第一篇：食品微生物心得體會(huì)

心得體會(huì)

本次為期一周的實(shí)驗(yàn)課，讓我更加深入的了解了酸乳中的各種微生物和豐富的微生物的世界。正如我們所知，微生物也有著不同的特征和生活方式，對(duì)人類的生活產(chǎn)生著或好或壞的影響。只有當(dāng)我們能真正的了解這些微生物之后，我們才可以更好地與它們和諧共處。

這次酸乳中微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)給予了我許許多多的鍛煉，從最開始實(shí)驗(yàn)課題的選取，實(shí)驗(yàn)材料的尋找，小組分工協(xié)作完成實(shí)驗(yàn)，到最后實(shí)驗(yàn)報(bào)告的完善，一切都是我們小組共同努力的結(jié)果，所以說這次大型實(shí)驗(yàn)給我們帶來的益處是無法估量的。

當(dāng)然在這次實(shí)驗(yàn)也暴露出了我們很多的問題。實(shí)驗(yàn)前我們準(zhǔn)備的資料不充分，導(dǎo)致了我們實(shí)驗(yàn)開始時(shí)就手忙腳亂，實(shí)驗(yàn)用的原料比例我們都沒能很好的把握。不過隨后經(jīng)過我們的不懈努力，最終還是比較圓滿的完成了任務(wù)。實(shí)驗(yàn)中我們先對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行了制備，后來我們計(jì)量了菌落的總數(shù)并加以分析辨別。并對(duì)主要的菌種大腸桿菌、霉菌、酵母菌、致病菌，乳酸菌等進(jìn)行了測定和研究。本次實(shí)驗(yàn)我們忙中有樂，十分的開心。

這次實(shí)驗(yàn)還增強(qiáng)了我們小組之間配合的默契程度，我們小組分工合作，有條不紊，通過大家共同的努力，我們的實(shí)驗(yàn)完成的很快。而且也使我們每個(gè)人的動(dòng)手能力的都得到了較好的鍛煉。實(shí)驗(yàn)中其他組做的實(shí)驗(yàn)也給予了我們很大的幫助，我們?cè)谒悸繁容^阻塞的時(shí)候，大家相互幫助，給了我們很多懇切實(shí)用的建議。并且在不懂的地方老師也耐心細(xì)致的給予了我們指導(dǎo)，使我們受益匪淺。這段實(shí)驗(yàn)時(shí)光讓我覺得大家就是一個(gè)完美的大家庭，很好的團(tuán)結(jié)在了一起。可以說這次實(shí)驗(yàn)不光對(duì)于我自己，對(duì)于我們整個(gè)班級(jí)都是一個(gè)很好的契機(jī)。讓我感覺我們的大家庭變得更加融合，更有凝聚力了。

總的來說我們這次實(shí)驗(yàn)是比較成功的，但是我們?cè)趯?shí)驗(yàn)中也存在著很多錯(cuò)誤并且也走了不少彎路。這給我們的警示是，在科研過程中要秉著嚴(yán)謹(jǐn)認(rèn)真的態(tài)度，在實(shí)驗(yàn)前做好周密的計(jì)劃，預(yù)想到各種狀況，避免錯(cuò)誤的出現(xiàn)。這樣才能更好完美的完成各自的任務(wù)。

對(duì)于這次實(shí)驗(yàn)我有一些建議，我覺得實(shí)驗(yàn)中應(yīng)該進(jìn)行多種產(chǎn)品的對(duì)比和比較，在進(jìn)行活性檢驗(yàn)時(shí)應(yīng)當(dāng)設(shè)置空白對(duì)照。這樣實(shí)驗(yàn)會(huì)更加嚴(yán)謹(jǐn)，我們分析的數(shù)據(jù)也會(huì)更準(zhǔn)確，而且我覺得還可以放映一些相關(guān)的影視資料，讓我們更加深入的了解現(xiàn)代食品行業(yè)并根據(jù)現(xiàn)階段的發(fā)展情況確定實(shí)驗(yàn)的主流方向，使實(shí)驗(yàn)更接近現(xiàn)實(shí)工業(yè)生產(chǎn)。我覺得通過這些我們會(huì)更有針對(duì)性的完成實(shí)驗(yàn)，并且有可能發(fā)現(xiàn)不同的問題，并給出比較合理的處理手段和實(shí)現(xiàn)方式。

最后我還是很感謝這次實(shí)驗(yàn)，因?yàn)槲覀儷@得了這樣一次機(jī)會(huì)，一個(gè)可以證明自己能力的機(jī)會(huì)。我們相信我們能行，相信自己會(huì)把實(shí)驗(yàn)任務(wù)完成的很出色。我希望這樣的實(shí)驗(yàn)?zāi)懿粩嚅_展下去，讓更多的同學(xué)了解微生物，了解我們豐富多彩的食品世界。

第二篇：食品微生物學(xué)習(xí)心得

學(xué)習(xí)心得

隨著科技發(fā)展和人們生活水平的提高，食品安全和衛(wèi)生已成為人們關(guān)注的焦點(diǎn)。“食品微生物檢驗(yàn)”是衡量食品衛(wèi)生的重要指標(biāo)之一，也是判斷被檢食品能否食用的科學(xué)依據(jù)之一，對(duì)食品的質(zhì)量與安全起著監(jiān)督、預(yù)防、評(píng)價(jià)等作用。通過食品微生物檢驗(yàn)可以判斷企業(yè)中食品加工環(huán)境、食品衛(wèi)生環(huán)境的優(yōu)劣，能夠?qū)κ称繁晃⑸镂廴镜某潭茸龀稣_的評(píng)價(jià)。食品微生物是一項(xiàng)實(shí)踐性和應(yīng)用性很強(qiáng)的學(xué)科，在實(shí)際生產(chǎn)生活中，微生物與食品的儲(chǔ)藏、運(yùn)輸、加工、制造過程緊密相連。一方面是利用有益微生物的作用制造發(fā)酵食品；另一方面是防止有害微生物污染食品，保證食品安全。

本次為期18天的食品微生物檢驗(yàn)學(xué)習(xí)，使我的專業(yè)理論知識(shí)與實(shí)際檢驗(yàn)水平都得到了全面的啟發(fā)與提高，借此機(jī)會(huì)要感謝公司領(lǐng)導(dǎo)對(duì)我的信任與大力支持！

此次學(xué)習(xí)分為二個(gè)階段，一是理論學(xué)習(xí)階段，2015年10月25日-11月4日于自治區(qū)質(zhì)監(jiān)局培訓(xùn)中心學(xué)習(xí)微生物檢測技術(shù)理論知識(shí)。二是實(shí)習(xí)階段，11月5日-11月13日于自治區(qū)質(zhì)監(jiān)局檢測中心微生物檢驗(yàn)室檢驗(yàn)食品中的常規(guī)菌與致病菌。

一、理論學(xué)習(xí)。

1、食品衛(wèi)生學(xué)的意義；食品中菌落總數(shù)；大腸菌群；金黃色葡萄球菌；志賀氏菌；沙門氏菌；單核細(xì)胞增生李斯特菌；霉菌，酵母菌等常見致病微生物的鑒別、分型與檢測技術(shù)；食源性微生物的分類與分布；食品內(nèi)外環(huán)境因素與微生物生長的關(guān)系；食品傳播性微生物的致病性與感染；食品腐敗的鑒評(píng)、監(jiān)控；細(xì)菌的能量代謝、分解代謝、合成代謝等。使我們掌握了更多食品微生物的基本原理、新的檢測技能和方法以及食品質(zhì)量的控制等。可使我們今后的工作更加精益求精，也為致病菌的檢驗(yàn)奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。

2、解讀了新《食品安全法》，食品安全關(guān)系到社會(huì)穩(wěn)定，關(guān)系到百姓健康，新《食品安全法》的正式實(shí)施，對(duì)食品企業(yè)提出了更高的要求，食品標(biāo)準(zhǔn)也從衛(wèi)生方面上升到安全層面，確保了對(duì)公眾身體健康和生命安全。食品企業(yè)是食品安全的重要環(huán)節(jié)，食品企業(yè)的微生物安全是關(guān)乎到千萬百姓的生命健康。因此，要求我們檢驗(yàn)員要有較高素質(zhì)，不但應(yīng)具有很好的技術(shù)能力，還要有實(shí)事求是的科學(xué)態(tài)度和良好的職業(yè)道德。

3、授課老師思路清晰，突出重點(diǎn)，善于引導(dǎo)學(xué)生思考，使我們更加深入的了解了各種食品中的各種微生物和豐富的微觀世界。通過幻燈片向我們展示了隨處可見的食品都與哪些微生物有關(guān)及腐敗食品因微生物污染引起的食物中毒實(shí)例與數(shù)據(jù)。通過鮮明的圖片與生動(dòng)的講解，使我們了解了食品微生物的重要性，在感慨微生物的強(qiáng)大作用之余，深切的體會(huì)到了食品企業(yè)不僅要生產(chǎn)出好的食品，更要生產(chǎn)出更好、更優(yōu)質(zhì)的食品。

二、實(shí)習(xí)階段。

1、學(xué)習(xí)了更加嚴(yán)格的無菌操作技術(shù)、殺菌技術(shù)；完成了送檢食品及抽檢食品中各種細(xì)菌的分離純化培養(yǎng)、分型與鑒定；微生物觀察及分析；學(xué)習(xí)了菌種保藏與遺傳育種技術(shù)；完成了各種細(xì)菌培養(yǎng)基的配制。

2、借鑒了各種試劑的配制、使用記錄；各種儀器設(shè)備的操作使用記錄；實(shí)驗(yàn)室與操作器具的消毒記錄等，以完善我單位的各項(xiàng)記錄。可參考致病菌的初篩可用快速檢測試紙片及初步證實(shí)實(shí)驗(yàn)同步進(jìn)行；對(duì)于已被證實(shí)的菌種可使用VITEK或PCR技術(shù)與下一步的生化實(shí)驗(yàn)同步進(jìn)行。很大程度上提高了檢出效率及準(zhǔn)確率。

3、了解了實(shí)驗(yàn)前后的有效處理。前處理：玻化器皿的洗滌可使用超聲波清洗機(jī)；洗滌后的試管擺放可使用高壓筐層層堆疊，然后立起的方式；分裝液體可使用分液器；實(shí)驗(yàn)過程中可實(shí)驗(yàn)移液槍；錐形瓶塞可使用橡皮筋封口等，從而可極大提高工作效率。對(duì)于培養(yǎng)基要求115℃滅菌的，需提前將試管于121℃高壓鍋內(nèi)滅菌，以保證管內(nèi)細(xì)菌完全滅活。后處理：必須將已發(fā)酵或者已長菌的容器用獨(dú)立高壓菌鍋滅菌后才可洗滌。加強(qiáng)防范意識(shí)，保護(hù)自身安全。

4、經(jīng)過證實(shí)，我單位曾一直使用的大腸菌群檢測方法有誤：1）沒有證實(shí)實(shí)驗(yàn)。我單位大腸菌群的檢測一直采用的是GB 4789.3-2010的檢驗(yàn)方法，LST初發(fā)酵后便查MPN表報(bào)出檢出值，違背了大腸菌群的國標(biāo)檢驗(yàn)三步法的規(guī)定（初發(fā)酵、復(fù)發(fā)酵和證實(shí)實(shí)驗(yàn)）。規(guī)定中第一步LST發(fā)酵實(shí)驗(yàn)是樣品的發(fā)酵結(jié)果，不是純菌發(fā)酵實(shí)驗(yàn)，所以初發(fā)酵陽性管經(jīng)過后兩步有可能成為陰性。大量檢驗(yàn)數(shù)據(jù)證明，食品中大腸菌群檢驗(yàn)程序的符合率、初發(fā)酵與證實(shí)實(shí)驗(yàn)相差很大，不同食品三步法的符合情況也不一致。只做一步初發(fā)酵，誤差是比較大的，這樣會(huì)有相當(dāng)部分的合格樣品被作為不合格樣品處理。我單位必須加以重視，避免經(jīng)濟(jì)損失。2）套用的國家標(biāo)準(zhǔn)有誤。根據(jù)我單位產(chǎn)品的微生物技術(shù)檢測要求，應(yīng)采取GB 4789.3-2003的檢測方法。初發(fā)酵：將待檢樣品接種于乳糖膽鹽發(fā)酵管內(nèi)。分離培養(yǎng)：將產(chǎn)氣的發(fā)酵管分別轉(zhuǎn)種于伊紅美藍(lán)瓊脂平板上，培養(yǎng)后觀察菌落形態(tài)。證實(shí)實(shí)驗(yàn)：在伊紅美藍(lán)瓊脂平板上挑取可疑大腸菌群于乳糖發(fā)酵管繼續(xù)培養(yǎng)并觀察產(chǎn)氣情況，同時(shí)做革蘭氏染色證實(shí)；查MPN表，報(bào)出檢出值。

此次學(xué)習(xí)與實(shí)習(xí)雖然時(shí)間較短，但內(nèi)容豐富、涉及面廣，理論與實(shí)踐相結(jié)合，可謂受益匪淺、收獲良多，不僅豐富了知識(shí)、增長了見識(shí)，而且開闊了眼界、拓寬了思路，這些對(duì)我今后的工作和學(xué)習(xí)必將起到積極而長遠(yuǎn)的影響。在今后的工作中，我將不斷學(xué)習(xí)、積累經(jīng)驗(yàn)、克服不足，腳踏實(shí)地、盡職盡責(zé)的做好各項(xiàng)工作。不斷提高自身素質(zhì)和業(yè)務(wù)能力，提升工作的主動(dòng)性和創(chuàng)造性，以飽滿的熱情、扎實(shí)的作風(fēng)投入到工作學(xué)習(xí)當(dāng)中去，為公司貢獻(xiàn)自己的一份光和熱。

品管部：孔香 2015年11月19日

第三篇：食品微生物實(shí)驗(yàn)室操作手冊(cè)

食品微生物實(shí)驗(yàn)室操作手冊(cè)

介紹了微生物實(shí)驗(yàn)中使用的標(biāo)準(zhǔn)菌的驗(yàn)收、制備、保藏、傳代、使用、銷毀的管理規(guī)程 規(guī)定了質(zhì)量管理部門實(shí)驗(yàn)用標(biāo)準(zhǔn)菌種的驗(yàn)收、制備、儲(chǔ)管、使用、以及銷毀等的相關(guān)規(guī)定。適用于微生物限度檢查、無菌檢查、抗生素微生物（效價(jià)）測定、評(píng)價(jià)防腐劑和抗菌劑的抑菌效果和確認(rèn)滅菌效果、檢驗(yàn)方法的驗(yàn)證、培養(yǎng)基的適用性檢查，樣品檢驗(yàn)時(shí)的陽性對(duì)照等。

依據(jù): 中國藥典2010年版二部及菌種使用說明書

1.標(biāo)準(zhǔn)菌的來源

標(biāo)準(zhǔn)菌株由中國藥品生物制品檢定所醫(yī)學(xué)菌種保藏中心（China Medical culture collection ,CMCC）提供的冷凍干燥菌種（0代）或由上級(jí)藥檢部門已接種好的菌種斜面（3代）。黑曲霉的0代菌種為保存于含15%甘油的0.9%無菌氯化鈉溶液中的孢子懸液冷存管。中國藥品生物制品檢定所醫(yī)學(xué)微生物菌種保藏管理中心提供的冷凍干燥菌種的標(biāo)簽CMCC

（B）代表細(xì)菌（bacteria）,CMCC(F)代表真菌（fungi）每種菌具有固定的代號(hào)。

2.標(biāo)準(zhǔn)菌的驗(yàn)收

從菌種保藏中心購買的原始菌種管是玻璃安瓿裝的凍干菌，接收同時(shí)應(yīng)檢查是否有隨菌種附有的相關(guān)資料。接收菌種時(shí)應(yīng)檢查安瓿的數(shù)量和名稱，和每一支安瓿的完整性。在相應(yīng)的菌種接收記錄上記上所有的關(guān)于菌種的信息，如名稱、數(shù)量和接收日期等。在菌種安瓿及菌種管上粘貼標(biāo)簽，內(nèi)容包括：菌種名稱、菌種代號(hào)、代次、接收日期、接收人、貯存條件、有效期至。新購入的0代原始菌種儲(chǔ)存于－20℃，有效期為三年。從上級(jí)藥檢部門購買的已接種好的菌種斜面（3代）應(yīng)檢查菌種管是否完好。儲(chǔ)存于2～ 8 ℃，有效期為3個(gè)月。

3.標(biāo)準(zhǔn)菌的復(fù)蘇、復(fù)壯及標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株的制備

3.1物品及試劑：接種針、酒精燈、移液管、75%酒精及75%酒精棉球

3.2培養(yǎng)基

改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基:用于黑曲霉復(fù)蘇、復(fù)壯.液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基:用于生孢梭菌復(fù)蘇、復(fù)壯.營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基:用于金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、大腸埃希菌、乙型副傷寒沙門菌、短小芽孢桿菌、銅綠假單胞菌復(fù)蘇、復(fù)壯。

改良馬丁培養(yǎng)基:用于白色念珠菌復(fù)蘇、復(fù)壯.3.3操作步驟：

a.打開潔凈工作臺(tái)。

b.在安瓿的外表面用75%的酒精擦拭并讓其自然風(fēng)干。

c.用一小砂輪在安瓿的上部劃一條線，用手輕輕將安瓿掰開（開啟安瓿時(shí)必須小心，因?yàn)榘碴秤鰺釙r(shí)可能會(huì)破裂）。

d.以無菌方法用一無菌吸管從已準(zhǔn)備好的上述液體培養(yǎng)基中移取0.5～0.8 ml到安瓿中。e.輕輕地旋轉(zhuǎn)安瓿以使凍干菌種和液體培養(yǎng)基充分混合并完全溶解。

f.用無菌吸管將安瓿內(nèi)菌液全部轉(zhuǎn)接到相應(yīng)的液體培養(yǎng)基。

g.根據(jù)安瓿上所標(biāo)明的不同菌種類型而將其培養(yǎng)于相應(yīng)的溫度（細(xì)菌培養(yǎng)溫度30～35℃，培養(yǎng)18～24小時(shí)；真菌培養(yǎng)溫度23～28℃，培養(yǎng)3～5天。觀察是否渾濁，渾濁說明菌種復(fù)蘇生長；若不渾濁，細(xì)菌應(yīng)延長培養(yǎng)時(shí)間至7天，真菌應(yīng)延長培養(yǎng)時(shí)間至14天，若仍未渾濁，滅菌處理。

h.黑曲霉的菌懸液先室溫待菌懸液融化后用無菌吸管吸取管內(nèi)液體1～2滴滴在改良馬丁瓊脂斜面上，用吸管涂布均勻，置23～28℃培養(yǎng)5～7天，斜面正面為黑褐色厚絨狀，色澤均一，不應(yīng)有雜色，斜面?zhèn)让鏌o色，接近菌層培養(yǎng)基略帶黃色。確認(rèn)后用含有0.05%（ml/ml）的吐溫-80的0.9%無菌氯化鈉溶液洗脫到無菌試管中。

i.取經(jīng)復(fù)蘇后的上述細(xì)菌菌液8-10ml至液體培養(yǎng)基中按g項(xiàng)操作對(duì)菌種進(jìn)行復(fù)壯。以無菌技術(shù)向復(fù)壯后的菌種中加入100ml20%的無菌甘油混勻，1-2ml/管分裝于凍存管。每個(gè)菌種制備10支，按順序進(jìn)行編號(hào)，最后一支做為質(zhì)控管進(jìn)行質(zhì)量控制，即進(jìn)行相應(yīng)的確認(rèn)。其余作為儲(chǔ)備管。黑曲霉的h項(xiàng)下洗脫液按h項(xiàng)下方法進(jìn)行復(fù)壯，制成復(fù)壯后的孢子懸液20ml。以無菌技術(shù)向復(fù)壯后的菌種中加入20ml、30%的無菌甘油混勻，1-2ml/管封存于凍存管。制備10支，按順序進(jìn)行編號(hào)，最后一支做為質(zhì)控管進(jìn)行質(zhì)量控制，即進(jìn)行相應(yīng)的確認(rèn)。其余作為儲(chǔ)備管。將上述制備好的凍存管逐支粘貼標(biāo)簽。內(nèi)容包括：菌種名稱、菌種代號(hào)、編號(hào)、代次、制備日期、制備人、貯存條件、有效期至等。

j．儲(chǔ)備菌種管制備成功，儲(chǔ)存于－20℃，有效期為三年。

3.4菌種確認(rèn)

用無菌接種環(huán)從質(zhì)控管中取細(xì)菌培養(yǎng)物接種到營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基平板上，或相應(yīng)的宜于該細(xì)菌生長的鑒別平板上，劃線分離出單個(gè)菌落。然后在30～35℃下培養(yǎng)2～3天；同樣的方法取真菌到玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基平板，并在23～28℃下培養(yǎng)7天；培養(yǎng)后，觀察其菌落形態(tài)，應(yīng)符合該菌種形態(tài)特征。

3.5污染處理

假如在該平板上發(fā)現(xiàn)有其他菌落生長，則說明或操作有污染或菌種不純。將此被污染了的培

養(yǎng)物滅菌處理。可尋找原因重新分離挑選純菌落轉(zhuǎn)接斜面菌種作為第四代。并重新制備儲(chǔ)備菌種管

3.6菌種的傳代與保藏

將菌種接種至一新鮮培養(yǎng)基上，每萌發(fā)一次即稱為一代，因此，當(dāng)原始菌種復(fù)溶并轉(zhuǎn)至新培養(yǎng)基內(nèi)生長，即認(rèn)為已傳代一次，從菌種保藏中心獲得的冷凍干燥的菌種為第0代，冷凍干燥的原始菌種開啟后轉(zhuǎn)種后為第1代，直到第3代為工作菌種。菌種的傳代次數(shù)（自原始菌種凍干粉起）不得超過5代。

菌種的傳代保藏過程

3.3項(xiàng)下標(biāo)準(zhǔn)菌的復(fù)蘇為傳第一代，復(fù)壯為第二代。傳第三代時(shí)取1支凍存管自然解凍，將其轉(zhuǎn)接斜面菌種作為工作用菌種。此時(shí)，工作用菌種為第3代。工作用菌種，分為兩類：一類用于定期傳代(W3)，一類用于實(shí)驗(yàn)用（S3）。

定期傳代用菌的傳代其操作步驟如下（斜面接種法）：

（1）從冰箱冷藏室中取出菌種斜面后，應(yīng)在室溫放置約30分鐘。

（2）將裝有新鮮配制的培養(yǎng)基菌種保藏管管壁上注明菌名及接種日期，和傳代菌種一并移入潔凈工作臺(tái)，打開紫外燈照射一小時(shí)。

（3）關(guān)閉紫外燈。點(diǎn)燃酒精燈，左手握住菌種斜面，將管口靠近火焰上方，右手拿接種棒后端，將接種環(huán)燒紅約30秒，隨后將接種棒金屬部分在火焰上燒灼，往返通過三次。

（4）右手用無名指、小指及掌部夾住管塞，左手將管口在火焰上旋轉(zhuǎn)燒灼，右手再輕輕拔開管塞，將接種環(huán)伸入管內(nèi)先在近壁的瓊脂斜面上靠一下，稍冷后再至菌苔上，刮取少量菌苔，隨即取出接種棒并將菌種管口移至火焰上方。

（5）塞上管塞，左手將菌種管放下，取營養(yǎng)瓊脂斜面（或改良馬丁瓊脂斜面）一支，照上述操作打開管塞，將接種環(huán)伸入管內(nèi)至瓊脂斜面的底部向上劃一條直線，然后從底部向上作連續(xù)曲線劃線，一直劃到斜面頂端，使細(xì)菌接種在斜面的表面上。

（6）取出接種環(huán)，在火焰上方將培養(yǎng)基管蓋上塞子，然后將接種過細(xì)菌的接種環(huán)在火焰上燒灼滅菌。

（7）將已接種好的細(xì)菌管置30～35℃細(xì)菌培養(yǎng)箱培養(yǎng)22 ～24h，真菌管置23～28℃真菌培養(yǎng)箱最多培養(yǎng)7天。

當(dāng)工作用菌種傳代代數(shù)小于5時(shí)，可直接用上一代工作用菌種轉(zhuǎn)接下一代工作用菌種，如：（W3）可直接轉(zhuǎn)接為（W4）。按上述程序操作，直至（W4）轉(zhuǎn)為（W5）為止，需重新接種，舊的工作菌種進(jìn)行銷毀。

菌種斜面的培養(yǎng)、保藏條件及時(shí)間

菌種培養(yǎng)條件及時(shí)間培養(yǎng)基保存條件及時(shí)間

大腸埃希菌(CMCC(B)44102)30～35℃22～ 24h營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基2℃～ 8 ℃保存3個(gè)月

金黃色葡萄球菌(CMCC(B)26003)30～35℃22～ 24h營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基2℃～ 8 ℃保存3個(gè)月

枯草芽孢桿菌(CMCC(B)63501)30～35℃22～ 24h營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基2℃～ 8 ℃保存3個(gè)月

銅綠假單胞菌(CMCC(B)10104)30～35℃22～ 24h營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基2℃～ 8 ℃保存3個(gè)月

乙型副傷寒沙門菌(CMCC(B)50094)30～35℃22～ 24h營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基2℃～ 8 ℃保存3個(gè)月

生孢梭菌(CMCC(B)64941)30～35℃22～ 24h營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基2℃～ 8 ℃保存3個(gè)月

白色念珠菌(CMCC(F)98001)23～28℃ 最多7天改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基2℃～ 8 ℃保存3個(gè)月

黑曲霉(CMCC(F)98003)23～28℃ 最多7天改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基2℃～ 8 ℃保存3個(gè)月

短小芽孢桿菌(CMCC(B)63602)30～35℃22～ 24h營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基2℃～ 8 ℃保存3個(gè)月

注：菌種斜面1次/周觀察狀態(tài)是否正常。

3.7菌種的使用及銷毀

每次進(jìn)行菌種復(fù)活時(shí)，只能復(fù)活一個(gè)菌種。如果要復(fù)活其他菌時(shí)，應(yīng)對(duì)所用物品重新消毒滅菌。

每次操作，都應(yīng)進(jìn)行記錄。菌種管上應(yīng)貼有牢固的標(biāo)簽。標(biāo)明菌種名稱、菌種代號(hào)、代次、傳代人、編號(hào)和傳代日期、貯存條件、有效期至等。

廢棄菌種及實(shí)驗(yàn)用品廢棄物的處理：121℃ 高壓蒸汽滅菌30分鐘。并對(duì)操作過程進(jìn)行記錄。

第四篇：大學(xué) 食品微生物 練習(xí)題

第一章a部分的練習(xí)題

一、概念：

1、細(xì)胞壁?2、周質(zhì)空間?3、菌落?4、莢膜?5、芽孢?6、糖被?7、氣生菌絲體?8、原生質(zhì)體

9、營養(yǎng)菌絲體?10、細(xì)胞膜?11、間體?12、羧化體?13、核質(zhì)體?14、鞭毛?15、菌毛?16、隱生態(tài)?17、球狀體?18、L型細(xì)菌?19、肽聚糖?20、溶菌酶?21、磷壁酸?22、伴孢晶體?23、基內(nèi)菌絲?24、孢子絲?25、支原體?26、衣原體?27、立克次氏體?28、螺旋體?29、螺菌?30、PHB?31、原核微生物

二、填空：

1、細(xì)菌的形態(tài)十分簡單，基本上只有-------、---------、----------三大類。

2、細(xì)菌是以----------方式繁殖，并是一種---------性較強(qiáng)的------核微生物。

3、量度細(xì)菌大小的單位是--------，量度其亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)則用---------作單位。

4、細(xì)胞壁主要由---------構(gòu)成，有-------和---------等多種功能，通過--------、----------或----------后再在光學(xué)顯微鏡下觀察，可證實(shí)細(xì)胞壁的存在。

5、原生質(zhì)體和球狀體有幾個(gè)共同特點(diǎn)，主要是-------，細(xì)胞呈-----狀，對(duì)-------十分敏感。

6、基質(zhì)蛋白使外壁層具有------功能，外壁蛋白是一類-------運(yùn)送蛋白或受體脂蛋白，作用是使細(xì)胞壁的--------牢固地連接在由肽聚糖組成的---------上。

7、細(xì)胞膜是-------和--------組成的，通過---------、--------、--------或--------等方法，可以證明細(xì)胞膜的存在，細(xì)胞膜的基本成分是由--------整齊地排列而成的。

8、磷脂雙分子層通常呈--------態(tài)，不同的-------和--------可在磷脂雙分子層中作側(cè)向運(yùn)動(dòng)。

9、異染粒功能是---------和----------，并可---------。

10、放線菌是一類呈----------，以----------繁殖的革蘭氏-----性細(xì)胞。

11、在固體培養(yǎng)基表面，放線菌的細(xì)胞有------和-------的分化。

12、細(xì)菌革蘭氏染色的主要原理是_。影響染色的主要因素是_和_，革蘭氏染色后為紅色的是_。

13、影響革蘭氏染色結(jié)果的因素是___，E.coli屬于_性菌，染色結(jié)果為_色。Bacillus?subtilis屬于_性菌，染色結(jié)果為_色。

14、微生物胞內(nèi)酶作用的最適PH多接近_，而細(xì)胞質(zhì)膜上的酶及胞外膜作用的最適PH則接近--------。

15、脂多糖的基本組成為，，為獲得G-菌原生質(zhì)體，可通過加入-----劑去除脂多糖。

16、影響微生物細(xì)胞化學(xué)組成的因素有。

17、肽聚糖單體的雙糖單位是由一個(gè)-------與一個(gè)-------通過---------鍵連接而成的。

18、肽聚糖單體的多肽尾中的四個(gè)氨基酸是按--------方式連接而成的。

19、莢膜的主要成分有---------、-----------、----------，尤以--------居多。

20、細(xì)菌的芽孢是----------體，而放線菌的孢子是----------體。

21、雙糖單位中---------鍵很容易被---------酶所水解，從而引起細(xì)菌因肽聚糖細(xì)胞壁的“散架”而死亡。

22、目前所知的肽聚糖有--------種，肽聚糖的多樣性變化主要發(fā)生在--------上。

三、簡答題：

1、革蘭氏陽性細(xì)菌與陰性細(xì)菌結(jié)構(gòu)單體有何差別？

2、簡述一下磷壁酸的主要生理功能。

3、簡述脂多糖的主要生理功能。

4、細(xì)胞膜的功能是什么？

5、芽孢形成的七個(gè)階段是什么？

6、革蘭氏陰性細(xì)菌與革蘭氏陽性細(xì)菌的肽聚糖結(jié)構(gòu)有何不同？

7、細(xì)菌芽孢有何特點(diǎn)？

8、如何理解“菌落特征與菌體細(xì)胞結(jié)構(gòu)、生長行為及環(huán)境條件有關(guān)”？

9、簡述細(xì)菌糖被的類型及其對(duì)科學(xué)研究、生產(chǎn)實(shí)踐的意義。

10、芽孢的耐熱機(jī)制是什么？

11、莢膜的功能是什么？

12、細(xì)胞壁的功能是什么？

四、論述題：

1、試?yán)L出細(xì)菌細(xì)胞構(gòu)造的模型圖，注明其一般構(gòu)造和特殊構(gòu)造，并扼要注明各部分的生理功能。

2、研究微生物的形態(tài)構(gòu)造有何重要性？試舉一例說明之。

3、試圖示革蘭氏陽性細(xì)菌和陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁構(gòu)造，并簡要說明其特點(diǎn)及成分。

4、試比較細(xì)菌的芽孢與孢囊的異同。

5、產(chǎn)芽孢的細(xì)菌有哪幾類？試各舉一例。細(xì)菌的芽孢有何實(shí)踐的重要性？

6、比較G+和G-在一系列生物學(xué)特性上的差別。

7、革蘭氏染色中，為什么能把細(xì)菌分為G+和G-細(xì)菌？什么情況下將會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果相反？

8、論述一下革蘭氏染色的步驟及其染色機(jī)理，有何重要意義？

9、試根據(jù)細(xì)菌細(xì)胞結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)，分析并舉例說明為什么它們能在自然界中分布廣泛。

10、如何理解“放線菌是介于細(xì)菌與絲狀真菌間而更接近細(xì)菌的一類微生物”？

11、如何理解“菌落特征與菌體細(xì)胞結(jié)構(gòu)、生長行為及環(huán)境條件有關(guān)”？

第一章b部分練習(xí)題

一、概念：

1、假菌絲?2、真菌絲?3、基質(zhì)?4、微體?5、膜邊體?6、子囊果?7、菌絲?8、菌絲體?9、菌絲球?10、芽痕?11、蒂痕?12、單細(xì)胞蛋白（SCP）13、氣生菌絲體?14、營養(yǎng)菌絲體

二、填空題：

1、酵母菌的細(xì)胞壁的外層為----------，內(nèi)層為----------，其間夾有一層----------。

2、維持酵母菌細(xì)胞壁強(qiáng)度的物質(zhì)主要是位于---------層的---------成分。

3、酵母菌細(xì)胞壁上含有少量--------和以----狀形式分布在芽孢周圍的---------。

4、蝸牛消化酶內(nèi)含有-------酶、-------酶、-------酶、--------酶、--------酶等30種。

5、除細(xì)胞核外，在酵母的------和------中也含有DNA。

6、產(chǎn)生擲孢子等無性孢子是在--------細(xì)胞上長出的-------上形成的。

7、營養(yǎng)菌絲體的特化形式有-----------------------------------------------------。

8、酵母菌是_，其無性繁殖方式是_和_，有性繁殖是_。

9、霉菌產(chǎn)生的無性孢子有___。

10、真菌的無性孢子有，，等。

11、真菌的有性孢子有，。

12、細(xì)菌和放線菌利用--------酶去除細(xì)胞壁，而真菌利用-------酶去除細(xì)胞壁。

三、簡答題：

1、霉菌一般具有哪五點(diǎn)特點(diǎn)？

2、簡述細(xì)胞膜的功能。

3、簡述芽體的形成過程。

4、霉菌的營養(yǎng)菌絲和氣生菌絲有何特點(diǎn)？它們可以分化出哪種特殊構(gòu)造？

5、如何獲得細(xì)菌（G+、G+）、放線菌、酵母菌、霉菌的原生質(zhì)體？

6、為什么霉菌菌落的中央邊緣、正面與反面在外形、顏色、構(gòu)造等方面常有明顯差別？放線菌、細(xì)菌和酵母菌呢？

7、酵母菌有性繁殖的過程是什么？

8、霉菌的有性繁殖方式的過程是什么？

9、霉菌有性繁殖方式的特點(diǎn)是什么？

10、簡述一下酵母菌的生活史。

11、簡述一下霉菌的生活史。

四、論述題：

1、試述真菌與人類的關(guān)系。

2、試論述真菌孢子的特點(diǎn)，并說明其實(shí)踐意義。

3、試列表比較真菌孢子的種類和各自的特點(diǎn)。

4、放線菌、酵母菌、細(xì)菌和霉菌這四大類微生物有何特點(diǎn)？為何有這些特點(diǎn)？掌握這些知識(shí)有何實(shí)踐意義？

5、細(xì)菌、粘細(xì)菌、放線菌、霉菌、酵母在繁殖方式上各有什么特點(diǎn)？

6、列表比較細(xì)菌、放線菌、霉菌、酵母菌細(xì)胞結(jié)構(gòu)、群體特征及繁殖方式的異同點(diǎn)。

7、詳細(xì)比較一下真核生物和原核生物的異同？

第二章部分的練習(xí)題

一、概念題：

1、包涵體?2、噬菌斑?3、烈性噬菌體?4、溫和噬菌體?5、裂解性生活周期?6、效價(jià)?7、溶源性?8、溶源噬菌體?9、溶源菌?10、原噬菌體?11、類病毒?12、擬病毒?13、朊病毒?14、病毒?15、一步生長曲線?16、巴斯德效應(yīng)

二、填空題：

1、病毒粒子的包膜由------和-------組成。

2、包涵體多數(shù)位于-------內(nèi)，具有-------性；少數(shù)位于--------內(nèi)，具有------性；也有-------和-------內(nèi)都存在的類型。

3、螺旋對(duì)稱病毒的代表是--------，十二面體對(duì)稱病毒的代表是--------，附和對(duì)稱的病毒代表是--------。

4、噬菌體的核酸是以-------居多，而真菌病毒則是----------。

5、噬菌體的裂解是由于水解細(xì)胞膜的-------酶和水解細(xì)胞壁的-------酶的作用。

6、溫和噬菌體的存在形式有------、--------和--------。

7、噬菌體的特點(diǎn)是___，其生長繁殖過程包括_____五個(gè)步驟。

8、病毒的主要組成為???和。具有，，等特點(diǎn)。

9、溶原性細(xì)菌具有，，等特點(diǎn)。

10、一步生長曲線的三個(gè)重要特性參數(shù)是--------、----------、---------。

三、簡答題：

1、根據(jù)包涵體的特點(diǎn)，可把它們分成哪幾種類型？

2、病毒核酸的類型可從哪幾點(diǎn)區(qū)分？

3、噬菌體的吸附作用受哪些內(nèi)外因素的影響？

4、簡述溫和噬菌體的特點(diǎn)。

5、簡述溶源菌有哪些顯著的特點(diǎn)。

6、簡述大腸桿菌l噬菌體在作為遺傳工程載體時(shí)具有哪些優(yōu)點(diǎn)？

7、病毒學(xué)發(fā)展可分幾個(gè)主要階段？簡述一下各階段的特點(diǎn)及其代表人物。

8、噬菌體的外形可分哪幾個(gè)類型？其相應(yīng)的核酸屬何類型？

9、病毒的核酸可分為哪幾個(gè)類型？

10、簡述烈性噬菌體其裂解性的生活史。

11、測定效價(jià)的方法有哪幾種？試簡述之。

四、論述題：

1、試介紹噬菌體在基因工程中的應(yīng)用。

2、如何判斷發(fā)酵罐被噬菌體侵染了？如何預(yù)防？怎樣處理？

第三章的練習(xí)題

一、概念

1、營養(yǎng)???2、營養(yǎng)物??3、氨基酸自養(yǎng)型微生物??4、氨基酸異養(yǎng)型微生物

5、生長因子??6、培養(yǎng)基??7、天然培養(yǎng)基???8、組合培養(yǎng)基??9、半組合培養(yǎng)基?????10、固體培養(yǎng)基???12、液體培養(yǎng)基??13、選擇培養(yǎng)基??14、鑒別培養(yǎng)基

15、加富培養(yǎng)基??16、碳源??17、氮源??18、能源??19、水活度

20、自養(yǎng)微生物

二、填空

1、生長因子過量合成微生物可作為-------的生產(chǎn)菌。

2、常用的選擇性培養(yǎng)基幾乎都同時(shí)利用了------和------原理。

3、營養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的方式有-----、------、-------、-------。

4、在促進(jìn)擴(kuò)散過程中，必須借助于膜上的底物--------的參與。

5、微生物吸收營養(yǎng)物質(zhì)的主要機(jī)制是--------，由它運(yùn)送的營養(yǎng)物質(zhì)主要有-------、-------和--------。

6、基團(tuán)移位主要用于運(yùn)送------、--------、--------、--------、--------和-------。

7、任何培養(yǎng)基都應(yīng)具備微生物所需的---------，且其間的-------是合適的，一旦配成，必須-------。

8、EMB培養(yǎng)基除有鑒別不同菌落的作用外，同時(shí)還有抑制--------細(xì)菌和選擇-------細(xì)菌的作用。

9、最常用的鑒別培養(yǎng)基為----------。

10、最常用的固體培養(yǎng)基凝固劑是----------。

11、微生物的營養(yǎng)類型分為-------、-------、--------、--------、----------。

12、微生物的的六大營養(yǎng)要素有-------------------------------------------。

13、按培養(yǎng)基用途可分為-------、-------、--------、--------、-------。

14、生長因子是___________________________________________，包括_____，_____，________，_____等，以生長因子劃分，微生物的營養(yǎng)類型可分為_______和______兩種。

15、低培養(yǎng)基氧化還原電勢(shì)Eh，可通過_______，_______，___，等手段。

16、培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)皿倒置是為了_______和________。

17、大腸桿菌的定義是______。在食品中檢測大腸菌群的意義是_______。常用________培養(yǎng)基，根據(jù)其用途，該培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。

三、簡答題

1、選擇和設(shè)計(jì)培養(yǎng)基的方法是什么？

2、選用培養(yǎng)基的原則是什么？

3、簡述一下如何利用鑒別培養(yǎng)基對(duì)大腸桿菌進(jìn)行檢測？

4、簡述營養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞方式的異同。

名稱????擴(kuò)散????促進(jìn)擴(kuò)散????主動(dòng)運(yùn)輸

載體

能量

逆濃度運(yùn)輸

有無選擇性????????????有高度的專一性

5、天然培養(yǎng)基的優(yōu)、缺點(diǎn)是什么？組合培養(yǎng)基的優(yōu)、缺點(diǎn)是什么？

6、根據(jù)固體的性質(zhì)，可把固體培養(yǎng)基分為幾種類型？

7、簡述固體培養(yǎng)基在科學(xué)研究和生產(chǎn)實(shí)踐上有哪些用途？

8、怎樣利用選擇性培養(yǎng)基，將混合樣品中的數(shù)量很少的某種微生物鑒別出？

9、生長因子包括哪幾類化合物？是否任何微生物都需要生長因子，如何才能滿足微生物對(duì)生長因子的需要？

10、活度對(duì)微生物的生命活動(dòng)有何影響？

11、天然、合成、半合成培養(yǎng)基各有哪些應(yīng)用？

12、試對(duì)細(xì)菌、放線菌、酵母菌各舉一種合成或半合成、天然培養(yǎng)基。

13、列表比較微生物的四大營養(yǎng)類型。

14、繪圖并簡要說明營養(yǎng)物跨膜運(yùn)輸?shù)乃姆N類型。

15、析下述培養(yǎng)基各組分的作用，依據(jù)其功能推測其所屬培養(yǎng)基的類?型：

A．麥康開培養(yǎng)液：蛋白胨20g,乳糖10g,牛膽酸鹽5g,NaCl?5g,水1000ml,PH7.4??加1%中性紅5ml???分裝與有發(fā)酵管的試管0.7kg/km2滅菌15min，用于腸道桿菌培養(yǎng)。

B.檸檬酸鹽培養(yǎng)基：NH4H2PO4??1g，K2HPO4???1g，NaCl??5g，MgSO4??0.2g,檸檬酸鈉2g,瓊脂??18g，水1000ml，PH6.8???加1%溴麝香草酚蘭10ml，1.1Kg/cm2滅菌20分鐘，制成斜面，用于細(xì)菌利用檸檬酸鹽試驗(yàn)。

A????????????????????功能????B??????????????????????功能

蛋白胨????????NH4H2PO4

乳糖????????K2HPO4

NaCl????????NaCl、MgSO4、K2HPO4

牛膽酸鹽????????檸檬酸鈉

PH7.4????????瓊脂

1%中性紅????????1%溴麝香草酚蘭

發(fā)酵管????????PH6.816、敘述微生物的營養(yǎng)物跨膜輸送方式。

17、試列表比較單純擴(kuò)散、促進(jìn)擴(kuò)散、主動(dòng)運(yùn)輸、基團(tuán)移位四種不同營養(yǎng)物質(zhì)運(yùn)送方式。

比較項(xiàng)目????特意性載體蛋白????運(yùn)送速度????溶質(zhì)運(yùn)送方式????平衡時(shí)內(nèi)外濃度????運(yùn)送分子????能耗????運(yùn)送前后溶質(zhì)分子

單純擴(kuò)散

促進(jìn)擴(kuò)散

主動(dòng)運(yùn)輸

基團(tuán)移位

四、論述題、1、選擇性培養(yǎng)基在微生物學(xué)工作中有何重要性？試舉一例，并分析其中的選擇性原理。

2、鑒別性培養(yǎng)基有何重要性？試以EMB為例分析鑒別性培養(yǎng)基的作用原理。

3、培養(yǎng)基中各種營養(yǎng)要素的含量一般遵循何種順序？試言其理。

4、在設(shè)計(jì)一種新培養(yǎng)基前為什么要遵循“目的明確”的原則，你能舉些實(shí)例來說明嗎？

5、試述瓊脂平板培養(yǎng)技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)及其在解決一系列微生物學(xué)問題中起過的重大歷史作用。

6、微生物由于個(gè)體微小一般都是以其群體形式進(jìn)行研究或利用，這必然就要涉及到對(duì)微生物的培養(yǎng)。能否找到一種培養(yǎng)基，使?所有的微生物都能良好地生長？為什么？

7、試結(jié)合微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課的內(nèi)容，談?wù)勗谶x擇、配制和使用培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意哪些方面的內(nèi)容。你們?cè)趯?shí)驗(yàn)中是如何做的？有何體會(huì)？

8、試比較營養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入微生物細(xì)胞的幾種方式的基本特點(diǎn)。

9、如何理解“菌落特征與菌體細(xì)胞結(jié)構(gòu)、生長行為及環(huán)境條件有關(guān)”？

10、寫出微生物以淀粉為碳源其代謝的一般過程，鑒定其代謝產(chǎn)物有何意義？為什么？

11、為什么霉菌菌落的中央邊緣、正面與反面在外形、顏色、構(gòu)造等方面常有明顯差別？放線菌、細(xì)菌和酵母菌呢？

12、營養(yǎng)要素與配置培養(yǎng)基的某一營養(yǎng)物是否同一概念？舉例說明。

第四章部分的練習(xí)題

一、概念

1、新陳代謝??2、生物氧化??3、呼吸鏈??4、無氧呼吸??5、發(fā)酵??6、操縱子

7、同型乳酸發(fā)酵??8、異型乳酸發(fā)酵??9、葡萄糖效應(yīng)??10、誘導(dǎo)酶

11、同功酶??12、變構(gòu)酶??13、操縱基因??14、結(jié)構(gòu)基因??15、調(diào)節(jié)基因

16、阻遏??17、回補(bǔ)順序??18、氧化磷酸化

二、填空

1、生物氧化的形式有---------、--------和--------，其過程又可分為------、--------、和--------，功能有-------、-------、和--------。

2、在真核微生物中，TCA循環(huán)的反應(yīng)在-------內(nèi)進(jìn)行，其中的大多數(shù)酶定位在------中；在原核微生物（例如，細(xì)菌）中，大多數(shù)酶都存在在------內(nèi)。

3、根據(jù)遞氫特別是受氫過程中氫受體性質(zhì)的不同，可把生物分為氧化區(qū)分成-------、--------和-------類型。

4、在氫或電子傳遞過程中，通過與------反應(yīng)發(fā)生偶聯(lián)，就可產(chǎn)生ATP形式的能量。

5、在硫呼吸過程中，------作為無氧呼吸鏈的最終氫受體，結(jié)果硫還原成-------。

6、碳酸鹽呼吸是一類以-------作為無氧呼吸鏈的末端氫受體的無氧呼吸。

7、凡能利用-------為唯一的碳源或能源的微生物，都能證明存在著-------循環(huán)，這種循環(huán)主要是通過-------酶和---------酶實(shí)現(xiàn)的。

8、反饋抑制的類型有---------和--------。

9、酶活性調(diào)節(jié)的類型有---------和-------。

10、操縱子分為------和------兩類。

11、在谷氨酸發(fā)酵生產(chǎn)中，--------的濃度對(duì)谷氨酸的積累有著明顯的作用。

12、酵母菌生物氧化在____內(nèi)進(jìn)行，而細(xì)菌生物氧化部位在____。

13、根據(jù)微生物生長與氧的關(guān)系，可分為_____、______和_____三大類。枯草芽孢桿菌屬于_____微生物，肉毒芽孢桿菌屬于______微生物，大腸桿菌屬于_____微生物。

14、至今發(fā)現(xiàn)的進(jìn)行固氮的微生物均為_____________微生物。固氮的六個(gè)必要條件為________，__________，______，_______，_____，________。

15、在發(fā)酵工業(yè)上，可通過___________________，_________________，__________等方法獲得大量有用代謝產(chǎn)物。

16、酵母菌進(jìn)行乙醇發(fā)酵時(shí)，將葡萄糖經(jīng)______途徑產(chǎn)生丙酮酸，由丙酮酸生成的乙醛被______成乙醇。

17、微生物胞內(nèi)酶作用的最適PH多接近________，而細(xì)胞質(zhì)膜上的酶及胞外膜作用的最適PH則接近________。

三、簡答題

1、HMP途徑在微生物生命活動(dòng)中有何重要意義？

2、簡述ED途徑的特點(diǎn)？

3、經(jīng)ED途徑發(fā)酵與傳統(tǒng)酵母酒精發(fā)酵相比，有哪些優(yōu)點(diǎn)？

4、硝酸鹽在微生物生命活動(dòng)中，具有哪些功能？

5、葡糖異生作用的生物意義是什么？

6、簡述代謝調(diào)控在發(fā)酵工業(yè)中的應(yīng)用。

7、試述EMP途徑在微生物生命活動(dòng)中的重要性。

8、簡述TCA循環(huán)在微生物產(chǎn)能和發(fā)酵生產(chǎn)中的重要性。

9、組成呼吸鏈的組分主要有哪幾個(gè)，它們各有什么作用。

10、列表比較呼吸、無氧呼吸和發(fā)酵的異同點(diǎn)。

11、列表比較同型和異性發(fā)酵的異同點(diǎn)。

12、固氮過程需要滿足哪些條件?

13、酶活性調(diào)節(jié)與酶合成調(diào)節(jié)有何不同？它們間有何聯(lián)系？

14、酶的誘導(dǎo)有何特點(diǎn)？意義如何？

15、列表比較生物氧化與非生物氧化的主要異同點(diǎn)。

16、繪圖并簡要說明有氧呼吸典型的呼吸鏈。

四、論述題

1、試圖示解釋色氨酸的操縱子的末端產(chǎn)物阻遏機(jī)制。

2、試述代謝調(diào)控在賴氨酸發(fā)酵中的應(yīng)用。

3、如何選育抗反饋調(diào)節(jié)突變株？舉例說明它在發(fā)酵生產(chǎn)中的應(yīng)用。

4、細(xì)胞膜缺陷突變株在發(fā)酵生產(chǎn)中有何應(yīng)用，試舉例說明之。

5、通過大腸桿菌乳糖操作子示意圖模型及理論，說明葡萄糖效應(yīng)和二次生長現(xiàn)象。

6、如何判斷發(fā)酵罐被噬菌體侵染？如何預(yù)防？如何處理？

7、不同營養(yǎng)類型的微生物在不同條件下?產(chǎn)生ATP和還原力的方式與特點(diǎn)。

8、何為初級(jí)代謝、次級(jí)代謝？試論二者間的關(guān)系。

9、當(dāng)環(huán)境中葡萄糖、山梨醇同時(shí)存在時(shí)，E.coli生長現(xiàn)象并分析其原因。

10、試述生物素對(duì)谷氨酸發(fā)酵生產(chǎn)的影響，并簡述其作用機(jī)制。

11、如何使微生物合成比自生所需更多的產(chǎn)物？

12、試圖示由EMP途徑的中間代謝物——丙酮酸出發(fā)的六種發(fā)酵類型及其各自的發(fā)酵產(chǎn)物。

13、在工業(yè)上“發(fā)酵”的含義是什么？試以一個(gè)具體的工業(yè)發(fā)酵實(shí)例為例，從微生物代謝角度說明其原理。

14、如何運(yùn)用代謝調(diào)控理論使微生物合成比自身需求量更多的有用代謝產(chǎn)物？舉例說明。

15、當(dāng)培養(yǎng)基中葡萄糖和乳糖同時(shí)存在時(shí)，E.coil的生長現(xiàn)象并分析其原因；

16、試設(shè)計(jì)選育高纖維素酶高產(chǎn)菌的實(shí)驗(yàn)方案，如已知纖維素酶的合成是操縱子的阻遏機(jī)制，如何利用這一機(jī)理設(shè)計(jì)有效的篩選方法？

第五章部分的練習(xí)題

一、概念題：

1、同步生長?2、生長速率常數(shù)?3、對(duì)數(shù)期?4、生長限制因子?5、生長產(chǎn)量常數(shù)?6、最適溫度?7、防腐?8、滅菌?9、繁殖?10、生長曲線?11、代時(shí)?12、倍增時(shí)間?13、連續(xù)培養(yǎng)?14、連續(xù)發(fā)酵?15、恒濁器?16、恒化器?17、抗生素?18、耐藥性?19、選擇毒力?20、生長?21、同步培養(yǎng)

二、填空題：

1、平板菌落計(jì)數(shù)法的原理是在-------或-------中吸有合適的培養(yǎng)基，其中還加有--------。

2、研究單個(gè)細(xì)菌個(gè)體的變化目前常使用的方法是：一是-------，二是---------。

3、同步培養(yǎng)技術(shù)是指設(shè)法使群體中的所有細(xì)胞盡可能的都處在-------中，然后分析此群體的各種--------特征，從而了解單個(gè)細(xì)胞所發(fā)生的變化。

4、獲得細(xì)菌同步生長的方法主要有兩類：其一是通過--------；其二是通過----------，它一般可用-------或--------來達(dá)到。

5、營養(yǎng)物的濃度可影響微生物的---------和--------。在---------情況下，營養(yǎng)物的濃度才會(huì)影響生長速率，隨著營養(yǎng)物濃度的逐漸增高，生長速率--------，而只影響---------。

6、指數(shù)期的微生物因其整個(gè)群體的--------較一致，-------的平衡發(fā)展和-------的恒定，故可作為代謝、生理等研究的---------。是增殖噬菌體的最適----------。

7、在穩(wěn)定期時(shí)，細(xì)胞開始貯存--------、----------和--------等貯藏物；多數(shù)芽孢桿菌在這時(shí)開始形成-------；有的微生物在穩(wěn)定期時(shí)還開始合成---------。

8、穩(wěn)定期是以生產(chǎn)-------或---------的代謝產(chǎn)物。

9、在衰亡期，整個(gè)群體呈現(xiàn)出-----生長，在這一時(shí)期有的微生物因蛋白水解酶活力的增強(qiáng)，就發(fā)生----------。

10、恒化器是一種通過控制某一營養(yǎng)物的-------，使其始終成為-------的條件下達(dá)到的連續(xù)培養(yǎng)裝置。

11、兼性厭氧型在有氧時(shí)靠-------產(chǎn)能；在無氧時(shí)借---------或-------產(chǎn)能。

12、微生物作為一個(gè)總體來說，其生長的PH值范圍極廣，多數(shù)真菌是-------，而多數(shù)放線菌是--------。

13、根據(jù)生長和O2的關(guān)系，大多數(shù)酵母屬于_，大多數(shù)霉菌屬于_。

14、平板菌落計(jì)數(shù)法結(jié)果表達(dá)中常用的“clu”的意思是_。

15、根據(jù)微生物生長和氧氣的關(guān)系，可分為___三大類型。黑曲酶屬于_，肉毒梭狀芽孢桿菌屬于_，釀酒酵母屬于_，米曲酶屬于_，解脂假絲酵母屬于_，酪酸梭狀芽孢酵母屬于_。

16、實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有___等。

17、與氧有關(guān)的微生物類型有--------、----------、---------、----------、---------。

18、干熱滅菌的溫度是----------，處理時(shí)間為---------。

19、巴氏滅菌的溫度為----------，處理時(shí)間為----------。

20、生長曲線是以-------為橫坐標(biāo)，以-------為縱坐標(biāo)。

21、根據(jù)----------------的不同，把生長曲線分為----------、----------、----------、----------四個(gè)階段。

三、簡答題：

1、影響延滯期長短的因素有哪些？

2、延滯期出現(xiàn)的原因是什么？

3、簡述對(duì)數(shù)期的特點(diǎn)。

4、影響指數(shù)期微生物增大時(shí)間的因素有哪些？

5、簡述穩(wěn)定期的特點(diǎn)。

6、穩(wěn)定期到來的主要原因有哪些？

7、列表比較恒濁器與恒化器的區(qū)別。

8、連續(xù)發(fā)酵有哪些優(yōu)缺點(diǎn)？

9、影響微生物生長的主要因素有哪些？

10、防腐主要有哪些措施？

11、影響加壓蒸汽滅菌效果的因素有哪些？

12、計(jì)算微生物的繁殖數(shù)時(shí)，常用哪些方法？比較它們的優(yōu)缺點(diǎn)？

13、如何使微生物達(dá)到同步生長？

14、延滯期的特點(diǎn)是什么？如何縮短延滯期？

15、影響濕熱滅菌效果的主要因素有哪些？

16、為什么有些物品在滅菌過程中要實(shí)施間歇滅菌？

17、測定微生物的生長量有那些方法？比較優(yōu)缺點(diǎn)？

18、從微生物學(xué)角度分析低酸性的食品和酸性食品如要長期保存，應(yīng)分別采取什么溫度殺菌？為什么？

19、試證明：Z=

四、論述題：

1、在微生物培養(yǎng)過程中引起PH值改變的原因有哪些？在實(shí)踐中如何保證微生物能處于較穩(wěn)定和合適的PH環(huán)境中？

2、在實(shí)驗(yàn)室中培養(yǎng)厭氧微生物的主要方法有哪些？其原理如何？哪兩類屬于培養(yǎng)嚴(yán)格厭氧菌的技術(shù)？

3、試述生產(chǎn)實(shí)踐中微生物培養(yǎng)裝置發(fā)展的幾個(gè)特點(diǎn)？

4、試比較殺菌（滅菌）、消毒和防腐的異同。

5、利用加熱蒸汽對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌時(shí)常會(huì)帶來哪些不利的影響？采用哪些對(duì)策方可避免？

6、試比較細(xì)菌的生長繁殖與高等動(dòng)植物的有哪些異同？

7、結(jié)合本章的知識(shí)，總結(jié)在日常生活中有哪些措施是被用來抑制或殺滅微生物的。

8、具體說明怎樣利用微生物的生長曲線使發(fā)酵工業(yè)的效率有所提高。

第六章部分的練習(xí)題（*）、一、概念

1、遺傳型??2、表型??3、變異??4、飾變??5、核基因組??6、質(zhì)粒

7、單倍體??8、雙倍體??9、基因??10、營養(yǎng)缺陷型??11、突變率

12、產(chǎn)量突變率??13、轉(zhuǎn)座因子??14、倒位??15、易位??16、光復(fù)合作用

17、暗修復(fù)作用??18、定向培育??19、誘變育種??20、基本培養(yǎng)基

21、完全培養(yǎng)基??22、補(bǔ)充培養(yǎng)基??23、原養(yǎng)型??24、轉(zhuǎn)化??25、感受態(tài)

26、基因重組??27、轉(zhuǎn)導(dǎo)??28、普遍轉(zhuǎn)導(dǎo)??29、局限轉(zhuǎn)導(dǎo)??30、接合31、有性雜交??32、準(zhǔn)性生殖??33、基因工程??34、染色體畸變??35、轉(zhuǎn)換

36、移碼突變??37、點(diǎn)突變??38、顛換??39、誘變劑??40、野生型

41、轉(zhuǎn)染??42、溶原轉(zhuǎn)變??43、流產(chǎn)轉(zhuǎn)導(dǎo)??44、原生質(zhì)體融合??45、接合子

46、轉(zhuǎn)化子??47、回復(fù)突變??48、艾姆斯試驗(yàn)（Ames?test）49、PCR

二、填空

1、-------和-------是生物體最本質(zhì)的屬性之一。

2、在核酸的結(jié)構(gòu)上，絕大多數(shù)微生物的DNA是-------鏈的，只有少數(shù)病毒的核酸為------鏈結(jié)構(gòu)的。

3、基因的物質(zhì)基礎(chǔ)的一個(gè)具有特定--------的核酸片段。

4、微生物的基因調(diào)控系統(tǒng)是由操縱子和---------組成，操作子又包括三種基

因，即----------、-----------和--------------。

5、質(zhì)粒的分離大致可包括細(xì)菌的---------、蛋白質(zhì)和DAN的----------和設(shè)法使染色體DNA與質(zhì)粒DNA相-------等幾種步驟，其中以----------步驟為最重要。

6、經(jīng)分離后的質(zhì)粒可用-------、--------或----------來鑒定。

7、同一種質(zhì)粒由于其構(gòu)象的不同，其---------也不同，因而可進(jìn)行分離。

8、能夠引起間接置換的誘變劑都是一些---------的類似物。

9、染色體結(jié)構(gòu)上的變化可分為-----和-------兩類。

10、轉(zhuǎn)座因子主要有三類，即--------、----------、和-------------。

11、自發(fā)突變是指在---------下生物體自然發(fā)生的突變。

12、---------對(duì)紫外線的敏感性要比嘧啶強(qiáng)得多它的光化產(chǎn)物主要是----------，其中了解較清楚的是-----------的形成和消除。

13、紫外線的主要作用是使同鏈DNA的相鄰嘧啶間形成-------結(jié)合的---------。

14、在暗修復(fù)過程中有四種酶參與，即----------、----------、---------、和---------。

15、一般可通過--------與-----------兩種對(duì)突變株進(jìn)行生產(chǎn)性能的測定。

16、感受態(tài)因子是一種---------蛋白，這種蛋白質(zhì)可能是------上的一種組成，它可以催化--------的吸收或降解---------成分，以讓細(xì)胞表面的DNA受體顯露出來；它也可能是一種-------酶。

17、呈--------形式的轉(zhuǎn)化因子其轉(zhuǎn)化頻率最高。

18、在--------菌和--------菌中都存在著接合的現(xiàn)象。

19、在F+菌株的細(xì)胞中存在著--------態(tài)的F因子，在細(xì)胞表面還有與F因子數(shù)目相當(dāng)?shù)?---------。

20、在F-菌株中不含----------，細(xì)胞表面也沒有----------。

21、原核微生物的基因重組的方式有--------、---------、--------、--------。

22、-------和-------是除染色體以外的另外兩類遺傳物質(zhì)。

23、凡能產(chǎn)生----------的酵母菌和霉菌都能進(jìn)行有性生殖。

24、真核微生物的基因重組方式有--------和----------。

25、基因工程比其他育種方法更有--------、---------、---------的優(yōu)點(diǎn)。

26、決定性別的質(zhì)粒是--------，又稱-----------。

27、轉(zhuǎn)導(dǎo)可分為--------和--------。

28、普通性轉(zhuǎn)導(dǎo)可分為-----------和-----------。

29、光復(fù)活作用是指____四種情況。

30、染色體畸變是指____四種情況。

31、影響微生物的抗熱性的因素是_____。

33、細(xì)胞的異常形態(tài)有畸形和衰頹形，前者是指由于_而引起的，而后者是指由于_而引起的。

34、在營養(yǎng)缺陷型菌株篩選過程中，常用抗生素法淘汰野生型菌株。其中淘汰野生型菌株細(xì)菌加入的抗生素為_，而淘汰酵母菌和霉菌加入的抗生素則為________。

三、簡答題

1、微生物有哪些獨(dú)特的生物學(xué)特性？

2、突變有哪幾種類型？

3、簡述突變的特點(diǎn)？

4、平板影印培養(yǎng)法的基本過程是什么？

5、自發(fā)突變可能的機(jī)制有哪些？

6、如何挑選優(yōu)良的出發(fā)菌株？

7、轉(zhuǎn)化的過程可分為幾個(gè)階段？

8、局限轉(zhuǎn)導(dǎo)有哪些特點(diǎn)？

9、溶原轉(zhuǎn)變與轉(zhuǎn)導(dǎo)有什么不同？

10、簡述原生質(zhì)體融合的主要步驟？

11、準(zhǔn)性生殖的主要過程分為幾步？

12、基因工程的基本操作分為幾步？

13、如何獲得目的基因？

14、選擇載體時(shí)必須滿足哪些條件？

15、誘變育種的基本環(huán)節(jié)有哪些？整個(gè)工作環(huán)節(jié)的關(guān)鍵是什么？

16、簡述影印培養(yǎng)法在育種工作中的應(yīng)用？

17、原生質(zhì)體融合在育種工作中有何重要性/

18、什么叫菌種衰退？如何區(qū)別衰退、飾變與雜菌污染？

19、現(xiàn)有的微生物保藏法可分為幾類？試列表解之。

20、列表比較準(zhǔn)性生殖與有性生殖的區(qū)別。

21、為什么微生物經(jīng)紫外線照射后要在暗中培養(yǎng)？

22、簡述一下誘變育種的原則。

23、目的基因是如何導(dǎo)入受體細(xì)胞的？

24、處于感受態(tài)的細(xì)菌細(xì)胞有何優(yōu)點(diǎn)？

25、如要長期保藏低酸性食品和酸性食品，通常分別采用什么t殺菌？???????????為什么？

26、什么是影印培養(yǎng)？如何用其來說明基因突變自發(fā)性，隨機(jī)性？

四、論述題

1、歷史上證明核酸是遺傳物質(zhì)基礎(chǔ)的著名實(shí)驗(yàn)有哪幾個(gè)？實(shí)驗(yàn)者是誰？工作發(fā)表于何時(shí)？你能舉出其中之一來加以說明嗎？

2、為什么證明核酸是遺傳物質(zhì)基礎(chǔ)的三個(gè)經(jīng)典試驗(yàn)都不約而同地選用了微生物作研究對(duì)象？

3、舉例說明在微生物的誘變育種工作中，采用高效的篩選方案和方法的重要性。

4、試用表解法概括一下篩選營養(yǎng)缺陷型菌株的主要步驟和方法。

5、試述瓊脂塊培養(yǎng)法的原理、方法及其在育種中的應(yīng)用。

6、從野生型和營養(yǎng)缺陷型混合菌液中如何檢出營養(yǎng)缺陷型菌株？試介紹四種方法，并說明其共同原理。

7、基因工程在哪些領(lǐng)域得到應(yīng)用及其發(fā)展前景如何？

8、試從供體、載體、受體、工具酶和“工程菌”在生產(chǎn)實(shí)踐上發(fā)揮經(jīng)濟(jì)效易等方面來討論微生物在發(fā)酵遺傳工程中的重要作用。

9、就方法的簡便與否，保藏效果的好壞，保藏對(duì)象的范圍，保藏的基本原理以及保藏期的長短等方面列表比較幾種最常用的菌種保藏法。

10、使用什么方法可以使個(gè)別菌種發(fā)生突變？如何選擇？自己設(shè)計(jì)步驟。

11、設(shè)計(jì)一種從自然界中篩選高溫淀粉酶產(chǎn)生菌的試驗(yàn)方案，并解釋主??要步驟的基本原理。

12、試設(shè)計(jì)一種從自然界中篩選果膠酶產(chǎn)生菌的試驗(yàn)方案，并解釋原理；如果果膠酶作為一種食品工業(yè)用酶，則必須考慮其安全性，從那幾個(gè)方面著手來保證該酶的安全性？

13、試述微生物菌種保藏的原理和常用方法，你認(rèn)為對(duì)于Escherichia???coli?和Aspergillus?niger分別采用什么保藏方法為好？請(qǐng)說明理由；

14、影響微生物抗熱力的因素有哪些？解釋D值、Z值以及D值和Z值得關(guān)系。

15、試設(shè)計(jì)一個(gè)試驗(yàn)證明基因突變的自發(fā)性和不對(duì)應(yīng)性。

16、試設(shè)計(jì)選育高纖維素酶高產(chǎn)菌的實(shí)驗(yàn)方案，如已知纖維素酶的合成是操縱子的阻遏機(jī)制，如何利用這一機(jī)理設(shè)計(jì)有效的篩選方法？

17、試述微生物菌種保藏的原理。Lactobacillus?bulgaricus?和Aspergillus?niger若要長期有效的保藏，可分別采用哪些方法？為什么？

18、試用平板影印培養(yǎng)法證明基因突變的自發(fā)性和不對(duì)應(yīng)性。

19、設(shè)計(jì)一種從自然界中篩選酸性蛋白酶產(chǎn)生菌的試驗(yàn)方案，說明其原理；若該酶作為食品工業(yè)用酶，如何保證其安全性？

20、述艾姆氏（Ames）法檢測致癌劑的理論依據(jù)，一般方法和優(yōu)點(diǎn)。

21、為什么在進(jìn)行誘變處理時(shí)，要把成團(tuán)的微生物細(xì)胞或孢子制成充分分散的單細(xì)胞或孢子懸液？

22、設(shè)計(jì)篩選高溫淀粉酶產(chǎn)生菌的方案，指出關(guān)鍵步驟。

23、菌種保藏的基本原理和冷凍干燥保藏法的過程、原理。在檢出缺陷型過程中采用夾層培養(yǎng)法，為什么基本培養(yǎng)基倒成“三明治”？

第七章部分的練習(xí)題

一、概念

1、極端微生物??2、生態(tài)??3、區(qū)系??4、活性污泥??5、無菌動(dòng)物??6、純培養(yǎng)

7、悉生動(dòng)物??8、硝化作用??9、反硝化作用??10、氨化作用??11、互生

12、共生??13、寄生??14、拮抗??15、捕食??16、生物膜??17、單級(jí)生態(tài)系統(tǒng)

18、雙級(jí)生態(tài)系統(tǒng)??19、三級(jí)生態(tài)系統(tǒng)?20、正常菌群

二、填空題

1、大腸桿菌的定義是_。在食品中檢測大腸菌群的意義是_。常用_培養(yǎng)基，根據(jù)其用途，該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。

2、活性污泥是指_，用活性污泥處理污水的方法又稱_法。

三、簡答題

1、在生命科學(xué)研究對(duì)象中，一般可以分成哪十個(gè)水平？

2、從含菌樣中篩選菌種一般要通過哪幾個(gè)環(huán)節(jié)和方法？

3、微生物的純種分離法有何重要性？

4、微生物生態(tài)學(xué)的任務(wù)是什么？

5、簡述微生物學(xué)與人類的關(guān)系。

6、悉生學(xué)研究的是什么？

7、自然界中碳元素是怎樣循環(huán)的？

8、自然界中的硫、碳元素是怎樣循環(huán)的，有哪些主要微生物參與？

9、用微生物學(xué)方法處理污水的基本原理是什么？

10、活性污泥與生物膜在污水處理中各起著什么作用？

11、微生物引起的劣化有哪幾種？

12、極端環(huán)境下的微生物包括哪幾種？

13、下列食品如變質(zhì)，主要是有什么??類型的微生物所引起？Why？1〉市售面包2〉充CO2的果汁；

14、下列食品如果變質(zhì)，主要是由什么類型的微生物所引起？Why？1〉市售的米粉2〉肉類罐頭

15、什么是大腸菌群，測檢食品中大腸菌群的意義是什么？常用什么培養(yǎng)基？該培養(yǎng)基中各種成分的主要作用是什么？這是一類什么性質(zhì)的培養(yǎng)基？

16、引起以下食品變質(zhì)的微生物類群是什么？為什么？

17、試分析下列現(xiàn)象產(chǎn)生的主要原因是什么？如何防止？

A）添加有山梨酸鉀防腐劑的面包出現(xiàn)中心發(fā)粘變質(zhì)的情況。

B）經(jīng)高溫高壓殺菌的低酸性罐頭出現(xiàn)變質(zhì)，檢測發(fā)現(xiàn)其中有大量的革蘭氏陰性桿菌。

C）把釀酒酵母接入煮過的糯米中室溫發(fā)酵，無法制得酒釀。

四、論述題

1、為什么說土壤是微生物的“大本營”或是人類最豐富的“菌種資源庫”？

2、試討論空氣、塵埃、微生物與微生物間的關(guān)系。

3、檢驗(yàn)引用水的質(zhì)量時(shí)，微生物要把大腸桿菌數(shù)作為重要測定指標(biāo)？我國衛(wèi)生部門對(duì)自來水的總菌量和大腸桿菌量有何規(guī)定？

4、工農(nóng)業(yè)產(chǎn)品為何會(huì)發(fā)生霉腐、變質(zhì)？如何預(yù)防？能舉些實(shí)例嗎？

5、為什么說微生物在自然界的氮素循環(huán)中起著關(guān)鍵的作用？

6、試述微生物生態(tài)知識(shí)與工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的關(guān)系。

7、沼氣發(fā)酵的微生物學(xué)原理是什么？試分析沼氣發(fā)酵在國民經(jīng)濟(jì)和環(huán)境保護(hù)中的重大戰(zhàn)略意義。

8、奶產(chǎn)品經(jīng)過封口殺菌后，出現(xiàn)部分產(chǎn)品發(fā)生變質(zhì)，是分析是什么原因，如何防止？

9、什么是微生物的正常菌群？試分析腸道正常菌群和人體的關(guān)系。

10、下述微生物的生態(tài)環(huán)境如何？設(shè)想如何分離。

第八章部分的練習(xí)(*)

一、概念題：

1、黃原膠?2、一步發(fā)酵法?3、兩步發(fā)酵法?4、葡萄糖氧化酶?5、明膠?6、蛋白酶

二、填空題：

1、面包酵母是一種-------細(xì)胞的生物，屬于--------菌類，學(xué)名為-----------。

2、檸檬酸的發(fā)酵微生物是----------，蘋果酸的發(fā)酵微生物為----------。

3、谷氨酸的生產(chǎn)菌為--------，其發(fā)酵原料為---------質(zhì)的發(fā)酵原料。

4、黃原膠是由----------菌提取而成的。

三、簡答題：

1、列表說明微生物在食品制造方面的作用。

2、微生物在食品制造方面中菌種擴(kuò)大培養(yǎng)有哪些共同特點(diǎn)？

3、在雙歧桿菌酸奶生產(chǎn)中，常用什么特定的工藝路線？

4、在釀?dòng)蜕a(chǎn)中對(duì)生產(chǎn)原料有什么要求？

5、簡述黃原膠的性質(zhì)及在食品中的應(yīng)用情況。

6、簡述啤酒生產(chǎn)的整個(gè)工藝過程。

7、下列食品如變質(zhì)，主要是有什么類型的微生物所引起？Why？1〉市售面包2〉充CO2的果汁。

8、簡述釀造食醋的三套微生物及其主要菌種。

9、簡述生產(chǎn)酶制劑過程中所需要的條件？

10、引起以下食品變質(zhì)的微生物類群是什么？為什么？1）消毒牛奶?2）真空包裝的蜜餞產(chǎn)品?3）面粉?4）充CO?不足的碳酸飲料?5）殺菌不足的肉類罐頭

11、設(shè)計(jì)篩選高溫淀粉酶產(chǎn)生菌的方案，指出關(guān)鍵步驟。

四、論述題：

1、為什么說食醋生產(chǎn)是多種微生物參與的結(jié)果？

2、近年來生產(chǎn)發(fā)酵乳制品時(shí)在菌種開發(fā)方面有哪些進(jìn)展？

3、酵母菌在面包制造過程中，起哪些重要作用？

4、在發(fā)酵生產(chǎn)葡萄酒過程中應(yīng)注意的問題有哪些？

5、檸檬酸在食品中的作用有哪些？

6、說明微生物酶制劑在食品加工制造中的應(yīng)用情況。

7、設(shè)計(jì)一種從自然界中篩選高溫淀粉酶產(chǎn)生菌的試驗(yàn)方案，并解釋主要步驟的基本原理。

8、試設(shè)計(jì)一種從自然界中篩選果膠酶產(chǎn)生菌的試驗(yàn)方案，并解釋原理；如果果膠酶作為一種食品工業(yè)用酶，則必須考慮其安全性，從那幾個(gè)方面著手來保證該酶的安全性？

9、果奶產(chǎn)品經(jīng)過封口殺菌后，出現(xiàn)部分產(chǎn)品發(fā)生變質(zhì)，是分析是什么原因，如何防止？

10、試設(shè)計(jì)選育高纖維素酶高產(chǎn)菌的實(shí)驗(yàn)方案，如已知纖維素酶的合成是操縱子的阻遏機(jī)制，如何利用這一機(jī)理設(shè)計(jì)有效的篩選方法？

11、在以消毒奶為原料生產(chǎn)酸奶的過程中，為什么要在盡可能短的時(shí)間內(nèi)達(dá)到酸凝？可采取哪些措施？

12、設(shè)計(jì)一種從自然界中篩選酸性蛋白酶產(chǎn)生菌的試驗(yàn)方案，說明其原理；若該酶作為食品工業(yè)用酶，如何保證其安全性？

13、試比較啤酒發(fā)酵過程與葡萄酒發(fā)酵過程的異同。

14、據(jù)你了解，哪些微生物在食品工業(yè)中廣泛應(yīng)用？試舉一例具體說明。

15、從微生物角度分析酸奶生產(chǎn)的關(guān)鍵及原因。

16、試分析下列現(xiàn)象產(chǎn)生的主要原因是什么？如何防止？

1）添加有山梨酸鉀防腐劑的面包出現(xiàn)中心發(fā)粘變質(zhì)的情況。

2）經(jīng)高溫高壓殺菌的低酸性罐頭出現(xiàn)變質(zhì)，檢測發(fā)現(xiàn)其中有大量的革蘭氏陰性桿菌。

3）把釀酒酵母接入煮過的糯米中室溫發(fā)酵，無法制得酒釀。

第五篇：食品微生物綜合實(shí)驗(yàn)報(bào)告

食品微生物綜合實(shí)驗(yàn)報(bào)告

項(xiàng)目一:食品中細(xì)菌總數(shù)的測定…………………………1

項(xiàng)目二： 革蘭氏染色技術(shù)………………………………5

項(xiàng)目三：飲用水中大腸菌群測定………………………7

指導(dǎo)老師：郭永班級(jí):食品1002班學(xué)號(hào)：2010040734

姓名：任冠華

食品微生物綜合實(shí)驗(yàn)報(bào)告

項(xiàng)目一：食品中細(xì)菌總數(shù)的測定

1.目的

本方法規(guī)定了食品中菌落總數(shù)的測定方法。本方法適合于各類食品中菌落總數(shù)的測定。2.設(shè)備和材料

溫箱：36±1℃。恒溫水浴：46±1℃。電爐 吸管。廣口瓶或三角瓶：容量為500ml玻璃珠：直徑約5mm。平皿：直徑為90mm。試管。酒精燈。試管架。滅菌刀或剪子。滅菌鑷子。3.測定步驟 檢樣稀釋及培養(yǎng)

（1）以無菌操作，將檢樣25g(或mL)剪碎放于含有225mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的滅菌玻璃瓶內(nèi)(瓶內(nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的玻璃珠)或滅菌乳缽內(nèi)，經(jīng)充分振搖或研磨做成1∶10的均勻稀釋液。（2）用1mL滅菌吸管吸取1∶10稀釋液1mL，沿管壁徐徐注入含有9mL滅菌生理鹽水 或其他稀釋液的試管內(nèi)(注意吸管尖端不要觸及管內(nèi)稀釋液)，振搖試管，混合均勻，做成1∶100的稀釋液。（3）另取1mL滅菌吸管，按上條操作順序，做10倍遞增稀釋液，如此每遞增稀釋一次，即換用1支1mL火菌吸管。

（4）根據(jù)食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)要求或?qū)?biāo)本污染情況的估計(jì)，選擇2～3個(gè)適宜稀釋度，分別在做10倍遞增稀釋的同時(shí)，即以吸取該稀釋度的吸管移1mL稀釋液于滅菌平皿內(nèi)，每個(gè)稀釋度做兩個(gè)平皿。（5）稀釋液移入平皿后，應(yīng)及時(shí)將涼至46℃營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(可放置于46±1℃水浴保溫)注入平皿約15mL，并轉(zhuǎn)動(dòng)平皿使混合均勻。同時(shí)將營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基傾入加有1mL稀釋液的滅菌平皿內(nèi)作空白對(duì)照

（6）待瓊脂凝固后，翻轉(zhuǎn)平板，置36±1℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)48±2h。菌落計(jì)數(shù)方法

做平板菌落計(jì)數(shù)時(shí)，可用肉眼觀查，必要時(shí)用放大鏡檢查，以防遺漏。在記下各平板的菌落數(shù)后，求出同稀釋度的各平板平均菌落總數(shù)。

菌落計(jì)數(shù)的報(bào)告

食品微生物綜合實(shí)驗(yàn)報(bào)告

（1）平板菌落數(shù)的選擇

選取菌落數(shù)在30～300之間的平板作為菌落總數(shù)測定標(biāo)準(zhǔn)。一個(gè)稀釋度使用兩個(gè)平板，應(yīng)采用兩個(gè)平板平均數(shù)，其中一個(gè)平板有較大片狀菌落生長時(shí)，則不宜采用，而應(yīng)以無片狀菌落生長的平板作為該稀釋度的菌落數(shù)，若片狀菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均勻，即可計(jì)算半個(gè)平板后乘2以代表全皿菌落數(shù)。平皿內(nèi)如有鏈狀菌落生長時(shí)(菌落之間無明顯界線)，若僅有一條鏈，可視為一個(gè)菌落；如果有不同來源的幾條鏈，則應(yīng)將每條鏈作為一個(gè)菌落計(jì)。（2）稀釋度的選擇

應(yīng)選擇平均菌落數(shù)在30～300之間的稀釋度，乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之。

若有兩個(gè)稀釋度，其生長的菌落數(shù)均在30～300之間，則視兩者之比如何來決定。若其比值小于或等于2，應(yīng)報(bào)告其平均數(shù)；若大于2則報(bào)告其中較小的數(shù)字。

若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均大于300，則應(yīng)按稀釋度最高的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之。

若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均小于30，則應(yīng)按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之。

若所有稀釋度均無菌落生長，則以小于1乘以最低稀釋倍數(shù)報(bào)告之。

若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均不在30～300之間，其中一部分大于300或小于30時(shí)，則以最接近30或300的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之。菌落數(shù)的報(bào)告

菌落數(shù)在100以內(nèi)時(shí)，按其實(shí)有數(shù)報(bào)告，大于100時(shí)，采用二位有效數(shù)字，在二位有效數(shù)字后面的數(shù)值，以四舍五入方法計(jì)算。為了縮4.出現(xiàn)的問題

①接種過程操作速度太慢，導(dǎo)致培養(yǎng)基與接種液無法充分混合。②平板劃線不規(guī)律。③儀器使用不熟練，配合不夠默契。5.參照國標(biāo)得出結(jié)論部分食品國標(biāo) 短數(shù)字后面的零數(shù)，也可用10的指數(shù)來表示。

食品微生物綜合實(shí)驗(yàn)報(bào)告

瓶（桶）裝飲用水菌落總數(shù)限量是≤20CFUmL，/總大腸菌群（MPN/100mL或CFU/100mL）不得檢出，耐熱大腸菌群（MPN/100mL或CFU/100mL）不得檢出，大腸埃希氏菌（MPN/100mL或CFU/100mL）不得檢出常溫液態(tài)奶≤10cfu/ml。6.結(jié)論：

自來水（或啤酒）的培養(yǎng)基均未培養(yǎng)出菌落，表示自來水（或啤酒）中菌落總數(shù)合格。土壤（或污水）的培養(yǎng)基中發(fā)現(xiàn)有大量菌落，則自來水和啤酒中無超標(biāo)現(xiàn)象，符合衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。

項(xiàng)目二:細(xì)菌涂片制作及革蘭氏染色技術(shù)

食品微生物綜合實(shí)驗(yàn)報(bào)告

一．目的

學(xué)習(xí)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌等細(xì)菌涂片制作、干燥和固定技術(shù)。掌握細(xì)菌的簡單染色和革蘭氏染色技術(shù) 二．設(shè)備和材料

菌種

大腸桿菌16h 牛肉膏蛋白胨瓊脂斜面培養(yǎng)物，金黃色葡萄球菌16h 牛肉膏蛋白胨瓊脂斜面培養(yǎng)物。溶液和試劑

草酸銨結(jié)晶紫染液，革蘭氏碘液，95%乙醇，番紅復(fù)染液等。儀器和其他用品

酒精燈，載玻片，顯微鏡，雙層瓶（內(nèi)裝香柏油和二甲苯），擦鏡紙，接種環(huán)，試管架，鑷子，載玻片夾子，濾紙，滴管和無菌生理鹽水等。三．測定步驟

1、細(xì)菌涂片制作

（1）涂片。用接種環(huán)從試管培養(yǎng)液中取一環(huán)菌，于載玻片中央涂成薄層即可，或先滴一滴無菌水于載玻片中央，用接種環(huán)從斜面挑出少許

（2）干燥。涂片后自然干燥，也可在酒精燈上略加熱，使之迅速干燥。

（3）固定。固定的方法主要取決于勇什么染色方法，常用的有火焰固定法和化學(xué)固定法，火焰固定法的主要操作要領(lǐng)是：手持載玻片一端，標(biāo)本面向上，在燈的火焰外側(cè)迅速來回移動(dòng)3~4次，約3~4s.2、革蘭氏染色法

涂片→干燥→草酸銨結(jié)晶紫（60s）→水洗→革蘭氏碘液媒染（60s）→95%酒精脫色（30s）→水洗→番紅（2min）→水洗→干燥→鏡檢。

脫色是革蘭氏染色關(guān)鍵的一步，可直接用95%酒精沖洗脫色，直到流下的酒精無明顯的紫色為止。然后，應(yīng)立即用水沖洗，以避免脫色時(shí)間過長而影響最終染色結(jié)果。另外，挑菌量、固定溫度、染色時(shí)間也是影響結(jié)果的重要因素，只有通過反復(fù)實(shí)踐，才能獲得滿意的結(jié)果。

食品微生物綜合實(shí)驗(yàn)報(bào)告

四．注意事項(xiàng): 1.革蘭氏染色成敗的關(guān)鍵是酒精脫色。如脫色過度，革蘭氏陽性菌也可被脫色而染成陰性菌；如脫色時(shí)間過短，革蘭氏陰性菌也會(huì)被染成革蘭氏陽性菌。脫色時(shí)間的長短還受涂片厚薄及乙醇用量多少等因素的影響，難以嚴(yán)格規(guī)定。

2.染色過程中勿使染色液干涸。用水沖洗后，應(yīng)吸去玻片上的殘水，以免染色液被稀釋而影響染色效果。

項(xiàng)目三：飲用水中大腸菌群測定

食品微生物綜合實(shí)驗(yàn)報(bào)告

一、目的：

1.學(xué)習(xí)食品中大腸菌群檢測程序、方法。2.掌握食品中大腸菌群檢測結(jié)果的報(bào)告方式

二、實(shí)驗(yàn)器材

1.培養(yǎng)基：乳糖膽鹽發(fā)酵管，伊紅美藍(lán)瓊脂、乳糖發(fā)酵管、蛋白胨 2.試劑：革蘭氏染液

3.器皿：水浴、均質(zhì)器或乳缽、載片等 三．內(nèi)容、方法與步棸 1.檢樣稀釋

以無菌操作將檢樣25mL(或g)放于有225mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的滅菌玻璃瓶內(nèi)(瓶內(nèi)予置適當(dāng)數(shù)量的玻璃珠)或滅菌乳缽內(nèi),經(jīng)充分振搖或研磨做成1:10的均勻稀釋液。固體檢樣最好用均質(zhì)器,以8 000-10 000 r/min的速度處理1min,做成1:10的均勻稀釋液。用1mL滅菌吸管吸取1:10稀釋液1mL,注入含有9mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的試管內(nèi),振搖試管混勻,做成1:100的稀釋液。

另取1mL滅菌吸管,按上條操作依次做10倍遞增稀釋液,每遞增稀釋一次,換用1支1mL滅菌吸管。

根據(jù)食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)要求或?qū)z樣污染情況的估計(jì),選擇三個(gè)稀釋度,每個(gè)稀釋度,接種3管、2.乳糖發(fā)酵試驗(yàn)

將待檢樣品接種于乳糖 膽鹽發(fā)酵管內(nèi),接種量在1mL以上者,用雙料乳糖膽鹽發(fā)酵管,1mL及1mL以下者,用單料乳糖膽鹽發(fā)酵管。每一稀釋度接種3管,置36±1℃ 溫箱內(nèi),培養(yǎng)24±2h,如所有乳糖膽鹽發(fā)酵管都不產(chǎn)氣,則可報(bào)告為大腸菌群陰性,如有產(chǎn)氣者,則按下列程序進(jìn) 7

食品微生物綜合實(shí)驗(yàn)報(bào)告

行。3.分離培養(yǎng)

將產(chǎn)氣的發(fā)酵管分別轉(zhuǎn)種在伊紅美藍(lán)瓊脂平板上,置36±1℃ 溫箱內(nèi),培養(yǎng)18-24h,然后取出,觀察菌落形態(tài),并做革蘭氏染色和證實(shí)試驗(yàn)。4.證實(shí)試驗(yàn)

在上述平板上,挑取可疑大腸菌群菌落1-2個(gè)進(jìn)行革蘭氏染色,同時(shí)接種乳糖發(fā)酵管,置 36±1℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)24±2h,觀察產(chǎn)氣情況。凡乳糖管產(chǎn)氣、革蘭氏染色為陰性的無芽胞桿菌,即可報(bào)告為大腸菌群陽性。5.報(bào)告

根據(jù)證實(shí)為大腸菌群陽性的管數(shù),查MPN檢索表,報(bào)告每100mL(g)大腸菌群的MPN值。

食品微生物綜合實(shí)驗(yàn)報(bào)告

四．總結(jié)

1.實(shí)驗(yàn)步驟多且繁瑣，因此需要小組成員的共同協(xié)作，從實(shí)驗(yàn)器材的刷洗到檢樣的稀釋，以及培養(yǎng)基的配制等等都是需要每個(gè)成員認(rèn)真密切配合的，如果哪位成員粗心大意或者偷懶少做步驟都會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果的變化，而這是我們食品工作者的禁忌。所以說，與隊(duì)友的配合

食品微生物綜合實(shí)驗(yàn)報(bào)告

和一絲不茍、任勞任怨的精神是至關(guān)重要的。

2.作為一個(gè)學(xué)生，很多東西都不懂，因此做實(shí)驗(yàn)的時(shí)候，必須要閱讀實(shí)驗(yàn)步驟和實(shí)驗(yàn)要求，最重要的是認(rèn)真聽取老師的觀點(diǎn)和方法以及注意事項(xiàng)。

3.實(shí)驗(yàn)過程中，我們每個(gè)人都難免會(huì)有出錯(cuò)或者是不懂得地方，這時(shí)候一定要虛心求教，不能不懂裝懂。尤其是當(dāng)隊(duì)友提出我們不正確的時(shí)候，不能不服氣，更不能莽撞惡語傷人。

5.做實(shí)驗(yàn)時(shí)我覺得我的技術(shù)還不嫻熟，一些細(xì)節(jié)還掌握不夠比如涂片始終涂不均勻，導(dǎo)致鏡檢時(shí)觀察到的現(xiàn)象總是一團(tuán)一團(tuán)或一對(duì)一對(duì)的。還有一個(gè)問題就是，雖然按照嚴(yán)格的步驟進(jìn)行了操作，但就是做不出結(jié)果，現(xiàn)實(shí)與期望的相差太遠(yuǎn)，我想這里面的原因就是因?yàn)榧夹g(shù)和細(xì)節(jié)沒有達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)要求。

6.通過這次試驗(yàn)我認(rèn)識(shí)到團(tuán)隊(duì)的力量是無窮的，個(gè)人太過渺小了。一粒沙雖微不足道，但聚沙能成塔；一滴水渺小無比，但匯集能成海。這個(gè)實(shí)驗(yàn)要想成功團(tuán)隊(duì)各個(gè)成員要有明確的分工，我們小組做的實(shí)驗(yàn)之所以不太成功，一方面的原因就是分工不太明確，每個(gè)人對(duì)自己的任務(wù)都不太清楚，尤其是我自己更不清楚，做實(shí)驗(yàn)時(shí)有點(diǎn)無所事事。7.這次做實(shí)驗(yàn)雖然出現(xiàn)了諸多問題，但是我還是受益匪淺學(xué)到了很多知識(shí)。