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生化知識(shí)點(diǎn)一句話總結(jié)

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第一篇:生化知識(shí)點(diǎn)一句話總結(jié)

◎ RNase P中的RNA稱M1RNA。◎ rRNA前體加工過程需要甲基化,主要是在核糖2’羥基上,真核生物rRNA甲基化程度比原核生物rRNA甲基化程度高。◎ 真核生物rRNA前體的甲基化、假尿苷酰化以及切割是由snoRNA指導(dǎo)的。◎ 真核生物tRNA基因的數(shù)目比原核生物tRNA基因的數(shù)目大。◎ 組蛋白、呼腸孤病毒和不少植物病毒的mRNA并無poly A尾巴。◎ 多聚腺苷化可被類似物3’脫氧腺苷即冬蟲夏草素阻止。◎ 真核生物mRNA內(nèi)部甲基化堿基為N6-甲基腺嘌呤(m6A)。DNA上的甲基化發(fā)生在CpG島上的胞嘧啶的5'-C上形成5'甲基胞嘧啶。◎ 第一類內(nèi)含子包括:四膜蟲rRNA內(nèi)含子、幾種酵母線粒體的內(nèi)含子、噬菌體T4胸苷酸合成酶的內(nèi)含子等,它們有較大的同源性,可自我拼接。◎ 真核蛋白結(jié)構(gòu)基因內(nèi)含子有GT-AG規(guī)律。◎ 真核生物中U1、U2、U4、U5、U6 snRNA參與hnRNA的拼接,U3 snRNA參與rRNA的加工。◎ DNA核酸內(nèi)切酶識(shí)別的是特異核苷酸序列,而RNA核酸內(nèi)切酶識(shí)別的是加工部位的空間結(jié)構(gòu)。◎ RNA復(fù)制的最低速度為35bp每秒。◎ 噬菌體RNA的高級(jí)結(jié)構(gòu)參與了翻譯的調(diào)節(jié)控制。◎ 堿基類似物進(jìn)入體內(nèi)要轉(zhuǎn)變?yōu)橄鄳?yīng)的核苷酸才能表現(xiàn)出抑制作用。◎ 蛋白質(zhì)合成的能量是GTP。◎ 蛋白質(zhì)合成的早期研究是用大腸桿菌的無細(xì)胞體系進(jìn)行的。◎ 在少數(shù)大腸桿菌噬菌體R17、Qβ的RNA基因組中,部分基因的遺傳密碼是重疊的。◎ I可與U、A、C配對(duì)。◎ 識(shí)別mRNA上多肽合成起始點(diǎn)的是16SrRNA。◎ 核糖體大小亞基與mRNA有不同的結(jié)合特性。◎ 多聚核糖體有三維空間結(jié)構(gòu),6個(gè)以上的核糖體組成的多聚核糖體有穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)。◎ 氨酰tRNA合成酶催化的氨基酸活化由是在可溶性胞質(zhì)內(nèi)完成的,而不是在核糖體上完成的。◎ 氨酰tRNA合成酶催化的氨基酸活化首先是氨基酸的羧基端通過酸酐鍵與AMP上的5’-P相連,再轉(zhuǎn)移到tRNA3'端核糖上的2'或3'-OH上形成酯鍵,但只有3'形式才能夠參與下面的轉(zhuǎn)肽反應(yīng)。◎ 活化每分子氨基酸需消耗2個(gè)高能磷酸鍵。◎ 當(dāng)有某種tRNA突變分子出現(xiàn)時(shí),也必定有可以識(shí)別正常氨基酸的tRNA存在。◎ tRNAf與fMet結(jié)合參與肽鏈合成的起始。tRNAm攜帶正常Met摻入肽鏈。◎ 除了fMet-tRNAf之外,所有的氨酰tRNA必須與EF-Tu、GTP結(jié)合后才能進(jìn)入70S核糖體A位點(diǎn)。◎ 嘌呤霉素的結(jié)構(gòu)與氨酰tRNA 3’末的AMP相似,與肽酰轉(zhuǎn)移酶而終止肽鏈合成。◎ 真核的RNA常只有一個(gè)AUG起始密碼子,每種mRNA只能轉(zhuǎn)譯出一種多肽。◎ 氯霉素、四環(huán)素、鏈霉素只抑制原核生物的轉(zhuǎn)譯。新霉素、卡那霉素與原核生物細(xì)胞30S亞基結(jié)合,引起密碼錯(cuò)讀。◎ 亞胺環(huán)己酮只作用于80S核糖體,只抑制真核生物的轉(zhuǎn)譯。白喉毒素與EF2結(jié)合而抑制肽鏈移位。◎ 信號(hào)肽常見的氨基酸有:丙氨酸、亮氨酸、纈氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸。◎ 多肽在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中的修飾有:N-信號(hào)肽的切除、形成雙硫鍵、線性多肽呈一定的空間結(jié)構(gòu)、初步的糖基化作用。◎ 線粒體定向肽富含正電荷氨基酸,如絲氨酸、蘇氨酸。◎ tRNA突變可校正結(jié)構(gòu)基因上的某些突變,使基因產(chǎn)物仍有功能,這稱為基因校正突變。◎ 許多抗生素、毒素都是多肽合成抑制劑。◎ 脂類分子為生物小分子,它們可以聚集成超分子結(jié)構(gòu)。◎ 生物大分子具有高度的特異性,生物間的差別都由它們決定。多糖、肽類聚合物的結(jié)構(gòu)由合成它們的酶決定。◎ 細(xì)胞代謝的原則和方略:將各類物質(zhì)分別納入各自的共同代謝途徑,以少數(shù)種類的反應(yīng)如氧化還原、基團(tuán)轉(zhuǎn)移、水解合成、基團(tuán)脫加、異構(gòu)反應(yīng)等轉(zhuǎn)化為種類繁多的分子。◎ 關(guān)鍵的中間代謝物有:6-磷酸葡萄糖、丙酮酸、乙酰輔酶A。◎ 生酮氨基酸有:亮氨酸、異氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸。它們?cè)诖x途徑中能生成乙酰乙酸。◎ 絲氨酸脫羧后形成膽胺,是腦磷脂的組成部分。它在接受甲硫氨酸給出的甲基后形成膽堿,是卵磷脂的組成部分。◎ 任何催化劑,包括酶在內(nèi),僅能改變化學(xué)反應(yīng)速度,不改變化學(xué)反應(yīng)的平衡點(diǎn)。◎ 在一條代謝途徑中,某些關(guān)鍵部位的正反應(yīng)和逆反應(yīng)往往是由不同的酶所催化,一種酶催化正的反應(yīng),另一種種酶催化逆的反應(yīng)。這類反應(yīng)稱為相對(duì)立的單向反應(yīng)。◎ NADPH主要來自于磷酸戊糖途徑。◎ 酶活性的調(diào)節(jié)包括酶的變構(gòu)效應(yīng)和共價(jià)修飾。◎ 草酰乙酸作為合成氨基酸和核苷酸的前體物質(zhì),能被產(chǎn)物連續(xù)地反饋抑制。◎ 對(duì)PEP羧化酶的激活有:嘧啶核苷酸的前饋激活,乙酰輔酶A的反饋激活,前體二磷酸果糖的前饋激活。◎ 正常情況下,細(xì)胞的能荷約為0.9,變化范圍為0.85——0.95。◎ 連鎖代謝反應(yīng)中一個(gè)酶被激活后,連續(xù)地發(fā)生其它酶的激活,導(dǎo)致原始信號(hào)的放大,這樣的連鎖代謝反應(yīng)系統(tǒng)稱為級(jí)聯(lián)系統(tǒng)(casade system)。◎ cAMP可為環(huán)磷酸二酯酶水解產(chǎn)生5’AMP。◎ 蛋白激酶A有兩種同工酶形式:Ⅰ型和Ⅱ型,它們至少有四個(gè)功能域:2個(gè)cAMP結(jié)合區(qū)域,1個(gè)二聚化區(qū)域,1個(gè)與催化亞基作用的區(qū)域。◎ 磷酸化酶激酶是一種鈣離子依賴的蛋白激酶,細(xì)胞內(nèi)底物為磷酸化酶b。糖原磷酸化酶同時(shí)受到共價(jià)修飾和變構(gòu)作用的調(diào)節(jié)。◎ 肌磷酸化酶激活的級(jí)聯(lián)反應(yīng)中第一個(gè)酶的全稱為肌糖原磷酸化酶激酶的激酶。◎ 高等動(dòng)物細(xì)胞中酶活性的調(diào)節(jié)為磷酸化/去磷酸化作用。細(xì)菌中酶活性的調(diào)節(jié)為腺苷酰化/去腺苷酰化作用。◎ 核膜直接參與DNA復(fù)制的起始過程。◎ 脂肪和糖原都是作為供能物質(zhì)被貯存的。◎ 葡萄糖進(jìn)入肌肉和脂肪細(xì)胞的運(yùn)輸是它們利用葡萄糖的限制過程。◎ 可逆地與膜結(jié)合,并以其膜結(jié)合型和可溶型的互變來影響酶的活性和調(diào)節(jié)酶的活性,這類酶稱雙關(guān)酶。◎ 雙關(guān)酶與膜結(jié)合狀態(tài)和溶解狀態(tài)的構(gòu)象不同,其理化性質(zhì)和動(dòng)力學(xué)參數(shù)也不同。◎ 細(xì)胞內(nèi)ATP濃度的變化,可通過雙關(guān)酶的膜結(jié)合型/可溶型比值的改變來調(diào)節(jié)糖代謝的流量和去向。◎ 線粒體內(nèi)膜的跨膜電位(ΔΨ)為導(dǎo)肽的蛋白轉(zhuǎn)移提供能量。◎ 凡牽引蛋白跨膜運(yùn)送至線粒體內(nèi)基質(zhì)的導(dǎo)肽,一般均含有導(dǎo)向基質(zhì)肽段和水解部位。◎ 泛素的甘氨酸與底物賴氨酸的遠(yuǎn)端氨基形成異肽鍵。通常一個(gè)蛋白可以結(jié)合幾個(gè)泛素分子。◎ 電位門控通道有:Na+通道、K+通道、Ca2+通道,由一條肽鏈組成,跨膜部分形成α-螺旋,中央部分形成離子通道。配體門控通道有:乙酰膽堿受體通道、氨基酸受體、單胺類受體通道、Ca2+激活的K+通道。◎ 神經(jīng)組織對(duì)靶細(xì)胞膜透性和細(xì)胞代謝的調(diào)節(jié)可通過神經(jīng)遞質(zhì)、局部遞質(zhì)、循環(huán)激素三種方式進(jìn)行。◎ 細(xì)胞質(zhì)膜受體分:依賴于神經(jīng)遞質(zhì)的離子通道、與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白相偶聯(lián)的受體、生長(zhǎng)因子受體。◎ 體是信使RNA與蛋白質(zhì)的復(fù)合物。它保護(hù)mRNA免受核酸酶的作用和控制其翻譯功能。◎ 翻譯控制RNA為20-30bp的寡聚核苷酸,可抑制翻譯作用,具寡聚尿苷酸,可與信使RNA形成雙鏈。◎ 酵母中的質(zhì)粒為2μDNA,它包裝在核小體中。◎ 病毒表達(dá)系統(tǒng)有:牛痘病毒(為雙鏈DNA病毒)、昆蟲多角體病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒、腺病毒。◎ Ti質(zhì)粒只用于雙子葉植物和少數(shù)單子葉植物的轉(zhuǎn)基因。◎ DNA完全降解長(zhǎng)用于建立次級(jí)基因文庫(kù)。◎ 常用載體有:細(xì)菌質(zhì)粒、酵母質(zhì)粒、噬菌體、病毒。◎ 表示修飾基團(tuán)在堿基上的寫在堿基符號(hào)左方,表示修飾基團(tuán)在核糖上的寫在堿基符號(hào)左方。◎ Am表示:2’-O-甲基腺苷。ψ表示:假尿嘧啶核苷。DHU表示:二氫尿嘧啶核苷。◎ 雙螺旋結(jié)構(gòu)模型的主要依據(jù)有:X-光衍射數(shù)據(jù)、Norweger研究、Chargaff規(guī)則、電位滴定行為。◎ 原核細(xì)胞中,DNA常與多胺(精胺、亞精胺)結(jié)合;正核細(xì)胞中DNA一般與組蛋白結(jié)合。◎ 提純的DNA為白色纖維狀固體,RNA為白色粉末,不溶于有機(jī)溶劑。◎ 瓊脂糖凝膠電泳一般分離較大的分子,聚丙烯酰胺凝膠電泳用于分離較小的分子。◎ 核酸的變性指核酸雙螺旋的氫鍵的斷裂,變成單鏈。核酸的降解是指多核苷酸鏈上的共價(jià)鍵(3’,5’-磷酸二酯鍵)的斷裂。◎ 變性后DNA的粘度降低,浮力密度升高,生物活性喪失。DNA的變性是爆發(fā)式的。◎ DNA制品應(yīng)保存在較高濃度的緩沖液或溶液中。常用1M/L的NaCl保存。◎ 苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸在近紫外區(qū)有光吸收是因?yàn)槠銻基團(tuán)上含有苯環(huán)共軛雙鍵系統(tǒng)。◎ 含兩個(gè)以上肽鍵的化合物在堿性溶液中與銅離子生成紫紅色到藍(lán)紫色的絡(luò)合物,稱雙縮脲反應(yīng)。◎ 蛋白一級(jí)結(jié)構(gòu)又稱共價(jià)結(jié)構(gòu)。包括肽鏈的數(shù)目、端基組成、氨基酸序列和二硫鍵位置。◎ 單體蛋白是由幾個(gè)獨(dú)立的肽段以二硫鍵連接而成的小分子蛋白。◎ 蛋白質(zhì)變性的表現(xiàn)有:⑴喪失生物活性;⑵溶解度降低,粘度加大,擴(kuò)散系數(shù)變小;⑶化學(xué)性質(zhì)的變化;⑷對(duì)蛋白酶降解敏感性加大。◎ 蛋白質(zhì)變性主要是由蛋白質(zhì)分子內(nèi)部的結(jié)構(gòu)發(fā)生改變而引起的。◎ 血漿脂蛋白按其密度分為:乳糜微粒、極低密度脂蛋白、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白,由脂蛋白、磷脂、脂肪、膽固醇組成,是各種脂質(zhì)在體內(nèi)的運(yùn)輸形式。◎ 活性中心是指酶分子中直接和底物結(jié)合,并和酶的催化作用直接有關(guān)的部位。有兩個(gè)功能部位:結(jié)合部位和催化部位。◎ 酶濃縮液加入等體積的甘油,于-20℃保存。◎ 維生素B2是核躺醇與6,7-二甲基異咯嗪和縮合物。◎ 生物素的結(jié)構(gòu)為帶有戊酸側(cè)鏈的噻吩與尿素結(jié)合的駢環(huán)。◎ 葉酸分子由蝶啶、對(duì)氨基苯甲酸、L-谷氨酸連接二而成。◎ 葉酸參與核酸的合成,是骨髓巨紅細(xì)胞、白細(xì)胞等細(xì)胞成熟和分裂所必需的物質(zhì)。◎ 維生素C是一種己糖酸內(nèi)酯。◎ 植物中,維生素C、谷胱甘肽、NADP+的氧化還原反應(yīng)相偶聯(lián),是呼吸系統(tǒng)的基礎(chǔ)。◎ 硫辛酸是含硫的脂肪酸,是丙酮酸脫氫酶、α-酮戊二酸脫氫酶的輔基,在轉(zhuǎn)酰基中起作用。◎ 維生素D是固醇類物質(zhì)。◎ 糖鏈突出于細(xì)胞膜表面是細(xì)胞間識(shí)別的基礎(chǔ)。◎ 胰凝乳蛋白酶專一地切斷苯丙氨酸和亮氨酸的羧端肽鍵。◎ 酶蛋白的熒光主要來自色氨酸與酪氨酸。◎ 血紅蛋白與氧結(jié)合的過程呈協(xié)同效應(yīng),是通過血紅蛋白的變構(gòu)現(xiàn)象來實(shí)現(xiàn)的。它的輔基是血紅素。由組織產(chǎn)生的二氧化碳擴(kuò)散至紅細(xì)胞,從而影響血紅蛋白和氧氣的親和力,這稱為波爾效應(yīng)。◎ 膠原蛋白是由3股肽鏈組成的超螺旋結(jié)構(gòu)的大分子蛋白,并含有稀有的羥脯氨酸和羥賴氨酸,它們是在翻譯后經(jīng)羥化加工而形成的。◎ 胰島素是胰島-β-細(xì)胞分泌的多肽激素,是由前胰島素原經(jīng)專一性蛋白水解,失去N端信號(hào)肽成為胰島素原。再經(jīng)肽酶激活失去C肽,最后形成具有生物活性的胰島素。◎ 橫紋肌的結(jié)構(gòu)蛋白主要是肌動(dòng)蛋白和肌球蛋白。它們各自通過線性締合而成細(xì)肌絲和粗肌絲,肌肉的運(yùn)動(dòng)和肌原纖維的收縮就是這兩種絲相互滑動(dòng)的結(jié)果。◎ 多聚L-谷氨酸的比旋隨PH改變是因?yàn)闃?gòu)象改變,L-谷氨酸的比旋隨PH改變是因?yàn)殡姾刹煌!?蛋白的磷酸化位點(diǎn)有絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸。◎ 氨基酸定量分析的經(jīng)典方法是茚三酮。氨基酸序列測(cè)定中最普遍的方法是PITC法。◎ 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜的表面附著大量核糖體是肽鏈合成的場(chǎng)所,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜的腔內(nèi)是新生肽鏈折疊、修飾的場(chǎng)所。高爾基體的主要功能是糖蛋白的肽鏈修飾和蛋白分類及細(xì)胞定位。◎ 分離蛋白混合物的方法主要是根據(jù)蛋白的下列性質(zhì):分自大小、溶解度、電荷、吸附作用/對(duì)其它分子的親和力。◎ 蛋白的磷酸化是可逆的,蛋白磷酸化需要蛋白激酶,蛋白去磷酸化需要蛋白磷酸酯酶。◎ 骨骼肌肉的收縮主要由兩種收縮蛋白肌動(dòng)蛋白和肌球蛋白以及兩種跳進(jìn)蛋白肌鈣蛋白和凝血酶原所完成。◎ 真核細(xì)胞中已合成的蛋白質(zhì)通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜運(yùn)輸時(shí)有信號(hào)肽、信號(hào)識(shí)別顆粒、停泊蛋白、信號(hào)肽酶等參與識(shí)別和運(yùn)輸作用。◎ 免疫球蛋白G在用木瓜蛋白酶處理時(shí),可產(chǎn)生Fab片段,在用胃蛋白酶處理時(shí),可產(chǎn)生Fab’2片段。◎ 氨基酸脫羧酶需要磷酸吡哆醛作為輔酶,絲氨酸轉(zhuǎn)羥甲基酶需要四氫葉酸作為輔酶。◎ 蛋白激酶對(duì)糖代謝的調(diào)節(jié)在于調(diào)節(jié)糖原磷酸化酶和糖原合成酶。◎ 酶可以分位六大類:氧化還原酶、轉(zhuǎn)移酶、水解酶、裂合酶、異構(gòu)酶、連接酶合成酶 ◎ 用酶偶聯(lián)法測(cè)定果糖-6-磷酸激酶的活性可以用醛縮酶、丙酮酸異構(gòu)酶和甘油磷酸異構(gòu)酶和NADH測(cè)定340nm光吸收的變化;也可以用磷酸烯醇式丙酮酸激酶、乳酸脫氫酶和NADH測(cè)定340nm光吸收的變化。◎ 果糖磷酸激酶催化F-6-P和ATP生成F-1,6-P。其逆反應(yīng)由果糖-1,6-二磷酸酯酶催化。逆向反應(yīng)和正向反應(yīng)不是同一個(gè)酶催化,構(gòu)成了一個(gè)循環(huán)稱底物循環(huán)。◎ 在動(dòng)物組織中蛋白激酶就其底物磷酸化的殘基種類,可分為三類:Ser/Thr、Tyr、Ser/Thr/Tyr蛋白激酶,而在微生物中還發(fā)現(xiàn)His殘基的蛋白激酶。◎ 一個(gè)有效的自殺性抑制劑應(yīng)具備:⑴無酶不反應(yīng);⑵為靶酶專一激活;⑶與靶酶反應(yīng)比解離更迅速。◎ 酶與酶或酶與蛋白相互作用是廣泛存在的,如酶與抗體,酶蛋白與蛋白激酶,酶與蛋白類激活劑或抑制劑,除此之外有蛋白水解酶對(duì)蛋白質(zhì)的降解,凝血過程中各個(gè)因子形成的級(jí)聯(lián)反應(yīng),補(bǔ)體系統(tǒng)中各組分,的相互作用,信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中諸多蛋白質(zhì)質(zhì)間的相互作用,肌肉中各組分間的相互作用。◎ 生物體內(nèi)有一些核苷酸衍生物可作為輔酶而作用,如NAD+、NADP+、FAD、CoA。◎ 一些生長(zhǎng)因子有酶的活性,如表皮生長(zhǎng)因子(GEF)受體有蛋白酪氨酸激酶活性,轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(TGFβ)受體有蛋白有絲氨酸/蘇氨酸激酶活性。◎ 核酸分子中含有嘌呤堿、嘧啶堿,所以對(duì)波長(zhǎng)260nm的光有強(qiáng)烈的吸收。◎ 轉(zhuǎn)移核糖核酸一般是由74個(gè)到85個(gè)核苷酸所組成。◎ 真核生物染色體DNA的主要結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是內(nèi)含子和重復(fù)序列。◎ 細(xì)菌氨基酸饑餓時(shí),rRNA的合成受到ppGpp、ppGppp的調(diào)節(jié),其合成是由空載tRNA引起的。◎ 核苷酸生物合成時(shí),從IMP(肌苷酸)轉(zhuǎn)變?yōu)锳MP經(jīng)過腺苷酰琥珀酸,轉(zhuǎn)變?yōu)镚MP經(jīng)過黃嘌呤核苷酸(XMP)。◎ 作為克隆載體的質(zhì)粒須具備的條件有:復(fù)制起點(diǎn)、篩選標(biāo)記、在非功能區(qū)的單一酶切位點(diǎn)。◎ 核苷三磷酸在代謝中起重要作用。ATP是能量和磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)移的重要物質(zhì),UTP參與單糖轉(zhuǎn)變和多糖合成,CTP卵磷脂合成,GTP供給肽鏈合成時(shí)所需的能量。◎ A5’pppp5’A經(jīng)蛇毒磷酸二酯酶部分酶解可以產(chǎn)生ATP和AMP。◎ 造成一個(gè)單順反子產(chǎn)生多種蛋白質(zhì)的原因有:基因重排、選擇性拼接和RNA編輯。◎ 真核生物tRNA的加工有剪切、修飾、剪接、接CCA、編輯。◎ snRNA主要參與mRNA的加工成熟,snoRNA主要參與rRNA的加工成熟。◎ 已知核糖體失活蛋白有兩類,它們分別具有位點(diǎn)專一性的N-糖苷酶和磷酸二酯酶活性 ◎ 纖維素和直鏈淀粉都是葡萄糖的多聚物,在纖維素中葡萄糖的構(gòu)型是β-吡喃,連接方式為1→4連接;在直鏈淀粉中葡萄糖的構(gòu)型是α-吡喃,連接方式為1→4連接。◎ 辛基葡萄糖可以用來增溶膜蛋白。◎ 直鏈淀粉是一種多糖,它的基本單位是α-D-葡萄糖,它們以1→4糖苷鍵連接;纖維素也是一種多糖,它的基本單位是β-D-葡萄糖,它們以1→4糖苷鍵連接。◎ 在脂肪酸的分解代謝過程中,長(zhǎng)鏈脂酰輔酶A以脂酰肉堿的形式運(yùn)到線粒體內(nèi),經(jīng)過β-氧化作用,生成乙酰輔酶A,參加三羧酸循環(huán)。◎ 用于膜蛋白研究的去垢劑應(yīng)具備的性質(zhì)是親水親脂平衡值大于15,臨界團(tuán)粒濃度高。◎ 研究放射性同位素標(biāo)記的配基與膜上受體結(jié)合常用的方法有:平衡透析、超離心、凝膠過濾、超濾。◎ 腦下垂體分泌的屬于糖蛋白激素有促卵泡激素、促甲狀腺激素、促黃體生成激素。◎ 維生素A是萜類化合物;維生素C是糖類化合物;維生素D是固醇類化合物。◎ 視紫紅蛋白的輔基是11-順視黃醛。◎ 生物體內(nèi)關(guān)鍵的三個(gè)中間代謝物是:6-磷酸葡萄糖、丙酮酸、乙酰CoA ◎ 在糖異聲作用中由丙酮酸生成磷酸烯醇式丙酮酸,在線粒體內(nèi)丙酮酸生成草酰乙酸是丙酮酸羧化酶催化的,同時(shí)消耗1ATP;然后在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)經(jīng)磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶催化,生成磷酸烯醇式丙酮酸,同時(shí)消耗1GTP。◎ 生物工程主要包括:發(fā)酵工程、基因工程、細(xì)胞工程、蛋白質(zhì)工程、糖工程。◎ NO是最小的信號(hào)分子,其主要功能有:⑴改變cGMP水平參與神經(jīng)遞質(zhì)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo);⑵抑制血小板凝集,⑶激活DNA修復(fù)酶;⑷高濃度時(shí)促進(jìn)前列腺素合成;⑸引起細(xì)胞衰老和死亡。

第二篇:OLYMPUS生化一點(diǎn)總結(jié)

[原創(chuàng)]看了OLYMPUS生化一點(diǎn)總結(jié) Post By:2006-8-22 15:41:00 奧林巴斯光學(xué)工業(yè)株式會(huì)社創(chuàng)立于1919年,1920年首次在日本成功地將顯微鏡商品化,從而作為精密、光學(xué)技術(shù)的代表企業(yè)開始起步。

該公司以先進(jìn)的光學(xué)技術(shù)及精密工藝為起點(diǎn),經(jīng)過多年的研制與開發(fā),于1968年初成功地生產(chǎn)出第一臺(tái)自動(dòng)生化分析儀,從而首次涉足自動(dòng)生化分析儀器領(lǐng)域。1974年生產(chǎn)出日本第一臺(tái)使用速率法的自動(dòng)生化分析儀ACA4型(12通道)。從20世紀(jì)70年代初開始至90年代,Olympus公司生產(chǎn)了十幾種型號(hào)的大型及超大型自動(dòng)生化分析儀,并于1994年開始進(jìn)入中國(guó)市場(chǎng)。1996年以后更先后推出AU1000、AU400、AU640等大中型儀器,使在中國(guó)市場(chǎng)的占有量上升為500臺(tái)左右。在新世紀(jì)到來之時(shí),Olympus公司推出了全新設(shè)計(jì)的AU2700及AU5400。Olympus新儀器的主要設(shè)計(jì)思想是使大型實(shí)驗(yàn)室的成本消耗降低的同時(shí)儀器保養(yǎng)工作量也減少,而工作效率大為提高。

1、集束式點(diǎn)光源:該公司于1996年率先在AU600型生化儀上采用,以后生產(chǎn)的各機(jī)型均采用該技術(shù),簡(jiǎn)而言之,該系統(tǒng)在光源和比色杯之間使用一組特制透鏡,其目的是將原始光源燈投射出的光通過比色杯時(shí)將光束變成一束點(diǎn)光源(與傳統(tǒng)儀器的楔形光束部同)。這樣,即使比色杯最小反應(yīng)體積只有120μl,光束也能完全通過。

2、光/數(shù)碼信號(hào)直接轉(zhuǎn)換技術(shù):1996年該公司首次在AU600型生化儀上采用光/數(shù)碼信號(hào)直接轉(zhuǎn)換技術(shù),它將光路種的光信號(hào)直接轉(zhuǎn)變成數(shù)碼信號(hào),將電磁波對(duì)信號(hào)的干擾及信號(hào)傳遞過程種的衰減完全消除。在傳統(tǒng)光路種,儀器、電機(jī)、電源及生化儀本身均會(huì)產(chǎn)生大量電磁波,這些電磁波對(duì)電信號(hào)產(chǎn)生不同程度的干擾。同時(shí),電信號(hào)在傳導(dǎo)過程中也有一定程度的衰減。這些因素都會(huì)影響測(cè)定結(jié)果的穩(wěn)定性和精確性。Olympus革新性的將光信號(hào)轉(zhuǎn)換成數(shù)碼信號(hào),同時(shí)采用光導(dǎo)纖維傳輸信號(hào),這樣可將測(cè)試精度提高進(jìn)百倍,其發(fā)展趨勢(shì)必將是今后生化儀優(yōu)先采用的技術(shù)。

3、進(jìn)樣系統(tǒng):

(1)常規(guī)樣品:1980年該公司開始推廣軌道式進(jìn)樣,最初采用后軌道,自1996年以后,該公司所有的生化儀全部改用側(cè)軌道和前軌道。使進(jìn)樣既方便靈活又具有可擴(kuò)展成自動(dòng)化實(shí)驗(yàn)室的潛力。每個(gè)樣本架可放置10個(gè)樣品,樣品架按功能及顏色分為常規(guī)、急診、質(zhì)控、定標(biāo)、重測(cè)、空白樣品架,儀器能自動(dòng)識(shí)別。

(2)急診樣品;:AU系列生化分析儀均采用兩種急診樣品插入方式。①獨(dú)立急診臺(tái)方式。生化儀備有一專用急診轉(zhuǎn)盤,可同時(shí)放置22個(gè)急診樣品,另有7個(gè)位置可放置質(zhì)控品和校準(zhǔn)品,急診轉(zhuǎn)盤具有另冷藏功能,且可優(yōu)先檢測(cè)。如果使用專門配套的急診試劑,4min后即可查到7項(xiàng)急診結(jié)果;更設(shè)計(jì)有“一觸即發(fā)”功能,即使毫無操作儀器經(jīng)驗(yàn)的人,也能勝任急診工作。一般情況下急診臺(tái)檢測(cè)血清樣品,也可以檢測(cè)尿、腦脊液燈。急診轉(zhuǎn)盤也具有條形碼閱讀功能。需要測(cè)定急診樣品時(shí),可隨時(shí)插入,不影響常規(guī)樣品的測(cè)試排序。②樣品架急診方式。AU系列生化分析儀均可使用軌道進(jìn)行急診樣品插入,方法為使用紅色樣品架,當(dāng)軌道上放有紅色樣品架時(shí),機(jī)器可自動(dòng)判斷為急診檢測(cè)樣品。

(3)重測(cè)樣品:AU系列生化分析儀均可自動(dòng)重測(cè)樣品,當(dāng)測(cè)試樣品的結(jié)果超出了用戶定義的范圍,即可自動(dòng)重測(cè)。如工結(jié)果偏高,則稀釋后再測(cè)(后稀釋);如果結(jié)果偏低則增加樣品量后再測(cè)。

(4)樣品前稀釋:由于軟件功能種稀釋比例最高為1:150,當(dāng)一些免疫及特殊項(xiàng)目需更大稀釋比例時(shí),需使用前稀釋功能,其方法為將待測(cè)樣品加入比色杯中稀釋,稀釋倍數(shù)5~100倍,再將稀釋樣品加入測(cè)光比色杯中進(jìn)行固定程序分析。

4、探針系統(tǒng):傳統(tǒng)的液面探針技術(shù)檢測(cè)液面時(shí)通過阻抗,或者時(shí)測(cè)定電容電流。樣品探針設(shè)計(jì)中具有超聲波頭,而超聲波常常受周圍環(huán)境的影響。當(dāng)環(huán)境污染改變可導(dǎo)致超聲波回音碼的變化。AU系列樣品探針為單根雙腔型探針。樣品量范圍1.6~25μl,再檢時(shí)從1μl開始,0.1μl步進(jìn),并采用隨量跟蹤技術(shù)以保證加樣零誤差。

⑴自動(dòng)液面檢測(cè):探針帶有感應(yīng)裝置,探到液面后會(huì)自動(dòng)停止下降。⑵隨量控制技術(shù):探針可依據(jù)吸入液體的多少,自動(dòng)調(diào)節(jié)探針的下降高度。探針液會(huì)自動(dòng)調(diào)節(jié)高度以放置加注液體時(shí)濺到比色杯壁上,保證超微量分析的精確性。

⑶智能防撞保護(hù)功能:探針遇到縱向或橫向一定阻力后會(huì)停止運(yùn)動(dòng)以保護(hù)探針,但只停止被撞探針的運(yùn)動(dòng),以前已加試劑及樣品的測(cè)試?yán)^續(xù)進(jìn)行。

⑷防堵及探測(cè)血凝塊功能:探針能自動(dòng)探測(cè)血清中的血凝塊或纖維蛋白而報(bào)警。當(dāng)發(fā)生堵針時(shí),探針內(nèi)有一強(qiáng)水壓將堵物沖出,可免除堵針時(shí)造成的測(cè)試結(jié)果不準(zhǔn)確。發(fā)生堵針并處理后的樣品會(huì)自動(dòng)重測(cè)。

5、恒溫系統(tǒng):目前恒溫系統(tǒng)應(yīng)用較為廣泛的使水浴式恒溫和空氣浴。水浴式恒溫是溫控裝置是反應(yīng)溫度控制在37℃±0.1℃的水平,開機(jī)后水浴可以自動(dòng)更換,換水后,儀器自動(dòng)加入一定量水浴保護(hù)劑,其作用有:①使恒溫水具有導(dǎo)電性;②抑制細(xì)菌生長(zhǎng)③潤(rùn)化比色杯以免產(chǎn)生氣泡。測(cè)定期間÷恒溫水浴不斷循環(huán)轉(zhuǎn)動(dòng),通過恒溫水的導(dǎo)電性保持恒定的水浴量,通過溫控裝置保持37℃±0.1℃的水平。水浴恒溫的優(yōu)點(diǎn)是溫度均勻、穩(wěn)定;缺點(diǎn)是升溫緩慢,開機(jī)預(yù)熱時(shí)間長(zhǎng),因水質(zhì)化(微生物、礦物質(zhì)沉積)影響測(cè)定,因測(cè)要定期換水和比色杯。為了加熱均勻和防止變質(zhì),往往要設(shè)置馬達(dá)循環(huán)轉(zhuǎn)動(dòng)和添加防腐劑。

空氣浴恒溫的優(yōu)點(diǎn)是升溫迅速,無需保養(yǎng);缺點(diǎn)是溫度易受外界環(huán)境影響。恒溫系統(tǒng)突破性地采用氟利昂為反應(yīng)槽恒溫。反應(yīng)杯放置在內(nèi)部密封有氟利昂的金屬環(huán)上,機(jī)內(nèi)專門一塊控制電路板,控制反應(yīng)恒溫、使反應(yīng)盤內(nèi)的溫度始終在30℃±0.1℃或37℃±0.1℃,而且變溫速度快。通過計(jì)算可得出25℃時(shí)的結(jié)果。恒溫可靠,使得樣品與試劑反應(yīng)穩(wěn)定完全,保證檢驗(yàn)數(shù)據(jù)準(zhǔn)確。

獨(dú)創(chuàng)的恒溫液循環(huán)加溫方式,集干式空氣浴和水浴的優(yōu)點(diǎn)。它是在比色杯周圍循環(huán)流動(dòng)一種無味、無污染、無變質(zhì)、不蒸發(fā)的穩(wěn)定液。在比色杯與恒溫液間有1mm空氣夾縫,恒溫液通過加熱夾縫的空氣達(dá)到恒溫。這種技術(shù)既有水浴恒溫溫度穩(wěn)定、均勻的優(yōu)點(diǎn),又具有空氣浴升溫迅速、無需維護(hù)保養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)。恒溫液為熱容量高、蓄熱能量強(qiáng)、無腐蝕的液體,使恒溫均勻穩(wěn)定。加上比色杯為可永久使用的硬質(zhì)石英玻璃,免得定期更換與保養(yǎng)。

6、攪拌系統(tǒng):

攪拌系統(tǒng)是指樣品與試劑混合后須迅速分布均勻,其目的是更好更快測(cè)定其反應(yīng)系統(tǒng)中的吸光度變化。OLYMPUS生化分析儀采用獨(dú)創(chuàng)的四頭回旋式雙重清洗攪拌棒,攪拌棒表面采用不沾涂層,具有不沾異物,無攜帶污染物的特點(diǎn)。其攪拌為四頭螺旋式高度旋轉(zhuǎn)攪拌棒,旋轉(zhuǎn)方向與螺旋方向相反,這樣攪拌時(shí)比色杯內(nèi)容物不外溢,不產(chǎn)生氣泡,使檢測(cè)結(jié)果更準(zhǔn)確。攪拌棒一頭攪拌樣品或試劑,另外三頭分別進(jìn)行以清洗液清洗,溫水自動(dòng)沖洗及風(fēng)干,四個(gè)步驟同時(shí)進(jìn)行。這樣,既加快了沖洗速度,又提高了沖洗質(zhì)量,使攪拌系統(tǒng)不產(chǎn)生攜帶污染。

7、沖洗系統(tǒng):

吸樣針和攪拌棒:激流式單向沖洗和多步驟沖洗。樣品、試劑探針的沖洗采用全新的“激流”(瀑布)式單向沖洗池。水流為從上向下的單向沖洗,將探針攜帶的污物沖向一排水口(就像人在自來水龍頭洗手)。較之傳統(tǒng)的涌泉式(就像人在洗臉盆內(nèi)洗手,不能完全洗凈)沖洗更干凈、徹底。該技術(shù)用以改善沖洗效果,提高測(cè)試的準(zhǔn)確性,防止交叉污染。

比色杯:OLYMPUS生化分析儀采用先進(jìn)的溫水八步驟自動(dòng)清洗比色杯,使用更新的抽干技術(shù),每次沖洗后遺留水量少于1μL,然后進(jìn)行風(fēng)干,使比色杯沖洗更干凈,徹底,防止項(xiàng)目間的交叉污染。為了不影響速度,比色杯實(shí)行分組沖洗,即測(cè)定與沖洗同時(shí)進(jìn)行,隨時(shí)準(zhǔn)備好測(cè)定使用的比色杯。通過編碼盤測(cè)定每個(gè)比色杯,自動(dòng)標(biāo)出不合要求的比色杯,提示進(jìn)一步處理。反應(yīng)盤內(nèi)裝有高質(zhì)量石英玻璃制成的反應(yīng)杯,杯子寬度0.5cm,使試劑和樣品用量大大減小,試劑量在200~300μL,樣品量3~26μL。由于是獨(dú)立的反應(yīng)杯,當(dāng)杯子污染或損壞時(shí),便于取出清洗和更換。

比色杯沖洗八步流程:污染比色杯→加注清洗劑→吸干→加注清洗劑→吸干→加注溫水→吸干→加注溫水→吸干→加注溫水→吸干(殘留水量<1μL)→擦干、干燥→干凈比色杯。

8、比色杯 AU2700的反應(yīng)盤共有330個(gè)比色杯,采用單盤雙輪式。比色杯為內(nèi)外2圈,比色杯內(nèi)外圈2個(gè)比色杯同時(shí)比色。比色杯采用硬質(zhì)石英玻璃,光徑6mm,耐酸耐堿,自動(dòng)沖洗,可永久使用。儀器自動(dòng)檢測(cè)比色杯透光性,當(dāng)發(fā)現(xiàn)有未清洗干凈的比色杯時(shí),會(huì)跳過該杯繼續(xù)進(jìn)行檢測(cè)。

9、試劑系統(tǒng) AU系列生化分析儀均采用開放式設(shè)計(jì),用戶可自行選擇試劑。試劑瓶可分120ml、60ml、30ml、15ml幾種,用戶根據(jù)工作量大小自行選定。使用120ml試劑瓶時(shí),一瓶試劑可檢測(cè)多達(dá)4000個(gè)測(cè)試。該儀器使用條形碼閱讀試劑位及固定試劑位2種方式,開機(jī)后自動(dòng)檢測(cè)試劑量及可測(cè)項(xiàng)目數(shù)量,試劑倉(cāng)采用半導(dǎo)體制冷(4~12℃)。

用戶可根據(jù)自身經(jīng)濟(jì)實(shí)力選擇使用配套的試劑。如使用該公司試劑,條形碼登錄會(huì)自動(dòng)檢測(cè)項(xiàng)目、出廠日期、有效期等。原廠試劑為濃縮型,儀器自動(dòng)稀釋后進(jìn)行檢測(cè)。該公司同時(shí)生產(chǎn)各種規(guī)格的定標(biāo)液和質(zhì)控液,若使用該公司的定標(biāo)液校正儀器能使測(cè)定結(jié)果更穩(wěn)定可靠。

10、電子系統(tǒng) 采用多微處理器(CPU)系統(tǒng),各工作單元如光路、恒溫、加樣、攪拌、清洗等均有獨(dú)立CPU。各CPU之間的通訊采用無噪音干擾的網(wǎng)絡(luò)連接及傳送,以提高速度和準(zhǔn)確性、穩(wěn)定性。操作系統(tǒng)采用Windows NT新圖形軟件。

11、條形碼登錄 AU系列生化儀條形碼系統(tǒng)均為標(biāo)準(zhǔn)配置。條形碼識(shí)別采用混合式,可使用NW7,Code128,Zof5standard,ISBTCode1,Zof5interleaved等,最大可使用22位。AU系列生化儀共采用5部條形碼登錄。配備有樣品架、樣品管(患者ID號(hào))、急診樣品、試劑

1、試劑2共5部條形碼閱讀器。

12、軟件功能 采用Windows NT軟件,圖形操作界面。AU2700主計(jì)算機(jī)能存儲(chǔ)60000個(gè)患者數(shù)據(jù),20000個(gè)反應(yīng)曲線,并通過Internet進(jìn)行遠(yuǎn)程培訓(xùn)及儀器故障判斷。在樣品質(zhì)量分析種,可分析出溶血、脂濁、黃疸及血凝塊等情況并給予提示報(bào)警。

第三篇:生化實(shí)驗(yàn)總結(jié)

一、實(shí)驗(yàn)技術(shù)

1.關(guān)于糖:本學(xué)期我們學(xué)習(xí)了兩種總糖樣品處理方法(面粉總糖酸水解以及肌糖原無氧酵解)以及兩種測(cè)定還原糖含量的方法(斐林試劑熱滴定及3,5-二硝基水楊酸法)。還原糖的測(cè)定是糖定量測(cè)定的基本方法。利用糖的溶解度不同,可將植物樣品中的單糖、雙糖和多糖分別提取出來,對(duì)沒有還原性的雙糖和多糖,可用酸水解法使其降解成有還原性的單糖進(jìn)行測(cè)定,再分別求出樣品中還原糖和總糖的含量(還原糖以葡萄糖含量計(jì))。

一種是費(fèi)林試劑熱滴定定糖法:在沸熱條件下,用還原糖溶液滴定一定量的費(fèi)林試劑時(shí), 將費(fèi)林試劑中的銅離子還原為氧化亞銅, 以亞甲基藍(lán)為指示劑, 稍過量的還原糖立即將藍(lán)色的氧化型亞甲基藍(lán)還原為無色的還原型亞甲基藍(lán), 指示滴定終點(diǎn)。

另一個(gè)是3,5-二硝基水楊酸法測(cè)定還原糖:還原糖在堿性條件下加熱被氧化成糖酸及其它產(chǎn)物,3,5-二硝基水楊酸則被還原為棕紅色的3-氨基-5-硝基水楊酸。在一定范圍內(nèi),還原糖的量與棕紅色物質(zhì)顏色的深淺成正比關(guān)系,利用分光光度計(jì),在540nm波長(zhǎng)下測(cè)定光密度值,查對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線并計(jì)算,便可求出樣品中還原糖和總糖的含量。

關(guān)于肌糖元酵解

2.關(guān)于蛋白質(zhì)含量測(cè)定:本學(xué)期我們學(xué)習(xí)了醋酸纖維薄膜電泳分離血清蛋白、氨基酸聚酰胺薄膜層析,以及利用溶解度差異提取血清中不同蛋白,并通過 BCA法、Folin酚法、凱氏定氮法測(cè)定蛋白質(zhì)含量

3.關(guān)于酶活性學(xué)習(xí)了纖維素酶活力測(cè)定以及酶最適PH測(cè)定 4.關(guān)于稀堿法酵母核糖核酸提取以及紫外吸收法測(cè)定濃度

二、關(guān)于感悟 經(jīng)過半年的生化實(shí)驗(yàn)的學(xué)習(xí)讓我受益菲淺。在生化實(shí)驗(yàn)課即將結(jié)束之時(shí),總結(jié)這學(xué)期的收獲與不足。取之長(zhǎng)、補(bǔ)之短,在今后的學(xué)習(xí)和工作中有所受用。

三、這半年的生化實(shí)驗(yàn)主要有菲林試劑熱滴定定糖法、folin-酚法測(cè)蛋白、稀堿法提取酵母RNA、醋酸纖維薄膜電泳、RNA定量測(cè)定-UV吸收法、纖維素酶活力的測(cè)定、最適PH選取、肌糖元的酵解作用、N-末端氨基酸殘基的測(cè)定--DNS-CL法柱層析分離色素、凱式定氮法等實(shí)驗(yàn)。

在這些實(shí)驗(yàn)中,凱式定氮法是給我印象最深的一個(gè)實(shí)驗(yàn),因?yàn)檫@個(gè)實(shí)驗(yàn)使我認(rèn)識(shí)了改良式凱式蒸餾儀的基本結(jié)構(gòu),同樣的也讓我透過這次實(shí)驗(yàn)掌握了凱式定氮法的操作技術(shù)。在這次實(shí)驗(yàn)中,我和我的同組者-韓文志犯了一些錯(cuò)誤,而且是很不就應(yīng)犯的錯(cuò)誤,我們都忘了在做實(shí)驗(yàn)時(shí)要加入新的沸石,這是個(gè)很低級(jí)的錯(cuò)誤,差點(diǎn)引起溶液的暴沸。透過這次錯(cuò)誤我認(rèn)識(shí)到,很多知識(shí),即使是老師在怎樣說,它也只是理論,當(dāng)我們不能把它應(yīng)用到實(shí)踐中去時(shí),它對(duì)我們都是毫無好處的。此刻更深的認(rèn)識(shí)到了理論結(jié)合實(shí)際的觀點(diǎn)。在這次實(shí)驗(yàn)中我們損壞了改良式凱式蒸餾儀,并且賠了錢,錢不是問題,重要的是操作的問題,我覺得我們?cè)谧鰧?shí)驗(yàn)時(shí)還是對(duì)儀器不是很熟悉,做實(shí)驗(yàn)時(shí)不認(rèn)真。

還有一個(gè)是柱層析分離色素,這個(gè)實(shí)驗(yàn)主要是掌握吸附層析的原理和操作技術(shù),我記得這次實(shí)驗(yàn)我是第二個(gè)到的實(shí)驗(yàn)室,當(dāng)時(shí)還很有成就感,進(jìn)來后就稱菠菜,還有研磨,這是很累人的活,我覺得,因?yàn)橄氚阉心サ暮眯窒?/p>

快點(diǎn)做實(shí)驗(yàn),于是就一向磨一向磨,直到做下一步時(shí)才覺得手腕有點(diǎn)累。我記得在加棉花時(shí),由于不明白就應(yīng)加多厚,提取色素時(shí)還很是膽戰(zhàn)心驚的。我覺得在這個(gè)實(shí)驗(yàn)中,裝柱這一步是很重要的,于是我們很留意的裝,直到柱面很平。直到最后,分離色素后,看到我們的色帶分離的很好,很是高興。

半年實(shí)驗(yàn)做下來,最“苦”的要數(shù)“菲林試劑熱滴定定糖法”這個(gè)實(shí)驗(yàn)了。這個(gè)實(shí)驗(yàn)要求我們正確掌握滴定管的使用方法和熱滴定的終點(diǎn)。由于全部滴定過程務(wù)必在沸騰狀態(tài)下快速進(jìn)行,而且終點(diǎn)不容易把握,我們滴了好幾十次才確定了終點(diǎn)。當(dāng)時(shí)我的同組者-韓文志已經(jīng)被火烤的不行了。

在這半年的十幾次的實(shí)驗(yàn)的學(xué)習(xí)中,我受益頗多。毫無疑問,它培養(yǎng)了我的動(dòng)手潛力。每個(gè)實(shí)驗(yàn)我都會(huì)親自去做,不放下每次鍛煉的機(jī)會(huì)。經(jīng)過這半年,我的動(dòng)手潛力有了明顯的提高;它讓我養(yǎng)成了課前預(yù)習(xí)的好習(xí)慣。一向以來就沒能養(yǎng)成課前預(yù)習(xí)的好習(xí)慣(雖然一向明白課前預(yù)習(xí)是很重要的),但經(jīng)過這半年,讓我不僅僅深深的懂得課前預(yù)習(xí)的重要,更領(lǐng)會(huì)了課前預(yù)習(xí)的好處。只有在課前進(jìn)行了認(rèn)真的預(yù)習(xí),在做實(shí)驗(yàn)時(shí)效率才會(huì)更高,才能收獲的更多、掌握的更多;它還提高了我處理數(shù)據(jù)的潛力;做實(shí)驗(yàn)就會(huì)有數(shù)據(jù),有數(shù)據(jù)就要處理,數(shù)據(jù)處理的是否得當(dāng)將直接影響實(shí)驗(yàn)成功與否。

半年實(shí)驗(yàn)雖然收獲很多,但在這中間,我也發(fā)現(xiàn)了我存在的很多不足。我的動(dòng)手潛力還不夠強(qiáng),當(dāng)有些實(shí)驗(yàn)需要很強(qiáng)的動(dòng)手潛力時(shí)我還不能從容應(yīng)對(duì);我的探索方式還有待改善,當(dāng)應(yīng)對(duì)一些復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)時(shí)我還不能很快很好的完成;我的數(shù)據(jù)處理潛力還得提高,當(dāng)眼前擺著一大堆復(fù)雜數(shù)據(jù)時(shí)我處理的方式及潛力還不足,不能用最佳的處理手段使實(shí)驗(yàn)誤差減小到最小程度……總之,生化實(shí)驗(yàn)課讓我收獲頗豐,同時(shí)也讓我發(fā)現(xiàn)了自身的不足。在實(shí)驗(yàn)課上學(xué)得的,我將發(fā)揮到其它中去,也將在今后的學(xué)習(xí)和工作中不斷提高、完善;在此間發(fā)現(xiàn)的不足,我將努力改善,透過學(xué)習(xí)、實(shí)踐等方式不斷提高,克服那些不應(yīng)成為學(xué)習(xí)、獲得知識(shí)的障礙。在今后的學(xué)習(xí)、工作中有更大的收獲,在不斷地探索中、在無私的學(xué)習(xí)、奉獻(xiàn)中實(shí)現(xiàn)自己的人身價(jià)值!

第四篇:2010生化實(shí)驗(yàn)室管理總結(jié)

2010---2011學(xué)年下學(xué)期華龍區(qū)三中生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室儀器室管理工作總結(jié)

2010---2011學(xué)年下學(xué)期華龍區(qū)三中生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室儀器室管理工作總結(jié)

一、實(shí)驗(yàn)室的管理

實(shí)驗(yàn)教學(xué)是生物、化學(xué)教學(xué)的一個(gè)重要組成部分,做好生物、化學(xué)實(shí)驗(yàn),讓學(xué)生鞏固即得知識(shí),培養(yǎng)學(xué)生實(shí)驗(yàn)技能,是中學(xué)生物、化學(xué)教學(xué)目標(biāo)之一。

回想當(dāng)初剛接手生物、化學(xué)實(shí)驗(yàn)室儀器室管理工作時(shí),以前上課時(shí)沒有感受到,看似簡(jiǎn)單的準(zhǔn)備試驗(yàn),看似清閑的儀器管理,其實(shí)還有許多意想不到的不易。首先,又臟又亂的實(shí)驗(yàn)室隨著我的汗流浹背被清理出一桶又一桶的垃圾,落滿塵土的試驗(yàn)臺(tái)面擦了一遍又一遍,終于露出干凈的本色,剛裝修完的地面、走廊地面落下一塊一塊的青石灰泥,也隨著我手中的小鏟一下又一下的揮舞和著滴滴汗水終于被徹底鏟除干凈。還有實(shí)驗(yàn)室里幾百個(gè)藥品的試劑瓶讓我茫然無措,幾萬元成堆的新進(jìn)儀器讓人無從下手,為了盡快熟悉他們,我整理、清洗了所有的櫥柜里的儀器、藥品,對(duì)照賬目,一一排查,很快對(duì)實(shí)驗(yàn)室里的儀器藥品都做到了心中有數(shù)。對(duì)儀器的擺放重新科學(xué)規(guī)劃,把儀器與藥品在有限的空間里巧妙地用柜子隔開,儀器室藥品室看起來井井有條、干凈整潔,加上幾盆自己養(yǎng)殖的吊蘭、菊花,不僅凈化了室內(nèi)空氣,又平添了幾分生機(jī)。如今學(xué)校新的實(shí)驗(yàn)樓已經(jīng)建成,兩室需再次搬遷,幾十萬元的儀器藥品仍需再次規(guī)劃擺放,熱火朝天的勞動(dòng)帶來的大汗淋漓又再次驅(qū)走三九寒冬的寒意。新年開學(xué),立即著手新實(shí)驗(yàn)室、新儀器室的整理,每天一上班就在實(shí)驗(yàn)室、儀器室里清點(diǎn)、搬運(yùn)、擺放儀器,每天從上班忙到下班,一連三四個(gè)星期的時(shí)間,有同事問我:“你也沒事,搬到新樓上咋不下來了呢?”不是沒事,是沒閑事,凈忙事,抓緊忙完儀器整理擺放還要準(zhǔn)備中招分組實(shí)驗(yàn),一項(xiàng)又一項(xiàng)的工作在那排著隊(duì)呢,哪里會(huì)有時(shí)間下樓來呢。

其次,實(shí)驗(yàn)儀器的準(zhǔn)備,尤其是分組實(shí)驗(yàn)儀器的準(zhǔn)備不僅繁雜,還需要謹(jǐn)慎細(xì)心。教學(xué)一線的老師們工作十分繁重,實(shí)驗(yàn)通知單常常是顧不上寫。準(zhǔn)備好的儀器藥品,上課前,老師們?nèi)∽邔?shí)驗(yàn)儀器時(shí),經(jīng)常發(fā)現(xiàn)有遺漏的儀器藥品,為了配合好教學(xué),我有時(shí)親自及時(shí)把儀器藥品送到任課教師手中,我還參照教學(xué)進(jìn)度計(jì)劃,仔細(xì)認(rèn)真鉆研教材,明確教材中的每一個(gè)實(shí)驗(yàn)所用儀器、藥品,主動(dòng)提醒課任老師,不僅可以提早查漏補(bǔ)缺,免去了任課教師填寫實(shí)驗(yàn)通知單的程序,減輕了負(fù)擔(dān)。

針對(duì)每次生物分組實(shí)驗(yàn),利用我以前擔(dān)任過生物課的優(yōu)勢(shì),儀器的準(zhǔn)備、擺放、回收、清洗全由我一人動(dòng)手,為任課教師節(jié)省了寶貴的時(shí)間和精力。化學(xué)分組實(shí)驗(yàn)也正在往這個(gè)方向努力。當(dāng)然中招實(shí)驗(yàn)兩科需要的儀器太多,一個(gè)人根本擺放不及,仍然需要科任老師協(xié)助。生物化學(xué)分組實(shí)驗(yàn)儀器準(zhǔn)備和清洗回收工作相當(dāng)繁重,幾乎每一件用過的玻璃儀器、水槽、污物桶等都得認(rèn)真清洗,這些工作都需要消耗很多氣力和時(shí)間,經(jīng)常被這些瑣碎的工作累得腰酸背痛是常有的事,但是干一行愛一行是咱老實(shí)人的本分。

實(shí)驗(yàn)室在學(xué)校屬于后方保障部門,為教學(xué)一線的老師們服務(wù)是工作重點(diǎn),我在準(zhǔn)備好化學(xué)、生物實(shí)驗(yàn),管理各個(gè)實(shí)驗(yàn)室、儀器室、藥品室的同時(shí),物理老師需要時(shí),我也會(huì)全心全意地為他們解決。實(shí)驗(yàn)室工作繁雜瑣碎,做好一線老師的后勤,盡可能減輕他們的工作強(qiáng)度,分擔(dān)它們的后顧之憂,是實(shí)驗(yàn)員的責(zé)任。

二、儀器室的管理

1.做好購(gòu)置儀器、藥品先行申請(qǐng)、入庫(kù)驗(yàn)收工作,同時(shí)填寫入庫(kù)清單,及時(shí)完善儀器明細(xì)賬。

2、做到購(gòu)物有登記,帳目清楚,帳物卡三對(duì)應(yīng)工作。教學(xué)儀器的借用嚴(yán)格按照教學(xué)儀器借用制度實(shí)行登記,如期歸還,追還等。

3、儀器做到常清點(diǎn),常保養(yǎng),常維修,保證抽查準(zhǔn)確,隨取隨用。

對(duì)顯微鏡等教學(xué)精密儀器,做到了定期檢修、除塵、防銹、保養(yǎng)等工作。對(duì)標(biāo)本類實(shí)施了定期檢查、防蛀等加以妥善管理。

4、對(duì)新的實(shí)驗(yàn)儀器的性能、使用、操作方法做了充分了解,能熟煉地操作使用,更好地配合了任課老師的實(shí)驗(yàn)教學(xué)工作。

5、定期對(duì)儀器室、實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行衛(wèi)生大掃除,平時(shí)做好兩室保潔工作,及時(shí)做好迎檢工作。

6、按時(shí)完成了本期的實(shí)驗(yàn)任務(wù),在新的一年里,要更進(jìn)一步加強(qiáng)學(xué)習(xí),使自己的管理工作更上一個(gè)臺(tái)階。

這一學(xué)年尤其是上學(xué)期的迎檢工作比較多,在這里感謝領(lǐng)導(dǎo)和課任老師的幫助,使每次的迎檢工作都得到了上級(jí)部門的認(rèn)可。回首看看,查漏補(bǔ)缺,也曾有一些紕漏,如藥品借用雖然都有詳細(xì)及時(shí)的往來記錄,但是沒有把庫(kù)存和損耗隨機(jī)賬合并成一個(gè)賬冊(cè),這一項(xiàng)已經(jīng)改正,新的藥品庫(kù)存損耗隨機(jī)賬冊(cè)已經(jīng)設(shè)計(jì)投入使用。再有,平時(shí)補(bǔ)充購(gòu)買實(shí)驗(yàn)材料時(shí),沒有做到詳細(xì)詢問記錄每一筆校資投入賬,在上級(jí)領(lǐng)導(dǎo)詢問時(shí)沒能脫口而出準(zhǔn)確的儀器藥品資金投入數(shù),這一點(diǎn)也已改正。因此以后在工作中還要不斷地汲取經(jīng)驗(yàn)、查漏補(bǔ)缺、改進(jìn)工作作風(fēng),更加謹(jǐn)慎細(xì)致,努力把兩室管理工作、教學(xué)服務(wù)工作開展得更好。建議學(xué)校建設(shè)多媒體實(shí)驗(yàn)室一個(gè),以改進(jìn)我校實(shí)驗(yàn)教學(xué)。

生化儀器管理員

2011年7月

第五篇:生化試驗(yàn)思考題總結(jié)

Shaonanlee 黑暗舞者DID 生化實(shí)驗(yàn)思考題總結(jié)

1.蛋白質(zhì)定量測(cè)量的方法有哪些?簡(jiǎn)要說明其原理。

答:a.紫外吸收,在280nm處有最大吸收峰。

b.定氮法,利用蛋白質(zhì)中氮元素含量為16%固定比例來測(cè)定。

c.分光光度計(jì)法,利用OD值和蛋白質(zhì)濃度成正比的原理。顯色劑為考藍(lán)。d.雙縮脲法。也是利用顯色反應(yīng)。e.Folin酚法。

2.如果凝膠過濾層析分離的蛋白質(zhì)樣品中含有多種蛋白質(zhì),在各蛋白質(zhì)分子量已知的情況下,如何判斷哪一種蛋白質(zhì)時(shí)所想要的?

答:現(xiàn)在假設(shè)有三種蛋白質(zhì)a b c,分子質(zhì)量a>b>c。

那么,a最先流出,在體積V1處有一個(gè)洗脫體積,對(duì)應(yīng)的a的溶液濃度在 V1處也最高,就會(huì)有一個(gè)OD值的峰值。b c同理。由不同的OD峰值,對(duì)應(yīng)不同的洗脫體積,就可以篩選出想要的蛋白質(zhì)。如果想要b,那么在第 二個(gè)吸收峰的時(shí)候,找到相應(yīng)的洗脫體積,然后在其附近的所接到的溶液 進(jìn)行選取。就會(huì)得到想要的蛋白質(zhì)。

3.如果鹽析后的樣品不經(jīng)脫鹽處理便上樣電泳,對(duì)其結(jié)果有何影響?

答:如果沒有去除清蛋白里面的鹽分,則會(huì)使電泳速度下降。原因在于溶液離子

強(qiáng)度太大,蛋白質(zhì)表面的電荷減少,所以導(dǎo)致電泳速度下降,甚至無法泳動(dòng)。

4.對(duì)電泳所得的結(jié)果如何進(jìn)行定量分析?

答:將電泳完畢的樣品(凝膠),按條帶寬度的分布剪下,分別把每個(gè)小塊樣品

用NaOH溶液漂洗,再將漂洗過的溶液進(jìn)行OD值的測(cè)量。

Shaonanlee 黑暗舞者DID

5.使SDS-PAGE具有高分辨率的三個(gè)因素是什么?

答:濃縮效應(yīng)。電荷效應(yīng)。分子篩效應(yīng)。

6.實(shí)驗(yàn)所得的各點(diǎn)數(shù)據(jù)中,哪些易出現(xiàn)較大的誤差?

答:有兩個(gè)點(diǎn)。第一個(gè),在三十秒的點(diǎn),反應(yīng)速度太快,時(shí)間如果掌握不準(zhǔn),容易

出現(xiàn)誤差。另一個(gè),在3min的點(diǎn),反應(yīng)速度很慢,斜率小,則倒數(shù)大,所以 時(shí)間掌握不好,也容易出現(xiàn)大誤差。

7.假如把堿性磷酸酶對(duì)底物的親和力提高十倍,實(shí)驗(yàn)方案該如何修改?

答:把底物和酶的濃度都降低。

8.請(qǐng)舉出三種提取質(zhì)粒的方法,并簡(jiǎn)要說明其中一種方法的原理。

答:堿裂解(要求原理,書上有);一步法(見書上46,47頁有關(guān)TELT試劑的內(nèi)容)

;SDS法;煮沸法。

9.分析質(zhì)粒DNA切割不完全的原因。

答:a.質(zhì)粒因素:堿裂解時(shí)間太長(zhǎng),無法復(fù)性;乙醇揮發(fā)不完全,影響酶的活性。

b.酶的因素:酶的濃度太高或者太低。或者酶的活性降低。

c.酶切體系:溫度不是最適溫度;時(shí)間不夠長(zhǎng);緩沖溶液的問題。

10.分析酶切后沒有觀察到目的DNA的原因。

答:a.重組失敗。

b.酶切失敗。

c.目的基因量太少。

11.從哪些方面可預(yù)防PCR出現(xiàn)假陽性結(jié)果?

答:假陽性就是出現(xiàn)了不該出現(xiàn)的條帶。

a.防止污染,例如模板的污染。b.引物設(shè)計(jì)合適,保證特異性。c.控制反應(yīng)條件。

d.必要時(shí),要減少循環(huán)次數(shù)。

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