第一篇：食品微生物教學實習報告

食品微生物教學實習報告

一、大腸菌群檢驗的準備工作

1、設備和材料

冰箱（2℃~5℃）、生化培養箱（37℃，24~48h）、手提式高壓蒸汽鍋、干燥箱（160 ℃，1~2h）、天平（感量0.1g）、無菌吸管（1ml、10ml或微量移液器及吸頭）、無菌錐形瓶、無菌培養皿

2、培養基和試劑

月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯（LST）：稱取7.12g溶解于100ml蒸餾水中，分裝到有玻璃小倒管的6支試管，每管10ml；再將剩下的稀釋一倍，分裝到有玻璃小倒管的3支試管，每管10ml；121℃高壓滅菌15min。

煌綠乳糖膽鹽肉湯（BGLB）：稱取4g溶解于100ml蒸餾水中，分裝到有玻璃小倒管的9支試管，每管10ml；121℃高壓滅菌15min。

伊紅美蘭營養瓊脂：稱取10g溶解于200ml蒸餾水中，裝于無菌錐形瓶中，121℃高壓滅菌15min。

葡萄糖發酵管：稱取2.5g溶解于100ml蒸餾水中，分裝到有玻璃小倒管的20支試管，每管5ml；121℃高壓滅菌15min。

革蘭氏染液：草酸銨結晶紫染液、革蘭氏碘液、95%乙醇、沙黃水溶液

無菌生理鹽水：稱取4.5g溶解于500ml蒸餾水中，裝到500ml的玻璃瓶中；121℃高壓滅菌15min。

二、培養物的滅菌處理

1在夾層鍋中加水沒過電熱管

2將待滅菌的培養基裝入內筒，注意不要過緊，以免影響蒸汽的流通和滅菌效果。3將內筒放置在鍋內的擱架上。將排氣閥下面的蛇形管插入內筒內壁的半圓管中，采用對角式均勻擰緊鍋蓋上的螺旋，使蒸汽鍋密閉，勿使漏氣。

4將高壓鍋置于熱源之上（電爐、煤火爐均可，如自帶加熱爐絲的，可直接接通電源）加熱，待壓力表指針達到0.05MPa時，打開排氣閥，待指針回零，并且排凈空氣后，關閉排氣閥，使壓力上升，達到0.1MPa時，維持25~30min（根據需要控制溫度時間，一般培養基和器皿滅菌控制在121℃，20min），關閉熱源，待指針回零后，打開排氣閥排氣（注意不能過早過急地排氣，否則會由于瓶內壓力下降的速度比鍋內慢而造成瓶內液體沖出容器之外），再將高壓鍋蓋打開，利用鍋內的余熱烘干包裝紙。滅菌后的培養基空白培養。

5滅菌后的培養基放于37℃培養箱中培養，經24h培養無菌生長，可保存備用；斜面培養基取出后，立即擺成斜面后空白培養；半固體的培養基垂直放置凝成半固體深層瓊脂后，空白培養。

6培養過細菌的試管和培養皿可先行集中，用1kg/cm2高壓滅菌15～30分鐘，再用熱水洗滌后，用肥皂洗刷，流水沖洗。

三、無菌操作

（一）操作前將界面上的細菌和病毒等微生物殺滅。

1、玻璃器皿的消毒和清潔

⑴新購玻璃器皿的處理新購玻璃器皿應用熱肥皂水洗刷，流水沖洗，再用1%～2%鹽酸溶液浸泡，以除去游離堿，再用水沖洗。對容量較大的器皿如試劑瓶、燒瓶或量具等，經清水洗凈后應注入濃鹽酸少許，慢慢轉動，使鹽酸布滿容器內壁數分鐘后傾出鹽酸，再用水沖洗。

⑵污染玻璃器皿的處理

①一般試管或容器可用3%煤酚皂溶液或5%石炭酸浸泡，再煮沸30分鐘，或在3%～5%漂白粉澄清液內4小時，有的亦可用肥皂或合成洗滌劑洗刷使盡量產生泡沫，然后用清水沖洗至無肥皂為止。最后用少量蒸餾水沖洗。

②細菌培養用的試管和培養皿可先行集中，用1kg/cm2高壓滅菌15～30分鐘，再用熱水洗滌后，用肥皂洗刷，流水沖洗。

③吸管使用后應集中于3%煤酚皂溶液中浸泡24小時，逐支用流水反復沖洗，再用蒸餾水沖洗。

④油蠟沾污的器皿，應單獨滅菌洗滌，先將沾有油污的物質棄去，倒置于吸水紙上，100℃烘干半小時，再用堿水煮沸，肥皂洗滌，流水沖洗。必要時可用二甲苯或汽油去油污。

⑤染料沾污的器皿，可先用水沖洗，后用清潔或稀鹽酸洗脫染料，再用清水沖洗。一般染色劑呈堿性，所以不宜用肥皂的堿水洗滌。

⑥玻片可置于3%煤酚皂溶液中浸泡，取出后流水沖洗，再用肥皂或弱堿性煮沸，自然冷卻后，流水沖洗。被結核桿菌污染或不易洗凈的玻片，可置于清潔液內浸泡后再沖洗。

2、無菌器材和液體的準備將玻璃器具中的培養皿、培養瓶、試管、吸管等按上述方法洗凈烘干后，用一潔凈紙包好瓶口并把吸管尾端塞上棉花，裝入干凈的鋁盒或鐵盒中，于120℃的干燥箱中干燥滅菌2小時，取出備用。對于手術器械、瓶塞、工作服以及新配制的PBS洗液，則采用高壓蒸氣滅菌法，即在15磅的條件下，加熱20分鐘。而對于MEM培養液、小牛血清和消化液等需用G5或G6濾器負壓抽濾后使用。

（二）操作過程中是界面與外界隔離,避免微生物的侵入。

無菌操作過程在無菌操作過程中，最重要的是要保持工作區的無菌、清潔。因此，在操作前20～30分鐘要先啟動超凈臺和紫外燈，并認真洗手和消毒。在操作時，嚴禁喧嘩，嚴禁用手直接拿無菌物品，如瓶塞等，而必須用消毒的止血鉗、鑷子等。培養瓶應在超凈臺內操作，并且在開啟和加蓋瓶塞時需反復用酒精燈燒。對于吸管應先用手拿后1/3處，戴上膠皮乳頭，并用酒精燈燒烤之后再吸液體。此外接種過程無菌操作應注意先用75%酒精擦手，手干后點燃酒精燈；接種過程不離開酒精燈火焰；接種環在接種前后要用火焰灼燒；所有使用器具經過嚴格滅菌并不準亂，尤其是棉塞等；接種用的培養基事先應做無菌培養試驗（37℃24～48h）

四、生化培養箱和超凈工作臺的使用

生化培養箱的使用：

1、打開箱門，將待處理物件放入箱內擱板上，關上箱門。

2、接通電源，將三芯插頭插入電源插座，將面板上的電源開關置于“開”的位置，此時儀表出現數字顯示，表示設備進入工作狀態。

3、通過操作控制面板上的溫度控制器，設定您所須要的箱內溫度

當設定溫度大于環境溫度5℃以上，請將制冷轉換開關置于“RT+5℃”。（溫度控制器詳細操作說明見后頁。）

4、儀器開始工作，箱內溫度逐漸達到設定值，經過所需的處理時間后，處理工作完成。

5、關閉電源，待箱內溫度接近環境溫度后，打開箱門，取出物件

超凈工作臺使用：

1、使用前的檢查

（1）接通超凈工作臺的電源；

（2）旋開風機開關，使風機開始正常運轉，這時應檢查高效過濾器出風面是否有風送出；

（3）檢查照明及紫外設備能否正常運行，如不能正常運行則通知工程部檢修；

（4）工作前必須對工作臺周圍環境及空氣進行超凈處理，認真進行清潔工作，并采用紫外線滅菌法進行滅菌處理；

（5）凈化工作區內嚴禁存放不必要的物品，以保持潔凈氣流流動不受干擾。

2、使用

（1）使用工作臺時，先經過清潔液浸泡的紗布擦拭臺面，然后用消毒劑擦拭消毒；

（2）接通電源，提前50分鐘打開紫外燈照射消毒，處理凈化工作區內工作臺表面積累的微生物，30分鐘后，關閉紫外燈，開啟送風機；

（3）工作臺面上，不要存放不必要的物品，以保持工作區內的潔凈氣流不受干擾；

（4）操作結束后，清理工作臺面，收集各廢棄物，關閉風機及照明開關，用清潔劑及消毒劑擦拭消毒；

（5）最后開啟工作臺紫外燈，照射消毒30分鐘后，關閉紫外燈，切斷電源；

（6）每二月用風速計測量一次工作區平均風速，如發現不符合技術標準，應調節調壓器手柄，改變風機輸入電壓，使工作臺處于最佳狀況；

（7）每月進行一次維護檢查，并填寫維護記錄。

3、清潔

（1）每次使用完畢，立即清潔儀器，懸掛標識，并填寫儀器使用記錄；

（2）取樣結束后，先用毛刷刷去潔凈工作區的雜物和浮塵；

（3）用細軟布擦拭工作臺表面污跡、污垢目測無清潔劑殘留，用清潔布擦干；

（4）要經常用紗布沾上酒精將紫外線殺菌燈表面擦干凈，保持表面清潔，否則會影響殺菌能力；

（5）效果評價:設備內外表面應該光亮整潔，沒有污跡。

第二篇：微生物實習報告

林業與生物技術學院

實習報告

學生姓名：婁鈞翼學號：201001220327專業名稱：生物科學—微生物班級：生物科學102班指導教師：張昕

2012-6-26

一、實習目的意義

1、通過實習過程掌握酸奶中乳酸細菌的分離純化

2、土壤中自生固N菌分離、純化、生長曲線測定 ：通過實習過程，掌握土壤中微生物的分離、純化和生長曲線測定的技術；

3、參觀臨安青山污水處理廠：參觀污水處理廠，了解其運行模式，以及在污水處理過程中微生物發揮的作用和技術；

4、參觀富陽海正藥業有限公司：了解一個大公司大企業的運行情況，以及專業方面的一些技術和應用。

二、實習地概況

1、第一個和第二個實驗是在學校學六實驗室完成的；

2、第三個實驗：臨安市青山污水處理有限公司成立于2002年3月21日，于2004年5月1日投入試運行，是一個集污水收集、處理于一體的公益事業企業。公司坐落于浙江省臨安市青山湖街道研口村發達畈，占地66畝，近期投資8082萬元，建成處理能力2萬噸/日，收集管網42公里，工藝采用MSBR法，具有脫氨除磷功能的污水處理設施。公司堅持內抓管理強素質，外創先進塑形象，通過規范化、制度化、精細化、科學化的管理來不斷提高污水處理水平，努力提升科學管理層次，切實增強企業核心競爭力。公司設備、工藝先進，技術力量雄厚，現有職工21人，其中技術人員15人。公司先后通過了ISO9000和ISO14000質量環境管理體系認證及清潔生產認證。同時被評為浙江省公眾滿意單位杭州市環境保護模范企業、臨安市花園式工廠、臨安市安全聲場先進單位、臨安市衛生先進單位、臨安市綠色企業等榮譽稱號。

3、第四個實驗：占地16000平方米，累計投資超過2.6億元，設有60多個單元實驗室，集小試、中試與研發支持為一體。始創于1956年的浙江海正藥業股份有限公司秉承“執著藥物創新，成就健康夢想”的使命和“成為廣受尊重的全球化制藥企業”的愿景，致力于整合藥物研發與生產資源，為全球客戶提供更好的產品和服務，通過美國FDA、歐盟EDQM、澳大利亞TGA、韓國KFDA等官方認證的品種達到40多個，銷往全球30多個國家和地區。

2009年，公司榮獲“全國五一勞動獎狀”，海正、HISUN及圖形被認定為“中國馳名商標”，入選“中國萬種微生物基因組計劃”和“國家重大（磅）級藥物品種產業化技術創新聯盟”。因圓滿完成“抗甲流藥物中間體生產”的國家任務，受到省政府的通令嘉獎。

2010年，公司入選浙江省醫藥工業“十強企業”，并榮獲“國內最佳產品線十佳工業企業” 稱

號，同時被譽為“金蜜蜂獎成長型企業”。

我們主要參觀了海正藥業在富陽的分公司。

三、材料方法

1、材料：乳酸細菌培養基、酸奶

原理：當乳酸菌生長代謝出乳酸后，會是PH下降而使顏色由綠變為黃綠，也由于PH

值降低，再加上抗生素及厭氧培養的作用，所以一般的微生物不容易在此培養基

上生長。因此十分容易鑒別乳酸菌。

方法 ：1.1(6月7日)配備乳酸細菌培養基(蛋白胨10.0G,牛肉膏10.0G,酵母膏5.0G,檸檬酸氫二銨2.0G,葡萄糖20.0G,吐溫801.0ML,乙酸鈉5.0G,磷酸氫二鉀2.0G,硫酸鎂0.58G,硫酸錳0.25G,瓊脂18.0G,蒸餾水1000ML,PH 6.2—6.6)

1.2(6月7日)培養基滅菌

1.3(6月8日)用滅菌后冷卻至50攝示度左右的培養基到成平板

1.4(6月8日)用滅菌過的接種環挑取酸奶在平板上劃線純化培養4天左右

1.5(6月12日)挑取平板上菌落制成臨時裝片觀察

2、材料：阿須貝無氮培養基、土壤

方法：2.1(6月12日)配備阿須貝無氮培養基(葡萄糖10.0G, 磷酸氫二鉀0.2G, 硫酸

鎂0.2G,氯化鈉0.2G,CaSO4’2H2O;0.1G,碳酸鈣5G,瓊脂18G,蒸餾水

1000ML,PH7.2)阿須貝無氮培養液(葡萄糖10.0G, 磷酸氫二鉀0.2G, 硫酸鎂

0.2G,氯化鈉0.2G,CaSO4’2H2O;0.1G,碳酸鈣5G,蒸餾水1000ML,PH7.2)

2.2(6月12日)培養基,培養液滅菌

2.3(6月12日)用滅菌后冷卻至50攝示度左右的阿須貝無氮培養基到成平板

2.4(6月12日)用滅菌過的鑷子將黃豆大小的菜園土埋入已冷凝的平板培養基上

2.5(6月12日)正面放置28度培養4天

2.6(6月18日)用滅菌過的接種環挑取菌苔在新的阿須貝平板上劃線純化32度

培養

2.7(6月20日)單菌落接入液體培養基中于12.24.36.48H后測吸光值.制備生長

曲線

四、結果分析

1.平板上有一個個單菌落.在顯微鏡下觀察單菌落就只有一種乳酸菌.酸奶中有保加利亞乳 菌與嗜熱鏈球菌二種.2.五、實習感受

通過此次實習，我學到了很多課堂上學不到的東西：親自動手配培養基，分離、純化菌類，學會使用分光光度計制作生長曲線，同時參觀了一些與微生物緊密相連的公司，了解其運行模式、實踐技術和應用。這讓我清楚地感到了自己肩上的重任，看清了自己的人生方向，也讓我認識到了科研工作應支持仔細認真的工作態度，要有一種平和的心態和不恥下問的精神，不管遇到什么事都要去思考，多聽別人的建議，不要太過急燥，要對自己所做的事去負責，不要輕易地去承諾，承諾了就要努力去兌現。實習也培養了我的實際動手能力，增加了實際的操作經驗，對實際的科研工作的有了一個新的開始，更好地為我們今后的工作積累經驗。

我知道科研工作是一項需要熱情的事業，并且要持之以恒的精神和吃苦耐勞的品質。我覺得重要的是在這段實習期間里，我第一次真正地接觸了實驗，在實踐中了解了一些科研技術，并且在此期間，我參觀了一些公司，也與社會有所接觸。利用這次難得的機會，也打開了視野，增長了見識，為我們以后進一步走向社會打下堅實的基礎。

實習期間，我從末出現無故缺勤。我認真聽取老師的指導，對于別人提出的實驗建議虛心聽取，并能夠仔細觀察、切身體驗、獨立思考、綜合分析，并努力把學到的知道應用到實際實驗操作中去，盡力做到理論和實際相結合的最佳狀態，培養了我的耐心和素質。

為期兩個多星期的實習結束了，我在兩個多星期的實習中學到了很多在課堂上根本就學不到的知識，受益匪淺。回想自己在這期間的實習情況，也有不足之處。對此我思考過，學習經驗自然是一個因素，然而更重要的是心態的轉變沒有做到位，有些實驗步驟還是停留在應付的層面上。現在發現了這個不足之處，應該還算是及時吧，因為我明白了何謂工作何謂實際。在接下來的日子里，我會朝這個方向努力，在實驗操作方面我會更加謹慎。

本次實習是我第一次親身感受了所學知識與實際的應用，理論與實際的相結合，讓我們大開 眼界，也算是對以前所學知識的一個初審吧!這次實習對于我們以后學習、找工作也真是受益匪淺。我會把這此實習作為我人生的起點，在以后的工作學習中不斷要求自己，完善自己，讓自己做的更好。

第三篇：食品微生物學習心得

學習心得

隨著科技發展和人們生活水平的提高，食品安全和衛生已成為人們關注的焦點。“食品微生物檢驗”是衡量食品衛生的重要指標之一，也是判斷被檢食品能否食用的科學依據之一，對食品的質量與安全起著監督、預防、評價等作用。通過食品微生物檢驗可以判斷企業中食品加工環境、食品衛生環境的優劣，能夠對食品被微生物污染的程度做出正確的評價。食品微生物是一項實踐性和應用性很強的學科，在實際生產生活中，微生物與食品的儲藏、運輸、加工、制造過程緊密相連。一方面是利用有益微生物的作用制造發酵食品；另一方面是防止有害微生物污染食品，保證食品安全。

本次為期18天的食品微生物檢驗學習，使我的專業理論知識與實際檢驗水平都得到了全面的啟發與提高，借此機會要感謝公司領導對我的信任與大力支持！

此次學習分為二個階段，一是理論學習階段，2015年10月25日-11月4日于自治區質監局培訓中心學習微生物檢測技術理論知識。二是實習階段，11月5日-11月13日于自治區質監局檢測中心微生物檢驗室檢驗食品中的常規菌與致病菌。

一、理論學習。

1、食品衛生學的意義；食品中菌落總數；大腸菌群；金黃色葡萄球菌；志賀氏菌；沙門氏菌；單核細胞增生李斯特菌；霉菌，酵母菌等常見致病微生物的鑒別、分型與檢測技術；食源性微生物的分類與分布；食品內外環境因素與微生物生長的關系；食品傳播性微生物的致病性與感染；食品腐敗的鑒評、監控；細菌的能量代謝、分解代謝、合成代謝等。使我們掌握了更多食品微生物的基本原理、新的檢測技能和方法以及食品質量的控制等。可使我們今后的工作更加精益求精，也為致病菌的檢驗奠定了堅實的基礎。

2、解讀了新《食品安全法》，食品安全關系到社會穩定，關系到百姓健康，新《食品安全法》的正式實施，對食品企業提出了更高的要求，食品標準也從衛生方面上升到安全層面，確保了對公眾身體健康和生命安全。食品企業是食品安全的重要環節，食品企業的微生物安全是關乎到千萬百姓的生命健康。因此，要求我們檢驗員要有較高素質，不但應具有很好的技術能力，還要有實事求是的科學態度和良好的職業道德。

3、授課老師思路清晰，突出重點，善于引導學生思考，使我們更加深入的了解了各種食品中的各種微生物和豐富的微觀世界。通過幻燈片向我們展示了隨處可見的食品都與哪些微生物有關及腐敗食品因微生物污染引起的食物中毒實例與數據。通過鮮明的圖片與生動的講解，使我們了解了食品微生物的重要性，在感慨微生物的強大作用之余，深切的體會到了食品企業不僅要生產出好的食品，更要生產出更好、更優質的食品。

二、實習階段。

1、學習了更加嚴格的無菌操作技術、殺菌技術；完成了送檢食品及抽檢食品中各種細菌的分離純化培養、分型與鑒定；微生物觀察及分析；學習了菌種保藏與遺傳育種技術；完成了各種細菌培養基的配制。

2、借鑒了各種試劑的配制、使用記錄；各種儀器設備的操作使用記錄；實驗室與操作器具的消毒記錄等，以完善我單位的各項記錄。可參考致病菌的初篩可用快速檢測試紙片及初步證實實驗同步進行；對于已被證實的菌種可使用VITEK或PCR技術與下一步的生化實驗同步進行。很大程度上提高了檢出效率及準確率。

3、了解了實驗前后的有效處理。前處理：玻化器皿的洗滌可使用超聲波清洗機；洗滌后的試管擺放可使用高壓筐層層堆疊，然后立起的方式；分裝液體可使用分液器；實驗過程中可實驗移液槍；錐形瓶塞可使用橡皮筋封口等，從而可極大提高工作效率。對于培養基要求115℃滅菌的，需提前將試管于121℃高壓鍋內滅菌，以保證管內細菌完全滅活。后處理：必須將已發酵或者已長菌的容器用獨立高壓菌鍋滅菌后才可洗滌。加強防范意識，保護自身安全。

4、經過證實，我單位曾一直使用的大腸菌群檢測方法有誤：1）沒有證實實驗。我單位大腸菌群的檢測一直采用的是GB 4789.3-2010的檢驗方法，LST初發酵后便查MPN表報出檢出值，違背了大腸菌群的國標檢驗三步法的規定（初發酵、復發酵和證實實驗）。規定中第一步LST發酵實驗是樣品的發酵結果，不是純菌發酵實驗，所以初發酵陽性管經過后兩步有可能成為陰性。大量檢驗數據證明，食品中大腸菌群檢驗程序的符合率、初發酵與證實實驗相差很大，不同食品三步法的符合情況也不一致。只做一步初發酵，誤差是比較大的，這樣會有相當部分的合格樣品被作為不合格樣品處理。我單位必須加以重視，避免經濟損失。2）套用的國家標準有誤。根據我單位產品的微生物技術檢測要求，應采取GB 4789.3-2003的檢測方法。初發酵：將待檢樣品接種于乳糖膽鹽發酵管內。分離培養：將產氣的發酵管分別轉種于伊紅美藍瓊脂平板上，培養后觀察菌落形態。證實實驗：在伊紅美藍瓊脂平板上挑取可疑大腸菌群于乳糖發酵管繼續培養并觀察產氣情況，同時做革蘭氏染色證實；查MPN表，報出檢出值。

此次學習與實習雖然時間較短，但內容豐富、涉及面廣，理論與實踐相結合，可謂受益匪淺、收獲良多，不僅豐富了知識、增長了見識，而且開闊了眼界、拓寬了思路，這些對我今后的工作和學習必將起到積極而長遠的影響。在今后的工作中，我將不斷學習、積累經驗、克服不足，腳踏實地、盡職盡責的做好各項工作。不斷提高自身素質和業務能力，提升工作的主動性和創造性，以飽滿的熱情、扎實的作風投入到工作學習當中去，為公司貢獻自己的一份光和熱。

品管部：孔香 2015年11月19日

第四篇：食品微生物心得體會

心得體會

本次為期一周的實驗課，讓我更加深入的了解了酸乳中的各種微生物和豐富的微生物的世界。正如我們所知，微生物也有著不同的特征和生活方式，對人類的生活產生著或好或壞的影響。只有當我們能真正的了解這些微生物之后，我們才可以更好地與它們和諧共處。

這次酸乳中微生物檢驗實驗給予了我許許多多的鍛煉，從最開始實驗課題的選取，實驗材料的尋找，小組分工協作完成實驗，到最后實驗報告的完善，一切都是我們小組共同努力的結果，所以說這次大型實驗給我們帶來的益處是無法估量的。

當然在這次實驗也暴露出了我們很多的問題。實驗前我們準備的資料不充分，導致了我們實驗開始時就手忙腳亂，實驗用的原料比例我們都沒能很好的把握。不過隨后經過我們的不懈努力，最終還是比較圓滿的完成了任務。實驗中我們先對培養基進行了制備，后來我們計量了菌落的總數并加以分析辨別。并對主要的菌種大腸桿菌、霉菌、酵母菌、致病菌，乳酸菌等進行了測定和研究。本次實驗我們忙中有樂，十分的開心。

這次實驗還增強了我們小組之間配合的默契程度，我們小組分工合作，有條不紊，通過大家共同的努力，我們的實驗完成的很快。而且也使我們每個人的動手能力的都得到了較好的鍛煉。實驗中其他組做的實驗也給予了我們很大的幫助，我們在思路比較阻塞的時候，大家相互幫助，給了我們很多懇切實用的建議。并且在不懂的地方老師也耐心細致的給予了我們指導，使我們受益匪淺。這段實驗時光讓我覺得大家就是一個完美的大家庭，很好的團結在了一起。可以說這次實驗不光對于我自己，對于我們整個班級都是一個很好的契機。讓我感覺我們的大家庭變得更加融合，更有凝聚力了。

總的來說我們這次實驗是比較成功的，但是我們在實驗中也存在著很多錯誤并且也走了不少彎路。這給我們的警示是，在科研過程中要秉著嚴謹認真的態度，在實驗前做好周密的計劃，預想到各種狀況，避免錯誤的出現。這樣才能更好完美的完成各自的任務。

對于這次實驗我有一些建議，我覺得實驗中應該進行多種產品的對比和比較，在進行活性檢驗時應當設置空白對照。這樣實驗會更加嚴謹，我們分析的數據也會更準確，而且我覺得還可以放映一些相關的影視資料，讓我們更加深入的了解現代食品行業并根據現階段的發展情況確定實驗的主流方向，使實驗更接近現實工業生產。我覺得通過這些我們會更有針對性的完成實驗，并且有可能發現不同的問題，并給出比較合理的處理手段和實現方式。

最后我還是很感謝這次實驗，因為我們獲得了這樣一次機會，一個可以證明自己能力的機會。我們相信我們能行，相信自己會把實驗任務完成的很出色。我希望這樣的實驗能不斷開展下去，讓更多的同學了解微生物，了解我們豐富多彩的食品世界。

第五篇：獸醫微生物實習報告

一．實習目的為了使學生能夠理論聯系實際，通過親自實地解剖感染小鼠，對小鼠的心、肝、脾進行麥康凱瓊脂平板劃線培養，以柯赫法則為這次實習的主線，達到鑒定出小鼠感染的菌種的目的，熟練運用微生物實驗課的所涉及的實驗操作和方法，提高實驗動手能力，分析實驗過程中可能出現的問題，并解決問題。特開設微生物教學實習，掌握基本技能，加深理論部分的理解，能夠獨立診斷出傳染病病菌，獲得嚴謹的科學實驗素養。

二．實習材料

實驗動物：一只被感染小鼠，一只健康小鼠

實驗器械，主要包括：小鼠解剖工具手術剪、鑷子、蠟盤、釘子，接種棒、酒精燈、打火機、記號筆、手套、載玻片、槍頭、注射器、離心管。

實驗材料：麥康凱瓊脂平板、各種染色液（結晶紫溶液、碘溶液、酒精、沙黃水）、蒸餾水、培養基（普通肉湯培養基、蛋白胨培養基、葡萄糖蛋白胨培養基、固體培養基）、PBS重懸液、生化試驗材料（微量發酵管（葡、乳、枸、尿素、麥、甘醇、蔗、硫）、對二甲基氨基苯甲醛、乙醚、甲基紅、vp甲乙液）。

實驗主要儀器：離心機，分光光度器，溫箱，搖床，超凈工作臺

三．實習內容

以柯赫法則為主線，通過對感染小鼠的剖解采樣、分離培養、鏡檢、擴增培養，然后把得到的純培養物對健康小鼠進行再次接種以獲得被感染小鼠，再次重復以上操作，把獲得的純培養物通過鏡檢觀察和做生化實驗來鑒定出感染小鼠的致病菌。

四．實習操作進程

第一天：實驗設計、討論癥狀、分離剖解實驗設計：以小組為單位進行實驗設計，明確此次實驗主要法則是：柯赫法則。在老師的指導下確定此次實習的主要步驟，討論實驗中可能遇到的問題以及注意事項。討論癥狀：比較觀察健康小鼠與病鼠，可見到病鼠一般呈萎靡狀，不活躍。每組領取一只感染小鼠觀察癥狀，體表基本正常。分離剖解：先將麥康凱瓊脂平板分三區，依次寫上肝、脾、心。右手抓起小鼠尾巴，將小鼠搖暈，采用頸椎脫臼法將小鼠處死。將小鼠尸體仰臥固定于蠟盤上，充分露出胸腹部。先用小鼠腹部柔軟部用剪刀剪一小口，然后從該小口處往上、往下剪將皮毛剝離，剝離腹膜暴露出肝臟和脾，可觀察到有輕微的肝腫脹，顏色變淡。將肝和脾切開一小口，用接種環取樣，在麥康凱瓊脂平板的相應區域進行劃線分離。再打開胸腔觀察，可見胸腔有出血現象和凝血塊，剪開心包膜，將心臟切一小口，用接種環取樣，在麥康凱瓊脂平板的相應區域進行劃線分離。寫上班級組別，日期，置于溫箱中培養至第二天早上8點。

第二天：挑取單菌落，鏡檢，擴增培養，重懸，測OD配濃度，小鼠腹腔注射挑取單菌落：觀察麥康凱瓊脂平板上菌落的形態為圓形，邊緣整齊，表面光滑，暗紅色，圓心處顏色較邊緣淺。挑去單個菌落，畫上記號準備做后續試驗。鏡檢：選取所挑選菌落的一半進行抹片。取干凈玻片，滴半滴去離子水，用接種環挑取菌進行抹片、干燥固定、采用格蘭染色法染色：草酸銨結晶紫染色1-2’，水洗，革蘭氏碘液媒染1-2’，水洗，95%酒精脫色約30’’-1’，水洗，沙黃水溶液復染10 ’ ’-30 ’ ’，水洗。吸干，鏡檢。觀察到該菌被染成紅色，是格蘭陰性菌。擴增培養：選取剩余的菌接種到肉湯培養基中，置于溫箱培養9個小時至菌的生長對數期。4 重懸測OD值配濃度：下午5點左右，將培養的菌轉入無菌小管中離心，離心后可見菌沉

于管底，在超凈工作臺內操作，去上清液，用槍頭吸取PBS液至去了上清液的菌管中，反復吹打使其重懸，然后再次離心，去上清，重懸，通過分光光度計測得OD590的值，配成2*10^7CFU濃度的菌液。小鼠腹腔注射：每組挑選一只健康小鼠，在頭部或尾部做上記號，用右手抓住鼠尾，將其搖暈，令其前爪抓住鐵絲蓋上，然后用左手的拇指和食指捏住小鼠頭頸部皮膚，并翻轉左后使其腹部朝上，將其尾巴夾在左手掌與小指之間，右手把持注射器吸取2mL菌液，在股后側面插入針頭，先刺入皮下，后進入腹腔，注射時阻力，皮膚也無泡隆起。注射完將小鼠放回鼠籠即可。

第三天：觀察小鼠發病情況

小組成員分時間段觀察小鼠感染情況，見小鼠瀕死的盡快解剖接種分離致病菌。若 一整天未見小鼠有異常情況的等第二天解剖

第四天：剖解劃線培養

雖然小鼠未見萎靡，由于預訂的感染時間差不多，可以進行解剖接種第一天的操作，可見體表有淤血點，剖開的小鼠肝臟流出大量的血液。其余均同第一天的操作，將麥康凱瓊脂平板的上所接的菌置于溫箱中培養。

第五天：生化鑒定

觀察到平板上只有一個較小的暗紅色菌落，挑取該菌落進行擴增培養9小時至細菌生長的對數期。下午6點觀察，培養液依舊是澄清的，很可能沒有長菌。為做進一步的驗證，進行生化試驗。將該菌接入微量發酵管（）和蛋白胨以及葡萄糖蛋白胨中，培養至第二天看結果。

第六天：觀察結果，整理報告

生化試驗無任何反應，說明接的菌為雜菌或污物，整理實驗報告并分析失敗原因。

六．實驗結果與分析

此次試驗失敗

給小鼠攻毒，未能分離出致病菌，因此也無法鑒定出小鼠被感染的病原菌為何種腸桿菌科

試驗失敗原因可能有：

1、接種棒火焰消毒后，等待冷卻的時間過短，接種棒接種菌時將菌燙死

2、由于小鼠的免疫力強，使得感染小鼠的病原菌被免疫掉了，因此未接種到治病菌

3.給小鼠注射的量或濃度還不夠未能達到使小鼠感染的目的4、在第一次從小鼠體內分離出來的菌可能不是致病菌，或者麥康凱瓊脂平板上培養出來的 菌落不止一種，而我們挑選到的某一菌落恰好不是致病菌。

5、在進行腹腔注射時，可能沒有注射到腹腔，而只注射到皮下，或者其它部位。

6、采樣時可能由于接種環未完全伸入到心、肝、脾的組織中，或者伸到的組織里 恰好沒有致病菌

7、可能由于小鼠感染的時間過短，還未達到菌生長曲線的高峰期

七．思考與總結此次試驗失敗的原因有很多在我看來最有可能的原因有以下幾點：

（1）小鼠免疫:由于這些小鼠是實驗室的小鼠，長期被用來做各種致病菌的實驗，使得它們獲得一定的免疫，所以雖然注射了足夠使小鼠感染發病的劑量，但也被小鼠免疫掉了，而無法從小鼠體內獲得病料。

（2）病料不夠：從學姐那了解到，她們做攻毒實驗的動物，都是將整個組織塊磨碎以后，再接到培養基上，而我們做實驗是只是用接種棒挑取一點，接種棒上粘到的病料比較少或根本沒有，因此培養不出菌。

（3）挑取的單菌落未必是致病菌：由于平板上長出可能不止一種菌，因此挑到的單菌落，未必是致病菌。

2為什么擴增出來的菌不直接注射小鼠，而要經過離心？

因為菌可能會產生毒素，若直接注射可能就無法判斷使小鼠發病的到底是毒素作用，還是因為病菌在小鼠體內繁殖感染而造成的。腸桿菌科有哪些，特征有哪些？

學生自我鑒定：

2011年5月16號到21號期間進行了維持一周的微生物實習，在微生物實習期間，我能夠做到主動和小組成員交流、合作、解決問題，認真完成實驗操作，學會靈活運用自己的專業知識解決問題。

通過這段時期的實習，我們對無菌操作有了進一步的理解，掌握了儀器操作的基本技能，鞏固了理論部分的知識，也了解到公共衛生意識的重要性。

實習不過短短的五天，在這短暫的五天內，我們有過發現時的喜悅，有過解剖小鼠時的緊張，有過培養不出菌時的困惑，但最終我們收獲了知識，也收獲了友誼，在合作中共同進步，在困難中共同進退，一切的困難便能迎刃而解。

這次微生物實習為我們專業的繼續拓展提供了寶貴的經驗，為動物醫學本科專業的我們學習后續課程奠定扎實的基礎。