第一篇：微生物第六七章總結(jié)（推薦）

微生物的生長和控制

第一節(jié)：測定生長繁殖的方法

一.測生長量

(一)直接法：有粗放的測體積法和精確的稱干重法。(二)間接法：1.比濁法2.生理指標法 二.計繁殖數(shù)

(一)直接法：指用計數(shù)板(例如血球計數(shù)板)在光學(xué)顯微鏡下直接觀察細胞并進行計數(shù)的方法。此法十分常用,但得到的數(shù)目是包括死細胞在內(nèi)的總菌數(shù)。可以采用特殊的染色法計算活細胞。

(二)間接法：

1.平板菌落計數(shù)法：可用澆注平板或涂布平板或滾管法等方法進行。2.厭氧菌的菌落計數(shù)法：亨蓋特滾管培養(yǎng)法。

第二節(jié)微生物的生長規(guī)律

一.單細胞微生物的典型生長曲線

它只適合單細胞微生物如細菌和酵母菌,非典型的絲狀菌生長曲線缺乏指數(shù)生長期, 與此期相當?shù)闹皇桥囵B(yǎng)時間與菌絲體干重的立方根成直線關(guān)系的一段快速生長時期。根據(jù)微生物的生長速率常數(shù), 即每小時分裂次數(shù)(的不同, 一般可把典型生長曲線粗分為延滯期、指數(shù)期、穩(wěn)定期和衰亡期等4個時期。(一)延滯期：

延滯期又稱停滯期、調(diào)整期或適應(yīng)期。

影響延滯期長短的因素：菌種類型，接種齡，接種量，培養(yǎng)基成分。(二)指數(shù)期：

指數(shù)期又稱對數(shù)期

在指數(shù)期中,有 3 個重要參數(shù),其相互關(guān)系及計算方法在書P155 影響對數(shù)期的因素：菌種，營養(yǎng)成分，營養(yǎng)物質(zhì)濃度，培養(yǎng)溫度(三)穩(wěn)定期：

細胞內(nèi)開始積聚糖原、異染顆粒和脂肪等內(nèi)含物;芽孢桿菌一般在這時開始形成芽孢;在這時開始以初生代謝物作前體,合成抗生素等對人類有用的各種次生代謝物。

穩(wěn)定期到來的原因是:①營養(yǎng)物尤其是生長限制因子的耗盡;②營養(yǎng)物的比例失調(diào);③有害代謝產(chǎn)物的累積;④物理化學(xué)條件越來越不適宜等等。(四)衰亡期：

有的微生物在這期會進一步合成或釋放對人類有益的抗生素等次生代謝物;而在芽孢桿菌中, 往往在此期釋放芽孢;等等。第三節(jié)影響微生物生長的主要因素

其中最主要的溫度、pH和氧氣。一.溫度：

生長溫度三基點:最低生長溫度、最適生長溫度和最高生長溫度。在不同溫度下，微生物的代謝產(chǎn)物可能會發(fā)生改變。二.PH：除不同種類微生物有其最適生長PH外, 即使同一種微生物在其不同的生長階段和不同的生理、生化過程, 也有不同的最適PH要求。三.氧氣：

按照微生物與氧的關(guān)系,可把它們粗分成好氧微生物和厭氧微生物兩大類。細分為專性好氧菌，兼性厭氧菌，微好氧菌，耐氧菌和厭氧菌。關(guān)于厭氧菌不能存活于氧氣環(huán)境中的解釋，現(xiàn)在普遍認為是因為厭氧菌中不存在過氧化氫酶和SOD（超氧化物歧化酶）

第四節(jié)微生物培養(yǎng)法概論

一.實驗室培養(yǎng)法(一)固體培養(yǎng)法

1.好氧菌的固體培養(yǎng)：主要用試管斜面、培養(yǎng)皿瓊脂平板。

2.厭氧菌的固體培養(yǎng)：高層瓊脂柱，厭氧培養(yǎng)皿，亨蓋特滾管技術(shù)(二)液體培養(yǎng)法

1.好氧菌的液體培養(yǎng)：(1)試管液體培養(yǎng);(2)三角瓶淺層液體培養(yǎng);(3)搖瓶培養(yǎng)

第五節(jié)有害微生物的控制

滅菌:采用強烈的理化因素使任何物體內(nèi)外部的一切微生物永遠喪失其生長繁殖能力的措施,稱為滅菌.消毒:是一種采用較溫和的理化因素,僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體或動、植物有害的病原菌, 而對被消毒的對象基本無害的措施。

防腐:防腐就是利用某種理化因素完全抑制霉腐微生物的生長繁殖, 即通過制菌作用防止食品、生物制品等對象發(fā)生霉腐的措施。例如：低溫，缺氧，干燥，高滲，高酸，高醇，防腐劑。

一.物理滅菌因素的代表——高溫 1.干熱滅菌法

把金屬器械或洗凈的玻璃器皿放入電熱烘箱內(nèi), 在150～170℃下維持1～2 h后, 可達到徹底滅菌(包括細菌的芽孢)的目的。2.濕熱滅菌法(1)常壓法

①巴氏消毒法：此法可殺滅物料中的無芽孢病原菌(如牛奶中的結(jié)核分枝桿菌或沙門氏菌), 又不影響其原有風味。

具體方法可分兩類: 第一類是經(jīng)典的低溫維持法(LTH),例如用于牛奶消毒只要在63℃下維持30 min即可;第二類是較現(xiàn)代的高溫瞬時法（HTST）,用此法作牛奶消毒時只要在72℃下保持15 s。

③間歇滅菌法：適用于不耐熱培養(yǎng)基的滅菌，將待滅菌的培養(yǎng)基放在80～100℃下蒸煮 15～60min,以殺滅其中所有的微生物營養(yǎng)體, 然后放至室溫或 37℃下保溫過夜, 誘使其中殘存的芽孢發(fā)芽,第二天再以同法蒸煮和保溫過夜, 如此連續(xù)重復(fù) 3 天即可在較低的滅菌溫度下同樣達到徹底滅菌的良好效果。(2)加壓法

①常規(guī)加壓蒸氣滅菌法：一般稱作“高壓蒸氣滅菌法”，一般要求為121℃，時間維持15-20min ②連續(xù)加壓蒸氣滅菌法:在發(fā)酵行業(yè)里也稱“連消法”。此法僅用于大型發(fā)酵廠的大批培養(yǎng)基滅菌。

利用溫度殺菌時幾個關(guān)鍵的數(shù)值：

①D值是指在一定的致死溫度下，90％的活菌被殺死所需的時間（min),即為D值。

②Z值是指如果在加熱致時間曲線中，加熱時間縮短90％，所需升高的溫度，這所需升高的溫度即為z值，或者說殺菌時間變化10倍，相應(yīng)的溫度變化值。影響加壓蒸氣滅菌效果的因素： 1.滅菌物體含菌量

2.滅菌鍋內(nèi)空氣排除程度 3.滅菌對象的 pH 4.滅菌對象的體積 5.加熱與散熱速度

微生物的遺傳變異和育種

第一節(jié)遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ) 個基本概念:(1)遺傳型：又稱基因型, 指某一生物個體所含有的全部遺傳因子即基因的總和。

(2)表型：指某一生物體所具有的一切外表特征和內(nèi)在特性的總和,是其遺傳型在合適環(huán)境條件下通過代謝和發(fā)育而得到的具體體現(xiàn)。

(3)變異：指生物體在某種外因或內(nèi)因的作用下所引起的遺傳物質(zhì)結(jié)構(gòu)或數(shù)量的改變,亦即遺傳型的改變。

(4)飾變：即一種不涉及遺傳物質(zhì)結(jié)構(gòu)改變而只發(fā)生在轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)譯水平上的表型變化。一.三個證明遺傳物質(zhì)是核酸的經(jīng)典實驗：(一)經(jīng)典轉(zhuǎn)化實驗：肺炎雙球菌的轉(zhuǎn)化實驗(二)噬菌體感染實驗(三)植物病毒的重建實驗 二.原核生物的質(zhì)粒簡介：

(1)F質(zhì)粒：又稱F因子、致育因子或性因子,是E.coli等細菌決定性別并有轉(zhuǎn)移能力的質(zhì)粒。(2)R質(zhì)粒：又稱R因子，為細菌提供抗藥性。(3)Col質(zhì)粒：編碼細菌素的質(zhì)粒。

(4)Ti質(zhì)粒：即誘癌質(zhì)粒或冠癭質(zhì)粒。Ri質(zhì)粒與Ti質(zhì)粒類似。

(5)mega質(zhì)粒：即巨大質(zhì)粒,存在于根瘤菌屬中, 其上有一系列與共生固氮相關(guān)的基因。(6)降解性質(zhì)粒：只在 Pseudomonas(假單胞菌屬)中發(fā)現(xiàn)。這類質(zhì)粒可為降解一系列復(fù)雜有機物的酶編碼,從而使這類細菌在污水處理、環(huán)境保護等方面發(fā)揮特有的作用。(7)2μm質(zhì)粒存在于酵母菌細胞中。

第二節(jié)基因突變和誘變育種

一.基因突變

（一）突變類型 1.營養(yǎng)缺陷型：某一野生型菌株因發(fā)生基因突變而喪失合成一種或幾種生長因子、堿基或氨基酸的能力,因而無法再在基本培養(yǎng)基(MM)上正常生長繁殖的變異類型。

2.抗性突變型：指野生型菌株因發(fā)生基因突變,而產(chǎn)生的對某化學(xué)藥物或致死物理因子的抗性變異類型。6.產(chǎn)量突變型：通過基因突變而產(chǎn)生的在代謝產(chǎn)物產(chǎn)量上明顯有別于原始菌株的突變株, 稱產(chǎn)量突變型。產(chǎn)量高則為正變株，產(chǎn)量低則為負變株。

（二）基因突變的特點

①自發(fā)性②不對應(yīng)性③稀有性⑤可誘變性⑥穩(wěn)定性⑦可逆性

（三）基因突變的機制

1.誘發(fā)突變：誘發(fā)突變簡稱誘變,是指通過人為的方法, 利用物理、化學(xué)或生物因素顯著提高基因自發(fā)突變頻率的手段。凡具有誘變效應(yīng)的任何因素, 都稱誘變劑。(1)堿基的置換：因它只涉及一對堿基被另一對堿基所置換。

置換又可分兩個亞類:一類稱轉(zhuǎn)換,即DNA鏈中一個嘌呤被另一個嘌呤或是一個嘧啶被另一個嘧啶所置換;另一類稱顛換,即一個嘌呤被另一個嘧啶或是一個嘧啶被另一個嘌呤所置換。①直接引起置換的誘變劑: 例如亞硝酸、羥胺和各種烷化劑等 ②間接引起置換的誘變劑: 5-溴尿嘧啶等

(2)移碼突變：指誘變劑會使 DNA 序列中的一個或少數(shù)幾個核苷酸發(fā)生增添(插入)或缺失,從而使該處后面的全部遺傳密碼的閱讀框架發(fā)生改變。能引起移碼突變的因素是一些吖啶類染料。

(3)染色體畸變：包括染色體結(jié)構(gòu)上的缺失、重復(fù)、插入、易位和倒位,也包括染色體數(shù)目的變化。某些強烈理化因子, 如電離輻射(X射線等)和烷化劑、亞硝酸等會導(dǎo)致染色體畸變。2.自發(fā)突變：指生物體在無人工干預(yù)下自然發(fā)生的低頻率突變。

（四）紫外線對 DNA 的損傷及其修復(fù)

嘧啶對UV的敏感性比嘌呤強得多, 其光化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)物主要是嘧啶二聚體(TT, TC, CC)和水合物,相鄰嘧啶形成二聚體后, 造成局部DNA分子無法配對。二.突變與育種

(一)自發(fā)突變與育種 1.從生產(chǎn)中育種 2.定向培育優(yōu)良菌株(二)誘變育種

1.誘變育種是指利用物理、化學(xué)等誘變劑處理均勻而分散的微生物細胞群, 在促進其突變率顯著提高的基礎(chǔ)上,采用簡便、快速和高效的篩選方法, 從中挑選出少數(shù)符合目的的突變株,以供科學(xué)實驗或生產(chǎn)實踐使用。2.艾姆斯試驗

艾姆氏試驗是一種利用細菌營養(yǎng)缺陷型的回復(fù)突變來檢測環(huán)境或食品中是否存在化學(xué)致癌劑的簡便有效方法。（三致作用：致癌致畸致突變）實驗菌種：鼠傷寒沙門氏菌的組氨酸營養(yǎng)缺陷型

試驗方法：是在含待測可疑“三致”物的試樣中,加入鼠肝勻漿液, 經(jīng)一段時間保溫后,吸入濾紙片中, 然后將濾紙片放置于上述平板中央。經(jīng)培養(yǎng)后,出現(xiàn)結(jié)果。有三種結(jié)果

①在平板上無大量菌落產(chǎn)生, 說明試樣中不含誘變劑;②在紙片周圍有一抑制圈, 其外周出現(xiàn)大量菌落, 說明試樣中有某種高濃度的誘變劑存在;③在紙片周圍長有大量菌落, 說明試樣中有濃度適當?shù)恼T變劑存在。加入鼠肝勻漿的作用：因許多化學(xué)物質(zhì)原先并非誘變劑或致癌劑,只有在進入機體并在肝臟的解毒過程中, 受到肝細胞中一些加氧酶的作用,才形成有害的環(huán)氧化物或其他激活態(tài)化合物, 故試驗中先要加入鼠肝勻漿液保溫;3.營養(yǎng)缺陷型突變株的篩選方法

①與篩選營養(yǎng)缺陷型突變株有關(guān)的 3 類培養(yǎng)基: 基本培養(yǎng)基(MM,符號為[-]):僅能滿足某微生物的野生型菌株生長所需要的最低成分的組合培養(yǎng)基,稱基本培養(yǎng)基。

完全培養(yǎng)基(CM,符號為[ + ]):凡可滿足一切營養(yǎng)缺陷型菌株營養(yǎng)需要的天然或半組合培養(yǎng)基, 稱完全培養(yǎng)基。

補充培養(yǎng)基(SM,符號為[ A]或[B]等):凡只能滿足相應(yīng)的營養(yǎng)缺陷型突變株生長需要的組合或半組合培養(yǎng)基, 稱補充培養(yǎng)基。

②與營養(yǎng)缺陷型突變有關(guān)的 3 類遺傳型個體: 野生型:指從自然界分離到的任何微生物在其發(fā)生人為營養(yǎng)缺陷突變前的原始菌株。

營養(yǎng)缺陷型:野生型菌株經(jīng)誘變劑處理后, 由于發(fā)生了喪失某酶合成能力的突變,因而只能在加有該酶合成產(chǎn)物的培養(yǎng)基中才能生長, 這類突變菌株稱為營養(yǎng)缺陷型突變株。

原養(yǎng)型:一般指營養(yǎng)缺陷型突變株經(jīng)回復(fù)突變或重組后產(chǎn)生的菌株,其營養(yǎng)要求在表型上與野生型相同。

(3)營養(yǎng)缺陷型的篩選方法 ①誘變劑處理

②淘汰野生型：通過抗生素法或者菌絲過濾法即可 ③檢出缺陷型：

夾層培養(yǎng)法: 先在培養(yǎng)皿底部倒一薄層不含菌的基本培養(yǎng)基（MM）,待凝,添加一層混有經(jīng)誘變劑處理菌液的基本培養(yǎng)基（含菌MM）,其上再澆一薄層不含菌的基本培養(yǎng)基（MM）,遂成“三明治”狀。經(jīng)培養(yǎng)后,對首次出現(xiàn)的菌落用記號筆一一標在皿底。然后, 再向皿內(nèi)倒上一薄層第四層培養(yǎng)基——完全培養(yǎng)基（CM）。再經(jīng)培養(yǎng)后,全長出形態(tài)較小的新菌落, 它們多數(shù)都是營養(yǎng)缺陷型突變株。限量補充培養(yǎng)法 逐個檢出法 影印平板法

④鑒定缺陷型:可借生長譜法進行。

第三節(jié)基因重組與雜交育種

真核微生物中的有性雜交、準性雜交、原生質(zhì)體融合以及原核生物中的轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)、接合和原生質(zhì)體融合等。

一.原核生物的基因重組

特點為: ①片段性,僅一小段DNA序列參與重組;②單向性,即從供體菌向受體菌(或從供體基因組向受體基因組)作單方向轉(zhuǎn)移;③轉(zhuǎn)移機制獨特而多樣,如接合、轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)導(dǎo)等。(一)轉(zhuǎn)化

1.定義：受體菌直接吸收供體菌的DNA片段而獲得后者部分遺傳性狀的現(xiàn)象,稱為轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)化作用。通過轉(zhuǎn)化方式而形成的雜種后代,稱轉(zhuǎn)化子。

2.感受態(tài)：凡能發(fā)生轉(zhuǎn)化, 其受體細胞必須處于感受態(tài)。感受態(tài)是指受體細胞最易接受外源 DNA 片段并能實現(xiàn)轉(zhuǎn)化的一種生理狀態(tài)。(二)轉(zhuǎn)導(dǎo) 1.定義：通過缺陷噬菌體的媒介,把供體細胞的小片段 DNA 攜帶到受體細胞中,通過交換與整合, 使后者獲得前者部分遺傳性狀的現(xiàn)象, 稱為轉(zhuǎn)導(dǎo)。

2.普遍轉(zhuǎn)導(dǎo)：通過極少數(shù)完全缺陷噬菌體對供體菌基因組上任何小片段DNA進行“誤包” , 而將其遺傳性狀傳遞給受體菌的現(xiàn)象,稱為普遍轉(zhuǎn)導(dǎo)。

3.局限轉(zhuǎn)導(dǎo)：指通過部分缺陷的溫和噬菌體把供體菌的少數(shù)特定基因攜帶到受體菌中, 并與后者的基因組整合、重組, 形成轉(zhuǎn)導(dǎo)子的現(xiàn)象。(三)接合

1.定義：供體菌(“雄性”)通過性菌毛與受體菌(“雌性”)直接接觸, 把 F 質(zhì)粒或其攜帶的不同長度的核基因組片段傳遞給后者, 使后者獲得若干新遺傳性狀的現(xiàn)象, 稱為接合。2.E.coli的4種接合型菌株

根據(jù)F質(zhì)粒在細胞內(nèi)的存在方式, 可把 E.coli 分成 4 種不同接合型菌株

(1)F+ 菌株即“雄性”菌株, 指細胞內(nèi)存在一至幾個F質(zhì)粒, 并在細胞表面著生一至幾條性菌毛的菌株。

(2)F-菌株即“雌性”菌株, 指細胞中無 F 質(zhì)粒、細胞表面也無性菌毛的菌株。它可通過與F+菌株或F’菌株的接合而接受供體菌的F質(zhì)粒或F’質(zhì)粒, 從而使自己轉(zhuǎn)變成“雄性”菌株;也可通過接合接受來自Hfr菌株的一部分或一整套核基因組 DNA(3)Hfr菌株:在Hfr菌株細胞中, 因F質(zhì)粒已從游離態(tài)轉(zhuǎn)變成在核染色體組特定位點上的整合態(tài), 故Hfr菌株與F-菌株相接合后, 發(fā)生基因重組的頻率要比單純用F+與F-接合后的頻率高出數(shù)百倍。

二.真核微生物的基因重組(一)有性雜交

有性雜交, 一般指不同遺傳型的兩性細胞間發(fā)生的接合和隨之進行的染色體重組,進而產(chǎn)生新遺傳型后代的一種育種技術(shù)。(二)準性雜交 1.定義：準性生殖是一種類似于有性生殖,但比它更為原始的兩性生殖方式, 這是一種在同種而不同菌株的體細胞間發(fā)生的融合,它可不借減數(shù)分裂而導(dǎo)致低頻率基因重組并產(chǎn)生重組子。2.準性生殖過程

(1)菌絲聯(lián)結(jié)：它發(fā)生于一些形態(tài)上沒有區(qū)別、但在遺傳型上卻有差別的同種不同菌株的體細胞(單倍體)間。發(fā)生菌絲聯(lián)結(jié)的頻率是極低的。

(2)形成異核體：兩個遺傳型有差異的體細胞經(jīng)菌絲聯(lián)結(jié)后,先發(fā)生質(zhì)配,使兩個單倍體核集中到同一細胞中, 于是形成了雙相的異核體。異核體能獨立生活。

(3)核融合：或稱核配, 指在異核體中的兩個細胞核在某種條件下,低頻率地產(chǎn)生雙倍體雜合子核的現(xiàn)象。

(4)體細胞交換和單倍體化：體細胞交換，即體細胞中染色體間的交換,也稱有絲分裂交換。3.準性雜交育種

(1)選擇親本：即選擇來自不同菌株的合適的營養(yǎng)缺陷型作為準性雜交的親本。(2)強制異合：即用人為的方法強制兩個營養(yǎng)缺陷型的親本菌株形成互補的異核體。(3)移單菌落：將平板上長出的單菌落移種到基本培養(yǎng)基[-]的斜面上。

(4)驗穩(wěn)定性：指設(shè)法檢驗獲得的菌株究竟是一種不穩(wěn)定的異核體,還是穩(wěn)定的雜合二倍體。(5)促進變異：把上述穩(wěn)定菌株所產(chǎn)生的分生孢子處理,以促使其發(fā)生染色體交換、染色體在子細胞中分配不均、染色體缺失或畸變以及發(fā)生點突變等變化,從而使分離后的雜交子代(單倍體雜合子)進一步增加新性狀變異的可能性。第四節(jié)菌種的衰退、復(fù)壯和保藏

一.菌種的衰退與復(fù)壯

衰退：是指由于自發(fā)突變的結(jié)果, 而使某物種原有一系列生物學(xué)性狀發(fā)生量變或質(zhì)變的現(xiàn)象。具體表現(xiàn)有: ①原有形態(tài)性狀變得不典型了②生長速度變慢,產(chǎn)生的孢子變少③代謝產(chǎn)物生產(chǎn)能力下降,即出現(xiàn)負變④致病菌對宿主侵染力的下降,⑤對外界不良條件包括低溫、高溫或噬菌體侵染等抵抗能力的下降等等。狹義的復(fù)壯僅是一種消極的措施，指的是在菌種已發(fā)生衰退的情況下, 通過純種分離和測定典型性狀、生產(chǎn)性能等指標,從已衰退的群體中篩選出少數(shù)尚未退化的個體, 以達到恢復(fù)原菌株固有性狀的相應(yīng)措施。

廣義的復(fù)壯則應(yīng)是一項積極的措施, 即在菌種的典型特征或生產(chǎn)性狀尚未衰退前,就經(jīng)常有意識地采取純種分離和生產(chǎn)性狀的測定工作, 以期從中選擇到自發(fā)的正變個體。(一)衰退的防止 1.控制傳代次數(shù)

2.創(chuàng)造良好的培養(yǎng)條件

3.利用不易衰退的細胞傳代 4.采用有效的菌種保藏方法(二)菌種的復(fù)壯 1.純種分離法 2.通過宿主體復(fù)壯 3.淘汰已衰退的個體 二.菌種的保藏

1.定義：通過適當?shù)姆椒ㄊ沟梦⑸锬軌蜷L期存活，并保持原種的微生物學(xué)性狀穩(wěn)定不變的一類措施。

2.原理：首先應(yīng)挑選典型菌種或典型培養(yǎng)物的優(yōu)良純種, 最好保藏它們的分生孢子、芽孢等體眠體;其次,還要創(chuàng)造一個有利于它們長期休眠的良好環(huán)境條件。3.七種常用的方法： 冰箱保藏法（斜面）冰箱保藏法（半固體）石蠟油封保藏法 甘油懸液保藏法 砂土保藏法

冷凍干燥保藏法：干燥，低溫，無氧，有保護劑 液氮超低溫保藏法：超低溫（-196℃）

各大菌種保藏單位普遍使用冷凍干燥保藏法和液氮超低溫保藏法

微生物的生態(tài)

1.土壤中微生物的數(shù)目：

盡管土壤的類型眾多, 其中各種微生物的含量變化很大, 但一般來說, 在每克耕作層土壤中,各種微生物含量之比大體有一個 10 倍系列的遞減規(guī)律: 細菌(～108)>放線菌(～107 , 孢子)>霉菌(～106 , 孢子)>酵母菌(～105)>藻類(～104)>原生動物(～103)2.微生物與生物環(huán)境間的關(guān)系：

①互生：兩種可單獨生活的生物, 當它們在一起時, 通過各自的代謝活動而有利于對方, 或偏利于一方的生活方式,稱為互生。

②共生：是指兩種生物共居在一起, 相互分工合作、相依為命, 甚至達到難分難解、合二為一的極其緊密的一種相互關(guān)系。

③寄生：一般指一種小型生物生活在另一種較大型生物的體內(nèi)(包括細胞內(nèi))或體表, 從中奪取營養(yǎng)并進行生長繁殖,同時使后者蒙受損害甚至被殺死的一種相互關(guān)系。前者稱為寄生物,后者則稱作宿主或寄主。④拮抗：指由某種生物所產(chǎn)生的特定代謝產(chǎn)物可抑制他種生物的生長發(fā)育甚至殺死它們的一種相互關(guān)系。⑤捕食：一般指一種大型的生物直接捕捉、吞食另一種小型生物以滿足其營養(yǎng)需要的相互關(guān)系。

習(xí)題：

一.填空題

1.證明核酸是遺傳物質(zhì)基礎(chǔ)的是三個經(jīng)典實驗分別是：____、____和____。2.細菌的質(zhì)粒種類很多，其中接合性質(zhì)粒如____，抗藥性質(zhì)粒如____，產(chǎn)細菌素質(zhì)粒如____，誘癌質(zhì)粒如____等。

3.常見的“三致”是指____、____和____，目前檢出某試樣是否含有三致作用的減簡便。高效的試驗是____。

4.與營養(yǎng)缺陷突變有關(guān)的三類培養(yǎng)基是____、____和____。其符號分別是____，____和____。5.檢出營養(yǎng)缺陷型一般有四種方法：____，____，____和____。

6.艾姆斯試驗中用的菌株是____的____缺陷型菌株，通過____突變可以測定待測樣品中“三致”物質(zhì)的存在。

7.普遍轉(zhuǎn)導(dǎo)與局限轉(zhuǎn)導(dǎo)的區(qū)別在于：①普遍轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體是____噬菌體，而局限轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體是____噬菌體。②普遍轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體能夠轉(zhuǎn)移供體菌的____基因，而局限轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體只能轉(zhuǎn)移供體菌的____基因。

8.在大腸桿菌接合過程中，有四種獨特的菌株參與，他們是____、____、____和____。9.目前國際上代表性菌種保藏機構(gòu)如美國的ATCC僅使用兩種保藏方法，即____和____。二.判斷題

1.原養(yǎng)型是野生型的別稱，兩者不僅表型相同，而且遺傳型也一致。2.受體細胞實現(xiàn)DNA轉(zhuǎn)化，必須先出現(xiàn)感受態(tài)。

3.5-尿溴吡啶是以堿基是以堿基顛換的方式引起基因突變的。

4.微生物菌種退化的問題在工業(yè)生產(chǎn)中有時會遇到，一旦菌種退化，生產(chǎn)效率下降，更重要的是：退化菌種群體中再也找不到生產(chǎn)能力正常的細胞。

5.準性雜交中能夠?qū)е碌皖l率的基因重組是因為這些真菌的雜合二倍體細胞在進行減數(shù)分裂時，同源染色體進行配對而發(fā)生染色體之間交換的結(jié)果。

6.在篩選營養(yǎng)缺陷型時，在完全培養(yǎng)基中加入青霉素，可以有效殺死大量生長繁殖的野生型菌株，從而達到濃縮營養(yǎng)缺陷型的作用。7.普遍轉(zhuǎn)導(dǎo)可將供體菌的任何基因轉(zhuǎn)導(dǎo)，故可使受體菌成為獲得全套供體菌基因組的轉(zhuǎn)導(dǎo)子。8.轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)導(dǎo)都不需要供體菌和受體菌的完整細胞直接接觸而進行的。

9、當大腸桿菌的F+和F-菌株發(fā)生結(jié)合時，F(xiàn)因子由供體菌進入受體菌，從而使原F+變成了 F-，而原F-變成了F+。

10.粘質(zhì)沙雷氏菌在25℃下形成血紅色菌落，但置于37℃下則形成無色菌落，這說明該菌種發(fā)生了衰退。

11.C+G%值差別越遠的兩種生物，其親緣關(guān)系必然十分疏遠。12.親緣關(guān)系越近的微生物，其堿基序列也越接近，故核酸分子雜交的同源性百分值就越高。13.微生物的數(shù)值分類法實際上是一種利用計算機進行的統(tǒng)計分類方法。三.選擇題

1.2μm質(zhì)粒存在于（）中 A.草履蟲 B.釀酒酵母 C.大腸桿菌 D.粗糙脈胞菌

2.某微生物經(jīng)誘變后，其DNA鏈上的A變成G,這種突變屬于（）A.轉(zhuǎn)換 B.顛換 C.移碼 D.轉(zhuǎn)座 3.最易引起移碼突變的誘變劑是（）A.亞硝酸 B.烷化劑 C.5-尿溴吡啶

D.吖啶類染料

4.有一種檢出營養(yǎng)缺陷型的夾層培養(yǎng)法，要在培養(yǎng)基中先加入3薄層片培養(yǎng)基，經(jīng)過培養(yǎng)后再倒入第4層培養(yǎng)基，這四層加入的順序是（）A.MM+含菌MM+SM+CM B.MM+含菌MM+MM+CM C.MM+含菌MM+MM+SM D.MM+含菌MM+CM+SM 5.有一種簡便的，快速的鑒定營養(yǎng)缺陷型的方法是（）A.青霉素法 B.夾層平板法 C.影印平板法 D.生長譜法

6.必須經(jīng)過兩性細胞如何而完成的高頻率基因重組并產(chǎn)生雜種子代的雜交方法，稱為（）A.準性雜交 B.接合 C.有性雜交 D.轉(zhuǎn)導(dǎo)

7.發(fā)生低頻率的染色體重組并產(chǎn)生雜種子代的方式，稱為（）A.準性雜交 B.接合 C.有性雜交 D.轉(zhuǎn)導(dǎo)

8.供體細胞和受體細胞通過缺陷噬菌體作為媒介，從供體細胞傳遞部分染色體至受體細胞的現(xiàn)象，稱為（）

A.接合 B.轉(zhuǎn)化 C.轉(zhuǎn)導(dǎo) D.性導(dǎo)

9.供體菌的游離DNA不通過細胞間的接觸直接進入受體菌并實現(xiàn)部分染色體遺傳重組的現(xiàn)象，稱為（）

A.接合 B.轉(zhuǎn)化 C.轉(zhuǎn)導(dǎo) D.轉(zhuǎn)染

10.白喉棒桿菌被β噬菌體溶源化后，稱為產(chǎn)毒株，此即（）A.轉(zhuǎn)化 B.轉(zhuǎn)導(dǎo) C.轉(zhuǎn)染 D.溶原性轉(zhuǎn)變

11.在細菌接合實驗中，不同菌株接合后的使受體菌獲得較多供體菌性狀的配對是（）A.F+和F-B.F和F-C.F+和Hfr D.Hfr和F-12.對于低溫保藏菌種來說，以下四種溫度中以（）為最好 A.0℃ B.-20℃

C.-70℃

D.-196℃ 13.人體正常菌群與人類的關(guān)系屬于（）A.互生 B.共生 C.寄生 D.拮抗

14.下列微生物中，有一種非但不是條件致病菌，而且還可以制成優(yōu)良益生菌制劑的是（）A.大腸桿菌

B.脆弱擬桿菌 C.白色假絲酵母

D.嗜酸乳桿菌 四.問答題

1.簡述微生物遺傳育種中常用的方法。2.微生物污染食品的途徑有哪些？

3.菌種保藏原理是什么？簡要介紹三種常用的方法？

第二篇：微生物總結(jié)

第一章、緒論

巴斯得的貢獻：

1、徹底否定了“自生說”

2、免疫學(xué)—預(yù)防接種

3、證實發(fā)酵是由微生物引起的3、巴斯德消毒法

柯赫貢獻：

1、證實炭疽病菌是炭疽病的病原菌

2、發(fā)現(xiàn)了肺結(jié)核病的病原菌

3、提出了證明某種微生物是否為某種疾病病原體的病原菌——柯赫原則

4、固體培養(yǎng)基分離純化微生物的技術(shù)

5、配制培養(yǎng)基

微生物的5大共性：

1、體積小、面積大

2、吸收多、轉(zhuǎn)化快

3生長旺、繁殖快

4、分布廣、種類多

5、適應(yīng)性強、易變異 第二章、微生物的純培養(yǎng)和顯微技術(shù)

一、涂布平板法作用：用于純種分離、篩選菌落、得到單菌落，對一些細菌進行計數(shù) 五區(qū)劃線發(fā)作用：純化菌種、得到單菌落

搖瓶實驗作用：菌種篩選、發(fā)酵實驗、種子培養(yǎng)等 穿刺法的作用：保藏厭氧菌種、研究微生物的動力 之字劃線法的作用：保藏菌種、單菌落的獲取

二、斜面菌種保藏法：保藏期限3個月以內(nèi)，沙土管保藏法：保藏期限1~10年主要適用于產(chǎn)孢子的，如芽孢桿菌、放線菌 石蠟油封藏法：保藏期限1~2年

真空冷凍干燥法：保藏期限5~10年，液氮超低溫病結(jié)法：保藏期限5~10年 第三章

一、細胞壁：根據(jù)細胞壁將原核生物分為革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌兩種。

1、革蘭氏陽性菌細胞壁的特點：厚度大（20~80nm）和化學(xué)組分簡單，一般只含90%肽聚糖和10%磷壁酸。

革蘭氏陽性菌的機械阻攔與保護作用有肽聚糖完成。磷壁酸：是結(jié)合在革蘭氏陽性菌細胞壁上的一種酸性多糖，主要成分為甘油磷酸或核糖醇磷酸。

磷壁酸為革蘭氏陽性菌所特有。對于革蘭氏陽性菌而言，抗原性由磷壁酸完成。磷壁酸的主要生理功能：1）、其磷酸分子上較多的負電荷可提高細胞周圍鎂離子的濃度進入細胞后就可以保證細胞膜上一些需鎂離子的合成提高活性 2）儲藏磷元素 3）、增強某些致病菌如A族鏈球菌對宿主細胞的黏連、避免被白細胞吞噬以及補抗體的作用 4）賦予革蘭氏陽性菌以特異的表面抗原 5）可作為噬菌體的特異性吸附受體

6）調(diào)節(jié)細胞自溶素的活力，借以防止細胞自溶而死亡

2、革蘭氏陰性菌：由肽聚糖和外膜組成，外膜中的脂多糖是革蘭氏陰性菌所特有的 外壁層可分為3層：外層為脂多糖層，中層為磷脂層，內(nèi)層為脂蛋白 革蘭氏陰性菌外膜的作用：1）控制細胞透性

2）提高鎂離子濃度 3）決定細胞的抗原性

4）類脂A是類毒素的主要成分

脂多糖：是位于革蘭氏陰性菌細胞壁最外層的一層較厚的類脂多糖物質(zhì)，由類脂A、核心多糖和O-特異側(cè)鏈

脂多糖的功能：1）其中類脂A是革蘭氏陰性菌致病物質(zhì)——內(nèi)毒素的物質(zhì)基礎(chǔ) 2）因其負電荷較強，有吸附鎂離子、鈣離子等陽離子以提高其在細胞表面的濃度作用 3)由于LPS結(jié)構(gòu)多變，決定了革蘭氏陰性菌細胞表面抗原決定族 4）是許多噬菌體在在細胞表面的吸附受體 5）具有控制某些物質(zhì)進出細胞的部分選擇性屏障功能

3、革蘭氏染色機制：通過結(jié)晶紫初染和碘液媒染后，在細胞膜內(nèi)形成了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物。革蘭氏陽性菌由于其細胞壁較厚，肽聚糖網(wǎng)層次多和交聯(lián)致密，故與乙醇與丙酮作脫色處理時因失水反而使網(wǎng)孔縮小，再加上它不含類脂，故乙醇處理不會溶出縫隙，因此能把結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物牢牢留在壁內(nèi)，使其任呈紫色。反之革蘭氏陰性菌因其細胞壁薄、外膜層的類脂含量高、肽聚糖層薄和交聯(lián)度差，遇脫色劑后，以類脂為主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖網(wǎng)不能阻擋結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物的溶出，因此，通過乙醇脫色后細胞退成無色。這時，再經(jīng)沙黃等紅色染料進行復(fù)染，就使革蘭氏陰性菌呈現(xiàn)紅色，而革蘭氏陽性則保留紫色。

二、芽孢

芽孢：某些細胞在生長發(fā)育后期，在細胞內(nèi)形成一個圓形或橢圓形、厚壁、含水量極低、抗逆性極強的休眠體

芽孢的特點：1）芽孢內(nèi)新陳代謝幾乎停止，處于休眠狀態(tài)，但保持潛在萌發(fā)力

2）芽孢不具生殖能力，僅只是一種休眠體 3）抗逆性最強的生命體之一，有抗熱、抗化學(xué)藥物、抗輻射和抗靜水壓能力 4）含水量低，壁厚而致密，通透性差，不易著色，折光性強

5）一個孢子萌發(fā)只產(chǎn)生一個營養(yǎng)狀態(tài)的細胞 芽孢的耐熱機制：芽孢的耐熱性在于芽孢衣對多價陽離子和水分的透性很差和皮層的離子強度很高，從而是皮層產(chǎn)生極高的滲透壓去奪取芽孢核心中的水分，其結(jié)果造成皮層的充分膨脹，而核心部分的細胞質(zhì)卻變得高度失水，因此，導(dǎo)致核心具極強的耐熱性。第四章微生物的營養(yǎng)要求

一、營養(yǎng)物質(zhì)：能夠滿足微生物機體生長、繁殖和完成各種生理條件所需的物質(zhì) 營養(yǎng)：微生物獲得U和利用營養(yǎng)物質(zhì)的過程

二、1、碳源：是在微生物生長過程中為微生物提供碳素來源的物質(zhì)。為微生物提供碳元素與能量

2、氮源：為微生物提供氮元素來源，只有少數(shù)自養(yǎng)微生物能利用銨鹽、硝酸鹽同時作為氮源與能源（是構(gòu)成細胞中核酸和蛋白質(zhì)的重要元素）氮源的類型：無機氮、有機氮、氣體氮

3、無機鹽：作用：作為酶活性中心的組成部分、維持生物大分子和細胞結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性、調(diào)節(jié)并維持細胞的滲透壓、控制細胞的氧化還原電位和作為某些微生物生長的能源物質(zhì)。

4、生長因子：通常是指那些微生物生長所必需的的且需量很少，但微生物自身不能合成或合成量不足以滿足機體生長需要的有機化合物

5、水：生理功能：1)起到溶劑與運輸介質(zhì)的作用

2）參與細胞內(nèi)一系列的化學(xué)反應(yīng)

3）維持蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子穩(wěn)定的天然構(gòu)象

4）是良好的導(dǎo)熱體，調(diào)節(jié)細胞溫度 微生物的營養(yǎng)類型分類（P84表格）

三、1、培養(yǎng)基的配制原則：1）目標明確

2）營養(yǎng)協(xié)調(diào)

3）物理化學(xué)條件適宜

4）原料來源的選擇

2、C多有助于次生物質(zhì)分泌，N多有助于個體生長發(fā)育

3、PH：細菌：7.0~8.0

酵母菌：4.0~6.0

放線菌：8.0~9.0

霉菌：4.0~5.8

4、維持培養(yǎng)基PH的方法：1）加緩沖劑一氫和二氫磷酸鹽的混合物

2）備用堿：CaCO3、CaHCO3 3）弱酸鹽：檸檬酸鹽、乳酸鹽

4）液氨或鹽酸

5、原料來源：1）經(jīng)濟節(jié)約原則：以粗代精、以廢代好、以簡代繁

2）原料來源要廣泛

3）原料藥易處理、處理成本要低

4）原料處理后廢物、廢液、廢氣要少

6、選擇和配制培養(yǎng)基的方法四種：生態(tài)模擬、查閱文獻、精心設(shè)計、實驗比較

四、培養(yǎng)基的分類

1、按成分不同劃分：天然培養(yǎng)基：優(yōu)點為取材方便，營養(yǎng)豐富，種了多樣，配制方便合成培養(yǎng)基：優(yōu)點：組分精確，重復(fù)性好確定：較昂貴，一般用于研究

2、根據(jù)物料狀態(tài)劃分：固體培養(yǎng)基：一般用于進行微生物的分離、鑒定、活菌計數(shù)及菌種保藏半固體培養(yǎng)基：用于觀察微生物的運動特征、分類鑒定及噬菌體效價滴定液體培養(yǎng)基：用于大量培養(yǎng)微生物，研究生理代謝

3、按用途劃分：基礎(chǔ)培養(yǎng)基：用于培養(yǎng)野生型微生物和原養(yǎng)型微生物 加富培養(yǎng)基（營養(yǎng)培養(yǎng)基）：在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入某些特殊營養(yǎng)物質(zhì)制成的一類營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基作用一般為分離某種微生物而專門設(shè)計或培養(yǎng)營養(yǎng)要求嚴謹?shù)漠悩游⑸?鑒別培養(yǎng)基：在培養(yǎng)可中加入某種特殊化學(xué)物質(zhì) 選擇培養(yǎng)基：根據(jù)不同種類微生物的特殊營養(yǎng)需求或?qū)δ撤N化學(xué)物質(zhì)的敏感性不同，在培養(yǎng)基中加入相應(yīng)的特殊營養(yǎng)物質(zhì)或化學(xué)物質(zhì)，抑制不需要的微生物的生長，有利于所需要微生物的生長，有利于所需微生物的生長 第五章、微生物代謝

微生物發(fā)酵過程的三個階段：脫氫（電子）、遞氫（或電子）和受氫（或電子）發(fā)酵：是指微生物細胞將有機物氧化釋放的電子直接交給底物本身未完全氧化的某些中間產(chǎn)物，同時釋放能量并產(chǎn)生各種不同的代謝產(chǎn)物

代謝：生命存在的基本特征，是微生物體內(nèi)所進行的全部生化反應(yīng)的總稱。主要由分解代謝和合成代謝兩個過程組成。分解代謝：是指將大分子物質(zhì)降解成小分子物質(zhì)，并在這個過程中產(chǎn)生能量（都是氧化反應(yīng)）合成代謝：是指細胞利用簡單的小分子物質(zhì)合成復(fù)雜大分子，在這個過程要消耗能量（都是還原反應(yīng)）

代謝途徑都是有一系列連續(xù)的酶促反應(yīng)構(gòu)成的

P102~P105EMP HM ED途徑的特點功能以及途徑路線

根據(jù)氧化還原反應(yīng)電子受體的不同可將發(fā)酵和呼吸分為有氧和無氧呼吸兩種 P108 TCA途徑圖

TCA循環(huán)特點：1）氧雖然不直接參與其中反應(yīng)，但必需在有氧條件下運行

2）每個丙酮酸產(chǎn)生15個ATP 3）位于一切分解代謝與合成代謝的樞紐地位，可為生物合成提供各種碳價原料

TCA的生理意義：1）為細胞提供能量

2）各種能源物質(zhì)徹底氧化的共同代謝途徑（對于微生物來說）3）物質(zhì)轉(zhuǎn)化樞紐

無氧呼吸：電子受體不是氧氣而是外源無機物與部分簡單小分子有機物

發(fā)酵作用：沒有外源電子受體，底物具有的能量只釋放一小部分，合成少量ATP 三種磷酸化：底物水平磷酸化，高能磷酸化，氧化磷酸化

光合磷酸化的特點：1）光驅(qū)使下電子自菌綠素上逐出后經(jīng)類似呼吸鏈又回到菌綠素

2）產(chǎn)還原力[H]和產(chǎn)ATP分別進行，還原力來自于H2O等無機物

3）不產(chǎn)生氧氣 合成代謝：微生物利用能量代謝所產(chǎn)生的能量、中間代謝產(chǎn)物以及從外界吸收的小分子合成復(fù)雜細胞物質(zhì)的過程

P118~P119 CO2固定路線圖

藍細菌孤單的抗氧化保護機制：1）分化出特殊的還原性異形胞

2）非異形胞藍細菌固氮酶的保護將固氮與光合進行時間上分隔

微生物固氮反應(yīng)6要素：1）ATP的供應(yīng)

2)還原力[H]及傳遞氫載體

3）固氮酶

4）還原底物——氮氣

5）鎂離子

6）嚴格厭氧微環(huán)境

聯(lián)合固氮菌：指必需生活在植物根莖葉，動物腸道等處才能進行固氮的微生物，不形成類似根瘤的共生結(jié)構(gòu) 微生物的代謝調(diào)節(jié)主要有兩種類型：一是酶活性的調(diào)節(jié)，即調(diào)節(jié)已經(jīng)存在的酶分子的活性，是酶在化學(xué)水平的變化。另一類是酶合成的調(diào)節(jié)，即調(diào)節(jié)酶分子的合成量，是遺傳水平發(fā)生的變化 第六章

一、生長曲線延滯期

特點：1）生長速率常數(shù)為零，細胞數(shù)目不增加或增加很小

2）細胞形態(tài)變大或 增長許多桿菌可長成絲狀

3）合成代謝十分活躍，核糖體、酶類和ATP 的合成加速產(chǎn)生各種誘導(dǎo)酶

4）對外界不良條件如NaCl溶液，溫度和抗 生素等理化因素反應(yīng)敏感

出現(xiàn)原因：1）微生物接種到一個新的環(huán)境，暫缺乏足夠的能量和必需的生長因子

2）“種子”老化即處于未對數(shù)期或種子未活化

3）接種時損傷

影響其長短的因素與實踐意義：1）接種齡：對數(shù)期種子延滯期短，延滯期或衰亡期的種子延滯期較長

2）接種量：接種量大，延滯期較短，接種量小，延滯期較長

3）培養(yǎng)基成分：培養(yǎng)基成分豐富的延滯期較短，培養(yǎng)基成分與種子培養(yǎng)基一致的延滯期較短

二、生長曲線指數(shù)期

特點：1）生長速率最快，細胞呈指數(shù)增長

2）生長速率恒定

3）代謝旺盛，細胞組分平衡發(fā)展

4）群體的生理特性一致

影響指數(shù)期的意義：1）菌種：不同菌種代時差異極大

2）營養(yǎng)成分：營養(yǎng)越豐富代時越短

3）營養(yǎng)物濃度：影響微生物的生長速率和生長總量

4）培養(yǎng)溫度：影響微生物的生長速率和生長總量

指數(shù)期的實踐意義：1）是代謝、生理研究的良好材料

2)是增殖噬菌體的最適宿主菌齡

4）革蘭氏染色是采用此期微生物

生長曲線穩(wěn)定期特點：1）活細胞總數(shù)維持不變即新增殖的細胞數(shù)與衰亡的細胞數(shù)相等，菌體總數(shù)達到最高點

2）細胞生長速率為零

3）細胞生理上處于衰老，代謝活力鈍化，細胞成分合成緩慢，革蘭氏染色發(fā)生變化

三、生長曲線衰亡期

特點：細胞以指數(shù)速率死亡，有時細胞速率的降低是由于抗性細胞的積累，細胞變形退化，有的發(fā)生自溶，革蘭氏染色發(fā)生變化

影響衰亡期的因素及實踐意義：1）與菌種的遺傳特性有關(guān)：有些細菌的培養(yǎng)經(jīng)歷所有的各個生長時期，幾天以后死亡，有細菌培養(yǎng)基個月乃至幾年以后任然有一些貨細胞

2）與是否產(chǎn)芽孢有關(guān)：產(chǎn)芽孢的細菌更易幸存下來

3）與營養(yǎng)物質(zhì)和有毒物質(zhì)有關(guān)：補充營養(yǎng)和能源，以及中和環(huán)境毒性，可以減緩死亡細胞的死亡速率，延長細菌培養(yǎng)物的存貨時間

四、分批培養(yǎng)：是指將微生物置于一定容積的的培養(yǎng)基中，經(jīng)過生長培養(yǎng)，最后一次收獲培養(yǎng)方式 連續(xù)培養(yǎng)：在一個恒定容積的的流動系統(tǒng)中培養(yǎng)微生物，一方面以一定速率加入新的培養(yǎng)基，另一方面又以相同的速率流出培養(yǎng)物（菌體和代謝產(chǎn)物）

連續(xù)發(fā)酵的優(yōu)點：1）高效

2）產(chǎn)品質(zhì)量較穩(wěn)定

3）節(jié)約了大量動力、人力、水和蒸汽，且使水、汽、電的負荷均衡合理

連續(xù)發(fā)酵的缺點：1）菌種易退化

2）易污染雜菌 3）營養(yǎng)物質(zhì)的利用率一般 同步生長：就是指在培養(yǎng)物中所有微生物細胞都同一生長階段，并都能同時分裂的生長方式 同步培養(yǎng)法包括誘導(dǎo)法與選擇法

誘導(dǎo)法：是采用物理、化學(xué)一男子使微生物生長到某一階段而停下來，使所有細菌都達到這個階段時再使其生長 恒濁器：根據(jù)培養(yǎng)器內(nèi)微生物的生長密度并借光電控制系統(tǒng)來控制培養(yǎng)液流速，以取得菌體密度高，生長速度恒定的微生物細胞的連續(xù)培養(yǎng)

恒化器：與恒濁器相反，是一種設(shè)法使培養(yǎng)液流速保持不變 最高生長速率條件下進行生長繁殖的一種連續(xù)培養(yǎng)裝置 裝置

控制對象

培養(yǎng)基

培養(yǎng)基流速

生長速率

產(chǎn)物

應(yīng)用范圍

恒濁器

菌體密度(內(nèi)控制)

無限制生長因子

不恒定

最高速率

大量菌體或與菌體平行的代謝產(chǎn)物

生產(chǎn)為主

恒化器

培養(yǎng)基流速（外控制）

有限制生長因子

恒定

低于最高速率

不同生長速率的菌體、并使微生物始終在低于其

實驗室為主

五、防腐：是在某些化學(xué)物質(zhì)或物理因子作用下防止或抑制微生物生長的一種措施，它能防止食物腐敗或防止其他物質(zhì)霉變 消毒：利用某種殺死或滅活物質(zhì)或物體中所有微生物的一種措施，它可以起到防止感染或傳播的作用

滅菌：利用某種方法殺死物體中包括芽孢在內(nèi)的所有微生物的一種措施 第七章

1、病毒的特點:1)形態(tài)及其微小，一般能通過細菌濾器必須自電鏡下才能觀察

2）沒有細胞構(gòu)造，主要成分僅為核酸與蛋白質(zhì)

3）每一種病毒致含有一種核酸

DNA和RNA 4）依靠自身的核酸進行復(fù)制，一病毒的核酸和蛋白質(zhì)等原件實現(xiàn)裝配，實現(xiàn)繁殖

5）嚴格細胞內(nèi)寄生，缺乏完整的酶和產(chǎn)能系統(tǒng)，只能利用宿主細胞的現(xiàn)成的代謝系統(tǒng)合成病毒自身的核酸和蛋白質(zhì)

6）在離體條件下，能以無生命力的大分子狀態(tài)存在，并可長期保持器侵染力

7）對一般抗生素不敏感，但對干擾素敏感

8）有些病毒的基因可以整合到宿主的基因中去

2、病毒與活細胞的區(qū)別：1）結(jié)構(gòu)簡單，沒有細胞結(jié)構(gòu)

2）幾乎所有的毒粒中只有DNA或RNA一種類型的核酸

3）在細胞外不能增殖

3、得到一步生長曲線的實驗：二院培養(yǎng)系統(tǒng)：1）低濃度病毒宿主細胞(給幾分鐘時間侵染)2）高倍稀釋病毒與細胞的培養(yǎng)物

3）保濕培養(yǎng)

4）不同時間取樣，涂布平板，得到效價

5）以時間為橫坐標，病毒濃度為縱坐標繪圖

4、烈性噬菌體：感染宿主后增殖裂解宿主 溶原性噬菌體（溫和性細菌）：感染后大多數(shù)可整合到宿主基因中少數(shù)以染色體外獨立存在

5、病毒分為真病毒和亞病毒，亞病毒又分為類病毒、衛(wèi)星病毒、衛(wèi)星RNA、朊病毒 類病毒：是一種只包含RNA的病毒，只在植物中出現(xiàn)，分質(zhì)量極小，不能編碼蛋白質(zhì) 衛(wèi)星病毒：寄生于與之無關(guān)的輔助病毒的基因產(chǎn)物的病毒 衛(wèi)星RNA：是指必需依賴一些輔助病毒進行復(fù)制的小分子單鏈RNA，他們被包藏在輔助病毒的殼體中

朊病毒：是一類能引起哺乳動物亞急性海綿樣腦病的病原因子 第八章

P204頁Griffith轉(zhuǎn)化實驗等3個實驗

基因組：是指位于細菌或細胞中的所有基因 大腸桿菌基因組的特點：1）遺傳信息的連續(xù)性

2）功能相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因組成操縱子結(jié)構(gòu)

3）結(jié)構(gòu)基因的單拷貝及rRNA基因的多拷貝

4）基因組重復(fù)序列少而短

質(zhì)粒：是一種獨立于染色體外，能進行自主復(fù)制的細胞質(zhì)遺傳因子，主要存在于各種微生物中

轉(zhuǎn)座子：是位于染色體或質(zhì)粒上的一種能改變自身位置的DNA序列，廣泛分布于原核和真核細胞中

質(zhì)粒的主要類型：致育因子、抗性因子、Col質(zhì)粒、毒性質(zhì)粒、代謝質(zhì)粒、隱秘質(zhì)粒

致育因子：又稱F質(zhì)粒，其大小約100kb，這是最早發(fā)現(xiàn)的一種與大腸桿菌的有性生殖現(xiàn)象（結(jié)合作用）有關(guān)的質(zhì)粒

抗性因子：是另一類普遍而重要的質(zhì)粒，主要包括抗藥性和抗重金屬兩大類，簡稱R質(zhì)粒 Col質(zhì)粒：該質(zhì)粒含有編碼大腸菌素的基因，大腸菌素是一種細菌蛋白，只殺死近緣且不含Col質(zhì)粒的菌株，而宿主不受其產(chǎn)生的細菌素的影響

毒性質(zhì)粒：致病菌中攜帶的能引起致病性的質(zhì)粒，這些質(zhì)粒具有編碼毒素的基因 代謝質(zhì)粒：攜帶有能降解某些基質(zhì)的酶的基因的質(zhì)粒

隱秘質(zhì)粒：不顯示任何表型效應(yīng)，它們的存在只有通過物理方法檢測出來 原核生物中對的轉(zhuǎn)座因子有3種類型：插入順序（IS）、轉(zhuǎn)座子（Tn）、病毒（Mu）轉(zhuǎn)座的遺傳學(xué)效應(yīng)：插入突變、產(chǎn)生染色體畸變、基因的移動和重排

基因突變：一個基因內(nèi)部遺傳結(jié)構(gòu)或DNA序列的任何改變包括一對或幾對堿基的缺失、插入或置換，而導(dǎo)致的遺傳變化

堿基變化對遺傳信息改變的四種類型：同義突變，錯義突變，無義突變，移碼突變 同義突變：是指某個堿基的變化沒有改變產(chǎn)物氨基酸序列的密碼子變化

錯義突變：是指堿基序列的改變引起了產(chǎn)物氨基酸的改變（可能為致死突變）無義突變：是指某個堿基的改變，使代表某種氨基酸的密碼子變?yōu)榈鞍踪|(zhì)的合成的終止密碼子，蛋白質(zhì)的合成提前終止，產(chǎn)生短截的蛋白質(zhì)

移碼突變：由于DNA序列中發(fā)生1~2個核苷酸的缺失或插入，使翻譯的閱讀框發(fā)生改變，從而導(dǎo)致改變位置以后的氨基酸序列的完全變化（一般為致死突變）

表型變化的突變型：營養(yǎng)缺陷型，抗藥性突變型，條件致死突變型，形態(tài)突變型 營養(yǎng)缺陷型：缺乏合成其生存所必需的營養(yǎng)物的突變型，只有從周圍環(huán)境或培養(yǎng)基中獲得這些營養(yǎng)或前體物才能生長 影印平板P218 抗藥性突變型：是由于基因突變使菌株對某種或某幾種藥物，特別是抗生素產(chǎn)生抗性的一種突變型

條件致死突變型：是指在某一條件下具有致死效應(yīng)，而在另一條件下沒有致死效應(yīng)的突變型 形態(tài)突變型：是指造成形態(tài)改變的突變型（包括菌落形態(tài)、顏色一件噬菌斑形態(tài)）

自發(fā)突變的緣由：1）NDA復(fù)制過程產(chǎn)生的錯誤

2）堿基互變異構(gòu)體的相互轉(zhuǎn)變

3）轉(zhuǎn)座子的隨機插入基因

自發(fā)突變的特性：1）非對應(yīng)性

2）稀有性

3）規(guī)律性

4）獨立性

5）遺傳和回復(fù)

6）可誘變性

誘發(fā)突變：堿基類似物、插入染料、直接與DNA其化學(xué)反應(yīng)的誘變劑、輻射和熱、生物誘變因子

DNA損傷修復(fù)：光復(fù)活作用、切除修復(fù)、重組修復(fù)、SOS修復(fù) 光復(fù)活：由phr基因編碼的光解酶進行

切除修復(fù)：又稱暗修復(fù)，該修復(fù)系統(tǒng)除了堿基錯誤配對和單核苷酸插入不能修復(fù)外，幾乎其他DNA損傷均可修復(fù)，是細胞內(nèi)主要修復(fù)系統(tǒng)

重組修復(fù)：是一種越過損傷而進行的修復(fù)，這種修復(fù)不將損傷堿基除去

SOS修復(fù)：是DNA分子受到較大范圍的重大損傷時誘導(dǎo)產(chǎn)生的一種應(yīng)急反應(yīng) P226~227 高頻重組菌等

轉(zhuǎn)導(dǎo)：是由病毒介導(dǎo)的細胞間進行遺傳交換的一種方式

供體DNA進入受體的命運：1）發(fā)生穩(wěn)定的轉(zhuǎn)導(dǎo)子

2）流產(chǎn)轉(zhuǎn)導(dǎo)：即不被降解，又不被整合，也不被復(fù)制

3）外源DNA被降解，轉(zhuǎn)導(dǎo)失敗

遺傳轉(zhuǎn)化：是指同源或異源的游離DNA分子被自然或人工感受態(tài)細胞攝取，并得到表達的水平方向的基因轉(zhuǎn)移過程

4個影響供體DNA與受體細胞間的最初相互作用：1）轉(zhuǎn)化片段的大小

2）形態(tài)：雙鏈DNA 3）濃度：在在臨界值出現(xiàn)之前成正比

4）生理狀態(tài)：感受器——剛停止DNA合成 微生物育種：誘變育種、代謝育種、體內(nèi)基因組育種 代謝育種：改變代謝途徑、擴展代謝途徑、構(gòu)建新的代謝途徑 體內(nèi)基因組育種：原生質(zhì)體融合，雜交育種

融合子的判別：1）親本遺傳標記的互補的2）親本滅活后性狀的恢復(fù)

3）具有雙親本的熒光標記 第九章

順式作用元件：位于基因的旁側(cè)，可以調(diào)控影響基因表達的核酸序列。其本身并不編碼蛋白質(zhì)

反式作用因子：通常為蛋白質(zhì)或RNA，其特征是可以合成并擴散到目標場所發(fā)揮作用 正調(diào)控：控制因子通過與啟動子原件結(jié)合來激活基因的表達 負調(diào)控：抑制物與操縱基因結(jié)合起來阻止基因表達 P248 操縱子的結(jié)構(gòu)

P249圖

P250 圖

啟動子：是RNA聚合酶和CAP的結(jié)合位點，控制著轉(zhuǎn)錄的起始，一個啟動子可以啟動多個基因的表達

操縱基因：DNA上的一個結(jié)合位點，阻抑物能與之結(jié)合抑制相鄰啟動子的起始轉(zhuǎn)錄，操縱基因不表達任何東西 終止子：控制轉(zhuǎn)錄結(jié)束

轉(zhuǎn)錄因子：轉(zhuǎn)錄起始過程中RNA聚合酶所需要的輔助因子

轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控:1）DNA的結(jié)構(gòu)

2）RNA聚合酶的功能

3）蛋白質(zhì)因子及其他小分子配基的相互作用

第三篇：微生物總結(jié)

微生物：一類分布廣泛、體積微小、結(jié)構(gòu)簡單、肉眼直接看不到，微小生物的總稱。

細菌L型：細菌細胞壁的肽聚糖結(jié)構(gòu)受理化或生物因素直接破壞或合成被抑制，這種細胞壁受損的細菌在高滲環(huán)境下仍可存活，稱細菌細胞壁缺陷型或L型。

質(zhì)粒：是染色體外的遺傳物質(zhì)，控制某些特定的生物學(xué)性狀，不是細菌生長所必需。

莢膜：是細菌合成分泌的包繞于細胞壁外的一層粘液性物質(zhì)。界限清晰性質(zhì)穩(wěn)定結(jié)合牢固。培養(yǎng)基：由人工方法經(jīng)滅菌后制成，專供微生物生長使用的混合營養(yǎng)制品。一般pH為7.2-7.6。

兼性厭氧菌：兼有需氧呼吸和無氧發(fā)酵兩種功能，無論在有氧或無氧環(huán)境中都能生長，但以有氧時生長較好，大多數(shù)病原菌屬于此。菌落：在固體培養(yǎng)基中，經(jīng)過十八到24小時培養(yǎng)后，單個細菌分裂繁殖成一堆肉眼可見的細紅細胞吸附：流感病毒等感染細胞后，由于細胞膜上出現(xiàn)了血凝素（HA），具有吸附脊椎動物紅細胞的能力，這一現(xiàn)象稱為紅細胞吸附。抗毒素：通常是用細菌類毒素給馬多次注射后，取其免疫血清提取免疫球蛋白精制而成抗生素：微生物來源的抗菌藥物，以及人工化學(xué)修飾或半合成的衍生物

無菌：就是指沒有活菌的意思。

1：細胞壁結(jié)構(gòu)、化學(xué)組成及功能？答：化學(xué)組成：G+①肽聚糖：聚糖骨架、四肽側(cè)鏈、五肽交聯(lián)橋②磷壁酸：粘附功能，與致病性有關(guān)；抗原性很強③其他成分：如A群鏈球菌的M蛋白G-①肽聚糖：聚糖骨架；四肽側(cè)鏈②外膜：脂蛋白；脂質(zhì)雙層；脂多糖：脂類A（毒性成分，無種屬特異性）；核心多糖；特異多糖。功能：①維持細菌固有形態(tài)②保護細菌抵抗低滲環(huán)境③物質(zhì)交換④決定菌體的抗原性。2：G-菌與G+菌細胞壁的異同點及其意義？答：兼性厭氧菌、專性厭氧菌。

11：與醫(yī)學(xué)有關(guān)的合成代謝產(chǎn)物？答：① 毒素與侵襲性酶：外毒素和內(nèi)毒素②熱原質(zhì)：G-菌細胞壁的脂多糖，耐高溫，250℃干烤破壞。③抗生素：某些微生物代謝中產(chǎn)生的一類能抑制或殺死其他微生物或腫瘤細胞的物質(zhì)。④維生素：如VitK、B族維生素。⑤色素：脂溶性和水溶性色素。⑥細菌素：無治療應(yīng)用價值。13：病毒的形態(tài)、結(jié)構(gòu)與化學(xué)組成。答：多數(shù)病毒呈球形或近似球形，少數(shù)呈桿狀（植物病毒）、絲狀（初分離的流感病毒）、彈狀（狂犬病毒）、磚塊狀（如痘類病毒）和蝌蚪狀（噬菌體）。病毒的核心和衣殼，二者構(gòu)成核衣殼，病毒包膜和其他輔助結(jié)構(gòu)。化學(xué)組成：核心：主要為核酸，化學(xué)組成為DNA或RNA。衣殼：包繞在核心外面的一層蛋白質(zhì)，由許多蛋白質(zhì)亞單位（殼粒）組成。包膜：化學(xué)組成： 脂質(zhì)蛋白質(zhì)糖類。

答：單細胞真菌呈圓形或卵圓形。多細胞真菌

結(jié)構(gòu)：菌絲和孢子，菌絲：分為營養(yǎng)菌絲、氣中菌絲、生殖菌絲；孢子：是真菌的繁殖體。結(jié)構(gòu)：細胞壁外成分；細胞壁；隔膜；其他結(jié)構(gòu)。

25：真菌培養(yǎng)特性。答：最常用的培養(yǎng):沙保弱培養(yǎng)基。溫度:多數(shù)都在22 ~ 28oC，但深部感染真菌最適溫度為37oC，pH4.0 ~ 6.0病原菌通常生長緩慢，1~4周。

26：真菌繁殖方式。答：①無性生殖：①由菌絲斷裂形成新個體②細胞直接分裂產(chǎn)生子細胞③產(chǎn)生芽生孢子④產(chǎn)生孢子囊孢子和分生孢子②有性生殖：指經(jīng)過兩性細胞配合產(chǎn)生新個體的繁殖方式。

27：真菌抵抗力答：①對干燥、陽光、紫外線及常用消毒劑有強抵抗力②不耐熱，菌絲與孢子60℃ 1小時均可殺死③2﹪石炭酸、10%甲醛、0.1%升汞、2.5%碘酊敏感④抗真菌藥物：菌集團。

純培養(yǎng)基：挑取一個菌落，移種到另一培養(yǎng)基中，生長出來的細菌均為純種。

毒性噬菌體：在宿主菌細胞內(nèi)噬菌體增殖產(chǎn)生子代噬菌體，宿主菌被裂解，形成溶菌性周期。溫和噬菌體：噬菌體基因與宿主菌染色體整合，成為前噬菌體，噬菌體DNA能隨細菌DNA復(fù)制而復(fù)制，并隨細菌的分裂而傳到子代細菌的基因組中，變成溶原性細菌，形成溶原性周期。前噬菌體：整合在細菌染色體上的噬菌體基因。轉(zhuǎn)座子：細菌基因組中的一段DNA序列，可以在染色體、質(zhì)粒或噬菌體之間自行移動的遺傳成分，伴隨轉(zhuǎn)座子的移動，會出現(xiàn)插入突變。基因轉(zhuǎn)移：遺傳物質(zhì)由供體菌轉(zhuǎn)入受體菌的過程為基因轉(zhuǎn)移。

重組：轉(zhuǎn)移的基因與受體菌DNA整合在一起稱為重組，重組使受體菌獲得供體菌的某些性狀。轉(zhuǎn)化：細菌通過性菌毛相互連接溝通，將質(zhì)粒或染色體等遺傳物質(zhì)從供體菌轉(zhuǎn)移給受體菌的過程。

接合：是受體菌直接攝取供體菌DNA片段，從而獲得新的遺傳性狀的過程。

轉(zhuǎn)導(dǎo)：以噬菌體為載體將供菌的DNA片段轉(zhuǎn)移到受菌體內(nèi)使受菌獲得供菌的部分遺傳性狀。溶原性轉(zhuǎn)換：某些前噬菌體可導(dǎo)致細菌基因型和性狀發(fā)生改變，例如白喉棒狀桿菌產(chǎn)生白喉毒素的機理，溫和噬菌體感染細菌時，其基因可整合于宿主菌染色體中，使宿主菌獲得噬菌體基因賦予的新的性狀，稱溶原性轉(zhuǎn)換。原生質(zhì)體融合：將兩種不同的細菌經(jīng)溶菌酶或青霉素等處理，失去細胞壁成為原生質(zhì)體后進行融合的過程。融合后的染色體之間發(fā)生重組。病毒的自我復(fù)制：以病毒核酸為模板，經(jīng)過復(fù)雜的生化過程，復(fù)制子代病毒的核酸并通過轉(zhuǎn)錄翻譯產(chǎn)生病毒蛋白質(zhì)，裝配成熟后釋放到細胞外，這種增殖方式稱為病毒的自我復(fù)制。頓挫感染：被病毒侵入的細胞如不能為病毒增殖提供必需成分，則病毒不能合成本身成分，或能合成但不能組裝和釋出有感染性的病毒顆粒。非容納細胞與容納細胞

缺陷病毒：病毒基因組不完整或某一基因位點改變，不能正常增殖，不能復(fù)制出完整有感染性的病毒顆粒，此病毒即缺陷病毒。缺陷病毒+輔助病毒?完成復(fù)制

干擾現(xiàn)象：當兩種病毒感染同一宿主細胞時，發(fā)生一種病毒的增殖抑制另一種病毒增殖的現(xiàn)象。某些病毒感染細胞時不出現(xiàn)CPE或其他易于測出的變化（如HAd），但能干擾其后感染的另一病毒的增殖，從而阻抑后者所特有的CPE 芽孢：某些細菌在一定環(huán)境條件下，胞質(zhì)脫水濃縮，在菌體內(nèi)部形成的一個圓形或卵圓形小體。

正常菌群：正常人的體表和與外界相通的眼結(jié)膜，口腔、鼻腔、腸道、泌尿生殖道等腔道粘膜中的不同種類和數(shù)量及對人體無害而有益的微生物。正常微生物群通稱為正常菌群

細菌群體：細菌附著在有生命或無生命的材料表面后，由細菌及其所分泌的胞外多聚物共同組成的呈膜狀的細菌群體。機會性感染：由正常菌群在機體免疫功能低下、寄居部位改變、菌群失調(diào)等特定條件下引起的感染。

毒力：致病性的強弱程度。

侵襲素：某些細菌的基因編碼一些具有侵襲功能的蛋白多肽，促進該病原菌向鄰近組織擴散甚至介導(dǎo)進入鄰近黏膜上皮細胞內(nèi)。

包涵體：細胞漿或細胞核內(nèi)出現(xiàn)光鏡下可見的斑塊狀結(jié)構(gòu)

G+ 菌:①肽聚糖：聚糖骨架,四肽側(cè)鏈,五肽交聯(lián)橋,三維立體②磷壁酸:重要表面抗原，與粘附致病有關(guān)，加強穩(wěn)定細胞壁G－菌:①肽聚糖：聚糖骨架,四肽側(cè)鏈組成二維結(jié)構(gòu), ②外膜（脂蛋白、脂質(zhì)雙層、脂多糖組成）功能:屏障結(jié)構(gòu)LPS是G－菌的內(nèi)毒素。細胞壁結(jié)構(gòu)異同:G+菌/G－菌--強度:較堅韌/較疏松--厚度:厚20-80nm/薄10-15nm--肽聚糖層數(shù):多可達50層/少，1-2層--肽聚糖結(jié)構(gòu):聚糖骨架,四肽側(cè)鏈,五肽交聯(lián)橋,三維立體/聚糖骨架,四肽側(cè)鏈,二維平面--脂類含量/少/多--磷壁酸:有/無--外膜:無/有,由脂蛋白、脂質(zhì)雙層、脂多糖組成3：細菌L型，特殊結(jié)構(gòu)種類、化學(xué)組成、抗原性及意義？答：定義：細菌細胞壁的肽聚糖結(jié)構(gòu)受理化或生物因素直接破壞或合成被抑制，這種細胞壁受損的細菌在高滲環(huán)境下仍可存活，稱細菌細胞壁缺陷型或L型。種類：G+菌細胞壁缺失后，僅有胞膜，稱原生質(zhì)體，G--菌肽聚糖層受損，尚有外膜，稱原生質(zhì)球。抗原性及意義：高度多形性，大小不一；大多染成G－；高滲低瓊脂含血清培養(yǎng)基—油煎蛋樣菌落；去除誘因后，有些可回復(fù)為原菌；某些L型仍有致病性,引起慢性感染。作用于胞壁的抗菌性藥對L型感染治療無效

4：細菌的特殊結(jié)構(gòu)？答：①莢膜：多糖或多肽的多聚體。功能a抗吞噬b黏附作用c抗有害物質(zhì)的損傷d有抗原性，用于細菌的鑒定和分型②鞭毛：蛋白質(zhì)，由基礎(chǔ)小體絲狀體鉤狀體組成，高度抗原性。功能a是細菌的運動器官b某些細菌的鞭毛與致病性有關(guān)c根據(jù)鞭毛的動力和鞭毛的抗原性可用以細菌的鑒別和分類③菌毛：由亞單位菌毛蛋白構(gòu)成。功能a黏附作用b傳遞遺傳物質(zhì)④芽孢：生產(chǎn)芽孢的細菌都是革陽菌。功能：a增強抵抗力b不直接致病c鑒定。

5：細菌的遺傳物質(zhì)？答：細菌染色體，質(zhì)粒，噬菌體：

6：基因轉(zhuǎn)移與重組方式的種類及定義？答：定義：基因轉(zhuǎn)移：遺傳物質(zhì)由供體菌轉(zhuǎn)入受體菌的過程為基因轉(zhuǎn)移。重組：轉(zhuǎn)移的基因與受體菌DNA整合在一起稱為重組，重組使受體菌獲得供體菌的某些性狀。分類：轉(zhuǎn)化,接合,轉(zhuǎn)導(dǎo),融合,轉(zhuǎn)換.【表格】類型：基因來源/轉(zhuǎn)移方式--轉(zhuǎn)化：供菌游離的DNA片段/直接攝入--接合：供菌質(zhì)粒DNA/ 性菌毛--轉(zhuǎn)導(dǎo)：供菌任意DNA或噬菌體與供菌特定DNA/噬菌體--融合：兩菌原生質(zhì)體的DNA/融合--轉(zhuǎn)換：溫和噬菌體/吸附穿入

7：噬菌體及其相關(guān)概念。答：1）毒性噬菌體：在宿主菌細胞內(nèi)噬菌體增殖產(chǎn)生子代噬菌體，宿主菌被裂解，形成溶菌性周期。2）溫和噬菌體：噬菌體基因與宿主菌染色體整合，成為前噬菌體，噬菌體DNA能隨細菌DNA復(fù)制而復(fù)制，并隨細菌的分裂而傳到子代細菌的基因組中，變成溶原性細菌，形成溶原性周期。

8：細菌生長繁殖的條件？答:營養(yǎng)物質(zhì)/酸堿度 多數(shù)病原菌最適pH為7.2~7.6/溫度 多數(shù)病原菌生長最適溫度為37℃/氣體 據(jù)代謝時對分子氧的需要與否，專性需氧菌、微需氧菌、兼性厭氧菌、專性厭氧菌/滲透壓。

9：細菌群體的生長繁殖？答：生長曲線：一定數(shù)量的細菌接種到定量的液體培養(yǎng)基中，連續(xù)定時取樣測定活菌數(shù)量，以培養(yǎng)時間為橫坐標，以活菌數(shù)的對數(shù)為縱坐標作圖，得到的一條曲線。遲緩期：適應(yīng)階段。對數(shù)期：對抗生素敏感，細菌鑒定選此期。穩(wěn)定期：代謝產(chǎn)物形成（如外毒素、抗生素、芽胞等）。衰亡期：菌體細胞呈現(xiàn)多種形態(tài)。

10：按細菌對氧需要的分類？答：據(jù)代謝時對分子氧的需要與否，專性需氧菌、微需氧菌、14：雙鏈DNA病毒的復(fù)制周期？答：vDNA（RNA聚合酶）→早期mRNA（翻譯）→早期蛋白（酶）→ vDNA（酶）子代DNA →? mRNA?→結(jié)構(gòu)蛋白.→子代DNA+結(jié)構(gòu)蛋白→子代病毒。簡要過程：吸附，穿入，脫殼，生物合成，組裝、成熟與釋放。

15：頓挫病毒，缺陷病毒的概念？答：頓挫病毒：被病毒侵入的細胞如不能為病毒增殖提供必需成分，則病毒不能合成本身成分，或能合成但不能組裝和釋出有感染性的病毒顆粒。非容納細胞與容納細胞。缺陷病毒：病毒基因組不完整或某一基因位點改變，不能正常增殖，不能復(fù)制出完整有感染性的病毒顆粒，此病毒即缺陷病毒。缺陷病毒+輔助病毒=完成復(fù)制 16：細菌的感染與致病。答：感染：在一定條件下，微生物與機體相互作用并導(dǎo)致機體產(chǎn)生不同程度的病理過程。★

17：細菌的毒力比較，外毒素與內(nèi)毒素生物學(xué)特性。答：【表格】種類：內(nèi)毒素★外毒素。來源：G-菌★G+菌部分G-菌。編碼基因：染色體基因★質(zhì)粒或前噬菌體或染色體基因。存在部位：細胞壁成分、細菌裂解后釋出★活菌分泌或細菌溶解后散出。化學(xué)成分：脂多糖★蛋白質(zhì)。穩(wěn)定性：好(160℃2~4h才破壞）★差（60~80 ℃30m可破壞）。毒性作用：弱、各種內(nèi)毒素作用大致相同★強、對機體組織器官有選擇性。抗原性：弱，甲醛處理后不能形成類毒素★強，能刺激機體形成抗毒素，經(jīng)甲醛脫毒后能形成類毒素。

18：細菌感染的類型答：①不感染②隱性感染③潛伏感染④顯性感染：急慢性感染；局部、全身感染⑤帶菌狀態(tài)。

19：病毒感染類型。答：①隱性感染②顯性感染：急性病毒感染：潛伏期短，發(fā)病急，數(shù)日或數(shù)周回復(fù)，病原消滅型感染。持續(xù)性病毒感染：慢性病毒感染；潛伏性病毒感染；慢發(fā)病毒感染。

20：細菌的致病機制。答：細菌的致病性強弱取決于毒力，細菌的毒力因子：①侵襲力：致病菌突破宿主生理屏障，進入機體并在體內(nèi)定植、繁殖和擴散的能力包括黏附素、莢膜和微莢膜、侵襲性物質(zhì)②毒素：細菌產(chǎn)生的損傷宿主引起生理功能紊亂的毒性物質(zhì)，包括內(nèi)毒素和外毒素。

21：正常菌群的生理作用。答：①生物拮抗：競爭粘附（占位性保護）作用；產(chǎn)生有害代謝物質(zhì)；營養(yǎng)競爭②營養(yǎng)作用③免疫作用④抑癌作用⑤抗衰老作用。

22：病毒分離鑒定方法及病毒在培養(yǎng)細胞中的增殖的指標。答：病毒的分離：①動物接種②雞胚培養(yǎng)；流感病毒初次分離接種于羊膜腔；流感病毒的再培養(yǎng)接種于尿囊腔③組織培養(yǎng)④細胞培養(yǎng) — 病毒分離鑒定中最常用的方法單層細胞培養(yǎng)；原代細胞培養(yǎng)；二倍體細胞培養(yǎng)；傳代細胞培養(yǎng)。指標：1）細胞的變化①細胞病變效應(yīng)：有些病毒在細胞內(nèi)增殖時引起的特有的細胞病變，如細胞變圓、聚集、壞死、溶解或脫落②多核巨細胞形成：有些病毒如麻疹病毒、巨細胞病毒等作用于細胞膜，使鄰近的細胞融合，形成多核巨細胞③胞質(zhì)或核內(nèi)包涵體的形成狂犬病病毒、巨細胞病毒。2）紅細胞吸附流感病毒等感染細胞后，由于細胞膜上出現(xiàn)了血凝素，具有吸附脊椎動物紅細胞的能力，這一現(xiàn)象稱為紅細胞吸附。常用來鑒定具有血凝素的黏病毒或副黏病毒的增殖3）.紅細胞凝集檢測含血凝素病毒的方法4）干擾現(xiàn)象5）空斑形成試驗。

23：病毒成份的檢測（抗原、核酸檢測）答：1.病毒抗原的檢測2.病毒核酸的檢測

24：真菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)（單細胞和多細胞真菌）。

灰黃霉素、制霉菌素B、二性霉素B、氟康唑和酮康唑；對抗生素不敏感。

28：抗菌藥物的種類與作用機制。答：殺菌藥和抑菌藥。機制：①抑制細菌細胞壁的合成②抑制細菌

細胞膜功③抑制細菌蛋白質(zhì)合成④抑制細菌核酸合成。29：細菌耐藥的機制。答：產(chǎn)生鈍化酶；細胞通透性的改變；靶位結(jié)構(gòu)的改變；建立代謝旁路；代謝酶分子的改變

30：醫(yī)院感染的定義。答：由醫(yī)院的病原生物或其毒素導(dǎo)致的局部或全身感染性疾病。

31：細菌分離培養(yǎng)和鑒定、生化試驗、血清學(xué)試驗？答：細菌分離培養(yǎng)和鑒定：原則上應(yīng)對所有送檢標本做分離培養(yǎng)，以便獲得單個菌落后進行純培養(yǎng)，從而對細菌做進一步的生物學(xué)、免疫學(xué)、致病性或細菌的藥物敏感性等方面的檢查，最終獲得確切的報告。生化試驗：得到細菌的純培養(yǎng)物后，用糖發(fā)酵試驗，吲哚試驗，硝酸鹽還原實驗等對細菌的酶系統(tǒng)和其代謝產(chǎn)物的檢查，是鑒別細菌的重要方法之一。血清學(xué)實驗：利用含已知的特異性抗體的免疫血清，對細菌進行群和型的鑒別。

微生物種類名稱★生物學(xué)性狀★致病物質(zhì)、致病機理及所致疾病

破傷風梭菌：菌體細長，芽胞正圓比菌體粗，位于菌體頂端菌體鼓槌狀★不發(fā)酵糖類，不分解蛋白質(zhì)。條件：局部傷口需形成厭氧微環(huán)境，傷口窄而深，有泥土或異物污染，大面積創(chuàng)傷，壞死組織多，局部組織缺血，同時有需氧菌或兼性厭氧菌混合感染的傷口。防治原則：特異性預(yù)防：注射破傷風類毒素主動免疫；迅速對傷口清創(chuàng)擴創(chuàng)，防止形成厭氧微環(huán)境；緊急預(yù)防：TAT（精制破傷風抗毒素）；治療： 早期足量使用TAT，抗生素。產(chǎn)氣莢膜梭菌：G+粗大桿菌，芽胞位于次極端，橢圓形，直徑小于菌體形成明顯莢膜★血平板：雙層溶血環(huán)，代謝十分活躍，牛奶培養(yǎng)基：“洶涌發(fā)酵”現(xiàn)象。增加血管通透性，組織壞死，氣性壞疽，食物中毒，壞死性腸炎。

肉毒梭菌：G+粗短桿菌，芽胞位于次極端，橢圓形，菌體呈網(wǎng)球拍狀，嚴格厭氧，分型多，生化反應(yīng)復(fù)雜★肉毒毒素，抑制乙酰膽堿釋放，引起運動神經(jīng)末梢失調(diào)→肌肉麻痹；食物中毒，嬰兒肉毒中毒。

支原體：菌落油煎蛋型，高度多形態(tài)型，細胞膜含高度固醇，無細胞壁，對青霉素有抵抗作用★支原體肺炎，病變?yōu)殚g質(zhì)性肺炎，可合并支氣管肺炎。稱為原發(fā)性非典型性肺炎。不規(guī)則發(fā)熱，刺激性咳嗽，頭痛。嬰幼兒病情嚴重，發(fā)病急，病程長，以呼吸困難為主。有些合并其他系統(tǒng)病變，如循環(huán)系統(tǒng)等。飛沫傳播。立克次體：是一類體積微小，絕大多數(shù)為自身代謝不完善，嚴格細胞內(nèi)寄生的原核細胞型微生物★流行性斑疹傷寒、地方性斑疹傷寒、恙蟲病、Q熱

衣原體：嚴格細胞內(nèi)寄生，有獨特發(fā)育周期，能通過細菌濾器，原核細胞型微生物★ 沙眼:感染眼結(jié)膜上皮細胞→增殖，包涵體→局部炎癥→早期流淚、有粘液膿性分泌物、結(jié)膜充血及濾泡增生→后期結(jié)膜瘢痕、眼瞼內(nèi)翻、倒睫以及角膜血管翳引起的角膜損害→影響視力或致盲包涵體結(jié)膜炎、泌尿生殖道感染、沙眼衣原體肺炎、性病淋巴肉芽腫

螺旋體：是一類細長、柔軟、彎曲、運動活潑的原核細胞型微生物基本結(jié)構(gòu)及生物學(xué)形狀與細菌相似★梅毒，人是唯一傳染源，致病物質(zhì)為莢膜樣物質(zhì)，透明質(zhì)酸酶；后天通過性接觸傳播或者先天經(jīng)過母體傳播。

第四篇：口腔微生物總結(jié)

1.口腔生態(tài)系:是指口輕微生物與口腔環(huán)境所組成的微小生態(tài)系統(tǒng),包括生態(tài)區(qū)、微生物、生態(tài)因子等因素。2.生態(tài)區(qū)：是生態(tài)系統(tǒng)的空間層次，是生物體生存的環(huán)境區(qū)。（生態(tài)區(qū)→生境→生態(tài)點→生態(tài)位）3.口腔生態(tài)學(xué)：是研究口腔組織器官與口腔微生物群以及微生物群之間的相互關(guān)系的一門學(xué)科，它闡明口腔組織器官與微生物群之間的相互作用的生理平衡態(tài)和病理失調(diào)態(tài)的機制，提出維護口腔生態(tài)平衡的和防止失調(diào)的措施和辦法。

4.口腔正常微生物：是指口腔內(nèi)在進化過程中自然選擇的與宿主有明顯共生關(guān)系的微生物。包括細菌、真菌、支原體、原蟲和病毒。在正常生理狀態(tài)下口腔正常微生物是有益的，不致病。生態(tài)環(huán)境的改變可能使正常微生物定位轉(zhuǎn)換變成致病菌。口腔正常微生物的定性、定量、定位可以作為人體生理功能的檢測指標。有益作用：保護性生物屏障；合成維生素；拮抗有害菌群；刺激宿主免疫。5.口腔微生物之間的關(guān)系：相互凝集作用；相互營養(yǎng)關(guān)系；競爭與拮抗；通訊與遺傳多樣性。6.影響口腔生態(tài)系的因素：1.宿主因素：宿主生理改變（年齡增長、口腔衛(wèi)生、食物等）和宿主病理改變（口腔疾病）。2微生物因素：口腔微生物種類和數(shù)量的變化。3免疫因子：免疫缺陷或者口腔感染。4其他作用：抗生素、女性性激素和口干癥等。

7.QS（Quorum sensing）：是細菌響應(yīng)細胞密度而調(diào)節(jié)基因表達的過程。在此過程中細菌產(chǎn)生并釋放一種稱作自誘導(dǎo)子（autoinducers，AI）的化學(xué)信號分子，當其達到一定閾值時便可調(diào)節(jié)相關(guān)基因的表達。革蘭氏陰性細菌和革蘭氏陽性細菌通過QS回路調(diào)節(jié)多種生理活性。

8.口腔微生物種群：

1細菌：兼性厭氧革蘭氏陽性菌：葡萄球菌（金黃色葡萄球菌）、鏈球菌（變異鏈球菌、血鏈球菌）、腸球菌、口腔球菌、顆粒鏈球菌

專性厭氧革蘭氏陽性菌：消化鏈球菌（厭氧/微小消化鏈球菌）

革蘭氏陽性無芽孢厭氧桿菌：放線菌（粘性放線菌）、真桿菌、丙酸桿菌、雙歧桿菌、乳桿菌。

兼性厭氧革蘭氏陰性桿菌：嗜血菌、艾肯菌、彎曲菌、金氏菌、二氧化碳嗜纖維菌

革蘭氏陰性無芽孢厭氧桿菌：坦納菌、卟啉單胞菌、梭桿菌。

革蘭氏陰性：厭氧：韋榮菌；需氧：奈瑟球菌

芽孢桿菌：厭氧：梭菌屬；需氧：

螺旋體：密螺旋體

2其他口腔微生物：真菌：假絲酵母（白假絲酵母菌）；原蟲：牙齦阿米巴原蟲；支原體：唾液支原體；病毒：腮腺病毒、單純皰疹病毒。9.牙菌斑生物膜：

定義：牙面上或牙周袋內(nèi)的多種對氧敏感性不同的菌從構(gòu)成的生態(tài)系。細菌在其中生長、繁殖和衰亡。其中細菌的代謝活動影響著細菌與宿主的生態(tài)平衡，一旦平衡被打破，細菌可能對宿主產(chǎn)生破壞。結(jié)構(gòu)：基底層（靠近牙面的無細胞均質(zhì)結(jié)構(gòu)、獲得性膜）、中間層（主體部分，柵欄狀結(jié)構(gòu)，絲狀菌、球菌和桿菌相互黏附構(gòu)成）和表層（谷穗狀結(jié)構(gòu)，絲狀菌為中心，球菌黏附其上）。

組成：不同位置牙菌斑的細菌種類差異較大，致病性和非治病性牙菌斑的細菌種類差別不大，細菌比例不同。影響因素：微生物種類；唾液；食物等

分類：部位：齦上菌斑（牙頸部齦緣以上，多為革蘭氏陽性球菌和桿菌、絲狀菌，分為溝裂菌斑和光滑面菌斑）和齦下菌斑（齦緣以下，齦溝和牙周袋內(nèi)，多為革蘭氏陰性厭氧菌，分為附著性齦下菌斑和非附著性齦下菌斑）

10.獲得性膜：是指由唾液糖蛋白選擇性黏附在牙齒表面形成，是牙菌斑生物膜的基底層。

結(jié)構(gòu)：表面下層（牙釉質(zhì)表面之下，鋸齒形，深入牙釉質(zhì)因脫鈣形成的縫隙或自然小孔內(nèi)）、表面層（牙釉質(zhì)表面，均質(zhì)，薄而透明）、表面上層（牙菌斑生物膜下，較厚，有時發(fā)生礦化，可能是唾液蛋白、細胞分泌物或退變的表皮細胞而來）。

作用：1確定首先定植于牙齒表面的細菌種類2細菌代謝的營養(yǎng)來源3保護牙釉質(zhì)表面4牙齒表面的離子保護庫。

11.細菌對牙面的黏附和集聚：

黏附：鈣橋作用，氫鍵作用，疏水作用，受體-粘附素作用。

集聚：細菌間細胞外聚合物的相互黏附；不同細菌直接黏附；細菌與宿主的聚合物黏附。

12.Stephan曲線：Stephan最先建立的食糖后牙菌斑PH變化的動態(tài)曲線。即：靜止狀態(tài)時菌斑PH穩(wěn)定，食糖后幾分鐘pH迅速下降到最低水平，以后逐漸回升，一小時左右恢復(fù)正常。蔗糖＞葡萄糖＞麥芽糖、乳糖、果糖＞山梨糖醇＞木糖醇。

13.齲病：牙硬組織的慢性感染性疾病，是牙齒局部生態(tài)平衡失調(diào)的表現(xiàn)。

14.齲病與細菌：Orland的無菌鼠實驗：無菌鼠+細菌→齲齒；無菌鼠+高糖飲食→無齲齒

Miller的體外實驗：牙齒+面包+唾液→齲齒；牙齒+面包+煮沸唾液→無齲

牙齒+脂肪+唾液→無齲。結(jié)論：細菌代謝碳水化合物是齲齒產(chǎn)生根本原因

齲病相關(guān)細菌：口腔鏈球菌（血鏈球菌，早起定植），變異鏈球菌（s.m），乳桿菌（嗜酸乳桿菌，參與齲病發(fā)展），口腔放線菌（黏性放線菌：菌毛I與牙面黏附，菌毛II與變鏈等細菌的集聚），口腔韋榮菌（小韋榮菌：與變鏈等集聚增加粘附力和加速生物膜形成，可利用乳酸減少產(chǎn)酸菌的致齲），奈瑟菌。

致齲微生物的特性：1產(chǎn)酸和耐酸2合成胞外多糖3牙面黏附能力

致齲標準：1具有致齲生物特性2在齲病發(fā)生各時期可以培養(yǎng)得到3菌量與齲病正相關(guān)4引起動物傳染性致齲5選擇性限制該菌可以減少致齲。

15.牙髓根尖周感染途徑：牙體感染；牙周感染；血緣感染（引菌作用：暫時性的菌血癥引起的細菌在代謝障礙或創(chuàng)傷的牙髓組織的定植、增植）。

16.牙髓根尖周感染菌：卟啉單胞菌（牙齦卟啉單胞菌Pg、牙髓卟啉單胞菌Pe：革蘭陰性桿菌、專性厭氧，產(chǎn)生黑色素和臭味，誘導(dǎo)化膿性感染，不酵解碳水化合物，可產(chǎn)生吲哚和硫化氫，主要終末酸產(chǎn)物是正丁酸和乙酸）、普雷沃菌屬（中間普雷沃菌：晚期牙髓根尖周感染常見菌）、梭桿菌屬（具核梭桿菌，G-，厭氧，主要定植于牙菌斑和齦溝，與Pg密切共生，毒力強，誘導(dǎo)IL-1和炎癥反應(yīng)）、擬桿菌屬、放線菌屬（內(nèi)氏放線菌、粘性放線菌，厭氧補充CO2才能生長）、消化鏈球菌屬（厭氧消化鏈球菌，根管和根尖周感染，產(chǎn)硫化氫）。

17.牙髓根尖周感染機制：內(nèi)毒素（誘導(dǎo)IL-1和TNF細胞因子，炎癥反應(yīng)）；侵襲性酶（導(dǎo)致組織破壞和感染擴散）、菌毛和莢膜、細菌代謝產(chǎn)物（外毒素和內(nèi)毒素）。

18.牙髓疾病與細菌：1.冷刺激痛與細菌感染： 可逆性牙髓炎（33% 細菌感染，為鏈球菌和乳桿菌）2.自發(fā)痛和熱刺激痛與細菌感染：不可逆性化膿性牙髓炎，90%細菌感染，以專性厭氧菌 為主）3.腐敗臭和顯著出血與細菌感染：以專性厭氧的普雷沃菌為主）4.拔髓后根管內(nèi)細菌殘留：拔髓后根管殘留細菌是根管治療后根尖周炎的主要原因。5.牙髓疾病中牙髓感染與拔髓后根管細菌殘存相關(guān)：拔髓后根管一次性填充，增加細菌殘留風險，以專性厭氧菌為主。

19.根尖周疾病與細菌：1.根尖周炎：厭氧菌為主，急性根尖周炎100%可檢測到細菌2.叩擊痛與根管內(nèi)細菌定植情況：急性期以專性厭氧菌為主，慢性期以兼性厭氧菌為主3.根管內(nèi)滲出物與根管內(nèi)細菌定植間的關(guān)系：專性厭氧為主

20.牙周病主要致病菌：牙齦卟啉單胞菌（侵襲性酶，內(nèi)毒素，菌毛，牙齦素）、伴防線嗜血桿菌（白細胞毒素，內(nèi)毒素，spa，上皮細胞毒素，骨吸收誘導(dǎo)因子）、普雷沃菌屬（蛋白酶機制免疫細胞能力）、具核梭桿菌、直形彎曲菌（白細胞毒素）、微小消化鏈球菌。21.牙周病致病菌致病機制：非特異性菌斑學(xué)說，特異性菌斑學(xué)說

22.口腔黏膜病相關(guān)病毒：單純皰疹病毒、水痘-帶狀皰疹病毒、EB病毒、HIV、人乳頭瘤病毒。23.變異鏈球菌致齲：能牢固粘附至牙面；能利用外源性糖類迅速產(chǎn)生乳酸；能利用外源性糖產(chǎn)生細胞內(nèi)多糖，在外源性糖缺乏時利用其產(chǎn)酸；能在酸性環(huán)境（pH<5）中生存并繼續(xù)產(chǎn)酸，具有較強耐酸性。

第五篇：環(huán)境工程微生物總結(jié)

選擇一個環(huán)境問題，論述微生物在防治此問題中的作用及研究應(yīng)用現(xiàn)狀。

由于有機毒物和重金屬的污水農(nóng)田灌溉和土地處理，固體廢物的堆放和填埋，以及地下儲油罐泄露，還有最普遍的農(nóng)藥噴灑等等，使得土壤的污染越來越嚴重。這些物質(zhì)破壞了土壤生態(tài)平衡，隨水源進入人體毒害人類。為了解決這個問題，可以采用微生物土壤修復(fù)。

土壤生物修復(fù)，是利用土壤中天然的微生物資源或人為投加目的菌株，將滯留的污染物快速降解和轉(zhuǎn)化，恢復(fù)土壤的天然功能。土壤本來就是微生物的大本營，因此選用適當?shù)木N，可以是受污染土壤本來就有的菌種，或是新植入的菌種。加入適當?shù)臓I養(yǎng)物并保證合適的溶解氧，微生物可以通過自身的特點快速的分解土壤中的有害物質(zhì)，從而縮短土壤修復(fù)的時間。

關(guān)于土壤修復(fù)的研究應(yīng)用現(xiàn)狀，最主流的是土壤生物修復(fù)功能。有微生物修復(fù)法和植物修復(fù)法兩種。微生物修復(fù)法分原位生物修復(fù)（將污染土壤在原地處理）和異位生物修復(fù)。植物修復(fù)是利用植物對某些污染物的超強吸附積累，以及植物代謝等共同途徑，增強污染物的降解活性，從而加速土壤污染物的降解過程。

微生物的特點

體積小比表面積大

分布廣種類多

生長旺繁殖快

適應(yīng)性強易變異

1分布廣種類多：已發(fā)現(xiàn)的微生物達10萬種以上,新種不斷發(fā)現(xiàn).。可以說微生物無處不有,無處不在，冰川,溫泉,火山口等極端環(huán)境都有。土壤，空氣，水，還有動植物體表都有微生物存在。繁殖快：因為微生物的代謝能力很強, 由于微生物個體微小,單位體積的表面積相對很大,有利于細胞內(nèi)外的物質(zhì)交換,細胞內(nèi)的代謝反應(yīng)較快.變異：微生物個體微小,對外界環(huán)境很敏感,抗逆性較差,很容易受到各種不良外界環(huán)境的影響;另外,微生物的結(jié)構(gòu)簡單,缺乏免疫監(jiān)控系統(tǒng), 很容易變異，但微生物的遺傳不穩(wěn)定性,是相對高等生物而言的。

稀釋平板分離法

該方法是將一定濃度的活性污泥稀釋液，通過平板劃線，表面涂布或是平板澆注的方法，接種到配置好的培養(yǎng)基上，最終獲得分離出來的特定微生物種群。

1先將一定濃度（10ml）的活性污泥置于90ml無菌水中，搖勻。得到10，-1 2用1ml移液管吸取1ml上述溶液到9ml無菌水中，的10，-2 3重復(fù)6次，最終獲得10,-6.4做平板：將融化并冷卻至50°的培養(yǎng)基倒入消過毒的滅過菌的培養(yǎng)皿中。5

（1）劃線：形狀多種多樣，但是不能劃破培養(yǎng)基，同時保證充分分散獲得單菌落。（2）澆注：現(xiàn)將配置好的稀釋液加入培養(yǎng)皿，在制作平板。

（3）涂布：先用無菌移液管吸取少量稀釋液于平板上，用三角刮刀在平板上均勻涂抹。

染色

染色作用：微生物的細胞小而透明，在普通光學(xué)顯微鏡下與背景反差很小不容易識別，因此，為了增加色差，必須染色以便識別各種形態(tài)和細胞結(jié)構(gòu)。分類：簡單染色和鑒別染色。

特點：簡單染色：只用一種染料，操作簡便，但是只能顯示微生物形態(tài)不能顯示構(gòu)造。

復(fù)合染色：用兩種以上的染料或試劑進行多次染色處理，使不同菌體和構(gòu)造顯示不同顏色從而鑒別。

革蘭氏染色

意義：成功的講兩類混在一起的細菌分離開，作為分類鑒別的第一步。步驟：1,涂片，干燥（固定）2初染：低價草酸銨結(jié)晶紫染液1-2min，水洗。3媒染，滴加革蘭氏染液，染1-2min，水洗。4脫色：滴加95%乙醇，講撥片搖晃幾下傾去乙醇，重復(fù)2-3次。5復(fù)染：滴加番紅 染2-3min，水洗并干燥。6鏡檢 關(guān)鍵步驟：脫色是否合適。若脫色過度，G+也可能脫色而被認為是G-。反之。

滅菌消毒

滅菌，是指用物理，化學(xué)方法殺滅或者除去物體上所有微生物及其芽孢。消毒，是指用物理，化學(xué)方法殺死物體上的能致病的微生物，或全部微生物的營養(yǎng)細胞和部分芽孢。

方法：干熱滅菌，濕熱滅菌，間歇滅菌，氣體滅菌，和過濾除菌

干熱：培養(yǎng)皿 移液管等玻璃器皿。先至于電熱干燥箱，160°2h。降至50°

濕熱：密閉金屬鍋，適用于一切物品。先加蒸餾水，浸沒被滅菌物品，對稱緊固螺栓，預(yù)置溫度時間，加熱 排放冷空氣 最后至于37°恒溫箱內(nèi)24h