第一篇：微生物菌群的選擇及培養(含總結)

微生物菌群的選擇與培養

針對所學的關于水污染治理的有關理念，加之對環境微生物這門課程的理解，此次環境微生物這門課程的設計我選用的微生物菌群是對保健、水產、養殖、種植甚至環保等方面都有益的菌群。

一、有益微生物的概念（“EM”菌群）

“EM”是英語Effective和microorganisms的縮寫，意為有益微生物群，是日本琉球大學的比嘉夫教授于1983年研制成功的微生物工程技術中綜合性最強的新創造。有益微生物群由整個生態系統都存在的五大類微生物（光合細菌、乳酸菌、放線菌、酵母菌、發酵型絲狀菌）中的多種有益微生物組成。

這些微生物組合在一個統一體中互相促進，共同組成一個復雜而穩定的具有多元功能的微生物生態系統，在水族箱使用后，可抑制有害微生物，特別是病原菌和腐敗菌的活動，從而改善水質，并改善魚類消化道細菌群落，促進魚類健康快速生長。其功能要超過硝化細菌和光合細菌。

二、有益微生物群的主要成分

1、光合菌群（好氧型和厭氧型）如光合細菌和藍藻類。屬于獨立營養微生物，菌體本身含60％以上的蛋白質，且富含多種維生素，還含有輔酶Ｑ

10、抗病毒物質和促生長因子；它以土壤接受的光和熱為能源，將土壤中的硫氫和碳氫化合物中的氫分離出來，變有害物質為無害物質，并以植物根部的分泌物、土壤中的有機物、有害氣體（硫化氫等）及二氧化碳、氮等為基質，合成糖類、氨基酸類、維生素類、氮素化合物、抗病毒物質和生理活性物質等，是肥沃土壤和促進動植物生長的主要力量。光合菌群的代謝物質可以被植物直接吸收，還可以成為其它微生物繁殖的養分。

2、乳酸菌群（厭氧型）以嗜酸乳桿菌為主導。它靠攝取光合細菌、酵母菌產生的糖類形成乳酸。乳酸具有很強的殺菌能力，能有效抑制有害微生物的活動和有機物的急劇腐敗分解。乳酸菌能夠分解在常態下不易分解的木質素和纖維素，并使有機物發酵分解。乳酸菌還能夠抑制連作障礙產生的致病菌增殖。

3、酵母菌群（好氧型）它利用植物根部產生的分泌物、光合菌合成的氨基酸、糖類及其它有機物質產生發酵力，合成促進根系生長及細胞分裂的活性化物質。酵母菌在有益微生物群中對于促進其它有效微生物（如乳酸菌、放線菌）增殖所需要的基質（食物）提供重要的給養保障。此外，酵母菌產生的單細胞蛋白是動物不可缺少的養分。

4、革蘭氏陽性放線菌群（好氧型）它從光合細菌中獲取氨基酸、氮素等作為基質，產生出各種抗生物質、維生素及酶，可以直接抑制病原菌。它提前獲取有害霉菌和細菌增殖所需要的基質，從而抑制它們的增殖，并創造出其它有益微生物增殖的生存環境。放線菌和光合細菌混合后的凈菌作用比放線菌單兵作戰的殺傷力要大得多。它對難分解的物質，如木質素、纖維素、甲殼素等具有降解作用，并容易被動植物吸收，增強動植物對各種病害的抵抗力和免疫力。放線菌也會促進固氮菌和VA菌根菌增殖。

5、發酵系的絲狀菌群（厭氧型）以發酵酒精時使用的曲霉菌屬為主體，它能和其他微生物共存，尤其對土壤中酯的生成有良好效果。因為酒精生成力強，能防止蛆和其他害蟲的發生，并可以消除惡臭。

三、“EM”菌群的培育

1、配方

配方一：100公斤干凈的水、EM菌種5公斤、紅糖5公斤、尿素0.6公斤、磷酸二氫鉀200克、維生素C50克；

配方二：100公斤干凈的水、EM菌種3公斤、光合細菌2公斤、紅糖4公斤、尿素0.4公斤、磷酸二氫鉀150克、維生素C50克（此配方不需要長期使用，3個月使用一次即可，平常建議采用配方一）。

2、材料選擇

a、塑料桶：選擇容量在20公斤以上的塑料桶（衛生條件要求塑料桶能容裝飲用水的標準）；

b、紅糖：商品名叫赤砂糖，也可用糖蜜代替；

c、EM菌種：如果你現在想采用新方法培育，建議從實驗場引進新菌種，如果你是引進的新菌種，半年內可不需要添加光合細菌；

d、光合細菌：耐低酸度的光合菌，一般光合細菌適合生存在PH值5-8的范圍；

e、磷酸二氫鉀：純度在90%以上的，不可用肥料用的磷酸二氫鉀代替； f、D-異抗壞血酸：為抗氧化劑，也叫維生素C，是一種食品添加劑，不可用藥品的維生素C代替，它能延長EM的保質期、提高動植物的抗疾病能力等作用；

g、尿素：化肥用的即可；

h、水：干凈的水，能夠飲用的水，自來水需要放置2天以上才能使用，冷開水或純凈水最好。

3、培育方法

把水放入塑料桶中加入紅糖→加入EM菌種和光合細菌→尿素和磷酸二氫鉀分別溶化后加入→搖均→密封→光照下培育，溫度保持在25-35度→每天搖動兩次，每次透氣半小時→第三天加入D-異抗壞血酸，搖均→第四天停止光照，檢測PH值，達到3.8以下培育完成，未達到繼續培育→開蓋透氣，三天后完成培育，密封保存或使用。如果溫度偏低、光照不足，培育時間肯定會延長，還有可能造成失敗，使用效果也有影響。是否培育完成憑PH測試紙測試PH值在3.8以上即合格。培育中是否有懸浮物產生都是正常情況，一般溫度高懸浮物容易產生。如果培育溫度偏低，培育的EM氣體將減少。培育中有異味是很正常的，PH合格后再透氣兩天如果異味還很嚴重，就有可能培育失敗了。冬季溫度偏低小批量培育可做一個較大點的紙箱或木箱，把培育桶放在箱中，幾個桶的中間吊一個60W的燈泡，封好箱蓋，即可保證光和溫度了，但要注意防火安全。

附錄： 有益微生物群在環保業的具體用法

一、機理與作用

利用微生物治理污水和城市生活垃圾是今后環保產業的主攻方向。作用機理是以光合菌群和酵母菌群為主導，協同其它有益微生物共同作用，產生抗氧化物質，通過氧化還原發酵等途徑，分解氧化有機物，把有害有毒轉化為無害無毒，變有害為有用。在廁所去臭、生活垃圾利用、生活和工業廢水治理等環保領域，應用前景廣闊且成本低廉。

二、處理方法

目前常用有益微生物群治理環境的方法是用有益微生物群稀釋液噴布及有益微生物群發酵料的撒放，采取三級凈化槽法、生物膜法、水面噴施法、垃圾發酵法等。

1．三級凈化槽法

循環處理反應系統一般是設置凈化槽。凈化槽由三個大槽組成，排出的污水先貯入第一槽，由有益微生物群微生物進行分解，第二個槽污水中的有機物分解成水和ＣＯ2（二氧化碳），第三個槽將處理過的水再送回最前面的處理槽，如此循環，可增加有益微生物的密度，提高水的抗氧化力。投放比例：第一凈化槽按污水接受量的千分之一投入，第二及第三個槽均按水量的萬分之一投入（可依據水質調整倍率）。每周投入一次。2．生物膜法

為使有益微生物群微生物在水底滯留繁殖，可用多孔磚石、木炭、竹炭、沸石等在10-50倍有益微生物群稀釋液中浸泡2 － 4 天后，拋入污水和放置于出水口。10天換一次。凈化有一定流速的水域時，如河床沒有淤泥，應投置不會沖走的特制水泥塊作為生物膜。3．水面噴施法

按總水量100000∶1 的比例取有益微生物群（加等量紅糖），配制100 倍有益微生物群稀釋液，密封發酵12小時后，潑灑水面。河流湖泊凈化時，水能保持流動狀態更好。

4．有益微生物群處理垃圾

（1）有益微生物群提高垃圾處理能力

在垃圾堆埋過程中，如以有益微生物群噴灑處理，可以有效地解決上述的問題，方式包括在垃圾收集時噴或當垃圾運輸到垃圾場時噴，兩者兼用效果更佳，有益微生物群對垃圾的主要作用有以下幾方面：

a.加速垃圾的發酵分解，在短時間內減少堆積垃圾的體積，變相增加總垃圾堆埋量的數目。

b.抑制腐敗細菌的生長，改善有機物的分解途徑，減少氨和琉化氫的釋放量和氨類物質的產生，同時亦減少沼氣量。

c.由于有效微生物作用會消耗水份，從而減少污水產生的數量，也改善了污水的水質，減低污染成份，方便將來污水的處理。

d.抑制蚊蠅的蛹、蛆孵化，達到減少蚊蠅孳生的長遠效果，減少疾病。e.抑制病原性微生物的繁殖，防止病害的產生。f.促進堆填區土壤化和再生的過程。

（2）有益微生物群垃圾處理技術

在開始處理的前3個月，按每天進場200噸垃圾計算，每天向垃圾噴灑1噸的有益微生物群稀釋液，如果垃圾場內有排沼氣管道，可用有益微生物群稀釋液灌入垃圾底層以增加處理效果，以后按處理進度而定，每天按垃圾數量及垃圾質素而定，向新到垃圾噴灑0.3—0.5噸的10%有益微生物群稀釋液，若要增加滅蚊蠅效果，有益微生物群稀釋液中可加入約0.5—1%按葉，冬青或其它植物提取劑，以增加對成蟲的殺滅效果，此種提取物對人畜無害，絕對合乎環保和衛生要求（以上處理為100倍有益微生物群稀釋液）。

（3）使用有益微生物群處理垃圾場后的效果

a.7—10天內垃圾場的舊垃圾臭味會明顯減少甚至消失，新到垃圾如在垃圾收集站進行有益微生物群處理，臭味亦會明顯降低。

b.蒼蠅捕集率會于7天后開始減少，配合植物提取劑60%以上。

c.沼氣產生量會于30天內明顯減少，長期使用沼氣量可減少40%以上。d.垃圾滲濾液排出量會卡30天內開始減少，COD及BOD 值穩定下降，數值視垃圾場使用年齡及垃圾性質而定。

（4）綜合效益分析

a.減少垃圾污水產生量，改善污水的水質，減低將來污水的處理費用。b.加速垃圾分解，減少體積，增加總垃圾堆埋量而減少垃圾處理成本。c.減少臭氣釋放量，減少蚊蠅，提高人員的健康和工作效率。d.減少沼氣，避免因沼氣意外而造成的經濟和生命損失。

e.減少污水產生的數量，改善了污水水質，減低垃圾污水的污染。f.加速垃圾分解，減少垃圾的體積，促進堆填區土壤化和再生的過程。g.抑制腐敗細菌的生長，降低沼氣，氨和琉化氫的產生，減低大氣污染。h.抑制蚊蟲的蛹孵化，長遠達到減少蚊蠅和疾病的效果。i.減少殺蟲劑的使用。

j.抑制病原性微生物的繁殖，防止病害的產生。

實習心得

通過這次為期一個星期的環境微生物課程設計，不僅讓我從各方面了解了微生物的類型及培養方式，還讓我認識到微生物的不同菌群對我們水利類專業的貢獻。

首先，本次微生物的實習，讓我對于書本上的知識有了全面的認識，微生物不僅在微生物學上很重要，它還和我們的生活息息相關，就我這次所選用的“EM”菌群而言，它廣泛運用于養殖和生活用水、城市垃圾的處理等各方面；其次，也讓我明白不能單方面從書本來淺顯的理解微生物，微生物不是分類學上的名詞，而是囊括了細菌、真菌、病毒等一大類生物群體，我們不僅要了解各類型微生物的結構、繁殖、培育等，還要了解它的生活習性以及對環境的利弊；最后，綜合對微生物各方面的了解，我們還要把有益于人類的各種微生物群充分運用于生活中。

在這次課程設計中，我也發現了很多連我自己也弄不明白的盲點，除了運用老師教導的知識外，我也查看了各類書籍及資料，已達到更近一步了解微生物的目的。就拿微生物菌群的培養來說，不同類型的微生物培養基選用的營養物質也有差異，還有外在環境條件對微生物菌群的影響等等，我們必需要綜合各方面考量，使微生物培育達到更好的效果。

總的來說，這次實習不僅完善了我對書本上知識的學習，達到了學以致用的作用，還更好的來發現了自己的不足，從而加以彌補，也讓我了解到微生物學的重要性。

第二篇：微生物,痰培養相關總結

關于痰標本

1.痰標本中需要檢測的主要致病菌：肺炎鏈球菌、肺炎克雷伯菌（可引起原發性肺炎）、流感嗜血桿菌、金黃色葡萄球菌（各種器官的化膿性感染，呼吸道的有氣管炎、肺炎膿胸等）、銅綠假單胞菌(條件致病菌，院感主要病原菌之一，在人體抵抗力低下時可引起呼吸道感染等感染，該菌引起的慢性肺部感染占有較大比例)。

2.非病原菌：酵母菌、草綠色鏈球菌、凝固酶陰性葡萄球菌。3.省醫院對痰標本的處理過程：

1）每個接收的痰標本進行痰涂片（老師稱之為痰質控片），鏡下觀察痰標本是否合格。合格的痰標本標準為WBC>25/LP,EPC<10/LP或二者比值大于2.5。由于種種原因，不合格的痰標本是不會退回的。痰質控片記錄的相關信息包括：每低倍鏡下的WBC數和EPC數，若查見細菌，報告細菌的種類（如G+C、G-b）、排列方式、數量（幾個+）。還要記錄真菌和孢子的鏡檢結果。不合格的痰標本依然會接種（若申請單上有培養）。痰質控片的作用：在篩查標本接種出來的平板時根據痰質控片的結果進行相關分析。

2）痰標本接種：接種三種平板，分別是血平板、麥康凱平板、巧克力平板（安圖篩選嗜血桿菌的平板，名稱為CAH）。

3）孵育和接種平板篩選：接收的痰標本均要兩夜的孵育。第一夜過夜孵育后取出進行平板篩選，做好相關記錄。第二次過夜孵育后取出再篩選一次，和前一天的記錄相比較，記錄或改正相關篩選結果。孵育兩夜的意義在于防止某些生長緩慢的致病菌被漏檢。4.關于如何篩選需要進行下一步檢驗的標本 1)數量標準

手工接種：血平板上第四區有5個菌落，表示有105，已經達到治病的數量。可以繼續往下做鑒定和/或藥敏。

儀器接種：因使用消化液，計數需有107（痰標本使用消化液，使很多胞內菌釋放，上機前都是加過生理鹽水的，經過這兩步那么這個判斷治病的數量級是如何得出的，經驗，實驗結果？）。2)其他

在微生物室的老師經過一定時間的經驗積累，對于常見的致病菌，根據其菌落形態就可以將其鑒別出來。比如通常情況下在血平板上G+菌的菌落較小，圓形，光滑，而G-菌的菌落較大，扁平，粗糙。而痰標本接種后的血平板上哪些細菌需要進行下一步試驗不僅需要相應的理論知識作基礎還需要經驗積累。

在血平板上達到量的細菌，還要看是否是優勢生長和純量生長。但是優勢生長的細菌并不一定是致病菌，如培養出來的全是口腔的正常菌群，相對來說，必定有優勢生長得細菌。所以優勢生長得細菌要是相關的致病菌。

在引起呼吸道感染的G-b有肺炎克雷伯桿菌、流感嗜血桿菌、銅綠假單胞菌等。是否痰標本培養出G-b就一定是致病菌？答案是痰中出現革蘭陰性菌不一定就是致病菌。因為某些病人，如ICU病人，在呼吸道插管存在的情況下，呼吸道是與外界相通的，這時就會定植很多細菌，如銅綠假單胞菌，這些細菌只是定植但不會引起感染。如果一個病人來自ICU，且是第二次或者多次做痰培養的時候，培養出大量純量的銅綠假單胞菌或者鮑曼不動桿菌（這兩種菌常從ICU病人分離到）就需要考慮是定植菌。省醫院遇到這樣的情況只會報一個該細菌的量，而不是進行鑒定和/或藥敏。判斷一株細菌是不是致病菌，單獨在實驗室很難做到，必須與臨床聯系。有的時候，即使從痰標本中只分離到根本不占優勢幾個菌落的革蘭陰性或陽性菌，這種細菌也可能是真正引起感染的致病菌。痰標本的培養、鑒定和藥敏結果通常情況下對臨床醫生只是起到一個輔助的作用，如果病人有癥狀，也分離到相應的致病菌，那么可以幫助臨床醫生肯定診斷。如果培養結果和臨床癥狀不相符合，臨床醫生會從多方面考慮原因（送檢標本不合格，某種細菌實驗室檢出能力低）并且經驗性用藥（病人有明確的感染癥狀）。

總之，致病菌的篩選不僅需要檢驗工作者的豐富經驗還需要多和臨床溝通，多了解臨床才能做好。

（整理的報告內容根據省醫院老師的講解和相關資料查詢而得，不一定完全正確，而且必定不全面。在接下來的學習中會去完善。有錯誤的地方希望郭老師指出！）

第三篇：微生物實驗關于空白染菌的幾個情況總結說明

微生物實驗關于空白染菌的幾個情況總結說明

一、空白平板上有細菌生長的原因比較多

1、培養基有可能沒有滅徹底，滅菌鍋沒壞的話這個可能性應該不大

2、做空白用無菌水，對吧，是滅菌的蒸餾水。

3、培養基空培養，驗證培養基配制的沒有問題

4、無菌操作。如果染菌的在培養皿邊緣，則是操作過程有誤，比如接菌時碰到下皿了；如果不是邊緣，就是無菌水沒滅徹底

1、培養基是否滅菌徹底?培養基是否是再次使用?培養基的包裝情況和保存時間是否太久了

2、生理鹽水是否滅菌徹底？配制時間是否太久了？

3、平皿、吸管是否滅菌徹底？保存方式和時間

4、操作時，無菌操作是否存在問題？

5、實驗室環境中微生物的污染狀況？可以用平皿沉降法對空氣菌落作一下測定。

二、檢測自來水的細菌總數時,為什么做空白對照試驗?如果空白對照試驗有少數幾個菌落說明

（1）陰性對照試驗目的：

1、如果試驗中用到緩沖液、稀釋液等，可以說明該些緩沖液稀釋液是無菌的，不影響正常實驗結果的。

2、可以說明在整個試驗操作過程中，步驟方法操作都得當整確，無微生物帶入。

（2）因此，如果陰性對照平板上有菌落，可能有如下原因：

1、緩沖液、稀釋液被污染

2、實驗過程中操作不當，將陽性菌大腸埃希菌不慎帶入陰性對照

3、試驗環境差，比如潔凈室無菌空氣被污染；或者生物安全柜、凈化工作臺失效。

以排除其他方面帶來的細菌，比如說來自培養基或接種時的空氣等，如果空白對照試驗內有少數菌落，則檢測的自來水細菌數內要扣除對照組的幾個菌落。

三、空白的作用

1、為了驗證實驗前的準備滅菌是否有效、2、和過程中是否有污染

3、主要是操作不當引起的污染引起的污染，如果空白有菌落說明實驗失敗，結果不可信，最好重做。

第四篇：關于用于專利程序的微生物菌（毒）種、培養物入境檢疫暫行規定

【分類號】 40200119850

3【標題】 衛生部、農牧漁業部、中國專利局頒發《關于用于專利程序的微生物菌（毒）種、培養物入境檢疫暫行規定》的通知

【時效性】 有效

【頒布單位】 衛生部＼農牧漁業部＼中國專利局

【頒布日期】 19850910

【實施日期】 19850910

【失效日期】

【內容分類】 專利申請審批程序

【文號】

【名稱】 衛生部、農牧漁業部、中國專利局頒發《關于用于專利程序的微生物菌（毒）種、培養物入境檢疫暫行規定》的通知

【題注】

【章名】 前言

中國國際貿易促進委員會、中國專利代理有限公司、上海專利事務所、中國微生物菌種保藏委員會普通微生物中心、中國典型培養物保藏中心、各衛生檢疫所、動植物檢疫所、站：

根據《中華人民共和國國境衛生檢疫條例》、《中華人民共和國進出口動植物檢疫條例》和《中華人民共和國專利法實施細則》等有關規定，現制定《關于用于專利程序的微生物菌（毒）種、培養物入境檢疫暫行規定》，現發給你們，請遵照執行。

【章名】 附件：衛生部、農牧漁業部、中國專利局關于用于專利程序的微生物菌（毒）種、培養物入境檢疫暫行規定

一、外國申請人向我國提出涉及微生物的專利申請，將微生物菌（毒）種、培養物交中國專利局指定的保藏單位保藏的，應事先由其委托的涉外專利代理機構向衛生部或農牧漁業部辦理入境許可審批手續。

與人、環境衛生有關的微生物菌（毒）種、培養物，由衛生部審批；與動物、植物有關的微生物菌（毒）種、培養物，由農牧漁業部審批；與人畜共患性疾病有關的，應由衛生部和農牧漁業部協商后聯合審批。審批單位一般應在收到微生物菌（毒）種、培養物入境申請后一周內，作出決定，并通知申請人。

二、審批單位根據國家頒布的有關法令、條例進行審批。對微生物菌（毒）種、培養物進口時，要求包裝絕對安全，不得造成污染。

三、涉外專利代理機構在辦理入境許可審批手續時，應向審批單位提交申請入境的微生物菌（毒）種、培養物的名稱、來源、數量、用途，對人和動植物有否危害等簡要資料。

四、經審批單位同意，涉外專利代理機構方可通知外國專利申請人將微生物菌（毒）種培養物寄入我國或攜帶入境。進口時涉外專利代理機構應將外國委托人的有關證明及審批單位的許可單向進口的國境衛生檢疫機關或口岸動植物檢疫機關報檢。國境衛生檢疫機關或口岸參錛煲呋亟郵鼙旌螅笆輩檠椋判小Ｈ舴⑾紙詰奈⑸錁ǘ荊┲幀⑴嘌鎘脛ぜ環虬安環弦螅從枰醞嘶鼗蠣皇障佟?/p>

五、微生物菌（毒）種、培養物保藏單位應對微生物菌（毒）種、培養物妥善保藏，確保安全，嚴防擴散。

六、任何人要求獲取用于專利程序的微生物菌（毒）種、培養物樣品供國內使用的，除按中國專利局《用于專利程序的微生物保藏辦法》辦理外，均應經衛生部或農牧漁業部批準。

第五篇：微生物室菌種管理及應急程序

檢驗科微生物室菌種管理規定及應急預案

1.0目的

為確保微生物實驗室菌種保管安全，避免微生物實驗室菌種生物安全事故的發生。2.0范圍

適用于微生物實驗室所有工作人員及管理人員。3.0職責

3.1微生物室組長負責微生物實驗室菌種管理。3.2科室主任為生物菌種保管安全 狀立即去急診科治療。

5.3 當發現菌株丟失時，立即報告實驗室負責人，經調查，若確定丟失時，由實驗室負責人上報科室負責人，并上報醫院感染管理科進一步調查處理。6.0支持文件

其它未盡事項嚴格按照下列文件執行：《中華人民共和國傳染病防治法》、《病原微生物實驗室生物安全管理條例》、《中國醫學微生物菌種保藏管理辦法》、《人間傳染的病原微生物菌（毒）種保藏機構管理辦法》。