第一篇:微生物培訓(xùn)總結(jié)一
微生物培訓(xùn)總結(jié)一
2011年12月19-20日,我去杭州參加了關(guān)于微生物檢驗的繼續(xù)培訓(xùn)。這次培訓(xùn)主要講了微生物的概念、重要性、以及微生物的一些相關(guān)專業(yè)基礎(chǔ)知識。
藥品微生物檢驗作為一門應(yīng)用微生物技術(shù)、是對藥品研制、生產(chǎn)、銷售和使用過程中進行質(zhì)量檢測和安全評價的基礎(chǔ)專業(yè)技術(shù)。隨著制藥工業(yè)的迅速發(fā)展和科學(xué)技術(shù)的進步,藥品微生物檢驗經(jīng)多年時間的不斷積累,在理論上不斷充實,逐步發(fā)展形成藥品領(lǐng)域的一門重要分支學(xué)科,專業(yè)技術(shù)檢驗已廣泛應(yīng)用藥品領(lǐng)域的各項專業(yè)和部門。國家藥典收藏的微生物學(xué)檢測項目逐版增加,藥品微生物檢驗已成為執(zhí)行國家藥典、藥品標(biāo)準(zhǔn)和對藥品進行質(zhì)量監(jiān)督的法定依據(jù)。
本次培訓(xùn)是為了隨著醫(yī)藥工業(yè)的發(fā)展,藥品生產(chǎn)企業(yè),廣泛推行GMP認證,微生物學(xué)檢測手段是基本內(nèi)容。這讓我更加適應(yīng)當(dāng)前藥品的微生物檢驗技術(shù)工作,將理論與實踐的想結(jié)合,為成為長期從事藥品微生物檢驗的專業(yè)人員做準(zhǔn)備。
2011年12月21日
第二篇:微生物培訓(xùn)總結(jié)二
微生物培訓(xùn)總結(jié)
2011年12月19-20日,我去杭州參加了關(guān)于微生物檢驗的繼續(xù)培訓(xùn)。這次培訓(xùn)主要講了微生物的概念、重要性、以及微生物的一些相關(guān)專業(yè)基礎(chǔ)知識。
本次培訓(xùn)對微生物的有關(guān)檢驗技術(shù)的實際操作、理論的提高,起到了很好的輔助、參考作用,對我很有啟發(fā)。培訓(xùn)中強調(diào)了藥品微生物試驗的質(zhì)量管理和質(zhì)量保證,檢驗方法的驗證,微生物耐藥性檢測等。還對藥品微生物檢驗的有關(guān)問題進一步擴展、神話、開闊視野,并力求簡明實用,涉及藥品微生物藥物開發(fā)、研制和檢驗的整個過程。
最后,理論還是要和實際相結(jié)合,把本次培訓(xùn)的內(nèi)容更好的運功到工作的實際操作中去,增強自己的質(zhì)量控制的理念,才是本次學(xué)習(xí)最重要的核心。
第三篇:微生物檢測培訓(xùn)問題總結(jié)范文
微生物檢測培訓(xùn)問題總結(jié)
1.“菌株的傳代次數(shù)不得超過5代”表示菌株傳代只能傳遞到第四代,使用第四代時意味著菌株已經(jīng)是第五代,因此,傳代記錄中不能顯示傳5代。
2.標(biāo)準(zhǔn)菌株確認工作是否齊全:存活性確認,純度確認,菌落形態(tài)、染色鏡檢及生化反應(yīng)進行確認。3.菌種保藏所用的冰箱是否經(jīng)過確認,是否容易結(jié)霜,且保存菌種(尤其是特異菌株)是否采用兩種以上的方式,防止意外流失。4.培養(yǎng)基的適用性檢查:
微生物限度檢查中培養(yǎng)基適用性檢查:在注重回收率達到70%時,是否確保檢查用培養(yǎng)基上的菌落形態(tài)同對照培養(yǎng)基上一致。
控制菌檢查中培養(yǎng)基適用性檢查:促生長能力----最短培養(yǎng)時間內(nèi)長出相應(yīng)的菌落;抑制能力-----最長培養(yǎng)時間下不得有菌生長;細菌培養(yǎng)時間:18-24-48小時;真菌培養(yǎng)時間:24-48-72小時,促生長取最短時間,抑制取最長時間。因此供試品在檢查時,培養(yǎng)時間應(yīng)取最長時間。
環(huán)境監(jiān)測的培養(yǎng)基適用性檢查:“中國藥典附錄:藥品微生物實驗室規(guī)范指導(dǎo)原則”中規(guī)定:用于環(huán)境監(jiān)測的培養(yǎng)基須特別防護,最好是雙層包裝和終端滅菌。如果不能采用終端滅菌的培養(yǎng)基,在使用前應(yīng)進行100%的預(yù)培養(yǎng)避免假陽性出現(xiàn)。同時做促生長試驗,防止假陰性出現(xiàn)。
沉降菌監(jiān)測所用培養(yǎng)基的適用性檢查:①培養(yǎng)基回收率確認(同微生物限度檢查的培養(yǎng)基適用性檢查);②確認培養(yǎng)基放置最長時間,在標(biāo)準(zhǔn)風(fēng)速下,一般不宜超過2小時;③同時確認溫度、濕度及風(fēng)速對培養(yǎng)基放置的影響。
5.潔凈區(qū)微生物監(jiān)控標(biāo)準(zhǔn)的理解是否到位?如何計算平均值。
6.生產(chǎn)抗生素的潔凈區(qū)進行環(huán)境監(jiān)測,其培養(yǎng)基是否添加有中和劑,如亞硫酸氫鈉、聚山梨酯等。7.潔凈室是否使用消毒劑與殺孢子輪滑使用,殺孢子劑一般半月1次(建議)8.無菌檢查:
在結(jié)果進行觀察時,最好將集菌器置于黑白背景下觀察,確保不能因燈檢原因而出現(xiàn)假陰性。無菌檢查結(jié)果判斷:
集菌器出現(xiàn)渾濁,但證明不是微生物,判供試品符合規(guī)定;
以下情況可證明無菌檢查結(jié)果無效:設(shè)備及環(huán)境微生物監(jiān)控結(jié)果不符合規(guī)定;回顧無菌試驗過程,發(fā)現(xiàn)有可能引起微生物污染的因素(陰性對照失敗、培養(yǎng)基的靈敏度試驗失敗等);供試管中生長的微生物經(jīng)鑒定后確認是物品或無菌操作技術(shù)所引起。此時可以提出復(fù)驗申請,復(fù)驗取樣條件:
①盡可能使用原樣品(全檢量的2-3倍)
②盡可能使用與第一份來源相同的另一份樣品(如理化檢驗樣品)③盡可能在同一處重新取樣
9.超凈工作臺及生物安全柜中不能使用酒精燈:酒精燈的使用會導(dǎo)致局部溫度對流,在生物安全柜中則會造成潔凈氣流紊亂,從而將臺面污染的灰塵或者周圍污染的空氣帶入到無菌操作區(qū),從而污染樣品;另外超凈工作臺中放置酒精燈,潔凈風(fēng)是超外吹的,對流空氣中污染的菌可能對操作人員造成傷害。10.實驗室進行調(diào)查:一般將重分析、重檢驗、重取樣同時進行,可以節(jié)省調(diào)查時間,延緩車間庫存時間。11.制藥用水中生物膜(生物膜形成微生物生長的物理和化學(xué)屏障。不僅增加了微生物對熱、各種藥物、殺菌刺、去污劑和清潔劑的抗性;而且,有利于微生物捕獲營養(yǎng)物質(zhì)。加速生長繁殖。)出現(xiàn)的可能現(xiàn)象:①在同一或同幾個監(jiān)測點多次檢測均出現(xiàn)菌落;②菌落的種類多樣,形態(tài)多樣;
措施:采用大量沖洗、化學(xué)消毒如次氯酸鈉、二氧化氯等其他辦法
第四篇:微生物總結(jié)
微生物:一類分布廣泛、體積微小、結(jié)構(gòu)簡單、肉眼直接看不到,微小生物的總稱。
細菌L型:細菌細胞壁的肽聚糖結(jié)構(gòu)受理化或生物因素直接破壞或合成被抑制,這種細胞壁受損的細菌在高滲環(huán)境下仍可存活,稱細菌細胞壁缺陷型或L型。
質(zhì)粒:是染色體外的遺傳物質(zhì),控制某些特定的生物學(xué)性狀,不是細菌生長所必需。
莢膜:是細菌合成分泌的包繞于細胞壁外的一層粘液性物質(zhì)。界限清晰性質(zhì)穩(wěn)定結(jié)合牢固。培養(yǎng)基:由人工方法經(jīng)滅菌后制成,專供微生物生長使用的混合營養(yǎng)制品。一般pH為7.2-7.6。
兼性厭氧菌:兼有需氧呼吸和無氧發(fā)酵兩種功能,無論在有氧或無氧環(huán)境中都能生長,但以有氧時生長較好,大多數(shù)病原菌屬于此。菌落:在固體培養(yǎng)基中,經(jīng)過十八到24小時培養(yǎng)后,單個細菌分裂繁殖成一堆肉眼可見的細紅細胞吸附:流感病毒等感染細胞后,由于細胞膜上出現(xiàn)了血凝素(HA),具有吸附脊椎動物紅細胞的能力,這一現(xiàn)象稱為紅細胞吸附。抗毒素:通常是用細菌類毒素給馬多次注射后,取其免疫血清提取免疫球蛋白精制而成抗生素:微生物來源的抗菌藥物,以及人工化學(xué)修飾或半合成的衍生物
無菌:就是指沒有活菌的意思。
1:細胞壁結(jié)構(gòu)、化學(xué)組成及功能?答:化學(xué)組成:G+①肽聚糖:聚糖骨架、四肽側(cè)鏈、五肽交聯(lián)橋②磷壁酸:粘附功能,與致病性有關(guān);抗原性很強③其他成分:如A群鏈球菌的M蛋白G-①肽聚糖:聚糖骨架;四肽側(cè)鏈②外膜:脂蛋白;脂質(zhì)雙層;脂多糖:脂類A(毒性成分,無種屬特異性);核心多糖;特異多糖。功能:①維持細菌固有形態(tài)②保護細菌抵抗低滲環(huán)境③物質(zhì)交換④決定菌體的抗原性。2:G-菌與G+菌細胞壁的異同點及其意義?答:兼性厭氧菌、專性厭氧菌。
11:與醫(yī)學(xué)有關(guān)的合成代謝產(chǎn)物?答:① 毒素與侵襲性酶:外毒素和內(nèi)毒素②熱原質(zhì):G-菌細胞壁的脂多糖,耐高溫,250℃干烤破壞。③抗生素:某些微生物代謝中產(chǎn)生的一類能抑制或殺死其他微生物或腫瘤細胞的物質(zhì)。④維生素:如VitK、B族維生素。⑤色素:脂溶性和水溶性色素。⑥細菌素:無治療應(yīng)用價值。13:病毒的形態(tài)、結(jié)構(gòu)與化學(xué)組成。答:多數(shù)病毒呈球形或近似球形,少數(shù)呈桿狀(植物病毒)、絲狀(初分離的流感病毒)、彈狀(狂犬病毒)、磚塊狀(如痘類病毒)和蝌蚪狀(噬菌體)。病毒的核心和衣殼,二者構(gòu)成核衣殼,病毒包膜和其他輔助結(jié)構(gòu)。化學(xué)組成:核心:主要為核酸,化學(xué)組成為DNA或RNA。衣殼:包繞在核心外面的一層蛋白質(zhì),由許多蛋白質(zhì)亞單位(殼粒)組成。包膜:化學(xué)組成: 脂質(zhì)蛋白質(zhì)糖類。
答:單細胞真菌呈圓形或卵圓形。多細胞真菌
結(jié)構(gòu):菌絲和孢子,菌絲:分為營養(yǎng)菌絲、氣中菌絲、生殖菌絲;孢子:是真菌的繁殖體。結(jié)構(gòu):細胞壁外成分;細胞壁;隔膜;其他結(jié)構(gòu)。
25:真菌培養(yǎng)特性。答:最常用的培養(yǎng):沙保弱培養(yǎng)基。溫度:多數(shù)都在22 ~ 28oC,但深部感染真菌最適溫度為37oC,pH4.0 ~ 6.0病原菌通常生長緩慢,1~4周。
26:真菌繁殖方式。答:①無性生殖:①由菌絲斷裂形成新個體②細胞直接分裂產(chǎn)生子細胞③產(chǎn)生芽生孢子④產(chǎn)生孢子囊孢子和分生孢子②有性生殖:指經(jīng)過兩性細胞配合產(chǎn)生新個體的繁殖方式。
27:真菌抵抗力答:①對干燥、陽光、紫外線及常用消毒劑有強抵抗力②不耐熱,菌絲與孢子60℃ 1小時均可殺死③2﹪石炭酸、10%甲醛、0.1%升汞、2.5%碘酊敏感④抗真菌藥物:菌集團。
純培養(yǎng)基:挑取一個菌落,移種到另一培養(yǎng)基中,生長出來的細菌均為純種。
毒性噬菌體:在宿主菌細胞內(nèi)噬菌體增殖產(chǎn)生子代噬菌體,宿主菌被裂解,形成溶菌性周期。溫和噬菌體:噬菌體基因與宿主菌染色體整合,成為前噬菌體,噬菌體DNA能隨細菌DNA復(fù)制而復(fù)制,并隨細菌的分裂而傳到子代細菌的基因組中,變成溶原性細菌,形成溶原性周期。前噬菌體:整合在細菌染色體上的噬菌體基因。轉(zhuǎn)座子:細菌基因組中的一段DNA序列,可以在染色體、質(zhì)粒或噬菌體之間自行移動的遺傳成分,伴隨轉(zhuǎn)座子的移動,會出現(xiàn)插入突變。基因轉(zhuǎn)移:遺傳物質(zhì)由供體菌轉(zhuǎn)入受體菌的過程為基因轉(zhuǎn)移。
重組:轉(zhuǎn)移的基因與受體菌DNA整合在一起稱為重組,重組使受體菌獲得供體菌的某些性狀。轉(zhuǎn)化:細菌通過性菌毛相互連接溝通,將質(zhì)粒或染色體等遺傳物質(zhì)從供體菌轉(zhuǎn)移給受體菌的過程。
接合:是受體菌直接攝取供體菌DNA片段,從而獲得新的遺傳性狀的過程。
轉(zhuǎn)導(dǎo):以噬菌體為載體將供菌的DNA片段轉(zhuǎn)移到受菌體內(nèi)使受菌獲得供菌的部分遺傳性狀。溶原性轉(zhuǎn)換:某些前噬菌體可導(dǎo)致細菌基因型和性狀發(fā)生改變,例如白喉棒狀桿菌產(chǎn)生白喉毒素的機理,溫和噬菌體感染細菌時,其基因可整合于宿主菌染色體中,使宿主菌獲得噬菌體基因賦予的新的性狀,稱溶原性轉(zhuǎn)換。原生質(zhì)體融合:將兩種不同的細菌經(jīng)溶菌酶或青霉素等處理,失去細胞壁成為原生質(zhì)體后進行融合的過程。融合后的染色體之間發(fā)生重組。病毒的自我復(fù)制:以病毒核酸為模板,經(jīng)過復(fù)雜的生化過程,復(fù)制子代病毒的核酸并通過轉(zhuǎn)錄翻譯產(chǎn)生病毒蛋白質(zhì),裝配成熟后釋放到細胞外,這種增殖方式稱為病毒的自我復(fù)制。頓挫感染:被病毒侵入的細胞如不能為病毒增殖提供必需成分,則病毒不能合成本身成分,或能合成但不能組裝和釋出有感染性的病毒顆粒。非容納細胞與容納細胞
缺陷病毒:病毒基因組不完整或某一基因位點改變,不能正常增殖,不能復(fù)制出完整有感染性的病毒顆粒,此病毒即缺陷病毒。缺陷病毒+輔助病毒?完成復(fù)制
干擾現(xiàn)象:當(dāng)兩種病毒感染同一宿主細胞時,發(fā)生一種病毒的增殖抑制另一種病毒增殖的現(xiàn)象。某些病毒感染細胞時不出現(xiàn)CPE或其他易于測出的變化(如HAd),但能干擾其后感染的另一病毒的增殖,從而阻抑后者所特有的CPE 芽孢:某些細菌在一定環(huán)境條件下,胞質(zhì)脫水濃縮,在菌體內(nèi)部形成的一個圓形或卵圓形小體。
正常菌群:正常人的體表和與外界相通的眼結(jié)膜,口腔、鼻腔、腸道、泌尿生殖道等腔道粘膜中的不同種類和數(shù)量及對人體無害而有益的微生物。正常微生物群通稱為正常菌群
細菌群體:細菌附著在有生命或無生命的材料表面后,由細菌及其所分泌的胞外多聚物共同組成的呈膜狀的細菌群體。機會性感染:由正常菌群在機體免疫功能低下、寄居部位改變、菌群失調(diào)等特定條件下引起的感染。
毒力:致病性的強弱程度。
侵襲素:某些細菌的基因編碼一些具有侵襲功能的蛋白多肽,促進該病原菌向鄰近組織擴散甚至介導(dǎo)進入鄰近黏膜上皮細胞內(nèi)。
包涵體:細胞漿或細胞核內(nèi)出現(xiàn)光鏡下可見的斑塊狀結(jié)構(gòu)
G+ 菌:①肽聚糖:聚糖骨架,四肽側(cè)鏈,五肽交聯(lián)橋,三維立體②磷壁酸:重要表面抗原,與粘附致病有關(guān),加強穩(wěn)定細胞壁G-菌:①肽聚糖:聚糖骨架,四肽側(cè)鏈組成二維結(jié)構(gòu), ②外膜(脂蛋白、脂質(zhì)雙層、脂多糖組成)功能:屏障結(jié)構(gòu)LPS是G-菌的內(nèi)毒素。細胞壁結(jié)構(gòu)異同:G+菌/G-菌--強度:較堅韌/較疏松--厚度:厚20-80nm/薄10-15nm--肽聚糖層數(shù):多可達50層/少,1-2層--肽聚糖結(jié)構(gòu):聚糖骨架,四肽側(cè)鏈,五肽交聯(lián)橋,三維立體/聚糖骨架,四肽側(cè)鏈,二維平面--脂類含量/少/多--磷壁酸:有/無--外膜:無/有,由脂蛋白、脂質(zhì)雙層、脂多糖組成3:細菌L型,特殊結(jié)構(gòu)種類、化學(xué)組成、抗原性及意義?答:定義:細菌細胞壁的肽聚糖結(jié)構(gòu)受理化或生物因素直接破壞或合成被抑制,這種細胞壁受損的細菌在高滲環(huán)境下仍可存活,稱細菌細胞壁缺陷型或L型。種類:G+菌細胞壁缺失后,僅有胞膜,稱原生質(zhì)體,G--菌肽聚糖層受損,尚有外膜,稱原生質(zhì)球。抗原性及意義:高度多形性,大小不一;大多染成G-;高滲低瓊脂含血清培養(yǎng)基—油煎蛋樣菌落;去除誘因后,有些可回復(fù)為原菌;某些L型仍有致病性,引起慢性感染。作用于胞壁的抗菌性藥對L型感染治療無效
4:細菌的特殊結(jié)構(gòu)?答:①莢膜:多糖或多肽的多聚體。功能a抗吞噬b黏附作用c抗有害物質(zhì)的損傷d有抗原性,用于細菌的鑒定和分型②鞭毛:蛋白質(zhì),由基礎(chǔ)小體絲狀體鉤狀體組成,高度抗原性。功能a是細菌的運動器官b某些細菌的鞭毛與致病性有關(guān)c根據(jù)鞭毛的動力和鞭毛的抗原性可用以細菌的鑒別和分類③菌毛:由亞單位菌毛蛋白構(gòu)成。功能a黏附作用b傳遞遺傳物質(zhì)④芽孢:生產(chǎn)芽孢的細菌都是革陽菌。功能:a增強抵抗力b不直接致病c鑒定。
5:細菌的遺傳物質(zhì)?答:細菌染色體,質(zhì)粒,噬菌體:
6:基因轉(zhuǎn)移與重組方式的種類及定義?答:定義:基因轉(zhuǎn)移:遺傳物質(zhì)由供體菌轉(zhuǎn)入受體菌的過程為基因轉(zhuǎn)移。重組:轉(zhuǎn)移的基因與受體菌DNA整合在一起稱為重組,重組使受體菌獲得供體菌的某些性狀。分類:轉(zhuǎn)化,接合,轉(zhuǎn)導(dǎo),融合,轉(zhuǎn)換.【表格】類型:基因來源/轉(zhuǎn)移方式--轉(zhuǎn)化:供菌游離的DNA片段/直接攝入--接合:供菌質(zhì)粒DNA/ 性菌毛--轉(zhuǎn)導(dǎo):供菌任意DNA或噬菌體與供菌特定DNA/噬菌體--融合:兩菌原生質(zhì)體的DNA/融合--轉(zhuǎn)換:溫和噬菌體/吸附穿入
7:噬菌體及其相關(guān)概念。答:1)毒性噬菌體:在宿主菌細胞內(nèi)噬菌體增殖產(chǎn)生子代噬菌體,宿主菌被裂解,形成溶菌性周期。2)溫和噬菌體:噬菌體基因與宿主菌染色體整合,成為前噬菌體,噬菌體DNA能隨細菌DNA復(fù)制而復(fù)制,并隨細菌的分裂而傳到子代細菌的基因組中,變成溶原性細菌,形成溶原性周期。
8:細菌生長繁殖的條件?答:營養(yǎng)物質(zhì)/酸堿度 多數(shù)病原菌最適pH為7.2~7.6/溫度 多數(shù)病原菌生長最適溫度為37℃/氣體 據(jù)代謝時對分子氧的需要與否,專性需氧菌、微需氧菌、兼性厭氧菌、專性厭氧菌/滲透壓。
9:細菌群體的生長繁殖?答:生長曲線:一定數(shù)量的細菌接種到定量的液體培養(yǎng)基中,連續(xù)定時取樣測定活菌數(shù)量,以培養(yǎng)時間為橫坐標(biāo),以活菌數(shù)的對數(shù)為縱坐標(biāo)作圖,得到的一條曲線。遲緩期:適應(yīng)階段。對數(shù)期:對抗生素敏感,細菌鑒定選此期。穩(wěn)定期:代謝產(chǎn)物形成(如外毒素、抗生素、芽胞等)。衰亡期:菌體細胞呈現(xiàn)多種形態(tài)。
10:按細菌對氧需要的分類?答:據(jù)代謝時對分子氧的需要與否,專性需氧菌、微需氧菌、14:雙鏈DNA病毒的復(fù)制周期?答:vDNA(RNA聚合酶)→早期mRNA(翻譯)→早期蛋白(酶)→ vDNA(酶)子代DNA →? mRNA?→結(jié)構(gòu)蛋白.→子代DNA+結(jié)構(gòu)蛋白→子代病毒。簡要過程:吸附,穿入,脫殼,生物合成,組裝、成熟與釋放。
15:頓挫病毒,缺陷病毒的概念?答:頓挫病毒:被病毒侵入的細胞如不能為病毒增殖提供必需成分,則病毒不能合成本身成分,或能合成但不能組裝和釋出有感染性的病毒顆粒。非容納細胞與容納細胞。缺陷病毒:病毒基因組不完整或某一基因位點改變,不能正常增殖,不能復(fù)制出完整有感染性的病毒顆粒,此病毒即缺陷病毒。缺陷病毒+輔助病毒=完成復(fù)制 16:細菌的感染與致病。答:感染:在一定條件下,微生物與機體相互作用并導(dǎo)致機體產(chǎn)生不同程度的病理過程。★
17:細菌的毒力比較,外毒素與內(nèi)毒素生物學(xué)特性。答:【表格】種類:內(nèi)毒素★外毒素。來源:G-菌★G+菌部分G-菌。編碼基因:染色體基因★質(zhì)粒或前噬菌體或染色體基因。存在部位:細胞壁成分、細菌裂解后釋出★活菌分泌或細菌溶解后散出。化學(xué)成分:脂多糖★蛋白質(zhì)。穩(wěn)定性:好(160℃2~4h才破壞)★差(60~80 ℃30m可破壞)。毒性作用:弱、各種內(nèi)毒素作用大致相同★強、對機體組織器官有選擇性。抗原性:弱,甲醛處理后不能形成類毒素★強,能刺激機體形成抗毒素,經(jīng)甲醛脫毒后能形成類毒素。
18:細菌感染的類型答:①不感染②隱性感染③潛伏感染④顯性感染:急慢性感染;局部、全身感染⑤帶菌狀態(tài)。
19:病毒感染類型。答:①隱性感染②顯性感染:急性病毒感染:潛伏期短,發(fā)病急,數(shù)日或數(shù)周回復(fù),病原消滅型感染。持續(xù)性病毒感染:慢性病毒感染;潛伏性病毒感染;慢發(fā)病毒感染。
20:細菌的致病機制。答:細菌的致病性強弱取決于毒力,細菌的毒力因子:①侵襲力:致病菌突破宿主生理屏障,進入機體并在體內(nèi)定植、繁殖和擴散的能力包括黏附素、莢膜和微莢膜、侵襲性物質(zhì)②毒素:細菌產(chǎn)生的損傷宿主引起生理功能紊亂的毒性物質(zhì),包括內(nèi)毒素和外毒素。
21:正常菌群的生理作用。答:①生物拮抗:競爭粘附(占位性保護)作用;產(chǎn)生有害代謝物質(zhì);營養(yǎng)競爭②營養(yǎng)作用③免疫作用④抑癌作用⑤抗衰老作用。
22:病毒分離鑒定方法及病毒在培養(yǎng)細胞中的增殖的指標(biāo)。答:病毒的分離:①動物接種②雞胚培養(yǎng);流感病毒初次分離接種于羊膜腔;流感病毒的再培養(yǎng)接種于尿囊腔③組織培養(yǎng)④細胞培養(yǎng) — 病毒分離鑒定中最常用的方法單層細胞培養(yǎng);原代細胞培養(yǎng);二倍體細胞培養(yǎng);傳代細胞培養(yǎng)。指標(biāo):1)細胞的變化①細胞病變效應(yīng):有些病毒在細胞內(nèi)增殖時引起的特有的細胞病變,如細胞變圓、聚集、壞死、溶解或脫落②多核巨細胞形成:有些病毒如麻疹病毒、巨細胞病毒等作用于細胞膜,使鄰近的細胞融合,形成多核巨細胞③胞質(zhì)或核內(nèi)包涵體的形成狂犬病病毒、巨細胞病毒。2)紅細胞吸附流感病毒等感染細胞后,由于細胞膜上出現(xiàn)了血凝素,具有吸附脊椎動物紅細胞的能力,這一現(xiàn)象稱為紅細胞吸附。常用來鑒定具有血凝素的黏病毒或副黏病毒的增殖3).紅細胞凝集檢測含血凝素病毒的方法4)干擾現(xiàn)象5)空斑形成試驗。
23:病毒成份的檢測(抗原、核酸檢測)答:1.病毒抗原的檢測2.病毒核酸的檢測
24:真菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)(單細胞和多細胞真菌)。
灰黃霉素、制霉菌素B、二性霉素B、氟康唑和酮康唑;對抗生素不敏感。
28:抗菌藥物的種類與作用機制。答:殺菌藥和抑菌藥。機制:①抑制細菌細胞壁的合成②抑制細菌
細胞膜功③抑制細菌蛋白質(zhì)合成④抑制細菌核酸合成。29:細菌耐藥的機制。答:產(chǎn)生鈍化酶;細胞通透性的改變;靶位結(jié)構(gòu)的改變;建立代謝旁路;代謝酶分子的改變
30:醫(yī)院感染的定義。答:由醫(yī)院的病原生物或其毒素導(dǎo)致的局部或全身感染性疾病。
31:細菌分離培養(yǎng)和鑒定、生化試驗、血清學(xué)試驗?答:細菌分離培養(yǎng)和鑒定:原則上應(yīng)對所有送檢標(biāo)本做分離培養(yǎng),以便獲得單個菌落后進行純培養(yǎng),從而對細菌做進一步的生物學(xué)、免疫學(xué)、致病性或細菌的藥物敏感性等方面的檢查,最終獲得確切的報告。生化試驗:得到細菌的純培養(yǎng)物后,用糖發(fā)酵試驗,吲哚試驗,硝酸鹽還原實驗等對細菌的酶系統(tǒng)和其代謝產(chǎn)物的檢查,是鑒別細菌的重要方法之一。血清學(xué)實驗:利用含已知的特異性抗體的免疫血清,對細菌進行群和型的鑒別。
微生物種類名稱★生物學(xué)性狀★致病物質(zhì)、致病機理及所致疾病
破傷風(fēng)梭菌:菌體細長,芽胞正圓比菌體粗,位于菌體頂端菌體鼓槌狀★不發(fā)酵糖類,不分解蛋白質(zhì)。條件:局部傷口需形成厭氧微環(huán)境,傷口窄而深,有泥土或異物污染,大面積創(chuàng)傷,壞死組織多,局部組織缺血,同時有需氧菌或兼性厭氧菌混合感染的傷口。防治原則:特異性預(yù)防:注射破傷風(fēng)類毒素主動免疫;迅速對傷口清創(chuàng)擴創(chuàng),防止形成厭氧微環(huán)境;緊急預(yù)防:TAT(精制破傷風(fēng)抗毒素);治療: 早期足量使用TAT,抗生素。產(chǎn)氣莢膜梭菌:G+粗大桿菌,芽胞位于次極端,橢圓形,直徑小于菌體形成明顯莢膜★血平板:雙層溶血環(huán),代謝十分活躍,牛奶培養(yǎng)基:“洶涌發(fā)酵”現(xiàn)象。增加血管通透性,組織壞死,氣性壞疽,食物中毒,壞死性腸炎。
肉毒梭菌:G+粗短桿菌,芽胞位于次極端,橢圓形,菌體呈網(wǎng)球拍狀,嚴(yán)格厭氧,分型多,生化反應(yīng)復(fù)雜★肉毒毒素,抑制乙酰膽堿釋放,引起運動神經(jīng)末梢失調(diào)→肌肉麻痹;食物中毒,嬰兒肉毒中毒。
支原體:菌落油煎蛋型,高度多形態(tài)型,細胞膜含高度固醇,無細胞壁,對青霉素有抵抗作用★支原體肺炎,病變?yōu)殚g質(zhì)性肺炎,可合并支氣管肺炎。稱為原發(fā)性非典型性肺炎。不規(guī)則發(fā)熱,刺激性咳嗽,頭痛。嬰幼兒病情嚴(yán)重,發(fā)病急,病程長,以呼吸困難為主。有些合并其他系統(tǒng)病變,如循環(huán)系統(tǒng)等。飛沫傳播。立克次體:是一類體積微小,絕大多數(shù)為自身代謝不完善,嚴(yán)格細胞內(nèi)寄生的原核細胞型微生物★流行性斑疹傷寒、地方性斑疹傷寒、恙蟲病、Q熱
衣原體:嚴(yán)格細胞內(nèi)寄生,有獨特發(fā)育周期,能通過細菌濾器,原核細胞型微生物★ 沙眼:感染眼結(jié)膜上皮細胞→增殖,包涵體→局部炎癥→早期流淚、有粘液膿性分泌物、結(jié)膜充血及濾泡增生→后期結(jié)膜瘢痕、眼瞼內(nèi)翻、倒睫以及角膜血管翳引起的角膜損害→影響視力或致盲包涵體結(jié)膜炎、泌尿生殖道感染、沙眼衣原體肺炎、性病淋巴肉芽腫
螺旋體:是一類細長、柔軟、彎曲、運動活潑的原核細胞型微生物基本結(jié)構(gòu)及生物學(xué)形狀與細菌相似★梅毒,人是唯一傳染源,致病物質(zhì)為莢膜樣物質(zhì),透明質(zhì)酸酶;后天通過性接觸傳播或者先天經(jīng)過母體傳播。
第五篇:微生物總結(jié)
第一章、緒論
巴斯得的貢獻:
1、徹底否定了“自生說”
2、免疫學(xué)—預(yù)防接種
3、證實發(fā)酵是由微生物引起的3、巴斯德消毒法
柯赫貢獻:
1、證實炭疽病菌是炭疽病的病原菌
2、發(fā)現(xiàn)了肺結(jié)核病的病原菌
3、提出了證明某種微生物是否為某種疾病病原體的病原菌——柯赫原則
4、固體培養(yǎng)基分離純化微生物的技術(shù)
5、配制培養(yǎng)基
微生物的5大共性:
1、體積小、面積大
2、吸收多、轉(zhuǎn)化快
3生長旺、繁殖快
4、分布廣、種類多
5、適應(yīng)性強、易變異 第二章、微生物的純培養(yǎng)和顯微技術(shù)
一、涂布平板法作用:用于純種分離、篩選菌落、得到單菌落,對一些細菌進行計數(shù) 五區(qū)劃線發(fā)作用:純化菌種、得到單菌落
搖瓶實驗作用:菌種篩選、發(fā)酵實驗、種子培養(yǎng)等 穿刺法的作用:保藏厭氧菌種、研究微生物的動力 之字劃線法的作用:保藏菌種、單菌落的獲取
二、斜面菌種保藏法:保藏期限3個月以內(nèi),沙土管保藏法:保藏期限1~10年主要適用于產(chǎn)孢子的,如芽孢桿菌、放線菌 石蠟油封藏法:保藏期限1~2年
真空冷凍干燥法:保藏期限5~10年,液氮超低溫病結(jié)法:保藏期限5~10年 第三章
一、細胞壁:根據(jù)細胞壁將原核生物分為革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌兩種。
1、革蘭氏陽性菌細胞壁的特點:厚度大(20~80nm)和化學(xué)組分簡單,一般只含90%肽聚糖和10%磷壁酸。
革蘭氏陽性菌的機械阻攔與保護作用有肽聚糖完成。磷壁酸:是結(jié)合在革蘭氏陽性菌細胞壁上的一種酸性多糖,主要成分為甘油磷酸或核糖醇磷酸。
磷壁酸為革蘭氏陽性菌所特有。對于革蘭氏陽性菌而言,抗原性由磷壁酸完成。磷壁酸的主要生理功能:1)、其磷酸分子上較多的負電荷可提高細胞周圍鎂離子的濃度進入細胞后就可以保證細胞膜上一些需鎂離子的合成提高活性 2)儲藏磷元素 3)、增強某些致病菌如A族鏈球菌對宿主細胞的黏連、避免被白細胞吞噬以及補抗體的作用 4)賦予革蘭氏陽性菌以特異的表面抗原 5)可作為噬菌體的特異性吸附受體
6)調(diào)節(jié)細胞自溶素的活力,借以防止細胞自溶而死亡
2、革蘭氏陰性菌:由肽聚糖和外膜組成,外膜中的脂多糖是革蘭氏陰性菌所特有的 外壁層可分為3層:外層為脂多糖層,中層為磷脂層,內(nèi)層為脂蛋白 革蘭氏陰性菌外膜的作用:1)控制細胞透性
2)提高鎂離子濃度 3)決定細胞的抗原性
4)類脂A是類毒素的主要成分
脂多糖:是位于革蘭氏陰性菌細胞壁最外層的一層較厚的類脂多糖物質(zhì),由類脂A、核心多糖和O-特異側(cè)鏈
脂多糖的功能:1)其中類脂A是革蘭氏陰性菌致病物質(zhì)——內(nèi)毒素的物質(zhì)基礎(chǔ) 2)因其負電荷較強,有吸附鎂離子、鈣離子等陽離子以提高其在細胞表面的濃度作用 3)由于LPS結(jié)構(gòu)多變,決定了革蘭氏陰性菌細胞表面抗原決定族 4)是許多噬菌體在在細胞表面的吸附受體 5)具有控制某些物質(zhì)進出細胞的部分選擇性屏障功能
3、革蘭氏染色機制:通過結(jié)晶紫初染和碘液媒染后,在細胞膜內(nèi)形成了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物。革蘭氏陽性菌由于其細胞壁較厚,肽聚糖網(wǎng)層次多和交聯(lián)致密,故與乙醇與丙酮作脫色處理時因失水反而使網(wǎng)孔縮小,再加上它不含類脂,故乙醇處理不會溶出縫隙,因此能把結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物牢牢留在壁內(nèi),使其任呈紫色。反之革蘭氏陰性菌因其細胞壁薄、外膜層的類脂含量高、肽聚糖層薄和交聯(lián)度差,遇脫色劑后,以類脂為主的外膜迅速溶解,薄而松散的肽聚糖網(wǎng)不能阻擋結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物的溶出,因此,通過乙醇脫色后細胞退成無色。這時,再經(jīng)沙黃等紅色染料進行復(fù)染,就使革蘭氏陰性菌呈現(xiàn)紅色,而革蘭氏陽性則保留紫色。
二、芽孢
芽孢:某些細胞在生長發(fā)育后期,在細胞內(nèi)形成一個圓形或橢圓形、厚壁、含水量極低、抗逆性極強的休眠體
芽孢的特點:1)芽孢內(nèi)新陳代謝幾乎停止,處于休眠狀態(tài),但保持潛在萌發(fā)力
2)芽孢不具生殖能力,僅只是一種休眠體 3)抗逆性最強的生命體之一,有抗熱、抗化學(xué)藥物、抗輻射和抗靜水壓能力 4)含水量低,壁厚而致密,通透性差,不易著色,折光性強
5)一個孢子萌發(fā)只產(chǎn)生一個營養(yǎng)狀態(tài)的細胞 芽孢的耐熱機制:芽孢的耐熱性在于芽孢衣對多價陽離子和水分的透性很差和皮層的離子強度很高,從而是皮層產(chǎn)生極高的滲透壓去奪取芽孢核心中的水分,其結(jié)果造成皮層的充分膨脹,而核心部分的細胞質(zhì)卻變得高度失水,因此,導(dǎo)致核心具極強的耐熱性。第四章微生物的營養(yǎng)要求
一、營養(yǎng)物質(zhì):能夠滿足微生物機體生長、繁殖和完成各種生理條件所需的物質(zhì) 營養(yǎng):微生物獲得U和利用營養(yǎng)物質(zhì)的過程
二、1、碳源:是在微生物生長過程中為微生物提供碳素來源的物質(zhì)。為微生物提供碳元素與能量
2、氮源:為微生物提供氮元素來源,只有少數(shù)自養(yǎng)微生物能利用銨鹽、硝酸鹽同時作為氮源與能源(是構(gòu)成細胞中核酸和蛋白質(zhì)的重要元素)氮源的類型:無機氮、有機氮、氣體氮
3、無機鹽:作用:作為酶活性中心的組成部分、維持生物大分子和細胞結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性、調(diào)節(jié)并維持細胞的滲透壓、控制細胞的氧化還原電位和作為某些微生物生長的能源物質(zhì)。
4、生長因子:通常是指那些微生物生長所必需的的且需量很少,但微生物自身不能合成或合成量不足以滿足機體生長需要的有機化合物
5、水:生理功能:1)起到溶劑與運輸介質(zhì)的作用
2)參與細胞內(nèi)一系列的化學(xué)反應(yīng)
3)維持蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子穩(wěn)定的天然構(gòu)象
4)是良好的導(dǎo)熱體,調(diào)節(jié)細胞溫度 微生物的營養(yǎng)類型分類(P84表格)
三、1、培養(yǎng)基的配制原則:1)目標(biāo)明確
2)營養(yǎng)協(xié)調(diào)
3)物理化學(xué)條件適宜
4)原料來源的選擇
2、C多有助于次生物質(zhì)分泌,N多有助于個體生長發(fā)育
3、PH:細菌:7.0~8.0
酵母菌:4.0~6.0
放線菌:8.0~9.0
霉菌:4.0~5.8
4、維持培養(yǎng)基PH的方法:1)加緩沖劑一氫和二氫磷酸鹽的混合物
2)備用堿:CaCO3、CaHCO3 3)弱酸鹽:檸檬酸鹽、乳酸鹽
4)液氨或鹽酸
5、原料來源:1)經(jīng)濟節(jié)約原則:以粗代精、以廢代好、以簡代繁
2)原料來源要廣泛
3)原料藥易處理、處理成本要低
4)原料處理后廢物、廢液、廢氣要少
6、選擇和配制培養(yǎng)基的方法四種:生態(tài)模擬、查閱文獻、精心設(shè)計、實驗比較
四、培養(yǎng)基的分類
1、按成分不同劃分:天然培養(yǎng)基:優(yōu)點為取材方便,營養(yǎng)豐富,種了多樣,配制方便合成培養(yǎng)基:優(yōu)點:組分精確,重復(fù)性好確定:較昂貴,一般用于研究
2、根據(jù)物料狀態(tài)劃分:固體培養(yǎng)基:一般用于進行微生物的分離、鑒定、活菌計數(shù)及菌種保藏半固體培養(yǎng)基:用于觀察微生物的運動特征、分類鑒定及噬菌體效價滴定液體培養(yǎng)基:用于大量培養(yǎng)微生物,研究生理代謝
3、按用途劃分:基礎(chǔ)培養(yǎng)基:用于培養(yǎng)野生型微生物和原養(yǎng)型微生物 加富培養(yǎng)基(營養(yǎng)培養(yǎng)基):在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入某些特殊營養(yǎng)物質(zhì)制成的一類營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基作用一般為分離某種微生物而專門設(shè)計或培養(yǎng)營養(yǎng)要求嚴(yán)謹(jǐn)?shù)漠悩游⑸?鑒別培養(yǎng)基:在培養(yǎng)可中加入某種特殊化學(xué)物質(zhì) 選擇培養(yǎng)基:根據(jù)不同種類微生物的特殊營養(yǎng)需求或?qū)δ撤N化學(xué)物質(zhì)的敏感性不同,在培養(yǎng)基中加入相應(yīng)的特殊營養(yǎng)物質(zhì)或化學(xué)物質(zhì),抑制不需要的微生物的生長,有利于所需要微生物的生長,有利于所需微生物的生長 第五章、微生物代謝
微生物發(fā)酵過程的三個階段:脫氫(電子)、遞氫(或電子)和受氫(或電子)發(fā)酵:是指微生物細胞將有機物氧化釋放的電子直接交給底物本身未完全氧化的某些中間產(chǎn)物,同時釋放能量并產(chǎn)生各種不同的代謝產(chǎn)物
代謝:生命存在的基本特征,是微生物體內(nèi)所進行的全部生化反應(yīng)的總稱。主要由分解代謝和合成代謝兩個過程組成。分解代謝:是指將大分子物質(zhì)降解成小分子物質(zhì),并在這個過程中產(chǎn)生能量(都是氧化反應(yīng))合成代謝:是指細胞利用簡單的小分子物質(zhì)合成復(fù)雜大分子,在這個過程要消耗能量(都是還原反應(yīng))
代謝途徑都是有一系列連續(xù)的酶促反應(yīng)構(gòu)成的
P102~P105EMP HM ED途徑的特點功能以及途徑路線
根據(jù)氧化還原反應(yīng)電子受體的不同可將發(fā)酵和呼吸分為有氧和無氧呼吸兩種 P108 TCA途徑圖
TCA循環(huán)特點:1)氧雖然不直接參與其中反應(yīng),但必需在有氧條件下運行
2)每個丙酮酸產(chǎn)生15個ATP 3)位于一切分解代謝與合成代謝的樞紐地位,可為生物合成提供各種碳價原料
TCA的生理意義:1)為細胞提供能量
2)各種能源物質(zhì)徹底氧化的共同代謝途徑(對于微生物來說)3)物質(zhì)轉(zhuǎn)化樞紐
無氧呼吸:電子受體不是氧氣而是外源無機物與部分簡單小分子有機物
發(fā)酵作用:沒有外源電子受體,底物具有的能量只釋放一小部分,合成少量ATP 三種磷酸化:底物水平磷酸化,高能磷酸化,氧化磷酸化
光合磷酸化的特點:1)光驅(qū)使下電子自菌綠素上逐出后經(jīng)類似呼吸鏈又回到菌綠素
2)產(chǎn)還原力[H]和產(chǎn)ATP分別進行,還原力來自于H2O等無機物
3)不產(chǎn)生氧氣 合成代謝:微生物利用能量代謝所產(chǎn)生的能量、中間代謝產(chǎn)物以及從外界吸收的小分子合成復(fù)雜細胞物質(zhì)的過程
P118~P119 CO2固定路線圖
藍細菌孤單的抗氧化保護機制:1)分化出特殊的還原性異形胞
2)非異形胞藍細菌固氮酶的保護將固氮與光合進行時間上分隔
微生物固氮反應(yīng)6要素:1)ATP的供應(yīng)
2)還原力[H]及傳遞氫載體
3)固氮酶
4)還原底物——氮氣
5)鎂離子
6)嚴(yán)格厭氧微環(huán)境
聯(lián)合固氮菌:指必需生活在植物根莖葉,動物腸道等處才能進行固氮的微生物,不形成類似根瘤的共生結(jié)構(gòu) 微生物的代謝調(diào)節(jié)主要有兩種類型:一是酶活性的調(diào)節(jié),即調(diào)節(jié)已經(jīng)存在的酶分子的活性,是酶在化學(xué)水平的變化。另一類是酶合成的調(diào)節(jié),即調(diào)節(jié)酶分子的合成量,是遺傳水平發(fā)生的變化 第六章
一、生長曲線延滯期
特點:1)生長速率常數(shù)為零,細胞數(shù)目不增加或增加很小
2)細胞形態(tài)變大或 增長許多桿菌可長成絲狀
3)合成代謝十分活躍,核糖體、酶類和ATP 的合成加速產(chǎn)生各種誘導(dǎo)酶
4)對外界不良條件如NaCl溶液,溫度和抗 生素等理化因素反應(yīng)敏感
出現(xiàn)原因:1)微生物接種到一個新的環(huán)境,暫缺乏足夠的能量和必需的生長因子
2)“種子”老化即處于未對數(shù)期或種子未活化
3)接種時損傷
影響其長短的因素與實踐意義:1)接種齡:對數(shù)期種子延滯期短,延滯期或衰亡期的種子延滯期較長
2)接種量:接種量大,延滯期較短,接種量小,延滯期較長
3)培養(yǎng)基成分:培養(yǎng)基成分豐富的延滯期較短,培養(yǎng)基成分與種子培養(yǎng)基一致的延滯期較短
二、生長曲線指數(shù)期
特點:1)生長速率最快,細胞呈指數(shù)增長
2)生長速率恒定
3)代謝旺盛,細胞組分平衡發(fā)展
4)群體的生理特性一致
影響指數(shù)期的意義:1)菌種:不同菌種代時差異極大
2)營養(yǎng)成分:營養(yǎng)越豐富代時越短
3)營養(yǎng)物濃度:影響微生物的生長速率和生長總量
4)培養(yǎng)溫度:影響微生物的生長速率和生長總量
指數(shù)期的實踐意義:1)是代謝、生理研究的良好材料
2)是增殖噬菌體的最適宿主菌齡
4)革蘭氏染色是采用此期微生物
生長曲線穩(wěn)定期特點:1)活細胞總數(shù)維持不變即新增殖的細胞數(shù)與衰亡的細胞數(shù)相等,菌體總數(shù)達到最高點
2)細胞生長速率為零
3)細胞生理上處于衰老,代謝活力鈍化,細胞成分合成緩慢,革蘭氏染色發(fā)生變化
三、生長曲線衰亡期
特點:細胞以指數(shù)速率死亡,有時細胞速率的降低是由于抗性細胞的積累,細胞變形退化,有的發(fā)生自溶,革蘭氏染色發(fā)生變化
影響衰亡期的因素及實踐意義:1)與菌種的遺傳特性有關(guān):有些細菌的培養(yǎng)經(jīng)歷所有的各個生長時期,幾天以后死亡,有細菌培養(yǎng)基個月乃至幾年以后任然有一些貨細胞
2)與是否產(chǎn)芽孢有關(guān):產(chǎn)芽孢的細菌更易幸存下來
3)與營養(yǎng)物質(zhì)和有毒物質(zhì)有關(guān):補充營養(yǎng)和能源,以及中和環(huán)境毒性,可以減緩死亡細胞的死亡速率,延長細菌培養(yǎng)物的存貨時間
四、分批培養(yǎng):是指將微生物置于一定容積的的培養(yǎng)基中,經(jīng)過生長培養(yǎng),最后一次收獲培養(yǎng)方式 連續(xù)培養(yǎng):在一個恒定容積的的流動系統(tǒng)中培養(yǎng)微生物,一方面以一定速率加入新的培養(yǎng)基,另一方面又以相同的速率流出培養(yǎng)物(菌體和代謝產(chǎn)物)
連續(xù)發(fā)酵的優(yōu)點:1)高效
2)產(chǎn)品質(zhì)量較穩(wěn)定
3)節(jié)約了大量動力、人力、水和蒸汽,且使水、汽、電的負荷均衡合理
連續(xù)發(fā)酵的缺點:1)菌種易退化
2)易污染雜菌 3)營養(yǎng)物質(zhì)的利用率一般 同步生長:就是指在培養(yǎng)物中所有微生物細胞都同一生長階段,并都能同時分裂的生長方式 同步培養(yǎng)法包括誘導(dǎo)法與選擇法
誘導(dǎo)法:是采用物理、化學(xué)一男子使微生物生長到某一階段而停下來,使所有細菌都達到這個階段時再使其生長 恒濁器:根據(jù)培養(yǎng)器內(nèi)微生物的生長密度并借光電控制系統(tǒng)來控制培養(yǎng)液流速,以取得菌體密度高,生長速度恒定的微生物細胞的連續(xù)培養(yǎng)
恒化器:與恒濁器相反,是一種設(shè)法使培養(yǎng)液流速保持不變 最高生長速率條件下進行生長繁殖的一種連續(xù)培養(yǎng)裝置 裝置
控制對象
培養(yǎng)基
培養(yǎng)基流速
生長速率
產(chǎn)物
應(yīng)用范圍
恒濁器
菌體密度(內(nèi)控制)
無限制生長因子
不恒定
最高速率
大量菌體或與菌體平行的代謝產(chǎn)物
生產(chǎn)為主
恒化器
培養(yǎng)基流速(外控制)
有限制生長因子
恒定
低于最高速率
不同生長速率的菌體、并使微生物始終在低于其
實驗室為主
五、防腐:是在某些化學(xué)物質(zhì)或物理因子作用下防止或抑制微生物生長的一種措施,它能防止食物腐敗或防止其他物質(zhì)霉變 消毒:利用某種殺死或滅活物質(zhì)或物體中所有微生物的一種措施,它可以起到防止感染或傳播的作用
滅菌:利用某種方法殺死物體中包括芽孢在內(nèi)的所有微生物的一種措施 第七章
1、病毒的特點:1)形態(tài)及其微小,一般能通過細菌濾器必須自電鏡下才能觀察
2)沒有細胞構(gòu)造,主要成分僅為核酸與蛋白質(zhì)
3)每一種病毒致含有一種核酸
DNA和RNA 4)依靠自身的核酸進行復(fù)制,一病毒的核酸和蛋白質(zhì)等原件實現(xiàn)裝配,實現(xiàn)繁殖
5)嚴(yán)格細胞內(nèi)寄生,缺乏完整的酶和產(chǎn)能系統(tǒng),只能利用宿主細胞的現(xiàn)成的代謝系統(tǒng)合成病毒自身的核酸和蛋白質(zhì)
6)在離體條件下,能以無生命力的大分子狀態(tài)存在,并可長期保持器侵染力
7)對一般抗生素不敏感,但對干擾素敏感
8)有些病毒的基因可以整合到宿主的基因中去
2、病毒與活細胞的區(qū)別:1)結(jié)構(gòu)簡單,沒有細胞結(jié)構(gòu)
2)幾乎所有的毒粒中只有DNA或RNA一種類型的核酸
3)在細胞外不能增殖
3、得到一步生長曲線的實驗:二院培養(yǎng)系統(tǒng):1)低濃度病毒宿主細胞(給幾分鐘時間侵染)2)高倍稀釋病毒與細胞的培養(yǎng)物
3)保濕培養(yǎng)
4)不同時間取樣,涂布平板,得到效價
5)以時間為橫坐標(biāo),病毒濃度為縱坐標(biāo)繪圖
4、烈性噬菌體:感染宿主后增殖裂解宿主 溶原性噬菌體(溫和性細菌):感染后大多數(shù)可整合到宿主基因中少數(shù)以染色體外獨立存在
5、病毒分為真病毒和亞病毒,亞病毒又分為類病毒、衛(wèi)星病毒、衛(wèi)星RNA、朊病毒 類病毒:是一種只包含RNA的病毒,只在植物中出現(xiàn),分質(zhì)量極小,不能編碼蛋白質(zhì) 衛(wèi)星病毒:寄生于與之無關(guān)的輔助病毒的基因產(chǎn)物的病毒 衛(wèi)星RNA:是指必需依賴一些輔助病毒進行復(fù)制的小分子單鏈RNA,他們被包藏在輔助病毒的殼體中
朊病毒:是一類能引起哺乳動物亞急性海綿樣腦病的病原因子 第八章
P204頁Griffith轉(zhuǎn)化實驗等3個實驗
基因組:是指位于細菌或細胞中的所有基因 大腸桿菌基因組的特點:1)遺傳信息的連續(xù)性
2)功能相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因組成操縱子結(jié)構(gòu)
3)結(jié)構(gòu)基因的單拷貝及rRNA基因的多拷貝
4)基因組重復(fù)序列少而短
質(zhì)粒:是一種獨立于染色體外,能進行自主復(fù)制的細胞質(zhì)遺傳因子,主要存在于各種微生物中
轉(zhuǎn)座子:是位于染色體或質(zhì)粒上的一種能改變自身位置的DNA序列,廣泛分布于原核和真核細胞中
質(zhì)粒的主要類型:致育因子、抗性因子、Col質(zhì)粒、毒性質(zhì)粒、代謝質(zhì)粒、隱秘質(zhì)粒
致育因子:又稱F質(zhì)粒,其大小約100kb,這是最早發(fā)現(xiàn)的一種與大腸桿菌的有性生殖現(xiàn)象(結(jié)合作用)有關(guān)的質(zhì)粒
抗性因子:是另一類普遍而重要的質(zhì)粒,主要包括抗藥性和抗重金屬兩大類,簡稱R質(zhì)粒 Col質(zhì)粒:該質(zhì)粒含有編碼大腸菌素的基因,大腸菌素是一種細菌蛋白,只殺死近緣且不含Col質(zhì)粒的菌株,而宿主不受其產(chǎn)生的細菌素的影響
毒性質(zhì)粒:致病菌中攜帶的能引起致病性的質(zhì)粒,這些質(zhì)粒具有編碼毒素的基因 代謝質(zhì)粒:攜帶有能降解某些基質(zhì)的酶的基因的質(zhì)粒
隱秘質(zhì)粒:不顯示任何表型效應(yīng),它們的存在只有通過物理方法檢測出來 原核生物中對的轉(zhuǎn)座因子有3種類型:插入順序(IS)、轉(zhuǎn)座子(Tn)、病毒(Mu)轉(zhuǎn)座的遺傳學(xué)效應(yīng):插入突變、產(chǎn)生染色體畸變、基因的移動和重排
基因突變:一個基因內(nèi)部遺傳結(jié)構(gòu)或DNA序列的任何改變包括一對或幾對堿基的缺失、插入或置換,而導(dǎo)致的遺傳變化
堿基變化對遺傳信息改變的四種類型:同義突變,錯義突變,無義突變,移碼突變 同義突變:是指某個堿基的變化沒有改變產(chǎn)物氨基酸序列的密碼子變化
錯義突變:是指堿基序列的改變引起了產(chǎn)物氨基酸的改變(可能為致死突變)無義突變:是指某個堿基的改變,使代表某種氨基酸的密碼子變?yōu)榈鞍踪|(zhì)的合成的終止密碼子,蛋白質(zhì)的合成提前終止,產(chǎn)生短截的蛋白質(zhì)
移碼突變:由于DNA序列中發(fā)生1~2個核苷酸的缺失或插入,使翻譯的閱讀框發(fā)生改變,從而導(dǎo)致改變位置以后的氨基酸序列的完全變化(一般為致死突變)
表型變化的突變型:營養(yǎng)缺陷型,抗藥性突變型,條件致死突變型,形態(tài)突變型 營養(yǎng)缺陷型:缺乏合成其生存所必需的營養(yǎng)物的突變型,只有從周圍環(huán)境或培養(yǎng)基中獲得這些營養(yǎng)或前體物才能生長 影印平板P218 抗藥性突變型:是由于基因突變使菌株對某種或某幾種藥物,特別是抗生素產(chǎn)生抗性的一種突變型
條件致死突變型:是指在某一條件下具有致死效應(yīng),而在另一條件下沒有致死效應(yīng)的突變型 形態(tài)突變型:是指造成形態(tài)改變的突變型(包括菌落形態(tài)、顏色一件噬菌斑形態(tài))
自發(fā)突變的緣由:1)NDA復(fù)制過程產(chǎn)生的錯誤
2)堿基互變異構(gòu)體的相互轉(zhuǎn)變
3)轉(zhuǎn)座子的隨機插入基因
自發(fā)突變的特性:1)非對應(yīng)性
2)稀有性
3)規(guī)律性
4)獨立性
5)遺傳和回復(fù)
6)可誘變性
誘發(fā)突變:堿基類似物、插入染料、直接與DNA其化學(xué)反應(yīng)的誘變劑、輻射和熱、生物誘變因子
DNA損傷修復(fù):光復(fù)活作用、切除修復(fù)、重組修復(fù)、SOS修復(fù) 光復(fù)活:由phr基因編碼的光解酶進行
切除修復(fù):又稱暗修復(fù),該修復(fù)系統(tǒng)除了堿基錯誤配對和單核苷酸插入不能修復(fù)外,幾乎其他DNA損傷均可修復(fù),是細胞內(nèi)主要修復(fù)系統(tǒng)
重組修復(fù):是一種越過損傷而進行的修復(fù),這種修復(fù)不將損傷堿基除去
SOS修復(fù):是DNA分子受到較大范圍的重大損傷時誘導(dǎo)產(chǎn)生的一種應(yīng)急反應(yīng) P226~227 高頻重組菌等
轉(zhuǎn)導(dǎo):是由病毒介導(dǎo)的細胞間進行遺傳交換的一種方式
供體DNA進入受體的命運:1)發(fā)生穩(wěn)定的轉(zhuǎn)導(dǎo)子
2)流產(chǎn)轉(zhuǎn)導(dǎo):即不被降解,又不被整合,也不被復(fù)制
3)外源DNA被降解,轉(zhuǎn)導(dǎo)失敗
遺傳轉(zhuǎn)化:是指同源或異源的游離DNA分子被自然或人工感受態(tài)細胞攝取,并得到表達的水平方向的基因轉(zhuǎn)移過程
4個影響供體DNA與受體細胞間的最初相互作用:1)轉(zhuǎn)化片段的大小
2)形態(tài):雙鏈DNA 3)濃度:在在臨界值出現(xiàn)之前成正比
4)生理狀態(tài):感受器——剛停止DNA合成 微生物育種:誘變育種、代謝育種、體內(nèi)基因組育種 代謝育種:改變代謝途徑、擴展代謝途徑、構(gòu)建新的代謝途徑 體內(nèi)基因組育種:原生質(zhì)體融合,雜交育種
融合子的判別:1)親本遺傳標(biāo)記的互補的2)親本滅活后性狀的恢復(fù)
3)具有雙親本的熒光標(biāo)記 第九章
順式作用元件:位于基因的旁側(cè),可以調(diào)控影響基因表達的核酸序列。其本身并不編碼蛋白質(zhì)
反式作用因子:通常為蛋白質(zhì)或RNA,其特征是可以合成并擴散到目標(biāo)場所發(fā)揮作用 正調(diào)控:控制因子通過與啟動子原件結(jié)合來激活基因的表達 負調(diào)控:抑制物與操縱基因結(jié)合起來阻止基因表達 P248 操縱子的結(jié)構(gòu)
P249圖
P250 圖
啟動子:是RNA聚合酶和CAP的結(jié)合位點,控制著轉(zhuǎn)錄的起始,一個啟動子可以啟動多個基因的表達
操縱基因:DNA上的一個結(jié)合位點,阻抑物能與之結(jié)合抑制相鄰啟動子的起始轉(zhuǎn)錄,操縱基因不表達任何東西 終止子:控制轉(zhuǎn)錄結(jié)束
轉(zhuǎn)錄因子:轉(zhuǎn)錄起始過程中RNA聚合酶所需要的輔助因子
轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控:1)DNA的結(jié)構(gòu)
2)RNA聚合酶的功能
3)蛋白質(zhì)因子及其他小分子配基的相互作用