第一篇：植物病害標本的采集制作與保存-系統發生錯誤

植物病害標本的采集制作與保存

植物病害標本是高等農業院校植物病理學科本科教學不可缺少的實物，它在教學中具有直觀、不受季節和區域限制的特點。因此，植物病害標本的采集、制作和保存是植物病理學科實驗教學中必不可少的基礎知識和技能。1 植物病害標本的采集

在北方由于季節分明，作物品種豐富，植物病害發生頻繁，大部分的植物病害標本都能從田間采集到。但是，病害的發生有一定的規律，要充分掌握病害發生的季節規律及寄主的生長規律才能收獲癥狀特征比較典型的標本。1.1 病害標本采集的工具

植物病害大多發生在根、莖、葉和果實上，因此所用工具要針對不同的部位，常用的工具有刀、剪、鋤、鋸等，還有標本夾、標本箱、標本紙、小玻瓶、紙袋、標簽和記錄本等。1.2 標本的采集

大田采集主要分為按季節采集和按寄主采集。按季節采集主要是針對每年只在特定時期發生的病害。如白粉病具有性階段，小麥白粉病多在每年5—6 月能夠采集到；植物的灰霉病則在低溫陰雨的條件下容易發病，每年3—5 月最容易采到。按寄主采集主要針對寄主范圍廣泛的病害，如霜霉病，可以在很多植物病害的葉片上發現，常見的有萵苣、葡萄、白菜等；疫病如番茄、馬鈴薯、辣椒疫病等。1.3 采集標本的記錄

為了區分采集的不同的標本，采集時要進行記載。主要包括寄主名稱、時間和地點、采集人姓名、主要發生情況和必要的生態環境因子。2 植物病害標本的制作

采集的標本通過鑒定以后，除去作為分離用的標本外，一般都用干燥法或浸漬法進行保存，要求能夠盡量保存標本的本來性狀。一些微小的可以做成玻片標本，比較難以保存的和特殊的標本可通過多媒體掃描系統或顯微系統存入計算機中，制成相應的文體圖形、動畫、視頻圖像等。

2.1 標本干燥制作法

2.1.1 壓制法。采到的植物病害標本，若干燥后容易卷縮的（如稻葉），最好隨采隨壓。其他的可以放到采集箱內帶回去后壓在吸水紙中，用標本夾夾緊，日曬任其干燥。在此期間，要經常更換標本紙。夏季溫度和濕度較高，容易使標本發霉變色，標本紙要勤更換。通常前3~4 d 換1~2 次/d，以后2~3d 換1 次，至標本完全干燥。2.1.2 燙干法或硅膠烘干法。不準備作為分離用的標本可以采用此2 種方法。為了加快標本的干燥速度，更好地保持標本原有的色澤，可以將剛采集的標本放在吸水紙或布中用電熨斗來回迅速燙干或將其加載草紙和干燥過的硅膠粉的標本夾中捆緊，放入50 ℃烘箱中2~3 d，使其很快干燥。

2.1.3 微波爐干燥保色法。為了彌補燙干法的不足之處，劉春元等（2003）報道了根據植物病害標本的質地，摸索了一套微波干燥保色法。此法干燥迅速，保色效果較佳，可長期保存而不褪色。如豆科植物病葉處理1 min，效果最佳，癥狀保存完好。2.1.4 冷凍干燥法。是目前比較好的方法。標本在冷凍的情況下干燥，幾乎能完全保持原有的色澤和形狀。

2.1.5 自然干燥法。水分很少的標本如枝干病害的枝條等，不需要采取任何干燥的手段，在空氣中自然干燥即可。2.2 浸漬標本制作法

對于果實病害和汁液較多的病害以及肉質的子囊菌和擔子菌的子實體，均可以采用浸漬法保存。但此方法占的面積大，保存時間有限，只能用于保存少量的標本，這些標本大多用于教學和示范。浸漬標本的制作，需要配備各種類型的浸漬液，主要包括各種保持原本顏色的保存液和防腐的保存液。

2.2.1 保色浸漬液的配制。根據植物果實病害的寄主植物的顏色，可將保色的浸漬液分為保存綠色浸漬液、保存黃色和桔色的浸漬液、保存紅色的浸漬液等。①保存綠色的浸漬液。保存綠色的浸漬液很多，要根據不同的植物病害標本選擇適當的方法，才能達到好的效果。如醋酸銅浸漬液：將醋酸銅結晶逐漸加在50％的醋酸溶液中，到不再溶解為止，原液要根據標本顏色的不同將其用水稀釋3~4 倍，然后使用。將標本加入到煮沸的稀釋液中，繼續加熱，標本的綠色開始褪去，經3~4 min，使綠色恢復后，將其取出，用清水沖凈，保存于5%的福爾馬林溶液中，或壓制成干燥的標

本。這種方法保色效果良好，但與原色稍有出入。不能煮的如淡綠色蘋果、梨、綠色葡萄等的病害標本可直接浸泡在1%亞硫酸100 ml、95%酒精100 ml、水800 ml 配成的溶液中浸泡10~20d，然后取出，沖洗干凈，再保存在5%的福爾馬林溶液中。另外，還有硫酸銅亞硫酸浸漬液、瓦查（Vacha）浸漬液等，也是保存綠色標本常用的方法。②保存紅色的浸漬液。對于紅色的果實病害標本如草莓、辣椒、馬鈴薯以及其他的植物紅色組織，選擇病害癥狀典型的標本，可以將標本浸入瓦查的紅色浸漬液（硝酸亞鈷15 g，福爾馬林25 ml，氯化錫10 g，水1 000 ml）內，2 周后取出沖洗干凈，浸泡在亞硫酸30~50ml，福爾馬林10 ml，酒精（95%）10 ml，水1 000 ml 配成的溶液中加以保存。③保存黃色和桔紅色標本的浸漬液。含葉黃素和胡蘿卜素的果實如杏、梨、柿子、柑橘等，用亞硫酸溶液保存比較適宜。方法是將亞硫酸（含SO2 5%~6%）配成4%~10%的水溶液（含SO2 0.2%~0.5%）中[1]。總之，各種保色的浸漬液，除有些保存綠色的浸漬液外，保存其他顏色的浸漬液，效果都不理想。為了更好的顯示植物病害的危害狀，最好采用多媒體系統將其掃描或攝影，制作成相應的圖片和視頻進行保存。

2.2.2 防腐浸漬液。對于浸漬標本的保存來說，防腐是最重要的一個環節。因此，需要防腐浸漬液對其進行保存。主要成分如下： 福爾馬林50 ml，酒精（95%）300 ml，水2 000ml，也可單用福爾馬林和酒精。3 植物病害標本的保存 3.1 蠟葉標本的保存

3.1.1 散裝標本。將干燥好的蠟葉標本放進消毒室或消毒箱內，傳統的方法是用酒精、升汞液消毒，或將敵敵畏或四氯化碳與二硫化碳混合液置于玻皿內，利用毒氣熏殺標本上的蟲或蟲卵，約3 d 后即可取出。有條件也在-40 ℃低溫處理消毒。將消毒好的蠟葉標本鑒定、整理，然后裝進標本袋中，貼好標簽，以備實驗課用作實物標本，供學生上課使用。

3.1.2 制作盒裝標本。將植物病害癥狀典型的蠟葉標本和干燥的果實標本，可利用玻面紙盒的方法進行保藏。按照標本的大小，選擇合適的紙盒（一般為長28 cm、寬20 cm、高1.5~3.0 cm），在紙盒中鋪1 層棉花，棉花上放標本和標簽，注明寄主植物、寄生菌的名稱、采集時間等，然后加上玻蓋。棉花中可加入少量的樟腦粉或驅

蟲的藥劑。這種方法制作的標本可長期保存，循環使用。

3.1.3 塑封標本。適合保存葉片標本和較小的莖稈（如小麥、水稻）標本。做法是：根據植物病害標本的大小選擇適當的護卡膜，將1 張比護卡膜稍小的白紙放入護卡膜中，在白紙右下角寫上該標本的標簽，然后把標本放在白紙上擺好，再把膜放平，放入預熱到160 ℃的過塑機封塑即可。如果標本較小、較窄，1 張紙上可放幾個標本，可根據需要分類裝訂成冊。這種方法做出的標本彌補了以上盒裝方法存在許多缺點，如標本盒體積大，攜帶不便，造價較高，只能用肉眼和手持放大鏡觀察標本的局部，對細小組織和結構觀察困難，標本易變色、發霉、受蟲蛀、不耐貯存等。3.2 浸漬標本的保存

將已鑒別的標本適當處理后放在盛有保存液的標本瓶中，用蠟或火棉膠封口后，將標簽貼在標本瓶上進行保存。由于浸漬液所使用的藥品大都為揮發性的，或容易氧化，因此浸漬標本最好放在暗處，以減少藥液的氧化，或瓶口因溫度變化而造成破裂。4 注意事項

植物病害標本的采集受植物生長季節、氣候條件、采集地點、采集時間及作物品種布局等多種因素的影響，要把握時機才能采到需要的癥狀典型的標本。另外，對于病害標本的制作，不同部位制作和保存的方法不同。蠟葉標本在保存過程中，要保持標本室的干燥才能防止發霉，但干燥標本易遭蟲蛀，因此最好每年用甲基溴等藥劑熏蒸，以保證標本的完好。浸漬標本保存液也要經常更換，以保證標本不腐爛。這樣，逐漸積累和補充各種病害標本，才能使實驗課程順利進行，達到預期的良好效果。

昆蟲標本制作方法

一、昆蟲標本的干制法

1.用針刺曬干。用昆蟲針由昆蟲的胸部刺過, 插在軟木板上。插人的針應當垂直, 插人的高度當用刺蟲臺校整, 自然干固。

2.粘蟲紙粘固。較小的昆蟲，如蚤、蚊等, 將其粘在粘蟲紙上后,剪下紙塊, 用

昆蟲針刺在紙上固定曬干。

3.展翅曬干。翅較大的昆蟲,針刺后常常兩翅下落, 這時應使用展翅板, 將其兩翅伸平并用紙條固定曬干。

4.去除內臟。對較大的昆蟲,內臟極易腐敗生霉, 應去除內臟。在腹或背側開口取出內臟, 再用脫脂棉花加以充填, 并放人少量的苯酚，再用昆蟲針從胸中刺人曬干。

5.填蠟法。對較大的蛾類幼蟲, 在去內臟之后（去內臟時用注射器從肛門刺人把內臟全部吸除）, 把化溶的石蠟用注射器從肛門注入其體腔內, 呈現原來的飽滿狀態。放人冷水中加以固化。

6.去臟烤干法。把昆蟲的內臟抽出之后, 用二聯球慢慢打人空氣使之體腔充起, 外加紅外線燈烘烤至干。

7.埋藏法。把昆蟲經固定脫水之后, 用熔化的酒精松香稠液慢慢澆灌, 使昆蟲被包埋藏在松香之中；另法是把昆蟲脫水后, 用白明膠液包藏之。明膠液配法明膠加水和石碳酸, 用水浴法溶化后澆埋之。此外還可以用萬能膠包藏, 效果較好。把脫水的材料放在白紙上用萬能膠滴埋, 使其全部軀體都粘上膠, 待后再滴一次, 滴后應加罩防塵。這種作法效果較好,包埋極薄的一層膠, 不影響觀察, 增加材料的堅固性能, 能防潮防霉。

二、昆蟲標本浸漬法

1.福爾馬林浸存法。用5%福爾馬林浸泡。經3-5d后換液一次再移入5%福爾馬林中保存。

2.酒精浸存法。用50%酒精固定12-24h后移入70%酒精中保存。

3.酒精甘油、甲醛甘油浸存法。將上二配方分別加20%-40%甘油效果更好。能增加昆蟲肢足關節的柔軟性，防治了單用酒精脫水變硬的缺點。

鼠類的標本采制和保藏

山西省農科院濟經作物研究所

柳

樞

在進行鼠類區系、生態調查，滅鼠防治工作中，必須要做好一件事情，就

是收集標本材料，保存和制作好各種鼠類的標本，作為研究生物科學的證據，標本的形跡是最重要的記錄材料，采集標本，鼠夾是最常用的捕鼠工具，種類型號很多，可根據鼠的活動特點

棲息環境以及鼠類的體型大小分別選用。為了不損傷被捕獲的動物，也可選用各種捕鼠籠捕抓活體。此外，亦也有獵槍、小口徑步槍獵取動物。在藥物滅鼠現場則能收集妥善處理。尤其是動物疫病流行地區或不疑地區，在無十分安全可靠的消毒措施及手段時，不要隨便進行采集。必須指出，在進行該項工作時，應穿戴防疫服裝、鞋、襪等，以避被跳蚤等叮咬感染動物流行病。

(1)制作標本所需要的物品

1、消毒用品：氯仿、來蘇兒、酒精、肥皂、洗滌劑等。

2、防腐劑：砒礬粉(配方：亞砒酸、明礬各半研制成細粉)或砒皂膏(配方亞砒酸五分之

一、樟腦五分之二，切碎的肥皂五分之二混合后加水煮成膏)樟腦或衛生球等。

3、工具和物品：熏桶、解剖刀、小剪刀、鉗子、鑷子、天平或小稱、鋼卷尺、鉛絲(粗細根據標本而定)、木板、毛巾、棉花、針、線、標簽、鋼筆、鉛筆、墨水、登記本、大頭針等等。制作生態標本時，還要準備假眼等。

(二)剝制前的處理

對于獲得的標本，務必置于鼠袋內并扎緊袋口，謹防鼠類體外寄生蟲逸出。同時，使用標簽注明采集地點、時間、原則上應以一鼠一袋為準。將帶回的鼠體，首先放在熏桶內、倒入一定量的乙醚、氯仿或氰化鈣，把體外寄生蟲、蚤、螨等熏死和暫時麻醉，然后，用昆蟲鑷或密梳子清揀昆蟲。捕獲的活鼠可就地破壞延髓、壓擠內藏、窒息等法處死。或置于密閉的容器內充以CO2窒息處死。對于獲得的罕見鼠種，即使是幼鼠和有血跡污染，或稍有腐爛尸體，也要用布或滑石粉等擦洗干凈，設法制成標本。經過上述處理的死動物，即可進行標本的測量，鑒定。

(三)外部測量與鑒別

已殺滅體外寄生蟲的死亡動物，挑選毛皮、頭骨、四肢及尾部完整的個體做標本。雖有損傷，但可能是稀有、珍貴或可疑的種類也應選取。選取的標本應先記錄體重，以克為單位，然后進行外部測量。

外部測量以毫米為單位，取其整數即可。測量器械可用兩腳規、鋼卷尺、卡尺等。測量前，將鼠體仰放桌上或搪瓷盤內，取其自然姿態，若是僵死蜷縮的標本，應輕輕揉按直，其使恢復自然姿勢。測定及記載項目包括：標本編號、采集地、日期、性別、體長、后足長、尾長、耳等(見圖1)動物的雌雄鑒別，主要決定于動物的外生殖器結構，雌雄有發達的乳腺位于胸腹部和鼠鼷部兩側；雄性的睪丸自腹腔降落至鼠鼷部的陰囊里。

對于幼體發育不完全，上述特征不易看清，因此不易鑒別。一般說來，可根據位于腹部正中線后端的泌尿生殖乳頭與肛門的距離長短而定，雄性比雌性距離為長。在上述方法皆無法鑒別性別或對于不熟悉的種類，可剖開腹部，通過內生殖器觀察來判斷。雄性可看到陰莖及睪丸，雌性可看到輸卵管及子宮帶。

(四)剝制方法

將鼠體仰放于平板上，用小剪刀或解剖刀輕輕沿腹部正中線，至生殖器前端切開表皮。

(不可用力過大，否則會切開腹肌露出內臟)，在刀口處小心把兩側表皮與肌肉分開，直到膝關節，并推出后腿的膝關節用剪刀將膝關節處剪斷。(如圖2)為了使這項工作作得方便，把后腿足略微向里推一點，此時關膝彎曲，而關節上去了。清除大腿的肌肉，把皮翻過來使恢復原態。另一側用同樣的方法處理。

把生殖器及直腸與皮膚連接處切斷，便可剝離尾部。以后修剪一下尾周圍的結締組織纖維，在此后用一只手的食指與拇指攝緊尾基部皮緣，緩緩緊拉，尾椎即可抽出(見圖3)。切記不可用力過猛、否則尾椎會斷。

尾部剝完后，繼續脫襪子式的向前推脫，一直脫到前肢，從肩胛處切斷。

頭部剝皮比較復雜，應特別小心謹慎，以免碰傷皮膚或頭骨。當翻至頸部上端時會遇到一層半透明的軟骨膜，這是耳殼。將周圍的結締組織輕輕剝離，細剪著耳部的皮膚，再向前剝至眼部，要特別小心，切匆剝破。輕拉皮與頭骨，可見到皮膚與眼球之間有一白色的園環，這就是眼臉。從脂白環與眼球之間小心剪開，繼剝至吻部。先剝下唇，后剝上唇，至鼻端從鼻骨處切斷。到此為止，鼠的尸體與鼠皮完全分開了。頭胄由頸部剪下，系上與鼠皮和采集薄上的一致編號，另行處理。如果要剝制生態標本，頭骨要保留在皮上。在上頷的鼻尖和下頷嘴唇的皮不要完全切開，適當的保留一點，由頭骨后部剪下，把舌頭、眼睛、腦漿挖出來，把頭骨上的肌肉去干凈。

(五)標本的填裝與制作

1、固態標本制作法：首先把皮上殘留肉和脂肪刮去，把破裂的地方要縫合好。將剝皮時留在皮上的四肢骨插上細鐵絲，涂以防腐劑，用棉花纏在四肢骨骼上，使其如生活有肌肉那樣豐滿，取長等于尾尖到胸部的鳥羽軸或竹·簽、鐵絲等卷以適當的棉花插入尾鞘。然后把鼠皮翻過來，開始填裝，填入的棉花應均勻不管裝在什么部位，都要平而松軟，與原來肌肉相似。填充完畢后，將上下唇縫合，再縫合腹皮。縫合時應注意要從里往外穿針，穿針時以免把毛帶進皮的內面。由上而下先拉一針，然后再左右拉線。最后調整姿態，先用小鑷子張鼓眼臉，兩耳豎直，胡須擺正，將皮毛梳理好。標簽一般系在右后腿上。四肢用大頭針固定在硬紙板或木板上，固定時前肢并攏，腳掌向下，兩后肢靠緊尾巴，足掌向下，尾平放于兩后腿之間。而后分別在前飛后肢的掌部用大頭針加以固定(圖4)。在陰干過程中還要不斷加以整形，直到干為止。

2、生態標本制作法：生態標本的制作法與固態標本相同，但是還需要用鐵

絲支持其肢體，并按其生活時的姿態進行制作。鐵絲的粗細應依動物個體的大小而不同。頭部、前后左右附肢及尾部各用一根鐵絲支撐。頭部的鐵絲先用棉花卷成與頸部原有肌肉粗細長短相同，其一端固定于頭骨上。眼窩、吻部等除去肌肉的部分，用棉花填充塑成而與原形相似，將它放在頭皮之內，按其原頭部之形狀矯正眼、耳、臉飛唇的位置。取兩根細鐵絲，一端由足底沿肢骨后側插入肢內，外留一段為固定之用。穿人的鐵絲沿肢骨彎曲，用線縛于骨骼上，外卷棉花以代替除去的肌肉。四肢皮膚翻回原狀，但應注意不可扭轉。尾巴的制法與固態標本同。先將頭和前肢的鐵絲在相當于肩胛骨外扭合，再將后肢和尾巴的鐵絲扭合成適當的軀干支柱，腹內填充棉花，縫合切口。

將制成的生態標本，按所需求的姿態固定于板上或生境架上，整理眼睛耳朵、嘴唇位置，唇間填入適當的棉花或粘土，使它與原肌肉一樣，胡須擺正，兩耳豎直，眼窩內嵌入大小適宜的假眼睛。至此生態標本制作完畢。

假眼的制作有許多方法。小型鼠類的眼睛因其虹彩不大明顯，可采用黑疙瘩釘。對于較大的鼠類，可采用彩色假眼，即用大小適當的半球形黑色飛玻璃體，或黑豆粒等。制作生態標本時，必須熟悉鼠類的生活習性和形態特征，這樣才能制成如生的標本o

3、浸制標本制作：暫時性的保存野外捕獲的鼠類或幼小的哺乳鼠，胎仔、生殖系統等資料，均可用浸制液保存。一般采得上述標本可直接浸于7 5％酒精，或5-10％甲醛(福爾馬林)溶液，或兩者各半的混合液中。對幼小鼠或胎盤內臟等，宜用較稀藥液浸泡，否則，容易硬化。

體型較大的鼠體處死后，應將腹部剖開，使保存溶液易于滲透到內部，以免腐爛。

活的鼠類標本可不經殺死直接投入浸泡液中，待它死后固定變硬之前，將附肢及其它部分調整適當姿態，以便日后觀察研究。

各浸制標本都應拴以標簽，用鉛筆寫上采集時間飛地點、種類等。為防止保存液蒸發，裝有浸制標本的標本瓶除加蓋外，還需將蓋縫四周以石臘密封。藥液如變渾濁，要隨時更換。

4、頭骨的標本制作法：頭骨是標本的一個組成部分，在分類簽定中是不可缺少的。鼠類鑒別，主要是根據外部形態與頭骨結構特征進行的。因此，制成剝制的標本，其頭骨均應制成相應的頭骨標本。

剝皮后的動物從頸部將頭切下，用水蒸法將附在頭骨下的肌肉煮熟后剝制干凈，用小勺子或小鑷子掏凈腦髓，用刷子刷凈后即成。較大的頭骨附著的筋健不易熟爛，可少加些堿面。較小的頭骨，用水煮時，時間不要過長，以免由于過于熟爛至頭骨破碎。此外，小型頭骨的制作也可采用生刮法或發酵法，即將頭骨連同附帶的肌肉浸泡于裝清水的玻璃瓶中或埋在土中，數日后肌肉自行腐爛，然后用清水洗凈制成完整的頭骨標本，制成的頭骨標本，如需漂白，可放于烈日下暴曬或在百分之二的漂白粉溶液中浸泡后清洗，即可達到標本漂白的目的。

(六)標本的保藏

標本是科學研究的資料和依據，也是生物教學的實物，需要長期保存，除應妥善管理不使損壞外，對原來頭骨、皮毛及其它認為有研究、保存價值的標本亦

應成套保管，不能隨便堆放。為了避免混亂，可在頭骨標本的顱骨與下頜骨上分別標以同樣的標號，在相配合的頭骨、假剝制標本或毛皮上也應系上相同的標簽。

標本應放置在通風良好，空氣干燥的室內保存。為使毛皮標本不致蛻色，宜放于柜廚內避免陽光照射。存放標本的柜廚內應經常撒放樟腦以防蟲蛀。標本室要定期用熏蒸毒劑處理，以防蛀蟲。

浸制標本的保藏除以上所述外，亦應注意避光保存。

第二篇：實驗四 植物病害標本采集及制作

實驗四 植物病害標本采集及制作

一、目的要求：

通過采集和制作標本，了解植物病害標本采集要求，學會標本的采集與記錄，掌握植物病害標本的制作方法。沒人鑒定10份病害標本，做3-4病原圖，標注病原名稱、拉丁學名。植物病害標本要能表現出植物病害特征，須注意采集病害癥狀的各種表現。對不認識的寄主植物，一定要采集花、果實以備鑒定，對常見的局部性病害寄主，就不一定采植物整株。但若植物各個器官都發病，則應分別采集各個發病器官。病征是鑒定植物病害的主要依據，凡有病征的植物病害，一定要注意采集帶有典型病征或病原物不同發育階段繁殖體的標本。

二、標本采集

1、觀察

采集時，應縣應對一種植物的反常表現進行觀察，主要觀察他是不是病害（是蟲害、或是機械傷害？是侵染性病害還是非侵染性病害？）這種病害特點是什么？哪些病株可以代表這種病害特點？

2、采集

典型的病害植株選定后，就可以采集所需要的部分，每種標本應采三份。

3、編號登記

采集數種病害標本以后，即可進行編號和登記。按照采集順序給所采集的標本編“采集號”。采集標簽、采集記錄本是記載標本癥狀特點的重要備查依據，應及時、詳細地填寫記載。

三、標本壓制

采集的標本要及時經過壓制，使其迅速干燥和平展，盡可能地保持其自然色澤和狀態，干燥后的標本才能成為有價值的材料永久保存。為此務必做到：

1、在壓制前須進行標本的修剪和整形，勿使過大、過密，然后放在標本紙中加壓吸水干燥。

2、勤換紙、翻壓標本。新采的標本，每日至少換干標本紙一次，遇秋季高濕及多汁標本，每日應換兩次。初次換紙翻壓時應對標本進行整形。三五日后，標本已大部干燥，可以隔日換紙、翻壓直至干燥。

四、采集工具

標本夾、標本紙、采集標簽、記錄本（采集號碼、采集日期、采集地點海拔、寄主名稱、危害部位、癥狀特點、病害名稱、病原菌學名、受害程度、產地環境、產地環境、采集人、標本號數、備注等）、手持放大鏡、修枝剪、手鋸等

第三篇：標本采集、運送、保存程序

標本采集、運送、保存成序

1.目的

規范標本采集程序，保證實驗室檢測前標本質量。2.范圍 微生物標本。3.職責

3.1 醫護人員和檢驗人員負責指導病人如何正確留取標本。3.2 標本運輸人員負責收取標本和運輸標本至微生物室。4.程序

4.1 采集標本前，采樣人員根據檢驗申請單檢驗項目的要求，確認采樣計劃并進行適當的準備工作，包括核對遺囑、打印條形碼、選擇合適的標本容器、粘貼條形碼及指導病人做好采樣前的準備工作等。4.2 認真核對病人、標本容器和檢驗申請單是否一致，嚴防差錯。4.3 標本送到微生物室，標本運輸人員必須與微生物室標本接收人員對標本進行核收登記并簽名

4.4 所有標本必須記錄采樣時間并立即送檢，一般不得超過2h.5 采集方法 5.1 血液及骨髓 5.1.1 血液

5.1.1.1采血時間：①在抗菌藥物治療前；②盡可能在患者寒戰開始時、發熱高峰前30-60分鐘內采血；③如患者已經應用抗菌藥物進行治療，應在下一次用藥之前采血培養；④同時或短時間內完成幾套血

培養采集，除非懷疑存在持續性菌血癥時（如亞急性感染性心內膜炎1-2小時從不同部位采集3套標本）

5.1.1.2采血量：成人一次采血5～10ml,兒童2～5 ml嬰幼兒為1～2ml。（附注：兒童的采血量不能超過其總血容量的1%）。

5.1.1.3采血方法：①成年病人，推薦同時在不同部位采集2～3套（每套包括一瓶需氧瓶、一瓶厭氧瓶）；對于感染性心內膜炎和真菌血癥則應多次采集；對于嬰幼兒病人，推薦同時在不同部位采集2～3瓶。因為兒童患者很少見厭氧菌感染，因此推薦僅使用需氧瓶而不常規推薦同時做厭氧培養。②采血量充足時，應先注入厭氧瓶，后注入需氧瓶；采血量不足時，應先注入需氧瓶，后注入厭氧瓶。5.1.2 骨髓標本用骨髓穿刺針從髂骨采集。

5.1.3 標本保存：采集標本后立即送到實驗室，不能及時送檢可置于室溫，切勿放入冰箱。冬季血培養瓶在送檢過程中應采取一定的保暖措施。

5.2 腦脊液標本：由臨床醫師以無菌要求做腰椎穿刺，抽取腦脊液2～3ml,盛于無菌容器中送檢。腦膜炎奈瑟菌離體后能產生自酶，會迅速自溶，肺炎鏈球菌及流感嗜血桿菌離體后也易死亡，因此，腦脊液無論圖片或培養，必須于采集后立即送檢。5.3 上呼吸道標本

5.3.1 鼻咽標本：將鼻咽拭子緩緩地伸進鼻孔直至鼻咽喉部（注意：不可用力），輕輕轉動，并于該深度停留20～30s,然后迅速地抽出（注意：避免受口或咽部中細菌的污染）。

5.3.2 喉標本：用壓舌板壓舌，用無菌拭子從咽后、扁桃體和發炎區采樣。喉拭子培養不能用于會厭發炎的病人。將轉運管安全封口，注明標識和日期，將標本盡快送到實驗室。5.4 下呼吸道標本 5.4.1 痰

5.4.1.1 采集標本以晨痰為好。支氣管擴張癥病人清晨起床后進行體位引流，可采集大量痰標本。

5.4.1.2 自然咳痰法：在留取痰之前，用清水反復漱口，從氣管深部咳出痰，吐入無菌容器內。

5.4.1.3 支氣管鏡下采集法：在病灶附近用導管吸引或用支氣管刷直接取得標本。

5.4.1.4 氣管穿刺法：在環甲膜下穿刺抽取痰液，收集標本，適用于厭氧菌培養。

5.4.1.5 棉拭采集法：用無菌棉拭子輕輕擦拭病人鼻咽部黏膜，留取標本，置無菌試管內送檢，放置時間不應超過2h.5.4.2 支氣管灌洗液：用不少于140ml無菌生理鹽水灌洗小支氣管和肺泡，40～80ml回收的灌洗液中包含約1ml支氣管末梢和肺泡中的分泌物；棄去前段可能污染的部分，收集其余部分后立即送檢。5.4.3 保護毛刷(PSB):保護毛刷因有雙層套管保護，不易污染上呼吸道和口腔定植菌。用無菌剪刀剪斷毛刷，置于1ml生理鹽水的無菌容器中（僅供需氧培養），快速送檢。5.5 穿刺液標本

5.5.1 采用無菌方法采集體內可疑感染部位的液體約2ml，注入無菌試管，或抽取穿刺液1～2ml注入多功能體液培養瓶，或抽取穿刺液2～5ml注入血培養瓶，混勻，立即送檢。

5.5.2 標本保存：采集標本后立即送到實驗室，若不能及時送檢可置于室溫，放置時間不應超過2h.5.6 生殖器來源

5.6.1 陰道：經過陰道口（introitus），將拭子插入約5ml,輕輕轉動10～30s。確保拭子觸及陰道壁，小心退出，不要觸及皮膚，將拭子轉移到Aptima采集管，與第二線折斷。拭子必須必須置于運輸管中，盡快送抵實驗室。梅毒螺旋體標本從外生殖器的硬下疳處蘸取滲出液，置于載玻片上，加蓋玻片后立即送檢。

5.6.2 前庭大腺：不要在黏膜部位使用乙醇。皮膚準備參見一般部位，吸取前庭大腺膿腫，使用厭氧轉運培養基送至實驗室。5.6.3 用于培養基的子宮頸（宮頸管）標本

5.6.3.1 準備陰道窺器，除溫水外，避免使用潤滑劑，插入陰道窺器，見到子宮頸，用棉拭子拭去多余的黏液，將滌綸拭子插入子宮頸，輕輕轉動，并停留10～30s,取出拭子，置于細菌轉運培養基。5.6.3.2 一般情況下，陰道標本培養不會產生有意義的結果，所以除B群鏈球菌篩檢外，不推薦陰道標本培養。陰道標本不用于厭氧培養。5.6.4 羊膜腔穿刺術：通常由醫生經超聲定位留取樣本，置于封口的注射器或厭氧轉運培養基送抵實驗室。

5.7 前列腺：用肥皂水清洗陰莖頭，經直腸前列腺按摩獲取前列腺液，用無菌拭子采集前列腺液，在室溫下運送標本，選擇前列腺按摩前和最近時刻的尿液同時送去培養。5.8 尿

5.8.1 女性：先以肥皂水清洗外陰部，再以無菌水沖洗，用無菌紗布擦拭，以手指將陰唇分開排尿，棄去前段尿，留取中段尿5～7ml于無菌試管內。

5.8.2 男性：翻轉包皮，用肥皂水清洗尿道口，用清水沖洗，留取中段尿。

5.8.3 兒童、嬰兒：先以無菌生理鹽水棉球清洗其外陰或外生殖器，將無菌拭管或瓶口對準尿道口，以膠布固定于皮膚上，待尿排出后送檢。

5.8.4 兩側腎盂尿：由專科醫生采集，左右側標本必須標明，避免混淆而誤診。

5.8.5 膀胱穿刺：此法用于厭氧菌培養。恥骨上皮膚經碘酊消毒后，再以75%乙醇擦拭，用無菌注射器行膀胱穿刺，吸取尿液后排去注射器內的空氣，針頭插于無菌橡皮塞上及時送檢，2h內進行接種。5.9 糞便標本

5.9.1 自然排便采集：自然排便后，挑取其膿血、黏液部分2～3g,黏液糞便取絮狀物2～3ml，盛于滅菌容器內，或置于保存液（運送培養基）、增菌培養基中送檢。

5.9.2 直腸拭子：如不易獲得糞便時，或排便困難病人及嬰兒，可用直腸拭子采取，即以無菌棉拭用保存液或生理鹽水濕潤后，插入肛門

內4～5cm（幼兒2～3ml）輕輕轉動取出，插入卡布（Cary-Blair）運送培養基內或無菌培容器內送檢。

5.9.3 糞便標本應該立即送檢，室溫保存下不能超過2h，如不能及時送檢可以發放入磷酸鹽甘油（ph7.0）或轉運培養基，但不能超過24h.培養艱難梭菌的標本保存于20℃以下。培養沙門菌和致賀菌的標本應放置磷酸鹽甘油溶液中保存。保存彎曲桿菌和弧菌的標本，需加Cacl2(100mg/L)試劑。5.10 膿及創傷標本

5.10.1 封閉性膿腫消毒局部皮膚或黏膜表面后，用無菌注射器抽取，用無菌手術刀切開栗粒狀膿腫（miliary abscess），使用無菌注射器和針頭采集露出的標本。

5.10.2 將膿液注入多功能培養瓶或無菌試管內送檢。疑為厭氧菌感染時，應做床邊接種或厭氧運送培養基內送檢。

5.10.3 開放性膿腫和膿性分泌物用無菌鹽水或75﹪乙醇擦去表面滲出物，用拭子深入潰瘍深處采集2支拭子，1支為圖片檢查用，1支為培養用。

5.10.4 大面積燒傷的創面分泌物用滅菌棉拭取多部位創面的膿液或分泌物，置滅菌試管內（注明采集部位）送檢。

5.10.5 對未引流膿腫：使用無菌注射器和針頭，按無菌操作技術，從中采集膿性物。用無菌手術刀切開栗粒狀膿腫，使用無菌注射器和針頭采集露出的標本。

5.10.6 疑為放線菌屬、奴卡菌屬感染時，在檢查單上注明需要排除

放線菌屬、奴卡菌屬。

5.11 褥瘡潰瘍：用無菌鹽水清洗表面后如得不到活檢標本或抽吸物，則用拭子用力采集損傷底部。由于褥瘡潰瘍拭子臨床價值不大，一般選擇組織活檢或針頭抽吸樣本。

5.12 大皰、蜂窩組織炎、小皰：皮膚消毒同血液培養，用無菌針頭和注射器抽吸液體或化膿性物質，如果獲得了抽吸物，將之置于合適細菌轉運培養基。如果沒有得到抽吸物，將小皰或大皰性病變打開，使用棉拭子采集病變部位，置于轉運培養基中。

5.13 中心靜脈導管標本：用無菌鑷子將5cm導管尖端或近心端送至實驗室。5.14 耳部標本

514.1 內耳：穿刺前用肥皂水清洗外耳道再進行消毒程序，最后用注射器穿刺鼓室抽吸膿液。對鼓室破裂者，用專用采樣管中配備的細頭軟桿拭子采集膿液，膿液量大也可采用注射器抽吸。

5.14.2 外耳：先用潤濕的棉簽清潔外耳道，再用專用采樣管中配備的毛刷狀采樣拭子在外耳道內用力旋轉摩擦取樣。5.15 眼部標本

5.15.1 結膜：采樣前先用無菌鹽水潤濕拭子，再繞結膜取樣，最好兩眼各采集2支拭子：其中1支用于涂片。建議在床邊接種。采集時，須小心地避免感染延至眼部臨近區域。注意，須標明左眼、右眼的標本。

5.15.2 角膜：由眼科醫生采用刮取法采集標本：采集前先滴2滴局

部麻醉液，再用角膜上皮刮鏟刮取病變角膜組織，將刮擦物用少許生理鹽水洗下，置無菌杯中送檢。

5.16組織標本采集：表淺的感染組織和各種竇道標本可用棉簽擦拭、小刀刮取、穿刺抽吸或手術切除，對竇道和瘺管應深部刮取，獲得部分管壁組織。深部組織標本可在手術過程中或采取穿刺活檢或抽取分泌物送檢，也可使用相應的內鏡采集活檢標本。標本置無菌容器中并加入少量生理鹽水以保持濕度，或置肉湯增菌液中送檢。如懷疑為軍團菌感染，肺組織切片不要滴加生理鹽水（能抑制軍團菌生長）。如果懷疑為厭氧菌感染，應把組織放入厭氧的傳輸系統內立即送檢。5.17引流液：用70%乙醇消毒導管采集部位，用注射器從引流管無菌采集2～3ml。標本不能直接從引流袋放出，因引流液在袋中潴留時間太長容易滋生細菌。

第四篇：標本采集常見錯誤分析

標本采集常見錯誤分析

送檢標本的質量控制包括分析前、分析中、分析后三個主要過程的質量管理。大多數不滿意的檢驗報告單可溯源到標本質量不符合要求，而分析前標本的質量控制對檢驗結果的可靠性有至關重要的影響，標本采集是影響標本質量最重要的因素之一。我們在加強與臨床、護理溝通的同時，堅持標本的核實驗收和不合格標本退回制度，目的就是為了把好標本質量關。以下是近年來血液及其他標本采集中最常見的錯誤，希望能引起重視。

1．凝血不充分：此類錯誤排在第一位，主要是抗凝血中存在小凝塊，多發生在血常規檢測中，為采血后標本沒有充分顛倒混勻所致；另外，標本量過多，由于抗凝劑的相對不足，血漿中出現微血凝塊的可能性增加。微血凝塊除易阻塞檢測儀器外，由于血液內部分成分的消耗而影響檢測結果。一份只有仔細檢查才能發現小凝塊的標本，可以使血小板降低30%甚至更多，紅細胞、白細胞計數也可以降低10%左右。我們規定，對用于血常規的標本均輕輕顛倒并仔細觀察，絕大部分可以檢查出。2．抗凝劑與血液比例不正確：在凝血功能測定中，常有一些標本量明顯不足，特別是兒童和入院檢查病人標本，由于小孩采血難，入院時需檢查項目多，最易發生抽血量不足，使PT、KPTT和TT假性延長，將誤導臨床診治。因此，血液未到刻度的標本一律退回重抽。

3．標本溶血：許多指標在紅細胞內和血清（血漿）明顯不同，溶血可使LDH、HBDH、血K+、AST、ALT或等值異常升高。此類錯誤是采血時的一些不良習慣造成，如：壓脈時間過長，采血不順利、抽血速度太快、血液注入容器時未取下針頭或用力過猛、等均可造成溶血。我們作過實驗，選擇20位體格檢查者，用兩種方法進行比較：⑴用注射器抽血后不去除針頭直接將針頭插入真空采血管，這時在真空管負壓作用下針管內的血液被吸入；⑵用注射器抽血后先除去針頭，然后打開真空采血管蓋子緩緩注入標本，兩種采血方法的標本同時作部分生化項目檢測，結果是：前者比后者LDH上升23.4%－58.2%，平均33.7%；HBDH上升22.5%－61.4%，平均35.4%；AST上升6.7%－31.6%，平均13.7%；ALT上升4.7%－18.2%，平均11.4%；血K+上升23.7%－71.2%，平均36.1%，其它如TP、GGT和UREA等也有或多或少的變化。因此，我們主張用真空采血系統自然流出的標本為宜，如果必須用注射器抽血，抽血后要取下針頭，再緩緩將血液注入標本采集管。對于未用真空采血系統的單位，若注射器和針頭連接不緊，采血時有空氣進入或產生泡沫，使用劣質采血器，標本收集管沒有干燥均易造成溶血。

4．采血部位不當：有些病人需多次檢查，或輸液時間較長，有的護士會在病人輸液更換瓶子時放出一些血液送檢，即使先去除前面的10ml血液，結果也有明顯變化。如一例輸脂肪乳后直接從輸液的靜脈中采血，導致了許多結果錯誤，影響前三位的是：TG為12.4mmol/L(平時為1.0 mmol/L左右)，血小板達560×109/L（上升了4倍多），總蛋白濃度從60左右上升到91.6(g/L)。其它常有明顯影響的有血糖、血電解質等項目。雖臨床也知道正確的采血方法，但由于護理人員流動性大，工作量超負荷，不時有此類標本送檢，只有反復與臨床溝通、宣傳，加上對標本審核，對于血細胞比例明顯不對，結果不合理或有異常變化，及時與臨床聯系，減少不合格報告發出。

5．采血量不足：對于血培養而言,采血過少可降低培養的陽性率。有文獻報告,當培養的血量從2ml增加至20ml時,血培養的陽性率增加30%—50%,培養血量每增加1ml,陽性率增加3%—5%。由于標本已經注入培養瓶，不能檢查是否符合要求，只有加強溝通交流，共同努力提高檢驗質量。

6．標本采集時間不當：對細菌培養、激素檢查、找瘧原蟲或絲蟲病原體，需在特定的時間，以提高陽性率。

7．標本運送和處理不及時：標本的運送雖不屬采集范疇，但標本采集再規范，若不能及時送檢，將嚴重影響檢驗質量。尿常規標本需在二小時內檢測完成，否則細胞等有形成分開始破壞；離體過長的標本作血細胞分析時會影響分類結果；生化檢測的標本也因為細胞內外物質交換而變化。我們要求標本及時送檢，到檢驗中心的標本盡快測定，不能及時測定的生化、免疫等標本及時分離血清，加蓋并置4℃冷藏。

以上是標本采集過程常見的錯誤，屬于分析前質量控制的重要部分，做好分析前質量控制是保證檢驗結果正確是前題和關鍵。有人對一份臨床標本的整個測試時間分布進行統計，結果顯示報告申請、抽血和運輸占整個測試時間的55%，標本編號、分離和編程占14%，上機檢測占4%，分析前的工作超過70%；用于儀器檢測的工作量為25%；核對和報告的時間不足3%。除標本采集外，病人的準備工作，所用藥物等對結果也有影響。如檢查2小時血糖時沒有按規定進餐（1個雞蛋，2根油條，1個包子加1杯牛奶），結果為7.4 mmol/L，重新檢查按規定飲食（75克糖溶于250 ml水中，5分鐘內喝完），結果為5.4 mmol/L。

質量是檢驗科的生命，質量的提高要全部醫務人員的共同努力，我們應主動和臨床乃至患者的溝通，加深了解。通過溝通，讓雙方都能夠從思想上認識到分析前質量控制的重要性，并能真正重視標本的采集工作，從而保證送檢標本的質量。另外，檢驗科工作人員也要提高質量意識，認真負責地做好標本的保存、處理等工作，并嚴格執行《不合格標本拒收制度》，做好解釋工作。

第五篇：血標本采集錯誤演練

標本采集錯誤的應急演練

時間：2015-2-14 地點：外科大樓8樓產科病房

參加人員：主班（）責護（）護士（）護士（）病人（）病人（）家屬（）

主班接到醫囑，3床（）查凝血功能，和責護核對無誤后粘貼采血管，并登記在標本采血登記本。責護（），拿著采血單到病房：3床（），你今天在門診抽血，查了血常規和肝腎功，沒有查凝血功能。辦了住院，我們就不允許外出外宿，請你明天早上七點務必要在病房，我們護士會到床邊給你采血的。

護士（）：三床（）是吧，現在我給你抽血了？ 病人處于半睡半醒狀態：是的。責護進行采血，采血畢.三床按呼叫器，護士趕到床邊詢問：您好，請問你有什么事嗎？ 病人回答：昨天我的責任護士告訴我今天早上，我要抽血化驗，昨天晚上家里有事就回去了，剛來，麻煩你現在給我抽血吧。

護士（）和護士（）核對后發現3床的凝血功已抽，并已經送檢了，去病房詢問，原來早上抽血時加3床病人睡在三床了。護士（）電話聯系檢驗科：你好，檢驗科嗎？我們是產科，剛送去的3床（）的凝血功你們化驗了嗎？

檢驗科：正在準備化驗呢，有什么事嗎？ 護士（）：發生采血錯誤，麻煩你們暫停化驗，并將此標本丟棄，我們馬上再抽血送檢，謝謝！

護士（）重新打印了3床的凝血功能的條碼，粘貼試管，和護士（）核對無誤后去病人床邊，核對無誤后給3床（）抽血，并及時送檢。

護士（）來到加3床床邊：不好意思，早上抽血的時候，您躺在3床的床上，我沒有仔細核對你的身份信息，就抽成你的了，我們已經給檢驗科打電話暫停化驗了。你不要太緊張。

加3床：沒事，晚上家屬沒地方睡，3床回去了，所以我就睡在她的床上了。護士（）：鐘護士長，剛才發生一起標本采集錯誤，現在向您匯報。

鐘護士長：通知全科護士，今天下午5：30學習，共同討論分析標本采集錯誤的原因并提出整改措施，現在先進行網報。演練結束！