第一篇：淀粉降解菌的分離與篩選實驗與總結

第一章

緒

論

1.1 簡介

1.1.1 淀粉

淀粉是葡萄糖的高聚體，通式是(C6H10O5)n，水解到二糖階段為麥芽糖，化學式是(C12H22O11），完全水解后得到葡萄糖，化學式是(C6H12O6)。淀粉有直鏈淀粉和支鏈淀粉兩類。淀粉是植物體中貯存的養分，貯存在種子和塊莖中，各類植物中的淀粉含量都較高。

淀粉可分為直鏈淀粉（糖淀粉）和支鏈淀粉（膠淀粉）。前者為無分支的螺旋結構； 后者以24~30個葡萄糖殘基以α-1,4-糖苷鍵首尾相連而成，在支鏈處為α-1,6-糖苷鍵。直鏈淀粉遇碘呈藍色，支鏈淀粉遇碘呈紫紅色。這并非是淀粉與碘發生了化學反應(reaction)，而是產生相互作用(interaction)，而是淀粉螺旋中央空穴恰能容下碘分子，通過范德華力，兩者形成一種藍黑色錯合物。實驗證明，單獨的碘分子不能使淀粉變藍，實際上使淀粉變藍的是碘分子離子。

本實驗的檢測方式則利用了直鏈淀粉遇碘呈藍色的特點。1.1.2 淀粉廢水的產生

淀粉是一種重要的化工原料，廣泛應用于食品、化工、紡織、造 紙、醫藥等行業。而在淀粉生產中會排放大量廢水屬高濃度有機廢水，其 COD 濃度幾千甚至上萬，BOD 濃度也有幾千，SS量也較高。如將廢水直接排放，不僅是水資源的巨大浪費，而且將造成嚴重的環境污染。因此，國內外學者都在力求研究出一種快速、高效、低能耗的淀粉廢水處理工藝。1.1.3 淀粉廢水的處理方式

對于淀粉廢水的治理，由于其污染物濃度高，危害大的特點，所以普通的化學治理方法難以達到很好的治理效果。目前對于淀粉廢水的處理研究廣泛采用生物治理方式，其技術方案大致包括厭氧生物處理法和好氧生物處理法。

1.2 國內外的研究進展

續前面所提到的厭氧生物處理法和好氧生物處理法，下面筆者將簡單介紹兩種方式的應用特點。(1)厭氧生物法

厭氧法處理淀粉廢水，其最終產物是以甲烷為主的可燃氣體，可作為能源回收利用；剩余污泥量少且易于脫水濃縮，可作為肥料使用；處理工藝運轉費用低。在當前能源日益緊張的形勢下，該方法作為一種低能耗，可回收資源的處理工藝日益受到世界各國的重視。近年來，厭氧發酵法處理淀粉廢水主要有升流式厭氧污泥床(UASB)、厭氧流化床(AFB)、厭氧接觸法(ACP)、兩相厭氧消化法(TPAD)和厭氧濾池(AF)等。(2)好氧生物法

同厭氧生物法相比，好氧生物處理法具有處理能力強、出水水質好、占地少的優點，因此被當前各國廣泛應用。近幾十年來，國內外對好氧生物處理法的凈化機理和曝氣原理進行了大量的實驗研究，使好氧生物處理法在設計和運行方面有了很大的改進和革新，特別是在 處理高濃度有機廢水方面，取得了一定的成果。但與厭氧法相比，好氧生物法在處理淀粉加工廢水方面有許多不足之處，例 如需要充氧、動力消耗大、無能量回收、微生物所需營養多和污泥量大等適合處理低濃度的有機廢水。而淀粉廢水的 COD 一般較大，所以在淀粉廢水的處理中單獨應用的較少，主要是活性污泥法、接觸氧化法、生物氧化塘法和 SBR 法。在淀粉加工廢水的處理中，好氧生物處理一般用作后續處理。

1.3 實驗目的與意義

1.3.1 實驗目的

(1).掌握微生物分離和篩選的基本方法及技術(2).鞏固微生物實驗操作的能力 1.3.2 實驗意義

淀粉廢水中的污染物濃度高，危害大，普通的化學治理方法又難以達到很好的治理效果，如果任其肆意泛濫，勢必影響到生態環境和人民的身體健康，長遠來看這更會影響到我國人口、經濟、社會、資源、環境等各方面的可持續發展。由此，淀粉廢水問題儼然成為了一個大問題，如此對其治理也更加是任重而道遠。目前對于淀粉廢水的處理研究廣泛采用生物治理方式，但多種方案都有一定的欠缺之處，一直沒有一個完善合理的辦法來解決淀粉廢水的問題。所以我們有必要去深入學習并領悟對其處理的方案及過程。

微生物方法對環境污染的治理有著十分重要的作用及非常可觀的前景，所以對于每一個環境工程專業的同學接觸同微生物分離與篩選有關的實驗都是有重要價值，無論是對于理論的理解，對專業的認識，還是對實踐的把握都是有著深刻意義的。

第2章

實驗的材料與方法

2.1 實驗材料

2.1.1 實驗儀器

500ml燒杯*1，500ml錐形瓶*1，250ml錐形瓶*1，培養皿*10，試管*5，1ml移液管*1，10ml移液管*1，酒精燈*1，加熱套*1，棉塞，棉繩，報紙若干。2.1.2實驗藥品

活性污泥，(NH4)2SO4 5g，KH2PO4 5g，淀粉5g，蛋白胨1.5g，牛肉膏3g，瓊脂8g，蒸餾水400ml，（鹽酸，氫氧化鈉適量）

2.2 實驗方法

2.2.1 實驗原理

淀粉酶能使淀粉分解成葡萄糖，而淀粉與碘液發生反應形成藍色化合物，葡萄糖不與碘液發生反應形成藍色化合物。能分泌淀粉酶的菌落能在周圍形成淀粉圈，從而通過碘液即可篩選出淀粉酶產生菌。

在活性污泥中的微生物通過初篩、復篩等過程可以達到分離的目的。初篩是對所得的純種進行檢測。由于淀粉酶是胞外酶，在分離培養基中加適量可溶淀粉通過平板透明圈法來檢測淀粉酶產生菌。篩選透明圈比值大的菌株接種到培養基中進行培養。

2.2.2 實驗步驟

1.固體淀粉培養基（周二）

固體培養基（NH4）2SO4

5g，KH2PO

45g，淀粉5g，蛋白胨1.5g，牛肉膏3g，瓊脂8g，蒸餾水400ml，pH 7.0—7.5放于燒杯在加熱套上加熱，待瓶中顆粒完全融化后停止加熱并倒入錐形瓶（500ml）然后用棉塞塞住瓶口，再用棉繩系好。試管、培養皿、移液管、錐形瓶一同高壓蒸汽滅菌。2.培養（周三）

取5支試管（無菌），用移液管（無菌）吸取1mL活性污泥放入裝有9.0mL無菌水的試管中吹吸數次混勻后即為10-1，再用無菌移液管吸取10-1的菌懸液1mL放入裝有9.0mL無菌水的試管中吹吸數次混勻即為l0-2稀釋液，照此方法分別制成l0-3～l0-5的稀釋液。將10-1～10-5稀釋液1mL涂布于平板培養基表面。用對應的移液管按濃度順序依低到高分別往培養皿中各加1ml菌液，并標注對應的標簽為10-1～10-5，在無菌條件下往各個培養皿中加入加熱后適當溫度的培養液，置于37℃的恒溫培養箱中培養24h（可適當延長）。3.初篩（周四）

制作兩個平板，在長出的菌落中，找出獨立菌株并滴加碘液，挑取有淀粉水解圈的單菌落，在兩個平板進行劃線并培養24h（37℃）（時間可調整）。4.復篩（周五）

兩個平板初篩菌株在同一塊平板上分別劃線培養，培養72h（37℃）（時間可調整）。5.精篩（周一）

用滴加碘液的方式挑選出最佳菌株 6.菌種鑒定（周二）

最后通過觀察篩選到的菌株的菌落大小、形態，顏色及革蘭氏染色等情況對篩選到的菌株進行初步鑒定。

（以上內容為原定步驟，在實際操作中由于條件變化情況，個別細節會有所改動，下文將說明）

第3章

實驗過程與結果

3.1 實驗過程

按照試驗設計步驟的大方向進行試驗，個別細節有所改變，具體過程及試驗時間如下：

(1)配置固體淀粉培養基（周二）

固體培養基（NH4）2SO4 5g，KH2PO

45g，淀粉5g，蛋白胨1.5g，牛肉膏3g，瓊脂8g，蒸餾水400ml，pH 7.0—7.5放于燒杯在加熱套上加熱，待瓶中顆粒完全融化后停止加熱并倒入錐形瓶（500ml）然后用棉塞塞住瓶口，再用棉繩系好。試管、培養皿、移液管、錐形瓶一同高壓蒸汽滅菌。(2)培養（周三）

取5支試管（無菌），用移液管（無菌）吸取1mL活性污泥放入裝有9.0mL無菌水的試管中吹吸數次混勻后即為10-1，再用無菌移液管吸取10-1的菌懸液1mL放入裝有9.0mL無菌水的試管中吹吸數次混勻即為l0-2稀釋液，照此方法分別制成l0-3～l0-5的稀釋液。將10-1～10-5稀釋液1mL涂布于平板培養基表面。用對應的移液管按濃度順序依低到高分別往培養皿中各加1ml菌液，并標注對應的-1-5標簽為10～10，在無菌條件下往各個培養皿中加入加熱后適當溫度的培養液，置于37℃的恒溫培養箱中培養48h。培養24h后取培養基進行觀察，并無明顯菌落生成。

(3)初篩（周五）

經48h培養后已經有較多菌株生成，通過滴加碘液選取幾株長勢較好，水解圈較大的菌株（圖一）

制作兩個平板，在長出的菌落中，滴加碘液選取的菌株挑取出來，在兩個平板進行劃線并在37℃的恒溫箱中培養72h。

(5)復篩（周一）

選取兩個平板中經初篩后長勢較好的菌株（圖二）在同一塊平板上分別劃線，在37℃的恒溫箱中培養24h。

3.2 實驗結果

菌種鑒定（周二）

最后通過革蘭氏染色對篩選到的菌株進行鑒定。染色后的顯微觀察圖（圖三）

最終觀察發現該菌落為白色濕潤，易挑取。革蘭氏染色后的顯微觀察為紅色桿狀菌體。

6

結

論

經過此次實驗，本組同學成功地篩選和分離出了一株淀粉降解菌，即在淀粉培養基內的該菌株附近有明顯的水解圈，且經碘液檢測水解圈內的淀粉已經水解。同時本組采用的方法有簡便、易行、快速的優點。

通過對整個環境處理方式的觀察，廢水處理工藝技術越來越向著多種技術組合為一體的新技術、新工藝發展，將其他物理、化學法同生物法相結合的綜合手段往往具有效率高，運行好等諸多優點。可以看出，環境廢水處理正朝著綜合、系統、高科技的方向發展，不僅對于淀粉廢水，甚至對于整個工業的發展都是是必不可少的配套技術，其意義十分深遠。

但是，對廢水的治理畢竟還只是一種被動的環境保護手段，不能從根本上解決環境和生產之間的矛盾，所以在淀粉產品開發及生產過程中，應盡量優化原料的使用和加工的手段，從污染源頭削減產污量，使廢消除在生產過程中，最終實現環境、經濟、效益的統一。

個人體會與建議

以下是本人對實驗操作過程中出現問題的思考總結：

1.固體培養基配方中瓊脂的成分偏低，造成培養基凝固性差，給劃線培養增加了較大的難度。

2.沒有設置關于降解菌對淀粉降解能力測定的實驗環節，未能取得有說服力的實驗數據。

3.實驗操作水平不高，影響實驗效率。

4.理論知識及實驗經驗缺乏，不能準確預計菌落生長所需的時間。

個人體會

本次實驗我們以小組的形式進行了從活性污泥中分離和篩選出具有特定功能的環境微生物，對其功能進行了初步的鑒定，及觀察菌落形態、染色并鏡檢對其進行菌種鑒定的過程。

這是一個綜合的技術訓練，通過這次訓練，讓我對環境微生物的作用的理解更為加深了，而且更加深刻的明白了實踐與理論相結合的重要性。

建議

如果條件允許希望可以優化實驗設施，改善實驗條件

第二篇：直鏈淀粉的分離純化--自己總結

橡實直鏈淀粉與支鏈淀粉的分離純化

謝 濤,陳建華,謝碧霞

(中南林學院資源與環境學院,中國湖南株洲412006)

1.2.3 橡實直鏈淀粉與支鏈淀粉的分離純化

取10 g橡實淀粉,先以少量的無水乙醇潤濕,再加200 mL 0.5 mol/L的NaOH溶液,在熱水浴中加熱分散至整個淀粉糊完全透明,冷至室溫,離心(6 000 r/min,20 min)除去不溶性雜質.淀粉糊以2 mol/L的HCl調至中性,再加90 mL正丁醇和異戊醇混合溶液,混合液中V(正丁醇)∶V(異戊醇)=3∶1,在沸水浴中加熱攪拌至整個體系透明,冷卻至室溫,置于7℃冰箱中過夜,離心(6 000 r/min,20 min),沉淀物和上清液分別處理如下.將沉淀物加入120 mL飽和的正丁醇水溶液,在沸水浴中加熱攪拌至溶液分散透明,冷至室溫,在7℃冰箱中過夜,離心(6 000 r/min,20 min).按上述步驟所得的沉淀物重復處理5~10次(即重結晶5~10次).然后將沉淀物浸于無水乙醇中24 h,再反復以無水乙醇洗滌沉淀后,置于室溫下真空干燥,此時得到的是純化的直鏈淀粉樣品.無水乙醇洗滌沉淀的目的是除去直鏈淀粉中所絡合的正丁醇.上清液中加入10 mL正丁醇于沸水浴中加熱攪拌至溶液分散透明,冷至室溫,在7℃冰箱中過夜,離心(6 000 r/min,20 min),重復上述操作2~3次.將上清液真空濃縮后,加入冷的無水乙醇進行沉淀,再以無水乙醇洗滌沉淀物數次,室溫下真空干燥得到純化的支鏈淀粉樣品.芋頭淀粉的分離和純化

孫忠偉 張燕萍 向傳萬

(江南大學食品學院,無錫, 214036)

干燥的芋頭淀粉,用體積分數85%甲醇脫脂24h后,用無水乙醇脫脂6h,在40℃干燥48h,待用。

1·3·2 直鏈淀粉與支鏈淀粉的分離與純化

1·3·2·1 直鏈淀粉與支鏈淀粉的粗分離

稱取10g芋頭淀粉,放入500mL燒杯中,加少量的無水乙醇,使樣品濕潤,再加入0·5mol/LNaOH溶液200mL。在沸水浴中加熱攪拌20~30min至完全分散。冷卻后離心(6000r/min,20min),去除未分散的殘渣(沉淀部分)。用2mol/LHCl中和離心液,并加入100mL正丁醇-異戊醇(體積比3∶1)混合液,然后在沸水浴中加熱攪拌20 min,此時溶液透明,冷卻至室溫,移入2~4℃冰箱靜置24 h,離心(6 000 r/min, 20min),沉淀物即為粗直鏈淀粉,上清液即為粗支鏈淀粉溶液。分別收集備用。1·3·2·2 直鏈淀粉的純化

將沉淀物即粗直鏈淀粉全部轉移至裝有120mL正丁醇飽和水溶液,然后置沸水浴中攪拌直至溶液分散透明,再逐漸冷卻至室溫,移入冰箱內(2~4℃)保持24 h,取出離心(6 000 r/min,20min),將得到的沉淀重復上述操作6次,然后將沉淀物浸入無水乙醇中24h,以無水乙醇洗滌沉淀數次,該沉淀于室溫下真空干燥,即得直鏈淀粉純品。無水乙醇沉淀的目的是除去直鏈淀粉中絡合的正丁醇。

1·3·2·3 支鏈淀粉的純化

支鏈淀粉溶液置于分液漏斗中靜置,取下層溶液加40mL正丁醇-異戊醇(體積

比1∶1)混和液,在沸水浴中加熱攪拌直至溶液分散透明,冷卻至室溫,移入冰箱于2~4℃靜置48h,離心(6000r/min,20min),去除沉淀物,用上清液重復上述操作3~5次,所得上清液減壓濃縮至原體積的一半,加入2倍體積的無水乙醇沉淀、離心,將沉淀溶于熱的200mL 0·5mol/L NaOH溶液中,離心去沉淀,離心液中再加入2倍體積的無水乙醇,將沉淀溶于200mL的蒸餾水中,用2倍體積的無水乙醇再沉淀,以無水乙醇洗滌數次,室溫下真空干燥,即得支鏈淀粉純品。

直鏈淀粉的分級制備研究

劉志強,益小蘇

(浙江大學高分子科學與工程系,浙江杭州310027)

1.3 原淀粉的去脂處理

(1)將210 g丙三醇或正丁醇與去離子水配成醇濃度為70%或85%的處理液,倒入500 mL的三頸燒瓶中.加入16 g淀粉,配成固含量約5%的淀粉懸浮液.(2)將燒瓶放入超級恒溫水槽中,通氮氣保護,攪拌溶液.控制水浴溫度,使其在1~1.5 h中由

30℃上升至89℃.在89℃保持1 h后將燒瓶撤離水浴.(3)待燒瓶中的溶液冷卻至25℃,將其分成兩份,分別倒入500 mL的三頸燒瓶中,各加入300mL無水乙醇,攪拌1 h.(4)攪拌結束后,將懸浮液抽濾,用無水乙醇沖洗沉淀約3~4次,得到不含處理液的去脂淀粉.1.4 分散法分級

(1)將二甲基亞砜(DMSO)400 mL和去離子水100 mL倒入1 000 mL的燒杯,配成分散溶液.然后加入50 g淀粉,室溫下攪拌若干小時(4,8,18 h),溶液呈乳液狀.(2)將乳液倒入1 000 mL燒瓶中,在某一溫度(60,80,100℃)的恒溫水浴中攪拌加熱30 min,然后加入100 mL的正丁醇,同時不停地攪拌5 min.(3)將溶液撤離水浴,冷卻至室溫,溶液中有細針狀沉淀出現.用高速沉淀機分離沉淀(2 000r/min,30 min).(4)取出沉淀于500 mL燒瓶中,加入200 mL的1% NaCl溶液,在80℃的恒溫水浴中加熱30min,此時沉淀完全溶解.緩慢滴加100 mL正丁醇于熱溶液中,同時用玻棒攪拌.(5)滴加結束后,將燒瓶撤離水浴,靜止冷卻至室溫.用高速沉淀機分離出沉淀(2 000 r/min, 30 min).(6)根據需要重復(4),(5)步,增加重結晶次數.(7)取出沉淀置于培養皿,在70℃真空烘箱中干燥至恒重,得到直鏈級分.1.5 水浸法分級

(1)取8 g淀粉,350 mL去離子水倒入500 mL的三頸燒瓶中,配成濃度約為2%的淀粉懸浮液,用pH為6.3的磷酸緩沖液調節懸浮液的pH值為6.3.(2)將該懸浮液放入某一溫度(70,80,90,98℃)的恒溫水浴中,攪拌,通氮氣保護.(3)保持15 min后,立即把溶液轉移至薄壁塑料杯,放入冰鹽浴中進行快速冷卻.(4)把已冷卻的懸浮液用離心沉淀機離心30 min,轉速為2 000 r/min.(5)抽取上層清液,將其在60℃水浴中加熱10 min后,緩慢滴加200 mL正丁醇,同時不停地攪拌,直至白色細針狀沉淀生成.(6)用離心沉淀機分離沉淀(2000 r/min,10 min).(7)取出沉淀放入培養皿中,在70℃真空烘箱中干燥至恒重,得到完全干燥的直鏈級分.【玉米淀粉】

直鏈淀粉提純方法的研究

無錫輕工大學食品學院(214036)

楊光丁霄霖

2·3·3堿液分散法

先加少量無水乙醇將淀粉充分濕潤,加入0·5MNaOH溶液,沸水浴10~30min,用2NHCl溶液中和至pH7·5左右,加入丁醇-異戊醇(1∶1, v/ v),沸水浴10~30min,冷卻至室溫后,于4℃下靜置至少12h,離心(1000r/min)20min,得到沉淀物,加適量丁醇飽和水溶液,沸水浴15~30min,不斷攪拌,使沉淀物完全溶解,于4~25℃下靜置3~12h,離心(1000r/min)20min,得到沉淀;如此循環3次以上,然后分別用78%乙醇洗滌3次,用95%乙醇洗滌3次,用無水乙醇洗滌3次,于40℃下真空干燥,即得直鏈淀粉純品。

3·結果與分析

3·1堿液分散法

采用堿液分散法時,加入丁醇后,靜置2~6h,即形成大量的沉淀,用普通離心機進行離心,可以將沉淀很好地分離。但是,應注意靜置的溫度不宜過低,否則,容易導致直鏈淀粉的老化。老化后的直鏈淀粉不溶于水,甚至加熱至沸騰也不溶解,給以后的使用帶來麻煩。直鏈淀粉老化主要是由直鏈淀粉結晶造成的,因此,隨著純化次數的增加,飽和丁醇水溶液的添加量也應該相應有所增加,使淀粉濃度適當稀釋,盡量避免發生淀粉老化。

葛根直鏈淀粉和支鏈淀粉分離純化的研究

杜先鋒 許時嬰 王 璋

(無錫輕工大學食品學院,無錫,214036)

1.3.2 淀粉組分的分離和純化

取10g葛根淀粉,先以少量的無水乙醇潤濕,再加200ml 0.5mol/L NaOH溶液,在熱水浴中加熱分散至整個淀粉糊完全透明,冷至室溫,離心(6000r/min,20min)除

去不溶性雜質。淀粉糊以2mol/L HCl調至中性,再加90ml正丁醇-異戊醇(3∶1,V∶V)溶液,在沸水浴中加熱攪拌至整個體系透明,冷卻至室溫,置于7℃冰箱中過夜,離心(6000r/min, 20min),沉淀物和上清液分別處理如下:

(1)沉淀物加120ml飽和的正丁醇水溶液,在沸水浴中加熱攪拌至溶液分散透明,冷至室溫,在7℃冰箱中過夜,離心(6000r/min,20min),所得的沉淀物按上述步驟重復操作5~10次(即重結晶5~10次),然后將沉淀物浸于無水乙醇中24h,再反復以無水乙醇洗滌沉淀,該沉淀物于室溫下真空干燥,得到純化的直鏈淀粉樣品。無水乙醇洗滌沉淀的目的是除去直鏈淀粉中所絡合的正丁醇。

(2)上清液中加入10ml正丁醇于沸水浴中加熱攪拌至溶液分散透明,冷至室溫,在7℃冰箱中過夜,離心(6000r/min,20min),重復上述操作2~3次。上清液經真空濃縮后,加冷的無水乙醇進行沉淀,再以無水乙醇洗滌沉淀物數次,室溫下真空干燥得到純化的支鏈淀粉樣品。

馬鈴薯直鏈淀粉與支鏈淀粉的分離方法

吉宏武丁霄霖

A無錫輕工業大學食品學院

2.3淀粉的分散

稱取10g干淀粉分散于100ml,水中，然后慢慢地倒入1.3L0.15mol/LNaOH中，并輕輕攪拌均勻，靜置5min后加360ml5%NaCl溶液，用HCl中和至pH為6.5-7.5，在室溫下放置15-20h，分為兩層，將上清液吸出，經兩次過濾，即為直鏈淀粉粗提液，下層膠體為支鏈淀粉粗提液。

2.4直鏈淀粉的純化

直鏈淀粉粗提液，按10:1體積比加入重蒸的正丁醇，在常溫下攪拌1h，靜置3h后，將部分沉淀物離心(3500r/min,20min)，沉淀物再用正丁醇攪拌飽和1h、靜置、離心，重復四次后，將沉淀物轉至無水乙醇中浸泡24h，再用乙醇洗滌幾次，在室溫下真空干燥，即為直鏈淀粉。

2.5支鏈淀粉的純化

支鏈淀粉粗提液經離心后(30min,20°C,7000r/min)，棄去上清液，沉淀物加入適量的1%NaCl,并輕輕攪動，放置15h左右，待其分層后，棄去上清液，部分沉淀物離心(30min,20°C,7000r/min)，棄去上清液，沉淀物再加入適量的1%NaCl,并輕輕攪動，靜置、離心，重復四次后，將沉淀物轉至無水乙醇中放置一夜，再用無水乙醇洗滌3-5次，室溫下真空干燥，即為支錠淀粉純品。

[玉米淀粉]

直鏈淀粉和支鏈淀粉純品的提取及其鑒定

（江南大學食品學院，無錫）

洪雁顧正彪劉曉欣

1.2.1直鏈淀粉和支鏈淀粉的分離與純化

1.2.1.1直鏈淀粉與支鏈淀粉的粗分離

稱取10g玉米淀粉，加入少量無水乙醇分散并濕潤樣品，再加入350ml 0.5mol/L的氫氧化鈉，在沸水浴中攪拌10min，使溶液清澈透明，無結團狀，冷卻后冷凍，高速離心（8000r/min）10min，用2mol/L的鹽酸中和至中性，加入100mL3:1丁醇(異戊醇的混合液，在沸水浴中加熱攪拌10min后，冷卻至室溫，于2-4°C的冰箱中靜置24h，取出，冷凍，高速離心（8000r/min）10min，得到的沉淀物為粗直鏈淀粉，離心液為粗支鏈淀粉。

1.2.1.2直鏈淀粉的純化

將粗直鏈淀粉沉淀全部移入丁醇飽和的200ml水中，加熱溶解至溶液透明，冷卻至室溫后放入2-4°C的冰箱中靜置24h，取出，冷凍，高速離心（8000r/min）20min，得沉淀物，再純化數次后，將沉淀物在砂芯漏斗中過濾，用無水乙醇洗滌數次，樣品在40°C的鼓風干燥箱中干燥8h，即得純直鏈淀粉。

1.2.1.3支鏈淀粉的純化

將粗支鏈淀粉離心液在分液漏斗中靜置數分鐘后，分成三層，取下層乳膠體溶液，加40ml1:1丁醇(異戊醇的混合液，于沸水浴中加熱攪拌10min，冷卻后放入2-4°C的冰箱中靜置48h后，冷凍，高速離心（8000r/min）10min，離心液中緩緩加入二倍體積的無水乙醇，在2-4°C的冰箱內靜置24h，將沉淀物溶于熱的0.5mol/L氫氧化鈉溶液，依上述方法純化數次，用無水乙醇脫水洗滌，樣品在40°C的鼓風干燥箱中干燥8h，即得純支鏈淀粉。

第三篇：小實驗——胡椒粉與鹽巴的分離

胡椒粉與鹽巴的分離

思考：不小心將廚房的佐料：胡椒粉與鹽巴混在了一起，用什么方法將他們分離開呢？

材料：胡椒粉、鹽巴、塑料湯勺、小盤子 操作：

1、將鹽巴與胡椒粉相混在一起。

2、用筷子攪拌均勻。

3、塑料湯勺在衣服上摩擦后放在鹽巴與胡椒粉的上方。

4、胡椒粉先粘附在湯勺上。

5、將塑料湯勺稍微向下移動一下。

6、鹽巴后粘附在湯勺上。講解：

胡椒粉比鹽巴早被靜電吸附的原因，是因為它的重量比鹽巴輕。創造：

你能用這種方法將其他混合的原料分離嗎？

第四篇：高中化學實驗匯總與總結

化學實驗中的先與后22例

1.加熱試管時，應先均勻加熱后局部加熱。

2.用排水法收集氣體時，先拿出導管后撤酒精燈。

3.制取氣體時，先檢驗氣密性后裝藥品。

4.收集氣體時，先排凈裝置中的空氣后再收集。

5.稀釋濃硫酸時，燒杯中先裝一定量蒸餾水后再沿器壁緩慢注入濃硫酸。

6.點燃H2、CH4、C2H4、C2H2等可燃氣體時，先檢驗純度再點燃。

7.檢驗鹵化烴分子的鹵元素時，在水解后的溶液中先加稀HNO3再加AgNO3溶液。

8.檢驗NH3(用紅色石蕊試紙)、Cl2(用淀粉KI試紙)、H2S[用Pb(Ac)2試紙]等氣體時，先用蒸餾水潤濕試紙后再與氣體接觸。

9.做固體藥品之間的反應實驗時，先單獨研碎后再混合。

10.配制FeCl3，SnCl2等易水解的鹽溶液時，先溶于少量濃鹽酸中，再稀釋。

11.中和滴定實驗時，用蒸餾水洗過的滴定管先用標準液潤洗后再裝標準掖；先用待測液潤洗后再移取液體；滴定管讀數時先等一二分鐘后再讀數；觀察錐形瓶中溶液顏色的改變時，先等半分鐘顏色不變后即為滴定終點。

12.焰色反應實驗時，每做一次，鉑絲應先沾上稀鹽酸放在火焰上灼燒到無色時，再做下一次實驗。

13.用H2還原CuO時，先通H2流，后加熱CuO，反應完畢后先撤酒精燈，冷卻后再停止通H2。

14.配制物質的量濃度溶液時，先用燒杯加蒸餾水至容量瓶刻度線1cm～2cm后，再改用膠

頭滴管加水至刻度線。

15.安裝發生裝置時，遵循的原則是：自下而上，先左后右或先下后上，先左后右。

16.濃H2SO4不慎灑到皮膚上，先迅速用布擦干，再用水沖洗，最后再涂上3％一5%的 NaHCO3

溶液。沾上其他酸時，先水洗，后涂 NaHCO3溶液。

17.堿液沾到皮膚上，先水洗后涂硼酸溶液。

18.酸(或堿)流到桌子上，先加 NaHCO3溶液(或醋酸)中和，再水洗，最后用布擦。

19.檢驗蔗糖、淀粉、纖維素是否水解時，先在水解后的溶液中加NaOH溶液中和H2SO4，再

加銀氨溶液或Cu(OH)2懸濁液。

20.用pH試紙時，先用玻璃棒沾取待測溶液涂到試紙上，再把試紙的顏色跟標準比色卡對比，定出pH。

2+2+ 21.配制和保存Fe，Sn等易水解、易被空氣氧化的鹽溶液時；先把蒸餾水煮沸趕走O2，再溶解，并加入少量的相應金屬粉末和相應酸。

22.稱量藥品時，先在盤上各放二張大小，重量相等的紙(腐蝕藥品放在燒杯等玻璃器皿)，再放藥品。加熱后的藥品，先冷卻，后稱量。

八.實驗中導管和漏斗的位置的放置方法

在許多化學實驗中都要用到導管和漏斗，因此，它們在實驗裝置中的位置正確與否均直接影響到實驗的效果，而且在不同的實驗中具體要求也不盡相同。下面擬結合實驗和化學課本中的實驗圖，作一簡要的分析和歸納。

1.氣體發生裝置中的導管；在容器內的部分都只能露出橡皮塞少許或與其平行，不然將不利于排氣。

2.用排空氣法(包括向上和向下)收集氣體時，導管都必領伸到集氣瓶或試管的底部附近。這樣利于排盡集氣瓶或試管內的空氣，而收集到較純凈的氣體。

3.用排水法收集氣體時，導管只需要伸到集氣瓶或試管的口部。原因是“導管伸入集氣瓶和試管的多少都不影響氣體的收集”，但兩者比較，前者操作方便。

4.進行氣體與溶液反應的實驗時，導管應伸到所盛溶液容器的中下部。這樣利于兩者接觸，充分反應。

5.點燃H2、CH4等并證明有水生成時，不僅要用大而冷的燒杯，而且導管以伸入燒杯的1/3為宜。若導管伸入燒杯過多，產生的霧滴則會很快氣化，結果觀察不到水滴。

6.進行一種氣體在另一種氣體中燃燒的實驗時，被點燃的氣體的導管應放在盛有另一種氣體的集氣瓶的中央。不然，若與瓶壁相碰或離得太近，燃燒產生的高溫會使集氣瓶炸裂。

7.用加熱方法制得的物質蒸氣，在試管中冷凝并收集時，導管口都必須與試管中液體的液面始終保持一定的距離，以防止液體經導管倒吸到反應器中。

8.若需將HCl、NH3等易溶于水的氣體直接通入水中溶解，都必須在導管上倒接一漏斗并使漏斗邊沿稍許浸入水面，以避免水被吸入反應器而導致實驗失敗。

9.洗氣瓶中供進氣的導管務必插到所盛溶液的中下部，以利雜質氣體與溶液充分反應而除盡。供出氣的導管則又務必與塞子齊平或稍長一點，以利排氣。

10.制H2、CO2、H2S和C2H2等氣體時，為方便添加酸液或水，可在容器的塞子上裝一長頸漏斗，且務必使漏斗頸插到液面以下，以免漏氣。

11.制Cl2、HCl、C2H4氣體時，為方便添加酸液，也可以在反應器的塞子上裝一漏斗。但由于這些反應都需要加熱，所以漏斗頸都必須置于反應液之上，因而都選用分液漏斗。特殊試劑的存放和取用10例

1.Na、K：隔絕空氣；防氧化，保存在煤油中(或液態烷烴中)，(Li用石蠟密封保存)。用鑷子取，玻片上切，濾紙吸煤油，剩余部分隨即放人煤油中。

2.白磷：保存在水中，防氧化，放冷暗處。鑷子取，并立即放入水中用長柄小刀切取，濾紙吸干水分。

3.液Br2：有毒易揮發，盛于磨口的細口瓶中，并用水封。瓶蓋嚴密。

4.I2：易升華，且具有強烈刺激性氣味，應保存在用蠟封好的瓶中，放置低溫處。

5.濃HNO3，AgNO3：見光易分解，應保存在棕色瓶中，放在低溫避光處。

6.固體燒堿：易潮解，應用易于密封的干燥大口瓶保存。瓶口用橡膠塞塞嚴或用塑料蓋蓋緊。

7.NH3?H2O：易揮發，應密封放低溫處。

8.C6H6、、C6H5—CH3、CH3CH2OH、CH3CH2OCH2CH3：易揮發、易燃，應密封存放低溫處，并遠離火源。

2+ 9.Fe鹽溶液、H2SO3及其鹽溶液、氫硫酸及其鹽溶液：因易被空氣氧化，不宜長期放置，應現用現配。

10.鹵水、石灰水、銀氨溶液、Cu(OH)2懸濁液等，都要隨配隨用，不能長時間放置。中學化學中與“0”有關的實驗問題4例

1.滴定管最上面的刻度是0。2.量筒最下面的刻度是0。

3.溫度計中間刻度是0。4.托盤天平的標尺中央數值是0。

能夠做噴泉實驗的氣體

NH3、HCl、HBr、HI等極易溶于水的氣體均可做噴泉實驗。其它氣體若能極易溶于某液體中時(如CO2易溶于燒堿溶液中)，亦可做噴泉實驗。

主要實驗操作和實驗現象的具體實驗80例

1．鎂條在空氣中燃燒：發出耀眼強光，放出大量的熱，生成白煙同時生成一種白色物質。

2．木炭在氧氣中燃燒：發出白光，放出熱量。

3．硫在氧氣中燃燒：發出明亮的藍紫色火焰，放出熱量，生成一種有刺激性氣味的氣體。

4．鐵絲在氧氣中燃燒：劇烈燃燒，火星四射，放出熱量，生成黑色固體物質。

5．加熱試管中碳酸氫銨：有刺激性氣味氣體生成，試管上有液滴生成。

6．氫氣在空氣中燃燒：火焰呈現淡藍色。7．氫氣在氯氣中燃燒：發出蒼白色火焰，產生大量的熱。

8．在試管中用氫氣還原氧化銅：黑色氧化銅變為紅色物質，試管口有液滴生成。

9．用木炭粉還原氧化銅粉末，使生成氣體通入澄清石灰水，黑色氧化銅變為有光澤的金屬

顆粒，石灰水變渾濁。

10．一氧化碳在空氣中燃燒：發出藍色的火焰，放出熱量。

11.向盛有少量碳酸鉀固體的試管中滴加鹽酸：有氣體生成。

12．加熱試管中的硫酸銅晶體：藍色晶體逐漸變為白色粉末，且試管口有液滴生成。

13．鈉在氯氣中燃燒：劇烈燃燒，生成白色固體。

14．點燃純凈的氯氣，用干冷燒杯罩在火焰上：發出淡藍色火焰，燒杯內壁有液滴生成。

5．向含有C1的溶液中滴加用硝酸酸化的硝酸銀溶液，有白色沉淀生成。

2-16．向含有SO4的溶液中滴加用硝酸酸化的氯化鋇溶液，有白色沉淀生成。

17．一帶銹鐵釘投入盛稀硫酸的試管中并加熱：鐵銹逐漸溶解，溶液呈淺黃色，并有氣體生成。

18．在硫酸銅溶液中滴加氫氧化鈉溶液：有藍色絮狀沉淀生成。

19．將Cl2通入無色KI溶液中，溶液中有褐色的物質產生。

20．在三氯化鐵溶液中滴加氫氧化鈉溶液：有紅褐色沉淀生成。

21．盛有生石灰的試管里加少量水：反應劇烈，發出大量熱。

22．將一潔凈鐵釘浸入硫酸銅溶液中：鐵釘表面有紅色物質附著，溶液顏色逐漸變淺。

23．將銅片插入硝酸汞溶液中：銅片表面有銀白色物質附著。

24．向盛有石灰水的試管里，注入濃的碳酸鈉溶液：有白色沉淀生成。

25．細銅絲在氯氣中燃燒后加入水：有棕色的煙生成，加水后生成綠色的溶液。

26．強光照射氫氣、氯氣的混合氣體：迅速反應發生爆炸。

27.紅磷在氯氣中燃燒：有白色煙霧生成。28．氯氣遇到濕的有色布條：有色布條的顏色退去。

29．加熱濃鹽酸與二氧化錳的混合物：有黃綠色刺激性氣味氣體生成。

30．給氯化鈉(固)與硫酸(濃)的混合物加熱：有霧生成且有刺激性的氣味生成。

31.在溴化鈉溶液中滴加硝酸銀溶液后再加稀硝酸：有淺黃色沉淀生成。

32．在碘化鉀溶液中滴加硝酸銀溶液后再加稀硝酸：有黃色沉淀生成。

33．I2遇淀粉，生成藍色溶液。34．細銅絲在硫蒸氣中燃燒：細銅絲發紅后生成黑色物質。

35．鐵粉與硫粉混合后加熱到紅熱：反應繼續進行，放出大量熱，生成黑色物質。

36．硫化氫氣體不完全燃燒(在火焰上罩上蒸發皿)：火焰呈淡藍色(蒸發皿底部有黃色的粉末)。

37．硫化氫氣體完全燃燒(在火焰上罩上干冷燒杯)：火焰呈淡藍色，生成有刺激性氣味的氣體(燒杯內壁有液滴生成)。

38．在集氣瓶中混合硫化氫和二氧化硫：瓶內壁有黃色粉末生成。

39．二氧化硫氣體通入品紅溶液后再加熱：紅色退去，加熱后又恢復原來顏色。

40．過量的銅投入盛有濃硫酸的試管，并加熱，反應畢，待溶液冷卻后加水：有刺激性氣

味的氣體生成，加水后溶液呈天藍色。

41．加熱盛有濃硫酸和木炭的試管：有氣體生成，且氣體有刺激性的氣味。

42．鈉在空氣中燃燒：火焰呈黃色，生成淡黃色物質。

43．鈉投入水中：反應激烈，鈉浮于水面，放出大量的熱使鈉溶成小球在水面上游動，有“嗤嗤”聲。

44．把水滴入盛有過氧化鈉固體的試管里，將帶火星木條伸入試管口：木條復燃。

45.加熱碳酸氫鈉固體，使生成氣體通入澄清石灰水：澄清石灰水變渾濁。

46．氨氣與氯化氫相遇：有大量的白煙產生。

47.加熱氯化銨與氫氧化鈣的混合物：有刺激性氣味的氣體產生。

48.加熱盛有固體氯化銨的試管：在試管口有白色晶體產生。

49．無色試劑瓶內的濃硝酸受到陽光照射：瓶中空間部分顯棕色，硝酸呈黃色。

50．銅片與濃硝酸反應：反應激烈，有紅棕色氣體產生。

51．銅片與稀硝酸反應：試管下端產生無色氣體，氣體上升逐漸變成紅棕色。

52.在硅酸鈉溶液中加入稀鹽酸，有白色膠狀沉淀產生。

53．在氫氧化鐵膠體中加硫酸鎂溶液：膠體變渾濁。54．加熱氫氧化鐵膠體：膠體變渾濁。

55．將點燃的鎂條伸入盛有二氧化碳的集氣瓶中：劇烈燃燒，有黑色物質附著于集氣瓶內壁。

56．向硫酸鋁溶液中滴加氨水：生成蓬松的白色絮狀物質。

57．向硫酸亞鐵溶液中滴加氫氧化鈉溶液：有白色絮狀沉淀生成，立即轉變為灰綠色，一

會兒又轉變為紅褐色沉淀。

3+ 58.向含Fe的溶液中滴入KSCN溶液：溶液呈血紅色。

2-2-59．向硫化鈉水溶液中滴加氯水：溶液變渾濁。S+Cl2=2Cl+S↓

60．向天然水中加入少量肥皂液：泡沫逐漸減少，且有沉淀產生。

61．在空氣中點燃甲烷，并在火焰上放干冷燒杯：火焰呈淡藍色，燒杯內壁有液滴產生。

62．光照甲烷與氯氣的混合氣體：黃綠色逐漸變淺，時間較長，（容器內壁有液滴生成)。

63.加熱(170℃)乙醇與濃硫酸的混合物，并使產生的氣體通入溴水，通入酸性高錳酸鉀溶

液：有氣體產生，溴水褪色，紫色逐漸變淺。

64．在空氣中點燃乙烯：火焰明亮，有黑煙產生，放出熱量。

65．在空氣中點燃乙炔：火焰明亮，有濃煙產生，放出熱量。

66．苯在空氣中燃燒：火焰明亮，并帶有黑煙。67．乙醇在空氣中燃燒：火焰呈現淡藍色。

68．將乙炔通入溴水：溴水褪去顏色。69．將乙炔通入酸性高錳酸鉀溶液：紫色逐漸變淺，直至褪去。

70.苯與溴在有鐵粉做催化劑的條件下反應：有白霧產生，生成物油狀且帶有褐色。

71．將少量甲苯倒入適量的高錳酸鉀溶液中，振蕩：紫色褪色。

72．將金屬鈉投入到盛有乙醇的試管中：有氣體放出。

73．在盛有少量苯酚的試管中滴入過量的濃溴水：有白色沉淀生成。

74．在盛有苯酚的試管中滴入幾滴三氯化鐵溶液，振蕩：溶液顯紫色。

75．乙醛與銀氨溶液在試管中反應：潔凈的試管內壁附著一層光亮如鏡的物質。

76．在加熱至沸騰的情況下乙醛與新制的氫氧化銅反應：有紅色沉淀生成。

77．在適宜條件下乙醇和乙酸反應：有透明的帶香味的油狀液體生成。

78．蛋白質遇到濃HNO3溶液：變成黃色。79．紫色的石蕊試液遇堿：變成藍色。

80．無色酚酞試液遇堿：變成紅色。

有機實驗的八項注意

有機實驗是中學化學教學的重要內容，是高考會考的常考內容。對于有機實驗的操作及復習必須注意以下八點內容。

１.注意加熱方式

有機實驗往往需要加熱，而不同的實驗其加熱方式可能不一樣。

⑴酒精燈加熱。酒精燈的火焰溫度一般在400～500℃，所以需要溫度不太高的實驗都可

用酒精燈加熱。教材中用酒精燈加熱的有機實驗是：“乙烯的制備實驗”、“乙酸乙酯的制取實驗”“蒸餾石油實驗”和“石蠟的催化裂化實驗”。

⑵酒精噴燈加熱。酒精噴燈的火焰溫度比酒精燈的火焰溫度要高得多，所以需要較高溫度的有機實驗可采用酒精噴燈加熱。教材中用酒精噴燈加熱的有機實驗是：“煤的干餾實驗”。

⑶水浴加熱。水浴加熱的溫度不超過100℃。教材中用水浴加熱的有機實驗有：“銀鏡實

驗（包括醛類、糖類等的所有的銀鏡實驗）”、“ 硝基苯的制取實驗（水浴溫度為6 0℃）”、“ 酚醛樹酯的制取實驗（沸水浴）”、“乙酸乙酯的水解實驗（水浴溫度為70℃～80℃）”和“ 糖類（包括二糖、淀粉和纖維素等）水解實驗（熱水浴）”。

⑷用溫度計測溫的有機實驗有：“硝基苯的制取實驗”、“乙酸乙酯的制取實驗”（以上兩個

實驗中的溫度計水銀球都是插在反應液外的水浴液中，測定水浴的溫度）、“乙烯的實驗室制取實驗”（溫度計水銀球插入反應液中，測定反應液的溫度）和“ 石油的蒸餾實驗”（溫度計水銀球應插在具支燒瓶支管口處，測定餾出物的溫度）。

２、注意催化劑的使用

⑴ 硫酸做催化劑的實驗有：“乙烯的制取實驗”、“硝基苯的制取實驗”、“乙酸乙酯的制

取實驗”、“纖維素硝酸酯的制取實驗”、“糖類（包括二糖、淀粉和纖維素）水解實驗”和“乙酸乙酯的水解實驗”。

其中前四個實驗的催化劑為濃硫酸，后兩個實驗的催化劑為稀硫酸，其中最后一個實驗

也可以用氫氧化鈉溶液做催化劑

⑵鐵做催化劑的實驗有：溴苯的制取實驗（實際上起催化作用的是溴與鐵反應后生成的溴化鐵）。

⑶氧化鋁做催化劑的實驗有：石蠟的催化裂化實驗。

３、注意反應物的量

有機實驗要注意嚴格控制反應物的量及各反應物的比例，如“乙烯的制備實驗”必須注意乙醇和濃硫酸的比例為１：３，且需要的量不要太多，否則反應物升溫太慢，副反應較多，從而影響了乙烯的產率。

４、注意冷卻

有機實驗中的反應物和產物多為揮發性的有害物質，所以必須注意對揮發出的反應物和產物進行冷卻。

⑴需要冷水（用冷凝管盛裝）冷卻的實驗：“蒸餾水的制取實驗”和“石油的蒸餾實驗”。⑵用空氣冷卻（用長玻璃管連接反應裝置）的實驗：“硝基苯的制取實驗”、“酚醛樹酯的制取實驗”、“乙酸乙酯的制取實驗”、“石蠟的催化裂化實驗”和 “溴苯的制取實驗”。這些實驗需要冷卻的目的是減少反應物或生成物的揮發，既保證了實驗的順利進行，又減少了這些揮發物對人的危害和對環境的污染。

５、注意除雜

有機物的實驗往往副反應較多，導致產物中的雜質也多，為了保證產物的純凈，必須注意對產物進行凈化除雜。如“乙烯的制備實驗”中乙烯中常含有CO2和SO2等雜質氣體，可將這種混合氣體通入到濃堿液中除去酸性氣體；再如“溴苯的制備實驗”和“硝基苯的制備實驗”，產物溴苯和硝基苯中分別含有溴和NO2，因此，產物可用濃堿液洗滌。

６、注意攪拌

注意不斷攪拌也是有機實驗的一個注意條件。如“濃硫酸使蔗糖脫水實驗”（也稱“黑面包”實驗）（目的是使濃硫酸與蔗糖迅速混合，在短時間內急劇反應，以便反應放出的氣體和大量的熱使蔗糖炭化生成的炭等固體物質快速膨脹）、“乙烯制備實驗”中醇酸混合液的配制。

７、注意使用沸石（防止暴沸）

需要使用沸石的有機實驗:⑴ 實驗室中制取乙烯的實驗;⑵石油蒸餾實驗。

８、注意尾氣的處理

有機實驗中往往揮發或產生有害氣體，因此必須對這種有害氣體的尾氣進行無害化處理。⑴如甲烷、乙烯、乙炔的制取實驗中可將可燃性的尾氣燃燒掉；⑵“溴苯的制取實驗”和“硝基苯的制備實驗”中可用冷卻的方法將有害揮發物回流。

第五篇：2012實驗材料與試劑總結

實驗專題

常用方法技術與藥品試劑

一、基本的實驗方法和技術（補充）

1.植物葉片生成淀粉的鑒定技術（1）適用于光合作用的有關實驗

（2）主要步驟：光照 酒精脫色加碘檢驗等 2.同位素示蹤技術

（1）噬菌體侵染細菌實驗

（2）光合作用中氧原子、碳原子轉移的研究實驗（3）半保留復制實驗

（4）分泌蛋白的形成過程 3.植物雜交技術

（1）雌雄同花：花蕾期去雄 + 套袋 + 開花期人工授粉 + 套袋（2）雌雄異花：花蕾期雌花套袋 + 開花期人工授粉 + 套袋 4.育種技術

（1）雜交育種（2）人工誘變育種（3）單倍體育種（4）基因工程育種（5）細胞工程育種等。

二、實驗中常用器材和藥品的使用

1.斐林試劑與班氏試劑：可溶性還原糖的鑒定磚紅色沉淀（水浴加熱）2.雙縮脲試劑：鑒定多肽（蛋白質）與雙縮脲紫色

3.蘇丹Ⅲ、蘇丹Ⅳ：脂肪的鑒定（脂肪被蘇丹Ⅲ染成橘黃色，被蘇丹Ⅳ染成紅色，用顯微鏡

觀察；也可向待測樣液中滴加）

4． 酒精：用于洗去浮色，配制解離液，葉片脫色，析出DNA（冷酒精），提取葉綠體中的色

素，消毒處理，沖洗卡諾是固定液。5.碘液：鑒定淀粉（藍色）

6． 吡羅紅甲基綠（混合染色劑、現配現用）：甲基綠使DNA呈現綠色（細胞核，面積小），吡羅紅使RNA呈現紅色（細胞質，面積大）

7.HCl：改變細胞膜的通透性，加速染色劑進入細胞；使染色質中DNA與蛋白質分離，有利于DNA與染色劑結合；解離；改變溶液pH

8.NaCl：配制生理鹽水（0.9%的氯化鈉溶液，維持動物細胞的正常形態）及其他不同濃度的鹽溶液，可用于測定動物細胞內液濃度；溶解(2mol/L)或析出DNA（0.14mol/L）9.NaOH：用于吸收CO２或改變溶液的pH，模擬細胞大小與物質運輸關系實驗中應用

10.健那綠染液 ：專一染線粒體的活細胞染料（健那綠溶解在生理鹽水中制成健那綠染液，使

活細胞中的線粒體呈現藍綠色）

11.蔗糖：配制蔗糖溶液，用于測定植物細胞液濃度或觀察質壁分離和復原

12.臺盼藍：臺盼藍使死細胞染成藍色（正常的活細胞，細胞膜結構完整具有選擇透過性能夠

排斥臺盼藍，區分活細胞和死細胞；檢測細胞膜的完整性）

13.20%的肝臟研磨液、3%的過氧化氫、3.5%的氯化鐵溶液：用于比較過氧化氫酶和Fe3+的催化效率。

14.可溶性淀粉、3%的蔗糖溶液、2%的新鮮淀粉酶溶液：探索淀粉酶對淀粉和蔗糖的作用

實驗（應該用斐林試劑檢測，不能用碘液進行檢驗，因為蔗糖及其水解產物與碘均不變色）15.3%可溶性淀粉、2%的新鮮淀粉酶溶液：探究溫度對酶活性的影響（①先分別保溫再混合，②不能用斐林試劑檢測，只能用碘液檢測，③不能用H2O2做本實驗）

16.20%的肝臟研磨液、3%的過氧化氫：探究Ph值對酶活性的影響（不能用淀粉酶催化淀粉

探究探究Ph值對酶活性的影響）17.Ca(OH)2（澄清的石灰水）：鑒定CO２（混濁程度不同可說明有氧呼吸與無氧呼吸產生二氧

化碳的多少

18.溴麝香草酚藍水溶液：可檢測CO2（由藍變綠再變黃）19．重鉻酸鉀溶液：橙色的重鉻酸鉀溶液，在酸性條件下與酒精發生化學反應，變成灰綠色（可

以檢測酵母菌的呼吸方式，也可檢驗酒駕）20．乙醇或丙酮：用于提取葉綠體中的色素

21．層析液：可用于色素的分離，即將色素在濾紙上分離開。22.濾紙 ：過濾或紙層析

23.二氧化硅：在色素的提取和分離實驗中研磨綠色葉片時加入，可使研磨充分

24.碳酸鈣：研磨綠色葉片時加入，可中和有機酸，防止在研磨時葉綠體中的色素受破壞25.NaHCO3 ： 維持環境中CO２濃度的恒定

26.改良苯酚品紅染液、龍膽紫染液、醋酸洋紅溶液（堿性染料）：用于染色體染色

27.秋水仙素：阻斷紡錘體的形成,使染色體加倍（人工誘導多倍體試劑。用于萌發的種子或

幼苗，可使染色體組加倍，原理是可抑制紡錘體的形成）（低溫也可抑制紡錘體的形成）28.卡諾氏液：把經誘導處理的根尖放入卡諾氏液中浸泡0.5-1h，以固定細胞形態 29.二苯胺：鑒定DNA（藍色，沸水浴）30.檸檬酸鈉：防止血液凝固，抗凝劑

31.洗滌劑：提取植物細胞中DNA時瓦解細胞膜 32.瓊脂：激素的轉移或配制固體培養基

33.PEG試劑：促融劑（滅活的病毒也可作為促融劑）34.氯化鈣： 增大細菌細胞壁的通透性 35.胰蛋白酶（膠原蛋白酶）：可用于動物細胞培養時分解組織使組織細胞分散開 36.木瓜蛋白酶：嫩肉粉的主要成分，催化水解蛋白質

37.蒸餾水：①在觀察DNA、RNA分布中配染色劑；緩水流沖洗載玻片

②質壁分離及復原實驗中，使發生質壁分離的細胞浸浴在蒸餾水中發生復原（引流法）

③臨時裝片的制作（擦、滴、取、放、展、蓋）④有絲分裂實驗中漂洗解離液

⑤DNA粗提取與鑒定實驗中使血細胞吸水漲破；稀釋NaCl溶液 ⑥制備細胞膜時使細胞吸水漲破（引流法、差速離心法）

三．注意取材問題

(1)觀察DNA、RNA在細胞中的分布不能選用哺乳動物成熟的紅細胞(無細胞核，也就幾乎不含DNA、RNA)；

(2)不能用觀察葉綠體的材料來觀察線粒體(葉綠體中的色素顏色會掩蓋健那綠染色后的顏色變化)；

(3)觀察細胞的有絲分裂或低溫誘導植物染色體數目的變化時，應注意觀察呈正方形的根尖分生區細胞(長方形的細胞可能是根尖的伸長區或成熟區的細胞，沒有分裂能力)；

(4)觀察細胞的減數分裂所選的材料可以是動物的精巢和植物的雄蕊，而不宜選用動物的卵巢和植物的雌蕊(雄配子的產生數量遠遠多于雌配子，更容易觀察到減數分裂的細胞)；

(5)觀察葉綠體時，若選用菠菜葉則取稍帶些葉肉的下表皮(靠近下表皮的葉肉細胞中的葉綠體較大而數目較少)；

(6)觀察植物細胞的質壁分離與復原應選取活的成熟的植物細胞(含有大的液泡)。四．實驗中注意問題 1.有關蛋白質的鑒定

①若用蛋清進行蛋白質鑒定時，需將雞蛋清用水稀釋，通常是0.5 mL蛋白液加入5 mL水，攪拌均勻。如果蛋白液稀釋程度不夠，與雙縮脲試劑發生反應后會粘固在試管的內壁上，使反應不容易徹底，并且試管也不容易刷洗干凈。

②鑒定蛋白質時，向樣液中加入2 mL雙縮脲試劑A搖勻，再向樣液中加入3～4滴雙縮脲試劑B搖勻。其中雙縮脲試劑B不能過量，因為過量的雙縮脲試劑B會與試劑A反應，使溶液呈藍色，從而掩蓋生成的紫色。

2.探究溫度(pH)對酶活性的影響時，必須在達到預設的溫度(pH)的條件下，再讓反應底物與酶接觸，避免在未達到預設的溫度(pH)時反應底物已與酶接觸發生反應，影響實驗結果。

（1）溫度對酶活性影響實驗中

①不能用過氧化氫酶來完成此實驗，因為過氧化氫受熱易分解

②不能用斐林試劑檢測，因為斐林試劑的使用需要加熱，加熱會改變0℃組的實驗結果（2）pH對酶活性影響實驗中：不能用淀粉、淀粉酶做此實驗 3.探究酵母菌的呼吸方式時：

（1）①新配制的質量分數為5%的葡萄糖溶液先加熱煮沸(殺死里面的微生物、除去溶液中的氧

氣)，等冷卻(防止高溫殺死酵母菌)后再將食用酵母菌加入；

②酵母菌培養液應封口放置一段時間后，待酵母菌將瓶內的氧氣消耗完，再連通盛有澄清石灰水的錐形瓶，以保證檢測到的一定是酵母菌無氧呼吸產生的CO2使澄清的石灰水變混濁。

（2）實驗結果的檢測

①檢測CO2（觀察石灰水混濁的程度、溴麝香草酚藍溶液變成黃色的時間長短）

②檢測酒精的產生（酸性的重鉻酸鉀）4.探究生長素類似物促進插條生根的最適濃度

①裝置的設計應有利于觀察，如觀察促進生根的實驗可以用水培法。

②所設組別除不同濃度的生長素類似物處理外，還要增加一組蒸餾水處理的做空白對照。5.探究培養液中的酵母菌種群數量的動態變化

①從試管中吸出培養液進行計數之前，要輕輕震蕩幾次，使酵母菌均勻分布，以確保計數準確，減少誤差。

②該探究不需要設置對照，因為隨著時間的延續，酵母菌種群數量的變化，在時間上形成前后自身對照

③該探究不用重復，只要分組實驗，求得平均值即可。

④對于壓在小方格界線上的酵母菌，應只計算相鄰兩邊及其頂角的酵母菌。⑤實驗結束后，用試管刷蘸洗滌劑擦洗血球計數板的做法是錯誤的，正確的方法是浸泡和沖洗。6.觀察葉綠體、線粒體

①選用蘚類的小葉或者菠菜葉的下表皮（稍帶葉肉）作觀察葉綠體的實驗材料是實驗成功的關鍵，因為蘚類葉片僅為一層細胞，菠菜葉的下表皮的葉肉細胞葉綠體大且數目少，便于觀察。）

②線粒體、葉綠體均需保持活性。

③葉綠體，不需染色，可直接觀察；線粒體用健那綠染色（活體染色劑）

④觀察線粒體一般選用動物或人體細胞，而不選用植物的葉肉細胞，其原因是經健那綠染

色的線粒體顏色為藍綠色，與葉綠體顏色相近，會掩蓋影響對對線粒體的觀察

7.采用差速離心法的實驗有

①細胞膜的提純②分離各種細胞器

8.研究DNA的復制方式用（答案：密度梯度離心法、同位素標記法）9.引流法的應用

①細胞膜的制備②質壁分離與復原 10.紫色洋蔥可做哪些實驗

有絲分裂（根尖）、低溫誘導染色體數目加倍（根尖）、質壁分離（洋蔥鱗片葉外表皮）、觀察DNA、RNA的分布（洋蔥鱗片葉內表皮）、觀察線粒體（洋蔥鱗片葉內表皮）

11、植物種群密度調查用

蚯蚓（活動能力比較弱的動物）的種群密度調查用調查動物豐富度用 取樣器取樣法）

統計動物豐富度（目測估計法、記名計算法）

12、關注酵母菌的常考知識點和注意問題

（1）酵母菌是單細胞真菌，即屬于真核生物（2）代謝類型異養兼性厭氧型（3）生殖方式無性生殖和有性生殖

（4）具有的核酸種類有DNA和RNA，其中遺傳物質是DNA，是否遵循

遺傳規律是（有性生殖）

（5）能發生的可遺傳變異有基因突變、基因重組和染色體畸變（6）酵母菌不是種名，代表的是一類生物。

（7）在生態系統中的地位：大多數腐生，屬分解者； 少數寄生，屬消費者，如葡萄表面的野生酵母。

（8）有細胞壁但成分既不是纖維素和果膠（植物），也不是肽聚糖（細菌）。