第一篇：《臨床技術操作規范》消化內鏡分冊

消化內鏡診療管理制度

一、內鏡室的基本設置

一、人員配置

1，醫師

(1)內鏡室必須有專職醫師（或主任）負責日常工作，在科主任的領導下，全面負責內鏡室的各項工作，并參加常規診療工作。專職醫師須由主治醫師以上人員擔任。

(2)內鏡醫師必須有堅實的臨床基礎，應在工作，年么上的住院醫師中擇優選拔，培訓時間不少于3個月。從事治療性內鏡工作的醫師，培訓時間應適當延長。

(3)內鏡醫師必須既有操作技能，又有豐富的臨床及理論知識。在有條件的地區，可采取考核上崗制度。

2，護士

(1)內鏡室應設有經過培訓的專業護士，其護齡至少在3年以上。每個檢查臺應設置1名護士(按同一時間內開展的臺數計算)。3臺以上的內鏡室可設立護理組或配備護士長。

(2)內鏡室護士應經過專門技術培，培訓工作應在三級醫院內進行，時間不短于2個月。在有條件的地區，可采取考核上崗制度。

3.技術員

對工作量較大的內鏡室，尤其是有x線設備的內鏡室應配備技術員，技術員應有(或相當于)中專以上學歷，經培訓后上崗。

二、檢查室

1.每一檢查室面積不小于20m2 ,室內主要放置內鏡檢查設備與清洗消毒設施。

2.檢查臺數與內鏡臺數應與實際檢查人數相適應，檢查臺過少必然會導致鏡消毒不嚴的后果。

3.不允許將不同類型的內鏡(如胃鏡與氣管鏡)安排在同一檢查室內進行。

4.胃鏡和腸鏡檢查原則上應分室進行。檢查人數不多的單位可分不同時間段進行檢查，但嚴格禁止在同一清洗槽內進行胃鏡與腸鏡的清洗與消毒。

5.檢查室應配有空調、相應的水電設施、穩壓電源裝置、吸引裝置、供氧裝置、搶救藥品及設備。

三、基本器械

1.內鏡數量 內鏡室的內鏡數量應與本院內鏡檢查人數相一致。根據國家衛生部有關內鏡消毒的規定，每例內鏡檢查后，內鏡清洗及消毒時間不得少于20min。醫院應根據檢查人數配置相應的內鏡與檢查臺數，以保證內鏡消毒質量。

2.內鏡的使用與報廢制度 各內鏡室應建立內鏡檔案卡，記錄內鏡購置時間、使用頻度、檢查人數及維修情況。對不能維修使用的內鏡實行報廢制度性能 不良的內鏡不得用于臨床檢查。

3.器械購置 對各類輔助器械與治療器械，購置時須嚴格檢查“三證”，未經醫療衛生行政部門批準的器械不得使用。

4.其他器械 活檢鉗等器械應每例患者一把，消毒后可重復使用，有條件者可采用一次性活檢鉗，但一次性器械不得反復使用。

四、其他輔助設施

各內鏡室應配備足量的檢查用品。包括：

1.內鏡檢查用品每一內鏡檢查臺必須配有足夠數量的彎盤、牙墊、治療巾、敷料缸、紗布、各類鑷子、過濾紙片、標本瓶、消毒手套、消毒用桶等。

五、內鏡室的管理制度

1.內鏡室應實施院長領導下的科主任負責制，醫護人員必須在有關規章制度下，有條不紊地進行工作。

2.內鏡室應設負責醫師〔或主任)及護士長(或護理小組負責人)，共同管理好內鏡室的日常工作。

3.內鏡室工作應嚴格按《規范》的要求及標準進行工作，制定出符合各醫院實際情況的內鏡室管理制度，使各項工作規范化、科學化。

4.內鏡室負責醫師的職責

(1)在科主任的領導下，完成內鏡室日常診斷與治療工作；

(2)與護士(或組長)共同組織實施有關內鏡室的管理規定與制度；

(3)做好對下級醫生和進修醫生的帶教工作；

(4)負責內鏡檢查與治療的質量控制，嚴格執行預約、消毒制度；

(5)制定各類人員培訓計劃及業務學習制度，以不斷提高自身的業務水平。

5.內鏡室護士的職責

(1)做好術前局部麻醉與器械準備工作；

(2)配合醫師完成各種內鏡檢查與治療工作，檢查治療過程中，應隨時觀察患者病情的變化，發現異常及時報告并協助醫師處理；

(3)負責內鏡及附件的清洗、消毒工作；

(4)收發內鏡申請報告及檢查報告；

(5)交待有關的醫療建議，解答患者的詢問。

6.內鏡室技術員的職責

(1)負責內鏡室全部器械的管理與檔案記錄，保證器械安全使用；

(2)內鏡及附件的報廢與添置應上報科主任；

(3)負責內鏡室計算機設備的維護與維修；

(4)負責內鏡設備的使用與維護。

7.內鏡室工作應保持整齊、清潔，工作期間，嚴禁家屬及無關人員人室觀看；醫護人員在工作時間，應集中精力，做好本職工作，不做、不講與工作無關的事和話。

8.內鏡室應有例會，布里、總結工作。

9.內鏡室應保管好各類資料，如內鏡檢查、治療申請單，治療內鏡術前同意書，內鏡報告，內鏡圖像，消毒檢測報告，器械維護記錄等。

10，內鏡室應制定儀器維修制度，及時報廢陳舊器械，不斷補充新器械，以保證日常工作正常進行。

Fu zhou gang tai gang chang yi yuang

2013-10-1

一dianzhiweijing鏡檢查

上消化道內鏡能清晰地觀察食管、胃、十二指腸壺腹至降段的粘膜形態及病變，如有病變可作活體組織病理學和細胞學檢查以確定診斷。

【適應證】

1.有上消化道癥狀，包括上腹不適、脹、痛、燒心及反酸、吞咽不適、梗噎、噯氣、呃逆及不明原因食欲不振、體重下降、貧血等。

2.上消化道鋇餐造影檢查不能確定病變或癥狀與鋇餐檢查結果不符者。

3.原因不明的急(慢)性上消化道出血或須做內鏡止血治療者。

4.須隨訪的病變，如潰瘍病、萎縮性胃炎、癌前病變等。

5.高危人群(食管癌、胃癌高發區)的普查。

6.須做內鏡治療者。

【禁忌證】

1.食管、胃、十二指腸急性穿孔。

2.嚴重心、肺、腎、腦功能不全及多臟器功能衰竭者。

3.精神病及意識明顯障礙不能合作者。

【術前準備】

1.器材 內鏡、光源主機、活檢鉗、細胞刷、必要的各種治療器械、表面麻醉劑、各種急救藥品(備用)以及內鏡消毒設備。

2.技術準備

(1)了解病史、檢查目的、特殊要求、其他檢查情況、有無內鏡檢查禁忌證、有無藥物過敏及急、慢性傳染病等。

(2)向患者講明檢查目的及配合檢查須注意的事項。

(3)術前禁食6～8h。已做鋇餐檢查者須待鋇劑排空后再做胃鏡檢查。幽門梗阻患者應禁食２～3d，必要時術前洗胃。最好排空大小便。

(4)咽部麻醉：檢查前15min用含2%～4%利多卡因的膠漿（內有祛泡劑）或普魯卡因噴霧或口含，有麻醉藥過敏史者可不用麻醉。

(5)不必常規應用鎮靜劑、解痙劑，對個別精神緊張或胃腸蠕動強者可在檢查前15rnin肌內注射阿托品。患者條件許可時可行無痛胃鏡檢查。

(6)術前常規檢查各項器材是否齊備。

【操作方法及程序】

1.患者體位

(1)患者取左側臥位，頭部略向前傾，雙腿屈曲。

(2)如患者有活動假牙宜取出，松解領口和褲帶，輕輕咬住牙墊。

2.插鏡

目前均使用單手法：術者面向患者，左手持內鏡操縱部，右手在距離鏡端20cm處持鏡，使鏡面對準患者舌根部，將鏡端自牙墊中插至咽后壁，左手調節旋鈕方向，使之順利到達咽喉部。.囑患者做吞咽動作，順勢輕柔地插人食管。切忌用暴力硬插。

雙手法（現已基本不用）

3.胃鏡檢查次序插鏡后，內鏡直視下從食管上端開始循腔進鏡，依次觀察食管、賁門、結腸鏡檢查

結腸鏡檢查是診斷和治療大腸疾病的安全、有效、可靠、簡便的方法之一，不但可明確鋇劑灌腸X線檢查未能明確的病變，而且能取活檢做病理檢查，并對某些大腸疾病進行治療。廣泛開展此項檢查，可提高早期大腸癌的發現率，還能對癌前期病變和大腸息肉及時治療。

【適應證】

1.原因不明的下消化道出血；

2.原因不明的慢性腹瀉、便秘、腹痛、腹脹；

3.鋇劑灌腸發現有異常；

4.不能排除大腸或末端回腸的腫物；

5.原因不明的低位腸梗阻；

6.某些炎癥性腸病須做鑒別和確定累及范圍及程度；

7.大腸某些良性病變為除外惡性變；

8.大腸息肉和癌診斷已明確，為了除外其他部位有無伴發性病變；

9.行結腸鏡下治療；

10.大腸某些疾病藥物治療的隨訪；

11.大腸癌手術后，大腸息肉摘除后隨訪；

12.大腸腫瘤的普查。

【禁忌證】

1.疑有大腸穿孔、腹膜炎;

2.嚴重心、肺、腎、肝及精神疾病;

3.多次開腹手術或有腸粘連者，應慎行結腸鏡檢查;4.妊娠期可能會導致流產或早產；

5.大腸炎癥性疾病急性活動期為相對禁忌證；

6.高熱、衰弱、嚴重腹痛、低血壓者，最好待病情穩定后再行結腸鏡檢查； 7.不合作者及腸道準備不充分者為相對禁忌證。

【術前準備】

.1.收集病史，介紹“患者須知”，爭取患者配合;

2.檢查前3d少渣飲食，檢查前1d流質飲食，檢查日上午禁食。檢查前晚瀉藥清腸或清潔灌腸。現在有更簡便的清腸方法，可根據不同要求按說明書使用。

3.準備好結腸鏡、冷光源、括檢鉗、注射針、圈套器、高頻電發生器、細胞刷、吸 引器、潤滑油等。

【操作方法及程序】

分雙人操作或單人操作法。

一、雙人操作法：

1.患者取左側臥位，常規做肛門指檢，除外肛門狹窄和直腸腫物。

2.循腔進鏡是結腸鏡操作的基本原則，即視野中見到腸腔才能插鏡，否則要退拉一下再找腔。

3.進鏡中常有幾個急彎腸段，如乙狀結腸、降結腸交界處，脾曲、肝曲；找腸腔如有困難，可根據見到的腸腔走行方向行滑行插人，一般滑行插人2}cm左右即現腸腔；如滑進很長距離仍不見腸腔，應該退鏡另找方向再插鏡。

可。在操作不順利時，反倒應該多使用空氣抽吸法和向后退鏡法，或者用手按壓腹部和變換患者體位的方法為好。但送氣量過少，對整個腸管的彎曲程度和正確的走向是難以判斷的。

【注意事項】

1.檢查結束后觀察患者有無腹痛、腹脹、腹部壓痛，若無異常。10min后即可離去。:

2.若有腹痛、腹脹、肝濁音界消失，應立即做腹部X線透視，如腸下有游離氣體即為消化道穿孔，應立即外科手術。

3.書寫報告單，應詳細描述陽性病變的部位、范圍、大小、形狀等，并解釋檢查結果。【并發癥】

1.穿孔

發生率為0.11%～0.26%，最常見為乙狀結腸穿孔，結腸穿孔一旦確診應立即手術。腹腔外穿孔一般不須手術，予以禁食補液，抗感染治療，1～2周后穿孔會自行愈合，腹膜后及皮下氣腫可自行吸收。

2.出血

發生率為0.07%，大部分經鏡下止血和保守治療可獲痊愈。

3.漿膜撕裂

也稱不完全穿孔，較少見，一般不須特殊治療，會自行愈合。4.腸絞痛

一般為檢查刺激所致，無特殊意義，能自行緩解。

5.心血管意外

結腸鏡檢查對心血管影響極其輕微，原有嚴重冠心病或心律失常者應慎重施行。

6.呼吸抑制

大部分與術前應用鎮靜或麻醉劑有關，一旦發生應立即復蘇治療。

Fu zhou gang tai gang chang yi yuang 2013-10-1

起來備用。

【操作方法及程序】

1.患者通常取左側臥位。根據息肉的具體位置、大小、外形等情況，可酌情改變體位，但應以息肉不倒臥于胃腸壁、不下垂至與對側胃腸壁貼近和易于觀察為原則。

2.用生理鹽水浸濕的紗布覆蓋于電極板，并緊密捆綁于患者左大腿外側或與左臀部緊密接觸。

3.常規插入內鏡，發現息肉，充分確認其位置、大小、形態后，反復沖洗，吸盡息肉表面粘液及周圍液體，使其暴露良好，便于息肉電凝電切操作。同時，必須吸凈胃腸腔內的氣體，尤其在大腸息肉切除時更須注意，必要時置換空氣，以防易燃氣體在通電時發生爆炸。

4.選擇合適的電切圈套器，經內鏡活檢管道插入胃腸腔。在內鏡直視下，在靠近息肉處張開圈套，將息肉套人圈套器內。于息肉根部逐漸拉緊套圈，但切勿用力過度，防止勒斷蒂部導致出血。

5.拉緊圈套器后，息肉因血流阻斷而頂端變為紫色，啟動高頻電源，腳踏開關通電，先凝后切。若使用新型高頻電發生器，具有ENDO CUT功能，則可自動輸出混合電流，自動通以凝、切電流，更易操作和控制，直至息肉被電切成功。

6.仔細觀察確認電切部位無出血、穿孔等并發癥后，用三爪鉗、圈套器或網籃撈取息肉，連同內鏡一并退出。

【并發癥及處理】

1.出血

在手術操作過程中或手術后均可發生出血，出血可為輕度、中度或大出血。輕度出血僅見創面輕度滲血或緩慢溢出，可自行停止。中度出血：上消化道息肉切除術后可表現為嘔血或黑便；大腸息肉切除術后可表現為排出鮮血便，應積極行內鏡下止血，多數經內科及內鏡治療可止血。大出血者可出現休克，內科及內鏡治療無效，應緊急外科手術控制出血。

2.穿孔

常由于電流強度過大，通電時間過長，視野不佳或內鏡及圈套器位置不恰當，即強行切除息肉或因圈套器破損，機械損傷胃腸壁等所致。

小穿孔可通過禁食、胃腸減壓、靜脈輸液并給予抗生素治療，內科治療無效或大的穿孔，應立即轉外科手術治療。

3.灼傷

電切時，若電極或電切圈套器安放位置不當，或圈套器附近有導電的粘液，或息肉較長倒掛，均可引起電流分流燒灼附近正常鉆膜組織。電灼傷一般僅表現為淺表潰瘍，偶可造成貫穿性電灼傷甚至穿孔，應予以重視。

4.潰瘍

息肉摘除術后，切斷面為壞死凝固物，形成的潰瘍多數在2~4周內俞合。胃息肉大腸息肉電切術后，包含以無渣流質或半流制裁為宜，不宜過多進食及過早活動。適當口服腸道不吸收的抗生素，口服液體石蠟以保持大便通暢。胃腸道息肉電切術后一般常規應用H2受體阻滯藥或質子泵抑制藥（PPI）及胃粘膜保護藥。

5.其他

高頻電切治療賁門部息肉時，可發生左側膈肌痙攣，并在心電圖上出現心肌缺血性改變。此可能為高頻電流影響膈神經以及局部高溫傳至心臟所致。所以賁門區息肉電切時須小時，時予心電監護。大腸息肉電切術偶爾可發生腸道氣體爆炸。因此，大腸肉電凝電切術前禁忌口服甘露醇清潔腸道，操作過程中可進行腸道氣體置換，即將腸腔內氣體盡吸盡并充以隋性氣體。

【注意事項】

1.分次電切法

廣基隆起、直腸大于2cm的消化道息肉，應分次電凝電切。第一次電切息肉的一部分組織，再進行第二次甚至第三次，直至完全切除。

2.長蒂息肉的切除

圈套器應套在蒂中部或在離根郎3一5mm處緊縮圈套器。寧可將殘蒂保留稍長一些，以免引起胃腸穿孔。

011-

第二篇：《臨床技術操作規范 病理學分冊》（范文）

《臨床技術操作規范?病理學分冊》

第1章 總 則

一、為提高病理學診斷質量，促進臨床工作，依據《中華人民共和國執 業醫師法》精神，結合醫院病理科工作的特點，制定本規范。

二、醫院病理科和承擔醫院病理科任務的醫學院校病理教研室的主要臨 床任務是通過活體組織病理學檢查（簡稱活檢）、細胞病理學檢查（簡 稱細胞學檢查）和尸體剖檢（簡稱尸檢）等作出疾病的病理學診斷（或 稱病理診斷）。具有一定規模的病理科，應積極開展教學、培訓病理醫 師和科學研究等項工作。

三、病理學診斷是病理醫師應用病理學知識、有關技術和個人專業實踐 經驗，對送檢的患者標本（或稱檢材，包括活體組織、細胞和尸體等）進行病理學檢查，結合有關臨床資料，通過分析、綜合后，作出的關于 該標本病理變化性質的判斷和具體疾病的診斷。病理學診斷為臨床醫師 確定疾病診斷、制定治療方案、評估疾病預后和總結診治疾病經驗等提 供重要的、有時是決定性的依據，并在疾病預防，特別是傳染病預防中 發揮重要作用。

四、病理學診斷報告書（或稱病理診斷報告）是關于疾病診斷的重要醫 學文書。當涉及醫、患間醫療爭議時，相關的病理學診斷報告書具有法 律意義。病理學診斷報告書應由具有執業資格的注冊主治醫師以上（含 主治醫師）的病理醫師簽發。各醫院可酌情準予條件適宜的高年資病理 科住院醫師試行簽署病理學診斷報告書。低年資病理科住院醫師、病理 科進修醫師和非病理學專業的醫師不得簽署病理學診斷報告書。

五、病理學檢查是臨床醫師與病理醫師為確立疾病診斷而進行的合作行 為，是有關臨床科室與病理科之間特殊形式的會診。臨床醫師和病理醫 師雙方皆應認真履行各自的義務和承擔相應的責任。

六、病理學檢查申請單是臨床醫師向病理醫師發出的會診邀請單。病理 學檢查申請單的作用是：臨床醫師向病理醫師傳遞關于患者的主要臨床 信息（包括癥狀、體征、各種輔助檢查結果和手術所見等）、診斷意向 和就具體病例對病理學檢查提出的某些特殊要求，為進行病理學檢查和 病理學診斷提供重要的參考資料或依據。病理學檢查申請單是疾病診治 過程中的有效醫學文書，各項信息必須真實，應由主管患者的臨床醫師 親自（或指導有關醫師）逐項認真填寫并簽名。

七、臨床醫師應保證送檢標本與相應的病理學檢查申請單內容的真實性 和一致性，所送檢材應具有病變代表性和可檢查性，并應是標本的全 部。

八、患者或患者的授權人應向醫師提供有關患者的真實信息（包括姓 名、性別、年齡、病史和可能涉及診斷需要的隱私信息）。病理醫師應 尊重和保護患者的隱私。患者或患者的授權人應保證其自送檢材的真實 性、完整性和可檢查性。

九、病理科應努力為臨床、為患者提供優質服務，遵照本規范的要求加 強科室建設，制訂完善的科室管理制度，并實施有效的質量監控。

十、病理科工作人員應恪盡職守，做好本職工作。病理醫師應及時對標 本進行檢查和發出病理學診斷報告書，認真對待臨床醫師就病理學診斷 提出的咨詢，必要時應復查有關的標本和切片，并予以答復。病理科技 術人員應嚴格執行本規范的技術操作規程，提供合格的病理學常規染色 片、特殊染色片和可靠的其他相關檢測結果，并確保經過技術流程處理 的檢材真實無誤。

第2章 病理學檢查常規

第一節 普通活體組織病理學檢查常規

一、申請單和標本的驗收

(一)病理科應有專人驗收普通活體組織病理學檢查(常規活檢)申 請單和送檢的標本。

(二)病理科驗收人員必須：

1． 同時接受同一患者的申請單和標本。

2． 認真核對每例申請單與送檢標本及其標志（聯號條或其他寫明患者 姓名、送檢單位和送檢日期等的標記）是否一致；對于送檢的微小標 本，必須認真核對送檢容器內或濾紙上是否確有組織及其數量。發現疑 問時，應立即向送檢方提出并在申請單上注明情況。

3．認真檢查標本的標志是否牢附于放置標本的容器上。

4．認真查閱申請單的各項目是否填寫清楚，包括：①患者基本情況［姓 名、性別、年齡，送檢單位（醫院、科室）、床位、門診號/住院號、送 檢日期、取材部位、標本數量等］，②患者臨床情況［病史（癥狀和體 征）、化驗/影象學檢查結果、手術（包括內鏡檢查）所見、既往病理學 檢查情況（包括原病理號和診斷）和臨床診斷等］。5．在申請單上詳細記錄患者或患方有關人員的明確地址、郵編及電話號 碼，以便必要時進行聯絡，并有助于隨訪患者。

(三)驗收標本人員不得對申請單中由臨床醫師填寫的各項內容進行改動。

(四)下列情況的申請單和標本不予接收：

1．申請單與相關標本未同時送達病理科；

2．申請單中填寫的內容與送檢標本不符合；

3．標本上無有關患者姓名、科室等標志；

4．申請單內填寫的字跡潦草不清；

5．申請單中漏填重要項目；

6．標本嚴重自溶、腐敗、干涸等；

7．標本過小，不能或難以制做切片；

8．其他可能影響病理檢查可行性和診斷準確性的情況。

病理科不能接收的申請單和標本一律當即退回，不予存放。

(五)臨床醫師采取的標本應盡快置放于盛有固定液（4%中性甲醛，即1 0%中性福爾馬林）的容器內，固定液至少為標本體積的5倍。對于需作 特殊項目檢查（如微生物、電鏡、免疫組織化學、分子生物學等）的標 本，應按相關的技術要求進行固定或預處理。

(六)病理醫師只對病理科實際驗收標本的病理診斷負責。

(七)病理科應建立與送檢方交接申請單和標本的手續制度。具體交接方 法由各醫院病理科自行制訂。

二、申請單和標本的編號、登記

(一)病理科驗收人員應在已驗收的申請單上注明驗收日期并及時、準確 編號（病理號），并逐項錄入活檢標本登記簿或計算機內。嚴防病理號 的錯編、錯登。

(二)標本的病理號可按年編序，或連續性（不分）編序。(三)同一病例同一次的申請單、活檢標本登記簿（包括計算機錄入）、放置標本的容器、組織的石蠟包埋塊（簡稱蠟塊）及其切片等的病理號 必須完全一致。

(四)病理科應建立驗收人員與組織取材人員之間申請單和標本的交接制度。具體交接方法由各醫院病理科自行制訂。

(五)在病理科內移送標本時，必須確保安全，嚴防放置標本的容器傾 覆、破損和標本的散亂、缺失等。

三、標本的預處理

標本驗收人員對已驗收的標本酌情更換適宜的容器，補充足量的固定 液；對于體積大的標本，值班取材的病理醫師在不影響主要病灶定位的 情況下，及時、規范地予以剖開，以便充分固定。

四、標本的巨檢、組織學取材和記錄

對于核驗無誤的標本，應按照下列程序進行操作：①肉眼檢查標本（巨 檢）；②切取組織塊（簡稱取材）；③將巨檢和取材情況記錄于活檢記 錄單上（活檢記錄單印于活檢申請單的背面）。巨檢和取材的技術操作 參見第3章第四節。

巨檢和取材時的注意事項：

(一)巨檢和取材必須由病理醫師進行，應配備人員負責記錄。

(二)巨檢和取材過程中，應嚴防污染工作人員和周圍環境。

(三)標本一般應經適當固定后再行取材。已知具有傳染性（例如結核 病、病毒性肝炎等）的標本，應在不污染環境和／或不擴散傳染的原則 下，經必要的初步巨檢或切開后，立即置于盛有足量固定液的專用容器 內，充分固定后再行常規巨檢和取材。

(四)病理醫師在對每例標本進行巨檢和取材前，應與記錄人員認真核對 該例標本及其標志與申請單的相關內容是否一致。若對申請單填寫的內 容或／和標本有疑問（例如患者姓名有誤，標本內容、數量、病變特征 與申請單填寫的情況不符等），應暫行擱置，盡快與送檢方聯系，查明 原因，確保無誤后，再行巨檢和取材。必要時，可邀請有關臨床醫師共 同檢查標本和取材。對于有疑問的標本，在消除疑問前不得進行巨檢和 取材，應將有關標本連同其申請單一并暫時妥存。

(五)病理醫師進行巨檢和取材時，記錄人員應根據病理申請單內容，向 巨檢醫師報告患者的基本臨床情況、手術所見、標本情況（采取部位、數量等）和送檢醫師的特殊要求等，并如實、清楚地將病理醫師的口頭 描述記錄于活檢記錄單上。必要時，應在活檢記錄單上（或另附紙）繪 簡圖顯示巨檢所見和標示取材部位。取材者應核對記錄內容。

(六)具有醫學學術價值的標本可攝影存檔，并酌情妥為保存。

(七)病理科宜積極推行巨檢和取材的錄音記錄。每次巨檢和取材結束 后，應由專人立即對錄音內容進行文字整理，記錄于活檢記錄單上（手 錄或用計算機錄入、打印）。有關的錄音資料應保存至病理診斷報告書 發出后兩周。

(八)細小標本取材時，可用伊紅點染并用軟薄紙妥善包裹。

(九)每例標本取材前、后，應用流水徹底清洗取材臺面和所有相關器 物，嚴防檢材被無關組織或其他異物污染，嚴防細小檢材被流水沖失。

(十)巨檢和取材必須按照本規范的要求進行操作（參見第3章第四 節）。對于由不同部位或不同病變區域切取的組織塊，應在其病理號之 后再加編次級號（例如：－1，－2，－3，??；A,，B，C，??等）。

(十一)巨檢／取材者和記錄人員應相互配合、核查，確保所取組織塊及 其編號標簽準確地置于用于脫水的容器（脫水盒等）內。

(十二)標本巨檢和取材后剩余的組織／器官應置入適當容器內，添加適 量4%中性甲醛并附有相關病理號和患者姓名等標志，然后按取材日期有 序地妥為保存。取材剩余的標本一般保存至病理診斷報告書發出后兩 周。

(十三)病理醫師在每批標本巨檢和取材后，應與記錄人員共同核對取材 內容，并在活檢記錄單／取材工作單上簽名和簽署日期。

(十四)取材后剩余的病理標本屬于污染源，應遵照有關規定處理。

(十五)巨檢／取材醫師或記錄人員與制片的技術人員認真辦理交接手 續。具體交接方法由各醫院病理科自行制訂。

五、組織切片制備的基本要求

(一)組織制片過程中，應確保切片號與蠟塊號一致。

(二)制片工作一般應在取材后2個工作日內完成（不含需要脫鈣、脫脂 等特殊處理的標本）。

(三)制片完成后，技術人員應檢查制片質量，并加貼標有本病理科病理 號的標簽。常規石蠟-HE染色片的優良率應≥95%，優秀率不<35％。不合格切片應立即重做。切片質量的基本標準參見第3章第一節的附 表。

(四)制片過程發生意外情況時，有關技術人員和技術室負責人應及時向 科主任報告，并積極設法予以補救。

(五)制片完成后，技術人員應將所制切片與其相應的活檢記錄單／取材 工作單等進行認真核對，確認無誤后，將切片連同相關的活檢申請單／ 活檢記錄單／取材工作單等一并移交給病理醫師。雙方經核對無誤后，辦理移交簽字手續。具體交接方法由各醫院病理科自行制訂。

(六)常規活檢組織切片制備技術的基本要求參見第3章第一節。

六、組織切片的光學顯微鏡檢查和病理診斷

(一)病理醫師進行病理診斷時：

1．應認真閱讀申請單提供的各項資料，必要時（尤其是疑難病例），應 向有關臨床醫師了解更多的臨床信息。

2．應認真閱讀活檢記錄單中關于標本巨檢的描述；負責復檢的病理醫師 必要時親自觀察標本，補充或訂正病變描述，指導或親自補取組織塊。

3．應了解患者既往病理學檢查情況（包括切片的病理診斷和有關文字記 錄）：①由本病理科既往受理者，必須及時調閱相關切片等病理學檢查 資料；②非本病理科既往受理者，應積極協助患者從有關病理科商借相 關切片等病理學檢查資料參閱。

4．應在活檢記錄單上簽署“醫囑”，告知技術人員進行必要的深切片、連切片、特殊染色和其他相關技術檢測。

5．應全面、細致地閱片，注意各種有意義的病變。

(二)進行初檢的病理醫師，應提出初診意見，送交主檢病理醫師復查。

(三)主檢病理醫師對難以明確診斷的病例,可以：

1．提請科內上級醫師會診或進行科內讀片討論（會診）；

2．與有關臨床醫師進行臨床－病理會診；

3．必要時約見患者（尤其門診患者）或患者親屬（或其他患方相關人 員），了解病情，說明病理診斷的疑難情況和延期簽發病理學診斷報告 書的原因等；

4．于簽發病理學診斷報告書前進行科外病理會診(“診斷報告前病理會 診”)，應將各方面會診意見的原件（或復印件）作為檔案資料貼附于有 關患者的活檢記錄單中備查；

5．必要時，建議臨床醫師重復活檢，或密切隨查。

(四)主檢病理醫師根據常規切片的鏡下觀察，結合標本巨檢、相關技術 檢查結果、有關臨床資料和參考病理會診意見等，作出病理診斷或提出 病理診斷意見（意向），清楚地書寫于活檢記錄單的有關欄目中、并親 筆簽名。各方會診意見不

一、難以明確診斷時，主檢醫師可參考會診意 見酌情診斷，或在病理學診斷報告書中將各方會診意見列出，供臨床醫 師參考。

(五)對打印的病理學診斷報告書，主檢病理醫師應與活檢記錄單上的病 理診斷文字進行核對，并親筆簽名。［參見本節下文：“

八、常規活檢 病理學診斷報告書及其簽發”］

七、相關診斷技術的選用

病理醫師可借助于組織化學染色（包括特殊染色）、免疫組織化學染 色、電子顯微鏡技術、分子生物學技術、流式細胞技術等相關診斷技術 檢查提供的佐證，對某些病例（尤其是疑難病例）進行病理診斷。（參 見第4章）

八、病理學診斷報告書及其簽發

(一)病理診斷表述的基本類型

Ⅰ類：檢材部位／疾病名稱／病變性質明確和基本明確的病理診斷。

Ⅱ類：不能完全肯定疾病名稱/病變性質，或是對于擬診的疾病名稱／病 變性質有所保留的病理診斷意向，可在擬診疾病／病變名稱之前冠以諸 如病變可“符合為”、“考慮為”、“傾向為”、“提示為”、“可能 為”、“疑為”、“不能排除（除外）”之類的詞語。

Ⅲ類：檢材切片所顯示的病變不足以診斷為某種疾病（即不能做出Ⅰ類 或

Ⅱ類病理診斷），只能進行病變的形態描述。

Ⅳ類：送檢標本因過于細小、破碎、固定不當、自溶、嚴重受擠壓（變 形）、被燒灼、干涸等，無法做出病理診斷。

(二)病理學診斷報告書的基本內容

1．患者的基本情況，包括病理號，姓名，性別，年齡，送檢醫院／科室（住院／門診），住院號／門診號，送檢／收驗日期等。

2．巨檢病變和鏡下病變要點描述（一般性病變和細小標本可酌情簡述或 省略）。

3．與病理診斷相關技術的檢查結果。

4．病理診斷的表述（參見上文“病理診斷表述的基本類型”）。

5．對于疑難病例或作出Ⅱ、Ⅲ類病理診斷的病例，可酌情就病理診斷及 其相關問題附加：①建議（例如進行其他有關檢查、再做活檢、科外病 理學會診、密切隨診／隨訪等）；②注釋／討論。

6．經過本病理科或／和科外病理會診的病例，可將各方病理會診 意見列于該例患者的病理學診斷報告書中。

(三)病理學診斷報告書的書寫要求

1．病理學診斷報告書的文字表述力求嚴謹、恰當、精練、條理和層 次清楚。

2．病理學診斷報告書應為一式二份，一份交予送檢方，另一份隨同患者 的病理學檢查申請單／病理學檢查記錄單一并存檔。主檢病理醫師必須 在每一份病理學診斷報告書上簽名，不能以個人印章代替簽名，不能由 他人代為簽名；主檢病理醫師簽名的字跡應能辨認。

3．手書的病理學診斷報告書必須二聯復寫，必須文字規范、字跡清楚，不得潦草、涂改。

4．手書和計算機打印的病理學診斷報告書中的關鍵性文字，例如

“癌”、“瘤”、“陽性”、“陰性”和數字等，要認真核對，不得有 誤。

5．計算機打印的圖文病理學診斷報告書提供的病變圖象要準確，具有典 型（代表）性，放大倍數適當。

6．患者的基本情況項目必須嚴格按照送檢臨床醫師填寫的文字抄寫或用 計算機輸錄于病理學診斷報告書中，并認真核查無誤，簽發報告書的病 理醫師和病理科的其他人員都不得改動。7．病理醫師不得簽發虛假的病理學診斷報告書，不得向臨床醫師和患方 人員提供有病理醫師簽名的空白病理學診斷報告書。

(四)病理學診斷報告書的發送

1．病理科自接受送檢標本至簽發該例病理學診斷報告書的時間，一般情 況下為5個工作日以內；

2．由于某些原因（包括深切片、補取材制片、特殊染色、免疫組 織化學染色、脫鈣、疑難病例會診或傳染性標本延長固定時間等）延遲 取材、制片，或是進行其他相關技術檢測，不能如期簽發病理學診斷報 告書時，應以口頭或書面告知有關臨床醫師或患方，說明遲發病理學診 斷報告書的原因。

3．病理科應有專人發送病理學診斷報告書。住院患者的病理學診斷報告 書應發送至有關臨床科室。病理科所在醫院門診患者和外院患者病理學 診斷報告書的發送方法，由各醫院病理科自行制訂。

4．病理學診斷報告書的經收人員（包括患方人員）必須履行簽收手續。

5．病理科已發出的病理學診斷報告書被遺失時，一般不予補發；必要 時，經病理科主任同意可以抄件形式補發。

九、資料管理

普通活體組織病理學檢查的資料必須妥善管理，有關規定參見本章第五 節。

十、會 診

病理學會診是普通活體組織病理學診斷過程的重要環節，有關規定參見本章第 六節。

第二節 手術中快速活體組織病理學檢查常規

一、概 述

(一)手術中快速活體組織病理學檢查（快速活檢）是臨床醫師在實施手術 過程中，就與手術方案有關的疾病診斷問題請求病理醫師快速進行的急會診，尤其需要臨床醫師與病理醫師間的密切合作。

(二)快速活檢要求病理醫師在很短時間內，根據對切除標本的巨檢和組織塊快 速冷凍切片（或快速石蠟切片）的觀察，向手術醫師提供的參考性病理診斷意 見。與常規石蠟切片的病理診斷相比，快速活檢會診具有更多的局限性和誤診 的可能性。有的病例難以快速診斷，需要等待常規石蠟切片進一步明確診斷。因此，應向臨床醫師說明快速活檢的：①局限性、②適用范圍、③慎用范圍和 ④不宜應用范圍。

(三)有關臨床醫師應于手術前向患者和／或患者授權人說明快速活檢的意義和 局限性等，取得患者和／或患方的知情和理解。患者和／或患者授權人應在由 醫院制定的《手術中快速活檢患方知情同意書》簽署意見和簽名。

(四)主持手術的臨床醫師應在手術前一天向病理科遞交快速活檢申請單，填寫 患者的病史，重要的影象學、實驗室檢查結果和提請病理醫師特別關注的問題 等。盡可能不在手術進行過程中臨時申請快速活檢。

(五)手術中快速活檢應由經過該項工作訓練的主治醫師以上的病理醫師主持。尚不具備相應條件的病理科不應勉強開展手術中快速活檢。

(六)負責快速活檢的主檢病理醫師應了解患者的①臨床情況，②手術所見，③ 既往有關的病理學檢查情況。

二、適用范圍

(一)需要確定病變性質（如腫瘤或非腫瘤／良性腫瘤或惡性腫瘤等），以

決定手術方案的標本。

(二)了解惡性腫瘤的擴散情況，包括腫瘤是否浸潤相鄰組織、有無區域淋 巴結轉移等。

(三)確定腫瘤部位的手術切緣有無腫瘤組織殘留。

(四)確認切除的組織，例如甲狀旁腺、輸卵管、輸精管及異位組織等。

三、慎用范圍

涉及截肢和其他會嚴重致殘的根治性手術切除的標本。需要此類手術治療的患者，其病變性質宜于手術前通過常規活檢確定。

四、不宜應用范圍

(一)疑為惡性淋巴瘤。

(二)過小的標本（檢材長徑≤0.2cm者）。(三)術前易于進行常規活檢者。

(四)脂肪組織、骨組織和鈣化組織。

(五)需要依據核分裂象計數判斷良、惡性的軟組織腫瘤。(六)主要根據腫瘤生物學行為特征而不能依據組織形態判斷良、惡性的腫瘤。(七)已知具有傳染性的標本（例如結核病、病毒性肝炎、艾滋病等）。

五、申請單和標本的驗收、編號和登記

手術中快速活體組織病理學檢查申請單和標本的驗收、編號和登記參照本章第一節中“一”至“三”項的有關規定。

六、標本的巨檢、取材和記錄

(一)病理科驗收快速活檢申請單和標本后，應參照本章第一節中“四”項的有關規定，立即進行標本的巨檢、取材和記錄。

(二)主持快速活檢的病理醫師應親自參與標本的巨檢和取材（或指導取 材）。

(三)通常選取具有代表性的病變組織1～2塊，需要時，增加取材塊數。

七、組織切片的制備(一)冷凍切片

1．完成冷凍HE染色切片制備的時間通常應為20～25分鐘。

2．恒冷箱切片機制片：至少應于切片前1小時開機預冷，冷室溫度一般為-15～-20℃。常規開展冷凍切片快速病理學診斷的病理科，恒冷箱切片機宜處于24小時恒溫待機狀態。

3．其他方法的冷凍切片制備參見第3章第一節。(二)快速石蠟切片

1．完成快速石蠟－HE染色切片的時間通常為30分鐘。2．快速石蠟切片的制備方法參見第3章第一節。

(三)制備好的冷凍／快速石蠟-HE染色切片，加貼標有本病理科病理號的 標簽后，立即交由主檢病理醫師進行診斷。

八、手術中快速活檢會診意見及其簽發

(一)有條件的病理科宜由兩位中／高級稱職的病理醫師共同簽署快速活檢的病理診斷意見。對于病變疑難、手術切除范圍廣泛和會嚴重致殘的手術中快速活檢，應由兩位高級稱職的病理醫師共同簽署會診意見。主檢病理醫師簽名的字跡應能辨認。

(二)快速活檢診斷意見一般在收到送檢標本后40分鐘內發出；同一時間段內相繼收到的多例患者標本或是同一例患者的多次標本，其發出報告的時間依次類推。對于疑難病變，可酌情延時報告。

(三)對于難以即時快速診斷的病變（例如病變不典型、交界性腫瘤病變或送檢組織不足以明確診斷等），主檢病理醫師應向手術醫師說明情況，恰如其分地簽發病理診斷意見或告知需要等待常規石蠟切片進一步明確病理診斷。

(四)主檢病理醫師簽署的快速活檢病理診斷意見，宜以文字形式報告（具體發出方式由各醫院自行決定）。快速活檢病理診斷意見報告書發出前應認真核對無誤。

九、冷凍切片后剩余組織的處理

(一)冷凍切片后剩余的冷凍組織（簡稱 “凍對”）和冷凍切片取材后剩余、未曾冷凍的組織（簡稱“凍剩”），均應保存，用以制備常規石蠟切片，以便與冷凍切片進行對照觀察。

（二）“凍對”／“凍剩”組織的蠟塊和切片需與同一病例手術后送檢的切除標本編為同一病理號，并作出綜合性診斷。

(三)當冷凍切片病理診斷意見與其“凍對”組織的常規石蠟-HE片的 病理診斷不一致時，該例的病理診斷一般應以石蠟-HE片診斷為準。

十、資料管理

手術中快速活體組織病理學檢查的資料必須妥善管理，有關規定參見本章第五節。

第三節 細胞病理學檢查常規

一、申請單和標本的驗收、編號和登記

(一)病理科應參照本章第一節（常規活體組織病理學檢查常規）中“一” 和“二”項的規定，進行細胞病理學檢查(細胞學檢查)申請單和標本的驗收、編號和登記。

(二)用于細胞學檢查的標本必須新鮮，取材后應盡快送至病理科(或細胞病理學室,下同)；病理科核驗檢材無誤后，應盡快進行涂片和染色。

(三)病理科驗收標本人員不得對申請單中由臨床醫師填寫的各項內容進行改動。

二、細胞涂片、組織印片和壓片的基本要求

(一)細胞涂片、組織印片和壓片（參見第3章第二節）。(二)腫物細針穿刺物涂片

1.應由掌握細針穿刺技術的注冊醫師或注冊助理醫師，按照細針穿刺技術操作常規，親自對確有適應癥且無禁忌癥的患者采取穿刺物。2.適應癥：通常為：

(1)淺表腫物：乳腺、甲狀腺、涎腺、淋巴結、前列腺、皮下軟組織和骨等。(2)胸腔腫物：肺、胸膜和縱隔等。

(3)腹腔腫物：肝、胰、腎、腎上腺、腹腔內、腹膜后和盆腔內等。(4)顱內腫物。

3．禁忌癥：患者有難以控制的咳嗽、肺動脈高壓癥、進行性肺氣腫、出血 性體質及“暈針史”等。

（三）對于核驗無誤的送檢標本，應立即依序進行：①涂片、印片或 壓片，②固定和③染色。

三、細胞病理學診斷報告書及其簽發

(一)細胞病理學診斷可為臨床醫師診斷疾病（尤其是腫瘤）提供重要參考 依據。

(二)細胞病理學診斷報告書必須由具有主檢資格的注冊病理醫師簽署后發出。主檢病理醫師簽名的字跡應能辨認。(三)細胞病理學診斷表述的基本類型

1.直接表述性診斷：適用于穿刺標本的細胞病理學診斷報告。根據形態學觀察的實際情況，對于某種疾病／病變做出肯定性（Ⅰ類）、不同程度意向性（Ⅱ類）細胞學診斷，或是提供形態描述性（Ⅲ類）細胞學診斷，或是告知無法做出（Ⅳ類）細胞學診斷。[參考本章第一節的八(一)項：“病理學診斷表述的基本類型”]

2.間接分級性診斷：用于查找惡性腫瘤細胞的診斷。Ⅰ級：未見惡性細胞 Ⅱ級：查見核異質細胞 Ⅱa：輕度核異質細胞 Ⅱb：重度核異質細胞 Ⅲ級：查見可疑惡性細胞 Ⅳ級：查見高度可疑惡性細胞 Ⅴ級：查見惡性細胞

(四)細胞病理學診斷的局限性（假陰性或假陽性診斷）

1.假陰性：是指在惡性腫瘤患者的有關標本中未能查見惡性細胞。假陰性

率一般為10%左右。因此，細胞病理學檢查的陰性結果并不能否定臨床醫師的惡性腫瘤診斷。

2.假陽性：是指在非惡性腫瘤患者的有關標本中查見了“惡性細胞”。假陽 性率通常≤1%。因此，細胞病理學診斷應密切結合患者的臨床資料，對于臨床上未考慮為惡性腫瘤患者的陽性細胞學診斷應持慎重態度。(五)細胞病理學診斷報告書的基本內容

1．患者的基本情況項目，包括病理號、姓名、性別、年齡、送檢醫院／科室（住院／門診）、住院號／門診號、送檢／收驗日期等。

2.細胞病理學診斷的表述（參見上項“細胞病理學診斷報告表述的基本類型”）。

3.必要時或條件允許時，可酌情就細胞病理學診斷及其相關問題附加：①

某些建議（例如進行其他有關檢查、再做活檢、病理科外病理學會診、密切隨查/隨訪等）；②注釋／討論。

4.經過本病理科或/和科外病理會診的病例，可將各方的細胞病理學診斷意見附于該例的細胞病理學診斷報告書中。(六)細胞病理學診斷報告書的書寫要求

1.參照本章第一節（“常規活體組織病理學檢查常規”）中“八

（二）”項的有關規定。

2.計算機圖文打印的細胞病理學診斷報告書提供的細胞學圖象應具有典型（代表）性，放大倍數適當。

(七)細胞病理學診斷報告書的發送

1.病理科自接受送檢標本至簽發細胞病理學診斷報告書的時間，一般情況 下為1～2個工作日。

2.因某些原因（包括特殊染色、免疫組化染色、疑難會診等）不能如期簽發細胞病理學診斷報告書時，應以口頭或書面告知有關臨床醫師或患方，說明遲發報告書的原因。

3．病理科應有專人發送細胞病理學診斷報告書。住院患者的細胞病理學診 斷報告書應發送至有關臨床科室；本院門診患者和外院患者的細胞病理學診斷報告書的發送方法由各醫院病理科自行制定。

4．細胞病理學診斷報告書的經收人員（包括患方人員）必須履行病理科規 定的簽收手續。

5．已由病理科發出的細胞病理學診斷報告書被遺失時，一般不予補發；必 要時，經病理科主任同意可以抄件形式補發。

四、資料管理

細胞病理學檢查的資料必須妥善管理，有關規定參見本章第五節。

五、會 診

細胞病理學會診是細胞病理學診斷過程的重要環節，有關規定參見本章第六節。

第四節 尸體剖檢（尸檢）的診斷常規

一、尸檢的受理

(一)必須遵照國家有關規定受理尸檢。

(二)受理尸檢范圍：①普通病理尸檢；②涉及醫、患爭議的尸檢（由衛生 行政主管部門指定的尸檢機構實施）。

(三)受理尸檢部門：具備獨立尸檢能力的①醫院病理科，②醫學院校的病理學教研室，③經醫政部門注冊的病理診斷中心。

(四)主持尸檢（主檢）人員：應是接受過尸檢訓練、具有中級以上專業職稱的病理學醫師或病理學教師。必要時，邀請法醫參與尸檢。

(五)申請或委托尸檢方：①有關醫院，②衛生行政部門，③司法機關，④死者的親屬或代理人，或⑤被受理尸檢方認可的其他申請或委托方。

(六)申請或委托尸檢方必須向受理尸檢方遞交：①死者的死亡證明，②有申請或委托方當事人簽名、負責人簽名和加蓋委托單位公章的尸檢申請書或委托書，③逐項認真填寫的尸檢申請書（包括死者的臨床資料要點和其他需要說明的情況）。

(七)死者親屬或代理人簽署說明尸檢有關事項的《死者親屬或代理人委托 尸檢知情同意書》（由受理尸檢方制定），確認以下事項： 1．同意有關受理尸檢機構對于死者進行尸檢。

2．授權主持尸檢人員根據實際需要確定尸檢的術式、范圍、臟器或組織的取留及其處理方式。

3．主持尸檢人員負責遺體尸檢后的體表切口縫合，不參與尸檢后遺體的其 他安置事項。

4．明確新生兒和圍生期胎兒尸檢后的尸體處理方式。

5．同意對尸檢過程進行必要的攝影、錄像，并確認是否同意教學示教。6．尸檢病理學診斷報告書可提供死者所患的主要疾病和死因；難以作出明 確結論時，可僅提交病變描述性尸檢報告。7．尸檢病理學診斷報告書發送給委托尸檢方。(八)下列情況的尸檢可不受理：

1．委托尸檢手續不完備者（包括未按規定交納尸檢費用者）；

2．拒簽《死者親屬或代理人委托尸檢知情同意書》者（包括對于尸檢的術 式、范圍、臟器或組織的取留及其處理方式等持有異義從而影響尸檢實施和尸檢結論形成者）；

3．委托尸檢方與受理尸檢方就涉及尸檢的某些重要問題未能達成協議者； 4.死者死亡超過48小時未經冷凍、或冷凍超過7日者；

5．疑因或確因烈性傳染病死亡的病例，尸檢方不具備相應尸檢設施條件者； 6．因其他情況不能受理者。

二、尸檢前的準備工作(一)尸檢室環境的準備。

(二)尸檢基本器材和工作服的準備。

(三)安排實施尸檢的專業人員和技術人員。(四)將擬行剖驗的尸體移送至尸檢室。

(五)主持尸檢人員確認尸檢手續完備（死亡證明、尸檢申請書或委托書、死者的臨床資料要點等），并請死者親屬或委托代理人確認尸體。

(六)主持尸檢人員認真閱讀、熟悉有關死者的臨床資料要點（必要時閱讀死者的生前病歷），了解申請或委托方對于尸檢的要求和尸檢時需要注意的問題。(七)進行尸檢編號并登錄于尸檢登記薄上。

(八)尸檢過程現場文字（或語音）記錄、攝影或錄象工作的準備。

三、尸檢的衛生管理

(一)制訂尸檢室衛生管理制度并認真實施。

(二)尸檢人員和尸檢室內其他人員必須認真做好個人和工作環境的衛生防護。(三)疑為或確診為烈性傳染病死者的尸檢，必須遵照傳染病尸檢的有關規 定進行操作。

(四)尸檢結束后衛生處置

1．認真清洗尸檢臺和尸檢室，并進行環境消毒。2．認真清洗尸檢工作服和器械等，并進行消毒。3．按照有關規定認真處理尸檢污物。4．尸檢人員在專用衛生間內淋浴。

5．進行上述各項衛生處置過程中必須嚴防污染有關人員和尸檢室內、外環境。

四、尸檢的技術操作

尸檢的技術操作規范參見第3章的第三節。

五、尸檢組織的切片制備

尸檢組織切片制備的技術操作規范參見第3章第一節。

六、尸檢組織的病理學相關技術檢查

尸檢組織病理學相關技術檢查的規范參見第4章。

七、尸檢組織切片的光學顯微鏡檢查和病理學診斷

(一)光鏡檢查切片，客觀地描述和記錄各系統、器官的病變要點；

(二)在綜合鏡檢和巨檢（肉眼檢查）所見的基礎上，結合死者生前的臨床資料等形成尸檢的病理診斷。

(三)有關鏡檢診斷的其他事項參見本章第一節的一

（六）項（“組織切片的光學顯微鏡檢查和病理學診斷”）。

八、尸檢檔案資料(一)基本內容

1.一般資料：包括死者的尸檢號、姓名、性別、年齡、籍貫、民族、出

生地、住址、死亡時間、尸檢時間和地點、相關醫院（臨床科室、住院號／門診號／急癥號）、委托或申請尸檢單位及主持尸檢人員和助手等。2.尸檢申請書或委托書。3.有關的臨床資料。

4.由死者親屬或代理人簽署的《死者親屬或代理人委托尸檢知情同意書》。5.尸檢所見（附有必要的圖像資料）。包括：(1)對有關尸體及其死亡征象的確認。(2)體表檢查所見。

(3)體腔（胸腔、心包腔、腹腔）檢查所見。

(4)臟器檢查所見：依序逐個描述各臟器的肉眼檢查和光學顯微鏡檢查所見。(5)特殊檢查結果。例如毒物、病原生物學等檢查（附有關檢查報告）。

6.病理學診斷和尸檢病理學診斷報告書副本（參見下項“尸檢病理學診斷報告書及其簽發”）。7.死亡原因。8.小結。

9．討論。包括：

(1)主要疾病及其診斷依據、發生和發展特點。

(2)主要疾病／病變之間、主要疾病與繼發／伴發疾病之間的相互關系。(3)從臨床與病理相結合的角度，參考有關文獻，進行討論。

10.其他資料。包括照片及其底片、幻燈片、圖表、臨床病理討論記錄、參考文獻和電子信息資料等。

(二)受理尸檢單位，應積極實施尸檢檔案資料的計算機管理。

九、尸檢病理學診斷報告書及其簽發

(一)尸檢病理學診斷報告書(簡稱尸檢報告書或尸檢報告)是關于尸檢的正式病理學報告。

(二)尸檢病理學診斷報告書的基本內容：①主要疾病（與死亡直接相關的疾病）；②繼發疾病（與主要疾病密切相關的疾病）；③伴發疾病（與主要疾病無密切關系的疾病）。可酌情進行死因分析、小結和討論。疾病診斷力求使用國際醫學規范術語，并按各疾病的致死重要性和因果關系排序。

(三)尸檢病理學診斷報告書必須由主檢人員簽名后發出。主檢人員簽名的字跡應能辨認。

(四)尸檢病理學診斷報告書應一式兩份（正本和副本），兩份報告書具有

同等效力。報告書的正本隨同其他尸檢資料一并歸檔，報告書的副本發給委托尸檢方。手書的尸檢病理學診斷報告書應二聯復寫，必須文字規范、字跡清楚，不得涂改。

(五)尸檢病理學診斷報告書通常在尸檢后45個工作日內發出。由于病變復 雜或其他原因不能按時發出尸檢病理學診斷報告書時，可酌情延遲發出并應向委托尸檢方說明遲發原因。

十、尸檢資料的管理

尸檢資料必須妥善管理，有關規定參見本章第五節。

第五節 病理學檢查資料的管理

一、概 述

(一)常規活檢、手術中快速活檢、細胞病理學檢查和尸檢等的文字資料（含電子信息資料）、非文字資料（組織的石蠟包埋塊、切片等）以及其他相關資料均為有價值的醫學資料，皆由受理病理學檢查的病理科按照本規范規定的期限妥為保存。病理科必須設立病理檔案資料室和制訂病理檔案資料管理制度（包括病理檢查資料的歸檔、借用和歸還手續等），并有專人管理。應積極實行病理學檢查資料的計算機管理。

(二)各種病理學檢查的文字資料應裝訂成冊保存。

(三)據以做出常規活檢、快速活檢、尸檢病理學診斷的原始組織學切片和

查見腫瘤細胞或可疑腫瘤細胞的玻片必須妥善保存。未查見惡性腫瘤細胞的玻片，于診斷報告書發出后保存2周。

二、患者查詢病理學檢查資料的期限(一)門診患者為送檢后15年。(二)住院患者為送檢后30年。

三、活檢、尸檢大體標本的保存期限(一)活檢：自簽發病理學診斷報告書之日起保存2～4周，具體保存期限由 各醫院自行規定。(二)尸檢

1.普通病理尸檢：自簽發病理學診斷報告書之日起保存3個月。2.涉及醫、患爭議的尸檢：按照尸檢前有關各方簽署的協議辦理。

四、病理學檢查資料的借用

(一)醫院必須制訂關于借用病理學檢查資料的辦法并嚴格實施。(二)關于患方借用病理組織學切片，應注意：

1．患方人員申請借用有關患者的活檢切片、尸檢切片時，應按照醫院制定 的有關規定辦理手續。

2．申請借用切片的患方人員必須：①出示本人身份證等有效證件并保留其復印件；②填寫借片申請單并簽名；③支付規定的借片押金（待歸還切片時退還）。

3． 病理科據以作出診斷的原始切片一般不外借，通常借出（或售出）相關 病例的復制切片。復制切片借出（或售出）前，應確認該切片的病變與原切片相同或基本相同。

4． 患方借出的切片應妥善保存，必須在規定的期限內歸還。患方借出的切 片若有破損、丟失等，應按規定支付賠償金，并承擔相應責任。

5．病理科因故不能向患方出借或出售有關切片時，由雙方協商解決病理學會診問題。病理科可酌情允許患方邀請外院的病理醫師前來病理科閱片；有條件的單位可酌情進行遠程病理會診。

(三)關于患方借用細胞病理學玻片

1．一個病例的同一次檢查有多張查見惡性腫瘤細胞的“陽性片”或“可疑 陽性片”時，可允許患方借用其中的一張。借用手續參見上項(二)。

2．一個病例僅有一張為查見惡性腫瘤細胞的“陽性片”或“可疑陽性片”時，該陽性片或可疑陽性片原則上不予外借。其會診問題由雙方協商解決。病理科可酌情允許患方邀請外院的病理醫師前來病理科閱片。(四)關于借用檢材組織的石蠟包埋塊

1.活檢和尸檢檢材組織的石蠟包埋塊（簡稱蠟塊）是無法復制的病理學檢 查資料，屬于診斷病理學的重要基礎檔案，原則上不外借。必要時，可由病理科向患方提供未經染色的切片（通稱白片）。

3． 患方外借病理切片會診時，受理會診的病理科若確實需要有關病例病理 檢材的蠟塊，可由有關病理科雙方協商解決。

第六節 病理學會診

一、具有一定規模的病理科應定期舉行科內病理會診或讀片討論會。

二、積極推動建立地域性病理會診中心。

三、加強臨床－病理會診。

四、應由具有高級職稱的病理醫師接受病理科內、外的病理學會診。

五、接受外院的病理會診時，由會診的病理醫師簽發《病理學會診咨詢意見書》，并在該《意見書》上寫明：“病理醫師個人會診咨詢意見，僅供原病理診斷的病理醫師參考”。由作出原病理診斷的病理醫師自行決定是否采納病理會診咨詢意見和采納的程度。做出原診斷的病理科應將《病理會診咨詢意見書》的原件或其復印件貼附于有關患者的病理檢查記錄單上，一并歸檔。

六、加做相關技術檢測方能作出診斷的會診病例，會診醫師應在《意見書》中予以說明，并向患方進行適當解釋。

七、對病理診斷時間較為長久病例的會診，應考慮到做出原診斷時期的診斷病理學理論、技術水平、相應病變／疾病的定性診斷標準和原診斷病理科當時的客觀條件。

八、有條件的病理科可開展遠程病理會診。

第七節 病理科的基本設施

一、病理科基本設施的指導原則

(一)保證病理科完成基本工作任務。(二)保護病理工作人員免受污染。(三)保護環境免受污染。

二、病理科的基本工作空間

(一)病理科的常規工作需要在下列的各自獨立的房間內進行：

1．收發室（檢材的接收、登記，病理診斷報告書的發放，病理資料查詢等）2．巨檢和取材室（檢材的肉眼檢查和切取組織塊，貯存取材后的剩余檢材）3．常規切片前的預處理室（組織塊的脫水、透明和浸蠟）4．制片室（石蠟切片／冷凍切片／細胞學涂片的制做和染色）5．病理組織學診斷室

6．細胞病理學診斷（酌情附設組織穿刺室）7．病理會診室 8．病理檔案資料室

9．大體標本制作室和陳列室

10．尸檢室及其配套空間（三級醫院建立，包括準備室、尸檢室、肉眼檢查和取材室、更衣／淋浴室、標本儲藏室等）11．儲藏室 12．淋浴室 13．辦公室

(二)較高技術層次的病理科還應設置： 1．特殊染色和免疫組織化學染色實驗室 2．細胞遺傳和分子病理學實驗室

3．其他特殊檢測實驗室（例如超薄切片制備、電鏡檢測、細胞培養、流式細胞術和其他新技術實驗室）

4．圖書／電子信息／學術活動室 5．進修病理醫師教室。

三、病理科常規活檢和快速活檢工作的基本設施(一)收發室 1． 辦公設施

2． 紫外線消毒柜（用于活檢申請單等消毒）3． 合于個人和環境防污染要求的上、下水系統 4． 其他相關設備

(二)病理標本巨檢和取材室

1．便于清洗、消毒的屋頂、室壁和地面裝修 2．室內紫外線消毒設備 3．室內高效通風設施

4．封閉式高效能通風柜廚(用于巨檢和取材，應便于清洗、消毒，并安裝足夠照明和紫外線消毒設備)5．合于個人和環境防污染要求的上、下水系統（包括獨立的污水排泄系統和污水處理池）

6．流水沖洗裝置

7．冷水和熱水供給系統

8．自動錄音設備（酌情安裝，用于記錄醫師巨檢標本時的語言描述）9．標本儲存柜（安裝排風設備）10．隔離服裝（消毒后使用）11．其他相關設備。

(三)常規切片的預處理室和常規/快速制片室

1．排放有毒物質的室內高效通風設施（用于組織塊和石蠟切片的 人工脫水流程）

2．符合個人和環境防污染要求的上、下水系統（包括獨立的污水排泄系統和污水處理池）

3．室內紫外線消毒設備

4．封閉式高效能通風柜廚（用于人工脫水流程）5．實驗臺

6．脫水設備：①人工脫水器具或/和②半自動或全封閉自動脫水機 7．組織塊石蠟包埋機 8．石蠟切片機

*9．恒溫冷凍切片機

*10．石蠟快速切片機 ［* 9和10：兩項皆配備或配備一項］ #11．一次性切片刀及其配套部件

#12．切片刀和磨刀機 ［# 11和12：兩項皆配備或配備一項］ 13．冰箱 14．恒溫箱 15．烤箱

16．有關試劑和試劑柜 17．天平

18．染色用器具

19．普通光學顯微鏡（用于染色質量控制）20．其他相關設備

(四)特殊染色和免疫組織化學染色實驗室

1．用于染色的實驗室環境設施和染色的常規設備［參見上文：(三)常規切片的預處理室和制片室］

2．微波爐或其他抗原修復設備 3．有關試劑和試劑柜

4．自動免疫組化染色儀（具有一定規模的病理科，酌情）5．其他相關設備

(五)病理組織學診斷室和病理會診室

1．雙筒顯微鏡（每名病理醫師配備一臺）

*2．雙頭和／或多頭顯微鏡（用于共覽會診和培訓示教）

*3．計算機和打印機（酌情連接局域網，用于病理學檢查資料的儲存和調閱）*4．顯微攝影設備，計算機圖像分析、電子圖像存儲和放映設備 [* 2～4：具有一定規模的病理科配置] 5．遠程會診系統（酌情）6．其他相關設備(六)病理檔案資料室

1．用于儲存切片、蠟塊和文字資料的柜具

2．計算機和打印機（酌情連接局域網，用于病理學檢查資料的儲存和調閱）3．秘書辦公設施（具有一定規模的病理科）4．其他相關設備

(七)必要的專業參考書和基本的專業期刊（具有一定規模的病理科應設立 圖書資料室）

(八)病理大體標本制作室和陳列室 1．制作病理大體標本的工具

2．用于陳列病理大體標本的展覽柜（配備照明裝置）3．其他相關設備

(九)辦公室：必要的辦公設備(十)儲藏室：必要設施(十一)淋浴室：必備設施

四、細胞病理學檢查工作的基本設施(一)腫物穿刺取材室：

1．便于清洗、消毒的屋頂、室壁和地面裝修 2．室內紫外線消毒設備

3．用于實施穿刺術的檢查床、椅 4．穿刺用器械和器械柜

5．穿刺用、急救用藥物和藥品柜 6．其他相關設備

(二)細胞學涂片制片室：

1．用于染色的實驗室環境設施和常規設備［參見本節的三(三)項：“常規切片的預處理室和常規／快速制片室”］)2．可調速離心機

3．自動細胞病理學檢查系統（具有一定規模的病理科，酌情）4．其他相關設備

(三)細胞病理學診斷室：參見本節的三(五)項（病理組織學診斷室和病理會診室）。

(四)獨立設置（不隸屬于病理科）的細胞病理學科室：需要其他必要空間的基本設備（參見本節的 “

三、病理科常規和快速活檢工作的基本設備”）。

五、尸檢工作的基本設施(一)尸檢準備室

1． 尸檢專用器械和柜具 2． 參與尸檢人員用隔離用衣物和消毒器物 3． 辦公設施 4． 消毒設施

5． 其他相關設備(二)普通尸檢室

1．便于清洗、消毒的屋頂、室壁和地面裝修 2．室內紫外線消毒設備 3．室內高效通風設施

4．設計合理、適用的尸檢臺［具有合于個人和環境防污染要求的上、下水系統（包括獨立的污水排泄系統和污水處理池），便于清洗、消毒。］ 5．適宜的照明裝置 6．冷水和熱水供給系統

7．階梯式看臺（示教用）8．其他相關設備

(三)傳染病用尸檢室：嚴格按照關于傳染病管理法規的要求建設。(四)更衣／淋浴室：必備設施

(五)病理標本巨檢和取材室［參見本節的三(二)項：“病理標本巨檢和取材室”］

(六)常規切片室：隸屬于病理科的尸檢室可不另設（參見本節的三(三)項：“常規切片的預處理室和常規／快速制片室”）(七)標本儲藏室：必要設施

六、病理學相關技術實驗室的基本設施

應用特殊染色和組織化學、免疫組織化學、塑料包埋組織切片制備、電子顯微鏡超微病理診斷檢材制備、圖像分析、流式細胞分析（FCM）、聚合酶鏈反應（PCR）、細胞和分子細胞遺傳學、病理學攝影技術和其他新開發、引進的病理學相關技術的病理科，應個根據有關技術要求，建立具有必備基本設施的實驗室。

《臨床技術操作規范?病理學分冊》/ 第三章 病理學基本技術規范

第一節 病理組織學診斷檢材的制備技術

一、組織的固定

㈠凡需要進行病理組織學檢查的標本（器官或組織），于離體（活體或尸體）后，應盡快置放（浸泡）于裝有足夠量固定液的容器中固定。固定液量應為被固定標本體積的5~10倍。置放標本的容器大小視標本和固定液的體積而定，應適當大一些。臨床科室切取的標本置放于容器中固定后，應盡快送交病理科繼續固定。未能及時、充分固定的干涸或腐敗標本不能再進行固定和用于制做切片。

㈡常規固定液為4%中性甲醛（10%中性福爾馬林），應預先多量配制貯存，以備隨時使用。小標本的固定時間為4~6小時，大標本為18~24小時或更久。㈢根據病理學特殊檢查（特殊染色和組織化學染色、免疫組織化學染色和原位核酸分子雜交染色、電鏡觀察等）的需要，應選用其他適宜的固定液進行固定［參見后述的“㈦固定液的常用種類和制備”］。㈣器官、組織固定的基本方法 ［另參見本章第四節（病理標本的肉眼檢查和組織學切片取材技術）］

1．食管、胃、腸、膽囊、膀胱等空腔器官：依規范方法剪開后，按其自然狀態平鋪于硬紙板上（重點暴露黏膜面或內表面的病變處），并用大頭針將標本邊緣處固定于紙板上，然后放入4%中性甲醛中固定（黏膜面或內表面朝向容器的液面，并覆蓋薄層脫脂棉）。

2．肝、脾：由器官背面，沿其長軸每間隔1.5~2.0cm縱向平行剖開，切成數片。將每片肝或脾輕輕地平放于裝有4%中性甲醛的容器中，容器底面襯以脫脂棉。應避免標本彎曲和相互間的疊壓。

3．肺葉：放入固定液中的肺葉漂浮于液面，需在肺表面覆蓋薄層脫脂棉。必要時從支氣管注入適量4%中性甲醛。

4．腎：沿腎外緣中線朝腎門方向作一水平切面（深達于腎盞），再行固定。5．淋巴結：先用4%中性甲醛固定1小時后，再沿其長軸切成數片（厚2 ~3mm），繼續固定。

6．骨組織：先鋸成小片（若是長骨應作橫向鋸片），在4%中性甲醛中固定24小時后，再進行脫鈣。

7．微小組織或液體沉淀物：先用拭紙或濾紙妥為包裹（需用大頭針扎牢），然后放入專用小盒內進行中性4%甲醛固定，以防檢材遺失。

8．凡進入固定程序的標本必須連帶其正確無誤的病理檢驗號（病理號）。㈤多數固定液對人體有害，需要防護，必須在封閉的通風條件下進行操作。㈥組織塊的切取和固定：①由較大標本切取用于制作切片的組織塊（取材）時，應與標本的斷面平行，組織塊厚度一般為0.3 cm(不應>0.5cm)，面積一般在1~1.5×1~1.5以內。②切取組織塊的形狀，在充分包括肉眼病變的前提下盡量規則些（例如方形、矩形、三角形等）；由一個標本切取的多塊組織的形狀有所不同，便于蠟塊與其相應切片的核對。③固定組織塊的固定液量，一般應為組織塊總體積的5~10倍以上。④室內常溫（25℃左右）下的固定時間為3~24小時；低溫（4℃）下的固定時間應延長。⑤固定組織塊的容器要大一些。⑥組織塊固定期間需要間斷地輕搖或攪動固定液以利于固定液的滲入。㈦常用固定液

1．4%中性甲醛（10%中性福爾馬林）固定液

甲醛（40%）100 ml 無水磷酸氫二鈉 6.5g 磷酸二氫鈉 4.0g 蒸餾水 900ml 2．乙醇－甲醛（酒精－福爾馬林，AF）固定液 甲醛（40%）100ml 95%乙醇 900ml ［說明］一般組織塊經乙醇－甲醛固定1～2小時后，即可移入95%乙醇內脫水。

3．Carnoy固定液 無水乙醇 60ml 氯仿 30ml 冰醋酸 10ml ［說明］組織化學染色的常用固定液，組織經Carnoy液固定1～2小時后，即可移入無水乙醇中脫水。4．Zenker固定液 升汞 5.0g 重鉻酸鉀 2.5g 硫酸鈉 1.0g 蒸餾水（加至）100ml ［說明］配制本液時，先將升汞溶于蒸餾水中、加溫至40～50℃溶解后，再加入重鉻酸鉀，最后加入硫酸鈉，貯存待用。使用前加入5ml冰醋酸，混合。組織塊需固定12~24小時。切片染色前，需進行脫汞沉淀處理。5．Bouin固定液

飽和苦味酸水溶液（約1.22%）75ml 甲醛（40%）25ml 冰醋酸 5ml ［說明］本液臨用時配制。組織塊置于Bouin液固定12～24小時即可（小塊組織只需固定數小時）。經Bouin液固定的組織被苦味酸染成黃色，可用水洗滌12小時后進入乙醇脫水（兼脫色）。不必將組織中的黃色除凈（殘存于組織中的苦味酸無礙染色）

6．過碘酸－賴氨酸－多聚甲醛固定液（PLP）A液：賴氨酸 1.827g 蒸餾水 50ml 0.1mol/L磷酸鹽緩沖液(pH7.4)50ml B液：8%多聚甲醛水溶液 100ml ［說明］本液臨用時配制：取A液3份、B液1份，混合后，加入過碘酸鈉，使液體終濃度為2%。組織塊在4℃下固定36~54小時。本液對細胞結構和抗原性保存較好。

7．B5（醋酸鈉－升汞－甲醛）固定液 無水醋酸鈉 1.25g 升汞 6.0g 蒸餾水 90ml ［說明］將以上物質混合、溶解，使用前加入甲醛10ml。本液多用于固定淋巴組織。染色前應進行脫汞沉淀處理。如不加甲醛稱為B4固定液（蒸餾水為100 ml）。

8．丙酮固定液

冷丙酮（4℃）固定液用于酶組織化學染色。細胞標本的免疫組化染色也常用冷丙酮固定10分鐘。

二、常規石蠟包埋組織切片（常規切片）的制備

㈠組織塊依序進行：①水洗，②脫水，③透明，④浸蠟，⑤包埋和⑥切片。㈡組織切片制備及其HE染色過程中使用的乙醇、丙酮、二甲苯、石蠟等為 易燃、有毒物，必須專人管理，2m以內不得有明火，局部環境應有良好的通風和消防設施。

㈢常規切片的手工操作（步驟次序和各步驟的持續時間）1．水洗：用流水沖洗已經固定的組織塊30min。2．脫水（常溫下）

（1）乙醇－甲醛（AF）液固定 60~120min（2）80%乙醇 60~120min（3）95%乙醇Ⅰ 60~120min（4）95%乙醇Ⅱ 60~120min（5）無水乙醇Ⅰ 60~120min（6）無水乙醇Ⅱ 60~120min（7）無水乙醇Ⅲ 60min ［注意事項］①未經充分固定的組織不得進入脫水程序。②用于脫水的試劑容積應為組織塊總體積的5～10倍以上。③自低濃度乙醇向高濃度乙醇逐級移進脫水。④脫水試劑應及時過濾、更換（500ml乙醇可用于500個組織塊脫水；加入硫酸銅的無水乙醇變藍時，提示需要更換）。⑤較大組織塊的脫水時間長于較小者，應將兩者分開進行脫水。⑥組織置于無水乙醇內的時間不宜過長（以免硬化）。⑦丙酮脫水性能強，會使組織塊過縮、硬脆，不宜用以替代無水乙醇。3．透明

（1）二甲苯Ⅰ 20min（2）二甲苯Ⅱ 20min（3）二甲苯Ⅲ 20min ［注意事項］①二甲苯的容積應為組織塊總體積的5～10倍以上。②組織塊在二甲苯中透明的時間不宜過長（以防組織硬、脆），并依不同種類組織及其大小而異；組織呈現棕黃或暗紅色透明即可。③二甲苯應及時過濾、更換。④組織經二甲苯適度處理后不顯透明時，常提示該組織的固定或脫水不充分，應查找原因并妥善處理。4．浸蠟

（1）石蠟Ⅰ（45~50℃）60min（2）石蠟Ⅱ（56~58℃）60min（3）石蠟Ⅲ（56~58℃）60min ［注意事項］①熔化石蠟必須有專人負責，必須在熔蠟箱內或水浴中（70 ℃）進行，不得用明火加溫。②熔蠟的容積應為組織塊總體積的5～10倍以上。③組織塊經二甲苯適度透明后方可轉入浸蠟過程，應盡可能減少將透明后組織塊表面的二甲苯帶入熔蠟中。④浸蠟時間適宜，過短時浸蠟不充分（組織過軟），過長時組織硬脆。⑤熔蠟應及時過濾、更換。5．包埋

（1）先將熔化的石蠟傾入包埋模具中，再用加熱的彎曲鈍頭鑷子輕輕夾取已經過浸蠟的組織塊，使組織塊的最大面或被特別指定處的組織面向下埋入熔蠟中；應將組織塊平正地置放于包埋模具底面的中央處；包埋于同一蠟塊內的多塊細小組織應彼此靠近并位于同一平面上；腔壁、皮膚和黏膜組織必須垂直包埋（立埋）。

（2）將與組織塊相關的病理號小條置入包埋模具內熔蠟的一側。

（3）待包埋模具內的熔蠟表面凝固后，即將模具移入冷水中加速凝固。

（4）從包埋模具中取出凝固的包埋蠟塊（簡稱蠟快），用刀片去除組織塊周圍的過多石蠟（組織塊周圍保留1~2mm石蠟為宜）。將包埋蠟塊修整成為規則的正方形或長方形。

（5）將病理號小條牢固地烙貼在蠟塊一側（編號應清晰可見）。（6）把修整好的蠟塊烙貼在支持器上，以備切片。（7）使用包埋機的方法按有關廠商的說明書操作。（8）注意事項

①應將組織塊嚴格分件包埋。包埋時一定要首先認真核對組織塊的病理號（包括亞號）、塊數和取材醫師對包埋面的要求，準確地包入相應的病理號小條。發生包埋差錯時，必須立即與取材醫師和病理科當班負責人取得聯系，及時處置。

②必須嚴防各種異物污染，勿將無關組織（包括縫線、紙屑或其他異物（尤其是硬質異物）埋入蠟塊內。

③包埋過程要操作迅速，以免組織塊尚未埋妥前熔蠟凝固。

④包埋用的熔蠟應純凈，熔點適宜。浸蠟Ⅰ用軟蠟（熔點為45~50℃），浸蠟Ⅱ、Ⅲ和包埋用蠟均用硬蠟（熔點為56~58℃）。⑤包埋用熔蠟使用前應將先靜置沉淀、過濾。

⑥熔蠟時不得使用明火，以防燃燒。包埋用熔蠟的溫度應<65℃；包埋用的鑷子不可加溫過高，以免燙傷組織。6．切片

（1）切片刀或一次性切片刀片必須鋒利。使用切片刀時，必須精心磨備（在低倍顯微鏡下確認刀刃無缺口）；使用一次性切片刀片時，應及時更新。（2）載玻片必須潔凈、光亮。

（3）將切片刀或刀片安裝在持刀座上（以15°為宜）。

（4）將蠟塊固定于持支持器上，并調整蠟塊和刀刃至適當位置（刀刃與蠟塊表面呈5°夾角）。

（5）細心移動刀座或蠟塊支持器，使蠟塊與刀刃接觸，旋緊刀座和蠟塊支持器。

（6）修塊（粗切）：用右手勻速旋轉切片機輪，修切蠟塊表面至包埋其中的組織塊完整地全部切到。修塊粗切片的厚度為15～20μm。［注意：對于醫囑再次深切片（特別是在原切片中發現了有意義病變而進行的深切片），應盡量少修塊，以盡量好地獲得有關病變的連續性。］

（7）調節切片厚度調節器（一般為4~6μm），進行切片，切出的蠟片應連續成帶，完整無缺，厚度適宜（3～5μm）、均勻，無刀痕、顫痕、皺折、開裂、缺損、松解等。

（8）以專用小鑷子輕輕夾取完整、無刀痕、厚薄均勻的蠟片，放入伸展器的溫水中（45℃左右），使切片全面展開。［注意：必須水溫適宜、潔凈（尤其是水面）；每切完一個蠟塊后，必須認真清理水面，不得遺留其它病例的組織碎片，以免污染。］

（9）將蠟片附貼于涂有蛋白甘油或經3－氨丙基－三乙氧基硅烷(3-aminopropyltriethoxy silane，APES)處理過的載玻片上（HE染色時酌情使用，可省略，必要時）。蠟片應置放在載玻片右（或左）2/3處的中央，留出載玻片左（或右）1/3的位置用于貼附標簽。蠟片與載玻片之間無氣泡。

（10）必須立即在置放了蠟片的載玻片一端（待貼標簽的一端），用優質記號筆或刻號筆準確、清楚標記其相應的病理號（包括亞號）。［注意：必須確保載玻片上的病理號與相關組織石蠟包埋塊的病理號完全一致，不得錯寫或漏寫病理號。］

（11）將置放了蠟片的載玻片呈45℃角斜置片刻；待載玻片上的水分流下 后，將其置于烤箱中烘烤（60～62℃，30～60min），然后即可進行染色。（12）注意事項 ①組織塊固定、脫水、透明和浸蠟的質量直接影響切片制備。切片過程中遇到的困難首先應注意從切片前的上述各環節中尋找原因。

②切片機的質量是制備優質切片的重要前提。要使用質量好的切片機，規范地切片，精心維護切片機。

③經由內窺鏡、穿刺等獲取的細小組織，應間斷性連續切片多面（一般至少制備6張蠟片，必要時制備更多張）。需作特殊染色、免疫組化染色等的病例，可預制蠟片備用。

④切片人員應細心操作，防范被切片刀具割傷。

㈣常規切片的自動組織處理機操作（步驟次序和各步驟的持續時間，總計需要14小時）

1．乙醇－甲醛（AF）固定液 2×60min 2．95%乙醇Ⅰ 2×60min 3．95%乙醇Ⅱ 2×60min 4．無水乙醇Ⅰ 60min 5．無水乙醇Ⅱ 60min 6．二甲苯Ⅰ 30min 7．二甲苯Ⅱ 30min 8．石蠟Ⅰ 30min 9．石蠟Ⅱ 60min 10．石蠟Ⅲ 90min 11．包埋

（1）手工常規包埋：參見上述的“㈠手工操作”項。（2）用組織包埋機時，按有關廠商說明書的規定操作。13．切片：參見上述的“㈠手工操作”項。14．注意事項

（1）必須按有關說明書的規定，使用和維護自動組織處理機、包埋機、磨刀機、封蓋玻片機等儀器等。

（2）要嚴防因停電、機械故障等造成的組織塊損壞。一旦發生此類事故，必須及時向科主任報告，盡快采取應急措施妥善處置。

（3）使用自動組織處理機時：①合理設定的運行時間（充分利用夜間）。②固定、脫水的環境溫度不得>30℃。③乙醇、二甲苯和熔蠟的容積，要大于組織塊總體積的5～10倍以上，并應經常過濾，保持清潔；應經常檢查試劑的濃度，及時更新。④對于多量組織塊，可按其大小分批進行處理；小塊組織可適當縮短處理時間。

三、快速石蠟包埋組織切片的制備 ㈠煮沸固定切片法

1．固定：切取大小適宜（厚度<2mm）的組織塊，盡快置入裝有5~8ml 10%中性4％甲醛的試管中煮沸1min，然后已入冷水中。2．脫水

（1）將已經煮沸固定的組織塊取出，用刀片將其厚度修切至<1.5mm，隨 即置入盛有5~8 ml丙酮的試管中，煮沸2 min，然后將丙酮傾棄。

（2）再向該試管中重新加入5~8 ml丙酮并煮沸2min。如此重復3~4次。3．浸蠟：將已經丙酮脫水的組織塊由試管中取出，用吸水紙去除其表面液體，隨即置入75~80℃熔化的石蠟中，待組織塊下沉、不再出現氣泡時（約需30s），即可包埋。4．包埋、切片和染色。

（1）用熱鑷子將預制的蠟塊表面熔化，埋入已經浸蠟的組織塊。

（2）待埋入組織塊的蠟塊表面凝固后，即用載玻片輕壓蠟塊表面片刻，使 蠟塊表面平整。

（3）將蠟塊置入冰水中，使其變硬。

（4）迅速切片，裱片后用吸水紙去除載玻片上的水分。（5）將載玻片用火焰烘干（勿距火焰太近）。（6）迅速進行HE染色。5．注意事項

（1）為了盡量縮短制片時間，必須預先作好有關準備工作，備齊取材用具、試管、固定液、丙酮、酒精燈、火柴（或其他引火器）、包埋用蠟塊、載玻片和染色試劑等，放在固定部位待用。

（2）全部制片過程一般在20~25min內完成。

（3）制片后剩余組織塊應作常規石蠟包埋切片染色，進一步診斷。（4）含脂肪較多的組織，須經多次丙酮處理。

（5）用于組織固定、脫水、透明的試劑和浸蠟用的石蠟應及時過濾、更換。（6）丙酮、乙醇、二甲苯等為易燃物，進行上述各項流程時，2m距離內不得存在明火。加溫脫水和浸蠟過程必須應用隔水溫箱，不得使用干烤箱操作。㈡超聲波快速處理儀石蠟切片法（參照有關廠商的說明書操作）。

四、冷凍組織切片的制備

㈠應用恒冷箱切片機制備切片：是目前最適用方法。恒冷箱切片機種類較多，應嚴格按有關廠商的說明書操作。用于切片的標本必須未曾固定。㈡應用開放式冷凍切片機制備切片 1．二氧化碳制冷切片

（1）將組織塊放在冷凍臺上，滴加OCT或羥甲基纖維素液于組織塊周圍（將組織塊包埋），使固定在切片機上的切片刀接近組織塊表面。

（2）間斷開放液態二氧化碳桶的開關，噴凍組織塊和切片刀，使組織塊凍結和切片刀制冷。

（3）迅速移動切片刀進行切片：先將組織塊修平，然后調節厚度至8~12μm處進行切片。

（4）用毛筆將切片展開，貼附于載玻片上，稍干后，置于冷凍切片固定液中固定1min，隨即進行HE染色。也可用毛筆將切片托入水中，再用玻璃彎針將切片移至染色皿中進行染色。

（5）組織塊也可先在4%中性甲醛中煮沸固定1min，水洗后再行冷凍切片。2．半導體致冷切片

（1）切片刀與持刀器之間要間隔一層云母片或硬紙片。將冷刀致冷器粘在刀面上。

（2）將組織冷凍臺安裝在半導體切片機上。

（3）將冷凍臺和切片刀致冷器上的導線連接在控制臺直流電源上（注意：正負電極不可接反）。

（4）連接致冷器的冷卻水管并開始放水，然后開啟電源；冷卻水管中的水流量不宜過大，在使用過程不得斷水。

（5）調整冷凍溫度調節器，至切片刀和冷凍臺呈現霜凍。（6）將新鮮組織塊或已固定的組織放在冷凍臺中央，滴加水或OCT，或用水調成糊狀的甲基纖維素于組織塊周圍（將組織塊包埋）。（7）待組織塊冷凍適當后，進行切片。

（8）對于未經固定的新鮮組織，用毛筆將制作滿意的切片展平，立即裱貼于蓋玻片或載玻片上，待冷凍的切片剛要融化時，立即將其置于冷凍切片固定液中固定1min。對于已經固定的組織塊，可用毛筆將制作滿意的切片托入水中，再用玻璃彎針將切片移至染色皿中進行染色。

（9）切片完畢后，先關閉電源，再關閉冷卻水，待冰霜融化后擦干機器，加罩。

3．甲醇致冷切片（按有關廠商的儀器說明書操作）。4．氯乙烷致冷切片

（1）將新鮮的或已經固定的組織塊置于支持器中央，加少許水或OCT。

（2）連續噴射氯乙烷于組織塊上，待組織塊凍結后，改為間歇噴射，使凍結適度，立即切片。使用氯乙烷時應注意防火、防爆。

（3）進行組織切片的裱貼、固定和染色（與上述方法相同）。㈢注意事項

1．制作冷凍切片所需的試劑和設備等應處于隨時可供使用狀態。

2．切取的組織塊大小適宜（厚度<2mm），并盡快置于冷凍組織切片機上制備切片。

3．調節冷凍程度，試切合適時便迅速切片。冷凍不足無法切片，冷凍過度 切片易碎。

4．冷凍切片固定液（1）乙醚-乙醇液

無水乙醚 1份 95%乙醇 1份

（2）乙醇-冰醋酸液

95%乙醇 100ml 冰醋酸 3～5滴

五、脫鈣方法

骨和其他鈣化組織，通常需要脫去鈣鹽后進行切片。骨組織脫鈣前需先行固定。

㈠常規脫鈣法：

1． 將骨組織鋸成薄片（約1×1×0.3cm）。2． 在AF中或4％中性甲醛中固定6～12h。

3． 將骨片置于5%硝酸（急需時可置于37℃溫箱）中脫鈣，至用針輕刺可 入時為止，約需12~24h（小塊骨組織脫鈣僅需2~3h），其間可更新脫鈣液2～3次。

4． 流水沖洗1~2h。

5． 移入5%甲明礬液，2~4h。6． 流水沖洗2~3h。7． 按常規脫水。8．石蠟包埋。㈡電解脫鈣法：

將骨片置于裝有8%硝酸和10%甲酸混合液的電泳槽（有蓋的方形玻璃標本 缸或燒杯）內的陽極處，6V直流電源下持續電解30min~3h，至用針輕刺可入時為止。

㈢骨髓組織脫鈣：可浸泡于苦味酸乙醇飽和液（占85%）、甲醛（占10%）和冰醋酸（占5%）的混合液中（同時進行固定和脫鈣）。㈣注意事項

1．骨片等脫鈣組織的厚度適宜。

2．脫鈣組織與脫鈣液的體積比>1:30。

3．脫鈣過程中應不時搖動，多次更換脫鈣液。4．脫鈣時間不可過長。

5．微波處理可加速脫鈣過程。

6．脫鈣后的組織必須用流水充分沖洗。

7．用于包埋的石蠟硬度適中（不要過軟或過硬）。

六、蘇木素－伊紅（HE）染色

HE染色是應用最廣泛的組織病理學常規染色技術。㈠染色程序

1．石蠟切片HE染色（常規HE染色）

（1）二甲苯Ⅰ 5～10min（2）二甲苯Ⅱ 5～10min（3）無水乙醇Ⅰ 1～3min（4）無水乙醇Ⅱ 1～3min（5）95%乙醇Ⅰ 1～3min（6）95%乙醇Ⅱ 1～3min（7）80%乙醇 1min（8）蒸餾水 1min（9）蘇木素液染色 5～10min（10）流水洗去蘇木素液 1min（11）1%鹽酸-乙醇 1～3s（12）稍水洗 1～2s（13）返藍（用溫水或1%氨水等）5～10s（14）流水沖洗 1～2min（15）蒸餾水洗 1～2min（16）0.5%伊紅液染色 1～3min（17）蒸餾水稍洗 1～2s（18）80%乙醇 1～2s（19）95%乙醇Ⅰ 2～3min（20）95%乙醇Ⅱ 2～3min（21）無水乙醇Ⅰ 3～5min（22）無水乙醇Ⅱ 3～5min（23）石炭酸-二甲苯 3～5min（24）二甲苯Ⅰ 3～5min（25）二甲苯Ⅱ 3～5min（26）二甲苯Ⅲ 3～5min（27）中性樹膠封固

注：①（12）和（13）項可省去，但（14）的沖水時間需延長至10～15min（細胞核顯示更清晰）。

②（23）項可用無水乙醇代替；北方地區可省略。2．冰凍切片HE染色

（1）冰凍切片固定 10～30s（2）稍水洗 1～2s（3）蘇木素液染色（60℃）30～60s（4）流水洗去蘇木素液 5～10s（5）1%鹽酸-乙醇 1～3s（6）稍水洗 1～2min（7）返藍（用溫水或1%氨水等）5～10s（8）流水沖洗 15～30s（9）0.5%伊紅液染色 1～2min（10）蒸餾水稍洗 1～2min（11）80%乙醇 1～2min（12）95%乙醇 1～2min（13）無水乙醇Ⅰ 1～2min（14）無水乙醇Ⅱ 1～2min（15）石炭酸-二甲苯 2～3min（16）二甲苯Ⅰ 2～3min（17）二甲苯Ⅱ 2～3min（18）中性樹膠封固

注：①（7）和（8）項可省去，但（9）的沖水時間需延長至10～15min（細胞核顯示更清晰）。

②（15）項可用無水乙醇代替；北方地區可省略。

㈡染色結果：細胞核呈藍色，細胞漿、肌纖維、膠原纖維和紅細胞呈不同程度的紅色。鈣鹽和細菌可呈藍色或紫藍色。㈢染色注意事項

1．切片染色前，應徹底脫蠟。

2．用含有升汞液體固定的組織，其切片染色前應先脫去汞鹽：（1）石蠟切片脫蠟至水洗

（2）Lugol液 20min（3）流水沖洗 5min（4）95%乙醇 10min（5）水洗 1min（6）5%次亞硫酸鈉水溶液 5min（7）流水沖洗 5min（8）顯微鏡觀察除汞滿意后，轉入HE染色 3．脫除福爾馬林色素（必要時）：（1）石蠟切片脫蠟至水洗

（2）1%NaOH(1ml)與80%乙醇（99ml）混合液 10min（3）流水沖洗 5min（4）轉入HE染色

4．嚴格執行HE染色流程，用顯微鏡控制細胞核的蘇木素染色質量。HE染片應著色鮮艷，紅、藍分明，對比清晰。5．載玻片自二甲苯中取出后，應立即用潔凈、光亮的蓋玻片和稠度適宜的中性樹膠濕封載玻片。封蓋處內無氣泡，外無溢膠。封片時必須進行操作人員和局部環境的二甲苯污染防護。不應將組織切片烤干或風干后再行封片。

6．必須在載玻片的一端牢貼標簽。標簽上應印有病理科所在的醫院名稱。標簽上應清楚顯示有關的病理號及其亞號；標簽上的病理號應準確無誤，無涂改。7．制片完成后，技術人員應對切片與其相應的病理學檢查記錄單或取材工作記錄單認真進行核對；確認無誤后，將制備好的切片連同相關的活檢申請單/活檢記錄單以及取材工作單等一并移交給有關的病理醫師；交接雙方經核對無誤后，辦理移交簽字手續。

8．石蠟切片-HE染色的優良率（甲、乙級切片所占的比率）應≥85%。石蠟切片-HE染色質量的基本標準列于附表。

9．制片工作一般應在取材后2個工作日內完成（不含進行脫鈣、脫脂等需要特殊處理的標本）。

10．制片過程出現意外情況時，技術室人員應及時向病理醫師和科主任報告，設法予以補救。

附表 常規石蠟包埋-HE染色切片質量的基本標準

優 質 標 準

滿 分 質 量 缺 陷 減 分

⒈組織切面完整，①組織稍不完整：減1～3分 ②不完整：減4～10分

內鏡咬檢、穿刺標本切面數 10 ③未達到規定面數：減5分

⒉切片薄(3～5μm)，厚薄均勻 10 ①切片厚(細胞重疊)，影響診斷：減6～10分

②厚薄不均勻：減3～5分

⒊切片無刀痕、裂隙、顫痕 10 ①有刀痕、裂隙、顫痕，尚不影響診斷：減2分

②有刀痕、裂隙、顫痕，影響診斷：減5分

⒋切片平坦，無皺褶、折疊 10 ①有皺褶或折疊，尚不影響診斷：各減2分

②有皺褶折或折疊，影響診斷：各減5分

⒌切片無污染 10 有污染：減10分

⒍無氣泡（切片與載玻片間/ 10 ①有氣泡：減3分 蓋片與切片、載玻片間），②膠液外溢：減3分

蓋片周圍無膠液外溢

⒎透明度好 10 ①透明度差：減1～3分

②組織結構模糊：減5～7分

⒏細胞核與細胞漿染色對比清晰 10 ①細胞核著色灰淡或過藍：減5分

②紅(細胞漿)與藍(細胞核)對比不清晰：減5分

⒐切片無松散，裱貼位置適當 10 ①切片松散：減5分

②切片裱貼位置不當：減5分

⒑切片整潔，①切片不整潔：減3分

標簽端正粘牢，編號清晰 10 ②標簽粘貼不牢：減3分

③編號不清晰：減4分

合 計 100

切片質量分級標準： ①甲級片： ≥90分（優）

②乙級片：75～89分（良）

③丙級片：60～74分（基本合格）

④丁級片： ≤59分（不合格）

㈣HE染色試劑的配制 1．蘇木素染液

（1）Harri蘇木素染液

蘇木素 1g 無水乙醇 10ml 硫酸鋁鉀 20g 蒸餾水 200ml 氧化汞 0.5g 冰醋酸 8ml 先用無水乙醇溶解蘇木素，用蒸餾水加熱溶解硫酸鋁鉀；然后將該兩液合并煮沸，加入氧化汞，繼續加熱和攪拌溶液至深紫色，隨即用冰水冷卻，恢復至室溫后過濾備用。使用前加入冰醋酸并混勻、過濾。

（2）Gill改良蘇木素液

蘇木素 2g 無水乙醇 250ml 硫酸鋁鉀 17g 蒸餾水 750ml 碘酸鈉 0.2g 冰醋酸 20ml 先用無水乙醇溶解蘇木素，用蒸餾水溶解硫酸鋁鉀；然后將該兩液混合，再依次加入碘酸鈉和冰醋酸。使用前過濾。

（3）Mayer改良蘇木素液

A液：蘇木素 2g 無水乙醇 40ml B液：硫酸鋁鉀 100g 蒸餾水 600ml 將蘇木素溶于無水乙醇中（A液）；稍加熱，使硫酸鋁鉀溶于蒸餾水中（B液）。將A液與B液混合后煮沸2min，再用蒸餾水補足至600 ml，加入400mg碘化鈉充分混勻。染液呈紫紅色。2.鹽酸－乙醇分化液

濃鹽酸 1 ml 70%乙醇 99 ml 3．伊紅液

（1）0.25～0.5%伊紅Y水溶液

伊紅Y 0.25～0.5 g 蒸餾水 100 ml 冰醋酸 1滴

（2）0.5%伊紅Y-氯化鈣水溶液

伊紅Y 0.5 g 蒸餾水 100 ml 無水氯化鈣 0.5 g（3）0.25～0.5%伊紅Y-乙醇溶液。

伊紅Y 0.25~0.5 g 80%乙醇 100 ml 4．石炭酸-二甲苯混合液

石炭酸 1份 二甲苯 3份 第二節 細胞學診斷檢材的制備技術

一、細胞涂片、組織印片和壓片的制備

（一）涂片質量的基本要求

1．將檢材涂布于載玻片的右（或左）2/3處，另1/3部位粘貼標簽。2．單向涂布檢材，避免細胞變形。3．均勻涂布檢材，涂片厚薄適當。

4．紅細胞過多的涂片，可酌情進行溶解紅細胞處理。

（二）涂片方法

1．涂抹法：用棉簽或針頭將標本單向、均勻地涂抹于載玻片上。2．拉片法：將一滴檢材置于一張載玻片上，再用另一張載玻片疊加其 上并予輕壓，再將該兩張載玻片朝反向拉動，從而獲得兩張涂片。3．推片法：將一滴檢液置于載玻片的右端，再用另一張窄邊光滑的載

玻片作為推片，并以與滴液載玻片成40°夾角、自右向左勻力推動檢液，形成涂片。

（三）痰涂片的制作

1．送檢的痰液應是由肺內咳出，最好是清晨空腹時自肺內深咳出的痰液。2．核查無誤的收驗痰液，應立即制作涂片（通常為2～3張）。3．用細簽或無鉤鑷子挑取痰液置于載玻片上，并左右往復薄涂，隨即投入固定液中。

4．痰液中呈現下列性狀的成分可能含有癌細胞，應注意挑取制作涂片：①血絲；②灰白色痰絲（形如白色細線，微細螺旋狀，牽引時可伸長）；③透明痰液（可拉成較長細絲）。［及時在細胞學檢查申請單上記錄痰液性狀］ 5．檢查痰液中的腫瘤細胞，一般應連續送檢3次。

（四）黏膜、皮膚表面刮取（刷取、拉取）物和分泌物的涂片的制作

1．陰道排出物、子宮頸刮取物涂片：通常由婦產科醫師將已制作、固定后的涂片送交病理科檢查。［注意由子宮頸外口上皮移行帶刮取細胞涂片］

2．支氣管鏡、胃鏡等內腔鏡的黏膜刷取物涂片（黏膜刷片）：刷片通常由內腔鏡醫師制作、固定后送交病理科檢查。

3．食管、胃拉網涂片：由食管拉出的套網氣囊適量放氣后，將氣囊套網在載玻片滾動涂片，尤應將套囊上血絲、灰白色物制作涂片；涂片通常由有關臨床醫師將已制作、固定后的刷片送交病理科檢查。套網中的小塊組織可用來制作石蠟包埋切片。

4．眼、耳、鼻、咽、口腔、皮膚等處病變（潰瘍性病變等）的分泌物涂片。

（五）液體涂片的制作

液體標本（檢材）包括乳頭溢液、胸水、腹水、尿液、胃液、腦脊液、穿

刺液、沖洗液、灌注液等。除乳頭溢液外，其他液體檢材一般均應先行離心（2000r/min，10～20min）后，取其沉淀物制作涂片；液體檢材也可用細胞涂片離心機（cytospin）直接制作細胞涂片。制作好的涂片應立即固定和染色。［及時在細胞學檢查申請單上記錄液體標本的性狀和數量］

液體標本的離心沉淀物較多時，將制作涂片后剩余的沉淀物固定于4％中性甲醛中1h，然后用檫鏡紙或綢布將其包裹，制作石蠟包埋切片。1．乳頭溢液：直接滴于載玻片上制作涂片。

（1）患者乳腺觸及腫物時：用手指自腫物遠方沿乳腺導管引流方向輕力按 模擠壓，獲取溢液，宜取中段溢液和血性溢液涂片。

（2）患者乳腺未觸及腫物時：可自乳暈周圍向乳腺外周輕力按模擠壓，獲取溢液。

2．胸水和腹水

（1）由患者體內抽取的胸水或腹水應盡快送交病理科驗收，檢液量以200～500ml為宜。因故（例如遠途）延時送達時，需在標本中加入40%的甲醛（加入量為送檢胸水、腹水量的1/5），或加入等量的50％乙醇－生理鹽水。

（2）胸水、腹水的離心：采取容器底部的液體10ml（包括可能存在的沉淀物），移入離心管內進行離心。

（3）離心后，傾去全部上清液，將離心管底部含有沉淀物的液體搖勻并用吸管吸出適量，滴注于載玻片上，制作涂片。3．尿液

（1）制作方法同胸、腹水。

（2）尿液含有膠狀物時，應先將其除去。清除方法：用0.5ml/L氫氧化鈉調節尿液Ph至6.0；離心后，傾去上清液，再向沉淀物中加入95%乙醇5～10ml／L（固定細胞），靜置5min后加入蒸餾水并輕搖（溶去膠狀物）；再次離心后，取沉淀物制作涂片。檢查尿液中的腫瘤細胞，一般應連續送檢3次。4．胃液、胃沖洗液：制作方法同胸、腹水。5．腦脊液

（1）制作方法同胸、腹水。

（2）腦脊液內細胞一般較少，可用微孔濾膜過濾法、沉淀法或纖維捕捉法收集細胞，制作涂片。

6．沖洗液、灌洗液、穿刺液涂片的制作：參見上述的胸水、腹水項。

二、腫物細針穿刺物涂片的制備

（一）實施細針穿刺術前的準備工作

1．實施細針穿刺術的病理醫師應先了解患者臨床情況，向患者和/或患者授權人說明實施穿刺術的意義、局限性和其他相關問題等，取得患者和/或患方的知情和理解，并簽署由各醫院制訂的《申請實施細針穿刺術細胞病理學診斷患方知情同意書》。

2．合格的手術操作環境。

3．必備的適用手術器械和其他相關設施。

（二）腫物穿刺術的操作要點：

1．確認腫物部位并估計其大小、與皮表距離和質地（實／囊性、硬度等），以指導穿刺的方向、深度和用力程度。2．必須嚴格實行無菌操作。

3．根據腫物大小及其血供情況選擇適用型號的穿刺用針頭。穿刺用針頭的外徑為0.6～0.9mm，安置在2ml或10ml的一次性空注射器上。4．針吸法穿刺術操作要點

（1）進行穿刺前，先將安裝了穿刺用針頭的空注射器管芯外拉2cm；然后，用手固定腫物，將安裝在空注射器上的穿刺用針頭刺入腫物（注射器內無空氣）。

（2）迅速上下提插注射器管芯10～20次（其間變換針頭方向3～4次），遂使腫物不同部位的多較內容吸進入針頭和注射器內。

（3）將注射器與針頭分離（管內負壓因而解除）；隨后，再將該注射器與仍插于腫物內的針頭相接，拔出針頭，穿刺結束。

（4）迅速推動注射器的管芯，盡快地將位于穿刺針頭內的少量吸出物排射在2～3張清潔的載玻片上，進行涂片。

5．涂片方法：用針頭將載玻片上的吸出物輕輕均勻撥開，或用推片法朝一個方向展開（不可雙向往返推移）。

6．吸出物過少時，可用向離心管內沖洗穿刺針頭；再將沖洗液離心，然后取其沉淀物涂片［參見上述一

（五）項“液體涂片的制作”］。

7．吸出物較多時，可適量50％乙醇－生理鹽水液將涂片后注射器和針頭內剩余的吸出物沖洗至離心管中，離心后，取其沉淀物制作常規石蠟包埋切片。8．吸出物中含有細小組織塊時，應將其制作常規石蠟包埋切片。

9．內臟腫物穿刺時，必須在影象學檢查的引導下用較長細針進行穿刺。10．穿刺操作完成后，即在細胞病理學檢查單上書寫穿刺記錄。

三、組織印片、壓片的制備

（一）組織印片：

1．用鋒利刀片剖開剛切取的新鮮腫瘤組織或淋巴結等，然后用清潔載玻片輕壓于組織剖面處，將組織表面的細胞成分印在玻片上。用稍微加溫的載玻片制備印片時，可印得較多細胞。

2．制作淋巴結印片前，應先用濾紙吸去淋巴結切面上的血液、組織液。

（二）壓片：

1．選取微小薄片組織平鋪于一張載玻片上，再用另一張載玻片疊加其上并予輕壓。

2．腦組織質軟，易于制作壓片；稍硬的組織需切成細碎薄片制作壓片。

四、涂片的固定

（一）用于HE染色和巴氏染色的涂片必須濕固定，即涂片后立即進行固定。乳頭溢液涂片和液體標本離心沉淀物涂片，應待涂膜潮干（即周膜稍干而其中央區域未干）時進行固定。用于瑞氏染色、May-Grünwald姬姆薩染色和免疫細胞化學染色的涂片，必須干固定，即待涂片稍干后再進行固定。

（二）固定液

1．乙醇－冰醋酸液：95%乙醇∶冰醋酸＝99∶1。常用。

2．乙醇－乙醚液：95%乙醇49.5ml, 乙醚49.5ml, 冰醋酸1ml。較常用。3．甲醇：滴加在干燥涂片上，用于瑞氏染色、May-Grünwald姬姆薩染色 和免疫細胞化學染色。

4．丙酮：適用于酶類染色。

5．Carnoy液：由無水乙醇、氯仿、冰醋酸按6:3:1比例混成，適用于顯

示核酸、糖原、黏液染色。涂片在Carnoy液固定3～5min后，應移入95%乙醇中繼續固定。

6．對于液體標本的離心沉淀物、食管拉網獲取的小塊組織或吸出物中的細小組織塊等，固定于4%中性甲醛液中1h，然后制作常規石蠟包埋切片。

（三）固定方法 1．浸入法：

（1）將稍為干燥（不能完全干燥）的涂片直接浸泡于固定液內至少15 ～ 30min。

（2）因細胞容易脫落，宜以一個盛有固定液的容器只固定一例標本的涂片；一個容器固定多例涂片時，有可能造成的腫瘤細胞交叉污染。（3）必要時可將標本涂在硅化載玻片上，以防脫落。（4）固定液重復使用時，應先用濾紙過濾。

（5）95%乙醇固定液多次重復使用時，需測定其濃度比重，乙醇濃度低于90%時應予棄用。

2．滴加法：將固定液滴加于平放的干燥涂片上，應避免因固定液揮發造成沉淀。

（四）固定后未染色涂片的保存或郵寄：涂片固定15min后取出，立即滴加數滴甘油于涂膜上。對該涂片進行染色前，應先將其置于95%乙醇中溶去甘油。

五、涂片的染色

最常用于細胞病理學涂片檢查的是蘇木素－伊紅（HE）染色和巴氏染色。一些特殊染色、組織化學染色和免疫組織化學染色也用于細胞病理學的涂片檢查（參見第4章第一、二節）。

（一）蘇木素－伊紅（HE）染色（參見本章第一節的“六”項）。

（二）巴氏（Papanicolaou）染色

巴氏染色時，細胞透明度好，細胞結構清晰，色彩豐富而鮮艷，主要用于婦科細胞學涂片、痰涂片和富含鱗狀上皮細胞的涂片檢查。1．試劑配制

（1）Harri蘇木素液（參見本章第一節的“六”項）（2）鹽酸－乙醇液

濃鹽酸 1ml 70%乙醇 99ml（3）橙黃G6液

橙黃G6 0.5g 蒸餾水 5ml 無水乙醇 95ml 磷鎢酸 0.015g 先將橙黃G溶于蒸餾水中，再加入無水乙醇，然后加入磷鎢酸。

（4）EA36染液

①EA36儲備液

A液：亮綠0.5g，溶于5ml蒸餾水中，溶解后加入無水乙醇至100ml。B液：伊紅0.5g，溶于5ml蒸餾水中，溶解后加入無水乙醇至100ml。C液：俾士麥棕0.5g，溶于5ml蒸餾水中，溶解后加入無水乙醇至100ml。

②EA36工作液

EA36儲備液的A液 45 ml EA36儲備液的B液 45 ml EA36儲備液的C 液 10 ml 磷鎢酸 0.2 g 碳酸鋰飽和水溶液 1 滴 2．染色程序

（1）將已經固定的涂片置于80%乙醇中2 min。

（2）蒸餾水洗2 min。

（3）蘇木素液染核10～12 min，自來水洗。

（4）鹽酸-乙醇液分化約20～30s，至涂片呈淡橙紅色。

（5）流水沖洗10～15min，蒸餾水洗。

（6）依次用80%、95%乙醇脫水，各2min。

（7）橙黃G6液染色3～5min。

（8）95%乙醇洗2～3次，洗去多余染液。

（9）EA36工作液染色3～5 min。

（10）95%乙醇洗2～3次，洗去多余染液。

（11）無水乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片。

3．染色結果：細胞核呈深藍色，核仁呈紅色；不同分化類型的鱗狀上皮細胞，其胞漿顏色各異：角化細胞呈粉紅色，不全角化細胞呈橙黃色，角化前細胞呈淡藍或淡綠色；紅細胞呈橙紅或鮮紅色，白細胞的胞漿呈淡藍綠色；粘液呈淡藍或粉紅色。

（三）瑞氏（Wright）染色

瑞氏染色一般用于血液涂片，也可用于檢查腫瘤細胞。1．試劑配制

（1）瑞氏染液

瑞氏染料 1g 甲醇 600ml 將瑞氏染料放入研缽內，加入適量甲醇與之混合研磨，使染料逐漸溶解。將溶解的染液傾入另一玻璃瓶內，然后再加入適量甲醇繼續研磨；未溶解的染料如此反復多次，直至染料完全溶解、甲醇用完為止。染液避光保存備用。

（2）磷酸鹽緩沖液

無水磷酸氫二鈉 6.5g 磷酸二氫鈉 4g 蒸餾水 1 000ml pH：6.5～7.0 2.染色程序

（1）涂片自然干燥。

（2）滴加瑞氏液染色1min。

（2）滴加等量的磷酸緩沖液，輕輕搖蕩玻片或用洗耳膠球在玻片上輕輕吹 氣，使兩液體混合均勻，持續10～15min。（4）流水洗去染液。

（5）涂片風干后，二甲苯透明，中性樹膠封片。

3.染色結果：胞核呈紫紅色，胞漿呈紫藍色，粘液呈粉紅色或淡藍色。

（四）May-Grünwald-姬姆薩（Giemsa）染色

May-Grünwald-姬姆薩染色適用于造血系統的細胞涂片和鑒別惡型淋巴瘤的類型。May-Grünwald原液和姬姆薩原液配制繁瑣，可直接購買。1．試劑配制

（1）May-Grünwald工作液

May-Grünwald原液 1份

蒸餾水 6～10份

使用前配制。

（2）姬姆薩工作液

姬姆薩原液 1份 蒸餾水 6～10份

使用前配制。2．染色程序

（1）涂片自然干燥，蒸餾水洗1～2min。（2）May-Grünwald工作液染15～30min。

（3）自來水沖洗，洗去載玻片上的染液，蒸餾水稍洗。

（4）姬姆薩工作液染15～30min。

（5）自來水沖洗，洗去載玻片上的染液。

（6）涂片風干后，二甲苯透明，中性樹膠封片。3．染色結果：胞核呈紫紅色，胞漿和核仁呈藍紫色。

（五）Rakoff染色

Rakoff染色用于陰道細胞學涂片快速測定雌激素水平。1． 試劑配制

（1）5%淡綠水溶液 83ml（2）1%伊紅水溶液 17ml 將兩液混合后使用。2．染色程序

（1）用細胞刷沿陰道側壁刷取黏膜鱗狀上皮細胞，放入裝有1~2ml生理鹽水的試管內。（2）在試管內滴入3滴Rakoff染液，用細胞刷在染液中輕搖混合。

（3）將1~2滴混合液滴于載玻片上，制成涂片。（4）待涂片干燥后，用中性樹膠封片。

染色結果：鱗狀上皮細胞的嗜酸性和嗜堿性胞漿區分明顯。角化前細胞的核呈網狀，角化細胞的固縮核呈基本不著色的空泡狀。

（六）猩紅－固綠染色

猩紅－固綠染色用于顯示性染色體。1．試劑配制（1）猩紅染液

水溶性比布里西猩紅 1.0g 磷鎢酸 0.3g 冰醋酸 5.0ml 50%酒精 100ml（2）固綠染液: 固綠 0.5g 磷鉬酸 0.3g 磷鎢酸 0.3g 冰醋酸 5.0ml 50%乙醇 100ml 2． 染色步驟

（1）涂片經95%乙醇固定后，置于70%乙醇中2min。

（2）猩紅染液中5min。（3）50%乙醇中漂清多余染液。

（4）固綠染液中分化2~5h。每小時在顯微鏡下觀察胞漿和網狀核膜是否呈現綠色；如果綠色滿意，立即取出涂片（一般約需4h）。固縮核呈鮮紅色。

（5）50%乙醇中5min。

（6）依次置于70%、95%和無水乙醇中各2min。

（7）置于二甲苯溶液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中透明，各2min。

（8）中性樹膠封片。

染色結果：胞核呈淡綠色；性染色質呈粉紅色、V字形或貼著于細胞膜呈三角形。在性染色質周圍可見空泡。

（七）Fouchet染色

Fouchet染色用于顯示膽色素。1．染液配制 Fouchet染液

A液：25%三氯醋酸水溶液 B液：10%三氯化鐵水溶液

A、B液皆小量新鮮配制為宜。使用時，取A、B液各30ml混勻（當天使用）。

2．染色步驟

（1）涂片經95%酒精固定后，置于蒸鎦水中漂洗。

（2）Fouchet液中染5min。

（3）蒸鎦水Ⅰ、Ⅱ中各1min。

（4）苦味品紅溶液中染5min。（5）95%乙醇Ⅰ、Ⅱ中漂洗。

（6）無水乙醇Ⅰ、Ⅱ中脫水。

（7）二甲苯Ⅰ、Ⅱ中透明，中性樹膠封片。

3．染色結果：膽色素呈橄欖綠色，膠原纖維呈紅色，涂片背景呈黃色。

（八）硫酸亞鐵染色

硫酸亞鐵染色用于顯示黑色素。1．試劑配制

（1）2.5%硫酸亞鐵水溶液（2）鐵氰化鉀醋酸液 鐵氰化鉀 1g 蒸餾水 99ml 冰醋酸 1ml（3）1%冰醋酸水溶液

（4）核固紅液[參見第4章第一節的八

（三）項（愛先藍法）] 2．染色程序

（1）涂片經95%酒精固定后，置于蒸鎦水中漂洗1~2min。（2）2.5%硫酸亞鐵溶液中1h。

（3）蒸鎦水Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中漂洗，各1min。（4）鐵氰化鉀醋酸液中30min。（5）1%冰醋酸液中1min。（6）蒸鎦水漂洗。

（7）核固紅液中染1~2min。（8）蒸鎦水漂洗。

（9）依次95%乙醇、無水乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片。3．染色結果：黑色素呈深綠或深藍色，涂片背景呈紅色或粉紅色。

（九）快速硝酸銀染色

快速硝酸銀染色用于顯示卡氏肺囊蟲和真菌。1．試劑配制

（1）硝酸銀烏洛托品

常備液：3%烏洛托品溶液100ml與5%的硝酸銀溶液5ml充分混合。

工作液：常備液25ml、蒸鎦水25ml與5%硼酸鈉2ml充分混合。（2）固綠

常備液：固綠0.2g充分溶解于0.2%冰醋酸液100ml中。

工作液：常備液10ml與蒸鎦水40ml混合（3）5%鉻酸溶液

1%亞硫酸氫鈉溶液 0.2%氯化金溶液 2%硫代硫酸鈉溶液 2．染色步驟

（1）涂片經95%乙醇固定后，置于蒸鎦水中漂洗1min。（2）5%鉻酸溶液（43℃水浴）中2min。（3）5%鉻酸溶液（58℃水浴）中15min。（4）自來水漂洗。

（5）1%亞硫酸氫鈉溶液中30s。（6）自來水沖洗15s。

（7）蒸鎦水Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ漂洗各1min。（8）硝酸銀工作液（43℃水浴）中2min。（9）硝酸銀工作液（58℃水浴）中23min。（10）蒸鎦水Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ漂洗。（11）0.2%氯化金溶液中30s。（12）蒸鎦水Ⅰ、Ⅱ漂洗。

（13）2%硫代硫酸鈉溶液中1min。（14）自來水沖洗15s。（15）固綠工作液中染30s。（16）自來水沖洗15s。（17）蒸鎦水Ⅰ、Ⅱ漂洗。

（18）95%酒精、無水酒精脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片。

3．染色結果：卡氏肺囊蟲和真菌皆呈黑色，形狀清晰；糖原和黏蛋白呈玫瑰色或灰色；涂片背景呈淡綠色。

（十）高碘酸-無色品紅（PAS）染色

PAS染色用于顯示多糖（糖原及黏蛋白等）。［參見第4章第一節的八

（一）項（高碘酸－無色品紅法）］

［《臨床技術操作規范?病理學分冊》／第四章 病理學相關技術規范］ 第九節 病理學攝影技術

一、概 述

（一）病理醫師根據病理學診斷、教學和研究的需要確定病理學攝影的內容，進行客觀、準確的圖像記錄。

（二）病理學攝影的客體包括：①患者體表病征，②大體標本（手術切除和尸檢標本的肉眼病變），③組織學切片（光學顯微鏡下病變），④超薄切片（透射電子顯微鏡下超微病變），⑤冷凍蝕刻標本（掃描電子顯微鏡下超微病變），⑥細胞培養標本，⑦細胞和分子細胞遺傳學檢測結果，⑧尸檢過程，⑨動物實驗標本和⑩文字、圖像資料翻拍等。

二、普通攝影

（一）普通攝影是應用普通照相機拍攝客體的圖像，包括患者體表病征，大體標本的肉眼病變，尸檢過程，動物實驗標本和文字、圖像資料等。攝影時應注意病征或病變顯示、光照、角度等，適度調節距離、光圈、速度。

（二）患者體表病征攝影

1．需征得患者或患方有關人員同意。2．應遮蓋患者的面容和隱私部位。

（三）大體標本攝影

1．于標本下面鋪墊色澤反差鮮明、協調的平整背景（紙或布），并需置放標尺和相關標本的病理號，必要時添加箭頭等符號標志指示重點部位。2．因照相機固定于翻拍機上，宜選用較慢的快門速度，以增加景深。

（四）尸檢過程攝影

1．宜用28～135mm變焦鏡頭的135相機進行攝影。

2．重要病變的原位攝影：應包括局部肉眼病變特征（“近拍”）及其與毗鄰結構的解剖關系（“全景”），突出重要病變，兼顧顯示全貌。3．離體標本攝影［參見上文：“

（二）大體標本攝影”］

（五）文字、圖像資料翻拍 1．應用翻拍機進行攝影。

2．在翻拍相機的兩側一般至少安裝2～4盞100W燈光，與照明直線呈45o角，以使光線均勻。攝影條件可用測光表確定。

（六）底片的選擇

1．黑白攝影：擴印照片者，可用ASA100速度底片；制作幻燈片者可用ASA25～50速度底片。2．彩色攝影：

（1）用日光型彩色底片攝影時，需用雷登80系列平衡濾色片把色溫調到5600oK狀態；用燈光照射者，無需平衡濾色片。

（2）用燈光型彩色底片在日光下攝影時，需用平衡濾色片把色溫調到3200oK狀態。

三、光學顯微鏡（光鏡）攝影

（一）光鏡顯微攝影是應用顯微照相機拍攝通過光學顯微鏡放大40～1000倍的客體圖像。

（二）攝影用顯微鏡性能要求 1．具有攝影目鏡筒。

2．能通過目鏡筒對圖像進行對焦。3．具有光鏡選擇移動桿。

4．物鏡具有分辨率良好平視場象。

5．聚光鏡具有孔徑光闌和調節光軸中心的機構。6．具有視場光闌。

7．光源亮度足夠，電壓可以調節。8．具有插入濾色鏡的槽口。

（三）顯微攝影的基本裝置

1．具有自動輸片機構的35mm照相機背。

2．具有對不同光照條件進行光路調節的調節桿。3．具有能對不同標本面積進行自動測光的裝置。

4．具有與顯微鏡相連接的接圈、平場消色差物鏡(Splan，Dplan)和聚光鏡。5．具有顯微攝影控制臺。目前較常用的有日產Olympus PM-10及PM-20等顯微攝影裝置。常用參數項目包括：①快門按鈕(EXPOSE)，②底片類型選擇鍵(FORMAT)，③感光度旋鈕(ASA/ISO)，④倒易律失效的補償旋鈕(RECIPROCITY)，⑤曝光增減旋鈕(EXPOSURE ADJ)，⑥快門速度調節旋鈕(MODE/EXPOSURE TIME)，⑦卷片按鈕(OFF/MINDING)，⑧停片進片按鈕(NO WINDING)，⑨自動曝光鎖按鈕(AEOCK)，⑩時間回憶按鈕(TIME RECALL)。

（四）顯微攝影要點

1．顯微照相機必須安放穩定，具有一定防震性，室內光線應暗些以避免散射光進入目鏡。

2．選擇適當的彩色或黑白底片裝入照相機身（暗盒）。拍攝常規HE染色、特殊染色、免疫組化染色切片的病變，宜用感光度ASA為100的彩色或黑白底片；拍攝培養細胞和免疫熒光染色標本，宜用感光度ASA為400的彩色或黑白底片。

3．調節照明和光照

（1）打開電源，調節電壓（約在9伏）。（2）視場光闌收縮到取景框邊緣外。

（3）孔徑光闌調到物鏡孔徑數值的60％～80％，例如孔徑為0.25的10×物鏡，聚光鏡上光闌應調到：0.25×60％～80％＝0.15～0.2。（4）光通路調節

①常規攝影：先將視野與照明合軸、再將聚光鏡調中，使光線同時調到①觀察目鏡和②取景目鏡的視野之中，以便于邊觀察邊曝光攝影。如圖像分布均勻，將曝光增減旋鈕（EXPOSURE ADJ）調至“1”處。

②暗視野、熒光和偏振光攝影：將光線100％調到取景目鏡的視野之中，用調焦鏡觀察視野中的標本圖像，進行攝影。如圖像分布不均勻，應將曝光增減旋鈕調于0.25～4之間。

4．調節和校準取景目鏡于標準狀態：旋轉調焦鏡鏡筒上的圓環，使取景框中央的雙十字線達到最清晰。

5．將切片等標本放置在載物臺上，先用觀察目鏡選定攝影圖像，再用取景目鏡調整攝影圖像，并轉動微調旋鈕，同時使圖像與取景框中的雙十字線像達到最清晰。

6．用彩色底片攝影時，必須用色溫計調節色溫：①將光通路100％到達色溫計上（由調焦鏡中看不到光線）；②觀察色溫指示表，用平衡濾色鏡（使用日光型底片時用雷登80系列）和燈光亮度將色溫調至最佳色溫點（日光型底片的色溫點為5600K左右，燈光型底片的色溫點定為3200K左右）

7．用黑白底片攝影時，必須按下列對應關系選擇濾色片以提高圖像反差和清晰度：

標本顏色 紅 橙 黃 綠 深藍 濾 色 鏡 藍、綠 藍、綠 藍 紅、藍 深綠、橙

8．檢查光線可達到底片的位置，確定正確的曝光時間和進行曝光；或用自動攝影控制臺上的按鍵曝光。

9．記錄圖像的攝影日期、攝影編號、樣品編號、放大倍數、內容、攝影條件和備注等。

10．將已全部攝影過的底片退回底片暗盒內，取出底片并進行暗室沖洗等后期處理。

四、電子顯微鏡(電鏡)攝影

（一）透射電鏡攝影

1．檢查電鏡工作狀態，確認樣本無漂移現象，選擇好曝光條件。2．調節好燈絲像，消正像散。3．選擇視野，確定放大倍數。

4．調整物鏡光闌：樣品反差較強時，使用較大的物鏡光闌孔，直至反差適中為止；反差小時，宜用較小的光闌孔。

5．樣本聚焦在低倍電鏡（＜1500倍）圖像時，可采用搖擺聚焦法用肉眼定位；樣品聚焦在高倍電鏡（＞1500倍）圖像時，除用肉眼觀察定位外，還需采用系列拍照法：于確定焦點后，用細調鈕聚焦，增加物鏡電流，每調動一級最小鈕拍攝一張底片，總計拍攝4～5張，從中選擇最佳底片。6．放平熒光屏，傳送底片使之進入攝影位置。

7．調定曝光亮度和速度，然后啟動快門進行曝光；曝光結束后，將底片送入儲存盒內。將底片全部攝影的儲存盒取出，進行暗室沖洗等后期處理。

8．用于透射電鏡攝影的底片一般為色盲片（對紅光不感光），曝光時間為2～4s，ASA［中文？］為8～25s。

（二）掃描電鏡攝影 1．檢查電鏡工作狀態

（1）加速電壓強度的選擇：取決于樣品的性質、圖像反差和放大倍率。高倍觀察時一般需要較高的加速電壓，低倍觀察時需要較低的加速電壓。

（2）聚光鏡電流的選擇：在保證圖像亮度和反差要求前提下，盡可能加大聚光鏡電流，以提高照片分辨力，加大景深。

（3）物鏡光闌孔的選擇：對于表面結構高低差異大的樣本可用較小的光闌孔，以獲較大景深；低倍鏡下觀察時，可選用較大光闌孔，以增加視野內的信號強度。

（4）選擇攝影掃描速度。

（5）視野選擇：與透射電鏡相同。

2．確定曝光時間。在掃描電鏡照相機處于光關？F8或F11情況下，照片的曝光時間在50～100s之間。

3．樣品的聚焦程度主要依靠操作人員的肉眼觀察。拍攝較低放大倍數（＜1000倍）的圖像，以調節粗聚焦鈕為主；拍攝較高放大倍數（＞1000倍）圖像，應先調節粗聚焦鈕，再調節細聚焦鈕。

4．圖像消像散：①先調節X方向旋鈕，消除X方向的像散；②再調節Y方向旋鈕，消除Y方向的像散；③最后再調節細聚焦鈕，直到圖像最清晰為止。

5．調節高度和反差：掃描電鏡一般裝有亮度和反差自動調節按鈕，按動該鈕即可得到反差適當的圖像。

6．拍攝：將照相機中的底片調至攝影位置，按動面板上的攝影快門鈕，熒光屏上便由上而下自動掃描圖像；掃描結束后，即完成一幅照片拍攝。

7．底片選擇：掃描電鏡裝有120或135照相機，故一般選擇感光速度為ASA100的120或135膠卷，；裝有Polaroid后背相機的掃描電鏡，可進行一次成像。

8．記錄圖像的攝影日期、攝影編號、樣本編號、放大倍數、內容、攝影條件和備注等。

五、暗室技術

（一）暗室技術用于：①普通攝影、顯微鏡攝影和電鏡攝影底片的沖洗，及其照片的洗印和放大；②幻燈片的制作等。

（二）攝影底片的沖洗操作程序

①于完全黑暗中取出全色底片（色盲片或電鏡底片可在紅燈下取出）→ ②將底片卷入螺旋形的槽內或顯影架上 → ③清水濕潤2min → ④顯影3～12min（20℃）→ ⑤定影10～20min（20℃）→ ⑥水洗30min → ⑦涼干底片 → ⑧分類裝入底片袋內，并做好記錄。

（三）試劑配制

1.顯影液：有多種配方，組成成分大同小異。下列的D‐11配方兼用于沖洗底片和照片的洗印和放大顯影： 水（50℃）500ml 米吐爾 1.0g 無水亞硫酸鈉 75 g 對苯二酚 9.0g 無水碳酸鈉 25 g 溴化鉀 5 g 加水至1 000ml 沖洗電鏡底片、色盲片和制做幻燈片、顯影照片等，需要極強反差，可用以上配方的原液顯影。普通攝影用的全色底片對反差要求不很高，可將原液用清水稀釋成1:2～1:4的工作液。2．停影液

水 750ml 28％醋酸 48ml 加水至1000ml 3.定影液：較常用下列的F‐5酸性堅膜定影液 水（50℃）600ml 硫代硫酸鈉 240g 無水亞硫酸鈉 15g 28％醋酸 48ml 硼砂（結晶）7.5g 硫酸鋁鉀 15 g 加水至1000ml

（四）照片的洗印和放大

洗印和放大照片一般使用黑白放大相紙。這類相紙根據反差分為特軟性、軟性、中性、硬性和特硬性等5種，即0、1、2、3、4號相紙。較常用者為3號相紙。

1.洗印：在印相箱中操作（一般裝有自動定時曝光控制器），主要用于制做透射電鏡攝影的照片。已經曝光的像紙進入沖洗操作程序（同底片的沖洗程序）。

2.放大：在放大機上操作，主要用于制做顯微鏡攝影的照片。（1）操作程序

①放大鏡頭焦距的選擇參見下表：

底片規格 135 120 120 120 120（16張）（12張）（10張）（8張）負 片 負 片 負 片 底片尺寸

(mm×mm)24×36 45×60 60×50 60×70 60×90 80×105 90×120 108×125 鏡頭焦距

(mm)50 75 75～80 80～90 90～105 135 150 175

②裝入底片：將底片的乳劑面向下，目測聚焦，使放大的圖像結構清晰。③選擇相紙：常用3號放大紙。

④確定鏡頭光圈和曝光時間：對于正常反差的底片，將鏡頭光圈縮小到f/5.6至f/8之間，曝光時間控制在8～20s為宜。⑤將曝光后放大紙進入顯影、定影程序中。

六、數碼攝影技術

數碼攝影通常包括：①拍攝、②下載（將所拍攝的照片由數碼相機下載到電腦中）、③修飾（加工處理等后期制作）和④分享（將經過修飾的照片輸出，例如打印等）4個步驟。

（一）選擇適當的照片質量要求

數碼相機的照片質量（解像度）分為①精細、②正常、③經濟等檔次。圖像質量越好，每張照片占用的存儲空間越大，在相同內存的情況下，解存儲的照片數量越小。因此，在拍攝之前，應先根據需要，設定對于照片的質量要求，即設定壓縮比。

設定壓縮比的原則是：①對照片質量要求越低，壓縮比可越高；②只在監視器或電視機上觀察圖像而不打印時，壓縮比可高些，可選擇“正常”甚至“經濟”檔拍攝儲存量小的圖像。③需要打印照片（尤其欲獲大幅彩色照片）時，壓縮比越低越好，應選擇“精細”檔，最好選擇不壓縮的拍攝存儲方式。

（二）力求曝光準確

1．數碼相機的感光度最低為ISO60，最高為ISO6400，多在ISO100左右。ISO額定值較低時，解像度高、色調范圍寬和反差低；ISO額定值較高時，解像度低、色調范圍寬和反差高。2．選擇感光度的原則：（1）檢查光線是否足夠。

（2）盡量用較低的感光度拍攝。

（3）曝光時間不要過長。照度低時，應盡量利用閃光拍攝。避免進行高感光度的長時間曝光。

（4）曝光準確與否決定于對照片質量的要求。

（三）注意對焦條件。

（四）注意用光。

（五）準確使用快門和光圈：宜用自動模式（Auto）拍攝。使用手動相機或將自動相機設置于手動模式時，需要隨時進行調整。

（六）正確設定白平衡：拍攝前設定自動白平衡，或是將白平衡調整設定在與拍攝光照條件一致的檔上。

（七）正確使用存儲媒介：向數碼相機內插入移動式存儲卡時，一定要到位；從相機中取出存儲卡時，要防止滑落到堅硬的物面上，以免不能讀取照片的某些數據，甚至損壞存儲卡。

（八）勿距攝影客體過遠：適當拍攝距離為5～15尺。拍攝小物體、文件等時，應啟動數碼相機的近攝功能。

第三篇：消化內鏡的規范化操作

消化內鏡的規范化操作

1、學習內鏡操作的人員條件

內鏡技術與操作是--I"1專業性很強、要求很高的在人體腔內進行診療工作的學科。學習內鏡技術或操作的人員需有相應的專業知識及基本技能，不是僅有一定醫學背景知識的人都可以進行內鏡技術的學習、開展內鏡操作的。將內鏡操作認為簡單、好學，會插鏡看看，隨意安排人員學習內鏡操作的思想或認識是片面的和不規范的，也不可能培養出理想合格的內鏡醫師或消化專科醫師。學習內鏡操作的人員需具備以下條件：①具備普通內科學或普通外科學的臨床知識和基本技能，掌握心肺復蘇搶救等。②能夠把內鏡和病人的整體病情進行統一評估和解釋。③能夠獨立判斷具體病人的適應癥、禁忌癥、內鏡操作的輕重緩急、風險及操作利害關系。④熟知元痛內鏡使用的鎮靜劑、麻醉藥品的藥理，副作用及搶救方法。⑤掌握內鏡設備的技術特點，清洗消毒要求，附件、活檢或細胞學用途，計算機圖文使用。⑥能夠和病人滿意交流，取得知情同意、向病人解釋病情、指導進一步的診療。⑦能夠清楚描述內鏡操作過程，準確識別和解釋病變。⑧能夠與內鏡中心麻醉師、護士、技師等協調工作，完成多人配合的內鏡操作。盡管不是每個內鏡中心都有條件開展所有的內鏡操作，但在學習或培訓內鏡操作時，學習人員應有基本的條件和要進行規范化的學習與培訓。因此，學習內鏡操作的人應具備以上的基本知識和能力。這可視為內鏡規范化操作與學習的第一步。

2、系統的理論培訓

內鏡操作不僅僅是動手和一種技能，因為包括正確的診斷、治療以及操作的安全性。要進行規范化的操作，首先需進行一定的理論學習，然后通過規范的技能培i：EIA‘能成為一個“科班”的內鏡操作醫師。理論培訓是系統培訓的第一步。包括消化道的解剖、生理、常見疾病的大體病理，這是進行內鏡操作和疾病識別的前提。同時需要學習不同疾病的好發部位、年齡、季節、地區、誘因等。消化疾病的分類，尤其內鏡下分類是需要首先學習和掌握的。閱讀內鏡設備說明，掌握內鏡檢查或治療設備的性能和特點，正確和充分的發揮設備的功效及設備的正確維護，才能達到良好的人機結合。現代內鏡的特點不僅是診斷，治療技術越來越多，其中附件的作用日益增大。了解不同附件的特點、正確使用的方法，往往成為能否成功進行內鏡操作或減少并發癥的關鍵，一些規范化的內鏡操作程序是基于附件的設計和特點，所以對附件的學習和掌握必不可少。內鏡是介人人體腔內進行操作的器械，消毒和防止交叉感染等是進行內鏡安全操作的重要環節。不同的國家或機構目前都制定了相應的內鏡清洗消毒指南、規定甚至是法規，從事內鏡操作的人員需學習和掌握這些法規或指南，從而保證內鏡操作的安全性。安全性不僅指內鏡操作的安全性，還包括對病人和醫師的環境安全性，例如從事ERCP或支架植入等操作，需在x線下進行，從事內鏡操作的人員必須學習x線的正確使用、防護及監測等，才能規范化防護醫患雙方。另外，為提高內鏡操作的規范化，世界上一些學會組織制定了許多具體疾病或操作的指南，主要是美國消化內鏡學會、世界消化內鏡學會、歐洲消化內鏡學會的指南，如：ERCP操作指南、胰腺假性囊腫處理指南、膠囊內鏡使用指南、小腸鏡操作指南、曲張靜脈出血治療指南等。學習和更新這些指南對進行規范化操作具有重要的指導意義，是系統的理論學習的重要組成部分，從事內鏡操作的人員都應學習或了解這些指南。

3、系統的技能培訓

規范化的內鏡操作需通過系統的技能培訓。以前技能培訓都是直接在人體上實踐或“練”出來的。近年來，計算機模擬使內鏡初始培訓可以在模擬機上進行，避免并發癥和減少病人的痛苦，同時迅速提高醫師的操作技能。模擬機上訓練內鏡操作，目前還不普及，但代表著一個重要的進步和發展方向。目前美國已有數十家醫療中心開始此項培訓，我國北京友誼醫院、解放軍總醫院已開展模擬機上消化內鏡的標準化程序培訓。人體上的規范內鏡操作，需從內鏡準備、病人知情同意、病人術前準備、正確的進鏡等逐項開始，正確的操作需在高年資內鏡醫師的指導或監督下從事。培訓大致可分成3個階段(不同地區不盡相同)。第一階段為診斷內鏡培訓階段，此階段一般在完成大內科或大外科培訓后，進行專科臨床培訓1年左右進行，或臨床工作4—5年時進行。學習上、下消化道內鏡的插入、觀察、病變描述、活檢等，一般需完成500例操作，基本可以獨立進行內鏡的診斷操作。第二階段內鏡操作培訓主要針對基本的內鏡治療，一般在完成內鏡診斷1 000例以上、從事臨床工作6—8年或專科工作2年以上時進行，在上級醫師的指導下主要學習和掌握消化道狹窄的內鏡規范化處理、較大息肉的內鏡下切除、非靜脈曲張出血的內鏡治療、異物取出、胃造瘺等。第三階段的內鏡培訓，在上級醫師指導下主要學習掌握操作風險大及向特長方向發展的項目，如靜脈曲張出血內鏡治療、超聲內鏡、治療ERCP、小腸鏡等。需要指出的是規范的技能培訓或以上階段的學習和培訓，都應在有帶教能力的老師指導下和在有條件的內鏡中心進行，同時應規范記錄受訓人員不同階段的理論學習內容、操作項目、例數、帶教老師等，最后給出培訓結果和達到的操作水平，從而保證內鏡機 能培訓的規范化及其質量。

4、內鏡操作的一般程序

不同的國家、不同的醫療體制和不同的內鏡中心，內鏡操作程序存在差異或不盡相同，但一些問題是共同關心和不可缺少的，從而保證內鏡操作的質量和安全性，或保證操作的規范化。系統培訓過的內鏡操作醫師，進行內鏡操作時，一般需包括：病史術中親屬聯系方式、病人術前準備、內鏡的觀察與治療、圖像或錄像的采集、標本的處理、內鏡報告的書寫和發送、術后恢復與醫囑、病理結果、術后隨訪或術后聯系等，國內還應包括醫療費用與操作的關系等。這些內容構成了內鏡操作的基本過程，從而保證和完成一個完整的或規范的內鏡操作。

第四篇：消化內鏡診療技術臨床應用可行性報告

我院消化內鏡診療技術臨床應用可行性報告

XXX院消化內鏡科成立至今已有10余年，現有6名醫師，6名護士，其中科主任為主任醫師，xxx副主任醫師，xxx醫師。我科醫師先后在xxx醫院，xxx醫院進修學習，且均具有3年以上消化內鏡相關診療工作經驗。消化內鏡科成立以來，已經完成相關檢查及治療11200余例。近兩年，隨著無痛胃腸鏡及鏡下治療的廣泛開展，更是積累了豐富的臨床經驗。

科室現擁有4臺消化內鏡主機，8條電子纖維胃鏡，3條電子纖維腸鏡，配備有先進的“電腦內鏡圖像數據處理系統”，各種規格活檢鉗、異物鉗、高頻電、氬氣刀等豐富的輔助設備，能熟練開展胃鏡、結腸鏡檢查及各種內鏡下治療。我科所在醫院是xx市最大的三級甲等醫院，我們在安全開展普通胃腸鏡檢查的同時，率先在本地區開展無痛胃腸鏡檢查，極大減輕了病人的痛苦，提高了診斷準確率。治療內鏡是我科室的專業特色，近幾年來我科陸續開展了大量的內鏡下治療項目，主要有消化道息肉內鏡下切除術、消化道出血內鏡下各種止血術（局部噴灑止血藥、電凝止血、金屬鈦夾止血等）等內鏡治療、消化道異物取出術等。

我科醫護人員積極學習，開展新技術、新業務，打造品牌科室，全面提高診療水平，更好的服務于廣大的群眾。

第五篇：《臨床技術操作規范_病理學分冊》醫院用

《臨床技術操作規范?病理學分冊》

第1章 總 則

一、為提高病理學診斷質量，促進臨床工作，依據《中華人民共和國執業醫師法》精神，結合醫院病理科工作的特點，制定本規范。

二、醫院病理科和承擔醫院病理科任務的醫學院校病理教研室的主要臨床任務是通過活體組織病理學檢查（簡稱活檢）、細胞病理學檢查（簡稱細胞學檢查）和尸體剖檢（簡稱尸檢）等作出疾病的病理學診斷（或稱病理診斷）。具有一定規模的病理科，應積極開展教學、培訓病理醫師和科學研究等項工作。

三、病理學診斷是病理醫師應用病理學知識、有關技術和個人專業實踐經驗，對送檢的患者標本（或稱檢材，包括活體組織、細胞和尸體等）進行病理學檢查，結合有關臨床資料，通過分析、綜合后，作出的關于該標本病理變化性質的判斷和具體疾病的診斷。病理學診斷為臨床醫師確定疾病診斷、制定治療方案、評估疾病預后和總結診治疾病經驗等提供重要的、有時是決定性的依據，并在疾病預防，特別是傳染病預防中發揮重要作用。

四、病理學診斷報告書（或稱病理診斷報告）是關于疾病診斷的重要醫學文書。當涉及醫、患間醫療爭議時，相關的病理學診斷報告書具有法律意義。病理學診斷報告書應由具有執業資格的注冊主治醫師以上（含主治醫師）的病理醫師簽發。各醫院可酌情準予條件適宜的高年資病理科住院醫師試行簽署病理學診斷報告書。低 年資病理科住院醫師、病理科進修醫師和非病理學專業的醫師不得簽署病理學診斷報告書。

五、病理學檢查是臨床醫師與病理醫師為確立疾病診斷而進行的合作行為，是有關臨床科室與病理科之間特殊形式的會診。臨床醫師和病理醫師雙方皆應認真履行各自的義務和承擔相應的責任。

六、病理學檢查申請單是臨床醫師向病理醫師發出的會診邀請單。病理學檢查申請單的作用是：臨床醫師向病理醫師傳遞關于患者的主要臨床信息（包括癥狀、體征、各種輔助檢查結果和手術所見等）、診斷意向和就具體病例對病理學檢查提出的某些特殊要求，為進行病理學檢查和病理學診斷提供重要的參考資料或依據。病理學檢查申請單是疾病診治過程中的有效醫學文書，各項信息必須真實，應由主管患者的臨床醫師親自（或指導有關醫師）逐項認真填寫并簽名。

七、臨床醫師應保證送檢標本與相應的病理學檢查申請單內容的真實性和一致性，所送檢材應具有病變代表性和可檢查性，并應是標本的全部。

八、患者或患者的授權人應向醫師提供有關患者的真實信息（包括姓名、性別、年齡、病史和可能涉及診斷需要的隱私信息）。病理醫師應尊重和保護患者的隱私。患者或患者的授權人應保證其自送檢材的真實性、完整性和可檢查性。

九、病理科應努力為臨床、為患者提供優質服務，遵照本規范的要求加強科室建設，制訂完善的科室管理制度，并實施有效的質 量監控。

十、病理科工作人員應恪盡職守，做好本職工作。病理醫師應及時對標本進行檢查和發出病理學診斷報告書，認真對待臨床醫師就病理學診斷提出的咨詢，必要時應復查有關的標本和切片，并予以答復。病理科技術人員應嚴格執行本規范的技術操作規程，提供合格的病理學常規染色片、特殊染色片和可靠的其他相關檢測結果，并確保經過技術流程處理的檢材真實無誤。

第2章 病理學檢查常規

第一節 普通活體組織病理學檢查常規

一、申請單和標本的驗收

(一)病理科應有專人驗收普通活體組織病理學檢查(常規活檢)申請單和送檢的標本。

(二)病理科驗收人員必須：

1、同時接受同一患者的申請單和標本。

2、認真核對每例申請單與送檢標本及其標志（聯號條或其他寫明患者姓名、送檢單位和送檢日期等的標記）是否一致；對于送檢的微小標本，必須認真核對送檢容器內或濾紙上是否確有組織及其數量。發現疑問時，應立即向送檢方提出并在申請單上注明情況。

3、認真檢查標本的標志是否牢附于放臵標本的容器上。

4、認真查閱申請單的各項目是否填寫清楚，包括：①患者基本情況［姓名、性別、年齡，送檢單位（醫院、科室）、床位、門 診號/住院號、送檢日期、取材部位、標本數量等］，②患者臨床情況［病史（癥狀和體征）、化驗/影象學檢查結果、手術（包括內鏡檢查）所見、既往病理學檢查情況（包括原病理號和診斷）和臨床診斷等］。

5、在申請單上詳細記錄患者或患方有關人員的明確地址、郵編及電話號碼，以便必要時進行聯絡，并有助于隨訪患者。(三)驗收標本人員不得對申請單中由臨床醫師填寫的各項內容進行改動。

(四)下列情況的申請單和標本不予接收：

1、申請單與相關標本未同時送達病理科；

2、申請單中填寫的內容與送檢標本不符合；

3、標本上無有關患者姓名、科室等標志；

4、申請單內填寫的字跡潦草不清；

5、申請單中漏填重要項目；

6、標本嚴重自溶、腐敗、干涸等；

7、標本過小，不能或難以制做切片；

8、其他可能影響病理檢查可行性和診斷準確性的情況。病理科不能接收的申請單和標本一律當即退回，不予存放。

(五)臨床醫師采取的標本應盡快臵放于盛有固定液（4%中性甲醛，即10%中性福爾馬林）的容器內，固定液至少為標本體積的5倍。對于需作特殊項目檢查（如微生物、電鏡、免疫組織化學、分子生物學等）的標本，應按相關的技術要求進行固定或預處理。(六)病理醫師只對病理科實際驗收標本的病理診斷負責。(七)病理科應建立與送檢方交接申請單和標本的手續制度。具體交接方法由各醫院病理科自行制訂。

二、申請單和標本的編號、登記

(一)病理科驗收人員應在已驗收的申請單上注明驗收日期并及時、準確編號（病理號），并逐項錄入活檢標本登記簿或計算機內。嚴防病理號的錯編、錯登。

(二)標本的病理號可按年編序，或連續性（不分）編序。(三)同一病例同一次的申請單、活檢標本登記簿（包括計算機錄入）、放臵標本的容器、組織的石蠟包埋塊（簡稱蠟塊）及其切片等的病理號必須完全一致。

(四)病理科應建立驗收人員與組織取材人員之間申請單和標本的交接制度。具體交接方法由各醫院病理科自行制訂。

(五)在病理科內移送標本時，必須確保安全，嚴防放臵標本的容器傾覆、破損和標本的散亂、缺失等。

三、標本的預處理

標本驗收人員對已驗收的標本酌情更換適宜的容器，補充足量的固定液；對于體積大的標本，值班取材的病理醫師在不影響主要病灶定位的情況下，及時、規范地予以剖開，以便充分固定。

四、標本的巨檢、組織學取材和記錄

對于核驗無誤的標本，應按照下列程序進行操作：①肉眼檢查標本（巨檢）；②切取組織塊（簡稱取材）；③將巨檢和取材情況記錄 于活檢記錄單上（活檢記錄單印于活檢申請單的背面）。巨檢和取材的技術操作 參見第3章第四節。

巨檢和取材時的注意事項：

(一)巨檢和取材必須由病理醫師進行，應配備人員負責記錄。(二)巨檢和取材過程中，應嚴防污染工作人員和周圍環境。(三)標本一般應經適當固定后再行取材。已知具有傳染性（例如結核病、病毒性肝炎等）的標本，應在不污染環境和／或不擴散傳染的原則下，經必要的初步巨檢或切開后，立即臵于盛有足量固定液的專用容器內，充分固定后再行常規巨檢和取材。

(四)病理醫師在對每例標本進行巨檢和取材前，應與記錄人員認真核對該例標本及其標志與申請單的相關內容是否一致。若對申請單填寫的內容或／和標本有疑問（例如患者姓名有誤，標本內容、數量、病變特征與申請單填寫的情況不符等），應暫行擱臵，盡快與送檢方聯系，查明原因，確保無誤后，再行巨檢和取材。必要時，可邀請有關臨床醫師共同檢查標本和取材。對于有疑問的標本，在消除疑問前不得進行巨檢和取材，應將有關標本連同其申請單一并暫時妥存。

(五)病理醫師進行巨檢和取材時，記錄人員應根據病理申請單內容，向巨檢醫師報告患者的基本臨床情況、手術所見、標本情況（采取部位、數量等）和送檢醫師的特殊要求等，并如實、清楚地將病理醫師的口頭描述記錄于活檢記錄單上。必要時，應在活檢記 錄單上（或另附紙）繪簡圖顯示巨檢所見和標示取材部位。取材者應核對記錄內容。

(六)具有醫學學術價值的標本可攝影存檔，并酌情妥為保存。(七)病理科宜積極推行巨檢和取材的錄音記錄。每次巨檢和取材結束后，應由專人立即對錄音內容進行文字整理，記錄于活檢記錄單上（手錄或用計算機錄入、打印）。有關的錄音資料應保存至病理診斷報告書發出后兩周。

(八)細小標本取材時，可用伊紅點染并用軟薄紙妥善包裹。(九)每例標本取材前、后，應用流水徹底清洗取材臺面和所有相關器物，嚴防檢材被無關組織或其他異物污染，嚴防細小檢材被流水沖失。

(十)巨檢和取材必須按照本規范的要求進行操作（參見第3章第四節）。對于由不同部位或不同病變區域切取的組織塊，應在其病理號之后再加編次級號（例如：－1，－2，－3，……；A,，B，C，……等）。

(十一)巨檢／取材者和記錄人員應相互配合、核查，確保所取組織塊及其編號標簽準確地臵于用于脫水的容器（脫水盒等）內。(十二)標本巨檢和取材后剩余的組織／器官應臵入適當容器內，添加適量4%中性甲醛并附有相關病理號和患者姓名等標志，然后按取材日期有序地妥為保存。取材剩余的標本一般保存至病理診斷報告書發出后兩周。

(十三)病理醫師在每批標本巨檢和取材后，應與記錄人員共同 核對取材內容，并在活檢記錄單／取材工作單上簽名和簽署日期。(十四)取材后剩余的病理標本屬于污染源，應遵照有關規定處理。

(十五)巨檢／取材醫師或記錄人員與制片的技術人員認真辦理交接手續。具體交接方法由各醫院病理科自行制訂。

五、組織切片制備的基本要求

(一)組織制片過程中，應確保切片號與蠟塊號一致。

(二)制片工作一般應在取材后2個工作日內完成（不含需要脫鈣、脫脂等特殊處理的標本）。

(三)制片完成后，技術人員應檢查制片質量，并加貼標有本病理科病理號的標簽。常規石蠟-HE染色片的優良率應≥95%，優秀率不<35％。不合格切片應立即重做。切片質量的基本標準參見第3章第一節的附表。

(四)制片過程發生意外情況時，有關技術人員和技術室負責人應及時向科主任報告，并積極設法予以補救。

(五)制片完成后，技術人員應將所制切片與其相應的活檢記錄單／取材工作單等進行認真核對，確認無誤后，將切片連同相關的活檢申請單／活檢記錄單／取材工作單等一并移交給病理醫師。雙方經核對無誤后，辦理移交簽字手續。具體交接方法由各醫院病理科自行制訂。

(六)常規活檢組織切片制備技術的基本要求參見第3章第一節。

六、組織切片的光學顯微鏡檢查和病理診斷(一)病理醫師進行病理診斷時：

1、應認真閱讀申請單提供的各項資料，必要時（尤其是疑難病例），應向有關臨床醫師了解更多的臨床信息。

2、應認真閱讀活檢記錄單中關于標本巨檢的描述；負責復檢的病理醫師必要時親自觀察標本，補充或訂正病變描述，指導或親自補取組織塊。

3、應了解患者既往病理學檢查情況（包括切片的病理診斷和有關文字記錄）：①由本病理科既往受理者，必須及時調閱相關切片等病理學檢查資料；②非本病理科既往受理者，應積極協助患者從有關病理科商借相關切片等病理學檢查資料參閱。

4、應在活檢記錄單上簽署“醫囑”，告知技術人員進行必要的深切片、連切片、特殊染色和其他相關技術檢測。

5、應全面、細致地閱片，注意各種有意義的病變。

(二)進行初檢的病理醫師，應提出初診意見，送交主檢病理醫師復查。

(三)主檢病理醫師對難以明確診斷的病例,可以：

1、提請科內上級醫師會診或進行科內讀片討論（會診）；

2、與有關臨床醫師進行臨床－病理會診；

3、必要時約見患者（尤其門診患者）或患者親屬（或其他患方相關人員），了解病情，說明病理診斷的疑難情況和延期簽發病理學診斷報告書的原因等；

4、于簽發病理學診斷報告書前進行科外病理會診(“診斷報告前病理會診”)，應將各方面會診意見的原件（或復印件）作為檔案資料貼附于有關患者的活檢記錄單中備查；

5、必要時，建議臨床醫師重復活檢，或密切隨查。

(四)主檢病理醫師根據常規切片的鏡下觀察，結合標本巨檢、相關技術檢查結果、有關臨床資料和參考病理會診意見等，作出病理診斷或提出病理診斷意見（意向），清楚地書寫于活檢記錄單的有關欄目中、并親筆簽名。各方會診意見不

一、難以明確診斷時，主檢醫師可參考會診意見酌情診斷，或在病理學診斷報告書中將各方會診意見列出，供臨床醫師參考。

(五)對打印的病理學診斷報告書，主檢病理醫師應與活檢記錄單上的病理診斷文字進行核對，并親筆簽名。［參見本節下文：“

八、常規活檢病理學診斷報告書及其簽發”］

七、相關診斷技術的選用

病理醫師可借助于組織化學染色（包括特殊染色）、免疫組織化學染色、電子顯微鏡技術、分子生物學技術、流式細胞技術等相關診斷技術檢查提供的佐證，對某些病例（尤其是疑難病例）進行病理診斷。（參見第4章）

八、病理學診斷報告書及其簽發(一)病理診斷表述的基本類型

Ⅰ類：檢材部位／疾病名稱／病變性質明確和基本明確的病理診斷。Ⅱ類：不能完全肯定疾病名稱/病變性質，或是對于擬診的疾病名稱／病變性質有所保留的病理診斷意向，可在擬診疾病／病變名稱之前冠以諸如病變可“符合為”、“考慮為”、“傾向為”、“提示為”、“可能為”、“疑為”、“不能排除（除外）”之類的詞語。

Ⅲ類：檢材切片所顯示的病變不足以診斷為某種疾病（即不能做出Ⅰ類或Ⅱ類病理診斷），只能進行病變的形態描述。

Ⅳ類：送檢標本因過于細小、破碎、固定不當、自溶、嚴重受擠壓（變形）、被燒灼、干涸等，無法做出病理診斷。

(二)病理學診斷報告書的基本內容

1、患者的基本情況，包括病理號，姓名，性別，年齡，送檢醫院／科室（住院／門診），住院號／門診號，送檢／收驗日期等。

2、巨檢病變和鏡下病變要點描述（一般性病變和細小標本可酌情簡述或省略）。

3、與病理診斷相關技術的檢查結果。

4、病理診斷的表述（參見上文“病理診斷表述的基本類型”）。

5、對于疑難病例或作出Ⅱ、Ⅲ類病理診斷的病例，可酌情就病理診斷及其相關問題附加：①建議（例如進行其他有關檢查、再做活檢、科外病理學會診、密切隨診／隨訪等）；②注釋／討論。

6、經過本病理科或／和科外病理會診的病例，可將各方病理 會診意見列于該例患者的病理學診斷報告書中。(三)病理學診斷報告書的書寫要求

1、病理學診斷報告書的文字表述力求嚴謹、恰當、精練、條理和層次清楚。

2、病理學診斷報告書應為一式二份，一份交予送檢方，另一份隨同患者的病理學檢查申請單／病理學檢查記錄單一并存檔。主檢病理醫師必須在每一份病理學診斷報告書上簽名，不能以個人印章代替簽名，不能由他人代為簽名；主檢病理醫師簽名的字跡應能辨認。

3、手書的病理學診斷報告書必須二聯復寫，必須文字規范、字跡清楚，不得潦草、涂改。

4、手書和計算機打印的病理學診斷報告書中的關鍵性文字，例如“癌”、“瘤”、“陽性”、“陰性”和數字等，要認真核對，不得有誤。

5、計算機打印的圖文病理學診斷報告書提供的病變圖象要準確，具有典型（代表）性，放大倍數適當。

6、患者的基本情況項目必須嚴格按照送檢臨床醫師填寫的文字抄寫或用計算機輸錄于病理學診斷報告書中，并認真核查無誤，簽發報告書的病理醫師和病理科的其他人員都不得改動。

7、病理醫師不得簽發虛假的病理學診斷報告書，不得向臨床醫師和患方人員提供有病理醫師簽名的空白病理學診斷報告書。(四)病理學診斷報告書的發送

1、病理科自接受送檢標本至簽發該例病理學診斷報告書的時間，一般情況下為5個工作日以內；

2、由于某些原因（包括深切片、補取材制片、特殊染色、免疫組織化學染色、脫鈣、疑難病例會診或傳染性標本延長固定時間等）延遲取材、制片，或是進行其他相關技術檢測，不能如期簽發病理學診斷報告書時，應以口頭或書面告知有關臨床醫師或患方，說明遲發病理學診斷報告書的原因。

3、病理科應有專人發送病理學診斷報告書。住院患者的病理學診斷報告書應發送至有關臨床科室。病理科所在醫院門診患者和外院患者病理學診斷報告書的發送方法，由各醫院病理科自行制訂。

4、病理學診斷報告書的經收人員（包括患方人員）必須履行簽收手續。

5、病理科已發出的病理學診斷報告書被遺失時，一般不予補發；必要時，經病理科主任同意可以抄件形式補發。

九、資料管理

普通活體組織病理學檢查的資料必須妥善管理，有關規定參見本章第五節。

十、會

診

病理學會診是普通活體組織病理學診斷過程的重要環節，有關規定參見本章第六節。

第二節 手術中快速活體組織病理學檢查常規

一、概

述

(一)手術中快速活體組織病理學檢查（快速活檢）是臨床醫師在實施手術過程中，就與手術方案有關的疾病診斷問題請求病理醫師快速進行的急會診，尤其需要臨床醫師與病理醫師間的密切合作。

(二)快速活檢要求病理醫師在很短時間內，根據對切除標本的巨檢和組織塊快速冷凍切片（或快速石蠟切片）的觀察，向手術醫師提供的參考性病理診斷意見。與常規石蠟切片的病理診斷相比，快速活檢會診具有更多的局限性和誤診的可能性。有的病例難以快速診斷，需要等待常規石蠟切片進一步明確診斷。因此，應向臨床醫師說明快速活檢的：①局限性、②適用范圍、③慎用范圍和④不宜應用范圍。

(三)有關臨床醫師應于手術前向患者和／或患者授權人說明快速活檢的意義和局限性等，取得患者和／或患方的知情和理解。患者和／或患者授權人應在由醫院制定的《手術中快速活檢患方知情同意書》簽署意見和簽名。

(四)主持手術的臨床醫師應在手術前一天向病理科遞交快速活檢申請單，填寫患者的病史，重要的影象學、實驗室檢查結果和提請病理醫師特別關注的問題等。盡可能不在手術進行過程中臨時申請快速活檢。

(五)手術中快速活檢應由經過該項工作訓練的主治醫師以上的病理醫師主持。尚不具備相應條件的病理科不應勉強開展手術中快 速活檢。

(六)負責快速活檢的主檢病理醫師應了解患者的①臨床情況，②手術所見，③既往有關的病理學檢查情況。

二、適用范圍

(一)需要確定病變性質（如腫瘤或非腫瘤／良性腫瘤或惡性腫瘤等），以決定手術方案的標本。

(二)了解惡性腫瘤的擴散情況，包括腫瘤是否浸潤相鄰組織、有無區域淋巴結轉移等。

(三)確定腫瘤部位的手術切緣有無腫瘤組織殘留。

(四)確認切除的組織，例如甲狀旁腺、輸卵管、輸精管及異位組織等。

三、慎用范圍涉及截肢和其他會嚴重致殘的根治性手術切除的標本。需要此類手術治療的患者，其病變性質宜于手術前通過常規活檢確定。

四、不宜應用范圍

(一)疑為惡性淋巴瘤。

(二)過小的標本（檢材長徑≤0.2cm者）。(三)術前易于進行常規活檢者。

(四)脂肪組織、骨組織和鈣化組織。

(五)需要依據核分裂象計數判斷良、惡性的軟組織腫瘤。(六)主要根據腫瘤生物學行為特征而不能依據組織形態判斷良、惡性的腫瘤。(七)已知具有傳染性的標本（例如結核病、病毒性肝炎、艾滋病等）。

五、申請單和標本的驗收、編號和登記

手術中快速活體組織病理學檢查申請單和標本的驗收、編號和登記參照本章第一節中“一”至“三”項的有關規定。

六、標本的巨檢、取材和記錄

(一)病理科驗收快速活檢申請單和標本后，應參照本章第一節中“四”項的有關規定，立即進行標本的巨檢、取材和記錄。(二)主持快速活檢的病理醫師應親自參與標本的巨檢和取材（或指導取材）。

(三)通常選取具有代表性的病變組織1～2塊，需要時，增加取材塊數。

七、組織切片的制備(一)冷凍切片

1、完成冷凍HE染色切片制備的時間通常應為20～25分鐘。

2、恒冷箱切片機制片：至少應于切片前1小時開機預冷，冷室溫度一般為-15～-20℃。常規開展冷凍切片快速病理學診斷的病理科，恒冷箱切片機宜處于24小時恒溫待機狀態。

3、其他方法的冷凍切片制備參見第3章第一節。(二)快速石蠟切片

1、完成快速石蠟－HE染色切片的時間通常為30分鐘。

2、快速石蠟切片的制備方法參見第3章第一節。(三)制備好的冷凍／快速石蠟-HE染色切片，加貼標有本病理科病理號的標簽后，立即交由主檢病理醫師進行診斷。

八、手術中快速活檢會診意見及其簽發

(一)有條件時病理科宜由兩位病理醫師共同簽署快速活檢的病理診斷意見。對于病變疑難、手術切除范圍廣泛和會嚴重致殘的手術中快速活檢，應由兩位高級稱職的病理醫師共同簽署會診意見。主檢病理醫師簽名的字跡應能辨認。

(二)快速活檢診斷意見一般在收到送檢標本后40分鐘內發出；同一時間段內相繼收到的多例患者標本或是同一例患者的多次標本，其發出報告的時間依次類推。對于疑難病變，可酌情延時報告。

(三)對于難以即時快速診斷的病變（例如病變不典型、交界性腫瘤病變或送檢組織不足以明確診斷等），主檢病理醫師應向手術醫師說明情況，恰如其分地簽發病理診斷意見或告知需要等待常規石蠟切片進一步明確病理診斷。

(四)主檢病理醫師簽署的快速活檢病理診斷意見，宜以文字形式報告（具體發出方式由各醫院自行決定）。快速活檢病理診斷意見報告書發出前應認真核對無誤。

九、冷凍切片后剩余組織的處理

(一)冷凍切片后剩余的冷凍組織（簡稱 “凍對”）和冷凍切片取材后剩余、未曾冷凍的組織（簡稱“凍剩”），均應保存，用以制備常規石蠟切片，以便與冷凍切片進行對照觀察。

（二）“凍對”／“凍剩”組織的蠟塊和切片需與同一病例手術后送檢的切除標本編為同一病理號，并作出綜合性診斷。(三)當冷凍切片病理診斷意見與其“凍對”組織的常規石蠟-HE片的病理診斷不一致時，該例的病理診斷一般應以石蠟-HE片診斷為準。

十、資料管理

手術中快速活體組織病理學檢查的資料必須妥善管理，有關規定參見本章第五節。

第三節 細胞病理學檢查常規

一、申請單和標本的驗收、編號和登記

(一)病理科應參照本章第一節（常規活體組織病理學檢查常規）中“一”和“二”項的規定，進行細胞病理學檢查(細胞學檢查)申請單和標本的驗收、編號和登記。

(二)用于細胞學檢查的標本必須新鮮，取材后應盡快送至病理科(或細胞病理學室,下同)；病理科核驗檢材無誤后，應盡快進行涂片和染色。

(三)病理科驗收標本人員不得對申請單中由臨床醫師填寫的各項內容進行改動。

二、細胞涂片、組織印片和壓片的基本要求

(一)細胞涂片、組織印片和壓片（參見第3章第二節）。

(二)腫物細針穿刺物涂片

1、應由掌握細針穿刺技術的注冊醫師或注冊助理醫師，按照 細針穿刺技術操作常規，親自對確有適應癥且無禁忌癥的患者采取穿刺物。

2、適應癥：通常為：

(1)淺表腫物：乳腺、甲狀腺、涎腺、淋巴結、前列腺、皮下軟組織和骨等。

(2)胸腔腫物：肺、胸膜和縱隔等。

(3)腹腔腫物：肝、胰、腎、腎上腺、腹腔內、腹膜后和盆腔內等。

(4)顱內腫物。

3、禁忌癥：患者有難以控制的咳嗽、肺動脈高壓癥、進行性肺氣腫、出血性體質及“暈針史”等。

（三）對于核驗無誤的送檢標本，應立即依序進行：①涂片、印片或壓片，②固定和③染色。

三、細胞病理學診斷報告書及其簽發

(一)細胞病理學診斷可為臨床醫師診斷疾病（尤其是腫瘤）提供重要參考依據。

(二)細胞病理學診斷報告書必須由具有主檢資格的注冊病理醫師簽署后發出。主檢病理醫師簽名的字跡應能辨認。(三)細胞病理學診斷表述的基本類型

1、直接表述性診斷：適用于穿刺標本的細胞病理學診斷報告。根據形態學觀察的實際情況，對于某種疾病／病變做出肯定性（Ⅰ類）、不同程度意向性（Ⅱ類）細胞學診斷，或是提供形態描 述性（Ⅲ類）細胞學診斷，或是告知無法做出（Ⅳ類）細胞學診斷。[參考本章第一節的八(一)項：“病理學診斷表述的基本類型”]

2、間接分級性診斷：用于查找惡性腫瘤細胞的診斷。Ⅰ級：未見惡性細胞 Ⅱ級：查見核異質細胞 Ⅱa：輕度核異質細胞 Ⅱb：重度核異質細胞 Ⅲ級：查見可疑惡性細胞 Ⅳ級：查見高度可疑惡性細胞 Ⅴ級：查見惡性細胞

(四)細胞病理學診斷的局限性（假陰性或假陽性診斷）

1、假陰性：是指在惡性腫瘤患者的有關標本中未能查見惡性細胞。假陰性率一般為10%左右。因此，細胞病理學檢查的陰性結果并不能否定臨床醫師的惡性腫瘤診斷。

2、假陽性：是指在非惡性腫瘤患者的有關標本中查見了“惡性細胞”。假陽性率通常≤1%。因此，細胞病理學診斷應密切結合患者的臨床資料，對于臨床上未考慮為惡性腫瘤患者的陽性細胞學診斷應持慎重態度。

(五)細胞病理學診斷報告書的基本內容

1、患者的基本情況項目，包括病理號、姓名、性別、年齡、送檢醫院／科室（住院／門診）、住院號／門診號、送檢／收驗日 期等。

2、細胞病理學診斷的表述（參見上項“細胞病理學診斷報告表述的基本類型”）。

3、必要時或條件允許時，可酌情就細胞病理學診斷及其相關問題附加：①某些建議（例如進行其他有關檢查、再做活檢、病理科外病理學會診、密切隨查/隨訪等）；②注釋／討論。

4、經過本病理科或/和科外病理會診的病例，可將各方的細胞病理學診斷意見附于該例的細胞病理學診斷報告書中。(六)細胞病理學診斷報告書的書寫要求

1、參照本章第一節（“常規活體組織病理學檢查常規”）中“八

（二）”項的有關規定。

2、計算機圖文打印的細胞病理學診斷報告書提供的細胞學圖象應具有典型（代表）性，放大倍數適當。(七)細胞病理學診斷報告書的發送

1、病理科自接受送檢標本至簽發細胞病理學診斷報告書的時間，一般情況下為1～2個工作日。

2、因某些原因（包括特殊染色、免疫組化染色、疑難會診等）不能如期簽發細胞病理學診斷報告書時，應以口頭或書面告知有關臨床醫師或患方，說明遲發報告書的原因。

3、病理科應有專人發送細胞病理學診斷報告書。住院患者的細胞病理學診斷報告書應發送至有關臨床科室；本院門診患者和外院患者的細胞病理學診斷報告書的發送方法由各醫院病理科自行制 定。

4、細胞病理學診斷報告書的經收人員（包括患方人員）必須履行病理科規定的簽收手續。

5、已由病理科發出的細胞病理學診斷報告書被遺失時，一般不予補發；必要時，經病理科主任同意可以抄件形式補發。

四、資料管理

細胞病理學檢查的資料必須妥善管理，有關規定參見本章第四節。

第四節 病理學檢查資料的管理

一、概

述

(一)常規活檢、手術中快速活檢、細胞病理學檢查和尸檢等的文字資料（含電子信息資料）、非文字資料（組織的石蠟包埋塊、切片等）以及其他相關資料均為有價值的醫學資料，皆由受理病理學檢查的病理科按照本規范規定的期限妥為保存。病理科必須設立病理檔案資料室和制訂病理檔案資料管理制度（包括病理檢查資料的歸檔、借用和歸還手續等），并有專人管理。應積極實行病理學檢查資料的計算機管理。

(二)各種病理學檢查的文字資料應裝訂成冊保存。

(三)據以做出常規活檢、快速活檢、尸檢病理學診斷的原始組織學切片和查見腫瘤細胞或可疑腫瘤細胞的玻片必須妥善保存。未查見惡性腫瘤細胞的玻片，于診斷報告書發出后保存2周。

二、患者查詢病理學檢查資料的期限(一)門診患者為送檢后15年。(二)住院患者為送檢后30年。

三、活檢、尸檢大體標本的保存期限

(一)活檢：自簽發病理學診斷報告書之日起保存2～4周，具體保存期限由各醫院自行規定。

四、病理學檢查資料的借用

(一)醫院必須制訂關于借用病理學檢查資料的辦法并嚴格實施。

(二)關于患方借用病理組織學切片，應注意：

1、患方人員申請借用有關患者的活檢切片、尸檢切片時，應按照醫院制定的有關規定辦理手續。

2、申請借用切片的患方人員必須：①出示本人身份證等有效證件并保留其復印件；②填寫借片申請單并簽名；③支付規定的借片押金（待歸還切片時退還）。

3、病理科據以作出診斷的原始切片一般不外借，通常借出（或售出）相關病例的復制切片。復制切片借出（或售出）前，應確認該切片的病變與原切片相同或基本相同。

4、患方借出的切片應妥善保存，必須在規定的期限內歸還。患方借出的切片若有破損、丟失等，應按規定支付賠償金，并承擔相應責任。

5、病理科因故不能向患方出借或出售有關切片時，由雙方協商解決病理學會診問題。病理科可酌情允許患方邀請外院的病理醫 師前來病理科閱片；有條件的單位可酌情進行遠程病理會診。

(三)關于患方借用細胞病理學玻片

1、一個病例的同一次檢查有多張查見惡性腫瘤細胞的“陽性片”或“可疑陽性片”時，可允許患方借用其中的一張。借用手續參見上項(二)。

2、一個病例僅有一張為查見惡性腫瘤細胞的“陽性片”或“可疑陽性片”時，該陽性片或可疑陽性片原則上不予外借。其會診問題由雙方協商解決。病理科可酌情允許患方邀請外院的病理醫師前來病理科閱片。

(四)關于借用檢材組織的石蠟包埋塊

1、活檢和尸檢檢材組織的石蠟包埋塊（簡稱蠟塊）是無法復制的病理學檢查資料，屬于診斷病理學的重要基礎檔案，原則上不外借。必要時，可由病理科向患方提供未經染色的切片（通稱白片）。

2、患方外借病理切片會診時，受理會診的病理科若確實需要有關病例病理檢材的蠟塊，可由有關病理科雙方協商解決。

第五節 病理學會診

一、具有一定規模的病理科應定期舉行科內病理會診或讀片討論會。

二、積極推動建立地域性病理會診中心。

三、加強臨床－病理會診。

四、應由具有高級職稱的病理醫師接受病理科內、外的病理學 會診。

五、接受外院的病理會診時，由會診的病理醫師簽發《病理學會診咨詢意見書》，并在該《意見書》上寫明：“病理醫師個人會診咨詢意見，僅供原病理診斷的病理醫師參考”。由作出原病理診斷的病理醫師自行決定是否采納病理會診咨詢意見和采納的程度。做出原診斷的病理科應將《病理會診咨詢意見書》的原件或其復印件貼附于有關患者的病理檢查記錄單上，一并歸檔。

六、加做相關技術檢測方能作出診斷的會診病例，會診醫師應在《意見書》中予以說明，并向患方進行適當解釋。

七、對病理診斷時間較為長久病例的會診，應考慮到做出原診斷時期的診斷病理學理論、技術水平、相應病變／疾病的定性診斷標準和原診斷病理科當時的客觀條件。

八、有條件的病理科可開展遠程病理會診。

第六節 病理科的基本設施

一、病理科基本設施的指導原則(一)保證病理科完成基本工作任務。(二)保護病理工作人員免受污染。(三)保護環境免受污染。

二、病理科的基本工作空間

(一)病理科的常規工作需要在下列的各自獨立的房間內進行：

1、收發室（檢材的接收、登記，病理診斷報告書的發放，病理資料查詢等）

2、巨檢和取材室（檢材的肉眼檢查和切取組織塊，貯存取材后的剩余檢材）

3、常規切片前的預處理室（組織塊的脫水、透明和浸蠟）

4、制片室（石蠟切片／冷凍切片／細胞學涂片的制做和染色）

5、病理組織學診斷室

6、細胞病理學診斷（酌情附設組織穿刺室）

7、病理會診室

8、病理檔案資料室

9、大體標本制作室和陳列室

10、儲藏室

(二)病理標本巨檢和取材室

1、便于清洗、消毒的屋頂、室壁和地面裝修

2、室內紫外線消毒設備

3、室內高效通風設施

4、封閉式高效能通風柜廚(用于巨檢和取材，應便于清洗、消毒，并安裝足夠照明和紫外線消毒設備)

5、合于個人和環境防污染要求的上、下水系統（包括獨立的污水排泄系統和污水處理池）

6、流水沖洗裝臵

7、冷水和熱水供給系統

8、標本儲存柜（安裝排風設備）

9、隔離服裝（消毒后使用）

10、其他相關設備。

(三)常規切片的預處理室和常規/快速制片室

1、排放有毒物質的室內高效通風設施（用于組織塊和石蠟切片的人工脫水流程）

2、符合個人和環境防污染要求的上、下水系統（包括獨立的污水排泄系統和污水處理池）

3、室內紫外線消毒設備

4、封閉式高效能通風柜廚（用于人工脫水流程）

5、實驗臺

6、脫水設備：①人工脫水器具或/和②半自動或全封閉自動脫水機

7、組織塊石蠟包埋機

8、石蠟切片機 *9．恒溫冷凍切片機

*10．石蠟快速切片機 ［* 9和10：兩項皆配備或配備一項］ #11．一次性切片刀及其配套部件

#12．切片刀和磨刀機［# 11和12：兩項皆配備或配備一項］

13、冰箱

14、恒溫箱

15、烤箱

16、有關試劑和試劑柜

17、天平

18、染色用器具

19、普通光學顯微鏡（用于染色質量控制）20、其他相關設備

(四)特殊染色和免疫組織化學染色實驗室

1、用于染色的實驗室環境設施和染色的常規設備［參見上文：(三)常規切片的預處理室和制片室］

2、微波爐或其他抗原修復設備

3、有關試劑和試劑柜

4、其他相關設備

(五)病理組織學診斷室和病理會診室

1、雙筒顯微鏡（每名病理醫師配備一臺）

*

2、雙頭和／或多頭顯微鏡（用于共覽會診和培訓示教）*

3、計算機和打印機（酌情連接局域網，用于病理學檢查資料的儲存和調閱）

*4．顯微攝影設備，計算機圖像分析、電子圖像存儲和放映設備

[* 2～4：具有一定規模的病理科配臵]

5、其他相關設備(六)病理檔案資料室

1、用于儲存切片、蠟塊和文字資料的柜具

2、計算機和打印機（酌情連接局域網，用于病理學檢查資料的儲存和調閱）

3、其他相關設備

(七)必要的專業參考書和基本的專業期刊（具有一定規模的病理科應設立圖書資料室）

(八)病理大體標本制作室和陳列室

1、制作病理大體標本的工具

2、其他相關設備

(九)辦公室：必要的辦公設備(十)儲藏室：必要設施(十一)淋浴室：必備設施

四、細胞病理學檢查工作的基本設施(一)腫物穿刺取材室：

1、便于清洗、消毒的屋頂、室壁和地面裝修

2、室內紫外線消毒設備

3、用于實施穿刺術的檢查床、椅

4、穿刺用器械和器械柜

5、穿刺用、急救用藥物和藥品柜

6、其他相關設備(二)細胞學涂片制片室：

1、用于染色的實驗室環境設施和常規設備［參見本節的三(三)項：“常規切片的預處理室和常規／快速制片室”］)

2、可調速離心機

3、自動細胞病理學檢查系統（具有一定規模的病理科，酌 情）

4、其他相關設備

(三)細胞病理學診斷室：參見本節的三(五)項（病理組織學診斷室和病理會診室）。

第三章 病理學基本技術規范 第一節 病理組織學診斷檢材的制備技術

一、組織的固定

㈠凡需要進行病理組織學檢查的標本（器官或組織），于離體（活體或尸體）后，應盡快臵放（浸泡）于裝有足夠量固定液的容器中固定。固定液量應為被固定標本體積的5~10倍。臵放標本的容器大小視標本和固定液的體積而定，應適當大一些。臨床科室切取的標本臵放于容器中固定后，應盡快送交病理科繼續固定。未能及時、充分固定的干涸或腐敗標本不能再進行固定和用于制做切片。

㈡常規固定液為4%中性甲醛（10%中性福爾馬林），應預先多量配制貯存，以備隨時使用。小標本的固定時間為4——6小時，大標本為18——24小時或更久。

㈢根據病理學特殊檢查（特殊染色和組織化學染色、免疫組織化學染色和原位核酸分子雜交染色、電鏡觀察等）的需要，應選用其他適宜的固定液進行固定［參見后述的“㈦固定液的常用種類和制備”］。

㈣器官、組織固定的基本方法 ［另參見本章第四節（病理標本的肉眼檢查和組織學切片取材技術）］

1、食管、胃、腸、膽囊、膀胱等空腔器官：依規范方法剪開后，按其自然狀態平鋪于硬紙板上（重點暴露黏膜面或內表面的病變處），并用大頭針將標本邊緣處固定于紙板上，然后放入4%中性甲醛中固定（黏膜面或內表面朝向容器的液面，并覆蓋薄層脫脂棉）。

2、肝、脾：由器官背面，沿其長軸每間隔1.5~2.0cm縱向平行剖開，切成數片。將每片肝或脾輕輕地平放于裝有4%中性甲醛的容器中，容器底面襯以脫脂棉。應避免標本彎曲和相互間的疊壓。

3、肺葉：放入固定液中的肺葉漂浮于液面，需在肺表面覆蓋薄層脫脂棉。必要時從支氣管注入適量4%中性甲醛。

4、腎：沿腎外緣中線朝腎門方向作一水平切面（深達于腎盞），再行固定。

5、淋巴結：先用4%中性甲醛固定1小時后，再沿其長軸切成數片（厚2 ——3mm），繼續固定。

6、骨組織：先鋸成小片（若是長骨應作橫向鋸片），在4%中性甲醛中固定24小時后，再進行脫鈣。

7、微小組織或液體沉淀物：先用拭紙或濾紙妥為包裹（需用大頭針扎牢），然后放入專用小盒內進行中性4%甲醛固定，以防檢材遺失。

8、凡進入固定程序的標本必須連帶其正確無誤的病理檢驗號（病理號）。

㈤多數固定液對人體有害，需要防護，必須在封閉的通風條件下進行操作。

㈥組織塊的切取和固定：①由較大標本切取用于制作切片的組織塊（取材）時，應與標本的斷面平行，組織塊厚度一般為0.3 cm(不應>0.5cm)，面積一般在1——1.5×1——1.5以內。②切取組織塊的形狀，在充分包括肉眼病變的前提下盡量規則些（例如方形、矩形、三角形等）；由一個標本切取的多塊組織的形狀有所不同，便于蠟塊與其相應切片的核對。③固定組織塊的固定液量，一般應為組織塊總體積的5~10倍以上。④室內常溫（25℃左右）下的固定時間為3~24小時；低溫（4℃）下的固定時間應延長。⑤固定組織塊的容器要大一些。⑥組織塊固定期間需要間斷地輕搖或攪動固定液以利于固定液的滲入。

㈦常用固定液 1、4%中性甲醛（10%中性福爾馬林）固定液

甲醛（40%）

ml 無水磷酸氫二鈉

6.5g 磷酸二氫鈉

4.0g 蒸餾水

900ml

2、乙醇－甲醛（酒精－福爾馬林，AF）固定液 甲醛（40%）100ml

95%乙醇 900ml ［說明］一般組織塊經乙醇－甲醛固定1～2小時后，即可移入95%乙醇內脫水。

3、Carnoy固定液 無水乙醇 60ml 氯仿 30ml 冰醋酸 10ml ［說明］組織化學染色的常用固定液，組織經Carnoy液固定1～2小時后，即可移入無水乙醇中脫水。

4、Zenker固定液 升汞 5.0g 重鉻酸鉀 2.5g 硫酸鈉 1.0g 蒸餾水（加至）

100ml ［說明］配制本液時，先將升汞溶于蒸餾水中、加溫至40～50℃溶解后，再加入重鉻酸鉀，最后加入硫酸鈉，貯存待用。使用前加入5ml冰醋酸，混合。組織塊需固定12~24小時。切片染色前，需進行脫汞沉淀處理。

5、Bouin固定液

飽和苦味酸水溶液（約1.22%）75ml 甲醛（40%）

25ml

冰醋酸

5ml

［說明］本液臨用時配制。組織塊臵于Bouin液固定12～24小時即可（小塊組織只需固定數小時）。經Bouin液固定的組織被苦味酸染成黃色，可用水洗滌12小時后進入乙醇脫水（兼脫色）。不必將組織中的黃色除凈（殘存于組織中的苦味酸無礙染色）

6、過碘酸－賴氨酸－多聚甲醛固定液（PLP）A液： 賴氨酸

1.827g

蒸餾水

50ml 0.1mol/L磷酸鹽緩沖液(pH7.4)

50ml

B液：8%多聚甲醛水溶液

100ml ［說明］本液臨用時配制：取A液3份、B液1份，混合后，加入過碘酸鈉，使液體終濃度為2%。組織塊在4℃下固定36~54小時。本液對細胞結構和抗原性保存較好。

7、B5（醋酸鈉－升汞－甲醛）固定液 無水醋酸鈉 1.25g 升汞 6.0g 蒸餾水 90ml ［說明］將以上物質混合、溶解，使用前加入甲醛10ml。本液多用于固定淋巴組織。染色前應進行脫汞沉淀處理。如不加甲醛稱為B4固定液（蒸餾水為100 ml）。

8、丙酮固定液

冷丙酮（4℃）固定液用于酶組織化學染色。細胞標本的免疫組化染色也常用冷丙酮固定10分鐘。

二、常規石蠟包埋組織切片（常規切片）的制備

㈠組織塊依序進行：①水洗，②脫水，③透明，④浸蠟，⑤包埋和⑥切片。

㈡組織切片制備及其HE染色過程中使用的乙醇、丙酮、二甲苯、石蠟等為易燃、有毒物，必須專人管理，2m以內不得有明火，局部環境應有良好的通風和消防設施。

㈢常規切片的手工操作（步驟次序和各步驟的持續時間）

1、水洗：用流水沖洗已經固定的組織塊30min。

2、脫水（常溫下）

（1）乙醇－甲醛（AF）液固定

60~120min（2）80%乙醇

60~120min（3）95%乙醇Ⅰ

60~120min（4）95%乙醇Ⅱ

60~120min（5）無水乙醇Ⅰ

60~120min（6）無水乙醇Ⅱ

60~120min（7）無水乙醇Ⅲ

60min ［注意事項］①未經充分固定的組織不得進入脫水程序。②用于脫水的試劑容積應為組織塊總體積的5～10倍以上。③自低濃度乙醇向高濃度乙醇逐級移進脫水。④脫水試劑應及時過濾、更換（500ml乙醇可用于500個組織塊脫水；加入硫酸銅的無水乙醇變藍時，提示需要更換）。⑤較大組織塊的脫水時間長于較小者，應將兩者分開進行脫水。⑥組織臵于無水乙醇內的時間不宜過長（以

免硬化）。⑦丙酮脫水性能強，會使組織塊過縮、硬脆，不宜用以替代無水乙醇。

3、透明

（1）二甲苯Ⅰ

20min（2）二甲苯Ⅱ

20min（3）二甲苯Ⅲ

20min ［注意事項］①二甲苯的容積應為組織塊總體積的5～10倍以上。②組織塊在二甲苯中透明的時間不宜過長（以防組織硬、脆），并依不同種類組織及其大小而異；組織呈現棕黃或暗紅色透明即可。③二甲苯應及時過濾、更換。④組織經二甲苯適度處理后不顯透明時，常提示該組織的固定或脫水不充分，應查找原因并妥善處理。

4、浸蠟

（1）石蠟Ⅰ（45-50℃）

60min（2）石蠟Ⅱ（56-58℃）

60min（3）石蠟Ⅲ（56-58℃）

60min ［注意事項］①熔化石蠟必須有專人負責，必須在熔蠟箱內或水浴中（70℃）進行，不得用明火加溫。②熔蠟的容積應為組織塊總體積的5～10倍以上。③組織塊經二甲苯適度透明后方可轉入浸蠟過程，應盡可能減少將透明后組織塊表面的二甲苯帶入熔蠟中。④浸蠟時間適宜，過短時浸蠟不充分（組織過軟），過長時組織硬脆。⑤熔蠟應及時過濾、更換。

5、包埋

36（1）先將熔化的石蠟傾入包埋模具中，再用加熱的彎曲鈍頭鑷子輕輕夾取已經過浸蠟的組織塊，使組織塊的最大面或被特別指定處的組織面向下埋入熔蠟中；應將組織塊平正地臵放于包埋模具底面的中央處；包埋于同一蠟塊內的多塊細小組織應彼此靠近并位于同一平面上；腔壁、皮膚和黏膜組織必須垂直包埋（立埋）。

（2）將與組織塊相關的病理號小條臵入包埋模具內熔蠟的一側。

（3）待包埋模具內的熔蠟表面凝固后，即將模具移入冷水中加速凝固。

（4）從包埋模具中取出凝固的包埋蠟塊（簡稱蠟快），用刀片去除組織塊周圍的過多石蠟（組織塊周圍保留1~2mm石蠟為宜）。將包埋蠟塊修整成為規則的正方形或長方形。

（5）將病理號小條牢固地烙貼在蠟塊一側（編號應清晰可見）。

（6）把修整好的蠟塊烙貼在支持器上，以備切片。

（7）使用包埋機的方法按有關廠商的說明書操作。

（8）注意事項

①應將組織塊嚴格分件包埋。包埋時一定要首先認真核對組織塊的病理號（包括亞號）、塊數和取材醫師對包埋面的要求，準確地包入相應的病理號小條。發生包埋差錯時，必須立即與取材醫師和病理科當班負責人取得聯系，及時處臵。

②必須嚴防各種異物污染，勿將無關組織（包括縫線、紙屑或

其他異物（尤其是硬質異物）埋入蠟塊內。

③包埋過程要操作迅速，以免組織塊尚未埋妥前熔蠟凝固。

④包埋用的熔蠟應純凈，熔點適宜。浸蠟Ⅰ用軟蠟（熔點為45~50℃），浸蠟Ⅱ、Ⅲ和包埋用蠟均用硬蠟（熔點為56~58℃）。

⑤包埋用熔蠟使用前應將先靜臵沉淀、過濾。

⑥熔蠟時不得使用明火，以防燃燒。包埋用熔蠟的溫度應<65℃；包埋用的鑷子不可加溫過高，以免燙傷組織。

6、切片

（1）切片刀或一次性切片刀片必須鋒利。使用切片刀時，必須精心磨備（在低倍顯微鏡下確認刀刃無缺口）；使用一次性切片刀片時，應及時更新。

（2）載玻片必須潔凈、光亮。

（3）將切片刀或刀片安裝在持刀座上（以15°為宜）。

（4）將蠟塊固定于持支持器上，并調整蠟塊和刀刃至適當位臵（刀刃與蠟塊表面呈5°夾角）。

（5）細心移動刀座或蠟塊支持器，使蠟塊與刀刃接觸，旋緊刀座和蠟塊支持器。

（6）修塊（粗切）：用右手勻速旋轉切片機輪，修切蠟塊表面至包埋其中的組織塊完整地全部切到。修塊粗切片的厚度為15～20μm。［注意：對于醫囑再次深切片（特別是在原切片中發現了有意義病變而進行的深切片），應盡量少修塊，以盡量好地獲

得有關病變的連續性。］

（7）調節切片厚度調節器（一般為4-6μm），進行切片，切出的蠟片應連續成帶，完整無缺，厚度適宜（3～5μm）、均勻，無刀痕、顫痕、皺折、開裂、缺損、松解等。

（8）以專用小鑷子輕輕夾取完整、無刀痕、厚薄均勻的蠟片，放入伸展器的溫水中（45℃左右），使切片全面展開。［注意：必須水溫適宜、潔凈（尤其是水面）；每切完一個蠟塊后，必須認真清理水面，不得遺留其它病例的組織碎片，以免污染。］

（9）將蠟片附貼于涂有蛋白甘油或經3－氨丙基－三乙氧基硅烷(3-aminopropyltriethoxy silane，APES)處理過的載玻片上（HE染色時酌情使用，可省略，必要時）。蠟片應臵放在載玻片右（或左）2/3處的中央，留出載玻片左（或右）1/3的位臵用于貼附標簽。蠟片與載玻片之間無氣泡。

（10）必須立即在臵放了蠟片的載玻片一端（待貼標簽的一端），用優質記號筆或刻號筆準確、清楚標記其相應的病理號（包括亞號）。［注意：必須確保載玻片上的病理號與相關組織石蠟包埋塊的病理號完全一致，不得錯寫或漏寫病理號。］

（11）將臵放了蠟片的載玻片呈45℃角斜臵片刻；待載玻片上的水分流下后，將其臵于烤箱中烘烤（60～62℃，30-60min），然后即可進行染色。

（12）注意事項

①組織塊固定、脫水、透明和浸蠟的質量直接影響切片制備。

切片過程中遇到的困難首先應注意從切片前的上述各環節中尋找原因。

②切片機的質量是制備優質切片的重要前提。要使用質量好的切片機，規范地切片，精心維護切片機。

③經由內窺鏡、穿刺等獲取的細小組織，應間斷性連續切片多面（一般至少制備6張蠟片，必要時制備更多張）。需作特殊染色、免疫組化染色等的病例，可預制蠟片備用。

④切片人員應細心操作，防范被切片刀具割傷。

㈣常規切片的自動組織處理機操作（步驟次序和各步驟的持續時間，總計需要14小時）

1、乙醇－甲醛（AF）固定液

2×60min 2、95%乙醇Ⅰ

2×60min 3、95%乙醇Ⅱ

2×60min

4、無水乙醇Ⅰ

60min

5、無水乙醇Ⅱ

60min

6、二甲苯Ⅰ

30min

7、二甲苯Ⅱ

30min

8、石蠟Ⅰ

30min

9、石蠟Ⅱ

60min

10、石蠟Ⅲ

90min

11、包埋

（1）手工常規包埋：參見上述的“㈠手工操作”項。

40（2）用組織包埋機時，按有關廠商說明書的規定操作。

13、切片：參見上述的“㈠手工操作”項。

14、注意事項

（1）必須按有關說明書的規定，使用和維護自動組織處理機、包埋機、磨刀機、封蓋玻片機等儀器等。

（2）要嚴防因停電、機械故障等造成的組織塊損壞。一旦發生此類事故，必須及時向科主任報告，盡快采取應急措施妥善處臵。

（3）使用自動組織處理機時：①合理設定的運行時間（充分利用夜間）。②固定、脫水的環境溫度不得>30℃。③乙醇、二甲苯和熔蠟的容積，要大于組織塊總體積的5～10倍以上，并應經常過濾，保持清潔；應經常檢查試劑的濃度，及時更新。④對于多量組織塊，可按其大小分批進行處理；小塊組織可適當縮短處理時間。

三、快速石蠟包埋組織切片的制備

㈠煮沸固定切片法

1、固定：切取大小適宜（厚度<2mm）的組織塊，盡快臵入裝有5-8ml 10%中性4％甲醛的試管中煮沸1min，然后已入冷水中。

2、脫水

（1）將已經煮沸固定的組織塊取出，用刀片將其厚度修切至<1.5mm，隨即臵入盛有5-8 ml丙酮的試管中，煮沸2 min，然后將丙酮傾棄。

（2）再向該試管中重新加入5-8 ml丙酮并煮沸2min。如此

重復3-4次。

3、浸蠟：將已經丙酮脫水的組織塊由試管中取出，用吸水紙去除其表面液體，隨即臵入75~80℃熔化的石蠟中，待組織塊下沉、不再出現氣泡時（約需30s），即可包埋。

4、包埋、切片和染色。

（1）用熱鑷子將預制的蠟塊表面熔化，埋入已經浸蠟的組織塊。

（2）待埋入組織塊的蠟塊表面凝固后，即用載玻片輕壓蠟塊表面片刻，使蠟塊表面平整。

（3）將蠟塊臵入冰水中，使其變硬。

（4）迅速切片，裱片后用吸水紙去除載玻片上的水分。

（5）將載玻片用火焰烘干（勿距火焰太近）。

（6）迅速進行HE染色。

5、注意事項

（1）為了盡量縮短制片時間，必須預先作好有關準備工作，備齊取材用具、試管、固定液、丙酮、酒精燈、火柴（或其他引火器）、包埋用蠟塊、載玻片和染色試劑等，放在固定部位待用。

（2）全部制片過程一般在20~25min內完成。

（3）制片后剩余組織塊應作常規石蠟包埋切片染色，進一步診斷。

（4）含脂肪較多的組織，須經多次丙酮處理。

（5）用于組織固定、脫水、透明的試劑和浸蠟用的石蠟應及

時過濾、更換。

（6）丙酮、乙醇、二甲苯等為易燃物，進行上述各項流程時，2m距離內不得存在明火。加溫脫水和浸蠟過程必須應用隔水溫箱，不得使用干烤箱操作。

㈡超聲波快速處理儀石蠟切片法（參照有關廠商的說明書操作）。

四、冷凍組織切片的制備

㈠應用恒冷箱切片機制備切片：是目前最適用方法。恒冷箱切片機種類較多，應嚴格按有關廠商的說明書操作。用于切片的標本必須未曾固定。

㈡應用開放式冷凍切片機制備切片

1、二氧化碳制冷切片

（1）將組織塊放在冷凍臺上，滴加OCT或羥甲基纖維素液于組織塊周圍（將組織塊包埋），使固定在切片機上的切片刀接近組織塊表面。

（2）間斷開放液態二氧化碳桶的開關，噴凍組織塊和切片刀，使組織塊凍結和切片刀制冷。

（3）迅速移動切片刀進行切片：先將組織塊修平，然后調節厚度至8-12μm處進行切片。

（4）用毛筆將切片展開，貼附于載玻片上，稍干后，臵于冷凍切片固定液中固定1min，隨即進行HE染色。也可用毛筆將切片托入水中，再用玻璃彎針將切片移至染色皿中進行染色。

43（5）組織塊也可先在4%中性甲醛中煮沸固定1min，水洗后再行冷凍切片。

㈢注意事項

1、制作冷凍切片所需的試劑和設備等應處于隨時可供使用狀態。

2、切取的組織塊大小適宜（厚度<2mm），并盡快臵于冷凍組織切片機上制備切片。

3、調節冷凍程度，試切合適時便迅速切片。冷凍不足無法切片，冷凍過度切片易碎。

4、冷凍切片固定液（1）乙醚-乙醇液

無水乙醚

1份

95%乙醇

1份

（2）乙醇-冰醋酸液

95%乙醇

100ml

冰醋酸

3～5滴

第二節 細胞學診斷檢材的制備技術

一、細胞涂片、組織印片和壓片的制備

（一）涂片質量的基本要求

1、將檢材涂布于載玻片的右（或左）2/3處，另1/3部位粘貼標簽。

2、單向涂布檢材，避免細胞變形。

3、均勻涂布檢材，涂片厚薄適當。

4、紅細胞過多的涂片，可酌情進行溶解紅細胞處理。

（二）涂片方法

1、涂抹法：用棉簽或針頭將標本單向、均勻地涂抹于載玻片上。

2、拉片法：將一滴檢材臵于一張載玻片上，再用另一張載玻片疊加其上并予輕壓，再將該兩張載玻片朝反向拉動，從而獲得兩張涂片。

3、推片法：將一滴檢液臵于載玻片的右端，再用另一張窄邊光滑的載玻片作為推片，并以與滴液載玻片成40°夾角、自右向左勻力推動檢液，形成涂片。

（三）痰涂片的制作

1、送檢的痰液應是由肺內咳出，最好是清晨空腹時自肺內深咳出的痰液。

2、核查無誤的收驗痰液，應立即制作涂片（通常為2～3張）。

3、用細簽或無鉤鑷子挑取痰液臵于載玻片上，并左右往復薄涂，隨即投入固定液中。

4、痰液中呈現下列性狀的成分可能含有癌細胞，應注意挑取制作涂片：①血絲；②灰白色痰絲（形如白色細線，微細螺旋狀，牽引時可伸長）；③透明痰液（可拉成較長細絲）。［及時在細胞學檢查申請單上記錄痰液性狀］

5、檢查痰液中的腫瘤細胞，一般應連續送檢3次。

（四）黏膜、皮膚表面刮取（刷取、拉取）物和分泌物的涂片的制作

1、陰道排出物、子宮頸刮取物涂片：通常由婦產科醫師將已制作、固定后的涂片送交病理科檢查。［注意由子宮頸外口上皮移行帶刮取細胞涂片］

2、支氣管鏡、胃鏡等內腔鏡的黏膜刷取物涂片（黏膜刷片）：刷片通常由內腔鏡醫師制作、固定后送交病理科檢查。

3、食管、胃拉網涂片：由食管拉出的套網氣囊適量放氣后，將氣囊套網在載玻片滾動涂片，尤應將套囊上血絲、灰白色物制作涂片；涂片通常由有關臨床醫師將已制作、固定后的刷片送交病理科檢查。套網中的小塊組織可用來制作石蠟包埋切片。

4、眼、耳、鼻、咽、口腔、皮膚等處病變（潰瘍性病變等）的分泌物涂片。

（五）液體涂片的制作

液體標本（檢材）包括乳頭溢液、胸水、腹水、尿液、胃液、腦脊液、穿刺液、沖洗液、灌注液等。除乳頭溢液外，其他液體檢材一般均應先行離心（2000r/min，10～20min）后，取其沉淀物制作涂片；液體檢材也可用細胞涂片離心機（cytospin）直接制作細胞涂片。制作好的涂片應立即固定和染色。［及時在細胞學檢查申請單上記錄液體標本的性狀和數量］

液體標本的離心沉淀物較多時，將制作涂片后剩余的沉淀物固定于4％中性甲醛中1h，然后用檫鏡紙或綢布將其包裹，制作石蠟

包埋切片。

1、胸水和腹水

（1）由患者體內抽取的胸水或腹水應盡快送交病理科驗收，檢液量以200～500ml為宜。因故（例如遠途）延時送達時，需在標本中加入40%的甲醛（加入量為送檢胸水、腹水量的1/5），或加入等量的50％乙醇－生理鹽水。

（2）胸水、腹水的離心：采取容器底部的液體10ml（包括可能存在的沉淀物），移入離心管內進行離心。

（3）離心后，傾去全部上清液，將離心管底部含有沉淀物的液體搖勻并用吸管吸出適量，滴注于載玻片上，制作涂片。

2、尿液

（1）制作方法同胸、腹水。

（2）尿液含有膠狀物時，應先將其除去。清除方法：用0.5ml/L氫氧化鈉調節尿液Ph至6.0；離心后，傾去上清液，再向沉淀物中加入95%乙醇5～10ml／L（固定細胞），靜臵5min后加入蒸餾水并輕搖（溶去膠狀物）；再次離心后，取沉淀物制作涂片。檢查尿液中的腫瘤細胞，一般應連續送檢3次。

3、胃液、胃沖洗液：制作方法同胸、腹水。

4、腦脊液

（1）制作方法同胸、腹水。

（2）腦脊液內細胞一般較少，可用微孔濾膜過濾法、沉淀法或纖維捕捉法收集細胞，制作涂片。

5、沖洗液、灌洗液、穿刺液涂片的制作：參見上述的胸水、腹水項。

二、腫物細針穿刺物涂片的制備

（一）實施細針穿刺術前的準備工作

1、實施細針穿刺術的病理醫師應先了解患者臨床情況，向患者和/或患者授權人說明實施穿刺術的意義、局限性和其他相關問題等，取得患者和/或患方的知情和理解，并簽署由各醫院制訂的《申請實施細針穿刺術細胞病理學診斷患方知情同意書》。

2、合格的手術操作環境。

3、必備的適用手術器械和其他相關設施。

（二）腫物穿刺術的操作要點：

1、確認腫物部位并估計其大小、與皮表距離和質地（實／囊性、硬度等），以指導穿刺的方向、深度和用力程度。

2、必須嚴格實行無菌操作。

3、根據腫物大小及其血供情況選擇適用型號的穿刺用針頭。穿刺用針頭的外徑為0.6～0.9mm，安臵在2ml或10ml的一次性空注射器上。

4、針吸法穿刺術操作要點

（1）進行穿刺前，先將安裝了穿刺用針頭的空注射器管芯外拉2cm；然后，用手固定腫物，將安裝在空注射器上的穿刺用針頭刺入腫物（注射器內無空氣）。

（2）迅速上下提插注射器管芯10～20次（其間變換針頭方向

3～4次），遂使腫物不同部位的多較內容吸進入針頭和注射器內。

（3）將注射器與針頭分離（管內負壓因而解除）；隨后，再將該注射器與仍插于腫物內的針頭相接，拔出針頭，穿刺結束。

（4）迅速推動注射器的管芯，盡快地將位于穿刺針頭內的少量吸出物排射在2～3張清潔的載玻片上，進行涂片。

5、涂片方法：用針頭將載玻片上的吸出物輕輕均勻撥開，或用推片法朝一個方向展開（不可雙向往返推移）。

6、吸出物過少時，可用向離心管內沖洗穿刺針頭；再將沖洗液離心，然后取其沉淀物涂片［參見上述一

（五）項“液體涂片的制作”］。

7、吸出物較多時，可適量50％乙醇－生理鹽水液將涂片后注射器和針頭內剩余的吸出物沖洗至離心管中，離心后，取其沉淀物制作常規石蠟包埋切片。

8、吸出物中含有細小組織塊時，應將其制作常規石蠟包埋切片。

9、內臟腫物穿刺時，必須在影象學檢查的引導下用較長細針進行穿刺。

10、穿刺操作完成后，即在細胞病理學檢查單上書寫穿刺記錄。

三、組織印片、壓片的制備

（一）組織印片：

1、用鋒利刀片剖開剛切取的新鮮腫瘤組織或淋巴結等，然后用清潔載玻片輕壓于組織剖面處，將組織表面的細胞成分印在玻片上。用稍微加溫的載玻片制備印片時，可印得較多細胞。

2、制作淋巴結印片前，應先用濾紙吸去淋巴結切面上的血液、組織液。

（二）壓片：

1、選取微小薄片組織平鋪于一張載玻片上，再用另一張載玻片疊加其上并予輕壓。

2、腦組織質軟，易于制作壓片；稍硬的組織需切成細碎薄片制作壓片。

四、涂片的固定

（一）用于HE染色和巴氏染色的涂片必須濕固定，即涂片后立即進行固定。乳頭溢液涂片和液體標本離心沉淀物涂片，應待涂膜潮干（即周膜稍干而其中央區域未干）時進行固定。用于瑞氏染色、May-Grünwald姬姆薩染色和免疫細胞化學染色的涂片，必須干固定，即待涂片稍干后再進行固定。

（二）固定液

1、乙醇－冰醋酸液：95%乙醇∶冰醋酸＝99∶1。常用。

2、乙醇－乙醚液：95%乙醇49.5ml, 乙醚49.5ml, 冰醋酸1ml。較常用。

3、甲醇：滴加在干燥涂片上，用于瑞氏染色、May-Grünwald姬姆薩染色和免疫細胞化學染色。