第一篇:各種皮試液配制的方法(范文)
藥物是否須要皮試及所用皮試液的配制方法請按說明書為準則,原則上原藥皮試。
一、1、青霉素80萬U/瓶:50u 80萬青霉素加生理鹽水溶解至4ml;(20萬U/ml)取上液0.1ml+生理鹽水至1ml;(2萬U/ml)取上液0.1ml+生理鹽水至1ml;(2千U/ml)取上液0.25ml+生理鹽水至1ml;(500U/ml)取上液0.1ml作皮試(即50U)
2、頭孢他啶1g/瓶、氯唑西林1g/瓶、氨芐西林鈉氯唑西林鈉1g/瓶、阿洛西林舒巴坦鈉1g/瓶:
以上所需藥物加生理鹽水溶解至4ml;(250mg/ml)取上液0.1ml+生理鹽水至1ml;(25mg/ml)取上液0.1ml+生理鹽水至1ml;(2.5mg/ml)取上液0.2ml+生理鹽水至1ml;(0.5mg/ml)取上液0.1ml作皮試(即0.05mg)皮試結果判斷同青霉素。
3、派拉西林舒巴坦鈉1.5g/瓶
以上所需藥物加生理鹽水溶解至6ml;(250mg/ml)取上液0.1ml+生理鹽水至1ml;(25mg/ml)取上液0.1ml+生理鹽水至1ml;(2.5mg/ml)取上液0.2ml+生理鹽水至1ml;(0.5mg/ml)取上液0.1ml作皮試(即0.05mg)皮試結果判斷同青霉素。
5、普魯卡因:
普魯卡因40mg/支,濃度為0.25%; 取0.125ml+生理鹽水至1ml;
取上液0.1ml作皮試(即0.25mg)皮試結果判斷同青霉素。
6、先鋒鉍1g/瓶、頭孢替唑1g/瓶: 以上所需藥物加生理鹽水溶解至4ml;(250mg/ml)取上液0.1ml+生理鹽水至1ml;(25 mg/ml)取上液0.1ml+生理鹽水至1ml;(2.5mg/ml)取上液0.2ml+生理鹽水至1ml;(0.5mg/ml)(500ug/ml)皮試時取0.1ml(即50ug/0.1ml)皮試結果判斷同青霉素。
7、頭孢曲松1.5g/瓶、頭孢曲松舒巴坦鈉1.5g/瓶 以上所需藥物加生理鹽水溶解至6ml;(250mg/ml)取上液0.1ml+生理鹽水至1ml;(25 mg/ml)取上液0.1ml+生理鹽水至1ml;(2.5mg/ml)取上液0.2ml+生理鹽水至1ml;(0.5mg/ml)(500ug/ml)皮試時取0.1ml(即50ug/0.1ml)皮試結果判斷同青霉素。
8、破傷風抗毒素(TAT)1500 U/支:(教科書)取上液0.1ml+生理鹽水至1ml;(150U/ml)取上液0.1ml作皮試;(即15U)20分鐘觀察結果,如為陰性可一次性注射,如為陽性者,則行脫敏療法。陰性:局部無紅腫、無異常反應。
陽性:皮丘紅腫,硬結直徑大于1.5cm,紅暈范圍直徑超過4cm,有時出現偽足或有癢感,全身過敏性反應同青霉素過敏反應大致相同。脫敏療法方法: 第一次:取TAT0.1ml+生理鹽水至1ml肌肉注射; 第二次:取TAT0.2ml+生理鹽水至1ml肌肉注射; 第三次:取TAT0.3ml+生理鹽水至1ml肌肉注射; 第四次:取余液+生理鹽水至1ml肌肉注射。
每隔20分鐘注射一次,在脫敏過程中密切觀察病人的反應。如病人有氣促、面色蒼白、紫紺、蕁麻疹及頭暈、心跳等不適時,應即停止注射并從速處理并報告醫生。
9、細胞色素C15mg/支/2ml:
取細胞色素C 0.1ml+生理鹽水至1ml;(0.75mg/ml)取上液0.1ml作皮試(即0.07mg)
局部紅腫,直徑大于1cm,有丘疹者為陽性
10、鏈霉素1g(100萬U/瓶):
鏈霉素100萬U+生理鹽水至3.5ml(共4ml)(25萬U/ml)取上液0.1ml+生理鹽水至1ml;(2.5萬U/ml)取上液0.1ml+生理鹽水至1ml;(2500萬U/ml)取上液0.1ml作皮試(即2500U)(皮試結果判斷同青霉素。鏈霉素過敏性休克搶救措施同青霉素過敏性休克搶救措施,因鏈霉素可與鈣離子鉻合,從而使鏈霉素的毒性癥狀減輕或消失。故需備10%葡萄糖酸鈣注射液靜脈注射)
11、糜蛋白酶4000U/瓶
糜蛋白酶4000U/瓶+生理鹽水5ml溶解;(800U/ml)取上液0.5ml+生理鹽水至1ml;(40U/ml)取上液0.1ml作皮試(即4U)
(肌注者需皮試;皮試結果判斷同青霉素。)
13、結核菌素 50U/支/ml 取上液0.1ml作皮試(5U/ ml)皮試時于左手注入試敏液,右手注入生理鹽水作對照。48-72小時觀察結果 陰性:皮膚硬結小于5mm 陽性:皮膚硬結5-10mm(+)皮膚硬結10-15mm(++)皮膚硬結15-20mm(+++)皮膚硬結大于20mm或局部出現水皰或壞死者為(++++)應向病人解釋結素試驗陽性僅表明曾有結核
14、碘過敏試驗:(30%泛影葡胺)(凡是造影者須做該試驗)
A、取60%泛影葡胺(歐乃派克)0.5ml加生理鹽水至1ml緩慢靜脈注射。B、專用30%泛影葡胺試敏劑(1ml)緩慢靜脈注射。
密切觀察15分鐘。如病人有惡心、嘔吐、手足麻木感和(或)出現蕁麻疹者即為陽性反應。
15、鮭魚降鈣素注射液 50單位(10μg/支)1、1ml注射器取0.2ml原液用生理鹽水稀釋至1ml;
2、取上液0.1ml(即1單位)皮下注射。觀察15分鐘看結果。結果判斷同青霉素。
過敏急救
破傷風抗毒素(TAT)1500單位/支(現說明書要求)1、0.1ml抗毒素加0.9ml氯化鈉注射液,2、取上液0.05ml在前掌側皮內注射。
觀察30分鐘看結果。結果判斷:陰性:注射部位無明顯反應者,可在嚴密觀察下直接注射抗毒素。陽性:注射部位出現皮丘增大、紅腫、浸潤,特別是形似偽足或有癢感者。破傷風抗毒素脫敏療法方法:
取TAT原液0.2ml稀釋至2ml,分小量數次作皮下注射,每次注射后觀察30分鐘;
第一次:取上液0.2ml皮下注射,觀察無紫紺、氣喘或顯著呼吸短促、脈搏加速即可注射第二次;
第二次:取上液0.4ml皮下注射,如無反應則可注射第三次; 第三次:取上液0.8ml皮下注射,如無反應則可注射第四次
第四次:取所有余液(含安瓿中未稀釋的抗毒素全量)作皮下或肌肉注射。
有過敏史或過敏試驗強陽性者,應將第一次注射量和以后的遞增量適當減少,分次注射,以免發生劇烈反應。門診病人注射后須觀察30分鐘始可離開。青霉素過敏試驗法:
1、評估:
1)仔細詢問過敏史,如有青霉素過敏史則停止該項試驗。有其他藥物過敏史或變態反應疾病史應慎用。2)曾使用青霉素,停藥3天(TAT7天)后再次使用,或在使用過程中改不同批號的制劑時,需要重做皮試,確定結果為陰性才能繼續用藥。
2、計劃:
1)用物準備:必需備0.1%鹽酸腎上腺素,(其他略)
2)病人準備:A、病人不宜空腹進行皮試,因個別人于空腹時注射用藥會發生眩暈、惡心等反應,宜與過敏反應相混淆。B、讓病人了解注射目的,懂得觀察期間不可隨意離開;不可搔抓或揉按皮試局部;如有異常隨時告知醫護人員。
3、實施:
1)配制方法(略)
2)皮內試驗:于前臂內側皮內注射皮試液0.1ml,20分鐘后觀察皮試結果。皮試結果標準: 陰性:皮丘無改變,周圍不紅腫,無紅暈、無自覺癥狀。
陽性:皮丘隆起增大,出現紅暈,直徑大于1cm,周圍有偽足伴局部癢感;嚴重時可有頭暈、心慌、惡心,甚至發生過敏性休克。
3)皮試結果陽性者不可使用青霉素,并要在病歷、醫囑單、床頭卡和注射單上加以注明,以及將結果告知病人及其家屬。如對皮試結果有懷疑的,應在對側前臂內注射生理鹽水0.1ml,以作對照,確認青霉素皮試結果為陰性方可用藥。過敏性休克的急救措施:
1、立即停藥,使病人平臥。
2、立即皮下注射0.1%腎上腺素1ml,小兒酌減。癥狀如不緩解,可每隔半小時皮下或靜脈注射該藥0.5ml。直至脫離危險期。
3、給予氧氣吸入,改善缺氧癥狀。呼吸受抑制時,應立即進行人工呼吸,并使用呼吸興奮劑。喉頭水腫引致窒息時,應盡快實行氣管切開。
4、根據醫囑靜脈注射地塞米松5-10mg,應用抗組胺類藥,如鹽酸異丙嗪等。
5、靜脈滴注10%葡萄糖溶液或平衡液擴充血容量。血壓仍不回升,可按醫囑加入多巴胺等。
6、若心跳驟停,則立即進行復蘇搶救。
7、密切觀察病情,記錄病人呼吸、脈搏、血壓、神志和尿量等變化
第二篇:常見《皮試液配制方法》
常見《皮試液配制方法》
青霉素過敏試驗法:
1、評估:
1)仔細詢問過敏史,如有青霉素過敏史則停止該項試驗。有其他藥物過敏史或**反應疾病史應慎用。
2)曾使用青霉素,停藥3天(TAT7天)后再次使用,或在使用過程中改不同批號的制劑時,需要重做皮試,確定結果為陰性才能繼續用藥。
2、計劃:
1)用物準備:必需備0.1%鹽酸腎上腺素,(其他略)
2)病人準備:A.病人不宜空腹進行皮試,因個別人于空腹時注射用藥會發生眩暈、惡心等反應,宜與過敏反應相混淆。B.讓病人了解注射目的,懂得觀察期間不可隨意離開;不可搔抓或揉按皮試局部;如有異常隨時告知醫護人員。
3、實施: 1)配制方法(略)
2)皮內試驗:于前臂內側皮內注射皮試液0.1ml,20分鐘后觀察皮試結果。皮試結果判斷標準:
陰性:皮丘無改變,周圍不紅腫,無紅暈、無自覺癥狀。
陽性:皮丘隆起增大,出現紅暈,直徑大于1cm,周圍有偽足伴局部癢感;嚴重時可有頭暈、心慌、惡心,甚至發生過敏性休克。
3)皮試結果陽性者不可使用青霉素,并要在病歷、醫囑單、床頭卡和注射單上加以注明,以及將結果告知病人及其家屬。如對皮試結果有懷疑的,應在對側前臂內注射生理鹽水0.1ml,以作對照,確認青霉素皮試結果為陰性方可用藥。
1、青霉素80萬U/瓶:50u80萬青霉素加生理鹽水溶解至4ml;(20萬U/ml)取上液0.1ml+生理鹽水至1ml;(2萬U/ml)取上液0.1ml+生理鹽水至1ml;(2千U/ml)取上液0.25ml+生理鹽水至1ml;(500U/ml)取上液0.1ml作皮試(即50U)
2、氨芐西林1g/瓶、氯唑西林1g/瓶、氨芐西林鈉氯唑西林鈉1g/瓶、阿洛西林舒巴坦鈉1g/瓶:
以上所需藥物加生理鹽水溶解至4ml;(250mg/ml)取上液0.1ml+生理鹽水至1ml;(25mg/ml)取上液0.1ml+生理鹽水至1ml;(2.5mg/ml)取上液0.2ml+生理鹽水至1ml;(0.5mg/ml)取上液0.1ml作皮試(即0.05mg)皮試結果判斷同青霉素。
3、氨芐西林鈉氯唑西林鈉2g/瓶以上所需藥物加生理鹽水溶解至8ml;(250mg/ml)取上液0.1ml+生理鹽水至1ml;(25mg/ml)取上液0.1ml+生理鹽水至1ml;(2.5mg/ml)取上液0.2ml+生理鹽水至1ml;(0.5mg/ml)取上液0.1ml作皮試(即0.05mg)皮試結果判斷同青霉素。
4、美洛西林舒巴坦鈉1.25g/瓶以上所需藥物加生理鹽水溶解至5ml;(250mg/ml)取上液0.1ml+生理鹽水至1ml;(25mg/ml)取上液0.1ml+生理鹽水至1ml;(2.5mg/ml)取上液0.2ml+生理鹽水至1ml;(0.5mg/ml)取上液0.1ml作皮試(即0.05mg)皮試結果判斷同青霉素。
5、阿莫西林舒巴坦鈉1.5g/瓶、派拉西林舒巴坦鈉1.5g/瓶以上所需藥物加生理鹽水溶解至6ml;(250mg/ml)
取上液0.1ml+生理鹽水至1ml;(25mg/ml)取上液0.1ml+生理鹽水至1ml;(2.5mg/ml)取上液0.2ml+生理鹽水至1ml;(0.5mg/ml)取上液0.1ml作皮試(即0.05mg)皮試結果判斷同青霉素。
6、美洛西林0.5g/瓶、派拉西林0.5g/瓶、氨芐西林0.5g/瓶以上所需藥物加生理鹽水溶解至2ml;(250mg/ml)
取上液0.1ml+生理鹽水至1ml;(25mg/ml)取上液0.1ml+生理鹽水至1ml;(2.5mg/ml)取上液0.2ml+生理鹽水至1ml;(0.5mg/ml)取上液0.1ml作皮試(即0.05mg)皮試結果判斷同青霉素。
7、長效西林(芐星青霉素)120萬U/瓶: 長效西林+生理鹽水5.8ml溶解;(20萬U/ml)取上液0.1ml+生理鹽水至1ml;(2萬U/ml)取上液0.1ml+生理鹽水至1ml;(2千U/ml)取上液0.25ml+生理鹽水至1ml;(500U/ml)取上液0.1ml作皮試(即50U/0.1ml)皮試結果判斷同青霉素。
8、普魯卡因:
普魯卡因40mg/支,濃度為0.25%; 取0.125ml+生理鹽水至1ml; 取上液0.1ml作皮試(即0.25mg)皮試結果判斷同青霉素。
9、先鋒鉍1g/瓶、頭孢替唑1g/瓶:
以上所需藥物加生理鹽水溶解至4ml;(250mg/ml)取上液0.1ml+生理鹽水至1ml;(25mg/ml)取上液0.1ml+生理鹽水至1ml;(2.5mg/ml)
取上液0.2ml+生理鹽水至1ml;(0.5mg/ml)(500ug/ml)皮試時取0.1ml(即50ug/0.1ml)皮試結果判斷同青霉素。
10、頭孢拉定0.5g/瓶、頭孢呋辛鈉0.5g/瓶、頭孢地嗪鈉0.5g/瓶、頭孢派酮鈉舒巴坦鈉0.5g/瓶、頭孢唑林鈉0.5g/瓶:
以上所需藥物加生理鹽水溶解至2ml;(250mg/ml)取上液0.1ml+生理鹽水至1ml;(25mg/ml)取上液0.1ml+生理鹽水至1ml;(2.5mg/ml)取上液0.2ml+生理鹽水至1ml;(0.5mg/ml)(500ug/ml)皮試時取0.1ml(即50ug/0.1ml)皮試結果判斷同青霉素。
11、頭孢曲松1.5g/瓶、頭孢曲松舒巴坦鈉1.5g/瓶以上所需藥物加生理鹽水溶解至6ml;(250mg/ml)
取上液0.1ml+生理鹽水至1ml;(25mg/ml)取上液0.1ml+生理鹽水至1ml;(2.5mg/ml)
取上液0.2ml+生理鹽水至1ml;(0.5mg/ml)(500ug/ml)皮試時取0.1ml(即50ug/0.1ml)皮試結果判斷同青霉素。
12、頭孢他定舒巴坦鈉0.75g/瓶以上所需藥物加生理鹽水溶解至3ml;(250mg/ml)取上液0.1ml+生理鹽水至1ml;(25mg/ml)取上液0.1ml+生理鹽水至1ml;(2.5mg/ml)
取上液0.2ml+生理鹽水至1ml;(0.5mg/ml)(500ug/ml)皮試時取0.1ml(即50ug/0.1ml)皮試結果判斷同青霉素。
13、破傷風抗毒素(TAT)1500U/支: 取上液0.1ml+生理鹽水至1ml;(150U/ml)取上液0.1ml作皮試;(即15U)
20分鐘觀察結果,如為陰性可一次性注射,如為陽性者,則行脫敏療法。陰性:局部無紅腫、無異常反應。
陽性:皮丘紅腫,硬結直徑大于1.5cm,紅暈范圍直徑超過4cm,有時出現偽足或有癢感,全身過敏性反應同青霉素過敏反應大致相同。脫敏療法方法:
第一次:取TAT0.1ml+生理鹽水至1ml肌肉注射; 第二次:取TAT0.2ml+生理鹽水至1ml肌肉注射; 第三次:取TAT0.3ml+生理鹽水至1ml肌肉注射; 第四次:取余液+生理鹽水至1ml肌肉注射。
每隔20分鐘注射一次,在脫敏過程中密切觀察病人的反應。如病人有氣促、面色蒼白、紫紺、蕁麻疹及頭暈、心跳等不適時,應即停止注射并從速處理并報告醫生。
14、細胞色素C15mg/支/2ml:
取細胞色素C0.1ml+生理鹽水至1ml;(0.75mg/ml)取上液0.1ml作皮試(即0.07mg)局部紅腫,直徑大于1cm,有丘疹者為陽性
15、鏈霉素1g(100萬U/瓶):
鏈霉素100萬U+生理鹽水至3.5ml(共4ml)(25萬U/ml)取上液0.1ml+生理鹽水至1ml;(2.5萬U/ml)取上液0.1ml+生理鹽水至1ml;(2500萬U/ml)取上液0.1ml作皮試(即2500U)
(皮試結果判斷同青霉素。鏈霉素過敏性休克搶救措施同青霉素過敏性休克搶救措施,因鏈霉素可與鈣離子鉻合,從而使鏈霉素的毒性癥狀減輕或消失。故需備10%葡萄糖酸鈣注射液靜脈注射)
16、糜蛋白酶4000U/瓶糜蛋白酶4000U/瓶+生理鹽水5ml溶解;(800U/ml)取上液0.5ml+生理鹽水至1ml;(40U/ml)取上液0.1ml作皮試(即4U)
(肌注者需皮試;皮試結果判斷同青霉素。)
17、B1注射液10mg/瓶/2ml取上液0.1ml+生理鹽水至1ml;(0.5mg/ml)取上液0.1ml作皮試(0.05mg/ml)(皮試結果判斷同青霉素)
18、結核菌素50U/支/ml取上液0.1ml作皮試(5U/ml)
皮試時于左手注入試敏液,右手注入生理鹽水作對照。48-72小時觀察結果陰性: 皮膚硬結小于5mm陽性 皮膚硬結5-10mm(+)皮膚硬結10-15mm(++)皮膚硬結15-20mm(+++)
皮膚硬結大于20mm或局部出現水皰或壞死者為(++++)應向病人解釋結素試驗陽性僅表明曾有結核
19、碘過敏試驗:(30%泛影葡胺)(凡是造影者須做該試驗)
A.取60%泛影葡胺(歐乃派克)0.5ml加生理鹽水至1ml緩慢靜脈注射。B.專用30%泛影葡胺試敏劑(1ml)緩慢靜脈注射。
密切觀察15分鐘。如病人有惡心、嘔吐、手足麻木感和(或)出現蕁麻疹者即為陽性反應。
20、鮭魚降鈣素注射液50單位(10μg/支)1、1ml注射器取0.2ml原液用生理鹽水稀釋至1ml;
2、取上液0.1ml(即1單位)皮下注射。觀察15分鐘看結果。結果判斷同青霉素。
21、破傷風抗毒素(TAT)1500單位/支 1、0.1ml抗毒素加0.9ml氯化鈉注射液;
2、取上液0.05ml在前掌側皮內注射。
觀察30分鐘看結果。結果判斷:陰性:注射部位無明顯反應者,可在嚴密觀察下直接注射抗毒素。陽性:注射部位出現皮丘增大、紅腫、浸潤,特別是形似偽足或有癢感者。
破傷風抗毒素脫敏療法方法:
取TAT原液0.2ml稀釋至2ml,分小量數次作皮下注射,每次注射后觀察30分鐘; 第一次:取上液0.2ml皮下注射,觀察無紫紺、氣喘或顯著呼吸短促、脈搏加速即可注射第二次;
第二次:取上液0.4ml皮下注射,如無反應則可注射第三次;
第三次:取上液0.8ml皮下注射,如無反應則可注射第四次第四次:取所有余液(含安瓿中未稀釋的抗毒素全量)作皮下或肌肉注射。
有過敏史或過敏試驗強陽性者,應將第一次注射量和以后的遞增量適當減少,分次注射,以免發生劇烈反應。門診病人注射后須觀察30分鐘始可離開。
過敏性休克的急救措施:
1、立即停藥,使病人平臥。
2、立即皮下注射0.1%腎上腺素1ml,小兒酌減。癥狀如不緩解,可每隔半小時皮下或靜脈注射該藥0.5ml.直至脫離危險期。
3、給予氧氣吸入,改善缺氧癥狀。呼吸受抑制時,應立即進行人工呼吸,并使用呼吸興奮劑。喉頭水腫引致窒息時,應盡快實行氣管切開。
4、根據醫囑靜脈注射地塞米松5-10mg,應用抗組胺類藥,如鹽酸異丙嗪等。
5、靜脈滴注10%葡萄糖溶液或平衡液擴充血容量。血壓仍不回升,可按醫囑加入多巴胺等。
6、若心跳驟停,則立即進行復蘇搶救。
7、密切觀察病情,記錄病人呼吸、脈搏、血壓、神志和尿量等變化。
第三篇:青霉素皮試藥液配制方法解讀
青霉素皮試藥液配制方法:
青霉素1瓶80萬u,注入4ml生理鹽水,則1ml含20萬u 取0.1ml,加生理鹽水至1ml,則1ml含2萬u 取0.1ml,加生理鹽水至1ml,則1ml含2000u 取0.25ml,加生理鹽水至1ml,則1ml含500u,即成青霉素皮試液。皮內注射0.1ml含50 u 破傷風抗毒素(TAT)皮試液的配制方法:
TAT 每支1500IU約0.7 ml,加水至1ml,抽取0.1ml,加生理鹽水稀釋至1ml(含150IU),皮內注射0.1ml含15IU。細胞色素C皮試液的配制方法:
細胞色素C 每支2 ml含15mg,取0.1ml,加生理鹽水至1ml(1ml含0.75 mg),皮內注射0.1ml含0.075 mg。先鋒酶素皮試液的配制方法:
先鋒酶素0.5 g加生理鹽水2 ml,則1ml含250mg 取0.2ml,加生理鹽水至1ml,則1ml含30mg 取0.1ml,加生理鹽水至1ml,則1ml含3mg(3000 ug)取0.1ml,加生理鹽水至1ml,則1ml含300 ug 皮內注射0.1ml含30ug 長效青霉素皮試液的配制方法;
長效青霉素1瓶120萬u,注入4ml生理鹽水,則1ml含30萬u 8 [<1?[b 取0.1ml l含3萬u,作畫痕試驗。
碘過敏試驗:
30%泛影葡胺1ml緩慢靜脈注射 鏈霉素皮試液的配制方法:
鏈霉素1瓶1g(100萬u),加生理鹽水至3.5ml溶解后為4ml,則1ml含0.25 g(25萬u)
取0.1ml,加生理鹽水至1ml,則1ml含2.5萬u 取0.1ml,加生理鹽水至1ml,則1ml含2500u 皮內注射0.1ml含250萬 精制抗狂犬病血清皮試液的配制方法: 抗血清每支400IU,取0.1ml,加生理鹽水0·9ml,皮內注射0.05ml,觀察30分鐘。
頭孢唑啉鈉皮試液的配制
0.5g/瓶頭孢唑啉鈉加等滲鹽水至5ml -→0.1g/ml
取0.1ml瓶加4.9ml等滲鹽水至5ml -→2mg/ml
取0.15g/瓶加4.85ml等滲鹽水至5ml -→60μg/ml
取頭孢唑啉鈉皮試液0.1ml(含6μg)作皮內注射,觀察20分鐘后,判斷試驗結果。頭孢曲松皮試液的配置
在1 g的頭孢曲松鈉中加入生理鹽水4 ml,充分溶化,使每毫升濃度為250 mg/ml。用1 ml注射器從上液中抽取0.2 ml,加生理鹽水至1 ml,使其濃度為50 mg/ml。取0.1 ml,加生理鹽水至1 ml,使其濃度為5 mg/ml。取0.1 ml,加生理鹽水至1 ml,即成濃度為500 μg/ml的皮試液。
取頭孢曲松皮試液0.1ml(含50 μg/ml)作皮內注射,觀察20分鐘后,判斷試驗結果。氨芐青霉素皮試液的配制
0.5g/瓶加等滲鹽水至2ml -→250mg/ml
取0.1ml加0.9ml等滲鹽水至1ml -→25mg/ml
取0.1ml加0.9m等滲鹽水至1ml -→2.5mg/ml
取0.1ml加0.9m等滲鹽水至1ml -→0.25mg/ml
取氨芐青霉素皮試液0.1ml(含25μg)作皮內注射,觀察20分鐘后,判斷試驗結果。
(1)青霉素G鈉(鉀)①皮試溶液的配制
a.用4ml 生理鹽水將80萬單位的青霉素稀釋成為20萬單位!b. 用lml注射器取每毫升含20萬u的青霉素溶液0.lml,加注射用水或生理鹽水至lml,搖勻即成(含青霉素2萬U)。c. 取上液0.lml&上法稀釋至lml(含青霉素2000u)。
d. 取每毫升含青霉素2000u的溶液0.sml按上法稀釋至2ml,搖勻即成(含青霉素500u)。
其實在b 的基礎上取0.25&上法稀釋至1ml,搖勻每0.1ml即含50U!這樣每次只取0.1ml做皮試.用一毫升針管配可簡記為:4-------0.1~1-------0.1~1------0.25~1;
用五毫升針管配,則為4-----0.4~4-----0.4~4-----1~4!!
注意事項
a.極少數患者可在皮膚試驗時發生過敏性休克,常于注射后數秒至5min內開始。先是皮膚蜃癢、四肢麻木,gy則氣急、胸悶、發紺、心跳加快、脈細、血壓下降、大量出汗等。如不及時搶救,可導致病人死亡。應做好搶救準備,如鹽酸腎上腺素肌注;氫化可的松靜滴;及10%葡萄糖酸鈣液與高滲葡萄糖液20ml緩慢靜注;以及使用中樞興奮藥和抗過敏藥。b.試驗用藥含量要準,配制后在冰箱中保存不應超過24h,注射器應用lml刻度者。C.更換同類藥物或不同批號或停藥3天以上,最好重新作皮內試驗。(2)頭胞菌素(先鋒霉素)①皮試溶液的配制
取頭抱菌素0.5g加生理鹽水5ml溶解,然后抽取0.lml稀釋至5ml后,再抽取0.15ml稀釋至5ml即成(每毫升含頭抱菌素60ug)。②應試方法及結果觀察
每次取應試液0.lml做皮內試驗,具體操作及結果觀察均同青霉素試驗。注:也有的醫療單位采用每毫升含0.25、0.3、0.5mg濃度的頭泡菌素為皮試液。每次抽取0.05—0.lml作皮試。下面介紹以劑量為50ug為例.配制方法:以一瓶含0.5g為例頭孢唑林鈉即先鋒V為例)a.取頭----鈉0.5g加生理鹽水2ml溶解,則每ml 含0.25g ,即250mg.b,取0.2ml上液加生理鹽水至1ml,則每ml含50mg.c.取0.1ml上液加生理鹽水至1ml ,則每ml 含5mg.d-------------,---0.5mg.即500ug.即每0.1ml含50ug,故每次取0.1ml做皮試!頭孢他啶(舒秦)規格為1.5g一瓶,則在a的步驟上加6ml生理鹽水,其他同理!
小結:用一毫升針管配,以唑林類或西林類藥為例,如先鋒V(0.5g)為例,則為2----0.2~1------0.1~1-----0.1~1.用五毫升針管配,則為2------0.4~2-----0.4~4-----0.4~4!!!頭孢哌酮舒巴坦鈉(懊必健0.75g)皮試配制方法: 1)1毫升:3------0.2~1-----0.1~1-----0.1~1!!2)5毫升:3------0.4~2-----0.4-~4----0.4~4!!頭孢曲松鈉:(1.0g為單位)
1)1毫升:4---0.2~1----0.1~1---0.1~1
2)5毫升:4---0.4~2-----0.4-~4----0.4~4!!小節:頭孢類藥皮試均以0.5g為標準,0.5克加2毫升0.9%NS或滅菌注射用水!然后依次為0.2~1----0.1~1---0.1~1!!1克加4毫升以此類推!
(3)鏈霉素 ①皮試溶液的配制
a.取鏈霉素1g(100萬u)加生理鹽水3.sml溶液后即成4ml(每毫升含25萬u)。b.取a液0.lml加生理鹽水稀釋至lml(每毫升含2.5萬U)。c.取b液0.lml加生理鹽水稀釋至lml(每毫升含2500U)。d.取c液0.Zml加生理鹽水稀釋至lml(每毫升含500u)即得。②皮試方法及結果觀察
取度試液0.lml做皮內試驗,觀察15—20min.具體皮試方法及結果觀察均同青霉素試驗。③注意事項
a.皮試陰性的病人,注射時也可發生過敏反應,故應做好搶救準備。b.皮試方法目前全國尚不統一,已規定要做皮試的地區,應按規定進行。(4)結核苗素 ①皮試溶液的配制
取純結核菌素0.5ml加生理鹽水4.5ml為第一號溶液,其稀釋度為1:10。依上法配制第2、3、4號溶液,其稀釋度分別為1:1加91:10o山1:10000O’ ②皮試方法及結果觀察。
選擇前臂屈側關節上6.6cm處,消毒后皮內注射0.1ml結核菌素液,使之成一皮丘。通常從1:1000開始,如無反應可用較大濃度。最后判斷小兒有無結核菌感染,需做1:100濃度的試驗。如患兒有皰性結膜炎、皮膚結節性紅斑或胸腔積液,應從1:10000開始。注射后48一72h觀察反應強度,并以(+)號表示之。陰性:不發紅和硬結直徑不超過0.5cm或僅發紅而無硬結。可疑:(t)發紅和硬結直徑為0.scm以下。陽性:(+)發紅和硬結直徑為0.5—0.gcm。(++)發紅和便結直徑為1—1.gcm。(+++)發紅和硬結直徑為ZCin以上。(++++)除發紅和硬結外有水泡或壞死。③注意事項
巳稀釋后的結核菌素液,在冰箱內可保存6周。如發生沉淀或變黃色則不能用。
(5)破傷風抗毒素
1、皮試液的配制
取破傷風抗毒素1500u,抽取0.1ml加生理鹽水稀釋至1ml既成。
2、皮試方法及結果觀察
取皮試液0.1ml在前臂作皮內試驗,15min后觀察,局部紅腫在1cm以上為陽性。必要時應以生理鹽水在另一前臂做對照試驗.
3、注意事項
若皮試為陽性,也可用脫敏法進行注射。第1針用1:20稀釋血清0.05ml;第2針用1:10稀釋血清0.05ml;第3針用未稀釋血清0.lml,第4針用未稀釋血清0.smll第5針將余量一次肌內注射。每針間隔20min,無反應可注射。但在注射前要做好過敏性休克的搶救準備。
次數 抗毒血清 等滲鹽水 注射法 1 0.1 0.9 肌肉注射 0.2 0.8--0.3 0.7---余量 稀釋至1ml---
注:白喉抗毒素、多價精制氣性壞疽抗毒素、精制肉毒抗毒素,其過敏試驗均同破傷風抗毒素。
(6)鹽酸普魯卡因 ①應試溶液的配制
將鹽酸普魯卡因配制0.25%溶液即成。②皮試方法及結果觀察
取皮試液0.lml在前臂作皮內試驗,15—20min后觀察結果。其判斷標準同青霉素皮膚試驗。
(7)細胞色素C ①皮試溶液的配制 用原藥液。
②皮試方法及結果觀察
a.劃痕法:用本品1滴于前臂內側皮膚上劃痕,使之少量出血,20min后觀察,如發紅在10mm以上或腫脹在7mm以上為陽性。b.皮內法。將本品稀釋為0.03mg/ml,在前臂皮內注射0.03—0.05ml,20min后,發紅直徑在15mm以上或腫脹在10cm以上為陽性。c.點眼法:將濃度為5mg/ml本品1滴,滴于眼結膜 上,20min后,結膜充血、水腫、癢者為陽性. ③注意事項
據報道偶可引起過敏反應,尤其是停藥后再用該藥時澳警隊_。
(8)有機碘造影劑(碘吡啦啥,醋碘苯酸鈉,泛影鈉,泛影葡胺,膽影鈉,碘化油等)①度試溶液的配制 用30%有機碘溶液。②皮試方法及結果觀察:
a.靜注法:用30%有機碘溶液lml靜注,密切觀察20min,注意有無心臟、頰膜水腫、惡心、嘔吐、尊麻疹、血壓下降及其它不適等反應。如有上述現象不可注射。b.日含試驗法:用1—5ml造影劑含于口中,5min后觀察有無上述反應。
c.皮內試驗法:用0.05一0.lml造影劑在前臂作皮內試驗,10一15min后觀察,有1cm大小的紅斑反成即為強陽性。,d.結膜試驗法。用1—2滴造影劑滴入一側眼結膜囊內,lmin后觀察結膜與鞏膜充血情況,如有顯著充血(與對側對比)、血管擴張、曲張,即為強陽性。③注意事項
過敏試驗陰性者,在碘造影過程中仍可出現過敏反應,必需注意。(9)門冬酰胺酶 ①皮試液的配制
a.取門冬酸胺酶1000u加生理鹽水lml溶解后即成1000u/ml.b.取上液0.lml加生理鹽水稀釋至lml即成。②皮試方法及結果觀察
取皮試液0.lml在前臂作皮內試驗,結果判斷同青霉素皮試。陽性者不可田。③注意事項
a.不同藥廠、不同批號產品的純度和過敏反應均有一差異,使用時必須慎重。b.有過敏史的病人應十分小心或不用。(10)精制抗蝮蛇毒血清 ①皮試溶液的配制
取本品0.lml加生理鹽水稀釋至2ml即成。②皮試方法及結果觀察
取皮試液0.05ml作皮內試驗,20—30min后觀察,在正在1cm以內,周圍無紅暈及偽足狀者為陰性。若疑為陽性者可先注射撲爾敏10mg,15min后再用脫敏法給藥。脫敏注射法:本品用生理鹽水稀釋20倍,第一次注射0.4ml,每次觀察10—20m1n,如無反應可酌情增量,注射3次以上無反應時可注射。如有異常反應,立即停止注射,可用地塞米松或氫化可的松流用酸鈉注射液靜注抗過敏。
注:精制抗五步蛇毒血清和精制抗銀環蛇毒血清過敏試驗同抗蝮蛇毒血清。(11)精制抗炭疽血清 ①皮試溶液的配制
取本品0.lml加生理鹽水稀釋至lml即成。②皮試方法及結果觀察
取應試液0.05ml在前臂作皮內試驗,30min后觀察,無明顯反應者為陰性。如出現皮丘增大、紅腫、浸潤、形似偽足或有庫感為陽性反應,須脫敏注射。脫敏注射法;用生理鹽水10倍稀釋血清,第一次注射稀釋血清0.2ml、第二次注射0.4ml、第三次注射0.8ml。每次注射后30min觀察,如無反應,可將安緬中未稀釋的全部血清肌注。有過敏史或過敏試驗強陽性者。應將第一次注射量及以后的遞增量減少。
注:精制抗狂犬病血清過敏試驗同精制抗炭疽血簡。溢一敏注射法亦同,僅用量第一次為lml,每次增加lml至4ml止。
讀書的好處
1、行萬里路,讀萬卷書。
2、書山有路勤為徑,學海無涯苦作舟。
3、讀書破萬卷,下筆如有神。
4、我所學到的任何有價值的知識都是由自學中得來的。——達爾文
5、少壯不努力,老大徒悲傷。
6、黑發不知勤學早,白首方悔讀書遲。——顏真卿
7、寶劍鋒從磨礪出,梅花香自苦寒來。
8、讀書要三到:心到、眼到、口到
9、玉不琢、不成器,人不學、不知義。
10、一日無書,百事荒廢。——陳壽
11、書是人類進步的階梯。
12、一日不讀口生,一日不寫手生。
13、我撲在書上,就像饑餓的人撲在面包上。——高爾基
14、書到用時方恨少、事非經過不知難。——陸游
15、讀一本好書,就如同和一個高尚的人在交談——歌德
16、讀一切好書,就是和許多高尚的人談話。——笛卡兒
17、學習永遠不晚。——高爾基
18、少而好學,如日出之陽;壯而好學,如日中之光;志而好學,如炳燭之光。——劉向
19、學而不思則惘,思而不學則殆。——孔子
20、讀書給人以快樂、給人以光彩、給人以才干。——培根
第四篇:化驗室試劑試液管理制度
化驗室試劑試液管理制度
1目的:規范化驗室試劑試液的管理,保證配制、儲存合理,為質量檢驗提供有利支持。
2范圍:適用于化驗室試劑、試液的管理。
3責任:化驗員對實施本程序負責。質量技術部監督執行。4程序
4.1化驗室試劑試液的配制管理
4.1.1所有試劑、試液應有專人保管,均應貼有明顯的標簽,內容包括:品名、配置濃度等。
4.1.2標準液由專人負責稱配,有專人核對并在《化學試劑配制記錄》上做好登記。標準液瓶簽要寫明品名、濃度、日期、室溫等。
4.1.3使用試劑、試液,要遵守使用規程,使用前要觀察性狀有無變化(色澤、澄明、臭味)瓶簽是否完整,濃度是否書寫清楚。
4.1.4使用剩余試液及標液不能傾回瓶中,如有不慎弄污瓶簽在復核下進行更換。4.1.5藥品、試液應由專柜、專人保管好。
4.1.6試劑、試液要避免陽光直曬,需要避光的試劑、試液要用黑色紙包裝或棕色瓶盛裝。
4.1.7試液的配置所用試劑無特殊要求,一般用分析純,溶劑一般用蒸餾水。4.1.8基準試劑在標定前應干燥至恒重。
4.1.9標準液、滴定液的配制按規定的操作標準執行。4.2化驗室試劑試液的儲存管理
4.2.1所有的化學試劑要分類單獨存放在專用櫥內,存放區要防熱、防潮,要通風干燥,避免陽光,室溫一般在5—25℃。
4.2.2試劑儲存在安全位置,嚴禁明火、消防設施器材完備。
4.2.3化學試劑應指定專人負責管理,對有毒的藥品應嚴格按照有毒藥品規定執行。4.2.4易燃燒、揮發的物品要放在空氣流通的地方。
4.2.5易被陽光分解的物質如硝酸銀、高錳酸鉀放在暗色瓶內。4.2.6相互抵觸化學品不得在同一櫥、同一室內存放。4.2.7危險品存儲于專室、專柜內。4.3化驗室試劑試液的安全管理
4.3.1未經質量技術部部長允許,非化驗室人員不準進行任何分析和化驗。
4.3.2室內一切設備儀器及藥品,非直接有關人員不得動用。4.3.3不了解其性能及用途的藥品儀器,須弄懂后方可使用.4.3.4水或蒸餾水用后應立即關閉閥門。4.3.5禁止使用有裂紋的玻璃器皿。4.3.6加熱溶液時出氣口不得面對工作人員。4.3.7禁止用口嘗試藥品,須用吸液管吸取毒性溶液。
4.3.8稀釋硫酸時必須把硫酸以細流狀緩緩傾入水中,而且要不斷攪拌,中和濃酸時應先稀釋。4.3.9使用易燃品要遠離明火。
4.3.10易燃易爆品及毒品應放在指定的地點。
第五篇:分子生物學實驗室常用試劑的配制方法
一.常用貯液與溶液
1mol/L亞精胺(Spermidine): 溶解2.55g亞精胺于足量的水中,使終體積為10ml。分裝成小份貯存于-20℃。
1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使終體積為10ml。分裝成小份貯存于-20℃。
10mol/L乙酸胺(ammonium acetate):將77.1g乙酸胺溶解于水中,加水定容至1L后,用0.22um孔徑的濾膜過濾除菌。
10mg/ml牛血清蛋白(BSA):加100mg的牛血清蛋白(組分V或分子生物學試劑級,無DNA酶)于9.5ml水中(為減少變性,須將蛋白加入水中,而不是將水加入蛋白),蓋好蓋后,輕輕搖動,直至牛血清蛋白完全溶解為止。不要渦旋混合。加水定容到10ml,然后分裝成小份貯存于-20℃。
1mol/L二硫蘇糖醇(DTT):在二硫蘇糖醇5g的原裝瓶中加32.4ml水,分成小份貯存于-20℃。或轉移100mg的二硫蘇糖醇
至微量離心管,加0.65ml的水配制成1mol/L二硫蘇糖醇溶液。
8mol/L乙酸鉀(potassium acetate):溶解78.5g乙酸鉀于足量的水中,加水定容到100ml。
1mol/L氯化鉀(KCl):溶解7.46g氯化鉀于足量的水中,加水定容到100ml。
3mol/L乙酸鈉(sodium acetate):溶解40.8g的三水乙酸鈉于約90ml水中,用冰乙酸調溶液的pH至5.2,再加水定容到100ml。
0.5mol/L EDTA:配制等摩爾的Na2EDTA和NaOH溶液(0.5mol/L),混合后形成EDTA的三鈉鹽。或稱取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH,并溶于水中,定容至1L。
1mol/L HEPES:將23.8gHEPES溶于約90ml的水中,用NaOH調pH(6.8-8.2),然后用水定容至100ml。
1mol/L HCl:加8.6ml的濃鹽酸至91.4ml的水中。
25mg/ml IPGT:溶解250mg的IPGT(異丙基硫代-β-D-半乳糖苷)于10ml水中,分成小份貯存于-20℃。
1mol/LMgCl2:溶解20.3g MgCl2·6H2O于足量的水中,定容到100ml。
100mmol/L PMSF:溶解174mg的PMSF(苯甲基磺酰氟)于足量的異丙醇中,定容到10ml。分成小份并用鋁箔將裝液管包裹
或貯存于-20℃。
20mg/ml蛋白酶K(proteinase K):將200mg的蛋白酶L加入到9.5ml水中,輕輕搖動,直至蛋白酶K完全溶解。不要渦旋混合。加水定容到10ml,然后分裝成小份貯存于-20℃。
10mg/mlRnase(無DNase)(DNase-free RNase):溶解10mg的胰蛋白RNA酶于1ml的10mmol/L的乙酸鈉水溶液中(pH 5.0)。溶解后于水浴中煮沸15min,使DNA酶失活。用1mol/L的Tris-HCl調pH至7.5,于-20℃貯存。(配制過程中要戴手套)
5mol/L氯化鈉(NaCl):溶解29.2g氯化鈉于足量的水中,定容至100ml。
10N氫氧化鈉(NaOH):溶解400g氫氧化鈉顆粒于約0.9L水的燒杯中(磁力攪拌器攪拌),氫氧化鈉完全溶解后用水定容至1L。
10%SDS(十二烷基硫酸鈉):稱取100gSDS慢慢轉移到約含0.9L的水的燒杯中,用磁力攪拌器攪拌直至完全溶解。用水定容至1L。
2mol/L山梨(糖)醇(Sorbitol):溶解36.4g山梨(糖)醇于足量水中使終體積為100ml。
100%三氯乙酸(TCA):在裝有500gTCA的試劑瓶中加入100ml水,用磁力攪拌器攪拌直至完全溶解。(稀釋液應在臨用前配制)
2.5% X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-半乳糖苷):溶解25mg的X-gal于1ml的二甲基甲酰胺(DMF),用鋁箔包裹裝液管,貯存于-20℃。
100×Denhardt試劑(Denhardt's regent)
成分及終濃度
配制100ml溶液各成分的用量
2%聚蔗糖(Ficoll,400型)
2%聚乙烯吡咯烷酮(PVP-40)
2%BSA(組分V)
水
2g 2g 2g
加水至總體積為100ml
依照上表稱取各組分,溶于水中定容。過濾除菌及雜質,分裝成小份于-20℃貯存。
10×標準DNA連接酶緩沖液(standard DNA ligase buffer)(粘端、平端連接)
成分及終濃度
配制10ml溶液各成分的用量
0.5mol/L Tris-HCl 100mmol/L MgCl2 100mmol/L DTT 2mmol/L ATP
5mmol/L 鹽酸亞精胺(可選)
0.5mg/ml BSA(組分V)(可選)
水
5ml 1mol/L 貯液
1ml 1mol/L 貯液
1ml 1mol/L 貯液
200ul 100 mmol/L 貯液
50ul 1 mmol/L 貯液
0.5ml 10 mg/mL 貯液
2.25ml
將配制好的緩沖液分裝成小份,貯存于-20℃。
mmol/L dNTP 溶液(dNTP solutions)
可以購買到100mmol/L純dNTPs貯液,-80℃可貯存至少6個月。
10mmol/L dNTP混合液
成分及終濃度
配制20ul溶液各成分的用量
10mmol/L dATP 10mmol/L dCTP 10mmol/L dGTP 10mmol/L dTTP 水
2ul 100 mmol/L dATP 貯液
2ul 100 mmol/L dCTP 貯液
2ul 100 mmol/L dGTP 貯液
2ul 100 mmol/L dTTP 貯液
12ul
20%PEG 8000/2.5M NaCl
成分及終濃度
配制10ml溶液各成分的用量
質量濃度為20%聚乙二醇
2.5mol/L 氯化鈉
水 20g
50ml 5 mol/L 氯化鈉 或 14.6g 固體氯化鈉
補足100ml
加聚乙二醇于含有氯化鈉的燒杯中,加水至終體積100ml,用磁力攪拌器攪拌溶解。
20×SSC
成分及終濃度
配制1L溶液各成分的用量
300mmol/L 檸檬酸三鈉(二水)
3mol/L 氯化鈉
水
88.2g 175.3g 補足1L
溶解檸檬酸三鈉(二水)和氯化鈉于約0.9L水中,加幾滴10N NaOH溶液調pH為7.0,用水補足體積至1L。
DEPC(焦碳酸二乙酯)處理水
加100ul DEPC 于 100ml 水中,使DEPC的體積分數為0.1%。在37℃溫浴至少12h,然后在15 psi 條件下高壓滅菌20min,以使殘余的DEPC失活。DEPC會與胺起反應,不可用DEPC處理Tris緩沖液。
甲酰胺(deionized formamide)
直接購買或加Dowex XG8 混合樹脂于裝有甲酰胺的玻璃燒杯中,用磁力攪拌器輕輕攪拌1h,可去除甲酰胺中的離子。經Whatman 1號濾紙過濾除去樹脂后分成小份,充氮氣于-80℃貯存(防止氧化)。
磷酸緩沖液(phosphate buffer)
按照下表所給定的體積,混合1 mol/L 的磷酸二氫鈉(單堿)和1mol/L 磷酸氫二鈉(雙堿)貯液,獲得所需pH的磷酸緩沖液。配制1 mol/L 的磷酸二氫鈉(NaH2PO4·H2O)貯液:溶解138g于足量水中,使終體積為1L;1mol/L 磷酸氫二鈉(Na2HPO4)貯液:溶解142g于足量水中使終體積為1L。
1mol/L 磷酸二氫鈉(ml)
1mol/L 磷酸氫二鈉(ml)
最終pH值
877 850 815 775 735 685 625 565 510 450 390 330 280 123 150 185 225 265 315 375 435 490 550 610 670 720 6.0 6.1 6.2 6.3 6.4 6.5 6.6 6.7 6.8 6.9 7.0 7.1 7.2
TE(用于懸浮和貯存DNA)
成分及終濃度
配制100ml溶液各成分的用量
10mmol/L Tris-HCl 1mmol/L EDTA 水
1ml 1mol/L Tris-HCl(pH7.4-8.0,25℃)
200ul 0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)
98.8ml
Tris緩沖液(Tris-HCl buffer)
將121g的Tris堿溶解于約0.9L水中,再根據所要求的pH(25℃下)加一定量的濃鹽酸(11.6N),用水調整終體積至1L。
濃鹽酸的體積(ml)
pH
8.6 14 21 28.5 38 46 56 66 71.3 76 9.0 8.8 8.6 8.4 8.2 8.0 7.8 7.6 7.4 7.2
二.電泳緩沖液、染料和凝膠加樣液
電泳緩沖液
50×Tris-乙酸(TAE)緩沖液
成分及終濃度
配制1L溶液各成分的用量
2mol/L Tris堿
1mol/L 乙酸
mmol/L EDTA 水
242g
57.1 ml的冰乙酸(17.4 mol/L)
200ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)
補足1L
5×Tris-硼酸(TBE)緩沖液
成分及終濃度
配制1L溶液各成分的用量
445 mmol/L Tris堿
445 mmol/L 硼酸鹽mmol/L EDTA 水
54g 27.5g 硼酸 ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)
補足1L
染料
1%溴酚藍(bromophenol blue)
加1g水溶性鈉型溴酚藍于100ml水中,攪拌或渦旋混合直到完全溶解。
1%二甲苯青FF(xylene cyanole FF)
溶解1g二甲苯青FF于足量水中,定容到100ml。
10mg/ml的溴化乙錠(ethidium bromide)
小心稱取1g溴化乙錠,轉移到廣口瓶中,加100ml水,用磁力攪拌器攪拌直到完全溶解。用鋁箔包裹裝液管,于4℃貯存。
凝膠上樣液(gel loading solutions)
6×堿性凝膠上樣液(室溫貯存)
成分及終濃度
配制10ml溶液各成分用量
0.3 N 氫氧化鈉mmol/L EDTA 18%聚蔗糖(400型)
0.15%溴甲酚綠
0.25%二甲苯青FF 水
300ul 10N 氫氧化鈉
120ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
1.8g 15mg 25mg 補足到10ml
6×聚蔗糖凝膠上樣液(室溫貯存)
成分及終濃度
配制10ml溶液各成分用量
0.15%溴酚藍
0.15%二甲苯青FF 5 mmol/L EDTA 15%聚蔗糖(400型)
水
1.5ml 1%溴酚藍
1.5ml 1%二甲苯青FF
100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
1.5g 補足到10ml
6×溴酚藍/二甲苯青/聚蔗糖凝膠上樣液(室溫貯存)
成分及終濃度
配制10ml溶液各成分用量
0.25%溴酚藍
0.25%二甲苯青FF 15%聚蔗糖(400型)
水
2.5ml 1%溴酚藍 2.5ml 1%二甲苯青FF 1.5g 補足到10ml
6×甘油凝膠上樣液(4℃貯存)
成分及終濃度
配制10ml溶液各成分用量
0.15%溴酚藍
0.15%二甲苯青FF 5 mmol/L EDTA 50%甘油
水
1.5ml 1%溴酚藍
1.5ml 1%二甲苯青FF
100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
3ml 3.9ml
6×蔗糖凝膠上樣液(室溫貯存)
成分及終濃度
配制10ml溶液各成分用量
0.15%溴酚藍
0.15%二甲苯青FF 5 mmol/L EDTA 40%聚蔗糖
水
1.5ml 1%溴酚藍
1.5ml 1%二甲苯青FF
100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
4g
補足到10ml
10×十二烷基硫酸鈉/甘油凝膠上樣液(室溫貯存)
成分及終濃度
配制10ml溶液各成分用量
0.2%溴酚藍
0.2%二甲苯青FF 200 mmol/L EDTA 0.1%SDS 50%甘油
水
20mg 20mg
4ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)100ul 10% SDS 5ml 補足到10ml
三.常用培養基
LB培養基
將下列組分溶解在0.9L水中:
蛋白胨
10g
酵母提取物
5g
氯化鈉
10g
如果需要用1N NaOH(~1ml)調整pH至7.0,再補足水至1L。注:瓊脂平板需添加瓊脂粉12g/L,上層瓊脂平板添加瓊脂粉7g/L。
SOB培養基
將下列組分溶解在0.9L水中:
蛋白胨
20g
酵母提取物
5g
氯化鈉 0.5g mol/L 氯化鉀
2.5ml
用水補足體積到1L。分成100ml的小份,高壓滅菌。培養基冷卻到室溫后,再在每100ml的小份中加1ml滅過菌的1mol/L氯化鎂。
SOC培養基
成分、方法同SOB培養基的配制,只是在培養基冷卻到室溫后,除了在每100ml的小份中加1ml滅過菌的1mol/L氯化鎂外,再加2ml滅菌的1mol/L葡萄糖(18g葡萄糖溶于足夠水中,再用水補足到100ml,用0.22um的濾膜過濾除菌)。
TB培養基
將下列組分溶解在0.9L水中:
蛋白胨
12g
酵母提取物
24g
甘油
4ml
各組分溶解后高壓滅菌。冷卻到60℃,再加100ml滅菌的170mmol/L KH2PO4/0.72 mol/L K2HPO4的溶液(2.31g的KH2PO4和12.54gK2HPO4溶在足量的水中,使終體積為100ml。高壓滅菌或用0.22um的濾膜過濾除菌)。
2×YT培養基
將下列組分溶解在0.9L水中:
蛋白胨
16g
酵母提取物
10g
氯化鈉
4ml
如果需要用1N NaOH(~1ml)調整pH至7.0,再補足水至1L。注:瓊脂平板需添加瓊脂粉12g/L,上層瓊脂平板添加瓊脂粉7g/L。
YPD培養基
將下列組分溶解在0.9L水中:
蛋白胨
20g
酵母提取物
10g
葡萄糖
20g
用水補足體積為1L后,高壓滅菌。建議在高壓滅菌之前,對色氨酸營養缺陷型每升培養基添加1.6g色氨酸,因為YPD培養基是色氨酸限制型培養基。為了配制平板,需要在高壓滅菌前加入20g瓊脂粉。
四.常用抗生素
氨芐青霉素(ampicillin)(100mg/ml)
溶解1g氨芐青霉素鈉鹽于足量的水中,最后定容至10ml。分裝成小份于-20℃貯存。常以25ug/ml~50ug/ml的終濃度添加于生長培養基。
羧芐青霉素(carbenicillin)(50mg/ml)
溶解0.5g羧芐青霉素二鈉鹽于足量的水中,最后定容至10ml。分裝成小份于-20℃貯存。常以25ug/ml~50ug/ml的終濃度添加于生長培養基。
甲氧西林(methicillin)(100mg/ml)
溶解1g甲氧西林鈉于足量的水中,最后定容至10ml。分裝成小份于-20℃貯存。常以37.5ug/ml終濃度與100ug/ml氨芐青霉素一起添加于生長培養基。
卡那霉素(kanamycin)(10mg/ml)
溶解100mg卡那霉素于足量的水中,最后定容至10ml。分裝成小份于-20℃貯存。常以10ug/ml~50ug/ml的終濃度添加于生長培養基。
氯霉素(chloramphenicol)(25mg/ml)
溶解250mg氯霉素足量的無水乙醇中,最后定容至10ml。分裝成小份于-20℃貯存。常以12.5ug/ml~25ug/ml的終濃度添加于生長培養基。
鏈霉素(streptomycin)(50mg/ml)
溶解0.5g鏈霉素硫酸鹽于足量的無水乙醇中,最后定容至10ml。分裝成小份于-20℃貯存。常以10ug/ml~50ug/ml的終濃度添加于生長培養基。
萘啶酮酸(nalidixic acid)(5mg/ml)
溶解50mg萘啶酮酸鈉鹽于足量的水中,最后定容至10ml。分裝成小份于-20℃貯存。常以15ug/ml的終濃度添加于生長培養基。
四環素(tetracyyline)(10mg/ml)
溶解100mg四環素鹽酸鹽于足量的水中,或者將無堿的四環素溶于無水乙醇,定容至10ml。分裝成小份用鋁箔包裹裝液管以免溶液見光,于-20℃貯存。常以10ug/ml~50ug/ml的終濃度添加于生長培養基。