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標(biāo)本溶血處理流程20110531

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第一篇:標(biāo)本溶血處理流程20110531

上門體檢客戶血標(biāo)本溶血處理流程

為進(jìn)一步做好精心優(yōu)選壽險(xiǎn)客戶上門核保體檢服務(wù),預(yù)防血標(biāo)本溶血情況的發(fā)生給客戶帶來的不便,特?cái)M定標(biāo)本溶血問題處理流程,以規(guī)范操作。

一、合作檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)發(fā)現(xiàn)標(biāo)本溶血和檢驗(yàn)結(jié)果異常,首先向親情健康客服報(bào)告*,客服人員接到報(bào)告立即向親情健康醫(yī)務(wù)主任*報(bào)告,由醫(yī)務(wù)主任向合作檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)了解可能的溶血原因和對檢驗(yàn)結(jié)果的影響程度等相關(guān)問題;

二、親情健康醫(yī)務(wù)主任致電人保核保人員報(bào)告事情經(jīng)過,并從醫(yī)學(xué)臨床角度提出是否需要復(fù)檢的建議;

三、人保核保人員根據(jù)檢驗(yàn)結(jié)果對核保結(jié)論的影響程度,初步作出是否重新采血的決定,將意見向慕再和總公司匯報(bào),聽取意見和建議,經(jīng)過合作方協(xié)商研究,最后做出是否復(fù)檢和復(fù)檢項(xiàng)目的決定,如需重新采血,致電告知明亞保險(xiǎn)經(jīng)濟(jì)公司客服*;

四、由明亞保險(xiǎn)經(jīng)濟(jì)公司客服人員通知當(dāng)?shù)貥I(yè)務(wù)經(jīng)理,轉(zhuǎn)告客戶并解釋重新采血的原因,征得客戶的同意;

五、人保壽險(xiǎn)核保人員收到明亞保險(xiǎn)經(jīng)濟(jì)公司業(yè)務(wù)經(jīng)理客戶同意復(fù)檢的反饋,郵件告知親情健康客服人員,確定客戶復(fù)檢預(yù)約方式,由客戶再次與親情健康預(yù)約復(fù)檢,或由親情健康致電客戶或業(yè)務(wù)員,客戶需了解原因時(shí)解釋核保要求重新采血的理由和決定,并約定重新采血的時(shí)間。

六、親情健康協(xié)調(diào)醫(yī)核員對客戶進(jìn)行重新采血送檢,并將化驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)錄入慕再核保系統(tǒng)。原件快遞人保。

七、上門體檢的醫(yī)核人員在未明確標(biāo)本溶血原因的情況下,不得擅自向任何人員解釋。

八、標(biāo)本溶血原因以外的其它任何標(biāo)本問題,也按上述流程處理。

注:

1、親情健康客服電話:4006509679

2、明亞保險(xiǎn)經(jīng)濟(jì)公司客服電話:4008110606

2011-5-31

第二篇:標(biāo)本溶血原因分析

標(biāo)本溶血原因分析及對策

我院于2004年3~7月份臨床科室對采血的血樣標(biāo)本的溶血情況進(jìn)行了分析,對溶血產(chǎn)生的原因提出了相應(yīng)的預(yù)防措施,現(xiàn)報(bào)告如下。1 臨床資料

我院自2004年3~7月份共采集血標(biāo)本6420例,溶血50例,對每一份標(biāo)本溶血的原因進(jìn)行分析,分別對病人的情況、抽血所用器具、抽血操作方法及標(biāo)本的存放、送檢等各方面進(jìn)行追查。不同原因造成的標(biāo)本溶血情況,見表1。

表1 不同原因造成的標(biāo)本溶血50例情況原因 略 通過調(diào)查發(fā)現(xiàn)造成標(biāo)本溶血的原因主要有以下幾點(diǎn)。

2.1 操作不當(dāng) 在發(fā)生溶血的50例標(biāo)本中,大部分與抽血困難有關(guān)。其低血容量25例,新生兒10例。(1)給這些病人采集血樣標(biāo)本時(shí),操作者多將止血帶扎的時(shí)間過長、過緊,再加上用力拍打穿刺部位。(2)將空針一次抽到510ml處,等待血液靠負(fù)壓進(jìn)入注射器中。(3)由于針頭固定不好,使針頭斜面貼于血管壁上,造成血液中混有大量的泡沫。(4)操作者沒有按操作規(guī)程執(zhí)行,將血沿血管壁緩慢注入,而是注入速度太快。造成泡沫與血液一同注入試管,從而造成溶血。(5)操作者過于用力晃動標(biāo)本瓶,造成溶血。

2.2 標(biāo)本容器不合格 空針質(zhì)量不過關(guān),密封不好,造成溶血。

2.3 標(biāo)本凍結(jié) 將標(biāo)本置于窗臺上,沒有及時(shí)送檢,由于溫度太低造成凍結(jié)。3 對策

(1)加強(qiáng)操作者的責(zé)任心,一定按操作規(guī)程操作,將所采血沿血管壁緩慢注入,同時(shí)要輕輕搖勻。(2)盡量及時(shí)送檢,要放在遠(yuǎn)離氣低溫的地方。(3)在操作時(shí),盡量減少扎止血帶的時(shí)間,不要用力拍打所抽部位,如:血管隱藏不清。可用熱敷,讓病人休息片刻,重新選擇穿刺部位。(4)注意 加強(qiáng)醫(yī)藥管理,防止劣質(zhì)空針的采用。

第三篇:標(biāo)本處理

[QUOTE=錦瑟]

病 人 的 準(zhǔn) 備

有很多檢驗(yàn)項(xiàng)目,如果病人準(zhǔn)備不當(dāng),分析結(jié)果則無價(jià)值,甚至于造成臨床上的混亂。醫(yī)生、護(hù)士和檢驗(yàn)人員有責(zé)任將該項(xiàng)檢驗(yàn)病人準(zhǔn)備 的要點(diǎn),用有效的方法告知病人,囑病人遵照執(zhí)行。

(一)生理因素的影響:

1.運(yùn)動:強(qiáng)烈的肌肉運(yùn)動明顯影響體內(nèi)代謝,暫時(shí)的變化是血清非酯化脂肪酸迅速下降,繼而上升;丙酮酸、乳酸亦接著升高,后者可 高達(dá)300%(3倍)。由于呼吸急促,可使Pco2下降,而PH值升高。持續(xù)較長時(shí)間的變化,是由于肌細(xì)胞酶的釋放引起血清CK、AST、LDH、ALP的升高,CK的峰值在11小時(shí)后,可達(dá)運(yùn)動前的1倍,持續(xù)60小時(shí)后才恢復(fù)到原水平。運(yùn)動對RBC、W BC、Hb測定明顯影響,可造成假性升高。運(yùn)動對檢驗(yàn)結(jié)果的影響程度與個(gè)體平時(shí)有無體育鍛煉及有無疾病有關(guān)。

為減少運(yùn)動對檢驗(yàn)結(jié)果的影響,一般主張?jiān)谇宄砍檠≡翰∪丝稍谄鸫睬俺檠颐ζ鸫驳介T診的病人應(yīng)至少休息15分鐘后采血。

2.精神因素:緊張、情緒激動可影響神經(jīng)—內(nèi)分泌功能,致使血清非酯化脂肪酸、乳酸、血糖等升高。

3.飲食:進(jìn)食后對某些檢驗(yàn)項(xiàng)目有明顯影響,餐后對CHE、CK、GLU、TG等影響非常顯著,但對TP、Aib、ALT、AS T、ALP、r—GT、LDH、AMY、Ca2+、BuN、CRE、choI、TBiL、DbiL等指標(biāo)無明顯影響。建議最好在 早晨空腹抽血,必要時(shí)在進(jìn)食4—6小時(shí)后抽血,血脂檢查必須空腹12小時(shí)后抽血(而且檢查前三天禁食肉、蛋、奶),緊急及特殊病 人可根據(jù)需要隨時(shí)抽血。

4.體位及采血部位:體位或采血部位的改變可引起某些檢驗(yàn)項(xiàng)目指標(biāo)的顯著變化。站立(或用止血帶)時(shí)水分會從血管內(nèi)向組織間轉(zhuǎn)移,大分子物質(zhì)與大顆粒物質(zhì)(如細(xì)胞)不能濾過而有一定程度的濃縮,但不影響低分子量物質(zhì)(如GLU)。Staland(斯特蘭德)比較了不得17項(xiàng)生化指標(biāo)在立位與臥位的差別,其中有12項(xiàng)立位時(shí)高于臥位,具有顯著性差異(P〈0·05〉,這些項(xiàng)目是:K +、Ca2+、P3+、Fe2+、TP、Aib、AST、ALP、ACP、Tchol、總脂。Na、Cl、BuN、Cr、GLU 差別不明顯。國內(nèi)研究也證實(shí)了體位變化對血脂成分的明顯影響。為此建議,統(tǒng)一用坐位、不使用止血帶來采血,以減少對 某些項(xiàng)目的影響。另外,中國血液病研究所楊天楹教授就耳血和指血采血對血液細(xì)胞成分的變化進(jìn)行研究,認(rèn)為手指(以無名指)血細(xì)胞 成分與靜脈血接近,而耳垂血與靜脈血具有非常顯著差異(P〈0·01〉,差別最大可達(dá)2—3倍。建議進(jìn)行血細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)一律用手指 血。

5.時(shí)間:在一天之中,人的代謝總是波動的,其代謝率并非是一個(gè)水平。因此在一天中,不同時(shí)間對某些項(xiàng)目檢測要有明顯影響,如在 進(jìn)行RBC、WBC等計(jì)數(shù)時(shí),上午、下午波動范圍很大。因此,為了反映病人的臨床狀態(tài),建議下次復(fù)查時(shí)應(yīng)在上次檢查的同一時(shí)間進(jìn) 行。

(二)藥物的影響:

藥物進(jìn)入人體內(nèi)引起的物理和化學(xué)變化是臨床檢驗(yàn)結(jié)果錯(cuò)誤(非病理性異常值)的主要因素之一。藥物本身或它的代謝產(chǎn)物,可以對化學(xué) 測定的任何步驟產(chǎn)生干擾。干擾可以由于藥物本身物理性質(zhì),如藥物本身有顏色或能發(fā)出熒光,或由于藥物的化學(xué)性質(zhì),如有強(qiáng)還原性、與蛋白質(zhì)結(jié)合成復(fù)合物及對酶的抑制作用等。藥物也可以通過它的生理作用、藥理及毒理作用改變生化參數(shù)。這類影響有的是治療上需要 的,但有的是不需要的,即通常所說的副作用。

任何試驗(yàn)都有其固定的化學(xué)反應(yīng)原理和條件。因藥物的參與使反應(yīng)和檢測條件發(fā)生了改變,直接影響了結(jié)果的準(zhǔn)確性。例如:先鋒霉素類 藥物可使血Cr比色測定時(shí)的最大吸收峰由505nm變?yōu)?35nm而干擾Cr的測定,且藥物的量與Cr的正誤差呈正相關(guān)(藥量越 大誤差越大)。Vit—c對AST為正向干擾,對CK、LDH為負(fù)向干擾,且隨Vit—c濃度的增高干擾越大。止血敏可使血清T G顯著降低。安乃近對血清LDH、Pi、Cr呈正向干擾,對TC、TG、GLU、UA則呈負(fù)干擾。Gascon研究認(rèn)為,病人給 予安乃近2h后血液中安乃近仍然干擾測定,因此建議在應(yīng)用安乃近6h后采血測定。長期口服避孕藥的婦女,由于肝酶的誘導(dǎo)合成增加,可使轉(zhuǎn)氨酶、轉(zhuǎn)肽酶及TG升高。近年來,利用氧化酶催化過氧化氫,以Tinder生成反應(yīng)檢測體內(nèi)多種代謝物質(zhì)濃度的方法已有 多種,如GLU、TC、TG、HDL—c等。由于某些藥物有較強(qiáng)的還原性,易于反應(yīng)中過氧化氫起作用,降低紅色醌亞胺生成致使測 定結(jié)果偏低。如:

(1)葡萄糖+H2O+O2葡萄糖氧化酶葡萄糖酸+H2O2

(2)2H2O2+4-AAP+酚過氧化物酶紅色醌+H2O

這類藥物有Vit-c、Vit-B6、V-E、巰甲丙脯酸、地奧心血康、安乃近、酚酸乙胺、鹽酸氯丙嗪、復(fù)方丹參、氨茶堿、左旋 多巴等。

日本學(xué)者研究認(rèn)為,藥物投給后,在血液中的最高濃度,可由尿中濃縮100-1000倍排出體外。目前常用的尿試紙?jiān)囼?yàn),一直是限 于一定區(qū)域內(nèi)的顏色變化來定性測定為陽性或陰性,異常著色尿?qū)Υ擞忻黠@干擾。臨床治療藥物所見的著色尿,常見的藥物有:苯妥英鈉、左旋多巴、核黃素、阿霉素、正定霉素、利福平、滅滴靈等。

青霉素對磺酸法、試紙法測定尿蛋白產(chǎn)生不同干擾,對于尿蛋白陰性可引起假陽性,而對于陽性者則可引起假陰性反應(yīng)

不同濃度的Vit-c對尿糖、潛血、尿膽原等也有不同程度的干擾作用。

長期靜脈點(diǎn)滴的病人留取標(biāo)本時(shí)可使標(biāo)本稀釋,造成某些項(xiàng)目結(jié)果偏低。又因靜點(diǎn)時(shí)高濃度的藥物進(jìn)入標(biāo)本中,使許多檢驗(yàn)結(jié)果發(fā)生巨大 變化。入:K+、Na+、Cl-、Ca2+、CO2-cp、GLU等,可因靜點(diǎn)得到高出正常值1-10倍的結(jié)果。藥物還可影響某 些酶的活性,如非那西酊可引起ALP、r-GT活性升高。杜冷丁類藥物可引起唾液型淀粉酶活力上升,而致總淀粉酶活力升高。許多 藥物的副作用使肝、腎、造血功能發(fā)生改變而引起檢驗(yàn)結(jié)果異常。這種影響一旦出現(xiàn),即使停藥也不會很快使檢驗(yàn)結(jié)果恢復(fù)正常。如大量 使用慶大酶素及抗腫瘤化療藥物時(shí),常給腎臟造成損害,使尿中出現(xiàn)蛋白、管型等異常結(jié)果。有許多種藥物,如紅霉素、磺胺類、對氨基 水楊酸、性激素等50多種藥物可引起肝功能異常等。因此當(dāng)臨床醫(yī)生填寫檢驗(yàn)申請單時(shí),一定要了解病人的用藥種類和時(shí)間。用量較大,時(shí)間較短對檢驗(yàn)結(jié)果有干擾,個(gè)別藥物干擾時(shí)間還會更長。當(dāng)檢驗(yàn)結(jié)果與臨床癥狀不符時(shí),應(yīng)結(jié)合分析這種現(xiàn)象產(chǎn)生的原因及了解糾正 的辦法,特別應(yīng)了解的是藥物對哪些項(xiàng)目有影響。護(hù)士應(yīng)避免在靜點(diǎn)時(shí)和用藥4h以內(nèi)采取檢驗(yàn)標(biāo)本,必要時(shí)停藥后再查,以防藥物的干 擾作用。

[QUOTE=錦瑟] 標(biāo) 本 的 采 集

要想測得的檢驗(yàn)結(jié)果真實(shí)地反映病人的臨床狀態(tài),送檢標(biāo)本的正確與否是一個(gè)關(guān)鍵因素。如果標(biāo)本不符合要求,檢驗(yàn)儀器再先進(jìn),技術(shù)再 好,測得再準(zhǔn)確,其結(jié)果也是錯(cuò)誤的。據(jù)統(tǒng)計(jì),約有半數(shù)以上的異常結(jié)果,是由于標(biāo)本不符合要求造成的。其常見的原因有:

1.標(biāo)本采集不正確:

(1)應(yīng)當(dāng)空腹抽血但是實(shí)際上病人已經(jīng)進(jìn)食,這時(shí)候TG、CK、chE、GLU等檢驗(yàn)項(xiàng)目有明顯影響。

(2)病人輸液過程中,從同側(cè)肢體抽血,甚至從輸液管中取“血”,抽出來的有一半是輸進(jìn)的液體,嚴(yán)重影響檢驗(yàn)結(jié)果。

(3)抽血量不準(zhǔn)確,如ESR測定,按要求抗凝劑與血液比例為1:4,總量為2·0ml,但實(shí)際工作中,很多標(biāo)本不合格,不是未 加抗凝劑就是量不準(zhǔn)(最多見是血量不足),使結(jié)果波動很大。

(4)尿標(biāo)本留取不準(zhǔn)確。如留取24h尿標(biāo)本時(shí),不按要求留取,甚至估計(jì)尿量,對生化指標(biāo)定量及肌酐清除率影響較大。

(5)精液標(biāo)本應(yīng)全量收集于干燥、清潔的容器內(nèi),但經(jīng)常遇到的是收集在避孕套內(nèi),致使大量精子死亡,引起誤會等。

(6)血培養(yǎng)應(yīng)在發(fā)熱初期或發(fā)熱高峰期采血。一般要求選擇在應(yīng)用抗生素治療之前,對已用藥而不能終止的病人,也應(yīng)在下次用藥之前 采血。但實(shí)際工作中,時(shí)常遇到邊輸注抗生素邊采血的情況,造成血培養(yǎng)陽性率大大減低。

(7)尿培養(yǎng)一般主張導(dǎo)尿,但多次導(dǎo)尿易引起逆行感染,故目前常采用中段尿。但經(jīng)常遇到不按要求留取標(biāo)本,致使培養(yǎng)出多種雜菌生 長而無法報(bào)告結(jié)果。

當(dāng)然,還有其它不合要求的標(biāo)本,不一一列舉。

2.標(biāo)本溶血:

溶血是臨床生化檢驗(yàn)中最常見的一種干擾和影響因素。除了常見的紅細(xì)胞破壞外,血小板、白細(xì)胞等血細(xì)胞破 壞釋放的某種成分亦可干擾或影響生化指標(biāo)的測定。

溶血干擾的機(jī)理有三種:(1)血細(xì)胞內(nèi)高濃度物質(zhì)逸出,使血清(漿)分析物濃度增加。不難理解如果血細(xì) 胞中某一分析物濃度大大高于血清,則溶血無疑會導(dǎo)致血清中該成分濃度的增高。例如:RBC內(nèi)與血清某一成分的比值:精氨酸156 9·2/

1、LDH

139·9/

1、醛縮酶135/

1、AST38·3/

1、丙酮酸激酶205/

1、K+20/

1、Cr18/

1、葉酸16·7/1

CK15·5/

1、Zn2+10·7/

1、等。(2)Hb對分光光度法測定中吸光度的干擾。溶血能引起可見光譜的短波長段(30 0-500nm)的吸光度明顯增加,而影響測定結(jié)果。(3)某些細(xì)胞成分對化學(xué)反應(yīng)的干擾。如血清CK動力學(xué)法測定中因RBC來 源的腺苷酸激酶(AK)參與其指示反應(yīng)而使CK結(jié)果假性增高。溶血可滯血清中LDH、ACP、CK、ALT等酶隨溶血加重而升高 ;使ALP、r-GT的活性隨溶血加重而降低,但機(jī)理尚不清楚。溶血對酶以外的生化指標(biāo),除K+、BIL最受干擾外,對TP、A ib、Ca2+、Na+、Cl-、Fe2+、Pi3+、TC、TG、HDL-c、Cr、BuN、GLU、UA等無明顯影響。溶血 還可影響乙肝五項(xiàng)標(biāo)志物測定,對ELISA雙位點(diǎn)一步法易產(chǎn)生假陽性,對競爭抑制法易產(chǎn)生假陰性,但對經(jīng)典的兩步法影響不大。

標(biāo)本溶血多是由于注射器不干燥、不清潔,抽血后未拔去針頭直接注入試管內(nèi)等原因造成。由于血液內(nèi)某些化學(xué)物質(zhì)在血清(漿)與紅細(xì)胞內(nèi)分布不同,有的差別很大,因此采集 標(biāo)本時(shí)應(yīng)嚴(yán)防溶血。

三.標(biāo) 本 送 檢

有些標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢,如血NH3、CO2-cp、血?dú)夥治龅龋⊙髴?yīng)該在30分鐘呢測定。目前最大的問題是GLU,取血 后室溫放置,由于糖酵解作用,每小時(shí)可降低6-11%,CK、BIL、URO、OB均可因分解或失活而明顯降低,而血清中的K+、Cl-、Pi3+、AcP、NH3、NiT等均可因細(xì)胞內(nèi)外的轉(zhuǎn)移代謝顯著增高。有時(shí)對不同的測定方法干擾方向可能相反,如T G抽提法隨放置時(shí)間結(jié)果 偏低,而酶法則增高,前者因TG分解所致,后者是由于磷酸分解產(chǎn)生甘油所致。

四.標(biāo) 本 處 理

許多檢驗(yàn)項(xiàng)目在正式分析前需進(jìn)行預(yù)處理。及時(shí)而適當(dāng)?shù)臉?biāo)本處理是每一個(gè)檢驗(yàn)者必須熟知和遵循的,如血GLU測定需要及時(shí)分離血清,防止細(xì)胞作用使塘發(fā)生酵解;電解質(zhì)測定亦需要及時(shí)分離血清,尤其是K+,防止K+從細(xì)胞內(nèi)向細(xì)胞外轉(zhuǎn)移;血氨、血?dú)夥治鰬?yīng)及時(shí) 操作,即使是及時(shí)放入冰瓶中也應(yīng)盡快分析。做CO2-cp時(shí),抽血后應(yīng)盡量避免與空氣接觸過久,防止血液中的二氧化碳向空氣中逸 散,以保證結(jié)果的可靠性。血性胸腹水、腦脊液等在測定蛋白質(zhì)等生化項(xiàng)目前,必須先行離心,細(xì)菌培養(yǎng)需根據(jù)不同要求和目的,選擇合 適的培養(yǎng)基及時(shí)接種,防止細(xì)菌污染,提高細(xì)菌檢出率(特別是厭氧菌)和準(zhǔn)確率。

抗凝劑的選擇是檢驗(yàn)質(zhì)量保證的重要環(huán)節(jié)。有資料表明,血清與血漿多個(gè)指標(biāo)的測定存在差異,甚至得到與實(shí)際相反的結(jié)果。凡需全血或 血漿檢驗(yàn)的項(xiàng)目標(biāo)本,要選擇合適的抗凝劑,如草酸鉀能抑制LDH、AcP、和AMY的活性,亦不能用于Ca2+、K的測定;ED TA不能用于Ca2+、Na+和含氮物質(zhì)的測定;肝素除了對個(gè)別項(xiàng)目如K+、LDH、r-GT、AMS有影響外,對其它項(xiàng)目影響 不大。[/QUOTE]

第四篇:溶血標(biāo)本血鉀的測定(范文)

利用溶血程度指數(shù)法校正溶血標(biāo)本血清鉀離子測定研究

錢高潮

黃旭東

丁志祥

金文濤

張琪

常州市中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科 常州

213003 摘要

目的對于一些不宜重新抽取血液的溶血標(biāo)本,通過全自動生化分析儀中血清信息功能溶血程度H與血鉀的相關(guān)性,探索一種簡單方便的校正公式檢測溶血標(biāo)本中血鉀濃度,供臨床參考。方法

分析溶血程度H與血鉀的相關(guān)性并建立回歸方程,研究不同人群中H=50時(shí)血鉀濃度是否存在差異并通過外加溶血標(biāo)準(zhǔn)液和制備溶血標(biāo)本兩種方法進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果 H與[K+]成正相關(guān)(r=0.9996),回歸方程y=0.1068H+0.2789,當(dāng)H在1~200(Hb約為95g/L)之間成線性;經(jīng)單因素方差檢驗(yàn),新生兒、成年男性和成年女性之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;兩種方法驗(yàn)證均表明計(jì)算得到的K+與實(shí)際檢測值之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,理論值平均相對誤差3.0%,最大相對誤差7.0%。結(jié)論 通過全自動生化分析儀中血清信息功能溶血程度H和公式K未=K

溶-0.1068H-0.2789能比較準(zhǔn)確的測算出溶血標(biāo)本中真實(shí)血鉀濃度,這個(gè)公式不受患者年齡、性別的影響。關(guān)鍵詞

溶血; 溶血程度H;血鉀

鑒于人紅細(xì)胞脆性較大,多種原因可使標(biāo)本發(fā)生不同程度的溶血,直接影響測定結(jié)果的準(zhǔn)確性[1-5]。溶血會對許多檢驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響,尤其在血鉀檢測中影響非常明顯,因?yàn)槿梭w體液中98%的鉀分布于細(xì)胞內(nèi)液,細(xì)胞外液只占2%,鉀在組織細(xì)胞內(nèi)的平均濃度為150mmol/L,紅細(xì)胞內(nèi)鉀濃度為105mmol/L,血清中鉀濃度僅為3.5~5.5mmol/L,紅細(xì)胞內(nèi)鉀濃度約為血清鉀濃度的20倍,溶血后紅細(xì)胞中的鉀會釋放到血清中,引起血鉀濃度的升高,因此標(biāo)本溶血是血鉀誤差的主要原因之一[6-8]。溶血標(biāo)本為一類不合格標(biāo)本,對于因采集、運(yùn)輸、保存不當(dāng)?shù)仍蛟斐扇苎仨毑檎以颍苊饣蚪瞪偃苎陌l(fā)生,而對于容易溶血的標(biāo)本(如兒科標(biāo)本)、有紅細(xì)胞結(jié)構(gòu)異常的標(biāo)本,血鉀的檢驗(yàn)結(jié)果很難保證。解決該問題的關(guān)鍵在于檢驗(yàn)與臨床的密切溝通。但有時(shí)臨床有不方便立即復(fù)查的情況,以及其他因素不宜重新抽取血液標(biāo)本時(shí),如果能探索出一個(gè)根據(jù)標(biāo)本異常情況程度對檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行校正的方法,給臨床一個(gè)比較準(zhǔn)確的報(bào)告,對臨床將非常有意義。溶血后標(biāo)本血鉀的增高主要是由于紅細(xì)胞被破壞而造成紅細(xì)胞內(nèi)的血鉀釋放所致。血清中血紅蛋白的含量能直接反映出標(biāo)本的溶血程度。如能通過檢測血清中血紅蛋白的含量,計(jì)算出因溶血造成血鉀增高的部分,檢測的血鉀減去因溶血增高的血鉀就能消除溶血對血鉀的影響。現(xiàn)在配有血清信息功能的生化分析儀(如日立、羅氏、島津系列生化分析儀)均可通過血清信息中溶血程度(Hemolytic 簡寫:H)指數(shù)法直接測定Hb, 試劑單一穩(wěn)定, 自動簡便[9]。鑒于上述思路,我們對溶血標(biāo)本血鉀的測定進(jìn)行了研究,以期找到一種比較方便的檢測方法。

材料與方法

1.1 標(biāo)本來源 江蘇省常州市中醫(yī)醫(yī)院2010年6月至2010年12月住院新生兒40例(1~20天)、成年男性40例(20~68歲)、成年女性40例(21~73歲)。

1.2 試劑與主要儀器:自配Tris-HCl緩沖液(pH7.4);6.0mmol/LKCl標(biāo)準(zhǔn)液;膽紅素標(biāo)準(zhǔn)液(上海生物制品研究所提供);日立7600全自動生化分析儀;-70℃冰箱(SANYO)

1.3 溶血程度H及血鉀的測定

按日立7600全自動生化分析儀操作說明書要求設(shè)定血清信息使用項(xiàng)目樣品吸量為10μl, Tris-HCl緩沖液吸量為190μl, 采用速率法, 反應(yīng)時(shí)間10分鐘。設(shè)定血清信息參數(shù)C=1,B=121000;血鉀的測定選用離子選擇電極間接法。

1.4 溶血程度H與血鉀相關(guān)性

取抗凝血,離心去除血漿,用生理鹽水洗滌紅細(xì)胞3次,以壓積紅細(xì)胞的容積為準(zhǔn),加入等體積的生理鹽水,-70℃凍存1小時(shí),立即放入37℃水箱5分鐘,反復(fù)凍溶2次,3000轉(zhuǎn)離心5分鐘,分離出Hb溶液,并用生理鹽水調(diào)節(jié)至H=200的標(biāo)準(zhǔn)液, 然后用生理鹽水稀釋成H為150,100,75,50,45,40,35,30,25,20,15,10,8,6,5,4,3,2,1共20種濃度Hb溶液,檢測血鉀濃度(當(dāng)H<20時(shí),用6.0mmol/L KCL標(biāo)準(zhǔn)液替代生理鹽水進(jìn)行稀釋,血鉀濃度通過計(jì)算得到)。

1.5 不同人群紅細(xì)胞溶血H=50時(shí)血鉀的測定

選取我院2010年6月至2010年12月住院新生兒40例、成年男性40例、成年女性40例標(biāo)本,制備Hb方法同上,將H調(diào)整為50,檢測各標(biāo)本血鉀濃度。

1.6 驗(yàn)證試驗(yàn)1 選取上述120例標(biāo)本(新生兒40例、成年男性40例、成年女性40例標(biāo)本)進(jìn)行血清鉀濃度檢測,制備H=200的Hb標(biāo)準(zhǔn)液,向上述血清中加入不同比例的Hb標(biāo)準(zhǔn)液,檢測標(biāo)本溶血程度H及血鉀濃度。

1.7 驗(yàn)證試驗(yàn)2 選取上述120例標(biāo)本(新生兒40例、成年男性40例、成年女性40例標(biāo)本)進(jìn)行血鉀濃度檢測,同時(shí)吸取少量紅細(xì)胞到血清中,反復(fù)凍溶2次(方法同上),3000轉(zhuǎn)離心5分鐘,吸取上清,檢測標(biāo)本溶血程度H及血鉀濃度。

1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件包對檢測結(jié)果進(jìn)行分析。數(shù)據(jù)資料呈正態(tài)分布,以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示;多組間比較采用方差分析,組內(nèi)兩兩比較采用SNK-q檢驗(yàn),配對資料采用配對t檢驗(yàn),以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果

1.溶血程度H與血鉀相關(guān)性

以H為橫坐標(biāo),K+濃度(mmol/L)為縱坐標(biāo),經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理H與K+濃度成正相關(guān)(r=0.9996),回歸方程K+=0.1068H+0.2789,當(dāng)H在1~200(Hb約為95g/L)內(nèi)成線性,見圖1。2520K mmol/Ly = 0.1068x + 0.27892R = 0.9993***0H

圖1 溶血程度H與血鉀相關(guān)性

150200250

2.不同人群紅細(xì)胞溶血H=50時(shí)血鉀的測定

由于H和K+濃度成線性關(guān)系,故選擇H=50時(shí),檢測K+濃度,40例新生兒K+濃度6.02±0.42;40例成年男性K+濃度5.92±0.39;40例成年女性K+濃度5.84±0.34;經(jīng)單因素方差檢驗(yàn),三組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=2.306,P=0.104)。驗(yàn)證公式1 將H=200的標(biāo)準(zhǔn)Hb液按1:n的比例加入到已知K+濃度的不同血清標(biāo)本中,按公式K

理論

= [n/(n+1)]×K++0.1068H+0.2789可得到理論上K+濃度,并將理論上K+與實(shí)際檢測值之間進(jìn)行配對t檢驗(yàn),統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明理論上K+與實(shí)際檢測值基本一致(t=1.263,P=0.209),無統(tǒng)計(jì)學(xué)差別,理論值平均相對誤差3.0%,最大相對誤差7.0%。表1為1例標(biāo)本(K=4.52 mmol/L)加入不同比例H=200的標(biāo)準(zhǔn)Hb液后理論K和實(shí)際K的比較,其他標(biāo)本結(jié)果類似。表2為20例不同樣本加入1/9體積H=200的標(biāo)準(zhǔn)Hb液后理論K與實(shí)際K的比較,其余標(biāo)本均得到類似結(jié)果。

表1 H=200的標(biāo)準(zhǔn)Hb液不同稀釋度時(shí)理論K與實(shí)際K濃度的比較

n 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 H 98 65 49 38 32 28 26 24 20 19 17 15 14 13 12 12 11 11 10 10 理論K 13.01 10.23 8.90 7.95 7.46 7.14 7.01 6.86 6.48 6.42 6.24 6.05 5.97 5.89 5.80 5.81 5.72 5.74 5.64 5.65 實(shí)際K 13.32 10.25 9.21 8.05 7.16 7.21 7.15 6.9 6.58 6.34 6.15 5.98 5.87 5.55 5.65 5.81 5.64 5.59 5.42 5.35 相對誤差% 2.36 0.15 3.34 1.20-4.23 0.92 1.95 0.58 1.48-1.22-1.43-1.22-1.72-6.05-2.62-0.08-1.46-2.61-4.08-5.64 注:將H=200的標(biāo)準(zhǔn)Hb液按1:n的比例加入已知K+濃度為4.52mmol/L的血清標(biāo)本中,理論K+= [n/(n+1)]×K++0.1068H+0.2789

表2 不同血清樣本中加入標(biāo)準(zhǔn)Hb液后理論K與實(shí)際K濃度的比較 n 標(biāo)本原始濃度

理論K

實(shí)際K

相對誤差% 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 3.45 5.26 4.35 4.65 5.68 4.12 3.89 3.58 3.69 4.23 4.96 4.12 3.67 3.48 3.76 4.35 4.78 4.62 3.95 4.05 5.26 6.88 6.07 6.34 7.26 5.86 5.65 5.37 5.47 5.96 6.61 5.86 5.45 5.28 5.53 6.07 6.45 6.31 5.71 5.80 5.04 6.78 6.21 6.43 7.45 5.76 5.43 5.68 5.52 6.25 6.48 6.28 5.29 5.19 5.65 5.81 6.58 6.12 5.89 5.85-4.27-1.53 2.33 1.48 2.52-1.70-4.07 5.42 0.89 4.69-2.07 6.72-3.08-1.77 2.05-4.39 1.95-3.07 3.14 0.94 注:將H=200的標(biāo)準(zhǔn)Hb液按1:9的比例加入已知K+濃度的20個(gè)血清標(biāo)本中,理論K= 0.9×K+ +0.1068H+0.2789 驗(yàn)證公式2

溶血標(biāo)本中標(biāo)本原來的血清K+濃度應(yīng)該為實(shí)際測得的K+濃度減去因溶血造成K+濃度升高部分即K

=K

溶-0.1068H-0.2789,并將計(jì)算得到的校正后血清K+濃度與實(shí)際檢測值之間進(jìn)行配對t檢驗(yàn),統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明溶血標(biāo)本校正后K+濃度與未溶血標(biāo)本實(shí)際測得K+濃度基本一致,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=0.165,P=0.869),校正值平均相對誤差2.9%,最大相對誤差6.9%。

6.56.05.5校正后血清K濃度5.04.54.03.53.03.03.54.04.55.0實(shí)際血清K濃度5.56.06.5

圖2 校正后血清K濃度與實(shí)際血清K濃度的比較

血清信息是對血清的混濁程度(Lipemi 簡寫:L)、溶血程度(Hemolytic簡寫:H)、黃疽程度Icteric 簡寫:I)的測定,并提供指數(shù)的一種功能, 利用無色透明試劑分別與膽紅素標(biāo)準(zhǔn)液, 人溶血液標(biāo)準(zhǔn), 濁度標(biāo)準(zhǔn)液按一定比例混合,用不同波長掃描吸光度。日立7600全自動生化分析儀利用這個(gè)原理當(dāng)采用血清信息功能后儀器在(λ1/λ2)480/505,570/600,660/700(nm)自動測定I、H、L。在570/600 nm處膽紅家不干擾Hb的吸收,但混濁則干擾。本法利用一個(gè)計(jì)算式來校正混濁干擾并計(jì)算H指數(shù), 計(jì)算式為:H=1/C×(△EH-B×△EL),其中的△EH,△EL分別是570/600, 660/700(nm)處測得的吸光度(ABS×104),B是吸收光譜中求出的一種補(bǔ)償系數(shù),C為H指數(shù)的輸出系數(shù),當(dāng)C=1時(shí),H指數(shù)為校正混濁后的血漿Hb吸光度。

血鉀測定對臨床疾病的診治非常重要,常涉及危重病人的處理。臨床要求快速而準(zhǔn)確地測定鉀離子濃度。由于血清中鉀濃度為3.5~5.5mmol/L,范圍較窄,許多因素均會引起血鉀的明顯誤差而誤導(dǎo)臨床醫(yī)生診治。其中標(biāo)本溶血?jiǎng)t是血鉀誤差的主要原因之一。有研究表明紅細(xì)胞內(nèi)鉀的濃度對血紅蛋白的α-螺旋和折疊構(gòu)象及功能有關(guān)鍵作用[10]。紅細(xì)胞的鉀濃度和血紅蛋白含量均較為穩(wěn)定,紅細(xì)胞內(nèi)鉀的濃度高于血漿水平近20倍[11]。標(biāo)本發(fā)生溶血時(shí),血鉀增高的誤差主要來源于紅細(xì)胞內(nèi)鉀。故溶血程度與鉀的誤差值有一定關(guān)系。首先我們以H作為溶血程度指標(biāo)探討血紅蛋白與鉀之間相關(guān)性,結(jié)果證實(shí),H與K+濃度顯著相關(guān)且成線性關(guān)系。當(dāng)H在1~200(Hb約為95g/L)內(nèi)成線性,可惜儀器給出的H靈敏度(H=1)稍低,不過從回歸方程K+=0.1068H+0.2789可以看出H靈敏度對K+濃度影響不大,在0.1mmol/L左右(H=±1),與血清中鉀濃度3.5~5.5mmol/L相比,誤差在5%之內(nèi),不會造成大的影響。另外需要說明的是由于K+濃度在小于2mmol/L時(shí)測量的值已經(jīng)不準(zhǔn)確,因此當(dāng)H<20時(shí),我們采用6.0mmol/LKCL標(biāo)準(zhǔn)液替代生理鹽水進(jìn)行稀釋,血鉀濃度通過計(jì)算得到。H與K+濃度這種線性關(guān)系是否受年齡、性別影響,特別是新生兒是否和成年人一樣。通過對新生兒、成年男性和成年女性各40例標(biāo)本進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析它們之間沒有差別。說明這個(gè)線性公式適合不同的人群。限于貧血種類較多,收集標(biāo)本數(shù)目有限,對于貧血病人未作專門討論,通過對失血性貧血和缺鐵性貧血標(biāo)本的初步研究H與[K+]的相關(guān)性與正常人相比沒有差別,但仍有必要收集更多標(biāo)本和更多種類貧血作進(jìn)一步研究。通過外加溶血標(biāo)準(zhǔn)Hb液和制備溶血標(biāo)本的方法進(jìn)行驗(yàn)證通過公式計(jì)算得到的[K+]與實(shí)際測得的值之間沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差別,說明完全可以通過公式計(jì)算來校正溶血標(biāo)本中[K+]。通過對大量的生化標(biāo)本(真空采血管正常采集)進(jìn)行檢測發(fā)現(xiàn)H均為0,因此公式K未=K溶-0.1068H-0.2789中H無需糾正。Vincenzo Brescia等[12]近來發(fā)表了一篇有關(guān)溶血標(biāo)本血鉀檢測糾正方法的報(bào)道,但其報(bào)道的方法需先檢測并計(jì)算出血漿游離血紅蛋白(fsHb)濃度,然后通過公式才能校正血鉀濃度,步驟復(fù)雜,不易推廣[12]。本文所采用的H測定法,只需在全自動生化分析儀上同時(shí)直接測定溶血標(biāo)本的[K+]和H值,便可直接在公式K未=K溶-0.1068H-0.2789下計(jì)算,無需制備標(biāo)準(zhǔn)液和其它顯色劑,價(jià)廉、快速、操作簡便,且具有較好的重復(fù)性和線性范圍,對溶血程度的判定尤為適宜。

綜上所述,如果臨床檢測血鉀的標(biāo)本為溶血標(biāo)本,當(dāng)球形紅細(xì)胞增多癥等易溶因素、凝血機(jī)能障礙以及其他因素不宜重新抽取血液標(biāo)本時(shí),使用公式K未=K溶-0.1068H-0.2789校正,能提供與實(shí)際值較為接近的測定結(jié)果,可作為一種補(bǔ)救措施。因此,在不便重采標(biāo)本補(bǔ)測時(shí),數(shù)學(xué)校正成為提供臨床參考的有效方法。參考文獻(xiàn)

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Objective

to explore a simple correction formula for detection of actual plasma potassium concentration in hemolysis specimen by the hemolytic(H)in automatic analyzer Methods

Studying on the relationship of hemolytic and plasma potassium and establishing an regression equation to analyze potassium concentration in different people when H=50 and be confirmed by two models.Results

H and [K+] concentration was significantly correlated(r = 0.9996)and the regression equation y = 0.1068H +0.2789, in which H from 1 to 200(Hb of about 95g / L)in a linear, and sensitivity to H=1;There was no significant difference in potassium concentration when H=50 among newborns、male and female patients by one-way ANOVA test;It showed that the calculated value of [K+] and the actual value of [K+] was no significant difference, in which the theoretical value of the average relative error was 3.0% and the maximum relative error was 7.0%.Conclusion

Using the formula to correct the test value of plasma potassium can rapidly get actual plasma potassium concentration in hemolytic specimens from different ages and gender.【Key words】

hemolysis;Hemolytic;plasma potassium;

第五篇:處理病理標(biāo)本

怎樣處理病理標(biāo)本

制作時(shí)將部分有病變的組織或臟器經(jīng)過各種化學(xué)品和埋藏法的處理,使之固定硬化,在切片機(jī)上切成薄片,粘附在玻片上,染以各種顏色,供在顯微鏡下檢查,以觀察病理變化,作出病理診斷,為臨床診斷和治療提供幫助。

1.取材組織取材的方法是制作切片的一個(gè)重要程序,根據(jù)教學(xué)、科研及外檢的具體要求取自人體(外科手術(shù)切除標(biāo)本、活檢標(biāo)本、尸檢標(biāo)本)或動物,并確定取材的部位和方法。取材者需要掌握解剖學(xué)、組織學(xué)、病理學(xué)的基本理論知識,還要掌握實(shí)際操作技術(shù),每個(gè)組織器官的取材都有一定的部位和方法,不能任意切取組織作為制片材料,不然,無法達(dá)到教學(xué)、科研和臨床診斷的目的,具體要求如下:

(1)材料新鮮:取材組織愈新鮮愈好,人體組織一般在離體后,動物組織在處死后迅速固定,以保證原有的形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)。

(2)組織塊的大小:所取組織塊較理想的體積為2.0cm×2.0cm×0.3cm,以使固定液能迅速而均勻地滲入組織內(nèi)部,但根據(jù)制片材料和目的不同,組織塊的較理想體積也不同,如制作病理外檢、科研切片,其組織塊可以薄取0.1~0.2cm即可,這樣可以縮短固定脫水透明的時(shí)間,若制作教學(xué)切片厚取0.3 ~0.5cm,這樣可以同一蠟塊制作出較多的教學(xué)切片。

(3)勿擠壓組織塊: 切取組織塊用的刀剪要鋒利,切割時(shí)不可來回銼動。夾取組織時(shí)切勿過緊,以免因擠壓而使組織、細(xì)胞變形。(4)規(guī)范取材部位: 要準(zhǔn)確地按解剖部位取材,病理標(biāo)本取材按照各病變部位、性質(zhì)的不同,根據(jù)要求規(guī)范化取材。

(5)選好組織塊的切面:根據(jù)各器官的組織結(jié)構(gòu),決定其切面的走向。縱切或橫切往往是顯示組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的關(guān)鍵,如長管狀器官以橫切為好。

(6)保持材料的清潔:組織塊上如有血液、污物、粘液、食物、糞便等,可用水沖洗干凈后再放入固定液中。

(7)保持組織的原有形態(tài):新鮮組織固定后,或多或少會產(chǎn)生收縮現(xiàn)象,有時(shí)甚至完全變形。為此可將組織展平,以盡可能維持原形。2.固定

(1)小塊組織固定法:這是最常用的方法,從人體或動物體取下的小塊組織,須立即置入液態(tài)固定劑中進(jìn)行固定,通常,標(biāo)本與固定液的比例為1:4~20,但組織塊不宜過大過厚,否則固定液不能迅速滲透。故取組織塊的大小一般為2.0cm×2.0cm×0.3cm。

(2)注射、灌注固定法:某些組織塊由于體積過大或固定液極難滲入內(nèi)部,或需要對整個(gè)臟器或整個(gè)動物體進(jìn)行固定。這時(shí)宜采用注射固定或灌注固定法。將固定液注入血管,經(jīng)血管分支到達(dá)整個(gè)組織和全身,從而得到充分的固定。(3)蒸汽固定法:比較小而厚的標(biāo)本,可采用鋨酸或甲醛蒸汽固定法。如血液涂片,則應(yīng)在血片未干燥前采用鋨酸或甲醛蒸汽接觸固定。最常用的固定液有10%甲醛固定液和95%乙醇固定液。

3.脫水透明標(biāo)本經(jīng)過固定和沖洗后,組織中含有較多的水分,必須將組織塊內(nèi)的水分置換出來,這一過程叫做脫水。無論是用石蠟切片,還是用火棉膠切片,都必須除去組織中所含水分,因含水組織與石蠟、火棉膠等包埋材料不相容,常用的脫水劑為一系列不同濃度的乙醇。脫水的步驟是:80%、90%、95%、100%各種濃度乙醇2小時(shí),此過程可用脫水機(jī)自控完成。

丙酮也是一種脫水能力很強(qiáng)的脫水劑,但因其脫水能力很強(qiáng),對組織有劇烈收縮作用,在制作科研、教學(xué)切片時(shí)一般不用該試劑。因乙醇、丙酮等不溶于石蠟,還要經(jīng)過一個(gè)能溶于石蠟的溶劑替代過程稱為透明。常用的透明劑有二甲苯、三氯甲烷、水楊酸甲酯等。4.浸蠟、包埋

(1)使石蠟浸入組織中,取代組織中含有的透明劑。

(2)包埋:將浸蠟后的組織置于融化的固體石蠟中,石蠟?zāi)毯螅M織即被包在其中,稱蠟塊,此過程稱為包埋。5.切片和貼片(1)修整蠟塊:可視其組織的大小,在組織邊緣約0.1~0.2cm處,切去余蠟部分,否則易造成組織皺縮不平。

(2)準(zhǔn)備好切片用具:切片刀、毛筆、眼科鑷子(彎)、漂烘溫控儀(3)安裝蠟塊:將修好的蠟塊安裝在金屬或木制持蠟器上。

(4)安裝切片刀:將切片刀安裝在切片機(jī)的刀臺上,把刀臺上的緊固螺絲旋緊,使切片時(shí)不產(chǎn)生振動,能保持一定的切片厚度。

(5)切片的厚度:切片機(jī)的厚度調(diào)節(jié)器上刻有0~50μm或0~25μm,可任意選擇其厚度,石蠟切片的厚度一般在4~6μm。(6)切片

(7)鋪片:用眼科鑷子鑷起蠟帶輕輕平鋪在40~45℃的水面上,借水的張力和水的溫度,將略皺的蠟帶自然展平。

(8)貼片、烘片:待切片在恒溫水面上充分展平后,將蠟片撈到載玻片的中段處傾去載玻片上的余水,置入60~65℃恒溫箱內(nèi)或切片漂烘溫控儀的烘箱內(nèi)烤片15~30分鐘,脫去溶化組織間隙的石蠟。

6.染色和封片常用的染色方法是蘇木素-伊紅(Hematoxylin-Eosin)染色法,簡稱H.E染色法。這種方法對任何固定液固定的組織和應(yīng)用各種包埋法的切片均可使用。蘇木素是一種堿性染料,可使組織中的嗜堿性物質(zhì)染成藍(lán)色,如細(xì)胞核中的染色質(zhì)等;伊紅是一種酸性染料,可使組織中的嗜酸性物質(zhì)染成紅色,如多數(shù)細(xì)胞的胞質(zhì)、核仁等在H.E染色的切片中均呈紅色。

H.E染色程序如下:脫蠟、脫苯、復(fù)水、染色、脫水、透明、封固

常規(guī)蘇木素染色中的對比染色是用伊紅,近年來在英、美國家的一些實(shí)驗(yàn)室則采用焰紅(phloxine),此外也有用桔黃G(OrangeG)、比布里希猩紅(Biebrich scarlet)、波爾多紅(Bordeaux red)等作為對比染色。伊紅為染胞質(zhì)、膠原纖維、肌纖維、嗜酸性顆粒等常用的染料。

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