第一篇:細胞生物學實驗課自我測試題
細胞生物學實驗課自我測試題
1、顯微鏡的光學系統主要有哪部分些構成?
2、拿到一張固定裝片,為了很快找到需要找到的物像,首先應該做什么?
3、為避免顯微鏡的燈泡燒壞,應注意什么?
4、在低倍鏡下找到物像后,為了看得更仔細,向高倍鏡轉換過程中需要調整粗調節螺旋嗎?為什么?
5、如何搬動顯微鏡?
6、推血涂片時,要一次成功。即使不成功,也不要再推第二次,一旦推片失敗,必須重新開始。為什么?
7、使用染色缸時,為避免拿出玻片時找不到涂有細胞的一面,應注意什么?
8、如何知道試管中的紅細胞溶血了?
9、抓取小鼠注射的正確方法是怎樣的?
10、取蛙血時,從胸腔最先看到的一般是哪個器官?如何快速找到心臟?
11、細胞生物學實驗要求學生掌握的最重要的技能是什么?
12、雞的紅細胞和小鼠的巨噬細胞相比,哪個體積大?
13、細胞處于高滲或低滲溶液中,如何判斷水的運動方向?
14、可自由擴散的脂溶性小分子對細胞的影響如何?
15、顯微鏡下口腔粘膜細胞的線粒體的形狀是什么樣的?
16、在細胞吞噬活動觀察的實驗中,如何在顯微鏡下快速找到巨噬細胞?
17、推蛙血涂片時應注意什么?
18、為什么要用派洛寧和甲基綠染的混合染液染色RNA和DNA?
19、派洛寧和甲基綠染的混合染液染色細胞,細胞核和細胞質的顏色分別是什么顏色?為什么?
20、使用顯微鏡觀察標本時,為什么必須按照從低倍鏡到高倍鏡,再到油鏡的順序進行?
21、使用顯微鏡時,為什么要先將10倍物鏡與標本表面的距離調節到6mm之內?
22、如果標本片放反了,可用高倍鏡或油鏡找到標本嗎?為什么?
23、怎樣才能準確而迅速地在高倍鏡或油鏡下找到目標?
24、如果細調焦螺旋已轉至極限而物像仍不清晰時,應該怎么辦?
25、如何判斷視野中所見到的污點是在目鏡上?
26、在對低倍鏡進行準焦時,如果視野中出現了隨標本片移動而移動的顆粒或斑紋,是否將標本移至物鏡中央,就一定能找到標本的物像?為什么?
27、動物細胞與植物細胞有哪些重要區別?
28、請說明細胞膜具有哪些特點。29 細胞的吞噬活動對人體有何意義?
30、物質跨膜(細胞膜)運輸有哪些方式?請比較它們的不同點。
31、比較動植物細胞有絲分裂的異同點。
32、開始顯微鏡使用時,電源接通后燈泡不亮,可能有哪幾種原因?
33、怎樣才能快速在高倍鏡下找到洋蔥根尖細胞的分裂相?
34、高倍鏡觀察標本時,無論怎么調節微調螺旋,視野都很模糊,可能的原因是什么?該怎么處理?
35、動物細胞馬蛔蟲卵的有絲分裂相的兩種圖形:染色體直線排列與放射狀排列屬于什么時期?
36、著絲點的分裂在有絲分裂的那一個時期?
37、觀察洋蔥根尖和馬蛔蟲卵有絲分裂時,二者都能看到核仁嗎?
38、顯示蟾蜍血液細胞DNA和RNA時,為什么要在純丙酮中迅速過一下?
39、細胞膜的通透性觀察實驗中溶血的原因是什么? 40、NaCl溶液和葡萄糖溶液為什么不能產生溶血?
41、蟾蜍心臟取血時,剪開其表皮、打開胸腔時,應注意什么?
42、用牙簽取自己的頰粘膜上皮細胞時,最先應做什么?
43、頸椎脫臼法處死大(小)白鼠時關鍵要注意什么?
44、在鼠肝細胞活體染色顯示線粒體的實驗操作中,為什么切取肝臟邊緣較薄的肝組織一小塊放入盛有染液的小培養皿內(或者凹玻片中)時,染液不可太多?
45、觀察小鼠腹腔巨噬細胞吞噬活動時,為什么在實驗前兩天,每天每只小鼠腹腔注射6%淀粉肉湯1ml(含臺酚藍)?
46、觀察小鼠腹腔巨噬細胞吞噬活動時,為什么在實驗前先給每只小鼠腹腔注射1%雞紅細胞懸液1ml?
47、小鼠腹腔巨噬細胞吞噬活動的觀察時,為什么25分鐘后再向腹腔注射0.5ml生理鹽水?
48、觀察蛙血涂片中的細胞形態結構時,甲醇的作用是什么?操作時要注意什么?
49、人的紅細胞有細胞核嗎?蛙的紅細胞有細胞核嗎? 50、觀察動植物細胞分裂時,間期的典型特點是什么?
細胞生物學實驗課自我測試題答案
1、目鏡、物鏡、光源、聚光鏡。
2、對著光線用肉眼找到固定裝片上的被觀察物,或者蓋玻片的位置,將它放在通光孔的正中央。
3、一旦不觀察或離開座位,應關閉光源開關。
4、不用,只調細調節螺旋。因為所有物鏡的焦平面都在一個平面內,秩序用微調螺旋輕輕調節即可。
5、一手托著鏡座,一手握著鏡臂。
6、因為推兩次必然造成兩層涂片,細胞層很厚,細胞堆積在一起,在顯微鏡下無法清楚地觀察單個血細胞。同時,第二次推片時必然破壞第一次推片涂布的細胞
7、應把所用的玻片正面都朝向一側,并記下方向。
8、隔著試管可以清晰地看見后面紙上的字,即從不透明變成透明。
9、左手大拇指、食指抓小鼠頭頸的上后部毛皮,使其頸部不能活動,其余手指固定其身體,將其翻轉后可直接用右手持注射器對其胸腹部注射。
10、紅色泡狀的肺。跳動的器官即心臟。
11、非常熟練地使用顯微鏡,掌握臨時裝片的基本技術,各種細胞形態的觀察。
12、一般說來小鼠的巨噬細胞大一些。
13、細胞處于高滲溶液中則水出細胞,細胞處于低滲溶液中則水進入細胞。
14、如果胞外的脂溶性小分子濃度很大,則會大量進入細胞,導致細胞破裂。
15、顆粒狀、棒狀、彎曲的線狀。
16、細胞內有很多藍色淀粉小顆粒的細胞,就是巨噬細胞。這是因為實驗前向小鼠腹腔注射了含有臺酚蘭的淀粉肉湯,巨噬細胞吞噬了臺酚蘭顆粒。
17、斜角越小,速度越快,涂片越薄。
18、核酸是酸性的,它們對于堿性染料派洛寧和甲基綠具有親和力。利用這兩種染料的混合液處理細胞,可使其中的DNA和RNA呈現出不同的顏色,這種顏色上的差異由DNA和RNA聚合程度的不同所引起,因為甲基綠分子上有兩個相對的正電荷,它與聚合程度較高的DNA分子有較強的親和力,可使DNA分子染成藍綠色;而派洛寧分子中僅一個正電荷,可與低聚分子RNA相結合使其染成紅色。這樣細胞中的DNA和RNA可被區別開來。
19、綠色和紅色。因為細胞核中主要是DNA,細胞質中主要是RNA,而它們分別被綠色的甲基綠和紅色的派洛寧著色。
20、因為低倍鏡觀察的表本范圍最大,可以更快地找到要觀察目標。
21、因為10倍物鏡的工作距離為7.63mm,而為了保護物鏡不與玻片相撞,應該將目鏡與載玻片的距離調至6mm以內后,再下調載物臺,既可找到觀察目標,又可保護物鏡。
22、不能,因為載玻片的厚度遠大于高倍鏡或油鏡的工作距離。
23、在低倍鏡下找到目標后,調至視野正中央,再轉換到高倍鏡。
24、應該換用粗調節旋鈕,輕輕同方向轉動一下,在用微調節旋鈕調節焦距。
25、輕輕轉動目鏡,污點隨目鏡轉動,就證明污點在目鏡上面。
26、不一定,因為這些斑紋可能位于載玻片的反面(下面)。
27、動物細胞有中心體,植物細胞沒有,植物細胞有液泡、細胞壁,動物細胞沒有。
28、細胞膜的主要特點是具有不對稱性、流動性。
29、細胞的吞噬活動對人體具有保護作用,免受外來微生物、有害物質的侵害。30、主動運輸:消耗能量,從低濃度到高濃度
被動運輸:不需要消耗能量,從高濃度一側向低濃度一側運輸。又可以分為:簡單擴散:不需要載體的幫助,物質直接透過細胞膜;幫助擴散:需要載體的幫助。通道運輸:高濃度相低濃度運輸,專一性強,運輸速度快
31、動物細胞分裂時有星體的形成,而植物細胞因為沒中心體,分裂時沒有星體。動物細胞分裂時細胞膜縊縮分裂成兩個細胞,而植物細胞因為有堅硬的細胞壁,在赤道板的位置重新形成細胞壁。
32、一是總開關未打開,或者插頭接觸不良;二是亮度調節旋鈕沒有打開。
33、先用肉眼對著光線找到切片上的洋蔥根尖,然后放在通光孔的正中央,用10倍的物鏡,在生長區找到分裂相,再轉換到高倍鏡即可。
34、可能的原因主要有:鏡頭被污染,尤其可能是被鏡油污染。應該先用二甲苯清洗,再用擦鏡紙擦去二甲苯。
35、有絲分裂中期,與赤道板垂直的切面和與赤道板平行的切面。
36、有絲分裂后期
37、洋蔥根尖的間期能看到核仁一個或者二到三個。動物細馬蛔蟲卵細胞看不到。
38、在純丙酮中迅速過一下的目的是為了脫去多余的染料,又不至于脫去已經與DNA和RNA結合的染料。
39、蒸餾水:水分子可以自由通過細胞膜,低滲溶液中的水分子迅速進入細胞內,使細胞破裂。乙醇、甘油:可以自由進入細胞,使細胞破裂。乙醇進入的速度慢于甘油。40、NaCl溶液的濃度高于生理鹽水,是高滲溶液,細胞在高滲溶液中,細胞內水分子流出細胞,鈉離子和氯離子都不能通過細胞膜
41、用鑷子挑起皮膚,仔細用剪刀剪開皮膚復,再用鑷子夾住胸骨。小心剪開,以免直接傷及內臟,流血過多,不利于取血。
42、漱口。這樣可除去口中的食物殘渣,便于刮下的大多是細胞。
43、固定頭頸部,用力一下子拉直脊椎。
44、要使肝組織的上半部分暴露在空氣中,而不可使組織塊完全淹沒,這樣細胞內線粒體的酶系可被充分氧化而使線粒體易于著色。
45、為了在后續觀察實驗中清晰地觀察到巨噬細胞,含臺酚藍的淀粉肉湯為藍色,被巨噬細胞吞噬后可示蹤巨噬細胞;此外,腹腔注射的淀粉肉湯作為外來異物,會吸引小鼠體內的巨噬細胞集中到腹腔,便于后續實驗得到大量的巨噬細胞。
46、為了觀察小鼠腹腔巨噬細胞如何吞噬雞紅細胞
47、使腹腔中的液體多一點,便于收集巨噬細胞和雞紅細胞;生理鹽水不會使細胞破裂或變形。
48、甲醇的作用是使細胞固定。注意用完甲醇后一定要倒回原瓶,予以回收,以免污染環境。尤其應該嚴格避免甲醇濺到眼睛和皮膚上,一旦醇濺到眼睛和皮膚上,應立即用清水沖洗。
49、人的紅細胞沒有細胞核。蛙的紅細胞有細胞核。50、核膜、核仁清晰,染色質呈絲狀。
第二篇:細胞生物學實驗課自我測試題
細胞生物學實驗課自我測試題
1、顯微鏡的光學系統主要有哪部分些構成?
2、拿到一張固定裝片,為了很快找到需要找到的物像,首先應該做什么?
3、為避免顯微鏡的燈泡燒壞,應注意什么?
4、在低倍鏡下找到物像后,為了看得更仔細,向高倍鏡轉換過程中需要調整粗調節螺旋嗎?為什么?
5、如何搬動顯微鏡?
6、推血涂片時,要一次成功。即使不成功,也不要再推第二次,一旦推片失敗,必須重新開始。為什么?
7、使用染色缸時,為避免拿出玻片時找不到涂有細胞的一面,應注意什么?
8、如何知道試管中的紅細胞溶血了?
9、抓取小鼠注射的正確方法是怎樣的?
10、取蛙血時,從胸腔最先看到的一般是哪個器官?如何快速找到心臟?
11、細胞生物學實驗要求學生掌握的最重要的技能是什么?
12、雞的紅細胞和小鼠的巨噬細胞相比,哪個體積大?
13、細胞處于高滲或低滲溶液中,如何判斷水的運動方向?
14、可自由擴散的脂溶性小分子對細胞的影響如何?
15、顯微鏡下口腔粘膜細胞的線粒體的形狀是什么樣的?
16、在細胞吞噬活動觀察的實驗中,如何在顯微鏡下快速找到巨噬細胞?
17、推蛙血涂片時應注意什么?
18、為什么要用派洛寧和甲基綠染的混合染液染色RNA和DNA?
19、派洛寧和甲基綠染的混合染液染色細胞,細胞核和細胞質的顏色分別是什么顏色?為
什么?
20、使用顯微鏡觀察標本時,為什么必須按照從低倍鏡到高倍鏡,再到油鏡的順序進行?
21、使用顯微鏡時,為什么要先將10倍物鏡與標本表面的距離調節到6mm之內?
22、如果標本片放反了,可用高倍鏡或油鏡找到標本嗎?為什么?
23、怎樣才能準確而迅速地在高倍鏡或油鏡下找到目標?
24、如果細調焦螺旋已轉至極限而物像仍不清晰時,應該怎么辦?
25、如何判斷視野中所見到的污點是在目鏡上?
26、在對低倍鏡進行準焦時,如果視野中出現了隨標本片移動而移動的顆粒或斑紋,是否
將標本移至物鏡中央,就一定能找到標本的物像?為什么?
27、動物細胞與植物細胞有哪些重要區別?
28、請說明細胞膜具有哪些特點。
29細胞的吞噬活動對人體有何意義?
30、物質跨膜(細胞膜)運輸有哪些方式?請比較它們的不同點。
31、比較動植物細胞有絲分裂的異同點。
32、開始顯微鏡使用時,電源接通后燈泡不亮,可能有哪幾種原因?
33、怎樣才能快速在高倍鏡下找到洋蔥根尖細胞的分裂相?
34、高倍鏡觀察標本時,無論怎么調節微調螺旋,視野都很模糊,可能的原因是什么?該
怎么處理?
35、動物細胞馬蛔蟲卵的有絲分裂相的兩種圖形:染色體直線排列與放射狀排列屬于什么
時期?
36、著絲點的分裂在有絲分裂的那一個時期?
37、觀察洋蔥根尖和馬蛔蟲卵有絲分裂時,二者都能看到核仁嗎?
38、顯示蟾蜍血液細胞DNA和RNA時,為什么要在純丙酮中迅速過一下?
39、細胞膜的通透性觀察實驗中溶血的原因是什么?
40、NaCl溶液和葡萄糖溶液為什么不能產生溶血?
41、蟾蜍心臟取血時,剪開其表皮、打開胸腔時,應注意什么?
42、用牙簽取自己的頰粘膜上皮細胞時,最先應做什么?
43、頸椎脫臼法處死大(小)白鼠時關鍵要注意什么?
44、在鼠肝細胞活體染色顯示線粒體的實驗操作中,為什么切取肝臟邊緣較薄的肝組織一
小塊放入盛有染液的小培養皿內(或者凹玻片中)時,染液不可太多?
45、觀察小鼠腹腔巨噬細胞吞噬活動時,為什么在實驗前兩天,每天每只小鼠腹腔注射6%
淀粉肉湯1ml(含臺酚藍)?
46、觀察小鼠腹腔巨噬細胞吞噬活動時,為什么在實驗前先給每只小鼠腹腔注射1%雞紅細
胞懸液1ml?
47、小鼠腹腔巨噬細胞吞噬活動的觀察時,為什么25分鐘后再向腹腔注射0.5ml生理鹽水?
48、觀察蛙血涂片中的細胞形態結構時,甲醇的作用是什么?操作時要注意什么?
49、人的紅細胞有細胞核嗎?蛙的紅細胞有細胞核嗎?
50、觀察動植物細胞分裂時,間期的典型特點是什么?
細胞生物學實驗課自我測試題答案
1、目鏡、物鏡、光源、聚光鏡。
2、對著光線用肉眼找到固定裝片上的被觀察物,或者蓋玻片的位置,將它放在通光孔的正中央。
3、一旦不觀察或離開座位,應關閉光源開關。
4、不用,只調細調節螺旋。因為所有物鏡的焦平面都在一個平面內,秩序用微調螺旋輕輕調節即可。
5、一手托著鏡座,一手握著鏡臂。
6、因為推兩次必然造成兩層涂片,細胞層很厚,細胞堆積在一起,在顯微鏡下無法清楚地觀察單個血細胞。同時,第二次推片時必然破壞第一次推片涂布的細胞
7、應把所用的玻片正面都朝向一側,并記下方向。
8、隔著試管可以清晰地看見后面紙上的字,即從不透明變成透明。
9、左手大拇指、食指抓小鼠頭頸的上后部毛皮,使其頸部不能活動,其余手指固定其身體,將其翻轉后可直接用右手持注射器對其胸腹部注射。
10、紅色泡狀的肺。跳動的器官即心臟。
11、非常熟練地使用顯微鏡,掌握臨時裝片的基本技術,各種細胞形態的觀察。
12、一般說來小鼠的巨噬細胞大一些。
13、細胞處于高滲溶液中則水出細胞,細胞處于低滲溶液中則水進入細胞。
14、如果胞外的脂溶性小分子濃度很大,則會大量進入細胞,導致細胞破裂。
15、顆粒狀、棒狀、彎曲的線狀。
16、細胞內有很多藍色淀粉小顆粒的細胞,就是巨噬細胞。這是因為實驗前向小鼠腹腔注射
了含有臺酚蘭的淀粉肉湯,巨噬細胞吞噬了臺酚蘭顆粒。
17、斜角越小,速度越快,涂片越薄。
18、核酸是酸性的,它們對于堿性染料派洛寧和甲基綠具有親和力。利用這兩種染料的混合液處理細胞,可使其中的DNA和RNA呈現出不同的顏色,這種顏色上的差異由DNA和RNA聚合程度的不同所引起,因為甲基綠分子上有兩個相對的正電荷,它與聚合程度較高的DNA分子有較強的親和力,可使DNA分子染成藍綠色;而派洛寧分子中僅一個正電荷,可與低聚分子RNA相結合使其染成紅色。這樣細胞中的DNA和RNA可被區別開來。
19、綠色和紅色。因為細胞核中主要是DNA,細胞質中主要是RNA,而它們分別被綠色的甲
基綠和紅色的派洛寧著色。
20、因為低倍鏡觀察的表本范圍最大,可以更快地找到要觀察目標。
21、因為10倍物鏡的工作距離為7.63mm,而為了保護物鏡不與玻片相撞,應該將目鏡與載
玻片的距離調至6mm以內后,再下調載物臺,既可找到觀察目標,又可保護物鏡。
22、不能,因為載玻片的厚度遠大于高倍鏡或油鏡的工作距離。
23、在低倍鏡下找到目標后,調至視野正中央,再轉換到高倍鏡。
24、應該換用粗調節旋鈕,輕輕同方向轉動一下,在用微調節旋鈕調節焦距。
25、輕輕轉動目鏡,污點隨目鏡轉動,就證明污點在目鏡上面。
26、不一定,因為這些斑紋可能位于載玻片的反面(下面)。
27、動物細胞有中心體,植物細胞沒有,植物細胞有液泡、細胞壁,動物細胞沒有。
28、細胞膜的主要特點是具有不對稱性、流動性。
29、細胞的吞噬活動對人體具有保護作用,免受外來微生物、有害物質的侵害。
30、主動運輸:消耗能量,從低濃度到高濃度
被動運輸:不需要消耗能量,從高濃度一側向低濃度一側運輸。又可以分為:簡單擴散:不需要載體的幫助,物質直接透過細胞膜;幫助擴散:需要載體的幫助。
通道運輸:高濃度相低濃度運輸,專一性強,運輸速度快
31、動物細胞分裂時有星體的形成,而植物細胞因為沒中心體,分裂時沒有星體。動物細胞
分裂時細胞膜縊縮分裂成兩個細胞,而植物細胞因為有堅硬的細胞壁,在赤道板的位置重新形成細胞壁。
32、一是總開關未打開,或者插頭接觸不良;二是亮度調節旋鈕沒有打開。
33、先用肉眼對著光線找到切片上的洋蔥根尖,然后放在通光孔的正中央,用10倍的物鏡,在生長區找到分裂相,再轉換到高倍鏡即可。
34、可能的原因主要有:鏡頭被污染,尤其可能是被鏡油污染。應該先用二甲苯清洗,再用
擦鏡紙擦去二甲苯。
35、有絲分裂中期,與赤道板垂直的切面和與赤道板平行的切面。
36、有絲分裂后期
37、洋蔥根尖的間期能看到核仁一個或者二到三個。動物細馬蛔蟲卵細胞看不到。
38、在純丙酮中迅速過一下的目的是為了脫去多余的染料,又不至于脫去已經與DNA和RNA
結合的染料。
39、蒸餾水:水分子可以自由通過細胞膜,低滲溶液中的水分子迅速進入細胞內,使細胞破
裂。乙醇、甘油:可以自由進入細胞,使細胞破裂。乙醇進入的速度慢于甘油。
40、NaCl溶液的濃度高于生理鹽水,是高滲溶液,細胞在高滲溶液中,細胞內水分子流出
細胞,鈉離子和氯離子都不能通過細胞膜
41、用鑷子挑起皮膚,仔細用剪刀剪開皮膚復,再用鑷子夾住胸骨。小心剪開,以免直接傷
及內臟,流血過多,不利于取血。
42、漱口。這樣可除去口中的食物殘渣,便于刮下的大多是細胞。
43、固定頭頸部,用力一下子拉直脊椎。
44、要使肝組織的上半部分暴露在空氣中,而不可使組織塊完全淹沒,這樣細胞內線粒體的酶系可被充分氧化而使線粒體易于著色。
45、為了在后續觀察實驗中清晰地觀察到巨噬細胞,含臺酚藍的淀粉肉湯為藍色,被巨噬細
胞吞噬后可示蹤巨噬細胞;此外,腹腔注射的淀粉肉湯作為外來異物,會吸引小鼠體內的巨噬細胞集中到腹腔,便于后續實驗得到大量的巨噬細胞。
46、為了觀察小鼠腹腔巨噬細胞如何吞噬雞紅細胞
47、使腹腔中的液體多一點,便于收集巨噬細胞和雞紅細胞;生理鹽水不會使細胞破裂或變
形。
48、甲醇的作用是使細胞固定。注意用完甲醇后一定要倒回原瓶,予以回收,以免污染環境。
尤其應該嚴格避免甲醇濺到眼睛和皮膚上,一旦醇濺到眼睛和皮膚上,應立即用清水沖洗。
49、人的紅細胞沒有細胞核。蛙的紅細胞有細胞核。
50、核膜、核仁清晰,染色質呈絲狀。
第三篇:細胞生物學實驗總結
細胞自主實驗方法總結
自主實驗是在老師的指導和幫助下學生自己設計實驗且自己準備實驗所需的一切準備工作來完成的實驗。平時做實驗老師占重要地位但自主實驗中學生占重要地位。自主實驗中學生自己思考設計出實驗方案,實驗所需試劑,實驗方法和步驟然后按該方案來做實驗。
老師讓學生做自主實驗的原因是老師想培養學生的動手能力,合作能力,想讓學生獨立思考,想讓學生親自動手做實驗,最重要的一點是把理論知識結合實踐。
細胞培養是在體外模擬體內的生理環境,培養從機體中取出的細胞,并使之生存和生長的技術為細胞培養技術。
本實驗采用了微量全血培養技術,培養人體外周血小淋巴細胞,使原處于 G0期的淋巴細胞轉化為淋巴母細胞, 進而進行有絲分裂,增殖成功率高、技術方法完善。把體外增殖的小淋巴細胞裂解,對細胞核染色體進行染色和 固定,制得人染色體標本,用于進行染色體組型分析,取得了令人滿意的效果。
人和動物細胞培養是動物細胞工程的一項基本技術。目前,動物細胞培養主要用于通過大量的細胞培養獲得有經濟價值的生物產品和細胞本身。1966 年以前基本上用 Mo o r he a d 等,1960年建立的人外周血白細胞培養技術,該方法比較完善,成功率高。但缺點是取血量多,手續較麻煩。近30 多年來國內外絕大多數均采用微量全血培養技術,不但取血量少,而且可略去一些繁瑣操作過程,如離心、分離血漿等,做起來既方便,也節省人力和物力, 比較適于推廣和使用。
本實驗對實驗操作要求比較高。實驗進行前,無菌室及無菌操作臺以紫外燈照射30-60分鐘滅菌,以70%酒精擦拭無菌操作抬面,并開啟無菌操作臺風扇運轉10分鐘后,才開始實驗操作。實驗完畢后,將實驗物品帶出工作臺,以70%酒精擦拭無菌操作抬面。操作間隔應讓無菌操作臺運轉10分鐘以上后,再進行下一個細胞株之操作。操作做成中也要保證不污染。
第四篇:細胞生物學實驗思考題
細胞生物學實驗思考題
1、為什么暗視場照明的視場暗黑,而樣品像明亮?相差顯微鏡鏡檢時,為什么要用綠色濾色鏡觀察活體樣本?
暗視場顯微鏡照明光線不直接進入物鏡,只允許被標本反射和衍射的光線進入物鏡,因而視野的背景是黑的,物體的邊緣是亮的;
為獲得好的效果,要用波長范圍窄的單色光,選用綠色濾光鏡,不但可滿足這個要求,而且綠色可吸收紅外光,減少發熱。
2、為什么活細胞不易染色,從細胞生物學角度解釋原因。
染色劑一般有劇毒,而細胞膜具有選擇透過性,會將一部分對細胞有害的物質阻擋在細胞外,所以活細胞難以染色。而當細胞死亡后,細胞膜失去選擇透過性,染色劑得以進入,細胞就被染色。
3、簡述中性紅染液、詹納斯綠B染液用于細胞超活染色的原理。
Janus green B活體細胞染色的機理:Janus green B是毒性較小的堿性染料,可專一性地對線粒體進行超活染色,這是由于線粒體內的細胞色素氧化酶系的作用,使染料始終保持氧化狀態(即有色狀態),呈藍綠色;而線粒體周圍的細胞質中,這些染料被還原為無色的色基(即無色狀態)。
Neutral red 堿性染料活體染色的機理:neutral red為弱堿性染料,對液泡系(即高爾基體)的染色有專一性,只將活細胞中的液泡系染成紅色,細胞核與細胞質完全不著色,這可能與液泡中某些蛋白質有關。
4、什么是細胞骨架?它有何主要功能?
生物學中細胞骨架指真核細胞中與保持細胞形態結構和細胞運動有關的纖維網絡。包括微管、微絲和中間絲。
細胞骨架不僅在維持細胞形態,承受外力、保持細胞內部結構的有序性方面起重要作用,而且還參與許多重要的生命活動,如:在細胞分裂中細胞骨架牽引染色體分離,在細胞物質運輸中,各類小泡和細胞器可沿著細胞骨架定向轉運;在肌肉細胞中,細胞骨架和它的結合蛋白組成動力系統;在白細胞(白血球)的遷移、精子的游動、神經細胞軸突和樹突的伸展等方面都與細胞骨架有關。另外,在植物細胞中細胞骨架指導細胞壁的合成。
5、列舉你所知道的動、植物細胞中由微絲組成的結構。
肌原纖維、微絨毛、應力纖維
6、顯示細胞骨架的原理是什么?說明實驗中使用的TritonX-100、戊二醛、考馬斯亮藍R-250的作用。
原理:用考馬斯亮藍對細胞骨架進行染色,染色觀察前,應首先用去垢劑抽提掉胞質中的除骨架以外的其他蛋白。
TritonX-100:非離子型去垢劑,可使細胞質膜中和細胞質中的蛋白質和全部脂質被溶解抽提。
戊二醛:固定細胞
考馬斯亮藍R-250:蛋白質染料,對細胞骨架染色。
7、顯示脂類時,制片及染色有何特殊之處?
制片時需要用10%甲醛鈣固定液進行固定,要求用蘇丹Ⅲ飽和溶液染色,但是對不同部位的脂類進行處理時有區別。
8、簡述Fenulgen反應的原理和實驗的關鍵步驟。
原理:DNA經弱酸水解后,嘌呤堿與脫氧核糖間的糖苷鍵打開,并且使脫氧核糖與磷酸間的磷脂鍵打開,在脫氧核糖的一端形成游離的醛基,醛基在原位與Schiff試劑結合,形成紫紅色復合物,使細胞內含有DNA的部位呈紫紅色的陰性反應。關鍵步驟:①Schiff試劑遮光染色30min,一定要遮光;
②壓片時,一定要壓均勻,否則細胞會重疊,影響觀察; ③洗玻片上的試劑,要注意樣品不被洗掉。
9、試述差速離心法分離細胞器的原理。
在一定的離心場中(選用離心機的一定轉速),球心顆粒的沉降速度取決于它的密度、半徑和懸浮介質的黏度。在一均勻的懸浮介質中離心一定時間,組織勻漿中的各種細胞器及其它內含物由于沉降速度不同將停留在高低不同的位置。依次增加離心力和離心時間,就能夠使這些顆粒按其大小、輕重分批沉降在離心管底部,從而分批收集。
10、試述密度梯度離心法分離細胞器的原理。
用一定的介質在離心管內形成一連續或不連續的密度梯度,將細胞混懸液或勻漿置于介質的頂部,通過重力或離心力場的作用使細胞分層、分離。
11、為什么要事先向小鼠腹腔注射淀粉肉湯懸浮液?吞噬細胞的變形運動及吞噬作用的生物學機理是什么?
①誘導小鼠腹腔大量產生巨噬細胞,使其聚集; ②細胞膜具有一定的流動性。
第五篇:《細胞生物學實驗》教學大綱
《細胞生物學實驗》教學大綱
課程名稱:細胞生物學實驗
課程編號:12030037
課程類別:專業基礎課/必修課
學時/學分: 24/0.75
開設學期:第四學期
說明
一、課程性質
細胞生物學實驗是生物科學和生物工程專業一門重要的必修基礎課程,在生命學科的本科教學中有著十分重要的地位。通過實驗,不僅使學生加深對細胞生物學理論知識的理解和認證,同時通過對細胞生命現象的觀察和親手操作,使學生獲得有關細胞生命活動的感性知識,有效地提高理論課的教學效果,并使學生掌握細胞生物學實驗的基本原理、方法和技能,培養和提高學生實驗設計和應用各種實驗技術的能力,培養和訓練學生的創新意識和創新能力,培養嚴謹的科學態度和實事求是的作風,提高發現問題、分析問題和解決問題的能力,為今后獨立從事教學或科學研究打下堅實的基礎。
二、教學目標
通過細胞生物學實驗,使學生們更加牢固地掌握細胞生物學基本知識和基本理論,對細胞的結構和功能有全面、真實的認識,使學生們掌握細胞生物學的基本實驗方法和技能。
三、學時分配表 序號
實驗項目實驗 時數 實驗
類型
內容與要求 小計實驗1細胞膜的滲透性及細胞凝集反應4設計性了解細胞膜的滲透性及各類物質進入細胞的速度,掌握細胞凝集反應的實驗方法及細胞凝集的原理實驗2葉綠體的分離與熒光觀察3驗證性掌握熒光顯微鏡的原理和使用方法;觀察葉綠體的自發熒光與次生熒光;
通過對植物葉綠體的分離,了解細胞器分離的一般原理和方法實驗3植物細胞骨架的觀察4驗證性掌握光學顯微鏡觀察植物細胞骨架的原理和方法實驗4雞血細胞的體外融合6綜合性了解PEG誘導細胞融合的基本原理,通過PEG誘導雞紅細胞之間的融合實驗,初步掌握細胞融合技術實驗5巨噬細胞吞噬現象的觀察7綜合性通過對小白鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞血紅細胞的活動觀察,加深理解細胞吞噬作用的過程和意義;掌握小白鼠腹腔注射給藥方法和頸椎脫臼處死法合計24
四、實驗方法與要求建議
本課程采用傳統的實驗教學方法,2人一組操作,結合多媒體、小組討論與集體討論、實驗設計、教學錄像、細胞生物學小知識和小技巧介紹等多種教學手段,幫助學生通過本課程的學習全面地掌握細胞生物學的基本實驗方法與技能以及實驗設計的思路,以提高學生從事教學和科學研究的綜合素質。
要求學生認真預習,熟悉實驗的內容,了解所用的儀器用具;實驗中嚴格按操作規程進行,仔細觀察,及時記錄實驗現象及結果,認真做好每一天的實驗報告;實驗結束后仔細分析和總結實驗結果;使用貴重精密儀器時,應嚴格遵守操作規程,對任何自己不熟悉的實驗儀器都不要隨意操作;在操作過程中發現任何意外現象都要及時向任課教師報告;在實驗過程中制造的任何垃圾都要丟到垃圾筐里(或先放在自己的桌面廢物缸內),嚴禁隨地投棄。
五、考核方式及要求
1.考核方式:考試(√);考查()
2.成績評定:
計分制:百分制(√);五級分制();兩級分制()
成績構成:實驗成績(100分)=實驗預習(10%)+實驗態度、衛生、安全(10%)+實驗操作(25%)+實驗報告(25%)+實驗考試(30%)。
本文
實驗一 ?細胞膜的滲透性及細胞凝集反應
一、實驗性質
實驗類別:專業基礎課/必修
實驗類型:設計性
計劃學時:4學時
實驗分組:2人/組
二、實驗目的
1.了解細胞膜的滲透性及各類物質進入細胞的速度,分析影響細胞膜滲透性的因素;
2.理解凝集素使細胞發生凝集反應的原理,觀察細胞的凝集現象。
三、實驗的基本內容和要求
1.制備羊血細胞懸液,加1份羊血和10份0.17mol/LNaCl溶液。
2.制備土豆凝集素的。
3.取10支試管分別加入1mL稀釋羊血和10mL不同濃度的試劑,觀察是否溶血,如不溶血,觀察溶液的顏色有無深淺的變化。
4.用滴管吸取土豆凝集素和2%紅細胞懸液各一滴,置載玻片上,充分混勻,靜置20min后于低倍鏡下觀察血球凝集現象。以PBS液加2%紅細胞懸液作對照實驗。
四、實驗儀器設備及材料
10ml移液管、1ml移液管、試管架、試管、燒杯、顯微鏡、粗天平、載玻片、蓋玻片、土豆塊莖、0.17mol/L氯化鈉、0.17mol/L硝酸鈉、0.12mol/L硫酸鈉、0.17mol/L氯化銨、0.17mol/L醋酸銨、0.12mol/L草酸銨、0.32mol/L葡萄糖、0.32mol/L甘油、0.32mol/L乙醇、0.32mol/L丙酮、新鮮羊血(加抗凝劑)、PBS緩沖液
五、實驗操作要點
1.血細胞懸液的制備
2.低滲溶液
3.血紅細胞的滲透性實驗
4.土豆凝集素的制備
5.凝集反應
六、實驗教學建議
先讓學生通過查資料和實驗指導書提前預習該實驗,實驗課上讓1-2位學生來講實驗原理,操作步驟,其他同學做補充,老師做點評和總結,指出實驗中注意事項等。學生自己以小組為單位配置所有藥品并進行實驗。
實驗二 葉綠體的分離與熒光觀察
一、實驗性質
實驗類別:專業基礎課/必修
實驗類型:驗證性
計劃學時:3學時
實驗分組:2人/組
二、實驗目的
1.通過植物細胞葉綠體的分離,了解細胞器分離的一般原理和方法;
2.觀察葉綠體的自發熒光和次生熒光,并熟悉熒光顯微鏡的使用方法。
三、實驗的基本內容和要求
葉綠體的分離與觀察、菠菜葉片徒手切片觀察。
四、實驗儀器設備及材料
研缽、粗天平、紗布、量筒、離心管、滴管、普通離心機、熒光顯微鏡、普通光學顯微鏡、0.35mol/L的NaCl、0.01%丫啶橙、新鮮菠菜
五、實驗操作要點
1.葉綠體的分離與觀察
2.菠菜手切片觀察
六、實驗教學建議
先讓學生通過查資料和實驗指導書提前預習該實驗,實驗課上讓學生來講實驗原理和操作步驟,其他同學做補充,老師做點評和總結,指出實驗中注意事項之后學生再進行實驗等。
實驗三 植物細胞骨架的觀察
一、實驗性質
實驗類別:專業基礎課/必修
實驗類型:驗證性
計劃學時:4學時
實驗分組:1人/組
二、實驗目的
了解細胞骨架的結構特征及制備技術。
三、實驗內容
制備植物細胞骨架、用光學顯微鏡觀察細胞骨架的原理和方法。
四、實驗儀器設備與試劑
1.材料:洋蔥鱗莖
2.試劑
(1).磷酸鹽緩沖液
(2)M緩沖液
(3)1% TritonX-100:用M緩沖液配置。
(4).2%考馬斯亮藍R-250: 46.5ml甲醇、7 ml 冰醋酸、46.5ml蒸餾水。
(5).3%戊二醛:用6mmol/L磷酸鹽緩沖液配置。
(6).0.2M磷酸鹽緩沖液。
3.器材和儀器:小燒杯 鑷子 滴管 載玻片 蓋玻片 顯微鏡
五、實驗操作要點
1.取材:撕取洋蔥鱗莖內表皮細胞(約1cm2大小)置于裝有6mmol/L磷酸鹽緩沖液的燒杯中,使其下沉;
2.抽提:吸去磷酸鹽緩沖液,用1% TritonX-100處理20~30min.;
3.沖洗:吸去TritonX-100,用M緩沖液洗3次,每次10min;
4.固定:3%戊二醛固定30min;
5.沖洗:6mmol/L磷酸鹽緩沖液洗3次,每次10min;
6.染色:0.2%考馬斯亮藍R-250染色20min;
7.制片:用蒸餾水洗1-2次,將標本置于載玻片上,加蓋片;
8.觀察:光鏡下可見表皮細胞的輪廓,細胞內存在著染成藍色、粗細不等的纖維網絡結構,即為構成細胞骨架的微絲束。
六、實驗教學建議
先讓學生通過查資料和指導書提前預習該實驗,實驗課上讓學生來講實驗原理,其他同學做補充,老師做點評和總結,指出實驗中注意事項,學生進行實驗。
實驗四 雞血細胞的體外融合一、實驗性質
實驗類別:專業基礎課/必修
實驗類型:綜合性
計劃學時:6學時
實驗分組:2人/組
二、實驗目的
掌握細胞融合原理,應用PEG融合細胞的方法以及細胞融合率的計算。
三、實驗內容
動物細胞的制備、融合和觀察。
四、實驗儀器設備與試劑
1.材料:家雞
2.試劑:
(1).50%PEG(MW4000)
(2).Hanks液
(3).0.85%生理鹽水
(4).肝素
3.器材和儀器
注射器、試管、離心管、移液管、酒精燈、載玻片、蓋玻片、水浴鍋、普通光學顯微鏡、離心機
五、實驗操作要點
1.雞血細胞的獲得
2.促融劑的配制
3.雞紅細胞的收集
4.細胞融合反應
5.終止反應
6.鏡檢
六、實驗教學建議
先讓學生通過查資料和指導書提前預習該實驗,實驗課上讓學生來講實驗原理,其他同學做補充,老師做點評和總結,指出實驗中注意事項,學生進行實驗。
實驗五 巨噬細胞吞噬現象的觀察
一、實驗性質
實驗類別:專業基礎課/必修
實驗類型:綜合性
計劃學時:7學時
實驗分組:2人/組
二、實驗目的
1.通過對小白鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞活動的觀察,加深理解細胞吞噬作用的過程及其意義;
2.掌握小鼠腹腔注射給藥和脊椎脫臼處死方法。
三、實驗內容與要求
對小白鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞活動的觀察、理解細胞吞噬作用的過程;掌握小鼠腹腔注射給藥和脊椎脫臼處死方法。
四、實驗儀器設備與試劑
(一)器材
顯微鏡、解剖盤、剪刀、鑷子、載玻片、蓋玻片、注射器、吸管、吸水紙
(二)試劑
1.0.85%生理鹽水
2.Alsever溶液
3.4%臺盼藍染液
4.6%淀粉肉湯(含臺盼藍染液)
(三)材料
1.小白鼠
2.1% 雞紅細胞懸液
自健康雞翼靜脈采血或從集市殺雞處接血lml(防止污染),放入盛有4ml AlseVer溶液瓶中,混勻置4℃冰箱保存備用(一周內使用)。使用前加入0.85%生理鹽水離心(1 500r/min 10min)洗滌二次,再用生理鹽水配成l%濃度懸液。
五、實驗操作要點
1.在實驗前—天,給小白鼠腹腔注射6%淀粉肉湯(含臺盼藍)1m1。注射時,先用右手抓住鼠尾提起,放在實驗臺上,用左手的拇指和食指抓住小鼠兩耳和頭頸皮膚,將鼠體置于左手心中,把后肢拉直,用左手的無名指和小指按住尾巴與后肢,前肢可用中指固定,即可在腹部后l/2處的一側注射。進針勿過深,否則易損害肝及血管等,造成出血致死;
2.?實驗時,每組取一只注射過淀粉肉湯的小白鼠,腹腔注射l%雞紅細胞懸液lml,輕按小白鼠腹部,使懸液分散;
3.?20min后,用脊脫臼法處死小鼠(右手抓住鼠尾,用力向后拉,左手拇指與食指同時向下按住鼠頭,使脊髓與腦髓間斷開致鼠死亡);?
4.將小鼠置于解剖盤中,剪開腹部,把內臟推向一側,用不裝針頭的注射器或吸管吸取腹腔液;
5.?每人取一張干凈載玻片,滴一滴腹腔液,蓋上蓋玻片,置顯微鏡下觀察。
六、實驗教學建議
先讓學生通過查資料和指導書提前預習該實驗,實驗課上讓學生來講實驗設計思路,其他同學做補充,老師做點評和總結,指出實驗中注意事項、學生進行實驗。
參考教材
[1]細胞生物學實驗(第二版).楊漢民主編,高等教育出版社 [2]細胞生物學實驗指導.李素文主編,高等教育出版社
[3]細胞生物學實驗教程.安利國主編,科學出版社