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血液常規(guī)檢驗標準操作規(guī)程

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第一篇:血液常規(guī)檢驗標準操作規(guī)程

昆侖泌尿外科醫(yī)院檢驗科 臨檢室作業(yè)指導(dǎo)書

文件編號;SZKL-LJ-01

版本/修訂號;1/0

主題內(nèi)容

血液常規(guī)檢驗標準操作規(guī)程

生效日期:20150101 頁碼;

血液常規(guī)檢驗標準操作規(guī)程 1.目的: 檢測分析血液中紅細胞、白細胞、血小板、血紅蛋白等的數(shù)量和質(zhì)量,對感染、炎癥、血液系統(tǒng)疾病等進行輔助診斷、監(jiān)測治療效果等。2.檢測項目: 邁瑞B(yǎng)C-2600全自動血球儀上測定血常規(guī)19項。包括:白細胞計數(shù)(WBC)、中性粒細胞數(shù)(Neut#)、淋巴細胞數(shù)(Lymph#)、中間細胞計數(shù)(MID#)、中性粒細胞比率(Neut%)、淋巴細胞比率(Lymph%)、中間細胞比率(MID %)、紅細胞計數(shù)(RBC)、血紅蛋白濃度(Hb)、紅細胞壓積(Hct)、紅細胞平均體積(MCV)、平均血紅蛋白量(MCH)、平均血紅蛋白濃度(MCHC)、紅細胞體積分布寬度變異系數(shù)(RDW-CV)、紅細胞體積分布寬度標準差(RDW-SD)、血小板計數(shù)(PLT)、平均血小板體積(MPV)、血小板體積分布寬度(PDW)、血小板壓積(PCT)。3.原理:

3.1 血細胞(WBC.RBC.PLT)數(shù)量和體積檢測原理:電阻抗法。3.2白細胞分類原理:電阻抗法。白細胞脈沖的大小是由被計數(shù)細胞在溶血素中大小決定的。3.3 血紅蛋白測定:采用氰化高鐵血紅蛋白(HICV)比色法。

3.4 RDW、MCH、MCV、MCHC、MPV、PCT、PDW為換算項目。

3.5 HCT測定原理:血細胞產(chǎn)生的脈沖信號的峰值與RBC容積成正比。4.儀器:

廠商名:深圳邁瑞公司。型號:BC-2600。5.試劑:

廠商名:深圳邁瑞公司。

5.1清洗液:注冊號:粵深藥臨械(準)字2013

7.6 觀察儀器測定結(jié)果及直方圖,必要時應(yīng)手工計數(shù)及白細胞分類。7.7 審核結(jié)果,打印報告。

8.血細胞的顯微鏡檢查(用于對儀器法結(jié)果可疑時的復(fù)核)8.1 鏡檢標準

8.1.1 醫(yī)生明確要求涂片鏡檢;

8.1.2 儀器提示有原始或幼稚細胞、變異淋巴細胞、有核紅細胞等異常需鏡檢; 8.1.3 新生兒標本需涂片鏡檢;

8.1.4 WBC≥20×10^9/L或≤2.0×10^9/L;

8.1.5淋巴細胞≥45%,需做涂片鏡檢,1-4歲兒童且血細胞計數(shù)及他結(jié)果正常者除外; 8.1.6 單核細胞≥15%;

8.1.7 嗜酸性粒細胞≥10%; 8.1.8 嗜堿性粒細胞≥3% 8.1.9 PLT>500×10^9/L或<60×10^9/L; 8.2.0 提示有PLT聚集,需涂片鏡檢; 8.2 鏡檢步驟

8.2.1 血涂片的制備

8.2.1.1 在距載玻片一端1cm的位置滴加約5μl的抗凝血;末梢血直接用干凈玻片蘸取。8.2.1.2 用推片使血液沿其邊緣展開,與載玻片30~40度角進行推片。8.2.1.3 涂片完成后在空氣中自燃晾干。8.2.2 血涂片的染色

8.2.2.1 染色試劑:瑞氏染色液。8.2.2.2 染色步驟

a.用蠟筆在血膜兩頭畫線,然后將血涂片平放在染色架上。b.加瑞氏染液數(shù)滴,以覆蓋整個血膜為宜,染色約1分鐘。c.滴加約等量的緩沖液與染液混合,室溫下染色5-10分鐘。d.用流水沖去染液,待干燥后鏡檢。8.2.2.3 鏡檢觀察要求

a.將濕片在高倍鏡下觀察涂片、染色是否良好,否則重新涂片染色。b.選擇涂片體尾交界、細胞分布均勻不重疊部分進行鏡檢。c.在高倍鏡下辨認細胞不清楚時,必須待玻片干后用油鏡觀察。8.2.2.4 鏡檢觀察的處理

a.根據(jù)儀器報警提示的內(nèi)容,確認鏡下觀察結(jié)果是否與儀器提示一致。

b.發(fā)現(xiàn)原始及幼稚白細胞,則必須進行手工分類;如不能確定細胞種類,則報告異常細胞的比例。

c.如果鏡下發(fā)現(xiàn)有核紅細胞,則必須對白細胞進行校正。

d.如果鏡下觀察有血小板聚集,則必須手工沖池計數(shù)血小板;如果是EDTA﹒K2引起的血小板聚集,可用109mmol/L枸櫞酸鈉抗凝劑采集標本,結(jié)果需要進行換算。

e.多發(fā)性骨髓瘤、冷球蛋白血癥引起的紅細胞聚集,可將血液用儀器稀釋液稀釋3倍,然后37℃水浴箱中10分鐘后,立即上機檢測,結(jié)果需要進行換算。昆侖泌尿外科醫(yī)院檢驗科 臨檢室作業(yè)指導(dǎo)書

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9.參考區(qū)間

中國成年人群血細胞分析參考區(qū)間(靜脈血標本儀器法)測定項目男

WBC(×10^9/L)

3.5~9.5

3.5~9.5 Neut(×10^9/L)

1.8~6.3

1.8~6.3 Lymph(×10^9/L)

1.1~3.2

1.1~3.2 Neut%

40~75

40~75 Lymph%

20~50

20~50 RBC(×10^12/L)

4.3~5.8

3.8~5.1

Hb(g/L)

130~175

115~150 HCT(%)

0.40~0.50

0.35~0.45 MCV(fl)

82~100

82~100 MCH(pg)

27~34

27~34 MCHC(g/L)

316~354

316-354 PLT(×10^9/L)

125~350

125~350 10.危急值 測定項目≤≥

WBC(×10^9/L)

1.0

Hb(g/L)

180 PLT(×10^9/L)

600 11.臨床意義

11.1 白細胞計數(shù):

11.1.1 生理性變化:白細胞計數(shù)結(jié)果有明顯的生理性波動,如早晨較低,傍晚較高;餐后較餐前高;劇烈運動、情緒激動時較安靜時偏高;月經(jīng)期、妊娠、分娩、哺乳期亦可增高;新生兒及嬰兒期明顯高于成人。11.1.2 病理性增多,常見于:

11.1.2.1 急生化膿性感染,尤其是革蘭陽性球菌感染(膿腫、腦膜炎、肺炎、扁桃體炎、闌尾炎)

11.1.2.2 某些病毒性感染:傳染性單核細胞增多癥、流行性乙型腦炎等。11.1.2.3 組織損傷:嚴重外傷、大手術(shù)、大面積燒傷、急性心肌梗死等。11.1.2.4 急性大出血 11.1.2.5 白血病

11.1.2.6 惡性腫瘤:肝癌、胃癌、肺癌等。11.1.3

病理性減少,見于:

11.1.3.1 某些感染性疾病,尤其是革蘭氏陰性桿菌感染(傷寒、副傷寒等)。11.1.3.2 某些病毒感染:流感、病毒性肝炎等。11.1.3.3 某些原蟲感染,如瘧疾、黑熱病等

11.1.3.4 某些血液病:再生障礙性貧血、急性粒細胞缺乏癥、巨幼細胞貧血等。11.1.3.5 自身免疫性疾病:SLE、AIDS等。11.1.3.6 脾功能亢進:門脈肝硬化 昆侖泌尿外科醫(yī)院檢驗科 臨檢室作業(yè)指導(dǎo)書 文件編號;SZKL-LJ-01

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11.1.3.7 腫瘤化療、放療及某些藥物(氯霉素、磺胺類藥等)反應(yīng)等。

11.2 中性粒細胞:中性粒細胞增多分生理性和病理性增多。病理性增多可見于急性感染或炎癥、急性失血、急性中毒及惡性腫瘤等;中性粒細胞減少可見于病毒感染、慢性理化損傷、自身免疫性疾病等。

11.3 淋巴細胞:淋巴細胞病理性增多見于某些慢性感染、腎移植手術(shù)后、白血病、再生障礙性貧血、粒細胞缺乏癥等;淋巴細胞減少可見于接觸放射線,應(yīng)用腎上腺皮質(zhì)激素或促腎上腺皮質(zhì)激素,嚴重化膿性感染等情況。11.4 紅細胞和血紅蛋白:

11.4.1減少見于:急、慢性紅細胞丟失過多、紅細胞壽命縮短、造血原料不足、骨髓造血功能減退等;

11.4.2增多見于:真性紅細胞增多癥,肺心病等。

11.5 紅細胞比積:增高可見于大面積燒傷、脫水等血液濃縮情況;減低可見于貧血。11.6 紅細胞體積分布寬度(RDW)

11.6.1用于缺鐵性貧血的診斷和療效觀察,缺鐵性貧血時RDW值增大,當給以鐵劑治療有效時RDW值一過性進一步增大,隨后逐漸降到正常。

11.6.2對小細胞低色索性貧血的鑒別診斷.缺鐵性貧血時RDW值增大而輕型海洋性貧血時RDW值正常。

11.6.3用于對貧血的分類(Bassman MCV/RDW分類法),根據(jù)MCV、RDW值變化共分為6種類型貧血。

A.小細胞均一性貧血:MCV減小,RDW正常,如輕型海洋性貧血。

B.小細胞不均一性貧血:MCV減小,RDW增大,如缺鐵性貧血。

C.正細胞均一性貧血:MCV、RDW均正常,如慢性病所致貧血。

D.正細胞不均一性貧血:MCV正常,RDW增大,如早期缺鐵性、營養(yǎng)性貧血。

E.大細胞均一性貧血:MCV增大,RDW正常,如再生障礙性貧血。

F.大細胞不均一性貧血MCV、RDW均增大,如巨幼細胞性貧血。

11.7 MCV、MCH、MCHC:這三個參數(shù)通常都用于各型貧血的診斷,具體應(yīng)用如下表: 貧血類型

MCV(82~100)

MCH(27~34)MCHC(316~354)

常見原因及疾病

正常細胞性貧血正常正常正常急性失血、急性溶血、再生障礙性貧血、白血病等

大細胞性貧血>正常>正常正常葉酸、維生素B12缺乏或吸收障礙 單純小細胞性貧血<正常<正常正常慢性炎癥、尿毒癥

小細胞低色素性貧血<正常<正常<正常鐵缺乏、維生素B6缺乏、珠蛋 白肽鏈合成障礙、慢性失血

11.8 血小板:血小板數(shù)量病理性減低見于性白血病、再障、脾亢、血小板減少性紫癜、敗血癥等;增高見于慢性白血病、真性紅細胞增多癥、急性化膿性感染、脾切除、溶血性貧血等。

11.9 MPV:研究表明MPV的大小與PLT的多少呈非線性負相關(guān),故在分析MPV的臨床意義時應(yīng)結(jié)合PLT的變化來考慮。

11.9.1鑒別血小板減少癥的病因:骨髓損傷導(dǎo)致血小板減少時,MPV下降;當血小板在外周血中破壞增多導(dǎo)致血小板減少時,MPV增大;當血小板分布異常導(dǎo)致血小板減少時,MPV正常。

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11.9.2 MPV增高可作為骨髓功能恢復(fù)的較早期指標。當骨髓功能衰竭時,MPV與PLT同時持續(xù)下降,骨髓抑制越嚴重,MPV越小,當骨髓功能恢復(fù)時,MPV值的增大先于PLT數(shù)值的增高。

11.9.3血栓前狀態(tài)或血栓性疾病時MPV常增高。

12.0 PCT的臨床應(yīng)用報道尚少。在血小板增多癥、慢性粒細胞性白血病早期PCT常增大。12.1 PDW的增大可能與骨髓巨核細胞的倍體數(shù)增大等有關(guān),其臨床應(yīng)用尚較少。12.注意事項:

12.1 采血時,加入到抗凝管后,應(yīng)注意充分混勻,避免血液凝固。混勻時,動作要輕,避免血液有形成分破壞。

12.2 樣本測定前,應(yīng)注意充分混勻,方法如下:①將血樣瓶口朝上置于操作者雙手掌心,雙手來回搓動10次,動作要連貫。②顛倒小瓶,使瓶口朝下,將血樣置于操作者雙手掌心,雙手來回搓動10次。③重復(fù)①和②步驟8次。④輕輕顛倒混勻1分鐘左右。12.3 為保證結(jié)果準確性,應(yīng)做好儀器的保養(yǎng)和校準(見保養(yǎng)和校準程序)。12.4 儀器有報警提示或直方圖有異常時,應(yīng)進行手工方法復(fù)查。當WBC>1O.O X10^9/L或<3.0X10^9/L時,應(yīng)推片瑞氏染色,鏡下復(fù)查白細胞分類、形態(tài)。當RBC<3.0X10^9/L或PLT<50x10^9/L時,應(yīng)進行手工方法鏡檢復(fù)查。12.5 建議使用儀器配套的試劑。

12.6 樣本應(yīng)在采血后2分鐘至4小時內(nèi)檢測完成。

12.7 血液與抗凝劑的比例要適當,lml血液用1.5-2.0mg的EDTA-K2抗凝。

12.8 MID包括單核細胞、嗜酸細胞、嗜堿細胞、幼稚細胞;當MXD>13%時,應(yīng)推片瑞氏染色,鏡下復(fù)查白細胞分類、形態(tài)。12.9失控處理:當出現(xiàn)失控現(xiàn)象時,按失控處理程序,尋找失控原因,并扣留該批檢測結(jié)果,待查明失控原因并排除后重測樣本,然后才發(fā)出報告。13.參考文獻 11.1尚紅、王毓

三、申子瑜主編,全國臨床臨驗操作規(guī)程(第4版),人民衛(wèi)生出版社,2015.

第二篇:血液常規(guī)檢驗標準操作規(guī)程

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1.目的:檢測分析血液中紅細胞、白細胞、血小板、血紅蛋白的數(shù)量和質(zhì)量,對感染、炎癥、血液系統(tǒng)疾病等進行輔助診斷、監(jiān)測治療效果等。

2.檢測項目:紅細胞計數(shù)、血紅蛋白、紅細胞比積、平均紅細胞體積、平均紅細胞血紅蛋白含量、平均紅細胞血紅蛋白濃度、白細胞計數(shù)、白細胞分類、血小板計數(shù)。

3.標本的采集與運送

3.1 標本類型:靜脈血或手指末梢血。3.2標本要求:標本用EDTA-K2 抗凝; 靜脈血標本量應(yīng)達到2ml;末梢血20μl。3.3標本運送:室溫運送,4小時內(nèi)完成檢測。

3.4標本拒收標準:嚴重溶血、凝固、血量少、無條碼、無標識的血液標本不能進行檢測。

4.標本的檢測 儀器及試劑

4.1 儀器:深圳mindrary公司BC—5100全自動血液細胞分析儀。試劑:由mindrary公司提供包括LH溶血劑、LEO(Ⅰ)溶血劑、LBA溶血劑、LEO(Ⅱ)溶血劑、清潔液、稀釋液、探頭清潔液等配套試劑。

4.1.1 檢測原理

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采用流式細胞技術(shù),通過檢測光學(xué)信號進行白細胞計數(shù)及白細胞分類測定;雙鞘流電阻原理進行紅細胞與血小板測定;HiCN-HGB法檢測血紅蛋白。

4.1.2 操作步驟 4.1.2.1開放-全血模式

a.在儀器主界面點擊“計數(shù)”,進入計數(shù)界面。

b.點擊計數(shù)界面“模式”,在彈出的對話框中選擇“開放全血模式”。輸入分析標本的試管號,點擊“CBC+DIFF測量模式”。

c.上下顛倒試管將試管內(nèi)容物充分混勻,輕輕取下蓋子,防止血液濺出。

d.將試管放到采樣針下,按吸樣鍵,蜂鳴器響后移走試管,儀器自動執(zhí)行樣本分析。

e.分析結(jié)束,結(jié)果顯示在屏幕的分析結(jié)果區(qū)同時自動傳入電腦。4.1.2.2自動-全血模式

a.在儀器主界面點擊“計數(shù)”,進入計數(shù)界面。

b.點擊計數(shù)界面“工作模式”,在彈出的對話框中點擊模式項的“自動—全血”按鈕,進樣模式為自動進樣,血樣模式為全血。點擊“CBC+DIFF”測量模式。

c.在“管架號”、“試管號”編輯框中輸入起始樣本的對應(yīng)管架號和試管號。點擊“確定”按鈕,保存輸入內(nèi)容并返回計數(shù)界面。

c.將分析標本試管放入對應(yīng)的試管位,將試管架放入進樣器右槽。

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貴州省盤縣中醫(yī)院檢驗科SOP文件 d.點擊計數(shù)界面“開始計數(shù)”,至分析結(jié)束。e.分析完畢,結(jié)果直接傳入電腦。4.1.3 室內(nèi)質(zhì)量控制

4.1.3.1 質(zhì)控品:由mindrary公司提供的配套質(zhì)控品。4.1.3.2 操作方法:選擇“開放—全血”模式,質(zhì)控品編號9000,計數(shù)狀態(tài)為綠色圖標。將充分混勻的質(zhì)控品放到采樣針下,使采樣針可吸入混勻后的質(zhì)控物。

按吸樣鍵,聽到蜂鳴器響后移開質(zhì)控物。質(zhì)控分析結(jié)束后,質(zhì)控結(jié)果自動傳入電腦。

5.血細胞的顯微鏡檢查 5.1 鏡檢標準

5.1.1 醫(yī)生明確要求涂片鏡檢;

5.1.2 儀器提示有原始或幼稚細胞、變異淋巴細胞、有核紅細胞等異常需鏡檢;

5.1.3 新生兒標本需涂片鏡檢; 5.1.4 WBC≥20×109/L或≤2.0×109/L;

5.1.5淋巴細胞≥45%,需做涂片鏡檢,1-4歲兒童且血細胞計數(shù)及他結(jié)果正常者除外;

5.1.6 單核細胞≥15%; 5.1.7 嗜酸性粒細胞≥10%; 5.1.8 嗜堿性粒細胞≥3% 5.1.9 PLT>500×109/L或<60×109/L;

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貴州省盤縣中醫(yī)院檢驗科SOP文件 5.2.0 提示有PLT聚集,需涂片鏡檢; 5.2 鏡檢步驟 5.2.1 血涂片的制備

5.2.1.1 在距載玻片一端1cm的位置滴加約5μl的抗凝血;末梢血直接用干凈玻片蘸取。

5.2.1.2 用推片使血液沿其邊緣展開,與載玻片30~40度角進行推片。

5.2.1.3 涂片完成后在空氣中自燃晾干。5.2.2 血涂片的染色

5.2.2.1 染色試劑:瑞氏快速染液。5.2.2.2 染色步驟

a.干后的血涂片加上瑞氏染液,染色約1分鐘。b.再加入等量的緩沖液,染色5~10分鐘。c.清水沖洗后,待干后鏡檢。5.2.2.3 鏡檢觀察要求

a.將濕片在高倍鏡下觀察涂片、染色是否良好,否則重新涂片染色。

b.選擇涂片體尾交界、細胞分布均勻不重疊部分進行鏡檢。c.在高倍鏡下辨認細胞不清楚時,必須待玻片干后用油鏡觀察。5.2.2.4 鏡檢觀察的處理

a.根據(jù)儀器報警提示的內(nèi)容,確認鏡下觀察結(jié)果是否與儀器提示一致。

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b.發(fā)現(xiàn)原始及幼稚白細胞,則必須進行手工分類;如不能確定細胞種類,則報告異常細胞的比例。

c.如果鏡下發(fā)現(xiàn)有核紅細胞,則必須對白細胞進行校正。d.如果鏡下觀察有血小板聚集,則必須手工沖池計數(shù)血小板;如果是EDTA﹒K2引起的血小板聚集,可用109mmol/L枸櫞酸鈉抗凝劑采集標本,結(jié)果需要進行換算。

e.多發(fā)性骨髓瘤、冷球蛋白血癥引起的紅細胞聚集,可將血液用儀器稀釋液稀釋3倍,然后37℃水浴箱中10分鐘后,立即上機檢測,結(jié)果需要進行換算。

6.生物參考區(qū)間

測定項目 男 女 新生兒 WBC(×109/L)4.0~10.0 4.0~10.0 15.0~20.0 RBC(×1012/L)4.0~5.5 3.5~5.0 6.0~7.0 Hb(g/L)120~160 110~150 170~200 HCT(%)40.0~50.0 35.0~45.0 38~68 MCV(fl)80~100 80~100 95~125 MCH(pg)27.0~34.0 27.0~34.0 30~42 MCHC(g/L)320~360 320~360 300~340 PLT(×109/L)100~300 100~300 100~360 7.白細胞分類計數(shù)參考值

分類百分率(%)絕對值(×109/L)中性粒細胞50~70 2~7

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貴州省盤縣中醫(yī)院檢驗科SOP文件 淋巴細胞 20~400.8~4.0 單核細胞 3~8 12~0.80 嗜酸性粒細胞0.5~5 0.02~0.5 嗜堿性粒細胞0~1 0~0.1 8.危急值

測定項目小于或等于大于或等于 WBC(×109/L)≥30.0

≤2.0 兒童(×109/L)≥35.0

≤1.5 Hb(g/L)≥200

≤60 PLT(×109/L)≥600

≤50 9.臨床意義

9.1 中性粒細胞:中性粒細胞增多分生理性和病理性增多。病理性增多可見于急性感染或炎癥、急性失血、急性中毒及惡性腫瘤等;中性粒細胞減少可見于病毒感染、慢性理化損傷、自身免疫性疾病等。

9.2 淋巴細胞:淋巴細胞病理性增多見于某些慢性感染、腎移植手術(shù)后、白血病、再生障礙性貧血、粒細胞缺乏癥等;淋巴細胞減少可見于接觸放射線,應(yīng)用腎上腺皮質(zhì)激素或促腎上腺皮質(zhì)激素,嚴重化膿性感染等情況。

9.3 單核細胞:單核細胞病理性增多見于急性感染恢復(fù)期、活動性肺結(jié)核、血液病等;單核細胞減少臨床意義不大。

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9.4 嗜酸性粒細胞:嗜酸性粒細胞增多 常見于寄生蟲、變態(tài)反應(yīng)疾病、皮膚病、血液病等;嗜酸性粒細胞減少 其臨床意義較小,見于長期應(yīng)用腎上腺皮質(zhì)激素后,某些急性傳染病等。

9.5 嗜堿性粒細胞:嗜堿性粒細胞增多可見于過敏性或炎癥性疾病、骨髓增生性疾病;嗜堿性粒細胞減低臨床意義不明確。

9.6 紅細胞和血紅蛋白減少見于急、慢性紅細胞丟失過多、紅細胞壽命縮短、造血原料不足、骨髓造血功能減退等;紅細胞和血紅蛋白增多見于真性紅細胞增多癥,肺心病等。

9.7 紅細胞比積增高可見于大面積燒傷、脫水等;減低可見于貧血。

9.8 血小板:血小板數(shù)量病理性減低見于性白血病、再障、脾亢、血小板 減少性紫癜、敗血癥等;增高見于慢性白血病、真性紅細胞增多癥、急性化膿性感染、脾切除、溶血性貧血等。

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第三篇:血液常規(guī)檢查檢驗程序

第 八 章 血液常規(guī)檢查檢驗程序

檢測血液中紅細胞、白細胞和血小板數(shù)量、白細胞分類及相關(guān)參數(shù)(HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW及MPV等)的變化對臨床有關(guān)疾病的診斷、觀察疾病的變化及治療效果具有重要參考價值。現(xiàn)根據(jù)ISO15189文件―《醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量與能力專用要求》的規(guī)定,以SF-3000、ADVIA-120和BC-2000血細胞分析儀為例進行介紹。

第一節(jié) 血細胞分析儀檢測原理

血常規(guī)檢查方法采用血細胞自動分析儀法,參見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》p7~11,白細胞分類計數(shù)采用顯微鏡檢查法,參見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》p5~7。現(xiàn)簡要介紹如下。

一、電阻抗法血細胞計數(shù)

在細胞檢測器微孔的兩側(cè)各有一個電極,兩電極間通有恒定電流,經(jīng)過稀釋液(電解質(zhì)溶液)稀釋的血樣(血細胞)在通過檢測器微孔時,產(chǎn)生了一個電脈沖;脈沖的高低代表細胞體積的大小,脈沖的個數(shù)代表細胞的數(shù)目。記錄脈沖的數(shù)目可以得到細胞計數(shù)的結(jié)果。

二、細胞化學(xué)和光散射法白細胞計數(shù)

將血液經(jīng)過細胞化學(xué)試劑染色,不同的白細胞胞漿內(nèi)部即可出現(xiàn)不同的酶化學(xué)反應(yīng)。當這些白細胞通過測量區(qū)時,由于酶反應(yīng)強度不同和細胞體積大小差異,激光束射到細胞上的前向角和散射角不同,以X軸為吸光率,Y軸為光散射,每個細胞產(chǎn)生兩個信號結(jié)合定位在細胞分布散點圖上。計算機對存儲的測量信息進行分析處理,得出白細胞總數(shù)和分類計數(shù)結(jié)果。適用于ADVIA-120血細胞分析儀。

三、多角度激光法白細胞計數(shù)

在白細胞分類通道:全血加入溶血劑(FD-Ⅰ和FD-Ⅱ)作用后,嗜酸性粒細胞內(nèi)顆粒被染色;其他白細胞略有皺縮。WBC/BASO通道:全血加入溶血劑(FB)溶血。除BASO外,其他白細胞均明顯皺縮。儀器從低角度及高角度分析白細胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu)。計算機對存儲的測量信息進行分析處理,得出白細胞總數(shù)和分類計數(shù)結(jié)果。適用于SF-3000血細胞分析儀。

四、光電比色法測量血紅蛋白

在稀釋的血樣中加入溶血劑使紅細胞膜破裂釋放出血紅蛋白,后者與溶血劑中有關(guān)成分結(jié)合形成Hb衍生物,進入Hb測試系統(tǒng),在特定波長(一般在530~550nm)下比色,吸光度的變化與液體中Hb含量成正比,儀器便可顯示其濃度。不同型號的血細胞分析儀配套溶血劑配方不同,形成的Hb衍生物亦不同,其吸收光譜各異但最大吸收均接近540nm。

五、光散射法紅細胞和血小板計數(shù)

以二維激光散射法檢測紅細胞和血小板。紅細胞測試原理是:在測試系統(tǒng)中,全血與紅細胞/血小板稀釋液混合,使自然狀態(tài)下雙凹盤狀扁平圓形的紅細胞成為球形并經(jīng)戊二醛固定,此種處理并不影響MCV體積。紅細胞無論以何種方位通過測量區(qū)時,被激光束照射后所得的信號是相同的。激光束以低角度前向光散射和高角度光散射同時測量一個紅細胞,根據(jù)低角度光散射轉(zhuǎn)換能量大小,測量單個紅細胞體積與總數(shù);根據(jù)高角度光散射得出單個紅細胞內(nèi)血紅蛋白濃度。血小板與紅細胞在一個系統(tǒng)中測量,其原理是:根據(jù)同質(zhì)性球體光散射的Mie理論,當球形化的血小板單個通過激光照射區(qū)時,儀器在兩個角度測定激光的散射強度:高角度主要測細胞的折射指數(shù)(RI),它與細胞的密度有關(guān);低角度主要測細胞體積的大小。血小板的體積在1~30fl,RI在1.35~1.40。計算機對存儲的測量信息進行分析處理,得出紅細胞和血小板計數(shù)結(jié)果。適用于ADVIA-120血細胞分析儀。

六、顯微鏡白細胞分類計數(shù)

把血液制成細胞分布均勻的薄膜涂片,經(jīng)瑞氏染料染色后,在顯微鏡下根據(jù)白細胞形態(tài)特征予以分類計數(shù),得出相對比值(百分率),并觀察細胞形態(tài)的變化。

第二節(jié) 儀器性能參數(shù)

血細胞分析儀的操作性能因儀器的種類與型號不同而異。

一、SF-3000血細胞分析儀

1.該儀器檢測血細胞的測量范圍為 WBC:(0.0~99.99)×109/L;RBC:(0.00~9.99)×1012/L、HGB:1~300g/L;PLT:(0~999)×109/L。

2.本儀器檢測血細胞的精密度為 WBC:±3.0%;RBC:±1.5%;HGB:±1.5%;PLT:±5.0%。

二、ADVIA-120血細胞分析儀

1.本儀器檢測血細胞的測量范圍為 WBC:(0.00~400)×109/L;RBC:(0.00~6.76)×1012/L;HGB:0~225g/L;PLT:(0~3980)×109/L。

2.本儀器檢測血細胞的精密度為 WBC:±3.0%;RBC:±1.5%;HGB:±1.5%;PLT:±5.0%。

三、BC-2000血細胞分析儀

1.本儀器檢測血細胞的測量范圍為 WBC:(0.0~99.99)×109/L;RBC:(0.00~9.99)×1012/L;HGB:0~300g/L;PLT:(0~999)×109/L。

2.本儀器檢測血細胞的精密度為 WBC:±3.0%;RBC:±2.0%;HGB:±2.0%;PLT:±5%。

第三節(jié) 血常規(guī)檢驗程序主要內(nèi)容

一、標本

1.臨床護士抽取患者抗凝靜脈血2ml。2.采血后立即送到臨床檢驗科。

3.血量不夠1ml或血液凝固、溶血或嚴重脂血標本不能進行檢測。

二、設(shè)備和試劑

1.設(shè)備 SF-3000、ADVIA-120、MEK-6108K和BC-2000血細胞分析儀。2.試劑

(1)稀釋液、溶血劑和清洗液。

(2)CBC試劑、DIFF試劑、消泡劑和鞘液沖洗液。(3)瑞氏染液及緩沖液。

3.購買的試劑應(yīng)放室溫保存,注意防塵、防潮。

4.開封后的試劑應(yīng)盡快用完,變質(zhì)、超過有效期的試劑不能使用。

三、容器及試劑添加劑

血液標本采集的容器是一次性含EDTA-K2抗凝劑的真空采血管;血液標本必需添加劑是EDTA-K2抗凝劑。

四、校準步驟

血細胞分析儀的操作過程分別見SF-3000血細胞分析儀標準操作程序(PLA 301-LJK-ZY-YQ-07)、ADVIA-120血細胞分析儀標準操作程序(PLA301-LJK-ZY-YQ-08)和BC-2000血細胞分析儀標準操作程序(PLA301-LJK-ZY-YQ-09)中6 儀器校準程序。

五、操作步驟

1.申請單及標本編號 整理血液常規(guī)檢驗申請單及血液標本,審核合格后,對檢驗申請單和血液標本進行編號。

2.上機測試

操作過程分別見SF-3000血細胞分析儀標準操作程序(PLA301-LJK-ZY-YQ-07)、ADVIA-120血細胞分析儀標準操作程序(PLA301-LJK-ZY-YQ-08)、BC-2000血細胞分析儀標準操作程序(PLA301-LJK-ZY-YQ-09)和MEK6108-K血細胞分析儀標準操作程序標準操作程序(PLA301-LJK-ZY-YQ-06)。

3.檢驗結(jié)果的輸入

(1)打開電腦,啟動“檢驗程序”,輸入用戶名及口令后,進入檢驗程序。

(2)單擊“檢驗”菜單,選擇“檢驗結(jié)果錄入修改”,進行檢驗結(jié)果的錄入及修改。通過申請序號進行結(jié)果的輸入,選擇“工作單號”(SF-3000自動傳輸:S+星期幾+當前檢驗標識序號;ADVIA-120自動傳輸:B+星期幾+當前檢驗標識;BC-2000測定結(jié)果和其他非自動傳輸標本:NK+星期幾+當前檢驗標識序號序號),儀器會自動傳輸入檢測結(jié)果;同時輸入當前患者的樣品“采集時間”和“接收時間”。

(3)儀器檢測結(jié)果進一步做鏡檢的標準

① BC-2000血細胞分析儀等三分類儀器檢測的標本全部需要鏡檢血涂片。

② SF-3000和ADVIA-120血細胞分析儀等五分類儀器檢測結(jié)果根據(jù)本程序第三節(jié)十五[白細胞五分類血細胞分析儀的白細胞分類篩選原則]篩選出需要做血涂片檢查的血標本。

③臨床醫(yī)師要求做紅細胞、白細胞、血小板等形態(tài)檢查的血標本。④血液病患者的檢測標本全部鏡檢血涂片。4.顯微鏡檢查操作步驟

(1)制片:靜脈抗凝血標本混勻或末梢血標本,采血后推成厚薄適宜的血膜片,血膜應(yīng)呈舌狀,頭、體、尾清晰可分。推好的血膜在空氣中晃動,以促使快干,以免細胞變形縮小。

(2)染色:平置玻片于染色架上,滴加瑞氏染色液5~8滴,使其迅速蓋滿血膜,約1min后,滴加緩沖液8~10滴,輕輕搖動玻片或用吸耳球?qū)恃禋猓c染液充分混合,15~20min后用水沖去染液,待干。

(3)鏡檢:先用低倍鏡或高倍鏡閱覽全片,注意觀察血片染色情況:如有無血小板或紅細胞聚集,片尾有無巨大異常細胞,再結(jié)合儀器警告的內(nèi)容,分別重點從白細胞分類、紅細胞參數(shù)和血小板參數(shù)等方面進行觀察,記錄各類細胞結(jié)果。

5.鏡檢結(jié)果的輸入及報告確認 單擊“結(jié)果處理”菜單,選擇“報告確認”進入結(jié)果確認,通過選擇“工作單元”、“報告日期”、“單張”或“批量”后,按“提取”鍵提取檢測結(jié)果,對檢驗結(jié)果進行逐一確認。

6.檢測過標本及廢物的處理 檢測過的血液標本、廢液及經(jīng)血液標本污染的各種廢物按血液常規(guī)標本的采集與處理程序(詳見第七章第四節(jié))進行處理。

六、質(zhì)量控制

1.室內(nèi)質(zhì)控 周一~周五每天做室內(nèi)質(zhì)控(廠家提供的質(zhì)控物)。測定過程是:從4~8℃冰箱取出全血質(zhì)控物置室溫,血細胞分析儀開機后預(yù)熱20min,分別將質(zhì)控物混勻后上機檢測,打印結(jié)果并與允許值范圍對比,質(zhì)控合格后才能檢測病人血標本。對于失控應(yīng)按質(zhì)量控制程序處理,儀器質(zhì)量控制當天的情況進行逐一登記。

2.室間質(zhì)控 每月參加科內(nèi)的室間質(zhì)控考評2次。每年參加衛(wèi)生部和WHO室間質(zhì)控。

七、干擾因素

1.嚴重的黃疸或脂血使血紅蛋白結(jié)果假性增高。

2.紅細胞冷凝集可使紅細胞和血小板計數(shù)結(jié)果假性減低,白細胞假性增高(電阻抗法)或假性減低(激光法)和MCV假性增高。

3.冷凝球蛋白增高使白細胞和血小板計數(shù)結(jié)果假性增高。4.有血小板凝集者可使血小板計數(shù)結(jié)果假性減低。

八、結(jié)果計算及測量不確定度 按儀器設(shè)計原理,只對紅細胞常數(shù)(紅細胞平均體積、紅細胞平均血紅蛋白量、紅細胞平均血紅蛋白濃度)進行計算,可根據(jù)RBC、HGB及HCT結(jié)果求出。

1.紅細胞平均體積(MCV):根據(jù)RBC及HCT,由下式求出。

每升血液中紅細胞比積Hct ?每升血液中紅細胞個數(shù) RBCMCV(fl)?2.紅細胞平均血紅蛋白量(MCH):根據(jù)RBC及HGB,由下式來求出。

MCH(pg)? 每升血液中血紅蛋白含量Hb ?每升血液中紅細胞個數(shù) RBC3.紅細胞平均血紅蛋白濃度(MCHC):根據(jù)HCT及HGB,由下式來求出。

MCHC(g/L)? 每升血液中血紅蛋白含量Hb?

每升血液中紅細胞比積 Hct4.RDW 由血細胞分析儀測量獲得,是反映周圍血紅細胞體積異質(zhì)性的參數(shù)。當紅細胞通過小孔的一瞬間,計數(shù)電路得到一個相應(yīng)大小的脈沖,不同大小的脈沖信號分別貯存在儀器內(nèi)裝計算機的不同通道,計算出相應(yīng)的體積及細胞數(shù),統(tǒng)計處理而得RDW。

5.測量不確定度

(1)SF-3000血細胞分析儀檢測血細胞測量不確定度為:WBC:±0.22×109/L(=3.87)、±0.46×109/L(=6.07)和±0.80×109/L(=13.27);RBC:±0.22×1012/L(=2.39)、±0.24×1012/L(=4.18)和±0.36×1012/L(=6.02);HGB:±2.60g/L(=82.60)、±3.66g/L(=129.53)和±5.48g/L(=168.07);PLT:±15.66×109/L(=64.60)、±25.80×109/L(=200.40)和±40.82×109/L(=340.93)。

(2)ADVIA 120血細胞分析儀儀器檢測血細胞測量不確定度為:WBC:±0.26×109/L(=3.69)、±0.32×109/L(=5.36)和±0.74×109/L(=13.32);RBC:±0.20×1012/L(=2.41)、±0.22×1012/L(=4.13)和±0.30×1012/L(=5.19);HGB:±2.90g/L(=82.90)、±3.66g/L(=130.63)和±4.38g/L(=1625.10);PLT:±10.32×109/L(=50.17)、±24.02×109/L(=201.13)和±30.54×109/L(=329.10)。

(3)BC-2000血細胞分析儀儀器檢測血細胞測量不確定度為:WBC:±0.22×109/L(=3.87)、±0.46×109/L(=6.07)和±0.80×109/L(=13.27);RBC:±0.22×1012/L(=2.39)、±0.24×1012/L(=4.18)和±0.36×1012/L(=6.02);HGB:±2.60g/L(=82.60)、±3.66g/L(=129.53)和±5.48g/L(=168.07);PLT:±15.66×109/L(=64.60)、±25.80×109/L(=200.40)和±40.82×109/L(=340.93)。

測量不確定度的來源包括標本、標本采集過程、送檢時間、保存條件、藥物、測試系統(tǒng)、員工操作步驟等因素。

九、生物參考區(qū)間與實驗室解釋

參見第七章第三節(jié)的有關(guān)內(nèi)容。

十、血細胞檢驗結(jié)果可報告區(qū)間

1.阻抗法儀器 WBC:(0.2~99.99)×109/L;RBC:(0.50~9.99)×1012/L;HGB:0~299g/L;PLT:(10~999)×109/L。

2.激光法儀器 WBC:(0.02~400)×109/L;RBC:(0.05~7.00)×1012/L;HGB:0~225g/L;PLT:(5~3500)×109/L。

十一、血細胞警告或危急值

白細胞<0.5×109/L;紅細胞<1.0×1012/L;血紅蛋白<30g/L;血小板<20×109/L。

十二、安全性預(yù)警措施

1.血液標本的運輸必須保證運送過程中的生物安全,防止溢出。血液標本溢出后,應(yīng)該立即對污染的環(huán)境和設(shè)備進行消毒處理。對標明有傳染性疾病的血液標本應(yīng)特別防護,以不污染環(huán)境或保護工作人員安全為前提。

2.在進行血液分析的一切操作活動中,應(yīng)按《實驗室安全管理》程序執(zhí)行。在進行操作前,首先應(yīng)采取必要的保護性措施如穿戴保護性外套、手套等。

3.與血液標本接觸的一切器皿、儀器組裝/拆卸組合零件都應(yīng)視為污染源,因此操作人員不小心接觸了這種污染源時,應(yīng)立即用清水沖洗被污染區(qū)域并進行消毒處理。

4.如果操作人員的皮膚或衣物上沾到了血液及廢液,應(yīng)立刻用清水沖洗并進行消毒處理。

5.如果眼睛被濺入血液及廢液,用大量的清水沖洗并采取必要的醫(yī)療措施。6.如血液標本采用開蓋程序測試,開蓋時應(yīng)防止氣霧膠污染環(huán)境。7.所有檢查過的血液樣本及有關(guān)的廢棄物,都會給您帶來潛在的危險或生物污染。所有廢棄樣本及廢棄物的處理方法同血液標本的處理程序。

十三、變異潛在來源

1.嚴重的黃疸或脂血標本可使血紅蛋白結(jié)果假性增高。

2.標本溶血可使紅細胞結(jié)果假性減低、血小板計數(shù)結(jié)果假性增高。

3.紅細胞冷凝集可使紅細胞和血小板計數(shù)結(jié)果假性減低,白細胞假性增高(電阻抗法)或假性減低(激光法)和MCV假性增高。

4.冷凝球蛋白或冷纖維蛋白增高使白細胞和血小板計數(shù)結(jié)果假性增高。5.有血小板凝集者可使血小板計數(shù)結(jié)果假性減低。6.試劑的溫度。

7.檢測器微孔不完全堵塞。

8.標本采集后放置的環(huán)境溫度過高、時間過長。9.試劑變質(zhì)或過了有效期而未發(fā)現(xiàn)等。

十四、白細胞五分類血細胞分析儀的白細胞分類篩選原則

1.血液病患者的血標本,無論血細胞計數(shù)結(jié)果和細胞分布圖是否正常,一律做血涂片鏡檢。

2.無論初診或復(fù)診患者的血標本,只要白細胞、紅細胞/血紅蛋白和血小板計數(shù)結(jié)果正常,白細胞散射圖、紅細胞和血小板直方圖均正常且無報警者,可不做血涂片鏡檢。

3.初診患者,其白細胞、紅細胞/血紅蛋白、血小板計數(shù)結(jié)果,白細胞散射圖、紅細胞和血小板直方圖中有一項異常或報警時,均需做血涂片鏡檢。

4.復(fù)診患者,其血細胞計數(shù)結(jié)果與前一次結(jié)果無明顯變化,但白細胞散射圖異常且有報警時,需做血涂片鏡檢。

5.復(fù)診患者,其血細胞計數(shù)結(jié)果與前一次檢測結(jié)果相比有變化,但與臨床診斷或治療相符;而且白細胞散射圖正常無報警時,可不做血涂片鏡檢。

十五、異常結(jié)果處理

血細胞分析儀測試的血常規(guī)結(jié)果異常需與臨床診斷相符,不符合的結(jié)果應(yīng)復(fù)查。

十六、報告時間與標本保存

1.病房患者的血常規(guī)檢驗結(jié)果報告單應(yīng)于當日下午4:00前由衛(wèi)生員發(fā)回病房科室。2.檢驗后的血常規(guī)標本應(yīng)放置室溫保存至次日上午8:00丟棄。

十七、實驗方法的溯源

見SF-3000、MEK-6108K、BC-2000和ADVIA-120血細胞分析儀使用說明書。

第四篇:檢驗項目標準操作規(guī)程

一 生物安全制度

1、醫(yī)務(wù)人員

1每1-2年做體檢一次并接受乙肝疫苗接種。

2每1—2年檢查乙肝病毒抗原抗體水平發(fā)現(xiàn)乙型肝炎者應(yīng)進行隔離治 療。

3檢驗人員進入實驗室應(yīng)穿好工作服不允許在實驗室進食和吸煙。

4檢驗人員在工作前后和被污染后應(yīng)用肥皂和流水清洗必要時由消 毒液浸泡雙手每季度抽查檢驗人員的手并做細菌培養(yǎng)一次。

2、環(huán)境消毒隔離

1實驗室應(yīng)分為清潔區(qū)和操作區(qū)清潔區(qū)要注意保護不受污染。操作有 氣溶膠可能的標本應(yīng)配置生物安全柜及其它防護設(shè)置如紫外線燈排氣 扇等操作區(qū)的工作臺及地面每日用消毒液擦拭一次有污染時隨時消毒 每周大掃除一次。

2采血室每日操作前用清水擦拭操作臺一次采血結(jié)束用消毒液擦拭操 作臺、桌子和地面一次紫外線每日照射消毒一次每月空氣細菌培 養(yǎng)一次紫外線強度定期測定。并做記錄。

3、各種檢驗標本的收集送檢必須用相應(yīng)指定的容器留取不得外溢污染。

4、靜脈及末稍采血應(yīng)嚴格執(zhí)行消毒隔離措施靜脈抽血做到一人一針一筒 一巾一帶一消毒所用止血帶及紙墊每日消毒末稍采血一人一片一管 杜絕交叉污染。

5、一次性醫(yī)用器具包括采血針注射器、尿杯、血紅蛋白微量吸血吸管應(yīng) 嚴格做好領(lǐng)發(fā)登記注射器先浸泡消毒后由供應(yīng)室一對一調(diào)換統(tǒng)一處 理其余一次性器具浸泡消毒后裝入污物袋送焚燒爐焚燒。

6、檢驗人員在進行靜脈抽血時應(yīng)嚴格遵守無菌操作技術(shù)操作前必須洗手必 須戴好帽子與口罩操作臺和手被污染時應(yīng)用肥皂和流水認真洗手必要 時用消毒液浸泡雙手酒精、碘酒瓶每周更換消毒兩次。

7、凡是肝炎病人和透析病人的血液標本及疑有黃疸的血標本都視為肝炎的 污染標本應(yīng)貼上紅色危險標記放在規(guī)定區(qū)域內(nèi)引起警惕和防止擴大 污染面。

8、溢出試管外的血液應(yīng)立即用碘酒棉簽擦拭干凈注意防止玻璃碎片刺傷 手并注意試管有無破裂。

9、當針頭和碎玻璃刺傷手時,用流水沖洗,擠出血水,應(yīng)立即用碘酒消毒局部。

10、實驗室操作時應(yīng)戴上手套。吸取標本離心振蕩等應(yīng)嚴格按操作規(guī)程防 止自身和實驗室受污染。

11、已檢查標本與容器分別浸泡于施康1號消毒液(2000mg/L)中兩小時后標 本傾棄一次性容器送焚燒重復(fù)使用的經(jīng)清洗消毒和滅菌后再使用均 要有記錄。有毒化學(xué)試劑和放射性試劑使用后要經(jīng)無害化處理防止污染 環(huán)境。

12、菌種、毒種按《傳染病防治法》進行管理。

13、三級醫(yī)院必須設(shè)置清潔區(qū)污染區(qū)操作有氣溶膠可能的標本應(yīng)配置生物 安全柜及其它防護設(shè)置如紫外線燈排氣扇等。

14、非科室工作人員不準進入實驗室外來人員參觀需經(jīng)科主任同意方可進入

二 質(zhì)量管理制度

1、各專業(yè)實驗室根據(jù)省臨檢中心的有關(guān)規(guī)定開展實驗室內(nèi)的質(zhì)量控制并 制定有關(guān)措施。對室 內(nèi)質(zhì)控應(yīng)每日有記錄對失控情況有糾正方法有預(yù) 防性措施對于目前尚無完整的室內(nèi)質(zhì)控體系的實驗室應(yīng)積極創(chuàng)造條 件建立室內(nèi)質(zhì)量控制體系。

2、各專業(yè)實驗室必須參加部、省的各次室間質(zhì)控活動對每次質(zhì)控評價應(yīng)有 記錄。

3、計量儀器包括分析天平天平、分光光度計等應(yīng)定期校正每年一 次。

4、大型分析儀器必須專人負責有使用維修記錄。

5、商品化的試劑盒的申購由各專業(yè)室的組長負責申報每月一次報科主任審 批不得使用過期無批準文號的劣質(zhì)試劑進貨統(tǒng)一由科室管理自配 試劑須嚴格校正后方可使用。

6、各專業(yè)實驗室必須建立完整的操作程序并應(yīng)嚴格按程序執(zhí)行。

7、當日發(fā)出的全部檢驗報告單須經(jīng)當日科室總值班人員嚴格審核后方可發(fā) 出。

8、科室在完成嚴格的室內(nèi)、室間質(zhì)量控制體系的同時應(yīng)逐步建立全面質(zhì)量 控制體系對標本的采集運送保存等納入嚴格的管理之中。每日送檢 的標本應(yīng)簽收。

9、急診檢驗應(yīng)嚴格按照急診制度執(zhí)行。

三 安全制度

1、菌種、毒種、劇毒品及貴重儀器物品指定專人保管、有防盜措施建立帳 冊記錄進出數(shù)量定期檢查制度。劇毒藥品專人保管由科室主任主 管試劑的同志負責放保險柜領(lǐng)用時須有主管同志在場作好領(lǐng)用登 記。

2、易燃物品專柜存放普通試劑按常規(guī)分類存放并由科室主任和主管試劑 同志負責注意用電安全特別是電爐子、大烤箱、火焰光度計由各科 使用同志負責安全嚴防火災(zāi)。

3、對工作中可能發(fā)生的觸電、失火、玻璃割傷、針頭刺傷、燒傷、不慎中 毒、傳染性標本的污染各實驗室應(yīng)有應(yīng)急處理的方法有關(guān)人員均應(yīng)熟 悉。

4、用電設(shè)備、電源線路、CO2氣體、給排水系統(tǒng)的安全性符合使用要求不 能帶電檢修儀器。

5、使用強酸堿腐蝕品時應(yīng)在適當?shù)沫h(huán)境下正確操作防止腐蝕、灼傷、中 毒、火災(zāi)和爆炸等事件發(fā)生。

6、注意安全隨手隨時關(guān)門下班時要做好水電門的安全保衛(wèi)工作防 火防盜防水。

7、科室安全保衛(wèi)負責鄭軍

四

試劑管理制度

1、各專業(yè)實驗室應(yīng)根據(jù)各自的工作需要按月向科主任申報所購試劑并應(yīng) 做到及時盤存清點入庫做到心中有數(shù)。

2、所有試劑的申請進貨一律由科室統(tǒng)一管理嚴格按市衛(wèi)生局招標要求執(zhí) 行做到三證齊全。無三無產(chǎn)品。

3、各專業(yè)實驗室應(yīng)對試劑庫存定期檢查不使用過期變質(zhì)的試劑。

4、自配試劑須以嚴格校正后方可使用。

5、試劑的保存應(yīng)嚴格按照要求以保證有效期內(nèi)能有效地使用杜絕浪費現(xiàn) 象。

6、試劑外借一律須經(jīng)科主任同意方可執(zhí)行。

7、劇毒試劑必須由科主任和負責科室保衛(wèi)的同志負責保存放保險箱內(nèi)使

7、用時應(yīng)有兩人在場并做好登記。

8、易燃易爆試劑應(yīng)分開存放遠離火源和電源。

9、供應(yīng)商所送的試劑必須先經(jīng)藥庫清點才能接受檢驗科人員清點后必須在

10、貨單上簽字有出入者必須向科主任或試劑管理員、組長報告再將貨單

11、交給試劑管理員以便月底結(jié)帳。

12、科室試劑管理員鐘梁

13、六標本管理制度14、15、一、標本采集 16、1、按每個項目要求告訴病人、病房護士或本室采血人員最佳采血時間、采血

17、前空腹或飲食注意、用藥情況、活動情況、體位等。18、2、明確抗凝劑種類、抗凝劑與血的比例、抽血 19、3、體液、分泌物、細菌培養(yǎng)標本按要求留足量、及時送檢。

20、二、標本運送 21、1、運送過程中原則上帶蓋不能用棉花等吸水物品以防倒翻和溢出或雨

22、淋。凡含傳染源的標本必須帶蓋外套尼龍袋以防溢出而污染環(huán)境。23、2、不能劇烈振蕩以防標本溶血和有形成分破壞。24、3、必須及時送檢。

25、三、標本接收 26、1、必須認真核對標本上病人姓名、病區(qū)、床號、聯(lián)號與申請單符合。27、2、必須觀察標本的量、標本類型、是否抗凝或有小凝塊、細菌培養(yǎng)標本是否符

28、合無菌要求。是否有明顯溶血或脂濁。29、3、不符要求的標本必須及時填寫退回理由單及時反饋臨床。

30、四、標本檢測 31、1、在檢測每一過程中都應(yīng)復(fù)核標本接收過程中的每一步驟。32、2、在標本足夠的情況下不能浪費、隨意丟棄或損壞標本。

33、五、標本儲存 34、1、當天不能完成的標本必須分離血清按要求儲存在2℃-8℃或-20℃。35、2、當天檢測完成的標本血常規(guī)儲存在2℃-8℃1天以上生化免疫儲在2℃-36、8℃7天以上腦脊液、胸腹水等重要標本儲存在2℃-8℃7天以上。37、3、特殊標本按要求保存。

38、六、標本處理

39、檢驗標本先用含2-3g/L有效氯消毒靈浸泡半小時再煮沸清洗試管烘 干備用。用雙層專用黃色醫(yī)用垃圾袋專人收集所有廢棄醫(yī)用垃圾。送專門存放醫(yī)

用垃圾處統(tǒng)一處理。并做好登記。

一、檢驗科檢測項目標準操作規(guī)程

A、臨檢室

A1、血常規(guī)檢驗標準操作規(guī)程

A2、嗜酸性粒細胞直接計數(shù)標準操作規(guī)程

A3、紅細胞沉降率測定標準操作規(guī)程

A4、血型鑒定標準操作規(guī)程

A5、尿常規(guī)標3準操作規(guī)程

A6、一小時尿沉渣計數(shù)標準操作規(guī)程

A7、尿乳糜定性檢查標準操作規(guī)程

A8、大便常規(guī)標準操作規(guī)程

A9、蟲卵及包囊濃縮檢查標準操作規(guī)程

A10、隱血試驗標準操作規(guī)程

A11、腦脊液檢驗標準操作規(guī)程

A12、漿膜腔積液檢查標準操作規(guī)程

A13、精液檢查標準操作規(guī)程

A14、前列腺液檢查標準操作規(guī)程

A15、陰道分泌物檢查標準操作規(guī)程

A16、胃液檢查標準操作規(guī)程

A、檢室

A1、血常規(guī)檢驗

1標本

用EDTA-K 2 0.2ul抗凝靜脈血1ml,門診病人在CD-1700儀器上做三分類 測定,住院病人在COULTER HMX儀器上做五分類測定。

2試劑及儀器

COULTER HMX五分類血球分析儀及配套試劑質(zhì)控用COULTER 4C PLUS 全血質(zhì)控品COULTER HMX五分類血分析儀及配套試劑質(zhì)控用 COULTER 5C 全血質(zhì)控品。血液細胞自動化分析儀介紹 

3操作

1門診

a)收到血常規(guī)標本后查看核對檢驗項目立即編號放混勻器上混勻 3分鐘。

b)如有血型立即用玻片法和試管法測定血型輸入電腦。

c)血標本在ABBOT CD-1700上檢測結(jié)果入庫。

d)對于中間細胞比較多的應(yīng)當手工涂片染色分類對于血小板等圖形不 好或結(jié)果異常較大的應(yīng)手工復(fù)查。

e)結(jié)果核對后在半小時內(nèi)報告。

2病房

a)采集血常規(guī)標本后立即編號試管加蓋后放于專用試管架上放入 HMX上自動混勻 b)如有血型用玻片法和試管法測定血型輸入電腦。

c)血標本在COULTER HMX上機檢測結(jié)果入庫。

d)對于分類圖形不好的結(jié)果應(yīng)當手工涂片染色分類對于血小板等結(jié)果 圖形不好或結(jié)果異常較大的應(yīng)手工復(fù)查。復(fù)查條件

e)結(jié)果核對后簽發(fā)報告單。如果急診則電話報告有血型的話通知 病房來拿報告單。血液項目

5特殊規(guī)定

在檢驗血常規(guī)時,科室所有工作人員及同志如發(fā)現(xiàn)以下樣本結(jié)果過高可過低,務(wù)必 作登記,復(fù)查和及時報告,以備查詢。

1.血紅蛋白低于100g/L.2.白細胞低于3000/ul.3.血小板低于8萬/ul.4.發(fā)現(xiàn)白細胞分類異常圖形時.5.發(fā)現(xiàn)其中一項過高時,或是臨床指定要鏡檢時.6臨床意義

61WBC計數(shù)

參考范圍

4-10 3 10 9 /L

1、增加

(l)生理性初生兒、妊娠末期、分娩期、經(jīng)期、飯后、劇烈運動 后、冷水浴后及極度恐懼與疼痛等。

5特殊規(guī)定

在檢驗血常規(guī)時,科室所有工作人員及同志如發(fā)現(xiàn)以下樣本結(jié)果過高可過低,務(wù)必 作登記,復(fù)查和及時報告,以備查詢。

1.血紅蛋白低于100g/L.2.白細胞低于3000/ul.3.血小板低于8萬/ul.4.發(fā)現(xiàn)白細胞分類異常圖形時.5.發(fā)現(xiàn)其中一項過高時,或是臨床指定要鏡檢時.6臨床意義

61WBC計數(shù)

參考范圍

4-10 3 10 9 /L

1、增加

(l)生理性初生兒、妊娠末期、分娩期、經(jīng)期、飯后、劇烈運動 后、冷水浴后及極度恐懼與疼痛等。

A3、紅細胞沉降率測定

[標本]

200ul枸櫞酸鈉抗凝靜脈血1.1ml顛倒混勻。[原理]

離體抗凝血液置于特制刻度測定管(魏氏法血沉管)內(nèi)垂直立于室 溫中一定時間時觀察上層血漿高度的毫米數(shù)值報告之。

[儀器及試劑]

MONITOR JI血沉儀、專用血沉管

109mmoIL(32g/L)枸櫞酸鈉溶液取含二分子結(jié)晶水的枸櫞酸鈉(分子量29412)328用蒸餾水溶解稀釋至100ml。此液在室 溫保存不得超過2周。

[操作]

1專用血沉管1支加抗凝劑02ml。

2靜脈采血后取下針頭加血至刻度顛倒混勻。

3用血沉管(300mm325mm)吸取上述混勻血液至“0”刻度處拭去管外 附著的血液將血沉管直立在血沉架上。MONITOR JI操作

4記時室溫中靜置lh讀出血沉儀上的讀數(shù)即是血沉值。

[參考值]

男:15mm60min 女20mm60min [附注]

1紅細胞在單位時間內(nèi)下沉的速度與血漿蛋白的量和質(zhì)血漿中脂類的量 和質(zhì)紅細胞的大小與數(shù)量是否成串錢相聚以及血沉管的內(nèi)徑、清潔 度、放置位置是否垂直室溫高低等因素都有關(guān)系。

2要求

(l)標本采集時避免脂肪血。

(2)血液和抗凝劑比例要準確。

(3)血沉管內(nèi)徑要標準(25mm)放置要垂直。

(4)做血沉的標本要在采集后3h內(nèi)測定并充分混勻。

3室溫過低、過高和貧血時對結(jié)果都有影響。為此血沉應(yīng)盡量 放在18—25℃室溫下測定。室溫過高時血沉加快可以按溫度系 數(shù)校正。室溫過低時血沉減慢無法校正。

A4、血型鑒定

1ABO血型鑒定

根據(jù)紅細胞上有或無A抗原或和B抗原將血型分為A型、B型、AB型及O型 4種。可利用紅細胞凝集試驗通過正、反定型準確鑒定ABO血型。所謂正定 型是用已知抗—A和抗—B分型血清來測定紅細胞上有無相應(yīng)的A抗原或和B 抗原所謂反定型是用已知A細胞和B細胞來測定血清中有無相應(yīng)的抗—A或 和抗—B。

[試劑和材料]

1抗—A(B型血)、抗—B(A型血)及抗—A十B(O型血)分型血清制備方 法見本節(jié)附注

25A、B及O型試劑紅細胞鹽水懸液制備方法見本節(jié)附注

3受檢者血清

4受檢者5紅細胞鹽水懸液制備方法見本節(jié)附注。

[方法] 2玻片法

(1)取清潔玻片1張(或白瓷板1塊)用蠟筆劃成方格標明抗-A、抗-B 和抗-A十B分別用滴管滴加抗-A、抗-B和抗-A十B分型血清 l滴 于標明的方格內(nèi)再各加受檢者2紅細胞懸液1滴混和。

(2)另取潔凈玻片一張(或白瓷板1塊)用蠟筆劃成方格標明A細胞、B細胞和O細胞用滴管各加受檢者血清1滴再分別用滴管滴加 A、B和O型試劑紅細胞懸液1滴。

(3)將玻片(或白瓷板)不斷輕輕轉(zhuǎn)動使血清與細胞充分混勻連續(xù)約 15min以肉眼觀察有無凝集(或溶血)反應(yīng)。如以玻片作試驗時也 可用低倍鏡觀察結(jié)果。附注]

1分型血清質(zhì)量性能符合要求用畢后應(yīng)放置冰箱保存以免細菌污染。

2試劑紅細胞以3個健康者同型新鮮紅細胞混和用生理鹽水洗滌1次以除 卻存在于血清中的抗體及可溶性抗原。

3試管、滴管和玻片必須清潔干燥防止溶血。

4操作方法應(yīng)按規(guī)定一般應(yīng)先加血清然后再加紅細胞懸液以便容易核實 是否漏加血清。

5按理IgM抗-A和抗-B與相應(yīng)紅細胞的反應(yīng)溫度以4℃為最強但為了防止 冷凝集現(xiàn)象的干擾一般仍在室溫(20—24℃)內(nèi)進行試驗37℃可使反應(yīng) 減弱。

6離心時間不宜過長或過短速度不宜過快或過慢以防假陽性或假陰性結(jié) 果。

7觀察時應(yīng)注意紅細胞呈特異性凝集、繼發(fā)性凝固以及緡錢狀排列的區(qū)別。

8判斷結(jié)果后應(yīng)仔細核對、記錄避免筆誤。A5、尿常規(guī)

1尿液標本處理

[收集]

1應(yīng)留取新鮮尿以清晨第一次尿為宜較濃縮條件恒定便于對 照。急診患者可隨時留取。

2使用清潔有蓋容器(一次性容器為好)。

3容器上應(yīng)貼上檢驗條碼。

4尿標本應(yīng)避免經(jīng)血、白帶、精液、糞便等混入。此外還應(yīng)注意避免煙灰、糖紙等異物混入。

5標本留取后應(yīng)及時送驗以免細菌繁殖、細胞溶解等。

6尿膽原等化學(xué)物質(zhì)可因光分解或氧化而減弱。

[防腐與保存]

1冷藏防腐劑隨檢驗?zāi)康亩ǐ惨话惴?℃冰箱可保存6h。

2甲醛用于管型、細胞的防腐按400g兒甲醛05ml100ml尿加 入。由于甲醛具有還原性不適于尿糖等化學(xué)成分檢查。

3甲苯(或二甲苯)用于尿糖、尿蛋白的防腐按甲苯05ml100m1 尿加入。

4麝香草酚用于檢查尿中化學(xué)成分及細菌的防腐劑每100ml加入 018。

[標本處理]

收到門診標本后核對檢驗項目后倒入普通長試管內(nèi)。液面距管中約1cm

檢驗后處理]

標本檢驗后必須經(jīng)過消毒處理后才能排放入下水道內(nèi)。所用盛尿容器及 試管等須經(jīng)30—50g兒漂白粉澄清液或10g/L次氯酸鈉液中浸泡2h也可 用5gL過氧乙酸浸泡30—60min再用清水沖洗干凈。

2常規(guī)檢查

(一)、尿 量

隨氣候、出汗量、飲水量等不同而異一般健康成人約為10—15L 24h即1m1(h/kg體重)小兒按k8體重計算尿量較成人多3—4倍。

(二)、顏 色

根據(jù)尿的顏色進行報告淡黃色、深黃色、褐黃色、紅色、乳白色、深紅 如濃茶、紅茶色、乳白色

(三、透明度

分為透明、微渾、渾濁、明顯渾濁、乳糜狀等。

3生化檢查

[儀器及試劑]

儀器

盈東URISCAN

試劑

盈東尿十一聯(lián)試紙

[操作]

把試紙條全部浸沒于尿液中約3-5秒后取出放于盈東URISCAN的試紙條架上測定。A8、大便常規(guī)

1標本采集

1采集糞便標本的方法因檢查目的不同而有差別如一般檢驗留取新鮮 指頭大小(約5g)即可放入干燥、清潔、無吸水性的有蓋容器內(nèi)送 檢標本容器最好用內(nèi)層涂臘的硬紙盒便于檢查后焚毀。血吸蟲毛 蝴孵化則留全量新鮮便(不少于30g)。細菌檢查的糞便標本應(yīng)收集于滅 菌封口的容器內(nèi)勿混入消毒劑及其它化學(xué)藥品。

2檢查蟯蟲卵需要用軟玻璃紙拭子在清晨排便前由肛門四周拭取標 本也可用棉拭子拭取但均須立即鏡檢。

3檢查阿米巴滋養(yǎng)體應(yīng)于排便后立即檢查。冬季需采取保溫措施迅 速送檢。

4不應(yīng)該采取尿壺或便盆中的糞便標本。若標本中混入尿液可使柔弱 的原蟲致死。用白明膠膜法檢查糞便中的胰蛋白酶活性時可因尿液 中存在溶解白明膠的物質(zhì)而導(dǎo)致其檢查結(jié)果錯誤的增高。糞便標本中 也不可混入植物、泥土、污水等因腐生性原蟲、真菌抱子、植物種 子、花粉易混淆實驗結(jié)果。

5盛糞便標本的容器必須有蓋有明顯標記。糞便標本應(yīng)選擇其中膿血 粘液等病理成分若無病理成分可多部位取材。采取標本后應(yīng)在 一小時內(nèi)完成檢查否則可因9H及消化酶等影響而使糞便中細胞成 分破壞分解。

6檢查膽石、胰石、寄生蟲體及蟲卵計數(shù)應(yīng)收集24h糞便送驗。

7隱血試驗應(yīng)囑患者收集標本前3日禁食動物性食物。連續(xù)檢查3 天并選取外表及內(nèi)層糞便。收集標本后須迅速進行檢查以免因長 時間放置使隱血反應(yīng)的敏感度降低。

8糞膽原定量檢查應(yīng)收集二天的糞便混合稱量從其中取出約20g送 驗。查膽汁成分的糞便標本不應(yīng)在室溫中長時間放置以免陽性率減 低。

9脂肪定量檢查時應(yīng)先食定量脂肪食每天進食脂肪50—1508連續(xù) 6天。從第三天起收集72h糞便也可定時口服色素(剛果紅)作為 留取糞便的指示劑將收集的糞便混合稱量從中取出608左右送 檢。簡易法為在正常膳食情況下收集24h的全部糞便混合稱量 從其中取出約60g送檢測脂肪含量。

10細菌檢驗用標本應(yīng)全部用無菌操作收集。

15、陰道分泌物檢查

陰道分泌物是女性生殖系統(tǒng)分泌的液體其中主要是由陰道分泌的液體。

1PH值

收到標本干棉拭子先用PH試紙測PH值并記錄。

2清潔度

15、陰道分泌物檢查

陰道分泌物是女性生殖系統(tǒng)分泌的液體其中主要是由陰道分泌的液體。

取陰道分泌物用生理鹽水涂片高倍鏡檢查根據(jù)所含白細胞(或膿細 胞)、上皮細胞、桿菌、球菌的多少分成I—Ⅳ度判定結(jié)果見表

第五篇:血液凈化標準操作規(guī)程試題

血液凈化標準操作規(guī)程試題

一、填空:

1、血液凈化室清潔區(qū)包括、、;污染區(qū)包括。

2、、、不得復(fù)用透析器。

3、乙型肝炎和丙型肝炎患者必須 進行感染病區(qū)的機器不能用于患者的治療,應(yīng)配備專門的透析操作用品車。

4、感染患者使用的 和 如病歷、血壓計、聽診器、治療車、機器等應(yīng)有。

5、如果血液污染到透析機應(yīng)立即用濃度的一次性布擦拭去掉血跡后,再用濃度的擦拭消毒機器外部。

6、

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