第一篇:生物材料檢驗
103頁,1.苯的監(jiān)測指標(biāo)有哪些?哪些是有特異性的?
答:反,反-黏糠酸(t,t-MA)和苯琉基尿酸(S-PMA)是苯在機(jī)體內(nèi)具有較強(qiáng)特異性和較高敏感性的代謝產(chǎn)物,與低水平苯暴露具有良好的線性相關(guān)關(guān)系,是較理想的職業(yè)苯接觸生物標(biāo)志物。尿酚僅適合作為群體苯接觸程度的生物監(jiān)測指標(biāo)(非特異性)。呼出氣中苯可以作為職業(yè)接觸苯的確證實驗。
2.尿中黏糠酸和苯琉基尿酸的測定方法有哪些?簡述最常用方法的原理及注意事項?
答:氣相色譜法,高效液相色譜法,氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法和高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法。1.原理
終末呼出氣樣品(肺泡氣)收集在50 ml呼出氣采集管內(nèi),用氮?dú)鈱悠反等牖钚蕴抗軆?nèi),使樣品中苯吸附在活性炭上。280 ℃熱解吸,氮?dú)鈱⑨尦龅谋綆隖FAP柱(改性的聚乙二醇)中,F(xiàn)ID檢測,保留時間定性,峰高或峰面積定量。2.注意事項
(1)采樣應(yīng)在無污染的室內(nèi)進(jìn)行;
(2)當(dāng)回收率低于75%時,應(yīng)檢查是否需要更換活性炭。活性炭在分析前應(yīng)按熱解吸的條件活化一定時間,以除去活性炭所吸附的有機(jī)物。
(3)正己烷、乙醚、丙酮、乙酸乙酯、二甲苯、環(huán)己酮等均不干擾苯的測定。
3.甲苯和二甲苯的生物監(jiān)測指標(biāo)有哪些?為什么說馬尿酸作為甲苯接觸的生物指標(biāo)是非特異性的? 答:終末呼出氣中的甲苯和二甲苯均為特異性生物監(jiān)測指標(biāo),尿中馬尿酸作為甲苯接觸的非特異性監(jiān)測指標(biāo),甲基馬尿酸是一個較特異性的監(jiān)測指標(biāo)。正常人尿中也含有馬尿酸,但其含量水平因個體差異很大,主要影響因素有膳食及某些藥物攝入(水楊酸類藥物),另外,接觸乙苯、苯乙烯、苯甲醛、苯甲醇、苯甲酸等有機(jī)物也會使人尿中馬尿酸含量增高。4,簡述監(jiān)測尿中1-羥基芘和3-羥基苯并a芘的意義及常用的方法?
答:1-羥基芘是芘的代謝產(chǎn)物,尿中1-羥基芘的濃度可以反映人體接觸環(huán)境中多環(huán)芳烴的水平,它不僅與環(huán)境空氣中芘的濃度有良好的正相關(guān),而且與BaP有很好的正相關(guān),因此人尿中1-羥基芘是多環(huán)芳烴一個靈敏有效的生物監(jiān)測指標(biāo)。高效液相色譜法
測定方法有:
HPLC,最為常用,無論是對于單一的羥基多環(huán)芳烴如3-羥基苯并[a]芘,還是多種羥基多環(huán)芳烴的同時檢測;GC-MS;HPLC-MS;超高 HPLC-MS ,ect.84頁,第六章 維生素的測定
2.維生素D的生物監(jiān)測指標(biāo)是什么?為什么選擇該指標(biāo)?
答:首先在肝臟中羥基化,形成25(OH)D3與25(OH)D2兩種形式的25(OH)D,其后在腎進(jìn)一步羥基化生成有生理活性的1,25(OH)2D2和1,25(OH)2D3或無生理活性的24R,25(OH)2D。
由于血清中25(OH)D的生物半減期約為15~20 d,而1,25(OH)2D的生物半減期僅為4~8 h,血清中25(OH)D含量明顯高于1,25(OH)2D,且后者的含量受到其他代謝過程的調(diào)控,已經(jīng)確證維生素D缺乏的個體血清1,25(OH)2D含量水平可表現(xiàn)為正常甚至偏高。因此,比較而言,血清中25(OH)D的含量更適合作為評價人體維生素D是否缺乏的指標(biāo) 4.什么是負(fù)荷實驗?其作用是什么?
答:負(fù)荷實驗是營養(yǎng)學(xué)中評價水溶性維生素營養(yǎng)狀況的常用方法。未參與代謝的硫胺素及核黃素以原型或結(jié)合形式經(jīng)尿排出,攝入后4小時排出量最大,以尿負(fù)荷實驗后尿中硫胺素或核黃素含量分別反映人體這兩種維生素的營養(yǎng)狀況。
受試者清晨空腹排尿后口服5mg硫胺素/核黃素片劑,飲水200 ml以上,收集4h內(nèi)尿液,尿中硫胺素含量:<100 μg為缺乏,100-200 μg為不足,>200 μg為正常; 尿中核黃素:<400 μg為缺乏,400-799 μg為不足,800-1300 μg為正常。
與其他水溶性維生素一樣,超出組織需求無法在體內(nèi)大量貯存,以原形或以脫氫形式隨尿排出。因此,可通過負(fù)荷實驗評價人體維生素C營養(yǎng)狀況。
維生素C負(fù)荷實驗:受試者口服維生素C水溶液(含維生素C 5mg),收集4h尿樣,測定維生素C含量。
評價標(biāo)準(zhǔn)為:排出<5mg為缺乏,5?13mg為合格,>13mg為充裕。
第二篇:生物材料檢驗復(fù)習(xí)資料
生物材料檢驗:分析檢驗生物材料中化學(xué)物質(zhì)及其代謝物的含量或因化學(xué)物質(zhì)引起的的生物效應(yīng)指標(biāo)變化。
生物材料:是人體體液(如血液)、排泄物(如呼吸氣、尿液)、毛發(fā),指甲以及組織臟器等的總稱。
生物標(biāo)志物:指生物系統(tǒng)接觸外源性物質(zhì)后出現(xiàn)的一種變化。分為三類:接觸性生物標(biāo)志物、效應(yīng)性生物標(biāo)志物,敏感性生物標(biāo)志物。
生物接觸限值(BEL):大體相當(dāng)于健康人吸入接觸最高允許濃度的毒物時生物材料中被測物的水平。
尿液可分為全日尿,晨尿,定時尿和隨時尿。
生物半減期:指進(jìn)入生物體內(nèi)的化學(xué)物質(zhì)的里量通過各種途徑消除一半所需要的時間,又代謝半減期。
一、檢驗方法的一般要求:
1.方法的一般要求
1)靈敏度選擇符合生物監(jiān)測的基本要求
2)操作簡便
3)試劑易得、價廉
4)效率高
5)符合國情,易推行、推廣 2.選擇和建立生物檢測方法必須考慮的因素: 1)被測成分
①
溶解性,穩(wěn)定性 ②含量水平高g/L水平低ug/L 二、方法研制準(zhǔn)則的基本內(nèi)容
1.取樣、運(yùn)輸、保存的原則
1)取樣:(1)容器工具材質(zhì)不干擾測定
(2)取樣的操作要防止污染
(3)取樣時間根據(jù)半減期判斷決定
(4)取樣的體積 尿液>=50ml 靜脈血>=5ml 末梢血500ul
2)保存時間:一天,三天,一周,兩周一般只要求兩周 3)運(yùn)輸過程:保證分析物穩(wěn)定,必要時要冷藏和冷凍運(yùn)輸
4)防腐劑(尿)和抗凝劑(血)
2.樣品預(yù)處理原則
1)尿液濃度按比重校正 尿標(biāo)準(zhǔn)比重1.020,>1.030及<1.010的尿液應(yīng)棄去
2)樣品預(yù)處理的目的是消除干擾
(1)測定無機(jī)物時 ①用稀釋液稀釋后測定 ②混合酸消化
(2)測定有機(jī)物成分:先水解,再分離
(3)回收率>=75%
3.制定分析方法的程序
1)分析條件選擇、優(yōu)化
2)確定檢出限
(1)影響檢出限的因素:試劑的純度,儀器的工作狀態(tài),電源穩(wěn)定性光源的溫度變化、污染等不可控制的因素。(2)檢出限的確定
一般用統(tǒng)計法,一般用空白值的3倍標(biāo)準(zhǔn)差計算;色譜法用3倍噪音水平,檢出限應(yīng)小于0.3倍生物接觸限值。(3)檢出限的表示方法
濃度或絕對量表示,用濃度表示時要說明方法取樣體積。
3)精密度 :同一個人用同一方法重復(fù)測定同一均勻樣品測定結(jié)果的符合程度通常在線性范圍內(nèi)取高、中、低三個濃度水平分別重復(fù)測定3~5次。用RSD表示或用變異系數(shù)表示
復(fù)雜方法RSD<=20 簡單方法<=10.4)準(zhǔn)確度(1)分析高低濃度水平和國家級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)各一組,測定值應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)值的不確定范圍內(nèi)。(2)用接觸表樣品的加標(biāo)回收率表示
回收率>=75% 若>105%表明存在明顯的系統(tǒng)誤差。(3)用標(biāo)準(zhǔn)方法或權(quán)威方法比較:①兩個方法均值相對誤差應(yīng)小于10% ②t檢驗 在確定一個置信水平條件,兩方法測定無明顯差異
5)干擾試驗 :如果有干擾,要找出消除干擾的方法
6)樣品的穩(wěn)定性實驗 :時間:當(dāng)天,3天,1周,2周 溫度:室溫,普通冰箱冷藏(4℃),冷凍保存(-8℃),低溫冰箱(-20℃)
4.方法的驗證
1)新方法的驗證:必須是另一單位①研制方提供方法所有技術(shù)材料
②驗證內(nèi)容:四項
線性范圍,精密度,準(zhǔn)確度,樣品的穩(wěn)定性。2)引進(jìn)國外標(biāo)準(zhǔn)方法或權(quán)威方法,引進(jìn)方就是驗證方。
5.現(xiàn)場應(yīng)用
①首先要觀察檢出率 ②觀察檢測結(jié)果與環(huán)境污染的符合程度 ③同時取非接觸樣品進(jìn)行對照
三、確定生物監(jiān)測指標(biāo)的依據(jù)
(一)化學(xué)物質(zhì)在體內(nèi)的動力學(xué)過程
1.吸收
1)呼吸道吸收①氣體物質(zhì)通過肺泡壁及周圍毛細(xì)血管吸收
②固體物質(zhì),溶解時吸收的前提
2)皮膚 ①有些有機(jī)物很容易被皮膚吸收 F=C/15 *(0.038-0.153p)exp(-0.016MN)F皮膚吸收量mg/㎝/h
2C化學(xué)物質(zhì)在水中的飽和度mg/ml P辛醇-水的分配系數(shù) MN相對分子質(zhì)量 ②許多農(nóng)藥易被皮膚吸收 如有機(jī)磷
2.體內(nèi)分壓和貯存 1)起始主要分布于血液中最終分布取決親和力 2)血液側(cè)得量是反映新近吸收量或機(jī)體組織的水平3)血液中毒物或其他被測物并非均勻分布 4)一般脂溶性溶劑及鹵代烴會分布在脂肪組織中,乳汁是檢測有機(jī)氯農(nóng)藥最好的樣品 5)體內(nèi)儲存毒物的形式大多為結(jié)合狀態(tài),測定尿液中的代謝物需要先水解
3.生物轉(zhuǎn)化 1)概念:外源性化合物在體內(nèi)經(jīng)過一系列化學(xué)變化并形成其衍生物以及分解產(chǎn)物的過程。2)有關(guān)生物轉(zhuǎn)化的討論 ①是毒物發(fā)生質(zhì)的變化 ②生物轉(zhuǎn)化的數(shù)量關(guān)系,個體差異很大 ③是一種動態(tài)過程,對時間的了解是確定采樣時間的基礎(chǔ),生物半衰期。
4.排出
易揮發(fā)性有機(jī)溶劑從呼吸氣中排出較多。長期蓄積的有機(jī)氯農(nóng)藥可從乳汁中排出及叮嚀中排出,易代謝的有機(jī)毒物大多以結(jié)合態(tài)從尿中排出。
(二)、個體差異
1、毒物在生物體內(nèi)的動力學(xué)過程有種屬家族和個體的差異,其中生物轉(zhuǎn)化過程變異極大;
2、生物監(jiān)測的個體差異可用監(jiān)測結(jié)果的變異系數(shù)表示;
3、個體差異降低了生物監(jiān)測的精確性,卻可幫助檢出特殊敏感人群或耐受人群。
(三)、接觸水平(劑量)—效應(yīng)(反應(yīng))關(guān)系
1、是確定一次生物監(jiān)測指標(biāo)的關(guān)鍵依據(jù);
2、生物監(jiān)測結(jié)果與空氣毒物濃度之間的相關(guān)資料,可作為選擇生物監(jiān)測指標(biāo)的替代依據(jù)。
四、檢驗指標(biāo)的選擇與分類
(一)、選擇的基本要求
1、特異性好;
2、具有良好的劑量—效應(yīng)關(guān)系;
3、穩(wěn)定性好;
4、有準(zhǔn)確可靠的檢驗方法。
(二)、生物材料檢驗指標(biāo)的分類
1、化學(xué)物質(zhì)原形:①化學(xué)物質(zhì)在生物體內(nèi)不進(jìn)行生物轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)化速度很慢;②缺乏毒物代謝動力學(xué)資料;③代謝產(chǎn)物在體內(nèi)沒有特異性
2、化學(xué)物質(zhì)代謝產(chǎn)物
3、生物效應(yīng)指標(biāo)。
五、樣品的采集與保存
一)、生物材料樣品的選擇
(一)、種類及特點
? 尿液: 最常用的1)特點:采集方便、無損傷性、采集量大
2)適用性:水溶性化學(xué)物質(zhì)、代謝產(chǎn)物、金屬等
3)尿樣的種類:(1)全日尿(24h尿)收集24h內(nèi)的全部尿液,通常只用于住院病人
(2)晨尿 起床后、早餐前第一次排出的尿
(3)定時尿: 生物半減期 ①班前尿:第2個工作日上班前以內(nèi)排出的尿 ②班中尿:上班2~3h以后排出的尿 ③班末尿:下班前1h內(nèi)排的尿 ④班后尿:下班以后1h以內(nèi)排出的尿 ⑤周末尿:連續(xù)工作第五個工作日的班末尿。? 血液
1)特點:①成分較恒定 ②個體差異小 ③取樣污染機(jī)會小 ④損傷性采集樣品 ⑤血樣貯存條件要求較高;
2)種類:①血清:不抗凝離心分離出的上層清夜 ②血漿:加抗凝劑離心分離的上層清夜 ③全血 ④紅細(xì)胞。
呼出氣
1)特點
①優(yōu)點:操作方便、干擾物少,非損傷性 ②缺點:a、被測物的含量比較低
b、肺泡氣中水分對某些測定有影響
c、肺部“死腔”中環(huán)境空氣對肺泡氣稀釋不穩(wěn)定,影響測定結(jié)果的解釋;2)適用性 ①監(jiān)測僅限于揮發(fā)性物質(zhì) ②主要用于測定化學(xué)物質(zhì)原形 ③呼出氣監(jiān)測結(jié)果能反映采樣期間車間空氣的平均濃度;
3)呼出氣的分類 混合呼出氣、終末呼出氣(肺泡氣)第一階段呼出的是空氣,第二
階段混合呼出氣,第三階段肺泡氣。
(二)、生物材料樣品的選擇
1、同一毒物或代謝產(chǎn)物在不同生物材料其生物學(xué)意義不一樣,血鎘代表近期接觸水平、尿鎘反映長期接觸的濃度;
2、選擇生物材料樣品種類的要求:①被測物有特異性 ②與外劑量有相關(guān)性 ③有足夠的穩(wěn)定 ④測定結(jié)果重復(fù)性好,個體差異在允許范圍內(nèi) ⑤采樣能被受試者接受;
3、尿、血、呼出氣是目前較理想的生物材料樣品,美國BEI55個尿58%、血27%、呼出氣14%。
二)、樣品采集、運(yùn)輸及保存
(一)、一般要求
1、采樣時間:依據(jù)生物半減期;
2、采樣環(huán)境:無污染;
3、采樣容器:①測無機(jī)成分、塑料、高壓聚合玻璃:硬質(zhì)、石英
不銹鋼含Cr、Ni、Mn(不能用于測此三種元素)使用前要求用酸液(稀HNO3)浸泡24h洗滌;②測有機(jī)物
玻璃、塑料(不能用橡膠和添加染料的橡膠)冷凍保存不能用玻璃儀器;
4、樣品的運(yùn)輸與保存;
5、采樣記錄①編號②檢驗項目③受試者信息④采樣信息:時間、地點、環(huán)境、過程。⑤采樣人及記錄人信息
(二)樣品采集與保存
1、尿樣
1)尿樣的校正:(1)比重校正法 ?標(biāo)準(zhǔn)比重1.020 ?校正公式C校正=(1.020-1.000)/(d-1.000)*c=kc ?d的使用范圍1.010~1.030(2)肌酐校正法.尿中被測物濃度(mg/g肌酐)=實測濃度(mg/L)/肌酐濃度(g/L),肌酐含量 2)采樣.?采集尿液不少于50ml,?用頂空分析法測定揮發(fā)性物質(zhì)時.收集尿樣的容器要充滿尿樣并知道體積,?記錄2人上次排光膀胱的時間及采集樣的終點時間。
3)儲存.貯存一般2周.?反腐 加酸.氯仿.冷藏?測尿中汞或揮發(fā)性有機(jī)物要盡快測定?要保存5天以上的,最好冷凍
2、血樣
1)采集(1)、全血;要抗凝(2)、血清(血漿)或紅細(xì)胞
2)注意事項 ?采集過程避免污染.毛細(xì)管血?防止溶血.金屬針頭(取下)再擠出針管時不能太快?取末梢血要避免擠壓采集部位,自然流出棄去第一滴血④有三種情況不宜采集? 毛細(xì)管血a血液量超過5ml.b采集環(huán)境有外源性化學(xué)物質(zhì)存在c測定揮發(fā)性成分
3)血樣的運(yùn)輸與保存 ?避免振動和溫度的改變 ?血樣冷凍肯定溶血采集血清或血漿時,應(yīng)分離再保存 ?臨時存放4℃過夜,長時間保存要冷凍
④測酶活性要采集后盡快分析
3.呼出氣.1)采集方法:?先深呼吸2~3次,再恢復(fù)正常呼吸時采集呼出氣?采集肺泡氣只收集末端呼出氣
2)注意事項:?受檢者必須時肺功能正常者 ?要選擇對被測物吸附小的容器 ?要在正常呼吸狀態(tài)下收集樣品呼出過程不能有阻力 ④采樣的時機(jī)要依被測物代謝速度決定
三、生物材料樣品的預(yù)處理原則
(一)無機(jī)物分析的樣品處理
1、稀釋法.1).常用的稀釋劑;1)稀硝酸液(尿),2)TntonX—100表面活性劑3)基體改進(jìn)劑溶液 2).常用機(jī)體改進(jìn)劑:硝酸鹽(NH4+ Ni2+ Ca2+)磷酸鹽(Na+ NH4+)3).應(yīng)用實例 :?磷酸銨,硝酸銨和TritonX-100可改善血清中銅鋅的測定 ?磷酸氫胺,硝酸銨測定血鉛可提高灰化溫度至1000℃
?硝酸鎳可使測定砷和Se的灰化溫度到1000℃
④磷酸銨可使測定Cd的灰化溫度增至800℃
2、酸提取法
1.硝酸提取,測定血鉛.6mol/L 硝酸離心取上清液。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)
被測成分的含量是已知的2,鹽酸提取3,三氯乙酸(固體)。鐵(有效)提取+2價鐵
3、礦物化法(無機(jī)法處理)
(二)有機(jī)物分析的樣品處理(p11)
第五節(jié)
鉛
一、接觸途徑:鉛礦,開采,冶煉
二、代謝物和生物監(jiān)測指標(biāo)
(一)動力學(xué)過程.1、吸收
1)呼吸道:鉛塵煙蒸汽
2)消化道:鉛塵
3)皮膚,無機(jī)物不吸收有機(jī)鉛化合物可被吸收(四乙基鉛)
2、分析:起始分布在血中有95%與紅細(xì)胞結(jié)合最終主要以磷酸鹽沉積于管中,其次是肝腎腦等
3、生物效應(yīng):抑制血紅蛋白的合成
1)抑制5—氨基乙酰丙酸脫水酶,導(dǎo)致血尿中δ-ALA增加 2)抑制糞川啉元氧化酶
3)抑制亞鐵螯合酶
4、排除:吸收的鉛主要經(jīng)尿排出,尿鉛生物半減期較長。
(二)鉛接觸的生物監(jiān)測指標(biāo)
1、血鉛:直接反映近期接觸鉛的情況
2、尿鉛:反應(yīng)機(jī)體中鉛的負(fù)荷量,是鉛中毒的輔助診斷指標(biāo)
3、生物效應(yīng)指標(biāo):1)尿中σ—ALA
2)血中鉛原卟啉
三、樣品的采集與保存——用于尿鉛血鉛的測定
1.尿樣.①采樣時間的限定
②隨即采集一次尿樣
③按1%比例加HNO3,4℃可保存兩周。
2.血樣.1)末梢血40 μL
2)靜脈血
四、尿鉛和血鉛的測定——石墨爐原子吸收法
(一)尿鉛的測定
1、原理:尿樣用基體改進(jìn)劑液稀釋后直接進(jìn)行測定,基體改進(jìn)劑液NH4H2PO4+抗壞血酸
2、石墨爐升溫程序——適用涂銅石墨管
①干燥~70℃,40S ②灰化 450℃,30S ③原子化
2000℃ 5S(停氣)④清除 2200℃ 3S
3、石墨管涂鉬處理,向石墨管中加20μL鉬酸銨液,石墨爐升溫程序①~③并重復(fù)10次升溫,石墨管內(nèi)壁呈灰白色
4、標(biāo)準(zhǔn)系列液配置
①鉛標(biāo)準(zhǔn)系列液
②基體改進(jìn)劑液(混合液)
③正常人混合尿 :
沒有接觸鉛的健康人的尿,取2份,一份比重小于1.020,一份比重大于1.020,混合成比重為1.020的尿液
5、說明 : 1)基體改進(jìn)劑液的作用 :本法選用4%磷酸二氫銨-6%抗壞血酸作為基體改進(jìn)劑,能有效地克服基體干擾
2)背景吸收的扣除
①背景校正器扣除背景吸收,氘燈背景校正
②石墨管涂鉬可降低背景吸收
(二)血鉛的測定
1、樣品處理:全血用TritonX-100液稀釋,稀HNO3酸化,進(jìn)樣測定
2、石墨爐升溫程序:
①干燥:75℃-100℃,10S(斜坡升溫)②灰化450℃-500℃
30S 保持10S(斜坡)③原子化
2400℃
7S④清除
2500℃
3S
3、標(biāo)準(zhǔn)系列液: ①鉛標(biāo)準(zhǔn)液②TritonX-100液③正常人血
五、生化指標(biāo)的測定
(一)尿中σ—ALA的測定
1、原理:①σ—ALA可與乙酰乙酸乙酯縮合生成吡咯化合物
②用乙酸乙酯萃取吡咯化合物③顯色,加對一二甲氨基苯甲酸生成紅色化合物λmax=554nm
2、操作要點: ①兩份經(jīng)稀釋尿樣——加PH=6緩沖液
②樣品管加乙酰乙酸乙酯
③尿樣空白管補(bǔ)充緩沖液
④各沸水浴10min
⑤各加4mL乙酸乙酯萃取
⑥離心、靜置、分層
⑦取清夜顯色10min后測定
(二)全血中游離原卟啉的測定
1、原理:①用乙酸-乙酸乙酯破壞紅細(xì)胞②鹽酸萃取原卟啉,測定熒光強(qiáng)度
2、樣品處理: 1)樣品:20μL血+0.1mL生理鹽水
2)加硅藻土懸浮液,乙酸乙酯—乙酸液、振搖、破壞紅細(xì)胞
3)離心,取上清液加鹽酸萃取
第三節(jié)、鎘
一、接觸途徑:①鋅礦的開采及冶煉②工業(yè)上含鎘材料的生產(chǎn)③農(nóng)業(yè)上也有鎘化合物的應(yīng)用
二、代謝和生物監(jiān)測指標(biāo)
(一)代謝 1.吸收、呼吸道和消化道2.生物效應(yīng)
急性中毒靶器官:肺
慢性中毒靶器官:肺、腎、骨
3.排出少量由尿排出,屬于蓄積性元素
(二)生物監(jiān)測指標(biāo)
1、尿鎘:只反映長期接觸情況2血鎘:只反映近期接觸情況
三、鎘接觸指標(biāo)的測定——石墨爐原子吸收法
(一)尿鎘的測定
1、原理:用磷酸氫二銨液稀釋,直接標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量
2、石墨爐升溫順序
1)干燥0~100℃
30S(斜坡)
2)灰化
100~200℃
20S(斜坡)
400℃ 10S(階梯)
3)原子化
1800℃
5S
4)清除
2000℃
3S
3、標(biāo)準(zhǔn)系列液:①鎘標(biāo)準(zhǔn)液
②空白尿液
③基體改進(jìn)劑液
④1%NH3
(二)血鎘測定
1、原理:血樣加稀HNO3離心,取上清液測定,標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量
2、標(biāo)準(zhǔn)系列液
①鎘血標(biāo)準(zhǔn)液 :抗凝小牛全血+鎘標(biāo)準(zhǔn)液
②4%HNO3
第七節(jié):汞
一、接觸機(jī)會
①礦的開采與冶煉 ②電器和儀表制造 ③化學(xué)工業(yè)
二、代謝和生物監(jiān)測指標(biāo)
(一)動力學(xué)過程 1.吸收主要是呼吸道 2.分布 無機(jī)汞主要是腎、其次肝、腦 有機(jī)汞主要是腦 其次肝、胃 3.排出 尿汞 生物半減期2~3個月
(二)生物監(jiān)測指標(biāo) 1.血汞:反映近期接觸無機(jī)汞的量 2.尿汞:用于診斷汞中毒觀察驅(qū)汞療效
三、樣品采集、保存 1.尿樣:①隨機(jī)取一次尿樣 ②加堿NaOH使?jié)舛冗_(dá)到40g/L,4℃可保存2周 2.血 樣 ①周末血 ②抗凝 4℃可以保存數(shù)天
四、尿汞的測定——冷原子吸收法
(一)堿性氯化亞錫還原法
1.原理:在堿性條件及有Cd存在條件下,高濃度的SnCl2將有機(jī)汞及無機(jī)汞還原成元素,用測氯儀測定
2.標(biāo)準(zhǔn)系列液的配置 ①汞標(biāo)準(zhǔn)液 ②基體尿液 正常人混合尿 ③NaOH液 ④DL-半胱氨酸 3.測定 將上述標(biāo)準(zhǔn)系列液加1滴磷酸三酯,加SnCl2-CdSO4液立即通入空氣測定(載氣)4.說明:①磷酸三酯 消泡
②Cd2+催化作用
③DL-半胱氨酸起穩(wěn)定劑的作用,防止無機(jī)汞吸附揮發(fā);還可使有機(jī)汞不分解
④測定讀數(shù):讀取最大吸光度值
(二)酸性SnCl2還原法
1.原理:用KMnO4和濃H2SO4分解尿樣,使汞都轉(zhuǎn)化成Hg2+,用SnCl2還原成Hg,吹空氣導(dǎo)入測汞儀
2.測定:尿液和標(biāo)準(zhǔn)系列液同樣用KMnO4和濃H2SO4分解
3.說明:1)KMnO4和濃H2SO4加入的順序:先加KMnO4液再加濃H2SO4 2)測定前先對氣路系統(tǒng)進(jìn)行凈化;加SnCl2(酸性)測定空白水、吹氣觀察到儀器的響應(yīng)值為零為止 每次測定都使響應(yīng)值為0再測第二份
第三章:非金屬化合物及其代謝產(chǎn)物 第一節(jié):CO
一、代謝及生物監(jiān)測指標(biāo)
1.吸收: 呼吸道
2.生物效應(yīng):進(jìn)入機(jī)體與血紅蛋白結(jié)合形成碳氧血紅蛋白(HbCO)形式導(dǎo)致機(jī)體組織缺O(jiān)
2CO?Hb?HbCO
3.分布: 血液中HbCO形式
4.排出 呼出氣 約有1%被氧化成CO2
5.生物監(jiān)測指標(biāo) 1)血中碳氧血紅蛋白 2)呼出氣中CO
三、樣品的采集與保存
1.呼出氣:1)采集班中(3h后)或班末呼出氣
2)收集終末呼出氣
2.血液:1)采集班中(3h后)或接觸最高濃度時的血
2)抗凝
3)密閉保存 4℃ 11周 4)最好取靜脈血 5)受試者不抽煙
四、血中碳氧血紅蛋白的測定——分光光度法
+
1、原理:1)血中血紅蛋白的四種成分:Hb、HbO2、HbCO、HbMet
SO2)HbCO,HbMet?Na????Hb 3)測定Hb和HbCO吸光度,最大吸收波長分別為
223432nm和420nm
2、測定方法:
1)摩爾吸光系數(shù)的測定:用吸光系數(shù)代替
(1)過飽和HbO2液的制備,血樣用水和Tris液適量稀釋通入O2 30min(2)飽和HbO2液的制備:取(1)中2份通入N2
(3)飽和HbCO液制備 取(1)中2份,通入CO 10min(4)HbCO和Hb液制備 在(2)和(3)的溶液中加Na2S2O4固體
(2)?Hb
(3)?Hb,HbCO
(5)分別測定420nm和430nm吸光度作為吸光常數(shù)(有四個值)
SO2)血樣測定 稀釋血樣?Na????224HbHbCO 分別測420nm和430nm的吸光度
3.計算 :碳氧血紅蛋白(%)?A430K2-A420K4A420(K2?K4)?A430(K1?K3)
A420:血樣在420nm吸光度 ;A430血樣在430nm吸光度 K1、K2是HbCO在420nm、430nm的吸光常數(shù) K3、K4是Hb在420nm、430nm的吸光常數(shù)
4.注意事項:
(1)所用氮?dú)夂脱鯕鈶?yīng)為高純度氮和高純度氧,不純氮和氧氣中含微量的CO,能干擾測定結(jié)果
(2)連二亞硫酸鈉遇水易分解,在空氣中容易被氧化失效,應(yīng)以小瓶分裝使用,避免接觸空氣和水分
(3)測定吸光系數(shù)必須采用新鮮血液,一次測定值在儀器波長穩(wěn)定的情況下可以使用一段時間,但還應(yīng)定期核檢。
(4)測試液應(yīng)盡量避免接觸空氣,及時測定,否則會造成結(jié)果偏低
第二節(jié)
CS2
二、代謝及生物監(jiān)測指標(biāo)
(一)代謝
1、吸收:呼吸道、皮膚
2、生物轉(zhuǎn)化
1)吸收后約70~90%轉(zhuǎn)化為多種代謝產(chǎn)物
2)目前,接觸者中尿中已確認(rèn)的有3種:TTCA、2-巰基-2-噻唑啉酮-5,硫脲(其中TTCA研究較少,生減期為2h)
3)排出:a.代謝產(chǎn)物隨尿排出 b.約20~30%以原形從呼吸道排出
c.約1%以原形從尿中排出
(二)生物監(jiān)測指標(biāo)
1、尿中TTCA:班末尿
2、呼出氣中CS2,目前研究較少
三、樣品采集與保存
四、尿中TTCA的測定——HPLC法
1、樣品的處理:A、取離心后的尿樣 B、稀HCL酸化:乙醚提取
C、離心分層,去上層醚液于試管中
D、40℃用N2吹干加20ul甲醇定容
2、說明:A、尿樣經(jīng)離心后取上層尿液,易于分離
B、此法從國外引進(jìn),將原來的梯度洗脫改為等度洗脫。國外的梯度洗脫是用兩種配比的流動相切換洗脫
C、TTCA純品需自己純化
五、呼出氣中CS2測定
(一)GC法
1、樣品處理:(1)、呼出氣中CS2濃度在測定范圍內(nèi)不需要處理,直接進(jìn)樣
(2)、呼出氣中CS2低于測定濃度范圍需富集,用Tenron GC管富集
2、色譜條件:固定相:OV-17;檢測器:火焰光度檢測器
3、說明:(1)采集終末呼出氣,最后呼出的100ml
(2)TenronGC管:2,6-二苯基對苯醚的多孔聚合物,用于捕集/熱解吸
(3)富集測定要求做富集空白測定:用180ml氣體(沖洗氣)注入空白Tenron GC管中,熱解吸后測定
(二)檢氣管法:快速檢測法
1、根據(jù)檢氣管中形成色帶長度,粗略估計濃度
2、特點:操作簡單、快速、成本低、精度差,相對偏差達(dá)20%-30%以上 第四章
芳香烴及其代謝產(chǎn)物 第一節(jié)
苯
一、代謝及生物監(jiān)測指標(biāo)
1、吸收:主要是呼吸道,其次是皮膚
2、代謝與排泄
1)吸入的苯約50%以上以原形從肺中排出,約10%以原形儲存在有機(jī)組織中
2)約40%進(jìn)入血液循環(huán),在肝中代謝,代謝產(chǎn)物50%-70%的苯酚,6%為間苯二酚,2%為對苯二酚,還有極少量的粘糖酸等都以結(jié)合態(tài)從尿中排出 3)有極少量的苯以原形從尿中排出
3、生物檢測指標(biāo):
1)尿酚
A、因正常人尿中很有酚且個體差異大
B、尿酚不是特異性指標(biāo) C、僅用于群檢
2)呼出氣中的苯:在測定尿酚以后,測定呼出氣中苯作為確認(rèn)試驗 3)尿苯:1993年有人提出用尿苯作苯接觸的生物接觸指標(biāo),目前,還沒納入生物監(jiān)測指標(biāo)
二、呼出氣中苯的測定——GC法
(一)原理:用塑料袋或采樣管收集呼出氣,呼出氣用N2吹入活性炭管吸附(-78℃)280℃熱解吸,用載氣(N2)導(dǎo)入色譜儀,F(xiàn)ID檢驗,通過六通閥切換完成
(二)苯標(biāo)準(zhǔn)氣的配制:注入20ul苯于100ml玻璃配氣瓶中,臨用時從中抽取一定體積注入另一配氣瓶中稀釋成20ng/ml的苯標(biāo)準(zhǔn)氣
(三)測定 : 1)取苯標(biāo)準(zhǔn)氣(0.5、1.0、2.0ul)和樣品分別注入呼吸氣的采樣管中
2)將采集管37攝氏度恒溫2h
3)一端與六通閥連接,一端接N4)吹入冷阱(-78℃)中的活性炭管
5)熱解吸導(dǎo)入色譜儀
三、尿酚的測定——GC法
1、原理:尿樣加鹽酸加熱(90℃水浴)水解,再用乙醚萃取苯酚
2、尿樣采集與保存:班末尿50ml
4℃
2周
3、樣品處理與測定: 1)5.0ml尿樣,1ml濃鹽酸于具塞試管中,90℃水浴1h
2)、用3.0ml乙醚振搖萃取
3)取上層醚液注入GC儀
4、標(biāo)準(zhǔn)曲線:苯酚標(biāo)準(zhǔn)系列液用3ml乙醚提取
4、色譜條件(1)液晶柱分離
分離苯酚和鄰間對甲酚。
(2)FFAP柱,分離苯酚和對甲酚
5、說明:(1)3ml乙醚萃取要避免乙醚揮發(fā),分層后不是3ml,加乙醚補(bǔ)至3ml
(2)可用內(nèi)標(biāo)志法定量
四、甲苯、二甲苯
(一)代謝及生物監(jiān)測指標(biāo)
1)代謝
(1)甲苯 ①約15%~25%以原型呼出約1%從尿中排出
②約80%代謝甲苯→[O]苯甲酸→馬尿酸
馬尿酸排出的半減期為2~3人。
(2)二甲苯
①約5%原形從肺中呼出②60%~80%生物轉(zhuǎn)化主要終產(chǎn)物是甲基馬尿酸
2)生物監(jiān)測指標(biāo)
(1)甲苯①尿中馬尿酸非特異性對群體判斷有一定的定義②呼出氣體中甲苯作為確認(rèn)
(2)二甲苯 :尿中馬尿酸正常人尿中無甲基馬尿酸特異性指標(biāo)
(二)、尿中馬尿酸的測定—比色法
(喹啉 苯磺酰氯比色法)
(1)原理
(2)樣品采集
兩天后班末尿,按100+1體積比加氯仿
(3)樣品處理與測定
(4)注意事項 :
1、試劑加入順序不能顛倒
2、日光對顯色有破壞作用要避光放置(加入苯磺酰氯后)
第四節(jié) 乙苯
一、代謝及生物監(jiān)測指標(biāo)
(一)代謝與排泄
1、只有少部分以原形從呼吸道排出。
2、70%以上代謝后隨尿排出,主要代謝產(chǎn)物為扁桃酸60%苯酰甲酸25%
(二)監(jiān)測指標(biāo):
1、呼出氣體中乙苯
2、尿中扁桃酸(非特異性)
二、生物監(jiān)測方法:
1、呼出氣體中乙苯的測定GC法與呼出氣中笨的測定類似
2、尿中扁桃酸的測定 HPLC法
內(nèi)標(biāo)法定量 內(nèi)標(biāo)物 4-羥基苯甲酸
第五章 芳香族硝基和氨基化合物
第一節(jié) 苯胺
一、代謝和生物監(jiān)測指標(biāo)
1、吸收:主要通過呼吸道吸收,很容易經(jīng)皮膚吸收
2、代謝 ①主要代謝途徑:苯胺—苯基羥胺—對氨基酚
②接觸24h后,有15~60%轉(zhuǎn)化為對氨基酚、以結(jié)合態(tài)隨尿排出
3、生物監(jiān)測指標(biāo):尿中對氨基酚
正常人尿中含微量對氨基酚平均3.7mg/L
二、尿中對氨基酚的測定
(一)鹽酸萘乙二胺分光光度法
1、原理:①尿中對氨基酚經(jīng)水解。萃取分離
②重氮化偶合顯色。重氮化試劑:亞硝酸鹽
偶和顯色劑:鹽酸萘乙二胺
2、操作要點
(1)樣品處理:①鹽酸酸化沸水浴水解約1人 ②萃取先用NaOH調(diào)中性,用乙酸乙酯萃取,再用鹽酸溶液反萃取。
(2)重氮化偶合反映 ①重氮化,酸性條件下加過量的亞硝酸鹽、反應(yīng)10min
②除過量的NaNO2液加氨基磺酸胺溶液至無色氣泡產(chǎn)生止放10min
③偶合反應(yīng)顯色:加鹽酸萘乙二胺生成紫紅色
(3)比色定量
580nm 尿空白管作參比,標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量
3、說明:(1)尿樣應(yīng)采集班末或班后尿,采樣前要詢問受檢者是否服用藥物
(2)重氮化反應(yīng),NaNO2過量才能完全重氮化 但NaNO2對偶和顯色有干擾
(3)重氮化反應(yīng)應(yīng)在盡量低溫條件下進(jìn)行,而偶合反應(yīng)在60°為宜,水浴加
熱前,偶合劑加入后充分混合(二)HPLC法
1樣品處理:
(1)水解,同上法
(2)萃取
①先在酸性條件下用乙酸乙酯萃取 ②再在中性條件下用乙酸乙酯萃取對氨基酚(兩次萃取除雜質(zhì))
2、說明:P96 用磷酸氫二鉀(弱堿)調(diào)節(jié)PH值
第二節(jié):硝基苯
一、代謝產(chǎn)物和生物監(jiān)測指標(biāo)
1、吸收:很容易從皮膚吸收,主要從呼吸道吸收。
2、代謝:代謝產(chǎn)物有硝基酚和氨基酚還有少量苯胺,對硝基酚13—16%,對氨基酚10%。
3、排出:①代謝產(chǎn)物與葡萄糖醛酸和硫酸結(jié)合,隨尿排出。②少量以原形級微量本案隨呼出氣排出。
4、生物監(jiān)測指標(biāo)
尿中對硝基酚(特異性)
二、尿中對硝基苯酚的測定
P98
(一)、鄰甲酚分光光度法
1、原理:①尿樣經(jīng)酸水解。②苯取 先用混合有機(jī)溶劑取,再用氫氧化銨溶液反萃取。③還原
用三氯化鈦將其還原成對氨基酚。④鄰甲酚顯色
藍(lán)色600nm比色定量。
2、樣品處理:1)水解 鹽酸酸化沸水浴1h。2)萃取 先用異戊醇—石油醚—乙醚萃取,再用3mol/L氯水反萃取。
3、顯色測定 ①先加鄰甲酚,再加三氯化鈦溶液。②立即振搖至黃色沉淀變成淡黃色沉淀,過濾③30min后600nm測定吸光度。
(二)HPLC法
1、樣品處理 1)水解同上法。2)萃取 二氯甲烷萃取3次定容至20ml。
2、說明
1)尿液采集后,盡快加鹽酸,10c以下運(yùn)輸。2)流動相配比和流速可根據(jù)儀器性能調(diào)整。
第三節(jié):三硝基甲苯
TNT
2,4,6—三硝基甲苯
一.代謝 1)經(jīng)氧化還原化合等途徑代謝。2)以還原代謝途徑為主,主要代謝物4—硝基—2,6—二硝基甲苯。3)各種代謝產(chǎn)物以結(jié)合態(tài)隨尿排出。二.生物監(jiān)測指標(biāo)
4—A 三.GC法測定尿中4—A
o
1、樣品處理:1)鹽酸酸化沸水浴1h。2)萃取代謝 加固體碳酸氫鈉調(diào)PH7—8用甲苯萃取(尿樣1ml,甲苯1ml)2.色譜條件:
1)檢測器 ECD
2)固定相:OV—17(固定液)
3)柱溫 220℃
程序升溫效果更好
200℃(0.4min)10℃/min
220℃
5℃/min
240℃
第六章:鹵代烴化合物及其代謝產(chǎn)物的測定 第一節(jié):氯乙烯
一、代謝
1)經(jīng)呼吸道吸入大部分以原形從呼吸道中排出
2)少部分在肝臟轉(zhuǎn)化①先轉(zhuǎn)化成一種致癌活性物環(huán)氧氯乙烯
②在甘光甘肽或半胱氨酸參與下最終代謝物為亞硫基二乙酸(硫代二乙酸)
3)少量的氯乙烯以原形隨尿液排出
二、生物監(jiān)測指標(biāo):尿中硫代氯乙酸,呼出氣中氯乙烯很少作為檢測指標(biāo)
三.GC法測定尿中硫代氯乙酸
(一)原理 ①尿樣經(jīng)酯化后水蒸氣蒸至近干 ②甲醇—乙醚溶解其中的硫代二乙酸 ③酯化 重氮甲烷酯化 ④火焰光度計監(jiān)測
(二)樣品處理: 1)1ml尿液加0.1mlHCl酯化 2)瓷蒸發(fā)皿水蒸氣蒸干至結(jié)晶狀態(tài) 3)甲醇—乙醚溶解殘渣,上層夜轉(zhuǎn)入離心管混水浴濃縮至1ml
(三)酯化 :(通風(fēng)柜中進(jìn)行)亞硝基甲脲與氫氧化鈉溶液反應(yīng)生成重氮甲烷氣體導(dǎo)入樣液酯化溶液至淺黃色為止,在放置10min,最終用甲醇定容。
(四)注意事項?
第三節(jié):三氯乙烯和四氯乙烯
一、代謝與生物監(jiān)測指標(biāo)
(一)代謝 1.三氯乙烯 1)吸入約20%以原形從肺中排出 2)有50—60%儲存在體內(nèi)(蓄積性)3)大部分在肝中轉(zhuǎn)化成三氯乙酸和三氯乙醇還有少量一氯乙酸 4)脫離接觸50h后,尿中三氯乙酸濃度達(dá)到最高。2.四氯乙酸 ①約98%經(jīng)肺排出 ②約2%代謝轉(zhuǎn)化成三氯乙酸
(二)生物監(jiān)測指標(biāo) 1.三氯乙烯:①尿中三氯乙酸和三氯乙醇聯(lián)合作為三氯乙烯接觸的生物監(jiān)測指標(biāo) ②呼出空氣中三氯乙烯特異性指標(biāo)
2.四氯乙烯:①尿中三氯乙酸 非特異性 ②呼出空氣中 特異性
二、尿中三氯乙酸的測定
(一)頂空GC法
??三氯乙烷
1、原理 ①在密閉頂空瓶中 三氯乙酸??②抽取頂空氣注入氣相色譜儀 ③FID檢測 內(nèi)標(biāo)法定量 內(nèi)標(biāo)物為正丁醇
第七章:農(nóng)藥接觸指標(biāo)的測定
第一節(jié)、有機(jī)磷農(nóng)藥 二代謝和生物監(jiān)測指標(biāo)
(一)、毒性效應(yīng) 抑制膽堿酯酶的活性造成乙酰膽堿過量,導(dǎo)致膽堿能神經(jīng)過度興奮,使中樞神經(jīng)系統(tǒng)紊亂
(二)、膽堿酯酶
1.真性膽堿酯酶
1)指的是乙酰膽堿酯酶和紅細(xì)胞膽堿酯酶 2)主要存在于神經(jīng)組織和細(xì)胞中 3)對乙酰膽堿有很高的特異性 4)在血中活性占80%以上
2、假性膽堿酯酶 1)指的是血清膽堿酯酶 2)存在于血清中 3)是非特異性膽堿酯酶 4)在血中活性約20%
(三)生物監(jiān)測指標(biāo) :血中膽堿酯酶活性——效應(yīng)性指標(biāo)
(三全血中膽堿酯酶的活性測定)(1)三氯化鐵分光光度法
??乙酸+膽堿
1.原理:①乙酰膽堿?NH2OH酶②剩余的乙酰膽堿與羥胺反應(yīng) 乙酸膽堿
FeCl3OH-乙酰羥胺
??紅色物質(zhì) 520nm測定吸光度標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量 ③顯色 乙酰羥胺??
2、標(biāo)準(zhǔn)系列液——乙酰膽堿標(biāo)準(zhǔn)系列液
3、樣品處理及測定
1)樣品處理:①將A、B兩個樣品管37℃水浴5min ②向A管加入乙酰膽堿標(biāo)液1ml,37℃水浴中精確反應(yīng)30min(每隔10min振搖一次)取出 ③立即向A、B管各加膽堿羥胺液4ml ④再向B管加乙酰膽堿標(biāo)液1ml
2)測定 向A、B管及標(biāo)準(zhǔn)管各加鹽酸(1+2)2ml 加2ml FeCl3液振搖過濾 520nm測定吸光度
4、計算:被水解的乙酰膽堿吸光度=AB-AA以此吸光度(差值)查標(biāo)準(zhǔn)曲線得到被水解乙酰膽堿量(μmol)此值為40ul血37℃反應(yīng)30min膽堿酯酶活性絕對值(G)
全血膽堿酯酶活性(μmol/ml)=c/0.04(絕對值)
全血膽堿酯酶活性相對值(%)=C/正常人血膽堿酯酶活性
5、注意事項:P116(2)DTNB分光光度法 : 硫代乙酰膽堿試劑測定血清中酶活性
第三篇:生物檢驗實習(xí)總結(jié)1
一、實習(xí)目的及單位概況
實習(xí)目的在我們即將畢業(yè)步入社會的前夕,為了檢驗我們所學(xué)的理論知識,達(dá)到理論聯(lián)系實際的目的。學(xué)校組織畢業(yè)班的學(xué)生與本學(xué)期1——4周進(jìn)行為期一個月的畢業(yè)生產(chǎn)實習(xí)。畢業(yè)實習(xí)是在完成全部基礎(chǔ)課程和專業(yè)課程的學(xué)習(xí)后通過到企業(yè)生產(chǎn)環(huán)節(jié)的實踐進(jìn)一步鞏固加深課堂所學(xué)過的知識。通過在工作單位進(jìn)行實地的實踐,更好的深化自己在學(xué)校所學(xué)的知識,鍛煉自己,使自己能更深的了解社會,畢業(yè)時能更好的融入社會。而且,通過畢業(yè)實習(xí),多掌握一些有用的技能,為下一步找工作做準(zhǔn)備。
1.單位概況
本單位是國家設(shè)質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督檢驗檢疫總局的一個分支,下設(shè)各省縣市區(qū)局,主要職能是:
(一)負(fù)責(zé)《計量法》、《標(biāo)準(zhǔn)化法》、《產(chǎn)品質(zhì)量法》、《特種設(shè)備安全監(jiān)察條例》、《棉花質(zhì)量監(jiān)督管理條例》等法律、法規(guī)及相關(guān)配套法規(guī)、規(guī)章的貫徹實施和行政執(zhí)法;
(二)統(tǒng)一管理標(biāo)準(zhǔn)化工作。宣傳貫徹國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)、地方標(biāo)準(zhǔn)并實施監(jiān)
督;負(fù)責(zé)農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化的實施及其示范區(qū)工作;管理組織機(jī)構(gòu)代碼和商品條碼工作。
(三)統(tǒng)一管理計量工作。推行法定計量單位,保障國家計量單位制的統(tǒng)一和量值的準(zhǔn)確可靠;組織開展計量器具的強(qiáng)制檢定和量值傳遞;查處生產(chǎn)和流通領(lǐng)域的計量違法行為,組織計量仲裁檢定,調(diào)解計量糾紛。
(四)負(fù)責(zé)宣傳貫徹GB/T19000-ISO9000系列標(biāo)準(zhǔn),積極推進(jìn)質(zhì)量認(rèn)證工作,并按省質(zhì)監(jiān)局的部署,對質(zhì)量認(rèn)證中介機(jī)構(gòu)的行為和認(rèn)證標(biāo)志的使用進(jìn)行監(jiān)督。
(五)負(fù)責(zé)鍋爐、壓力容器、壓力管道、電梯、起重機(jī)械、防爆電器等特種設(shè)備的安全監(jiān)察和監(jiān)督管理工作,依法查處各類違法行為。
(六)負(fù)責(zé)棉花等纖維質(zhì)量監(jiān)督工作,依法查處收購、加工、銷售、倉儲等環(huán)節(jié)的違法行為。
(七)負(fù)責(zé)質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督行政執(zhí)法工作。依法組織查處產(chǎn)品質(zhì)量、標(biāo)準(zhǔn)和計量違法行為。受理消費(fèi)者投訴和舉報,受理工商部門移交的在流通領(lǐng)域查出的屬于生產(chǎn)環(huán)節(jié)引起的產(chǎn)品質(zhì)量問題,并依法組織查處。辦理行政復(fù)議案件。承擔(dān)市政府“打假辦”的日常工作,組織協(xié)調(diào)本市的“打假”工作,完成市政府授權(quán)牽頭的市場專項整治任務(wù)。
本單位主要職責(zé)是:建立、保存、相濟(jì)使用本地區(qū)社會公用計量標(biāo)準(zhǔn)和質(zhì)量檢驗設(shè)備裝置,承擔(dān)量值傳遞、強(qiáng)制檢定、仲裁檢定、委托鑒定、非強(qiáng)制檢定、校準(zhǔn)和檢測任務(wù)。承擔(dān)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗、委托檢驗、仲裁檢定、新產(chǎn)品質(zhì)量檢定檢驗等多種產(chǎn)(商)品質(zhì)量檢驗工作。
二、實習(xí)內(nèi)容
通過國家或省制定的食品衛(wèi)生檢測標(biāo)準(zhǔn),檢測食品中各項化學(xué)物質(zhì)或 元素的或微生物的含量以及 含量是否超標(biāo)。例如酸牛乳質(zhì)量檢測標(biāo)準(zhǔn):(1)感官檢測(2)凈含量(3)脂肪(4)蛋白質(zhì)(5)非脂乳國體(6)總固形物(7)酸度(8)蘋果酸(9)山梨酸(10)硝酸鹽(11)亞硝酸鹽(12)黃曲霉素M(13)大腸桿菌群(14)酵母(15)霉菌(16)致病菌(17)乳酸菌(18)鉛(19)無機(jī)砷(20)標(biāo)簽.學(xué)習(xí)并掌握各項各項指標(biāo)的檢測。還有很多食品很多項,再次就不一一介紹了。
三、實習(xí)結(jié)果
我感覺通過這一個多月的學(xué)習(xí),我基本掌握的檢測項有:糕點的過氧化值檢測,酸價,砷得測定,掛面烹調(diào)損失得測定,食品中脂肪的測定,食品中有機(jī)酸的測定,食品中蛋白質(zhì)的測定,生活飲用水好氧量的測定,食品中淀粉的測定,等等
四、實習(xí)總結(jié)和體會
作為2009年的畢業(yè)生就業(yè)壓力相較去年會更大了很多,我是一名生物工程系,生物技術(shù)及應(yīng)用專業(yè)的大專畢業(yè)生。面對就業(yè)這個難問題深感其困難所在。一個偶然的機(jī)會可以讓我在平頂山市技術(shù)監(jiān)督檢驗測試中心實習(xí),雖說在學(xué)校學(xué)習(xí)過可都是理論知識,并沒實際操作過,心中始終有個心結(jié)又帶著那樣的迷惑,不安和好奇。
我在這一個多月里學(xué)到了很多書本以外的東西,任何一個企業(yè)都有它自己的企業(yè)文化,正是這種文化使大家得力量超一個方向使只要大家齊心協(xié)作沒有辦不了得事。提到協(xié)作就是要同事之間互相幫助。剛到單位我是一個沒有任何工作經(jīng)驗的實習(xí)生,產(chǎn)生錯誤或者做的不到位的地方肯定是有的,但我要正視我的缺點,遇事不急噪要以溫和的態(tài)度。
雖然實習(xí)結(jié)束了,但是我覺的該學(xué)得還有很多很多,從身邊的每一個細(xì)小的事件上我們都能學(xué)到做人或者做事的經(jīng)驗。希望我的路會越走越好,希望朋友們的路也越走越好。記得奮斗!以后是我們的!
第四篇:生物藥物分析與檢驗知識分析
生物藥物分析與檢驗知識分析
摘 要:本次課程主要講生物藥物分析與檢驗常用的方法,雜質(zhì)與安全檢查,氨基酸、多肽和蛋白質(zhì)類藥物的分析與檢驗,酶類藥物的分析與檢驗,脂類藥物的分析與檢驗,核酸類藥物的分析與檢驗,糖類藥物的分析與檢驗,基因工程藥物質(zhì)量控制,生物藥物的現(xiàn)代分析方法與檢驗技術(shù)。
關(guān)鍵詞:發(fā)展前景分析檢驗方法安全應(yīng)用
生物藥物分析與檢驗在將來相當(dāng)長的時間內(nèi)也仍是研究開發(fā)的主要方面,但隨著現(xiàn)代生物技術(shù)的研究與應(yīng)用日趨成熟,生物技術(shù)制藥領(lǐng)域?qū)l(fā)揮越來越重要的作用。其發(fā)展趨勢主要表現(xiàn)在:⑴應(yīng)用基因工程技術(shù),制取天然來源少和過去難以獲得的生物活性物質(zhì);⑵應(yīng)用蛋白質(zhì)工程技術(shù)研制新型蛋白質(zhì)類藥物;⑶大分子物質(zhì)活性片段的制取和化學(xué)修飾;⑷發(fā)展大分子藥物的新劑型。
生物藥物分析與檢驗的基本任務(wù)和作用是:使學(xué)生掌握生物藥物分析與檢驗的基本理論知識和生物藥物基本分析檢驗方法,培養(yǎng)學(xué)生重視生物藥物質(zhì)量的觀念,從而不斷提高分析問題和解決問題的能力。
它的內(nèi)容主要包括生物藥物分析與檢驗常用的方法,雜質(zhì)與安全檢查,氨基酸、多肽和蛋白質(zhì)類藥物的分析與檢驗,酶類藥物的分析與檢驗,脂類藥物的分析與檢驗,核酸類藥物的分析與檢驗,糖類藥物的分析與檢驗,基因工程藥物質(zhì)量控制,生物藥物的現(xiàn)代分析方法與檢驗技術(shù)。
生物藥物廣泛用作醫(yī)療用品,特別是在傳染病的預(yù)防和某些疑難雜癥的診斷和治療上起著其他藥物所不能代替的獨(dú)特作用。隨著預(yù)防醫(yī)學(xué)和保健醫(yī)學(xué)的發(fā)展,生物藥物正日益滲入到人民生活的各個領(lǐng)域,大大擴(kuò)展了其應(yīng)用范圍。(1)、治療藥物 腫瘤、愛滋病、心腦血管疾病等。(2)、預(yù)防藥物傳染性強(qiáng)的疾病,疫苗、菌苗、類毒素。(3)、診斷藥物 速度快、靈敏度高、特異性強(qiáng)。免疫診斷、酶診斷、放射性診斷、基因診斷試劑。(4)、其它 生化試劑、保健品、化妝品、食品、醫(yī)用材料。
生物藥物是指利用生物體、生物組織或器官等成分,綜合運(yùn)用生物學(xué)、生物化學(xué)等學(xué)科的原理與方法制得的天然生物活性物質(zhì)以及人工合成或半合成的天然物質(zhì)類似物。主要包括生化藥物、生物技術(shù)藥物和生物制品等。生物藥物分析”主要包括對生物藥物進(jìn)行分析的理論和實驗技術(shù)。而生物藥物是指利用生物體、生物組織或器官等成分,綜合運(yùn)用生物學(xué)、生物化學(xué)等學(xué)科的原理與方法制得的天然生物活性物質(zhì)以及人工合成或半合成的天然物質(zhì)類似物。主要包括生化藥物、生物技術(shù)藥物和生物制品等。
藥物分析工作的基本程序:(1)、樣品審查。(2)、取樣。(3)、鑒別。(4)、檢查。(5)、含量測定。(6)、記錄。(7)、檢驗報告。
酶分析法是一種生物藥物分析方法。酶分析法在生物藥物分析中的應(yīng)用主要有兩個方面:第一,以酶為分析對象,根據(jù)需要對生物藥物生產(chǎn)過程中所使用的酶和生物藥物樣品所含的酶進(jìn)行酶的含量或酶活力的測定,稱為酶分析法;第二,利用酶的特點,以酶作為分析工具或分析試劑,用于測定生物藥物樣品中用一般化學(xué)方法難于儉測的物質(zhì),如底物、輔酶、抑制劑和激動劑(活化劑)或輔助因子含量的方法稱為酶法分析。
優(yōu)勢:酶是一種專一性強(qiáng)、催化效率高的生物催化劑。酶法分析具有特異性強(qiáng),干擾少,操作簡便,樣品和試劑用量少,測定快速精確,靈敏度高等特點
免疫分析法:免疫分析法利用抗原抗體特異性結(jié)合反應(yīng)檢測各種物質(zhì)(藥物、激
素、蛋白質(zhì)、微生物等)的分析方法。
應(yīng)用:在藥物分析中,免疫分析法的應(yīng)用主要集中在以下幾方面:(1)在實驗藥物動力學(xué)和臨床藥物學(xué)中測定生物利用度和藥物代謝動力學(xué)參數(shù)等生物藥劑學(xué)中的重要數(shù)據(jù),以便了解藥物在體內(nèi)的吸收、分解、代謝和排泄情況;(2)在藥物的臨床檢測中,對治療指數(shù)小、超過安全劑量易發(fā)生嚴(yán)重不良反應(yīng)或最佳治療濃度和毒性反應(yīng)濃度有交叉的藥物血液濃度進(jìn)行監(jiān)測;(3)在藥物生產(chǎn)中從發(fā)酵液或細(xì)胞培養(yǎng)液中快速測定有效組分的含量,以實現(xiàn)對生產(chǎn)過程的在線監(jiān)測;(4)對藥品中是否存在特定的微量有害雜質(zhì)進(jìn)行評價。高效液相色譜:以液體為流動相,采用高壓輸液系統(tǒng),將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內(nèi)各成分被分離后,進(jìn)入檢測器進(jìn)行檢測,從而實現(xiàn)對試樣的分析。
生物檢定法:利用某些生物對某些物質(zhì)(如維生素、氨基酸)的特殊需要,或?qū)δ承┪镔|(zhì)(如激素、植物激素、抗生素、藥物等)的特殊反應(yīng)來定性、定量測定這些物質(zhì)的方法
生物測定今后的方向是:發(fā)展更敏感的短期實驗方法和能測定綜合因素的方法,并選擇適當(dāng)?shù)姆椒ńM成系列檢測系統(tǒng);研究其他生物試驗得到的數(shù)據(jù)如何推演到人;研究外界物質(zhì)進(jìn)入機(jī)體后如何代謝,進(jìn)入細(xì)胞后起什么作用,如何影響遺傳物質(zhì),化學(xué)結(jié)構(gòu)與毒性有什么關(guān)系;探索“三致”的機(jī)理等,以為人類戰(zhàn)勝癌癥、遺傳性疾病和衰老提供科學(xué)依據(jù)。
雜質(zhì)是指藥物中存在的無治療作用或影響藥物的穩(wěn)定性和療效,甚至對人健康有害的物質(zhì)。一般雜質(zhì)及其檢查方法:
(一)、氯化物檢查法。
(二)、硫酸鹽檢查法。
(三)、鐵鹽檢查法。
(四)、重金屬檢查法。
(五)、其他檢查法
氨基酸,多肽,蛋白質(zhì)和酶類藥品檢驗:氨基酸類藥品檢驗:酸堿滴定法,非水溶液滴定法,定氮法,碘量法或溴量法等。多肽類藥品檢驗:酸堿滴定法,紫外分光光度法,效價測定法。
基因工程藥物檢測:基因工程藥物的質(zhì)量控制主要包括以下幾項要求:產(chǎn)品的鑒別、純度、活性、安全性、穩(wěn)定性和一致性。常用的鑒定方法:電泳方法: SDS-PAGE、等電聚焦、免疫電泳;免疫學(xué)方法: 放射免疫(RIA)、酶聯(lián)免疫(ELISA)
參考文獻(xiàn)
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第五篇:微生物檢驗人員的生物安全防范措施
微生物檢驗人員的生物安全防范措施
【摘要】微生物檢驗實驗室最常見的潛在感染因素有,化學(xué)感染、生物感染、物理感染以及檢驗人員的主觀因素等。本文主要對微生物檢驗人員的生物安全防范措施進(jìn)行分析,以控制、預(yù)防感染為主要目的。
【關(guān)鍵詞】微生物;檢驗人員;生物安全;防范措施 前言
對微生物進(jìn)行檢驗的過程中,均有可能出現(xiàn)出現(xiàn)意外事故,而出現(xiàn)意外事故的主要原因為檢驗人員的安全防護(hù)意識相對較差,加上實驗室的管理制度較為落后,以及實驗室的消毒與清潔工作不到位等。出現(xiàn)的意外事故會對檢驗人員的生命安全產(chǎn)生較大的威脅,并且會對生物安全的防護(hù)工作產(chǎn)生較大的影響。因此,制定安全、有效的防護(hù)措施,能夠?qū)τ谖⑸餀z驗人員的人身安全有一定的保護(hù),并且具有一定的重要性。1.微生物實驗室潛在的危險因素
在實驗室獲得性感染中,立克次體所占的比例最小,其次到病毒感染,細(xì)菌感染所占的比例最高。在細(xì)菌感染中衣原體感染的致死率相對較高,在病毒感染中肝炎病毒與委內(nèi)瑞拉腦炎病毒的致死率相對較高。而哪些因素在實驗室感染中有一定的作用?
主觀因素:實驗室的工作量相對較大、檢驗的時間相對緊迫以及相關(guān)管理制度的不健全等,從而導(dǎo)致檢驗人員的對實驗室潛在的安全隱患認(rèn)識相對淺薄,無菌操作的意識較為薄弱,并且自我保護(hù)意識相對較弱。檢驗人員在實際工作的過程中經(jīng)常不按照相關(guān)工作流程來進(jìn)行工作,在進(jìn)行微生物檢驗的過程中經(jīng)常出現(xiàn)不戴口罩、工作帽,不及時對手部進(jìn)行進(jìn)行清洗和消毒等情況。除此之外,還會出現(xiàn)部分檢驗人員戴著污染手套接聽電話、飲水、吸煙、進(jìn)食或者是穿著工作服進(jìn)入員工休息室等現(xiàn)象。
生物原因:大部分的微生物實驗室的設(shè)計并不科學(xué),室內(nèi)的通風(fēng)效果相對較差,而在對微生物標(biāo)本進(jìn)行離心過程中,出現(xiàn)的標(biāo)本外溢以及產(chǎn)生的氣溶膠會對工作臺、室內(nèi)空氣以及實驗室地面產(chǎn)生較大的污染。而檢驗員經(jīng)常接觸的標(biāo)本均為肝炎、呼吸疾病等,該種標(biāo)本在離心的過程中會對空氣的質(zhì)量產(chǎn)生較大的影響。2.安全防護(hù)措施
2.1安全防護(hù)知識教育與宣傳
我國的醫(yī)療教育與管理模式相對落后、安全防護(hù)意識薄弱等因素,會給我國醫(yī)療事業(yè)以及科研事業(yè)產(chǎn)生一定的不良影響。為提升微生物檢驗人員的人身安全,增強(qiáng)檢驗人員的安全防護(hù)意識以及安全防護(hù)意識具有一定的重要性,因此,醫(yī)院管理人員需要組織院內(nèi)微生物實驗室檢驗人員進(jìn)行安全知識學(xué)習(xí),讓檢驗人員能夠在提升自身技能知識的同時,重視人身安全保護(hù)。
除此之外,提升生物安全防范意識,一方面能夠讓檢驗人員了解到微生物對人體產(chǎn)生的危害,另一方面能夠?qū)z驗人員的生命安全起到一定的保障作用。檢驗人員在工作的過程中應(yīng)該自覺遵守工作的相關(guān)制度,并且需要做好生物安全防范措施以及意外事故的處理方法,不斷在工作中提升對安全生產(chǎn)的重視程度,以確保自身的安全以及實驗室的安全。2.2建立健全相應(yīng)管理制度與操作規(guī)范
建立健全相應(yīng)的管理制度與操作規(guī)范,在一定程度上能夠避免檢驗人員遭受危險生物的侵害,讓檢驗人員的人身安全得到一定的保障。建立健全微生物實驗室安全管理制度,一方面能夠讓檢驗人員在實際工作的過程中嚴(yán)格按照相應(yīng)的規(guī)章制度來進(jìn)行實驗與生產(chǎn),能夠最大限度地保護(hù)檢驗人員的人身安全。如此一來,不但能夠規(guī)范檢驗的工作流程,而且能夠保證檢驗人員的人生安全,讓檢驗人員能夠全身心投入工作。因此,建立健全相應(yīng)的管理制度以操作規(guī)范能夠保障檢驗人員的生命安全,降低安全隱患的發(fā)生概率。2.3做好實驗室的消毒與清潔工作
實驗室的消毒與清潔工作對生物安全具有一定的保障作用,只有真正做到全面的消毒與清潔,才能夠為檢驗人員提供安全的工作環(huán)境。檢驗人員在對實驗室進(jìn)行消毒與清潔的過程中,一定要做到先消毒后清潔,避免檢驗人員在次日的工作中觸摸或者接觸到被細(xì)菌沾染的物品,導(dǎo)致檢驗得出的結(jié)果受到影響,這些遺留的細(xì)菌極有可能對檢驗人員進(jìn)行侵害。因此,必須對實驗室進(jìn)行嚴(yán)格地消毒與清潔,避免對檢驗人員產(chǎn)生不必要的傷害。2.4廢物處理
工作人員需要采用相應(yīng)的措施,對實驗室內(nèi)產(chǎn)生的廢物進(jìn)行相應(yīng)的處理。在對實驗室廢物進(jìn)行處理的過程中,管理人員需要進(jìn)行實時監(jiān)督,防止實驗廢物出現(xiàn)泄露、流失以及擴(kuò)散等情況。因此,管理人員需要對專門對實驗室廢物進(jìn)行收集、運(yùn)輸以及處理等工作的負(fù)責(zé)人進(jìn)行相應(yīng)的培訓(xùn),加強(qiáng)工作人員的工作責(zé)任心。3.小結(jié)
采取有效且積極的個人防護(hù)措施在一定程度上能夠降低實驗室檢驗人員在實驗室內(nèi)遭受細(xì)菌侵害的概率,并且能夠確保檢驗工作的順利進(jìn)行,能夠提升整個部門的工作安全性。就目前而言,大部分微生物檢驗人員的安全防范意識較為薄弱,導(dǎo)致實驗室的安全事故時有發(fā)生,對檢驗人員的生命安全產(chǎn)生較大的影響和威脅,因此,采用有效的安全防護(hù)措施具有一定的作用和意義。在對微生物檢驗人員進(jìn)行安全防護(hù)的過程中,需要對工作人員進(jìn)行安全知識教育與宣傳,讓檢驗人員能夠明白安全工作的重要性,讓其能夠在實際工作的過程中提高警惕,提升對實驗室的安全生產(chǎn)的重視程度,降低安全事故的發(fā)生概率,以保證檢驗人員的人身安全。【參考文獻(xiàn)】
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