第一篇:血液常規(guī)檢驗標準操作規(guī)程
昆侖泌尿外科醫(yī)院檢驗科 臨檢室作業(yè)指導(dǎo)書
文件編號;SZKL-LJ-01
版本/修訂號;1/0
主題內(nèi)容
血液常規(guī)檢驗標準操作規(guī)程
生效日期:20150101 頁碼;
血液常規(guī)檢驗標準操作規(guī)程 1.目的: 檢測分析血液中紅細胞、白細胞、血小板、血紅蛋白等的數(shù)量和質(zhì)量,對感染、炎癥、血液系統(tǒng)疾病等進行輔助診斷、監(jiān)測治療效果等。2.檢測項目: 邁瑞B(yǎng)C-2600全自動血球儀上測定血常規(guī)19項。包括:白細胞計數(shù)(WBC)、中性粒細胞數(shù)(Neut#)、淋巴細胞數(shù)(Lymph#)、中間細胞計數(shù)(MID#)、中性粒細胞比率(Neut%)、淋巴細胞比率(Lymph%)、中間細胞比率(MID %)、紅細胞計數(shù)(RBC)、血紅蛋白濃度(Hb)、紅細胞壓積(Hct)、紅細胞平均體積(MCV)、平均血紅蛋白量(MCH)、平均血紅蛋白濃度(MCHC)、紅細胞體積分布寬度變異系數(shù)(RDW-CV)、紅細胞體積分布寬度標準差(RDW-SD)、血小板計數(shù)(PLT)、平均血小板體積(MPV)、血小板體積分布寬度(PDW)、血小板壓積(PCT)。3.原理:
3.1 血細胞(WBC.RBC.PLT)數(shù)量和體積檢測原理:電阻抗法。3.2白細胞分類原理:電阻抗法。白細胞脈沖的大小是由被計數(shù)細胞在溶血素中大小決定的。3.3 血紅蛋白測定:采用氰化高鐵血紅蛋白(HICV)比色法。
3.4 RDW、MCH、MCV、MCHC、MPV、PCT、PDW為換算項目。
3.5 HCT測定原理:血細胞產(chǎn)生的脈沖信號的峰值與RBC容積成正比。4.儀器:
廠商名:深圳邁瑞公司。型號:BC-2600。5.試劑:
廠商名:深圳邁瑞公司。
5.1清洗液:注冊號:粵深藥臨械(準)字2013
7.6 觀察儀器測定結(jié)果及直方圖,必要時應(yīng)手工計數(shù)及白細胞分類。7.7 審核結(jié)果,打印報告。
8.血細胞的顯微鏡檢查(用于對儀器法結(jié)果可疑時的復(fù)核)8.1 鏡檢標準
8.1.1 醫(yī)生明確要求涂片鏡檢;
8.1.2 儀器提示有原始或幼稚細胞、變異淋巴細胞、有核紅細胞等異常需鏡檢; 8.1.3 新生兒標本需涂片鏡檢;
8.1.4 WBC≥20×10^9/L或≤2.0×10^9/L;
8.1.5淋巴細胞≥45%,需做涂片鏡檢,1-4歲兒童且血細胞計數(shù)及他結(jié)果正常者除外; 8.1.6 單核細胞≥15%;
8.1.7 嗜酸性粒細胞≥10%; 8.1.8 嗜堿性粒細胞≥3% 8.1.9 PLT>500×10^9/L或<60×10^9/L; 8.2.0 提示有PLT聚集,需涂片鏡檢; 8.2 鏡檢步驟
8.2.1 血涂片的制備
8.2.1.1 在距載玻片一端1cm的位置滴加約5μl的抗凝血;末梢血直接用干凈玻片蘸取。8.2.1.2 用推片使血液沿其邊緣展開,與載玻片30~40度角進行推片。8.2.1.3 涂片完成后在空氣中自燃晾干。8.2.2 血涂片的染色
8.2.2.1 染色試劑:瑞氏染色液。8.2.2.2 染色步驟
a.用蠟筆在血膜兩頭畫線,然后將血涂片平放在染色架上。b.加瑞氏染液數(shù)滴,以覆蓋整個血膜為宜,染色約1分鐘。c.滴加約等量的緩沖液與染液混合,室溫下染色5-10分鐘。d.用流水沖去染液,待干燥后鏡檢。8.2.2.3 鏡檢觀察要求
a.將濕片在高倍鏡下觀察涂片、染色是否良好,否則重新涂片染色。b.選擇涂片體尾交界、細胞分布均勻不重疊部分進行鏡檢。c.在高倍鏡下辨認細胞不清楚時,必須待玻片干后用油鏡觀察。8.2.2.4 鏡檢觀察的處理
a.根據(jù)儀器報警提示的內(nèi)容,確認鏡下觀察結(jié)果是否與儀器提示一致。
b.發(fā)現(xiàn)原始及幼稚白細胞,則必須進行手工分類;如不能確定細胞種類,則報告異常細胞的比例。
c.如果鏡下發(fā)現(xiàn)有核紅細胞,則必須對白細胞進行校正。
d.如果鏡下觀察有血小板聚集,則必須手工沖池計數(shù)血小板;如果是EDTA﹒K2引起的血小板聚集,可用109mmol/L枸櫞酸鈉抗凝劑采集標本,結(jié)果需要進行換算。
e.多發(fā)性骨髓瘤、冷球蛋白血癥引起的紅細胞聚集,可將血液用儀器稀釋液稀釋3倍,然后37℃水浴箱中10分鐘后,立即上機檢測,結(jié)果需要進行換算。昆侖泌尿外科醫(yī)院檢驗科 臨檢室作業(yè)指導(dǎo)書
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9.參考區(qū)間
中國成年人群血細胞分析參考區(qū)間(靜脈血標本儀器法)測定項目男
女
WBC(×10^9/L)
3.5~9.5
3.5~9.5 Neut(×10^9/L)
1.8~6.3
1.8~6.3 Lymph(×10^9/L)
1.1~3.2
1.1~3.2 Neut%
40~75
40~75 Lymph%
20~50
20~50 RBC(×10^12/L)
4.3~5.8
3.8~5.1
Hb(g/L)
130~175
115~150 HCT(%)
0.40~0.50
0.35~0.45 MCV(fl)
82~100
82~100 MCH(pg)
27~34
27~34 MCHC(g/L)
316~354
316-354 PLT(×10^9/L)
125~350
125~350 10.危急值 測定項目≤≥
WBC(×10^9/L)
1.0
Hb(g/L)
180 PLT(×10^9/L)
600 11.臨床意義
11.1 白細胞計數(shù):
11.1.1 生理性變化:白細胞計數(shù)結(jié)果有明顯的生理性波動,如早晨較低,傍晚較高;餐后較餐前高;劇烈運動、情緒激動時較安靜時偏高;月經(jīng)期、妊娠、分娩、哺乳期亦可增高;新生兒及嬰兒期明顯高于成人。11.1.2 病理性增多,常見于:
11.1.2.1 急生化膿性感染,尤其是革蘭陽性球菌感染(膿腫、腦膜炎、肺炎、扁桃體炎、闌尾炎)
11.1.2.2 某些病毒性感染:傳染性單核細胞增多癥、流行性乙型腦炎等。11.1.2.3 組織損傷:嚴重外傷、大手術(shù)、大面積燒傷、急性心肌梗死等。11.1.2.4 急性大出血 11.1.2.5 白血病
11.1.2.6 惡性腫瘤:肝癌、胃癌、肺癌等。11.1.3
病理性減少,見于:
11.1.3.1 某些感染性疾病,尤其是革蘭氏陰性桿菌感染(傷寒、副傷寒等)。11.1.3.2 某些病毒感染:流感、病毒性肝炎等。11.1.3.3 某些原蟲感染,如瘧疾、黑熱病等
11.1.3.4 某些血液病:再生障礙性貧血、急性粒細胞缺乏癥、巨幼細胞貧血等。11.1.3.5 自身免疫性疾病:SLE、AIDS等。11.1.3.6 脾功能亢進:門脈肝硬化 昆侖泌尿外科醫(yī)院檢驗科 臨檢室作業(yè)指導(dǎo)書 文件編號;SZKL-LJ-01
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11.1.3.7 腫瘤化療、放療及某些藥物(氯霉素、磺胺類藥等)反應(yīng)等。
11.2 中性粒細胞:中性粒細胞增多分生理性和病理性增多。病理性增多可見于急性感染或炎癥、急性失血、急性中毒及惡性腫瘤等;中性粒細胞減少可見于病毒感染、慢性理化損傷、自身免疫性疾病等。
11.3 淋巴細胞:淋巴細胞病理性增多見于某些慢性感染、腎移植手術(shù)后、白血病、再生障礙性貧血、粒細胞缺乏癥等;淋巴細胞減少可見于接觸放射線,應(yīng)用腎上腺皮質(zhì)激素或促腎上腺皮質(zhì)激素,嚴重化膿性感染等情況。11.4 紅細胞和血紅蛋白:
11.4.1減少見于:急、慢性紅細胞丟失過多、紅細胞壽命縮短、造血原料不足、骨髓造血功能減退等;
11.4.2增多見于:真性紅細胞增多癥,肺心病等。
11.5 紅細胞比積:增高可見于大面積燒傷、脫水等血液濃縮情況;減低可見于貧血。11.6 紅細胞體積分布寬度(RDW)
11.6.1用于缺鐵性貧血的診斷和療效觀察,缺鐵性貧血時RDW值增大,當給以鐵劑治療有效時RDW值一過性進一步增大,隨后逐漸降到正常。
11.6.2對小細胞低色索性貧血的鑒別診斷.缺鐵性貧血時RDW值增大而輕型海洋性貧血時RDW值正常。
11.6.3用于對貧血的分類(Bassman MCV/RDW分類法),根據(jù)MCV、RDW值變化共分為6種類型貧血。
A.小細胞均一性貧血:MCV減小,RDW正常,如輕型海洋性貧血。
B.小細胞不均一性貧血:MCV減小,RDW增大,如缺鐵性貧血。
C.正細胞均一性貧血:MCV、RDW均正常,如慢性病所致貧血。
D.正細胞不均一性貧血:MCV正常,RDW增大,如早期缺鐵性、營養(yǎng)性貧血。
E.大細胞均一性貧血:MCV增大,RDW正常,如再生障礙性貧血。
F.大細胞不均一性貧血MCV、RDW均增大,如巨幼細胞性貧血。
11.7 MCV、MCH、MCHC:這三個參數(shù)通常都用于各型貧血的診斷,具體應(yīng)用如下表: 貧血類型
MCV(82~100)
MCH(27~34)MCHC(316~354)
常見原因及疾病
正常細胞性貧血正常正常正常急性失血、急性溶血、再生障礙性貧血、白血病等
大細胞性貧血>正常>正常正常葉酸、維生素B12缺乏或吸收障礙 單純小細胞性貧血<正常<正常正常慢性炎癥、尿毒癥
小細胞低色素性貧血<正常<正常<正常鐵缺乏、維生素B6缺乏、珠蛋 白肽鏈合成障礙、慢性失血
11.8 血小板:血小板數(shù)量病理性減低見于性白血病、再障、脾亢、血小板減少性紫癜、敗血癥等;增高見于慢性白血病、真性紅細胞增多癥、急性化膿性感染、脾切除、溶血性貧血等。
11.9 MPV:研究表明MPV的大小與PLT的多少呈非線性負相關(guān),故在分析MPV的臨床意義時應(yīng)結(jié)合PLT的變化來考慮。
11.9.1鑒別血小板減少癥的病因:骨髓損傷導(dǎo)致血小板減少時,MPV下降;當血小板在外周血中破壞增多導(dǎo)致血小板減少時,MPV增大;當血小板分布異常導(dǎo)致血小板減少時,MPV正常。
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11.9.2 MPV增高可作為骨髓功能恢復(fù)的較早期指標。當骨髓功能衰竭時,MPV與PLT同時持續(xù)下降,骨髓抑制越嚴重,MPV越小,當骨髓功能恢復(fù)時,MPV值的增大先于PLT數(shù)值的增高。
11.9.3血栓前狀態(tài)或血栓性疾病時MPV常增高。
12.0 PCT的臨床應(yīng)用報道尚少。在血小板增多癥、慢性粒細胞性白血病早期PCT常增大。12.1 PDW的增大可能與骨髓巨核細胞的倍體數(shù)增大等有關(guān),其臨床應(yīng)用尚較少。12.注意事項:
12.1 采血時,加入到抗凝管后,應(yīng)注意充分混勻,避免血液凝固。混勻時,動作要輕,避免血液有形成分破壞。
12.2 樣本測定前,應(yīng)注意充分混勻,方法如下:①將血樣瓶口朝上置于操作者雙手掌心,雙手來回搓動10次,動作要連貫。②顛倒小瓶,使瓶口朝下,將血樣置于操作者雙手掌心,雙手來回搓動10次。③重復(fù)①和②步驟8次。④輕輕顛倒混勻1分鐘左右。12.3 為保證結(jié)果準確性,應(yīng)做好儀器的保養(yǎng)和校準(見保養(yǎng)和校準程序)。12.4 儀器有報警提示或直方圖有異常時,應(yīng)進行手工方法復(fù)查。當WBC>1O.O X10^9/L或<3.0X10^9/L時,應(yīng)推片瑞氏染色,鏡下復(fù)查白細胞分類、形態(tài)。當RBC<3.0X10^9/L或PLT<50x10^9/L時,應(yīng)進行手工方法鏡檢復(fù)查。12.5 建議使用儀器配套的試劑。
12.6 樣本應(yīng)在采血后2分鐘至4小時內(nèi)檢測完成。
12.7 血液與抗凝劑的比例要適當,lml血液用1.5-2.0mg的EDTA-K2抗凝。
12.8 MID包括單核細胞、嗜酸細胞、嗜堿細胞、幼稚細胞;當MXD>13%時,應(yīng)推片瑞氏染色,鏡下復(fù)查白細胞分類、形態(tài)。12.9失控處理:當出現(xiàn)失控現(xiàn)象時,按失控處理程序,尋找失控原因,并扣留該批檢測結(jié)果,待查明失控原因并排除后重測樣本,然后才發(fā)出報告。13.參考文獻 11.1尚紅、王毓
三、申子瑜主編,全國臨床臨驗操作規(guī)程(第4版),人民衛(wèi)生出版社,2015.
第二篇:血液常規(guī)檢驗標準操作規(guī)程
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血液常規(guī)檢驗標準操作規(guī)程
1.目的:檢測分析血液中紅細胞、白細胞、血小板、血紅蛋白的數(shù)量和質(zhì)量,對感染、炎癥、血液系統(tǒng)疾病等進行輔助診斷、監(jiān)測治療效果等。
2.檢測項目:紅細胞計數(shù)、血紅蛋白、紅細胞比積、平均紅細胞體積、平均紅細胞血紅蛋白含量、平均紅細胞血紅蛋白濃度、白細胞計數(shù)、白細胞分類、血小板計數(shù)。
3.標本的采集與運送
3.1 標本類型:靜脈血或手指末梢血。3.2標本要求:標本用EDTA-K2 抗凝; 靜脈血標本量應(yīng)達到2ml;末梢血20μl。3.3標本運送:室溫運送,4小時內(nèi)完成檢測。
3.4標本拒收標準:嚴重溶血、凝固、血量少、無條碼、無標識的血液標本不能進行檢測。
4.標本的檢測 儀器及試劑
4.1 儀器:深圳mindrary公司BC—5100全自動血液細胞分析儀。試劑:由mindrary公司提供包括LH溶血劑、LEO(Ⅰ)溶血劑、LBA溶血劑、LEO(Ⅱ)溶血劑、清潔液、稀釋液、探頭清潔液等配套試劑。
4.1.1 檢測原理
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采用流式細胞技術(shù),通過檢測光學(xué)信號進行白細胞計數(shù)及白細胞分類測定;雙鞘流電阻原理進行紅細胞與血小板測定;HiCN-HGB法檢測血紅蛋白。
4.1.2 操作步驟 4.1.2.1開放-全血模式
a.在儀器主界面點擊“計數(shù)”,進入計數(shù)界面。
b.點擊計數(shù)界面“模式”,在彈出的對話框中選擇“開放全血模式”。輸入分析標本的試管號,點擊“CBC+DIFF測量模式”。
c.上下顛倒試管將試管內(nèi)容物充分混勻,輕輕取下蓋子,防止血液濺出。
d.將試管放到采樣針下,按吸樣鍵,蜂鳴器響后移走試管,儀器自動執(zhí)行樣本分析。
e.分析結(jié)束,結(jié)果顯示在屏幕的分析結(jié)果區(qū)同時自動傳入電腦。4.1.2.2自動-全血模式
a.在儀器主界面點擊“計數(shù)”,進入計數(shù)界面。
b.點擊計數(shù)界面“工作模式”,在彈出的對話框中點擊模式項的“自動—全血”按鈕,進樣模式為自動進樣,血樣模式為全血。點擊“CBC+DIFF”測量模式。
c.在“管架號”、“試管號”編輯框中輸入起始樣本的對應(yīng)管架號和試管號。點擊“確定”按鈕,保存輸入內(nèi)容并返回計數(shù)界面。
c.將分析標本試管放入對應(yīng)的試管位,將試管架放入進樣器右槽。
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貴州省盤縣中醫(yī)院檢驗科SOP文件 d.點擊計數(shù)界面“開始計數(shù)”,至分析結(jié)束。e.分析完畢,結(jié)果直接傳入電腦。4.1.3 室內(nèi)質(zhì)量控制
4.1.3.1 質(zhì)控品:由mindrary公司提供的配套質(zhì)控品。4.1.3.2 操作方法:選擇“開放—全血”模式,質(zhì)控品編號9000,計數(shù)狀態(tài)為綠色圖標。將充分混勻的質(zhì)控品放到采樣針下,使采樣針可吸入混勻后的質(zhì)控物。
按吸樣鍵,聽到蜂鳴器響后移開質(zhì)控物。質(zhì)控分析結(jié)束后,質(zhì)控結(jié)果自動傳入電腦。
5.血細胞的顯微鏡檢查 5.1 鏡檢標準
5.1.1 醫(yī)生明確要求涂片鏡檢;
5.1.2 儀器提示有原始或幼稚細胞、變異淋巴細胞、有核紅細胞等異常需鏡檢;
5.1.3 新生兒標本需涂片鏡檢; 5.1.4 WBC≥20×109/L或≤2.0×109/L;
5.1.5淋巴細胞≥45%,需做涂片鏡檢,1-4歲兒童且血細胞計數(shù)及他結(jié)果正常者除外;
5.1.6 單核細胞≥15%; 5.1.7 嗜酸性粒細胞≥10%; 5.1.8 嗜堿性粒細胞≥3% 5.1.9 PLT>500×109/L或<60×109/L;
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貴州省盤縣中醫(yī)院檢驗科SOP文件 5.2.0 提示有PLT聚集,需涂片鏡檢; 5.2 鏡檢步驟 5.2.1 血涂片的制備
5.2.1.1 在距載玻片一端1cm的位置滴加約5μl的抗凝血;末梢血直接用干凈玻片蘸取。
5.2.1.2 用推片使血液沿其邊緣展開,與載玻片30~40度角進行推片。
5.2.1.3 涂片完成后在空氣中自燃晾干。5.2.2 血涂片的染色
5.2.2.1 染色試劑:瑞氏快速染液。5.2.2.2 染色步驟
a.干后的血涂片加上瑞氏染液,染色約1分鐘。b.再加入等量的緩沖液,染色5~10分鐘。c.清水沖洗后,待干后鏡檢。5.2.2.3 鏡檢觀察要求
a.將濕片在高倍鏡下觀察涂片、染色是否良好,否則重新涂片染色。
b.選擇涂片體尾交界、細胞分布均勻不重疊部分進行鏡檢。c.在高倍鏡下辨認細胞不清楚時,必須待玻片干后用油鏡觀察。5.2.2.4 鏡檢觀察的處理
a.根據(jù)儀器報警提示的內(nèi)容,確認鏡下觀察結(jié)果是否與儀器提示一致。
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b.發(fā)現(xiàn)原始及幼稚白細胞,則必須進行手工分類;如不能確定細胞種類,則報告異常細胞的比例。
c.如果鏡下發(fā)現(xiàn)有核紅細胞,則必須對白細胞進行校正。d.如果鏡下觀察有血小板聚集,則必須手工沖池計數(shù)血小板;如果是EDTA﹒K2引起的血小板聚集,可用109mmol/L枸櫞酸鈉抗凝劑采集標本,結(jié)果需要進行換算。
e.多發(fā)性骨髓瘤、冷球蛋白血癥引起的紅細胞聚集,可將血液用儀器稀釋液稀釋3倍,然后37℃水浴箱中10分鐘后,立即上機檢測,結(jié)果需要進行換算。
6.生物參考區(qū)間
測定項目 男 女 新生兒 WBC(×109/L)4.0~10.0 4.0~10.0 15.0~20.0 RBC(×1012/L)4.0~5.5 3.5~5.0 6.0~7.0 Hb(g/L)120~160 110~150 170~200 HCT(%)40.0~50.0 35.0~45.0 38~68 MCV(fl)80~100 80~100 95~125 MCH(pg)27.0~34.0 27.0~34.0 30~42 MCHC(g/L)320~360 320~360 300~340 PLT(×109/L)100~300 100~300 100~360 7.白細胞分類計數(shù)參考值
分類百分率(%)絕對值(×109/L)中性粒細胞50~70 2~7
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貴州省盤縣中醫(yī)院檢驗科SOP文件 淋巴細胞 20~400.8~4.0 單核細胞 3~8 12~0.80 嗜酸性粒細胞0.5~5 0.02~0.5 嗜堿性粒細胞0~1 0~0.1 8.危急值
測定項目小于或等于大于或等于 WBC(×109/L)≥30.0
≤2.0 兒童(×109/L)≥35.0
≤1.5 Hb(g/L)≥200
≤60 PLT(×109/L)≥600
≤50 9.臨床意義
9.1 中性粒細胞:中性粒細胞增多分生理性和病理性增多。病理性增多可見于急性感染或炎癥、急性失血、急性中毒及惡性腫瘤等;中性粒細胞減少可見于病毒感染、慢性理化損傷、自身免疫性疾病等。
9.2 淋巴細胞:淋巴細胞病理性增多見于某些慢性感染、腎移植手術(shù)后、白血病、再生障礙性貧血、粒細胞缺乏癥等;淋巴細胞減少可見于接觸放射線,應(yīng)用腎上腺皮質(zhì)激素或促腎上腺皮質(zhì)激素,嚴重化膿性感染等情況。
9.3 單核細胞:單核細胞病理性增多見于急性感染恢復(fù)期、活動性肺結(jié)核、血液病等;單核細胞減少臨床意義不大。
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9.4 嗜酸性粒細胞:嗜酸性粒細胞增多 常見于寄生蟲、變態(tài)反應(yīng)疾病、皮膚病、血液病等;嗜酸性粒細胞減少 其臨床意義較小,見于長期應(yīng)用腎上腺皮質(zhì)激素后,某些急性傳染病等。
9.5 嗜堿性粒細胞:嗜堿性粒細胞增多可見于過敏性或炎癥性疾病、骨髓增生性疾病;嗜堿性粒細胞減低臨床意義不明確。
9.6 紅細胞和血紅蛋白減少見于急、慢性紅細胞丟失過多、紅細胞壽命縮短、造血原料不足、骨髓造血功能減退等;紅細胞和血紅蛋白增多見于真性紅細胞增多癥,肺心病等。
9.7 紅細胞比積增高可見于大面積燒傷、脫水等;減低可見于貧血。
9.8 血小板:血小板數(shù)量病理性減低見于性白血病、再障、脾亢、血小板 減少性紫癜、敗血癥等;增高見于慢性白血病、真性紅細胞增多癥、急性化膿性感染、脾切除、溶血性貧血等。
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第三篇:血液常規(guī)檢查檢驗程序
第 八 章 血液常規(guī)檢查檢驗程序
檢測血液中紅細胞、白細胞和血小板數(shù)量、白細胞分類及相關(guān)參數(shù)(HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW及MPV等)的變化對臨床有關(guān)疾病的診斷、觀察疾病的變化及治療效果具有重要參考價值。現(xiàn)根據(jù)ISO15189文件―《醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量與能力專用要求》的規(guī)定,以SF-3000、ADVIA-120和BC-2000血細胞分析儀為例進行介紹。
第一節(jié) 血細胞分析儀檢測原理
血常規(guī)檢查方法采用血細胞自動分析儀法,參見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》p7~11,白細胞分類計數(shù)采用顯微鏡檢查法,參見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》p5~7。現(xiàn)簡要介紹如下。
一、電阻抗法血細胞計數(shù)
在細胞檢測器微孔的兩側(cè)各有一個電極,兩電極間通有恒定電流,經(jīng)過稀釋液(電解質(zhì)溶液)稀釋的血樣(血細胞)在通過檢測器微孔時,產(chǎn)生了一個電脈沖;脈沖的高低代表細胞體積的大小,脈沖的個數(shù)代表細胞的數(shù)目。記錄脈沖的數(shù)目可以得到細胞計數(shù)的結(jié)果。
二、細胞化學(xué)和光散射法白細胞計數(shù)
將血液經(jīng)過細胞化學(xué)試劑染色,不同的白細胞胞漿內(nèi)部即可出現(xiàn)不同的酶化學(xué)反應(yīng)。當這些白細胞通過測量區(qū)時,由于酶反應(yīng)強度不同和細胞體積大小差異,激光束射到細胞上的前向角和散射角不同,以X軸為吸光率,Y軸為光散射,每個細胞產(chǎn)生兩個信號結(jié)合定位在細胞分布散點圖上。計算機對存儲的測量信息進行分析處理,得出白細胞總數(shù)和分類計數(shù)結(jié)果。適用于ADVIA-120血細胞分析儀。
三、多角度激光法白細胞計數(shù)
在白細胞分類通道:全血加入溶血劑(FD-Ⅰ和FD-Ⅱ)作用后,嗜酸性粒細胞內(nèi)顆粒被染色;其他白細胞略有皺縮。WBC/BASO通道:全血加入溶血劑(FB)溶血。除BASO外,其他白細胞均明顯皺縮。儀器從低角度及高角度分析白細胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu)。計算機對存儲的測量信息進行分析處理,得出白細胞總數(shù)和分類計數(shù)結(jié)果。適用于SF-3000血細胞分析儀。
四、光電比色法測量血紅蛋白
在稀釋的血樣中加入溶血劑使紅細胞膜破裂釋放出血紅蛋白,后者與溶血劑中有關(guān)成分結(jié)合形成Hb衍生物,進入Hb測試系統(tǒng),在特定波長(一般在530~550nm)下比色,吸光度的變化與液體中Hb含量成正比,儀器便可顯示其濃度。不同型號的血細胞分析儀配套溶血劑配方不同,形成的Hb衍生物亦不同,其吸收光譜各異但最大吸收均接近540nm。
五、光散射法紅細胞和血小板計數(shù)
以二維激光散射法檢測紅細胞和血小板。紅細胞測試原理是:在測試系統(tǒng)中,全血與紅細胞/血小板稀釋液混合,使自然狀態(tài)下雙凹盤狀扁平圓形的紅細胞成為球形并經(jīng)戊二醛固定,此種處理并不影響MCV體積。紅細胞無論以何種方位通過測量區(qū)時,被激光束照射后所得的信號是相同的。激光束以低角度前向光散射和高角度光散射同時測量一個紅細胞,根據(jù)低角度光散射轉(zhuǎn)換能量大小,測量單個紅細胞體積與總數(shù);根據(jù)高角度光散射得出單個紅細胞內(nèi)血紅蛋白濃度。血小板與紅細胞在一個系統(tǒng)中測量,其原理是:根據(jù)同質(zhì)性球體光散射的Mie理論,當球形化的血小板單個通過激光照射區(qū)時,儀器在兩個角度測定激光的散射強度:高角度主要測細胞的折射指數(shù)(RI),它與細胞的密度有關(guān);低角度主要測細胞體積的大小。血小板的體積在1~30fl,RI在1.35~1.40。計算機對存儲的測量信息進行分析處理,得出紅細胞和血小板計數(shù)結(jié)果。適用于ADVIA-120血細胞分析儀。
六、顯微鏡白細胞分類計數(shù)
把血液制成細胞分布均勻的薄膜涂片,經(jīng)瑞氏染料染色后,在顯微鏡下根據(jù)白細胞形態(tài)特征予以分類計數(shù),得出相對比值(百分率),并觀察細胞形態(tài)的變化。
第二節(jié) 儀器性能參數(shù)
血細胞分析儀的操作性能因儀器的種類與型號不同而異。
一、SF-3000血細胞分析儀
1.該儀器檢測血細胞的測量范圍為 WBC:(0.0~99.99)×109/L;RBC:(0.00~9.99)×1012/L、HGB:1~300g/L;PLT:(0~999)×109/L。
2.本儀器檢測血細胞的精密度為 WBC:±3.0%;RBC:±1.5%;HGB:±1.5%;PLT:±5.0%。
二、ADVIA-120血細胞分析儀
1.本儀器檢測血細胞的測量范圍為 WBC:(0.00~400)×109/L;RBC:(0.00~6.76)×1012/L;HGB:0~225g/L;PLT:(0~3980)×109/L。
2.本儀器檢測血細胞的精密度為 WBC:±3.0%;RBC:±1.5%;HGB:±1.5%;PLT:±5.0%。
三、BC-2000血細胞分析儀
1.本儀器檢測血細胞的測量范圍為 WBC:(0.0~99.99)×109/L;RBC:(0.00~9.99)×1012/L;HGB:0~300g/L;PLT:(0~999)×109/L。
2.本儀器檢測血細胞的精密度為 WBC:±3.0%;RBC:±2.0%;HGB:±2.0%;PLT:±5%。
第三節(jié) 血常規(guī)檢驗程序主要內(nèi)容
一、標本
1.臨床護士抽取患者抗凝靜脈血2ml。2.采血后立即送到臨床檢驗科。
3.血量不夠1ml或血液凝固、溶血或嚴重脂血標本不能進行檢測。
二、設(shè)備和試劑
1.設(shè)備 SF-3000、ADVIA-120、MEK-6108K和BC-2000血細胞分析儀。2.試劑
(1)稀釋液、溶血劑和清洗液。
(2)CBC試劑、DIFF試劑、消泡劑和鞘液沖洗液。(3)瑞氏染液及緩沖液。
3.購買的試劑應(yīng)放室溫保存,注意防塵、防潮。
4.開封后的試劑應(yīng)盡快用完,變質(zhì)、超過有效期的試劑不能使用。
三、容器及試劑添加劑
血液標本采集的容器是一次性含EDTA-K2抗凝劑的真空采血管;血液標本必需添加劑是EDTA-K2抗凝劑。
四、校準步驟
血細胞分析儀的操作過程分別見SF-3000血細胞分析儀標準操作程序(PLA 301-LJK-ZY-YQ-07)、ADVIA-120血細胞分析儀標準操作程序(PLA301-LJK-ZY-YQ-08)和BC-2000血細胞分析儀標準操作程序(PLA301-LJK-ZY-YQ-09)中6 儀器校準程序。
五、操作步驟
1.申請單及標本編號 整理血液常規(guī)檢驗申請單及血液標本,審核合格后,對檢驗申請單和血液標本進行編號。
2.上機測試
操作過程分別見SF-3000血細胞分析儀標準操作程序(PLA301-LJK-ZY-YQ-07)、ADVIA-120血細胞分析儀標準操作程序(PLA301-LJK-ZY-YQ-08)、BC-2000血細胞分析儀標準操作程序(PLA301-LJK-ZY-YQ-09)和MEK6108-K血細胞分析儀標準操作程序標準操作程序(PLA301-LJK-ZY-YQ-06)。
3.檢驗結(jié)果的輸入
(1)打開電腦,啟動“檢驗程序”,輸入用戶名及口令后,進入檢驗程序。
(2)單擊“檢驗”菜單,選擇“檢驗結(jié)果錄入修改”,進行檢驗結(jié)果的錄入及修改。通過申請序號進行結(jié)果的輸入,選擇“工作單號”(SF-3000自動傳輸:S+星期幾+當前檢驗標識序號;ADVIA-120自動傳輸:B+星期幾+當前檢驗標識;BC-2000測定結(jié)果和其他非自動傳輸標本:NK+星期幾+當前檢驗標識序號序號),儀器會自動傳輸入檢測結(jié)果;同時輸入當前患者的樣品“采集時間”和“接收時間”。
(3)儀器檢測結(jié)果進一步做鏡檢的標準
① BC-2000血細胞分析儀等三分類儀器檢測的標本全部需要鏡檢血涂片。
② SF-3000和ADVIA-120血細胞分析儀等五分類儀器檢測結(jié)果根據(jù)本程序第三節(jié)十五[白細胞五分類血細胞分析儀的白細胞分類篩選原則]篩選出需要做血涂片檢查的血標本。
③臨床醫(yī)師要求做紅細胞、白細胞、血小板等形態(tài)檢查的血標本。④血液病患者的檢測標本全部鏡檢血涂片。4.顯微鏡檢查操作步驟
(1)制片:靜脈抗凝血標本混勻或末梢血標本,采血后推成厚薄適宜的血膜片,血膜應(yīng)呈舌狀,頭、體、尾清晰可分。推好的血膜在空氣中晃動,以促使快干,以免細胞變形縮小。
(2)染色:平置玻片于染色架上,滴加瑞氏染色液5~8滴,使其迅速蓋滿血膜,約1min后,滴加緩沖液8~10滴,輕輕搖動玻片或用吸耳球?qū)恃禋猓c染液充分混合,15~20min后用水沖去染液,待干。
(3)鏡檢:先用低倍鏡或高倍鏡閱覽全片,注意觀察血片染色情況:如有無血小板或紅細胞聚集,片尾有無巨大異常細胞,再結(jié)合儀器警告的內(nèi)容,分別重點從白細胞分類、紅細胞參數(shù)和血小板參數(shù)等方面進行觀察,記錄各類細胞結(jié)果。
5.鏡檢結(jié)果的輸入及報告確認 單擊“結(jié)果處理”菜單,選擇“報告確認”進入結(jié)果確認,通過選擇“工作單元”、“報告日期”、“單張”或“批量”后,按“提取”鍵提取檢測結(jié)果,對檢驗結(jié)果進行逐一確認。
6.檢測過標本及廢物的處理 檢測過的血液標本、廢液及經(jīng)血液標本污染的各種廢物按血液常規(guī)標本的采集與處理程序(詳見第七章第四節(jié))進行處理。
六、質(zhì)量控制
1.室內(nèi)質(zhì)控 周一~周五每天做室內(nèi)質(zhì)控(廠家提供的質(zhì)控物)。測定過程是:從4~8℃冰箱取出全血質(zhì)控物置室溫,血細胞分析儀開機后預(yù)熱20min,分別將質(zhì)控物混勻后上機檢測,打印結(jié)果并與允許值范圍對比,質(zhì)控合格后才能檢測病人血標本。對于失控應(yīng)按質(zhì)量控制程序處理,儀器質(zhì)量控制當天的情況進行逐一登記。
2.室間質(zhì)控 每月參加科內(nèi)的室間質(zhì)控考評2次。每年參加衛(wèi)生部和WHO室間質(zhì)控。
七、干擾因素
1.嚴重的黃疸或脂血使血紅蛋白結(jié)果假性增高。
2.紅細胞冷凝集可使紅細胞和血小板計數(shù)結(jié)果假性減低,白細胞假性增高(電阻抗法)或假性減低(激光法)和MCV假性增高。
3.冷凝球蛋白增高使白細胞和血小板計數(shù)結(jié)果假性增高。4.有血小板凝集者可使血小板計數(shù)結(jié)果假性減低。
八、結(jié)果計算及測量不確定度 按儀器設(shè)計原理,只對紅細胞常數(shù)(紅細胞平均體積、紅細胞平均血紅蛋白量、紅細胞平均血紅蛋白濃度)進行計算,可根據(jù)RBC、HGB及HCT結(jié)果求出。
1.紅細胞平均體積(MCV):根據(jù)RBC及HCT,由下式求出。
每升血液中紅細胞比積Hct ?每升血液中紅細胞個數(shù) RBCMCV(fl)?2.紅細胞平均血紅蛋白量(MCH):根據(jù)RBC及HGB,由下式來求出。
MCH(pg)? 每升血液中血紅蛋白含量Hb ?每升血液中紅細胞個數(shù) RBC3.紅細胞平均血紅蛋白濃度(MCHC):根據(jù)HCT及HGB,由下式來求出。
MCHC(g/L)? 每升血液中血紅蛋白含量Hb?
每升血液中紅細胞比積 Hct4.RDW 由血細胞分析儀測量獲得,是反映周圍血紅細胞體積異質(zhì)性的參數(shù)。當紅細胞通過小孔的一瞬間,計數(shù)電路得到一個相應(yīng)大小的脈沖,不同大小的脈沖信號分別貯存在儀器內(nèi)裝計算機的不同通道,計算出相應(yīng)的體積及細胞數(shù),統(tǒng)計處理而得RDW。
5.測量不確定度
(1)SF-3000血細胞分析儀檢測血細胞測量不確定度為:WBC:±0.22×109/L(=3.87)、±0.46×109/L(=6.07)和±0.80×109/L(=13.27);RBC:±0.22×1012/L(=2.39)、±0.24×1012/L(=4.18)和±0.36×1012/L(=6.02);HGB:±2.60g/L(=82.60)、±3.66g/L(=129.53)和±5.48g/L(=168.07);PLT:±15.66×109/L(=64.60)、±25.80×109/L(=200.40)和±40.82×109/L(=340.93)。
(2)ADVIA 120血細胞分析儀儀器檢測血細胞測量不確定度為:WBC:±0.26×109/L(=3.69)、±0.32×109/L(=5.36)和±0.74×109/L(=13.32);RBC:±0.20×1012/L(=2.41)、±0.22×1012/L(=4.13)和±0.30×1012/L(=5.19);HGB:±2.90g/L(=82.90)、±3.66g/L(=130.63)和±4.38g/L(=1625.10);PLT:±10.32×109/L(=50.17)、±24.02×109/L(=201.13)和±30.54×109/L(=329.10)。
(3)BC-2000血細胞分析儀儀器檢測血細胞測量不確定度為:WBC:±0.22×109/L(=3.87)、±0.46×109/L(=6.07)和±0.80×109/L(=13.27);RBC:±0.22×1012/L(=2.39)、±0.24×1012/L(=4.18)和±0.36×1012/L(=6.02);HGB:±2.60g/L(=82.60)、±3.66g/L(=129.53)和±5.48g/L(=168.07);PLT:±15.66×109/L(=64.60)、±25.80×109/L(=200.40)和±40.82×109/L(=340.93)。
測量不確定度的來源包括標本、標本采集過程、送檢時間、保存條件、藥物、測試系統(tǒng)、員工操作步驟等因素。
九、生物參考區(qū)間與實驗室解釋
參見第七章第三節(jié)的有關(guān)內(nèi)容。
十、血細胞檢驗結(jié)果可報告區(qū)間
1.阻抗法儀器 WBC:(0.2~99.99)×109/L;RBC:(0.50~9.99)×1012/L;HGB:0~299g/L;PLT:(10~999)×109/L。
2.激光法儀器 WBC:(0.02~400)×109/L;RBC:(0.05~7.00)×1012/L;HGB:0~225g/L;PLT:(5~3500)×109/L。
十一、血細胞警告或危急值
白細胞<0.5×109/L;紅細胞<1.0×1012/L;血紅蛋白<30g/L;血小板<20×109/L。
十二、安全性預(yù)警措施
1.血液標本的運輸必須保證運送過程中的生物安全,防止溢出。血液標本溢出后,應(yīng)該立即對污染的環(huán)境和設(shè)備進行消毒處理。對標明有傳染性疾病的血液標本應(yīng)特別防護,以不污染環(huán)境或保護工作人員安全為前提。
2.在進行血液分析的一切操作活動中,應(yīng)按《實驗室安全管理》程序執(zhí)行。在進行操作前,首先應(yīng)采取必要的保護性措施如穿戴保護性外套、手套等。
3.與血液標本接觸的一切器皿、儀器組裝/拆卸組合零件都應(yīng)視為污染源,因此操作人員不小心接觸了這種污染源時,應(yīng)立即用清水沖洗被污染區(qū)域并進行消毒處理。
4.如果操作人員的皮膚或衣物上沾到了血液及廢液,應(yīng)立刻用清水沖洗并進行消毒處理。
5.如果眼睛被濺入血液及廢液,用大量的清水沖洗并采取必要的醫(yī)療措施。6.如血液標本采用開蓋程序測試,開蓋時應(yīng)防止氣霧膠污染環(huán)境。7.所有檢查過的血液樣本及有關(guān)的廢棄物,都會給您帶來潛在的危險或生物污染。所有廢棄樣本及廢棄物的處理方法同血液標本的處理程序。
十三、變異潛在來源
1.嚴重的黃疸或脂血標本可使血紅蛋白結(jié)果假性增高。
2.標本溶血可使紅細胞結(jié)果假性減低、血小板計數(shù)結(jié)果假性增高。
3.紅細胞冷凝集可使紅細胞和血小板計數(shù)結(jié)果假性減低,白細胞假性增高(電阻抗法)或假性減低(激光法)和MCV假性增高。
4.冷凝球蛋白或冷纖維蛋白增高使白細胞和血小板計數(shù)結(jié)果假性增高。5.有血小板凝集者可使血小板計數(shù)結(jié)果假性減低。6.試劑的溫度。
7.檢測器微孔不完全堵塞。
8.標本采集后放置的環(huán)境溫度過高、時間過長。9.試劑變質(zhì)或過了有效期而未發(fā)現(xiàn)等。
十四、白細胞五分類血細胞分析儀的白細胞分類篩選原則
1.血液病患者的血標本,無論血細胞計數(shù)結(jié)果和細胞分布圖是否正常,一律做血涂片鏡檢。
2.無論初診或復(fù)診患者的血標本,只要白細胞、紅細胞/血紅蛋白和血小板計數(shù)結(jié)果正常,白細胞散射圖、紅細胞和血小板直方圖均正常且無報警者,可不做血涂片鏡檢。
3.初診患者,其白細胞、紅細胞/血紅蛋白、血小板計數(shù)結(jié)果,白細胞散射圖、紅細胞和血小板直方圖中有一項異常或報警時,均需做血涂片鏡檢。
4.復(fù)診患者,其血細胞計數(shù)結(jié)果與前一次結(jié)果無明顯變化,但白細胞散射圖異常且有報警時,需做血涂片鏡檢。
5.復(fù)診患者,其血細胞計數(shù)結(jié)果與前一次檢測結(jié)果相比有變化,但與臨床診斷或治療相符;而且白細胞散射圖正常無報警時,可不做血涂片鏡檢。
十五、異常結(jié)果處理
血細胞分析儀測試的血常規(guī)結(jié)果異常需與臨床診斷相符,不符合的結(jié)果應(yīng)復(fù)查。
十六、報告時間與標本保存
1.病房患者的血常規(guī)檢驗結(jié)果報告單應(yīng)于當日下午4:00前由衛(wèi)生員發(fā)回病房科室。2.檢驗后的血常規(guī)標本應(yīng)放置室溫保存至次日上午8:00丟棄。
十七、實驗方法的溯源
見SF-3000、MEK-6108K、BC-2000和ADVIA-120血細胞分析儀使用說明書。
第四篇:檢驗項目標準操作規(guī)程
一 生物安全制度
1、醫(yī)務(wù)人員
1每1-2年做體檢一次并接受乙肝疫苗接種。
2每1—2年檢查乙肝病毒抗原抗體水平發(fā)現(xiàn)乙型肝炎者應(yīng)進行隔離治 療。
3檢驗人員進入實驗室應(yīng)穿好工作服不允許在實驗室進食和吸煙。
4檢驗人員在工作前后和被污染后應(yīng)用肥皂和流水清洗必要時由消 毒液浸泡雙手每季度抽查檢驗人員的手并做細菌培養(yǎng)一次。
2、環(huán)境消毒隔離
1實驗室應(yīng)分為清潔區(qū)和操作區(qū)清潔區(qū)要注意保護不受污染。操作有 氣溶膠可能的標本應(yīng)配置生物安全柜及其它防護設(shè)置如紫外線燈排氣 扇等操作區(qū)的工作臺及地面每日用消毒液擦拭一次有污染時隨時消毒 每周大掃除一次。
2采血室每日操作前用清水擦拭操作臺一次采血結(jié)束用消毒液擦拭操 作臺、桌子和地面一次紫外線每日照射消毒一次每月空氣細菌培 養(yǎng)一次紫外線強度定期測定。并做記錄。
3、各種檢驗標本的收集送檢必須用相應(yīng)指定的容器留取不得外溢污染。
4、靜脈及末稍采血應(yīng)嚴格執(zhí)行消毒隔離措施靜脈抽血做到一人一針一筒 一巾一帶一消毒所用止血帶及紙墊每日消毒末稍采血一人一片一管 杜絕交叉污染。
5、一次性醫(yī)用器具包括采血針注射器、尿杯、血紅蛋白微量吸血吸管應(yīng) 嚴格做好領(lǐng)發(fā)登記注射器先浸泡消毒后由供應(yīng)室一對一調(diào)換統(tǒng)一處 理其余一次性器具浸泡消毒后裝入污物袋送焚燒爐焚燒。
6、檢驗人員在進行靜脈抽血時應(yīng)嚴格遵守無菌操作技術(shù)操作前必須洗手必 須戴好帽子與口罩操作臺和手被污染時應(yīng)用肥皂和流水認真洗手必要 時用消毒液浸泡雙手酒精、碘酒瓶每周更換消毒兩次。
7、凡是肝炎病人和透析病人的血液標本及疑有黃疸的血標本都視為肝炎的 污染標本應(yīng)貼上紅色危險標記放在規(guī)定區(qū)域內(nèi)引起警惕和防止擴大 污染面。
8、溢出試管外的血液應(yīng)立即用碘酒棉簽擦拭干凈注意防止玻璃碎片刺傷 手并注意試管有無破裂。
9、當針頭和碎玻璃刺傷手時,用流水沖洗,擠出血水,應(yīng)立即用碘酒消毒局部。
10、實驗室操作時應(yīng)戴上手套。吸取標本離心振蕩等應(yīng)嚴格按操作規(guī)程防 止自身和實驗室受污染。
11、已檢查標本與容器分別浸泡于施康1號消毒液(2000mg/L)中兩小時后標 本傾棄一次性容器送焚燒重復(fù)使用的經(jīng)清洗消毒和滅菌后再使用均 要有記錄。有毒化學(xué)試劑和放射性試劑使用后要經(jīng)無害化處理防止污染 環(huán)境。
12、菌種、毒種按《傳染病防治法》進行管理。
13、三級醫(yī)院必須設(shè)置清潔區(qū)污染區(qū)操作有氣溶膠可能的標本應(yīng)配置生物 安全柜及其它防護設(shè)置如紫外線燈排氣扇等。
14、非科室工作人員不準進入實驗室外來人員參觀需經(jīng)科主任同意方可進入
二 質(zhì)量管理制度
1、各專業(yè)實驗室根據(jù)省臨檢中心的有關(guān)規(guī)定開展實驗室內(nèi)的質(zhì)量控制并 制定有關(guān)措施。對室 內(nèi)質(zhì)控應(yīng)每日有記錄對失控情況有糾正方法有預(yù) 防性措施對于目前尚無完整的室內(nèi)質(zhì)控體系的實驗室應(yīng)積極創(chuàng)造條 件建立室內(nèi)質(zhì)量控制體系。
2、各專業(yè)實驗室必須參加部、省的各次室間質(zhì)控活動對每次質(zhì)控評價應(yīng)有 記錄。
3、計量儀器包括分析天平天平、分光光度計等應(yīng)定期校正每年一 次。
4、大型分析儀器必須專人負責有使用維修記錄。
5、商品化的試劑盒的申購由各專業(yè)室的組長負責申報每月一次報科主任審 批不得使用過期無批準文號的劣質(zhì)試劑進貨統(tǒng)一由科室管理自配 試劑須嚴格校正后方可使用。
6、各專業(yè)實驗室必須建立完整的操作程序并應(yīng)嚴格按程序執(zhí)行。
7、當日發(fā)出的全部檢驗報告單須經(jīng)當日科室總值班人員嚴格審核后方可發(fā) 出。
8、科室在完成嚴格的室內(nèi)、室間質(zhì)量控制體系的同時應(yīng)逐步建立全面質(zhì)量 控制體系對標本的采集運送保存等納入嚴格的管理之中。每日送檢 的標本應(yīng)簽收。
9、急診檢驗應(yīng)嚴格按照急診制度執(zhí)行。
三 安全制度
1、菌種、毒種、劇毒品及貴重儀器物品指定專人保管、有防盜措施建立帳 冊記錄進出數(shù)量定期檢查制度。劇毒藥品專人保管由科室主任主 管試劑的同志負責放保險柜領(lǐng)用時須有主管同志在場作好領(lǐng)用登 記。
2、易燃物品專柜存放普通試劑按常規(guī)分類存放并由科室主任和主管試劑 同志負責注意用電安全特別是電爐子、大烤箱、火焰光度計由各科 使用同志負責安全嚴防火災(zāi)。
3、對工作中可能發(fā)生的觸電、失火、玻璃割傷、針頭刺傷、燒傷、不慎中 毒、傳染性標本的污染各實驗室應(yīng)有應(yīng)急處理的方法有關(guān)人員均應(yīng)熟 悉。
4、用電設(shè)備、電源線路、CO2氣體、給排水系統(tǒng)的安全性符合使用要求不 能帶電檢修儀器。
5、使用強酸堿腐蝕品時應(yīng)在適當?shù)沫h(huán)境下正確操作防止腐蝕、灼傷、中 毒、火災(zāi)和爆炸等事件發(fā)生。
6、注意安全隨手隨時關(guān)門下班時要做好水電門的安全保衛(wèi)工作防 火防盜防水。
7、科室安全保衛(wèi)負責鄭軍
四
試劑管理制度
1、各專業(yè)實驗室應(yīng)根據(jù)各自的工作需要按月向科主任申報所購試劑并應(yīng) 做到及時盤存清點入庫做到心中有數(shù)。
2、所有試劑的申請進貨一律由科室統(tǒng)一管理嚴格按市衛(wèi)生局招標要求執(zhí) 行做到三證齊全。無三無產(chǎn)品。
3、各專業(yè)實驗室應(yīng)對試劑庫存定期檢查不使用過期變質(zhì)的試劑。
4、自配試劑須以嚴格校正后方可使用。
5、試劑的保存應(yīng)嚴格按照要求以保證有效期內(nèi)能有效地使用杜絕浪費現(xiàn) 象。
6、試劑外借一律須經(jīng)科主任同意方可執(zhí)行。
7、劇毒試劑必須由科主任和負責科室保衛(wèi)的同志負責保存放保險箱內(nèi)使
7、用時應(yīng)有兩人在場并做好登記。
8、易燃易爆試劑應(yīng)分開存放遠離火源和電源。
9、供應(yīng)商所送的試劑必須先經(jīng)藥庫清點才能接受檢驗科人員清點后必須在
10、貨單上簽字有出入者必須向科主任或試劑管理員、組長報告再將貨單
11、交給試劑管理員以便月底結(jié)帳。
12、科室試劑管理員鐘梁
13、六標本管理制度14、15、一、標本采集 16、1、按每個項目要求告訴病人、病房護士或本室采血人員最佳采血時間、采血
17、前空腹或飲食注意、用藥情況、活動情況、體位等。18、2、明確抗凝劑種類、抗凝劑與血的比例、抽血 19、3、體液、分泌物、細菌培養(yǎng)標本按要求留足量、及時送檢。
20、二、標本運送 21、1、運送過程中原則上帶蓋不能用棉花等吸水物品以防倒翻和溢出或雨
22、淋。凡含傳染源的標本必須帶蓋外套尼龍袋以防溢出而污染環(huán)境。23、2、不能劇烈振蕩以防標本溶血和有形成分破壞。24、3、必須及時送檢。
25、三、標本接收 26、1、必須認真核對標本上病人姓名、病區(qū)、床號、聯(lián)號與申請單符合。27、2、必須觀察標本的量、標本類型、是否抗凝或有小凝塊、細菌培養(yǎng)標本是否符
28、合無菌要求。是否有明顯溶血或脂濁。29、3、不符要求的標本必須及時填寫退回理由單及時反饋臨床。
30、四、標本檢測 31、1、在檢測每一過程中都應(yīng)復(fù)核標本接收過程中的每一步驟。32、2、在標本足夠的情況下不能浪費、隨意丟棄或損壞標本。
33、五、標本儲存 34、1、當天不能完成的標本必須分離血清按要求儲存在2℃-8℃或-20℃。35、2、當天檢測完成的標本血常規(guī)儲存在2℃-8℃1天以上生化免疫儲在2℃-36、8℃7天以上腦脊液、胸腹水等重要標本儲存在2℃-8℃7天以上。37、3、特殊標本按要求保存。
38、六、標本處理
39、檢驗標本先用含2-3g/L有效氯消毒靈浸泡半小時再煮沸清洗試管烘 干備用。用雙層專用黃色醫(yī)用垃圾袋專人收集所有廢棄醫(yī)用垃圾。送專門存放醫(yī)
用垃圾處統(tǒng)一處理。并做好登記。
一、檢驗科檢測項目標準操作規(guī)程
A、臨檢室
A1、血常規(guī)檢驗標準操作規(guī)程
A2、嗜酸性粒細胞直接計數(shù)標準操作規(guī)程
A3、紅細胞沉降率測定標準操作規(guī)程
A4、血型鑒定標準操作規(guī)程
A5、尿常規(guī)標3準操作規(guī)程
A6、一小時尿沉渣計數(shù)標準操作規(guī)程
A7、尿乳糜定性檢查標準操作規(guī)程
A8、大便常規(guī)標準操作規(guī)程
A9、蟲卵及包囊濃縮檢查標準操作規(guī)程
A10、隱血試驗標準操作規(guī)程
A11、腦脊液檢驗標準操作規(guī)程
A12、漿膜腔積液檢查標準操作規(guī)程
A13、精液檢查標準操作規(guī)程
A14、前列腺液檢查標準操作規(guī)程
A15、陰道分泌物檢查標準操作規(guī)程
A16、胃液檢查標準操作規(guī)程
A、檢室
A1、血常規(guī)檢驗
1標本
用EDTA-K 2 0.2ul抗凝靜脈血1ml,門診病人在CD-1700儀器上做三分類 測定,住院病人在COULTER HMX儀器上做五分類測定。
2試劑及儀器
COULTER HMX五分類血球分析儀及配套試劑質(zhì)控用COULTER 4C PLUS 全血質(zhì)控品COULTER HMX五分類血分析儀及配套試劑質(zhì)控用 COULTER 5C 全血質(zhì)控品。血液細胞自動化分析儀介紹
3操作
1門診
a)收到血常規(guī)標本后查看核對檢驗項目立即編號放混勻器上混勻 3分鐘。
b)如有血型立即用玻片法和試管法測定血型輸入電腦。
c)血標本在ABBOT CD-1700上檢測結(jié)果入庫。
d)對于中間細胞比較多的應(yīng)當手工涂片染色分類對于血小板等圖形不 好或結(jié)果異常較大的應(yīng)手工復(fù)查。
e)結(jié)果核對后在半小時內(nèi)報告。
2病房
a)采集血常規(guī)標本后立即編號試管加蓋后放于專用試管架上放入 HMX上自動混勻 b)如有血型用玻片法和試管法測定血型輸入電腦。
c)血標本在COULTER HMX上機檢測結(jié)果入庫。
d)對于分類圖形不好的結(jié)果應(yīng)當手工涂片染色分類對于血小板等結(jié)果 圖形不好或結(jié)果異常較大的應(yīng)手工復(fù)查。復(fù)查條件
e)結(jié)果核對后簽發(fā)報告單。如果急診則電話報告有血型的話通知 病房來拿報告單。血液項目
5特殊規(guī)定
在檢驗血常規(guī)時,科室所有工作人員及同志如發(fā)現(xiàn)以下樣本結(jié)果過高可過低,務(wù)必 作登記,復(fù)查和及時報告,以備查詢。
1.血紅蛋白低于100g/L.2.白細胞低于3000/ul.3.血小板低于8萬/ul.4.發(fā)現(xiàn)白細胞分類異常圖形時.5.發(fā)現(xiàn)其中一項過高時,或是臨床指定要鏡檢時.6臨床意義
61WBC計數(shù)
參考范圍
4-10 3 10 9 /L
1、增加
(l)生理性初生兒、妊娠末期、分娩期、經(jīng)期、飯后、劇烈運動 后、冷水浴后及極度恐懼與疼痛等。
5特殊規(guī)定
在檢驗血常規(guī)時,科室所有工作人員及同志如發(fā)現(xiàn)以下樣本結(jié)果過高可過低,務(wù)必 作登記,復(fù)查和及時報告,以備查詢。
1.血紅蛋白低于100g/L.2.白細胞低于3000/ul.3.血小板低于8萬/ul.4.發(fā)現(xiàn)白細胞分類異常圖形時.5.發(fā)現(xiàn)其中一項過高時,或是臨床指定要鏡檢時.6臨床意義
61WBC計數(shù)
參考范圍
4-10 3 10 9 /L
1、增加
(l)生理性初生兒、妊娠末期、分娩期、經(jīng)期、飯后、劇烈運動 后、冷水浴后及極度恐懼與疼痛等。
A3、紅細胞沉降率測定
[標本]
200ul枸櫞酸鈉抗凝靜脈血1.1ml顛倒混勻。[原理]
離體抗凝血液置于特制刻度測定管(魏氏法血沉管)內(nèi)垂直立于室 溫中一定時間時觀察上層血漿高度的毫米數(shù)值報告之。
[儀器及試劑]
MONITOR JI血沉儀、專用血沉管
109mmoIL(32g/L)枸櫞酸鈉溶液取含二分子結(jié)晶水的枸櫞酸鈉(分子量29412)328用蒸餾水溶解稀釋至100ml。此液在室 溫保存不得超過2周。
[操作]
1專用血沉管1支加抗凝劑02ml。
2靜脈采血后取下針頭加血至刻度顛倒混勻。
3用血沉管(300mm325mm)吸取上述混勻血液至“0”刻度處拭去管外 附著的血液將血沉管直立在血沉架上。MONITOR JI操作
4記時室溫中靜置lh讀出血沉儀上的讀數(shù)即是血沉值。
[參考值]
男:15mm60min 女20mm60min [附注]
1紅細胞在單位時間內(nèi)下沉的速度與血漿蛋白的量和質(zhì)血漿中脂類的量 和質(zhì)紅細胞的大小與數(shù)量是否成串錢相聚以及血沉管的內(nèi)徑、清潔 度、放置位置是否垂直室溫高低等因素都有關(guān)系。
2要求
(l)標本采集時避免脂肪血。
(2)血液和抗凝劑比例要準確。
(3)血沉管內(nèi)徑要標準(25mm)放置要垂直。
(4)做血沉的標本要在采集后3h內(nèi)測定并充分混勻。
3室溫過低、過高和貧血時對結(jié)果都有影響。為此血沉應(yīng)盡量 放在18—25℃室溫下測定。室溫過高時血沉加快可以按溫度系 數(shù)校正。室溫過低時血沉減慢無法校正。
A4、血型鑒定
1ABO血型鑒定
根據(jù)紅細胞上有或無A抗原或和B抗原將血型分為A型、B型、AB型及O型 4種。可利用紅細胞凝集試驗通過正、反定型準確鑒定ABO血型。所謂正定 型是用已知抗—A和抗—B分型血清來測定紅細胞上有無相應(yīng)的A抗原或和B 抗原所謂反定型是用已知A細胞和B細胞來測定血清中有無相應(yīng)的抗—A或 和抗—B。
[試劑和材料]
1抗—A(B型血)、抗—B(A型血)及抗—A十B(O型血)分型血清制備方 法見本節(jié)附注
25A、B及O型試劑紅細胞鹽水懸液制備方法見本節(jié)附注
3受檢者血清
4受檢者5紅細胞鹽水懸液制備方法見本節(jié)附注。
[方法] 2玻片法
(1)取清潔玻片1張(或白瓷板1塊)用蠟筆劃成方格標明抗-A、抗-B 和抗-A十B分別用滴管滴加抗-A、抗-B和抗-A十B分型血清 l滴 于標明的方格內(nèi)再各加受檢者2紅細胞懸液1滴混和。
(2)另取潔凈玻片一張(或白瓷板1塊)用蠟筆劃成方格標明A細胞、B細胞和O細胞用滴管各加受檢者血清1滴再分別用滴管滴加 A、B和O型試劑紅細胞懸液1滴。
(3)將玻片(或白瓷板)不斷輕輕轉(zhuǎn)動使血清與細胞充分混勻連續(xù)約 15min以肉眼觀察有無凝集(或溶血)反應(yīng)。如以玻片作試驗時也 可用低倍鏡觀察結(jié)果。附注]
1分型血清質(zhì)量性能符合要求用畢后應(yīng)放置冰箱保存以免細菌污染。
2試劑紅細胞以3個健康者同型新鮮紅細胞混和用生理鹽水洗滌1次以除 卻存在于血清中的抗體及可溶性抗原。
3試管、滴管和玻片必須清潔干燥防止溶血。
4操作方法應(yīng)按規(guī)定一般應(yīng)先加血清然后再加紅細胞懸液以便容易核實 是否漏加血清。
5按理IgM抗-A和抗-B與相應(yīng)紅細胞的反應(yīng)溫度以4℃為最強但為了防止 冷凝集現(xiàn)象的干擾一般仍在室溫(20—24℃)內(nèi)進行試驗37℃可使反應(yīng) 減弱。
6離心時間不宜過長或過短速度不宜過快或過慢以防假陽性或假陰性結(jié) 果。
7觀察時應(yīng)注意紅細胞呈特異性凝集、繼發(fā)性凝固以及緡錢狀排列的區(qū)別。
8判斷結(jié)果后應(yīng)仔細核對、記錄避免筆誤。A5、尿常規(guī)
1尿液標本處理
[收集]
1應(yīng)留取新鮮尿以清晨第一次尿為宜較濃縮條件恒定便于對 照。急診患者可隨時留取。
2使用清潔有蓋容器(一次性容器為好)。
3容器上應(yīng)貼上檢驗條碼。
4尿標本應(yīng)避免經(jīng)血、白帶、精液、糞便等混入。此外還應(yīng)注意避免煙灰、糖紙等異物混入。
5標本留取后應(yīng)及時送驗以免細菌繁殖、細胞溶解等。
6尿膽原等化學(xué)物質(zhì)可因光分解或氧化而減弱。
[防腐與保存]
1冷藏防腐劑隨檢驗?zāi)康亩ǐ惨话惴?℃冰箱可保存6h。
2甲醛用于管型、細胞的防腐按400g兒甲醛05ml100ml尿加 入。由于甲醛具有還原性不適于尿糖等化學(xué)成分檢查。
3甲苯(或二甲苯)用于尿糖、尿蛋白的防腐按甲苯05ml100m1 尿加入。
4麝香草酚用于檢查尿中化學(xué)成分及細菌的防腐劑每100ml加入 018。
[標本處理]
收到門診標本后核對檢驗項目后倒入普通長試管內(nèi)。液面距管中約1cm
檢驗后處理]
標本檢驗后必須經(jīng)過消毒處理后才能排放入下水道內(nèi)。所用盛尿容器及 試管等須經(jīng)30—50g兒漂白粉澄清液或10g/L次氯酸鈉液中浸泡2h也可 用5gL過氧乙酸浸泡30—60min再用清水沖洗干凈。
2常規(guī)檢查
(一)、尿 量
隨氣候、出汗量、飲水量等不同而異一般健康成人約為10—15L 24h即1m1(h/kg體重)小兒按k8體重計算尿量較成人多3—4倍。
(二)、顏 色
根據(jù)尿的顏色進行報告淡黃色、深黃色、褐黃色、紅色、乳白色、深紅 如濃茶、紅茶色、乳白色
(三、透明度
分為透明、微渾、渾濁、明顯渾濁、乳糜狀等。
3生化檢查
[儀器及試劑]
儀器
盈東URISCAN
試劑
盈東尿十一聯(lián)試紙
[操作]
把試紙條全部浸沒于尿液中約3-5秒后取出放于盈東URISCAN的試紙條架上測定。A8、大便常規(guī)
1標本采集
1采集糞便標本的方法因檢查目的不同而有差別如一般檢驗留取新鮮 指頭大小(約5g)即可放入干燥、清潔、無吸水性的有蓋容器內(nèi)送 檢標本容器最好用內(nèi)層涂臘的硬紙盒便于檢查后焚毀。血吸蟲毛 蝴孵化則留全量新鮮便(不少于30g)。細菌檢查的糞便標本應(yīng)收集于滅 菌封口的容器內(nèi)勿混入消毒劑及其它化學(xué)藥品。
2檢查蟯蟲卵需要用軟玻璃紙拭子在清晨排便前由肛門四周拭取標 本也可用棉拭子拭取但均須立即鏡檢。
3檢查阿米巴滋養(yǎng)體應(yīng)于排便后立即檢查。冬季需采取保溫措施迅 速送檢。
4不應(yīng)該采取尿壺或便盆中的糞便標本。若標本中混入尿液可使柔弱 的原蟲致死。用白明膠膜法檢查糞便中的胰蛋白酶活性時可因尿液 中存在溶解白明膠的物質(zhì)而導(dǎo)致其檢查結(jié)果錯誤的增高。糞便標本中 也不可混入植物、泥土、污水等因腐生性原蟲、真菌抱子、植物種 子、花粉易混淆實驗結(jié)果。
5盛糞便標本的容器必須有蓋有明顯標記。糞便標本應(yīng)選擇其中膿血 粘液等病理成分若無病理成分可多部位取材。采取標本后應(yīng)在 一小時內(nèi)完成檢查否則可因9H及消化酶等影響而使糞便中細胞成 分破壞分解。
6檢查膽石、胰石、寄生蟲體及蟲卵計數(shù)應(yīng)收集24h糞便送驗。
7隱血試驗應(yīng)囑患者收集標本前3日禁食動物性食物。連續(xù)檢查3 天并選取外表及內(nèi)層糞便。收集標本后須迅速進行檢查以免因長 時間放置使隱血反應(yīng)的敏感度降低。
8糞膽原定量檢查應(yīng)收集二天的糞便混合稱量從其中取出約20g送 驗。查膽汁成分的糞便標本不應(yīng)在室溫中長時間放置以免陽性率減 低。
9脂肪定量檢查時應(yīng)先食定量脂肪食每天進食脂肪50—1508連續(xù) 6天。從第三天起收集72h糞便也可定時口服色素(剛果紅)作為 留取糞便的指示劑將收集的糞便混合稱量從中取出608左右送 檢。簡易法為在正常膳食情況下收集24h的全部糞便混合稱量 從其中取出約60g送檢測脂肪含量。
10細菌檢驗用標本應(yīng)全部用無菌操作收集。
15、陰道分泌物檢查
陰道分泌物是女性生殖系統(tǒng)分泌的液體其中主要是由陰道分泌的液體。
1PH值
收到標本干棉拭子先用PH試紙測PH值并記錄。
2清潔度
15、陰道分泌物檢查
陰道分泌物是女性生殖系統(tǒng)分泌的液體其中主要是由陰道分泌的液體。
取陰道分泌物用生理鹽水涂片高倍鏡檢查根據(jù)所含白細胞(或膿細 胞)、上皮細胞、桿菌、球菌的多少分成I—Ⅳ度判定結(jié)果見表
第五篇:血液凈化標準操作規(guī)程試題
血液凈化標準操作規(guī)程試題
一、填空:
1、血液凈化室清潔區(qū)包括、、;污染區(qū)包括。
2、、、不得復(fù)用透析器。
3、乙型肝炎和丙型肝炎患者必須 進行感染病區(qū)的機器不能用于患者的治療,應(yīng)配備專門的透析操作用品車。
4、感染患者使用的 和 如病歷、血壓計、聽診器、治療車、機器等應(yīng)有。
5、如果血液污染到透析機應(yīng)立即用濃度的一次性布擦拭去掉血跡后,再用濃度的擦拭消毒機器外部。
6、