第一篇:微生物總結資料
1、微生物:指個體微小、結構簡單、大多數單細胞,少數多細胞,還有些沒有細胞結構的低等生物。
2、轉導:通過完全缺陷或部分缺陷噬菌體的媒介,把供體細胞的DNA小片段攜帶到受體細胞中,通過交換與整合,從而使后者獲得前者部分遺傳性狀的現象。
3、轉化:受體菌直接吸收了來自供體菌的DNA片段,通過交換與整合,從而獲得部分新的遺傳性狀的現象。
4、普遍性轉導: 噬菌體可以轉導供體菌染色體的任何部分到受體細胞中的轉導過程。
5、局限性轉導: 通過部分缺陷的溫和噬菌體把供體菌的少數特定基因攜帶到受體菌,并與后者的基因組整合;重組,形成轉導子的現象。
6、接合:供體菌通過性菌毛與受體菌直接接觸,把F質粒或其攜帶的不同長度的核基因組片段傳遞給后者,使后者獲得若干新遺傳性狀的現象。
7、轉染:指用提純的病毒核酸去感染其宿主細胞或其原生質體,可增殖出一群正常病毒后代的現象
8、基因突變:一個基因內部遺傳結構或DNA序列的任何改變,而導致的遺傳變化就稱基因突變。
9、非特異性免疫:機體的一般生理防衛功能,在種系發育過程中形成的,由先天遺傳而來,可防衛任何外界異物對機體的侵入而不需要特殊的刺激或誘導。
10、特異性免疫:機體在生命過程中接受抗原性異物刺激,如微生物感染或接種疫苗后產生的,針對性排除或摧毀,滅活相關抗原的防御能力,又稱獲得性免疫
11、抗原:能誘導機體產生體液抗體和細胞免疫應答,并能與抗體和致敏淋巴細胞在體內外發生特異結合反應的物質
12、抗體:機體在抗原物質刺激下所形成的一類能與抗原特異結合的血清活性成分稱為抗體,又稱免疫球蛋白
13、生長曲線:將少量微生物細胞接種至恒體積的液體培養基中,定時測定含菌數,以時間為橫坐標,以菌數對數為縱坐標繪制的曲線稱為生長曲線。
14、同步培養:采用物理或者化學的方法使微生物處于比較一致的生長發育階段上的培養方法叫同步培養。例如利用孔徑大小不同的濾膜,將大小不同的細胞分開培養,可使同一大小的細胞處于同一生長階段。
15、營養缺陷型:通過誘變產生的,在某些物質的合成能力上出現缺陷、因而必須加入相應物質才能生長的變異菌株,叫營養缺陷型。
16、溫和噬菌體:侵染細菌細胞后,暫不完成生命周期,通常不引起細菌裂解的噬菌體。
17、外毒素:G+菌一種代謝產物,蛋白質性質,其毒性強,抗原性強,但對理化因子敏感,易失去活性面保持抗原性。
18、內毒素 :革蘭氏陰性菌的細胞壁外層的脂多糖(LPS),因它在活細胞中不分泌到體外,僅在細菌死亡后自溶或人工裂解時才釋放
19、類毒素:利用外毒素對熱和某些化學物質敏感的特點,用0.3-0.4%甲醛處理,使其毒性完全喪失,但仍保持抗原性,這種經處理的外毒素。
20、高頻重組菌株:該細胞的F質粒已從游離態轉變為整合態,當與F-菌株相接合 時,發生基因重組的頻率非常高
21、溶源性: 溫和噬菌體侵入宿主細胞后,由于基因組整合到宿主細胞的基因組上,與宿主細胞 DNA 同步復制,因此,一般情況下不引起宿主細胞裂解,這稱為溶源性。.22、生長因子;微生物生長不可缺少的微量有機物,包括維生素,氨基酸及堿基等。
23、滅菌:指利用某種方法殺死物體中包括芽孢在內的所有微生物的一種措施。滅菌后的物體不再有可存活的微生物。
24、消毒:指利用某種方法殺死或滅活物質或物體中所有病原微生物的一種措施。
25、溶源轉變:是指原噬菌體引起的溶源性細菌除免疫性以外的其他的表型改變,包括溶源菌細胞表面性質的改變和致病性轉變。
26、化能異養型:以有機碳化合物作為能源,碳源和能源也是有機碳化合物的微生物是化能有機異養型。
27、純培養:只有一種微生物的培養
1、微生物的五大共性(1)體積小、面積大(2)吸收多、轉化快(3)生長旺、繁殖快(4)適應強、易變異(5)分布廣、種類多
其中最基本的特性是體積小,面積大。微生物是一個突出的小體積大面積系統,從而賦予它們具有不同于一切大生物的五大共性,因為一個小體積大面積系統,必然有一個巨大的營養物質吸收面、代謝廢物的排泄面和環境信息的交換面,故而產生了其余四個共性。巨大的營養物質吸收面和代謝廢物的排泄面使微生物具有了吸收多,轉化快,生長旺,繁殖快的特點。環境信息的交換面使微生物具有適應強,易變異的特點。而正是因為微生物具有適應強,易變異的特點,才能使其分布廣,種類多。
2、如何鑒別一固體平板上生長的灰白色菌落是細菌還是酵母菌? 用顯微鏡觀察。
酵母菌:菌落大,鼓,光亮一般貨乳黃色 白色容易挑取
細菌:菌落小,扁平,有特殊結構的表面會有褶皺,糖被,芽孢等,有臭味 3.革蘭氏染色原理是什么?
(本題10分)
答:革蘭氏染色是原生質染色,染色后細胞內形成了深紫色的結晶紫-碘的復合物,而脫色與否則決定于細菌細胞壁的結構和組成,G+ 菌:細胞壁厚,肽聚糖含量高,交聯度大,當乙醇脫色時,肽聚糖因脫水而孔徑縮小,故結晶紫-碘復合物被阻留在細胞內,細胞不能被酒精脫色,仍呈紫色。Gˉ菌:肽聚糖層薄,交聯松散,乙醇脫色不能使其結構收縮,因其含脂量高,乙醇將脂溶解,縫隙加大,結晶紫-碘復合物溶出細胞壁,酒精將細胞脫色,細胞無色,沙黃復染后呈紅色。
4、理化因子對微生物生長的影響。(1)物理因子
A、溫度:為影響微生物生長的重要因素,每種微生物都有三種基本溫度:最低生長溫度、最適生長溫度、最高生長溫度
B、氧:對微生物的生長影響很大,根據微生物和氧的關系,可將微生物分成4類,專性好氧微生物、專性厭氧微生物、兼性好氧微生物、微量氧微生物
C、PH :為影響微生物生長的重要因素,每種微生物都有三種基本PH:最低生長PH、最適生長PH、最高生長PH。
5、根據細菌的不同生長時期的特點安排接種、發酵、化驗檢測以及放罐等生產工序(10分)細菌的生長曲線可分為四個時期:
A、遲緩期:菌種接種后細菌并不立即生長和繁殖,而要經過一段調整和適應。遲緩期細胞質均勻,代謝活力很強,蛋白質和RNA含量增加,菌體積顯著增大。遲緩期末細菌的長度增大,形狀變化較大,此時細菌對熱、化學物質等不良條件的抵抗力減低。
B、對數期:對數期活菌數和總菌數非常接近,細菌的生長速度達到高峰,世代時間最短,細胞的代謝活性比較穩定,酶的活力也高。因此,接種宜選擇處于對數期的細菌接種到相同的培養基上,并在同一溫度下培養,細菌仍以原來的生長速度繼續其對數生長,而不會出現遲緩期,因而縮短了培養時間。另外,對數期的細胞也是化驗檢測的好材料。C、穩定期:在生長過程中,營養物質不斷消耗及代謝毒物積累,致使細菌分裂的速率降低,世代時間延長,細胞活力減退。此時群體中細菌的繁殖速度與死亡速度相等,活菌數目保持相對穩定,細胞積累次級代謝產物達最大量。
D、死亡期:細菌的群體衰落,死亡率大于繁殖率,活菌數量、次級代謝產物逐漸減少。
6、什么是缺壁細菌,試簡述四類缺壁細菌的形成.特點及實踐意義。
缺壁細菌是指在自然界長期進化中或在實驗室菌種的自發突變中發生缺壁細胞壁的細菌;此外,在實驗室中,還可用人為的方法抑制新生細胞壁的合成或對現成細胞壁進行酶解而獲得缺壁細菌。
缺壁細菌共有四類:
(1)L-型細菌:指細菌在特定的條件下,由基因自發突變而形成的遺傳性穩定的細胞壁缺陷菌株,多形態,有的可通過細菌濾器而又稱濾過型細菌,在固體培養基上形成“油煎蛋”似的小菌落。
(2)原生質體:是指在人為條件下,用溶菌酶除盡原有細胞壁或用青霉素抑制新生細胞壁合成后,所得到的僅有一層細胞膜包裹著的圓球狀滲透敏感細胞。一般由革蘭氏陽性細菌形成。
3)原生質球:又稱球狀體,是指在人為條件下,用溶菌酶去除革蘭氏陰性細菌細胞壁或用青霉素抑制革蘭氏陰性細菌新生細胞壁合成后,還殘留著部分細胞壁而形成的細菌細胞,它呈圓球形。
(4)支原體:是在長期進化過程中形成的.適應自然生活條件的無細胞壁的原核生物。因它的細胞膜中含有一般原核生物所沒有的甾醇。所以即使缺乏細胞壁,其細胞膜仍有較高的機械強度。
上述原生質體和球狀體的共同特點是:無完整的細胞壁,細胞呈球狀,對滲透壓極其敏感,革蘭氏染色陰性,即使有鞭毛也無法運動,對相應噬菌體不敏感,細胞不能分裂等。當然,如在形成原生質體和球狀體以前已有噬菌體侵入,則它仍能正常復制.增殖和裂解;同樣,如在形成原生質體前正在形成芽孢,則該芽孢也仍能正常形成。原生質體或球狀體比正常有細胞壁的細菌更易導入外源遺傳物質,故是研究遺傳規律和進行原生質體育種的良好實驗材料。
7、某發酵工廠生產菌株經常因噬菌體“感染”而不能正常生產,在排除了外部感染的可能性后有人認為是由于溶源性菌裂解所致,你的看法如何?并設計一實驗證明。
本人也認為有這種可能性。
溶源菌是指在核染色體組上整合有前噬菌體并能正常生長繁殖而不被裂解的細菌(或其他微生物),具有自發裂解、誘導、免疫性、復愈、溶源轉變等特性。
檢驗方法是將適量發酵液與大量的敏感性指示菌(遇溶源菌裂解后所釋放的溫和噬菌體會發生裂解性生活周期者)相混合,然后加至瓊脂培養基中倒一平板。過一段時間后溶源菌就長成菌落。由于在溶源菌分裂過程中有極少數個體會發生自發裂解,其釋放的噬菌體可不斷侵染溶源菌菌落周圍的指示菌菌苔,所以會產生一個個中央有溶源菌小菌落、四周有透明圈的特殊噬菌斑
8、普遍型轉導,局限型轉導的區別?
1)被轉導的基因共價地與噬菌體DNA連接,與噬菌體DNA一起進行復制、包裝以及被導入受體細胞中.而完全轉導包裝的可能全部是宿主菌的基因;
2)局限性轉導顆粒攜帶特定的染色體片段并將固定的個別基因導入受體,故稱為局限性轉導; 3)局限性轉導發生于溶原性后期,普遍性轉到則發生于裂解期.4)局限轉導只能用溫和噬菌體,普通轉導烈性溫和均可.9、簡述一個細菌進入機體的遭遇
細菌進入機體的過程是細菌與機體發生相互關系的一個過程。首先,細菌必須突破宿主的“三道防線”即機械防御、非特異性免疫和特異性免疫系統后,在宿主的一定部位生長繁殖,并引起一系列病理生理過程。細菌若長期保持著潛伏狀態或亞臨床的感染狀態,則傳染病就不至于發生;反之,如果環境條件有利于細菌的大量繁殖,并隨之產生大量的酶和毒素來損害其宿主,則宿主即會患傳染病。
10、細菌獲同步生長的方法:
(1)選擇法:從非同步生長的細菌中選出同一生長階段的細菌(用濾膜過濾或密度梯度離心法),然后培養出同步生長細菌。
(2)誘導法:控制細菌生長條件(如溫度、培養基成分等)來誘導細菌進行同步生長。
11、在結合前質粒間的基因能轉移嗎?
在自然條件下,很多質粒都可通過細菌結合作用轉移到新的宿主內。但在人工構建的質粒載體中,一般缺乏此種轉移所必須的mob基因,因此不能自行完成從一個細胞到另一個細胞的接合轉移。如需將質粒載體轉移進受體細菌。需誘導受體細菌產生一種短暫的感受態以攝取外源DNA.12、述微生物與當代人類實踐的重要關系?
答:①在微生物與工業發展的關系上,釀酒,釀醋等微生物的發酵作用②微生物在當代農業生產中具有十分顯著的作用,例如,以菌治害蟲和以菌治植病的生物防治技術;以菌增肥效和以菌促生長的微生物增產技術;以菌做飼料和以菌當蔬菜的單細胞蛋白和食用菌生產技術;以及以菌產沼氣等生物能源技術。
③微生物與環境保護的關系越來越受到當代全人類廣泛的重視。微生物是占地球面積70%以上的海洋和其他水體中光合生產力的基礎;是一切食物鏈的重要環節;是污水處理中的關鍵角色;是生態農業中最重要的一環;是自然界重要元素循環的首要推動者;以及是環境污染和監測的重要指示生物;等等
④微生物與在食品上的應用。調味品,發酵食品,酸乳,蔬菜加工。⑤微生物在醫藥方面的應用。抗菌素,維生素。⑥微生物在能源生產方面也有重要的作用。
13、從遺傳學角度談談你對朊病毒的理解和看法?
朊病毒又稱蛋白質侵染因子、毒朊或感染性蛋白質,是一類能侵染動物并在宿主細胞內復制的小分子無免疫性疏水蛋白質
復制: 最引起當今科學家興趣和關注的是朊病毒的復制機理。由于朊病毒是一種只含有蛋白質而不含核酸的分子生物并且只能在寄生宿主細胞內生存。因此,合成朊病毒所需的信息,有可能是存在于寄主細胞之中的,而朊病毒的作用,僅在于激活在寄主細胞中為朊病毒的編碼的基因,使得朊病毒得以復制繁殖。
14.將待分離突變株的原始菌株以合適的稀釋度涂布到野生型菌株和突變株均能 生長的主平板上,然后經培養后形成單菌落。
2.通過消毒的印章,將a平板的菌落分別原位轉移到c平板(與a相同,選擇培 養基)和d平板(基本培養基)。
3.經培養后對照如果在c上長而在d上不長的則為所需分離的突變型。4.從c上挑取菌落在完全培養基上進行劃線分離純化。
15、請設計實驗來決定在一種特定的細菌中發生的遺傳轉移過程是轉化、轉導還是接合?說明每一種的預期結果。設想有下列條件和材料可以利用:(1)合適的突變株和選擇培養基。(2)Dnase(一種降解裸露DNA分子的酶)。(3)兩種濾板:一種能夠持留細菌和細菌病毒,但不能持留游離的DNA分子;另一種濾板只能持留細菌。(4)一種可以插入濾板使其分隔成兩個空間的玻璃容器(如U型管)。
選取相對應的雙重營養缺陷型菌株(如A+B+C-D-和A-B-C+D+)作為實驗菌株。配制基本培養基和補充培養基。在U型管的兩頭分別接入不同的營養缺陷型菌株。中間加入能夠持留細菌和細菌病毒的濾板。一段時間后,取菌液用雙蒸水洗滌,涂布在基本培養基和補充培養基上,有菌落長出。但如在U型管內加DNA酶,則在基本培養基上無菌落長出——轉化。在U型管的兩頭分別接入不同的營養缺陷型菌株。加入任何一種濾板在基本培養基和補充培養基上,均沒有菌落長出。但如不加濾板,在基本培養基和補充培養基上,有菌落長出——接合。
在U型管的兩頭分別接入不同的營養缺陷型菌株。中間加入能夠持留細菌和細菌病毒的濾板,在基本培養基和補充培養基上,均沒有菌落長出。但加入僅可持留細菌的濾板在基本培養基和補充培養基上,有菌落長出——轉導。
16、Hfr×F- 和 F+×F-雜交得到的接合子都有性菌毛產生嗎?它們是否都能被M13噬菌體感染呢?
Hfr×F-中,由于Hfr菌株的染色體在向F-的轉移過程中,整合在染色體上的F因子(實際是F'因子),除先導區外,絕大部分處于轉移染色體的末端,由于轉移過程中常被中斷,因此F因子不易轉移到受體細胞中,所以Hfr×F-得到的接合子仍然是F-,無性菌毛的產生;而F+×F-得到的接合子有性菌毛產生,能被M13噬菌體感染,因為M13的侵染途徑是性菌毛。
17、自發突變的特性
(1)非對應性(2)稀有性(3)規律性(4)獨立性(5)遺傳和回復性(6)可誘變性(7)可逆性(8)穩定性
18、設計一種用微生物處理廢水或廢渣,變廢為可用資源的方案。
19、Ames試驗
1、什么是純培養物,在實驗室如何利用固體培養基獲得微生物純培養物? 答:純培養物是只含有一種微生物的培養物。在實驗室如何利用固體培養基可以通過以下方法獲得微生物純培養物:1)稀釋涂布平板法;2)平板劃線分離法;3)澆注培養法。
2、試述一種細菌的蘇氨酸營養缺陷型突變株的篩選方法。答:(1)誘變劑處理;
(2)淘汰野生型:用青霉素法。將誘變劑處理后的單細胞懸液均勻涂布于相應基本培養基上進行培養,同時在平板表面均勻噴上青霉素。培養后用影印方法接種到完全培養基上進行培養。(3)檢出缺陷型:將上述平板上生長的菌落全部用影印接種工具轉印到另一基本培養基平板上。比較兩種平板上菌落生長情況,在基本培養基平板上不生長但是在完全培養基上能生長的菌落就是營養缺陷型突變株。
(4)鑒定缺陷型:生長譜法。(6分))
3.微生物的營養類型有哪些?各舉一例。(本題6分)
答:1)光能自養型微生物,例如藍細菌;2)光能異養型微生物,例如紅螺菌;3)化能自養型微生物,例如硫化細菌;4)化能異養型微生物,例如黑曲霉。
4、細菌四個生長時期特點:
(1)延遲生長期:生長慢;體積變大或增長;RNA尤其是rRNA含量增高;合成代謝活躍;對外界不良環境條件敏感。
(2)對數生長期:生長速度快,菌體數目按幾何級數增加; 各組分平衡生長;代謝旺盛。(3)穩定生長期:生長速率=死亡速率,菌數保持恒定,菌體量達最高點;內含物積累;次級代謝產物合成。
(4)衰亡期:生長速率<死亡速率,活菌數減少;菌體退化、自溶。
5、特異性免疫的特點:
(1)是生物個體在其后天活動中接觸了相應的抗原后而獲得的。(2)其產物與相應的刺激物之間是有針對性的。
(3)包括體液免疫系統和細胞免疫系統或細胞介導免疫系統。
(4)特異性免疫力在同種生物的不同個體間或同一個體在不同條件下有很大的差別。
6、特異性與非特異性免疫的區別:
(1)特異性免疫是個體出生后逐步形成的,有針對性(2)與同微生物接觸的次數有關(3)有個體特異性
9、試述根據F質粒的有無,可以把大腸桿菌分為幾種類型菌株,請對它們進行簡要說明。
答:根據F質粒的有無,可以把大腸桿菌分為四種類型菌株: 1)F+菌株,F因子獨立存在,細胞表面有性菌毛; 2)F-菌株,不含F因子,沒有性菌毛;
3)Hfr菌株,Hfr菌株仍然保持著F+細胞的特征,具有F性菌毛。
4)F′菌株,游離的但攜帶一小段染色體基因的F因子,特稱為F′因子
10、真核微生物與原核微生物區別:
真核微生物:細胞壁無肽聚糖,細胞膜有固醇、有內質網、液泡、溶酶體、微體、線粒體、葉綠體等細胞器、80S核糖體、細胞核有核膜、核仁、多條染色體、有絲分裂。原核微生物:細胞壁有肽聚糖、細胞膜無固醇、無細胞器、70S核糖體、細胞核無核膜、核仁,單條染色體、無有絲分裂。
11、莢膜的作用:
(1)保護細胞免受干燥的影響;(2)貯藏養料,以備營養缺乏時利用;(3)具有表面附著作用,與病原菌的毒性密切相關(4)能抵抗吞噬細胞的吞噬。
1.溶菌酶抑菌機理是抑制革蘭氏陽性菌肽聚糖合成。
()
2.在固體培養基中,瓊脂的濃度一般為2%。
1、微生物來說,碳源可作為能源。(×)
2.高壓蒸汽滅菌方法適用于一切物品和培養基的滅菌。(×)
3.微生物最適生長溫度是一切生理過程中的最適溫度。(×)
4.組成微生物細胞的化學元素來自微生物生長所需要的營養物質。(√)
5.原核生物只存在有性繁殖過程 ×)
6.自發突變具有不對應性和稀有性的特點
√
7.在可見光照下可以對微生物進行紫外線誘變而達到育種目的。×
9、外毒素主要為革蘭代陰性菌分泌,對熱不穩定,60℃以上能迅速被破壞。
(x)
第二篇:微生物總結
微生物:一類分布廣泛、體積微小、結構簡單、肉眼直接看不到,微小生物的總稱。
細菌L型:細菌細胞壁的肽聚糖結構受理化或生物因素直接破壞或合成被抑制,這種細胞壁受損的細菌在高滲環境下仍可存活,稱細菌細胞壁缺陷型或L型。
質粒:是染色體外的遺傳物質,控制某些特定的生物學性狀,不是細菌生長所必需。
莢膜:是細菌合成分泌的包繞于細胞壁外的一層粘液性物質。界限清晰性質穩定結合牢固。培養基:由人工方法經滅菌后制成,專供微生物生長使用的混合營養制品。一般pH為7.2-7.6。
兼性厭氧菌:兼有需氧呼吸和無氧發酵兩種功能,無論在有氧或無氧環境中都能生長,但以有氧時生長較好,大多數病原菌屬于此。菌落:在固體培養基中,經過十八到24小時培養后,單個細菌分裂繁殖成一堆肉眼可見的細紅細胞吸附:流感病毒等感染細胞后,由于細胞膜上出現了血凝素(HA),具有吸附脊椎動物紅細胞的能力,這一現象稱為紅細胞吸附。抗毒素:通常是用細菌類毒素給馬多次注射后,取其免疫血清提取免疫球蛋白精制而成抗生素:微生物來源的抗菌藥物,以及人工化學修飾或半合成的衍生物
無菌:就是指沒有活菌的意思。
1:細胞壁結構、化學組成及功能?答:化學組成:G+①肽聚糖:聚糖骨架、四肽側鏈、五肽交聯橋②磷壁酸:粘附功能,與致病性有關;抗原性很強③其他成分:如A群鏈球菌的M蛋白G-①肽聚糖:聚糖骨架;四肽側鏈②外膜:脂蛋白;脂質雙層;脂多糖:脂類A(毒性成分,無種屬特異性);核心多糖;特異多糖。功能:①維持細菌固有形態②保護細菌抵抗低滲環境③物質交換④決定菌體的抗原性。2:G-菌與G+菌細胞壁的異同點及其意義?答:兼性厭氧菌、專性厭氧菌。
11:與醫學有關的合成代謝產物?答:① 毒素與侵襲性酶:外毒素和內毒素②熱原質:G-菌細胞壁的脂多糖,耐高溫,250℃干烤破壞。③抗生素:某些微生物代謝中產生的一類能抑制或殺死其他微生物或腫瘤細胞的物質。④維生素:如VitK、B族維生素。⑤色素:脂溶性和水溶性色素。⑥細菌素:無治療應用價值。13:病毒的形態、結構與化學組成。答:多數病毒呈球形或近似球形,少數呈桿狀(植物病毒)、絲狀(初分離的流感病毒)、彈狀(狂犬病毒)、磚塊狀(如痘類病毒)和蝌蚪狀(噬菌體)。病毒的核心和衣殼,二者構成核衣殼,病毒包膜和其他輔助結構。化學組成:核心:主要為核酸,化學組成為DNA或RNA。衣殼:包繞在核心外面的一層蛋白質,由許多蛋白質亞單位(殼粒)組成。包膜:化學組成: 脂質蛋白質糖類。
答:單細胞真菌呈圓形或卵圓形。多細胞真菌
結構:菌絲和孢子,菌絲:分為營養菌絲、氣中菌絲、生殖菌絲;孢子:是真菌的繁殖體。結構:細胞壁外成分;細胞壁;隔膜;其他結構。
25:真菌培養特性。答:最常用的培養:沙保弱培養基。溫度:多數都在22 ~ 28oC,但深部感染真菌最適溫度為37oC,pH4.0 ~ 6.0病原菌通常生長緩慢,1~4周。
26:真菌繁殖方式。答:①無性生殖:①由菌絲斷裂形成新個體②細胞直接分裂產生子細胞③產生芽生孢子④產生孢子囊孢子和分生孢子②有性生殖:指經過兩性細胞配合產生新個體的繁殖方式。
27:真菌抵抗力答:①對干燥、陽光、紫外線及常用消毒劑有強抵抗力②不耐熱,菌絲與孢子60℃ 1小時均可殺死③2﹪石炭酸、10%甲醛、0.1%升汞、2.5%碘酊敏感④抗真菌藥物:菌集團。
純培養基:挑取一個菌落,移種到另一培養基中,生長出來的細菌均為純種。
毒性噬菌體:在宿主菌細胞內噬菌體增殖產生子代噬菌體,宿主菌被裂解,形成溶菌性周期。溫和噬菌體:噬菌體基因與宿主菌染色體整合,成為前噬菌體,噬菌體DNA能隨細菌DNA復制而復制,并隨細菌的分裂而傳到子代細菌的基因組中,變成溶原性細菌,形成溶原性周期。前噬菌體:整合在細菌染色體上的噬菌體基因。轉座子:細菌基因組中的一段DNA序列,可以在染色體、質粒或噬菌體之間自行移動的遺傳成分,伴隨轉座子的移動,會出現插入突變。基因轉移:遺傳物質由供體菌轉入受體菌的過程為基因轉移。
重組:轉移的基因與受體菌DNA整合在一起稱為重組,重組使受體菌獲得供體菌的某些性狀。轉化:細菌通過性菌毛相互連接溝通,將質粒或染色體等遺傳物質從供體菌轉移給受體菌的過程。
接合:是受體菌直接攝取供體菌DNA片段,從而獲得新的遺傳性狀的過程。
轉導:以噬菌體為載體將供菌的DNA片段轉移到受菌體內使受菌獲得供菌的部分遺傳性狀。溶原性轉換:某些前噬菌體可導致細菌基因型和性狀發生改變,例如白喉棒狀桿菌產生白喉毒素的機理,溫和噬菌體感染細菌時,其基因可整合于宿主菌染色體中,使宿主菌獲得噬菌體基因賦予的新的性狀,稱溶原性轉換。原生質體融合:將兩種不同的細菌經溶菌酶或青霉素等處理,失去細胞壁成為原生質體后進行融合的過程。融合后的染色體之間發生重組。病毒的自我復制:以病毒核酸為模板,經過復雜的生化過程,復制子代病毒的核酸并通過轉錄翻譯產生病毒蛋白質,裝配成熟后釋放到細胞外,這種增殖方式稱為病毒的自我復制。頓挫感染:被病毒侵入的細胞如不能為病毒增殖提供必需成分,則病毒不能合成本身成分,或能合成但不能組裝和釋出有感染性的病毒顆粒。非容納細胞與容納細胞
缺陷病毒:病毒基因組不完整或某一基因位點改變,不能正常增殖,不能復制出完整有感染性的病毒顆粒,此病毒即缺陷病毒。缺陷病毒+輔助病毒?完成復制
干擾現象:當兩種病毒感染同一宿主細胞時,發生一種病毒的增殖抑制另一種病毒增殖的現象。某些病毒感染細胞時不出現CPE或其他易于測出的變化(如HAd),但能干擾其后感染的另一病毒的增殖,從而阻抑后者所特有的CPE 芽孢:某些細菌在一定環境條件下,胞質脫水濃縮,在菌體內部形成的一個圓形或卵圓形小體。
正常菌群:正常人的體表和與外界相通的眼結膜,口腔、鼻腔、腸道、泌尿生殖道等腔道粘膜中的不同種類和數量及對人體無害而有益的微生物。正常微生物群通稱為正常菌群
細菌群體:細菌附著在有生命或無生命的材料表面后,由細菌及其所分泌的胞外多聚物共同組成的呈膜狀的細菌群體。機會性感染:由正常菌群在機體免疫功能低下、寄居部位改變、菌群失調等特定條件下引起的感染。
毒力:致病性的強弱程度。
侵襲素:某些細菌的基因編碼一些具有侵襲功能的蛋白多肽,促進該病原菌向鄰近組織擴散甚至介導進入鄰近黏膜上皮細胞內。
包涵體:細胞漿或細胞核內出現光鏡下可見的斑塊狀結構
G+ 菌:①肽聚糖:聚糖骨架,四肽側鏈,五肽交聯橋,三維立體②磷壁酸:重要表面抗原,與粘附致病有關,加強穩定細胞壁G-菌:①肽聚糖:聚糖骨架,四肽側鏈組成二維結構, ②外膜(脂蛋白、脂質雙層、脂多糖組成)功能:屏障結構LPS是G-菌的內毒素。細胞壁結構異同:G+菌/G-菌--強度:較堅韌/較疏松--厚度:厚20-80nm/薄10-15nm--肽聚糖層數:多可達50層/少,1-2層--肽聚糖結構:聚糖骨架,四肽側鏈,五肽交聯橋,三維立體/聚糖骨架,四肽側鏈,二維平面--脂類含量/少/多--磷壁酸:有/無--外膜:無/有,由脂蛋白、脂質雙層、脂多糖組成3:細菌L型,特殊結構種類、化學組成、抗原性及意義?答:定義:細菌細胞壁的肽聚糖結構受理化或生物因素直接破壞或合成被抑制,這種細胞壁受損的細菌在高滲環境下仍可存活,稱細菌細胞壁缺陷型或L型。種類:G+菌細胞壁缺失后,僅有胞膜,稱原生質體,G--菌肽聚糖層受損,尚有外膜,稱原生質球。抗原性及意義:高度多形性,大小不一;大多染成G-;高滲低瓊脂含血清培養基—油煎蛋樣菌落;去除誘因后,有些可回復為原菌;某些L型仍有致病性,引起慢性感染。作用于胞壁的抗菌性藥對L型感染治療無效
4:細菌的特殊結構?答:①莢膜:多糖或多肽的多聚體。功能a抗吞噬b黏附作用c抗有害物質的損傷d有抗原性,用于細菌的鑒定和分型②鞭毛:蛋白質,由基礎小體絲狀體鉤狀體組成,高度抗原性。功能a是細菌的運動器官b某些細菌的鞭毛與致病性有關c根據鞭毛的動力和鞭毛的抗原性可用以細菌的鑒別和分類③菌毛:由亞單位菌毛蛋白構成。功能a黏附作用b傳遞遺傳物質④芽孢:生產芽孢的細菌都是革陽菌。功能:a增強抵抗力b不直接致病c鑒定。
5:細菌的遺傳物質?答:細菌染色體,質粒,噬菌體:
6:基因轉移與重組方式的種類及定義?答:定義:基因轉移:遺傳物質由供體菌轉入受體菌的過程為基因轉移。重組:轉移的基因與受體菌DNA整合在一起稱為重組,重組使受體菌獲得供體菌的某些性狀。分類:轉化,接合,轉導,融合,轉換.【表格】類型:基因來源/轉移方式--轉化:供菌游離的DNA片段/直接攝入--接合:供菌質粒DNA/ 性菌毛--轉導:供菌任意DNA或噬菌體與供菌特定DNA/噬菌體--融合:兩菌原生質體的DNA/融合--轉換:溫和噬菌體/吸附穿入
7:噬菌體及其相關概念。答:1)毒性噬菌體:在宿主菌細胞內噬菌體增殖產生子代噬菌體,宿主菌被裂解,形成溶菌性周期。2)溫和噬菌體:噬菌體基因與宿主菌染色體整合,成為前噬菌體,噬菌體DNA能隨細菌DNA復制而復制,并隨細菌的分裂而傳到子代細菌的基因組中,變成溶原性細菌,形成溶原性周期。
8:細菌生長繁殖的條件?答:營養物質/酸堿度 多數病原菌最適pH為7.2~7.6/溫度 多數病原菌生長最適溫度為37℃/氣體 據代謝時對分子氧的需要與否,專性需氧菌、微需氧菌、兼性厭氧菌、專性厭氧菌/滲透壓。
9:細菌群體的生長繁殖?答:生長曲線:一定數量的細菌接種到定量的液體培養基中,連續定時取樣測定活菌數量,以培養時間為橫坐標,以活菌數的對數為縱坐標作圖,得到的一條曲線。遲緩期:適應階段。對數期:對抗生素敏感,細菌鑒定選此期。穩定期:代謝產物形成(如外毒素、抗生素、芽胞等)。衰亡期:菌體細胞呈現多種形態。
10:按細菌對氧需要的分類?答:據代謝時對分子氧的需要與否,專性需氧菌、微需氧菌、14:雙鏈DNA病毒的復制周期?答:vDNA(RNA聚合酶)→早期mRNA(翻譯)→早期蛋白(酶)→ vDNA(酶)子代DNA →? mRNA?→結構蛋白.→子代DNA+結構蛋白→子代病毒。簡要過程:吸附,穿入,脫殼,生物合成,組裝、成熟與釋放。
15:頓挫病毒,缺陷病毒的概念?答:頓挫病毒:被病毒侵入的細胞如不能為病毒增殖提供必需成分,則病毒不能合成本身成分,或能合成但不能組裝和釋出有感染性的病毒顆粒。非容納細胞與容納細胞。缺陷病毒:病毒基因組不完整或某一基因位點改變,不能正常增殖,不能復制出完整有感染性的病毒顆粒,此病毒即缺陷病毒。缺陷病毒+輔助病毒=完成復制 16:細菌的感染與致病。答:感染:在一定條件下,微生物與機體相互作用并導致機體產生不同程度的病理過程。★
17:細菌的毒力比較,外毒素與內毒素生物學特性。答:【表格】種類:內毒素★外毒素。來源:G-菌★G+菌部分G-菌。編碼基因:染色體基因★質粒或前噬菌體或染色體基因。存在部位:細胞壁成分、細菌裂解后釋出★活菌分泌或細菌溶解后散出。化學成分:脂多糖★蛋白質。穩定性:好(160℃2~4h才破壞)★差(60~80 ℃30m可破壞)。毒性作用:弱、各種內毒素作用大致相同★強、對機體組織器官有選擇性。抗原性:弱,甲醛處理后不能形成類毒素★強,能刺激機體形成抗毒素,經甲醛脫毒后能形成類毒素。
18:細菌感染的類型答:①不感染②隱性感染③潛伏感染④顯性感染:急慢性感染;局部、全身感染⑤帶菌狀態。
19:病毒感染類型。答:①隱性感染②顯性感染:急性病毒感染:潛伏期短,發病急,數日或數周回復,病原消滅型感染。持續性病毒感染:慢性病毒感染;潛伏性病毒感染;慢發病毒感染。
20:細菌的致病機制。答:細菌的致病性強弱取決于毒力,細菌的毒力因子:①侵襲力:致病菌突破宿主生理屏障,進入機體并在體內定植、繁殖和擴散的能力包括黏附素、莢膜和微莢膜、侵襲性物質②毒素:細菌產生的損傷宿主引起生理功能紊亂的毒性物質,包括內毒素和外毒素。
21:正常菌群的生理作用。答:①生物拮抗:競爭粘附(占位性保護)作用;產生有害代謝物質;營養競爭②營養作用③免疫作用④抑癌作用⑤抗衰老作用。
22:病毒分離鑒定方法及病毒在培養細胞中的增殖的指標。答:病毒的分離:①動物接種②雞胚培養;流感病毒初次分離接種于羊膜腔;流感病毒的再培養接種于尿囊腔③組織培養④細胞培養 — 病毒分離鑒定中最常用的方法單層細胞培養;原代細胞培養;二倍體細胞培養;傳代細胞培養。指標:1)細胞的變化①細胞病變效應:有些病毒在細胞內增殖時引起的特有的細胞病變,如細胞變圓、聚集、壞死、溶解或脫落②多核巨細胞形成:有些病毒如麻疹病毒、巨細胞病毒等作用于細胞膜,使鄰近的細胞融合,形成多核巨細胞③胞質或核內包涵體的形成狂犬病病毒、巨細胞病毒。2)紅細胞吸附流感病毒等感染細胞后,由于細胞膜上出現了血凝素,具有吸附脊椎動物紅細胞的能力,這一現象稱為紅細胞吸附。常用來鑒定具有血凝素的黏病毒或副黏病毒的增殖3).紅細胞凝集檢測含血凝素病毒的方法4)干擾現象5)空斑形成試驗。
23:病毒成份的檢測(抗原、核酸檢測)答:1.病毒抗原的檢測2.病毒核酸的檢測
24:真菌的形態結構(單細胞和多細胞真菌)。
灰黃霉素、制霉菌素B、二性霉素B、氟康唑和酮康唑;對抗生素不敏感。
28:抗菌藥物的種類與作用機制。答:殺菌藥和抑菌藥。機制:①抑制細菌細胞壁的合成②抑制細菌
細胞膜功③抑制細菌蛋白質合成④抑制細菌核酸合成。29:細菌耐藥的機制。答:產生鈍化酶;細胞通透性的改變;靶位結構的改變;建立代謝旁路;代謝酶分子的改變
30:醫院感染的定義。答:由醫院的病原生物或其毒素導致的局部或全身感染性疾病。
31:細菌分離培養和鑒定、生化試驗、血清學試驗?答:細菌分離培養和鑒定:原則上應對所有送檢標本做分離培養,以便獲得單個菌落后進行純培養,從而對細菌做進一步的生物學、免疫學、致病性或細菌的藥物敏感性等方面的檢查,最終獲得確切的報告。生化試驗:得到細菌的純培養物后,用糖發酵試驗,吲哚試驗,硝酸鹽還原實驗等對細菌的酶系統和其代謝產物的檢查,是鑒別細菌的重要方法之一。血清學實驗:利用含已知的特異性抗體的免疫血清,對細菌進行群和型的鑒別。
微生物種類名稱★生物學性狀★致病物質、致病機理及所致疾病
破傷風梭菌:菌體細長,芽胞正圓比菌體粗,位于菌體頂端菌體鼓槌狀★不發酵糖類,不分解蛋白質。條件:局部傷口需形成厭氧微環境,傷口窄而深,有泥土或異物污染,大面積創傷,壞死組織多,局部組織缺血,同時有需氧菌或兼性厭氧菌混合感染的傷口。防治原則:特異性預防:注射破傷風類毒素主動免疫;迅速對傷口清創擴創,防止形成厭氧微環境;緊急預防:TAT(精制破傷風抗毒素);治療: 早期足量使用TAT,抗生素。產氣莢膜梭菌:G+粗大桿菌,芽胞位于次極端,橢圓形,直徑小于菌體形成明顯莢膜★血平板:雙層溶血環,代謝十分活躍,牛奶培養基:“洶涌發酵”現象。增加血管通透性,組織壞死,氣性壞疽,食物中毒,壞死性腸炎。
肉毒梭菌:G+粗短桿菌,芽胞位于次極端,橢圓形,菌體呈網球拍狀,嚴格厭氧,分型多,生化反應復雜★肉毒毒素,抑制乙酰膽堿釋放,引起運動神經末梢失調→肌肉麻痹;食物中毒,嬰兒肉毒中毒。
支原體:菌落油煎蛋型,高度多形態型,細胞膜含高度固醇,無細胞壁,對青霉素有抵抗作用★支原體肺炎,病變為間質性肺炎,可合并支氣管肺炎。稱為原發性非典型性肺炎。不規則發熱,刺激性咳嗽,頭痛。嬰幼兒病情嚴重,發病急,病程長,以呼吸困難為主。有些合并其他系統病變,如循環系統等。飛沫傳播。立克次體:是一類體積微小,絕大多數為自身代謝不完善,嚴格細胞內寄生的原核細胞型微生物★流行性斑疹傷寒、地方性斑疹傷寒、恙蟲病、Q熱
衣原體:嚴格細胞內寄生,有獨特發育周期,能通過細菌濾器,原核細胞型微生物★ 沙眼:感染眼結膜上皮細胞→增殖,包涵體→局部炎癥→早期流淚、有粘液膿性分泌物、結膜充血及濾泡增生→后期結膜瘢痕、眼瞼內翻、倒睫以及角膜血管翳引起的角膜損害→影響視力或致盲包涵體結膜炎、泌尿生殖道感染、沙眼衣原體肺炎、性病淋巴肉芽腫
螺旋體:是一類細長、柔軟、彎曲、運動活潑的原核細胞型微生物基本結構及生物學形狀與細菌相似★梅毒,人是唯一傳染源,致病物質為莢膜樣物質,透明質酸酶;后天通過性接觸傳播或者先天經過母體傳播。
第三篇:微生物總結
第一章、緒論
巴斯得的貢獻:
1、徹底否定了“自生說”
2、免疫學—預防接種
3、證實發酵是由微生物引起的3、巴斯德消毒法
柯赫貢獻:
1、證實炭疽病菌是炭疽病的病原菌
2、發現了肺結核病的病原菌
3、提出了證明某種微生物是否為某種疾病病原體的病原菌——柯赫原則
4、固體培養基分離純化微生物的技術
5、配制培養基
微生物的5大共性:
1、體積小、面積大
2、吸收多、轉化快
3生長旺、繁殖快
4、分布廣、種類多
5、適應性強、易變異 第二章、微生物的純培養和顯微技術
一、涂布平板法作用:用于純種分離、篩選菌落、得到單菌落,對一些細菌進行計數 五區劃線發作用:純化菌種、得到單菌落
搖瓶實驗作用:菌種篩選、發酵實驗、種子培養等 穿刺法的作用:保藏厭氧菌種、研究微生物的動力 之字劃線法的作用:保藏菌種、單菌落的獲取
二、斜面菌種保藏法:保藏期限3個月以內,沙土管保藏法:保藏期限1~10年主要適用于產孢子的,如芽孢桿菌、放線菌 石蠟油封藏法:保藏期限1~2年
真空冷凍干燥法:保藏期限5~10年,液氮超低溫病結法:保藏期限5~10年 第三章
一、細胞壁:根據細胞壁將原核生物分為革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌兩種。
1、革蘭氏陽性菌細胞壁的特點:厚度大(20~80nm)和化學組分簡單,一般只含90%肽聚糖和10%磷壁酸。
革蘭氏陽性菌的機械阻攔與保護作用有肽聚糖完成。磷壁酸:是結合在革蘭氏陽性菌細胞壁上的一種酸性多糖,主要成分為甘油磷酸或核糖醇磷酸。
磷壁酸為革蘭氏陽性菌所特有。對于革蘭氏陽性菌而言,抗原性由磷壁酸完成。磷壁酸的主要生理功能:1)、其磷酸分子上較多的負電荷可提高細胞周圍鎂離子的濃度進入細胞后就可以保證細胞膜上一些需鎂離子的合成提高活性 2)儲藏磷元素 3)、增強某些致病菌如A族鏈球菌對宿主細胞的黏連、避免被白細胞吞噬以及補抗體的作用 4)賦予革蘭氏陽性菌以特異的表面抗原 5)可作為噬菌體的特異性吸附受體
6)調節細胞自溶素的活力,借以防止細胞自溶而死亡
2、革蘭氏陰性菌:由肽聚糖和外膜組成,外膜中的脂多糖是革蘭氏陰性菌所特有的 外壁層可分為3層:外層為脂多糖層,中層為磷脂層,內層為脂蛋白 革蘭氏陰性菌外膜的作用:1)控制細胞透性
2)提高鎂離子濃度 3)決定細胞的抗原性
4)類脂A是類毒素的主要成分
脂多糖:是位于革蘭氏陰性菌細胞壁最外層的一層較厚的類脂多糖物質,由類脂A、核心多糖和O-特異側鏈
脂多糖的功能:1)其中類脂A是革蘭氏陰性菌致病物質——內毒素的物質基礎 2)因其負電荷較強,有吸附鎂離子、鈣離子等陽離子以提高其在細胞表面的濃度作用 3)由于LPS結構多變,決定了革蘭氏陰性菌細胞表面抗原決定族 4)是許多噬菌體在在細胞表面的吸附受體 5)具有控制某些物質進出細胞的部分選擇性屏障功能
3、革蘭氏染色機制:通過結晶紫初染和碘液媒染后,在細胞膜內形成了不溶于水的結晶紫與碘的復合物。革蘭氏陽性菌由于其細胞壁較厚,肽聚糖網層次多和交聯致密,故與乙醇與丙酮作脫色處理時因失水反而使網孔縮小,再加上它不含類脂,故乙醇處理不會溶出縫隙,因此能把結晶紫與碘的復合物牢牢留在壁內,使其任呈紫色。反之革蘭氏陰性菌因其細胞壁薄、外膜層的類脂含量高、肽聚糖層薄和交聯度差,遇脫色劑后,以類脂為主的外膜迅速溶解,薄而松散的肽聚糖網不能阻擋結晶紫與碘的復合物的溶出,因此,通過乙醇脫色后細胞退成無色。這時,再經沙黃等紅色染料進行復染,就使革蘭氏陰性菌呈現紅色,而革蘭氏陽性則保留紫色。
二、芽孢
芽孢:某些細胞在生長發育后期,在細胞內形成一個圓形或橢圓形、厚壁、含水量極低、抗逆性極強的休眠體
芽孢的特點:1)芽孢內新陳代謝幾乎停止,處于休眠狀態,但保持潛在萌發力
2)芽孢不具生殖能力,僅只是一種休眠體 3)抗逆性最強的生命體之一,有抗熱、抗化學藥物、抗輻射和抗靜水壓能力 4)含水量低,壁厚而致密,通透性差,不易著色,折光性強
5)一個孢子萌發只產生一個營養狀態的細胞 芽孢的耐熱機制:芽孢的耐熱性在于芽孢衣對多價陽離子和水分的透性很差和皮層的離子強度很高,從而是皮層產生極高的滲透壓去奪取芽孢核心中的水分,其結果造成皮層的充分膨脹,而核心部分的細胞質卻變得高度失水,因此,導致核心具極強的耐熱性。第四章微生物的營養要求
一、營養物質:能夠滿足微生物機體生長、繁殖和完成各種生理條件所需的物質 營養:微生物獲得U和利用營養物質的過程
二、1、碳源:是在微生物生長過程中為微生物提供碳素來源的物質。為微生物提供碳元素與能量
2、氮源:為微生物提供氮元素來源,只有少數自養微生物能利用銨鹽、硝酸鹽同時作為氮源與能源(是構成細胞中核酸和蛋白質的重要元素)氮源的類型:無機氮、有機氮、氣體氮
3、無機鹽:作用:作為酶活性中心的組成部分、維持生物大分子和細胞結構的穩定性、調節并維持細胞的滲透壓、控制細胞的氧化還原電位和作為某些微生物生長的能源物質。
4、生長因子:通常是指那些微生物生長所必需的的且需量很少,但微生物自身不能合成或合成量不足以滿足機體生長需要的有機化合物
5、水:生理功能:1)起到溶劑與運輸介質的作用
2)參與細胞內一系列的化學反應
3)維持蛋白質、核酸等生物大分子穩定的天然構象
4)是良好的導熱體,調節細胞溫度 微生物的營養類型分類(P84表格)
三、1、培養基的配制原則:1)目標明確
2)營養協調
3)物理化學條件適宜
4)原料來源的選擇
2、C多有助于次生物質分泌,N多有助于個體生長發育
3、PH:細菌:7.0~8.0
酵母菌:4.0~6.0
放線菌:8.0~9.0
霉菌:4.0~5.8
4、維持培養基PH的方法:1)加緩沖劑一氫和二氫磷酸鹽的混合物
2)備用堿:CaCO3、CaHCO3 3)弱酸鹽:檸檬酸鹽、乳酸鹽
4)液氨或鹽酸
5、原料來源:1)經濟節約原則:以粗代精、以廢代好、以簡代繁
2)原料來源要廣泛
3)原料藥易處理、處理成本要低
4)原料處理后廢物、廢液、廢氣要少
6、選擇和配制培養基的方法四種:生態模擬、查閱文獻、精心設計、實驗比較
四、培養基的分類
1、按成分不同劃分:天然培養基:優點為取材方便,營養豐富,種了多樣,配制方便合成培養基:優點:組分精確,重復性好確定:較昂貴,一般用于研究
2、根據物料狀態劃分:固體培養基:一般用于進行微生物的分離、鑒定、活菌計數及菌種保藏半固體培養基:用于觀察微生物的運動特征、分類鑒定及噬菌體效價滴定液體培養基:用于大量培養微生物,研究生理代謝
3、按用途劃分:基礎培養基:用于培養野生型微生物和原養型微生物 加富培養基(營養培養基):在基礎培養基中加入某些特殊營養物質制成的一類營養豐富的培養基作用一般為分離某種微生物而專門設計或培養營養要求嚴謹的異樣微生物 鑒別培養基:在培養可中加入某種特殊化學物質 選擇培養基:根據不同種類微生物的特殊營養需求或對某種化學物質的敏感性不同,在培養基中加入相應的特殊營養物質或化學物質,抑制不需要的微生物的生長,有利于所需要微生物的生長,有利于所需微生物的生長 第五章、微生物代謝
微生物發酵過程的三個階段:脫氫(電子)、遞氫(或電子)和受氫(或電子)發酵:是指微生物細胞將有機物氧化釋放的電子直接交給底物本身未完全氧化的某些中間產物,同時釋放能量并產生各種不同的代謝產物
代謝:生命存在的基本特征,是微生物體內所進行的全部生化反應的總稱。主要由分解代謝和合成代謝兩個過程組成。分解代謝:是指將大分子物質降解成小分子物質,并在這個過程中產生能量(都是氧化反應)合成代謝:是指細胞利用簡單的小分子物質合成復雜大分子,在這個過程要消耗能量(都是還原反應)
代謝途徑都是有一系列連續的酶促反應構成的
P102~P105EMP HM ED途徑的特點功能以及途徑路線
根據氧化還原反應電子受體的不同可將發酵和呼吸分為有氧和無氧呼吸兩種 P108 TCA途徑圖
TCA循環特點:1)氧雖然不直接參與其中反應,但必需在有氧條件下運行
2)每個丙酮酸產生15個ATP 3)位于一切分解代謝與合成代謝的樞紐地位,可為生物合成提供各種碳價原料
TCA的生理意義:1)為細胞提供能量
2)各種能源物質徹底氧化的共同代謝途徑(對于微生物來說)3)物質轉化樞紐
無氧呼吸:電子受體不是氧氣而是外源無機物與部分簡單小分子有機物
發酵作用:沒有外源電子受體,底物具有的能量只釋放一小部分,合成少量ATP 三種磷酸化:底物水平磷酸化,高能磷酸化,氧化磷酸化
光合磷酸化的特點:1)光驅使下電子自菌綠素上逐出后經類似呼吸鏈又回到菌綠素
2)產還原力[H]和產ATP分別進行,還原力來自于H2O等無機物
3)不產生氧氣 合成代謝:微生物利用能量代謝所產生的能量、中間代謝產物以及從外界吸收的小分子合成復雜細胞物質的過程
P118~P119 CO2固定路線圖
藍細菌孤單的抗氧化保護機制:1)分化出特殊的還原性異形胞
2)非異形胞藍細菌固氮酶的保護將固氮與光合進行時間上分隔
微生物固氮反應6要素:1)ATP的供應
2)還原力[H]及傳遞氫載體
3)固氮酶
4)還原底物——氮氣
5)鎂離子
6)嚴格厭氧微環境
聯合固氮菌:指必需生活在植物根莖葉,動物腸道等處才能進行固氮的微生物,不形成類似根瘤的共生結構 微生物的代謝調節主要有兩種類型:一是酶活性的調節,即調節已經存在的酶分子的活性,是酶在化學水平的變化。另一類是酶合成的調節,即調節酶分子的合成量,是遺傳水平發生的變化 第六章
一、生長曲線延滯期
特點:1)生長速率常數為零,細胞數目不增加或增加很小
2)細胞形態變大或 增長許多桿菌可長成絲狀
3)合成代謝十分活躍,核糖體、酶類和ATP 的合成加速產生各種誘導酶
4)對外界不良條件如NaCl溶液,溫度和抗 生素等理化因素反應敏感
出現原因:1)微生物接種到一個新的環境,暫缺乏足夠的能量和必需的生長因子
2)“種子”老化即處于未對數期或種子未活化
3)接種時損傷
影響其長短的因素與實踐意義:1)接種齡:對數期種子延滯期短,延滯期或衰亡期的種子延滯期較長
2)接種量:接種量大,延滯期較短,接種量小,延滯期較長
3)培養基成分:培養基成分豐富的延滯期較短,培養基成分與種子培養基一致的延滯期較短
二、生長曲線指數期
特點:1)生長速率最快,細胞呈指數增長
2)生長速率恒定
3)代謝旺盛,細胞組分平衡發展
4)群體的生理特性一致
影響指數期的意義:1)菌種:不同菌種代時差異極大
2)營養成分:營養越豐富代時越短
3)營養物濃度:影響微生物的生長速率和生長總量
4)培養溫度:影響微生物的生長速率和生長總量
指數期的實踐意義:1)是代謝、生理研究的良好材料
2)是增殖噬菌體的最適宿主菌齡
4)革蘭氏染色是采用此期微生物
生長曲線穩定期特點:1)活細胞總數維持不變即新增殖的細胞數與衰亡的細胞數相等,菌體總數達到最高點
2)細胞生長速率為零
3)細胞生理上處于衰老,代謝活力鈍化,細胞成分合成緩慢,革蘭氏染色發生變化
三、生長曲線衰亡期
特點:細胞以指數速率死亡,有時細胞速率的降低是由于抗性細胞的積累,細胞變形退化,有的發生自溶,革蘭氏染色發生變化
影響衰亡期的因素及實踐意義:1)與菌種的遺傳特性有關:有些細菌的培養經歷所有的各個生長時期,幾天以后死亡,有細菌培養基個月乃至幾年以后任然有一些貨細胞
2)與是否產芽孢有關:產芽孢的細菌更易幸存下來
3)與營養物質和有毒物質有關:補充營養和能源,以及中和環境毒性,可以減緩死亡細胞的死亡速率,延長細菌培養物的存貨時間
四、分批培養:是指將微生物置于一定容積的的培養基中,經過生長培養,最后一次收獲培養方式 連續培養:在一個恒定容積的的流動系統中培養微生物,一方面以一定速率加入新的培養基,另一方面又以相同的速率流出培養物(菌體和代謝產物)
連續發酵的優點:1)高效
2)產品質量較穩定
3)節約了大量動力、人力、水和蒸汽,且使水、汽、電的負荷均衡合理
連續發酵的缺點:1)菌種易退化
2)易污染雜菌 3)營養物質的利用率一般 同步生長:就是指在培養物中所有微生物細胞都同一生長階段,并都能同時分裂的生長方式 同步培養法包括誘導法與選擇法
誘導法:是采用物理、化學一男子使微生物生長到某一階段而停下來,使所有細菌都達到這個階段時再使其生長 恒濁器:根據培養器內微生物的生長密度并借光電控制系統來控制培養液流速,以取得菌體密度高,生長速度恒定的微生物細胞的連續培養
恒化器:與恒濁器相反,是一種設法使培養液流速保持不變 最高生長速率條件下進行生長繁殖的一種連續培養裝置 裝置
控制對象
培養基
培養基流速
生長速率
產物
應用范圍
恒濁器
菌體密度(內控制)
無限制生長因子
不恒定
最高速率
大量菌體或與菌體平行的代謝產物
生產為主
恒化器
培養基流速(外控制)
有限制生長因子
恒定
低于最高速率
不同生長速率的菌體、并使微生物始終在低于其
實驗室為主
五、防腐:是在某些化學物質或物理因子作用下防止或抑制微生物生長的一種措施,它能防止食物腐敗或防止其他物質霉變 消毒:利用某種殺死或滅活物質或物體中所有微生物的一種措施,它可以起到防止感染或傳播的作用
滅菌:利用某種方法殺死物體中包括芽孢在內的所有微生物的一種措施 第七章
1、病毒的特點:1)形態及其微小,一般能通過細菌濾器必須自電鏡下才能觀察
2)沒有細胞構造,主要成分僅為核酸與蛋白質
3)每一種病毒致含有一種核酸
DNA和RNA 4)依靠自身的核酸進行復制,一病毒的核酸和蛋白質等原件實現裝配,實現繁殖
5)嚴格細胞內寄生,缺乏完整的酶和產能系統,只能利用宿主細胞的現成的代謝系統合成病毒自身的核酸和蛋白質
6)在離體條件下,能以無生命力的大分子狀態存在,并可長期保持器侵染力
7)對一般抗生素不敏感,但對干擾素敏感
8)有些病毒的基因可以整合到宿主的基因中去
2、病毒與活細胞的區別:1)結構簡單,沒有細胞結構
2)幾乎所有的毒粒中只有DNA或RNA一種類型的核酸
3)在細胞外不能增殖
3、得到一步生長曲線的實驗:二院培養系統:1)低濃度病毒宿主細胞(給幾分鐘時間侵染)2)高倍稀釋病毒與細胞的培養物
3)保濕培養
4)不同時間取樣,涂布平板,得到效價
5)以時間為橫坐標,病毒濃度為縱坐標繪圖
4、烈性噬菌體:感染宿主后增殖裂解宿主 溶原性噬菌體(溫和性細菌):感染后大多數可整合到宿主基因中少數以染色體外獨立存在
5、病毒分為真病毒和亞病毒,亞病毒又分為類病毒、衛星病毒、衛星RNA、朊病毒 類病毒:是一種只包含RNA的病毒,只在植物中出現,分質量極小,不能編碼蛋白質 衛星病毒:寄生于與之無關的輔助病毒的基因產物的病毒 衛星RNA:是指必需依賴一些輔助病毒進行復制的小分子單鏈RNA,他們被包藏在輔助病毒的殼體中
朊病毒:是一類能引起哺乳動物亞急性海綿樣腦病的病原因子 第八章
P204頁Griffith轉化實驗等3個實驗
基因組:是指位于細菌或細胞中的所有基因 大腸桿菌基因組的特點:1)遺傳信息的連續性
2)功能相關的結構基因組成操縱子結構
3)結構基因的單拷貝及rRNA基因的多拷貝
4)基因組重復序列少而短
質粒:是一種獨立于染色體外,能進行自主復制的細胞質遺傳因子,主要存在于各種微生物中
轉座子:是位于染色體或質粒上的一種能改變自身位置的DNA序列,廣泛分布于原核和真核細胞中
質粒的主要類型:致育因子、抗性因子、Col質粒、毒性質粒、代謝質粒、隱秘質粒
致育因子:又稱F質粒,其大小約100kb,這是最早發現的一種與大腸桿菌的有性生殖現象(結合作用)有關的質粒
抗性因子:是另一類普遍而重要的質粒,主要包括抗藥性和抗重金屬兩大類,簡稱R質粒 Col質粒:該質粒含有編碼大腸菌素的基因,大腸菌素是一種細菌蛋白,只殺死近緣且不含Col質粒的菌株,而宿主不受其產生的細菌素的影響
毒性質粒:致病菌中攜帶的能引起致病性的質粒,這些質粒具有編碼毒素的基因 代謝質粒:攜帶有能降解某些基質的酶的基因的質粒
隱秘質粒:不顯示任何表型效應,它們的存在只有通過物理方法檢測出來 原核生物中對的轉座因子有3種類型:插入順序(IS)、轉座子(Tn)、病毒(Mu)轉座的遺傳學效應:插入突變、產生染色體畸變、基因的移動和重排
基因突變:一個基因內部遺傳結構或DNA序列的任何改變包括一對或幾對堿基的缺失、插入或置換,而導致的遺傳變化
堿基變化對遺傳信息改變的四種類型:同義突變,錯義突變,無義突變,移碼突變 同義突變:是指某個堿基的變化沒有改變產物氨基酸序列的密碼子變化
錯義突變:是指堿基序列的改變引起了產物氨基酸的改變(可能為致死突變)無義突變:是指某個堿基的改變,使代表某種氨基酸的密碼子變為蛋白質的合成的終止密碼子,蛋白質的合成提前終止,產生短截的蛋白質
移碼突變:由于DNA序列中發生1~2個核苷酸的缺失或插入,使翻譯的閱讀框發生改變,從而導致改變位置以后的氨基酸序列的完全變化(一般為致死突變)
表型變化的突變型:營養缺陷型,抗藥性突變型,條件致死突變型,形態突變型 營養缺陷型:缺乏合成其生存所必需的營養物的突變型,只有從周圍環境或培養基中獲得這些營養或前體物才能生長 影印平板P218 抗藥性突變型:是由于基因突變使菌株對某種或某幾種藥物,特別是抗生素產生抗性的一種突變型
條件致死突變型:是指在某一條件下具有致死效應,而在另一條件下沒有致死效應的突變型 形態突變型:是指造成形態改變的突變型(包括菌落形態、顏色一件噬菌斑形態)
自發突變的緣由:1)NDA復制過程產生的錯誤
2)堿基互變異構體的相互轉變
3)轉座子的隨機插入基因
自發突變的特性:1)非對應性
2)稀有性
3)規律性
4)獨立性
5)遺傳和回復
6)可誘變性
誘發突變:堿基類似物、插入染料、直接與DNA其化學反應的誘變劑、輻射和熱、生物誘變因子
DNA損傷修復:光復活作用、切除修復、重組修復、SOS修復 光復活:由phr基因編碼的光解酶進行
切除修復:又稱暗修復,該修復系統除了堿基錯誤配對和單核苷酸插入不能修復外,幾乎其他DNA損傷均可修復,是細胞內主要修復系統
重組修復:是一種越過損傷而進行的修復,這種修復不將損傷堿基除去
SOS修復:是DNA分子受到較大范圍的重大損傷時誘導產生的一種應急反應 P226~227 高頻重組菌等
轉導:是由病毒介導的細胞間進行遺傳交換的一種方式
供體DNA進入受體的命運:1)發生穩定的轉導子
2)流產轉導:即不被降解,又不被整合,也不被復制
3)外源DNA被降解,轉導失敗
遺傳轉化:是指同源或異源的游離DNA分子被自然或人工感受態細胞攝取,并得到表達的水平方向的基因轉移過程
4個影響供體DNA與受體細胞間的最初相互作用:1)轉化片段的大小
2)形態:雙鏈DNA 3)濃度:在在臨界值出現之前成正比
4)生理狀態:感受器——剛停止DNA合成 微生物育種:誘變育種、代謝育種、體內基因組育種 代謝育種:改變代謝途徑、擴展代謝途徑、構建新的代謝途徑 體內基因組育種:原生質體融合,雜交育種
融合子的判別:1)親本遺傳標記的互補的2)親本滅活后性狀的恢復
3)具有雙親本的熒光標記 第九章
順式作用元件:位于基因的旁側,可以調控影響基因表達的核酸序列。其本身并不編碼蛋白質
反式作用因子:通常為蛋白質或RNA,其特征是可以合成并擴散到目標場所發揮作用 正調控:控制因子通過與啟動子原件結合來激活基因的表達 負調控:抑制物與操縱基因結合起來阻止基因表達 P248 操縱子的結構
P249圖
P250 圖
啟動子:是RNA聚合酶和CAP的結合位點,控制著轉錄的起始,一個啟動子可以啟動多個基因的表達
操縱基因:DNA上的一個結合位點,阻抑物能與之結合抑制相鄰啟動子的起始轉錄,操縱基因不表達任何東西 終止子:控制轉錄結束
轉錄因子:轉錄起始過程中RNA聚合酶所需要的輔助因子
轉錄水平的調控:1)DNA的結構
2)RNA聚合酶的功能
3)蛋白質因子及其他小分子配基的相互作用
第四篇:微生物復習總結
11級食品質量與安全班復習總結
一、名詞解釋:
莢膜芽胞細菌外膜Ames試驗溶原性噬菌體/溫和噬菌體毒性噬菌體
L-型細菌Vi抗原血漿凝固酶內毒素卡介苗二相性真菌
肥達反應外裴反應抗-O試驗S9Ascoli熱沉淀反應菌落總數
病毒病毒包膜
二、重點復習:
1、簡述食品衛生細菌學樣品采樣的原則、種類及特點。
2、菌種保存的方法、特點及菌種保管的規章制度。防止菌種退化的主要措施有哪些?
3、細菌外毒素的特點。
4、大腸菌群的定義,食品中大腸菌群數是指什么?
5、致病性葡萄球菌有哪些重要特點?
6、簡述腸桿菌科細菌共同的生物學特性,如何初步區分腸道致病菌與非致病菌?
7、鑒定A群、B群鏈球菌的特征性生化試驗。
8、如何區別肺炎鏈球菌與草綠色鏈球菌?
9、小結KIA、MIU、O/F、枸櫞酸鹽利用試驗及SS、MaCC平板的指示劑.10、小結微生物學生化試驗中常用酸堿指示劑(如酚紅、甲基紅、溴甲酚紫、溴麝香草酚
藍、中性紅)的顯色特點。
11、比較大腸埃希菌、沙門菌、志賀菌、變形桿菌在KIA、MIU上的表現及腸道選擇性培養
基(SS、麥康凱)上的菌落特點。
12、沙門菌細菌學檢查標本采集的原則。
13、變形桿菌的鑒定依據。
14、結腸炎耶爾森菌的重要特征。
15、如何對疑為霍亂的病人標本進行細菌學檢驗?
16、試述銅綠假單胞菌的主要生物學特性。
17、蠟樣芽胞桿菌的形態與培養特性、選擇性培養基,所致疾病。
18、軍團菌的形態與培養特性、培養基,所致疾病、傳播方式
19、肉毒桿菌的形態特征、肉毒外毒素的特點及致病機制、所致疾病、傳播方式。
20、試述炭疽桿菌的主要生物學性狀、致病物質及所致疾病類型。
21、結核分枝桿菌的形態培養特點(培養基、培養條件、生長表現)及抵抗力。
22、試述Ames試驗的原理、試驗菌株、主要方法及結果判定。
23、細菌的分類標記有哪些?簡述細菌的分類方法及特點。
24、測定DNA堿基組成的方法及意義,判定同屬不同種及同一種內不同菌株的標準分別是什
么?(注:同一個種內的不同菌株的G+C mol %差別應在4%~5%以下。同屬不同種的G+C mol %
差別應在10%~15%以下,通常低于10%。)
25、常見的微生物突變類型有哪些?各有何特點?(營養缺陷型、抗藥性突變型、條件致
死突變型、形態突變型)
注:抗藥性突變型的特點是正選擇標記(即突變株可直接從抗性平板上獲得,在加有相
應抗生素的平板上,只有抗性突變能生長。)
營養缺陷突變型的特點是在選擇培養基(一般為基本培養基)上不生長,即負選擇標記。
26、數值分類法與傳統方法的區別。
27、什么是真菌,病原性真菌的培養條件與細菌有何不同?
第五篇:微生物實驗總結
微生物實驗總結
姓名:趙葉鋒班級:食品科學113學號:2011013522
大三的第二學期塊結束了,這個學期操作了四個微生物實驗,以及一個自主設計性實驗。通過前階段對四個實驗的操作和認知的基礎上,展開第五個實驗的自主設計。實驗分別是菌落總數測定,霉菌和酵母的檢查和計數,乳酸菌的檢驗,微生物藥敏試驗以及探討環境因素對微生物生長的影響。
這學期的微生物實驗是在上學期微生物實驗的基礎上的累積和擴展延伸:以培養基的制備與滅菌,玻璃器皿的洗滌、包扎和滅菌,微生物接種技術和細菌的革蘭氏染色為技術基礎進行的,以加強學生基礎理論知識和基本技能的培養為目的。
下面我來談談我在實驗中的心得體會。
第一個實驗是菌落總數測定。讓我重新認識了一下這個名詞:菌落形成單位,我現在的理解就是:1ml或者1g待測樣品中菌落的個數,一定要注意的是單位是CFU/ml或CFU/g。還有就是要掌握好對高壓蒸汽滅菌鍋的操作。實驗之前要充分做好預習工作,以便實驗的進行。由于是測定微生物實驗,就要尤其小心其他雜菌的混入影響實驗結果。因此要做好實驗儀器和各種試劑的滅菌,有培養皿,試管,移液槍頭(裝在盒子中),按要求配置好的瓊脂培養基和生理鹽水,按各自要求用紗布和報紙包扎好,送入高壓蒸汽滅菌鍋進行滅菌。玻璃儀器在包扎前要進行清洗,并烘干,以免水分沾濕報紙。滅完菌后取出物品進入超凈工作臺,超近工作臺的紫外燈在進入20分鐘前開啟,并在進入時關閉,以免影響人體。要對臺面進行消毒處理,用酒精擦拭。可以在等待瓊脂培養基冷卻到50攝氏度左右前對待測樣品進行10倍系列稀釋至需要的濃度。要注意的是一定要標記好濃度或者按順序排列在試管架上以免弄混,同一個試管里吸取樣品才能用同一個槍頭進行移液。再進行平板接種。待瓊脂培養基冷卻好后,用右手打開紗布并將錐形瓶拿住,將瓶口靠近酒精燈再進行滅菌,左手拿培養皿用大拇指和食指稍微打開培養皿蓋,將瓊脂培養基倒入培養皿中心內,不用倒很多,使瓊脂培養基沒過培養皿表面即可。培養皿一定是平拿在手上的,倒好后輕輕蓋上培養皿蓋,緩慢地平方在超凈工作臺臺面邊緣處,再推至中間。再用移液槍取1ml樣品快速打入培養皿中央,蓋上培養皿蓋,然后用手輕輕搖晃,千外不要太大力。然后貼上標簽記號,靜置。如此依次操作下去。靜置一段時間待培養基凝固后倒置放入恒溫培養箱培養一段時間再取出進行觀察計數。
我們組的實驗結果不甚理想,培養皿中的微生物都是連成一片的,或者是培養皿壁上也都長著,主要是由于待測樣品打入培養皿后,搖晃不均勻或者太大力了,以至于菌液沒分散開來或是跑到培養皿壁上去了。
第五個實驗是自主設計實驗環境因素對微生物生長的影響。選取3個環境因素物理、化學和生物因素均可進行設計。根據前四個實驗的基礎,通過小組探討和交流設計出實驗方案。并加以驗證。通過自主設計實驗可以結合小組的智慧,加強團隊協作精神和創新思維,通過實驗可以驗證理論,增加感性認識,培養獨立工作能力和思考能力,并使具有過硬的專業技術水平。
通過這次的實驗,我明白了任何事情丟不是一蹴而就的,而是一個慢慢積累的過程。雖然實驗結果不是很理想,但是我參與了過程,通過小組討論我們也分析了失敗的原因,找到了解決的方法,避免了下一次失誤。并且從中理解了團隊討論和合作的重要性。以上即是我的全部感想。