第一篇：食品微生物檢測實驗室要求

自來水水池至少有兩個，工作臺，藥品試劑柜，超凈工作臺（無菌室），滅菌鍋，培養(yǎng)箱，冰箱，干燥箱，電子天平，顯微鏡，平皿，試管，三角瓶等玻璃器皿。這些都是必備基本設(shè)備，只要能擺放的下就可以。

一、微生物實驗室設(shè)計

微生物實驗室由準(zhǔn)備室、洗滌室、滅菌室、無菌室、恒溫培養(yǎng)室和普通實驗室六部分組成。這些房間的共同特點是地板和墻壁的質(zhì)地光滑堅硬，儀器和設(shè)備的陳設(shè)簡潔，便于打掃衛(wèi)生。

二、微生物實驗室基本要求

（一）準(zhǔn)備室

準(zhǔn)備室用于配制培養(yǎng)基和樣品處理等。室內(nèi)設(shè)有試劑柜、存放器具或材料的專柜、實驗臺、電爐、冰箱和上下水道、電源等。

（二）洗滌室

洗滌室用于洗刷器皿等。由于使用過的器皿已被微生物污染，有時還會存在病原微生物。因此，在條件允許的情況下，最好設(shè)置洗滌室。室內(nèi)應(yīng)備有加熱器、蒸鍋，洗刷器皿用的盆、桶等，還應(yīng)有各種瓶刷、去污粉、肥皂、洗衣粉等。

（三）滅菌室

滅菌室主要用于培養(yǎng)基的滅菌和各種器具的滅菌，室內(nèi)應(yīng)備有高壓蒸汽滅菌器、烘箱等滅菌設(shè)備及設(shè)施。

（四）無菌室

無菌室也稱接種室，是系統(tǒng)接種、純化菌種等無菌操作的專用實驗室。在微生物工作中，菌種的接種移植是一項主要操作，這項操作的特點就是要保證菌種純種，防止雜菌的污染。在一般環(huán)境的空氣中，由于存在許多塵埃和雜菌，很易造成污染，對接種工作干擾很大。1.無菌室的設(shè)置

無菌室應(yīng)根據(jù)既經(jīng)濟又科學(xué)的原則來設(shè)置。其基本要求有以下幾點：

（1）無菌室應(yīng)有內(nèi)、外兩間，內(nèi)間是無菌室，外間是緩沖室。房間容積不宜過大，以便于空氣滅菌。最小內(nèi)間面積2×2.5＝5m2，外間面積1×2＝2m2，高以2.5m以下為宜，都應(yīng)有天花板。

（2）內(nèi)間應(yīng)當(dāng)設(shè)拉門，以減少空氣的波動，門應(yīng)設(shè)在離工作臺最遠(yuǎn)的位置上；外間的門最好也用拉門，要設(shè)在距內(nèi)間最遠(yuǎn)的位置上。（3）在分隔內(nèi)間與外間的墻壁或“隔扇”上，應(yīng)開一個小窗，作接種過程中必要的內(nèi)外傳遞物品的通道，以減少人員進(jìn)出內(nèi)間的次數(shù)，降低污染程度。小窗寬60cm、高40cm、厚30cm，內(nèi)外都掛對拉的窗扇。

（4）無菌室容積小而嚴(yán)密，使用一段時間后，室內(nèi)溫度很高，故應(yīng)設(shè)置通氣窗。通氣窗應(yīng)設(shè)在內(nèi)室進(jìn)門處的頂棚上（即離工作臺最遠(yuǎn)的位置），最好為雙層結(jié)構(gòu)，外層為百葉窗，內(nèi)層可用抽板式窗扇。通氣窗可在內(nèi)室使用后、滅菌前開啟，以流通空氣。有條件可安裝恒溫恒濕機。

2.無菌室內(nèi)設(shè)備和用具

（1）無菌室內(nèi)的工作臺，不論是什么材質(zhì)、用途的，都要求表面光滑和臺面水平。

（2）在內(nèi)室和外室各安裝一個紫外燈（多為30W）。內(nèi)室的紫外線燈應(yīng)安裝在經(jīng)常工作的座位正上方，離地面2m，外室的紫外線燈可安裝在外室中央。

（3）外室應(yīng)有專用的工作服、鞋、帽、口罩、盛有來蘇兒水的瓷盆和毛巾、手持噴霧器和5%石炭酸溶液等。

（4）內(nèi)室應(yīng)有酒精燈、常用接種工具、不銹鋼制的刀、剪、鑷子、70%的酒精棉球、工業(yè)酒精、載玻璃片、特種蠟筆、記錄本、鉛筆、標(biāo)簽紙、膠水、廢物筐等。3.無菌室的滅菌消毒

（1）薰蒸：這是無菌室徹底滅菌的措施。無菌室使用了較長時間，污染比較嚴(yán)重時，應(yīng)進(jìn)行薰蒸滅菌。可用甲醛、乳酸或硫磺薰蒸。（2）噴霧：在每次使用無菌室前進(jìn)行。噴霧可促使空氣中微粒及微生物沉降，防止桌面、地面上的微塵飛場，并有殺菌作用。可用5%石炭酸噴霧。

（3）紫外線照射：在每次使用無菌室前進(jìn)行。紫外線有較好的殺菌效果。通常應(yīng)開啟紫外線燈照射30～60min。

（五）恒溫培養(yǎng)室1.培養(yǎng)室的設(shè)置

（1）培養(yǎng)室應(yīng)有內(nèi)、外兩間，內(nèi)室是培養(yǎng)室，外室是緩沖室。房間容積不宜大，以利于空氣滅菌，內(nèi)室面積在3.2×4.4＝14m2左右，外室面積在3.2×1.8＝6m2左右，高以2.5m左右為宜，都應(yīng)有天花板。

（2）分隔內(nèi)室與外室的墻壁上部應(yīng)設(shè)帶空氣過濾裝置的通風(fēng)口。（3）為滿足微生物對溫度的需要，需安裝恒溫恒濕機。（4）內(nèi)外室都應(yīng)在室中央安裝紫外線燈，以供滅菌用。2.培養(yǎng)室內(nèi)設(shè)備及用具（1）內(nèi)室通常配備培養(yǎng)架和搖瓶機（搖床）。常用的搖瓶機有旋轉(zhuǎn)式、往復(fù)式兩種。（2）外室應(yīng)有專用的工作服、鞋、帽、口罩、手持噴霧器和5%石炭酸溶液、70%酒精棉球等。

3.培養(yǎng)室的滅菌、消毒 同無菌室的滅菌、消毒措施。小規(guī)模的培養(yǎng)可不啟用恒溫培養(yǎng)室，而在恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行。

（六）普通實驗室

進(jìn)行微生物的觀察、計數(shù)和生理生化測定工作的場所。室內(nèi)的陳設(shè)因工作側(cè)重點不同而有很大的差異。一般均配備實驗臺、顯微鏡、柜子及凳子。實驗臺要求平整、光滑，實驗柜要足以容納日常使用的用具及藥品等。

第二篇：食品微生物實驗室操作手冊

食品微生物實驗室操作手冊

介紹了微生物實驗中使用的標(biāo)準(zhǔn)菌的驗收、制備、保藏、傳代、使用、銷毀的管理規(guī)程 規(guī)定了質(zhì)量管理部門實驗用標(biāo)準(zhǔn)菌種的驗收、制備、儲管、使用、以及銷毀等的相關(guān)規(guī)定。適用于微生物限度檢查、無菌檢查、抗生素微生物（效價）測定、評價防腐劑和抗菌劑的抑菌效果和確認(rèn)滅菌效果、檢驗方法的驗證、培養(yǎng)基的適用性檢查，樣品檢驗時的陽性對照等。

依據(jù): 中國藥典2010年版二部及菌種使用說明書

1.標(biāo)準(zhǔn)菌的來源

標(biāo)準(zhǔn)菌株由中國藥品生物制品檢定所醫(yī)學(xué)菌種保藏中心（China Medical culture collection ,CMCC）提供的冷凍干燥菌種（0代）或由上級藥檢部門已接種好的菌種斜面（3代）。黑曲霉的0代菌種為保存于含15%甘油的0.9%無菌氯化鈉溶液中的孢子懸液冷存管。中國藥品生物制品檢定所醫(yī)學(xué)微生物菌種保藏管理中心提供的冷凍干燥菌種的標(biāo)簽CMCC

（B）代表細(xì)菌（bacteria）,CMCC(F)代表真菌（fungi）每種菌具有固定的代號。

2.標(biāo)準(zhǔn)菌的驗收

從菌種保藏中心購買的原始菌種管是玻璃安瓿裝的凍干菌，接收同時應(yīng)檢查是否有隨菌種附有的相關(guān)資料。接收菌種時應(yīng)檢查安瓿的數(shù)量和名稱，和每一支安瓿的完整性。在相應(yīng)的菌種接收記錄上記上所有的關(guān)于菌種的信息，如名稱、數(shù)量和接收日期等。在菌種安瓿及菌種管上粘貼標(biāo)簽，內(nèi)容包括：菌種名稱、菌種代號、代次、接收日期、接收人、貯存條件、有效期至。新購入的0代原始菌種儲存于－20℃，有效期為三年。從上級藥檢部門購買的已接種好的菌種斜面（3代）應(yīng)檢查菌種管是否完好。儲存于2～ 8 ℃，有效期為3個月。

3.標(biāo)準(zhǔn)菌的復(fù)蘇、復(fù)壯及標(biāo)準(zhǔn)儲備菌株的制備

3.1物品及試劑：接種針、酒精燈、移液管、75%酒精及75%酒精棉球

3.2培養(yǎng)基

改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基:用于黑曲霉復(fù)蘇、復(fù)壯.液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基:用于生孢梭菌復(fù)蘇、復(fù)壯.營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基:用于金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、大腸埃希菌、乙型副傷寒沙門菌、短小芽孢桿菌、銅綠假單胞菌復(fù)蘇、復(fù)壯。

改良馬丁培養(yǎng)基:用于白色念珠菌復(fù)蘇、復(fù)壯.3.3操作步驟：

a.打開潔凈工作臺。

b.在安瓿的外表面用75%的酒精擦拭并讓其自然風(fēng)干。

c.用一小砂輪在安瓿的上部劃一條線，用手輕輕將安瓿掰開（開啟安瓿時必須小心，因為安瓿遇熱時可能會破裂）。

d.以無菌方法用一無菌吸管從已準(zhǔn)備好的上述液體培養(yǎng)基中移取0.5～0.8 ml到安瓿中。e.輕輕地旋轉(zhuǎn)安瓿以使凍干菌種和液體培養(yǎng)基充分混合并完全溶解。

f.用無菌吸管將安瓿內(nèi)菌液全部轉(zhuǎn)接到相應(yīng)的液體培養(yǎng)基。

g.根據(jù)安瓿上所標(biāo)明的不同菌種類型而將其培養(yǎng)于相應(yīng)的溫度（細(xì)菌培養(yǎng)溫度30～35℃，培養(yǎng)18～24小時；真菌培養(yǎng)溫度23～28℃，培養(yǎng)3～5天。觀察是否渾濁，渾濁說明菌種復(fù)蘇生長；若不渾濁，細(xì)菌應(yīng)延長培養(yǎng)時間至7天，真菌應(yīng)延長培養(yǎng)時間至14天，若仍未渾濁，滅菌處理。

h.黑曲霉的菌懸液先室溫待菌懸液融化后用無菌吸管吸取管內(nèi)液體1～2滴滴在改良馬丁瓊脂斜面上，用吸管涂布均勻，置23～28℃培養(yǎng)5～7天，斜面正面為黑褐色厚絨狀，色澤均一，不應(yīng)有雜色，斜面?zhèn)让鏌o色，接近菌層培養(yǎng)基略帶黃色。確認(rèn)后用含有0.05%（ml/ml）的吐溫-80的0.9%無菌氯化鈉溶液洗脫到無菌試管中。

i.取經(jīng)復(fù)蘇后的上述細(xì)菌菌液8-10ml至液體培養(yǎng)基中按g項操作對菌種進(jìn)行復(fù)壯。以無菌技術(shù)向復(fù)壯后的菌種中加入100ml20%的無菌甘油混勻，1-2ml/管分裝于凍存管。每個菌種制備10支，按順序進(jìn)行編號，最后一支做為質(zhì)控管進(jìn)行質(zhì)量控制，即進(jìn)行相應(yīng)的確認(rèn)。其余作為儲備管。黑曲霉的h項下洗脫液按h項下方法進(jìn)行復(fù)壯，制成復(fù)壯后的孢子懸液20ml。以無菌技術(shù)向復(fù)壯后的菌種中加入20ml、30%的無菌甘油混勻，1-2ml/管封存于凍存管。制備10支，按順序進(jìn)行編號，最后一支做為質(zhì)控管進(jìn)行質(zhì)量控制，即進(jìn)行相應(yīng)的確認(rèn)。其余作為儲備管。將上述制備好的凍存管逐支粘貼標(biāo)簽。內(nèi)容包括：菌種名稱、菌種代號、編號、代次、制備日期、制備人、貯存條件、有效期至等。

j．儲備菌種管制備成功，儲存于－20℃，有效期為三年。

3.4菌種確認(rèn)

用無菌接種環(huán)從質(zhì)控管中取細(xì)菌培養(yǎng)物接種到營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基平板上，或相應(yīng)的宜于該細(xì)菌生長的鑒別平板上，劃線分離出單個菌落。然后在30～35℃下培養(yǎng)2～3天；同樣的方法取真菌到玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基平板，并在23～28℃下培養(yǎng)7天；培養(yǎng)后，觀察其菌落形態(tài)，應(yīng)符合該菌種形態(tài)特征。

3.5污染處理

假如在該平板上發(fā)現(xiàn)有其他菌落生長，則說明或操作有污染或菌種不純。將此被污染了的培

養(yǎng)物滅菌處理。可尋找原因重新分離挑選純菌落轉(zhuǎn)接斜面菌種作為第四代。并重新制備儲備菌種管

3.6菌種的傳代與保藏

將菌種接種至一新鮮培養(yǎng)基上，每萌發(fā)一次即稱為一代，因此，當(dāng)原始菌種復(fù)溶并轉(zhuǎn)至新培養(yǎng)基內(nèi)生長，即認(rèn)為已傳代一次，從菌種保藏中心獲得的冷凍干燥的菌種為第0代，冷凍干燥的原始菌種開啟后轉(zhuǎn)種后為第1代，直到第3代為工作菌種。菌種的傳代次數(shù)（自原始菌種凍干粉起）不得超過5代。

菌種的傳代保藏過程

3.3項下標(biāo)準(zhǔn)菌的復(fù)蘇為傳第一代，復(fù)壯為第二代。傳第三代時取1支凍存管自然解凍，將其轉(zhuǎn)接斜面菌種作為工作用菌種。此時，工作用菌種為第3代。工作用菌種，分為兩類：一類用于定期傳代(W3)，一類用于實驗用（S3）。

定期傳代用菌的傳代其操作步驟如下（斜面接種法）：

（1）從冰箱冷藏室中取出菌種斜面后，應(yīng)在室溫放置約30分鐘。

（2）將裝有新鮮配制的培養(yǎng)基菌種保藏管管壁上注明菌名及接種日期，和傳代菌種一并移入潔凈工作臺，打開紫外燈照射一小時。

（3）關(guān)閉紫外燈。點燃酒精燈，左手握住菌種斜面，將管口靠近火焰上方，右手拿接種棒后端，將接種環(huán)燒紅約30秒，隨后將接種棒金屬部分在火焰上燒灼，往返通過三次。

（4）右手用無名指、小指及掌部夾住管塞，左手將管口在火焰上旋轉(zhuǎn)燒灼，右手再輕輕拔開管塞，將接種環(huán)伸入管內(nèi)先在近壁的瓊脂斜面上靠一下，稍冷后再至菌苔上，刮取少量菌苔，隨即取出接種棒并將菌種管口移至火焰上方。

（5）塞上管塞，左手將菌種管放下，取營養(yǎng)瓊脂斜面（或改良馬丁瓊脂斜面）一支，照上述操作打開管塞，將接種環(huán)伸入管內(nèi)至瓊脂斜面的底部向上劃一條直線，然后從底部向上作連續(xù)曲線劃線，一直劃到斜面頂端，使細(xì)菌接種在斜面的表面上。

（6）取出接種環(huán)，在火焰上方將培養(yǎng)基管蓋上塞子，然后將接種過細(xì)菌的接種環(huán)在火焰上燒灼滅菌。

（7）將已接種好的細(xì)菌管置30～35℃細(xì)菌培養(yǎng)箱培養(yǎng)22 ～24h，真菌管置23～28℃真菌培養(yǎng)箱最多培養(yǎng)7天。

當(dāng)工作用菌種傳代代數(shù)小于5時，可直接用上一代工作用菌種轉(zhuǎn)接下一代工作用菌種，如：（W3）可直接轉(zhuǎn)接為（W4）。按上述程序操作，直至（W4）轉(zhuǎn)為（W5）為止，需重新接種，舊的工作菌種進(jìn)行銷毀。

菌種斜面的培養(yǎng)、保藏條件及時間

菌種培養(yǎng)條件及時間培養(yǎng)基保存條件及時間

大腸埃希菌(CMCC(B)44102)30～35℃22～ 24h營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基2℃～ 8 ℃保存3個月

金黃色葡萄球菌(CMCC(B)26003)30～35℃22～ 24h營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基2℃～ 8 ℃保存3個月

枯草芽孢桿菌(CMCC(B)63501)30～35℃22～ 24h營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基2℃～ 8 ℃保存3個月

銅綠假單胞菌(CMCC(B)10104)30～35℃22～ 24h營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基2℃～ 8 ℃保存3個月

乙型副傷寒沙門菌(CMCC(B)50094)30～35℃22～ 24h營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基2℃～ 8 ℃保存3個月

生孢梭菌(CMCC(B)64941)30～35℃22～ 24h營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基2℃～ 8 ℃保存3個月

白色念珠菌(CMCC(F)98001)23～28℃ 最多7天改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基2℃～ 8 ℃保存3個月

黑曲霉(CMCC(F)98003)23～28℃ 最多7天改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基2℃～ 8 ℃保存3個月

短小芽孢桿菌(CMCC(B)63602)30～35℃22～ 24h營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基2℃～ 8 ℃保存3個月

注：菌種斜面1次/周觀察狀態(tài)是否正常。

3.7菌種的使用及銷毀

每次進(jìn)行菌種復(fù)活時，只能復(fù)活一個菌種。如果要復(fù)活其他菌時，應(yīng)對所用物品重新消毒滅菌。

每次操作，都應(yīng)進(jìn)行記錄。菌種管上應(yīng)貼有牢固的標(biāo)簽。標(biāo)明菌種名稱、菌種代號、代次、傳代人、編號和傳代日期、貯存條件、有效期至等。

廢棄菌種及實驗用品廢棄物的處理：121℃ 高壓蒸汽滅菌30分鐘。并對操作過程進(jìn)行記錄。

第三篇：微生物實驗室檢測規(guī)范

一、實驗室管理制度

1．實驗室應(yīng)制定儀器配備管理、使用制度，藥品管理、使用制度，玻璃器皿管理，使用制度，并根據(jù)安全制度和環(huán)境條件的要求，本室工作人員應(yīng)嚴(yán)格掌握，認(rèn)真執(zhí)行。

2．進(jìn)入實驗室必須穿工作服，進(jìn)入無菌室換無菌衣、帽、鞋，戴好口罩，非實驗室人員不得進(jìn)入實驗室，嚴(yán)格執(zhí)行安全操作規(guī)程。

3．實驗室內(nèi)物品擺放整齊，試劑定期檢查并有明晰標(biāo)簽，儀器定期檢查、保養(yǎng)、檢修, 嚴(yán)禁在冰箱內(nèi)存放和加工私人食品。

4．各種器材應(yīng)建立請領(lǐng)消耗記錄，貴重儀器有使用記錄，破損遺失應(yīng)填寫報告；藥品、器材、菌種不經(jīng)批準(zhǔn)不得擅自外借和轉(zhuǎn)讓，更不得私自拿出，應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行《菌種保管制度》。

5．禁止在實驗室內(nèi)吸煙、進(jìn)餐、會客、喧嘩，實驗室內(nèi)不得帶入私人物品，離開實驗室前認(rèn)真檢查水、電、暖氣、門窗，對于有毒、有害、易燃、污染、腐蝕的物品和廢棄物品應(yīng)按有關(guān)要求執(zhí)行。

6．科、室負(fù)責(zé)人督促本制度嚴(yán)格執(zhí)行，根據(jù)情況給于獎懲，出現(xiàn)問題立即報告，造成病原擴散等責(zé)任事故者，應(yīng)視情節(jié)直至追究法律責(zé)任。

二、儀器配備、管理使用制度

1．食品微生物實驗室應(yīng)具備下列儀器：培養(yǎng)箱、高壓鍋、普通冰箱、低溫冰箱、厭氧培養(yǎng)設(shè)備、顯微鏡、離心機、超凈臺、振蕩器、普通天平、千分之一天平、烤箱、冷凍干燥設(shè)備、勻質(zhì)器、恒溫水浴箱、菌落計數(shù)器、生化培養(yǎng)箱，電位 pH計、高速離心機。

2．實驗室所使用的儀器、容器應(yīng)符合標(biāo)準(zhǔn)要求，保證準(zhǔn)確可靠，凡計量器具須經(jīng)計量部門檢定合格方能使用。

3．實驗室儀器安放合理，貴重儀器有專人保管，建立儀器檔案，并備有操作方法，保養(yǎng)、維修、說明書及使用登記本，做到經(jīng)常維護(hù)、保養(yǎng)和檢查，精密儀器不得隨意移動，若有損壞需要修理時，不得私自拆動、應(yīng)寫出報告、通知管理人員，經(jīng)科室負(fù)責(zé)人同意填報修理申請、送儀器維修部門。

4．各種儀器（冰箱、溫箱除外），使用完畢后要立即切斷電源，旋鈕復(fù)原歸位，待仔細(xì)檢查后，方可離去。

5．一切儀器設(shè)備未經(jīng)設(shè)備管理人員同意，不得外借，使用后按登記本的內(nèi)容進(jìn)行登記。

6．儀器設(shè)備應(yīng)保持清潔，一般應(yīng)有儀器套罩。

7．使用儀器時，應(yīng)嚴(yán)格按操作規(guī)程進(jìn)行，對違反操作規(guī)程的因管理不善致使儀器械損壞，要追究當(dāng)事者責(zé)任。

三、藥品管理、使用制度

1．依據(jù)本室檢測任務(wù)，制定各種藥品試劑采購計劃，寫清品名、單位、數(shù)量、純度、包裝規(guī)格，出廠日期等，領(lǐng)回后建立帳目，專人管理，每半年做出消耗表，并清點剩余藥品。

2．藥品試劑陳列整齊，放置有序、避光、防潮、通風(fēng)干燥，瓶簽完整，劇毒藥品加鎖存放、易燃、揮發(fā)、腐蝕品種單獨貯存。

3．領(lǐng)用藥品試劑，需填寫請領(lǐng)單、由使用人和室負(fù)責(zé)人簽字，任何人無權(quán)私自出借或饋送藥品試劑，本單位科、室間或外單位互借時需經(jīng)科室負(fù)責(zé)人簽字。

4．稱取藥品試劑應(yīng)按操作規(guī)范進(jìn)行，用后蓋好，必要時可封口或黑紙包裹，不使用過期或變質(zhì)藥品。

四、玻璃器皿管理、使用制度

1．根據(jù)測試項目的要求，申報玻璃儀器的采購計劃、詳細(xì)注明規(guī)格、產(chǎn)地、數(shù)量、要求，硬質(zhì)中性玻璃儀器應(yīng)經(jīng)計量驗證合格。

2．大型器皿建立帳目，每年清查一次，一般低值易耗器皿損壞后隨時填寫損耗登記清單。

3．玻璃器皿使用前應(yīng)除去污垢，并用清潔液或2%稀鹽酸溶液浸泡24 h后，用清水沖洗干凈備用。

4．器皿使用后隨時清洗，染菌后應(yīng)嚴(yán)格高壓滅菌，不得亂棄亂扔。

五、安全制度

1．進(jìn)入實驗室工作衣、帽、鞋必須穿戴整齊。

2．在進(jìn)行高壓、干烤、消毒等工作時，工作人員不得擅自離現(xiàn)場，認(rèn)真觀察溫度、時間，蒸餾易揮發(fā)、易燃液體時，不準(zhǔn)直接加熱，應(yīng)置水浴鍋上進(jìn)行，試驗過程中如產(chǎn)生毒氣時應(yīng)在避毒柜內(nèi)操作。

3．嚴(yán)禁用口直接吸取藥品和菌液，按無菌操作進(jìn)行，如發(fā)生菌液，病原體濺出容器外時，應(yīng)立即用有效消毒劑進(jìn)行徹底消毒，安全處理后方有離開現(xiàn)場。

4．工作完畢，兩手用清水肥皂洗凈，必要時可用新潔爾滅、過氧乙酸泡手，然后用水沖洗，工作服應(yīng)經(jīng)常清洗，保持整潔，必要時高壓消毒。

5．實驗完畢，即時清理現(xiàn)場和實驗用具，對染菌帶毒物品，進(jìn)行消毒滅菌處理。

6．每日下班，尤其節(jié)假日前后認(rèn)真檢查水、暖氣、電和正在使用的儀器設(shè)備，關(guān)好門窗，方可離去。

六、環(huán)境條件要求

1.實驗室內(nèi)要經(jīng)常保持清潔衛(wèi)生，每天上下班應(yīng)進(jìn)行清掃整理，桌柜等表面應(yīng)每天用消毒液擦拭，保持無塵，杜絕污染。

2.實驗室應(yīng)井然有序，不得存放實驗室外及個人物品、儀器等，實驗室用品要擺放合理，并有固定位置。

3.隨時保持實驗室衛(wèi)生，不得亂扔紙屑等雜物，測試用過的廢棄物要倒在固定的箱筒內(nèi)，并及時處理。

4.實驗室應(yīng)具有優(yōu)良的采光條件和照明設(shè)備。

5.實驗室工作臺面應(yīng)保持水平和無滲漏，墻壁和地面應(yīng)當(dāng)光滑和容易清洗。

6.實驗室布局要合理，一般實驗室應(yīng)有準(zhǔn)備間和無菌室，無菌室應(yīng)有良好的通風(fēng)條件，如安裝空調(diào)設(shè)備及過濾設(shè)備，無菌室內(nèi)空氣測試應(yīng)基本達(dá)到無菌。

7.嚴(yán)禁利用實驗室作會議室及其他文娛活動和學(xué)習(xí)場所。

第四篇：食品微生物檢測檢內(nèi)容

上海千測標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)服務(wù)有限公司

食品微生物檢測檢內(nèi)容

在絕大部分食品檢測標(biāo)準(zhǔn)中都有微生物這一指標(biāo)，那么食品微生物檢測都檢些什么，筆者就這一問題走訪了質(zhì)檢部門有關(guān)專家。

據(jù)專家介紹，食品中的微生物按照其對人類有無危害可分為兩類。一類是有益菌；例如酵母菌、乳酸菌等，可用來釀造美酒或腌制咸菜；另一類是有害菌，例如大腸菌群及其他腸道性致病菌，它們會引起食物中毒或引發(fā)傳染病。

食品的微生物檢測內(nèi)容比較多。其中，反映食品衛(wèi)生質(zhì)量的細(xì)菌污染指標(biāo)是菌落總數(shù)和大腸菌群。食品中的細(xì)菌數(shù)量一般是以單位（g、ml）食品中細(xì)菌的個數(shù)來計，常用菌落總數(shù)來表示。利用菌落總數(shù)一方面可以起到監(jiān)督食品的清潔狀態(tài)的作用，另一方面可以用來預(yù)測食品的保藏期。大腸菌群是腸道致病菌污

染的指示菌，它一般直接或間接來自人與溫血動物糞便。食品中如檢出大腸菌群，就表示食品曾受到污染。

菌落總數(shù)和大腸菌群是食品的衛(wèi)生指標(biāo)，絕大部分食品都需要檢驗這兩個指標(biāo)是否合格。其中，菌落總數(shù)培養(yǎng)時間是48小時，大腸菌群的檢測時間也在24到72小時之間。按照國標(biāo)要求，菌落總數(shù)和大腸菌群是食品企業(yè)出廠時必須檢驗的項目。

除衛(wèi)生指標(biāo)之外，食品中還需檢驗是否含有致病菌（致病菌不得檢出），包括霉菌和酵母菌以及沙門氏菌、志賀氏菌、金黃色葡萄球菌等。致病菌的種類很多，并非所有食品所檢致病菌都相同，常檢的致病菌有沙門、志賀氏菌、金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌等。

當(dāng)然，根據(jù)產(chǎn)品的類別不同，檢測項目也存在差別，一般可以按照產(chǎn)品和原材料等所屬的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)來確定檢測的項目。例如酸奶需要檢測乳酸菌而不需要檢菌落總數(shù)，而白酒就不需要檢測微生物。

第五篇：食品衛(wèi)生微生物檢驗實驗室操作技術(shù)要求

食品衛(wèi)生微生物檢驗實驗室操作技術(shù)要求

第一節(jié)實驗室管理制度

一、實驗室管理制度

1．實驗室應(yīng)制定儀器配備管理、使用制度，藥品管理、使用制度，玻璃器皿管理、使用制度，并根據(jù)安全制度和環(huán)境條件的要求，本室工作人員應(yīng)嚴(yán)格掌握，認(rèn)真執(zhí)行。2．進(jìn)入實驗室必須穿工作服，進(jìn)入無菌室換無菌衣、帽、鞋，戴好口罩，非實驗室人員不得進(jìn)入實驗室，嚴(yán)格執(zhí)行安全操作規(guī)程。

3．實驗室內(nèi)物品擺放整齊，試劑定期檢查并有明晰標(biāo)簽，儀器定期檢查、保養(yǎng)、檢修，嚴(yán)禁在冰箱內(nèi)存放和加工私人食品。

4．各種器材應(yīng)建立請領(lǐng)消耗記錄，貴重儀器有使用記錄，破損遺失應(yīng)填寫報告；藥品、器材、菌種不經(jīng)批準(zhǔn)不得擅自外借和轉(zhuǎn)讓，更不得私自拿出。5．禁止在實驗室內(nèi)吸煙、進(jìn)餐、會客、喧嘩，實驗室內(nèi)不得帶入私人物品，離開實驗室前認(rèn)真檢查水電，對于有毒、有害、易燃、污染、腐蝕的物品和廢棄物品應(yīng)按有關(guān)要求執(zhí)行。

6．負(fù)責(zé)人嚴(yán)格執(zhí)行本制度，出現(xiàn)問題立即報告，造成病原擴散等責(zé)任事故者，應(yīng)視情節(jié)直至追究法律責(zé)任。

二、儀器配備、管理使用制度

1．食品微生物實驗室應(yīng)具備下列儀器：培養(yǎng)箱、高壓鍋、冰箱、顯微鏡、超凈臺、普通天平、干燥箱、均質(zhì)器、恒溫水浴箱、菌落計數(shù)器。

2.實驗室所使用的儀器、容器應(yīng)符合標(biāo)準(zhǔn)要求，保證準(zhǔn)確可靠，凡計量器具須經(jīng)計量部門檢定合格方能使用。

3．實驗室儀器安放合理，貴重儀器有專人保管，建立儀器檔案，并備有操作方法，保養(yǎng)、維修、說明書及使用登記本，做到經(jīng)常維護(hù)、保養(yǎng)和檢查，精密儀器不得隨意移動，若有損壞需要修理時，不得私自拆動，應(yīng)寫出報告，通知管理人員，由經(jīng)理同意填報修理申請，送儀器維修部門。

4.各種儀器（冰箱、溫箱除外），使用完畢后要立即切斷電源，旋鈕復(fù)原歸位，待仔細(xì)檢查后，方可離去。5．一切儀器設(shè)備未經(jīng)設(shè)備管理人員同意，不得外借，使用后按登記本的內(nèi)容進(jìn)行登記。

6．儀器設(shè)備應(yīng)保持清潔，一般應(yīng)有儀器套罩。

7．使用儀器時，應(yīng)嚴(yán)格按操作規(guī)程進(jìn)行，對違反操作規(guī)程的因管理不善致使儀器損壞，要追究當(dāng)事者責(zé)任。

三、藥品管理、使用制度1．依據(jù)本室檢測任務(wù)，制定各種藥品試劑采購計劃，寫清品名、單位、數(shù)量、純度、包裝規(guī)格，出廠日期等，領(lǐng)回后建立賬目，專人管理，每半年做出消耗表，并清點剩余藥品。2．藥品試劑陳列整齊，放置有序、避光、防潮、通風(fēng)干燥，瓶簽完整，劇毒藥品加鎖存放、易燃、揮發(fā)、腐蝕品種單獨貯存。

3．領(lǐng)用藥品試劑，需填寫請領(lǐng)單，由使用人和室負(fù)責(zé)人簽字，任何人無權(quán)私自出借或饋送藥品試劑，本單位科、室間或與外單位互借時需經(jīng)實驗室負(fù)責(zé)人簽字。

4．稱取藥品試劑應(yīng)按操作規(guī)范進(jìn)行，用后蓋好，必要時可封口或黑紙包裹，不使用過期或變質(zhì)藥品。

四、玻璃器皿管理、使用制度1．根據(jù)測試項目的要求，申報玻璃儀器的采購計劃、詳細(xì)注明規(guī)格、產(chǎn)地、數(shù)量、要求，硬質(zhì)中性玻璃儀器應(yīng)經(jīng)計量驗證合格。2．大型器皿建立賬目，每年清查一次，一般低值易耗器皿損壞后隨時填寫損耗登記清單。

3．玻璃器皿使用前應(yīng)除去污垢，并用清潔液浸泡24 h后，用清水沖洗干凈備用。

4．器皿使用后隨時清洗，染菌后應(yīng)嚴(yán)格高壓滅菌，不得亂棄亂扔。

五、安全制度

1．進(jìn)入實驗室工作衣、帽、鞋必須穿戴整齊。2．在進(jìn)行高壓、干燥、消毒等工作時，工作人員不得擅自離現(xiàn)場，認(rèn)真觀察溫度、時間，蒸餾易揮發(fā)、易燃液體時，不準(zhǔn)直接加熱，應(yīng)置水浴鍋上進(jìn)行。3．嚴(yán)禁用口直接吸取藥品和菌液，按無菌操作進(jìn)行，如發(fā)生菌液、病原體濺出容器外時，應(yīng)立即用有效消毒劑進(jìn)行徹底消毒，安全處理后方可離開現(xiàn)場。

4．工作完畢，兩手用清水肥皂洗凈，必要時可用新潔爾滅、過氧乙酸泡手，然后用水沖洗，工作服應(yīng)經(jīng)常清洗，保持整潔，必要時高壓消毒。

5．實驗完畢，即時清理現(xiàn)場和實驗用具，對染菌帶毒物品，進(jìn)行消毒滅菌處理。6．每日下班，尤其節(jié)假日前后認(rèn)真檢查水、電和正在使用的儀器設(shè)備，關(guān)好門窗，方可離去。

六、環(huán)境條件要求1．實驗室內(nèi)要經(jīng)常保持清潔衛(wèi)生，每天上下班應(yīng)進(jìn)行清掃整理，桌柜等表面應(yīng)每天用消毒液擦拭，保持無塵，杜絕污染。2．實驗室應(yīng)井然有序，不得存放實驗室外及個人物品、儀器等，實驗室用品要擺放合理，并有固定位置。

3．隨時保持實驗室衛(wèi)生，不得亂扔紙屑等雜物，測試用過的廢棄物要倒在固定的箱筒內(nèi)，并及時處理。

4．實驗室應(yīng)具有優(yōu)良的采光條件和照明設(shè)備。

5．實驗室工作臺面應(yīng)保持水平和無滲漏，墻壁和地面應(yīng)當(dāng)光滑和容易清洗。

6．實驗室布局要合理，一般實驗室應(yīng)有準(zhǔn)備間和無菌室，無菌室應(yīng)有良好的通風(fēng)條件，無菌室內(nèi)空氣測試應(yīng)基本達(dá)到無菌。

7．嚴(yán)禁利用實驗室作會議室及其他文娛活動和學(xué)習(xí)場所。

第二節(jié)實驗室技術(shù)操作要求

一、無菌操作要求

食品微生物實驗室工作人員，必須有嚴(yán)格的無菌觀念，許多試驗要求在無菌條件下進(jìn)行，主要原因：一是防止試驗操作中人為污染樣品，二是保證工作人員安全，防止檢出的致病菌由于操作不當(dāng)造成個人污染。

1．接種細(xì)菌時必須穿工作服、戴工作帽。2．進(jìn)行接種食品樣品時，必須穿專用的工作服、帽及鞋子，應(yīng)放在無菌室緩沖間，工作前經(jīng)紫外線消毒后使用。3．接種食品樣品時，應(yīng)在進(jìn)無菌室前用肥皂洗手，然后用75％酒精棉球?qū)⑹植粮蓛簟?/p>

4．進(jìn)行接種所用的吸管，平皿及培養(yǎng)基等必須經(jīng)消毒滅菌，打開包裝未使用完的器皿，不能放置后再使用，金屬用具應(yīng)高壓滅菌或用95%酒精點燃燒灼三次后使用。

5．從包裝中取出吸管時，吸管尖部不能觸及外露部位，使用吸管接種于試管或平皿時，吸管尖不得觸及試管或平皿邊。6．接種樣品、轉(zhuǎn)種細(xì)菌必須在酒精燈前操作，接種細(xì)菌或樣品時，吸管從包裝中取出后及打開試管塞都要通過火焰消毒。

7．接種環(huán)和針在接種細(xì)菌前應(yīng)經(jīng)火焰燒灼全部金屬絲，必要時還要燒到環(huán)或針與桿的連接處，接種結(jié)核菌和烈性菌的接種環(huán)應(yīng)在沸水中煮沸5min，再經(jīng)火焰燒灼。

8．吸管吸取菌液或樣品時，應(yīng)用相應(yīng)的橡皮頭吸取，不得直接用口吸。

二、無菌間使用要求

1．無菌間應(yīng)設(shè)有與無菌間大小相應(yīng)的緩沖間及推拉門，另設(shè)有0.5-0.7m2的小窗，以備進(jìn)

入無菌間后傳遞物品。2．無菌間內(nèi)應(yīng)保持清潔，工作后用消毒液消毒，擦拭工作臺面，不得存放與實驗無關(guān)的物品。

3．無菌間使用前后應(yīng)將門關(guān)緊，打開紫外消毒車，需30W紫外燈，距離在1.0m處，照射時間不少于30min，使用紫外燈，應(yīng)注意不得直接在紫外線下操作，以免引起損傷，燈管每隔兩周需用酒精棉球輕輕擦拭，除去上面灰塵和油垢，以減少紫外線穿透的影響。

4．處理和接種食品標(biāo)本時，進(jìn)入無菌間操作，不得隨意出入，如需要傳遞物品，可通過小窗傳遞。

三、消毒滅菌要求

微生物檢測用的玻璃器皿、金屬用具及培養(yǎng)基、被污染和接種的培養(yǎng)物等，必須經(jīng)滅菌后方能使用。

（一）干熱和濕熱高壓蒸氣鍋滅菌方法

1．滅菌前準(zhǔn)備（1）所有需要滅菌的物品首先應(yīng)清洗晾干，玻璃器皿如吸管、平皿用紙包裝嚴(yán)密，如用金屬筒應(yīng)將上面通氣孔打開。（2）裝培養(yǎng)基的三角瓶塞，用紙包好，試管蓋好蓋，用紗布包好。2．裝放

（1）干熱滅菌器：裝放物品不可過擠，且不能接觸箱的四壁。（2）高壓蒸氣鍋：放置滅菌物品分別包扎好，直接放入消毒筒內(nèi)，物品之間不能過擠。3．設(shè)備檢查（1）檢查門的開關(guān)是否靈活，橡皮圈有無損壞，是否平整。（2）檢查壓力表蒸氣排盡時是否停留在零位，關(guān)好門和蓋，通蒸氣或加熱后，觀察是否漏氣，壓力表與溫度計所標(biāo)示的狀況是否吻合，管道有無堵塞。

（3）對有自動電子程序控制裝置的滅菌器，使用前應(yīng)檢查規(guī)定的程序，是否符合于進(jìn)行滅菌處理的要求。4．滅菌處理(1)干熱滅菌法：此法適應(yīng)于在干熱情況下，不損壞、不變質(zhì)、不蒸發(fā)的物品、較常用于玻璃器皿、金屬制品、陶瓷制品等的滅菌。

a．器械器皿應(yīng)清洗后再干燥，以防附著在表面的污物炭化。

b．滅菌時安放物品不能過擠，不要直接接觸底和箱壁，物品之間留有空隙。

c．滅菌時將箱門關(guān)緊，接上電源，先將排氣孔打開約30min，排除滅菌器中的冷空氣，溫度升至160℃調(diào)節(jié)指示燈，維持1.5 –2h。d．滅菌完畢后或溫度升溫過程中，須在60℃以下才能打開箱門。(2)立式壓力蒸氣滅菌器的使用應(yīng)按下列步驟進(jìn)行：

a．立式高壓鍋加水16L（重復(fù)使用時應(yīng)將水量補足，水變混濁需更換）.b．蓋好頂蓋擰緊，勿使漏氣；立式壓力鍋通上電源，并打開頂蓋上的排氣閥放掉冷氣（水沸騰后排氣10-15min）。

c．關(guān)閉排氣閥，使蒸氣壓上升到規(guī)定要求，并維持規(guī)定時間（按滅菌物品性質(zhì)與有關(guān)情況而定）。d．達(dá)到規(guī)定時間后，對需干燥的物品，立即打開排氣閥排出蒸氣，待壓力恢復(fù)到零時，自然冷卻至60℃后開蓋取物；如為液體物品，不要打開排氣閥，而應(yīng)立即將鍋去除熱源，待自然冷卻，壓力恢復(fù)至零，溫度降到60℃以下再開蓋取物，以防突然減壓液體劇烈沸騰或容器爆破。5．滅菌溫度與時間(1)干熱滅菌器滅菌溫度160℃，1.5-2h。

(2)壓力蒸氣滅菌鍋滅菌溫度與時間見表1。

表1

物品滅菌時間

115℃121℃

不含糖等耐熱物質(zhì)培養(yǎng)基

含糖類等不耐熱培養(yǎng)基染菌培養(yǎng)物器械器皿15-20min30min30min

（二）間歇滅菌方法

1．此滅菌方法系利用不加壓力的蒸氣滅菌，某些物質(zhì)經(jīng)高壓蒸氣滅菌容易破壞，可用此法滅菌。

（1）將欲滅菌物品置于鍋內(nèi)，蓋上頂蓋，打開排水口，使器內(nèi)余水排盡。（2）關(guān)閉排水口，打開進(jìn)氣門，根據(jù)需要消毒10～20min。

（3）滅菌完畢關(guān)閉進(jìn)氣門，取出物品待冷至室溫溫度，放入37℃溫箱過夜，次日仍按上述方法消毒，如此三次，即可達(dá)到滅菌目的。

2．煮沸消毒：可用煮鍋或煮沸消毒器，水沸騰后再煮5～15min，也可在水中加入2﹪石炭酸煮沸5min，加入0.02﹪甲醛，80℃煮60min均可達(dá)到滅菌目的，但選用煮沸消毒的增消劑時，應(yīng)注意對物品的腐蝕性.3．滅菌處理：滅菌后物品，按正常情況已屬無菌，從滅菌器中取出應(yīng)仔細(xì)檢查放置，以免再度污染。

(1)物品取出，隨即檢查包裝的完整性，若有破壞或棉塞脫掉，不可作為無菌物品使用。

(2)取出的物品，如為包裝有明顯的水浸者，不可作為無菌物品使用。(3)培養(yǎng)基或試劑等，應(yīng)檢查是否符合達(dá)到滅菌后的色澤或狀態(tài)，未達(dá)到者應(yīng)廢棄。

(4)啟閉式容器，在取出時應(yīng)將篩孔關(guān)閉。(5)取出的物品掉落在地或誤放不潔之處，或沾有水液，均視為受到污染，不可作為無菌物品使用。(6)取出的合格滅菌物品，應(yīng)存放于貯藏室或防塵柜內(nèi)，嚴(yán)禁與未滅菌物品混放。

(7)凡屬合格物品，應(yīng)標(biāo)有滅菌日期及有效期限。(8)每批滅菌處理完成后，記錄滅菌品名、數(shù)量、溫度、時間、操作者。

四、有毒有菌污物處理要求 微生物實驗所用實驗器材、培養(yǎng)物等未經(jīng)消毒處理，一律不得帶出實驗室。1．經(jīng)培養(yǎng)的污染材料及廢棄物應(yīng)放在嚴(yán)密的容器或鐵絲筐內(nèi)，并集中存放在指定地點，待統(tǒng)一進(jìn)行高壓滅菌。

2．經(jīng)微生物污染的培養(yǎng)物，必須經(jīng)121℃30min高壓滅菌。3．染菌后的吸管，使用后放入消毒液中，最少浸泡24h（消毒液體不得低于浸泡的高度）再經(jīng)121℃30 min高壓滅菌。

4．涂片染色沖洗片的液體，一般可直接沖入下水道，烈性菌的沖洗液必須沖在燒杯中，經(jīng)高壓滅菌后方可倒入下水道，染色的玻片放入消毒液中浸泡24 h后，煮沸洗滌。做凝集試驗用的玻片或平皿，必須高壓滅菌后洗滌。

5．打碎的培養(yǎng)物，立即用消毒液噴灑和浸泡被污染部位，浸泡半小時后再擦拭干凈。污染的工作服或進(jìn)行烈性試驗所穿的工作服、帽、口罩等，應(yīng)放入專用消毒袋內(nèi)，經(jīng)高壓滅菌后方能洗滌。

五、培養(yǎng)基制備要求

培養(yǎng)基制備的質(zhì)量將直接影響微生物生長。因為各種微生物對其營養(yǎng)要求不完全相同，培養(yǎng)目的的不同，各種培養(yǎng)基制備要求如下：

1．根據(jù)培養(yǎng)基配方的成分按量稱取，然后溶于蒸餾水中，在使用前對應(yīng)用的試劑藥品應(yīng)進(jìn)行質(zhì)量檢驗。

2．PH測定及調(diào)節(jié)：PH測定要在培養(yǎng)基冷至室溫時進(jìn)行，因在熱或冷的情況下，其PH有一定差異，當(dāng)測定好時，按計算量加入堿或酸混勻后，應(yīng)再測試一次。培養(yǎng)基PH值一定要準(zhǔn)確，否則會影響微生物的生長或影響結(jié)果的觀察。但需注意因高壓滅菌可影響一些培養(yǎng)基的PH降低或升高，故不宜滅菌壓力過高或次數(shù)太多，以免影響培養(yǎng)基的質(zhì)量，指示劑、去氧膽酸鈉、瓊脂等一般在調(diào)完P(guān)H后再加入。

3．培養(yǎng)基需保持澄清，便于觀察細(xì)菌的生長情況，培養(yǎng)基加熱煮沸后，可用脫脂棉花或絨布過濾，以除去沉淀物，必要時可用雞蛋白澄清處理，所用瓊脂條要預(yù)先洗凈晾干后使用，避免因瓊脂含雜質(zhì)而影響透明度。

4．盛裝培養(yǎng)基不宜用鐵、銅等容器，使用洗凈的中性硬質(zhì)玻璃容器為好。

5．培養(yǎng)基的滅菌既要達(dá)到完全滅菌目的，又要注意不因加熱而降低其營養(yǎng)價值，一般121℃

15min即可，如為含有不耐高熱物質(zhì)的培養(yǎng)基如糖類、血清、明膠等，則應(yīng)采用低溫滅菌或間歇法滅菌，一些不能加熱的試劑如亞碲酸鉀、卵黃、TTC、抗菌素等，待基礎(chǔ)瓊脂高壓滅菌后涼至50℃左右再加入。

6．每批培養(yǎng)基制備好后，應(yīng)做無菌生長試驗及所檢菌株生長試驗。如果是生化培養(yǎng)基，使用標(biāo)準(zhǔn)菌株接種培養(yǎng)，觀察生化反應(yīng)結(jié)果，應(yīng)呈正常反應(yīng)，培養(yǎng)基不應(yīng)貯存過久，必要時可置4℃冰箱存放。

7．目前各種干燥培養(yǎng)基較多，每批需用標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行生長試驗或生化反應(yīng)觀察，各種培養(yǎng)基用相應(yīng)菌株生長試驗良好后方可應(yīng)用，新購進(jìn)的或存放過久的干燥培養(yǎng)基，在配制時也應(yīng)測PH，使用時需根據(jù)產(chǎn)品說明書用量和方法進(jìn)行。

8．每批制備的培養(yǎng)基所用化學(xué)試劑、滅菌情況及菌株生長試驗結(jié)果、制作人員等應(yīng)做好記錄，以備查詢。

六、樣品采集及處理要求

1．所采集的檢驗樣品一定要具有代表性，采樣時應(yīng)首先對該批食品原料、加工、運輸、貯藏方法條件、周圍環(huán)境衛(wèi)生狀況等進(jìn)行詳細(xì)調(diào)查，檢查是否有污染源存在。

2．根據(jù)食品的種類及數(shù)量，采樣數(shù)量及方法應(yīng)按標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法的要求進(jìn)行。

3．采樣應(yīng)注意無菌操作，容器必須滅菌，避免環(huán)境中微生物污染，容器不得使用煤酚皂溶液，用新潔爾滅、酒精等消毒藥物滅菌，更不能含有此類消毒藥物或抗生素類藥物，以避免殺死樣品中的微生物，所用剪、刀、匙用具也需滅菌方可應(yīng)用。

4．樣品采集后應(yīng)立即送往檢驗室進(jìn)行檢驗，送檢過程中一般不超過3h，如路程較遠(yuǎn)，可保存在1～5℃環(huán)境中，如需冷凍者，則在凍存狀態(tài)下送檢。

5．檢驗室收到樣品后，進(jìn)行登記（樣品名稱、送檢單位、數(shù)量、日期、編號等），觀察樣品的外觀，如果發(fā)現(xiàn)有下列情況之一者，可拒絕檢驗。

(1)樣品經(jīng)過特殊高壓、煮沸或其他方法殺菌者，失去代表原食品檢驗意義者。

(2)瓶、袋裝食品已啟開者，食品已折碎不完整者，即失去原食品形狀者（食物中毒樣品除外）。

(3)按規(guī)定采樣數(shù)量不足者。

對送檢符合要求的樣品，檢驗室收到后，應(yīng)立即進(jìn)行檢驗，如果條件不具備，應(yīng)置4℃冰箱存放，及時準(zhǔn)備創(chuàng)造條件，然后進(jìn)行檢驗。

6．樣品檢驗時，根據(jù)其不同性狀，進(jìn)行適當(dāng)處理。

(1)液體樣品接種時，應(yīng)充分混合均勻，按量吸取進(jìn)行接種。

(2)固體樣品，用滅菌刀、剪取其不同部位共25g，置于225ml滅菌生理鹽水或其他溶液中，用均質(zhì)器攪碎混勻后，按量吸取接種。

(3)瓶、袋裝食品應(yīng)用滅菌操作啟開，根據(jù)性狀選擇上述方法處理后接種。

七、樣品檢驗、記錄和報告的要求

1．檢驗室收到樣品后，首先進(jìn)行外觀檢驗，及時按照國家標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法進(jìn)行檢驗，檢驗過程中要認(rèn)真、負(fù)責(zé)、嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，避免環(huán)境中微生物污染。

2．樣品檢驗過程中所用方法、出現(xiàn)的現(xiàn)象和結(jié)果等均要用文字寫出試驗紀(jì)錄，以作為對結(jié)果分析、判定的依據(jù)，記錄要求詳細(xì)、清楚、真實、客觀、不得涂改和偽造。