第一篇:微生物實驗室規劃
一、選址:
1.實驗室應選擇在清潔安靜的場所,遠離生活區,鍋爐房與交通要道;
2.實驗室應選擇在光線充足,通風良好的場所,要與生產加工車間有一定距離;
3.實驗室應選擇在方便扦樣與檢驗,距離車間較近的工作場所。
二、結構和布局:
根據生產實際需要,一般工廠應設置細菌與理化檢驗兼有的綜合實驗室,主要包括以下三大部分:細菌實驗室、理化實驗室、辦公室。
1.辦公室
2.理化分析實驗室:(或者和細菌檢驗操作室合并)
①理化分析室(兼作感觀檢驗室)②儀器室(兼放細菌室顯微鏡等少量儀器)
3.細菌實驗室: ①細菌檢驗操作室; ②無菌室; ③培養基制作室;④洗滌消毒室;
一般布局要求如下:
1.辦公室:
辦公室是化驗人員進行原始記錄等各項工作的場所,是與非化驗室人員交往較多的場所,因此,應設在整體綜合化驗室的最外層,只需有桌、椅等簡單設施即可。
2.細菌檢驗操作室(常規操作)
細菌檢驗操作室是細菌培養與檢驗主要操作室,主要設施是實驗臺。
對實驗臺的要求:
a.實驗臺面積一般不小于2.4×1.3m;
b.實驗臺位置應在實驗室中心位置,要有充足光線;也可以做邊臺。
c.實驗臺兩側安裝小盆與水龍頭;
d.實驗臺中間設置試劑架,架上裝有日光燈與插座;
e.實驗臺材料要以耐熱、耐酸堿為宜。
3.無菌室:
無菌室通過空氣的凈化和空間的消毒為微生物實驗提供一個相對無菌的工作環境,無菌室是處理樣品和接種培養的主要工作間,應與細菌檢驗操作室緊密相連。為滿足無菌室無菌要求,無菌間應滿足以下布局:
a.入口避開走廊,設在細菌檢驗操作室內;
b.與操作室用兩道緩沖間隔開;
c.無菌室與緩沖間均裝有紫外燈,要求每3平米安裝30w紫外燈一盞;
d.無菌室內設有實驗臺中央(實驗臺與邊臺皆可),紫外燈距實驗臺面要小于
1.5m;
e.無菌室與操作室之間設有雙層窗構成小通道。
4.培養基制作室:
培養基室是制作、配制微生物培養所需培養基及檢驗用試劑的場所,其主要設備應為邊臺與藥品柜。
a.邊臺上要放置電爐,以滿足熔化煮沸培養基時用;
b.邊臺材料要耐高熱、耐酸堿;
c.藥品柜分門別類存放一些一般藥品及試劑;
d.危險、易腐易燃有毒有害藥品單獨設保險柜存放;
e.邊臺上要放天平,以稱取藥品用。
5.洗滌消毒室:
洗滌消毒室用以消毒洗滌待用與已用之玻璃器皿,培養基及污物,其面積應大于10m2。
為滿足洗滌消毒的功能,洗滌消毒室應設有:
a.1-2個洗滌池,洗滌池上下水網要暢通;
b.器皿柜或實驗臺,以放置洗滌好器皿;
c.高壓滅菌鍋,其所用電源應滿足用電負荷;
d.室內安有通風裝置(通風柜)或換氣扇;
e.有條件的單位還可在該室內,設供日常檢驗用水蒸餾水器裝置。
6.理化分析室:
(如果沒有條件,這個可以和微生物常規實驗室合并)理化分析室是物理化學分析的主要操作室
a.實驗臺與細菌操作室要求相同
b.設置通風柜以滿足加熱、消化、干燥、燒灼和化學處理等工作需要;c.洗滌池。
7.儀器室:
如果沒有條件,這個可以和微生物常規實驗室合并,用以放置顯微鏡、電子天平
及理化分析用小型儀器;
a.要求清潔干燥、防潮防蟲、避光;
b.儀器臺要穩固、牢靠。
對于小的企業實驗室,如果沒有更多的房間進行區分,應該可以通過規劃房間分區,以保證實驗室不同工作區(潔凈區和一般操作區)之間有一定區分,因此,最少應保證4個房間或者4個分區。
1.洗刷消毒區域,這個區域要求相對獨立,最好以房間間隔,因為這個區域處理廢物,有一定的污染和濕度。
2.培養基配制區域,用于培養基的配制,經常有水等,需要相對獨立一些。
3.一般操作區域,這個是主要操作區域,微生物的試驗結果的觀察,顯微鏡操作,一般的簡單理化操作,儀器設備等,都可以合并在這個房間或者區域進行。
4.無菌操作區域,無菌間,這個要求獨立。
第二篇:微生物實驗室守則
微生物實驗室守則
1.須著長及膝蓋之實驗衣,並穿著長褲,若有長髮應予以適當束結,嚴禁穿著拖鞋或涼鞋。實驗室內嚴禁喧嘩嬉鬧、追逐、抽煙及吃食等行為。
2.非必要物品勿置於實驗室之桌面,實驗結束後,需加以清理,物品並應歸於原位。
3.實驗前後消毒桌面及手部,實驗時操作桌面應隨時保持乾淨。
4.應熟悉實驗室內所有設備,配置及正確操作方法。
5.顯微鏡使用後應清理乾淨,並清點附件是否齊備,關閉電源後再拔掉插頭,並歸定位,發現有任何異狀,即報告指導老師處理,任何配件或裝置避免任意交換或拆卸。
6.不可於點燃酒精燈時噴酒精,並隨時注意自己及他人之安全,酒精燈不用時應即熄滅。
7.實驗所用之菌體有些為致病菌,故須以無菌操作且避免用手及口的動作,如咬手指或用舌頭舔濕標籤。
8.實驗用之所有菌體或器具未經許可嚴禁攜出室外。9.接種針(環)於接菌前後務必以酒精燈滅菌。
10.含菌體之容器,應妥予加蓋,非必要時切勿任意打開。
11.實驗後待丟棄物品應妥善包裹或予殺菌處理再丟棄;固體培養基則不得倒入水槽中。
12.實驗結束後,應確實關閉所有不用之電源。
13.任何意外事件,應即報告助教及指導老師,亦應熟知其應變措施。
14.實驗操作過程中必須隨時注意自身及他人之安全,若有危及自身及他人安全之事件或違反實驗守則者,本實驗課成績一律以零分計。
微生物實驗室守則
1.須著長及膝蓋之實驗衣,並穿著長褲,若有長髮應予以適當束結,嚴禁穿著拖鞋或涼鞋。實驗室內嚴禁喧嘩嬉鬧、追逐、抽煙及吃食等行為。
2.非必要物品勿置於實驗室之桌面,實驗結束後,需加以清理,物品並應歸於原位。3.實驗前後消毒桌面及手部,實驗時操作桌面應隨時保持乾淨。
4.應熟悉實驗室內所有設備,配置及正確操作方法。
5.顯微鏡使用後應清理乾淨,並清點附件是否齊備,關閉電源後再拔掉插頭,並歸定位,發現有任何異狀,即報告指導老師處理,任何配件或裝置避免任意交換或拆卸。
6.於點燃酒精燈時噴酒精,並隨時注意自己及他人之安全,酒精燈不用時應即熄滅。
7.實驗所用之菌體有些為致病菌,故須以無菌操作且避免用手及口的動作,如咬手指或用舌頭舔濕標籤。
8.實驗用之所有菌體或器具未經許可嚴禁攜出室外。
9.接種針(環)於接菌前後務必以酒精燈滅菌。
10.含菌體之容器,應妥予加蓋,非必要時切勿任意打開。
11.實驗後待丟棄物品應妥善包裹或予殺菌處理再丟棄;固體培養基則不得倒入水槽中。
12.實驗結束後,應確實關閉所有不用之電源。13.任何意外事件,應即報告助教及指導老師,亦應熟知其應變措施。
14.實驗操作過程中必須隨時注意自身及他人之安全,若有危及自身及他人安全之事件或違反實驗守則者,本實驗課成績一律以零分計。
第三篇:微生物實驗室規則
微生物實驗室規則
1、進實驗室應穿工作服,離室時脫去放在指定處所,工作服應定期消毒洗滌。
2、非必要物品勿帶入實驗室。
3、實驗室內應保持肅靜;不得高聲談笑;不準吸煙和進食;無菌室在工作前、工作后均須全面清掃、消毒。
4、如帶有細菌的增菌液污染桌面或地面,應立即用消毒溶液傾覆其上,半小時后方可抹去;如有污染物污染工作服,應立即將工作服脫去以高壓蒸汽法滅菌。
5、如有污染物污染手部,應立即將手浸泡消毒液內,經5分鐘后,再用肥皂和水刷洗干凈。如有污染物吸入口內,應立即吐出,并以大量清水漱口,根據需要亦可服用有關藥物以防發生感染染。
6、接種環用后應立即在酒精燈火焰上燒灼滅菌;沾菌的吸管、玻片等用后應分別浸泡在盛有消毒液的玻璃缸內,其他已污染的試管、平皿等亦必須置于專用容器內,經滅菌后再進行洗滌。
7、用于消毒的酒精應放在加蓋搪瓷缸內,如不慎著火,應立即用搪瓷蓋蓋上與空氣隔絕即可滅掉火焰。
8、工作完畢時工作臺用沾有消毒液的抹布擦拭干凈,地面應用墩布擦拭干凈。
9、檢驗人員應具備高度責任感,以嚴謹的科學態度從事檢驗工作。
第四篇:微生物實驗室管理制度
目 的:規范微生物室管理規范,以保證微生物實驗的順利進行。范 圍:適用于微生物實驗室
依 據:GB/T 19489-2008《實驗室 生物安全通用要求》; 執行部門:化驗室微生物檢驗室
職 責:1.微生物檢驗員負責微生物實驗室的管理。2.實驗室主管負責對微生物實驗室管理情況進行檢查。內 容:
本中心微生物實驗室管理制度包括微生物實驗室人員管理制度、微生物室出入管理 制度、微生物室環境管理制度、微生物室的使用管理制度。微生物實驗室藥品管理制度。
1.微生物實驗室的人員管理
1.1 微生物實驗室由微生物檢驗員管理及使用,其他人員須經主管人員批準后方可進入和使 用。
1.2 微生物實驗室的人員需經過相關的培訓。2.微生物實驗室出入管理 2.1 人員出入管理:
2.1.1 人員進入微生物實驗室潔凈區前,需要洗手消毒;在一級緩沖室換實驗服、戴帽子、換鞋后,進入風淋室,風淋后,進入二級緩沖室準備實驗。2.1.2 實驗操作前須帶上無菌手套和口罩。2.2 物料出入管理:
2.2.1 物料進入微生物實驗室以前,脫去外包裝或者用酒精棉球擦拭后,放置于傳遞窗中。2.2.2 物料放置于傳遞窗后,開啟紫外0.5小時,同時將微生物實驗室內的凈化系統、紫外 燈打開。
2.2.3 紫外開啟0.5小時以后,關閉紫外,并將物品轉移于實驗操作臺上。
2.2.4 實驗完畢后,微生物實驗室物品經傳遞窗傳出后,經高溫滅菌后廢液、廢物倒入廢液桶處理。
3.微生物實驗室的環境管理 3.1 微生物實驗室的清潔管理
微生物實驗室的清潔分為一般清潔及徹底清潔,其具體的清潔部位、方式方法、頻率見下表所示:
3.2 微生物實驗室常用消毒劑及其配制
4.微生物實驗室的使用管理
4.1 微生物實驗室使用之前,應先開啟微生物實驗室自凈系統30分鐘。每次使用前應用消毒 液擦拭超凈工作臺及其他一切可能引起污染的死角,然后開紫外燈滅菌30分鐘,同時開啟超凈工作臺。操作完畢后,用消毒液擦拭臺面,做好衛生,開紫外燈30分鐘,并記錄紫外燈照射時間。注:當紫外燈使用1000小時應更換。
4.2 微生物實驗室使用時,應同時進行沉降菌監測,將含有營養瓊脂培養基培養皿在各監測點正向放置,打開蓋子,暴露30分鐘,然后蓋上,將營養瓊脂培養基放入30~35℃培養箱培養48小時,觀察結果,每皿菌落數應≤1個,否則應加強清潔消毒工作,必要時驗證生物安全柜的性能。5.微生物實驗室藥品及培養基管理制度
藥品及培養基是微生物試驗的基礎,直接影響微生物試驗結果。適宜的培養基制備方法、貯藏條件和質量控制試驗是提供優質培養基的保證。5.1 藥品及培養基的采購及接收
微生物實驗室所用的藥品及培養基必須是符合國家相關資質的公司所出產的。實驗室根據檢驗需要申購所需的培養基并做好相應的接收記錄。5.1培養基的接收
微生物檢驗室應指定專人負責培養基的管理,在接收培養基時,應核對培養基的品名、來源、批號、生產日期、有效期、數量,脫水培養基應附有處方和使用說明,并做好接收記錄。5.2培養基的制備
培養基可按處方配制,也可使用按處方生產的符合規定的脫水培養基。在制備培養基時,應選擇質量符合要求的脫水培養基或單獨配方組分進行配制。脫水 培養基應附有處方和使用說明,配制時應按使用說明上的要求操作以確保培養基的質量符合要求,不得使用結塊或顏色發生改變的脫水培養基。脫水培養基或單獨配方組分應在適當的條件下貯藏,如低溫、干燥和避光,所有的容器應密封,尤其是盛放脫水培養基的容器。商品化的成品培養基除了應附有處方和使用說明外,還應注明有效期、貯藏條件、適用性檢查試驗的質控菌和用途。
為保證培養基質量的穩定可靠,各脫水培養基或各配方組分應準確稱量,并要求有一定的精確度。配制培養基最常用的溶劑是純化水,特殊情況下,可能需要用去離子水和蒸餾水。應記錄各稱量物的重量和水的使用量。配制培養基所用容器和配套器具應潔凈,可用純化水沖洗玻璃器皿以消除清潔劑和外來物質的殘留,對熱敏感的培養基如糖發酵培養基其分裝容器一般應預先進行滅菌,以保證培養基的無菌性。
脫水培養基應完全溶解于水中,再行分裝與滅菌。配制時若需要加熱助溶,應注意不要過度加熱,以避免培養基顏色變深。如需要添加其他組分時,加入后應充分混勻。應按照生產商提供或使用者驗證的參數進行培養基的滅菌。商品化的成品培養基必須附有所用滅菌方法的資料。培養基滅菌一般采用濕熱滅菌技術,特殊培養基可采用薄膜過濾除菌。
培養基若采用不適當的加熱和滅菌條件,有可能引起顏色變化、透明度降低、瓊脂凝固力或pH 的改變。因此,培養基應采用驗證的滅菌程序滅菌,培養基滅菌方法和條件,應通過無菌性試驗和促生長試驗進行驗證。此外,對高壓滅菌器的蒸汽循環系統也要加以驗證,以保證在一定裝載方式下的正常熱分布。溫度緩慢上升的高壓滅菌器可能導致培養基的過熱,過度滅菌可能會破壞絕大多數的細菌和真菌培養基促生長的質量。滅菌器中培養基的容積和裝載方式也將影響加熱的速度。因此,應根據滅菌培養基的特性,進行全面的滅菌程序驗證。應確定每批培養基滅菌后的pH值(冷卻至室溫25 ℃ 測定)。若培養基處方中未列出pH 值的范圍,除非經驗證表明培養基的pH 值允許的變化范圍很寬,否則,pH值的范圍不能超過規定值士0.2。
制成平板或分裝于試管的培養基應進行下列檢查:容器和蓋子不得破裂,裝量應相同,盡量避免形成氣泡,固體培養基表面不得產生裂縫或漣漪,在冷藏溫度下不得形成結晶,不得污染微生物等。應檢查和記錄批數量、有效期及培養基的無菌檢查。5.3 培養基的貯藏
自配的培養基應標記名稱、批號、配制日期等信息,并在已驗證的條件下貯藏。商品化的成品培養基標簽上應標有名稱、批號、生產日期、失效期及培養基的有關特性,生產商和使用者應根據培養基使用說明書上的要求進行貯藏,所采用的貯藏和運輸條件應使成品培養基最低限度的失去水分并提供機械保護。
培養基滅菌后若貯藏在高壓滅菌器中,質量可能會受影響,一般不提倡這種存放法。瓊脂培養基不得在O ℃ 或O ℃ 以下存放,因為冷凍可能破壞凝膠特性。
培養基應避光保存,若要長期保存,應置于密閉容器中以防止水分流失。瓊脂平板最好現配現用,如置冰箱保存,一般不超過1周,且應密閉包裝,若延長保存期限,保存期需經驗證確定。固體培養基滅菌后的再融化只允許1 次,以避免因過度受熱造成培養基質量下降或微生物污染。培養基的再融化一般采用水浴或流通蒸汽加熱。若使用微波爐,應避免培養基過度受熱及水分的蒸發,更要注意安全。融化的培養基應置于45 ~50 ℃ 的水浴中,不得超過8 小時。傾注培養基時,應擦干培養基容器外表面的水分,避免容器外壁的水滴進人培養基中造成污染。使用過的培養基(包括失效的培養基)應按照國家污染廢物處理相關規定進行。5.4 質量控制試驗
實驗室應對試驗用培養基建立質量控制程序,以確保所用培養基質量符合相關檢測的需要。實驗室配制或商品化的成品培養基的質量依賴于其制備過程,采用不適宜方法制備的培養基將影響微生物的生長或復蘇,從而影響試驗結果的可靠性。所有配制好的培養基均應進行質量控制試驗。實驗室配制的培養基的常規監控項目是pH、適用性檢查試驗,定期的穩定性檢查以確定有效期。
培養基在有效期內應依據適用性檢查試驗確定培養基質量是否符合要求。有效期的長短將取決于在一定存放條件下(包括容器特性及密封性)的培養基其組成成分的穩定性。
除藥典附錄另有規定外,在實驗室中,若采用已驗證的配制和滅菌程序制備培養基且過程受控,那么同一批脫水培養基的適用性檢查試驗可只進行1 次。
如果培養基的制備過程未經驗證,那么每一批培養基均要進行適用性檢查試驗,試驗的菌種可根據培養基的用途從相關附錄中進行選擇,也可增加從生產環境及產品中常見的污染菌株。培養基的質屋控制試驗若不符合規定,應尋找不合格的原因,以防止問題重復出現。任何不符合要求的培養基均不能使用。
用于環境監控的培養基須特別防護,最好要雙層包裝和終端滅菌,如果不能采用終端滅菌的培養基,那么在使用前應進行100 %的預培養以防止外來的污染物帶到環境中及避免出現假陽性結果。
第五篇:微生物實驗室設備
無菌室(接種室)或接種箱
要培養微生物,首先就需要接種,而接種必須在無菌條件下進行。這就需要建造無菌室或接種箱,為接種創造必要的條件。
無菌室可以建在實驗室內,作為實驗室的一個小套間。面積為4~5平方米,高2.5米左右。無菌室外應連接一個小緩沖間,面積為2平方米左右。緩沖間和無菌室的門不要建在同一條直線上,以減少空氣中雜菌進入無菌室。
無菌室和緩沖間應作到清潔、密閉性好,室內最好有換氣設備,以便在工作結束后更換室內空氣。兩個房間中應各安裝l盞30瓦紫外線燈管和照明用的日光燈,無菌室的紫外線燈應懸吊在工作臺的正上方,距臺面1米,以發揮最大的消毒功能。無菌室內的工作臺等用具用品,應經常保持清潔,避免雜菌污染。
如果沒有條件建造無菌室,可以用木制的接種箱代替。接種箱結構簡單,容易制作,其正面安裝玻璃,便于觀察。箱前方開兩個圓洞各接連1只套袖,操作時將兩臂從套袖伸入箱內進行操作。箱內也應懸吊一盞紫外線殺菌燈和一盞日光燈。接種箱的尺寸規格見圖9-1。
恒溫箱
用于恒溫條件下培養微生物。恒溫箱的調溫范圍一般為20~45℃之間。培養酵母菌和霉菌時,一般可調至28℃,培養細菌和放線菌時,可根據菌種的生長溫度進行調溫,一般為30~37℃。
電烘箱(干燥箱)
用于玻璃器皿等物的烤干和滅菌。電烘箱的調溫的范圍一般為40~180℃,對玻璃器皿等物進行滅菌時,可將溫度調至160℃,滅菌4小時,即可將器皿上的微生物全部殺死。滅菌完畢后,在電烘箱溫度還沒有降到50~70℃以前,不要打開電烘箱,以免器皿破裂。
冰箱
用于保藏菌種和需要低溫保存的藥品。
高壓蒸汽滅菌鍋
是微生物學實驗中最重要的滅菌工具,用于一般培養基和玻璃器皿等物的滅菌。在15磅/英寸2壓力下(121.6℃),滅菌15~30分鐘,可以殺死包括芽孢在內的全部微生物。
離心機
用它使菌體和液體培養基分開。一般多使用普通小型“蘑菇”式離心機,最高轉數為4000轉/分,用電力啟動。如果沒有條件置備電動離心機,可用手搖離心器代替。
接種針
用于接種和分離微生物。根據不同用途做成針狀、環狀、鉤狀、刀狀和鏟狀等。接種針由針頭和針柄兩部分組成。針頭由白金或鉻鎳合金(細電爐絲)制成,長約7厘米。針柄可用玻璃棒或鋁管制成,長約20厘米。將針頭燒結在針柄上即成。
天平
用于稱量各種試劑。托盤天平或扭力天平均可,感量應為0.01克。
酒精燈
用于接種時對接種工具進行滅菌。酒精燈火焰上部熱度最高,應利用這一最高溫度區燒灼接種針或試管口。
顯微鏡
用于觀察微生物的形態結構,顯微鏡應配備油鏡頭,以便能看清細菌的形態。
常用玻璃器皿
(1)培養皿(平皿):用于盛放固體培養基,是培養微生物和觀察微生物的主要器皿。一般直徑為9厘米。可根據活動規模準備若干個。
(2)試管:用于盛放斜面培養基(固體),是接種微生物的主要器皿。常用的有兩種。較大的長220毫米,直徑20毫米;較小的長150毫米,直徑15毫米。可根據需要選用其中一種,并準備若干個。
(3)錐形瓶:用于盛放液體培養基。是用液體培養基培養微生物的主要器皿。一般容量為50、100、250、300、500、1000毫升。可根據活動需要選擇和準備。
(4)量筒、量杯:用于定量量取各種液體。
(5)移液管(吸管):一般容量為0.5、1、5、10毫升等,可根據需要選擇和準備。
(6)其它:燒杯、漏斗等。