第一篇：病理科操作規(guī)范及流程

病理標(biāo)本的驗(yàn)收規(guī)范及流程

病理科應(yīng)有專(zhuān)人驗(yàn)收普通活體組織病理學(xué)檢查(常規(guī)活檢)申請(qǐng)單和送檢的標(biāo)本。

(二)病理科驗(yàn)收人員必須：

1． 同時(shí)接受同一患者的申請(qǐng)單和標(biāo)本。

2． 認(rèn)真核對(duì)每例申請(qǐng)單與送檢標(biāo)本及其標(biāo)志（聯(lián)號(hào)條或其他寫(xiě)明患者姓名、送檢單位和送檢日期等的標(biāo)記）是否一致；對(duì)于送檢的微小標(biāo)本，必須認(rèn)真核對(duì)送檢容器內(nèi)或?yàn)V紙上是否確有組織及其數(shù)量。發(fā)現(xiàn)疑問(wèn)時(shí)，應(yīng)立即向送檢方提出并在申請(qǐng)單上注明情況。3．認(rèn)真檢查標(biāo)本的標(biāo)志是否牢附于放置標(biāo)本的容器上。

4．認(rèn)真查閱申請(qǐng)單的各項(xiàng)目是否填寫(xiě)清楚，包括：①患者基本情況［姓名、性別、年齡，送檢單位（醫(yī)院、科室）、床位、門(mén)診號(hào)/住院號(hào)、送檢日期、取材部位、標(biāo)本數(shù)量等］，②患者臨床情況［病史（癥狀和體征）、化驗(yàn)/影象學(xué)檢查結(jié)果、手術(shù)（包括內(nèi)鏡檢查）所見(jiàn)、既往病理學(xué)檢查情況（包括原病理號(hào)和診斷）和臨床診斷等］。5．在申請(qǐng)單上詳細(xì)記錄患者或患方有關(guān)人員的電話號(hào)碼，以便必要時(shí)進(jìn)行聯(lián)絡(luò)，并有助于隨訪患者。

(三)驗(yàn)收標(biāo)本人員不得對(duì)申請(qǐng)單中由臨床醫(yī)師填寫(xiě)的各項(xiàng)內(nèi)容進(jìn)行改動(dòng)。

不合格標(biāo)本的處理規(guī)范與程序

1． 申請(qǐng)單與相關(guān)標(biāo)本未同時(shí)送達(dá)病理科；

2．申請(qǐng)單中填寫(xiě)的內(nèi)容與送檢標(biāo)本不符合； 3．標(biāo)本上無(wú)有關(guān)患者姓名、科室等標(biāo)志； 4．申請(qǐng)單內(nèi)填寫(xiě)的字跡潦草不清； 5．申請(qǐng)單中漏填重要項(xiàng)目； 6．標(biāo)本嚴(yán)重自溶、腐敗、干涸等； 7．標(biāo)本過(guò)小，不能或難以制做切片；

8．其他可能影響病理檢查可行性和診斷準(zhǔn)確性的情況。

病理科不能接收的申請(qǐng)單和標(biāo)本一律當(dāng)即退回申請(qǐng)醫(yī)師，不予存放，并記錄。病理標(biāo)本檢查和取材規(guī)范及程序

1.取材前閱讀申請(qǐng)單中的內(nèi)容，初步判斷病變的性質(zhì)。2.核對(duì)申請(qǐng)單的編號(hào)與標(biāo)本的編號(hào)、標(biāo)本的份數(shù)是否相符。３.對(duì)于核對(duì)無(wú)誤的標(biāo)本應(yīng)按下列程序取材：

３.１小標(biāo)本和不完整的標(biāo)本通常為活檢標(biāo)本，應(yīng)按如下標(biāo)準(zhǔn)取材。

３.１.1應(yīng)描述和記錄送檢標(biāo)本的數(shù)量（少量時(shí)精確計(jì)算，多量時(shí)進(jìn)行估計(jì)）、大小（若干mm或cm；多量時(shí)聚攏測(cè)量）、形狀、色澤和質(zhì)地等。

３.１.2少量的小標(biāo)本應(yīng)全部取材制片。

３.１.３多量的小標(biāo)本，原則上全部取材制片；數(shù)量過(guò)多時(shí)，可盡量多地取材制片，剩余的標(biāo)本應(yīng)置于4%的中興甲醛中妥善保存?zhèn)溆谩?/p>

３.１.４.黏膜和皮膚組織應(yīng)“立埋”，即將黏膜面與包埋盒的 底面垂直。

３.１.5使用鑷子夾取標(biāo)本時(shí)須嚴(yán)防擠壓組織。３.２大標(biāo)本通常為手術(shù)標(biāo)本，應(yīng)按如下標(biāo)準(zhǔn)取材：

３.２.1 記錄切除標(biāo)本的手術(shù)類(lèi)型。

３.２.2應(yīng)描述和記錄送檢標(biāo)本的大小（三維長(zhǎng)度，mm或cm）、形狀、色澤、表面、質(zhì)地等，球形或接近球形的標(biāo)本可測(cè)其直徑（mm或cm）。必要時(shí)稱(chēng)重（g或kg）。

３.２.3檢查切面：通常沿標(biāo)本長(zhǎng)徑切開(kāi)或剪開(kāi)（囊性標(biāo)本時(shí)），3 描述和記錄其形狀特點(diǎn)，例如囊性和實(shí)性及其所占比例、色澤、質(zhì)地、紋理、壞死；囊腫壁的厚度及其內(nèi)外表面、囊腔內(nèi)容物及其性狀等，有的臟器，例如前列腺、胰腺、甲狀腺等，應(yīng)間隔一定距離（甚至間距2mm左右）做多個(gè)平行切面，檢查有無(wú)微小腫物。

３.２.4帶有臟器的標(biāo)本，應(yīng)描述和記錄病變處與有無(wú)臟器的毗鄰關(guān)系特點(diǎn)。

３.２.5必要時(shí)，繪簡(jiǎn)圖說(shuō)明巨檢病變的特點(diǎn)和解剖學(xué)關(guān)系，病注明取材部位的編號(hào)，以便鏡檢時(shí)定位。

３.２.6切取有代表性病變區(qū)域的組織制片，適量包括與病變區(qū)域毗鄰的“正常”結(jié)構(gòu)和壞死組織等。

３.２.7完整切除的腫瘤標(biāo)本，切取的組織塊應(yīng)包括其包膜，較

大的腫瘤應(yīng)酌情多處包膜取材。

３.２.8切取組織塊的刀具必須鋒利，嚴(yán)防擠壓組織。３.２.9切取組織塊的數(shù)量，依巨檢病變的具體情況酌定，一般以滿足診斷需要為準(zhǔn)。組織塊的面積，通常在2cmx1.5cm以內(nèi)，厚度不宜超過(guò)3mm（快速包埋制片時(shí)則應(yīng)盡量薄些）。

３.２.10組織塊的切面應(yīng)平整。需要指定組織塊的包埋面時(shí)，可將其非包埋面切出凹痕作為標(biāo)記。管壁和囊壁組織應(yīng)立埋。

４.標(biāo)本攝影，必要時(shí)酌情進(jìn)行（標(biāo)本固定前或固定后）。５.切取組織塊的編號(hào)、數(shù)量和取材后是否尚有標(biāo)本存留等均應(yīng)在活檢記錄單的肉眼檢查描寫(xiě)欄內(nèi)和取材工作單中注明，以便鏡檢時(shí)核對(duì)切片。例如，1.組織較少，全部包埋制片者，可注明“全”字；2.針吸、內(nèi)鏡取材或少量易碎的組織，須用軟紙妥善包裹（以防制片過(guò)程中丟失），可注明“包”字；3.取材后尚有存留的標(biāo)本，可注明“留”字等。

６.需要重新肉眼檢查標(biāo)本時(shí)，應(yīng)在有關(guān)病例活檢記錄單中補(bǔ)充必要的文字描述，需要補(bǔ)充切取組織塊時(shí)，應(yīng)按上述取材操作程序進(jìn)行，并應(yīng)在相關(guān)活檢記錄單、取材工作單中和編號(hào)小條上注明“補(bǔ)”字。常規(guī)石蠟包埋組織切片規(guī)范及程序

１.脫水（常溫下）

3.2.1乙醇-甲醛（AF）液固定：60~120min。3.2.2 80%乙醇：60~120min。3.2.3 95%乙醇Ⅰ：60~120min。3.2.4 95%乙醇Ⅱ：60~120min。3.2.5 無(wú)水乙醇Ⅰ：30~60min。3.2.6無(wú)水乙醇Ⅱ：30~60min。3.2.7無(wú)水乙醇Ⅲ：30~60min。２.透明

a..二甲苯Ⅰ：20 min。b.二甲苯Ⅱ：20 min。c.二甲苯Ⅲ：20 min。

３.浸蠟

3.3 石蠟Ⅰ（45~50℃）：60 min。3.4 石蠟Ⅱ（56~58℃）：60 min。3.5 石蠟Ⅲ（56~58℃）：60 min。4 包埋

４.１先將熔化的石蠟傾入包埋模具中，再用加熱的彎曲鈍頭鑷子輕輕夾取已經(jīng)浸蠟的組織塊，使組織的最大面或被特別指定的組織面埋入熔蠟中，應(yīng)將組織塊平整地置放于包埋模具底面的中央處。包埋于同一拉塊的多塊細(xì)小組織應(yīng)彼此靠近并位于 同一平面上；腔壁、皮膚和黏膜組織必須垂直包埋（立埋）。４.２將與組織塊相關(guān)的病理號(hào)小條置入包埋模具內(nèi)熔蠟的一側(cè)。

４.３待包埋模具內(nèi)的熔蠟表面凝固后，即將模具移入冷水中加速凝固。

４.４從包埋模具中取出凝固的包埋蠟塊（簡(jiǎn)稱(chēng)蠟塊），用刀片去除組織塊周?chē)倪^(guò)多石蠟（組織周?chē)Ａ?~2mm石蠟為宜）。將包埋蠟塊修整成為規(guī)則的正方形或長(zhǎng)方形。

４.５將病理號(hào)小條牢固地烙貼在蠟塊一側(cè)（編號(hào)應(yīng)清晰可見(jiàn)）。４.６把修整好的蠟塊烙貼在支持器上，準(zhǔn)備切片。４.７使用包埋機(jī)的方法按有關(guān)廠商的說(shuō)明書(shū)操作。5 切片

5.1 切片刀或一次性切片刀必須鋒利。5.2 載玻片必須潔凈、光亮。

5.3 將切片刀或刀片安裝在持刀座上（以150為宜）。

5.4 細(xì)心移動(dòng)刀座或蠟塊支持器，使蠟塊與刀刃接觸，旋緊刀座和蠟塊支持器。

5.5 修塊（粗切）。用右手勻速旋轉(zhuǎn)切片機(jī)輪，修切蠟塊表面至包埋其中的組織塊完整地全部切到。修塊粗切片的厚度為15~2μm。

5.6 調(diào)節(jié)切片厚度調(diào)節(jié)器（一般為4~6μm），進(jìn)行切片。5.7 以專(zhuān)用小鑷子輕輕夾取完整、無(wú)刀痕、厚薄均勻的蠟片放入 伸展器的溫水中（45℃左右），使切片全面展開(kāi)。

5.8 將蠟片附貼于載玻片上。蠟片應(yīng)置放在載玻片右（或左）2/3處的中央，留出載玻片左（或右）1/3的位置用于貼附標(biāo)簽。蠟片與載玻片之間無(wú)氣泡。

5.9 必須立即在置放了蠟片的載玻片一端，用優(yōu)質(zhì)記號(hào)筆或刻號(hào)筆準(zhǔn)確、清楚地標(biāo)記其相應(yīng)的病理號(hào)。

5.10 將置放了蠟片的載玻片呈45℃斜置片刻；待載玻片上的水分流下后，將其置于烤箱中烘烤（60~62℃，30~60min），然后即可進(jìn)行染色。

5.11 內(nèi)鏡小的活檢，穿刺等組織需連續(xù)切片不少于６片。5.12 針對(duì)不同組織（如小活檢，骨組織，淋巴結(jié)等），優(yōu)化制片，染色流程，保證切片質(zhì)量。術(shù)中快速冰凍切片的規(guī)范及程序

１.冰凍切片的制備

１.１打開(kāi)照明開(kāi)關(guān)，打開(kāi)冰凍切片機(jī)的玻璃箱蓋。１.2選擇凍頭，在凍頭滴上冰凍切片機(jī)包埋劑適當(dāng)。１.3 待組織完全冷凍后，將凍頭移到切片刀口的凍口內(nèi)，扭緊凍頭，進(jìn)行切片，切片時(shí)有節(jié)奏的來(lái)回推動(dòng)搖手柄，切得完整且較薄的切片（厚度8-9um），即可貼在玻璃片上。

１.4 將切好的片子用95%的乙醇固定，然后進(jìn)行染色、封片、鏡檢（同石蠟切片H-E染色步驟）。

１.5 工作完畢后將凍頭上組織取出，放回送檢的標(biāo)本袋內(nèi)，用10%的中性甲醛固定液固定。

１.6清掃切冰凍切片機(jī)箱，將凍頭擦干后放回冰凍切片機(jī)內(nèi)。

１.7關(guān)好冰凍切片機(jī)的玻璃箱蓋，關(guān)閉照明電源。２.冰凍切片機(jī)須24h開(kāi)機(jī)，長(zhǎng)假或節(jié)假日前檢查切片機(jī)箱內(nèi)的結(jié)凍情況，必要時(shí)關(guān)機(jī)，化霜，清潔冰凍切片機(jī)。３.注意事項(xiàng)

３.1 制作冷凍切片所需的試劑和設(shè)備等應(yīng)處于隨時(shí)可供使用狀態(tài)。

３.2 切取的組織塊大小適宜（厚度<2mm），并盡快置于冷凍組織切片機(jī)上制備切片。

３.3 調(diào)節(jié)冷凍程度，試切合合適時(shí)便迅速切片。冷凍不足無(wú)法切片，冷凍過(guò)度切片易碎。

３.4 冷凍切片固定液

95%乙醇

50ml ４.單體標(biāo)本的冰凍制片應(yīng)在１５min內(nèi)完成。術(shù)中快速冰凍診斷的規(guī)范及程序

１.臨床醫(yī)師在術(shù)前向患者或近親屬告知術(shù)中快速病理診斷的局限性，簽署術(shù)中快速病理診斷知情同意書(shū)。

２.從標(biāo)本接收到發(fā)出報(bào)告的時(shí)間，應(yīng)在病理申請(qǐng)單上注明。３.有條件的由兩位中／高級(jí)稱(chēng)職的病理醫(yī)師共同簽署快速活檢的病理診斷意見(jiàn)。對(duì)于病變疑難、手術(shù)切除范圍廣泛和會(huì)嚴(yán)重致殘的手術(shù)中快速活檢，應(yīng)由兩位高級(jí)稱(chēng)職的病理醫(yī)師共同簽署會(huì)診意見(jiàn)。主檢病理醫(yī)師簽名的字跡應(yīng)能辨認(rèn)。

４.快速活檢診斷意見(jiàn)一般在收到送檢標(biāo)本后３０min內(nèi)發(fā)出；同一時(shí)間段內(nèi)相繼收到的多例患者標(biāo)本或是同一例患者的多次標(biāo)本，其發(fā)出報(bào)告的時(shí)間依次類(lèi)推。對(duì)于疑難病變，可酌情延時(shí)報(bào)告。５.對(duì)于難以即時(shí)快速診斷的病變（例如病變不典型、交界性腫瘤病變或送檢組織不足以明確診斷等），主檢病理醫(yī)師應(yīng)向手術(shù)醫(yī)師說(shuō)明情況，恰如其分地簽發(fā)病理診斷意見(jiàn)或告知需要等待常規(guī)石蠟切片進(jìn)一步明確病理診斷。

６.主檢病理醫(yī)師簽署的快速活檢病理診斷意見(jiàn)，以書(shū)面形式報(bào)告（可傳真或網(wǎng)絡(luò)傳輸）。快速活檢病理診斷意見(jiàn)報(bào)告書(shū)發(fā)出前應(yīng)認(rèn)真核對(duì)無(wú)誤。

７.冷凍切片后剩余組織的處理

７.１ 冷凍切片后剩余的冷凍組織（簡(jiǎn)稱(chēng) “凍后”）和冷凍切片取材后剩余、未曾冷凍的組織（簡(jiǎn)稱(chēng)“凍剩”），均應(yīng)保存，用以制備常規(guī)石蠟切片，以便與冷凍切片進(jìn)行對(duì)照觀察。７.２“凍后”／“凍剩”組織的蠟塊和切片需與同一病例手術(shù)后送檢的切除標(biāo)本編為同一病理號(hào)，并作出綜合性診斷。

７.３當(dāng)冷凍切片病理診斷意見(jiàn)與其“凍后”組織的常規(guī)石蠟-HE片的病理診斷不一致時(shí)，該例的病理診斷一般應(yīng)以石蠟-HE片診斷為準(zhǔn)。常用特殊染色的操作規(guī)范

膠原纖維染色

Van Gieson(VG)苦味酸-酸性品性紅法

一、染色程序

1、組織塊固定于4%中性甲醛液中，常規(guī)脫水、石蠟包埋和切片。

2、切片脫蠟至水。

3、用Weigrt鐵蘇木精液染5-10min。

4、流水稍洗。

5、1%鹽酸-乙醇迅速分化。

6、流水沖洗5-10min。

7、用Van Gieson液染1-2min。

8、傾去染液，直接用95%乙醇分化和脫水。

9、無(wú)水乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹(shù)膠封固。

二、染色結(jié)果 膠原纖維呈鮮紅色。細(xì)胞質(zhì)、肌纖維和紅細(xì)胞呈黃色，胞核呈藍(lán)褐色。Maasson三色法

一、染色程序

1、組織塊固定于4%中性甲醛液中。用Bouin液或Zenker固定時(shí)，流水沖洗組織塊過(guò)夜，效果更好。常規(guī)脫水、石蠟包埋和切片。

2、切片脫蠟到水。組織塊經(jīng)Zenker液固定時(shí)應(yīng)對(duì)切片進(jìn)行除汞處理：（1）切片脫蠟后，以0.5%碘乙醇作用10min；（2）稍水洗；（3）以5%硫代硫酸鈉作用5min；（4）流水沖洗10min。

3、gert鐵蘇木精液染5-10min。

4、流水沖洗。

5、1%鹽酸-乙醇分化。

6、流水沖洗5-10min。

7、麗春紅酸性品紅液染5-10min。

8、蒸餾水稍洗。

9、1%磷鉬酸水溶液處理約5min。

10、不用水洗，直接用苯胺藍(lán)液復(fù)染5min。

11、0.2%冰醋酸處理1min。

12、95%乙醇脫水并洗去冰醋酸。

13、無(wú)水乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹(shù)膠封固。

二、染色結(jié)果 膠原纖維呈藍(lán)色。細(xì)胞質(zhì)、肌纖維和紅細(xì)胞呈紅色，胞核呈藍(lán)色。

網(wǎng)狀纖維染色

氫氧化銀氨液浸染法

一、染色程序

1、組織塊固定于4%中性甲醛液中，常規(guī)脫水、石蠟包埋和切片。

2、切片脫蠟至水。

3、酸化高錳酸鉀液氧化5min。

4、稍水洗。

5、2%草酸水溶液漂白1-2min。

6、稍水洗。

7、2%硫酸鐵銨水溶液媒染5min。

8、稍水洗，再用蒸餾水洗1次。

9、滴加Gordon-Sweet銀氨液，作用1min。

10、蒸餾水稍洗。

11、4%中性甲醛液還原1min。

12、流水沖洗5-10min。

13、以0.2%氯化金調(diào)色1-2min。

14、蒸餾水洗。

15、固定于5%硫代硫酸鈉2min。

16、用核固紅液復(fù)染5-10min或行HE復(fù)染。

17、稍水洗。

18、常規(guī)脫水、透明，中性樹(shù)膠封固。

二、染色結(jié)果 網(wǎng)狀纖維呈黑色，胞核呈紅色（用核固紅復(fù)染）或（用蘇木精復(fù)染），膠原纖維呈黃棕色，細(xì)胞質(zhì)呈淡紅色（用伊紅復(fù)染）。

彈力纖維染色

醛品紅法

一、染色程序

1、組織塊固定于4%中性甲醛液中，常規(guī)脫水、石蠟包埋和切片。

2、切片脫蠟至水。

3、用Lugol碘液處理5min。

4、稍水洗。5、5%硫代硫酸鈉處理5min。

6、流水沖洗5min。7、70%乙醇稍洗。

8、醛品紅液浸染10min。9、70%乙醇浸洗2次，每次約30s,至切片不再脫色為止。

10、稍水洗。

11、澄黃基液滴染約1s。

12、稍水洗。

14、常規(guī)脫水、透明，中性樹(shù)膠封固。

二、染色結(jié)果 彈力纖維呈深紫色，底色為不同程度的黃色。

抗酸桿菌染色

苯酚堿性品紅法

一、染色程序

1、組織塊固定于4%中性甲醛液中，常規(guī)脫水、石蠟包埋和切片。

2、切片用汽油松節(jié)油脫蠟2次，每次5-10min。

3、不經(jīng)乙醇洗，只用紗布將切片周?chē)嘁翰粮伞?/p>

4、流水稍洗。

5、滴入苯酚堿性品紅液，于室溫下染15-30min。

6、流水洗去多余染液。

7、有20%硫酸水溶液分化至適當(dāng)為止。（一般需1-5min）

8、用流水充分沖洗。

9、用Mayer蘇木精淺染細(xì)胞核。

10、流水沖洗10-15min。

11、胸風(fēng)扇把切片吹干。隨即二甲苯透明，中性樹(shù)膠封固。

二、染色結(jié)果 抗酸（包括麻風(fēng)桿菌和結(jié)核桿菌）呈鮮紅色，胞核呈藍(lán)色。

淀粉樣蛋白染色

甲醇剛果紅法

一、染色程序

1、組織塊固定于4%中性甲醛液中，常規(guī)脫水、石蠟包埋和切片。

2、切片脫蠟至水。

3、甲醇剛果紅液染10min，傾去余液。

4、用堿性乙醇急速分化約數(shù)秒，鏡下控制。

5、水沖洗5min。

6、蘇木精液淺染細(xì)胞核。

7、流水沖洗10min。

8、常規(guī)脫水、透明，中性樹(shù)膠封固。

二、染色結(jié)果 淀粉樣蛋白呈紅色，細(xì)胞核呈藍(lán)色。在偏光鏡下，淀粉樣蛋白呈現(xiàn)綠色雙折光。

脂肪染色

蘇丹Ⅲ染色法

一、染色程序

1、組織塊固定于4%中性甲醛液中。

2、冷凍切，厚6-10um，如為新鮮組織，須用40%中性甲醛液固定10min，稍水洗后，用60%乙醇稍洗。

3、蘇丹Ⅲ染液浸染1-2min。

4、70%乙醇稍洗去多余染液。

5、流水稍洗。

6、Mayer蘇木精液復(fù)染胞核，必要進(jìn)用1%鹽酸-乙醇分化。

7、水洗10min，或于稀碳酸鋰水溶液中促藍(lán)。

8、阿拉伯糖膠或明膠封蓋。

二、染色結(jié)果 中性脂肪呈猩紅色、橙紅色或橙黃至橙紅色，細(xì)胞核呈藍(lán)色。

糖原染色

高碘酸-無(wú)色品紅（PAS）法。

一、染色程序

1、取新鮮薄片組織，立即用Gendre液固定6-12h或Cornoy液固定3-6h，其間可更換2次固定液，然后轉(zhuǎn)入95%乙醇。

2、無(wú)水乙醇按常規(guī)脫水透明，石蠟包埋，切片厚4-5um。

3、取兩張連續(xù)切片，分別作A和B記號(hào)，然后把B片脫蠟至水。

4、把B切片置入預(yù)熱至37℃的1%淀粉液，于37℃溫箱內(nèi)消化1h，或用預(yù)熱至37℃的唾液在37℃溫箱消化30min。

5、取出切片稍水洗。

6、在消化過(guò)程中，把A片脫蠟至水。

7、在A、B兩片同時(shí)滴入0.5%高碘酸水溶液氧化5-8min。

8、流水沖洗2min，再用蒸餾水洗1次。

9、于暗處，無(wú)色品紅液加蓋染色10-20min。

10、用0.5%偏重亞硫酸鈉液滴洗2次，每次約1min。

11、流水沖洗2min。

12、1%甲基綠水溶液復(fù)染胞核3-5min，或用Mayer蘇木精液淺染細(xì)胞核（必要時(shí)用鹽酸乙醇分化，再用流水沖洗）。

13、稍水洗。

14、常規(guī)脫水、透明，中性樹(shù)膠封固。

二、染色結(jié)果 A片上的細(xì)胞質(zhì)呈現(xiàn)亮紅色顆粒為陽(yáng)性（顯示糖原），經(jīng)消化后B片應(yīng)為陰性。

黏液染色

愛(ài)先藍(lán)（pH 2.5）法

一、染色程序

1、組織塊固定于4%中性甲醛液中，常規(guī)脫水、石蠟包埋和切片。

2、切片脫蠟至水。

3、愛(ài)先藍(lán)（pH 2.5）液染10-20min。

4、流水稍洗。

5、核固紅復(fù)染5-10min，或用沙紅染液復(fù)染2-3min。

6、稍水洗。

7、常規(guī)脫水、透明，中性樹(shù)膠封固。

二、染色結(jié)果 唾液酸黏液和弱硫酸化黏液以及一般黏液均呈藍(lán)色，各種強(qiáng)堿酸化黏液不著色或淡染，細(xì)胞核呈紅色。免疫組化染色（Envision System）的規(guī)范及程序

1.切片脫蠟水洗：將石蠟切片浸于二甲苯5分鐘，三次。取出切片置于100%無(wú)水乙醇中3分鐘，兩次；依次置入90%-70%各級(jí)酒精各3分鐘。取出置于蒸餾水中。

2.抗原修復(fù)(根據(jù)一抗說(shuō)明而定)。

3.取出置于蒸餾水中的切片，甩掉并擦干切片上組織周?chē)囊后w，平放于濕盒中，滴加過(guò)氧化酶阻斷劑（通常用3%的過(guò)氧化氫）于組織上避光孵育15分鐘。蒸餾水沖洗，再將切片置入TBS緩沖液中，浸泡3分鐘，三次。取出切片，甩掉并擦干切片上組織周?chē)囊后w（組織切勿干燥），平放于濕盒中。

4.滴加50-100毫升一抗工作液于組織上，室溫孵育30分鐘。用TBS液沖洗切片。將切片置入TBS緩沖液中，浸泡5分鐘，三次。取出切片，甩掉并擦干切片上組織周?chē)囊后w（組織切勿干燥），平放于濕盒中。

5.滴加50-100毫升A液于組織上，室溫孵育30分鐘。用TBS液沖洗切片。將切片置入TBS緩沖液中，浸泡5分鐘，三次。取出切片，甩掉并擦干切片上組織周?chē)囊后w（組織切勿干燥），平放于濕盒中。

6.滴加Y預(yù)備好的顯色劑DAB工作液50-100微升，室溫孵育5-10分鐘，或光鏡下控制顯色。顯色完畢后，用蒸餾水沖 洗終止顯色。

7.蘇木精復(fù)染。

8.各級(jí)酒精（70%-100%）脫水，每級(jí)3分鐘。取出切片置入二甲苯5分鐘，三次。

9.用封片膠封片。

病理診斷的規(guī)范及程序

1.診斷前注意事項(xiàng)

1．1病理醫(yī)師進(jìn)行診斷前，核對(duì)申請(qǐng)單和切片核查是否相符。1.2閱讀申請(qǐng)單上所有填寫(xiě)的內(nèi)容，對(duì)于不清楚的內(nèi)容及時(shí)聯(lián)系送檢醫(yī)師。

1.3閱片時(shí)必須全面，不要遺漏病變。

1.4疑難病例，應(yīng)由上級(jí)醫(yī)師復(fù)核，并簽署全名。1.5因特殊原因遲發(fā)報(bào)告，應(yīng)向臨床醫(yī)師說(shuō)明遲發(fā)的原因。1.6有科內(nèi)疑難病例會(huì)診制度（2名以上高級(jí)職稱(chēng)人員參與），并有相應(yīng)的記錄和簽字。

2.病理學(xué)診斷表述的基本類(lèi)型

2.1 Ⅰ類(lèi)：檢材部位、疾病名稱(chēng)、病變性質(zhì)明確和基本明確的病理學(xué)診斷。

2.2 Ⅱ類(lèi)：不能完全肯定疾病名稱(chēng)、病變性質(zhì)，或是對(duì)于擬診的疾病名稱(chēng)、病變性質(zhì)有所保留的病理學(xué)診斷意向，可在擬診疾病/病變名稱(chēng)之前冠以諸如兵變“符合為”、“考慮為”、“傾向?yàn)椤薄ⅰ疤崾緸椤薄ⅰ翱赡転椤薄ⅰ耙蔀椤薄ⅰ安荒芘懦ǔ猓敝?lèi)的詞語(yǔ)。

2.3 Ⅲ類(lèi)：檢材切片所顯示的病變不足以診斷為某種疾病（即不能做出Ⅰ類(lèi)或Ⅱ類(lèi)病理學(xué)診斷），只能進(jìn)行病變的形態(tài)描述。

2.4 Ⅳ類(lèi)：送檢標(biāo)本應(yīng)過(guò)于細(xì)小、破碎、固定不當(dāng)、自溶、嚴(yán)重受擠壓（變形）、被燒灼、干涸等，無(wú)法做出病理學(xué)診斷。

病理診斷報(bào)告書(shū)寫(xiě)的規(guī)范

1.病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)的基本內(nèi)容

1.1患者的基本情況，包括病理號(hào)、姓名、性別、年齡、送檢醫(yī)師或科室（住院或門(mén)診）、住院號(hào)和門(mén)診號(hào)、送驗(yàn)和收檢日期等。1.2巨檢病變和鏡下病變要點(diǎn)描述。1.3與病理學(xué)診斷相關(guān)技術(shù)的檢驗(yàn)結(jié)果。1.4病理學(xué)診斷的描述。

1.5對(duì)于疑難病例或做出Ⅱ、Ⅲ類(lèi)病理學(xué)診斷的病例，可酌情就病理學(xué)診斷及其相關(guān)問(wèn)題附加：建議和注釋及討論等。1.6未經(jīng)本病理科和（或）科外病理會(huì)診的病例，可將各方病理會(huì)診意見(jiàn)列于該例患者的病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)中。2.病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)的書(shū)寫(xiě)要求

2.1病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)的文字表述力求嚴(yán)謹(jǐn)、恰當(dāng)、精練，條理和層次清楚。

2.2病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)應(yīng)為一式二份，一份交予送檢方，另一份隨同患者的病理學(xué)檢查申請(qǐng)單和病理學(xué)檢查記錄單一并存檔。主檢病理醫(yī)師必須在每一份病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)上簽名，不能以個(gè)人印章代替簽名，不能由他人代為簽名。主檢病理醫(yī)師簽名的字跡應(yīng)能辨認(rèn)。

2.3手寫(xiě)的病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)必須二聯(lián)復(fù)寫(xiě)，必須文字規(guī)范、字跡清楚，不得潦草、涂改。

2.4手寫(xiě)和計(jì)算機(jī)打印的病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)中的關(guān)鍵性文字，如“癌”、“瘤”、“ 陽(yáng)性”、“陰性”和數(shù)字等，要認(rèn)真核對(duì)，不得 有誤。

2.5計(jì)算機(jī)打印的圖文病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)提供的病變圖象要準(zhǔn)確，具有典型（代表）性，放大倍數(shù)適當(dāng)。

2.6患者的基本情況項(xiàng)目必須嚴(yán)格按照送檢臨床醫(yī)師填寫(xiě)的文字抄寫(xiě)或用計(jì)算機(jī)輸錄于病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)中，并認(rèn)真核查無(wú)誤，簽發(fā)報(bào)告書(shū)的病理醫(yī)師和病理科的其他人員都不得改動(dòng)。2.7病理醫(yī)師不得簽發(fā)虛假的病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)，不得向臨床醫(yī)師和患方人員提供有病理醫(yī)師簽名的空白病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)。細(xì)胞學(xué)診斷的規(guī)范及程序

１.直接表述性診斷：適用于穿刺標(biāo)本的細(xì)胞病理學(xué)診斷報(bào)告。根據(jù)形態(tài)學(xué)觀察的實(shí)際情況，對(duì)于某種疾病／病變做出肯定性（Ⅰ類(lèi)）、不同程度意向性（Ⅱ類(lèi)）細(xì)胞學(xué)診斷，或是提供形態(tài)描述性（Ⅲ類(lèi)）細(xì)胞學(xué)診斷，或是告知無(wú)法做出（Ⅳ類(lèi)）細(xì)胞學(xué)診斷。[參考本章第一節(jié)的八(一)項(xiàng)：“病理學(xué)診斷表述的基本類(lèi)型”] ２.間接分級(jí)性診斷：用于查找惡性腫瘤細(xì)胞的診斷。

Ⅰ級(jí)：未見(jiàn)惡性細(xì)胞 Ⅱ級(jí)：查見(jiàn)核異質(zhì)細(xì)胞 Ⅱa：輕度核異質(zhì)細(xì)胞 Ⅱb：重度核異質(zhì)細(xì)胞 Ⅲ級(jí)：查見(jiàn)可疑惡性細(xì)胞 Ⅳ級(jí)：查見(jiàn)高度可疑惡性細(xì)胞 Ⅴ級(jí)：查見(jiàn)惡性細(xì)胞細(xì)胞病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)的基本內(nèi)容

1.患者的基本情況項(xiàng)目，包括病理號(hào)、姓名、性別、年齡、送檢醫(yī)院／科室（住院／門(mén)診）、住院號(hào)／門(mén)診號(hào)、送檢／收驗(yàn)日期等。2.細(xì)胞病理學(xué)診斷的表述（參見(jiàn)上項(xiàng)“細(xì)胞病理學(xué)診斷報(bào)告表述的基本類(lèi)型”）。

3.必要時(shí)或條件允許時(shí)，可酌情就細(xì)胞病理學(xué)診斷及其相關(guān)問(wèn)題附加：①某些建議（例如進(jìn)行其他有關(guān)檢查、再做活檢、病理科外病理學(xué)會(huì)診、密切隨查/隨訪等）；②注釋?zhuān)懻摗?/p>

4.經(jīng)過(guò)本病理科或/和科外病理會(huì)診的病例，可將各方的細(xì)胞病理學(xué)診斷意見(jiàn)附于該例的細(xì)胞病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)中。病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)的發(fā)送

1.病理科自接收標(biāo)本至簽發(fā)該病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)的時(shí)間，一般為3-5個(gè)工作日，細(xì)胞病理診斷報(bào)告一般為2個(gè)工作日。

2.由于某些原因延遲取材、制片，或是進(jìn)行其他相關(guān)技術(shù)檢測(cè)，不能如期簽發(fā)病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)時(shí)，應(yīng)以口頭或書(shū)面形式告知有關(guān)臨床醫(yī)師或患方，說(shuō)明遲發(fā)病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)的原因。

3.病理科應(yīng)有專(zhuān)人發(fā)送病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)，并有接受人的簽字。4.病理科已經(jīng)發(fā)出的病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)被遺失時(shí)，一般不予補(bǔ)發(fā)；必要時(shí)，經(jīng)病理科主任同意可以抄件形式補(bǔ)發(fā)。

顯微鏡操作的標(biāo)準(zhǔn)化程序

1.目的

正確使用顯微鏡。

2.適用范圍

全體病理科工作人員。3.具體操作

3.1將準(zhǔn)備觀察的切片放在載物臺(tái)上。

3.2調(diào)光：開(kāi)啟顯微鏡的電源開(kāi)關(guān)。

3.3對(duì)焦：先用粗調(diào)螺旋把低倍物鏡下降至載物片上6cm處，然后上升物鏡，直接看到物象，再用細(xì)螺旋把物鏡調(diào)節(jié)到清晰處。

3.4觀察：用低倍鏡觀察組織的一般結(jié)構(gòu)，然后再用高倍鏡進(jìn)一步觀察，必要時(shí)方使用油鏡，再低倍鏡轉(zhuǎn)至高倍鏡觀察時(shí)，只要適當(dāng)轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)調(diào)節(jié)即能看到物像。

3.5放置載物片時(shí)注意勿把蓋玻片面向下，以免用高倍鏡觀察時(shí)因?qū)Σ坏浇裹c(diǎn)而壓破玻片，甚至損壞鏡頭。

3.6觀察顯微鏡物像時(shí)應(yīng)養(yǎng)成同時(shí)睜開(kāi)雙眼的習(xí)慣，眼的觀察位置也要適當(dāng)，即應(yīng)放在眼點(diǎn)處。

3.7用畢應(yīng)將顯微鏡放回木箱或用罩蓋好。

普洱市人民醫(yī)院病理科操作規(guī)范及流程

目錄

1.病理標(biāo)本的驗(yàn)收規(guī)范及流程 ????????1-2 2.不合格標(biāo)本的處理規(guī)范與程序?????????3 3.病理標(biāo)本檢查和取材規(guī)范及程序????????.4-6 4.常規(guī)石蠟包埋組織切片規(guī)范及程序???????...7-9 5.術(shù)中快速冰凍切片的規(guī)范及程序????????..10-11 6.術(shù)中快速冰凍診斷的規(guī)范及程序????????.12-13 7.特殊染色的操作規(guī)范????????????14-21 8.免疫組化染色（Envision System）的規(guī)范及程序?22-23 9.病理診斷的規(guī)范及程序?????????????24-25 10.病理診斷報(bào)告書(shū)寫(xiě)的規(guī)范??????????.26-27 11.細(xì)胞學(xué)診斷的規(guī)范及程序????????????28 12.細(xì)胞病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)的基本內(nèi)容???????????29 13.病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)的發(fā)送???????????.30 14.顯微鏡操作的標(biāo)準(zhǔn)化程序????????31-32

第二篇：病理科制度職責(zé)及操作規(guī)范

病理科主任（副主任）醫(yī)師崗位職責(zé)

一：資格要求

1：具有主任（副主任）醫(yī)師專(zhuān)業(yè)技術(shù)職務(wù)任職資格。2：具有執(zhí)業(yè)醫(yī)師資格并注冊(cè)。二：知識(shí)要求

1：精通本專(zhuān)業(yè)基礎(chǔ)理論和專(zhuān)業(yè)知識(shí)掌握本專(zhuān)業(yè)國(guó)內(nèi)外發(fā)展趨勢(shì)，能夠解決疑難特殊病例。能吸收最新科研成果并應(yīng)用于實(shí)踐工作。

2：借助工具書(shū)能閱讀本專(zhuān)業(yè)的外文資料。

3：熟練掌握計(jì)算機(jī)操作，取得計(jì)算機(jī)中級(jí)上崗證書(shū)（3—5年取得）。

4：通過(guò)繼續(xù)教育不斷提高，更新專(zhuān)業(yè)知識(shí)水平。三：能力要求

1：理解判斷能力：對(duì)診療過(guò)程中出現(xiàn)的各種問(wèn)題做出正確的分析判斷，并妥善進(jìn)行處理。

2：組織實(shí)施能力：能夠組織和開(kāi)展本專(zhuān)業(yè)的工作，培養(yǎng)下級(jí)醫(yī)師，實(shí)施和指導(dǎo)本專(zhuān)業(yè)的科研工作。

3：業(yè)務(wù)實(shí)施能力：參加并負(fù)責(zé)簽發(fā)疑難、特殊病理報(bào)告及術(shù)中快速冰凍報(bào)告。

4：教學(xué)能力：具有承擔(dān)專(zhuān)題講座或講課的能力。

5：語(yǔ)言文字能力：具有較強(qiáng)的書(shū)面文字能力及口頭表達(dá)能力。

病理科主治醫(yī)師崗位職責(zé)

一：資格要求

1：具有主治醫(yī)師專(zhuān)業(yè)技術(shù)職務(wù)任職資格。2：具有執(zhí)業(yè)醫(yī)師資格并注冊(cè)。二：知識(shí)要求

1：熟悉本專(zhuān)業(yè)基礎(chǔ)理論和專(zhuān)業(yè)知識(shí)，掌握本專(zhuān)業(yè)國(guó)內(nèi)外發(fā)展趨勢(shì)，能吸收最新科研成果并應(yīng)用于實(shí)踐工作。2：借助工具書(shū)能閱讀本專(zhuān)業(yè)的外文資料。

3：熟練掌握計(jì)算機(jī)操作，取得計(jì)算機(jī)中級(jí)上崗證書(shū)（3—5年取得）。

4：通過(guò)繼續(xù)教育不斷提高，更新專(zhuān)業(yè)知識(shí)水平。三：能力要求

1：理解判斷能力：對(duì)診療過(guò)程中出現(xiàn)的各種問(wèn)題做出正確的分析判斷，并進(jìn)行處理。

2：組織實(shí)施能力：能夠?qū)嵤╅_(kāi)展本專(zhuān)業(yè)的業(yè)務(wù)工作，代教下級(jí)醫(yī)師，協(xié)助參與本專(zhuān)業(yè)的科研工作。

3：業(yè)務(wù)實(shí)施能力：能夠獨(dú)立簽發(fā)常見(jiàn)病病理報(bào)告及部分疑難特殊病理報(bào)告。

4：語(yǔ)言文字能力：具有一定的書(shū)面文字能力及口頭表達(dá)能力。

病理科住院醫(yī)師崗位職責(zé)

一：資格要求

1：具有住院醫(yī)師專(zhuān)業(yè)技術(shù)職務(wù)任職資格。2：具有執(zhí)業(yè)醫(yī)師資格并注冊(cè)。

3：經(jīng)過(guò)1年以上的業(yè)務(wù)進(jìn)修或培訓(xùn)并合格。二：知識(shí)要求

1：掌握本專(zhuān)業(yè)基礎(chǔ)理論和專(zhuān)業(yè)知識(shí)，了解國(guó)內(nèi)外發(fā)展趨勢(shì)，能吸收最新科研成果并應(yīng)用于實(shí)踐工作。2：借助工具書(shū)能閱讀本專(zhuān)業(yè)的外文資料。

3：熟練掌握計(jì)算機(jī)操作，取得計(jì)算機(jī)中級(jí)上崗證書(shū)（3—5年取得）。三：能力要求

1：理解判斷能力：對(duì)診療過(guò)程中出現(xiàn)的各種問(wèn)題做出正確的分析判斷。

2：業(yè)務(wù)實(shí)施能力：負(fù)責(zé)活檢的初檢工作，對(duì)于常見(jiàn)一般病例可獨(dú)立簽發(fā)病理報(bào)告。

3：語(yǔ)言文字能力：具有一定的書(shū)面文字能力及口頭表達(dá)能力。

病理科主任（副主任）技師崗位職責(zé)

一：資格要求

1：具有主任（副主任）技師專(zhuān)業(yè)技術(shù)職務(wù)任職資格。二：知識(shí)要求：

1：精通本專(zhuān)業(yè)基礎(chǔ)理論和專(zhuān)業(yè)知識(shí)，掌握本專(zhuān)業(yè)國(guó)內(nèi)外發(fā)展趨勢(shì)并能夠應(yīng)用于工作實(shí)踐。

2：借助工具書(shū)能閱讀本專(zhuān)業(yè)的外文資料。

3：熟練掌握計(jì)算機(jī)操作，取得計(jì)算機(jī)中級(jí)上崗證書(shū)（3—5年取得）。

4：通過(guò)繼續(xù)教育不斷提高，更新專(zhuān)業(yè)知識(shí)水平。三：能力要求

1：理解判斷能力：對(duì)診療過(guò)程中出現(xiàn)的各種問(wèn)題做出正確的分析判斷，并妥善進(jìn)行處理。

2：組織實(shí)施能力：能夠組織和指導(dǎo)開(kāi)展本專(zhuān)業(yè)的業(yè)務(wù)科研工作，培養(yǎng)下級(jí)技師。

3：業(yè)務(wù)實(shí)施能力：熟練掌握本專(zhuān)業(yè)各種儀器的操作及維護(hù)。4：教學(xué)能力：具有承擔(dān)本專(zhuān)業(yè)專(zhuān)題講座或講課的能力。5：語(yǔ)言文字能力：具有較強(qiáng)的書(shū)面文字能力及口頭表達(dá)能力。

病理科主管技師崗位職責(zé)

一：資格要求

1：具有主管技師專(zhuān)業(yè)技術(shù)職務(wù)任職資格。二：知識(shí)要求

1：熟知本專(zhuān)業(yè)基礎(chǔ)理論和專(zhuān)業(yè)知識(shí)，掌握本專(zhuān)業(yè)國(guó)內(nèi)外發(fā)展趨勢(shì)。2：借助工具書(shū)能閱讀本專(zhuān)業(yè)的外文資料。

3：熟練掌握計(jì)算機(jī)操作，取得計(jì)算機(jī)中級(jí)上崗證書(shū)（3—5年取得）。

4：通過(guò)繼續(xù)教育不斷提高，更新專(zhuān)業(yè)知識(shí)水平。三：能力要求

1：了解判斷能力：對(duì)診療過(guò)程中出現(xiàn)的各種問(wèn)題做出正確的分析判斷，并妥善進(jìn)行處理。

2：組織實(shí)施能力：能夠開(kāi)展本專(zhuān)業(yè)的業(yè)務(wù)工作，代教下級(jí)技師，參與本專(zhuān)業(yè)的科研工作。

3：業(yè)務(wù)實(shí)施能力：熟練掌握本專(zhuān)業(yè)各種儀器的操作及維護(hù)。4：語(yǔ)言文字能力：具有一定的書(shū)面文字能力及口頭表達(dá)能力。

病理科技師崗位職責(zé)

一：嚴(yán)格要求

1：具有技師專(zhuān)業(yè)技術(shù)職務(wù)任職資格。二：知識(shí)要求

1：掌握本專(zhuān)業(yè)基礎(chǔ)理論和專(zhuān)業(yè)知識(shí)，了解本專(zhuān)業(yè)國(guó)內(nèi)外發(fā)展趨勢(shì)。2：借助工具書(shū)能閱讀本專(zhuān)業(yè)的外文資料。

3：熟練掌握計(jì)算機(jī)操作，取得計(jì)算機(jī)中級(jí)上崗證書(shū)（3—5年取得）。三：能力要求

1：理解判斷能力：對(duì)診療過(guò)程中出現(xiàn)的各種問(wèn)題做出正確的分析判斷。

2：業(yè)務(wù)實(shí)施能力：熟練掌握本專(zhuān)業(yè)各種儀器的操作。3：語(yǔ)言文字能力：具有一定的書(shū)面文字能力及口頭表達(dá)能力。

病理科 2010年一月二十日

病理科一般工作制度

1：工作人員必須嚴(yán)格遵守醫(yī)院及科內(nèi)的工作制度，服從管理，嚴(yán)格遵守各項(xiàng)操作規(guī)程。

2：每位工作人員必須履行自己的職責(zé)，精神飽滿，熱情、耐心、負(fù)責(zé)的接待每位患者。

3：堅(jiān)持每月定期或不定期的召開(kāi)科務(wù)會(huì)，討論本科發(fā)展及解決科室中存在的問(wèn)題。

4：在不影響工作的前提下，堅(jiān)持每月1-2次的業(yè)務(wù)學(xué)習(xí)活動(dòng)，以提高工作人員的業(yè)務(wù)水平。

5：全科人員在發(fā)揮現(xiàn)有設(shè)備、技術(shù)力量的前提下，努力開(kāi)展新技術(shù)、新項(xiàng)目，為患者提供優(yōu)質(zhì)的服務(wù)。

6：每月開(kāi)展質(zhì)量控制的自查工作、并將檢查結(jié)果與經(jīng)濟(jì)效益掛鉤。7：每年安排1-2人進(jìn)修學(xué)習(xí)、培訓(xùn)（包括短期學(xué)習(xí)班、學(xué)術(shù)會(huì)議），不斷提高全體工作人員的診斷、技術(shù)水平。8：做好各項(xiàng)設(shè)備的使用保養(yǎng)記錄，保證機(jī)器正常運(yùn)行。

病理科 2010年一月二十日

病理診斷報(bào)告書(shū)類(lèi)別

病理診斷表述的基本類(lèi)型

Ⅰ類(lèi)：檢材部位／疾病名稱(chēng)／病變性質(zhì)明確和基本明確的病理診斷。

Ⅱ類(lèi)：不能完全肯定疾病名稱(chēng)/病變性質(zhì)，或是對(duì)于擬診的疾病名稱(chēng)／病變性質(zhì)有所保留的病理診斷意向，可在擬診疾病／病變名稱(chēng)之前冠以諸如病變可“符合為”、“考慮為”、“傾向?yàn)椤薄ⅰ疤崾緸椤薄ⅰ翱赡転椤薄ⅰ耙蔀椤薄ⅰ安荒芘懦ǔ猓敝?lèi)的詞語(yǔ)。

Ⅲ類(lèi)：檢材切片所顯示的病變不足以診斷為某種疾病（即不能做出Ⅰ類(lèi)或Ⅱ類(lèi)病理診斷），只能進(jìn)行病變的形態(tài)描述。

Ⅳ類(lèi)：送檢標(biāo)本因過(guò)于細(xì)小、破碎、固定不當(dāng)、自溶、嚴(yán)重受擠壓（變形）、被燒灼、干涸等，無(wú)法做出病理診斷。

病理科 2010年一月二十日

病理診斷室工作制度

1.主檢醫(yī)師接收切片時(shí)，應(yīng)核對(duì)切片數(shù)后簽字。

2.主檢醫(yī)師認(rèn)真閱讀申請(qǐng)單，必要時(shí)與有關(guān)臨床醫(yī)師了解更詳細(xì)臨床信息，細(xì)致全面的閱片，寫(xiě)出初步診斷。

3.主檢醫(yī)師不能明確診斷的病例交上級(jí)醫(yī)師診斷，必要時(shí)科內(nèi)討論，提出處理意見(jiàn)。

4.疑難病例應(yīng)用輔助診斷技術(shù)，如特染、免疫組化等協(xié)助診斷。5.病理報(bào)告交圖文報(bào)告室打印，仔細(xì)核對(duì)后簽名，一般報(bào)告四個(gè)工作日發(fā)出。

病理科 2010年一月二十日

術(shù)中冰凍切片報(bào)告制度

1.值班醫(yī)師接受標(biāo)本，并逐項(xiàng)查對(duì)姓名、科別、住院號(hào)及標(biāo)本是否相符，立即巨檢及取材，如有疑問(wèn)請(qǐng)上級(jí)醫(yī)師指導(dǎo)取材。必要時(shí)與手術(shù)醫(yī)師直接聯(lián)系。

2.技術(shù)人員及時(shí)切片，切片厚5um。染色后送主檢醫(yī)生。3.一般冰凍報(bào)告由高年資主治醫(yī)師簽發(fā)，遇有下列情況之一者，應(yīng)請(qǐng)上級(jí)醫(yī)師會(huì)診，共同簽發(fā)。① 所有惡性腫瘤 ② 交界性病變 ③ 良惡性難定的病變 ④ 病理診斷與臨床不符

⑤ 其它疑難病變，主檢醫(yī)師不能明確診斷 4.冰凍報(bào)告由傳真發(fā)出，一般情況下小于30分鐘。5.報(bào)告發(fā)出后，技術(shù)人員及時(shí)將冰凍組織固定。

病理科 2010年一月二十日

病理科會(huì)診制度

一、科內(nèi)會(huì)診

如有下述情況之一者，由具有高級(jí)職稱(chēng)的病理醫(yī)師會(huì)診后簽發(fā)報(bào)告：

1.主檢醫(yī)師不能明確診斷。2.臨床與病理診斷不符。3.初次診斷為惡性腫瘤的病例。

4.一組病理醫(yī)師中兩人或多人的診斷意見(jiàn)不一致。5.患者要求得到另外一位醫(yī)師的意見(jiàn)。6.臨床醫(yī)師要求傾聽(tīng)另外一位醫(yī)師的意見(jiàn)。

二、科外（院外）會(huì)診

接受外院個(gè)人、單位送檢的病理切片會(huì)診，由具有高級(jí)職稱(chēng)的病理醫(yī)師簽發(fā)會(huì)診報(bào)告。如遇疑難病例，會(huì)診醫(yī)師不能明確診斷時(shí)，由科內(nèi)高級(jí)職稱(chēng)的醫(yī)師討論后簽發(fā)會(huì)診報(bào)告。

病理科 2010年一月二十日

病理切片質(zhì)控制度

病理切片質(zhì)量高低，對(duì)病理診斷起著重要的作用。因此，努力提高病理切片質(zhì)量，尤為重要。科室要采取各種措施，使切片優(yōu)良率達(dá)到91%以上。特作如下要求：

1.每日主班醫(yī)師閱片時(shí)，要對(duì)當(dāng)日切片存在問(wèn)題及時(shí)向主班技師告知，找出存在問(wèn)題的原因，及時(shí)糾正。2.3.4.對(duì)不合格切片及時(shí)重切糾正。脫水機(jī)的各種試劑每周更換一次。

每月由技師、醫(yī)師共同對(duì)病理切片進(jìn)行抽查、評(píng)分，找出問(wèn)題。并進(jìn)行科內(nèi)小結(jié)。

病理科 2010年一月二十日

病理診斷質(zhì)控制度

為持續(xù)提高病理診斷準(zhǔn)確率及病理醫(yī)師病理診斷水平，減少差錯(cuò)發(fā)生，根據(jù)有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)力爭(zhēng)達(dá)到活檢病理診斷準(zhǔn)確率≥99.5％，細(xì)胞學(xué)病理診斷準(zhǔn)確率≥85％，冰凍切片與石蠟切片診斷符合率≥95%，制定如下措施：

① 病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)一般應(yīng)由具有執(zhí)業(yè)資格的注冊(cè)主治醫(yī)師以上（含主治醫(yī)師）的病理醫(yī)師簽發(fā)，常見(jiàn)病的診斷也可酌情準(zhǔn)予資格相當(dāng)?shù)母吣曩Y病理住院醫(yī)師簽發(fā)。② 診斷報(bào)告書(shū)上應(yīng)有主檢醫(yī)師親筆簽名，主檢醫(yī)師難以明確診斷的應(yīng)行科內(nèi)會(huì)診或院外會(huì)診。

③ 每月由專(zhuān)人統(tǒng)計(jì)分析院外會(huì)診意見(jiàn)、手術(shù)前后的診斷結(jié)果，統(tǒng)計(jì)診斷的符合率，分析不符原因，制定改進(jìn)措施。④ 每月由專(zhuān)人統(tǒng)計(jì)分析有活檢對(duì)照的細(xì)胞學(xué)的診斷結(jié)果，統(tǒng)計(jì)診斷的符合率，分析不符原因，制定改進(jìn)措施。⑤ 每月由專(zhuān)人統(tǒng)計(jì)冰凍診斷與術(shù)后石蠟切片診斷符合率，分析不符原因，制定改進(jìn)措施。

⑥ 對(duì)少數(shù)經(jīng)會(huì)診不能明確診斷的，應(yīng)力爭(zhēng)做到病人隨訪。

病理科 2010年一月二十日

病理質(zhì)控制度

為持續(xù)提高病理診斷準(zhǔn)確率及病理醫(yī)師病理診斷水平，減少差錯(cuò)發(fā)生，根據(jù)有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)力爭(zhēng)達(dá)到病理切片優(yōu)良率≥91%，活檢病理診斷準(zhǔn)確率≥99.5％，細(xì)胞學(xué)病理診斷準(zhǔn)確率≥85％，冰凍切片與石蠟切片診斷符合率≥95%，制定如下措施：

1.每月由技師、醫(yī)師共同對(duì)病理切片進(jìn)行抽查評(píng)分，找出存在問(wèn)題，制定改進(jìn)措施并糾正。

2.病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)一般應(yīng)由具有執(zhí)業(yè)資格的注冊(cè)主治醫(yī)師以上（含主治醫(yī)師）的病理醫(yī)師簽發(fā)，常見(jiàn)病的診斷也可酌情準(zhǔn)予資格相當(dāng)?shù)母吣曩Y病理住院醫(yī)師簽發(fā)。

3.診斷報(bào)告書(shū)上應(yīng)有主檢醫(yī)師親筆簽名，主檢醫(yī)師難以明確診斷的應(yīng)行科內(nèi)會(huì)診或院外會(huì)診。

4.每月由專(zhuān)人統(tǒng)計(jì)分析院外會(huì)診意見(jiàn)、手術(shù)前后的診斷結(jié)果，統(tǒng)計(jì)診斷的符合率，分析不符原因，制定改進(jìn)措施。5.每月由專(zhuān)人統(tǒng)計(jì)分析有活檢對(duì)照的細(xì)胞學(xué)的診斷結(jié)果，統(tǒng)計(jì)診斷的符合率，分析不符原因，制定改進(jìn)措施。

6.每月由專(zhuān)人統(tǒng)計(jì)冰凍診斷與術(shù)后石蠟切片診斷符合率，分析不符原因，制定改進(jìn)措施。

7.對(duì)少數(shù)經(jīng)會(huì)診不能明確診斷的，應(yīng)力爭(zhēng)做到病人隨訪。8.科內(nèi)每月召開(kāi)一次質(zhì)控小組會(huì)議進(jìn)行總結(jié)。

圖像分析室工作制度

1.接收標(biāo)本，認(rèn)真核對(duì)病人姓名、科室與標(biāo)本一致后并簽收登記。

2.認(rèn)真執(zhí)行物價(jià)收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)，負(fù)責(zé)劃價(jià)扣費(fèi)。

3.負(fù)責(zé)病理申請(qǐng)單錄入，病理診斷錄入及圖像分析、采集，認(rèn)真核對(duì)無(wú)誤后打印報(bào)告。

4.報(bào)告打印后審查無(wú)差錯(cuò)后交醫(yī)師簽發(fā)并登記。5.及時(shí)將資料裝訂后歸檔。

6.負(fù)責(zé)查詢病理結(jié)果。

病理科 2010年一月二十日

病理科取材室工作制度

1.病理技術(shù)人員負(fù)責(zé)接收標(biāo)本，接受標(biāo)本時(shí)認(rèn)真核對(duì)申請(qǐng)單及送檢標(biāo)本，填寫(xiě)項(xiàng)目是否一致：姓名、科室、床號(hào)、住院號(hào)、標(biāo)本類(lèi)型及數(shù)量。

下列情況不予接收：

① 申請(qǐng)單內(nèi)容與送檢標(biāo)本不符合 ② 標(biāo)本上無(wú)有關(guān)標(biāo)志，如姓名、科室等

2.技術(shù)人員將申請(qǐng)單編號(hào)并將標(biāo)本按順序排列好等待取材。3.病理醫(yī)師負(fù)責(zé)巨檢、取材。取材前應(yīng)再次核對(duì)標(biāo)本袋上的標(biāo)志，如病人姓名、科室等。巨檢內(nèi)容由技術(shù)人員記錄。

4.取材后，將標(biāo)本固定放好，已備補(bǔ)取材。報(bào)告發(fā)出后一周，如臨床無(wú)疑問(wèn)，將標(biāo)本清理交專(zhuān)門(mén)部門(mén)處理。

5.每日取材完畢后，認(rèn)真清洗取材臺(tái)基各種器械，關(guān)閉門(mén)窗、水電等。

6.每周六集中紅外線消毒。

病理科 2010年一月二十日

細(xì)胞學(xué)室穿刺規(guī)范

1、先由臨床醫(yī)師提出申請(qǐng)，穿刺醫(yī)師在詳細(xì)了解病人病史及一般情況后決定是否進(jìn)行穿刺。

2、一般穿刺為體表明顯的、不在危險(xiǎn)部位的病變、病人一般情況可以耐受的。

3、在仔細(xì)檢查病人后，確定穿刺部位，做好標(biāo)記，給病人解釋具體穿刺中可能出現(xiàn)的問(wèn)題后，征得病人或家屬同意后準(zhǔn)備穿刺。

4、準(zhǔn)備好穿刺用品，穿刺部位消毒后，依無(wú)菌操做進(jìn)行穿刺。

5、穿刺過(guò)程中避開(kāi)明顯血管，平行進(jìn)針，達(dá)到部位后反復(fù)抽吸，穿刺后按壓止血。

6、涂片要求要盡量薄，標(biāo)記號(hào)碼，及時(shí)固定涂片。

病理科 2010年一月二十日

技術(shù)室工作制度

1.技術(shù)人員每日上午負(fù)責(zé)組織包埋，包埋時(shí)應(yīng)對(duì)號(hào)對(duì)蠟塊，嚴(yán)防差錯(cuò)發(fā)生。

2.嚴(yán)格遵守切片操作規(guī)程，切片厚4~5um。3.染色時(shí)統(tǒng)一使用自動(dòng)染色機(jī)程序。4.封片時(shí)注意防止氣泡產(chǎn)生。

5.貼上標(biāo)簽寫(xiě)上編號(hào)，切片編號(hào)核對(duì)后交主檢醫(yī)師并簽字。6.每日清理干凈各種機(jī)器及桌面。

7.根據(jù)工作量的情況及時(shí)更換各種液體及染液。8.主班下班前關(guān)好水電、門(mén)窗，以防意外發(fā)生。9.負(fù)責(zé)各機(jī)器設(shè)備的維護(hù)。

病理科 2010年一月二十日

細(xì)胞學(xué)室工作制度

1.接收院內(nèi)外送檢的細(xì)胞學(xué)標(biāo)本并簽收，認(rèn)真核對(duì)病人姓名、科室及標(biāo)本與申請(qǐng)單是否一致。

2.針吸細(xì)胞學(xué)穿刺時(shí)，做好消毒并按規(guī)范操作。

3.編號(hào)后及時(shí)離心、涂片、固定、蘇木素伊紅染色后，封片編號(hào)。

4.閱片前認(rèn)真閱讀申請(qǐng)單各項(xiàng)內(nèi)容，仔細(xì)閱讀全片內(nèi)容，結(jié)合臨床寫(xiě)出診斷報(bào)告，交圖文報(bào)告室打印后簽字發(fā)出。5.剩余各種標(biāo)本放冰箱保存，等報(bào)告發(fā)出后交保潔部門(mén)集中處理，嚴(yán)防標(biāo)本造成環(huán)境污染。

6.報(bào)告發(fā)出后，及時(shí)將涂片及申請(qǐng)單歸檔。7.每天下班前，關(guān)好水電及門(mén)窗。

病理科 2010年一月二十日

病理科資料管理制度

1、常規(guī)活檢、快速冰凍、細(xì)胞病理學(xué)檢查、尸檢等的文字資料、非文字資料（蠟塊、切片、涂片等）以及其他相關(guān)資料均為有價(jià)值的醫(yī)學(xué)資料，應(yīng)妥為保存。

2、由專(zhuān)人管理。

3、活體組織檢查剩余標(biāo)本在報(bào)告發(fā)出后保存一周。

4、報(bào)告申請(qǐng)書(shū)每100份為一本由圖文報(bào)告室主班技術(shù)員檢查核對(duì)后裝訂成冊(cè)。

5、蠟塊管理由技術(shù)室負(fù)責(zé)，每天在切片結(jié)束后按順序歸檔，如需特染、免疫組化、深切，在制好切片后及時(shí)歸回原位。

6、切片的管理由診斷組醫(yī)師負(fù)責(zé)，當(dāng)班醫(yī)師在閱片后按前后順序歸檔，每月有一名醫(yī)師負(fù)責(zé)按時(shí)統(tǒng)一歸入資料庫(kù)，歸庫(kù)時(shí)應(yīng)仔細(xì)檢查核對(duì)無(wú)誤。

7、免疫組化申請(qǐng)單由免疫組化室技術(shù)員負(fù)責(zé)整理裝訂。

8、細(xì)胞學(xué)涂片除痰陰性涂片外應(yīng)全部保存，送檢體液標(biāo)本應(yīng)保存在冰箱內(nèi)，直至報(bào)告發(fā)出2-3天。

9、出于學(xué)習(xí)或研究的目的，歸檔后的切片及文字資料需要調(diào)閱，調(diào)閱時(shí)應(yīng)仔細(xì)登記時(shí)間、切片號(hào)（病理號(hào)）、歸還與否、是否損壞。

10、技術(shù)組組長(zhǎng)定期抽查各種資料保管情況，發(fā)現(xiàn)問(wèn)題應(yīng)及時(shí)處理及處罰。

病理科 2010年一月二十日

切片借閱制度

1、切片借閱由科室安排專(zhuān)人負(fù)責(zé)，其他人不得私自借出。

2、由患者或家屬提出要求和目的，并出示相關(guān)身份證明及復(fù)印件。

3、負(fù)責(zé)人調(diào)閱切片及相關(guān)資料，由醫(yī)師審核后借出。

4、登記借閱切片號(hào)、切片數(shù)量并由借片人簽名。

5、借閱期最長(zhǎng)1月，為防止損壞、丟失，應(yīng)依切片種類(lèi)及數(shù)量收取押金。

6、歸還切片時(shí)借閱人歸還切片及押金收據(jù)并提供其他醫(yī)院的診斷。

7、免疫組化及細(xì)胞學(xué)涂片因無(wú)法重復(fù)制片，確需借閱的應(yīng)征得科主任同意后方可。

病理科 2010年一月二十日

尸檢工作制度

1、尸檢應(yīng)由臨床醫(yī)師提出申請(qǐng)，死者家屬同意并簽字，填寫(xiě)申請(qǐng)單，申請(qǐng)單內(nèi)所有項(xiàng)目應(yīng)詳細(xì)填寫(xiě)并簽字，經(jīng)醫(yī)務(wù)部批準(zhǔn)，方為有效。并由申請(qǐng)人辦理有關(guān)手續(xù)后，及時(shí)送交病理科。

2、檢驗(yàn)的尸體應(yīng)在死亡2小時(shí)后進(jìn)行，在死亡2小時(shí)后則應(yīng)及早進(jìn)行，以免尸體發(fā)生過(guò)多的死后變化，影響病理診斷結(jié)果。如有尸體腐敗現(xiàn)象，不宜解剖。

3、檢驗(yàn)的尸體涉及法律案件者，原則上應(yīng)由法醫(yī)剖驗(yàn)。如遇特殊情況，應(yīng)受司法機(jī)關(guān)的委托，并提供死者生前的社會(huì)情況調(diào)查，報(bào)院醫(yī)務(wù)部批準(zhǔn)后，方可接受。最后將尸檢報(bào)告交委托單位，不與死者家屬發(fā)生直接聯(lián)系。

4、對(duì)有醫(yī)療糾紛的病例，臨床應(yīng)提供詳細(xì)的病史及其它有關(guān)情況，并了解死者親屬的意見(jiàn)。必要時(shí)與有關(guān)人員進(jìn)行討論，提出解剖目的，使剖驗(yàn)人員心中有數(shù)，以便作出符合客觀實(shí)際的診斷。解剖結(jié)果，以尸檢報(bào)告書(shū)為準(zhǔn)，并將此報(bào)告交院醫(yī)務(wù)部。

5、病理醫(yī)師接到尸檢申請(qǐng)后，應(yīng)立即登記編號(hào)，及早進(jìn)行剖驗(yàn)。尸檢前必須核對(duì)死者姓名，年齡，性別無(wú)誤后，方可進(jìn)行。同時(shí)詳細(xì)閱讀死者的病史和臨床醫(yī)師提出的要求，以加強(qiáng)尸檢的針對(duì)性。

6、尸檢同時(shí)，應(yīng)安排相關(guān)人員對(duì)整個(gè)解剖過(guò)程進(jìn)行記錄，對(duì)不同臟器、不同病變進(jìn)行詳細(xì)描述，完成尸檢記錄，一般在一個(gè)月內(nèi)經(jīng)組織學(xué)檢查后發(fā)出最后的尸檢報(bào)告。報(bào)告發(fā)出后，全部資料及時(shí)歸檔，并清理大體標(biāo)本，除保留有科研，教學(xué)價(jià)值外，一律交后勤部焚化處理。

病理科 2010年一月二十日

切片機(jī)操作規(guī)程

1.先切片機(jī)鎖扣打開(kāi)。

2.將切片刀放置在刀架上，調(diào)整好角度。3.將石蠟組織塊放置在蠟塊夾中固定好。4.正常進(jìn)行正常切片。

5.完成切片后，鎖緊鎖扣（在切片過(guò)程中動(dòng)作要輕，均勻）。6.拆開(kāi)各部件進(jìn)行徹底清潔。7.先切片機(jī)鎖扣打開(kāi)。

8.將切片刀放置在刀架上，調(diào)整好角度。9.將石蠟組織塊放置在蠟塊夾中固定好。10.正常進(jìn)行正常切片。

11.完成切片后，鎖緊鎖扣（在切片過(guò)程中動(dòng)作要輕，均勻）。12.拆開(kāi)各部件進(jìn)行徹底清潔。

病理科 2010年一月二十日

染色機(jī)操作過(guò)程

1.打開(kāi)電源開(kāi)關(guān)。

2.按“F1”啟動(dòng)染色程序。3.打開(kāi)水龍頭開(kāi)關(guān)。4.揭開(kāi)染色盒盒蓋。

5.將需染色切片放置備染盒中按“LOAD”。6.染色完畢后取出切片，按“EXIT”。7.按“F4”退出程序。8.關(guān)閉電源開(kāi)關(guān)。

病理科 2010年一月二十日

自動(dòng)染色機(jī)染色程序

1.烘片1分鐘

11.水洗10秒 2.二甲苯Ⅰ脫蠟5分鐘

3.二甲苯Ⅱ脫蠟5分鐘

4.二甲苯Ⅲ脫蠟5分鐘

5.無(wú)水乙醇5秒

6.無(wú)水乙醇5秒

7.95％酒精5秒

8.80％酒精5秒

9.水洗10秒

10.蘇木素染色10分鐘

2010

12.分化15秒 13.水洗返蘭1分鐘 14.伊紅染色15秒 15.水洗5秒 16.80％酒精5秒 17.95％酒精5秒 18.無(wú)水乙醇5秒 19.無(wú)水乙醇5秒 20.染色程序結(jié)束送EXIT

病理科 年一月二十日

冰凍機(jī)操作程序

1.在開(kāi)機(jī)狀態(tài)下先解除操作臺(tái)的鎖定，打開(kāi)冰凍機(jī)蓋。2.開(kāi)啟照明燈。打開(kāi)手柄鎖，搖動(dòng)手柄檢查其工作狀態(tài)。3.檢查切片臺(tái)是否固定，將切片固定于刀架上。4.將已凍好的組織固定于切片機(jī)頭上進(jìn)行切片。

5.切片完備后鎖定操作臺(tái)及手柄鎖，關(guān)照明燈，關(guān)冰凍機(jī)蓋。

病理科 2010年一月二十日

EnVision兩步法免疫組化染色步驟

1、石蠟切片烤片12小時(shí)，脫蠟至水。

2、高壓修復(fù)：將高壓鍋內(nèi)的EDTA液燒開(kāi)后，放入切片加蓋，待壓力閥吹起后，定時(shí)3分鐘，開(kāi)蓋自然放涼。

3、蒸餾水洗2遍。

4、放入3%H2O2溶液中，室溫下孵育10分鐘。

5、蒸餾水沖洗2遍。

6、PBS浸洗3次，每次5分鐘（3×5/）。

7、擦去多余PBS液，每張切片上滴加一抗，放入4℃冰箱過(guò)夜。

8、PBS浸洗3次，每次5分鐘（3×5/）。

9、擦去多余PBS液，滴加二抗，室溫下孵育45分鐘。

10、PBS浸洗3×5/。

11、加DAB顯色液，顯微鏡下觀察，陽(yáng)性部位顯棕色，背景無(wú)著色，終止顯色。

12、自來(lái)水沖洗，蘇木素復(fù)染2—5分鐘、分化液分化、脫水、透明、中性樹(shù)膠封片。

脫水機(jī)操作程序

1.檢查脫水機(jī)內(nèi)各種液體及石蠟是否充分。2.將脫水機(jī)調(diào)整至起始位置。

3.將放置組織籃固定于脫水機(jī)上，降入液體缸內(nèi)。4.選擇已設(shè)置好的程序1，進(jìn)行組織標(biāo)本處理。5.次日停止程序，升起組織籃，將其取下復(fù)位。

病理科 2010年一月二十日

圖文報(bào)告系統(tǒng)操作流程

1． 檢查電源后打開(kāi)電腦。2． 點(diǎn)擊“圖文報(bào)告系統(tǒng)”。

3． 點(diǎn)擊“報(bào)告登錄”鍵進(jìn)行病理報(bào)告錄入。4． 點(diǎn)擊“改一般信息”鍵對(duì)已發(fā)報(bào)告進(jìn)行輸入。5． 點(diǎn)擊“攝像采集”鍵進(jìn)行病理切片的采集、分析。6． 認(rèn)真核對(duì)無(wú)誤后點(diǎn)擊“打印”鍵進(jìn)行報(bào)告打印。7． 下班前退出“圖文報(bào)告系統(tǒng)”并關(guān)機(jī)，關(guān)電源。

病理科 2010年一月二十日

電子天平操作規(guī)程

1.打開(kāi)電源開(kāi)關(guān)。2.打開(kāi)天平開(kāi)關(guān)。3.校正到“0”。4.進(jìn)行藥物稱(chēng)量。

5.稱(chēng)量完畢后，關(guān)閉開(kāi)關(guān)及電源。

病理科 2005年8月

尼康顯微鏡80i熒光使用操作注意事項(xiàng)

1.開(kāi)機(jī)前檢查顯微鏡電源和熒光汞燈電源是否關(guān)閉，在做熒光觀察時(shí)最好關(guān)閉顯微鏡主機(jī)電源。

2.開(kāi)機(jī)預(yù)熱：落射熒光汞燈電源開(kāi)啟后，需預(yù)熱最少5分鐘再進(jìn)行激發(fā)。

3.使用中根據(jù)熒光的強(qiáng)弱選擇不同的減光片。

4.使用激發(fā)后，不能少于30分鐘再停止激發(fā)。在關(guān)閉了激發(fā)光源后，若要再次使用，時(shí)間間隔不能少于30分鐘。

5.經(jīng)常觀察汞燈位置是否居中（通過(guò)對(duì)中望遠(yuǎn)鏡進(jìn)行觀察），如有偏差進(jìn)行調(diào)節(jié)至對(duì)中。

6.顯微鏡使用完畢后，依次關(guān)閉電源開(kāi)關(guān)，等機(jī)器冷卻一段時(shí)間后蓋上防塵罩。

病理科 2006年12月

尼康顯微鏡50i圖像采集系統(tǒng)操作流程

1.檢查電源后打開(kāi)電腦。2.打開(kāi)圖像傳輸系統(tǒng)按鈕/ 3.打開(kāi)顯微鏡。

4.雙擊“圖像采集系統(tǒng)”。5.調(diào)整“圖像采集系統(tǒng)”設(shè)置。6.拍攝并保存圖像。

7.拍攝完畢，退出“圖像采集系統(tǒng)”，并關(guān)機(jī)。8.關(guān)閉顯微鏡。

9.關(guān)閉“圖像傳輸系統(tǒng)”。

10.關(guān)電源，等機(jī)器冷卻一段時(shí)間后蓋上防塵罩。

病理科 2006年12月

試劑配制方法

一、蘇木素染液的配制方法：

A液：蘇木素1g，無(wú)水酒精10ml;B液：硫酸鋁鉀20克，蒸餾水200ml;兩液分別溶解后混合，加熱煮沸后，徐徐加入紅色氧化汞0.5g，然后將染液迅速冷卻后過(guò)濾使用，使用前每100ml加入冰醋酸4ml。

一、伊紅染液的配制方法（一般濃度為0.25~1%）：

伊紅0.5g，蒸餾水100ml，先用20ml蒸餾水溶解伊紅，全部溶解后加入80ml蒸餾水，最后加一滴冰醋酸。

二、分化液的配制方法：

鹽酸0.5ml，70%酒精100ml。

病理科 2005年6月

腎穿刺活檢染色操作常規(guī)

（一）一、常規(guī)染色

蘇木素——伊紅常規(guī)染色

注：石蠟切片伊紅必須染夠2分鐘。

二、特殊染色

（一）PAS（periodic acid shiff reaction）染色1、1%過(guò)碘酸10分鐘；

2、蒸餾水水洗5分鐘；

3、shiff 氏液40分鐘，觀察；

4、蒸餾水水洗；

5、蘇木素復(fù)染；

6、常規(guī)脫水、透明、封片。

（二）Masson染色 染色液配制：

1、Regnd氏蘇木素

蘇木素

95%酒精

甘油

雙蒸水2、0．2%酸性水

冰醋酸

蒸餾水

3、甲液（分析純）

麗春紅

酸性復(fù)紅

冰醋酸

蒸餾水

4、乙液（1%磷鉬酸）

磷鉬酸

蒸餾水

5、丙液（苯胺蘭液）

苯胺蘭

冰醋酸

蒸餾水

操作方法：

1、蘇木素

2、甲液

3、蒸餾水水洗；

1g

10ml

80ml

0.2ml 100ml 0.7g

0.3g

1ml

100ml

1g 100ml 2g 1ml 980ml

5-10分鐘；

20分鐘；

10ml

4、分化于乙液

10分鐘；

5、勿水洗直接入丙液

30秒鐘；

6、蒸餾水水洗；

腎穿刺活檢染色操作常規(guī)

（二）7、酸化液

5分鐘； 8、95%乙醇分化、快速脫水、透明、封固。

（三）PASM染色 染液配制

六胺銀染液：

2%硝酸銀水溶液

ml 6%六次甲基四胺（烏洛托品）

25ml 5%硼砂（四硼酸鈉）

2ml 注：四硼酸鈉易結(jié)晶，事先應(yīng)全部溶解。操作方法：

1、1%過(guò)碘酸

10分鐘

2、蒸餾水水洗3、5%鉻酸水溶液

40分鐘

4、蒸餾水水洗

5、六胺銀溶液60℃ 40分鐘（20分鐘后

每5分鐘觀察一次）

6、蒸餾水水洗7、0．2%氯化金水溶液

1-2分鐘

8、蒸餾水水洗9、5%硫代硫酸鈉水溶液

1-2分鐘

10、蒸餾水水洗

11、蘇木素復(fù)染、透明、封固。

（四）PASm+Masson套染

1、上接PASm第9步，水洗；

2、甲液

2分鐘；

3、蒸餾水水洗；

4、乙液

10分鐘；

5、勿水洗直接入丙液

30分鐘；

6、蒸餾水水洗入酸化液

5分鐘；

7、95%乙醇分化、快速脫水、透明、封固。

離心機(jī)操作規(guī)范

1、將液體標(biāo)本分裝入離心管中，用天平平衡后對(duì)稱(chēng)地放入離心管托架內(nèi)。

2、蓋上離心機(jī)蓋，設(shè)定時(shí)間為5分鐘，轉(zhuǎn)速為2000轉(zhuǎn)/分，按下“開(kāi)始”鍵后離心機(jī)開(kāi)始工作。

3、待離心機(jī)完全停止運(yùn)轉(zhuǎn)后，方可關(guān)閉電源，打開(kāi)離心機(jī)蓋，取出標(biāo)本，蓋好離心機(jī)蓋。

4、每日清潔離心機(jī)。

生物光學(xué)顯微鏡操作規(guī)程

顯微鏡屬于精密光學(xué)儀器，為了保證顯微鏡系統(tǒng)正常的發(fā)揮功能，特制定本規(guī)程。顯微鏡由專(zhuān)人使用，專(zhuān)人負(fù)責(zé)日常維護(hù)、保養(yǎng)。任何人未經(jīng)許可，不得調(diào)試該設(shè)備。

顯微鏡系統(tǒng)的操作步驟及日常維護(hù)、保養(yǎng)注意事項(xiàng)如下：

一、顯微鏡部分

1、去掉防塵罩，打開(kāi)電源。

2、將試樣置于載物臺(tái)墊片，調(diào)整粗/微調(diào)旋鈕進(jìn)行調(diào)焦，直到觀察到的圖像清晰為止。

3、調(diào)整載物臺(tái)位置，找到關(guān)心的視場(chǎng)，進(jìn)行金相分析。

二、計(jì)算機(jī)及圖像分析系統(tǒng)

將顯微鏡上的觀察/照相切換旋鈕調(diào)至位置，顯微鏡里觀察到的信息便轉(zhuǎn)換到視頻接口和攝像頭，打開(kāi)計(jì)算機(jī)，啟動(dòng)圖象分析軟件，即可觀察到來(lái)自顯微鏡的實(shí)時(shí)的圖像，找到關(guān)心的視場(chǎng)后將其采集、處理。

三、日常維護(hù)、保養(yǎng)及注意事項(xiàng)

為保證系統(tǒng)的使用壽命及可靠性，注意以下事項(xiàng)：

1.試驗(yàn)室應(yīng)具備三防條件：防震（遠(yuǎn)離震源）、防潮（使用空調(diào)、干燥器）、防塵（地面鋪上地板）；電源：220V+-10%,50HZ溫度：0-40℃ 2.調(diào)焦時(shí)注意不要使物鏡碰到試樣，以免劃傷物鏡。3.當(dāng)載物臺(tái)墊片圓孔中心的位置遠(yuǎn)離物鏡中心位置時(shí)不要切換物鏡，以免劃傷物鏡。

4.亮度調(diào)整切忌忽大忽小，也不要過(guò)亮，影響燈泡的使用壽命，同時(shí)也有損視力。

5.所有（功能）切換，動(dòng)作要輕，要到位。6.關(guān)機(jī)時(shí)要將亮度調(diào)到最小。

7.非專(zhuān)業(yè)人員不要調(diào)整照明系統(tǒng)（燈絲位置燈），以免影響成像質(zhì)量。8.更換鹵素?zé)魰r(shí)要注意高溫，以免灼傷；注意不要用手直接接觸鹵素?zé)舻牟Ａw。

9.關(guān)機(jī)不使用時(shí)，將物鏡通過(guò)調(diào)焦機(jī)構(gòu)調(diào)整到最低狀態(tài)。

10.關(guān)機(jī)不使用時(shí)，不要立即該蓋防塵罩，待冷卻后再蓋，注意防火。11.不經(jīng)常使用的光學(xué)部件放置于干燥皿內(nèi)。

12.非專(zhuān)業(yè)人員不要嘗試擦物鏡及其它光學(xué)部件。目鏡可以用脫脂棉簽蘸1:1比例（無(wú)水酒精：乙醚）混合液體甩干后擦拭，不要用其他液體，以免損傷目鏡。

病理檢查服務(wù)項(xiàng)目目錄

1、局部切除組織活檢檢查與診斷

2、內(nèi)鏡組織活檢檢查與診斷

3、手術(shù)標(biāo)本檢查與診斷

4、骨髓組織活檢檢查與診斷

5、穿刺組織活檢檢查與診斷

6、特殊染色：

PAS染色 VG染色 Masson染色 剛果紅染色 抗酸染色

7、普通病理會(huì)診

8、細(xì)胞學(xué)診斷

病理科

2010年1月20日

第三篇：病理科免疫組織化學(xué)技術(shù)員培訓(xùn)及技術(shù)操作規(guī)范

題目：病理科免疫組織化學(xué)技術(shù)員培訓(xùn)及技術(shù)操作規(guī)范 市一—病理科—30 生效日期：2012年1月1日 版本號(hào)1.0 修改日期： 頁(yè)碼1/13

病理科免疫組織化學(xué)技術(shù)員培訓(xùn)及技術(shù)操作規(guī)范

一、病理科免疫組織化學(xué)技術(shù)員培訓(xùn)規(guī)范：

凡新入我科的病理技術(shù)員均需進(jìn)行免疫組化理論知識(shí)的學(xué)習(xí)、培訓(xùn)，經(jīng)考核合格、具備病理技術(shù)員技士資質(zhì)后方能從事免疫組織化學(xué)染色。

二、病理科免疫組織化學(xué)染色操作規(guī)范 1.免疫組織化學(xué)染色前的準(zhǔn)備事項(xiàng)(一)組織切片的制備

常規(guī)切片脫蠟至水（組織固定需用10%中性甲醛）(二)抗體的選擇、稀釋和保存

（1）選擇抗體應(yīng)先了解其反應(yīng)譜和適用條件〔包括適用切片(石蠟切片抑或冷凍切片)、稀釋度和溫育時(shí)間等〕。

（2）對(duì)于未曾使用過(guò)的新抗體，應(yīng)按照有關(guān)說(shuō)明書(shū)的提示，以幾個(gè)不同的稀釋度對(duì)適宜檢材(已知陽(yáng)性切片/涂片)進(jìn)行預(yù)試驗(yàn);根據(jù)染色陽(yáng)性表達(dá)的程度和檢材背景著色程度，確定用于染色的最適稀釋度（3）抗體的原液應(yīng)于分裝后置于一20℃冷室中保存，切勿反復(fù)凍存(以免效價(jià) 降低)。（4）抗體的工作液可置于4℃冰箱中保存。（5）抗體的稀釋。

(1)一般用0.01M PBS(生理鹽水磷酸鹽緩沖液)，pH值7.2。(2)或用0.05M TBS(生理鹽水三經(jīng)基氨基甲烷緩沖液)，pH值7.6。(3)必要時(shí)可按需要加適量小牛血清清蛋白。(三)被檢測(cè)組織內(nèi)抗原的修復(fù)

（1）經(jīng)4%中性甲醛之類(lèi)含醛基固定劑固定的組織，其切片中的抗原決定簇因醛的交聯(lián)作用而被封閉，從而影響抗原一抗體反應(yīng)。進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色前，對(duì)于組織切片進(jìn)行抗原修復(fù)處理，會(huì)使組織中的固有抗原盡量多地暴露出來(lái)，提升了大部分檢測(cè)抗體的陽(yáng)性率和反應(yīng)強(qiáng)度。有的抗體不需要進(jìn)行抗原修復(fù)。應(yīng)按抗體試劑說(shuō)明書(shū)的提示決定是否進(jìn)行被檢測(cè)組織內(nèi)的抗原修復(fù)。（2）抗原修復(fù)緩沖液。

(l)一般為0.01M檸檬酸緩沖液(2.1g檸檬酸溶于100ml蒸餾水中，用2M NaOH調(diào)節(jié)pH值至6.0)。(2)有些抗體需要特殊修復(fù)緩沖液，如高PH值的EDTA(50mM Tris.，10mM EDTA，pH9.0)，或商品化的該高題目：病理科免疫組織化學(xué)技術(shù)員培訓(xùn)及技術(shù)操作規(guī)范 市一—病理科—30 生效日期：2012年1月1日 版本號(hào)1.0 修改日期： 頁(yè)碼2/13

pH修復(fù)液等。

（3）抗原修復(fù)的常用方法。(l)胰蛋白酶消化法: ①組織切片脫蠟、水化。

②滴加一滴0.1%胰蛋白酶液于組織切片上。

③37℃下溫育20-40min(溫育時(shí)間取決于組織經(jīng)4%中性甲醛固定時(shí)間的長(zhǎng)短和被檢測(cè)抗原)。

④蒸餾水沖洗，終止反應(yīng)。

⑤阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶。

⑥進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色。（配制0.1%胰蛋白酶液時(shí)，應(yīng)將0.1g胰蛋白酶溶于0.1%無(wú)水氯化鈣水溶液(pH值7.8)中。）

（2)胃蛋白酶消化法: ①組織切片脫蠟、水化.②滴加胃蛋白酶工作液于組織切片上。

③37℃下溫育10-30min(一般為10min，可延至30min，取決于組織經(jīng)4%中性甲醛固定時(shí)間的長(zhǎng)短).④浸人蒸餾水，終止反應(yīng)。

⑤進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色。用1%胰蛋白酶液37℃下處理20min。(應(yīng)以 0.1M HCI配制胃蛋白酶工作液。過(guò)度的胃蛋白酶消化會(huì)使組織結(jié)構(gòu)破壞、切片 脫落。)（3)微波修復(fù)抗原法: ①組織切片脫蠟、水化(硅化玻片或經(jīng)防脫片膠處理的玻片)。

②將組織切片置于容器(塑料盒或玻璃缸)中，并向其中加人抗原修復(fù)液 200ml，蓋上具有小孔的蓋子。

③將該容器置于微波爐(705-800W)中央加熱(95℃)5min，2次(于兩次之間，應(yīng)向容器中添加蒸餾水50ml，嚴(yán)防組織切片干燥)。

④將該容器移出微波爐，置于室溫下冷卻15-20min。

⑤蒸餾水沖洗。

⑥阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，而后將切片置于蒸餾水中。

⑦用TBS或 PBS液沖洗。

⑧進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色。(4)熱水浴法: 題目：病理科免疫組織化學(xué)技術(shù)員培訓(xùn)及技術(shù)操作規(guī)范 市一—病理科—30 生效日期：2012年1月1日 版本號(hào)1.0 修改日期： 頁(yè)碼3/13

①組織切片脫蠟、水化(硅化玻片或經(jīng)防脫片膠處理的玻片)。

②向裝組織切片的容器加人足量(例如200ml)抗原緩沖液，置于水浴鍋中，加熱至95-99℃(不沸騰)預(yù)熱。

③將組織切片插人已預(yù)熱的容器內(nèi)，溫育20-40min。

④將該容器由微波爐移出，置于室溫下冷卻20min。⑤室溫下，用TBS、PBS或水洗。

⑥蒸餾水沖洗。

⑦阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，而后將切片置于蒸餾水中。

⑧用TBS或PBS液沖洗。

⑨進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色。

（5)壓力鍋法: ①組織切片脫蠟、水化(硅化玻片或經(jīng)防脫片膠處理的玻片)。

②向4-5.5L的不銹鋼壓力鍋中加人抗原修復(fù)緩沖液(約為鍋容積的2/3)，不加閥情況 下加熱至沸騰。

③將組織切片插放于金屬切片架上，并置于壓力鍋內(nèi)沸騰的緩沖液中。

④加閥情況下，將組織切片加壓2min。

⑤壓力鍋?zhàn)孕欣鋮s或以流水冷卻減壓后，持續(xù)20min。

⑥將冷卻后的切片取出，蒸餾水沖洗后，置于TBS或PBS液中(以免組織切片干燥)。

⑦蒸餾水沖洗。

⑧阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，而后將切片置于蒸餾水中。

⑨用TBS或PBS液沖洗。

⑩進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色。

（四）組織切片中內(nèi)源性酶的阻斷

1.內(nèi)源性過(guò)氧化物酶 主要存在于紅細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞了嗜酸性粒細(xì)胞和組織內(nèi)。阻斷方法:最常用0.3%-0.5%H2O2-甲醇液，作用15-30min，阻斷液必須使用時(shí)新鮮配制。由于阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶常同時(shí)導(dǎo)致被測(cè)抗原變性(使特異性著色減弱)，而大部分組織不含有內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，所以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶一般不必作為常規(guī)步驟。必須阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶時(shí)，可安排在第一抗體反應(yīng)后進(jìn)行，以減少抗原的破壞。題目：病理科免疫組織化學(xué)技術(shù)員培訓(xùn)及技術(shù)操作規(guī)范 市一—病理科—30 生效日期：2012年1月1日 版本號(hào)1.0 修改日期： 頁(yè)碼4/13

2.內(nèi)源性堿性磷酸酶 主要存在于嗜中性粒細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞。阻斷方法:應(yīng)用1M左旋咪唑，作用15-30min。

3.內(nèi)源性生物素 肝、胰、腎等的細(xì)胞內(nèi)含有多量生物素或類(lèi)生物素物質(zhì)。阻斷方法:先將切片浸于卵白素(0.5μg/ml)中15min，以緩沖液洗凈后，移浸于生物素飽和溶液中15min，再用緩沖液洗去多余的生物素飽和液;也可應(yīng)用商供的阻斷試劑盒(按說(shuō)明書(shū)操作)。(五)正常血清保護(hù)

作為檢測(cè)試劑的抗體蛋白帶有一定的負(fù)電荷，免疫組織化學(xué)染色時(shí)，易與帶有正電荷的組織〔特別是纖維組織、變性和(或)壞死的細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞等〕發(fā)生靜電吸引而導(dǎo)致非特異性染色。去除這種非特異性染色最有效的方法是，在滴加第一抗體前，先滴加用于制備第二抗體動(dòng)物的非免疫血清或是滴加除制備第一抗體動(dòng)物以外的其他動(dòng)物非免疫血清，濃度為1：5-1：20;必要時(shí)可滴加2%-5%牛 血清清蛋白。正常血清保護(hù)作用時(shí)間10-20min。用于阻斷非特異性結(jié)合的血清不能有明顯的溶血。(六)緩沖液

用于稀釋抗體，洗滌切片的緩沖液主要有兩種。1.TBS(0.05M，pH7.6)，Tris一HCl緩沖液(0.SM，pH 7.6)100ml 8.5%NaCl 100ml 蒸餾水加至 1000ml Tris一HCI緩沖液(0.5M，pH7.6)三經(jīng)甲基氨基甲烷(Tris)61g HCl 37ml 蒸餾水加至 1000ml 2．PBS(0.IM，pH 7.6)Na2 HPO4 · 12H2O2 29g NaH2PO4 · 2H2O 3g NaCl 85g 蒸餾水加至 1000ml 使用時(shí)用蒸餾水稀釋10倍即成0.0lM。

二、免疫組織化學(xué)染色常用方法 題目：病理科免疫組織化學(xué)技術(shù)員培訓(xùn)及技術(shù)操作規(guī)范 市一—病理科—30 生效日期：2012年1月1日 版本號(hào)1.0 修改日期： 頁(yè)碼5/13

(一)直接法 1.脫蠟和水化。

2.3%過(guò)氧化氫或0.5%過(guò)氧化氫甲醇液，5min。

3.TBS或PBS緩沖液洗滌。4.抗原修復(fù)。

5.無(wú)關(guān)動(dòng)物正常血清(適當(dāng)稀釋)20-30min。

6.甩去正常動(dòng)物血清，滴加適當(dāng)稀釋的辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記抗體，或增強(qiáng)的酶標(biāo)多聚物一步法(Enhanced Polymer One-step Staining，EPOS)抗體于切片上，20-60min。7.TBS或PBS緩沖液洗滌。

8.0.04%-0.05%DAB(二氨基聯(lián)苯胺四鹽酸)H2O2液顯色5-10min，鏡下觀察控制顯色時(shí)間。底物配法:DAB 40-50mg；0.05M TBS(pH 7.6)l00ml；3% H2O2 100-200ml。9.緩沖液洗，流水洗滌。10.蘇木精淡染細(xì)胞核。11.脫水，透明，封片。(二)間接法

l-5步同“直接法”。

6.滴加第一抗體于切片上，濕盒內(nèi)溫育30-60min。7.TBS或PBS緩沖液洗滌。

8.HRP標(biāo)記抗體或用增強(qiáng)的酶標(biāo)記多聚物(Enhanced Labeled一 Polymer Sys-tem，ELPS)抗體滴加切片上，濕盒內(nèi)溫育30min。9-14步同“直接法”的7-11步。(三)過(guò)氧化物酶一抗過(guò)氧化物酶(PAP)法 1-5步同直接法。

6.適當(dāng)稀釋的第一抗體，濕盒內(nèi)溫育30-60min。7.緩沖液洗滌。

8.第二抗體，濕盒內(nèi)溫育30min。9.緩沖液洗滌。

10.滴加PAP，濕盒內(nèi)溫育30min。題目：病理科免疫組織化學(xué)技術(shù)員培訓(xùn)及技術(shù)操作規(guī)范 市一—病理科—30 生效日期：2012年1月1日 版本號(hào)1.0 修改日期： 頁(yè)碼6/13

11-15步同“直接法”的7-11步。

雙PAP法:上述操作進(jìn)行到第10步后，再重復(fù)7-10步1次，然后繼續(xù)11-15步。(四)葡萄球菌A蛋白(SPA)免疫酶法 1-5步同“直接法”。

6.第一抗體，濕盒溫育30-60min。7.緩沖液洗滌。

8.酶聯(lián)SPA，濕盒溫育30min。9.緩沖液洗滌。

10-13步同“直接法”的8-11步。(五)ABC法和SABC法

ABC法是卵白素-生物素-酶復(fù)合物(Avidin--Biotin--Peroxidase Complex)法的簡(jiǎn)稱(chēng)。SABC法是鏈霉卵白素-生物素-酶復(fù)合物(Streptavidin一Biotin一peroxidase Complex)法的簡(jiǎn)稱(chēng)。l-5步同“直接法”。

6.第一抗體，濕盒溫育30-60min.7.緩沖液洗滌。

8.生物素化的第二抗體，30min。9.緩沖液洗滌。

10.ABC復(fù)合物或SABC復(fù)合物(皆于使用前新鮮配制)，30-60min。11-15步同“直接法”7-11步。(六)LSAB(SP)法

LSAB(SP)法，是標(biāo)記的鏈酶卵白素-生物素(Labeled Streptavidin--Biotin)法的簡(jiǎn)稱(chēng)，操作步驟同“ABC法”，只是以LSAB復(fù)合物替代ABC復(fù)合物。(七)CSA法

CSA法是催化信號(hào)放大(Catalyzed Signal Amplifieation)法的簡(jiǎn)稱(chēng)。1-5步同“直接法”。6.第一抗體，15-30min。7.緩沖液洗滌。

8.生物素標(biāo)記的第二抗體，15-30min。題目：病理科免疫組織化學(xué)技術(shù)員培訓(xùn)及技術(shù)操作規(guī)范 市一—病理科—30 生效日期：2012年1月1日 版本號(hào)1.0 修改日期： 頁(yè)碼7/13

9.緩沖液洗滌。

10.鏈霉卵白素-生物素-HRP復(fù)合物(用前新鮮配制)，15min。11.緩沖液洗滌。12.放大液，15min。13.緩沖液洗滌。

14.HRP-StrePtavidin，15min。15-19步同“直接法”的7-11步。(八)二步法Envision System Envision是通過(guò)一個(gè)多聚葡聚糖骨架聯(lián)接成一個(gè)多聚體。1-5步同“直接法”。6.第一抗體，30-60min。7.緩沖液洗滌。

8.Envision TM，10-30min。9-13步同“直接法”的7-11步。(九)雙重免疫組織化學(xué)法.Sequential(1)鼠或兔抗體1，30-60min。

(2)Envision TM，羊抗鼠/羊抗兔/HRP，30 min。(3)DAB(棕色)，2-10 min。(4)鼠或兔抗體2，30-60 min。

(5)Envision TM，羊抗鼠/羊抗兔/AP，30 min。(6)AP(紅色)。2.Simnl一Aaneous(1)混合鼠抗體1和兔抗體2，4℃，過(guò)夜或60 min。(2)Envision TM羊抗鼠/HRP和羊抗兔/AP。(3)AP染色。(4)HRP染色。

上述方法除注明溫度者外，均可在室溫(20-25℃)環(huán)境中進(jìn)行;第一抗體溫育后，如有必要可置于4℃題目：病理科免疫組織化學(xué)技術(shù)員培訓(xùn)及技術(shù)操作規(guī)范 市一—病理科—30 生效日期：2012年1月1日 版本號(hào)1.0 修改日期： 頁(yè)碼8/13

下過(guò)夜。

三、免疫組織化學(xué)染色的常用抗體標(biāo)記物(一)上皮源性標(biāo)記物 1.一般性標(biāo)記物

（1）CK(角蛋白)CK亞型:①CK5/6;②CK7;③CK8;④CK10/13;⑤CK18;⑥CK19;⑦CK20。(2)EMA(上皮細(xì)胞膜抗原)。

2.特異性和(或)相對(duì)特異性上皮標(biāo)記物

（1）CEA(癌胚抗原，標(biāo)記胃癌、大腸癌).（2）CA242(腫瘤相關(guān)粘液抗原，標(biāo)記胰腺癌、大腸癌)。

（3）TG(甲狀腺球蛋白，標(biāo)記甲狀腺癌).（4）PSA(前列腺特異性抗原，標(biāo)記前列腺癌)。

（5）PSAP(前列腺特異性酸性磷酸酶，標(biāo)記前列腺癌).（6）34βE12(標(biāo)記前列腺底細(xì)胞).（7）AFP(甲胎蛋白，標(biāo)記肝癌、內(nèi)胚竇癌).（8）Hepatoeyte(標(biāo)記肝細(xì)胞癌)。

(9)β-HCG(β-絨毛膜促性腺激素，標(biāo)記胎盤(pán)滋養(yǎng)層細(xì)胞腫瘤、生殖細(xì)胞腫瘤).（10）CA125(卵巢癌).（二)間葉源性標(biāo)記物

主要是Vimentin(vim，波形蛋白)等.（三）肌源性標(biāo)記物 1.Desmin(Des，結(jié)蛋白)2.Actin(肌動(dòng)蛋白）.3.SMA(平滑肌肌動(dòng)蛋白).4.MSA(肌特異性肌動(dòng)蛋白).5.Myosin(肌球蛋白).6.Myoglobin(MG，肌紅蛋白)7.Myogen(肌漿蛋白).題目：病理科免疫組織化學(xué)技術(shù)員培訓(xùn)及技術(shù)操作規(guī)范 市一—病理科—30 生效日期：2012年1月1日 版本號(hào)1.0 修改日期： 頁(yè)碼9/13

8.MyoDI(肌調(diào)節(jié)蛋白).(四)血管源性標(biāo)記物 FⅧRAg(第8因子相關(guān)抗原).CD31 CD34 UEA-l BNH9.(五)組織細(xì)胞源性標(biāo)記物 1.CD68/KP-l.2.Lysozyme(溶菌酶)。3.a1-AT(a1-抗胰蛋白酶).4.a1-ACT(al-抗胰糜蛋白酶)5.Mac387.淋巴造血組織源性標(biāo)記物 1.全淋巴細(xì)胞

(1)CD45/LCA(白細(xì)胞共同抗原）。(2)TdT(末端脫氧核昔酸轉(zhuǎn)移酶)。(3)CD30/Ki-1。2.全B細(xì)胞(1)Igκ。(2)Igλ。(3)CD20/L26。(4)CD79a。

(5)BLA36(B淋巴細(xì)胞抗原)。3.B細(xì)胞亞型(1)CDl0。

(2)CD21(標(biāo)記濾泡性樹(shù)突狀細(xì)胞)。(3)CD23。題目：病理科免疫組織化學(xué)技術(shù)員培訓(xùn)及技術(shù)操作規(guī)范 市一—病理科—30 生效日期：2012年1月1日 版本號(hào)1.0 修改日期： 頁(yè)碼10/13

(4)CD35(標(biāo)記濾泡性樹(shù)突狀細(xì)胞)。(5)CD38.4.全T細(xì)胞(1)CD3。(2)CD5。(3)CD43。(4)CD45RO/UCHL-1.5.T細(xì)胞亞型(1)CDla。(2)CD4。(3)CD8。6.NK細(xì)胞(1)CD56。(2)CD57/Leu-7。(3)CD16/Leu-11。7.粒細(xì)胞和單核巨噬細(xì)胞(1)CD11c/LeuM5。(2)CD15/LeuM5。(3)Lysozyme(溶菌酶)。(4)al-AT(al-抗胰蛋白酶)。(5)al-ACT(al-抗胰糜蛋白酶)。(6)CD68.(7)S-100蛋白.(8)Mac387。8.其他

(1)EMA(上皮細(xì)胞膜抗原).(2)CD99(尤因肉瘤標(biāo)記物).(3)ALK-l(間變性淋巴瘤激酶)。題目：病理科免疫組織化學(xué)技術(shù)員培訓(xùn)及技術(shù)操作規(guī)范 市一—病理科—30 生效日期：2012年1月1日 版本號(hào)1.0 修改日期： 頁(yè)碼11/13

(4)HLA-DR。(5)Bel-2。(6)Bel-6。(7)Bel-10。(8)Ki-67。

(9)CyclinD1(周期素D1)。(10)CD25。

(11)CD34。

（七）神經(jīng)源性標(biāo)記物 1.S-100蛋白.2.NSE（神經(jīng)原特異性烯醇化酶）.3.Leu7。

4.Neurofilament(NF，神經(jīng)微絲蛋白)。5.GFAP(膠質(zhì)纖維酸性蛋白）

（八）神經(jīng)內(nèi)分泌源性標(biāo)記物 1.激素標(biāo)記物(1)CA(兒茶酚胺)。(2)5-HT(5-經(jīng)色胺).(3)垂體激素。

①GH(促生長(zhǎng)素)。

②PRL(催乳素)。

③ACTH(促腎上腺皮質(zhì)激素).④TSH(促甲狀腺素).⑤FSH(促濾泡素).⑥LH(促黃體素)。(4)甲狀腺。

①TG(甲狀腺球蛋白)。

②CT(降鈣素)。題目：病理科免疫組織化學(xué)技術(shù)員培訓(xùn)及技術(shù)操作規(guī)范 市一—病理科—30 生效日期：2012年1月1日 版本號(hào)1.0 修改日期： 頁(yè)碼12/13

(5)甲狀旁腺:PTH(甲狀旁腺素)。(6)胰島。

①I(mǎi)nsulin(胰島素)。

②Glueagon(胰高糖素)。

③VIP(舒血管腸肽).④PP(胰多肽).⑤Someitostatin(生長(zhǎng)抑素)。

⑥Gastrin(胃泌素)。2.非激素標(biāo)記物

(1)NSE(神經(jīng)原特異性烯醇化酶).(2)CgA(嗜鉻素A).(3)SY(突觸素).3.激素受體

（1）ER(雌激素受體）.（2）AR(雄激素受體）.（3）PR(孕激素受體).(九)細(xì)胞增殖標(biāo)記物 1.PCNA(增殖細(xì)胞核抗原).2.Ki-67.（十）黑色素標(biāo)記物 1.S-100蛋白.2.HMB45.3.Melanoma。

(十一）癌基因和（或）抑癌基因 1.bel-2.2.c-erbB-2.3.p53 4.p16(多腫瘤抑制基因)。題目：病理科免疫組織化學(xué)技術(shù)員培訓(xùn)及技術(shù)操作規(guī)范 市一—病理科—30 生效日期：2012年1月1日 版本號(hào)1.0 修改日期： 頁(yè)碼13/13

5.nm23。(十二)病原體標(biāo)記物

1.Myoeobaeterium Bovis(分枝桿菌，抗卡介苗)。2.HBsAg(乙型肝炎病毒表面抗原).3.HBcAg(乙型肝炎病毒核心抗原).4.HPV(人乳頭狀瘤病毒)5.HTLV-1(人類(lèi)T細(xì)胞白血病病毒)。

第四篇：銷(xiāo)售部業(yè)務(wù)操作流程及規(guī)范

業(yè)務(wù)操作流程及要求

為提高工作效率，規(guī)范服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)，提高服務(wù)質(zhì)量，強(qiáng)化工作的原則性，縮短團(tuán)散操作周期，特別制定此條款，所有業(yè)務(wù)人員必須嚴(yán)格按照本條例程序和要求進(jìn)行操作，工作中秉承嚴(yán)謹(jǐn)、認(rèn)真、干練、專(zhuān)業(yè)及完善的服務(wù)態(tài)度。旨在服務(wù)好本期當(dāng)前客戶的前提下，同時(shí)做好客戶資源儲(chǔ)備和客戶管理及后續(xù)服務(wù)，用長(zhǎng)遠(yuǎn)的眼光和永續(xù)的思維去工作。

一、出團(tuán)前準(zhǔn)備工作。

1、出團(tuán)前的操作流程及要求：

① 訪問(wèn)交談深入了解客戶具體團(tuán)隊(duì)細(xì)節(jié)：出行人數(shù)和年齡（明確不同情況的不同收費(fèi)情況，與計(jì)調(diào)對(duì)接好，獲得客戶本人的認(rèn)可并簽字。）②證件情況：是否白本護(hù)照，是否外地戶口，取證時(shí)間和郵寄地點(diǎn)。③ 出行時(shí)間：某月大概的時(shí)間。

④大交通：是否含接送，接送機(jī)具體地址，核價(jià)前告知計(jì)調(diào)。

⑤ 特殊要求：是否有孕婦、老人、小孩、高血壓等需要特殊照顧的病人。⑥ 具體行程要求：常規(guī)操作，還是高品。具體住宿要求，常規(guī)星級(jí)還是特色酒店。用餐自理、標(biāo)準(zhǔn)團(tuán)餐、還是需要升級(jí)。行程安排常規(guī)景點(diǎn)還是非常規(guī)，要求加入哪些景點(diǎn)，明確自費(fèi)和購(gòu)物要求等。

⑦ 遇到競(jìng)爭(zhēng)，應(yīng)盡量詳細(xì)的了解清楚當(dāng)前具體進(jìn)展程度，了解競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手狀態(tài)，及時(shí)告知計(jì)調(diào)，報(bào)價(jià)時(shí)需斟酌。

（以上內(nèi)容需做詳細(xì)記錄，業(yè)務(wù)需在計(jì)調(diào)設(shè)計(jì)產(chǎn)品和報(bào)價(jià)前提供給計(jì)調(diào)，配合給出有針對(duì)性、有競(jìng)爭(zhēng)力、最適合此客戶的產(chǎn)品，團(tuán)隊(duì)中每一個(gè)細(xì)節(jié)性的調(diào)整，業(yè)務(wù)都要與計(jì)調(diào)QQ聊天記錄，做到有據(jù)可依。）

2、確定行程：跟進(jìn)客戶要求，按要求調(diào)整行程，給客人詳細(xì)講解行程，定

稿后請(qǐng)客戶在最終行程上簽字確認(rèn)。

3、最終報(bào)價(jià)：不得低于計(jì)調(diào)給出的正常報(bào)價(jià)，根據(jù)客戶情況靈活掌握。涉

及到團(tuán)隊(duì)或老客戶優(yōu)惠幅度較大時(shí)，需申請(qǐng)主管副總批準(zhǔn)。

4、簽合同。收取出行人員名單并叮囑客人名單一定要保密，防止被他人盜

用引發(fā)不必要的后果。單位出行的需蓋公章，負(fù)責(zé)人簽字。散客出行需客戶本人簽字。

5、收款。散客收全款。特殊團(tuán)隊(duì)出發(fā)前至少收總團(tuán)款的80%（需經(jīng)總經(jīng)理

批準(zhǔn)），同時(shí)在合同備注尾款支付日期。當(dāng)日交款至財(cái)務(wù)。

6、名單核實(shí)。負(fù)責(zé)人需在名單上簽署“名單準(zhǔn)確無(wú)誤”及負(fù)責(zé)人名字和日期。

再次和每一個(gè)客人逐一確認(rèn)，并通知客人出票后不能做任何更改變動(dòng)。如發(fā)現(xiàn)團(tuán)中有客戶過(guò)生日的客戶，需要特殊標(biāo)志，并告知計(jì)調(diào)及導(dǎo)游。

7、出票。出票前在與計(jì)調(diào)核對(duì)最終名單，確認(rèn)無(wú)誤時(shí)再進(jìn)行出票。出票后，應(yīng)立即通知客戶，并把航班信息通知給客戶，并電話作《出團(tuán)通知》，告知旅游目的地注意事項(xiàng)、天氣、須帶物品等情況。將客戶信息上傳至管理系統(tǒng)中，以便計(jì)調(diào)做派團(tuán)單。

8、計(jì)調(diào)派團(tuán)后，業(yè)務(wù)將客戶要求與帶團(tuán)導(dǎo)游對(duì)接詳細(xì)。

行前說(shuō)明會(huì)。導(dǎo)游講解行程（導(dǎo)游不在由業(yè)務(wù)代替）特別強(qiáng)調(diào)確認(rèn)行程的住宿、用餐標(biāo)準(zhǔn)等，贈(zèng)品發(fā)放（講解贈(zèng)品使用方法）、當(dāng)?shù)刈⒁馐马?xiàng)細(xì)則、需帶物品提醒、告知客戶根據(jù)旅行中的實(shí)際體會(huì)如實(shí)填寫(xiě)地接導(dǎo)游給出《意見(jiàn)反饋單》，并告知此單將作為我公司與對(duì)方的結(jié)算依據(jù)，（帶團(tuán)導(dǎo)游需根據(jù)實(shí)際情況判斷客人評(píng)價(jià)是否屬實(shí)，后簽字確認(rèn)。）與領(lǐng)導(dǎo)

對(duì)接特殊要求及其他細(xì)節(jié)等。

9、送團(tuán)。提前通知客戶集合時(shí)間和地點(diǎn)，確保每一位需要送機(jī)的客戶能夠

準(zhǔn)確抵達(dá)集合地點(diǎn)，自行前往的客戶統(tǒng)計(jì)標(biāo)注，并提前告知計(jì)調(diào)及送帶團(tuán)導(dǎo)游。

二、團(tuán)中，操作流程及要求：

1、團(tuán)中質(zhì)量監(jiān)控。隔天下午或晚上短息或電話跟蹤，問(wèn)候領(lǐng)隊(duì)，了解團(tuán)隊(duì)進(jìn)行中的具體情況，如果車(chē)、餐、導(dǎo)、宿、行程等具體細(xì)節(jié)方面客戶提出不足之處，需和帶團(tuán)導(dǎo)游核實(shí)確認(rèn)情況屬實(shí)后，立即通知計(jì)調(diào)在合理要求范圍之內(nèi)做出調(diào)整，并把調(diào)整后結(jié)果及時(shí)告知客戶。長(zhǎng)線團(tuán)隊(duì)至少要做1次團(tuán)中質(zhì)量監(jiān)控。

2、回團(tuán)接團(tuán)。與計(jì)調(diào)落實(shí)好接機(jī)或接站的時(shí)間、地點(diǎn)、車(chē)，提前跟司機(jī)再確認(rèn)一遍。如團(tuán)隊(duì)返回，和導(dǎo)游及領(lǐng)隊(duì)打電話詢問(wèn)是否順利，酌情考慮是否需要業(yè)務(wù)員親自前往接團(tuán)。

三、回團(tuán)后：

1、回團(tuán)后3天之內(nèi)做質(zhì)量回訪（參照客服中心回訪標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行）。

2、收尾款。回團(tuán)后根據(jù)合同簽訂的尾款支付日期收取剩余團(tuán)款。

3、將此客戶更新至《已成單客戶列表》，并完善自己的客戶檔案（一個(gè)計(jì)劃號(hào)一個(gè)文檔，體現(xiàn)客戶提供的初始名單、最終確認(rèn)名單、客戶咨詢的備選線路、確認(rèn)行程等，以便后期查閱）。

4、完善《管理系統(tǒng)》

5、生日及特殊日期問(wèn)候、祝福。

6、關(guān)注此客戶出行特點(diǎn)和規(guī)律，及時(shí)進(jìn)行實(shí)施營(yíng)銷(xiāo)。

業(yè)務(wù)日常工作要求：

一、周一工作安排：

①09：00之前上交《周計(jì)劃》至副經(jīng)理。部門(mén)領(lǐng)導(dǎo)布置本周工作，根據(jù)公司任務(wù)下達(dá)及時(shí)調(diào)整本周工作計(jì)劃。本周主推，新產(chǎn)品發(fā)布，培訓(xùn)等。做日常推廣、客戶回復(fù)。下午拜訪客戶，老客戶及陌生拜訪5+。及其他日常。

二、工作日安排：

①每日在QQ、微信、微博等網(wǎng)絡(luò)銷(xiāo)售平臺(tái)做至少2次推廣。09：00前做完第一次推廣。

②09:00之前外去開(kāi)展業(yè)務(wù)，老客戶客戶維護(hù)，意向跟進(jìn)，陌生拜 訪等。每日資料發(fā)放8-12份，有效溝通8-12訪。（根據(jù)客戶接待情況作適當(dāng)調(diào)整。）

③總結(jié)當(dāng)日工作，當(dāng)日拜訪情況當(dāng)日匯總（附《客戶檔案表》）。剔出意向客戶，匯總至（附《意向客戶列表》）。以上文件備注自己的名字、日期，組長(zhǎng)負(fù)責(zé)匯總完畢后，下班前將當(dāng)日意向電子版發(fā)送至主管領(lǐng)導(dǎo)。業(yè)務(wù)動(dòng)態(tài)表匯總完畢后，方可下班。

④做好次日計(jì)劃，筆記本體現(xiàn)，備查。

三、工作日17:00小組小會(huì)（各組值班組長(zhǎng)負(fù)責(zé)組織，副經(jīng)理指導(dǎo)工作），做會(huì)議記錄。具體內(nèi)容及要求：

①了解各業(yè)務(wù)員當(dāng)日工作情況。

②匯總市場(chǎng)最新動(dòng)態(tài)，當(dāng)前當(dāng)季客戶市場(chǎng)分析，掌握客戶需求變化并做記錄，目標(biāo)市場(chǎng)定位，尋找新客源。

③各業(yè)務(wù)員遇到的問(wèn)題，回來(lái)匯總，處理，并做記錄。

④銷(xiāo)售經(jīng)理（或者輪值經(jīng)理）把握各業(yè)務(wù)員的意向客戶及并實(shí)時(shí)關(guān)注跟進(jìn)情況。（附《意向客戶統(tǒng)計(jì)表》，部門(mén)當(dāng)日更新。）匯總意向和各部門(mén)意向?qū)樱浜嫌?jì)調(diào)做出合理定“團(tuán)期收客”計(jì)劃。

⑤當(dāng)日成單客戶統(tǒng)計(jì)匯總。

⑥布置次日工作，指導(dǎo)督促員工做當(dāng)日工作總計(jì)及次日工作安排。⑦督促各業(yè)務(wù)員的專(zhuān)業(yè)化程度，根據(jù)時(shí)間適當(dāng)安排培訓(xùn)學(xué)習(xí)計(jì)劃。⑧每周匯總《任務(wù)實(shí)時(shí)收客表》《任務(wù)實(shí)時(shí)收客表 營(yíng)業(yè)額》，并上 交主管副總。

四、周五工作安排：

早上拜訪5+。下午進(jìn)行本周工作總結(jié)（附《個(gè)人周總結(jié)表》），部門(mén)會(huì)議分析、解決本周工作中間存在的問(wèn)題安排部署下周的工作方向、下達(dá)各自任務(wù)量。匯總本周收客情況，機(jī)票數(shù)據(jù)及收欠款等。

主管做部門(mén)工作總結(jié)（附《部門(mén)周總結(jié)表》），上交《集團(tuán)公司實(shí)

時(shí)收客表 營(yíng)業(yè)額》給公司。

五、業(yè)務(wù)員將采集回來(lái)的客戶需要實(shí)時(shí)的反饋給部門(mén)負(fù)責(zé)人，部門(mén)每周匯

總一次給計(jì)調(diào)部，便于做新產(chǎn)品的研發(fā)和產(chǎn)品升級(jí)。

六、每天基礎(chǔ)性的專(zhuān)業(yè)知識(shí)、新產(chǎn)品的學(xué)習(xí)。

七、每天早中晚按時(shí)簽到簽退四次，外出業(yè)務(wù)需在前臺(tái)外出登記表登記并打卡，特殊情況需要提前或推后的，需提前給主管領(lǐng)導(dǎo)申請(qǐng)。如需第二天

早上直接去拜訪客戶時(shí)，需前一天下午提前申請(qǐng)，主管領(lǐng)導(dǎo)檢查此員工次日工作安排后放行。

八、關(guān)注行業(yè)新聞，媒體報(bào)道，了解行業(yè)趨勢(shì)，資格認(rèn)證，培訓(xùn)視頻等，銷(xiāo)售技能技巧的提升等相關(guān)知識(shí)。

各部門(mén)配合需求細(xì)節(jié)

1、計(jì)調(diào)部必須嚴(yán)格按照業(yè)務(wù)反饋回來(lái)的客戶要求進(jìn)行安排和行程標(biāo)準(zhǔn)操作，保質(zhì)保量。

此文件要求內(nèi)容作為月度之星及之星的考核打分依據(jù)。

此文件要求內(nèi)容作為本考核及打分制度的依據(jù)

第五篇：病理科操作常規(guī)

醫(yī)技科室操作常規(guī)

病理科操作常規(guī)

第一章 病理學(xué)檢查常規(guī)

第一節(jié) 普通活體組織病理學(xué)檢查常規(guī)

一、申請(qǐng)單和標(biāo)本的驗(yàn)收

（一）病理科應(yīng)有專(zhuān)人驗(yàn)收普通活體組織病理學(xué)檢查（常規(guī)活檢）申請(qǐng)單和送檢的標(biāo)本。

1、同時(shí)接受同一患者的申請(qǐng)單和標(biāo)本。

2、認(rèn)真核對(duì)每例申請(qǐng)單與送檢標(biāo)本及其標(biāo)志（聯(lián)號(hào)條或其他寫(xiě)明患者姓名、送檢單位和送檢日期等的標(biāo)記）是否一致；對(duì)于送檢的微小標(biāo)本，必須認(rèn)真核對(duì)送檢容器內(nèi)或?yàn)V紙上是否確有組織及其數(shù)量。發(fā)現(xiàn)疑問(wèn)時(shí)，應(yīng)立即向送檢方提出并在申請(qǐng)單上注明情況。

3、認(rèn)真檢查標(biāo)本的標(biāo)志是否牢附于放置標(biāo)本的容器上。

4、認(rèn)真查閱申請(qǐng)單的各項(xiàng)目是否填寫(xiě)清楚，包括：

（1）患者基本情況［姓名、性別、年齡、送檢單位（醫(yī)院、科室）、床位、門(mén)診號(hào)／住院號(hào)、送檢日期、取材部位、標(biāo)本數(shù)量等」；

（2）患者臨床情況［病史（癥狀和體征）、化驗(yàn)／影像學(xué)檢查結(jié)果、手術(shù)（包括內(nèi)鏡檢查）所見(jiàn)、既往病理學(xué)檢查情況（包括原病理號(hào)和診斷）和臨床診斷等]。

5、在申請(qǐng)單上詳細(xì)記錄患者或患方有關(guān)人員的明確地址、郵編及電話號(hào)碼，以便必要時(shí)進(jìn)行聯(lián)絡(luò)，并有助于隨訪患者。

（二）驗(yàn)收標(biāo)本人員不得對(duì)申請(qǐng)單中由臨床醫(yī)師填寫(xiě)的各項(xiàng)內(nèi)容進(jìn)行改動(dòng)。

（三）下列情況的申請(qǐng)單和標(biāo)本不予接收。

1、申請(qǐng)單與相關(guān)標(biāo)本未同時(shí)送達(dá)病理科。

2、申請(qǐng)單中填寫(xiě)的內(nèi)容與送檢標(biāo)本不符合。

3、標(biāo)本上無(wú)有關(guān)患者姓名、科室等標(biāo)志。

4、申請(qǐng)單內(nèi)填寫(xiě)的字跡潦草不清。

5、申請(qǐng)單中漏填重要項(xiàng)目。

6、標(biāo)本嚴(yán)重自溶、腐敗。干涸等。

7、標(biāo)本過(guò)小，不能或難以制做切片。

8、其他可能影響病理檢查可行性和診斷準(zhǔn)確性的情況。病理科不能接收的申請(qǐng)單和標(biāo)本一律當(dāng)即退回，不予存放。

（四）臨床醫(yī)師采取的標(biāo)本應(yīng)盡快置放于盛有固定液（４％中性甲醛，即１０％中性福爾馬林）的容器內(nèi)，固定液至少為標(biāo)本體積的５倍。對(duì)于需要做特殊項(xiàng)目檢查（如微生物、電鏡、兔疫組織化學(xué)、分子生物學(xué)等）的標(biāo)本，應(yīng)按相關(guān)的技術(shù)要求進(jìn)行固定或預(yù)處理。

（五）病理醫(yī)師只對(duì)病理科實(shí)際驗(yàn)收標(biāo)本的病理學(xué)診斷負(fù)責(zé)。

（六）病理科應(yīng)建立與送檢方交接申請(qǐng)單和標(biāo)本的手續(xù)制度。具體交接方法由各醫(yī)院病理科自行制定。

二、申請(qǐng)單和標(biāo)本的編號(hào)、登記

（一）病理科驗(yàn)收人員應(yīng)在已驗(yàn)收的申請(qǐng)單上注明驗(yàn)收日期，及時(shí)、準(zhǔn)確編號(hào)（病理號(hào)），并逐項(xiàng)錄入活檢標(biāo)本登記簿或計(jì)算機(jī)內(nèi)。嚴(yán)防病理號(hào)的錯(cuò)編、錯(cuò)登。

（二）標(biāo)本的病理號(hào)可按年編序，或連續(xù)性（不分）編序。

（三）同一病例同一次的申請(qǐng)單、活檢標(biāo)本登記簿（包括計(jì)算機(jī)錄入）、放置標(biāo)本的容器、組織的石蠟包埋塊（簡(jiǎn)稱(chēng)蠟塊）及其切片等的病理號(hào)必須完全一致。

（四）病理科應(yīng)建立驗(yàn)收人員與組織取材人員之間申請(qǐng)單和標(biāo)本的交接制度。

（五）在病理科內(nèi)移送標(biāo)本時(shí)，必須確保安全，嚴(yán)防放置標(biāo)本的容器傾覆、破損和標(biāo)本的散亂、缺失等。

三、標(biāo)本的預(yù)處理

標(biāo)本驗(yàn)收人員對(duì)已驗(yàn)收的標(biāo)本酌情更換適宜的容器，補(bǔ)充足量的固定液。對(duì)于體積大的標(biāo)本，值班取材的病理醫(yī)師在不影響主要病灶定位的情況下，及時(shí)、規(guī)范地予以剖開(kāi)，以便充分固定。

四、標(biāo)本的巨檢、組織學(xué)取材和記錄

（一）對(duì)于核驗(yàn)無(wú)誤的標(biāo)本，應(yīng)按照下列程序進(jìn)行操作：

1、肉眼檢查標(biāo)本（巨檢）；

2、切取組織塊（簡(jiǎn)稱(chēng)取材）；

3、將巨檢和取材情況記錄于活檢記錄單上（活檢記錄單印于活檢申請(qǐng)單的背面）。

（二）巨檢和取材的技術(shù)操作：

1、巨檢和取材必須由病理醫(yī)師進(jìn)行，應(yīng)配備人員負(fù)責(zé)記錄。

2、巨檢和取材過(guò)程中，應(yīng)嚴(yán)防污染工作人員和周?chē)h(huán)境。

3、標(biāo)本一般應(yīng)經(jīng)適當(dāng)固定后再行取材。已知具有傳染性（例如結(jié)核病、病毒性肝炎等）的標(biāo)本，應(yīng)在不污染環(huán)境和（或）不擴(kuò)散傳染的原則下，經(jīng)必要的初步巨檢或切開(kāi)后，立即置于盛有足量固定液的專(zhuān)用容器內(nèi)，充分固定后再行常規(guī)巨檢和取材。

4、病理醫(yī)師在對(duì)每例標(biāo)本進(jìn)行巨檢和取材前，應(yīng)與記錄人員認(rèn)真核對(duì)該例標(biāo)本及其標(biāo)志與申請(qǐng)單的相關(guān)內(nèi)容是否一致。若對(duì)申請(qǐng)單填寫(xiě)的內(nèi)容和（或）標(biāo)本有疑問(wèn)（例如患者姓名有誤，標(biāo)本內(nèi)容、數(shù)量、病變特征與申請(qǐng)單填寫(xiě)的情況不符等），應(yīng)暫行擱置，盡快與送檢方聯(lián)系，查明原因，確保無(wú)誤后，再行巨檢和取材。必要時(shí)，可邀請(qǐng)有關(guān)臨床醫(yī)師共同檢查標(biāo)本和取材。對(duì)于有疑問(wèn)的標(biāo)本，在消除疑問(wèn)前不得進(jìn)行巨檢和取材，應(yīng)將有關(guān)標(biāo)本連同其申請(qǐng)單一并暫時(shí)妥為保存。

5、病理醫(yī)師進(jìn)行巨檢和取材時(shí)，記錄人員應(yīng)根據(jù)病理申請(qǐng)單內(nèi)容，向巨檢醫(yī)師報(bào)告患者的基本臨床情況、手術(shù)所見(jiàn)、標(biāo)本情況（采取部位、數(shù)量等）和送檢醫(yī)師的特殊要求等，并如實(shí)、清楚地將病理醫(yī)師的口頭描述記錄于活檢記錄單上。必要時(shí)，應(yīng)在活檢記錄單上（或另附紙）繪簡(jiǎn)圖顯示巨檢所見(jiàn)和標(biāo)示取材部位。取材者應(yīng)核對(duì)記錄內(nèi)容。

6、具有醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)價(jià)值的標(biāo)本可攝影存檔，并酌情妥為保存。

7、病理科宜積極推行巨檢和取材的錄音記錄。每次巨檢和取材結(jié)束后，應(yīng)由專(zhuān)人立即對(duì)錄音內(nèi)容進(jìn)行文字整理，記錄于活檢記錄單上（手錄或用計(jì)算機(jī)錄入、打印）。有關(guān)的錄音資料應(yīng)保存至病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)發(fā)出后兩周。

8、細(xì)小標(biāo)本取材時(shí)，可用伊紅點(diǎn)染并用軟薄紙妥善包裹。

9、每例標(biāo)本取材前、后，應(yīng)用流水徹底清洗取材臺(tái)面和所有相關(guān)器物，嚴(yán)防檢材被無(wú)關(guān)組織或其他異物污染，嚴(yán)防細(xì)小檢材被流水沖失。

10、巨檢和取材必須按照本規(guī)范的要求進(jìn)行操作（參見(jiàn)第３章第四節(jié)）。對(duì)于由不同部位或不同病變區(qū)域切取的組織塊，應(yīng)在其病理號(hào)之后再加編次級(jí)號(hào)（例如：一１，一２，一３，??；Ａ，Ｂ，C，??）。

11、巨檢者、取材者和記錄人員應(yīng)相互配合、核查，確保所取組織塊及其編號(hào)標(biāo)簽準(zhǔn)確地置人用于脫水的容器（脫水盒等）內(nèi)。

12、標(biāo)本巨檢和取材后剩余的組織、器官應(yīng)置人適當(dāng)容器內(nèi)，添加適量州中性甲醛并附有相關(guān)病理號(hào)和患者姓名等標(biāo)志，然后按取材日期有序地妥善保存。取材剩余的標(biāo)本一般保存至病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)發(fā)出后兩周。

13、病理醫(yī)師在每批標(biāo)本巨檢和取材后，應(yīng)與記錄人員共同核對(duì)取材內(nèi)容，并在活檢記錄單、取材工作單上簽名和簽署日期。

14、取材后剩余的病理標(biāo)本屬于污染源，應(yīng)遵照有關(guān)規(guī)定處理。

15、巨檢和取材醫(yī)師或記錄人員與制片的技術(shù)人員應(yīng)認(rèn)真辦理所取檢材、活檢申請(qǐng)單／記錄單和取材工作單等的交接手續(xù)。具體交接方法由各醫(yī)院病理科自行制定。

五、組織切片制備的基本要求

（一）組織制片過(guò)程中，應(yīng)確保切片號(hào)與蠟塊號(hào)一致。

（二）制片工作一般應(yīng)在取材后２個(gè)工作日內(nèi)完成（不含需要脫鈣、脫脂等特殊處理的標(biāo)本）。

（三）制片完成后，技術(shù)人員應(yīng)檢查制片質(zhì)量，并加貼標(biāo)有本病理科病理號(hào)的標(biāo)簽。常規(guī)石蠟包埋一ＨＥ染色片的優(yōu)良率（甲、乙級(jí)切片所占的比例≥９０％，優(yōu)級(jí)率（甲級(jí)切片所占的比例）≥３５％。不合格切片應(yīng)立即重做。切片質(zhì)量的基本標(biāo)準(zhǔn)參見(jiàn)表2－1。

表2－1 常規(guī)石蠟包埋一ＨＥ染色切片質(zhì)量的基本標(biāo)準(zhǔn) 優(yōu)質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)

組織切面完整，內(nèi)鏡咬檢、穿刺標(biāo)本切面數(shù)

滿分（分）

質(zhì)量缺陷減分

組織稍不完整：減1～３分；不完整：減4～10分；未達(dá)到規(guī)定面數(shù)：減５分 切片薄（３～５uｍ）厚薄均勻

切片厚（細(xì)胞重疊），影響診斷：減６～10分；厚薄不均勻：減３～５分

切片無(wú)刀痕、裂隙、顫痕 10 有刀痕、裂隙、顫痕，尚不影響診斷：減２分；有刀痕、裂隙、顫痕，影響診斷：減５分

切片平坦，無(wú)皺褶、折疊 10 有皺褶或折疊，尚不影響診斷：各減２分；有皺褶或折疊，影響診斷：各減５分

切片無(wú)污染物

無(wú)氣泡（切片與載玻片間／蓋玻片與切片、載玻片間），蓋玻片周?chē)鸁o(wú)膠液外溢,透明度好

細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)染色對(duì)比清晰 10

有污染物：減１０分

有氣泡：減３分；膠液外溢：減３分 細(xì)胞核著色灰淡或過(guò)藍(lán)：減５分；紅（細(xì)胞質(zhì)）與藍(lán)（細(xì)胞核）對(duì)比不清晰：減５分

切片無(wú)松散，裱貼位置適當(dāng) 10 切片松散：減５分；切片裱貼位置不當(dāng)：減５分

切片整潔，標(biāo)簽端正粘牢，編號(hào)清晰 10 切片不整潔：減３分；標(biāo)簽粘貼不牢：減３分；編號(hào)不清晰：減４分

合計(jì) 100

注：切片質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)：（1）甲級(jí)片：≥９０分（優(yōu)）；（2）乙級(jí)片：７５～８９分（良）；（3）丙級(jí)片：６０～７４分（基本合格）；（4）丁級(jí)片：≤５９分（不合格）

（四）制片過(guò)程發(fā)生意外情況時(shí)，有關(guān)技術(shù)人員和技術(shù)室負(fù)責(zé)人應(yīng)及時(shí)向病理科主任報(bào)告，并積極設(shè)法予以補(bǔ)救。

（五）制片完成后，技術(shù)人員應(yīng)將所制切片與其相應(yīng)的活檢申請(qǐng)單／活檢記錄單、取材工作單等進(jìn)行認(rèn)真核對(duì)，確認(rèn)無(wú)誤后，將切片連同相關(guān)的活檢申請(qǐng)單／活檢記錄單、取材工作單等一并移交給病理醫(yī)師。雙方經(jīng)核對(duì)無(wú)誤后，辦理移交簽字手續(xù)。具體交接方法由各醫(yī)院病理科自行制定。

（六）常規(guī)活檢組織切片制備技術(shù)的基本要求參見(jiàn)第３章第一節(jié)。

六、組織切片的光學(xué)顯微鏡檢查和病理學(xué)診斷

（一）初檢病理醫(yī)師

1、應(yīng)認(rèn)真閱讀申請(qǐng)單提供的各項(xiàng)資料，必要時(shí)（尤其是疑難病例），應(yīng)向有關(guān)臨床醫(yī)師了解更多的臨床信息。

2、應(yīng)認(rèn)真閱讀活檢記錄單中關(guān)于標(biāo)本巨檢的描述。

3、應(yīng)了解患者既往病理學(xué)檢查情況（包括切片的病理學(xué)診斷和有關(guān)文字記錄），包括：（1）本病理科既往受理者，必須及時(shí)調(diào)閱相關(guān)切片等病理學(xué)檢查資料；

（2）非本病理科既往受理者，應(yīng)積極協(xié)助患者從有關(guān)病理科商借相關(guān)切片等病理學(xué)檢查資料參閱。

4、應(yīng)在活檢記錄單上簽署“醫(yī)囑”，告知技術(shù)人員進(jìn)行必要的深切片、連切片、特殊染色和其他相關(guān)技術(shù)檢測(cè)。

5、應(yīng)全面、細(xì)致地閱片，注意各種有意義的病變。

初檢的病理醫(yī)師，應(yīng)提出初診意見(jiàn)，送交主檢病理醫(yī)師復(fù)查。

（二）主檢病理醫(yī)師

1、主檢病理醫(yī)師對(duì)難以明確診斷的病例要做進(jìn)一步的處理。

（1）必要時(shí)親自觀察標(biāo)本，補(bǔ)充或訂正病變描述，指導(dǎo)或親自補(bǔ)取組織塊。（2）提請(qǐng)科內(nèi)上級(jí)醫(yī)師會(huì)診或進(jìn)行科內(nèi)讀片討論（會(huì)診）。（3）與有關(guān)臨床醫(yī)師進(jìn)行臨床-病理會(huì)診。

（4）必要時(shí)約見(jiàn)患者（尤其門(mén)診患者）或患者親屬（或其他患方相關(guān)人員），了解病情，說(shuō)明病理學(xué)診斷的疑難情況和延期簽發(fā)病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)的原因等。

（5）于簽發(fā)病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)前進(jìn)行科外病理會(huì)診（診斷報(bào)告前病理會(huì)診），應(yīng)將各方面會(huì)診意見(jiàn)的原件（或復(fù)印件）作為檔案資料貼附于有關(guān)患者的活檢記錄單中備查。

（6）必要時(shí)，建議臨床醫(yī)師重復(fù)活檢，或密切隨查。

2、主檢病理醫(yī)師根據(jù)常規(guī)切片的鏡下觀察，結(jié)合標(biāo)本巨檢、相關(guān)技術(shù)檢查結(jié)果、有關(guān)臨床資料和參考病理會(huì)診意見(jiàn)等，做出病理學(xué)診斷或提出病理學(xué)診斷意見(jiàn)（意向），清楚地書(shū)寫(xiě)于活檢記錄單的有關(guān)欄目中，并親筆簽名。各方會(huì)診意見(jiàn)不

一、難以明確診斷時(shí)，主檢醫(yī)師可參考會(huì)診意見(jiàn)酌情診斷，或在病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)中將各方會(huì)診意見(jiàn)列出，供臨床醫(yī)師參考。

3、對(duì)打印的病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)，主檢病理醫(yī)師應(yīng)與活檢記錄單上的病理學(xué)診斷文字進(jìn)行核對(duì)，并親筆簽名（參見(jiàn)本節(jié)下文“

八、病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)及其簽發(fā)”）。

七、相關(guān)診斷技術(shù)的選用

病理醫(yī)師可借助于組織化學(xué)染色（包括特殊染色）、免疫組織化學(xué)染色、電子顯微鏡技術(shù)、分子生物學(xué)技術(shù)、流式細(xì)胞技術(shù)等相關(guān)診斷技術(shù)檢查提供的佐證，對(duì)某些病例（尤其是疑難病例）進(jìn)行病理學(xué)診斷（具體內(nèi)容參見(jiàn)第４章）。

八、病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)及其簽發(fā)

（一）病理學(xué)診斷表述的基本類(lèi)型

Ｉ類(lèi)：檢材部位、疾病名稱(chēng)、病變性質(zhì)明確和基本明確的病理學(xué)診斷。

Ⅱ類(lèi)：不能完全肯定疾病名稱(chēng)、病變性質(zhì)，或是對(duì)于擬診的疾病名稱(chēng)、病變性質(zhì)有所保留的病理學(xué)診斷意向，可在擬診疾病／病變名稱(chēng)之前冠以諸如病變“符合為”、“考慮為”、“傾向?yàn)椤薄ⅰ疤崾緸椤薄ⅰ翱赡転椤薄ⅰ耙蔀椤薄ⅰ安荒芘懦ǔ猓敝?lèi)的詞語(yǔ)。

Ⅲ類(lèi)：檢材切片所顯示的病變不足以診斷為某種疾病（即不能做出Ⅰ類(lèi)或Ⅱ類(lèi)病理學(xué)診斷），只能進(jìn)行病變的形態(tài)描述。

Ⅳ類(lèi)：送檢標(biāo)本因過(guò)于細(xì)小、破碎、固定不當(dāng)、自溶、嚴(yán)重受擠壓（變形）、被燒灼、干涸等，無(wú)法做出病理學(xué)診斷。

（二）病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)的基本內(nèi)容

1、患者的基本情況，包括病理號(hào)、姓名、性別、年齡、送檢醫(yī)院或科室（住院或門(mén)診）、住院號(hào)或門(mén)診號(hào)、送檢和收驗(yàn)日期等。

2、巨檢病變和鏡下病變要點(diǎn)描述（一般性病變和細(xì)小標(biāo)本可酌情簡(jiǎn)述或省略）。

3、與病理學(xué)診斷相關(guān)技術(shù)的檢查結(jié)果。

4、病理學(xué)診斷的表述，參見(jiàn)上文“

（一）病理學(xué)診斷表述的基本類(lèi)型”。

5、對(duì)于疑難病例或做出Ⅱ、Ⅲ類(lèi)病理學(xué)診斷的病例，可酌情就病理學(xué)診斷及其相關(guān)問(wèn)題附加：（1）建議（例如進(jìn)行其他有關(guān)檢查、再做活檢、科外病理學(xué)會(huì)診、密切隨診或隨訪等）；（2）注釋和（或）討論。

6、經(jīng)過(guò)本病理科和（或）科外病理會(huì)診的病例，可將各方病理會(huì)診意見(jiàn)列于該例患者的病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)中。

（三）病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)的書(shū)寫(xiě)要求

1、病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)的文字表述力求嚴(yán)謹(jǐn)、恰當(dāng)、精練，條理和層次清楚。

2、病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)應(yīng)為一式二份，一份交予送檢方，另一份隨同患者的病理學(xué)檢查申請(qǐng)單和病理學(xué)檢查記錄單一并存檔。主檢病理醫(yī)師必須在每一份病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)上簽名，不能以個(gè)人印章代替簽名，不能由他人代為簽名。主檢病理醫(yī)師簽名的字跡應(yīng)能辨認(rèn)。

3、手書(shū)的病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)必須二聯(lián)復(fù)寫(xiě)，必須文字規(guī)范、字跡清楚，不得潦草、涂改。

4、手書(shū)和計(jì)算機(jī)打印的病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)中的關(guān)鍵性文字，例如“癌”、“瘤”、“陽(yáng)性”、“陰性”和數(shù)字等，要認(rèn)真核對(duì)，不得有誤。

5、計(jì)算機(jī)打印的圖文病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)提供的病變圖像要準(zhǔn)確，具有典型（代表）性，放大倍數(shù)適當(dāng)。

6、患者的基本情況項(xiàng)目必須嚴(yán)格按照送檢臨床醫(yī)師填寫(xiě)的文字抄寫(xiě)或用計(jì)算機(jī)輸錄于病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)中，并認(rèn)真核查無(wú)誤，簽發(fā)報(bào)告書(shū)的病理醫(yī)師和病理科的其他人員都不得改動(dòng)。

7、病理醫(yī)師不得簽發(fā)虛假的病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)，不得向臨床醫(yī)師和患方人員提供有病理醫(yī)師簽名的空白病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)。

（四）病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)的發(fā)送

1、病理科自接受送檢標(biāo)本至簽發(fā)該例病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)的時(shí)間，一般情況下為５個(gè)工作日以內(nèi)。

2、由于某些原因（包括深切片、補(bǔ)取材制片、特殊染色、免疫組織化學(xué)染色、脫鈣、疑難病例會(huì)診或傳染性標(biāo)本延長(zhǎng)固定時(shí)間等）延遲取材、制片，或是進(jìn)行其他相關(guān)技術(shù)檢測(cè)，不能如期簽發(fā)病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)時(shí)，應(yīng)以口頭或書(shū)面形式告知有關(guān)臨床醫(yī)師或患方，說(shuō)明遲發(fā)病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)的原因。

3、病理科應(yīng)有專(zhuān)人發(fā)送病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)。住院患者的病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)應(yīng)發(fā)送至有關(guān)臨床科室。病理科所在醫(yī)院門(mén)診患者和院外患者病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)的發(fā)送方法，由各醫(yī)院病理科自行制定。

4、病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)的經(jīng)收人員（包括患方人員）必須履行簽收手續(xù)。

5、病理科已發(fā)出的病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)被遺失時(shí)，一般不予補(bǔ)發(fā)；必要時(shí)，經(jīng)病理科主任同意可以抄件形式補(bǔ)發(fā)。

九、資料管理

普通活體組織病理學(xué)檢查的資料必須妥善管理，有關(guān)規(guī)定參見(jiàn)本章第五節(jié)。

十、會(huì)診

病理學(xué)會(huì)診是普通活體組織病理學(xué)診斷過(guò)程的重要環(huán)節(jié)，有關(guān)規(guī)定參見(jiàn)本章第六節(jié)。

第二節(jié) 手術(shù)中快速活體組織病理學(xué)檢查常規(guī)

一、概述

（一）手術(shù)中快速活體組織病理學(xué)檢查（簡(jiǎn)稱(chēng)快速活檢）是臨床醫(yī)師在實(shí)施手術(shù)過(guò)程中，就與手術(shù)方案有關(guān)的疾病診斷問(wèn)題請(qǐng)求病理醫(yī)師快速進(jìn)行的緊急會(huì)診，尤其需要臨床醫(yī)師與病理醫(yī)師間的密切合作。

（二）快速活檢要求病理醫(yī)師在很短時(shí)間內(nèi)，根據(jù)對(duì)切除標(biāo)本的巨檢和組織塊快速冷凍切片（或快速石蠟切片）的觀察，向手術(shù)醫(yī)師提供的參考性病理學(xué)診斷意見(jiàn)。

與常規(guī)石蠟切片的病理學(xué)診斷相比，快速活檢會(huì)診具有更多的局限性和誤診的可能性。有的病例難以快速診斷，需要等待常規(guī)石蠟切片進(jìn)一步明確診斷。因此，應(yīng)向臨床醫(yī)師說(shuō)明快速活檢的：（1）局限性；（2）適用范圍；（3）慎用范圍；（4）不宜應(yīng)用范圍。

（三）有關(guān)臨床醫(yī)師應(yīng)于手術(shù)前向患者和（或）患者授權(quán)人說(shuō)明快速活檢的意義和局限性等，取得患者和（或）患方的知情和理解。患者和（或）患者授權(quán)人應(yīng)在由醫(yī)院制定的《手術(shù)中快速活檢患方知情同意書(shū)》簽署意見(jiàn)和簽名。

（四）主持手術(shù)的臨床醫(yī)師應(yīng)在手術(shù)前一天向病理科遞交快速活檢申請(qǐng)單，填寫(xiě)患者的病史，重要的影像學(xué)、實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果和提請(qǐng)病理醫(yī)師特別關(guān)注的問(wèn)題等。盡可能不在手術(shù)進(jìn)行過(guò)程中臨時(shí)申請(qǐng)快速活檢。

（五）手術(shù)中快速活檢應(yīng)由經(jīng)過(guò)該項(xiàng)工作訓(xùn)練的主治醫(yī)師以上的病理醫(yī)師主持。尚不具備相應(yīng)條件的病理科不應(yīng)勉強(qiáng)開(kāi)展手術(shù)中快速活檢業(yè)務(wù)。

（六）負(fù)責(zé)快速活檢的主檢病理醫(yī)師應(yīng)了解患者的（1）臨床情況；（2）手術(shù)所見(jiàn)；（3）既往有關(guān)的病理學(xué)檢查情況。

二、適用范圍

（一）需要確定病變性質(zhì)（如腫瘤或非腫瘤、良性腫瘤或惡性腫瘤等），以決定手術(shù)方案的標(biāo)本。

（二）了解惡性腫瘤的擴(kuò)散情況，包括腫瘤是否浸潤(rùn)相鄰組織、有無(wú)區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等。

（三）確定腫瘤部位的手術(shù)切緣有無(wú)腫瘤組織殘留。

（四）確認(rèn)切除的組織，例如甲狀旁腺、輸卵管、輸精管及異位組織等。

三、慎用范圍

涉及截肢和其他嚴(yán)重致殘的根治性手術(shù)切除的標(biāo)本。需要此類(lèi)手術(shù)治療的患者，其病變性質(zhì)宜于手術(shù)前通過(guò)常規(guī)活檢確定。

四、不宜應(yīng)用范圍

（一）疑為惡性淋巴瘤。

（二）過(guò)小的標(biāo)本（檢材長(zhǎng)徑≤0.2ｃｍ者）。

（三）術(shù)前易于進(jìn)行常規(guī)活檢者。

（四）脂肪組織、骨組織和鈣化組織。

（五）需要依據(jù)核分裂象計(jì)數(shù)判斷良、惡性的軟組織腫瘤。

（六）主要根據(jù)腫瘤生物學(xué)行為特征而不能依據(jù)組織形態(tài)判斷良、惡性的腫瘤。

（七）已知具有傳染性的標(biāo)本（例如結(jié)核病、病毒性肝炎、艾滋病等）。

五、申請(qǐng)單和標(biāo)本的驗(yàn)收、編號(hào)和登記

手術(shù)中快速活體組織病理學(xué)檢查申請(qǐng)單和標(biāo)本的驗(yàn)收、編號(hào)和登記參見(jiàn)本章第一節(jié)中“

一、”至“

三、”項(xiàng)的有關(guān)規(guī)定。

六、標(biāo)本的巨檢、取材和記錄

（一）病理科驗(yàn)收快速活檢申請(qǐng)單和標(biāo)本后，應(yīng)參照本章第一節(jié)中“

四、”項(xiàng)的有關(guān)規(guī)定，立即進(jìn)行標(biāo)本的巨檢、取材和記錄。

（二）主持快速活檢的病理醫(yī)師應(yīng)親自參與標(biāo)本的巨檢和取材（或指導(dǎo)取材）。

（三）通常選取具有代表性的病變組織1或２塊，需要時(shí)，增加取材塊數(shù)。

七、組織切片的制備

（一）冷凍切片

1、完成冷凍ＨＥ染色切片制備的時(shí)間通常為２０～２５min。

2、恒冷箱切片機(jī)制片：至少應(yīng)于切片前ｌｈ開(kāi)機(jī)預(yù)冷，冷室溫度一般為-15～-20℃。常規(guī)開(kāi)展冷凍切片快速病理學(xué)診斷的病理科，恒冷箱切片機(jī)宜處于24ｈ恒溫待機(jī)狀態(tài)。

3、其他方法的冷凍切片制備參見(jiàn)第３章第一節(jié)。

（二）快速石蠟切片

1、完成快速石蠟-ＨＥ染色切片的時(shí)間通常為30min。

2、快速石蠟切片的制備方法參見(jiàn)第３章第一節(jié)。

制備好的冷凍或快速石蠟-ＨＥ染色切片，加貼標(biāo)有本病理科病理號(hào)的標(biāo)簽后，立即交由主檢病理醫(yī)師進(jìn)行診斷。

八、手術(shù)中快速活檢會(huì)診意見(jiàn)及其簽發(fā)

（一）有條件的病理科宜由兩位具有中、高級(jí)職稱(chēng)的病理醫(yī)師共同簽署快速活檢的病理學(xué)診斷意見(jiàn)。對(duì)于病變疑難、手術(shù)切除范圍廣泛和會(huì)嚴(yán)重致殘的手術(shù)中快速活檢，應(yīng)由兩位具有高級(jí)職稱(chēng)的病理醫(yī)師共同簽署會(huì)診意見(jiàn)。主檢病理醫(yī)師簽名的字跡應(yīng)能辨認(rèn)。

（二）快速活檢診斷意見(jiàn)一般在收到送檢標(biāo)本后40min內(nèi)發(fā)出；同一時(shí)間段內(nèi)相繼收到的多例患者標(biāo)本或是同一例患者的多次標(biāo)本，其發(fā)出報(bào)告的時(shí)間依次類(lèi)推。對(duì)于疑難病變，可酌情延時(shí)報(bào)告。

（三）對(duì)于難以即時(shí)快速診斷的病變（例如病變不典型、交界性腫瘤病變或送檢組織不足以明確診斷等），主檢病理醫(yī)師應(yīng)向手術(shù)醫(yī)師說(shuō)明情況，恰如其分地簽發(fā)病理學(xué)診斷意見(jiàn)或告知需要等待常規(guī)石蠟切片進(jìn)一步明確病理學(xué)診斷。

（四）主檢病理醫(yī)師簽署的快速活檢病理學(xué)診斷意見(jiàn)，宜以文字形式報(bào)告（具體發(fā)出方式由各醫(yī)院自行決定）。快速活檢病理學(xué)診斷意見(jiàn)報(bào)告書(shū)發(fā)出前應(yīng)認(rèn)真核對(duì)無(wú)誤。

九、冷凍切片后剩余組織的處理

（一）冷凍切片后剩余的冷凍組織（簡(jiǎn)稱(chēng)“凍對(duì)”）和冷凍切片取材后剩余、未曾冷凍的組織（簡(jiǎn)稱(chēng)“凍剩”），均應(yīng)保存，用以制備常規(guī)石蠟切片，以便與冷凍切片進(jìn)行對(duì)照觀察。

（二）“凍對(duì)”、“凍剩”組織的蠟塊和切片須與同一病例手術(shù)后送檢的切除標(biāo)本編為同一病理號(hào)，并做出綜合性診斷。

（三）當(dāng)冷凍切片病理學(xué)診斷意見(jiàn)與其“凍對(duì)”組織的常規(guī)石蠟-HE片的病理學(xué)診斷不一致時(shí)，該例的病理學(xué)診斷一般應(yīng)以石蠟-HE片診斷為準(zhǔn)。

十、資料管理

手術(shù)中快速活體組織病理學(xué)檢查的資料必須妥善管理，有關(guān)規(guī)定參見(jiàn)本章第五節(jié)。

第二章 病理學(xué)基本技術(shù)操作

第一節(jié) 病理組織學(xué)診斷檢材的制備技術(shù)

一、組織的固定

（一）凡需要進(jìn)行病理組織學(xué)檢查的標(biāo)本（器官或組織），離體（活體或尸體）后，應(yīng)盡快置放（浸泡）于裝有足夠量固定液的容器中固定。固定液量應(yīng)為被固定標(biāo)本體積的５～１０倍。置放標(biāo)本的容器大小視標(biāo)本和固定液的體積而定，應(yīng)適當(dāng)大一些。臨床科室切取的標(biāo)本置放于容器中固定后，應(yīng)盡快送交病理科繼續(xù)固定。未能及時(shí)、充分固定的干涸或腐敗標(biāo)本不能再進(jìn)行固定和用于制作切片。

（二）常規(guī)固定液為４％中性甲醛（10％中性福爾馬林）。應(yīng)預(yù)先多量配制貯存，以備隨時(shí)使用。小標(biāo)本的固定時(shí)間為4～6ｈ，大標(biāo)本為18～24ｈ或更久。

（三）根據(jù)病理學(xué)特殊檢查（特殊染色和組織化學(xué)染色、免疫組織化學(xué)染色和原位核酸分子雜交染色、電鏡觀察等）的需要，應(yīng)選用其他適宜的固定液進(jìn)行固定。[參見(jiàn)后文“

（七）常用固定液。”]

（四）器官、組織固定的基本方法可參見(jiàn)本章第四節(jié)“病理標(biāo)本的肉眼檢查和組織學(xué)切片取材技術(shù)”。

1、管、胃、腸、膽囊、膀胱等空腔器官：依規(guī)范方法剪開(kāi)后，按其自然狀態(tài)平鋪于硬紙板上（重點(diǎn)暴露黏膜面或內(nèi)表面的病變處），并用大頭針將標(biāo)本邊緣處固定于紙板上，然后放人４％中性甲醛中固定（黏膜面或內(nèi)表面朝向容器的液面，并覆蓋薄層脫脂棉）。

2、肝、脾：由器官背面，沿其長(zhǎng)軸每間隔1.5～2.0ｃｍ縱向平行剖開(kāi)，切成數(shù)片。將每片肝或脾輕輕地平放于裝有4％中性甲醛的容器中，容器底面襯以脫脂棉。應(yīng)避免標(biāo)本彎曲和相互間的疊壓。

3、肺葉：放人固定液中的肺葉漂浮于液面，須在肺表面覆蓋浸含固定液的薄層脫脂棉。必要時(shí)從支氣管注人適量4％中性甲醛。

4、腎：沿腎外緣中線朝腎門(mén)方向做一水平切面（深達(dá)于腎盞），再行固定。

5、淋巴結(jié)：先用4％中性甲醛固定ｌｈ后，再沿其長(zhǎng)軸切開(kāi)（腫大的淋巴結(jié)可切成數(shù)片，厚2～3ｍｍ），繼續(xù)固定。

6、骨組織：先鋸成小片（若是長(zhǎng)骨應(yīng)做橫向鋸片），在4％中性甲醛中固定24ｈ后，再進(jìn)行脫鈣。

7、微小組織或液體沉淀物：先用拭紙或?yàn)V紙妥為包裹（須用大頭針扎牢），然后放入專(zhuān)用小盒內(nèi)進(jìn)行4％中性甲醛固定，以防檢材遺失。凡進(jìn)入固定程序的標(biāo)本必須連帶其正確無(wú)誤的病理檢驗(yàn)號(hào)（病理號(hào)）。

（五）多數(shù)固定液對(duì)人體有害，需要防護(hù)，必須在封閉的通風(fēng)條件下進(jìn)行操作。

（六）組織塊的切取和固定。

1、由較大標(biāo)本切取用于制作切片的組織塊（取材）時(shí)，應(yīng)與標(biāo)本的斷面平行，組織塊厚度一般為0.3cm（不應(yīng)＞0.5cm），面積一般在（1～1.5）cm×（1～1.5）cm。

2、切取組織塊的形狀，在充分包括肉眼所見(jiàn)病變的前提下盡量規(guī)則些（例如方形、矩形、三角形等）；由一個(gè)標(biāo)本切取的多塊組織的形狀有所不同，便于蠟塊與其相應(yīng)切片的核對(duì)。

3、固定組織塊的固定液量，一般應(yīng)為組織塊總體積的5～10倍以上。

4、室內(nèi)常溫（25℃左右）下的固定時(shí)間為3～24ｈ；低溫（4℃）下的固定時(shí)間應(yīng)延長(zhǎng)。

5、固定組織塊的容器要大一些。

6、組織塊固定期間需要間斷地輕搖或攪動(dòng)固定液以利于固定液的滲入。

（七）常用固定液。1、4％中性甲醛（10％中性福爾馬林）固定液： 甲醛（40％）100ｍｌ 無(wú)水磷酸氫二鈉6.5ｇ 磷酸二氫鈉4.0ｇ 蒸餾水900ｍｌ

2、乙醇-甲醛（酒精-福爾馬林，AF）固定液： 甲醛（40％）100ｍｌ 95％乙醇900ｍｌ

[說(shuō)明]一般組織塊經(jīng)乙醇-甲醛固定１～2ｈ后，即可移入95％乙醇內(nèi)脫水。

3、Carnoy固定液： 無(wú)水乙醇 60ｍｌ 氯仿 30ｍｌ 冰醋酸 10ｍｌ

[說(shuō)明]本液是組織化學(xué)染色的常用固定液，組織經(jīng)Carnoy液固定1～2ｈ后，即可移入95％乙醇中脫水。

二、常規(guī)石蠟包埋組織切片（常規(guī)切片）的制備

（一）制備程序

1、水洗。

2、脫水。

3、透明。

4、浸蠟。

5、包埋。

6、切片。

（二）注意事項(xiàng)

組織切片制備及其HＥ染色過(guò)程中使用的乙醇、丙酮、二甲苯、石蠟等為易燃、有毒物，必須專(zhuān)人管理，2ｍ以內(nèi)不得有明火，局部環(huán)境應(yīng)有良好的通風(fēng)和消防設(shè)施。

（三）常規(guī)切片的手工操作

1、水洗 用流水沖洗已經(jīng)固定的組織塊30min。

2、脫水（常溫下）

（1）乙醇-甲醛（AF）液固定：60～120min。（2）乙醇-甲醛（AF）液固定：60～120min。（3）80％乙醇：60 min。（4）95％乙醇Ⅰ：60 min。（5）95％乙醇Ⅱ：60 min。（6）無(wú)水乙醇Ⅰ：60 min。（7）無(wú)水乙醇Ⅱ：60 min。

3、透明

（1）正丁醇Ⅰ：30min。（2）正丁醇Ⅱ：30min。4.浸蠟；

（1）石蠟Ⅰ：（52-54℃）60min。（2）石蠟Ⅱ：（52-56℃）60min。（3）石蠟Ⅲ：（52-56℃）60min。

注意事項(xiàng)：（1）用熔化石蠟必須有專(zhuān)人負(fù)責(zé)，必須在熔蠟箱內(nèi)或水浴中（70℃）進(jìn)行，不得用明火加溫；（2）熔蠟的容積應(yīng)為組織塊總體積的5～10倍以上；（3）組織塊經(jīng)二甲苯適度透明后方可轉(zhuǎn)人浸蠟過(guò)程，應(yīng)盡可能減少將透明后組織塊表面的二甲苯帶入熔蠟中；（4）浸蠟時(shí)間適宜，過(guò)短時(shí)浸蠟不充分（組織過(guò)軟），過(guò)長(zhǎng)時(shí)組織硬脆；（5）熔蠟應(yīng)及時(shí)過(guò)濾、更換。

5、包埋

（1）先將熔化的石蠟傾入包埋模具中，再用加熱的彎曲鈍頭鑷子輕輕夾取已經(jīng)過(guò)浸蠟的組織塊，使組織塊的最大面或被特別指定處的組織面向下埋入熔蠟中，應(yīng)將組織塊平整地置放于包埋模具底面的中央處。包埋于同一蠟塊內(nèi)的多塊細(xì)小組織應(yīng)彼此靠近并位于同一平面上；腔壁、皮膚和黏膜組織必須垂直包埋（立埋）。

（2）將與組織塊相關(guān)的病理號(hào)小條置入包埋模具內(nèi)熔蠟的一側(cè)。（3）待包埋模具內(nèi)的熔蠟表面凝固后，即將模具移入冷水中加速凝固。

（4）從包埋模具中取出凝固的包埋蠟塊（簡(jiǎn)稱(chēng)蠟塊），用刀片去除組織塊周?chē)倪^(guò)多石蠟（組織塊周?chē)Ａ?～2ｍｍ石蠟為宜）。將包埋蠟塊修整成為規(guī)則的正方形或長(zhǎng)方形。

（5）將病理號(hào)小條牢固地烙貼在蠟塊一側(cè)（編號(hào)應(yīng)清晰可見(jiàn)）。（6）把修整好的蠟塊烙貼在支持器上，以備切片。（7）使用包埋機(jī)的方法按有關(guān)廠商的說(shuō)明書(shū)操作。（8）注意事項(xiàng)。

①應(yīng)將組織塊嚴(yán)格分件包埋。包埋時(shí)一定要首先認(rèn)真核對(duì)組織塊的病理號(hào)（包括次級(jí)號(hào)）、塊數(shù)和取材醫(yī)師對(duì)包埋面的要求，準(zhǔn)確地置入相應(yīng)的病理號(hào)小條。發(fā)生包埋差錯(cuò)時(shí)，必須立即與取材醫(yī)師和病理科當(dāng)班負(fù)責(zé)人取得聯(lián)系，及時(shí)處置。

②必須嚴(yán)防各種異物污染，勿將無(wú)關(guān)組織如縫線、紙屑或其他異物（尤其是硬質(zhì)異物）埋入蠟塊內(nèi)。

③包埋過(guò)程要操作迅速，以免組織塊尚未埋妥前熔蠟?zāi)獭?/p>

④包埋用的熔蠟應(yīng)純凈，熔點(diǎn)適宜。浸蠟工用軟蠟（熔點(diǎn)為45～50℃），浸蠟Ⅱ、Ⅲ和包埋用蠟均用硬蠟（熔點(diǎn)為56～58℃）。

⑤包埋用熔蠟使用前應(yīng)先靜置沉淀、過(guò)濾。

⑥熔蠟時(shí)不得使用明火，以防燃燒。包埋用熔蠟的溫度應(yīng)＜65℃；包埋用的鑷子不可加溫過(guò)高，以免燙傷組織。

（六）切片

1、切片刀或一次性切片刀片必須鋒利。使用切片刀時(shí)，必須精心磨備（在低倍顯微鏡下確認(rèn)刀刃無(wú)缺口）；使用一次性切片刀片時(shí)，應(yīng)及時(shí)更新。

2、載玻片必須潔凈、光亮。

3、將切片刀或刀片安裝在持刀座上（以15°為宜）。

4、將蠟塊固定于支持器上，并調(diào)整蠟塊和刀刃至適當(dāng)位置（刀刃與蠟塊表面呈5°夾角）。

5、細(xì)心移動(dòng)刀座或蠟塊支持器，使蠟塊與刀刃接觸，旋緊刀座和蠟塊支持器。

6、修塊（粗切）。用右手勻速旋轉(zhuǎn)切片機(jī)輪，修切蠟塊表面至包埋其中的組織塊完整地全部切到。修塊粗切片的厚度為15～20μｍ［注意：對(duì)于醫(yī)囑再次深切片（特別是在原切片中發(fā)現(xiàn)了有意義病變而進(jìn)行的深切片），應(yīng)盡量少修塊，以盡量好地獲得有關(guān)病變的連續(xù)性]。

7、調(diào)節(jié)切片厚度調(diào)節(jié)器（一般為4～6μｍ），進(jìn)行切片。切出的蠟片應(yīng)連續(xù)成帶狀，完整無(wú)缺，厚度適宜（4～5μｍ）、均勻，無(wú)刀痕、顫痕、皺褶、開(kāi)裂、缺損、松解等。

8、以專(zhuān)用小鑷子輕輕夾取完整、無(wú)刀痕、厚薄均勻的蠟片，放入伸展器的溫水中（45℃左右），使切片全面展開(kāi)[注意：必須水溫適宜、潔凈（尤其是水面）；每切完一個(gè)蠟塊后，必須認(rèn)真清理水面，不得遺留其他病例的組織碎片，以免污染]。

9、將蠟片附貼于涂有蛋白甘油或經(jīng)3-氨丙基-三乙氧基硅烷（3-aminopropyl-triethoxy silane，APES）處理過(guò)的載玻片上（HE染色時(shí)酌情使用，可省略）。蠟片應(yīng)置放在載玻片右（或左）2/3處的中央，留出載玻片左（或右）1/3的位置用于貼附標(biāo)簽。蠟片與載玻片之間無(wú)氣泡。

10、必須立即在置放了蠟片的載玻片一端（待貼標(biāo)簽的一端），用優(yōu)質(zhì)記號(hào)筆或刻號(hào)筆準(zhǔn)確、清楚地標(biāo)記其相應(yīng)的病理號(hào)（包括次級(jí)號(hào)兒注意：必須確保載玻片上的病理號(hào)與相關(guān)組織石蠟包埋塊的病理號(hào)完全一致，不得錯(cuò)寫(xiě)或漏寫(xiě)病理號(hào)）。

11、將置放了蠟片的載玻片呈４５°斜置片刻；待載玻片上的水分流下后，將其置于烤箱中烘烤（60～62℃，30～60min），然后即可進(jìn)行染色。

12、注意事項(xiàng)。

（1）組織塊固定、脫水、透明和浸蠟的質(zhì)量直接影響切片制備。切片過(guò)程中遇到的困難首先應(yīng)注意從切片前的上述各環(huán)節(jié)中尋找原因。

（2）切片機(jī)的質(zhì)量是制備優(yōu)質(zhì)切片的重要前提。要使用質(zhì)量好的切片機(jī)，規(guī)范地切片，精心維護(hù)切片機(jī)。

（3）經(jīng)由內(nèi)鏡、穿刺等獲取的細(xì)小組織，應(yīng)間斷性連續(xù)切片多面（一般至少制備６張蠟片，必要時(shí)制備更多張）。須做特殊染色、免疫組化染色等的病例，可預(yù)制蠟片備用。

（4）切片人員應(yīng)細(xì)心操作，防范被切片刀具割傷。

三、冷凍組織切片的制備程序

（一）應(yīng)用恒冷箱切片機(jī)制備切片

是目前最適用方法。恒冷箱切片機(jī)種類(lèi)較多，應(yīng)嚴(yán)格按有關(guān)廠商的說(shuō)明書(shū)操作。用于切片的組織塊必須未曾固定并不能沾水。

（三）注意事項(xiàng)

1、制作冷凍切片所需的試劑和設(shè)備等應(yīng)處于隨時(shí)可供使用狀態(tài)。

2、切取的組織塊大小適宜（厚度＜3ｍｍ），并盡快置于冷凍組織切片機(jī)上制備切片。

3、調(diào)節(jié)冷凍程度，試切合適時(shí)便迅速切片。冷凍不足無(wú)法切片，冷凍過(guò)度切片易碎。

4、冷凍切片固定液。

苦味酸飽和于80％酒精液 75ML 甲醛 10ML 丙酮 10ML 冰醋酸 5ML 醋酸 1G 5.冰凍切片操作程序

（1）新鮮組織冰凍切片入固定液中固定30秒中。（2）自來(lái)水洗1－2分鐘。

（3）用蘇木素置于60度下染核20—30秒。（4）自來(lái)水水洗1－2分鐘。

（5）0·5％－1％鹽酸酒精液分化1－2次（6）入弱氨水返蘭。（7）自來(lái)水洗1－2分鐘。（8）1％伊紅染液染色15秒鐘。

（9）逐級(jí)酒精脫水，二甲苯透明，中性樹(shù)膠封固。

四、脫鈣方法

骨和其他鈣化組織，通常需要脫去鈣鹽后進(jìn)行切片。骨組織脫鈣前須先行固定。

（一）常規(guī)脫鈣法

1、將骨組織鋸成薄片（約1ｃｍ×1ｃｍ×0.3ｃｍ）。

2、在ＡＦ中或州中性甲醛中固定6～12ｈ。

3、將骨片置于5％硝酸（急需時(shí)可置于37℃溫箱）中脫鈣，至用針輕刺可進(jìn)人時(shí)為止，需12～24ｈ（小塊骨組織脫鈣僅需2～3ｈ），其間可更新脫鈣液2～3次。

4、流水沖洗１～2ｈ。

5、移人5％甲明礬液，2～4h。

6、流水沖洗2～3ｈ。

7、按常規(guī)脫水。

8、石蠟包埋。

（二）電解脫鈣法

將骨片置于裝有8％硝酸和10％甲酸混合液的電泳槽（有蓋的方形玻璃標(biāo)本缸或燒杯）內(nèi)的陽(yáng)極處，6Ｖ直流電源下持續(xù)電解30 min至3ｈ，至用針輕刺可入時(shí)為止。

（三）骨髓組織脫鈣

可浸泡于苦味酸乙醇飽和液（占85％）、甲醛（占10％）和冰醋酸（占5％）的混合液中（同時(shí)進(jìn)行固定和脫鈣）。

（四）注意事項(xiàng)

1、骨片等脫鈣組織的厚度適宜。

2、脫鈣組織與脫鈣液的體積比＞1：30。

3、脫鈣過(guò)程中應(yīng)不時(shí)搖動(dòng)，多次更換脫鈣液。

4、脫鈣時(shí)間不可過(guò)長(zhǎng)。

5、微波處理可加速脫鈣過(guò)程。

6、脫鈣后的組織必須用流水充分沖洗。

7、用于包埋的石蠟硬度適中（不要過(guò)軟或過(guò)硬）。

五、蘇木精一伊紅（ＨＥ）染色

HE染色是應(yīng)用最廣泛的組織病理學(xué)常規(guī)染色技術(shù)。

（一）染色程序

1、石蠟切片 HE染色（常規(guī)HE染色）（1）松節(jié)油Ⅰ：5～10min。（2）松節(jié)油Ⅱ：5～10min。（3）水乙醇Ⅰ：1～3min。（4）無(wú)水乙醇Ⅱ：1～3min。（5）95％乙醇Ⅰ：1～3min。（6）95％乙醇Ⅱ：1～3min。（7）80％乙醇：1min。（8）蒸餾水：1min。

（9）蘇木精液染色：10～20 min。（10）流水洗去蘇木精液：1min。（11）１％鹽酸-乙醇：1～3s。（12）稍水洗：1～2s。

（13）返藍(lán)（用溫水或１％氨水等）：5～10s。（14）流水沖洗：1～2 min。（15）蒸餾水洗：1～2ｍmin（16）0.5％伊紅液染色：min。（17）蒸餾水稍洗：1～2s。（18）８０％乙醇：1～2s。（19）無(wú)水乙醇Ⅰ：3～5 min。（20）無(wú)水乙醇Ⅱ：3～5 min。（21）無(wú)水乙醇Ⅲ：3～5 min（22）中性樹(shù)膠封固。

2、冷凍切片ＨＥ染色

（1）冷凍切片固定：10～30s。（2）稍水洗：1～2Ｓ。

（3）蘇木精液染色（60℃）：30～60s。（4）流水洗去蘇木精液：5～10s。（5）１％鹽酸-乙醇：1～3Ｓ。（6）稍水洗：1～2ｍｉｎ。

（7）返藍(lán)（用溫水或1％氨水等）：5～10s。（8）流水沖洗：15～30s。（9）0.5％伊紅液染色：1～2 min。（10）蒸餾水稍洗：1～2 min。（11）80％乙醇：1～2 min。（12）95％乙醇：1～2 min。（13）無(wú)水乙醇Ⅰ：1～2 min。（14）無(wú)水乙醇Ⅱ：1～2 min。（15）石炭酸-二甲苯：2～3min。（16）二甲苯Ｉ：2～3min。（17）二甲苯Ⅱ：2～3min。（18）中性樹(shù)膠封固。

上述（7）和（8）項(xiàng)可省去，但（9）的沖水時(shí)間須延長(zhǎng)至10～15min（細(xì)胞核顯示更清晰）；(15)項(xiàng)可用無(wú)水乙醇代替，北方地區(qū)可省略。

（二）染色結(jié)果

細(xì)胞核呈藍(lán)色，細(xì)胞質(zhì)、肌纖維、膠原纖維和紅細(xì)胞呈不同程度的紅色。鈣鹽和細(xì)菌可呈藍(lán)色或紫藍(lán)色。

（三）染色注意事項(xiàng)

1、切片染色前，應(yīng)徹底脫蠟。

2、用含有升汞液體固定的組織，其切片染色前應(yīng)先脫去汞鹽。（1）石蠟切片脫蠟至水洗。（2）Ｌｕｇｏｌ碘液：20min。（3）流水沖洗：5 min。（4）95％乙醇：10min。（5）水洗：1min。

（6）5％次亞硫酸鈉水溶液：5 min。（7）流水沖洗：5min。

（8）顯微鏡觀察除汞滿意后，轉(zhuǎn)入HE染色。

3、脫除甲醛色素（必要時(shí)）。（1）石蠟切片脫蠟至水洗。

（2）１％ＮａＯＨ（ｌｍｌ）與８０％乙醇（９９ｍｌ）混合液：１０min。（3）流水沖洗：5 min。（4）轉(zhuǎn)入ＨＥ染色。

4、嚴(yán)格執(zhí)行ＨＥ染色流程，用顯微鏡控制細(xì)胞核的蘇木精染色質(zhì)量。ＨＥ染片應(yīng)著色鮮艷，紅、藍(lán)分明，對(duì)比清晰。

5、載玻片自二甲苯中取出后，應(yīng)立即用潔凈、光亮的蓋玻片和稠度適宜的中性樹(shù)膠濕封載玻片。封蓋處內(nèi)無(wú)氣泡，外無(wú)溢膠。封片時(shí)必須進(jìn)行操作人員和局部環(huán)境的二甲苯污染防護(hù)。不應(yīng)將組織切片烤干或風(fēng)干后再行封片。

6、必須在載玻片的一端牢貼標(biāo)簽。標(biāo)簽上應(yīng)印有病理科所在的醫(yī)院名稱(chēng)。標(biāo)簽上應(yīng)清楚顯示有關(guān)的病理號(hào)及其次級(jí)號(hào)；標(biāo)簽上的病理號(hào)應(yīng)準(zhǔn)確無(wú)誤，無(wú)涂改。

7、制片完成后，技術(shù)人員應(yīng)將切片與其相應(yīng)的病理學(xué)檢杏記錄單或取材工作記錄單認(rèn)真進(jìn)行核對(duì)；確認(rèn)無(wú)誤后，將制備好的切片連同相關(guān)的活檢申請(qǐng)單、活檢記錄單以及取材工作單等一并移交給有關(guān)的病理醫(yī)師；交接雙方經(jīng)核對(duì)無(wú)誤后，辦理移交簽字手續(xù)。

8、石蠟切片-ＨＥ染色的優(yōu)良率（甲、乙級(jí)切片所占的比率）應(yīng)≥90％。石蠟切片-ＨＥ染色質(zhì)量的基本標(biāo)準(zhǔn)列于表２－１。

9、制片工作一般應(yīng)在取材后２個(gè)工作日內(nèi)完成（不合進(jìn)行脫鈣、脫脂等需要特殊處理的標(biāo)本）。

10、制片過(guò)程出現(xiàn)意外情況時(shí)，技術(shù)室人員應(yīng)及時(shí)向病理醫(yī)師和病理科主任報(bào)告，設(shè)法予以補(bǔ)救。

（四）HE染色試劑的配制

1、蘇木精染液

（1）Ｈａｒｒｉ蘇木精染液： 蘇木精1ｇ 無(wú)水乙醇１０ｍｌ 硫酸鋁鉀２０ｇ 蒸餾水２００ｍｌ 氧化汞0.5ｇ 冰醋酸8ｍｌ

先用無(wú)水乙醇溶解蘇木精，用蒸餾水加熱溶解硫酸鋁鉀，然后將該兩液合并煮沸，加人氧化汞，繼續(xù)加熱和攪拌溶液至深紫色，隨即用冰水冷卻，恢復(fù)至室溫后過(guò)濾備用。使用前加人冰醋酸并混勻、過(guò)濾。

（2）Ｇｉｌｌ改良蘇木精液： 蘇木精2ｇ 無(wú)水乙醇250ｍｌ 硫酸鋁鉀17ｇ 蒸餾水750ｍｌ 碘酸鈉0.2ｇ 冰醋酸20ｍｌ

先用無(wú)水乙醇溶解蘇木精，用蒸餾水溶解硫酸鋁鉀，然后將該兩液混合，再依次加入碘酸鈉和冰醋酸。使用前過(guò)濾。

（3）Ｍａｙｅｒ改良蘇木精液： Ａ液：蘇木精2ｇ 無(wú)水乙醇40ｍｌ Ｂ液：硫酸鋁鉀100ｇ 蒸餾水 600ｍｌ

將蘇木精溶于無(wú)水乙醇中（Ａ液）；稍加熱，使硫酸鋁鉀溶于蒸餾水中出液）。將Ａ液與Ｂ液混合后煮沸2 min，再用蒸餾水補(bǔ)足至60ml，加入400mg碘化鈉充分混勻。染液呈紫紅色。

2、針吸法穿刺術(shù)操作要點(diǎn)。

（1）用手固定腫物，將安裝在空注射器上的穿刺用針頭刺人腫物，然后外拉管芯２cm。（2）迅速上下提插注射器管芯10～20次（其間變換針頭方向3～4次），遂使腫物不同部位的較多內(nèi)容吸進(jìn)人針頭和注射器內(nèi)。

（3）將注射器與針頭分離（管內(nèi)負(fù)壓因而解除）；隨后，再將該注射器與仍插于腫物內(nèi)的針頭相接，拔出針頭，穿刺結(jié)束。

（4）迅速推動(dòng)注射器的管芯，盡快地將位于穿刺針頭內(nèi)的少量吸出物排射在２～３張清潔的載玻片上，進(jìn)行涂片。

3、涂片方法。用針頭將載玻片上的吸出物輕輕均勻撥開(kāi)，或用推片法朝一個(gè)方向展開(kāi)（不可雙向往返推移）。

4、吸出物過(guò)少時(shí)，可向離心管內(nèi)沖洗穿刺針頭，再將沖洗液離心，然后取其沉淀物涂片，參見(jiàn)上文“

一、”項(xiàng)“

（五）液體涂片的制作”。

5、吸出物較多時(shí)，可用適量５０％乙醇-生理鹽水液將涂片后注射器和針頭內(nèi)剩余的吸出物沖洗至離心管中，離心后，取其沉淀物制作常規(guī)石蠟包埋切片。

6、吸出物中含有細(xì)小組織塊時(shí)，應(yīng)將其制作常規(guī)石蠟包埋切片。

7、內(nèi)臟腫物穿刺時(shí)，必須在影像學(xué)檢查的引導(dǎo)下用較長(zhǎng)細(xì)針進(jìn)行穿刺。

8、穿刺操作完成后，即在細(xì)胞病理學(xué)檢查單上書(shū)寫(xiě)穿刺記錄。

第二節(jié) 細(xì)胞學(xué)診斷檢材的制備技術(shù)

一、組織印片、壓片的制備

（一）組織印片

1、用鋒利刀片剖開(kāi)剛切取的新鮮腫瘤組織或淋巴結(jié)等，然后用清潔載玻片輕壓于組織剖面處，將組織表面的細(xì)胞成分印在玻片上。用稍微加溫的載玻片制備印片時(shí)，可印得較多細(xì)胞。

2、制作淋巴結(jié)印片前，應(yīng)先用濾紙吸去淋巴結(jié)切面上的血液、組織液。

（二）壓片

1、選取微小薄片組織平鋪于一張載玻片上，再用另一張載玻片疊加其上并予輕壓。

2、腦組織質(zhì)軟，易于制作壓片；稍硬的組織須切成細(xì)碎薄片制作壓片。

二、涂片的固定

（一）用于ＨＥ染色和巴氏染色的涂片必須濕固定，即涂片后立即進(jìn)行固定。乳頭溢液涂片和液體標(biāo)本離心沉淀物涂片，應(yīng)待涂膜潮干（即周膜稍干而其中央?yún)^(qū)域未干）時(shí)進(jìn)行固定。用于瑞氏染色、Ｍａｙ-Ｇｒüｎｗａｌｄ-姬姆薩染色和免疫細(xì)胞化學(xué)染色的涂片，必須干固定，即待涂片稍干后再進(jìn)行固定。

（二）巴氏（Ｐａｐａｎｉｃｏｌａｏｕ）染色巴氏染色時(shí)，細(xì)胞透明度好，細(xì)胞結(jié)構(gòu)清晰，色彩豐富而鮮艷，主要用于婦科細(xì)胞學(xué)涂片、痰涂片和富含鱗狀上皮細(xì)胞的涂片檢查。

1、試劑配制

（1）Ｈａｒｒｉ蘇木精液：參見(jiàn)本章第一節(jié)“

五、蘇木精-伊紅（ＨＥ）染色”。（2）鹽酸-乙醇液： 濃鹽酸1ｍｌ 70％乙醇99ｍｌ（3）橙黃Ｇ6液： 橙黃Ｇ6 0.5ｇ 蒸餾水5ｍｌ 無(wú)水乙醇95ｍｌ 磷鎢酸0.015ｇ

先將橙黃Ｇ6溶于蒸餾水中，再加人無(wú)水乙醇，然后加人磷鎢酸。（4）ＥＡ36染液： ①ＥＡ36儲(chǔ)備液

Ａ液：亮綠0.5ｇ，溶于5ｍｌ蒸餾水中，溶解后加人無(wú)水乙醇至 100ｍｌ。Ｂ液：伊紅0.5ｇ，溶于5ｍｌ蒸餾水中，溶解后加人無(wú)水乙醇至100ｍｌ。Ｃ液：俾士麥棕 0.5ｇ，溶于5ｍｌ蒸餾水中，溶解后加人無(wú)水乙醇至100ｍｌ。②ＥＡ36工作液

ＥＡ36儲(chǔ)備液的Ａ液45ｍｌ ＥＡ36儲(chǔ)備液的 Ｂ液45ｍｌ ＥＡ36儲(chǔ)備液的Ｃ液10ｍｌ 磷鎢酸0.2ｇ

碳酸鋰飽和水溶液1滴

2、染色程序

（1）將已經(jīng)固定的涂片置于80％乙醇中２min。（2）蒸餾水洗2min。

（3）蘇木精液染核10～12min，自來(lái)水洗。

（4）鹽酸-乙醇液分化約20～30s，至涂片呈淡橙紅色。（5）流水沖洗10～15min，蒸餾水洗。（6）依次用80％、95％乙醇脫水，各2 min。（7）橙黃Ｇ６液染色3～5 min。

（8）95％乙醇洗2～3次，洗去多余染液。（9）ＥＡ36工作液染色3-5 min。（10）95％乙醇洗2～3次，洗去多余染液。（11）無(wú)水乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹(shù)膠封片。

3、染色結(jié)果 細(xì)胞核呈深藍(lán)色，核仁呈紅色；不同分化類(lèi)型的鱗狀上皮細(xì)胞，其細(xì)胞質(zhì)顏色各異：角化細(xì)胞呈粉紅色，不全角化細(xì)胞呈橙黃色，角化前細(xì)胞呈淡藍(lán)或淡綠色；紅細(xì)胞呈橙紅或鮮紅色，白細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)呈淡藍(lán)綠色；黏液呈淡藍(lán)或粉紅色。

（三）瑞氏（Ｗｒｉｇｈｔ）染色 瑞氏染色一般用于血液涂片，也可用于檢查腫瘤細(xì)胞。

1、試劑配制（1）瑞氏染液： 瑞氏染料1ｇ 甲醇600ｍｌ

將瑞氏染料放人研缽內(nèi)，加人適量甲醇與之混合研磨，使染料逐漸溶解。將溶解的染液傾入另一玻璃瓶?jī)?nèi)，然后再加人適量甲醇繼續(xù)研磨；未溶解的染料如此反復(fù)多次，直至染料完全溶解、甲醇用完為止。染液避光保存?zhèn)溆谩?/p>

（2）磷酸鹽緩沖液： 無(wú)水磷酸氫二鈉６·ｓｇ 磷酸二氫鈉4ｇ 蒸餾水1000ｍｌ ｐＨ：6.5～7.0

2、染色程序（1）涂片自然干燥。（2）滴加瑞氏液染色1min。

（3）滴加等量的磷酸緩沖液，輕輕搖蕩玻片或用洗耳膠球在玻片上輕輕吹氣，使兩液體混合均勻，持續(xù)10～15min。

（4）流水洗去染液。

（5）涂片風(fēng)干后，二甲苯透明，中性樹(shù)膠封片。

3、染色結(jié)果 胞核呈紫紅色，細(xì)胞質(zhì)呈紫藍(lán)色，黏液呈粉紅色或淡藍(lán)色。

（四）Ｍａｙ－Ｇｒüｎｗａｌｄ姬姆薩（Ｇｉｅｍｓａ）染色

Ｍａｙ－Ｇｒüｎｗａｌｄ一姬姆薩染色適用于造血系統(tǒng)的細(xì)胞涂片和鑒別惡型淋巴瘤的類(lèi)型。Ｍａｙ-Ｇｒüｎｗａｌｄ原液和姬姆薩原液配制繁瑣，可直接購(gòu)買(mǎi)。

1、試劑配制

（1）Ｍａｙ－Ｇｒüｎｗａｌｄ工作液： Ｍａｙ－Ｇｒüｎｗａｌｄ原液１份 蒸餾水6～10份 使用前配制。（2）姬姆薩工作液： 姬姆薩原液1份 蒸餾水6～10份 使用前配制。

2、染色程序

（1）涂片自然干燥，蒸餾水洗1～2min。

（2）Ｍａｙ－Ｇｒüｎｗａｌｄ作液染 15～30min。（3）自來(lái)水沖洗，洗去載玻片上的染液，蒸餾水稍洗。（4）姬姆薩工作液染15～30min。（5）自來(lái)水沖洗，洗去載玻片上的染液。（6）涂片風(fēng)干后，二甲苯透明，中性樹(shù)膠封片。

3、染色結(jié)果 胞核呈紫紅色，細(xì)胞質(zhì)和核仁呈藍(lán)紫色。

（五）Ｒａｋｏｆｆ染色

Ｒａｋｏｆｆ染色用于陰道細(xì)胞學(xué)涂片快速測(cè)定雌激素水平。

1、試劑配制

（1）5％淡綠水溶液83ｍｌ（2）1％伊紅水溶液17ｍｌ 將兩液混合后使用。

2、染色程序

（1）用細(xì)胞刷沿陰道側(cè)壁刷取黏膜鱗狀上皮細(xì)胞，放入裝有1～2ｍｌ生理鹽水的試管內(nèi)。

（2）在試管內(nèi)滴入3滴Ｒａｋｏｆｆ染液，用細(xì)胞刷在染液中輕搖混合。（3）將1～2滴混合液滴于載玻片上，制成涂片。（4）待涂片干燥后，用中性樹(shù)膠封片。

3、染色結(jié)果 鱗狀上皮細(xì)胞的嗜酸性和嗜堿性細(xì)胞質(zhì)區(qū)分明顯。角化前細(xì)胞的核呈網(wǎng)狀，角化細(xì)胞的固縮核呈基本不著色的空泡狀。

三、TCT細(xì)胞學(xué)診斷方式及要求

一、標(biāo)本評(píng)估 ㈠滿意標(biāo)本

⒈送檢標(biāo)本貼標(biāo)簽，有編號(hào)，有申請(qǐng)目的。

⒉有關(guān)臨床病史填入送檢單（如年齡、末次月經(jīng)陰道宮頸和盆腔檢查主要發(fā)現(xiàn)）。⒊有足夠量保存好并結(jié)構(gòu)清晰鱗狀上皮細(xì)胞達(dá)8000－12000個(gè)，其覆蓋液基制片應(yīng)超過(guò)30－40％。

⒋足夠量頸管柱狀上皮團(tuán)（1或2團(tuán)，每團(tuán)不少于10個(gè)或5個(gè)細(xì)胞），或有移行區(qū)細(xì)胞成分（化生細(xì)胞）。除此之外，保存好的鱗狀上皮細(xì)胞達(dá)5000個(gè)以上即可。㈡不滿意標(biāo)本

⒈標(biāo)本沒(méi)有識(shí)別標(biāo)志和申請(qǐng)目的。⒉載玻片破裂而不能修復(fù)。

⒊缺乏足夠量、保存好并結(jié)構(gòu)清晰鱗狀上皮細(xì)胞，覆蓋面少于10％。

⒋血細(xì)胞和炎細(xì)胞過(guò)多，細(xì)胞重疊、過(guò)厚，固定欠佳，空氣干燥和污染等因素，影響75％或更多上皮細(xì)胞的觀察。㈢不滿意標(biāo)本處理原則

⒈說(shuō)明拒收或不能制片的詳細(xì)原因。

⒉標(biāo)本已進(jìn)行制片和檢查，應(yīng)說(shuō)明何種原因引起無(wú)法滿意地對(duì)上皮細(xì)胞異常做出評(píng)估。

二、描述性診斷報(bào)告 ㈠反應(yīng)性細(xì)胞改變

⒈炎癥反應(yīng)（輕度 中度 重度）⒉萎縮反應(yīng)（伴或不伴炎癥）⒊IUD反應(yīng) ⒋放療反應(yīng) ㈡鱗狀上皮細(xì)胞異常 ⒈無(wú)明確診斷意義的非典型鱗狀上皮細(xì)胞（ASCUS）

⒉非典型鱗狀上皮細(xì)胞,不除外高度鱗狀上皮內(nèi)病變（ASC-H）⒊低度鱗狀上皮內(nèi)病變（LSIL,CINⅠ）⒋高度鱗狀上皮內(nèi)病變（HSIL,CINⅡⅢ）⒌鱗狀細(xì)胞癌（SCC）㈢腺上皮細(xì)胞異常

⒈非典型腺上皮細(xì)胞（AGC）⑴宮頸腺細(xì)胞 ⑵宮內(nèi)膜細(xì)胞 ⒉非典型腺上皮細(xì)胞，不除外腺癌 ⒊腺癌

⑴宮頸腺癌 ⑵宮內(nèi)膜腺癌 ⑶宮外腺癌

三、對(duì)診斷及治療建議

㈠有性行為的婦女在開(kāi)始3年每年做1次宮頸抹片，若均為陰性以后每3年做1次，直至65歲。

㈡對(duì)ASCUS的處理意見(jiàn)分為重復(fù)涂片、檢測(cè)HPV和行陰道鏡檢查三種。⒈若能保證隨訪，3－6月復(fù)查涂片連續(xù)2年。

⒉若不能保證隨訪，或患者有高危因素，應(yīng)立即做陰道鏡或組織活檢。

⒊宮頸瘤樣病變（包括ASCH）或臨床可疑病變而細(xì)胞學(xué)陰性，需做陰道鏡下組織活檢。⑴活檢結(jié)果為CINⅡ，行物理、抗炎等治療或?qū)m頸錐切術(shù)。

⑵活檢結(jié)果為CINⅢ，45歲以下，行宮頸錐切或Leep刀宮頸環(huán)切；45歲以上或患者強(qiáng)烈要求，可行全宮切除，之后陰道鏡或細(xì)胞學(xué)定期隨訪。第一年每3月1次，第二、三年每6月1次，第四、五年每年1次。

⑶鱗癌、腺癌或其他類(lèi)型惡性腫瘤，按具體臨床手術(shù)分期做相應(yīng)的全宮切除和（或）加淋巴結(jié)清掃，必要時(shí)手術(shù)前后加放療或化療。

四、TCT質(zhì)量管理標(biāo)準(zhǔn)

一、診斷部分 ㈠閱片嚴(yán)格核對(duì)編號(hào)、標(biāo)本得5分；如標(biāo)本與申請(qǐng)單據(jù)不符，應(yīng)及時(shí)與臨床聯(lián)系，并報(bào)告上級(jí)醫(yī)師；如查對(duì)結(jié)果屬臨床差錯(cuò)，本科得0.5分，如屬本科差錯(cuò)扣0.5分。

㈡TCT標(biāo)本應(yīng)于3-5日內(nèi)出報(bào)告，遇有疑難病例請(qǐng)值班主治醫(yī)師復(fù)驗(yàn)，主治醫(yī)師如有疑難，請(qǐng)主任醫(yī)師復(fù)驗(yàn)，實(shí)行三級(jí)復(fù)驗(yàn)制得5分。

㈢病理報(bào)告書(shū)寫(xiě)正確，條理清晰，無(wú)錯(cuò)別字，無(wú)涂改得5分，如有一項(xiàng)欠缺扣0.1分。㈣細(xì)胞診斷嚴(yán)肅認(rèn)真，防止差錯(cuò)，正確診斷得10分，如有差錯(cuò)，分清責(zé)任，及時(shí)登記，并按情節(jié)扣分。

㈤復(fù)驗(yàn)完畢申請(qǐng)單和切片應(yīng)有次序地交檔案室保管得4分，不得遺失或差錯(cuò)，如有差錯(cuò)每次扣0.1分。

㈥每人使用顯微鏡，負(fù)責(zé)保養(yǎng)愛(ài)護(hù)得3分，如有損害酌情扣分。㈦下班前關(guān)好門(mén)窗、水電，不出事故得3分，出事故酌情扣分。

二、技術(shù)部分

㈠收標(biāo)本要嚴(yán)格核對(duì)編號(hào)與標(biāo)本是否相符，得5分。如標(biāo)本與申請(qǐng)單據(jù)不符，應(yīng)及時(shí)與臨床聯(lián)系，屬臨床差錯(cuò)，本科得0.5分，如屬本科差錯(cuò)扣0.5分。㈡收到標(biāo)本及時(shí)編號(hào)、登記，得5分，如做得不好每項(xiàng)扣0.1分。㈢嚴(yán)格執(zhí)行，遵守技術(shù)操作規(guī)程得5分，如有貼標(biāo)簽差錯(cuò)扣0.1分。

㈣制片要保證質(zhì)量，染色鮮亮，核漿對(duì)比清晰得10分，如影響診斷扣0.5分。

㈤報(bào)告及時(shí)發(fā)出，并有登記簽收本，發(fā)出報(bào)告后7天內(nèi)將診斷結(jié)果登記在記錄本上得5分，漏登記扣0.1分。

㈥收存切片、申請(qǐng)單要核對(duì)切片數(shù)，并及時(shí)整理歸檔，切片資料按章保管得5分，如有差錯(cuò)每次扣0.1分。

㈦下班前關(guān)好門(mén)窗、水電，確保正常工作秩序，不出事故得3分，出事故酌情扣分。

三、切片質(zhì)量控制

技術(shù)人員應(yīng)檢查制片質(zhì)量：染色片的優(yōu)良率（甲、乙級(jí)切片所占的比例）＞90％，優(yōu)級(jí)率（甲級(jí)切片所占的比例）35％。不合格切片應(yīng)立即重做。TCT切片質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)（參照常規(guī)石蠟包埋一HE染色片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)）

㈠細(xì)胞片無(wú)污染物，20分；有污染物，扣20分。㈡無(wú)氣泡（細(xì)胞片與載玻片間/蓋玻片與細(xì)胞片、載玻片間），蓋玻片周?chē)鸁o(wú)膠液外溢，20分；有氣泡，扣6分，膠液外溢，扣6分。

㈢細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)染色對(duì)比鮮明、清晰，20分；細(xì)胞核著色灰或著色過(guò)蘭，扣10分，紅（細(xì)胞質(zhì)）與蘭（細(xì)胞核）對(duì)比不清晰，扣10分。

㈣透明度好20分；透明度差，扣2－6分，細(xì)胞結(jié)構(gòu)模糊，扣10－15分。

㈤切片整潔標(biāo)簽端正粘牢編號(hào)清晰，20分；切片不整潔，扣6分，標(biāo)簽粘貼不牢，扣6分，編號(hào)不清晰，扣8分。㈥切片質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)

甲級(jí)片≥90分（優(yōu)）；乙級(jí)片75－89分（良）；丙級(jí)片60－74分（基本合格）；丁級(jí)片≤59分（不合格）

第三章 免疫組化染色操作常規(guī)

一、石蠟切片脫蠟和水化后，用PBS（Ph7.4）沖洗三次，每次3分鐘。

二、根據(jù)每一種抗體的要求，對(duì)組織抗原進(jìn)行相應(yīng)的修復(fù)。

三、如有必要（內(nèi)源性過(guò)氧化物酶含量高的組織），每張切片加1滴3%過(guò)氧化氫，室溫下孵育10分鐘，以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶的活性。PBS沖洗三次，每次3分鐘，除去PBS液。

四、每張切片加1滴或50μl第一抗體（用戶自選），室溫下孵育60分鐘或4℃過(guò)夜。

五、PBS沖洗三次，每次3-5分鐘。除去PBS液，每張切片加1滴或50μl第二抗體，室溫下孵育10-15分鐘。PBS沖洗三次，每次3分鐘。

六、除去PBS液，每張切片加2滴或100μl新鮮配制的DAB或AEC溶液，顯微鏡下觀察3-5分鐘（DAB）或10分鐘（AEC）。

七、自來(lái)水沖洗，蘇木素復(fù)染，自來(lái)水沖洗返藍(lán)。二甲苯透明，中性樹(shù)膠封固。

第四章 病理科易燃易爆物品管理規(guī)定

1易燃易爆物品應(yīng)嚴(yán)格按照相關(guān)部門(mén)發(fā)布的管理辦法進(jìn)行管理。分類(lèi)儲(chǔ)存，保持通風(fēng)，避免高溫和陽(yáng)光照射。

2倉(cāng)庫(kù)必須遠(yuǎn)離火源，貼有嚴(yán)禁煙火標(biāo)志，配有相應(yīng)消防器材。3由專(zhuān)人負(fù)責(zé)管理，接受，出入庫(kù)記錄。

4對(duì)性質(zhì)不穩(wěn)定的藥品應(yīng)定期檢查，定期清點(diǎn)數(shù)量，查看試劑包裝是否有破損、溢液等，若發(fā)現(xiàn)情況及時(shí)處理。

5對(duì)過(guò)期物品應(yīng)定期清理，送有關(guān)部門(mén)進(jìn)行銷(xiāo)毀。

6、凡遇“元旦”、“春節(jié)”、“五一”、“十一”等長(zhǎng)假，應(yīng)進(jìn)行嚴(yán)格檢查登記。