第一篇：微生物檢驗人員的生物安全防范措施

微生物檢驗人員的生物安全防范措施

【摘要】微生物檢驗實驗室最常見的潛在感染因素有，化學感染、生物感染、物理感染以及檢驗人員的主觀因素等。本文主要對微生物檢驗人員的生物安全防范措施進行分析，以控制、預防感染為主要目的。

【關鍵詞】微生物；檢驗人員；生物安全；防范措施 前言

對微生物進行檢驗的過程中，均有可能出現出現意外事故，而出現意外事故的主要原因為檢驗人員的安全防護意識相對較差，加上實驗室的管理制度較為落后，以及實驗室的消毒與清潔工作不到位等。出現的意外事故會對檢驗人員的生命安全產生較大的威脅，并且會對生物安全的防護工作產生較大的影響。因此，制定安全、有效的防護措施，能夠對于微生物檢驗人員的人身安全有一定的保護，并且具有一定的重要性。1.微生物實驗室潛在的危險因素

在實驗室獲得性感染中，立克次體所占的比例最小，其次到病毒感染，細菌感染所占的比例最高。在細菌感染中衣原體感染的致死率相對較高，在病毒感染中肝炎病毒與委內瑞拉腦炎病毒的致死率相對較高。而哪些因素在實驗室感染中有一定的作用？

主觀因素：實驗室的工作量相對較大、檢驗的時間相對緊迫以及相關管理制度的不健全等，從而導致檢驗人員的對實驗室潛在的安全隱患認識相對淺薄，無菌操作的意識較為薄弱，并且自我保護意識相對較弱。檢驗人員在實際工作的過程中經常不按照相關工作流程來進行工作，在進行微生物檢驗的過程中經常出現不戴口罩、工作帽，不及時對手部進行進行清洗和消毒等情況。除此之外，還會出現部分檢驗人員戴著污染手套接聽電話、飲水、吸煙、進食或者是穿著工作服進入員工休息室等現象。

生物原因：大部分的微生物實驗室的設計并不科學，室內的通風效果相對較差，而在對微生物標本進行離心過程中，出現的標本外溢以及產生的氣溶膠會對工作臺、室內空氣以及實驗室地面產生較大的污染。而檢驗員經常接觸的標本均為肝炎、呼吸疾病等，該種標本在離心的過程中會對空氣的質量產生較大的影響。2.安全防護措施

2.1安全防護知識教育與宣傳

我國的醫療教育與管理模式相對落后、安全防護意識薄弱等因素，會給我國醫療事業以及科研事業產生一定的不良影響。為提升微生物檢驗人員的人身安全，增強檢驗人員的安全防護意識以及安全防護意識具有一定的重要性，因此，醫院管理人員需要組織院內微生物實驗室檢驗人員進行安全知識學習，讓檢驗人員能夠在提升自身技能知識的同時，重視人身安全保護。

除此之外，提升生物安全防范意識，一方面能夠讓檢驗人員了解到微生物對人體產生的危害，另一方面能夠對檢驗人員的生命安全起到一定的保障作用。檢驗人員在工作的過程中應該自覺遵守工作的相關制度，并且需要做好生物安全防范措施以及意外事故的處理方法，不斷在工作中提升對安全生產的重視程度，以確保自身的安全以及實驗室的安全。2.2建立健全相應管理制度與操作規范

建立健全相應的管理制度與操作規范，在一定程度上能夠避免檢驗人員遭受危險生物的侵害，讓檢驗人員的人身安全得到一定的保障。建立健全微生物實驗室安全管理制度，一方面能夠讓檢驗人員在實際工作的過程中嚴格按照相應的規章制度來進行實驗與生產，能夠最大限度地保護檢驗人員的人身安全。如此一來，不但能夠規范檢驗的工作流程，而且能夠保證檢驗人員的人生安全，讓檢驗人員能夠全身心投入工作。因此，建立健全相應的管理制度以操作規范能夠保障檢驗人員的生命安全，降低安全隱患的發生概率。2.3做好實驗室的消毒與清潔工作

實驗室的消毒與清潔工作對生物安全具有一定的保障作用，只有真正做到全面的消毒與清潔，才能夠為檢驗人員提供安全的工作環境。檢驗人員在對實驗室進行消毒與清潔的過程中，一定要做到先消毒后清潔，避免檢驗人員在次日的工作中觸摸或者接觸到被細菌沾染的物品，導致檢驗得出的結果受到影響，這些遺留的細菌極有可能對檢驗人員進行侵害。因此，必須對實驗室進行嚴格地消毒與清潔，避免對檢驗人員產生不必要的傷害。2.4廢物處理

工作人員需要采用相應的措施，對實驗室內產生的廢物進行相應的處理。在對實驗室廢物進行處理的過程中，管理人員需要進行實時監督，防止實驗廢物出現泄露、流失以及擴散等情況。因此，管理人員需要對專門對實驗室廢物進行收集、運輸以及處理等工作的負責人進行相應的培訓，加強工作人員的工作責任心。3.小結

采取有效且積極的個人防護措施在一定程度上能夠降低實驗室檢驗人員在實驗室內遭受細菌侵害的概率，并且能夠確保檢驗工作的順利進行，能夠提升整個部門的工作安全性。就目前而言，大部分微生物檢驗人員的安全防范意識較為薄弱，導致實驗室的安全事故時有發生，對檢驗人員的生命安全產生較大的影響和威脅，因此，采用有效的安全防護措施具有一定的作用和意義。在對微生物檢驗人員進行安全防護的過程中，需要對工作人員進行安全知識教育與宣傳，讓檢驗人員能夠明白安全工作的重要性，讓其能夠在實際工作的過程中提高警惕，提升對實驗室的安全生產的重視程度，降低安全事故的發生概率，以保證檢驗人員的人身安全。【參考文獻】

[1]李秀平,李爭鳴,張荔茗,等.模塊式教學在醫學檢驗技術專業微生物檢驗實驗中的實踐[J].中華醫學教育探索雜志,2015,14(06):575-579.[2]陳瓊,林麗英,唐曉華,等.微生物實驗實習生生物安全的教學探索[J].檢驗醫學與臨床,2015,12(08):1170-1171.[3]景嶸,景明.探討微生物檢驗科生物安全存在的防護措施[J].臨床醫藥文獻雜志,2015,2(30):6337-6338.[4]劉保彥,趙青,邢新麗,等.檢驗科微生物室生物安全與醫院感染隱患及預防控制[J].醫學檢驗與臨床,2015,26(04):66-68.[5]何惠珍.微生物檢驗人員生物安全防護探討[J].中國社區醫師,2016,32(04):183.

第二篇：微生物限度檢驗人員考試試題

2012年微生物限度檢查基礎知識考試試題 姓名： 分數：

一、填空題（1×35=35分）

1．微生物限度檢查和無菌檢查應在環境潔凈度 級的局部潔凈度 級的單向流空氣區域內進行。

2.除另有規定外，微生物限度檢查法中，細菌培養溫度為，培養時間為 ；霉菌、酵母菌培養溫度為，培養時間為 ；控制菌培養溫度為，培養時間為。

3.除另有規定外，一般供試品檢驗量為 或 ；膜劑為 ；、的檢驗量可以酌減。其中沙門菌的檢驗量為 或。

4.檢驗時應從 個以上最小包裝單位中抽取供試品，膜劑不得少于 片；一般應 抽取不少于檢驗用量 倍量的供試品。

5.試驗用菌株的傳代次數不得超過 代。從菌種保存中心獲得的冷凍干燥菌種為 代。菌液制備后若在室溫下放置，應在 小時內使用，若保存在，可在24小時內使用。

6.消除供試品抑菌活性的方法有、、、。

7.薄膜過濾法所用濾膜孔徑應不大于 um，直徑一般為50mm。若需要沖洗液沖洗濾膜，每張濾膜每次沖洗量為。總沖洗量不得超過。8.培養基配制的分裝量不得超過容器的，以免滅菌時溢出；配制后應在 內滅菌，避免細菌繁殖。

9.供試液制備若需水浴加溫時，溫度不應超過 ℃，供試液自制備至加入培養基不得超過 小時。

10.潔凈區測定沉降菌時，注入培養基的平皿應放置 分鐘。

二、單項選擇題（2×10=20分）

1.熱力滅菌法分干熱和濕熱滅菌兩類，并在同一溫度下濕熱滅菌效力較干熱滅菌效力要強這是因為（）

A、可迅速提高溫度 B、濕熱有一定潛熱、穿透力大，促進菌體蛋白凝固

C、迅速破壞細菌的酶系統 D、使細菌迅速失活 2.生物安全柜主要原理（）

A、干燥 B、空氣經濾膜除菌后定向流動 C、空氣定向流動 D、通風

3.培養基加入有供試品的平皿時的溫度不宜超過（）A、45℃ B、50℃ C、48℃ D、60℃

4.藥品微生物實驗室所檢測微生物的生物危害等級大部分為生物安全（）A、一級 B、二級 C、三級 D、四級

5.潔凈實驗室內的溫度應控制在（），相對濕度最好控制在（）A、20～25℃，40～60% B、10～30℃，50～70% C、15～25℃，50～70% D、18～26℃，40～60% 6.操作間或凈化工作臺的潔凈空氣對環境的相對正壓為（），操作間與緩沖間的相對正壓為（）

A、不低于10帕，不高于5帕 B、不高于10帕，不低于5帕 C、不低于10帕，不低于5帕 D、不低于5帕，不低于10帕

7．檢查結果如各稀釋級的平板均無菌落生長或僅最低稀釋級的平板有菌落生長，但平均菌落數小于1時，應報告（）A、0個 B、＜1 cfu C、0cfu D、＜1乘以最低稀釋倍數的值

8.微生物限度檢查法系檢查非規定滅菌制劑及其原料、輔料受微生物污染程度的方法，檢查項目包括（）檢查

A、細菌數和霉菌數 B、細菌數、霉菌數及酵母菌數 C、細菌數、霉菌數、酵母菌數及控制菌 D、細菌數、霉菌數、控制菌數 9.微生物限度檢查驗證試驗至少應進行（）次獨立的平行試驗，各試驗菌每次試驗的回收率應不低于（）

A、3，70% B、2，80% C、3，80% D、2，70% 10.細菌、霉菌及酵母菌計數方法驗證時試驗菌加入量規定為（）cfu，控制

菌計數方法驗證時試驗菌加入量規定為（）cfu。A、50～100,50～100 B、10～100,10～100 C、10～100,50～100 D、50～100,10～100

三、多項選擇題（3×5=15分）

1.常用的清毒劑的種類有：（）A.75%乙醇 B.甲醛 C.碘酊 D.0.1%新潔爾滅 E.乳酸

2.下列（）不是無菌操作法的特點

A.無菌操作法是一個殺菌的過程 B無菌操作法是一個抑菌的過程 C.無菌操作法是一個消毒的過程 D.無菌操作法只能保持原有的無菌度 E.無菌操作的目的僅是為了防止待檢品被環境中的微生物污染

3.2010版藥典附錄微生物限度檢查法中，可選用的稀釋液有（）A.pH7.0無菌氯化鈉－蛋白胨緩沖液 B.pH6.8無菌磷酸鹽緩沖液 C.pH7.6無菌磷酸鹽緩沖液 D.0.9%無菌氯化鈉溶液 E.pH7.0無菌磷酸鹽緩沖液 4.供試液的制備方法有（）A、勻漿法 B、研缽法 C、保溫振搖法 D、振搖法

5.以下哪些是影響集菌培養效果的因素（）

A.溫度和培養基 B.氧氣和光 C.抗生素 D.滲透壓 E、PH值和氧化還原電位

二、判斷題（2×10=20分）

1．融化培養基可以選擇用水浴或電爐直接加熱，一次未用完的封存好可以再次使用。（）

2．培養時每垛最多堆放6個平板，以保證各個平板的受熱均勻。（）3.配制培養基時若出現沉淀屬正常現象，無需過濾，可以直接使用。（）

4.濕熱滅菌條件就是指121℃15分鐘。（）

5.從事藥品微生物試驗工作的人員只要具備微生物學或相近專業知識的教育背景就可以直接上崗。（）

6.若同一稀釋級的兩個平板的菌落數小于15，則兩個平板的菌落數不能相差1倍或以上。（）

7.若營養瓊脂培養基上長有霉菌、酵母菌，玫瑰紅鈉瓊脂培養基上長有細菌，則應分別點計菌落數，合并計算后報告菌數。（）

8.對供試品進行微生物限度檢查時，如果使用了表面活性劑、中和劑或滅活劑，應證明其有效性及對微生物生長的存活無影響。（）9.平皿法操作時應先注入培養基，再加入1ml供試液。（）10.MUG陽性，靛基質陰性，判斷未檢出大腸埃希菌。（）

三、簡答題（2×5=10分）

1.簡述藥品染菌的可能原因。

2.列舉不少于五種的滅菌消毒方式。

一

1.1000、100

2.30～35℃，3天∕72h；23～28℃，5天∕120h；30～35℃，2天∕48h 3．10g，10ml，100cm；貴重藥品、微量包裝藥品；20g、20ml 4.2，4；隨機，3 5.5；0；2；2～8℃

6.培養基稀釋法、離心沉淀法、薄膜過濾法、中和法 7.0.45；100ml；1000ml 8.2／3，2h 9.45℃；1 10．30min

2二

BBABD

CDCAD 三

3.ABCDE;2.ABCE;3.ABCD;4.ABCD;5.ABCDE 四

×√×××

××√×× 五

1.一、二、三、四、2.水系統的內外部污染；

無菌室密封性差；環境衛生、個人衛生達不到要求； 設備和配件消毒不符合要求、物料物品消毒不徹底 生產中操作不當

1.濕熱滅菌 2.干熱滅菌 3.輻射滅菌 4.氣體滅菌 5.消毒劑滅菌 6.紫外照射滅菌

7.過濾滅菌

第三篇：微生物實驗室生物安全管理制度

微生物實驗室生物安全管理制度

第一章 總 則

1.為了加強病原微生物實驗室的生物安全管理，保護實驗室工作人員和公眾的健康，制定本制度。

2.醫院和科內實行對實驗室的實驗活動進行安全管理與監督。

3.實驗室實行分級管理，檢驗科微生物室為二級生物安全標準。

4.檢驗科負責微生物室日常活動的管理，承擔建立健全安全管理制度，檢查、維護實驗設施、設備，控制實驗室感染的職責。

第二章 生物安全水平

生物安全水平一般可分為四級：

a.生物安全水平Ⅰ級：用于已知的通常不引起健康成人感染，對實驗室人員和環境危害甚少的病原體，如大腸艾希氏菌等。

b.生物安全水平Ⅱ級：用于具有中度潛在危害的病原的實驗操作，主要防止通過皮膚黏膜及消化道的感染，實驗室應有進出規定程序，粘貼生物危險的警示標志。

c.生物安全水平Ⅲ級：用于可通過氣溶膠傳播的，能引起嚴重可致死性疾病的病原體，如結核分支桿菌等。

d.生物安全水平Ⅳ級：可用于可通過氣溶膠傳播的，能引起致死性感染的高風險劇毒病原的操作。同時還要有內部和外部進行對話的裝置，要有應急供氣、應急供電和應急出口等。

第三章 生物安全操作要求

實驗室操作要求分為標準微生物學操作（見微生物操作規程）和特殊操作，前者是指實驗室安全的共性要求，后者是指根據特定生物安全的級別提出的特殊要求。

安全裝備：為達到生物安全的目的，安全裝備包括兩部分，即操作設備、生物安全柜。二級實驗室必須有可提供一個無菌操作的生物安全柜。

個人防護用品：主要有工作服、隔離衣、防護服、工作帽罩、眼罩、面罩、手套，呼吸保護裝置及正壓氣體供應的工作服等。

第四章標本的采集、轉運和接收

微生物標本在接收時操作者要穿工作服、帶手套和口罩，必要時要戴眼罩，必須在生物安全

柜內執行嚴格操作。所有盛標本的容器必須是防漏的。在轉運時應密封，標本不可發生泄露。一旦發生泄露，應高壓滅菌處理。具有強感染性的標本轉運時要嚴格包裝，嚴格操作。標本的采集應由專人轉送，實驗室應由專人驗收和簽收。

第五章 生物廢物的安全處理

1.生物廢物包括培養物、分離物極其污染物，剩余標本極其污染物，尖銳破碎物，吸管、針頭和費包裝等。

2.生物廢物的安全處理要求：A.裝廢物的容器應防漏，堅固而不宜刺穿，密封并要避免裝的太滿。B.尖銳的破碎物要放入專用的硬質容器中。C.盛放生物廢物的容器應置入高壓滅菌袋中送去滅菌。D.所有能在實驗室消毒的物品在送出實驗室前盡可能先進行一次消毒處理。E.盛放生物廢物的容器要做到安全轉運。

第六章 安全應急措施

1.操作者暴露的處理A.立即報警并告知同事。B.立即用肥皂水清洗暴露表面，用洗眼液洗眼，用生理鹽水漱口。C.啟動應急治療。D.盡快向上級報告。

2.污染表面的處理A.立即報警并告知同事。B.隔離污染區。C.處理者穿戴適當的防護服。

D.用鑷子將污染物移入廢物桶。E.用干毛巾吸干，將消毒劑到在毛巾上，一段時間后仍入廢物桶。F.先后以消毒劑和酒精清洗污染表面。G.以適當方法對桶消毒。F.盡快報告上級。

第四篇：微生物實驗室生物安全操作規程

微生物實驗室生物安全操作規程(2017版)

Dr.Tiger

(修訂說明：CNAS-CL09實施后，對微生物實驗室的生物安全提高了要求，對實驗室人員在配制培養基過程的生物安全、高壓鍋的生物指示劑還有菌種的傳代次數均提出明確的要求，為適應新要求，對舊版的微生物實驗室生物安全操作過程作了補充，同時修改和完善了一些小問題)

一、目的

制訂本規則，保證實驗室工作人員的健康安全、實驗設備安全衛生以及防止對外界環境造成污染。

二、適用范圍

適用于所有進入微生物實驗室人員。實驗室工作人員必需嚴格遵守安全操作規程。

三、安全操作規程： 1.員工安全操作規程

1.1 實驗室入口處須貼上生物危險標志，注明危險因子、生物安全級別、負責人姓名和電話、進入實驗室的特殊要求及離開實驗室的程序。

1.2 禁止非工作人員進入實驗室。參觀實驗室等特殊情況須經實驗室負責人批準后方可進入，做好衛生防護，并在有關人員陪同下方可進入，同時注意做好環境維護及保密工作。

1.3 進行感染性實驗時，禁止他人進入實驗室，或必須經實驗室負責人同意后方可進入。免疫耐受或正在使用免疫抑制劑的工作人員必須經實驗室負責人同意方可在實驗室工作。

1.4 接觸微生物或含有微生物的物品后，脫掉手套后和離開實驗室前要洗手。1.5 禁止在工作區飲食、吸煙、處理隱形眼鏡、化妝及儲存食物。1.6 盡量以移液器吸取液體，禁止口吸。

1.7 實驗過程中，嚴格按有關操作規程操作，降低濺出和氣溶膠的產生。

1.8 每天至少消毒一次工作臺面，活性物質濺出后要隨時用75%乙醇或巴氏消毒液消毒。

1.9 實驗人員在配制培養基過程中，需盡量避免接觸性或吸入性危害，特別是配制TTB和碘液等對人體有害的培養基或試劑時，要穿戴工作服、口罩和手套，并在通風櫥中進行。

1.10工作人員應接受必要的免疫接種和檢測(如乙型肝炎疫苗、卡介苗等)。工作人員要接受有關的潛在危險知識的培訓，掌握預防暴露以及暴露后的處理程序。每年要接受一次最新的培訓。人員暴露于感染性物質時，及時向實驗室負責人匯報，并記錄事故經過和處理方案。

1.11禁止將無關動物帶入實驗室。2.無菌室安全操作規程

2.1無菌培養室每天都要用0.2%的新潔爾滅拖洗地面一次(拖布專用)，紫外線照射消毒30min以上，超凈工作臺臺面每次實驗前要用75％酒精擦洗。然后紫外線消毒30min。操作用具如移液器、廢液缸、污物盒、試管架等用75%酒精擦洗后置于臺內同時紫外線消毒。

2.2無菌室應保持清潔，嚴禁堆放雜物，以防污染。

2.3無菌室應備有工作濃度的消毒液，如5％的甲酚溶液，75％的酒精，0.1％的新潔爾滅溶液，等等。

2.4無菌室應定期用適宜的消毒液滅菌清潔，以保證無菌室的潔凈度符合要求。2.5需要帶入無菌室使用的器械、平皿等一切物品，均應包扎嚴密，并應經過適宜的方法滅菌。

2.6工作人員進入無菌室前，必須用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在緩沖間更換專用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(或用75% 乙醇等消毒劑再次擦拭雙手)，方可進入無菌室進行操作。

2.7無菌室使用前必須打開無菌室的紫外燈輻照滅菌30分鐘，滅菌后通無菌風至少30min以上人員才能進入。操作完畢，應及時清理無菌室，再用紫外燈輻照滅菌30分鐘。

2.8供試品在檢查前，應保持外包裝完整，不得開啟，以防污染。檢查前，用75％的酒精棉球消毒外表面。

2.9每次操作過程中，均應做陰性對照，以檢查無菌操作的可靠性。2.10吸取菌液時，必須用移液器吸取，切勿直接用口接觸吸管。

2.11接種針每次使用前后，必須通過火焰灼燒滅菌，待冷卻后，方可接種培養物。2.12帶有菌液的吸管，試管，培養皿等器皿應浸泡在盛有5%來蘇爾溶液或巴氏消毒液的消毒桶內消毒，24小時后取出沖洗。

2.13如有菌液灑在桌上或地上，應立即用5%石碳酸溶液或3％的來蘇爾傾覆在被污染處至少30分鐘，再做處理。工作衣帽等受到菌液污染時，應立即脫去，高壓蒸汽滅菌后洗滌。

2.14凡帶有活菌的物品，必須經消毒后，才能在水龍頭下沖洗，嚴禁污染下水道。2.15無菌室應每月檢查菌落數。在層流無菌風開啟的狀態下，取內徑90mm的無菌營養瓊脂平板5個，分別放置無菌室四周及中央位置，開蓋暴露30分鐘后，倒置于36℃培養箱培養48小時，取出檢查。100級潔凈區平板雜菌數平均不得超過1個菌落/平皿，10000級潔凈室平均不得超過3個菌落/平皿。如超過限度，應用臭氧發生器等對無菌室進行徹底消毒，直至重復檢查合乎要求為止。3.壓力蒸汽滅菌器的安全使用操作程序：

3.1堆放：將需滅菌的物品予以妥善包扎，各包之間留有空隙，依次堆放在滅菌桶的篩板上，以蒸汽穿透，提高滅菌效果。需滅菌物品外需黏上高壓指示膠帶以檢驗滅菌溫度是否達到要求。

3.2 加水：在鍋體內注入生活用水，水位一定要超過電熱管2厘米以上（不宜過多）；連續使用時，每次操作前，必須補足上述水位，以免燒壞電熱管和意外發生。

3.3 密封：在每次使用高壓鍋前，都必須認真檢查高壓鍋的出氣伐和安全閥，確保其狀態完好，如有故障，在故障排除之前不得使用高壓滅菌鍋。把堆放好物品的滅菌桶放在鍋體內，蓋上鍋蓋并鎖緊。

3.4 加熱滅菌：將滅菌器接通與銘牌一致的電源，按下電源開關，接通電源，指示燈亮，表示電源已正常輸入本器，按下開始按紐電熱管開始加熱工作；非全自動的高壓滅菌鍋要注意排空空氣，確保滅菌時高壓鍋內是飽和水蒸氣，高壓滅菌鍋內滅菌期間工作人員需監視高壓鍋指示面板上的壓力、溫度和時間等。

3.5 開蓋：滅菌結束后，切勿立即將滅菌鍋內的蒸汽排出，否則：由于液體物品的溫度未能下降，而壓力蒸汽突然釋放，會使液體劇烈沸騰，造成溢出或容器爆裂。應待壓力表指針歸零位后，方可開啟鍋蓋。

3.6 滅菌后無菌工器具及培養基應存放于無菌區域（如滅過菌后的無菌室或生物安全柜內），無菌物品需有明確標識。

3.7 每年至少2次用嗜熱脂肪芽孢桿菌作為生物指示劑檢查滅菌效果并記錄，指示物需放在不一達到滅菌的部位（如堆放物品的居中位置）。4.生物安全柜操作規程

4.1確認玻璃窗處于關閉位置后，打開紫外燈，對安全柜內工作空間進行滅菌。滅菌結束后，關閉紫外燈。安全柜使用前后均需滅菌。

4.2抬起玻璃門至正常工作位置。打開外排風機。打開熒光燈及內置風機。檢查回風格柵，使之不要被物品堵塞。在無任何阻礙狀態下，讓安全柜至少工作10分鐘。

4.3用消毒液徹底清洗手及手臂。穿上工作褂，戴橡膠手套并套在袖口上，如有必要的話，戴防護眼鏡和防護面罩。

4.4按實驗程序放入實驗材料，要將工作區域內的污染物質與潔凈物質分開放置。盡量將所需要的物品在正式操作前全部放入安全柜，但不要過載，不要擋住前后風口。4.5盡量避免使用可干擾安全柜內氣流流動的裝置和程序。在操作期間，避免隨便移動材料，避免操作者的手臂在前方開口處頻繁移動，盡量減少氣流干擾。

盡量不要使用明火，接種環之類用紅外滅菌器滅菌。

4.6在操作過程中，如果有物質溢出或液體濺出，在將物品移出安全柜前，要對其表面進行消毒，為防止安全柜內有任何殘留的污染物，在安全柜工作過程中，就要將安全柜內表面全部消毒。所有接觸了污染材料的物體，在從安全柜中取出前，要進行表面消毒。所有開口容器，從安全柜中拿出前要蓋好。

4.7全部工作結束后，用70%的乙醇或適當的中性消毒劑，擦拭安全柜內表面，讓安全柜在無任何阻礙的情況下繼續至少工作5分鐘，以清除工作區域內浮沉污染。

4.8關閉照明燈和安全柜風機。關閉玻璃門，打開UV燈消毒。滅菌結束后，關閉UV燈。4.9定期抬起工作區域下面板，擦拭或沖洗工作面底下空間。

5.標準菌株安全操作規程

5.1標準菌株由專人保管。保管人負責建立標準菌株目錄；目錄至少應包編號、菌株號、菌種名稱、來源、購買日期、購買數量、保存方法等。

5.2標準菌株應做好標識后，保存于專用冰箱中。

5.3標準菌株不能隨意轉借其它單位或個人，需要時，須經實驗室負責人批準后方可提供。

5.4必須在生物安全柜中進行標準菌株實驗，操作過程中，不要穿戴巳經污染的防護性手套觸摸門柄、儀器或污染區以外區域，避免擴大污染范圍。

5.5試驗結束后，操作過程中所有可能與生物危險物接觸或被污染的試驗器械和物品，能夠高壓消毒的必須高壓消毒，不能進行高壓消毒的物品，應使用有效的消毒劑消毒處理。

5.6 標準菌株傳代原則上不超過5代。

6.微生物培養物廢棄物安全處理程序

6.1 盡可能使用塑料器材代替玻璃器材,防止利器損傷。非一次性利器必須放入厚壁容器中并運送到特定區域消毒，最好進行高壓消毒。

6.2 禁止用手處理破碎的玻璃器具。裝有污染針、利器及破碎玻璃的容器在丟棄之前必須應用次氯酸消毒液或其他有效藥品進行消毒。

6.3 所有培養物、廢棄物在運出實驗室之前須經巴氏消毒液消毒處理或高壓滅菌后,置于專門污物袋內，交由專業衛生處理公司處置。

6.4 實驗設備在運出修理或維護前必須進行消毒。

7、微生物實驗室緊急事故處理辦法

7.1刺傷、切割傷或擦傷。受傷人員應脫下防護服，清洗雙手和受傷部位，使用適當的皮膚消毒劑進行消毒，必要時進行醫學處理。同時記錄受傷原因和相關的微生物，并保留完整適當的醫療記錄。

7.2潛在感染性物質的食入。應脫下受害人的防護服，進行必要的醫學處理。報告食入材料的鑒定和事故發生的細節，并保留完整適當的醫療記錄。7.3潛在危害性氣溶膠的釋放（在生物安全柜以外）。所有人員必須立即撤離相關區域，暴露人員應接受醫學咨詢，同時立即通知實驗室負責人和生物安全負責人。為了使氣溶膠排出和使較大的粒子沉降，在一定時間內嚴禁人員入內，若實驗室沒有中央通風系統，應推遲進入實驗室的時間，同時張貼“禁止進入”的標志。待氣溶膠排出、較大的粒子沉降后，在生物安全負責人的指導下，清理人員穿戴適當的防護服和呼吸保護裝備進行污染的清除。

7.4容器破碎及感染性物質的溢出。應立即用布或紙巾覆蓋被感染性物質污染或受感染性物質溢灑的破碎物品，并倒上消毒劑。作用適當時間后，將覆蓋物以及破碎物品清除，再用消毒劑擦拭污染區域。玻璃碎片應用鑷子清理，已污染的布、紙巾和抹布等應放在盛放污染性廢棄物的容器內。如果用簸箕清理破碎物，應對其進行高壓滅菌或放在有效的消毒液內浸泡消毒。所有操作過程中要求戴手套。

若實驗表格或其他打印或手寫材料被污染，應將這些信息復制后，再將原件置于盛放污染性廢棄物的容器內，按廢棄物處理的方式進行處理。

7.5未裝可封閉離心桶的離心機內盛有潛在感染性物質的離心管發生破裂。如果機器正在運行時發生破裂或懷疑發生破裂，應關閉機器電源，讓機器密閉適當時間（如30min），使氣溶膠沉積。如果機器停止后發現破裂，不開蓋或立即將蓋子蓋上，并密閉（如30min）。同時應通知生物安全負責人。玻璃碎片應使用鑷子，或用鑷子夾著棉花進行清理。所有破碎的離心管、玻璃碎片、離心桶、十字軸和轉子都應放入無腐蝕性的、已知對相關微生物具有殺滅活性的消毒劑內進行消毒。未破損的帶蓋離心管應放在另一個有消毒劑的容器中，消毒后回收。離心機內腔應用適當濃度的同種消毒劑多次擦拭，再用水沖洗后干燥。

清理時，應戴結實的手套（如厚橡膠手套），必要時在外面再戴適當的一次性手套。所使用的全部材料都應按感染性廢棄物處理。

7.6在可封閉的離心桶（安全杯）內離心管發生破裂。所有的密封離心桶都應在生物安全柜內裝卸。若懷疑在安全杯內發生破損，應松開安全杯蓋子并將離心桶高壓滅菌，也可采用化學消毒的方法進行處理。

7.7生物安全柜內生物危害溢出。等待至少5min，讓安全柜充滿氣溶膠，清理時應穿戴實驗服，安全眼鏡和手套，且讓安全柜繼續工作。使用浸泡消毒劑的消毒紙巾吸附溢出物，進行消毒處理應保證一定的接觸時間（至少20min）。并用同樣的消毒紙巾擦拭安全柜內壁、工作臺表面和柜內所有設備。按照正確的生物廢棄物處理步驟處理被污染的物質，將可回收的被污染物品放入生物危害物回收袋或高壓滅菌盤并且用報紙包起來，然后進行消毒或清理。用消毒劑對無法進行高壓滅菌的物品進行至少20 min的消毒處理后再拿出安全柜。最后脫下個人防護服并放進污染物收集袋中進行高壓滅菌處理。若所要清理的物品達到2級生物安全水平或者更高，應聯系生物安全辦公室負責人。

7.8使用消毒劑進行清潔的具體步驟如下：用干紙巾覆蓋溢出物(用來吸附液體)后，再放上浸泡消毒液的紙巾，使消毒劑包圍溢出物，并確保消毒劑與污染溢出物充分接觸，盡可能減少氣溶膠的形成。對溢出物附近的所有物品進行消毒處理，處理一定時間，使消毒劑的消毒作用得到充分發揮。使用正確的消毒劑擦拭設備，并按照正確的生物危害物處理程序處理被污染的物質。對可回收利用的物品進行消毒處理。

第五篇：微生物實驗室生物安全操作規程

微生物實驗室生物安全操作規程

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一、目的

制訂本規則，保證實驗室工作人員的健康安全、實驗設備安全衛生以及防止對外界環境造成污染。

二、適用范圍

適用于微生物實驗室人員人身安全、衛生健康安全管理及設備安全。

三、職責

實驗室工作人員必需嚴格遵守安全操作規程。

四、安全操作規程： 1.員工安全操作規程

1.1 實驗室入口處須貼上生物危險標志，注明危險因子、生物安全級別、負責人姓名和電話、進入實驗室的特殊要求及離開實驗室的程序。

1.2 禁止非工作人員進入實驗室。參觀實驗室等特殊情況須經實驗室負責人批準后方可進入，做好衛生防護，并在有關人員陪同下方可進入，同時注意做好環境維護及保密工作。

1.3 進行感染性實驗時，禁止他人進入實驗室，或必須經實驗室負責人同意后方可進入。免疫耐受或正在使用免疫抑制劑的工作人員必須經實驗室負責人同意方可在實驗室工作。

1.4 接觸微生物或含有微生物的物品后，脫掉手套后和離開實驗室前要洗手。1.5 禁止在工作區飲食、吸煙、處理隱形眼鏡、化妝及儲存食物。1.6 盡量以移液器吸取液體，禁止口吸。

1.7 實驗過程中，嚴格按有關操作規程操作，降低濺出和氣溶膠的產生。

1.8 每天至少消毒一次工作臺面，活性物質濺出后要隨時用75%乙醇或巴氏消毒液消毒。

1.9 工作人員應接受必要的免疫接種和檢測(如乙型肝炎疫苗、卡介苗等)。工作人員要接受有關的潛在危險知識的培訓，掌握預防暴露以及暴露后的處理程序。每年要接受一次最新的培訓。人員暴露于感染性物質時，及時向實驗室負責人匯報，并記錄事故經過和處理方案。

1.10禁止將無關動物帶入實驗室。2.無菌室安全操作規程

2.1無菌培養室每天都要用0.2%的新潔爾滅拖洗地面一次(拖布專用)，紫外線照射消毒30min以上，超凈工作臺臺面每次實驗前要用75％酒精擦洗。然后紫外線消毒30min。操作用具如移液器、廢液缸、污物盒、試管架等用75%酒精擦洗后置于臺內同時紫外線消毒。

2.2無菌室應保持清潔，嚴禁堆放雜物，以防污染。

2.3無菌室應備有工作濃度的消毒液，如5％的甲酚溶液，75％的酒精，0.1％的新潔爾滅溶液，等等。

2.4無菌室應定期用適宜的消毒液滅菌清潔，以保證無菌室的潔凈度符合要求。2.5需要帶入無菌室使用的器械、平皿等一切物品，均應包扎嚴密，并應經過適宜的方法滅菌。

2.6工作人員進入無菌室前，必須用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在緩沖間更換專用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(或用75% 乙醇等消毒劑再次擦拭雙手)，方可進入無菌室進行操作。

2.7無菌室使用前必須打開無菌室的紫外燈輻照滅菌30分鐘，并且同時打開超凈臺進行吹風。操作完畢，應及時清理無菌室，再用紫外燈輻照滅菌30分鐘。

2.8供試品在檢查前，應保持外包裝完整，不得開啟，以防污染。檢查前，用75％的酒精棉球消毒外表面。

2.9每次操作過程中，均應做陰性對照，以檢查無菌操作的可靠性。2.10吸取菌液時，必須用移液器吸取，切勿直接用口接觸吸管。

2.11接種針每次使用前后，必須通過火焰灼燒滅菌，待冷卻后，方可接種培養物。2.12帶有菌液的吸管，試管，培養皿等器皿應浸泡在盛有5%來蘇爾溶液或巴氏消毒液的消毒桶內消毒，24小時后取出沖洗。

2.13如有菌液灑在桌上或地上，應立即用5%石碳酸溶液或3％的來蘇爾傾覆在被污染處至少30分鐘，再做處理。工作衣帽等受到菌液污染時，應立即脫去，高壓蒸汽滅菌后洗滌。

2.14凡帶有活菌的物品，必須經消毒后，才能在水龍頭下沖洗，嚴禁污染下水道。2.15無菌室應每月檢查菌落數。在層流無菌風開啟的狀態下，取內徑90mm的無菌營養瓊脂平板5個，分別放置無菌室四周及中央位置，開蓋暴露30分鐘后，倒置于36℃培養箱培養48小時，取出檢查。100級潔凈區平板雜菌數平均不得超過1個菌落/平皿，10000級潔凈室平均不得超過3個菌落/平皿。如超過限度，應用臭氧發生器等對無菌室進行徹底消毒，直至重復檢查合乎要求為止。3.壓力蒸汽滅菌器的安全使用操作程序：

3.1堆放：將需滅菌的物品予以妥善包扎，各包之間留有空隙，依次堆放在滅菌桶的篩板上，以蒸汽穿透，提高滅菌效果。需滅菌物品外需黏上高壓指示膠帶以檢驗滅菌溫度是否達到要求。

3.2 加水：在鍋體內注入生活用水，水位一定要超過電熱管2厘米以上（不宜過多）；連續使用時，每次操作前，必須補足上述水位，以免燒壞電熱管和意外發生。

3.3 密封：在每次使用高壓鍋前，都必須認真檢查高壓鍋的出氣伐和安全閥，確保其狀態完好，如有故障，在故障排除之前不得使用高壓滅菌鍋。把堆放好物品的滅菌桶放在鍋體內，蓋上鍋蓋并鎖緊。

3.4 加熱滅菌：將滅菌器接通與銘牌一致的電源，按下電源開關，接通電源，指示燈亮，表示電源已正常輸入本器，按下開始按紐電熱管開始加熱工作；滅菌期間工作人員需監視高壓鍋指示面板上的壓力、溫度和時間等。

3.5 開蓋：滅菌結束后，切勿立即將滅菌鍋內的蒸汽排出，否則：由于液體物品的溫度未能下降，而壓力蒸汽突然釋放，會使液體劇烈沸騰，造成溢出或容器爆裂。應待壓力表指針歸零位后，方可開啟鍋蓋。4.生物安全柜操作規程

4.1確認玻璃窗處于關閉位置后，打開紫外燈，對安全柜內工作空間進行滅菌。滅菌結束后，關閉紫外燈。安全柜使用前后均需滅菌。

4.2抬起玻璃門至正常工作位置。打開外排風機。打開熒光燈及內置風機。檢查回風格柵，使之不要被物品堵塞。在無任何阻礙狀態下，讓安全柜至少工作10分鐘。

4.3用消毒液徹底清洗手及手臂。穿上工作褂，戴橡膠手套并套在袖口上，如有必要的話，戴防護眼鏡和防護面罩。

4.4按實驗程序放入實驗材料，要將工作區域內的污染物質與潔凈物質分開放置。盡量將所需要的物品在正式操作前全部放入安全柜，但不要過載，不要擋住前后風口。放入.4.5盡量避免使用可干擾安全柜內氣流流動的裝置和程序。在操作期間，避免隨便移動材料，避免操作者的手臂在前方開口處頻繁移動，盡量減少氣流干擾。盡量不要使用明火。

4.6在操作過程中，如果有物質溢出或液體濺出，在將物品移出安全柜前，要對其表面進行消毒，為防止安全柜內有任何殘留的污染物，在安全柜工作過程中，就要將安全柜內表面全部消毒。所有接觸了污染材料的物體，在從安全柜中取出前，要進行表面消毒。所有開口容器，從安全柜中拿出前要蓋好。

4.7全部工作結束后，用70%的乙醇或適當的中性消毒劑，擦拭安全柜內表面，讓安全柜在無任何阻礙的情況下繼續至少工作5分鐘，以清除工作區域內浮沉污染。

4.8關閉照明燈和安全柜風機。關閉玻璃門，打開UV燈消毒。滅菌結束后，關閉UV燈。4.9定期抬起工作區域下面板，擦拭或沖洗工作面底下空間。

5.標準菌株安全操作規程

5.1標準菌株由專人保管。保管人負責建立標準菌株目錄；目錄至少應包編號、菌株號、菌種名稱、來源、購買日期、購買數量、保存方法等。

5.2標準菌株應做好標識后，保存于專用冰箱中。

5.3標準菌株不能隨意轉借其它單位或個人，需要時，須經實驗室負責人批準后方可提供。

5.4必須在生物安全柜中進行標準菌株實驗，操作過程中，不要穿戴巳經污染的防護性手套觸摸門柄、儀器或污染區以外區域，避免擴大污染范圍。

5.5試驗結束后，操作過程中所有可能與生物危險物接觸或被污染的試驗器械和物品，能夠高壓消毒的必須高壓消毒，不能進行高壓消毒的物品，應使用有效的消毒劑消毒處理。

6.微生物培養物廢棄物安全處理程序

6.1 盡可能使用塑料器材代替玻璃器材,防止利器損傷。非一次性利器必須放入厚壁容器中并運送到特定區域消毒，最好進行高壓消毒。

6.2 禁止用手處理破碎的玻璃器具。裝有污染針、利器及破碎玻璃的容器在丟棄之前必須應用次氯酸消毒液或其他有效藥品進行消毒。

6.3 所有培養物、廢棄物在運出實驗室之前須經巴氏消毒液消毒處理或高壓滅菌后,置于專門污物袋內，交由專業衛生處理公司處置。

6.4 實驗設備在運出修理或維護前必須進行消毒。

7、微生物實驗室緊急事故處理辦法

7.1刺傷、切割傷或擦傷。受傷人員應脫下防護服，清洗雙手和受傷部位，使用適當的皮膚消毒劑進行消毒，必要時進行醫學處理。同時記錄受傷原因和相關的微生物，并保留完整適當的醫療記錄。

7.2潛在感染性物質的食入。應脫下受害人的防護服，進行必要的醫學處理。報告食入材料的鑒定和事故發生的細節，并保留完整適當的醫療記錄。

7.3潛在危害性氣溶膠的釋放（在生物安全柜以外）。所有人員必須立即撤離相關區域，暴露人員應接受醫學咨詢，同時立即通知實驗室負責人和生物安全負責人。為了使氣溶膠排出和使較大的粒子沉降，在一定時間內嚴禁人員入內，若實驗室沒有中央通風系統，應推遲進入實驗室的時間，同時張貼“禁止進入”的標志。待氣溶膠排出、較大的粒子沉降后，在生物安全負責人的指導下，清理人員穿戴適當的防護服和呼吸保護裝備進行污染的清除。

7.4容器破碎及感染性物質的溢出。應立即用布或紙巾覆蓋被感染性物質污染或受感染性物質溢灑的破碎物品，并倒上消毒劑。作用適當時間后，將覆蓋物以及破碎物品清除，再用消毒劑擦拭污染區域。玻璃碎片應用鑷子清理，已污染的布、紙巾和抹布等應放在盛放污染性廢棄物的容器內。如果用簸箕清理破碎物，應對其進行高壓滅菌或放在有效的消毒液內浸泡消毒。所有操作過程中要求戴手套。

若實驗表格或其他打印或手寫材料被污染，應將這些信息復制后，再將原件置于盛放污染性廢棄物的容器內，按廢棄物處理的方式進行處理。

7.5未裝可封閉離心桶的離心機內盛有潛在感染性物質的離心管發生破裂。如果機器正在運行時發生破裂或懷疑發生破裂，應關閉機器電源，讓機器密閉適當時間（如30min），使氣溶膠沉積。如果機器停止后發現破裂，不開蓋或立即將蓋子蓋上，并密閉（如30min）。同時應通知生物安全負責人。玻璃碎片應使用鑷子，或用鑷子夾著棉花進行清理。所有破碎的離心管、玻璃碎片、離心桶、十字軸和轉子都應放入無腐蝕性的、已知對相關微生物具有殺滅活性的消毒劑內進行消毒。未破損的帶蓋離心管應放在另一個有消毒劑的容器中，消毒后回收。離心機內腔應用適當濃度的同種消毒劑多次擦拭，再用水沖洗后干燥。

清理時，應戴結實的手套（如厚橡膠手套），必要時在外面再戴適當的一次性手套。所使用的全部材料都應按感染性廢棄物處理。

7.6在可封閉的離心桶（安全杯）內離心管發生破裂。所有的密封離心桶都應在生物安全柜內裝卸。若懷疑在安全杯內發生破損，應松開安全杯蓋子并將離心桶高壓滅菌，也可采用化學消毒的方法進行處理。

7.7生物安全柜內生物危害溢出。等待至少5min，讓安全柜充滿氣溶膠，清理時應穿戴實驗服，安全眼鏡和手套，且讓安全柜繼續工作。使用浸泡消毒劑的消毒紙巾吸附溢出物，進行消毒處理應保證一定的接觸時間（至少20min）。并用同樣的消毒紙巾擦拭安全柜內壁、工作臺表面和柜內所有設備。按照正確的生物廢棄物處理步驟處理被污染的物質，將可回收的被污染物品放入生物危害物回收袋或高壓滅菌盤并且用報紙包起來，然后進行消毒或清理。用消毒劑對無法進行高壓滅菌的物品進行至少20 min的消毒處理后再拿出安全柜。最后脫下個人防護服并放進污染物收集袋中進行高壓滅菌處理。若所要清理的物品達到2級生物安全水平或者更高，應聯系生物安全辦公室負責人。

7.8使用消毒劑進行清潔的具體步驟如下：用干紙巾覆蓋溢出物(用來吸附液體)后，再放上浸泡消毒液的紙巾，使消毒劑包圍溢出物，并確保消毒劑與污染溢出物充分接觸，盡可能減少氣溶膠的形成。對溢出物附近的所有物品進行消毒處理，處理一定時間，使消毒劑的消毒作用得到充分發揮。使用正確的消毒劑擦拭設備，并按照正確的生物危害物處理程序處理被污染的物質。對可回收利用的物品進行消毒處理。