第一篇：實驗五 細菌的生理生化

實驗五 細菌的生理、生化試驗

實驗目的：

初步學會細菌生理、生化試驗的操作、結果分析。

儀器材料：

蛋白胨水培養基、糖發酵培養基、葡萄糖蛋白胨水培養基、醋酸鉛蛋白胨水培養基、檸檬酸鹽瓊脂斜面培養基等；甲基紅（MR）試劑、維-培（V-P）試劑、靛基質試劑等；大腸桿菌、產氣桿菌、沙門氏菌的24h純培養物等。

微生物生化反應是指用化學反應來測定微生物的代謝產物，生化反應常用來鑒別一些在形態和其它方面不易區別的微生物。因此微生物生化反應是微生物分類鑒定中的重要依據之一,微生物檢驗中常用的生化反應介紹如下：

一、糖酵解試驗

不同微生物分解利用糖類的能力有很大差異，或能利用或不能利用，能利用者，或產氣或不產氣。可用指示劑及發酵管檢驗。

試驗方法：以無菌操作，用接種針或環移取純培養物少許，接種于發酵液體培養基管中，若為半固體培養基，則用接種針作穿刺接種。接種后，置36±1.0°C培養，每天觀察結果，檢視培養基顏色有無改變（產酸），小倒管中有無氣泡，微小氣泡亦為產氣陽性，若為半固體培養基，則檢視沿穿刺線和管壁及管底有無微小氣泡，有時還可看出接種菌有無動力，若有動力，培養物可呈彌散生長。本試驗主要是檢查細菌對各種糖、醇和糖苷等的發酵能力，從而進行各種細菌的鑒別，因而每次試驗，常需同時接種多管。一般常用的指示劑為酚紅、溴甲酚紫，溴百里藍和An-drade指示劑。

二、淀粉水解試驗

某些細菌可以產生分解淀粉的酶，把淀粉水解為麥芽糖或葡萄糖。淀粉水解后，遇碘不再變藍色。

試驗方法：以18~24h的純培養物，涂布接種于淀粉瓊脂斜面或平板（一個平板可分區接種，試驗數種培養物）或直接移種于淀粉肉湯中，于36±1°C培養24~48h，或于20℃培養5天。然后將碘試劑直接滴浸于培養表面，若為液體培養物，則加數滴碘試劑于試管中。立即檢視結果，陽性反應（淀粉被分解）為瓊脂培養基呈深藍色、菌落或培養物周圍出現無色透明環、或肉湯顏色無變化。陰性反應則無透明環或肉湯呈深藍色。

淀粉水解系逐步進行的過程，因而試驗結果與菌種產生淀粉酶的能力、培養時間，培養基含有淀粉量和pH等均有一定關系。培養基pH必須為中性或微酸性，以pH7.2最適。淀粉瓊脂平板不宜保存于冰箱，因而以臨用時制備為妥。

三：V-P試驗

某些細菌在葡萄糖蛋白胨水培養基中能分解葡萄糖產生丙酮酸，丙酮酸縮合，脫羧成乙酰甲基甲醇，后者在強堿環境下，被空氣中的氧氧化為二乙酰，二乙酰與蛋白胨中的胍基生成紅色化合物，稱V－P（+）反應。

試驗方法：

１）O’Meara氏法：將試驗菌接種于通用培養基，于36±1°C培養48h，培養液1ml加O’Meara試劑（加有0.3%肌酸Creatine或肌酸酐Creatinine的40%氫氧化鈉水溶液）1ml，搖動試管1~2min，靜置于室溫或36±1°C恒溫箱，若4h內不呈現伊紅，即判定為陰性。亦有主張在48~50°C水浴放置2h后判定結果者。

２）Barritt氏法：將試驗菌接種于通用培養基，于36±1°C培養4天、培養液2.5ml先加入a萘酚（2-na-phthol）純酒精溶液0.6ml,再加40%氫氧化鉀水溶液0.2ml，搖動2~5min，陽性菌常立即呈現紅色，若無紅色出現，靜置于室溫或36±1°C恒溫箱，如2h內仍不顯現紅色、可判定為陰性。

３）快速法：將0.5%肌酸溶液2滴放于小試管中、挑取產酸反應的三糖鐵瓊脂斜面培養物一接種環，乳化接種于其中，加入5%α-萘酚3滴，40%氫氧化鈉水溶液2滴，振動后放置5min，判定結果。不產酸的培養物不能使用。

本試驗一般用于腸桿菌科各菌屬的鑒別。在用于芽胞桿菌和葡萄球菌等其它細菌時，通用培養基中的磷酸鹽可阻礙乙酰甲基醇的產生，故應省去或以氯化鈉代替。

四：甲基紅（Methyl Red）試驗

腸桿菌科各菌屬都能發酵葡萄糖，在分解葡萄糖過程中產生丙酮酸，進一步分解中，由于糖代謝的途徑不同，可產生乳酸，琥珀酸、醋酸和甲酸等大量酸性產物，可使培養基PH值下降至pH4.5以下，使甲基紅指示劑變紅。

試驗方法：挑取新的待試純培養物少許，接種于通用培養基，培養于36±1°C或30°C（以30°C較好）3~5天，從第二天起，每日取培養液1ml，加甲基紅指示劑1~2滴，陽性呈鮮紅色，弱陽性呈淡紅色，陰性為黃色。迄至發現陽性或至第5天仍為陰性、即可判定結果。

甲基紅為酸性指示劑，pH范圍為4.4~6.0，其pK值為5.0。故在pH5.0以下，隨酸度而增強黃色，在pH5.0以上，則隨堿度而增強黃色，在pH5.0或上下接近時，可能變色不夠明顯，此時應延長培養時間，重復試驗。

五：靛基質（Imdole）試驗

某些細菌能分解蛋白胨中的色氨酸，生成吲哚。吲哚的存在可用顯色反應表

現出來。吲哚與對二甲基氨基苯醛結合，形成玫瑰吲哚，為紅色化合物。

試驗方法：將待試純培養物小量接種于試驗培養基管，于36±1°C培養24h時后，取約2ml培養液，加入Kovacs氏試劑2~3滴，輕搖試管，呈紅色為陽性，或先加少量乙醚或二甲苯，搖動試管以提取和濃縮靛基質，待其浮于培養液表面后，再沿試管壁徐緩加入Kovacs氏試劑數滴，在接觸面呈紅色，即為陽性。

實驗證明靛基質試劑可與17種不的靛基質化合物作用而產生陽性反應，若先用二甲苯或乙醚等進行提取，再加試劑，則只有靛基質或5-甲基靛基質在溶劑中呈現紅色，因而結果更為可靠。

六、硝酸鹽（Nitrate）還原試驗

有些細菌具有還原硝酸鹽的能力，可將硝酸鹽還原為亞硝酸鹽、氨或氮氣等。亞硝酸鹽的存在可用硝酸試劑檢驗。

試驗方法：臨試前將試劑的A（磺胺酸冰醋酸溶液）和B（α－萘胺乙醇溶液）試液各0.2ml等量混合、取混合試劑約0.1ml、加于液體培養物或瓊脂斜面培養物表面，立即或于10min內呈現紅色即為試驗陽性，若無紅色出現則為陰性。

用α-萘胺進行試驗時，陽性紅色消退很快、故加入后應立即判定結果。進行試驗時必須有未接種的培養基管作為陰性對照。α-萘胺具有致癌性、故使用時應加注意。

七、明膠（Gelatin）液化試驗

有些細菌具有明膠酶（亦稱類蛋白水解酶），能將明膠先水解為多肽，又進一步水解為氨基酸，失去凝膠性質而液化。

試驗方法：挑取18~24h待試菌培養物，以較大量穿刺接種于明膠高層約2/3深度或點種于平板培養基。于20~22℃培養7~14天。明膠高層亦可培養于36±1℃。每天觀察結果，若因培養溫度高而使明膠本身液化時應不加搖動、靜置冰箱中待其凝固后、再觀察其是否被細菌液化，如確被液化，即為試驗陽性。平板試驗結果的觀察為在培養基平板點種的菌落上滴加試劑，若為陽性，10~20min后，菌落周圍應出現清晰帶環。否則為陰性。

八、尿素酶（Urease）試驗

有些細菌能產生尿素酶，將尿素分解、產生2個分子的氨，使培養基變為堿性，酚紅呈粉紅色。尿素酶不是誘導酶，因為不論底物尿素是否存在，細菌均能合成此酶。其活性最適pH為7.0。

試驗方法：挑取18~24h待試菌培養物大量接種于液體培養基管中，搖均，于36±1℃培養10，60和120min，分別觀察結果。或涂布并穿刺接種于瓊脂斜面，不要到達底部，留底部作變色對照。培養2，4和24h分別觀察結果，如陰性應繼續培養至4天，作最終判定，變為粉紅色為陽性。

九、氧化酶（Oxidase）試驗

氧化酶亦即細胞色素氧化酶，為細胞色素呼吸酶系統的終末呼吸酶，氧化酶先使細胞色素C氧化，然后此氧化型細胞色素C再使對苯二胺氧化，產生顏色反應。

試驗方法：在瓊脂斜面培養物上或血瓊脂平板菌落上滴加試劑1~2滴，陽性者Kovacs氏試劑呈粉紅色~深紫色，Ewing氏改進試劑呈藍色。陰性者無顏色改變。應在數分鐘內判定試驗結果。

十、硫化氫（H2S）試驗

有些細菌可分解培養基中含硫氨基酸或含硫化合物，而產生硫化氫氣體，硫化氫遇鉛鹽或低鐵鹽可生成黑色沉淀物。

試驗方法：在含有硫代硫酸鈉等指示劑的培養基中，沿管壁穿刺接種，于36±1℃培養24~28h，培養基呈黑色為陽性。陰性應繼續培養至6天。也可用醋酸鉛紙條法：將待試菌接種于一般營養肉湯，再將醋酸鉛紙條懸掛于培養基上空，以不會被濺濕為適度；用管塞壓住置36±1℃培養1~6天。紙條變黑為陽性。

十一、三糖鐵（TSI）瓊脂試驗

試驗方法：以接種針挑取待試菌可疑菌落或純培養物，穿刺接種并涂布于斜面，置36±1℃培養18~24h，觀察結果。

本試驗可同時觀察乳糖和蔗糖發酵產酸或產酸產氣（變黃）；產生硫化氫（變黑）。葡萄糖被分解產酸可使斜面先變黃，但因量少，生成的少量酸，因接觸空氣而氧化，加之細菌利用培養基中含氮物質，生成堿性產物，故使斜面后來又變紅，底部由于是在厭氧狀態下，酸類不被氧化，所以仍保持黃色。

十二、硫化氫-靛基質-動力（SIM）瓊脂試驗

試驗方法：以接種針挑取菌落或純養物穿刺接種約1/2深度，置36±1℃培養18~24h，觀察結果。培養物呈現黑色為硫化氫陽性，混濁或沿穿刺線向外生長為有動力，然后加Kovacs氏試劑數滴于培養表面，靜置10min，若試劑呈紅色為靛基質陽性。培養基未接種的下部，可作為對照。

本試驗用于腸桿菌科細菌初步生化篩選，與三糖鐵瓊脂等聯合使用可顯著提高篩選功效。

第二篇：生化實驗

1．火

（1）酒精及其它可溶于水的液體著火時，可用水滅火

（2）汽油、乙醚、甲苯等有機溶劑著火時，應用石棉布或砂土撲滅，絕對不能用水，否則反而會擴大燃燒面積。

（3）電起火，不能用水和二氧化碳滅火器，應切斷電源或用四氯化碳滅火器。2．燒傷

（1）強堿燒傷：先用大量水沖洗，再用5%的硼酸溶液和2%的乙酸溶液沖洗。（2）強酸燒傷：先用大量水沖洗，再用5%的碳酸氫鈉或5%的氫氧化銨沖洗。

氨基酸的分離鑒定紙層析法

紙層析法是用濾紙作為惰性支持物的分配層析法。層析溶劑由有機溶劑和水組成。物質被分離后在紙層析圖譜上的位置是用Rf值（比移）來表示的：

在一定的條件下某種物質的Rf值是常數。Rf值的大小與物質的結構、性質、溶劑系統；層析濾紙的質量和層析溫度等因素有關。本實驗利用紙層析法分離氨基酸。

在操作過程中，手不要摸濾紙。點樣直徑不超過3mm。

點樣的一端朝下, 擴展劑的液面需低于點樣線1cm。

即時取出濾紙, 以免出現氨基酸層析跑到濾紙的外面不能檢測。

蛋白質及氨基酸的呈色反應 雙縮脲反應

紫紅色

肽鍵 可用于蛋白質的定性或定量測定 一切蛋白質或二肽以上的多肽都有雙縮脲反應，但有雙縮脲反應的物質不一定都是蛋白質或多肽。茚三酮反應

除脯氨酸、羥脯氨酸和茚三酮反應產生黃色物質外，所有α—氨基酸及一切蛋白質都能和茚三酮反應生成藍紫色物質。此反應的適宜pH為5~7，同一濃度的蛋白質或氨基酸在不同pH條件下的顏色深淺不同，酸度過大時甚至不顯色。

與茚三酮呈陽性反應的不一定就是蛋白質或氨基酸。在定性、定量測定中，應嚴防干擾物存在。該反應十分靈敏，1∶1 500 000濃度的氨基酸水溶液即能給出反應，是一種常用的氨基酸定量測定方法。茚三酮反應分為兩步，第一步是氨基酸被氧化形成CO2、NH3和醛，水合茚三酮被還原成還原型茚三酮；第二步是所形成的還原型茚三酮同另一個水合茚三酮分子和氨縮合生成有色物質。黃色反應

含有苯環結構的氨基酸，如酪氨酸和色氨酸，遇硝酸后，可被硝化成黃色物質，該化合物在堿性溶液中進一步形成橙黃色的硝醌酸鈉。苯丙氨酸不易硝化，需加入少量濃硫酸才有黃色反應。

坂口反應

與精氨酸反應呈紅色，精氨酸是唯一呈此反應的氨基酸，反應極為靈敏 醋酸鉛反應

蛋白質分子中常含有半胱氨酸和胱氨酸，含硫蛋白質在強堿條件下，可分解形成硫化鈉。硫化鈉和醋酸鉛反應生成黑色的硫化鉛沉淀。若加入濃鹽酸，就生成有臭味的硫化氫氣體。

蛋白質分子中常含有半胱氨酸和胱氨酸，含硫蛋白質在強堿條件下，可分解形成硫化鈉。硫化鈉和醋酸鉛反應生成黑色的硫化鉛沉淀。若加入濃鹽酸，就生成有臭味的硫化氫氣體。

蛋白質的等電點測定和沉淀反應

當溶液的pH達到一定數值時，蛋白質顆粒上正負電荷的數目相等，在電場中，蛋白質既不向陰極移動，也不向陽極移動，此時溶液pH值稱為此種蛋白質的等電點。

用醋酸與醋酸鈉（醋酸鈉混合在酪蛋白溶液中）配制成各種不同pH值的緩沖液。向緩沖液溶液中加入酪蛋白后，沉淀出現最多的緩沖液的pH值即為酪蛋白的等電點 蛋白質的沉淀反應

在水溶液中的蛋白質分子由于表面生成水化層和雙電層而成為穩定的親水膠體顆粒，在一定的理化因素影響下，蛋白質顆粒可因失去電荷和脫水而沉淀。蛋白質的沉淀反應可分為兩類。

（1）可逆的沉淀的反應

此時蛋白質分子的結構尚未發生顯著變化，除去引起沉淀的因素后，蛋白質的沉淀仍能溶解于原來的溶劑中，并保持其天然性質而不變性。如大多數蛋白質的鹽析作用或在低溫下用乙醇（或丙酮）短時間作用于蛋白質。提純蛋白質時，常利用此類反應。

（2）不可逆沉淀反應

此時蛋白質分子內部結構發生重大改變，蛋白質常變性而沉淀，不再溶于原來溶劑中。加熱引起的蛋白質沉淀與凝固，蛋白質與重金屬離子或某些有機酸的反應都屬于此類。

蛋白質變性后，有時由于維持溶液穩定的條件仍然存在（如電荷），并不析出。因此變性蛋白質并不一定都表現為沉淀，而沉淀的蛋白質也未必都已變性。

考馬斯亮藍法測定蛋白質濃度

考馬斯亮藍G-250染料，在酸性溶液中與蛋白質結合，使染料的最大吸收峰(max)位置由465 nm變為595 nm，溶液顏色也由棕黑色變為藍色。通過測定595 nm處光吸收的增加量可知與其結合蛋白質的量。吸光度與蛋白質含量成正比。靈敏度高，測定快速簡便，干擾物質少。

微量凱氏定氮法

有機物與濃硫酸共熱，有機氮轉變為無機氮（氨），氨與硫酸作用生成硫酸氨，后者與強堿作用釋放出氨，借蒸汽將氨蒸至酸液中，根據此過量酸液被中和的程度，即可計算出樣品的含氮量。

中和程度用滴定法來判斷，分回滴法和直接法兩種。

（1）回滴法：用過量的標準酸吸收氨，其剩余的酸可用標準NaOH滴定，由鹽酸量減去滴定所耗NaOH的量即為被吸收的氨之量。此法采用甲基紅做指示劑。

（2）直接法：用硼酸作為氨的吸收溶液，結果使溶液中[H+]降低，混合指示劑（PH4.3－5.4），黑紫色變為綠色。再用標準酸來滴定，使硼酸恢復到原來的氫離子濃度為止，指示劑出來淡紫色為終點，此時所耗的鹽酸量即為氨的量。

樣液：1g卵清蛋白溶于0.9%NaCl液，并稀釋至100ml。如有不溶物，離心取上清液備用。

醋酸纖維薄膜電泳法分離血清蛋白質

本實驗是以醋酸纖維素薄膜作為支持體的區帶電泳。

方法是將少量新鮮血清用點樣器點在浸有緩沖液的乙酸纖維素薄膜上，薄膜兩端經過濾紙與電泳槽中緩沖液相連，所用緩沖液pH值為8.6，血清蛋白質在此緩沖液中均帶負電荷，在電場中向正極泳動。

由于血清中不同蛋白質帶有的電荷數量及分子量不同而泳動速度不同。帶電荷多及分子量小者泳動速度快；帶電荷少及分子量大者泳動速度慢，從而彼此分離。

電泳后，將薄膜取出，經染色和漂洗，薄膜上顯示出五條藍色區帶，每條帶代表一種蛋白質，按泳動快慢順序，一般經漂洗后，薄膜上可呈現清晰的5條區帶，由正極端起，依次為清蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白和γ-球蛋白。

經洗脫比色觀察不同蛋白質的區帶。

1、醋酸纖維素薄膜一定要充分浸透后才能點樣。點樣后電泳槽一定要密閉。電流不宜過大，以防止薄膜干燥，電泳圖譜出現條痕。

2、緩沖溶液離子強度不應小于0.05或大于0.07。因為過小可使區帶拖尾，過大則使區帶過于緊密。

3、電泳槽中緩沖液要保持清潔(數天過濾)兩極溶液要交替使用；最好將連接正、負極的線路調換使用。

4、通電過程中，不準取出或放入薄膜。通電完畢后，應先斷開電源后再取薄膜，以免觸電。

酶的特性

溫度對酶活力的影響

大多數動物酶的最適溫度為37－40℃，植物酶的最適溫度為50－60℃。高溫失活，低溫能降低或抑制酶的活性，但不能使酶失活。pH對酶活性的影響

唾液淀粉酶的最適pH約為6.8。唾液淀粉酶的活化和抑制

酶的活性受活化劑或抑制劑的影響。氯離子為唾液淀粉酶的活化劑，銅離子為其抑制劑。

血糖的定量測定

動物血液中的糖主要是葡萄糖，其含量較恒定。用硫酸鋅和氫氧化鈉除去被檢測血中的蛋白質制成無蛋白血濾液。當將血濾液與標準鐵氰化鉀溶液共熱時,一部分鐵氰化鉀還原成亞鐵氰化鉀，并與鋅離子生成不溶性化合物。

向混合物中加入碘化物后，用硫代硫酸鈉溶液滴定所釋放的碘。即可知剩余的鐵氰化鉀量。血糖越多，剩余的鐵氰化鉀越少，所消耗的硫代硫酸鈉也越少。硫代硫酸鈉溶液用量與血糖的關系可以由經驗確定下來的數字表查出。對照組要多一些，且要先查表再相減

脂肪酸的β－氧化

樣品中丙酮的含量=(V1-V2)x C Na2S2O3 x 1/6 V1—滴定對照所消耗的Na2S2O3 的體積 V2—滴定樣品所消耗的Na2S2O3 的體積 C—Na2S2O3 的濃度

維生素C的定量測定

2，6-二氯酚靛酚滴定法

用藍色的堿性染料標準溶液,對含維生素 C的酸性浸出液進行氧化還原滴定,染料被還原為無色,當到達滴定終點時,多余的染料在酸性介質中則表現為淺紅色,如無其他干擾物質存在，樣品提取液所還原的標準染料量與樣品中所含的還原性抗壞血酸量成正比。

過氧化物酶的作用 過氧化物酶能催化過氧化氫釋出新生氧以氧化某些酚類和胺類物質，例如氧化溶于水中的焦性沒食子酸生成不溶于水的焦性沒食子橙（橙紅色）；氧化愈創木脂中的愈創木酸成為藍色的愈創木酸的臭氧化物。

目前測定蛋白質含量的方法有很多種，下面列出根據蛋白質不同性質建立的一些蛋白質測定方法：

物理性質：紫外分光光度法。

化學性質：凱氏定氮法、雙縮脲法、Lowry法等。染色性質：考馬斯亮藍染色法、銀染法。其他性質：熒光法。

一、凱氏定氮法： 根據蛋白質的含氮量來測定蛋白質的含量

公式:每g樣品中含氮克數 × 6.25 ×100

二、比色法：利用蛋白質與不同試劑的呈色反應，測定蛋白質的含量，如雙縮尿法和酚試劑法（lowry’s method）。

三、紫外分光光度法：利用蛋白質對280nm紫外光有最大的吸光度而采用

第三篇：生理實驗復習資料

生理實驗復習資料2（藍林）

1．為何肌肉收縮在一定范圍內可隨刺激強度的增加而增強？

從閾刺激起始，隨著刺激強度的增加，肌肉收縮也相應地增大。當刺激強度增加到一定限度時，肌肉收縮也達到最大限度，如再增大刺激強度，肌肉收縮力就不再增大。其原因同上一題。

2．用閾強度和閾上刺激分別刺激單根神經纖維與神經干時，其記錄的電變化有何不同？為什么？

用閾強度和閾上刺激分別刺激單根神經纖維與神經干時，動作電位幅度不相同。①用不同的刺激強度刺激神經干時，動作電位的幅度將隨刺激強度的增大而呈等級性反應。神經干是由許多條興奮性不同的神經纖維組成，即興奮性高的纖維先興奮，隨著刺激強度的增大，興奮的纖維越來越多。當刺激達到某一最適強度時，可使神經干中所有的纖維都興奮，此時動作電位的幅度就先到最大值，再增大刺激強度，動作電位幅度不再增大。在神經干上記錄的是許多神經纖維興奮所形成的復合動作電位。②單根神經纖維的動作電位呈“全或無”現象。刺激強度未達到閾值不產生動作電位。一旦達到閾值，就產生固定幅度的動作電位。再給予閾上刺激，動作電位幅值也不隨之增大。

3．電刺激坐骨神經－腓腸肌標本的神經后，從電刺激神經到引起肌肉收縮的整個過程中依次發生了哪些生理活動？

從坐骨神經接受刺激到發生肌肉收縮歷經下列變化過程：①刺激引起坐骨神經產生動作電位；②動作電位沿坐骨神經以跳躍式傳導至末梢；③興奮在神經-肌肉接頭處的傳遞，即：突觸前膜去極化引起Ca2+內流→Ca2+內流觸發神經遞質Ach釋放→Ach經擴散與接頭后膜上的N2型Ach受體結合，出現Na+內流為主的離子跨膜流動，形成終板電位→終板電位電緊張傳播，引起周圍肌膜產生動作電位；④骨骼肌興奮收縮－耦聯，肌細胞胞質內Ca2+濃度迅速增高；⑤胞質內Ca2+與肌鈣蛋白結合，誘發肌絲滑行，肌肉收縮；⑥肌質網膜上Ca2+泵活動的結果，使胞質內Ca2+濃度恢復，肌肉出現舒張。4．在蛙心灌注實驗中，逐級升高任氏液K＋濃度時，心肌的興奮性和傳導性有何變化？為什么？有何意義？ 制備離體蛙心灌流模型。用蛙心夾連接心尖和張力傳感器，調節放大倍數，進行下列實驗項目：（1）描記一段蛙心正常收縮曲線。

（2）向套管中加入1%KCl 1～2滴，觀察蛙心活動有何變化？然后繼續加入1%KCl 1～2滴，觀察蛙心活動有何變化？ 結果發現，心肌的興奮性出現雙向變化。當細胞外液K＋濃度輕度升高時，心肌細胞膜內外K＋濃度差減小，K＋外流減少，心肌細胞靜息電位或最大復極電位輕度減小，與閾電位之間差距減小，心肌興奮性升高。當細胞外液K＋過度升高時，心肌細胞靜息電位或最大復極電位絕對值顯著減小，心肌膜上的Na+通道部分或大量失活，心肌興奮性減低，甚至喪失。

心肌興奮性傳導速度將逐漸減慢。其機制是當細胞外液K＋濃度逐漸升高時，心肌細胞靜息電位或最大復極化電位絕對值顯著減小，Na+（或Ca2+）內流的驅動減小，并且Na+（或Ca2+）通道部分失活，心肌動作電位0期Na+（或Ca2+）內流的速度和量減小，0期去極化的速度和幅度減小，局部電流形成減慢，強度減小，局部電流影響范圍小，故興奮傳導減慢。嚴重的高血鉀可引起房室交界和心房肌傳導阻滯，嚴重時引起心室內傳導阻滯，心臟停跳。5．試述影響動脈血壓的因素。影響動脈血壓的因素有：

（1）搏出量：在心率與外周阻力恒定的情況下，搏出量可以增加動脈內血容量，升高收縮壓；雖然舒張壓也升高，但不如收縮壓，脈壓也有輕度增加。因此，收縮壓的高低主要反映心臟搏出量的多少。

（2）心率：如心率加快則使心舒期縮短，心舒期末主動脈內存留血量增加。因此心率加快時，舒張壓的升高大于收縮壓的升高，故脈壓減小。當心率減慢時，結果相反。可見，心率主要影響舒張壓。

（3）外周阻力：外周阻力增加時，阻止動脈血液流向外周，使心舒期末動脈內存留的血量增加。因此，以舒張壓增加為主。同理，外周阻力降低時，血壓降低也以舒張壓為明顯。可見，舒張壓的高低主要反應外周阻力的大小。

（4）主動脈和大動脈的順應性：大動脈彈性擴張主要是緩沖血壓，使收縮壓降低，舒張壓升高。故當大動脈硬化時，順應性變小，緩沖能力減弱，收縮壓升高而舒張壓降低，脈壓增大。

（5）循環血量和血管系統容量的比例：失血時，循環血量減少，而血管容量改變不大，體循環平均壓下降，使回心血量減少，心輸出量減少，動脈血壓下降。如循環血量不變，血管容量增加，也可使回心血量減少，動脈血壓下降。

6．在嚴重缺O2、CO2潴留、酸中毒、窒息情況下，機體是如何維持動脈血壓的？

在嚴重缺O2、CO2潴留、酸中毒、窒息對體循環血管的直接作用是擴張血管，降低動脈血壓。但機體可通過頸動脈體和主動脈體化學感受性反射維持動脈血壓，維持心腦等重要生命器官血液供應。正常情況下，化學感受器反射主要是調節呼吸運動，對心血管活動不起明顯調節作用。但血液中O2分壓降低，CO2分壓升高及pH值降低，可激活頸動脈體及主動脈體內的化學感受器。傳入沖動分別沿竇神經和主動脈神經上傳到延髓的心血管中樞及呼吸中樞，引起呼吸加深加快，并因此使心率加快，心肌收縮增強，心輸出量增多；同時使交感縮血管緊張增強，使外周血管收縮，外周阻力加大，動脈血壓升高，皮膚、骨骼肌、腹腔內臟和腎臟的血流量減少，心、腦血流量增加，從而維持了動脈血壓和心腦的血液供應。7．在動物實驗中，夾閉一側頸總動脈后，動脈血壓有何變化？為什么 夾閉一側頸總動脈后，動脈血壓會出現升高。

心臟射出的血液經主動脈弓、頸總動脈而到達頸總動脈竇。當血壓升高時，該處動脈管壁受到機械牽張而擴張，從而使主動脈弓和頸動脈竇血管壁外膜上作為壓力感受器的感覺神經末梢興奮，引起減壓反射，使血壓下降。當血壓下降使竇內壓降低，減壓反射減弱，使血壓升高。在實驗中夾閉一側頸總動脈后，心臟射出的血液不能流經該側頸動脈竇，使竇內壓力降低，壓力感受器受到刺激減弱，經竇神經上傳中樞的沖動減少，減壓反射活動減弱，因而心率加快、心縮力加強、回心血量增加、心輸出量增加；阻力血管收縮，外周阻力增加，導致動脈血壓升高。

8．電刺激家兔完整的減壓神經時動脈血壓有何變化？若再分別刺激減壓神經向中端及向心端又會引起什么結果？為什么？

主動脈弓壓力感受器的傳入纖維一般均在迷走神經中上傳到中樞，但家兔主動脈弓壓力感受器的傳入纖維卻自成一束，在頸部與迷走神經及頸交感神經伴行，稱之為減壓神經。電刺激家兔完整的減壓神經或切斷后的減壓神經向中端，其傳入沖動相當于壓力感受器的傳入興奮，傳入延髓心血管中樞將引起減壓反射的加強，使心率減慢，心輸出量減少，外周血管阻力降低，動脈血壓下降；刺激減壓神經的外周端對動脈血壓無影響，因為減壓神經是傳入神經。

9．電刺激家兔迷走神經向心端引起動脈血壓如何變化？機制是什么？

電刺激家兔迷走神經向心端即刺激支配心臟的迷走神經，其末梢釋放的遞質是乙酰膽堿（Ach）, Ach與心肌細胞膜上的M膽堿受體結合，可導致心率減慢，心房肌收縮力量減弱，心房肌不應期縮短，房室傳導速度減慢，甚至出現房室傳導阻滯，即負性變時、變力和變傳導效應，導致血壓下降。10．靜脈注射腎上腺素或乙酰膽堿之后血壓會發生什么變化，為什么？

靜脈注射腎上腺素，血壓先升高后降低，然后再逐漸恢復。腎上腺素對心臟的作用是使心率加快，興奮傳導速度增加，心肌收縮力加強和心輸出量增加。對血管的作用則主要取決于血管平滑肌上受體的分別情況：對α受體占優勢的皮膚、腎臟、腸胃等內臟的血管，腎上腺素使之收縮；而對以β受體占優勢的骨骼肌、肝臟和心臟冠脈等血管，小劑量的腎上腺素則使之舒張，而大劑量時才出現縮血管反應。靜脈注射腎上腺素后，開始血液中濃度較高，對心臟和α受體占優勢的血管發生作用，使心跳加快，心肌收縮力加強，心輸出量增加，皮膚、腎臟、腸胃等內臟的血管收縮，所以血壓升高。隨著血中腎上腺素的代謝，其濃度逐漸降低，對α受體占優勢的血管作用減弱，而對β受體占優勢的骨骼肌、肝臟和冠脈血管發生作用，使之擴張，引起血壓下降。最后腎上腺素逐漸消失，血壓也逐漸恢復正常。靜脈注射乙酰膽堿后，血壓會降低。乙酰膽堿與心肌細胞膜上的M2型膽堿能受體結合，通過第二信使cGMP提高K+通道開放程度，減少細胞內cAMP，降低Ca2+通道開放程度，使靜息電位水平下降，興奮性降低；竇房結P細胞靜息電位水平下移，外向電流Ik衰減減慢，心率減慢；復極化進程加速，Ca2+內流減少，房室結傳導慢，且心肌收縮減弱，故血管平滑肌舒張，使血壓下降。11．切斷家兔雙側頸迷走神經對呼吸的影響如何 為什么 ? 切斷家兔雙側頸迷走神經后，呼吸變深變慢。兔的肺牽張感受器較為敏感，正常的呼吸受肺牽張反射的調節，阻止吸氣活動過長，加速吸氣動作和呼氣動作的交替。迷走神經中含有肺牽張反射的傳入纖維。切斷兩側迷走神經后，中斷了肺牽張反射的傳入通路，肺牽張反射作用被消除，呼吸變深變慢。12．試述動脈血中CO2分壓升高，O2分壓下降，對呼吸有何作用 機制如何

血中PCO2增高，PO2、pH下降均可使呼吸運動增強，但其機制有所不同。CO2為很強的呼吸興奮劑，其作用通過兩條途徑：一是刺激延髓腹外側的中樞化學感受器（CO2能透過血腦屏障，加強腦脊液中H+對此感受器的作用），這是主要途徑；另一是刺激外周化學感受器，沖動沿竇神經和主動脈神經傳入延髓呼吸中樞，誘發反射性呼吸加深加快；CO2減少時呼吸減弱，但血PCO2過高反能抑制呼吸中樞。血PO2下降作用于外周化學感受器引起反射性呼吸興奮，缺氧對呼吸中樞的直接作用是抑制。pH降低、H+增高亦通過外周與中樞化學感受器兩種途徑興奮呼吸中樞。雖然中樞化學感受器的生理刺激是H+，但H+通過血腦屏障緩慢，限制了它的中樞效應。

13．靜脈注入3%乳酸2 ml，家兔的呼吸運動有何變化

家兔注入2 ml的3%乳酸后，血中H＋濃度升高，pH下降，通過外周化學感受器，反射性地引起呼吸加快加深。

14．家兔吸入CO2后呼吸運動有何變化 為什么

家兔吸入CO2，可使呼吸運動加深加快，肺通氣量增加。因為CO2興奮呼吸是通過刺激中樞化學感受器和外周化學感受器兩條途徑而起作用的，并且以興奮中樞化學感受器為主。

15．小腸運動的形式有幾種？各有何生理作用？小腸運動受哪些因素的調節？ 小腸的運動形式有：

（1）緊張性收縮，小腸平滑肌經常處于緊張狀態，這種緊張性是小腸運動的基礎。如果小腸緊張性降低，腸腔易于擴張，混合食糜無力，推送食糜也慢；反之，緊張性升高，推送和混合食糜就加快。（2）分節運動，主要作用是使食糜與消化液充分混合，便于進行化學性消化；它還使食糜與腸壁緊密接觸，有利于營養物質的吸收。此外，分節運動還能擠壓腸壁，有助于血液和淋巴的回流。（3）蠕動，腸段的一種速度緩慢的波浪式推進運動。

（4）擺動，以縱行肌為主的節律性舒縮活動。在草食動物中擺動較為明顯。小腸運動的調節：

①內在神經叢的作用：食糜對腸壁的機械和化學刺激，通過肌間神經叢聯系的局部反射，引起平滑肌的蠕動。

②外來神經的作用：副交感神經興奮能加強小腸運動，交感神經則抑制其運動，上述作用還依腸肌當時的機能狀態而定。③體液因素的作用：除乙酰膽堿和去甲腎上腺素外，P物質、腦啡肽和 5-羥色胺都有刺激小腸運動的作用。16．為什么小腸是最重要的吸收部位？

小腸之所以成為吸收的最重要部位，是因為它具備以下條件：（1）小腸內集中了許多重要的消化液，如胰液、膽汁、小腸液等。其中的各種消化酶，對食物的各種成分都能進行徹底消化。（2）小腸具有廣泛的吸收面積。人的小腸長約5～7m，小腸黏膜上有環狀皺褶，皺褶上又有大量絨毛，絨毛外的柱狀上皮細胞頂端還有許多微絨毛，這些結構最終可使小腸面積增加約600倍，達200 m2左右。（3）食物在小腸內停留時間較長（3～8h），可作充分地消化和吸收。（4）小腸絨毛內有毛細血管和中央乳糜管，利于代謝物質的吸收并進入血液和淋巴。

17．簡述胃運動的形式及其生理意義。

胃運動功能在于接受和貯存從食管來的食物，還可以機械地磨碎塊狀固體食物，并使食物與胃液充分混合，直至成為一種半流體混合物－食糜，以適宜的速度逐次地、小量地將食糜分批排入小腸。消化期主要運動形式有2種。（1）胃的容受性舒張：當進食時，咀嚼和吞咽食物對咽、食管等處感受器的刺激，可反射性地引起胃底和胃體肌肉的舒張，該運動形式被稱為胃的容受性舒張。舒張后的胃容量可增加到1.5L，使胃適應于大量食物的擁入，從而更好地完成容受和貯存食物的機能。（2）胃的蠕動：食物進入胃后約5min，蠕動即開始。蠕動是從胃的中部開始，有節律地向幽門方向進行。在人其頻率為3/min，每次需1min左右到達幽門。因此，通常是一波未平，一波又起。蠕動的主要的生理意義是，一方面使食物與胃液充分混合，以利于胃液發揮作用；另一方面，則可攪拌和粉碎食物，并推進胃內容物通過幽門進入十二指腸內。胃在消化期存在移行性復合運動，其生理意義在于它的Ⅲ時相出現強烈的收縮活動，加速胃排空，把胃內容物“清掃”入十二指腸，接著沿小腸向下“清掃”。同時還伴有胃酸分泌等，為下一次消化做好準備。18．膽汁成分中與消化有關的物質是什么？它具有什么作用？膽汁的分泌和排出是如何調節的？

膽汁的成分：膽汁中除水外，還有膽色素、膽鹽、膽固醇、卵磷脂以及血漿中所有的無機鹽，膽汁中沒有消化酶。

膽汁的作用：

⑴膽汁中的膽鹽、膽固醇和卵磷脂等可做為乳化劑，減低脂肪的表面張力，增加胰脂肪酶的作用面積。⑵膽汁達到一定濃度后，可聚合成微膠粒，與脂肪分解產物形成水溶性復合物，作為運載工具，促進不溶于水的脂肪分解產物的吸收。

⑶促進脂溶性維生素A,D,E,K的吸收。此外，它在十二指腸可中和一部分胃酸，它還作為促進膽汁自身分泌的體液因素。膽汁分泌的調節

⑴神經因素的作用：

進食動作或食物對胃、小腸的刺激，均可通過神經反射引起肝膽汁分泌的少量增加和膽囊的輕度收縮。迷走神經釋放乙酰膽堿可直接作用于肝細胞和膽囊，增加膽汁分泌和引起膽囊收縮，還可通過釋放胃泌素引起肝膽汁分泌增加。⑵體液因素的作用：

①胃泌素的作用：它可通過血液循環直接作用于肝細胞，也可先引起胃酸的分泌，后者再作用于十二指腸粘膜，使之釋放促胰液素而作用于肝細胞，引起膽汁分泌增加。②促胰液素的作用：可刺激肝細胞引起肝膽汁的分泌。

③膽囊收縮素的作用：可興奮膽囊平滑肌，使其強烈地收縮，從而排出膽汁。④膽鹽的作用：膽鹽經過肝腸循環后回到肝臟，刺激肝細胞分泌膽汁。

19、靜脈注射37℃的20％葡萄糖溶液10 ml，計數每分鐘尿分泌的滴數。

結果發現，靜脈注射清水后，尿量增加。因為，血液被稀釋，血漿晶體滲透壓下降，位于下丘腦的滲透壓感受器可感受這種變化，轉而引起抗利尿激素分泌減少，腎遠曲小管和集合管對水的重吸收減少，于是尿液被稀釋，尿量增加，從而使體內多余的水被排除體外。這就是水利尿的產生機制。

靜脈注射葡萄糖溶液后，由于腎小管內的葡萄糖含量超過腎小管重吸收的能力，葡萄糖將不能完全被吸收，小管液滲透壓升高，結果導致尿量增多。這就是滲透性利尿的產生機制。20.電刺激家兔迷走神經外周端，尿量有何變化？為什么？

電刺激家兔迷走神經外周端，其末梢釋放的遞質是乙酰膽堿與心肌細胞膜上的M膽堿受體結合，改變離子通道的通透性和心肌動作電位，使心臟活動抑制，出現負性變化，心輸出量減少，血壓下降，腎小球毛細血管壓降低，有效濾過壓減小，腎小球濾過率減少，所以尿生成減少。21．靜脈注射腎上腺素對尿量有何影響？

腎上腺素作用于腎血管平滑肌的腎上腺素能受體，引起腎血管收縮，使腎血流量減少，腎小球的有效濾過壓下降，腎小球濾過率降低。增加近端小管和髓袢上皮細胞重吸收Na+、Cl-和水。因此，靜脈注射腎上腺素可使尿量減少。

22．飲大量生理鹽水或清水后，尿量發生什么變化 為什么

正常人一次飲用1000ml清水后，經過0.5h，尿量就開始增加，到第1h末，尿量可達最高值；隨后尿量減少，2～3h后恢復到原來水平，此現象稱為水利尿。其原因是：大量飲清水后，使血漿晶體滲透壓下降和血容量增加，引起抗利尿激素分泌減少，以致遠曲小管和集合管對水的重吸收減少，尿量增加。如果飲用的是生理鹽水，因為是等滲溶液，僅改變血容量而不會改變血漿晶體滲透壓，抗利尿激素抑制程度輕，故其尿量少于飲清水后的水利尿排出的尿量。

23．大量出汗后尿量會發生什么變化？為什么？

尿量減少。因為汗液為低滲液體，大量出汗造成機體水分的丟失大于電解質的丟失，使血漿晶體滲透壓升高，對滲透壓感受器刺激增強，抗利尿激素釋放增多，促進遠曲小管和集合管對水的重吸收，尿量減少。24.胰島素和胰高血糖素是如何相互作用來維持機體血糖穩定的？

胰島素通過促進組織細胞攝取葡萄糖，增強糖原合成和減少糖異生，而使血糖降低。胰高血糖素的作用與胰島素相反，通過促進糖原分解和增強糖異生，使血糖升高。胰高血糖分泌有利于機體防止低血糖的發生。血糖水平是調節胰島素和胰高血糖素分泌的最主要因素。血糖水平持續升高時，胰島β細胞合成與釋放胰島素增加，而胰島α-細胞分泌胰高血糖素減少，使血糖降低；而當血糖降低時，胰島素分泌量迅速降低，而胰高血糖素分泌量大增，使血糖回升。實驗設計題

1．請設計實驗證明纖維蛋白原在凝血中的作用。

取新鮮血液50 ml放入燒杯中，用帶有開叉橡皮管的玻棒攪動，以除去其中的纖維蛋白，結果血液不凝固。說明去除纖維蛋白后血液不發生凝固，纖維蛋白原在凝血中具有重要的作用。2．請設計實驗證明加速或延緩血液凝固的方法。

（1）取試管3支，一支做對照，另兩支分別加少量棉花，或涂少許液體石蠟。加1 ml新鮮家兔靜脈血到三支試管內，每30 s輕輕地傾斜試管一次，記錄三管的凝血時間。結果發現，加少量棉花使血液與粗糙面接觸，促進凝血因子的激活，進而加速凝血。涂少許液體石蠟使血液與光滑面接觸，延緩血液凝固。（2）取試管3支，分別加入新鮮血液1 ml，然后分別置于37℃水浴、室溫和冰水中，比較3管的凝血時間。結果發現，37℃水浴適當增加溫度可加快酶促反應而使血凝加速。反之，冰水低溫可延緩血液凝固。（3）取試管3支，一支做對照，另2支分別加入3滴3.8％檸檬酸鈉和5％草酸鉀，然后再向各管加入1 ml新鮮血液，混合后觀察血凝情況。往加入檸檬酸鈉和草酸鉀的兩管分別再加1％CaCl2 1～2滴。結果發現，加入3.8％檸檬酸鈉和5％草酸鉀可與血液中Ca2+結合成為絡合物或沉淀的化學物質，減少血液中Ca2+從而起到抗凝作用。再加1％CaCl2 1～2滴后，血液發生凝固。

（4）取一支試管放肝素8單位，再加入新鮮血液1 ml，搖勻后，觀察其結果。結果發現，肝素能抑制凝血酶的活性而延緩血液凝固。（5）取新鮮血液50 ml放入燒杯中，用帶有開叉橡皮管的玻棒攪動，以除去其中的纖維蛋白，觀察血液能否凝固。結果發現，去除纖維蛋白后血液不發生凝固。3．血清與血漿的主要區別是什么？

血漿是指經過抗凝處理過的血液經離心沉淀得到的淡黃色半透明液體，血清是指末經抗凝處理的血液發生凝固，待血凝塊收縮后得到的淡黃色上清液。所以，血漿和血清的主要區別是：制備血漿的血液經過了抗凝處理，未發生凝血，故血漿中含較齊備的凝血因子；而制備血清的血液，未經抗凝處理，發生了凝血，所以其中的凝血因子因消耗而減少，某些凝血因子甚至耗竭。此外，血清中還含血管內皮細胞和血小板在凝血過程中釋放的活性物質。

4．設計實驗證實心肌有較長的有效不應期。

（1）動物和設備的準備：破壞蛙的腦和脊髓，使之背位固定于蛙板上，剪開胸部皮膚、肌肉和胸骨，暴露心臟。用蛙心夾連接心尖和張力傳感器并調節好緊張度，刺激電極接觸心室；刺激參數選單刺激、波寬1 ms、強度增加達到閾值。

（2）描記一段正常蛙心收縮曲線。

（3）在心室收縮期給于一個閾上刺激，記錄其反應。

（4）在心室舒張早期、中期、晚期各給予一次閾上刺激并記錄其反應。

結果發現，在收縮期間不能接受任何刺激而出現新的興奮和收縮。而心肌的舒張期（不包括舒張早期）則處于相對不應期，該期中能接受閾上刺激，并出現一個期前收縮，隨后有一代償性間歇，因此心肌具有相當長的有效不應期，比整個收縮期還略長。

5．設計實驗分析蛙心興奮的正常起搏點及傳導方向，各部分自律性的高低。

（1）動物和設備的準備：破壞蛙的腦和脊髓，使之背位固定于蛙板上，剪開胸部皮膚、肌肉和胸骨，暴露心臟。用蛙心夾連接心尖。

（2）將蛙心翻向頭端或提起心尖，觀察蛙心各部的收縮順序，并記錄其收縮頻率。

（3）在主動脈之下穿線，將心臟翻向頭端，用絲線在心房和靜脈竇之間結扎，此結扎稱為斯氏第一結扎。觀察此時心房、心室搏動均停止，但靜脈竇仍搏動。

（4）待心臟恢復搏動后，用絲線在心房和心室之間結扎，此結扎稱為斯氏第二結扎。此時心室搏動停止，但心房和靜脈竇仍搏動。

蛙心傳導系統各部分都具有自律性，其中以靜脈竇（哺乳動物為竇房結）的自律性最高，房室交界次之，心室內的傳導組織最低。故靜脈竇為蛙心興奮和搏動的正常起搏點。靜脈竇的興奮沿心房傳至房室交界，再經房室束和浦金野氏纖維傳至心肌。如在不同部位阻斷傳導，則出現正常收縮節律的障礙。6．設計實驗證實組織胺和腎上腺素對毛細血管的影響

取蟾蜍一只，破壞蛙腦和脊髓后將蛙固定在蛙板上，在腹側部剪一切口，拉出一段小腸，將腸系膜展開，并用大頭針將其固定在蛙板的圓孔周圍。其上滴加任氏液，防止干燥，然后進行以下項目：（1）在低倍鏡下觀察小動脈、小靜脈和毛細血管中血流情況，分辨其流速、方向和特征。

（2）滴1滴0.01%腎上腺素于腸系膜血管上，觀察血管口徑及血流速度的變化。發生變化后，速以任氏液沖洗。

（3）滴1滴0.01%組織胺于腸系膜血管上，觀察血管口徑及血流速度的變化。

結果發現，滴加腎上腺素后，血管口徑變小，血流速度加快。腎上腺素對α受體和β受體都有作用，因此腎上腺素對血管的作用則取決于在血管平滑肌上哪種受體占優勢，對以α受體占優勢的血管，如皮膚和內臟的血管等，腎上腺素使之收縮。滴加組織胺后，血管口徑變大，血流速度減慢，因為組胺有強烈的舒血管作用。

7．設計實驗證明胰島素和腎上腺素調控血糖水平的不同作用。

（1）選擇體重約20g的小白鼠3只，禁食24h。皮下注射1～2單位胰島素后觀察小鼠的活動，有無不安，呼吸局促，痙攣，甚至休克現象的發生。

（2）待小白鼠出現低血糖癥狀如驚厥時，留1只作對照，其余2只分別進行腹腔注射(或尾靜脈注射)20％葡萄糖1ml和皮下注射(或尾靜脈注射)0.01％腎上腺素0.1ml，觀察并記錄結果。

結果發現，注射胰島素后因血糖濃度迅速下降動物可出現精神不安、抽搐、休克等表現，這些癥狀幾乎全是低血糖對神經系統作用的后果。腦組織對低血糖比較敏感，需要量非常多，因此如果血糖濃度降低，會使神經組織的正常代謝受到限制，對交感神經產生刺激而引起一系列交感神經異常興奮的癥狀。

對注射胰島素引起以上癥狀，最有效的辦法就是立即靜脈注射葡萄糖溶液，動物因血糖水平即刻升高，低血糖癥狀會立刻糾正。也可皮下注射0.01％腎上腺素，此法糾正低血糖癥狀較慢。機理是進入體內的腎上腺素與胰島β細胞α受體結合，抑制胰島素的釋放；亦可直接作用于肝臟、肌肉等組織，使糖原異生，糖原和脂肪分解增加，提高血糖水平。

8．設計實驗證明腎上腺對動物生命活動及應激反應的生理作用。

（1）取實驗鼠20只，稱重并編號，分成4組，每組5只。第一組為對照組（假手術組），其余為腎上腺摘除組。手術操作參見第一章實驗手術方法。

（2）四組動物在相同條件下單籠飼養。室溫20～25℃，喂以高熱量和高蛋白飼料，飲水充足。

（3）摘除腎上腺后動物水鹽代謝和存活率的影響：手術后，動物分成以下四個大組，按下表給予相應處理一周并將記錄每天情況：

第四篇：生化實驗計劃

2016-2017學年第一學期生物化學教研室實驗室工作計劃

一、指導思想

堅持以鄧小平理論和“三個代表”的重要思想及科學發展觀為指導，踐行社會主義核心價值觀,開展教育教學改革，全力推進以高等衛生職業教育為核心的素質教育，抓好教育教學管理工作。

二、工作計劃

（一）實驗室日常管理計劃

1、牢固樹立“教學中心”意識，對實驗室的儀器耗材進行精確登記備案，以便為《生物化學》實驗做好后勤服務。

2、嚴格執行儀器使用人使用儀器必須登記的規章制度。

3、嚴格執行及時更新實驗耗材的規章制度。

4、嚴格執行實驗安全條例，做好實驗室安全意識宣講，做到實驗室安全零事故。

5、嚴格執行實驗室值日制度。

6、嚴格執行實驗室衛生制度，保持實驗室衛生整潔，給學生提供一個良好的實驗環境。

7、嚴格執行學院規定及時批改實驗報告。

8、切實做好實驗課的示教工作。

（二）實驗室師資隊伍建設

1、開展政治學習和業務學習，特別是學習社會主義核心價值體系和人才培養水平評估標準，提高教師的政治品德和業務素養，組織教師開展高等衛生職業教育理念討論，切實轉變教學理念，改變教學方式，提高教學水平。

2、加強實驗指導教師的管理和培養，提高實驗實訓的準備能力和指導水平。

3、加強實驗指導教師的安全責任意識。

生物化學教研室 2016年9月

第五篇：生化實驗心得

生化實驗心得

劉欣怡

201100140057 2011級生物基地班

我很喜歡做實驗，并且樂于鍛煉自己的動手能力。

本學期的生化實驗，雖然只從第二周上到第十五周，但是我收獲了很多并且留下了深刻的印象。對于本次實驗心得的撰寫，我將分為以下3個部分來進行：本學期實驗回顧、本學期實驗總結以及對于生化實驗課的支持和建議。

一、本學期實驗回顧：

本學期的生化實驗課上，我們一共進行了11次實驗，分別是Folin-酚試劑法測定血清蛋白質含量、酵母RNA的提取、醋酸纖維薄膜電泳、紫外吸收法測定RNA含量、聚酰胺薄膜層析、纖維素酶活力的測定（三硝基水楊酸法）、還原糖和總糖含量的測定（三硝基水楊酸法）、酶最適PH的測定、費林試劑熱滴定糖、肌糖原酵解作用、微量凱氏定氮法。這些實驗具有代表性，是典型的生化實驗。在這些實驗中，涵蓋了以前無機實驗和有機實驗的基礎實驗操作，還有全新的實驗操作以及實驗儀器。

在這學期的生化實驗課上，我既復習并熟練了大一無機實驗和有機實驗的基本實驗操作和儀器（比如移液管、滴定管、蒸餾等），又學習并掌握了許多新操作以及新儀器的使用，比如紫外分光光度計、離心機、聚酰胺薄膜、熱滴定、凱氏定氮儀器等。最重要的是，我學習并掌握了一些重要的實驗方法和原理，比如Folin-酚試劑法、紫外吸收法、三硝基水楊酸法、費林試劑與糖的反應、微量凱氏定氮法等。掌握了這些實驗原理以及方法，有利于我們在以后中靈活運用設計實驗。

總體來說，本學期生化實驗教會了我測定蛋白質、糖、核酸的方法，電泳和層析分離物質、如何測定酶的相關特性、驗證肌糖原酵解作用、如何提取RNA。

二、本學期實驗總結

通過這學期的生化實驗，我的實驗技能的到了大大地提升，同時，實驗中的細節、注意事項以及老師拓展的知識令我獲益匪淺，也讓我深深地認識到科學是非常嚴謹的，尤其是在做實驗的時候，要全神貫注，井井有條，否則很容易出差錯，而這個小小的差錯很有可能就使實驗前功盡棄，既耽誤時間又浪費試劑。

回顧這一學期我的實驗課程，每一次我都能完成實驗任務。大多數都比較順利，小組內兩人也大多配合默契，但是有一些美中不足的地方。有的一些實驗比較麻煩，實驗步驟較為繁瑣，我們在做實驗時偶爾會產生不耐煩的思想，只想著抓緊結束，但是在這種時候往往更容易出差錯。我有兩次記憶很深，一次是在測定纖維素酶活力（三硝基水楊酸法）時，沒能及時貼上空白標簽，導致又重新制作空白，拜拜浪費了時間；另一次是在鑒定肌糖原酵解作用時，實驗步驟較為繁瑣，并且老師對黑板上的簡易實驗步驟進行了多個補充，其中一點是要在水浴后取出大塊肉再加下一步驟的試劑，結果我們當時產生了不耐煩情緒，就直接加了試劑而沒有取出大肉塊。對于這兩次情況，雖然對最終的實驗結果沒有產生什么明顯的影響，但是，它實實在在體現了自己的操作并不是很嚴謹，需要注意和努力。

在本學期生化實驗報告的撰寫中，我重點注意老師強調的實驗分析部分。上課認真聽老師的實驗講解并認真記錄有關的可能實驗結果的分析。在課后撰寫實驗報告時對這些點重點分析和總結，有時甚至是查找相關資料然后再進行分析。通過這一些列的做法，我的實驗分析能力得到了提升，我能在討論實驗結果或者實驗操作時找到更好、更精確的切入點，能得出更好的結論。

同時，本學期老師將我們分為兩人一組來進行實驗，兩人之間的磨合和合作是一種鍛煉，對今后很有幫助。

三、對于生化實驗課的支持和建議

我非常感謝老師在這一學期中的辛勤勞動。老師在課前為我們做好實驗準備很不容易，配試劑等都很辛苦。謝謝老師您了。

我覺得咱們的額生化實驗課設計的挺好的。兩人一組可以分工合作，加快實驗效率，同時又避免了因為同組同學人數多而有的同學無事可做的現象。老師在課上講解實驗時，有關實驗步驟、實驗可能結果、實驗注意事項的分析、講解和拓展令我獲益匪淺，有利于培養我的實驗思維并且拓寬了知識視野。

建議方面，我想和老師提的一點建議其實是有關實驗器材方面的。對于老師所提到的有關節約試劑、減少材料浪費等事項我非常贊同，并且大多數時候器材和試劑都很全（這和大一的無機實驗和有機實驗相比條件進步了很多），只是希望咱們的一些其他實驗儀器能更全面一點，舉一個例子，可以使用的紫外分光光度計只有3臺，有些過少，實驗中要等待的時間較長，并且有的儀器還不是很準確，對于我們的實驗造成了一定的困擾，希望老師能將實驗室內有些問題的儀器同一修一修。

總之，我很喜歡咱們的生化實驗課，并且從中學到了很多知識、實驗方法和應用，鍛煉了實驗操作，形成了實驗要耐心、細心、恒心的觀念。同時還培養了團隊意識和合作觀念。我獲益匪淺。