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淺析中藥有效成分現代提取技術研究進展的論文[五篇范例]

時間:2020-02-23 15:20:06下載本文作者:會員上傳
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第一篇:淺析中藥有效成分現代提取技術研究進展的論文

中藥有效成分是其發揮治療功效的物質基礎,成分及作用機理相對清晰是中藥走向國際化的瓶頸。因此,篩選以及優化中藥有效成分的提取工藝十分重要。本文對近5 年的中藥有效成分提取方法及特點作一全面概述。超臨界流體萃取法

程艷芹等應用水蒸氣蒸餾法和超臨界CO2萃取法提取復方苦黃方中的揮發性成分,采用GC-MS法分析比較兩種提取方法得出,SFE-CO2萃取法對復方苦黃方中蛇床子素、人參醇及蒼術醇等有效成分的提取具有更高的選擇性。朱德艷等采用正交試驗法對CO2超臨界提取葛渣中葛根素的工藝進行了考察,實驗結果表明,在最佳工藝條件下,應用CO2超臨界方法得到葛根素的萃取率為82.5%。此方法具有分離效果好、萃取率較高并且無污染等優點,但是成本較高的問題仍有待解決。超聲波提取法

尤靜等分別采用超聲法和酶法結合半仿生法提取野菊花中的有效成分總黃酮,應用分光光度法測定總黃酮含量得出較高的提取率。張芝維等應用超聲輔助技術提取出蕨菜多糖的提取率為1.72%,該方法與其他提取方法相比有提取成本低,工藝簡單,易于操作等優點。微波萃取法

徐春明等采用微波輔助乙醇-硫酸銨雙水相體系提取苦蕎麥粉中的黃酮類化合物,以響應面法優化后的條件提取得到的黃酮類化合物占苦蕎麥粉的1.38%。徐瀾等應用單因素試驗和正交試驗對微波輔助萃取穿山龍中薯蕷皂苷元的工藝進行了優化,以料液比1w25 為最佳條件得到0.766%的有效成分薯蕷皂苷元,此法具有時間短,取率高,穩定性好的特點。半仿生提取法

半仿生提取法是模仿人體胃腸道轉運吸收環境對有效成分進行分離的一種新型提取方法。賴紅芳等應用半仿生法提取雞骨草中有效成分總三萜酸,經UV 測定總三萜酸含量達0.123%,高于傳統水提法,并且綠色無污染。此方法常與其他提取方法結合使用以達到提高有效成分利用率。薛璇璣等分別采用酶解法、半仿生法及半仿生酶法對拐棗七中總生物堿進行提取,結果發現,半仿生酶法提取的總生物堿含量最高,具有高效環保的特點。藍峻峰等以超聲波法輔助半仿生法提取地桃花多糖的提取率為12.86%,加樣回收率高達95.3%,兩種方法相結合提取多糖具有提取率高,提取成本低等優勢。酶提取法

劉炳福等采用正交試驗優化當歸有效成分的酶解提取工藝,應用HPLC 法測定有效成分阿魏酸、多糖的含量,結果顯示,酶解法對當歸有效成分的提取較傳統水提法提取率高,藥材成本消耗低。周曄等采用響應面分析法優化金櫻子多糖的酶提取工藝,在最優條件下金櫻子多糖的提取率為14.49%,并且與理論萃取率接近。鄭鈞予等采用復合酶酶解提取黑木耳多糖的提取率為4.353%。此工藝耗能低,效率高,是多糖類的有效提取方法。破碎提取法

該方法大多利用閃式提取器使中藥材在溶劑中破碎而得到有效成分。王玥等采用正交試驗法優化提取黃芩中黃芩苷的閃式提取工藝,結果發現,應用閃式提取器提取黃芩苷與傳統提取工藝相比具有提取率高,操作便捷,節能經濟等優勢。楊炳川等應用閃式提取法提取馬尾松松針中有效成分總黃酮,與乙醇回流法等相比,該法提取時間短,溶劑消耗少,并且環保。大孔樹脂吸附法

郭小藤等用大孔樹脂分離得到40% 乙醇洗脫部位,該有效部位對人肝癌細胞BEL-7402 的增值有一定的抑制作用。王鍵等采用大孔樹脂分離純化桔梗中總皂苷得到較高含量。該方法具有分離效果好,操作簡單,成本低及穩定性好的特性。超微粉碎法

任桂林等對低溫超微粉碎地龍工藝進行了考察,結果發現用低溫粉碎過的地龍其有效成分無變化,并且不易聚集。黃芩經氣流超微粉碎技術粉碎后,提取出的黃芩有效成分具有溶出速度大、生物利用度高等特點。因此該方法主要應用于名貴藥材的微粉化。動態逆流提取法

該分離方法具有高產率、有效成分含量高的優勢。張雄志采用動態逆流技術提取龍牡壯骨顆粒中有效成分黃芪甲苷,提高了水的利用率,降低了實際藥材消耗量,使有效成分的轉移率高達87% 以上。羅喜榮等采用罐組式動態逆流法提取有效成分當歸油的得率為3.43%,與傳統提取工藝相比,該法提取的有效成分含量更多,提取率更高,并且提取溶劑消耗少,工藝操作簡單可應用于工業化大生產。膜提取分離法

顏繼忠等應用膜分離技術結合樹脂法富集純化桑葉中有效成分,得到收率較高的1-脫氧野尻霉素。張濤等分別采用膜分離技術和水提醇沉法純化雙黃連口服液并測定其有效成分含量,與水提醇沉法相比,膜分離法處理得到的有效成分黃芩等質量穩定性更好。分子印跡技術

該方法具有預定、識別和實用的特性。劉慶山等分別采用沉淀聚集法和表面分子印跡法制備分子印跡聚合物,通過比較得出表面分子印跡法制備的人參皂苷Rg1 分子印跡聚合物的吸附性更高,選擇性更好。衣麗娜等利用分子印跡技術定向分離有效成分胡黃連苷Ⅱ,得到的有效成分具有很好的靶向吸附性,此方法與傳統工藝相比操作簡單,無污染,有機溶劑的消耗較少。分子蒸餾法

史晉輝等采用刮膜式分子蒸餾法分離深海魚油中的脂肪酸成分,得到質量好、收率高的脂肪酸,并且產物無雜質、安全環保。吳永平等采用超臨界CO2萃取技術和分子蒸餾法聯用提取分離澤瀉中的有效成分,得到良好的效果。由于此方法提取的有效成分較純,并且高效無污染,因此主要應用于揮發油、甾醇類成分的提取。高速逆流色譜提取技術

李忠琴等利用高速逆流色譜技術從100 mg訶子醇中分離得到沒食子酸8.6 mg,本方法可一次得到純度高達96.4%的沒食子酸,并且簡單高效,操作時間短。李文娟等采用高速逆流色譜法從黃芩中分離得到高純度的漢黃芩素,此方法分離效率高,應用范圍廣,重現性好,將有很好的應用前景。本文對近年來13 種常用的提取工藝進行了闡述,每種提取方法都有各自的優劣之處,與浸漬法、蒸煮法等傳統提取方法相比,現代提取方法具有提取率高、有效成分損失少、節能環保等優勢,但是有些提取方法還不完善,不適于大工業生產。

第二篇:微波萃取技術及其在中藥有效成分提取中的應用

微波萃取技術及其在中藥有效成分提取中的應用

來源:中國論文下載中心 [ 08-05-22 15:35:00 ] 編輯:studa20

作者:王志祥,李紅娟,萬水昌,李菊,樂龍

【摘要】微波萃取技術是一種新型高效分離技術,也是中藥現代化的關鍵技術之一。文章簡要介紹了微波萃取技術的基本原理、特點及其在中藥有效成分提取中的應用。在此基礎上,提出了今后微波萃取技術的主要研究方向。

【關鍵詞】微波萃取;中藥有效成分;研究方向

微波萃取技術是利用微波的熱效應對樣品及其有機溶劑進行加熱,從而將目標組分從樣品基體中分離出來的一種新型高效分離技術。與傳統萃取技術相比,微波萃取技術具有許多獨特的優點,被譽為“綠色萃取技術”,并已成為實現中藥現代化的主要關鍵技術之一。本文簡要介紹了微波萃取技術的基本原理、特點及其在中藥有效成分提取中的應用。在此基礎上,提出了今后微波萃取技術的主要研究方向。

微波萃取技術的基本原理

微波萃取主要是利用微波強烈的熱效應,但微波加熱方式不同于傳統的加熱方式。在傳統的加熱方式中,容器壁大多由熱的不良導體制成,熱由器壁傳導至溶液內部需要一定的時間;此外,液體表面氣化而引起的對流傳熱將形成自內而外的溫度梯度,因而僅一小部分液體與外界溫度相當。而微波加熱是一個內部加熱過程,它不同于普通的外加熱方式將熱量由外向內傳遞,而是同時直接作用于內部和外部的介質分子,使整個物料被同時加熱,即為“體加熱”過程,從而可克服傳統的傳導式加熱方式所存在的溫度上升較慢的缺陷。微波萃取離不開合適的溶劑,因此微波萃取可作為溶劑提取的輔助措施。溶劑提取法是根據中草藥中各種成分在溶劑中的溶解性能差異,選用對有效成分溶解度大,而對無效成分溶解度小的溶劑,將有效成分從藥材組織內提取出來。采用微波協助提取,可以使溶劑提取過程更為有效。

當被提取物和溶劑共處于快速振動的微波電磁場中時,目標組分的分子在高頻電磁波的作用下,以每秒數十億次的高速振動產生熱能,使分子本身獲得巨大的能量而得以掙脫周圍環境的束縛。當環境存在一定的濃度差時,即可在非常短的時間內實現分子自內向外的遷移,這就是微波可在短時間內達到提取目的的原因。微波萃取的機理可從以下3個方面來分析:①微波輻射過程是高頻電磁波穿透萃取介質到達物料內部的微管束和腺胞系統的過程。由于吸收了微波能,細胞內部的溫度將迅速上升,從而使細胞內部的壓力超過細胞壁膨脹所能承受的能力,結果細胞破裂,其內的有效成分自由流出,并在較低的溫度下溶解于萃取介質中。通過進一步的過濾和分離,即可獲得所需的萃取物。②微波所產生的電磁場可加速被萃取組分的分子由固體內部向固液界面擴散的速率。例如,以水作溶劑時,在微波場的作用下,水分子由高速轉動狀態轉變為激發態,這是一種高能量的不穩定狀態。此時水分子或者汽化以加強萃取組分的驅動力,或者釋放出自身多余的能量回到基態,所釋放出的能量將傳遞給其他物質的分子,以加速其熱運動,從而縮短萃取組分的分子由固體內部擴散至固液界面的時間,結果使萃取速率提高數倍,并能降低萃取溫度,最大限度地保證萃取物的質量。③由于微波的頻率與分子轉動的頻率相關連,因此微波能是一種由離子遷移和偶極子轉動而引起分子運動的非離子化輻射能,當它作用于分子時,可促進分子的轉動運動,若分子具有一定的極性,即可在微波場的作用下產生瞬時極化,并以24.5億次/s的速度作極性變換運動,從而產生鍵的振動、撕裂和粒子間的摩擦和碰撞,并迅速生成大量的熱能,促使細胞破裂,使細胞液溢出并擴散至溶劑中。在微波萃取中,吸收微波能力的差異可使基體物質的某些區域或萃取體系中的某些組分被選擇性加熱,從而使被萃取物質從基體或體系中分離,進入到具有較小介電常數、微波吸收能力相對較差的萃取溶劑中。綜上所述,微波能是一種能量形式,它在傳輸過程中可對許多由極性分子組成的物質產生作用,并使其中的極性分子產生瞬時極化,并迅速生成大量的熱能,導致細胞破裂,其中的細胞液溢出并擴散至溶劑中。從原理上說,傳統的溶劑提取法如浸漬法、滲漉法、回流提取法、連續回流提取法等均可加入微波進行輔助提取,從而成為高效的提取方法。

微波萃取的特點

微波具有波動性、高頻性、熱特性和非熱特性四大特點,這決定了微波萃取具有以下特點。

2.1 試劑用量少、節能、污染小。

2.2 加熱均勻,且熱效率較高。傳統熱萃取是以熱傳導、熱輻射等方式自外向內傳遞熱量,而微波萃取是一種“體加熱”過程,即內外同時加熱,因而加熱均勻,熱效率較高。微波萃取時沒有高溫熱源,因而可消除溫度梯度,且加熱速度快,物料的受熱時間短,因而有利于熱敏性物質的萃取。

2.3 微波萃取不存在熱慣性,因而過程易于控制。

2.4 微波萃取無需干燥等預處理,簡化了工藝,減少了投資。

2.5 微波萃取的處理批量較大,萃取效率高、省時。與傳統的溶劑提取法相比,可節省50%~90%的時間。

2.6 微波萃取的選擇性較好。由于微波可對萃取物質中的不同組分進行選擇性加熱,因而可使目標組分與基體直接分離開來,從而可提高萃取效率和產品純度。

2.7 微波萃取的結果不受物質含水量的影響,回收率較高。基于以上特點,微波萃取常被譽為“綠色提取工藝”。

當然,微波萃取也存在一定的局限性。例如,微波萃取僅適用于熱穩定性物質的提取,對于熱敏性物質,微波加熱可能使其變性或失活。又如,微波萃取要求藥材具有良好的吸水性,否則細胞難以吸收足夠的微波能而將自身擊破,產物也就難以釋放出來。再如,微波萃取過程中細胞因受熱而破裂,一些不希望得到的組分也會溶解于溶劑中,從而使微波萃取的選擇性顯著降低。微波萃取技術在中藥有效成分提取中的應用

3.1 黃酮類物質的提取

黃酮類成分具有降壓、降血脂和抑制血小板聚集等功能,在大部分中藥中均存在。黃酮類化合物的傳統提取方法主要有水煎煮法、浸提法或索氏提取法,但費時費力且收率較低。微波萃取在黃酮類物質的提取上具有良好的效果,在提取過程中具有反應高效性和強選擇性等特點。劉忠英等[1]采用常壓回流微波提取法提取刺五加葉中的總黃酮,結果表明提取率可達48.2 mg/g,遠高于索氏提取法的34.7 mg/g,而提取時間卻由索氏提取法的8h縮短至14 min。劉志勇等[2]采用微波提取法萃取荊芥中的總黃酮,結果表明提取時間可由常規法的2 h縮短至20 min,且提取液中的總黃酮含量可由常規法的0.71%提高至1.11%。周謹等[3]以水為溶劑來提取銀杏黃酮,考察了微波功率、微波作用時間、溶劑用量及水浴浸提時間等因素對黃酮提取率的影響,結果表明微波水提法的黃酮平均提取率為60.5%,比常規法高出40%,而提取時間為1 h,比常規法縮短了50%。

3.2 生物堿的提取

生物堿是生物體內一類含氮有機物的總稱,多數生物堿具有較復雜的含氮雜環結構和特殊而顯著的生理作用,是中草藥中的重要成分之一。劉覃等[4]利用微波萃取技術從龍葵中提取總生物堿,結果表明提取時間可由回流提取法的6 h縮短至8 min,產率則由8.40μg/g增加至10.77 μg/g。范志剛等[5]利用微波萃取技術從麻黃中提取麻黃堿,結果表明提取率可由常規煎煮法的0.183%提高至0.485%。查圣華等[6]利用微波萃取技術從千層塔中提取石杉堿甲和石杉堿乙,結果表明提取時間可由傳統回流提取法的2 h縮短至90 s,而石杉堿甲和石杉堿乙的回收率分別達到94.3%和93.6%,比傳統回流提取法高出10%以上。

3.3 苷類物質的提取微波對某些化合物具有一定的降解作用,且在短時間內可使藥材中的酶滅活,因而用于提取苷類等成分時具有更突出的優點。郭振庫等[7]研究了黃芩中的黃芩苷微波提取工藝,并與超聲提取法進行了對比,結果表明微波提取法具有提取時間短、工藝穩定等特點,提取率可達13.12%。黎海彬[8]對微波輔助水提取羅漢果皂苷的工藝進行了研究,結果表明該工藝的羅漢果皂苷平均提取率可達70.5%,比常規水提法高出45%,且提取時間可縮短50%。龔盛昭等[9]利用微波萃取技術提取黃芪皂苷,結果表明提取時間可由直接加熱法的3 h縮短至8 min,而皂苷產率則由1.65%增加至2.42%。

3.4 萜類和揮發油的提取萜類化合物是一類具有廣泛生物活性的天然藥物有效成分,植物中的揮發油大多富含單萜和倍半萜類化合物。揮發油的沸點較低,傳統提取工藝具有提取溫度高、提取時間長、易破壞有效成分的缺陷,致提取收率低。而微波提取可瞬間產生高溫,具有提取時間短、提取效率高等優點。成玉懷等[10]利用微波萃取技術提取紅景天葉中的揮發油,結果表明提取時間可由傳統提取法的5 h縮短至20 min,而揮發油含量則由0.15%提高至0.40%。魯建江等[11]利用微波萃取技術從佩蘭中提取揮發油,結果表明提取時間可由傳統提取法的5 h縮短至20 min,而揮發油的含量則由1.830%提高至2.106%。陳宏偉等[12]利用微波萃取技術從荊芥葉中提取揮發油,結果表明提取時間可由傳統法的5 h縮短至20 min,而揮發油含量則由0.89%提高至1.10%。朱曉薇等[13]利用微波萃取技術從丹參中提取丹參酮IIA,結果表明提取率為1.815 mg/g,與傳統提取法的1.808 mg/g相當,但提取時間則由傳統提取法的7.6 h縮短至30 min。Hao J Y等[14]利用微波萃取技術從黃花蒿中提取青蒿素,結果表明提取率可達92.1%,提取時間可由索氏提取法的幾個小時縮短至12 min。

3.5 多糖類物質的提取

中藥多糖是一類具有顯著生物活性的生物大分子物質,許多多糖具有抗腫瘤、增強免疫力、抗衰老和抗病毒等作用,因而受到國內外研究者的重視。與常規提取法相比,微波萃取法在選擇性與提取時間上都表現出無可比擬的優越性。王莉等[15]對黃芪多糖的微波萃取工藝進行了研究,結果表明提取時間僅為常規法的1/12,提取的多糖含量為6.55%。王莉等[16]還利用微波萃取技術從天花粉中提取天花粉多糖,結果表明提取時間僅為常規法的1/12,而多糖收率則由常規法的0.840 9%提高至18.301 2%。劉紅等[17]利用微波萃取技術提取山楂多糖,結果表明提取率可由傳統提取法的10.05%提高至16.07%,而提取時間則由3 h縮短至20 min。付志紅等[18]利用微波萃取技術提取車前子多糖,并與水提法和超聲提取法進行了對比,結果表明提取時間分別為65 s、1 h和30 min,而提取率則分別為1.867%,1.243%,1.764%,可見微波萃取法的提取時間最短,提取率最高。

3.6 其他物質的提取目前,微波萃取技術還用于中藥中的其他物質如色素、蒽醌類、有機酸等物質的提取。黎彧等[19]利用微波萃取技術從紫荊花中提取色素,結果表明提取時間可由溶劑浸提法的24 h縮短至30 s,而提取率則從90.2%提高至92.1%。王巧娥等[20]利用微波萃取技術提取甘草中的甘草酸,并與超聲提取法、室溫冷浸提取法和索氏提取法進行了對比,結果表明微波萃取54 min與室溫冷浸44.3h、索氏提取4h的甘草酸得率相當。郝守祝等[21]以正交試驗篩選出的較佳微波萃取方案為實驗組,與常規煎煮法及95%乙醇回流提取法進行對比,結果表明微波萃取法對大黃游離蒽醌的提取效率要明顯優于常規煎煮法,而與95%乙醇回流提取法的相同,但提取時間由回流提取法的2 h縮短為20 min。

今后的主要研究方向

微波萃取技術是提取中藥有效成分的有效手段,已成為實現中藥現代化的關鍵技術之一。從中藥現代化的角度,今后的研究方向主要應集中于以下兩點。

4.1 加強微波萃取的基礎理論研究雖然許多研究者對微波萃取植物組織中的天然產物的機理進行了大量的研究,但由于基體物質和被萃取物質的復雜性,在萃取機理方面仍有許多工作要做。今后應特別注重微波作用下的傳質機理研究,并建立描述微波萃取過程的熱力學和動力學模型,這對微波萃取設備的開發和過程的優化設計是至關重要的。此外,迄今為止,有關微波萃取技術用于提高中藥有效成分的含量或收率以及縮短提取時間方面的報道很多,但有關微波對中藥有效成分的藥理作用和藥物療效影響的研究則少有報道,這方面尚有許多工作要做。

4.2 微波萃取過程的工程化研究有關微波萃取技術提取中藥有效成分的報道很多,但大多數微波萃取過程還停留于實驗室小樣品的提取及分析,所用設備較為簡陋,許多甚至還在使用家用微波爐,因而不能提供工業化生產所需的基礎數據。今后應加強微波萃取過程的放大研究及其配套設備的開發,以推動微波萃取過程的工程化。

可以預見,隨著研究的不斷深入,微波萃取技術一定能為中藥現代化作出更大的貢獻。【參考文獻】

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第三篇:植物性香料提取技術的研究進展

植物性香料提取技術的研究進展香料是一種能被嗅感嗅出氣味和被味感品出香味的物質,是用以調制香精的原料。植物性天然香料也稱植物性精油(essential oil),是由植物的花、葉、莖、根和果實,或者樹木的葉、木質、樹皮和樹根中提取的易揮發芳香組分的混合物。

近年來,美國、El本、韓國等發達國家對天然香料提取技術研究已經相當成熟,對應用研究也很活躍;而目前我國還大多集中在對天然香料提取方面的研究,并且缺乏對深加工技術與高附加值產品方案的研究。因此,全面了解植物性天然香料的提取技術,對我國香料香精行業的發展具有深遠的現實意義。發展歷史

香料的發展歷史悠久,從黃帝神農氏時代人們采集樹皮、草根作為醫藥用品來驅疫避穢開始,現已有5000多年的歷史。起初人們把這些有香味的物質作為敬神拜福,清凈身心之用,也用于祭祀和喪葬方面,后逐漸用于飲食、裝飾和美容。大約在8~l0世紀,人們已經知道用蒸餾法分離香料。1370年第一種用乙醇提取的香水一匈牙利水(Eaudela Reimed Hongafie)出現了,開始只是從迷迭香中蒸餾制得,其后才逐漸從薰衣草等植物中制得。自1420年,在蒸餾中采用蛇形

冷凝器后,精油發展迅速,法國格拉斯(Grasse)因生產花油和香水,而成為世界著名的天然香料(特別是香花)的生產基地。此后各地逐步采用蒸餾提取精油,同時從柑桔樹的花、果實及葉中提取精油,這樣就從香料植物固體轉變成液體,提取了植物中的精油,這是劃時代的進展。l8世紀后,由于有機化學的發展,人們在對天然香料的提取、成份分析等方面都取得了很大進步。隨著天然香料應用范圍不斷擴大,香料工業急劇發展,天然香料提取技術也得到不斷改進ll J。提取技術

2.1 榨磨法

該方法主要用于提取柑桔類果實精油,如檸檬油、甜橙油、香檸檬油、紅橘油等。基本原理是采用冷磨或機械冷榨的方法將含芳香油較多的果皮中的芳香油分壓榨出來,并噴水使油和水混合流出,再經高速離心機將精油分離出來。此法生產過程在常溫下進行,確保了芳香油中萜烯類化合物不發生化學反應,從而使精油質量提高、香氣逼真。該法傳統上主要采用整果壓榨法和果皮海綿吸收法,近代生產方法采用整果冷磨法和果皮壓榨法 J。榨磨過程主要包括循環噴淋水、過濾與沉降、離心分離、榨磨后果皮處理幾個工藝過程。

2.2 蒸餾技術

2.2.1 水蒸氣蒸餾

水蒸氣蒸餾是使水蒸氣連續地流過容器中樣品混合物來進行蒸餾的方法。該法避免了精油長時間在高溫下發生破壞分解、水解或聚合,使精油的質量和提取率都得到了一定程度的提高。水蒸氣蒸餾法生產精油主要有水上蒸餾、水中蒸餾、直接蒸汽蒸餾(水氣蒸餾)三種方式。李玉媛 等分別采用水上蒸餾和水中蒸餾法多次提取云南擬單性木蘭鮮葉精油,取精油

平均得率進行比較,研究表明,水上蒸餾較好,不僅精油得率高,香成分也較水中蒸餾法保留的好。羅曼 等采用隔層蒸餾代替水蒸氣蒸餾法提取山蒼籽油,不僅能夠提高精油的提取率,并且所獲香料油為無色透明,而靠蒸汽直接蒸餾的香料油茶褐色,即使經精餾,其精油仍呈深黃色。周榮琪 對果皮、枝葉、花等各類芳香植物的提取進行了實驗,研究表明,蒸餾方式、加熱方式、蒸汽速度、操作壓力、操作溫度等因素對出油率均有影響。Boutekedjiret等 采用蒸餾的方法對迷迭香精油進行提取,研究表明在各種蒸餾方式中以水蒸氣蒸餾操作最為簡單,不但可降低香料成分餾出溫度,而且可防止分解或變質,薄荷油、桉葉油、迷迭香油等均可采用此法提取。該法設備簡單,操作方便,但采用此法處理得到的香精只含有揮發成分,而味覺成分未被提取出,因此在植物類香精油的提取中使用較多。但蒸餾技術存在著操作溫度較高、時間較長、低沸點和水溶性組分缺失較大的缺點。

2.2.2 水擴散法

水擴散法提取芳香精油這一新型的提取技術產生于2O世紀9O年代中期,與常規蒸餾相比,其進汽方式截然不同,水蒸氣是在低壓下自上而下的通過植物層,水擴散表示其中的一個過程(即滲透過程,指提取油從植物油腺中向外擴散的過程),在重力作用下,水蒸氣將油帶入冷凝器,蒸汽由上往下作快速補充。水擴散裝置具有易搬運、操作簡單、節約蒸氣、勞動強度低、精油產量高、質量好等優點。

目前國內外對此技術的研究及其應用報道甚少,周榮琪[ 曾用公丁香對這項技術與水蒸餾做了對比實驗,得到一些有參考價值的數據,對比結果表明,水擴散技術不僅具有得油率高、蒸餾時間短、能耗低、設備簡單等優點,而且油質也較好。這是因為水擴散強化了蒸餾中的擴散作用,抑制了蒸餾中的不利因素水解和熱解作用。

2.3 溶劑浸提法

溶劑浸提法是用水、酒精、石油醚以及其他有機溶劑對芳香原料(包括含精油的植物各部分、樹脂樹膠以及動物的泌香物質等)作選擇性的萃取,排除那些不重要的成分,有選擇地提取香味物質。

溶劑萃取法的優點是操作簡單,且可通過選擇不同的萃取溶劑而有選擇地提取致香成分。如在蘋果香精的萃取中,異戊烷對低級醇類的回收率就高于其它萃取溶劑 ]。但從萃取液中有效地除去溶劑且盡量降低致香成分的損失是溶劑萃取法面臨的重要問題。蒸餾一萃取裝置(SDE法)使萃取溶劑的用量大幅度減少,較好地解決了在去除溶劑的過程中失去致香成分的問題。朱旗等¨叫用SDE法提取的茶葉香精油中的香氣總量、數量及回收率均優于普通溶劑萃取法,特別是醇類和酯類,香氣成分尤為突出。與其他提取方法相比,浸提法不僅生產周期長,而且溶劑用量大,設備較復雜,密封程度要求較高,溶劑損耗也增加了產品的成本,因此浸提生產多用于較貴的品種(如茉莉、藏紅花等)。

2.4 超臨界CO:萃取

超臨界CO:萃取技術與一般傳統分離方法相比較,具有其獨特的優點。CO:臨界溫度3

1.4℃,臨界壓力7.28MPa。這樣的性質使得超臨界CO:萃取特別適用于天然植物中脂溶性揮發油、浸膏、樹脂和熱敏性產品的萃取。由于其近常溫的操作溫度,可幾乎保留全部天然香氣本香成分物質,故產品香氣天然感好、香氣純正、色澤淺、無溶劑殘留,產品質量高。

另外提取過程簡單,故分離過程中損失少,收率高,該法在天然植物有效成分的提取中具有越來越廣泛的應用前景。

符史良等⋯用超臨界cO:萃取香草蘭香料,研究了壓力、溫度、時間等因素對香料萃取率的影響,確定了從香草蘭豆莢萃取香料的最佳工藝條件,并用高效液相色譜(HPLC)測定香料中香蘭素的含量。

Luiz等¨ 以SCF—CO,為溶劑,在23~50℃、8.5~12MPa的條件下對檸檬香草精油的超臨界萃取進行了研究,綜合考慮萃取率、萃取速率和產品的質量,找到了最佳的操作條件:P= 12MPa,t=40oC。所提取的產品充分保留了檸檬香草中的活性成分和其特有的香味。周江等 以超臨界c0:為溶劑,采用SFE對香草蘭中香蘭素的提取進行了研究,得到的最佳萃取條件為55oC,39MPa,產品的提取率可達97.2%,所提取的香蘭素充分保留了香草蘭的營養成分和活性成分,并具有香草蘭獨特的香氣。Reis—Vasco等¨ 采用一萃兩分的工藝流程,對薄荷精油的超臨界CO:萃取進行了研究,其選用的最佳工藝條件為:萃取P=10MPa、t=50~C;一級分離P =8MPa,溫度t =一16℃,除去其中的臘質成分;二級分離P:=1.8MPa,溫度t:=0~C,所得到的精油品質純正,香氣濃郁。研究者還嘗試將超臨界技術與其他分離技術相耦合。如Chang等‘1 在提取分離綠茶精油時,將SFE技術與吸附分離技術相耦合,收到了提高分離效率之功效。

2.5 超聲波萃取

超聲提取的機制包括機械機制、熱學機制及空化機制_1。超聲萃取的空化作用是:存在于萃取液中的微氣泡(空化核)在聲場作用下振動,當聲壓達到一定值時,氣泡迅速增長,然后突然閉合,在氣泡閉合時產生激波,在波面處造成很大壓強梯度,因而產生局部高溫高壓,溫度可達5000K以上,壓力可達上千個大氣壓,將植物細胞壁打破,香料得以浸出,從而提高萃取率。所以選擇合理的聲學參數,使萃取液達到最大空化狀態,才能獲得良好的萃取效果。楊海燕等 在自制的超聲萃取試驗裝置上進行了超聲萃取寬葉纈草中香料的試驗研究。正交

試驗顯示,影響萃取吸光度值的主次因素為:萃取溫度、萃取濃度、萃取時間。較優水平為萃取濃度10g/50mL、溫度為45℃、時間2h。進行超聲和不加超聲對比試驗表明,加超聲比不加超聲提高吸光度值12%~40%。文獻_1 報道了一種

新型超聲反應器,并將其應用于天然香料的提取T業中。此技術主要是利用超聲波破碎細胞(空化作用)和強化傳質(機械作用),在天然植物的浸取過程中,粉碎植物細胞,釋放出其內容物,以達到從中提取有效成分的目的,并起到提高傳質速率、縮短浸取時間、提高有效成分得率的作用。

2.6 微波輻射誘導萃取技術

微波輻照誘導萃取法基本原理是促使香料植物組織的維管束和腺胞系統的細胞破裂,活性物質沿破裂的細胞自由流出,被萃取劑捕獲并溶解其中的一個過程¨。微波萃取的方法一般分為常壓法、高壓法、連續流動法。與傳統提取方法相比,新方法的特點是快速、節能、節省溶劑、污染小而且有利于萃取熱不穩定的物質,可以避免長時間高溫引起的物質的分解,特別適合于熱敏性組分或從天然物質中提取有效成分 J。:另外,微波萃取的傳熱與傳質方

向一致,因而加熱均勻,萃取效率高。國外已有很多學者利用微波萃取香料,加拿大環境署Pare于1994年申請了美國專利,他們對薄荷、洋蔥中的揮發油進行了提取。將剪碎的薄荷葉放入盛有正己烷的玻璃燒杯中,經微波短時間處理后,薄荷油釋放到正己烷中,與傳統的乙醇浸提相比,微波處理得到的薄荷油幾乎不含葉綠素和薄荷酮。20s的微波誘導提取與2h的水蒸汽蒸餾、6h的索氏提取相當,且提取產物的質量優于傳統方法。

1991年Jean等 在對熏衣草油進行微波提取時就獲得了比水擴散技術多2.5%的乙酸芳樟酯和9.1%的芳樟醇。該方法與常規蒸餾法和萃取法相比,所得產品品質好、色澤淺、質地醇,而且微波輻射誘導萃取具有高效率、高選擇性、不會破壞天然熱敏性物質等優點。

另有Chen等 以正己烷:乙醇提取迷迭香及薄荷葉中的揮發油為研究體系,系統研究了微波場中的溫度分布,考察了物料量、微波功率、照射時間等對微波提取的影響,并研究了微波提取揮發油的動力學過程。微波萃取法具有雖然具有良好的再現性,但此技術應用于天然香料的提取,鑒于基體物質和萃取體系的復雜性,其萃取機理還需進一步研究。

2.7 吸附法

吸附生產天然香料基本上有兩種形式,即非揮發性溶劑吸收法和固體吸附劑吸收法。與其他方法相比,吸收法加工過程溫度低、芳香成分不易破壞,產品香氣最佳。鮮花或食品所揮發的香氣或香氣成分宜采用吸收法進行捕集。但其存在手工操作多,生產周期長,生產效率低等問題。非揮發性溶劑吸收法根據吸收時的溫度不同可分為溫浸法和冷吸收法兩種。溫浸法所用非揮發性溶劑為精制的動物油脂、橄欖油、麻油等。冷吸收法所用非揮發性溶劑為精制的豬油和牛油。在冷吸收法摘除的殘花中,仍含有一些芳香成分,可用揮發性溶劑浸提法提取制取浸膏。固體吸附劑吸收法是利用吸附香氣成分的吸附劑提取低沸點的香氣成分,其特點在于能富集、提取沸點低的香氣成分,且不會破壞香氣的組分和性質。但高沸點的組分較少,因此精油收率一般較低。多孑L吸附樹脂對極性較小的有機分子的有強吸附作用,因而主要用于頭香制備。

2.8 微膠囊雙水相萃取技術

雙水相萃取分離技術是近年來溶劑萃取技術與其他技術相結合產生的一種新的分離技術。雙水相能有效分離細胞勻漿中的極微小碎片,提取醛、酮、醇等弱極性至無極性香味成分,提取過程不需加熱和相變,分相時間短,能耗低。但目前只限于生物物質、中草藥有效成分的分離方面。

劉品華_2 提出的微膠囊雙水相法,把微膠囊技術和雙水相萃取技術相結合,用于提取植物精油、能避免提取過程中的高溫、氧化、聚合等情況發生,有效地保護了精油的天然組分,通過調整精油和鹽的用量改變分配比,可控制囊化萃取物中精油的各種成分比,以達到有目的、最有效的、最佳分配比的囊化萃取。此技術應用前景較好。

2.9 酶提取技術

梅長松等 用纖維素酶(CE)法提取松針中的天然香料,確定了酶法提取松針葉中有效成分的最佳工藝條件。與普通的水提取法相比,酶法具有提取條件溫和,提取率高等優點,提取率可以提高40%以上。存在的問題與展望

近年來,隨著氣相色譜、高效液相色譜、質譜、核磁共振譜、紅外分光光度法和紫外分光光度法在有機分子結構分析中的廣泛應用,人們加快了對天然香料的提取和食品成分的研究進展,發現了一批很有價值的新型香料化合物,香料工業也取得了很大進步。在對天然香料提取的研究過程中,超臨界萃取技術、超聲波技術、微波技術等在香料工業中的應用也越來越廣泛,這些新技術的應用,給古老的香料工業注入了新的生機和活力。但是由于發展不成熟,雖然這些新技術都具有可行性,各具特點,但也還存在著許多問題,例如超聲波萃取技術中對合理的聲學參數選擇的研究、微波提取天然香料的萃取機理的研究等都有待有待進一步開展。同時,在選擇提取方法時,注意對我們現階段掌握的各項提取技術進

行綜合的利用,將會是香料工業未來發展的一個突破,也是未來香料提取技術的一個發展研究方向,如超臨界CO 萃取與分離技術中的分子蒸餾聯用技術,超臨界CO 萃取與吸附分離技術相耦合等都能有效提高提取效率,將新的提取方法結合新的分析技術,也將有助于香料提取工業的發展。另外,對新的提取技術要加強推廣應用,例如應用超(亞)臨界CO:萃取法提取精油的研究已取得初步成果,但仍局限于食品工業方面,今后應加強在提取領域的應用開發;微膠囊雙水相萃取技術目前也只限于生物物質、中草藥有效成分的分離方面,但其在提取植物精油方面具有良好的應用前景,應加強開發應用。

第四篇:現代中藥鑒定技術

現代中藥鑒定技術

國家實施

水利行業職業技能鑒定指導職業技能鑒定的主要內容包括:職業知識、操作技能和職業道德三個方面,現代中藥鑒定技術。這些內容是依據國家職業(技能)標準、職業技能鑒定規范(即考試大綱)和相應教材來確定的,并通過編制試卷來進行鑒定考核。

職業技能鑒定分為知識要求考試和操作技能考核兩部分。內容是依據國家職業(技能)標準、職業技能鑒定規范(即考試大綱)和相應教材來確定的,并通過編制試卷來進行鑒定考核。

知識要求考試一般采用筆試,技能要求考核一般采用現場操作加工典型工件、生產作業項目、模擬操作等方式進行。計分一般采用百分制,兩部分成績都在60分以上為合格,80分以上為良好,95分以上為優秀。

不同級別鑒定的人員,其申報條件不盡相同,考生要根據鑒定公告的要求,確定申報的級別。一般來講,不同等級的申報條件為:參加初級鑒定的人員必須是學徒期滿的在職職工或職業學校的畢業生;參加中級鑒定的人員必須是取得初級技能證書并連續工作5年以上、或是經勞動行政部門審定的以中級技能為培養目標的技工學校以及其他學校畢業生;參加高級鑒定人員必須是取得中級技能證書5年以上、連續從事本職業(工種)生產作業可少于10年、或是經過正規的高級技工培訓并取得了結業證書的人員;參加技師鑒定的人員必須是取得高級技能證書,具有豐富的生產實踐經驗和操作技能特長、能解決本工種關鍵操作技術和生產工藝難題,具有傳授技藝能力和培養中級技能人員能力的人員;參加高級技師鑒定的人員必須是任技師3年以上,具有高超精湛技藝和綜合操作技能,能解決本工種專業高難度生產工藝問題,在技術改造、技術革新以及排除事故隱患等方面有顯著成績,而且具有培養高級工和組織帶領技師進行技術革新和技術攻關能力的人員。

.申請職

職業技能鑒定考試

業技能鑒定的人員,可向當地職業技能鑒定所(站)提出申請,填寫職業技能鑒定 申請表,自我鑒定《現代中藥鑒定技術》。報名時應出示本人身份證、培訓畢(結)業證書、《技術等級證書》或工作單位勞資部門出具的工作年限證明等。申報技師、高級身份技師任職資格的人員,還須出具本人的技術成果和工作業績證明,并提交本人的技術總結和論文資料等。職業技能鑒定分為知識要求考試和操作技能考核兩部分。知識要求考試一般采用筆試,技能要求考核一般采用現場操作加工典型工件、生產作業項目、模擬操作等方式進行。計分一般采用百分制,兩部分成績都在60分以上為合格,80分以上為良好,95分以上為優秀。

【擴展閱讀篇】

1.∶評論的話2.∶含有說明、解釋或評論的話;作說明或講解用的話偶爾有對正文的講解和帶解釋性的注,但無評語3對某人的看法與對這人的感覺詳細解釋評論的話。清 唐鑒 《廩貢生王府君墓志銘》:“昔年官京師,閱 倭艮峯 日記,見其上方評語,有曰‘子 涵 子 潔 ’者,問之,則其 河南 同志 王檢心、王滌心 也。”《二十年目睹之怪現狀》第一回:“就將這本冊子的記載,改做了小說體裁,剖作若干回,加了些評語。” 趙樹理 《三里灣·決心》:“ 玉生 一時想不出適當的評語來,只籠統地說:‘我覺著你各方面都很好!’” 編輯本段評語范文X同學是個文靜懂事的女孩,踏實、穩重、有禮貌,時刻起著模范帶頭作用,給同學們作出表率。上課時用心聽講的神情,讓人感到你的專注、認真。你的作業干凈整潔、字跡又漂亮,令老師感到非常滿意。你思維靈活,接受能力較強,勤于思考,大膽質疑。你的學習成績一直都很好,在班里是一個的好女生。愿你永遠健康、漂亮、快樂、上進,在知識的海洋里遨游,做一個強者、勝利者!你的聰明加上勤奮好學會令你成功,老師深深地祝福你。

第五篇:現代生物制藥技術的研究進展

燕京理工學院

Yanching Institute of Technology(2016)屆化工與制藥專業現代制藥技術論文 題目:現代生物制藥技術的研究進展

學院: XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX 專業:

XXXXX

學號: XXXXXXX

姓名:

Dream

指導教師:林貝

教研室主任(負責人):林貝 2015 年 6 月 4 日

現代生物制藥技術的研究進展 Dream 化工與材料工程學院化藥1204班學號XXXXXXX 指導教室林貝 摘要

本文簡述了近年來基因工程在生物制藥技術的發展和應用。其中主要從基因操作中大分子的分離、PCR技術、基因芯片、外源基因的表達這4個方面敘述基因工程相關技術的應用和發展,以及基因工程藥物的產業化現狀與發展趨勢。關鍵詞:生物技術基因工程基因操作技術生物制藥 1 基本概念 1.1 生物技術

廣義的生物技術是指人類對生物資源(包括動物、植物、微生物)的利用、改造的相關技術。其發展經歷了三個不同的階段——以釀造為代表的傳統生物技術,以微生物發酵為代表的近代生物技術,以基因工程、細胞工程、酶工程和蛋白質工程為代表的現代生物技術。

現代生物技術可以理解為是直接操縱有機體細胞和基因的一種全新技術是二十世紀70年代開始異軍突起的高技術領域,在醫療、制藥、農業、輕工食品及環保業發展迅速。[1]以上的生物技術成果集中應用于醫藥工業。1.2 現代生物技術兩大核心工程 1.2.1 工程 概念:基因工程是分子遺傳學和工程技術結合的產物。是現代生物技術的核心它能按人類需要把遺傳物質DNA分子從生物體中分離出來,進行剪切、組合、拼裝合成新的DNA分子。再將新的DNA分子植入某種生物細胞中,使遺傳信息在新的宿主細胞或個體中得到表達,以達到定向改造或重建新物種的目的。1.2.2 細胞工程 概念:利用細胞融合技術把含有不同遺傳物質的細胞合成雜種細胞。并使之分裂生長成為雜種生物。它包括體細胞融合、核移植、細胞器攝取和染色體片段的重組等。 1.3 現代生物制藥

主要指基因重組的蛋白質分子類藥物的制造過程,即利用基因工程、抗體工程或細胞工程技術生產的源自生物體內的天然物質,用于體內診斷、治療或預防藥物的生產過程(也可稱基因工程制藥)。2 基因操作技術

基因大分子的分離主要指質粒(plasmid DNA)和基因組DNA的分離。質粒分離的常用方法有堿變性抽提法、煮沸法、去污劑裂解法、質粒DNA釋放法、酸酚法等。質粒在基因工程中最常用來做成各種克隆載體(cloning vector)或表達載體(expression vector)。質粒載體還可用于RNA干擾(RNA inter-ference)的研究[1](由于這一技術的研究和應用,美國科學家Andrew Z.Fire博士和Craig C.Mello博士獲得了2006的諾貝爾生理學或醫學獎)。基因組DNA的分離通常采用酚-氯仿法、基因文庫(gene library)、Southern雜交以及PCR擴增技術等。其中基因文庫是指含有某種生物基因組不同基因片段的一群DNA重組體克隆,包括cDNA文庫(com-plementaryDNA library, cDNA library)和基因組DNA文庫(genomic library)。最近又有研究者利用名為chum-RNA的小分子RNA建立非PCR擴增的單細胞cDNA文庫[2]。2.1 聚合酶鏈式反應

聚合酶鏈式反應(polymerase chain reaction,PCR)是一種在體外模擬天然DNA復制過程的核酸擴增技術。該法由Mullis等人于1985年發明,并于1993年獲得了諾貝爾化學獎。PCR技術的基本原理類似于DNA的天然復制過程,其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR由變性--退火--延伸三個基本反應步驟構成:①模板DNA的變性:模板DNA經加熱至93℃左右一定時間后,使模板DNA雙鏈或經PCR擴增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結合,為下輪反應作準備;②模板DNA與引物的退火(復性):模板DNA經加熱變性成單鏈后,溫度降至55℃左右,引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結合;③引物的延伸:DNA模板--引物結合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP為反應原料,靶序列為模板,按堿基互補配對與半保留復制原理,合成一條新的與模板DNA鏈互補的半保留復制鏈,重復循環變性--退火--延伸三過程就可獲得更多的“半保留復制鏈”,而且這種新鏈又可成為下次循環的模板。每完成一個循環需2~4分鐘,2~3小時就能將待擴目的基因擴增放大幾百萬倍。PCR技術可分為定性PCR和定量PCR。2.2 定性PCR技術

定性PCR技術包括:反轉錄PCR(reverse transcription PCR, RT-PCR),是從非常少量的mRNA樣品構建大容量cDNA文庫的方法,還發展出實時RT-PCR用于定量實驗[3];多重PCR(multiplex PCR),是指在同一PCR反應體系中加入多對不同的引物,以擴增同一模板的不同區域;反向PCR(inverse PCR),該法可以對一個已知DNA片段兩側的未知序列進行擴增和研究;錨定PCR(an-chored PCR),現稱為cDNA末端快速擴增技術(rap-id amplification of cDNA ends,RACE)[4]。2.3 熒光標記分子

定量PCR技術以實時PCR(real time PCR)為代表,其基本原理是在PCR反應體系中引入熒光標記分子,對每一反應時刻的熒光信號積累進行實時監測,計算出PCR產物量,或通過標準曲線法得出初始模板量。2.4 基因芯片

基因芯片(gene chip ormicroarray),是生物芯片的一種,其基本技術包括:核酸方陣的構建、樣品的制備、雜交和雜交圖譜的檢測及讀出。根據用途不同可分為表達譜芯片(expression profile chip)、測序芯片和診斷芯片。其中表達譜芯片的應用最為廣泛,可用于基因功能分析、疾病發生機制的探討及藥物研究和篩選[5]。(1)確定藥靶基因:通過比較正常細胞與異常細胞表達譜之間的差異,從而確定藥靶基因。(2)監測藥物治療前后的基因表達變化:該監測可有3方面的作用。一是用于研究藥物作用機制,通過監測基因表達的變化,可研究藥物作用途徑和對細胞信號轉導的影響,從而了解該藥物的作用機制;二是用于研究藥物毒理,從表達譜的改變和異常表達,便可分析藥物毒理;三是用于藥物篩選,利用用藥前后表達譜的改變,通過分析病理、生理、生化原理,能高效地篩選出新的藥物或先導化合物。N A 芯片技術在藥物基因組學的應用, 一方面可加速藥物基因組學的發展;另一方面: D N A 芯片利用藥物基因組學的研究成果, 根據基因型將人群劃分為各種類型。D N A芯片可自動快速地檢測哪些可影響藥物效應的基因(為藥物代謝酶、藥物作用靶標等)例如設計一種淋巴白血病藥物基因組芯片, 包括所有可能影響病人化療反應的基因, 借助于這種芯片, 根據病人的基因型分類, 醫生為每一個病人選擇合適的治療藥物和劑量。2.5 外源基因

導入宿主細胞的外源基因,通過基因表達得到相應的蛋白質產物。根據宿主細胞的不同可分為原核細胞表達系統和真核細胞表達系統。在外源基因表達時,通常把一個報告蛋白的基因與一個目的蛋白的基因融合在一起,形成融合蛋白,用于目的蛋白的檢測與純化。常用的報告蛋白有β-半乳糖苷酶(β-gal-actosidase)、谷胱甘肽S-轉移酶(glutathione s-transfer-ase,GST)、綠色熒光蛋白(green fluorescence protein,GFP)以及硫還蛋白(thioredoxin, Trx)等。其中值得一提的是GFP,2008年8月有3位科學家因此獲得諾貝爾化學獎:日本科學家Osamu Shimomura、美國科學家Martin Chalfie、美籍華人科學家錢永健。除了直接標記目的蛋白用于檢測與純化外,還可利用某些GFP具有熒光共振能量轉移(fluorescence resonanceenergy transfer,FRET)的現象,用于蛋白質折疊[6]、蛋白質-蛋白質相互作用[7]、信號轉導通路等[8]方面的研究。3 現代生物制藥的現狀

國際上,生物制藥業主要集中在美國日本和歐洲,其中美國作為生物制藥的發源地,無論是在經費投入、產品開發和研制,還是在產品生產和市場卜都居于國際領先地位,其它開發的產品和市場銷售額占全球的90%以上。目前, 美國共有生物制藥公司約1400家,具中形成規模生產的有Alzlgen、Seherir一g一Plougll、EliIJ1l一yMcrk、Gelexlteell等20多家公司。日本在生物技術的開發僅次美國, 目前共有生物制藥公司約600家,其中麒麟啤灑、中外制藥、味之素等著名廠商不僅在日本習內處與生物制藥各方面的領先地位,而不斷加強世界市場的開拓,進入歐洲和亞洲市場。歐洲在生物技術的開發上稍落后于日本但近兩年來歐洲在生物技術的投入和新公司成眾的數量上急速增長,目前歐洲的生物制藥公司約有300家但還處在發展的開始階段。

3.1 我國生物制藥的現狀

至2004年我國有現代生物制藥企業114家,其中疫苗生產企業28家,可以生產27種基因工程藥物和26種病毒的41種疫苗。按現價統計規定,生物生化制品生產企業全國409家,總產值220億元,銷售收入196億元。“十五”前四年,平均每年大于20%的速度增長用于該領域的投資不斷加大于固定資產平均增長32.5%。我國現已成為世界疫苗最大生產國年產量超過了10億個計量單位。兒科常見病疫苗年產量達5億人民幣除滿足自用外還向世界衛生組織(WHO)提供疫苗產品用于其他國家。3.2 我國生物制藥存在的問題及應采取的措施

我國生物制藥存在一系列問題開發水平低缺少創新產品生物制藥產業下游技術薄弱重復生產嚴重、資源浪費過大產業化規模小、市場競爭無序。可采取的措施以仿制促進創新最終以創新實現產業飛躍,多渠道建立融資網絡改革科研體制建立新的產學研一體化的機制,加強國際交流與合作積極應對國際競爭加強宏觀調控強化和規范財稅優惠政策。4 基因工程在生物制藥中的發展趨勢

目前基因工程藥物的研發趨勢是:(1)發展表達載體:目前最主要的用于生產的表達載體是哺乳動物細胞和大腸桿菌。大腸桿菌屬于原核表達系統,沒有糖基化功能,只能用于表達功能蛋白不需要糖基化的重組藥物,如胰島素等,且目的蛋白大量表達之后易形成包涵體,不易復性。而功能蛋白需要糖基化的則主要在哺乳動物細胞中表達。也有用真核化的原核表達載體[9]。目前還有“人源化”酵母表達體系和植物表達體系正在發展。(2)對現有的重組藥進行基因工程改造和修飾:通過基因工程的改造和修飾使蛋白藥物在臨床應用上更安全更有療效,如G-CSF和EPO等突變體藥物研究與開發。目前,由于天然基因工程藥物品種的研究已經相當普遍,因此采取對現有的重組藥進行基因工程改造和修飾的策略,既可以避免侵犯知識產權,又可以為新藥研究開辟出新途徑。(3)改變給藥途徑:在繼續改進注射用溶液和注射用無菌粉末的穩定性之外,還發展出化學修飾型、控釋微球型和脈沖式給藥系統。而在鼻腔、口服、直腸、口腔、肺部給藥方面也已取得重大進展。5 生物制藥研究新進展

5.1 計算機輔助藥物設計技術發展

計算機技術的發展和向藥物化學學科的滲透,促進了藥物設計的發展。20世紀90年代計算機輔助藥物設計取得突破性進展,現已成為藥物研究和開發的重要方法和工具。

計算機輔助藥物設計利用了計算機快速、全方位的邏輯推理功能、圖形顯示控制功能,并將量子化學、分子力學、藥物化學、生物化學和信息科學結合起來,研究受體生物分子與藥物結合部位的結構與性質、藥物與受體復合物的構型和立體化學特征、藥物與受體結合的模式和選擇性、特異性、、藥物分子的活性基團和藥效構象關系等,從藥物機理出發,改進現有生物活性物質的結構,快速發現并優化先導化合物,使其盡早進入臨床前研究,減少傳統的新藥研究的盲目性,縮短新藥研制的時間。

計算機輔助藥物設計有兩類方法,一類是基于機理的藥物設計(MBDD),另一類是基于結構的藥物設計(SBDD),基于機理的藥物設計要針對藥物作用機理,從靶點出發,考慮藥物與受體的作用過程,并要模擬藥物在體內的吸收、轉運、代謝等動態過程,比基于結構的藥物設計更合理,但該法還不成熟。目前的計算機輔助藥物設計主要還是基于結構的藥物設計,今后的計算機輔助藥物設計的目標是向基于機理的藥物設計方向發展。相信隨著生命科學和計算機科學的發展,考慮藥物不同作用機理和全部作用過程的計算機輔助藥物設計技術將逐步建立并不斷完善。

5.2 組合化學與高通量篩選技術發展

組合化學是近20年發展起來的一種合成大量化合物的新方法,它是建立在高效平行的合成之上,在同一個反應器內使用相同條件同時制備出多種化合物,建立各類化合物庫的策略。組合化學通常采用操作、分離簡便的固相化學合成。液相化學合成技術也在快速發展和完善中。

在藥物研究過程中,通過化合物活性篩選而獲得具有藥物活性的先導化合物是新藥研究的基礎。隨著分子水平的藥物篩選模型的建立,篩選方法和技術都發生了根本性的變化,出現了高通量篩選的新技術,大大加快了先導化合物的尋找和發現,并促進了高通量有機合成。近年來,組合化學與高通量篩選結合,使組合化學的化合物庫種類、數量不斷擴大,篩選的先導化合物數量和種類也在不斷地增多,使新藥的種類和數量也在不斷地增加。組合化學實現的自動化合成僅20世紀90年代后得到的各類化合物總和已超過了人類有史以來所發現化合物的總和,故有人把組合化學與高通量篩選結合技術稱為“新藥發現的高速公路”,據文獻記載,1992年~1998年的幾年,經過組合化學化合物庫與高通量篩選,確定的候選藥物已有46個,并已進入人體測試階段。[10]顯然,組合化學與高質量篩選的結合技術,大大地加快了新藥研制的步伐。雖然如此,組合化學建立的大型化合物庫,為篩選也帶來了困難,因此,利用組合化學設計,構建具有結構多樣性的小型而便于篩選的組合化合物庫,結合化學信息學和高通量篩選,將是組合化學與高通量篩選結合的一項重要課題。5.3 藥物手性合成技術發展

化學合成技術在新藥發現過程中發揮著十分重要的作用。近年來由于有機化學學科新理論、新反應、新技術不斷發現,使得合成反應具有化學選擇性成為現實,并促進了藥物合成技術的快速發展,其中手性合成技術使新藥研制的領域不斷擴大。

手性是自然界的本質屬性。在生物體手性環境,如酶、受體、離子通道、蛋白質、載體中,分子之間手性匹配是分子識別的基礎,受體與配體的專一作用,酶與底物的高度、區域、位點和立體催化專一性,抗原與抗體的免疫識別都與手性有關,同時藥物的生物應答常受到手性影響,包括藥物在體內的吸收、轉運、分配、位點活性的作用以及代謝和消除。所以,手性藥物的開發是當前醫藥界重點研究的熱點之一,并取得了令人注目的成就。目前已上市的藥物中手性藥物約占1/3,如2000年全球手性藥物銷售額達1233億美元。手性藥物的制備技術主要有拆分法、化學合成法和生物合成等三大類,發展較快的是后二類。化學合成法是在不對稱催化劑存在下,利用化學反應的動力學和熱力學不對稱性,進行單一對映體合成。在已上市的手性藥物中,其手性中間體均可通過現有的重(雙)鍵不對稱還原技術,特別是不對稱氫化和不對稱轉移氫化來合成。至今為止在不對稱催化合成中,昂貴的手性配體和貴金屬的使用,以及手性催化劑的催化效率仍是制約其在手性技術上應用的關鍵。因而,手性催化劑的設計和合成,以及催化劑的回收循環使用是當今不對稱催化合成研究的方向。

生物合成法則利用催化劑, 酶-催化反應的高度、底物、區域、位點和立體選擇性來合成手性藥物。生物合成法具有選擇性高、產率高、反應條件溫和等特點,隨著科學技術的發展,生物合成法將成為手性制備的高效手段。5.4 藥物生物技術發展[11] 生物技術藥物是指利用DNA重組技術或單克隆抗體技術或其它生物技術研制的蛋白質、抗體或核酸類藥物,它是目前生物技術研究最為活躍的領域,給生命科學的研究和生物制藥工業帶來了革命性變化。參考文獻

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