才培養的精髓就是培養學生的實踐和創新能力,因此,圍繞培養大學生的實踐和創新能力這一目標,近幾年來作者在該課程的教改方面進行了一些探索,有一些心得體會,現報道如下:
一、互動式教學模式
所謂“互動”就是以教師為主導,學生為主體,教學中在教師的啟發下,引導學生去發現,在學生發現的情況下,促使教師去啟發,師生密切配合,在和諧、愉快的情境中實現教與學的共振[1]。除了授新課前的記憶性提問和授課中的啟發式提問外,小組討論是效果顯著的互動式教學模式。小組討論采用按學號或自由組合方式組成討論小組,各小組內部推薦小組長,在組長的協調組織下,分析材料和合作討論,討論的結果由小組推薦人員進行陳述,對于小組間不同的結果可進行辯論,當堂解決不了的問題可通過查閱資料后進行解答。小組討論使學生由原來的被動的接受知識者轉變為主動學習知識者,從而知識掌握度好、涉及面廣,能主動地從多角度、多層次、多元化地對知識進行剖析和思考。通過小組討論方式,激發了學生學習主動性,提高了課堂教學效果,增強了學生語言運用能力,培養了學生的團隊協作精神。
二、角色互換式教學模式
傳統的教學方式主要是灌輸式教學,學生是“教―學”中的從屬,對課程的參與度低,學習積極性差,角色互換式教學在提高學生的課程參與度,激發學習積極性方面有重要作用。角色互換式教學即學生講授,教師指導的教學模式。取課程中1~2章內容安排角色互換式教學,學生按學號或自由組合方式組成講授小組,在組長的協調組織下,認真學習課程教材和相關參考資料,按照教學大綱要求合作備課,課間通過小組競賽的方式擇優選取3個優秀小組進行課堂授課,授課中隨時解答學生的提問,每個小組隨機抽取1名學生做評委,根據小組備課情況、授課情況、解答問題等進行評分,根據評分確定名次,按照不同名次給每個小組成員加分,分數作為期末考試的一部分,最后,各小組分享授課的心得和體會,老師給予適時引導和總結。角色互換式教學使學生保持了一種活躍的學習狀態,而且后續教學中很多學生主動了解學習計劃,教學進度和培養方案,大大提高了學生課程參與性。角色互換式教學使學生的自學能力、分析問題能力、解決問題能力、語言表達能力、邏輯思維能力及組織材料的能力等都得到了鍛煉和提高。
三、開放性課題培養模式
實驗操作是細胞生物學教學的重要組成部分,是學生實踐和創新的重要平臺,然而傳統的實驗基本上都是驗證性的,其目標旨在培養學生的基本實驗技能而不是創新能力,這種教學模式束縛了學生創新思維的培養。為了解決這一問題,我們在實驗教學中引入了開放性課題培養模式,開放性課題包括了設計性實驗和研究性實驗[2],設計性實驗教師給出實驗項目的實驗目標,而實驗方案、實驗步驟等由學生課題小組根據所學知識,所查資料等自行設計完成;研究性實驗完全由學生課題小組根據課程學習中發現的科學問題自行查閱相關資料,確定實驗項目名稱、目的、方案等,獨立完成實驗。教師在開放性課題培養模式中起到指導和監控的作用,不論設計性實驗還是研究性實驗,課題小組在形成實驗方案過程中,教師給予適時指導,并對實驗方案進行可行性分析,審閱合格后學生按照實驗方案進行課題研究,最后教師對學生提交的論文進行總體評價。開放性課題培養模式對學生創新思維能力的培養起到積極的作用。
四、讀書報告教學模式
細胞生物學日新月異,發展迅速,為了能夠更好的了解學科的前沿動態和新技術的應用,我們在教學中根據課程內容需要穿插讀書報告式教學,即根據課程進度,學生自行查找最新的相關文獻,在課堂上用10~15 min對相關文獻內容作綜述式報告,介紹最新研究進展,同時選取1~2篇有代表性的高層次論文作詳細講解,對涉及的已知的理論知識和技術方法簡要說明,對前沿的新知識和新技術作詳細介紹。讀書報告教學模式不僅使學生能更好掌握細胞生物學課程的基礎理論和基本技術,而且對學科前沿有所了解,對新技術的應用有所掌握,更重要的是培養了學生科技文獻查閱能力,通過對文獻資料的分析思考,又激發了他們的創新思維和創新意識。
為了響應我校創新型應用型人才培養的號召,細胞生物學教學經過幾年的教學改革和實踐,在培養學生的實踐和創新能力方面總結了一定的經驗,取得了一定的成效。但還需不斷的努力探索和學習,不斷提高自身的素質和能力,才能為社會培養出更多具有良好適應能力、競爭能力和創新能力的生物學人才。
參考文獻:
[1]張金海,孫紅衛.互動式教學在大學英語課堂教學中的應用[J].吉林廣播電視大學學報,2010,(8):127-128.[2]劉翠紅,陳秉巖,王建永.基于學生實踐和創新能力培養的實驗教學改革[J].科技創新導報,2011,(1):151-152.
第三篇:細胞生物學教學改革
細胞生物學教學改革
摘 要:細胞生物學是從細胞的整體水平、亞顯微結構水平和分子水來研究生命活動的基本規律。然而細胞生物學內容繁多, 看不見、摸不著,枯燥無味, 學生沒有感性認識, 難于理解,所以在教學過程如何解決這一問題成為教學的首要任務。我們要以學生為出發點,提高教學水平。
細胞生物學是生命科學中的一門重要基礎學科, 是現代四大前沿生命學科之一。它與其他生命科學理論互相聯系、互相滲透、互相促進[1]。它是從細胞的整體水平、亞顯微結構水平和分子水來研究生命活動的基本規律。然而細胞生物學內容繁多, 看不見、摸不著,枯燥無味, 學生沒有感性認識, 難于理解, 所以有些學生產生厭學情緒如何解決教師難教, 學生難學的狀況。近年來,我們以學生為中心,結合其相關知識基礎及學習興趣,在實際教學中對教學內容、教學手段和方法以及實踐教學等諸多環節進行了一系列優化組合和改革,以提高教學效果。以學生為中心,融洽師生關系,增強學生學習興趣
學生是學習的主體,教師要立足于把學生作為認知的主體,尋找學生個性中積極因素, 以此為出發點, 因材施教,能更好地挖掘學生的潛能, 變潛能為能力, 增強學生學習細胞生物學的興趣。教師必須德才兼備, 德高望重, 要熱愛學生, 具有與學生打成一片的親和能力,幫助學生解決專業知識和生活中的困難。要用真心和實際行動去感化學生, 同時要尊重學生的個性, 倡導同學之間互相尊重、互相幫助、團結友愛, 使得每一位學生都生活在一個融洽和諧的集體之中。良好的師生關系和同學之情能促進學生積極的個性充分展現, 在非智力因素的影響下, 促進智力因素的發展, 增強學生學習細胞生物學的興趣。改革教學方法,不斷提高教學質量
教師在教學過程中應發揮組織者、指導者作用。教學過程中,教師個人的敬業精神和專業素質至關緊要,不僅要具備堅實的專業基礎知識和相關的實踐經驗,還應及時獲取各種相關信息以充實自己。細胞生物學課程教學中,教師如果掌握較多關于生命科學的新發現及其它最新前沿成果,就會使講課內容豐論文聯盟www.tmdps.cn整理富多彩而又不失專業水準,而介紹輔助信息時自然地改變了相對嚴肅的課堂氣氛,使得師生之間的距離得以縮短,彼此容易產生一種交流的意念而促使教、學雙方的互動。
充分利用現代教學手段,多媒體教學是新近發展起來的教學輔助技術,是課堂教學手段改革的一種方向,在細胞生物學課堂上采用多媒體教學,其圖文并茂、動靜結合、表現力強的特點,更利于營建課堂教學氛圍,對提高教學質量、改革教育方式能起到良好的促進作用。
多媒體教學可以把細胞的顯微和亞顯微結構形象化、具體化,避免學生因為細胞生物學的內容抽象、難懂而覺得枯燥,覺得一節課下來什么也沒聽懂,猶如坐在云端,降低教學難度,有利于學生對知識的理解,增強學生的學習興趣,激發學習積極性。例如,細胞骨架這一節微絲的組裝,可以用動畫來形象的表達它的“踏車模型”,這樣學生就容易理解。當然多媒體課件教學也存在局限和不足,如有些課件內容簡單,缺乏有效的組織管理與提煉,只是大量堆砌教材內容,教師課前不再充分的備課,知識簡單的照讀多媒體上的內容,不能把把前后內容連貫起來,而且放映速度快,有的學生還沒聽明白、看明白,就放到下一頁了。這樣就沒沒有起到很好的教學效果。所以教師要在課前搜集資料使課件內容生動、豐富,也要認真備課,這樣在教學才能做到融會貫通,才能有成效。完善實驗教學論文聯盟www.tmdps.cn
實驗教學是細胞生物學教學不可或缺的內容,它可以讓學生對理論課學習的內容加深映象,還可以提高學生的動手能力。在實驗課教學中首先教師講解實驗步驟過程,然后大部分實驗留給學生自己動手,在學生動手過程中給予學生解決出現的問題,最后讓沒有做出結果的學生總結失敗的原因,給予做好的學生以獎勵,這樣無形之中可以增加學生對細胞生物學的學習興趣,還能提高學生的學習水平,為以后進一步深造打好基礎。
在科學發展的今天,我們要積極探索對學生創新精神的培養 ,鼓勵學生個性的發展 ,努力培養出基礎扎實、具有較強工作能力和科研能力的醫學專業人才。在傳授專業知識和醫學人才的培養過程中 ,要同時加強素質教育。作為教師應該要不斷學習,提高自己的專業水平,還要提高自己的個人素質,為學生做表率,培養出更多高水平、高專業素質的學生。
第四篇:細胞生物學實驗總結
細胞自主實驗方法總結
自主實驗是在老師的指導和幫助下學生自己設計實驗且自己準備實驗所需的一切準備工作來完成的實驗。平時做實驗老師占重要地位但自主實驗中學生占重要地位。自主實驗中學生自己思考設計出實驗方案,實驗所需試劑,實驗方法和步驟然后按該方案來做實驗。
老師讓學生做自主實驗的原因是老師想培養學生的動手能力,合作能力,想讓學生獨立思考,想讓學生親自動手做實驗,最重要的一點是把理論知識結合實踐。
細胞培養是在體外模擬體內的生理環境,培養從機體中取出的細胞,并使之生存和生長的技術為細胞培養技術。
本實驗采用了微量全血培養技術,培養人體外周血小淋巴細胞,使原處于 G0期的淋巴細胞轉化為淋巴母細胞, 進而進行有絲分裂,增殖成功率高、技術方法完善。把體外增殖的小淋巴細胞裂解,對細胞核染色體進行染色和 固定,制得人染色體標本,用于進行染色體組型分析,取得了令人滿意的效果。
人和動物細胞培養是動物細胞工程的一項基本技術。目前,動物細胞培養主要用于通過大量的細胞培養獲得有經濟價值的生物產品和細胞本身。1966 年以前基本上用 Mo o r he a d 等,1960年建立的人外周血白細胞培養技術,該方法比較完善,成功率高。但缺點是取血量多,手續較麻煩。近30 多年來國內外絕大多數均采用微量全血培養技術,不但取血量少,而且可略去一些繁瑣操作過程,如離心、分離血漿等,做起來既方便,也節省人力和物力, 比較適于推廣和使用。
本實驗對實驗操作要求比較高。實驗進行前,無菌室及無菌操作臺以紫外燈照射30-60分鐘滅菌,以70%酒精擦拭無菌操作抬面,并開啟無菌操作臺風扇運轉10分鐘后,才開始實驗操作。實驗完畢后,將實驗物品帶出工作臺,以70%酒精擦拭無菌操作抬面。操作間隔應讓無菌操作臺運轉10分鐘以上后,再進行下一個細胞株之操作。操作做成中也要保證不污染。
第五篇:細胞生物學實驗思考題
細胞生物學實驗思考題
1、為什么暗視場照明的視場暗黑,而樣品像明亮?相差顯微鏡鏡檢時,為什么要用綠色濾色鏡觀察活體樣本?
暗視場顯微鏡照明光線不直接進入物鏡,只允許被標本反射和衍射的光線進入物鏡,因而視野的背景是黑的,物體的邊緣是亮的;
為獲得好的效果,要用波長范圍窄的單色光,選用綠色濾光鏡,不但可滿足這個要求,而且綠色可吸收紅外光,減少發熱。
2、為什么活細胞不易染色,從細胞生物學角度解釋原因。
染色劑一般有劇毒,而細胞膜具有選擇透過性,會將一部分對細胞有害的物質阻擋在細胞外,所以活細胞難以染色。而當細胞死亡后,細胞膜失去選擇透過性,染色劑得以進入,細胞就被染色。
3、簡述中性紅染液、詹納斯綠B染液用于細胞超活染色的原理。
Janus green B活體細胞染色的機理:Janus green B是毒性較小的堿性染料,可專一性地對線粒體進行超活染色,這是由于線粒體內的細胞色素氧化酶系的作用,使染料始終保持氧化狀態(即有色狀態),呈藍綠色;而線粒體周圍的細胞質中,這些染料被還原為無色的色基(即無色狀態)。
Neutral red 堿性染料活體染色的機理:neutral red為弱堿性染料,對液泡系(即高爾基體)的染色有專一性,只將活細胞中的液泡系染成紅色,細胞核與細胞質完全不著色,這可能與液泡中某些蛋白質有關。
4、什么是細胞骨架?它有何主要功能?
生物學中細胞骨架指真核細胞中與保持細胞形態結構和細胞運動有關的纖維網絡。包括微管、微絲和中間絲。
細胞骨架不僅在維持細胞形態,承受外力、保持細胞內部結構的有序性方面起重要作用,而且還參與許多重要的生命活動,如:在細胞分裂中細胞骨架牽引染色體分離,在細胞物質運輸中,各類小泡和細胞器可沿著細胞骨架定向轉運;在肌肉細胞中,細胞骨架和它的結合蛋白組成動力系統;在白細胞(白血球)的遷移、精子的游動、神經細胞軸突和樹突的伸展等方面都與細胞骨架有關。另外,在植物細胞中細胞骨架指導細胞壁的合成。
5、列舉你所知道的動、植物細胞中由微絲組成的結構。
肌原纖維、微絨毛、應力纖維
6、顯示細胞骨架的原理是什么?說明實驗中使用的TritonX-100、戊二醛、考馬斯亮藍R-250的作用。
原理:用考馬斯亮藍對細胞骨架進行染色,染色觀察前,應首先用去垢劑抽提掉胞質中的除骨架以外的其他蛋白。
TritonX-100:非離子型去垢劑,可使細胞質膜中和細胞質中的蛋白質和全部脂質被溶解抽提。
戊二醛:固定細胞
考馬斯亮藍R-250:蛋白質染料,對細胞骨架染色。
7、顯示脂類時,制片及染色有何特殊之處?
制片時需要用10%甲醛鈣固定液進行固定,要求用蘇丹Ⅲ飽和溶液染色,但是對不同部位的脂類進行處理時有區別。
8、簡述Fenulgen反應的原理和實驗的關鍵步驟。
原理:DNA經弱酸水解后,嘌呤堿與脫氧核糖間的糖苷鍵打開,并且使脫氧核糖與磷酸間的磷脂鍵打開,在脫氧核糖的一端形成游離的醛基,醛基在原位與Schiff試劑結合,形成紫紅色復合物,使細胞內含有DNA的部位呈紫紅色的陰性反應。關鍵步驟:①Schiff試劑遮光染色30min,一定要遮光;
②壓片時,一定要壓均勻,否則細胞會重疊,影響觀察; ③洗玻片上的試劑,要注意樣品不被洗掉。
9、試述差速離心法分離細胞器的原理。
在一定的離心場中(選用離心機的一定轉速),球心顆粒的沉降速度取決于它的密度、半徑和懸浮介質的黏度。在一均勻的懸浮介質中離心一定時間,組織勻漿中的各種細胞器及其它內含物由于沉降速度不同將停留在高低不同的位置。依次增加離心力和離心時間,就能夠使這些顆粒按其大小、輕重分批沉降在離心管底部,從而分批收集。
10、試述密度梯度離心法分離細胞器的原理。
用一定的介質在離心管內形成一連續或不連續的密度梯度,將細胞混懸液或勻漿置于介質的頂部,通過重力或離心力場的作用使細胞分層、分離。
11、為什么要事先向小鼠腹腔注射淀粉肉湯懸浮液?吞噬細胞的變形運動及吞噬作用的生物學機理是什么?
①誘導小鼠腹腔大量產生巨噬細胞,使其聚集; ②細胞膜具有一定的流動性。