第一篇：生物化學實驗教學大綱

《生物化學》實驗教學大綱

課程編號: 課程名稱：生物化學 課程類型: 實驗教學 學

時：24 適用對象: 生物制藥及相關專業 先修課程：基礎化學實驗、有機化學實驗

一、課程性質、目的和任務

生物化學實驗是與生物化學理論課相配套的一門以實驗為主的課程，它是生物制藥及相關專業必修的專業基礎課程。本課程通過介紹生物化學實驗技術的原理和操作方法，對學生進行生物化學基本技能訓練，為今后進行后繼課程的學習和將來的科學研究工作打下良好基礎。

通過本實驗課程的學習，增強學生對生物化學理論知識的理解與感性認識，使學生牢固掌握生物化學的基本理論與基本實驗技能，培養學生嚴謹的科學態度和良好的實驗習慣，提高學生在實驗過程中發現問題、分析問題、解決問題的綜合能力。

二、教學基本要求

生物化學實驗教學以學生為主體的教學實踐活動,?教師只作必要的實驗原理和注意事項的講解,并注意引導學生拓展所學的內容。通過實驗內容的學習使學生掌握生物化學技術的基本原理和操作要點，同時注重在實驗的過程中提高學生的實踐能力和創新能力。

三、實驗內容及要求（此部分根據具體實驗項目列出具體內容及要求）

大綱基本內容包括6個必做的實驗，在規定的24個學時內完成。

實驗一 氨基酸的分離與鑒定（基礎性實驗，3學時）

實驗準備，濾紙準備，點樣，展層和顯色，分析。

了解利用層析法分離掌握氨基酸的基本原理，學會利用層析法分離氨基酸的方法。

實驗二 蛋白質的提取及含量的測定（綜合性實驗，4學時）

實驗準備，蛋白質樣品的提取，標準曲線的制作，分光光度法測定。

學會從生物材料中提取蛋白質的基本技術，掌握離心機的使用方法，了解蛋白質含量測定的基本原理，學會測定的方法。

實驗三 血清蛋白的醋酸纖維薄膜電泳（基礎性實驗，3學時）

實驗準備，浸膜，點樣，電泳，染色，分析。

掌握電泳技術的基本原理，了解電泳設備的組成，學會使用的方法，掌握利用電泳分離蛋白質的技術。

實驗四RNA的提取及含量的測定（綜合性實驗，5學時）

實驗準備，濃鹽法提取RNA，離心，等電點沉淀，抽濾，烘干，稱重，配制成溶液，紫外分光光度法測定含量。

學會用濃鹽法從酵母中提取RNA的方法，掌握純化的技術（離心法，等電點沉淀法、抽濾法），學會紫外分光光度計的使用，掌握利用紫外分光光度法測定核酸含量的方法。

實驗五 堿性磷酸酶的提取、分離和比活力的測定*（綜合性實驗，5學時）

實驗準備，堿性磷酸酶的提取和分離，配制試劑，堿性磷酸酶活力的測定，蛋白質含量的測定，比活力的計算。

掌握從動物新鮮組織中制備酶的方法，學習酶提純的方法，了解堿性磷酸酶活力測定的原理，掌握測定的方法，學會堿性磷酸酶活力的計算方法，掌握比活力的概念及計算方法。

實驗六 發酵過程中無機磷的被利用和ATP的生成*（綜合性實驗，4學時）

實驗準備，發酵，發酵樣品的處理，無機磷的測定，DEAE纖維素薄析層析法測定ATP的形成。

了解ATP生成的意義，掌握無機磷的測定方法，學會DEAE纖維素薄板制作的方法，掌握DEAE纖維素薄析層析法測定ATP的形成。

四、考核方式

實驗總成績包括實驗過程表現成績和實驗報告成績。其中實驗過程表現成績占60%，包括學習態度是否認真、實驗操作是否正確規范、實驗結果是否正確、是否具有創新意識等。實驗報告成績占40%，包括實驗報告的格式是否正確、原理是否論述清楚、實驗結果分析討論是否符合邏輯，報告字跡是否清楚等方面。

五、推薦教材和教學參考書

實驗教材：《生物化學實驗》（第三版）陳鈞輝等編，科學出版社，2003。參考教材：《基礎生物化學實驗》（第二版）王秀奇等編，高等教育出版社，1999。

《生物化學技術原理及其應用》趙永芳主編，科學出版社，2002。《生化實驗方法和技術》張龍翔，張庭芳，李令媛編，高等教育出版社，1997。

六、說明

大綱制訂人：張輝 大綱審定人： 制訂日期：2014-11-8

第二篇：生物化學(英文版)教學大綱

《生物化學》（英文版）教學大綱

課程編號：15010003

總學時數：86學時（另有實驗教學33學時）學分：5學分

一、課程性質、目的和要求

生物化學是生物科學和生物技術專業的一門重要的必修專業基礎課。學習和掌握生物化學的基本理論和技術對于其它生物學科的學習及今后的相關工作都具有十分重要的意義。開展生物化學雙語教學的目的是使學生在系統學習和掌握生物化學的理論和和實踐知識的同時，更好地掌握和應用專業外語，培養成具有國際合作意識、國際交流與競爭能力的外向型人才。鑒于生物化學是一門知識涉及面廣，復雜程度高的學科，所以，我們將生物化學雙語教學分為不同層次開設，即基礎生物化學和高級生物化學的雙語教學。在基礎生物化學的雙語教學中，著重要求學生學習和掌握生物化學的基本理論、基本知識和基本原理；同時也要求了解一些本學科發展前沿的新理論、新動向，使學生打下生物化學基本理論和知識的堅實基礎，適應以后的高級生物化學雙語教學及相關學科的學習。同時，采用原版英文生化教材，有利于學生盡快接觸生化發展的新知識，擴大知識面，提高學生閱讀英文專業文獻的能力，適應生物化學的高速發展。不僅使學生獲得較為廣博的生物化學基本理論和基礎知識，而且使學生初步樹立科學的世界觀和人生觀，學會用辯證唯物主義的正確觀點認識生命的現象和本質，從而使學生進一步學習和工作打下堅實的基礎。

二、教學內容、要點和課時安排

本課程的教學內容共分十三章。

Section A Cell organization

5課時

A1 Prokaryotes

A2 Eukaryotes

A3 Microscopy

A4 Cellular fractionation Section B

Amino acids and proteins

9課時

B1 Amino acids

B2 Acids and bases

B3 Protein structure

B4 Myoglobin and hemoglobin

B5 Collagen

B6 Protein purification

B7 Chromatography of proteins

B8 Electrophoresis of proteins

B9 Protein sequencing and peptide synthesis Section C Enzymes

6課時

C1 Introduction to enzymes

C2 Thermodynamics

C3 Enzyme kinetics

C4 Enzyme inhibition

C5 Regulation of enzyme activity Section D Antibodies

6課時

D1 The immune system

D2 Antibody structure

D3 Polyclonal and monoclonal antibodies

D4 Antibody synthesis

D5 Antibodies as tools Section E Membranes

E1 Membrane lipids

E2 Membrane protein and carbohydrate

E3 Membrane transport: small molecules

E4 Membrane transport: macromolecules

E5 Signal transudation Section F DNA structure and replication

F1 DNA structure

F2 Chromosomes

F3 DNA replication in bacteria

F4 DNA replication in eukaryotes Section G

RNA synthesis and processing

G1 RNA structure

G2 Transcription in prokaryotes

G3 The lac operon

G4 The trp operon

G5 Transcription in eukaryotes: an overview G6 Transcription of protein-coding genes in eukaryotes

G7 Regulation of transcription by RNA Pol Ⅱ

G8 Processing of eukaryotic Pre-mRNA

G9 Ribosomal RNA

G10 Transfer RNA Section H

Protein synthesis

H1 The genetic code

H2 Translation in prokaryotes

H3 Translation in eukaryotes

H4 Protein targeting

H5 Protein glycosylation Section I

Recombinant DNA technology

I1 Restriction enzymes

I2 Nucleic acid hybridization

I3 DNA cloning

I4 Viruses

I5 DNA sequencing

6課時 6課時 8課時 6課時 6課時

I6 Polymerase chain reaction Section J

Carbohydrate metabolism

10課時

J1 Monosaccharides and disaccharides

J2 Polysaccharides and oligosaccharides

J3 Glycolysis

J4 Gluconeogenesis

J5 Pentose Phosphate Pathway

J6 Glycogen Metabolism

J7 Control of glycogen metabolism Section K

Lipid metabolism

6課時

K1 Structures and roles of fatty acids

K2 Fatty acid breakdown

K3 Fatty acid synthesis

K4 Triacylglycerols

K5 Cholesterol

K6 Lipoproteins Section L

Respiration and energy

6課時

L1 Citric acid cycle

L2 Electron transport and oxidative phosphorylation

L3 Photosynthesis Section M

Nitrogen metabolism

6課時

M1 Nitrogen fixation and assimilation

M2 Amino acid metabolism

M3 The urea cycle

M4 Hemes and chlorophylls

三、教學方法

采用英文原版教材，實行雙語教學，制作PPT課件，利用多媒體技術和適當的板書輔助教學。

四、成績考核方式

課程結束后以閉卷、筆試形式進行考試。英文出題，鼓勵英文答卷，結合平時成績計算總分。

五、教材與主要參考書目

教材：

B.D.Hames等編著，《Biochemistry》(第二版)，科學出版社，2003年 主要參考書目：

1．H.R.Horton, L.A.Moran, R.S.Ochs, J.D.Rawn, K.G.Scrimgerour.PRINCIPLES OF BIOCHEMISTRY(Third Edition).Science Press and Pearson Education North Asia Limited.2002 2.Trudy McKee, James R.McKee.BIOCHEMISRY: AN INTRODUCTION(Second Editon).McGraw-Hill Companies, Inc.2001 3.William J, Lennarz, M.Daniel Lane.ENCYCLOPEDIA OF BIOLOGICAL CHEMISTRY.Elsevier Pte Ltd.2004 4.Lehninger Principles of Biochemistry, Third Edition, David L.Nelson and Micheal M.Cox, Worth Publishers, 2000.5.Jeremy M.Berg, John L.Tymoczko, and Lubert Stryer, Biochemistry Fifth edition.W.H.Freeman and Company, 2003.6.Trudy Mckee and James R.Mckee, Biochemistry.Third edition.The McGraw Hill Companies, Inc., 2003.7.羅紀盛，張麗萍，楊建雄，秦德安，高天慧，顏卉君，魯心安 合編。生物化學簡明教程（第三版），高等教育出版社，2000年

8.王鏡巖，朱圣庚，除長法 主編。生物化學，上、下冊（第三版），高等教育出 版社，2002年

9.生物化學導論(第2版), Trudy Mckee & James R.Mckee, 科學出版社, 2000.4

第三篇：生物化學實驗大綱

《生物化學》實驗教學大綱

課程名稱：生物化學 課程代碼：120005 課程類型：專業基礎課程 開課學期：第二學期 課程總學時：72學時 實驗學時：20學時 前期課程：人體解剖學、組織胚胎學、遺傳學、有機化學 使用專業：護理、助產、臨床、藥學

一、課程性質、目的和任務

生物化學是在分子水平上闡明生命現象的科學，它主要以化學和生物學的理論和方法為主要手段來研究生物體基本物質的化學組成，結構、理化性質、生物功能和結構與功能的關系及其在生命過程中化學變化的規律。生物化學是本專業基礎課。通過本課程的教學使學生掌握生物化學的基本理論，基本知識和基本技能。為學習其它基礎課程和專業課程奠定基礎。

生物化學是一門實驗性學科，它之所以能夠迅速地發展，主要原因就是由于生物化學實驗技術的不斷提高和實驗內容的持續發展。

生物化學實驗課是生物化學教學的重要組成部分，加強和改進實驗課教學是提高教學質量的重要環節，本實驗室所開的實驗課均隨相應的理論課進行，通過生化實驗課教學應達到以下三方面的教學目的：

1、加深對生物化學基本理論的理解和掌握。

2、掌握生物化學的基本實驗方法和基本實驗技術。

3、培養學生嚴謹的科學態度和思維能力以及獨立分析問題和解決問題的能力。

二、實驗教學基本要求

為達到以上教學目的，對所有參加生物化學實驗課的學生做出以下具體要求：

1、實驗課前要預習實驗教程，了解實驗的目的、原理及基本操作規程。

2、實驗時應認真操作，仔細觀察實驗現象及實驗結果，及時并如實地做好記錄。

3、實驗結束后，及時整理和總結實驗結果，按規定格式寫出實驗報告。實驗報告格式： 實驗題目___________________ 實驗日期___________________

一、目的要求

二、實驗原理

三、操作步驟

四、實驗結果

五、結果分析

三、主要儀器設備

離心機、電泳設備、722分光光度計、電冰箱、可調式恒溫水浴儀、恒溫浴槽、培養箱、移液器等。

四、實驗內容及學時分配

生化實驗基本操作（2學時）

1．了解生物化學實驗室的一般規則。2．熟悉生化實驗室的基本操作。

3．練習玻璃器皿的洗滌、刻度吸管的選擇和使用。4．掌握離心機的使用方法及注意事項。

實驗一 蛋白質的兩性電離和等電點的測定（定量實驗,2學時）

1、驗證蛋白質的兩性電離和等電點。

2、掌握測定酪蛋白等電點的原理及方法。實驗二 血清總蛋白測定（選修、2學時）1.熟悉血清總蛋白測定的原理及基本操作。2.掌握血清總蛋白測定的臨床意義。

實驗三 血清蛋白質的醋酸纖維素薄膜電泳（半定量實驗，2學時）1．掌握電泳法的原理及應用。

2．用醋酸纖維素薄膜電泳法分離血清蛋白。3．了解血漿蛋白質的分類及功能。

實驗四 肝組織中核酸的提取和鑒定（選修、2學時）1.驗證核酸的三大組成成分。

2.熟悉組織中核酸的提取與鑒定的基本操作方法。3.了解核酸的理化性質。

實驗五 酶的特異性及影響酶活性的因素（定性實驗 2學時）1．驗證酶催化的特異性及影響酶活性的因素。

2．通過唾液淀粉酶活性的變化，觀察溫度、pH、激活劑和抑制劑對酶活性的影響。

3．學習使用恒溫水浴箱。

實驗六 尿淀粉酶活性測定（選修、2學時）

1、驗證淀粉酶的催化作用。

2、觀察淀粉及其水解產物分別與碘反應呈現的顏色變化。實驗七 琥珀酸脫氫酶的作用及其抑制（選修、定性實驗，2學時）1．加深酶的競爭性抑制作用及其特點的認識。2．學習琥珀酸脫氫酶的提取方法。3．通過實驗觀察酶的競爭性抑制現象。

實驗八 分光光度計的使用（定性實驗，2學時）1．掌握分光光度法定性、定量測定物質的原理。2．學習使用722 分光光度計

實驗九

血糖的測定（定量實驗，2學時）1.了解葡萄糖氧化酶法測定血糖的原理。2.能熟練進行血糖測定的操作。3.掌握血糖測定的臨床意義。

實驗十 酮體的生成與利用（定性實驗，2學時）1．掌握酮體的概念。

2．了解酮體生成和利用的生理意義。

3．通過實驗加深對酮體生成部位的認識并學會酮體的鑒定方法。4．學會從動物肝臟提取酶的粗制品。5.學會正確使用離心機

實驗十一 血清甘油三酯的測定（定量實驗，2學時）

1.熟悉酶法測血清TG的基本原理及注意事項。2.熟練進行實驗操作。3.了解TG測定主要臨床意義。

實驗十二 血清膽固醇測定（定量實驗，2學時）1．了解膽固醇氧化酶法測定血清膽固醇的原理。2.能熟練進行血清膽固醇測定的操作。3.掌握血清膽固醇測定的臨床意義。

實驗十三 血清ALT測定-賴氏法（定量實驗，2學時）1．掌握轉氨基反應并了解常見轉氨酶測定的臨床意義。2．熟悉丙氨酸氨基轉移酶測定的原理及方法。3．了解酶活性單位的規定。4．測定血清丙氨酸氨基轉移酶活性。

實驗十四 血清BUN測定—二乙酰一肟顯色法（定量實驗，2學時）1．熟悉血清尿素氮測定的原理及方法。2．了解血清尿素氮測定的臨床意義和正常值。3．學會使用微量進樣器

實驗十五 血清膽紅素測定（定量實驗，2學時）1.熟悉血清膽紅素測定的原理和方法； 2.掌握膽紅素測定的正常參考范圍及臨床意義。實驗十六 血清鉀、鈉的測定（定量實驗，2學時）1.了解火焰光度計的作用原理。

2.了解血鉀、鈉測定的方法及臨床意義。

實驗十七 血清總鈣測定（選修、定量實驗，2學時）1.熟悉甲基麝香草酚藍比色法測定鈣的原理和方法。2.掌握血鈣測定的參考范圍及臨床意義。

實驗十八 血漿碳酸氫根濃度測定（定量實驗，2學時）1.熟悉滴定法測定血漿碳酸氫根濃度的原理和方法。2.掌握血漿碳酸氫根濃度測定的臨床意義。

實驗十九 胡蘿卜素的柱層析分離（半定量實驗，2學時）

1.了解柱層析分離法的基本原理及其在生物化學中的應用

2.學習柱層析法的基本操作技術，利用柱層析法分離菠菜葉（或紅辣椒）中的胡蘿卜素及其它色素。

實驗二十 凝膠層析分離血紅蛋白和核黃素（選修、定量實驗，2學時）1.掌握凝膠層析的基本原理。2.熟悉凝膠層析的操作過程。

五、考核方式

實驗對提高學生動手能力和加深理解、掌握課堂理論教學內容具有不可替代的作用。為了加強實驗教學工作，提高師生上好、學好實驗課程，特制定實驗技能考核辦法。

實驗課考核內容如下：

1、考勤：四分之一實驗課未做者，實驗成績為不合格。

2、預習：課前要預習所做實驗的目的、內容。

3、實驗課：上課時必須穿白大褂。嚴格實驗課紀律，熟悉實驗的目的、方法。在帶教教師的指導下能較好的完成實驗。

4、實驗成績包括以下幾方面：（1）考勤（10分）；

（2）實驗技能掌握優劣（40分）；（3）實驗結果（20分）；（4）實驗報告完成情況（30分）。

5、教師要精心組織實驗教學，認真帶教，學期末教師應將學生實驗成績單交教研室存檔。

以上各項由實驗課教師按相應比例酌情給分，總分再按30%的比例折算出實驗成績，匯入期末總成績。

六、推薦實驗教材和教學參考書

實驗教材：王文玉主編.《生物化學實驗教程與習題》.第四軍醫大學出版社，2010.9 參考書：李玉蘭主編.《生物化學實驗》（供高職高專使用）.中國醫藥科技出版社，2008.6

七、說明

選修實驗不計在總學時內，可根據具體情況調整使用。本大綱中編寫的有些簡單實驗項目可以合并上，在時間允許的情況下，爭取開設設計性實驗項目，給學生增加動手的機會，加強對學生實踐技能的訓練和提高。

第四篇：生物化學教學大綱

《生物化學》教學大綱

第一章 蛋白質的結構與功能

教學目的與要求：

? 掌握：蛋白質元素組成的特點及其應用。組成蛋白質的二十種氨基酸的結構通式、中文名字及英文三字編寫符號；氨基酸的重要理化性質（兩性解離及等電點、紫外吸收、茚三酮反應等）。多肽鏈、肽及多肽的定義。蛋白質一級結構的概念、維系鍵、重要性。蛋白質二、三、四級結構的概念、維系鍵，二級結構的主要形式。蛋白質的重要理化性質（兩性電離及等電點，膠體性質，變性、沉淀和凝固、紫外吸收和呈色反應）

? 熟悉：二十種基本氨基酸的分類。一些重要的生物活性肽（GSH、多肽類激素、神經肽）。蛋白質三種常用分類方法（按分子組成成分分類、按分子形狀分類、按其主要功能分類）。α折疊的結構要點；一級結構與功能的直接關系；一級結構是空間結構基礎的實例（RNase 變性與復性）。思考題

1．復習下列名詞

肽鍵 蛋白質一級結構 蛋白質的空間結構 結構域 等電點 蛋白質變性與復性 協同效應 變構效應 分子伴侶

2．蛋白質在生命活動中有哪些重要的生理功用？

3．蛋白質的元素組成中，哪一種是蛋白質的特征元素？其含量在蛋白質樣品檢測上有何意義？

4．試述蛋白質空間結構的含義和層次？

5．舉例說明蛋白質一級結構與功能的關系，一級結構與空間結構的關系？ 6．舉例說明空間結構與功能的關系？

7．維系蛋白質空間結構的鍵或作用力有哪些？ 8．蛋白質為什么具有兩性解離的性質？ 9．一般采用什么方法分離蛋白質？

10．蛋白質變性的實質是什么？在醫學上有何意義？

第二章 核酸的結構與功能

教學目的與要求：

? 熟悉核苷酸、核酸的化學組成；掌握 DNA、RNA 的堿基組成及其紫外吸收特性及應用； ? 掌握核苷酸概念、結構特點、命名與分類、各種核苷酸的英文符號；熟悉核苷酸的其他功能（輔酶、高能物質、第二信使）

? 掌握核酸主鏈共價鍵、側鏈、兩端的概念；掌握多核苷酸書寫； ? 一級結構概念（DNA 及 RNA 比較）；熟悉 chargaff 規則；

? 掌握 DNA 雙螺旋結構模型要點（DNA 二級結構）；熟悉原核、真核細胞 DNA 的三級結構

? 掌握 DNA 的基本生物學功能；熟悉基因組的概念； ? 掌握動物細胞中三種 RNA 的功能； tRNA 的二、三級結構 ? 掌握 DNA 的 Tm、增色及減色效應、變性及復性、分子雜交的概念

? 熟悉核酸酶、核酸內切酶、核酸外切酶及限制性核酸內切酶的概念及其在 DNA 重組技術中的應用 思考題

1、試比較兩類核酸的化學組成、分子結構、分布及生物學功能。

2、簡述DNA雙螺旋結構的堿基組成的Chargaff規則。

3、簡述真核細胞的mRNA的結構特點和功用。

4、簡述tRNA的分子組成、結構特點和功能。

5、什么是TM值？他有何生物學意義？

6、什么是核酶？他在醫學發展中有何意義？

7、什么是DNA變性、復性、分子雜交和增色效應？有何實際意義？

第三章 酶

教學目的與要求：

? 掌握：酶、酶活性中心的概念、化學本質及主要作用特點；影響酶反應的多種因素； ? 熟悉：中間產物學說，酶促反應的特點，酶促反應動力學，pH、T、抑制劑對酶促反應的影響；

? 了解：酶催化作用機制。思考題

1.試述酶能加速化學反應的機制。

2.試述在酶促反應中酶蛋白與輔酶（輔基）的相互關系。

3.比較三種可逆性抑制作用的特點。

4.試述競爭性抑制的特點及磺胺類藥物抑菌的機制。

5.別構調節有何生理意義？

第四章 糖代謝

教學目的與要求：

? 掌握 糖酵解、糖有氧氧化及三羧酸循環的概念，關鍵酶及其生理意義 ? 掌握 磷酸戊糖途徑關鍵酶及其生理意義。? 糖原的合成與分解過程的關鍵酶。糖異生的概念、進行部位、主要反應過程及其生理意義

? 掌握激素（胰島素、胰高血糖素）對血糖的調節要點。? 掌握 糖酵解、糖有氧氧化反應過程及其反應的調控點

熟悉主要 英文單祠 思考題

1.一分子葡萄糖是如何分解生成乳酸的？關鍵酶有那些？（提示：糖酵解的反應過程）2.蠶豆黃的發病機理是什么？（提示；蠶豆黃患者缺乏6-磷酸葡萄糖脫氫酶而發生溶血性黃疸）

3.肌糖原的合成與分解為什么不能參與血糖水平的調節呢？又是如何為肌肉收縮提供能量的呢？（提示：缺乏葡萄糖-6-磷酸酶，并把糖原分解過程與糖酵解過程聯系起來）

4.詳細論述乳酸循環的反應過程？2分子乳酸異生成葡萄糖消耗幾分子ATP？（提示：糖酵解和糖異生的反應過程及其關鍵酶）

5.谷氨酸是如何異生成糖的？（提示：谷氨酸脫氫生成α-酮戊二酸，α-酮戊二酸以蘋果酸方式出線粒體，再異生成糖）

第五章 脂類代謝

教學目的與要求：

? 熟悉脂類的概念、分類、熟悉甘油三酯合成的部位；合成的基本過程（甘油一酯和甘油二酯途徑）。掌握甘油三酯合成的原料。

? 掌握脂肪動員、激素敏感脂肪酶（HSL）、脂解激素、抗脂解激素的概念；掌握脂肪水解產物的去向及甘油的代謝。

? 掌握脂酸氧化的主要器官，掌握脂酸的活化及脂酰 CoA 進入線粒體的概況。掌握β－氧化的概念、部位、四步循環反應及反應的產物的代謝去向。以軟脂酸為例，熟悉脂肪酸氧化產生 ATP 的計算。

? 掌握酮體的概念、部位。掌握酮體在肝中生成、在肝外利用的要點。掌握酮體生成的生理意義及病理意義。

? 掌握脂肪酸合成原料的主要來源。熟悉其合成部位、丙二酰 CoA 的生成、限速酶。熟悉從乙酰 CoA 及丙二酰 CoA 合成軟脂酸的概況；了解脂肪酸合成酶系（屬多功能酶）的組成特點。

? 熟悉磷脂的概念，分類。

? 熟悉膽固醇的基本結構，熟悉膽固醇的合成部位、合成原料的來源、合成的三個階段及限速酶。掌握膽固醇在體內轉化為三個重要物質。? 熟悉血脂的概念及組成。熟悉血脂的來源；熟悉脂蛋白的概念及血漿脂蛋白的分類。掌握各類脂蛋白的化學組成（組成特點）、來源（合成部位）及主要生理功能。熟悉載脂蛋白的概念及主要的五種類型。熟悉載脂蛋白的三大功能。了解各類血將脂蛋白的代謝要點（生成、降解或轉化、最后歸宿）思考題

1．脂肪消化吸收有何特點？ 2．飽和脂酸如何氧化供能？

3．計算軟脂酸氧化成水和CO2時，可使多少ADP磷酸化生成ATP 4．在體內糖如何轉變成脂肪？

5．何謂酮體？酮體是如何生成和氧化？酮體代謝有何生理意義？ 6．欲降低血漿膽固醇水平可采用哪些措施？ 7．血漿脂蛋白可分為那幾類？各有何生理功用？ 8．何謂載脂蛋白？載脂蛋白有哪些生理功用？ 9．試述VLDL和LDL代謝。

10．何謂逆向轉運膽固醇？有哪些因素同逆向轉運膽固醇有關？

第六章 生物氧化

教學目的與要求：

? 掌握：呼吸鏈的概念，組成以及氧化磷酸化的概念、氧化磷酸化的偶聯部位、ATP 概論、胞液中 NADH 的氧化；

? 熟悉：熟悉呼吸鏈的排列順序；氧化磷酸化的偶聯機制，影響氧化磷酸化的因素，其它氧化體系； ATP 的生成和利用。

? 了解：體內呼吸鏈遞氫遞電子的原理。α－磷酸甘油穿梭作用和蘋果酸－天冬氨酸穿梭作用。了解腺苷酸載體的轉運。線粒體外其它氧化酶系的催化特點和功能。思考題

1.何為生物氧化?有何特點? 2.試述呼吸鏈的定義,體內有哪兩條呼吸鏈? 3.試寫出兩條呼吸鏈組分的排列次序和ATP的生成部位。4.體內ATP生成的主要方式是什么? 舉例說明。5.試述化學滲透學說的主要內容。

6.影響氧化磷酸化的因素有哪些? 舉例說明。

7.胞漿中生成的NADH必須經哪兩種穿梭機制進入線粒體氧化,各生成幾分子ATP?

第七章 氨基酸代謝

教學目的與要求：

? 熟悉蛋白質的生理作用、氮平衡的三種情況、蛋白質的生理需要量及蛋白質的營養價值（其中掌握營養必需氨基酸及半必需氨基酸）。熟悉蛋白質腐敗的概念及主要腐敗產物（胺、NH2 及其它）。? 掌握氨基酸的幾種脫氨基方式

? 掌握α-酮酸的代謝去向、氨的來源、轉運和代謝去路 ? 掌握三大物質代謝聯系的整體情況

? 掌握一碳單位的概念及種類及生理功能 思考題

1.何為氮平衡? 正氮平衡? 負氮平衡? 舉例說明。2.何為蛋白質的互補作用? 有何生理意義? 3.試述血氨的來源與去路。

4.試述氨基酸脫氨基作用的方式。5.試述嘌呤核苷酸循環的主要過程。

6.丙氨酸是如何異生成葡萄糖的? 寫出主要過程和關鍵酶。7.谷氨酸是如何徹底氧化的? 產生多少ATP? 8.試述丙氨酸-葡萄糖循環的過程和生理意義。9.試述鳥氨酸循環的過程和生理意義。10.試述肝昏迷氨中毒學說的主要內容。11.試述一碳單位的生理功用。

12.試述甲硫氨酸循環的過程和生理意義。

第八章 核苷酸代謝

教學目的與要求：

? 掌握核苷酸的生物學功用。掌握嘌呤核苷酸從頭合成的原料，部位，關鍵酶，關鍵調節，及抗代謝物的主要種類和作用機制。掌握嘌呤核苷酸分解代謝參加的關鍵酶，主要終產物。掌握嘧啶從頭合成的原料，主要酶，抗代謝物。掌握嘧啶分解代謝的最終產物。? 熟悉嘌呤核苷酸從頭合成的步驟及調節。熟悉嘌呤核苷酸補救合成的幾種反應及參與的酶。

? 了解核酸消化概況，根據所學知識 , 評價 ” 珍奧核酸 ” 的功用。了解核苷酸的分布情況。了解嘧啶從頭合成反應過程，了解嘧啶補救合成過程。思考題

（一）名詞解釋：

1.嘌呤核苷酸從頭合成途徑 2.嘧啶核苷酸補救合成途徑 3.核苷酸的抗代謝物 4.痛風癥

（二）簡答題： 1.核苷酸的生理功用

2.嘌呤核苷酸補救合成的生理意義

（三）論述題：

試比較嘌呤核苷酸和嘧啶核苷酸從頭合成途經的異同點以6-巰基嘌呤為例說明抗代謝物的作用機制

第九章 物質代謝聯系與調節

教學目的與要求：

? 掌握：代謝途徑、關鍵酶（調節酶）的概念；關鍵酶（調節酶）所催化反應的特點；變構調節、變構酶、變構效應劑、調節亞基、催化亞基的概念；變構調節的生理意義；酶的化學修飾調節的概念及主要方式。

? 熟悉：，三大營養物質氧化供能的一般規律和相互關系；糖、脂、蛋白質、核酸代謝之間的相互聯系；三大營養物質氧化供能的一般規律和相互關系；細胞內酶隔離分布的意義；代謝調節的三種方式；酶活性調節的方式；變構調節的機制；酶的化學修飾調節的特點；酶量調節的方式;激素種類及其調節物質代謝的特點

? 了解：物質代謝的六大特點；組織器官的代謝特點及聯系;物質代謝整體調節的兩種方式。饑餓和應激狀態下的代謝改變。思考題

1、名詞解釋：

變構調節酶的化學修飾調節誘導劑阻遏劑限速酶變構效應劑催化亞基調節亞基

2、簡答題：

簡述物質代謝的特點

簡述酶的化學修飾調節的特點

簡述酶的別構調節的機制和生理意義 簡述物質代謝調節的方式及其關系 簡述應激時血糖升高的機制

3、論述題：

舉例說明美的隔離分布在細胞代謝調節中的重要作用 試述短期饑餓時機體代謝發生的主要變化

第十章 DNA 的生物合成

教學目的與要求：

? 掌握：半保留復制的概念，DNA 復制系統的組成（底物，聚合酶，模板，引物，其他酶和蛋白質因子），逆轉錄的概念。

? 熟悉：半保留復制的意義； DNA 生物合成過程； DNA 損傷概念；逆轉錄酶的作用及應用。

? 了解： DNA 突變時 DNA 分子改變的類型，四種修復途徑的概況，逆轉錄現象，逆轉錄病毒。思考題

1.參與原核生物DNA復制過程所需的物質包括有哪些？ 2.DNA復制為什么能準確的將遺傳信息轉遞給下一代，其機制是什么？ 3.DNA復制的基本過程是什么？

4.DNA半保留復制中，兩條新合成的鏈為什么是半不連續性合成？ 5.遺傳的中心法則包含的內容是什么？

6.引起DNA損傷的因素是什么？損傷的修復方式有哪些？ 7.逆轉錄的基本過程是什么？

第十一章 RNA 的生物合成（轉錄）

教學目的與要求：

? 掌握 轉錄全過程概況，真核生物轉錄后修飾特點 ? 熟悉 轉錄起始復合物是如何形成的，轉錄加工的一般方式

? 了解 轉錄因子的作用，其它元件在轉錄起始過程中的作用 思考題

1.轉錄與復制有哪些相同點和不同點？ 2.如何解釋不對稱轉錄？

3.RNA轉錄的基本過程是什么？

4.真核生物中三種RNA聚合酶的轉錄產物是什么？ 5.真核生物mRNA轉錄后如何進行加工？

第十二章 蛋白質的生物合成（翻譯）

教學目的與要求：

? 掌握 翻譯、遺傳密碼、核糖體循環的概念，mRNA，核蛋白體，tRNA 在翻譯中的作用 ? 熟悉 氨基酰-tRNA 合成酶，保證翻譯準確的兩大環節，蛋白質生物合成過程 ? 了解 原核生物翻譯起始概況，合成終止概況，能量消耗 思考題

1．蛋白質的生物合成需要什么物質參與？各起什么作用？ 2．簡述氨基酰-tRNA合成酶在氨基酸活化中的作用。3．原核生物與真核生物的蛋白質合成有何異同？

4．簡述核糖體循環中起始、肽鏈延長及終止的重要步驟。5．簡述蛋白質合成后的加工修飾有哪些方式？

6．舉例說明生物活性物質和抗生素干擾抑制蛋白質合成的作用機

7．蛋白質合成后靶向輸送的主要類型？分泌性蛋白質是如何實現靶向輸送的？

第十三章 基因表達調控

教學目的與要求： ? 掌握（原核）乳糖操縱子結構、（真核）順式作用元件、啟動子、增強子、沉默子、反式作用因子

? 熟悉 阻遏蛋白、負性調節、正性調節、真核生物基因組結構特點

? 了解 原核、真核基因轉錄調節的特點 思考題

1．名詞解釋：

阻遏、誘導、啟動子、操縱子、反式作用因子、順式作用元件 2．基因轉錄調節的基本原理。

3.簡述乳糖操縱子基因表達的正、負調控。4.轉錄調節因子的分類。

5.轉錄調節因子的結構特征有哪些？ 6.真核RNA pol II轉錄終止的調節。7.真核生物翻譯后的調節

第十四章 基因重組與基因工程

教學目的與要求：

? 掌握 基因重組、DNA 克隆、基因工程、目的基因、基因載體的概念 ? 熟悉 工具酶，特別是限制性核酸內切酶及其特點，DNA 克隆的一般步驟

? 了解 基因重組的幾種方式，重組 DNA 技術在醫學研究方面的應用及意義 思考題

1、自然界有哪幾種常見的DNA重組方式？重組機制如何？

2、細菌基因組的轉移方式有哪幾種？

3、試述限制酶的作用特點。

4、制備目的基因主要有哪幾種方法？

5、連接DNA片段的方法主要有哪些？

6、克隆載體和表達載體在結構及應用上有何異同點？

7、連接DNA片段的方法主要有哪些？

8、試述重組DNA技術的基本過程。

第十五章 細胞信號傳導

教學目的與要求：

? 掌握（細胞信息）受體，信息分子，第二信使的概念

? 熟悉 受體與配體作用的特點，信息傳遞進入細胞內的兩種方式，細胞膜受體介導的 5 條信息傳遞途徑的大致過程

? 了解 受體活性的調節作用，細胞內受體介導的信息傳遞途徑，信息傳遞異常與疾病的關 系 思考題

1.何謂細胞轉導？有幾種方式？ 2.受體的種類基結構特點。3.G蛋白的活化過程。

4.G蛋白偶聯的受體介導的信號轉導途徑主要有哪幾條途徑 5.PDGF-R介導的信號轉導有哪幾條重要途徑及其反應過程？ 6.舉例說明JAK-STAT途徑反應過程。7.何謂信號途徑交會和信號轉導網絡？ 8.信號轉導專一性決定于哪些因素？

9.舉例說明信號轉導缺陷與疾病的關系。

第十六章 血液的生物化學

教學目的與要求：

? 掌握：血液中各成分所占比例；血漿與血清的區別;血液固體成分的組成及功能；血漿蛋白的分類、性質和功能；紅細胞糖代謝的特點及其幾種代謝產物的生理功能；血紅素合成特點、合成調節。

? 熟悉：血紅素合成步驟。

? 了解：白細胞代謝的特點。思考題

1．簡述血液的組成。

2．血漿蛋白的主要功能及共同特點有哪些？

3．紅細胞中ATP的來源和主要生理功能有哪些？

4．簡述2,3-BPG旁路，并說明2,3-BPG是如何調節血紅蛋白的攜氧功能的。

第十七章 肝的生物化學

教學目的與要求：

? 掌握：生物轉化概念;膽色素的代謝（包括膽紅素的生成與轉運，膽紅素在肝中的轉變，膽紅素在腸道中的轉變和膽色素的腸肝循環，血清膽紅素與黃疸）。

? 熟悉：肝在物質代謝中的作用：包括肝在糖、脂類、蛋白質、維生素、激素代謝中的作用。肝臟的生物轉化作用，生物轉化的反應類型及生理意義。各種膽汁酸的名稱和膽汁酸的腸肝循環;.三種黃疸時血 , 尿和糞的改變

? 了解：膽汁與膽汁酸的代謝：包括膽汁酸的生成、排泄及生理功能。思考題

1.概述肝臟在糖、脂類、蛋白質、維生素和激素代謝中的作用 2.比較兩種不同的膽紅素 3.生物轉化作用的概念及意義

4.膽汁酸的生理功能及其腸肝循環的生理意義

第十八章 維生素與微量元素

教學目的與要求：

．掌握幾種常見維生素的活性形式及作用；

．了解各維生素缺乏導致的疾病。思考題

1、維生素A、D的生化作用及缺乏癥

2、水溶性維生素與輔酶的關系

3、在氨基酸代謝中參與的B族維生素

第二十章 癌基因、抑癌基因與生長因子

教學目的與要求：

? 掌握：癌基因的概念，并能正確的區分癌基因和原癌基因的關系。掌握原癌基因的四大特點，五大癌基因家族的名稱、編碼產物的性質和功能。原癌基因的活化機制、產物種類和功能。抑癌基因的概念。掌握生長因子的概念。

? 熟悉：兩種抑癌基因 Rb 和 P53 的定位，結構、轉錄產物性質及其作用機制。生長因子的分類、產生及作用的三種方式（內分泌、旁分泌、自分泌），生長因子的作用機制。熟悉細胞凋亡的概念。

? 了解： Sis 基因表達產物的作用機制及其與相關細胞信號傳導通路的聯系。Rb 蛋白的磷酸化形式與細胞周期及其作用機制的關系，Rb 蛋白如何與轉錄因子 E-2F 作用。P53 蛋白的結構和功能的關系。了解生長因子與疾病的關系。思考題

1.什么是癌基因，癌基因活化的機制？ 2.闡述原癌基因產物與功能。

3.什么是抑癌基因?舉例說明抑癌基因的作用機制。4.什么是生長因子？闡述生長因子的作用方式及機制。

第二十一章 基因診斷與基因治療

教學目的與要求： ? 掌握基因診斷的概念； ? 了解基因診斷的常用技術方法； ? 掌握基因治療的概念； ? 熟悉基因治療的基本程序； 思考題

1.什么是基因診斷？介紹基因診斷的常用技術方法。2.簡單介紹基因診斷的應用。

3.什么是基因治療？簡述基因治療的方法。

4.基因滅活的主要方法有哪些？簡述滅活的原理。5.簡述基因治療的基本程序。

第二十二章 分子生物學常用技術與人類基因組計劃

教學目的與要求：

? 掌握核酸分子雜交、探針的概念； ? 掌握 PCR 的概念、原理及基本反應步驟； ? 熟悉印跡技術的原理和應用；

? 熟悉 PCR 的主要用途以及核酸序列分析的兩種方法；

? 了解斑點印跡、原位雜交、DNA 點陣、DNA 芯片；核酸序列分析的兩種方法的原理； ? 了解人類基因組計劃與后基因組研究的主要內容及其意義；了解疾病相關基因克隆的兩種主要策略

? 了解轉基因技術、核轉移技術與基因剔除技術的概念和原理及其在醫學中的應用。思考題

１.名詞解釋

分子雜交 PCR 基因文庫 基因芯片 ２.試述分子雜交的基本原理。３.試述PCR技術的基本原理。

４.cDNA克隆與基因組克隆有何不同？

第五篇：《生物化學與分子生物學》教學大綱

分子生物學（Molecular Biology）

（50學時）

一、前言

本課程面向生物技術專業和生物科學專業，學時50，學分3，屬于專業必修課，先修課程為生物化學。

二、課程的性質、地位和任務：

本課程首先介紹分子生物學的含義,它在生命科學中的位置、發展現狀及展望以及基因組織包括DNA結構、復制、突變、修復和重組。同時兼顧學科發展動向,著重涉及當今分子生物學應用技術即分子克隆工具酶、電泳技術、載體、DNA及RNA制備、構建DNA文庫、遺傳轉化、基因表達、PCR、RFLP、RAPD,還介紹了蛋白質合成及分析。旨在使研究生了解現代分子生物學理論的新進展并為相關學科從分子水平上闡明問題提供知識和技術。

三、教學基本要求和方法：

通過對本課程的學習，要求學生掌握基因概念在分子水平上的發展與演變、基因的分子結構和特點、基因的復制、基因表達（在轉錄、翻譯水平）的基本原理、基因表達調控的基本模式、基因發生突變與交換及DNA遺傳多型性檢測的分子生物學原理。

四、授課教材及主要參考書目 教材：

P.C.Turner,A.G.McLennan,A.D.Bates&M.R.H.White 1999 分子生物學（Molecular Biology）科學出版社

參考書目：

黃翠芬 1987 遺傳工程理論和方法 科學出版社 盛祖嘉等 1988 分子遺傳學 復旦大學出版社 齊義鵬 1989 基因工程原理和方法 武漢大學出版社 吳乃虎 1991 基因工程原理 高等教育出版社 1998 基因工程原理(第二版)科學出版社 金冬雁 黎孟楓等譯 1992 分子克隆實驗指南 科學出版社 謝友菊 1992 遺傳工程概論 北京農業大學出版社 閻隆飛、張玉麟 1993 分子生物學 北京農業大學出版社 閻隆飛、張玉麟 1997 分子生物學(第二版)北京農業大學出版社 徐洵、劉震乾 1993 DNA重組技術 科學出版社 盧圣棟 1993 現代分子生物學實驗技術 高等教育出版社 李德葆 徐平1994 重組DNA原理和方法 淅江科學技術出版社 孫志賢 1995 現代生物化學理論與研究技術 軍事醫學科學出版社 林萬明等 1995 PCR技術操作和應用指南 人民軍醫出版社 金冬雁 1996 英漢分子生物學與生物工程詞匯 科學出版社 1998 基因及其操作原理 武漢大學出版社 金冬雁等 1996 核酸和蛋白的化學合成與序列分析 科學出版社 夏其昌 1997 蛋白質化學研究技術與進展 科學出版社 科學出版社名詞室 1997 英漢生物學詞匯（第二版）科學出版社 朱玉賢等 1997 現代分子生物學 高等教育出版社 瞿禮嘉等 1998 現代生物技術導論 高等教育出版社 Robert.F.Weaver 2000 分子生物學(in English)科學出版社 Sambrook J.等 1982 Molecular Cloning;A Laboratiry Manual 1989(2nd edition)Cold Spring Harbor Laboratory Press Turner等 1999 分子生物學(in English)科學出版社

五、教學內容及學時分配： 第一章 細胞與大分子（2學時）

1、目的要求：掌握細胞和大分子的分類及用以分析的一些方法。

2、要點： 第一節 細胞分類

1.真細菌 2.古細菌 3.真核生物 4.分化 第二節 亞細胞器

1.細胞核 2.線粒體與葉綠體 3.內質網 4.微體 5.細胞器的分離 第三節 生物大分子

1.蛋白質和核酸 2.多糖 3.脂類 4.復雜大分子 第四節 大分子的組裝

1.蛋白質復合體 2.核蛋白 3.膜

4.非共價相互作用

第二章 原核與真核生物的染色體結構（2學時）

1、目的要求：掌握DNA如何整合進原核和真核生物復雜的基因組中。

2、要點

第一節 原核生物的染色體結構

1.大腸桿菌染色體 2.DNA結構域 3.基因組超螺旋 4.DNA結合蛋白 第二節 染色質結構

1.染色質 2.組蛋白 3.核小體 4.H1的功能 5.連接DNA 6.30nm纖絲 7.高級結構

第三節 真核生物的染色體結構

1.有絲分裂染色體 2.著絲粒 3.端粒 4.間期染色體 5.異染色質 6.常染色質 7.DNaseⅠ超敏性 8.CpG甲基化 9.組蛋白變異體和修飾 第四節 基因組復雜度

1.非編碼DNA 2.復性動力學 3.單一序列DNA 4.串聯基因簇 5.分散重復DNA 6.衛星DNA 7.遺傳多態性 第五節 遺傳信息流

1.中心法則 2.原核基因表達 3.真核基因表達

第三章 DNA復制（4學時）

1、目的要求：重點掌握DNA復制的過程，DNA復制在原核生物與真核生物中的區別。

2、要點：

第一節 DNA復制概述

1.半保留機制

2.復制子、復制起點與終點 3.半不連續復制 4.RNA引導 第二節 細菌的DNA復制

1.實驗系統 2.起始 3.解旋 4.延伸 5.終止與分離 第三節 細胞周期

1.細胞周期 2.細胞周期4個時期 3.檢驗點及其調控

4.細胞周期蛋白和依賴于細胞周期蛋白的激酶 5.E2F和RB的調控

6.細胞周期的激活、抑制與癌癥 第四節 真核生物的DNA復制

1.實驗系統 2.起始點與起始 3.復制叉 4.核基質 5.端粒的復制

第四章 DNA損傷、修復與重組（4學時）

1、目的要求：了解導致DNA損傷的因素，掌握基因誘變、DNA重組和DNA修復的概念和方法。

2、要點： 第一節 誘變

1.突變 2.復制忠實性 3.物理誘變劑 4.化學誘變劑 5.直接誘變 6.間接誘變 第二節 DNA損傷

1.DNA損傷 2.氧化性損傷 3.烷基化 4.聚化加合物 第三節 DNA修復

1.光復活 2.烷基轉移酶 3.切除修復 4.錯配修復 5.遺傳性的修復缺陷 第四節 重組

1.同源重組 2.位點特異性重組 3.轉座作用

第五章 基因操作（4學時）

1、目的要求：掌握現有的對DNA進行操作的技術，學習用簡單的DNA克隆策略圖說明問題。

2、要點：

第一節 DNA克隆概述

1.DNA克隆 2.宿主和載體 3.亞克隆 4.DNA文庫 5.篩選文庫 6.克隆分析 第二節 質粒DNA的制備

1.載體質粒 2.質粒的小量制備 3.堿裂解 4.酚抽提 5.乙醇沉淀 6.氯化銫梯度 第三節 限制酶與電泳

1.限制性內切核酸酶 2.識別序列 3.黏末端 4.限制性酶解 5.瓊脂糖凝膠電泳 6.DNA片段的分離

第四節 連接、轉化與重組體分析

1.DNA連接 2.重組DNA分子 3.堿性磷酸酶 4.轉化 5.篩選 6.轉化率 7.篩選轉化子 8.轉化子的增殖與保存 9.凝膠分析 10.插入片段定向

第六章 克隆載體（4學時）

1、目的要求：了解常用的適合于各種用途的克隆載體。

2、要點：

第一節 質粒載體的設計

1.連接產物 2.雙抗生素抗性 3.藍—白顏色篩選 4.多克隆位點 5.已克隆插入片段的轉錄 6.表達載體 第二節 噬菌體載體

1.λ噬菌體 2.λ置換型載體 3.包裝與侵染 4.噬菌斑的形成 5.λ溶原體 6.M13噬菌體載體 7.克隆到M13 8.質粒—M13雜合載體 第三節 黏粒、YAC與BAC 1.大片段DNA的克隆 2.黏粒載體 3.YAC載體

4.用釀酒酵母的篩選 5.BAC載體 第四節 真核生物載體

1.克隆到真核生物 2.轉染真核細胞 3.穿梭載體 4.酵母附加型質粒 5.根癌農桿菌Ti質粒 6.桿狀病毒 7.哺乳動物病毒載體 8.直接基因轉移

第七章 基因文庫與篩選（4學時）

1、目的要求：介紹用DNA文庫來分離篩選新的基因序列的過程與方法。

2、要點：

第一節 基因組文庫

1.具代表性的基因文庫 2.文庫大小 3.基因組DNA 4.載體 第二節 cDNA文庫

1.mRNA分離、純化與分級分離 2.cDNA的合成 3.cDNA末端的處理 4.與載體的連接 第三節 篩選流程

1.篩選 2.菌落及噬菌斑雜交 3.表達篩選 4.雜交扣留與釋放 5.染色體步移

第八章 克隆DNA的分析與應用（2學時）

1、目的要求：了解涉及DNA測序和克隆序列分析方面的一些更加復雜和詳細的方法，熟練掌握PCR技術的原理和過程。

2、要點：

第一節 克隆的鑒定

1.鑒定 2.限制圖譜 3.部分酶解 4.核酸標記 5.DNA和RNA雜交 第二節 核酸測序

1.DNA測序 2.RNA測序 3.序列數據庫 4.序列分析 5.基因組測序計劃 第三節 聚合酶鏈式反應

1.PCR 2.PCR循環 3.模板 4.引物 5.酶

6.PCR的條件優化 7.PCR派生技術 第四節 克隆基因的組構

1.組構

2.在基因組DNA上定位cDNA 3.S1核酸酶作圖 4.引物延伸 5.凝膠阻滯 6.DNaseⅠ足跡法 7.報道基因 第五節 克隆基因的誘變

1.缺失突變 2.定點誘變 3.PCR誘變 第六節 克隆技術的應用

1.應用 2.重組蛋白 3.遺傳修飾生物體 4.DNA指紋分析 5.醫學診斷 6.基因治療

第九章

原核生物的轉錄（3學時）

1、目的要求：熟練掌握原核生物基因轉錄的原理、過程。

2、要點：

第一節 轉錄的基本原則

1.轉錄概述 2.起始 3.延伸 4.終止

第二節 大腸桿菌RNA聚合酶

1.大腸桿菌RNA聚合酶 2.α亞基 3.β亞基 4.β’亞基 5.σ因子 第三節 大腸桿菌σ70啟動子

1.啟動子序列 2.啟動子大小 3.-10序列 4.-35序列 5.轉錄起始點 6.啟動子效率

第四節 轉錄的起始、延伸與終止

1.啟動子結合 2.DNA解旋 3.RNA鏈起始點 4.RNA鏈延伸 5.RNA鏈終止 6.依賴ρ的轉錄終止

第十章

原核生物的轉錄調控（3學時）

1、目的要求：熟練掌握一些被細菌用來調控特定基因表達的精細機制。

2、要點：

第一節 乳糖操縱子

1.操縱子 2.乳糖操縱子 3.乳糖阻抑物 4.誘導 5.cAMP受體蛋白 第二節 色氨酸操縱子

1.色氨酸操縱子 2.色氨酸阻抑物 3.弱化子 4.前導RNA結構 5.前導肽 6.弱化作用 7.弱化的重要性

第三節 不同σ因子對轉錄的調節

1.σ因子 2.啟動子識別 3.熱休克

4.枯草桿菌的孢子形成 5.噬菌體σ因子

第十一章

真核生物的轉錄（2學時）

1、目的要求：熟練掌握真核生物基因轉錄的基本原理和過程。

2、要點：

第一節 三種RNA聚合酶：性質與功能

1.真核生物RNA聚合酶 2.RNA聚合酶亞基 3.真核生物RNA聚合酶的活性 4.RNA聚合酶Ⅱ的CTD 第二節 RNA聚合酶Ⅰ基因：核糖體重復

1.核糖體RNA基因 2.核仁的作用 3.RNA聚合酶Ⅰ啟動子 4.上游結合因子 5.選擇因子1 6.TBP與TAF1 7.其他rRNA基因

第三節 RNA聚合酶Ⅲ基因：5S基因與tRNA基因的轉錄

1.RNA聚合酶Ⅲ 2.tRNA基因 3.5S rRNA基因

4.可變的RNA聚合酶Ⅲ啟動子 5.RNA聚合酶Ⅲ的終止

第四節 RNA聚合酶Ⅱ基因：啟動子與增強子

1.RNA聚合酶Ⅱ 2.啟動子 3.上游調控元件 4.增強子

第五節 通用轉錄因子與RNA聚合酶Ⅱ的起始

1.RNA聚合酶Ⅱ的基本轉錄因子 2.TFⅡD 3.TBP 4.TFⅡA 5.TFⅡB與RNA酶的結合 6.RNA聚合酶進入之后的結合因子 7.TFⅡH作用下的CTD磷酸化 8.起始轉錄復合體

第十二章

真核生物的轉錄調控（2學時）

1、目的要求：掌握一些重要的真核細胞基因的轉錄調控的例子。

2、要點：

第一節 真核生物的轉錄因子

1.轉錄因子結構域結構 2.DNA結合結構域 3.二聚體結構域 4.轉錄激活結構域 5.阻抑物結構域 6.轉錄調控的對象 第二節 轉錄調控舉例

1.組成性轉錄：SP1 2.激素調控：類固醇激素受體 3.磷酸化調控：STAT蛋白 4.轉錄延伸：HIV Tat 5.細胞決定：myoD 6.胚胎發育：同源域蛋白

第十三章 RNA加工與核糖核蛋白復合體（4學時）

1、目的要求：熟練掌握從新生RNA到成熟RNA分子的加工過程。

2、要點：

第一節 rRNA加工與核糖體

1.RNA的加工類型 2.原核生物的rRNA加工 3.真核生物的rRNA加工 4.核糖核蛋白復合體及其研究 5.原核生物的核糖體 6.真核生物的核糖體

第二節 tRNA的加工、RNA酶P和核酶

1.原核生物的tRNA加工 2.真核生物的tRNA加工 3.核糖核酸酶P 4.核酶

第三節 mRNA加工、hnRNP和snRNP 1.mRNA的加工 2.hnRNP 3.snRNP顆粒 4.5’端加帽 5.3’端剪切及加尾 6.剪接

7.前mRNA的甲基化 第四節 可變mRNA加工

1.可變加工 2.可變poly(A)位點 3.可變剪接 4.RNA編輯

第十四章

遺傳密碼與tRNA（2學時）

1、目的要求：掌握遺傳密碼的特點以及tRNA在翻譯過程中的作用。

2、要點： 第一節 遺傳密碼

1.特性 2.破譯 3.特征 4.突變的效應 5.通用性 6.可讀框 7.重疊基因

第二節 tRNA的結構與功能

1.tRNA的一級結構 2.tRNA的二級結構 3.tRNA的三級結構 4.tRNA功能 5.tRNA的氨酰化 6.氨酰tRNA合成酶 7.校正

第十五章

蛋白質合成（4學時）

1、目的要求：熟練掌握RNA通過遺傳密碼翻譯成成熟蛋白質序列的過程。

2、要點：

第一節 蛋白質合成概述

1.密碼子與反密碼子的相互作用 2.擺動現象 3.核糖體結合位點 4.多聚核糖體 5.起始tRNA 第二節 蛋白質合成機制 1.基本過程 2.起始 3.延伸 4.終止

第三節 真核生物蛋白質合成的起始

1.基本過程 2.掃描 3.起始 4.延伸 5.終止

第四節 翻譯調控與翻譯后加工

1.翻譯調控 2.多蛋白 3.蛋白質定位 4.蛋白質修飾 5.蛋白質降解

第十六章

噬菌體與真核生物病毒（2學時）

1、目的要求：掌握重要的原核生物和真核生物病毒，了解它們對我們理解分子信息處理所作的貢獻。

2、要點： 第一節 病毒簡介

1.病毒 2.病毒基因組 3.復制策略 4.病毒毒性 第二節 噬菌體

1.一般特性

2.裂解性與溶源性侵染 3.噬菌體M13 4.λ噬菌體 5.轉座噬菌體 第三節 DNA病毒

1.DNA病毒基因組：復制與轉錄 2.較小DNA病毒 3.較大DNA病毒 4.單純皰疹病毒-1 第四節 RNA病毒

1.RNA病毒基因組的一般特性 2.病毒的反轉錄 3.反轉錄病毒 4.致癌性反轉錄病毒

5.反轉錄病毒基因組結構及其表達 6.反轉錄病毒的突變率

第十七章

腫瘤病毒與癌基因（2學時）

1、目的要求：從病毒的研究的進展以及分子生物學其他領域的知識累積了解癌癥的發生機制。

2、要點：

第一節 腫瘤病毒中的癌基因

1.癌癥 2.癌基因

3.致癌性反轉錄病毒 4.癌基因的分離 第二節 癌基因的分類

1.癌基因與生長因子 2.核癌基因 3.癌基因間的協同作用 第三節 腫瘤抑制基因

1.概述

2.腫瘤抑制基因存在的證據 3.RB1基因 4.P53基因 第四節 凋亡

1.凋亡

2.損傷或危險性細胞的清除 3.凋亡過程中細胞變化 4.線蟲中的凋亡作用 5.哺乳動物中的凋亡 6.凋亡在疾病和癌癥中的作用福建農林大學生物科學專業

本科生《生物化學與分子生物學實驗》教學大綱

80學時 3學分

一、課程的性質和任務

分子生物學和生物工程學是兩門新興的學科，無論對基礎理論研究，還是生產實踐都將產生巨大的影響。生物化學與分子生物學是這兩門學科的重要基礎，是一門實踐性很強的實驗課程。掌握和應用生物化學與分子生物學實驗技能，是學好這一課程的必要條件。

生物化學與分子生物學實驗技術不僅是生物化學教學重要的組成部分，而且在培養學生分析和解決問題的能力，嚴謹的科學態度和獨立工作的能力方面，有著不可替代的作用。

針對學生的培養方向，本課程以培養學生掌握生物技術與分子生物學研究的基礎實驗技能為主要目標，力圖最大限度地利用我校現有的實驗條件，使學生通過本課程的學習和實踐，接觸和掌握從事生物技術研究所必要的實驗手段。通過有限的實驗室實踐，涵蓋生物化學與分子生物學各個方面的實驗內容，以點帶面，突出重點，促進學生對生物化學與分子生物學課程學習內容的理解和掌握。

二、課程教學的基本要求

本課程的內容以蛋白質（含酶）、核酸及脂類的提取、分離、純化及鑒定為重點，兼及這些內容的定性和基團鑒定，以及糖類．維生素的實驗。本課程的實驗安排考慮到與化學基礎和后繼的專業實驗的銜接，盡量避免重復。在實驗項目安排方面，主要涉及提取、透析、凍干、層析、電泳、分光、離心、濃縮、PCR、分子雜交和基因表達等基礎實驗技能的訓練。在時間安排上，針對本科生的學習特點，盡量安排每一個實驗可以在２－３小時內完成，在課程結束前，適當安排少量綜合實驗，以培養學生應用實驗手段的綜合能力。

本課程教學總時數為8０學時，實驗技術原理采取以學生自習為主，課堂進行提要式的提示講解和必要的答疑的方式，使學生掌握實驗方法的基本原理和應用范圍。本課程強調實驗技能訓練的重要性，主要課時安排學生實驗，以便盡量提高學時利用率。為了節省基礎設施投資，提高儀器利用率，本課程采取開放式集中實驗的方式，要求學生在實施實驗之前，必須做好預習準備，擬好實驗方案，經任課教師認可后，方可進入實驗室做實驗。課堂講授與實驗課的比例為１：10。

我們在課程成績評定上，不以一次考試定音的傳統考試方式，而強調平時和考試并重，基礎理論和實驗技能相結合的綜合評定方式（理論３０％，實驗技能考試３０％，平時觀察和記錄４０％）。

三、課程教學大綱及學時分配 1 緒論（3學時）常用生物化學實驗技術及原理（自學）2.1 樣品處理 2.1.1 透析

2.1.2 薄膜濃縮與冷凍干燥 2.2 層析技術 2.3 電泳技術 2.4 光譜技術 2.5 離心技術 2.6 PCR技術 3 學生實驗

3.1 氨基酸的分離鑒定───紙層析法（3學時）

了解層析技術的一般原理、分類及應用范圍，重點掌握紙層層析法的原理及操作技術，用以分離游離氨基酸組分。3.2 多糖的薄層層析分離（5學時）

了解薄層層析的一般原理，掌握多糖的水解方法和硅膠G薄層層析的基本技術及其在可溶性糖分離鑒定中的應用。

3.3 瓊脂糖凝膠柱層析測定蛋白質分子量及分子量分布（8學時）

通過采用瓊脂糖凝膠柱層析測定蛋白質分子量及分子量分布，學習和掌握凝膠柱層析法的工作原理和基本操作技術。

3.4 大蒜細胞ＳＯＤ的提取與分離（6學時）

通過大蒜細胞SOD的提取與分離，學習和掌握蛋白質和酶的提取與分離的基本原理和操作方法。

3.5 ＳＤＳ－ＰＡＧＥ測定蛋白質的相對分子量（8學時）

通過利用SDS-PAGE測定蛋白質分子量實驗，掌握垂直板型聚丙烯酰胺凝膠電泳的原理和操作方法，以及SDS-PAGE測定蛋白質分子量的原理和方法。3.6 酵母ＲＮＡ的提取與分離（8學時）

通過采用苯酚溶液提取法提取酵母RNA，采用地衣酚顯色法測定RNA含量，學習和掌握RNA的分離與測定的基本原理和技術。3.7 植物ＤＮＡ的提取與測定（8學時）

通過采用SDS提取法提取花椰菜DNA，采用二苯胺顯色法測定DNA含量，采用瓊 脂糖凝膠電泳鑒定DNA，學習和掌握RNA的分離與測定的基本原理和技術。3.8 大腸桿菌感受態細胞的制備和轉化（3學時）

通過本實驗，掌握大腸桿菌感受態細胞的制備及轉化方法和技術。3.9 質粒DNA的提取及酶切（8學時）

通過本實驗學習和掌握堿裂解法提取質粒。3.10

DNA重組（2學時）

通過本實驗學會重組DNA連接以及鑒定重組子的方法。3.11

DNA序列測定——銀染色法（8學時）

通過本實驗，掌握銀染測序法。3.12 PCR基因擴增（6學時）

通過本實驗學習PCR反應的基本原理與實驗技術。4 實驗技能考試（2學時）和實驗基礎理論考試（2學時）

四、參考文獻

１

張立名，王賢舜： 現代生物化學分析原理，中國科學技術大學出版社，１９９１年４月第一版。

２

王重慶等： 高級生物化學實驗教程，北京大學出版社，１９９４年６月第一版。３

張龍翔等：生化實驗方法和技術（第二版），高等教育出版社，１９９７年７月第二版。

４

趙亞華：生物化學實驗技術教程，華南理工大學出版社，２０００年８月第一版。５

歐陽平凱：生物分離原理及技術，化學工業出版社，１９９９年２月第一版。６ 魏群：分子生物學實驗指導，高等教育出版社，１９９９年１２月第一版。７ 楊安鋼等：生物化學與分子生物學實驗技術，高等教育出版社，２００１年２月第一版。

８ 郭勇：現代生化技術，華南理工大學出版社，１９９６年８月第一版。