第一篇：實驗室標本處理

實驗室標本處理、消毒和衛生防護制度

檢驗科集中了醫院患者送檢的人體血液、體液、分泌物、排泄物等標本，這些標本大多帶有不同種類的病原體，在檢驗過程中極易引起對工作人員及環境的污染，并隨著檢驗報告單進一步傳播。而其中醫療廢棄物的排放更是污染環境的元兇。因此，在檢驗科做好標本處理、消毒和衛生防護，是控制醫院感染的一個重要環節

1環境

（1）工作場所布局合理。檢驗科各室采光及通風良好，以保證室內與室外空氣對流。根據工作場所可能受污染的程度，分為清潔區、半污染區、污染區。

（2）工作人員進入實驗室須穿工作服，必要時戴工作帽、口罩，穿隔離衣。實驗室不得存放生活用品，不得有生活垃圾。

（3）重點部門均配有紫外線燈管，定時進行空氣消毒。專職消毒監督員檢查落實情況，并予以記錄。

2做好培訓，提高認識

（1）組織全科人員參加醫院主辦的各種醫院內感染知識講座，重點學習醫院對檢驗科預防感染管理的要求，從思想上和理論上提高對消毒、防護和醫院內感染的認識。掌握消毒、防護基本知識和技能，規范醫療行為，人人重視消毒、防護的每個環節。

（2）提高自我健康保護意識，掌握工作中的防護技術。

3落實消毒隔離制度，防止交叉感染

物體表面

工作臺面實驗前、后用含氯消毒劑擦拭2次，地 面用含氯消毒液濕拖，上、下午各1次，并根據清潔區、半污染區、污染區分別使用不同標識的拖把。

工作人員的手

由于采血的需要，工作人員的手必須與患者接觸，并且所有標本都要通過檢驗師的雙手進行檢測。因此要求所有人員在采集、檢測、處理標本時戴一次性手套，操作完后按“六步法”正確洗手，并定期對工作人員的手、物體表面、空氣進行微生物監測，發現問題及時糾正。

門診靜脈采血

堅持一人一巾、一針、一管、一止血帶；微量采血，也做到一人一巾、一針、一管、一片。給每位患者采血前洗手或手消毒。采集標本時不得污染容器外部，運送過程中防止容器破碎和標本外溢，以確保環境安全。

4醫療廢棄物的正確處理

（1）使用后的一次性針頭存放在利器盒中集中處理；一次性注射器和使用后的一次性采血管應定點存放，由專職人員運送到醫療垃圾回收站集中處理。

（2）醫療垃圾存放在無滲透、無破損的黃色塑料袋中，由專職人員存放到醫療垃圾回收站集中處理。

報告單的處理

為防止病原微生物隨著檢驗報告單進一步傳播，報告單要求采用微機遠端打印，非打印報告單送出前用移動式的紫外線殺菌車進行消毒。

第二篇：標本處理

[QUOTE=錦瑟]

病 人 的 準 備

有很多檢驗項目，如果病人準備不當，分析結果則無價值，甚至于造成臨床上的混亂。醫生、護士和檢驗人員有責任將該項檢驗病人準備 的要點，用有效的方法告知病人，囑病人遵照執行。

（一）生理因素的影響：

1．運動：強烈的肌肉運動明顯影響體內代謝，暫時的變化是血清非酯化脂肪酸迅速下降，繼而上升；丙酮酸、乳酸亦接著升高，后者可 高達300%（3倍）。由于呼吸急促，可使Pco2下降，而PH值升高。持續較長時間的變化，是由于肌細胞酶的釋放引起血清CK、AST、LDH、ALP的升高，CK的峰值在11小時后，可達運動前的1倍，持續60小時后才恢復到原水平。運動對RBC、W BC、Hb測定明顯影響，可造成假性升高。運動對檢驗結果的影響程度與個體平時有無體育鍛煉及有無疾病有關。

為減少運動對檢驗結果的影響，一般主張在清晨抽血，住院病人可在起床前抽血，匆忙起床到門診的病人應至少休息15分鐘后采血。

2．精神因素：緊張、情緒激動可影響神經—內分泌功能，致使血清非酯化脂肪酸、乳酸、血糖等升高。

3．飲食：進食后對某些檢驗項目有明顯影響，餐后對CHE、CK、GLU、TG等影響非常顯著，但對TP、Aib、ALT、AS T、ALP、r—GT、LDH、AMY、Ca2+、BuN、CRE、choI、TBiL、DbiL等指標無明顯影響。建議最好在 早晨空腹抽血，必要時在進食4—6小時后抽血，血脂檢查必須空腹12小時后抽血（而且檢查前三天禁食肉、蛋、奶），緊急及特殊病 人可根據需要隨時抽血。

4．體位及采血部位：體位或采血部位的改變可引起某些檢驗項目指標的顯著變化。站立（或用止血帶）時水分會從血管內向組織間轉移，大分子物質與大顆粒物質（如細胞）不能濾過而有一定程度的濃縮，但不影響低分子量物質（如GLU）。Staland（斯特蘭德）比較了不得17項生化指標在立位與臥位的差別，其中有12項立位時高于臥位，具有顯著性差異（P〈0·05〉，這些項目是：K +、Ca2+、P3+、Fe2+、TP、Aib、AST、ALP、ACP、Tchol、總脂。Na、Cl、BuN、Cr、GLU 差別不明顯。國內研究也證實了體位變化對血脂成分的明顯影響。為此建議，統一用坐位、不使用止血帶來采血，以減少對 某些項目的影響。另外，中國血液病研究所楊天楹教授就耳血和指血采血對血液細胞成分的變化進行研究，認為手指（以無名指）血細胞 成分與靜脈血接近，而耳垂血與靜脈血具有非常顯著差異（P〈0·01〉，差別最大可達2—3倍。建議進行血細胞計數時一律用手指 血。

5．時間：在一天之中，人的代謝總是波動的，其代謝率并非是一個水平。因此在一天中，不同時間對某些項目檢測要有明顯影響，如在 進行RBC、WBC等計數時，上午、下午波動范圍很大。因此，為了反映病人的臨床狀態，建議下次復查時應在上次檢查的同一時間進 行。

（二）藥物的影響：

藥物進入人體內引起的物理和化學變化是臨床檢驗結果錯誤（非病理性異常值）的主要因素之一。藥物本身或它的代謝產物，可以對化學 測定的任何步驟產生干擾。干擾可以由于藥物本身物理性質，如藥物本身有顏色或能發出熒光，或由于藥物的化學性質，如有強還原性、與蛋白質結合成復合物及對酶的抑制作用等。藥物也可以通過它的生理作用、藥理及毒理作用改變生化參數。這類影響有的是治療上需要 的，但有的是不需要的，即通常所說的副作用。

任何試驗都有其固定的化學反應原理和條件。因藥物的參與使反應和檢測條件發生了改變，直接影響了結果的準確性。例如：先鋒霉素類 藥物可使血Cr比色測定時的最大吸收峰由505nm變為535nm而干擾Cr的測定，且藥物的量與Cr的正誤差呈正相關（藥量越 大誤差越大）。Vit—c對AST為正向干擾，對CK、LDH為負向干擾，且隨Vit—c濃度的增高干擾越大。止血敏可使血清T G顯著降低。安乃近對血清LDH、Pi、Cr呈正向干擾，對TC、TG、GLU、UA則呈負干擾。Gascon研究認為，病人給 予安乃近2h后血液中安乃近仍然干擾測定，因此建議在應用安乃近6h后采血測定。長期口服避孕藥的婦女，由于肝酶的誘導合成增加，可使轉氨酶、轉肽酶及TG升高。近年來，利用氧化酶催化過氧化氫，以Tinder生成反應檢測體內多種代謝物質濃度的方法已有 多種，如GLU、TC、TG、HDL—c等。由于某些藥物有較強的還原性，易于反應中過氧化氫起作用，降低紅色醌亞胺生成致使測 定結果偏低。如：

（1）葡萄糖+H2O+O2葡萄糖氧化酶葡萄糖酸+H2O2

（2）2H2O2+4-AAP+酚過氧化物酶紅色醌+H2O

這類藥物有Vit-c、Vit-B6、V-E、巰甲丙脯酸、地奧心血康、安乃近、酚酸乙胺、鹽酸氯丙嗪、復方丹參、氨茶堿、左旋 多巴等。

日本學者研究認為，藥物投給后，在血液中的最高濃度，可由尿中濃縮100-1000倍排出體外。目前常用的尿試紙試驗，一直是限 于一定區域內的顏色變化來定性測定為陽性或陰性，異常著色尿對此有明顯干擾。臨床治療藥物所見的著色尿，常見的藥物有：苯妥英鈉、左旋多巴、核黃素、阿霉素、正定霉素、利福平、滅滴靈等。

青霉素對磺酸法、試紙法測定尿蛋白產生不同干擾，對于尿蛋白陰性可引起假陽性，而對于陽性者則可引起假陰性反應

不同濃度的Vit-c對尿糖、潛血、尿膽原等也有不同程度的干擾作用。

長期靜脈點滴的病人留取標本時可使標本稀釋，造成某些項目結果偏低。又因靜點時高濃度的藥物進入標本中，使許多檢驗結果發生巨大 變化。入：K+、Na+、Cl-、Ca2+、CO2-cp、GLU等，可因靜點得到高出正常值1-10倍的結果。藥物還可影響某 些酶的活性，如非那西酊可引起ALP、r-GT活性升高。杜冷丁類藥物可引起唾液型淀粉酶活力上升，而致總淀粉酶活力升高。許多 藥物的副作用使肝、腎、造血功能發生改變而引起檢驗結果異常。這種影響一旦出現，即使停藥也不會很快使檢驗結果恢復正常。如大量 使用慶大酶素及抗腫瘤化療藥物時，常給腎臟造成損害，使尿中出現蛋白、管型等異常結果。有許多種藥物，如紅霉素、磺胺類、對氨基 水楊酸、性激素等50多種藥物可引起肝功能異常等。因此當臨床醫生填寫檢驗申請單時，一定要了解病人的用藥種類和時間。用量較大，時間較短對檢驗結果有干擾，個別藥物干擾時間還會更長。當檢驗結果與臨床癥狀不符時，應結合分析這種現象產生的原因及了解糾正 的辦法，特別應了解的是藥物對哪些項目有影響。護士應避免在靜點時和用藥4h以內采取檢驗標本，必要時停藥后再查，以防藥物的干 擾作用。

[QUOTE=錦瑟] 標 本 的 采 集

要想測得的檢驗結果真實地反映病人的臨床狀態，送檢標本的正確與否是一個關鍵因素。如果標本不符合要求，檢驗儀器再先進，技術再 好，測得再準確，其結果也是錯誤的。據統計，約有半數以上的異常結果，是由于標本不符合要求造成的。其常見的原因有：

1．標本采集不正確：

（1）應當空腹抽血但是實際上病人已經進食，這時候TG、CK、chE、GLU等檢驗項目有明顯影響。

（2）病人輸液過程中，從同側肢體抽血，甚至從輸液管中取“血”，抽出來的有一半是輸進的液體，嚴重影響檢驗結果。

（3）抽血量不準確，如ESR測定，按要求抗凝劑與血液比例為1：4，總量為2·0ml，但實際工作中，很多標本不合格，不是未 加抗凝劑就是量不準（最多見是血量不足），使結果波動很大。

（4）尿標本留取不準確。如留取24h尿標本時，不按要求留取，甚至估計尿量，對生化指標定量及肌酐清除率影響較大。

（5）精液標本應全量收集于干燥、清潔的容器內，但經常遇到的是收集在避孕套內，致使大量精子死亡，引起誤會等。

（6）血培養應在發熱初期或發熱高峰期采血。一般要求選擇在應用抗生素治療之前，對已用藥而不能終止的病人，也應在下次用藥之前 采血。但實際工作中，時常遇到邊輸注抗生素邊采血的情況，造成血培養陽性率大大減低。

（7）尿培養一般主張導尿，但多次導尿易引起逆行感染，故目前常采用中段尿。但經常遇到不按要求留取標本，致使培養出多種雜菌生 長而無法報告結果。

當然，還有其它不合要求的標本，不一一列舉。

2．標本溶血：

溶血是臨床生化檢驗中最常見的一種干擾和影響因素。除了常見的紅細胞破壞外，血小板、白細胞等血細胞破 壞釋放的某種成分亦可干擾或影響生化指標的測定。

溶血干擾的機理有三種：（1）血細胞內高濃度物質逸出，使血清（漿）分析物濃度增加。不難理解如果血細 胞中某一分析物濃度大大高于血清，則溶血無疑會導致血清中該成分濃度的增高。例如：RBC內與血清某一成分的比值：精氨酸156 9·2/

1、LDH

139·9/

1、醛縮酶135/

1、AST38·3/

1、丙酮酸激酶205/

1、K+20/

1、Cr18/

1、葉酸16·7/1

CK15·5/

1、Zn2+10·7/

1、等。（2）Hb對分光光度法測定中吸光度的干擾。溶血能引起可見光譜的短波長段（30 0-500nm）的吸光度明顯增加，而影響測定結果。（3）某些細胞成分對化學反應的干擾。如血清CK動力學法測定中因RBC來 源的腺苷酸激酶（AK）參與其指示反應而使CK結果假性增高。溶血可滯血清中LDH、ACP、CK、ALT等酶隨溶血加重而升高 ；使ALP、r-GT的活性隨溶血加重而降低，但機理尚不清楚。溶血對酶以外的生化指標，除K+、BIL最受干擾外，對TP、A ib、Ca2+、Na+、Cl-、Fe2+、Pi3+、TC、TG、HDL-c、Cr、BuN、GLU、UA等無明顯影響。溶血 還可影響乙肝五項標志物測定，對ELISA雙位點一步法易產生假陽性，對競爭抑制法易產生假陰性，但對經典的兩步法影響不大。

標本溶血多是由于注射器不干燥、不清潔，抽血后未拔去針頭直接注入試管內等原因造成。由于血液內某些化學物質在血清（漿）與紅細胞內分布不同，有的差別很大，因此采集 標本時應嚴防溶血。

三．標 本 送 檢

有些標本采集后應立即送檢，如血NH3、CO2-cp、血氣分析等，取血后應該在30分鐘呢測定。目前最大的問題是GLU，取血 后室溫放置，由于糖酵解作用，每小時可降低6-11%，CK、BIL、URO、OB均可因分解或失活而明顯降低，而血清中的K+、Cl-、Pi3+、AcP、NH3、NiT等均可因細胞內外的轉移代謝顯著增高。有時對不同的測定方法干擾方向可能相反，如T G抽提法隨放置時間結果 偏低，而酶法則增高，前者因TG分解所致，后者是由于磷酸分解產生甘油所致。

四．標 本 處 理

許多檢驗項目在正式分析前需進行預處理。及時而適當的標本處理是每一個檢驗者必須熟知和遵循的，如血GLU測定需要及時分離血清，防止細胞作用使塘發生酵解；電解質測定亦需要及時分離血清，尤其是K+，防止K+從細胞內向細胞外轉移；血氨、血氣分析應及時 操作，即使是及時放入冰瓶中也應盡快分析。做CO2-cp時，抽血后應盡量避免與空氣接觸過久，防止血液中的二氧化碳向空氣中逸 散，以保證結果的可靠性。血性胸腹水、腦脊液等在測定蛋白質等生化項目前，必須先行離心，細菌培養需根據不同要求和目的，選擇合 適的培養基及時接種，防止細菌污染，提高細菌檢出率（特別是厭氧菌）和準確率。

抗凝劑的選擇是檢驗質量保證的重要環節。有資料表明，血清與血漿多個指標的測定存在差異，甚至得到與實際相反的結果。凡需全血或 血漿檢驗的項目標本，要選擇合適的抗凝劑，如草酸鉀能抑制LDH、AcP、和AMY的活性，亦不能用于Ca2+、K的測定；ED TA不能用于Ca2+、Na+和含氮物質的測定；肝素除了對個別項目如K+、LDH、r-GT、AMS有影響外，對其它項目影響 不大。[/QUOTE]

第三篇：實驗室標本接收

實驗室標本接收、登記、保存與使用制度

為了確保以病人為中心,以質量為核心,根據檢驗科工作性質，現對標本管制做如下規定:

1、樣品接收程序 1.1、接收程序：

1.1.1正常白班標本 每天7.30由護士工作人員接收服務中心送檢病房的樣本。通過lis系統逐個掃描標本信息納入微機程序保存。納入結束后將其名單打印一份交給送檢人員雙簽備存。并按檢驗項目直接擺放在各室的標本框內。

1.1.2急診白班標本 送檢人員直接將急診標本送采血室，并且親自在登記簿上填寫標本信息，然后由采血室人員送到各室檢測。1.2、驗證 ：進入各實驗室的樣本在進行操作前,工作人員應再次認真查對姓名,聯號,住院號,病區床號,項目等對不符合要求者應作記錄,并及時通知采樣科室,正確及時地補采樣,以免延誤病人的檢測結果報告,對書寫不清楚的申請單, 當事者要及時與病房聯系(可電話),明確受檢 者姓名,住院號,性別,年齡,病區, 床號和檢驗項目等。

1.3、轉送 ：在查對過程中一旦發現有其他實驗室(包括病理科)或本科各實驗室的樣本,要提高責任性,及時地轉送(可電話通知)有關實驗室(尤其是爭論急診項目)切勿延擱樣本,延誤檢測,影響檢驗結果和報告時間,對人為造成的樣本遺失, 漏檢 和由之延誤檢測違反承諾限時報告引起病人糾紛和投訴, 將追究當事者和當事實驗室責任。急診標本及各病房零散標本：由采血室人員登記并轉送相關實驗室 1.4、外單位送檢 ：外單位送檢的樣本,一律登記后,再轉交各實驗室檢測, 報告結果由檢測者傳真發出或由服務臺人員轉發。

1.5、標本放置 ：接收后的樣本須統一放置在固定部位并有明顯標志的樣本盒中, 以便其他實驗室的同志來拿取各實驗室對如何轉送和取樣本應有明確的規定,包括定時定點,由檢測實驗室同志詢查收集, 對超時樣本要求(急診樣本除外),必要時通知和催促有關實驗室的同志來拿取, 并作記錄。

1.6、多張檢驗單標本 ：凡有兩張以上的檢驗申請單(包括其他實驗室或外送兄弟醫院實驗室作檢測以及本科不同實驗室檢測的項目)原則上要分裝各管, 隨檢驗申請單一起分別放置各樣本盒 ,對采樣困難者要主動跟蹤樣本,并作詳細記錄以免漏檢,分清責任。

1.7、特殊標本處理 ：對暫不檢測的項目和超規定時間的樣本,要隨時登記和交班,以免漏檢, 遺失和延誤檢驗,對沒有登記實驗室和當事者,一旦發現有此樣本的差錯發生,一律追究責任。對特殊樣本或特殊病人的樣本,實行“首接”負責制, 所謂特殊樣本是指難于采集的樣本,以及特殊病人的樣本一律實行“首接”負責制,無論那位工作人員(包括進修生和實習生,違者根據實際情況分別追查當事者或帶教老師責任)一旦收到樣本后,均須負其責任,不得以任何借口推托, 及時和正確保管和轉送樣本到有關實驗室或有關人員,同時作交班記錄和雙簽名。

2、樣品使用

2.1.將當天送來的標本，根據編號的基本原則，給當天的標本編好號，每個樣本的每個檢測項目對應一個唯一的編號。2.2.每張單和對應的樣品管上條碼號標記相同。2.3.在lis上每個樣本的記錄都包括以下信息：接收時間、醫院、科室、醫生、病人信息、實驗結果（當天實驗后填上）、發報告時間、樣本采集時間等。

2.4.微生物樣本將編號完畢的標本，分別接種于血平板，營養平板，麥康凱平板、沙保弱氏平板，35度18－24小時孵育后，按衛生部操作規程進行系統鑒定。并將結果作好記錄，再一一把實驗結果填入相應化驗單。

3、樣品保管

血液樣本每天使用后不能立即處理，要留至該樣品報告結果以后，按編號擺放樣本儲存盒內，放入樣本儲存冰箱冷藏2-8℃7天后處理銷毀。尿液、痰液、腦脊液、胸腹水、糞便在結果報出后當天銷毀。

4、樣品處理及銷毀

將各實驗室所有廢棄物消毒后裝入垃圾袋，封口，在垃圾筐上套好新的垃圾袋，將垃圾帶出實驗室交給醫院集中進行無害化處理。

5、樣品運送要求

對于各病房及門診需要送檢的標本要嚴格按照無菌、安全、及時的原則由陪檢人員運送至實驗室。標本應置于被承認的、本質安全、防漏的容器中運輸。

第四篇：處理病理標本

怎樣處理病理標本

制作時將部分有病變的組織或臟器經過各種化學品和埋藏法的處理，使之固定硬化，在切片機上切成薄片，粘附在玻片上，染以各種顏色，供在顯微鏡下檢查，以觀察病理變化，作出病理診斷，為臨床診斷和治療提供幫助。

1．取材組織取材的方法是制作切片的一個重要程序，根據教學、科研及外檢的具體要求取自人體（外科手術切除標本、活檢標本、尸檢標本）或動物，并確定取材的部位和方法。取材者需要掌握解剖學、組織學、病理學的基本理論知識，還要掌握實際操作技術，每個組織器官的取材都有一定的部位和方法，不能任意切取組織作為制片材料，不然，無法達到教學、科研和臨床診斷的目的，具體要求如下：

(1)材料新鮮：取材組織愈新鮮愈好，人體組織一般在離體后，動物組織在處死后迅速固定，以保證原有的形態學結構。

(2)組織塊的大?。核〗M織塊較理想的體積為2.0cm×2.0cm×0.3cm，以使固定液能迅速而均勻地滲入組織內部，但根據制片材料和目的不同，組織塊的較理想體積也不同，如制作病理外檢、科研切片，其組織塊可以薄取0.1～0.2cm即可，這樣可以縮短固定脫水透明的時間，若制作教學切片厚取0.3 ～0.5cm，這樣可以同一蠟塊制作出較多的教學切片。

(3)勿擠壓組織塊: 切取組織塊用的刀剪要鋒利，切割時不可來回銼動。夾取組織時切勿過緊，以免因擠壓而使組織、細胞變形。(4)規范取材部位: 要準確地按解剖部位取材，病理標本取材按照各病變部位、性質的不同，根據要求規范化取材。

(5)選好組織塊的切面:根據各器官的組織結構，決定其切面的走向?？v切或橫切往往是顯示組織形態結構的關鍵，如長管狀器官以橫切為好。

(6)保持材料的清潔:組織塊上如有血液、污物、粘液、食物、糞便等，可用水沖洗干凈后再放入固定液中。

(7)保持組織的原有形態:新鮮組織固定后，或多或少會產生收縮現象，有時甚至完全變形。為此可將組織展平，以盡可能維持原形。2．固定

(1)小塊組織固定法：這是最常用的方法，從人體或動物體取下的小塊組織，須立即置入液態固定劑中進行固定，通常，標本與固定液的比例為1:4～20，但組織塊不宜過大過厚，否則固定液不能迅速滲透。故取組織塊的大小一般為2.0cm×2.0cm×0.3cm。

(2)注射、灌注固定法：某些組織塊由于體積過大或固定液極難滲入內部，或需要對整個臟器或整個動物體進行固定。這時宜采用注射固定或灌注固定法。將固定液注入血管，經血管分支到達整個組織和全身，從而得到充分的固定。(3)蒸汽固定法：比較小而厚的標本，可采用鋨酸或甲醛蒸汽固定法。如血液涂片，則應在血片未干燥前采用鋨酸或甲醛蒸汽接觸固定。最常用的固定液有10%甲醛固定液和95%乙醇固定液。

3．脫水透明標本經過固定和沖洗后，組織中含有較多的水分，必須將組織塊內的水分置換出來，這一過程叫做脫水。無論是用石蠟切片，還是用火棉膠切片，都必須除去組織中所含水分，因含水組織與石蠟、火棉膠等包埋材料不相容，常用的脫水劑為一系列不同濃度的乙醇。脫水的步驟是：80%、90%、95%、100%各種濃度乙醇2小時，此過程可用脫水機自控完成。

丙酮也是一種脫水能力很強的脫水劑，但因其脫水能力很強，對組織有劇烈收縮作用，在制作科研、教學切片時一般不用該試劑。因乙醇、丙酮等不溶于石蠟，還要經過一個能溶于石蠟的溶劑替代過程稱為透明。常用的透明劑有二甲苯、三氯甲烷、水楊酸甲酯等。4．浸蠟、包埋

(1)使石蠟浸入組織中，取代組織中含有的透明劑。

(2)包埋：將浸蠟后的組織置于融化的固體石蠟中，石蠟凝固后，組織即被包在其中，稱蠟塊，此過程稱為包埋。5．切片和貼片(1)修整蠟塊：可視其組織的大小，在組織邊緣約0.1～0.2cm處，切去余蠟部分，否則易造成組織皺縮不平。

(2)準備好切片用具：切片刀、毛筆、眼科鑷子（彎）、漂烘溫控儀(3)安裝蠟塊：將修好的蠟塊安裝在金屬或木制持蠟器上。

(4)安裝切片刀：將切片刀安裝在切片機的刀臺上，把刀臺上的緊固螺絲旋緊，使切片時不產生振動，能保持一定的切片厚度。

(5)切片的厚度：切片機的厚度調節器上刻有0～50μm或0～25μm，可任意選擇其厚度，石蠟切片的厚度一般在4～6μm。(6)切片

(7)鋪片：用眼科鑷子鑷起蠟帶輕輕平鋪在40～45℃的水面上，借水的張力和水的溫度，將略皺的蠟帶自然展平。

(8)貼片、烘片：待切片在恒溫水面上充分展平后，將蠟片撈到載玻片的中段處傾去載玻片上的余水，置入60～65℃恒溫箱內或切片漂烘溫控儀的烘箱內烤片15～30分鐘，脫去溶化組織間隙的石蠟。

6．染色和封片常用的染色方法是蘇木素-伊紅（Hematoxylin-Eosin）染色法，簡稱H.E染色法。這種方法對任何固定液固定的組織和應用各種包埋法的切片均可使用。蘇木素是一種堿性染料,可使組織中的嗜堿性物質染成藍色，如細胞核中的染色質等；伊紅是一種酸性染料，可使組織中的嗜酸性物質染成紅色，如多數細胞的胞質、核仁等在H.E染色的切片中均呈紅色。

H.E染色程序如下:脫蠟、脫苯、復水、染色、脫水、透明、封固

常規蘇木素染色中的對比染色是用伊紅,近年來在英、美國家的一些實驗室則采用焰紅（phloxine）,此外也有用桔黃G（OrangeG）、比布里希猩紅(Biebrich scarlet)、波爾多紅(Bordeaux red)等作為對比染色。伊紅為染胞質、膠原纖維、肌纖維、嗜酸性顆粒等常用的染料。

第五篇：檢驗標本采集處理

一﹑臨床常用檢驗項目的標本采集和處理

（一）血常規檢驗標本

一般用EDTA-2K（EDTA-K2-2H2O）1.5～2.2mg/ml抗凝（EDTA抗凝管）采血。采血注意事項為：

1.采血后立即上下顛倒混勻（5-10次，不可用力震蕩）；

2.應按抗凝管刻度準確采血至2ml；3.采血后應盡快送檢（需顯微鏡觀察形態的標本采血后 應及時推片固定，因為超過2h WBC形態會發生改變）。

（二）紅細胞沉降率（血沉，ESR）測定標本

靜脈采集枸櫞酸鈉（109mmol/L，即32.06g/L）抗凝血（枸櫞酸鈉抗凝管采血）。注意事項：

1.采血后立即上下顛倒混合5-10次；

2.單獨采1管血,準確采血至2ml（抗凝劑：全血 = 0.4 ：1.6）； 3.采血后應盡快送檢（必須2h內檢測）。

（三）凝血檢測（PT、APTT、TT、FBG、DD）標本

靜脈采集抗凝血（最好真空負壓系統采血），抗凝劑用枸櫞酸鈉（109mmol/L，即32.06g/L,抗凝劑:全血 = 0.2：1.8）。采血注意事項：

1.空腹采靜脈血（餐后脂血影響檢測結果，使因子Ⅶ活化，導致PT延長）；

2.采血時患者應保持平靜狀態30min以上（劇烈活動可使因子Ⅷ活化，APTT明顯縮短）； 3.應單獨1管血；

4.必須準確采血至刻度線2.0ml；

5.采血后應立即上下顛倒混勻5-10次，不可有凝塊； 6.采血后應盡快送檢（必須2h內檢測）。

（四）血型 與 血交叉標本

為EDTA-2K抗凝血。采血注意事項：

1.最好血型與血交叉各采1管血（要求保留血樣）； 2.采血量分別為1.0ml和1.0～2.0ml； 3.采血后立即上下顛倒混勻（5～10次）。

（五）尿液常規檢查標本

１.尿液常規檢查標本應按以下原則進行采集：

（1）新鮮晨尿最佳，門診病人亦可留隨機尿；

（2）尿液采集于干凈帶蓋容器中，不可使用未經洗滌的裝藥物或試劑的器皿；

（3）避免混有經血、白帶、精液和糞便；

（4）尿液標本冰箱可保存6～8h，但細胞等有型成分會有破壞，會有結晶析出；

（5）尿液成分定量檢查應留取24h防腐混合尿100～200ml（須記取24h尿液總量）；

（6）根據不同檢測目的選擇不同的防腐劑：臨床最多用的尿液防腐劑為:①甲醛（formalin），用于尿液有形成分檢查，濃度為400mg/L尿液即40%；②甲苯（toluene），常用于尿糖和尿蛋白等化學成分的定性或定量檢查，5-20ml/L尿液；③濃鹽（hydrochloric ａｃｉｄ），用于定量測定尿１７－羥、１７－酮、腎上腺素、兒茶酚胺和尿鈣等，濃度為１ｍｌ/L尿液。

２.尿液常規檢查標本采集方法：

（１）晨尿最好（安靜狀態下留取清晨第一次尿，濃縮，無其他影響）；

（２）隨機尿較常用（隨時留尿，適用于門診和急診病人，結果易受多種因素影響）；

（３）清潔尿（中段尿、導管尿、膀胱穿刺尿，用于病原微生物學培養、堅定和藥敏）；

（４）24h尿（用于尿液成分24h定量檢查分析，一定要教會病人留取24h尿正確方法）。

（５）３ｈ、１２ｈ等計時尿和餐后尿等特殊實驗尿，則應按醫囑要求進行留尿。

（六）糞便常規檢查標本

1.一般應為新鮮的自然排出的糞便３～５ｇ，必要時可肛拭子采??； 2.送檢糞便應盛于潔凈帶蓋的塑料盒中送檢，要做好標記；

3.要選取糞便的膿、血、黏液等異常成分進行檢查，表面無異常時應從糞便表面、深處及糞端多處取材；

4.檢查蟯蟲卵需用透明塑料薄膜于半夜12pm或早晨排便前，于肛門周圍皺襞處拭取標本，并立即送檢；

5.檢查血吸蟲卵時應取黏液、膿、血部分，如須孵化毛蚴應留取不少于30g的糞便，并盡快送檢，必要時留取整份糞便送檢。

6.檢查痢疾阿米巴滋養體時，應床邊留取新排出的糞便，從膿血和稀軟部分取材，并立即保溫送實驗室，并且實驗室接受標本后應立即進行檢查。

7.做便隱血試驗時，應囑病人檢查前3d內禁食肉類、含動物血的食物及某些蔬菜，禁服鐵劑和維生素C等對實驗有干擾作用的藥物。

（七）漿膜腔積液檢查標本

（1）漿膜腔積液標本一般由醫生無菌穿刺采??；

（2）送檢標本量：理學檢查、化學檢查、細胞學檢查各留?。瞞l；細菌學檢查用 無菌管采集標本，厭氧菌培養留?。眒l，結核菌檢查留取１０ml。

（3）標本采集后必須立即送檢（否則可出現細胞變性，標本凝集，細菌溶解）；

（4）用于細胞學檢查時，可在標本中加適量EDTA鹽抗凝，但還須留?。惫懿患涌鼓齽┑臉吮居糜谟^察積液的凝固性；化學檢查標本宜用肝素抗凝。

（八）臨床化學檢驗標本

臨床化學檢驗多用非抗凝血標本，有條件應使用真空負壓采血管。臨床化學檢驗血標本采集主要注意事項是：

1.多項化學檢測一般可采1管血；

2.采血量視檢查項目多少不同而異，單通常為4.0～5.0ml； 3.如果檢測項目不是很多，生化和免疫也可以采1管血；

4.多項檢測同時采血時應按下列順序采血：①血培養；②無添加劑管；③凝血管；④有添加劑管的順序為：a櫞酸鹽管；b肝素管；cEDTA管；d草酸鹽/氟化鈉管。

5.不論是抗凝血還是非抗凝血，為了縮短血清或血漿與血細胞的接觸時間，以避免由此而影響結果的準確性，血液標本收集后，都必須盡可能早地將血清或血漿從全血中分離出來。從血液標本采集開始，必須在2h內將全血處理為血清或血漿。

（1）血清（非抗凝血）：采血后標本必須顛倒混合5～10 次，22～25oC（室溫）15～30min后可自行（自發）完全凝固，禁用木棍和玻棒等剝離凝塊；冷藏標本凝集較慢，加促凝劑時凝集加快。

（2）血漿（抗凝血）：應采用抗凝管采血，采血后立即顛倒混合5～10次，采血后數min內可離心分離血漿。

（3）冷藏標本：用于穩定血液中溫度依賴性成分的（抑制細胞代謝），標本于2-8oC冷藏（標本采集后立即置冰屑或冰水混合物中，冷藏必須充分）；標本需冷藏的測定項目有：兒茶酚胺、胃泌素、甲旁素、PH/血氣、NH3、乳酸、丙酮酸等。，全血標本一般不冷藏，血鉀測定標本冷藏不得＞2h（4）代謝抑制劑和防腐劑的應用：用于抑制細胞代謝。血標本中加入氟化鈉后，血細胞未分離情況下血標本中Glu，22～25oC穩定24h，2～8oC穩定48h；氟化鈉不適用于新生兒及兒童的Glu測定（因兒童PCV高，細胞糖酵解難以控制）；氟化鈉-麝香草酚混合劑不適合酶學檢測（因氟化鈉-麝香草酚混合劑能抑制酶活性）；甲醛—草酸鉀抗凝保存劑不適用于血糖測定。

（5）實驗室離心標本的準備：不主張用小棍強行剝離凝血塊(誘發溶血)；必須剝離時應動作輕柔；真空采血管應一直保持封閉垂直位置直到離心取出血清或血漿。

（6）關于標本離心（指標本處于離心機里的一段時間）

①離心時間和相對離心力：離心時間為5～10min；相對離心力（RCF）為1000～1200×g；

②溫度控制離心：離心時產熱，不利于分析物穩定。溫度依賴性分析物（ACTH﹑環腺苷酸﹑兒茶酚胺等）離心溫度應控制在4oC；無特殊溫度要求的分析物離心溫度在20～22oC；冷藏運送標本應利用溫度控制離心機離心。

③再離心：最好一次完成標本離心。普通采血管二次離心時必須在首次離心后短時間內完成；帶分離膠的采血管不可以二次離心。

（7）離心后標本處理（指標本離心后和用于檢測的血清或血漿被取出 一定量之前）(1)血清/血漿與接觸的細胞/凝塊應于采集后2h內盡快分離；(2)分離出的血清或血漿的儲存：

①8h內可以儲藏于22oC，8h以上儲藏于2～8oC 48h以上儲藏于－20oC；

② 標本不可反復凍融（只能一次，且不可儲藏于無霜冰箱）；

③分離膠上面的血清或血漿，可保存2-5天；

④用非凝膠分離物質時，離心后必須立即移開血清或血漿；

⑤ 血清或血漿必須密閉保存（置于帶塞或封口的試管中）。

（九）血氣分析標本

血氣分析標本為動脈（股﹑肱﹑撓動脈）抗凝全血，抗凝劑為肝素鈉（0.05mg/ml，即1000u/ml，用9g/L的生理鹽水配制）。標本采集注意事項為： 1.采血一定要用厭氧技術（讓血液盡量少的與空氣接觸）；

2.采血前先吸入足夠量液體肝素抗凝劑于注射器內，使其盡可能濕潤注射器內壁，然后排出液體肝素，留下注射器死區內液體肝素約0.1ml即可； 3.采血量0.5～1.0ml（最好2.0ml）；

4.抽出的血液不能有氣泡，如有氣泡應立即排出；

5.標本采好后立即封閉注射器針頭，用兩手挫動注射器針筒使標本混勻后立即送檢。

（十）微生物學檢驗標本

微生物學檢驗標本的正確采集﹑運送及處理，與細菌的培養﹑鑒定結果有十分密切的關系；對可疑烈性呼吸道傳染病（如SARS ﹑炭疽﹑肺鼠疫等）患者采集標本時，必須按國家規范化要求嚴格注意生物安全；醫生﹑護士﹑檢驗人員均應重視微生物學檢驗標本正確采集的有關問題，并有責任向患者及其家屬進行正確采集標本的宣傳和指導。1．微生物學檢驗標本采集、運送、驗收和處理注意事項

（1）標本采集

1）申請單標記必須清楚（姓名、性別、年齡、病例號、臨床診斷、標本來源、采集時間、檢查項目、抗生素應用情況等），以便實驗室能夠合理選擇培養環境和培養基； 2）盡量在抗生素應用前采集標本，以避免漏檢和提高陽性檢出率； 3）標本采集應嚴格執行無菌操作；

4）咽拭、肛拭、傷口拭子等拭子標本，應插入運送培養基送檢；

5）痰、尿液、傷口拭子等混有正常菌群的標本，不可放入肉湯培養基內送檢； 6）采集標本的容器必須經滅菌處理，但不可用消毒劑。

（2）標本運送

1）標本采集后應盡快送到微生物實驗室；

2）標本采集后在室溫下超過2h未送達實驗室，可視為不合格標本。

（3）標本驗收

1）實驗室只能接受和處理合格標本；

2）實驗室對不合格標本退回必須說明原因，并應及時與臨床聯

（4）處理

根據檢驗目的結合臨床資料選擇合適的培養基接種標本；混有正常菌群的標本應做定量細菌培養；不能精確定量或常規定量操作較困難的痰、傷口拭子等標本，應分離出優勢菌做細菌鑒定和藥敏實驗，同時注明細菌量化指標；抗菌藥物治療的標本，必要時應加入某些物質以中和藥物對細菌的抑制作用。2．微生物學檢驗標本采集和處理

（1）尿液標本采集和處理 通常留取晨起第一次尿液（此時尿液在膀胱內儲存4h以上）；尿液采集后要及時送檢，并保證2h內接種；不能及時送檢和接種時，尿液應置4-8℃冰箱保存；冷藏標本應于8h內接種；懷疑沙門氏菌感染時，應于發病2w左右采集尿液，懷疑鉤端螺旋體感染時，應于發病后2w采集尿液，上述時間此時陽性率高。尿液微生物學檢驗標本采集方法如下。1）中段尿采集法：成年男性和女性分別用肥皂水清洗尿道口和外陰部，再用滅菌水沖洗尿道口，然后排尿棄去前段尿液，于帶蓋的無菌盛器中留取中段尿液5～10ml 2）導尿法：用導尿管導取10～15ml尿液，置滅菌容器中送檢；長期留置導尿管者應更換新導尿管留尿；留置導尿時，用無菌消毒法消毒導尿管外部及導尿管口，用無菌注射器通過導尿管抽取尿液送檢（不可采集尿液收集袋中的尿液送檢）；

3）集尿法：懷疑結核分枝桿菌感染時，于清潔盛器中留取24h尿液，取其沉渣10～15ml送檢；

4）恥骨上膀胱穿刺法：培養結果與臨床病情矛盾時可采用此法，一般較少應用； 5）腎盂尿采集法：必須由臨床醫生采集。

（2）糞便標本采集和處理 1）采集時間：

①腹瀉患者于急性期，盡量在用藥前采集糞便；

②傷寒患者于發病2w以后采集糞便；

③懷疑霍亂時立即采集糞便送檢。2)采集方法：

① 自然排便：取新鮮糞便的黏液、膿血、或絮狀物等有意義成分，2-3g或1-2ml，盛無菌容器內或置于保存液或增菌液內送檢；

②直腸拭子：用于難以獲得糞便或排便困難的患者和嬰幼兒，標本采集后插入滅菌試管內送檢。

（3）痰及下呼吸道標本采集和處理 1）自然咳痰法：

① 晨痰為佳；

② 先冷開水漱口清潔口腔和牙齒；

③ 再用力咳出呼吸道深部的痰；

④ 痰量不得少于1ml；

⑤痰咳出困難時可先霧化吸入NaCl溶液（100g/L，加溫到45℃）使痰容易咳出。2）小兒取痰法：用彎壓舌板向后壓舌，將拭子深入咽部，小兒因壓舌板刺激引起咳嗽，噴出的肺或氣管分泌物粘在拭子上可送檢。

3）支氣管鏡、支氣管穿刺、支氣管肺胞灌洗等采集法：此采集方法必須由醫生操作。

（4）血液及骨髓培養標本

1)抗生素治療前，嚴格無菌靜脈采血8～10ml（兒童1～4ml）；

2）無菌注入專用培養瓶（成人、兒童、需氧菌、厭氧菌、L型菌不同培養瓶）中送檢； 3）如已用抗生素不能停用時，可于48h內分別于下次用抗生素之前，采取6份血液標本送檢；

4）必要時可需氧菌、厭氧菌（占10%）和L型菌同時培養；

5）疑為心內膜炎時，為提高陽性檢出率，可酌情不同部位、不同時間，多次采血或動脈采血進行培養；

6）必要時可取骨髓1～2ml，無菌注入專用培養瓶中送檢(5）腦脊液培養標本

1)采集時間：懷疑腦膜炎時應立即采集腦脊液，最是在應用抗生素之前采集腦脊液。2)采集方法：無菌腰穿采集腦脊液3～5ml，分裝到3個無菌小瓶中（各1～2ml）。用于細菌和病毒檢測時腦脊液量不少于1ml；用于真菌和抗酸桿菌檢測腦脊液量不少于2ml。

（6）穿刺液培養標本包括胸水、腹水、心包液、關節液、鞘膜液等穿刺液培養標本。1)采集時間：一般在用抗生素等抗菌藥物治療之前，或在停止使用抗菌藥物之后2-3d采集標本。2)采集方法：

①無菌操作穿刺抽取標本或外科手術采集標本；

② 標本采集量應＞1ml（結核分支桿菌培養時應為1～5ml）；

③ 標本采集后注入無菌小瓶或無菌試管中送檢；

④可在盛器中先加入滅菌肝素然后再加入穿刺液，以防止穿刺液凝固（0.5ml肝素可抗凝5ml標本）

（7）胃液及膽汁培養標本

抽取空腹胃液5ml，置無菌管內送檢；膽汁培養標本由十二指腸引流法或膽囊穿刺法或手術中留取膽汁，采集膽汁量為5ml，置無菌管內送檢；胃液和膽汁采集后必須立即送檢。

（8）膿汁和病灶分泌物培養標本采集前局部消毒，然后無菌采取膿汁或病灶分泌物或組織。標本采集后立即置無菌管內送檢。

（9）眼.耳.鼻.咽拭子培養標本用拭子常規采集各種標本。標本采集過程中應注意避免被黏膜上的正常菌群污染，標本采集后連同拭子一起置無菌管內送檢。

（10）泌尿生殖道培養標本

1）尿道分泌物：清洗尿道口采取尿道口溢出的膿性等分泌物，或用無菌拭子插入尿道2～4cm處輕輕轉動后取出，置無菌試管中送檢。

2）陰道、宮頸分泌物：通過陰道擴張器，用滅菌拭子采取陰道口或宮頸管1～2cm處分泌物，置無菌試管中送檢。

3）宮腔分泌物：在必要時用外套保護膜的滅菌導管抽取。

4）前列腺液：清洗尿道口沖洗膀胱后用前列腺按摩法采取前列腺液送檢。

5）精液：受檢者應5d未排精，清洗尿道口后手淫或體外排精法，射精于無菌容器內送檢。

6）潰瘍分泌物：滅菌生理鹽水溶液清洗患處，用無菌拭子取其邊緣或基底部的分泌物，置無菌試管中送檢。(11）燒傷感染培養標本

燒傷12h后用無菌棉拭子無菌操做采集標本；要注意從多個創面取樣；燒傷嚴重感染時易發生敗血癥，創面取樣的同時應該采集血樣送做血培養（最好同時做需氧菌培養和厭氧菌培養）。

（12）厭氧菌感染培養標本 1）標本采集

①要注意避免標本污染和與空氣接觸，嚴格遵守無菌操作；

②用注射器抽取胸水、腹水、心包液、關節液、膽汁、腦脊液或無菌手術抽出膿液；

③抽出液體標本后，要盡快排除注射器內的空氣。2）標本運送

① 標本采集后不得冰箱儲存，必須盡快（半小時內）送實驗室；

② 運送方法：

a注射器運送（標本抽取后盡快排除空氣）或接種到專門的運送培養基中直接運送； b含運送培養基的無氧小瓶運送； c厭氧罐運送（組織塊）；

d 大量液體標本運送時要裝滿標本瓶并立即驅氧，加蓋運送； e一般不采用棉拭子法。(13）真菌感染培養標本 1）淺部真菌感染標本采集

① 皮膚：常規消毒皮膚，從皮膚癬菌皮損邊緣刮取鱗屑，置無菌平皿內送檢；皮膚潰瘍則采集病損邊緣膿汁或組織；

② 指（趾）指甲：消毒指（趾）指甲并去掉其表面部分，取可疑病變部分，用刀片修成小薄片5～6片，置無菌容器內送檢；

③毛發：采集根部斷折處，至少5～6根送檢。2）深部真菌感染標本采集

① 血液：無菌采血8～10ml，注入未用過抗生素的或可中和抗生素的血培養瓶中，立刻送檢；如不能立刻送檢時血培養瓶應放室溫，但不可超過8～9h；

② 腦脊液：采樣量不少于3～5ml，分別注入兩支無菌試管中送檢（一管做真菌培養和墨汁染色；一管測隱球菌抗原和其他培養）；③呼吸道及泌尿生殖道深部真菌感染標本采集同一般菌培養標本。

（14）病毒感染標本

1）標本采集原則：根據不同檢查目的采集不同的標本，見表1。盡量于疾病早期采集標本；尸檢標本應在患者死亡后6h內采集標本。2)標本采集方法：

① 呼吸道病毒感染標本用咽拭子采集；讓患者先咳嗽，再口服0.5%乳蛋白水解物15ml，反復含漱3～4次后吐到容器中立即送檢；兒童常應用無菌棉拭子，先沾好0.5%乳蛋白水解物，再去涂拭扁桃體周圍組織，并立即泡在0.5%乳蛋白水解物中，立即送檢；

②乙腦病毒需采集血清或血漿，置無軍菌容器中盡快送檢；

③ 尿液則取其中段尿立即送檢（否則置4℃冰箱12h內接種）；

④腸道病毒和柯薩奇病毒則采集新鮮糞便，盡快送檢。

3）標本運送及保存：多數病毒對熱不穩定，標本采集后應立即送檢接種；如48h內接種，須置4℃冰箱保存；空運標本須置冰壺中48h內送到實驗室并接種。