第一篇:預膠化淀粉檢驗標準操作規程
目的:建立預膠化淀粉檢驗操作規程,保證檢驗結果的準確性。范
圍:適用于預膠化淀粉的檢驗。責
任:質檢室。內
容: 試劑
碘、碘化鉀、鹽酸、硫代硫酸鈉、無水碳酸鈉、淀粉、重鉻酸鉀、硫酸、醋酸、甘油、乙醇、草酸三氫鉀、無水磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、鄰苯二甲酸氫鉀、硼砂、氫氧化鈣、鹽酸、過硫酸銨、硫氰酸銨、硫酸鐵銨、甲醇、氯化鈉 儀器
垂熔玻璃濾器、容量瓶、分析天平、燒杯、碘量瓶、酸式滴定管、堿式滴定管、具塞棕色玻璃瓶、磁力攪拌器、聚乙烯塑料瓶、酸度計、50目篩、100目篩、研缽、稱量瓶、烘箱、干燥器、坩堝、電熱板、納氏比色管、分液漏斗 操作步驟
3.1 性狀: 本品為白色粉末;無臭,無味。3.2 鑒別: 3.2.1 取本品約1g,加水15ml,煮沸,放冷,即成半透明類白色的凝膠狀物。
3.2.2 取本品約0.1g,加水20ml,混勻,加碘試液數滴,即顯藍色或藍黑色,加熱后逐漸退色。
3.2.3取本品,用甘油醋酸試液制片,在顯微鏡下觀察,為原淀粉和殘片的聚集體,外形失去淀粉粒原有的球形,表面為不規則的顆粒。
3.2.4取本品,在偏光顯微鏡下觀察,其部分顆粒的偏光十字完全消失。3.3 檢查
3.3.1 酸度 取本品10.0g,加中性乙醇(對酚酞指示液顯中性)10ml,搖勻,再加經煮沸放冷的水100ml,電磁攪拌5分鐘,取上清液,依法測定,PH值應為4.5~7.0。檢查法:見PH值測定法檢驗操作規程。
3.3.2 粒度 取本品15.0g,稱定重量,依法檢查,左右往返,邊篩動并拍打15分鐘。能通過六號篩的樣品量不得少于供試量的90%,不能通過三號篩的樣品量不得過供試量的0.5%。
檢查法:見粒度測定法檢驗操作規程。3.4 干燥失重
取本品,取本品,在120℃干燥4小時,減失重量不得過14.0%。檢查法:見干燥失重檢查法檢驗操作規程。
3.5 灰分 取本品1.0g,置熾灼至恒重的坩堝中,精密稱定,緩緩熾灼至完全碳化后,逐漸升高溫度至600~700℃,使完全灰化并恒重,灰化不得超過0.3%。
3.6 鐵鹽 取本品0.50g,加稀鹽酸4ml與水16ml,振搖5分鐘,濾過,用少量水洗滌,合并濾液與洗液,加過硫酸銨50mg,用水稀釋成35ml后,依法檢查,與標準鐵__________________________________________________
溶液1.0ml制成的對照液比較,不得更深(0.002%)。
檢查法:見鐵鹽檢查法檢驗操作規程。
3.7 二氧化硫
取本品20.0g,置具塞錐形瓶中,加水200ml,充分振搖,濾過,取濾液100ml,加淀粉指示液2ml,用碘滴定液(0.005mol/L)滴定,消耗的碘滴定液不得過1.25ml(0.004%)。
3.8 氧化物
取本品5.0g,加甲醇-水(1:1)的混合液20ml,再加6mol/L醋酸溶液1ml,攪拌成均勻的混懸液,精密加臨用新制的飽和碘化鉀溶液0.5ml,混勻,放置5分鐘,不得有明顯的藍棕色或紫色(0.002%)。
3.9 微生物限度 取本品,依法檢查,每1g供試品中除細菌數不得過1000個,霉菌及酵母菌數不得過100個外,還不得檢出大腸埃希菌。
檢查方法:見微生物限度檢查法檢驗操作規程。
__________________________________________________
第二篇:檢驗項目標準操作規程
一 生物安全制度
1、醫務人員
1每1-2年做體檢一次并接受乙肝疫苗接種。
2每1—2年檢查乙肝病毒抗原抗體水平發現乙型肝炎者應進行隔離治 療。
3檢驗人員進入實驗室應穿好工作服不允許在實驗室進食和吸煙。
4檢驗人員在工作前后和被污染后應用肥皂和流水清洗必要時由消 毒液浸泡雙手每季度抽查檢驗人員的手并做細菌培養一次。
2、環境消毒隔離
1實驗室應分為清潔區和操作區清潔區要注意保護不受污染。操作有 氣溶膠可能的標本應配置生物安全柜及其它防護設置如紫外線燈排氣 扇等操作區的工作臺及地面每日用消毒液擦拭一次有污染時隨時消毒 每周大掃除一次。
2采血室每日操作前用清水擦拭操作臺一次采血結束用消毒液擦拭操 作臺、桌子和地面一次紫外線每日照射消毒一次每月空氣細菌培 養一次紫外線強度定期測定。并做記錄。
3、各種檢驗標本的收集送檢必須用相應指定的容器留取不得外溢污染。
4、靜脈及末稍采血應嚴格執行消毒隔離措施靜脈抽血做到一人一針一筒 一巾一帶一消毒所用止血帶及紙墊每日消毒末稍采血一人一片一管 杜絕交叉污染。
5、一次性醫用器具包括采血針注射器、尿杯、血紅蛋白微量吸血吸管應 嚴格做好領發登記注射器先浸泡消毒后由供應室一對一調換統一處 理其余一次性器具浸泡消毒后裝入污物袋送焚燒爐焚燒。
6、檢驗人員在進行靜脈抽血時應嚴格遵守無菌操作技術操作前必須洗手必 須戴好帽子與口罩操作臺和手被污染時應用肥皂和流水認真洗手必要 時用消毒液浸泡雙手酒精、碘酒瓶每周更換消毒兩次。
7、凡是肝炎病人和透析病人的血液標本及疑有黃疸的血標本都視為肝炎的 污染標本應貼上紅色危險標記放在規定區域內引起警惕和防止擴大 污染面。
8、溢出試管外的血液應立即用碘酒棉簽擦拭干凈注意防止玻璃碎片刺傷 手并注意試管有無破裂。
9、當針頭和碎玻璃刺傷手時,用流水沖洗,擠出血水,應立即用碘酒消毒局部。
10、實驗室操作時應戴上手套。吸取標本離心振蕩等應嚴格按操作規程防 止自身和實驗室受污染。
11、已檢查標本與容器分別浸泡于施康1號消毒液(2000mg/L)中兩小時后標 本傾棄一次性容器送焚燒重復使用的經清洗消毒和滅菌后再使用均 要有記錄。有毒化學試劑和放射性試劑使用后要經無害化處理防止污染 環境。
12、菌種、毒種按《傳染病防治法》進行管理。
13、三級醫院必須設置清潔區污染區操作有氣溶膠可能的標本應配置生物 安全柜及其它防護設置如紫外線燈排氣扇等。
14、非科室工作人員不準進入實驗室外來人員參觀需經科主任同意方可進入
二 質量管理制度
1、各專業實驗室根據省臨檢中心的有關規定開展實驗室內的質量控制并 制定有關措施。對室 內質控應每日有記錄對失控情況有糾正方法有預 防性措施對于目前尚無完整的室內質控體系的實驗室應積極創造條 件建立室內質量控制體系。
2、各專業實驗室必須參加部、省的各次室間質控活動對每次質控評價應有 記錄。
3、計量儀器包括分析天平天平、分光光度計等應定期校正每年一 次。
4、大型分析儀器必須專人負責有使用維修記錄。
5、商品化的試劑盒的申購由各專業室的組長負責申報每月一次報科主任審 批不得使用過期無批準文號的劣質試劑進貨統一由科室管理自配 試劑須嚴格校正后方可使用。
6、各專業實驗室必須建立完整的操作程序并應嚴格按程序執行。
7、當日發出的全部檢驗報告單須經當日科室總值班人員嚴格審核后方可發 出。
8、科室在完成嚴格的室內、室間質量控制體系的同時應逐步建立全面質量 控制體系對標本的采集運送保存等納入嚴格的管理之中。每日送檢 的標本應簽收。
9、急診檢驗應嚴格按照急診制度執行。
三 安全制度
1、菌種、毒種、劇毒品及貴重儀器物品指定專人保管、有防盜措施建立帳 冊記錄進出數量定期檢查制度。劇毒藥品專人保管由科室主任主 管試劑的同志負責放保險柜領用時須有主管同志在場作好領用登 記。
2、易燃物品專柜存放普通試劑按常規分類存放并由科室主任和主管試劑 同志負責注意用電安全特別是電爐子、大烤箱、火焰光度計由各科 使用同志負責安全嚴防火災。
3、對工作中可能發生的觸電、失火、玻璃割傷、針頭刺傷、燒傷、不慎中 毒、傳染性標本的污染各實驗室應有應急處理的方法有關人員均應熟 悉。
4、用電設備、電源線路、CO2氣體、給排水系統的安全性符合使用要求不 能帶電檢修儀器。
5、使用強酸堿腐蝕品時應在適當的環境下正確操作防止腐蝕、灼傷、中 毒、火災和爆炸等事件發生。
6、注意安全隨手隨時關門下班時要做好水電門的安全保衛工作防 火防盜防水。
7、科室安全保衛負責鄭軍
四
試劑管理制度
1、各專業實驗室應根據各自的工作需要按月向科主任申報所購試劑并應 做到及時盤存清點入庫做到心中有數。
2、所有試劑的申請進貨一律由科室統一管理嚴格按市衛生局招標要求執 行做到三證齊全。無三無產品。
3、各專業實驗室應對試劑庫存定期檢查不使用過期變質的試劑。
4、自配試劑須以嚴格校正后方可使用。
5、試劑的保存應嚴格按照要求以保證有效期內能有效地使用杜絕浪費現 象。
6、試劑外借一律須經科主任同意方可執行。
7、劇毒試劑必須由科主任和負責科室保衛的同志負責保存放保險箱內使
7、用時應有兩人在場并做好登記。
8、易燃易爆試劑應分開存放遠離火源和電源。
9、供應商所送的試劑必須先經藥庫清點才能接受檢驗科人員清點后必須在
10、貨單上簽字有出入者必須向科主任或試劑管理員、組長報告再將貨單
11、交給試劑管理員以便月底結帳。
12、科室試劑管理員鐘梁
13、六標本管理制度14、15、一、標本采集 16、1、按每個項目要求告訴病人、病房護士或本室采血人員最佳采血時間、采血
17、前空腹或飲食注意、用藥情況、活動情況、體位等。18、2、明確抗凝劑種類、抗凝劑與血的比例、抽血 19、3、體液、分泌物、細菌培養標本按要求留足量、及時送檢。
20、二、標本運送 21、1、運送過程中原則上帶蓋不能用棉花等吸水物品以防倒翻和溢出或雨
22、淋。凡含傳染源的標本必須帶蓋外套尼龍袋以防溢出而污染環境。23、2、不能劇烈振蕩以防標本溶血和有形成分破壞。24、3、必須及時送檢。
25、三、標本接收 26、1、必須認真核對標本上病人姓名、病區、床號、聯號與申請單符合。27、2、必須觀察標本的量、標本類型、是否抗凝或有小凝塊、細菌培養標本是否符
28、合無菌要求。是否有明顯溶血或脂濁。29、3、不符要求的標本必須及時填寫退回理由單及時反饋臨床。
30、四、標本檢測 31、1、在檢測每一過程中都應復核標本接收過程中的每一步驟。32、2、在標本足夠的情況下不能浪費、隨意丟棄或損壞標本。
33、五、標本儲存 34、1、當天不能完成的標本必須分離血清按要求儲存在2℃-8℃或-20℃。35、2、當天檢測完成的標本血常規儲存在2℃-8℃1天以上生化免疫儲在2℃-36、8℃7天以上腦脊液、胸腹水等重要標本儲存在2℃-8℃7天以上。37、3、特殊標本按要求保存。
38、六、標本處理
39、檢驗標本先用含2-3g/L有效氯消毒靈浸泡半小時再煮沸清洗試管烘 干備用。用雙層專用黃色醫用垃圾袋專人收集所有廢棄醫用垃圾。送專門存放醫
用垃圾處統一處理。并做好登記。
一、檢驗科檢測項目標準操作規程
A、臨檢室
A1、血常規檢驗標準操作規程
A2、嗜酸性粒細胞直接計數標準操作規程
A3、紅細胞沉降率測定標準操作規程
A4、血型鑒定標準操作規程
A5、尿常規標3準操作規程
A6、一小時尿沉渣計數標準操作規程
A7、尿乳糜定性檢查標準操作規程
A8、大便常規標準操作規程
A9、蟲卵及包囊濃縮檢查標準操作規程
A10、隱血試驗標準操作規程
A11、腦脊液檢驗標準操作規程
A12、漿膜腔積液檢查標準操作規程
A13、精液檢查標準操作規程
A14、前列腺液檢查標準操作規程
A15、陰道分泌物檢查標準操作規程
A16、胃液檢查標準操作規程
A、檢室
A1、血常規檢驗
1標本
用EDTA-K 2 0.2ul抗凝靜脈血1ml,門診病人在CD-1700儀器上做三分類 測定,住院病人在COULTER HMX儀器上做五分類測定。
2試劑及儀器
COULTER HMX五分類血球分析儀及配套試劑質控用COULTER 4C PLUS 全血質控品COULTER HMX五分類血分析儀及配套試劑質控用 COULTER 5C 全血質控品。血液細胞自動化分析儀介紹
3操作
1門診
a)收到血常規標本后查看核對檢驗項目立即編號放混勻器上混勻 3分鐘。
b)如有血型立即用玻片法和試管法測定血型輸入電腦。
c)血標本在ABBOT CD-1700上檢測結果入庫。
d)對于中間細胞比較多的應當手工涂片染色分類對于血小板等圖形不 好或結果異常較大的應手工復查。
e)結果核對后在半小時內報告。
2病房
a)采集血常規標本后立即編號試管加蓋后放于專用試管架上放入 HMX上自動混勻 b)如有血型用玻片法和試管法測定血型輸入電腦。
c)血標本在COULTER HMX上機檢測結果入庫。
d)對于分類圖形不好的結果應當手工涂片染色分類對于血小板等結果 圖形不好或結果異常較大的應手工復查。復查條件
e)結果核對后簽發報告單。如果急診則電話報告有血型的話通知 病房來拿報告單。血液項目
5特殊規定
在檢驗血常規時,科室所有工作人員及同志如發現以下樣本結果過高可過低,務必 作登記,復查和及時報告,以備查詢。
1.血紅蛋白低于100g/L.2.白細胞低于3000/ul.3.血小板低于8萬/ul.4.發現白細胞分類異常圖形時.5.發現其中一項過高時,或是臨床指定要鏡檢時.6臨床意義
61WBC計數
參考范圍
4-10 3 10 9 /L
1、增加
(l)生理性初生兒、妊娠末期、分娩期、經期、飯后、劇烈運動 后、冷水浴后及極度恐懼與疼痛等。
5特殊規定
在檢驗血常規時,科室所有工作人員及同志如發現以下樣本結果過高可過低,務必 作登記,復查和及時報告,以備查詢。
1.血紅蛋白低于100g/L.2.白細胞低于3000/ul.3.血小板低于8萬/ul.4.發現白細胞分類異常圖形時.5.發現其中一項過高時,或是臨床指定要鏡檢時.6臨床意義
61WBC計數
參考范圍
4-10 3 10 9 /L
1、增加
(l)生理性初生兒、妊娠末期、分娩期、經期、飯后、劇烈運動 后、冷水浴后及極度恐懼與疼痛等。
A3、紅細胞沉降率測定
[標本]
200ul枸櫞酸鈉抗凝靜脈血1.1ml顛倒混勻。[原理]
離體抗凝血液置于特制刻度測定管(魏氏法血沉管)內垂直立于室 溫中一定時間時觀察上層血漿高度的毫米數值報告之。
[儀器及試劑]
MONITOR JI血沉儀、專用血沉管
109mmoIL(32g/L)枸櫞酸鈉溶液取含二分子結晶水的枸櫞酸鈉(分子量29412)328用蒸餾水溶解稀釋至100ml。此液在室 溫保存不得超過2周。
[操作]
1專用血沉管1支加抗凝劑02ml。
2靜脈采血后取下針頭加血至刻度顛倒混勻。
3用血沉管(300mm325mm)吸取上述混勻血液至“0”刻度處拭去管外 附著的血液將血沉管直立在血沉架上。MONITOR JI操作
4記時室溫中靜置lh讀出血沉儀上的讀數即是血沉值。
[參考值]
男:15mm60min 女20mm60min [附注]
1紅細胞在單位時間內下沉的速度與血漿蛋白的量和質血漿中脂類的量 和質紅細胞的大小與數量是否成串錢相聚以及血沉管的內徑、清潔 度、放置位置是否垂直室溫高低等因素都有關系。
2要求
(l)標本采集時避免脂肪血。
(2)血液和抗凝劑比例要準確。
(3)血沉管內徑要標準(25mm)放置要垂直。
(4)做血沉的標本要在采集后3h內測定并充分混勻。
3室溫過低、過高和貧血時對結果都有影響。為此血沉應盡量 放在18—25℃室溫下測定。室溫過高時血沉加快可以按溫度系 數校正。室溫過低時血沉減慢無法校正。
A4、血型鑒定
1ABO血型鑒定
根據紅細胞上有或無A抗原或和B抗原將血型分為A型、B型、AB型及O型 4種。可利用紅細胞凝集試驗通過正、反定型準確鑒定ABO血型。所謂正定 型是用已知抗—A和抗—B分型血清來測定紅細胞上有無相應的A抗原或和B 抗原所謂反定型是用已知A細胞和B細胞來測定血清中有無相應的抗—A或 和抗—B。
[試劑和材料]
1抗—A(B型血)、抗—B(A型血)及抗—A十B(O型血)分型血清制備方 法見本節附注
25A、B及O型試劑紅細胞鹽水懸液制備方法見本節附注
3受檢者血清
4受檢者5紅細胞鹽水懸液制備方法見本節附注。
[方法] 2玻片法
(1)取清潔玻片1張(或白瓷板1塊)用蠟筆劃成方格標明抗-A、抗-B 和抗-A十B分別用滴管滴加抗-A、抗-B和抗-A十B分型血清 l滴 于標明的方格內再各加受檢者2紅細胞懸液1滴混和。
(2)另取潔凈玻片一張(或白瓷板1塊)用蠟筆劃成方格標明A細胞、B細胞和O細胞用滴管各加受檢者血清1滴再分別用滴管滴加 A、B和O型試劑紅細胞懸液1滴。
(3)將玻片(或白瓷板)不斷輕輕轉動使血清與細胞充分混勻連續約 15min以肉眼觀察有無凝集(或溶血)反應。如以玻片作試驗時也 可用低倍鏡觀察結果。附注]
1分型血清質量性能符合要求用畢后應放置冰箱保存以免細菌污染。
2試劑紅細胞以3個健康者同型新鮮紅細胞混和用生理鹽水洗滌1次以除 卻存在于血清中的抗體及可溶性抗原。
3試管、滴管和玻片必須清潔干燥防止溶血。
4操作方法應按規定一般應先加血清然后再加紅細胞懸液以便容易核實 是否漏加血清。
5按理IgM抗-A和抗-B與相應紅細胞的反應溫度以4℃為最強但為了防止 冷凝集現象的干擾一般仍在室溫(20—24℃)內進行試驗37℃可使反應 減弱。
6離心時間不宜過長或過短速度不宜過快或過慢以防假陽性或假陰性結 果。
7觀察時應注意紅細胞呈特異性凝集、繼發性凝固以及緡錢狀排列的區別。
8判斷結果后應仔細核對、記錄避免筆誤。A5、尿常規
1尿液標本處理
[收集]
1應留取新鮮尿以清晨第一次尿為宜較濃縮條件恒定便于對 照。急診患者可隨時留取。
2使用清潔有蓋容器(一次性容器為好)。
3容器上應貼上檢驗條碼。
4尿標本應避免經血、白帶、精液、糞便等混入。此外還應注意避免煙灰、糖紙等異物混入。
5標本留取后應及時送驗以免細菌繁殖、細胞溶解等。
6尿膽原等化學物質可因光分解或氧化而減弱。
[防腐與保存]
1冷藏防腐劑隨檢驗目的而定一般放4℃冰箱可保存6h。
2甲醛用于管型、細胞的防腐按400g兒甲醛05ml100ml尿加 入。由于甲醛具有還原性不適于尿糖等化學成分檢查。
3甲苯(或二甲苯)用于尿糖、尿蛋白的防腐按甲苯05ml100m1 尿加入。
4麝香草酚用于檢查尿中化學成分及細菌的防腐劑每100ml加入 018。
[標本處理]
收到門診標本后核對檢驗項目后倒入普通長試管內。液面距管中約1cm
檢驗后處理]
標本檢驗后必須經過消毒處理后才能排放入下水道內。所用盛尿容器及 試管等須經30—50g兒漂白粉澄清液或10g/L次氯酸鈉液中浸泡2h也可 用5gL過氧乙酸浸泡30—60min再用清水沖洗干凈。
2常規檢查
(一)、尿 量
隨氣候、出汗量、飲水量等不同而異一般健康成人約為10—15L 24h即1m1(h/kg體重)小兒按k8體重計算尿量較成人多3—4倍。
(二)、顏 色
根據尿的顏色進行報告淡黃色、深黃色、褐黃色、紅色、乳白色、深紅 如濃茶、紅茶色、乳白色
(三、透明度
分為透明、微渾、渾濁、明顯渾濁、乳糜狀等。
3生化檢查
[儀器及試劑]
儀器
盈東URISCAN
試劑
盈東尿十一聯試紙
[操作]
把試紙條全部浸沒于尿液中約3-5秒后取出放于盈東URISCAN的試紙條架上測定。A8、大便常規
1標本采集
1采集糞便標本的方法因檢查目的不同而有差別如一般檢驗留取新鮮 指頭大小(約5g)即可放入干燥、清潔、無吸水性的有蓋容器內送 檢標本容器最好用內層涂臘的硬紙盒便于檢查后焚毀。血吸蟲毛 蝴孵化則留全量新鮮便(不少于30g)。細菌檢查的糞便標本應收集于滅 菌封口的容器內勿混入消毒劑及其它化學藥品。
2檢查蟯蟲卵需要用軟玻璃紙拭子在清晨排便前由肛門四周拭取標 本也可用棉拭子拭取但均須立即鏡檢。
3檢查阿米巴滋養體應于排便后立即檢查。冬季需采取保溫措施迅 速送檢。
4不應該采取尿壺或便盆中的糞便標本。若標本中混入尿液可使柔弱 的原蟲致死。用白明膠膜法檢查糞便中的胰蛋白酶活性時可因尿液 中存在溶解白明膠的物質而導致其檢查結果錯誤的增高。糞便標本中 也不可混入植物、泥土、污水等因腐生性原蟲、真菌抱子、植物種 子、花粉易混淆實驗結果。
5盛糞便標本的容器必須有蓋有明顯標記。糞便標本應選擇其中膿血 粘液等病理成分若無病理成分可多部位取材。采取標本后應在 一小時內完成檢查否則可因9H及消化酶等影響而使糞便中細胞成 分破壞分解。
6檢查膽石、胰石、寄生蟲體及蟲卵計數應收集24h糞便送驗。
7隱血試驗應囑患者收集標本前3日禁食動物性食物。連續檢查3 天并選取外表及內層糞便。收集標本后須迅速進行檢查以免因長 時間放置使隱血反應的敏感度降低。
8糞膽原定量檢查應收集二天的糞便混合稱量從其中取出約20g送 驗。查膽汁成分的糞便標本不應在室溫中長時間放置以免陽性率減 低。
9脂肪定量檢查時應先食定量脂肪食每天進食脂肪50—1508連續 6天。從第三天起收集72h糞便也可定時口服色素(剛果紅)作為 留取糞便的指示劑將收集的糞便混合稱量從中取出608左右送 檢。簡易法為在正常膳食情況下收集24h的全部糞便混合稱量 從其中取出約60g送檢測脂肪含量。
10細菌檢驗用標本應全部用無菌操作收集。
15、陰道分泌物檢查
陰道分泌物是女性生殖系統分泌的液體其中主要是由陰道分泌的液體。
1PH值
收到標本干棉拭子先用PH試紙測PH值并記錄。
2清潔度
15、陰道分泌物檢查
陰道分泌物是女性生殖系統分泌的液體其中主要是由陰道分泌的液體。
取陰道分泌物用生理鹽水涂片高倍鏡檢查根據所含白細胞(或膿細 胞)、上皮細胞、桿菌、球菌的多少分成I—Ⅳ度判定結果見表
第三篇:血液常規檢驗標準操作規程
貴州省盤縣中醫院檢驗科SOP文件
血液常規檢驗標準操作規程
1.目的:檢測分析血液中紅細胞、白細胞、血小板、血紅蛋白的數量和質量,對感染、炎癥、血液系統疾病等進行輔助診斷、監測治療效果等。
2.檢測項目:紅細胞計數、血紅蛋白、紅細胞比積、平均紅細胞體積、平均紅細胞血紅蛋白含量、平均紅細胞血紅蛋白濃度、白細胞計數、白細胞分類、血小板計數。
3.標本的采集與運送
3.1 標本類型:靜脈血或手指末梢血。3.2標本要求:標本用EDTA-K2 抗凝; 靜脈血標本量應達到2ml;末梢血20μl。3.3標本運送:室溫運送,4小時內完成檢測。
3.4標本拒收標準:嚴重溶血、凝固、血量少、無條碼、無標識的血液標本不能進行檢測。
4.標本的檢測 儀器及試劑
4.1 儀器:深圳mindrary公司BC—5100全自動血液細胞分析儀。試劑:由mindrary公司提供包括LH溶血劑、LEO(Ⅰ)溶血劑、LBA溶血劑、LEO(Ⅱ)溶血劑、清潔液、稀釋液、探頭清潔液等配套試劑。
4.1.1 檢測原理
貴州省盤縣中醫院
貴州省盤縣中醫院檢驗科SOP文件
采用流式細胞技術,通過檢測光學信號進行白細胞計數及白細胞分類測定;雙鞘流電阻原理進行紅細胞與血小板測定;HiCN-HGB法檢測血紅蛋白。
4.1.2 操作步驟 4.1.2.1開放-全血模式
a.在儀器主界面點擊“計數”,進入計數界面。
b.點擊計數界面“模式”,在彈出的對話框中選擇“開放全血模式”。輸入分析標本的試管號,點擊“CBC+DIFF測量模式”。
c.上下顛倒試管將試管內容物充分混勻,輕輕取下蓋子,防止血液濺出。
d.將試管放到采樣針下,按吸樣鍵,蜂鳴器響后移走試管,儀器自動執行樣本分析。
e.分析結束,結果顯示在屏幕的分析結果區同時自動傳入電腦。4.1.2.2自動-全血模式
a.在儀器主界面點擊“計數”,進入計數界面。
b.點擊計數界面“工作模式”,在彈出的對話框中點擊模式項的“自動—全血”按鈕,進樣模式為自動進樣,血樣模式為全血。點擊“CBC+DIFF”測量模式。
c.在“管架號”、“試管號”編輯框中輸入起始樣本的對應管架號和試管號。點擊“確定”按鈕,保存輸入內容并返回計數界面。
c.將分析標本試管放入對應的試管位,將試管架放入進樣器右槽。
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貴州省盤縣中醫院檢驗科SOP文件 d.點擊計數界面“開始計數”,至分析結束。e.分析完畢,結果直接傳入電腦。4.1.3 室內質量控制
4.1.3.1 質控品:由mindrary公司提供的配套質控品。4.1.3.2 操作方法:選擇“開放—全血”模式,質控品編號9000,計數狀態為綠色圖標。將充分混勻的質控品放到采樣針下,使采樣針可吸入混勻后的質控物。
按吸樣鍵,聽到蜂鳴器響后移開質控物。質控分析結束后,質控結果自動傳入電腦。
5.血細胞的顯微鏡檢查 5.1 鏡檢標準
5.1.1 醫生明確要求涂片鏡檢;
5.1.2 儀器提示有原始或幼稚細胞、變異淋巴細胞、有核紅細胞等異常需鏡檢;
5.1.3 新生兒標本需涂片鏡檢; 5.1.4 WBC≥20×109/L或≤2.0×109/L;
5.1.5淋巴細胞≥45%,需做涂片鏡檢,1-4歲兒童且血細胞計數及他結果正常者除外;
5.1.6 單核細胞≥15%; 5.1.7 嗜酸性粒細胞≥10%; 5.1.8 嗜堿性粒細胞≥3% 5.1.9 PLT>500×109/L或<60×109/L;
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貴州省盤縣中醫院檢驗科SOP文件 5.2.0 提示有PLT聚集,需涂片鏡檢; 5.2 鏡檢步驟 5.2.1 血涂片的制備
5.2.1.1 在距載玻片一端1cm的位置滴加約5μl的抗凝血;末梢血直接用干凈玻片蘸取。
5.2.1.2 用推片使血液沿其邊緣展開,與載玻片30~40度角進行推片。
5.2.1.3 涂片完成后在空氣中自燃晾干。5.2.2 血涂片的染色
5.2.2.1 染色試劑:瑞氏快速染液。5.2.2.2 染色步驟
a.干后的血涂片加上瑞氏染液,染色約1分鐘。b.再加入等量的緩沖液,染色5~10分鐘。c.清水沖洗后,待干后鏡檢。5.2.2.3 鏡檢觀察要求
a.將濕片在高倍鏡下觀察涂片、染色是否良好,否則重新涂片染色。
b.選擇涂片體尾交界、細胞分布均勻不重疊部分進行鏡檢。c.在高倍鏡下辨認細胞不清楚時,必須待玻片干后用油鏡觀察。5.2.2.4 鏡檢觀察的處理
a.根據儀器報警提示的內容,確認鏡下觀察結果是否與儀器提示一致。
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b.發現原始及幼稚白細胞,則必須進行手工分類;如不能確定細胞種類,則報告異常細胞的比例。
c.如果鏡下發現有核紅細胞,則必須對白細胞進行校正。d.如果鏡下觀察有血小板聚集,則必須手工沖池計數血小板;如果是EDTA﹒K2引起的血小板聚集,可用109mmol/L枸櫞酸鈉抗凝劑采集標本,結果需要進行換算。
e.多發性骨髓瘤、冷球蛋白血癥引起的紅細胞聚集,可將血液用儀器稀釋液稀釋3倍,然后37℃水浴箱中10分鐘后,立即上機檢測,結果需要進行換算。
6.生物參考區間
測定項目 男 女 新生兒 WBC(×109/L)4.0~10.0 4.0~10.0 15.0~20.0 RBC(×1012/L)4.0~5.5 3.5~5.0 6.0~7.0 Hb(g/L)120~160 110~150 170~200 HCT(%)40.0~50.0 35.0~45.0 38~68 MCV(fl)80~100 80~100 95~125 MCH(pg)27.0~34.0 27.0~34.0 30~42 MCHC(g/L)320~360 320~360 300~340 PLT(×109/L)100~300 100~300 100~360 7.白細胞分類計數參考值
分類百分率(%)絕對值(×109/L)中性粒細胞50~70 2~7
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貴州省盤縣中醫院檢驗科SOP文件 淋巴細胞 20~400.8~4.0 單核細胞 3~8 12~0.80 嗜酸性粒細胞0.5~5 0.02~0.5 嗜堿性粒細胞0~1 0~0.1 8.危急值
測定項目小于或等于大于或等于 WBC(×109/L)≥30.0
≤2.0 兒童(×109/L)≥35.0
≤1.5 Hb(g/L)≥200
≤60 PLT(×109/L)≥600
≤50 9.臨床意義
9.1 中性粒細胞:中性粒細胞增多分生理性和病理性增多。病理性增多可見于急性感染或炎癥、急性失血、急性中毒及惡性腫瘤等;中性粒細胞減少可見于病毒感染、慢性理化損傷、自身免疫性疾病等。
9.2 淋巴細胞:淋巴細胞病理性增多見于某些慢性感染、腎移植手術后、白血病、再生障礙性貧血、粒細胞缺乏癥等;淋巴細胞減少可見于接觸放射線,應用腎上腺皮質激素或促腎上腺皮質激素,嚴重化膿性感染等情況。
9.3 單核細胞:單核細胞病理性增多見于急性感染恢復期、活動性肺結核、血液病等;單核細胞減少臨床意義不大。
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9.4 嗜酸性粒細胞:嗜酸性粒細胞增多 常見于寄生蟲、變態反應疾病、皮膚病、血液病等;嗜酸性粒細胞減少 其臨床意義較小,見于長期應用腎上腺皮質激素后,某些急性傳染病等。
9.5 嗜堿性粒細胞:嗜堿性粒細胞增多可見于過敏性或炎癥性疾病、骨髓增生性疾病;嗜堿性粒細胞減低臨床意義不明確。
9.6 紅細胞和血紅蛋白減少見于急、慢性紅細胞丟失過多、紅細胞壽命縮短、造血原料不足、骨髓造血功能減退等;紅細胞和血紅蛋白增多見于真性紅細胞增多癥,肺心病等。
9.7 紅細胞比積增高可見于大面積燒傷、脫水等;減低可見于貧血。
9.8 血小板:血小板數量病理性減低見于性白血病、再障、脾亢、血小板 減少性紫癜、敗血癥等;增高見于慢性白血病、真性紅細胞增多癥、急性化膿性感染、脾切除、溶血性貧血等。
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第四篇:血液常規檢驗標準操作規程
昆侖泌尿外科醫院檢驗科 臨檢室作業指導書
文件編號;SZKL-LJ-01
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主題內容
血液常規檢驗標準操作規程
生效日期:20150101 頁碼;
血液常規檢驗標準操作規程 1.目的: 檢測分析血液中紅細胞、白細胞、血小板、血紅蛋白等的數量和質量,對感染、炎癥、血液系統疾病等進行輔助診斷、監測治療效果等。2.檢測項目: 邁瑞BC-2600全自動血球儀上測定血常規19項。包括:白細胞計數(WBC)、中性粒細胞數(Neut#)、淋巴細胞數(Lymph#)、中間細胞計數(MID#)、中性粒細胞比率(Neut%)、淋巴細胞比率(Lymph%)、中間細胞比率(MID %)、紅細胞計數(RBC)、血紅蛋白濃度(Hb)、紅細胞壓積(Hct)、紅細胞平均體積(MCV)、平均血紅蛋白量(MCH)、平均血紅蛋白濃度(MCHC)、紅細胞體積分布寬度變異系數(RDW-CV)、紅細胞體積分布寬度標準差(RDW-SD)、血小板計數(PLT)、平均血小板體積(MPV)、血小板體積分布寬度(PDW)、血小板壓積(PCT)。3.原理:
3.1 血細胞(WBC.RBC.PLT)數量和體積檢測原理:電阻抗法。3.2白細胞分類原理:電阻抗法。白細胞脈沖的大小是由被計數細胞在溶血素中大小決定的。3.3 血紅蛋白測定:采用氰化高鐵血紅蛋白(HICV)比色法。
3.4 RDW、MCH、MCV、MCHC、MPV、PCT、PDW為換算項目。
3.5 HCT測定原理:血細胞產生的脈沖信號的峰值與RBC容積成正比。4.儀器:
廠商名:深圳邁瑞公司。型號:BC-2600。5.試劑:
廠商名:深圳邁瑞公司。
5.1清洗液:注冊號:粵深藥臨械(準)字2013
7.6 觀察儀器測定結果及直方圖,必要時應手工計數及白細胞分類。7.7 審核結果,打印報告。
8.血細胞的顯微鏡檢查(用于對儀器法結果可疑時的復核)8.1 鏡檢標準
8.1.1 醫生明確要求涂片鏡檢;
8.1.2 儀器提示有原始或幼稚細胞、變異淋巴細胞、有核紅細胞等異常需鏡檢; 8.1.3 新生兒標本需涂片鏡檢;
8.1.4 WBC≥20×10^9/L或≤2.0×10^9/L;
8.1.5淋巴細胞≥45%,需做涂片鏡檢,1-4歲兒童且血細胞計數及他結果正常者除外; 8.1.6 單核細胞≥15%;
8.1.7 嗜酸性粒細胞≥10%; 8.1.8 嗜堿性粒細胞≥3% 8.1.9 PLT>500×10^9/L或<60×10^9/L; 8.2.0 提示有PLT聚集,需涂片鏡檢; 8.2 鏡檢步驟
8.2.1 血涂片的制備
8.2.1.1 在距載玻片一端1cm的位置滴加約5μl的抗凝血;末梢血直接用干凈玻片蘸取。8.2.1.2 用推片使血液沿其邊緣展開,與載玻片30~40度角進行推片。8.2.1.3 涂片完成后在空氣中自燃晾干。8.2.2 血涂片的染色
8.2.2.1 染色試劑:瑞氏染色液。8.2.2.2 染色步驟
a.用蠟筆在血膜兩頭畫線,然后將血涂片平放在染色架上。b.加瑞氏染液數滴,以覆蓋整個血膜為宜,染色約1分鐘。c.滴加約等量的緩沖液與染液混合,室溫下染色5-10分鐘。d.用流水沖去染液,待干燥后鏡檢。8.2.2.3 鏡檢觀察要求
a.將濕片在高倍鏡下觀察涂片、染色是否良好,否則重新涂片染色。b.選擇涂片體尾交界、細胞分布均勻不重疊部分進行鏡檢。c.在高倍鏡下辨認細胞不清楚時,必須待玻片干后用油鏡觀察。8.2.2.4 鏡檢觀察的處理
a.根據儀器報警提示的內容,確認鏡下觀察結果是否與儀器提示一致。
b.發現原始及幼稚白細胞,則必須進行手工分類;如不能確定細胞種類,則報告異常細胞的比例。
c.如果鏡下發現有核紅細胞,則必須對白細胞進行校正。
d.如果鏡下觀察有血小板聚集,則必須手工沖池計數血小板;如果是EDTA﹒K2引起的血小板聚集,可用109mmol/L枸櫞酸鈉抗凝劑采集標本,結果需要進行換算。
e.多發性骨髓瘤、冷球蛋白血癥引起的紅細胞聚集,可將血液用儀器稀釋液稀釋3倍,然后37℃水浴箱中10分鐘后,立即上機檢測,結果需要進行換算。昆侖泌尿外科醫院檢驗科 臨檢室作業指導書
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血液常規檢驗標準操作規程
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9.參考區間
中國成年人群血細胞分析參考區間(靜脈血標本儀器法)測定項目男
女
WBC(×10^9/L)
3.5~9.5
3.5~9.5 Neut(×10^9/L)
1.8~6.3
1.8~6.3 Lymph(×10^9/L)
1.1~3.2
1.1~3.2 Neut%
40~75
40~75 Lymph%
20~50
20~50 RBC(×10^12/L)
4.3~5.8
3.8~5.1
Hb(g/L)
130~175
115~150 HCT(%)
0.40~0.50
0.35~0.45 MCV(fl)
82~100
82~100 MCH(pg)
27~34
27~34 MCHC(g/L)
316~354
316-354 PLT(×10^9/L)
125~350
125~350 10.危急值 測定項目≤≥
WBC(×10^9/L)
1.0
Hb(g/L)
180 PLT(×10^9/L)
600 11.臨床意義
11.1 白細胞計數:
11.1.1 生理性變化:白細胞計數結果有明顯的生理性波動,如早晨較低,傍晚較高;餐后較餐前高;劇烈運動、情緒激動時較安靜時偏高;月經期、妊娠、分娩、哺乳期亦可增高;新生兒及嬰兒期明顯高于成人。11.1.2 病理性增多,常見于:
11.1.2.1 急生化膿性感染,尤其是革蘭陽性球菌感染(膿腫、腦膜炎、肺炎、扁桃體炎、闌尾炎)
11.1.2.2 某些病毒性感染:傳染性單核細胞增多癥、流行性乙型腦炎等。11.1.2.3 組織損傷:嚴重外傷、大手術、大面積燒傷、急性心肌梗死等。11.1.2.4 急性大出血 11.1.2.5 白血病
11.1.2.6 惡性腫瘤:肝癌、胃癌、肺癌等。11.1.3
病理性減少,見于:
11.1.3.1 某些感染性疾病,尤其是革蘭氏陰性桿菌感染(傷寒、副傷寒等)。11.1.3.2 某些病毒感染:流感、病毒性肝炎等。11.1.3.3 某些原蟲感染,如瘧疾、黑熱病等
11.1.3.4 某些血液病:再生障礙性貧血、急性粒細胞缺乏癥、巨幼細胞貧血等。11.1.3.5 自身免疫性疾病:SLE、AIDS等。11.1.3.6 脾功能亢進:門脈肝硬化 昆侖泌尿外科醫院檢驗科 臨檢室作業指導書 文件編號;SZKL-LJ-01
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血液常規檢驗標準操作規程
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11.1.3.7 腫瘤化療、放療及某些藥物(氯霉素、磺胺類藥等)反應等。
11.2 中性粒細胞:中性粒細胞增多分生理性和病理性增多。病理性增多可見于急性感染或炎癥、急性失血、急性中毒及惡性腫瘤等;中性粒細胞減少可見于病毒感染、慢性理化損傷、自身免疫性疾病等。
11.3 淋巴細胞:淋巴細胞病理性增多見于某些慢性感染、腎移植手術后、白血病、再生障礙性貧血、粒細胞缺乏癥等;淋巴細胞減少可見于接觸放射線,應用腎上腺皮質激素或促腎上腺皮質激素,嚴重化膿性感染等情況。11.4 紅細胞和血紅蛋白:
11.4.1減少見于:急、慢性紅細胞丟失過多、紅細胞壽命縮短、造血原料不足、骨髓造血功能減退等;
11.4.2增多見于:真性紅細胞增多癥,肺心病等。
11.5 紅細胞比積:增高可見于大面積燒傷、脫水等血液濃縮情況;減低可見于貧血。11.6 紅細胞體積分布寬度(RDW)
11.6.1用于缺鐵性貧血的診斷和療效觀察,缺鐵性貧血時RDW值增大,當給以鐵劑治療有效時RDW值一過性進一步增大,隨后逐漸降到正常。
11.6.2對小細胞低色索性貧血的鑒別診斷.缺鐵性貧血時RDW值增大而輕型海洋性貧血時RDW值正常。
11.6.3用于對貧血的分類(Bassman MCV/RDW分類法),根據MCV、RDW值變化共分為6種類型貧血。
A.小細胞均一性貧血:MCV減小,RDW正常,如輕型海洋性貧血。
B.小細胞不均一性貧血:MCV減小,RDW增大,如缺鐵性貧血。
C.正細胞均一性貧血:MCV、RDW均正常,如慢性病所致貧血。
D.正細胞不均一性貧血:MCV正常,RDW增大,如早期缺鐵性、營養性貧血。
E.大細胞均一性貧血:MCV增大,RDW正常,如再生障礙性貧血。
F.大細胞不均一性貧血MCV、RDW均增大,如巨幼細胞性貧血。
11.7 MCV、MCH、MCHC:這三個參數通常都用于各型貧血的診斷,具體應用如下表: 貧血類型
MCV(82~100)
MCH(27~34)MCHC(316~354)
常見原因及疾病
正常細胞性貧血正常正常正常急性失血、急性溶血、再生障礙性貧血、白血病等
大細胞性貧血>正常>正常正常葉酸、維生素B12缺乏或吸收障礙 單純小細胞性貧血<正常<正常正常慢性炎癥、尿毒癥
小細胞低色素性貧血<正常<正常<正常鐵缺乏、維生素B6缺乏、珠蛋 白肽鏈合成障礙、慢性失血
11.8 血小板:血小板數量病理性減低見于性白血病、再障、脾亢、血小板減少性紫癜、敗血癥等;增高見于慢性白血病、真性紅細胞增多癥、急性化膿性感染、脾切除、溶血性貧血等。
11.9 MPV:研究表明MPV的大小與PLT的多少呈非線性負相關,故在分析MPV的臨床意義時應結合PLT的變化來考慮。
11.9.1鑒別血小板減少癥的病因:骨髓損傷導致血小板減少時,MPV下降;當血小板在外周血中破壞增多導致血小板減少時,MPV增大;當血小板分布異常導致血小板減少時,MPV正常。
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血液常規檢驗標準操作規程
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11.9.2 MPV增高可作為骨髓功能恢復的較早期指標。當骨髓功能衰竭時,MPV與PLT同時持續下降,骨髓抑制越嚴重,MPV越小,當骨髓功能恢復時,MPV值的增大先于PLT數值的增高。
11.9.3血栓前狀態或血栓性疾病時MPV常增高。
12.0 PCT的臨床應用報道尚少。在血小板增多癥、慢性粒細胞性白血病早期PCT常增大。12.1 PDW的增大可能與骨髓巨核細胞的倍體數增大等有關,其臨床應用尚較少。12.注意事項:
12.1 采血時,加入到抗凝管后,應注意充分混勻,避免血液凝固。混勻時,動作要輕,避免血液有形成分破壞。
12.2 樣本測定前,應注意充分混勻,方法如下:①將血樣瓶口朝上置于操作者雙手掌心,雙手來回搓動10次,動作要連貫。②顛倒小瓶,使瓶口朝下,將血樣置于操作者雙手掌心,雙手來回搓動10次。③重復①和②步驟8次。④輕輕顛倒混勻1分鐘左右。12.3 為保證結果準確性,應做好儀器的保養和校準(見保養和校準程序)。12.4 儀器有報警提示或直方圖有異常時,應進行手工方法復查。當WBC>1O.O X10^9/L或<3.0X10^9/L時,應推片瑞氏染色,鏡下復查白細胞分類、形態。當RBC<3.0X10^9/L或PLT<50x10^9/L時,應進行手工方法鏡檢復查。12.5 建議使用儀器配套的試劑。
12.6 樣本應在采血后2分鐘至4小時內檢測完成。
12.7 血液與抗凝劑的比例要適當,lml血液用1.5-2.0mg的EDTA-K2抗凝。
12.8 MID包括單核細胞、嗜酸細胞、嗜堿細胞、幼稚細胞;當MXD>13%時,應推片瑞氏染色,鏡下復查白細胞分類、形態。12.9失控處理:當出現失控現象時,按失控處理程序,尋找失控原因,并扣留該批檢測結果,待查明失控原因并排除后重測樣本,然后才發出報告。13.參考文獻 11.1尚紅、王毓
三、申子瑜主編,全國臨床臨驗操作規程(第4版),人民衛生出版社,2015.
第五篇:金相檢驗操作規程
金相檢驗操作規程
取樣-粗磨-細磨-拋光-腐蝕-顯微觀察評級
1、取樣,取樣要具有代表性,試樣尺寸盡量12-20mm范圍內,截取過程中應防止組織發生變化(要求截取試樣過程中試樣受熱、受外力作用都能盡量小)通常用于切割試樣的有砂輪切割機、原材料檢測試樣:a)試樣的金相檢測面要平行于軋制方向;
2、細磨細磨一般在金相砂紙上對粗磨好的試樣進一步磨制,為拋光作好準備。細磨一般要由粗到細依次經過240#400#800#金相砂紙。每更換一道砂紙,試樣轉動90°角,以觀察上道砂紙劃痕是否全部磨掉。細磨后,將試樣和雙手沖洗干凈。
3拋光 拋光的目的是除去試樣磨面上磨痕,使其呈光亮無痕的鏡面。拋光在涂有金剛石研磨膏的專用拋光機上進行,并在拋光機上沿半徑方向往復移動或轉動,以防產生拋光道痕或拖尾。拋光好的試樣沖洗干凈,并迅速用吹風機吹干。
3.2.5試樣的腐蝕 為進行顯微組織檢驗,須對拋光好的金屬試樣進行腐蝕,以顯示其真實,清晰的組織結構。腐蝕試劑4%硝酸酒精溶液腐蝕金相顯微組織:一般過程:沖洗拋光試樣-酒精擦洗-吹干-腐蝕-沖洗-酒精擦洗-吹干。
根據所需放大倍數選擇物鏡及目鏡。試樣的顯微組織檢驗包括腐蝕前的檢驗和腐蝕后的檢驗。腐蝕前主要檢驗試樣中的夾雜物、裂紋、孔隙等及發現磨制過程中所引起的缺陷。腐蝕后主要檢驗試樣的顯微組織。