第一篇：微生物實驗室生物安全管理工作自查報告

榆次區(qū)疾控中心

微生物實驗室生物安全管理工作自查報告

為加強(qiáng)我中心微生物實驗室生物安全管理工作，確保實驗室各項工作的有效有序進(jìn)行，確保微生物實驗室不發(fā)生生物安全事件，保障公眾健康，維護(hù)社會穩(wěn)定，根據(jù)晉中市衛(wèi)生局文件要求，對照檢查內(nèi)容，對我中心微生物實驗室生物安全管理工作進(jìn)行了自查工作，檢查結(jié)果如下：

一、組織機(jī)構(gòu)及管理制度

我中心微生物實驗室具有完善的生物安全管理責(zé)任制和生物安全管理制度，建有實驗室生物安全自查制度，制定有實驗室生物安全手冊和實驗室生物安全事件應(yīng)急預(yù)案，所有實驗活動均有實驗記錄并進(jìn)行歸檔。

二、實驗室布局設(shè)施及環(huán)境

微生物實驗室分區(qū)明確，分為污染區(qū)、半污染區(qū)和清潔區(qū)，不同區(qū)域之間無交叉分布，實驗室門有可視窗，并標(biāo)示有生物安全標(biāo)識和生物安全危害警告，工作人員衣物與實驗室工作服及物品分開存放，實驗室臺面、墻壁、天花板和地面易清潔、無滲水、耐化學(xué)品和消毒劑的腐蝕，實驗室配備有生物安全柜并儲備有足夠的實驗防護(hù)用品和器材，制定有實驗室生物安全事件應(yīng)急預(yù)案，在實驗室的出口處配備有洗手消毒設(shè)施，二級實驗室在工作區(qū)配備有洗眼裝置等，有高壓蒸汽滅菌器，實驗室有可靠的電力供應(yīng)，實驗室所有設(shè)備功能正常，狀態(tài)良好，并進(jìn)行定期維護(hù)，每天早晨均監(jiān)測室內(nèi)環(huán)境參數(shù)，且參數(shù)符合工作要求和衛(wèi)生相關(guān)要求。

三、人員與管理

微生物實驗室工作人員均經(jīng)過職業(yè)技術(shù)的職稱考試，考核合格并取得資質(zhì)，HIV實驗室工作人員每年均定期進(jìn)行健康檢查，并建有實驗室工作人員健康檔案，所有實驗室的活動均符合有關(guān)國家標(biāo)準(zhǔn)、技術(shù)規(guī)范和操作規(guī)程，非實驗有關(guān)物品不得進(jìn)入實驗室，實驗操作人員防護(hù)水平符合相關(guān)規(guī)定。

四、實驗室生物安全突發(fā)事件的處理工作

制定了艾滋病職業(yè)暴露應(yīng)急預(yù)案、實驗室污染及安全事故應(yīng)急處置預(yù)案，處置意外事件的應(yīng)急指揮和處置體系，能滿足實際工作的需要。同時規(guī)范了皮膚刺傷（破損）的處理原則、離 1 心管發(fā)生破裂的處理原則并建立了意外事故報告制度。

五、菌（毒）種及樣本管理

本實驗室不保存病原微生物菌（毒）種和樣本。

六、廢物處置

實驗室產(chǎn)生的垃圾、廢物分類收集，并有內(nèi)部交接記錄，實驗室內(nèi)供感染性材料、廢物暫存及運(yùn)送容器有明顯標(biāo)志、防滲漏、防穿刺，并存放在指定位置，實驗室內(nèi)病原體的培養(yǎng)基、標(biāo)本和菌株保存液等高危險廢物廢棄前均在室內(nèi)進(jìn)行高壓蒸汽滅菌處理，實驗室設(shè)備維護(hù)、修理、報廢移出實驗室前均經(jīng)過清潔、消毒滅菌，實驗設(shè)備末端排出液均經(jīng)過消毒處理，實驗室排放的廢水廢氣符合國家規(guī)定。

第二篇：微生物實驗室生物安全管理自查報告

微生物實驗室生物安全管理自查報告

為加強(qiáng)醫(yī)院病原微生物實驗室生物安全管理工作，確保醫(yī)院平安目標(biāo)的實現(xiàn)，我院檢驗科根據(jù)山東省《病原微生物實驗室生物安全管理條例》的相關(guān)內(nèi)容，對醫(yī)院實驗室安全管理工作進(jìn)行了自查，對涉及病原微生物菌（毒）種及樣本的人員進(jìn)行了培訓(xùn)，提高他們生物安全的意識，掌握必要的生物安全知識。

一、實驗室生物安全管理工作、各項規(guī)章制度的運(yùn)行情況 醫(yī)院檢驗科根據(jù)《病原微生物實驗室生物安全管理條例》的相關(guān)規(guī)定進(jìn)行學(xué)習(xí)，并定期對有關(guān)生物安全各項規(guī)章制度的運(yùn)行情況進(jìn)行檢查，對存在的問題及時進(jìn)行整改。實驗室所從事的實驗活動均嚴(yán)格遵守有關(guān)的國家標(biāo)準(zhǔn)和實驗室技術(shù)規(guī)范、操作規(guī)程，并指定專人監(jiān)督檢查實驗室技術(shù)規(guī)范和操作規(guī)程的落實情況。同時，對檢查情況進(jìn)行詳細(xì)記錄，定期召開會議討論工作中發(fā)現(xiàn)的問題，及時糾正。

二、病原微生物菌（毒）種的管理及運(yùn)輸 因各方面條件限制我院現(xiàn)不能開展病原微生物實驗室生物的檢查，根據(jù)通知要求積極組織相關(guān)人員主要學(xué)習(xí)了：病原微生物實驗室菌（毒）種的管理嚴(yán)格登記制度，收到菌（毒）種后立即進(jìn)行編號登記，詳細(xì)記錄菌（毒）種的名稱、來源、特性、用途、批號、傳代日期、數(shù)量。在菌（毒）種的管理，安全保衛(wèi)制度，安全保衛(wèi)措施，保管過程中，傳代、分發(fā)及使用，均應(yīng)及時登記，定期核對庫存數(shù)量。菌（毒）種在進(jìn)行銷毀時，滅菌指示標(biāo)志，滅菌效果，同時做好銷毀登記等內(nèi)容。

三、實驗室生物安全突發(fā)事件的處理工作 在此次自檢中，我院實驗室對以前制訂的處置意外事件的應(yīng)急指揮和處置體系，進(jìn)一步進(jìn)行了修訂，使之能滿足實際工作的需要。針對當(dāng)發(fā)生自然災(zāi)害（如地震、水災(zāi)等）或設(shè)施出現(xiàn)故障時，我們制定了可能遇到的緊急情況及其處理原則。同時規(guī)范了菌（毒）種外溢在臺面、地面和其他表面的的處理原則、皮膚刺傷（破損）的處理原則、離心管發(fā)生破裂的處理原則并建立了意外事故報告制度。在實驗室的顯著位置張貼了實驗負(fù)責(zé)人、實驗室工作人員、消防、醫(yī)院、公安、工程技術(shù)人員、水、電氣維修部門電話。

四、提高意識，加強(qiáng)學(xué)習(xí)組織檢驗人員對《病原微生物實驗室生物安全管理條例》進(jìn)行全面系統(tǒng)的學(xué)習(xí)，同時加強(qiáng)了實驗室的準(zhǔn)入制度的管理，標(biāo)明實驗室類型、負(fù)責(zé)人及其聯(lián)絡(luò)方式。加強(qiáng)了個人安全防護(hù)，并要求檢驗人員嚴(yán)格遵守標(biāo)準(zhǔn)的操作規(guī)程進(jìn)行檢驗。通過這次對微生物實驗室生物安全管理工作自查，提高了全體檢驗人員對微生物實驗室生物安全管理工作重要性的認(rèn)識，加強(qiáng)管理，采取有效措施，確保實驗室工作安全。

****衛(wèi)生院檢驗科

2015-10-14

第三篇：微生物實驗室生物安全管理制度

微生物實驗室生物安全管理制度

第一章 總 則

1.為了加強(qiáng)病原微生物實驗室的生物安全管理，保護(hù)實驗室工作人員和公眾的健康，制定本制度。

2.醫(yī)院和科內(nèi)實行對實驗室的實驗活動進(jìn)行安全管理與監(jiān)督。

3.實驗室實行分級管理，檢驗科微生物室為二級生物安全標(biāo)準(zhǔn)。

4.檢驗科負(fù)責(zé)微生物室日常活動的管理，承擔(dān)建立健全安全管理制度，檢查、維護(hù)實驗設(shè)施、設(shè)備，控制實驗室感染的職責(zé)。

第二章 生物安全水平

生物安全水平一般可分為四級：

a.生物安全水平Ⅰ級：用于已知的通常不引起健康成人感染，對實驗室人員和環(huán)境危害甚少的病原體，如大腸艾希氏菌等。

b.生物安全水平Ⅱ級：用于具有中度潛在危害的病原的實驗操作，主要防止通過皮膚黏膜及消化道的感染，實驗室應(yīng)有進(jìn)出規(guī)定程序，粘貼生物危險的警示標(biāo)志。

c.生物安全水平Ⅲ級：用于可通過氣溶膠傳播的，能引起嚴(yán)重可致死性疾病的病原體，如結(jié)核分支桿菌等。

d.生物安全水平Ⅳ級：可用于可通過氣溶膠傳播的，能引起致死性感染的高風(fēng)險劇毒病原的操作。同時還要有內(nèi)部和外部進(jìn)行對話的裝置，要有應(yīng)急供氣、應(yīng)急供電和應(yīng)急出口等。

第三章 生物安全操作要求

實驗室操作要求分為標(biāo)準(zhǔn)微生物學(xué)操作（見微生物操作規(guī)程）和特殊操作，前者是指實驗室安全的共性要求，后者是指根據(jù)特定生物安全的級別提出的特殊要求。

安全裝備：為達(dá)到生物安全的目的，安全裝備包括兩部分，即操作設(shè)備、生物安全柜。二級實驗室必須有可提供一個無菌操作的生物安全柜。

個人防護(hù)用品：主要有工作服、隔離衣、防護(hù)服、工作帽罩、眼罩、面罩、手套，呼吸保護(hù)裝置及正壓氣體供應(yīng)的工作服等。

第四章標(biāo)本的采集、轉(zhuǎn)運(yùn)和接收

微生物標(biāo)本在接收時操作者要穿工作服、帶手套和口罩，必要時要戴眼罩，必須在生物安全

柜內(nèi)執(zhí)行嚴(yán)格操作。所有盛標(biāo)本的容器必須是防漏的。在轉(zhuǎn)運(yùn)時應(yīng)密封，標(biāo)本不可發(fā)生泄露。一旦發(fā)生泄露，應(yīng)高壓滅菌處理。具有強(qiáng)感染性的標(biāo)本轉(zhuǎn)運(yùn)時要嚴(yán)格包裝，嚴(yán)格操作。標(biāo)本的采集應(yīng)由專人轉(zhuǎn)送，實驗室應(yīng)由專人驗收和簽收。

第五章 生物廢物的安全處理

1.生物廢物包括培養(yǎng)物、分離物極其污染物，剩余標(biāo)本極其污染物，尖銳破碎物，吸管、針頭和費包裝等。

2.生物廢物的安全處理要求：A.裝廢物的容器應(yīng)防漏，堅固而不宜刺穿，密封并要避免裝的太滿。B.尖銳的破碎物要放入專用的硬質(zhì)容器中。C.盛放生物廢物的容器應(yīng)置入高壓滅菌袋中送去滅菌。D.所有能在實驗室消毒的物品在送出實驗室前盡可能先進(jìn)行一次消毒處理。E.盛放生物廢物的容器要做到安全轉(zhuǎn)運(yùn)。

第六章 安全應(yīng)急措施

1.操作者暴露的處理A.立即報警并告知同事。B.立即用肥皂水清洗暴露表面，用洗眼液洗眼，用生理鹽水漱口。C.啟動應(yīng)急治療。D.盡快向上級報告。

2.污染表面的處理A.立即報警并告知同事。B.隔離污染區(qū)。C.處理者穿戴適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)服。

D.用鑷子將污染物移入廢物桶。E.用干毛巾吸干，將消毒劑到在毛巾上，一段時間后仍入廢物桶。F.先后以消毒劑和酒精清洗污染表面。G.以適當(dāng)方法對桶消毒。F.盡快報告上級。

第四篇：微生物實驗室生物安全操作規(guī)程

微生物實驗室生物安全操作規(guī)程(2017版)

Dr.Tiger

(修訂說明：CNAS-CL09實施后，對微生物實驗室的生物安全提高了要求，對實驗室人員在配制培養(yǎng)基過程的生物安全、高壓鍋的生物指示劑還有菌種的傳代次數(shù)均提出明確的要求，為適應(yīng)新要求，對舊版的微生物實驗室生物安全操作過程作了補(bǔ)充，同時修改和完善了一些小問題)

一、目的

制訂本規(guī)則，保證實驗室工作人員的健康安全、實驗設(shè)備安全衛(wèi)生以及防止對外界環(huán)境造成污染。

二、適用范圍

適用于所有進(jìn)入微生物實驗室人員。實驗室工作人員必需嚴(yán)格遵守安全操作規(guī)程。

三、安全操作規(guī)程： 1.員工安全操作規(guī)程

1.1 實驗室入口處須貼上生物危險標(biāo)志，注明危險因子、生物安全級別、負(fù)責(zé)人姓名和電話、進(jìn)入實驗室的特殊要求及離開實驗室的程序。

1.2 禁止非工作人員進(jìn)入實驗室。參觀實驗室等特殊情況須經(jīng)實驗室負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)后方可進(jìn)入，做好衛(wèi)生防護(hù)，并在有關(guān)人員陪同下方可進(jìn)入，同時注意做好環(huán)境維護(hù)及保密工作。

1.3 進(jìn)行感染性實驗時，禁止他人進(jìn)入實驗室，或必須經(jīng)實驗室負(fù)責(zé)人同意后方可進(jìn)入。免疫耐受或正在使用免疫抑制劑的工作人員必須經(jīng)實驗室負(fù)責(zé)人同意方可在實驗室工作。

1.4 接觸微生物或含有微生物的物品后，脫掉手套后和離開實驗室前要洗手。1.5 禁止在工作區(qū)飲食、吸煙、處理隱形眼鏡、化妝及儲存食物。1.6 盡量以移液器吸取液體，禁止口吸。

1.7 實驗過程中，嚴(yán)格按有關(guān)操作規(guī)程操作，降低濺出和氣溶膠的產(chǎn)生。

1.8 每天至少消毒一次工作臺面，活性物質(zhì)濺出后要隨時用75%乙醇或巴氏消毒液消毒。

1.9 實驗人員在配制培養(yǎng)基過程中，需盡量避免接觸性或吸入性危害，特別是配制TTB和碘液等對人體有害的培養(yǎng)基或試劑時，要穿戴工作服、口罩和手套，并在通風(fēng)櫥中進(jìn)行。

1.10工作人員應(yīng)接受必要的免疫接種和檢測(如乙型肝炎疫苗、卡介苗等)。工作人員要接受有關(guān)的潛在危險知識的培訓(xùn)，掌握預(yù)防暴露以及暴露后的處理程序。每年要接受一次最新的培訓(xùn)。人員暴露于感染性物質(zhì)時，及時向?qū)嶒炇邑?fù)責(zé)人匯報，并記錄事故經(jīng)過和處理方案。

1.11禁止將無關(guān)動物帶入實驗室。2.無菌室安全操作規(guī)程

2.1無菌培養(yǎng)室每天都要用0.2%的新潔爾滅拖洗地面一次(拖布專用)，紫外線照射消毒30min以上，超凈工作臺臺面每次實驗前要用75％酒精擦洗。然后紫外線消毒30min。操作用具如移液器、廢液缸、污物盒、試管架等用75%酒精擦洗后置于臺內(nèi)同時紫外線消毒。

2.2無菌室應(yīng)保持清潔，嚴(yán)禁堆放雜物，以防污染。

2.3無菌室應(yīng)備有工作濃度的消毒液，如5％的甲酚溶液，75％的酒精，0.1％的新潔爾滅溶液，等等。

2.4無菌室應(yīng)定期用適宜的消毒液滅菌清潔，以保證無菌室的潔凈度符合要求。2.5需要帶入無菌室使用的器械、平皿等一切物品，均應(yīng)包扎嚴(yán)密，并應(yīng)經(jīng)過適宜的方法滅菌。

2.6工作人員進(jìn)入無菌室前，必須用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在緩沖間更換專用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(或用75% 乙醇等消毒劑再次擦拭雙手)，方可進(jìn)入無菌室進(jìn)行操作。

2.7無菌室使用前必須打開無菌室的紫外燈輻照滅菌30分鐘，滅菌后通無菌風(fēng)至少30min以上人員才能進(jìn)入。操作完畢，應(yīng)及時清理無菌室，再用紫外燈輻照滅菌30分鐘。

2.8供試品在檢查前，應(yīng)保持外包裝完整，不得開啟，以防污染。檢查前，用75％的酒精棉球消毒外表面。

2.9每次操作過程中，均應(yīng)做陰性對照，以檢查無菌操作的可靠性。2.10吸取菌液時，必須用移液器吸取，切勿直接用口接觸吸管。

2.11接種針每次使用前后，必須通過火焰灼燒滅菌，待冷卻后，方可接種培養(yǎng)物。2.12帶有菌液的吸管，試管，培養(yǎng)皿等器皿應(yīng)浸泡在盛有5%來蘇爾溶液或巴氏消毒液的消毒桶內(nèi)消毒，24小時后取出沖洗。

2.13如有菌液灑在桌上或地上，應(yīng)立即用5%石碳酸溶液或3％的來蘇爾傾覆在被污染處至少30分鐘，再做處理。工作衣帽等受到菌液污染時，應(yīng)立即脫去，高壓蒸汽滅菌后洗滌。

2.14凡帶有活菌的物品，必須經(jīng)消毒后，才能在水龍頭下沖洗，嚴(yán)禁污染下水道。2.15無菌室應(yīng)每月檢查菌落數(shù)。在層流無菌風(fēng)開啟的狀態(tài)下，取內(nèi)徑90mm的無菌營養(yǎng)瓊脂平板5個，分別放置無菌室四周及中央位置，開蓋暴露30分鐘后，倒置于36℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時，取出檢查。100級潔凈區(qū)平板雜菌數(shù)平均不得超過1個菌落/平皿，10000級潔凈室平均不得超過3個菌落/平皿。如超過限度，應(yīng)用臭氧發(fā)生器等對無菌室進(jìn)行徹底消毒，直至重復(fù)檢查合乎要求為止。3.壓力蒸汽滅菌器的安全使用操作程序：

3.1堆放：將需滅菌的物品予以妥善包扎，各包之間留有空隙，依次堆放在滅菌桶的篩板上，以蒸汽穿透，提高滅菌效果。需滅菌物品外需黏上高壓指示膠帶以檢驗滅菌溫度是否達(dá)到要求。

3.2 加水：在鍋體內(nèi)注入生活用水，水位一定要超過電熱管2厘米以上（不宜過多）；連續(xù)使用時，每次操作前，必須補(bǔ)足上述水位，以免燒壞電熱管和意外發(fā)生。

3.3 密封：在每次使用高壓鍋前，都必須認(rèn)真檢查高壓鍋的出氣伐和安全閥，確保其狀態(tài)完好，如有故障，在故障排除之前不得使用高壓滅菌鍋。把堆放好物品的滅菌桶放在鍋體內(nèi)，蓋上鍋蓋并鎖緊。

3.4 加熱滅菌：將滅菌器接通與銘牌一致的電源，按下電源開關(guān)，接通電源，指示燈亮，表示電源已正常輸入本器，按下開始按紐電熱管開始加熱工作；非全自動的高壓滅菌鍋要注意排空空氣，確保滅菌時高壓鍋內(nèi)是飽和水蒸氣，高壓滅菌鍋內(nèi)滅菌期間工作人員需監(jiān)視高壓鍋指示面板上的壓力、溫度和時間等。

3.5 開蓋：滅菌結(jié)束后，切勿立即將滅菌鍋內(nèi)的蒸汽排出，否則：由于液體物品的溫度未能下降，而壓力蒸汽突然釋放，會使液體劇烈沸騰，造成溢出或容器爆裂。應(yīng)待壓力表指針歸零位后，方可開啟鍋蓋。

3.6 滅菌后無菌工器具及培養(yǎng)基應(yīng)存放于無菌區(qū)域（如滅過菌后的無菌室或生物安全柜內(nèi)），無菌物品需有明確標(biāo)識。

3.7 每年至少2次用嗜熱脂肪芽孢桿菌作為生物指示劑檢查滅菌效果并記錄，指示物需放在不一達(dá)到滅菌的部位（如堆放物品的居中位置）。4.生物安全柜操作規(guī)程

4.1確認(rèn)玻璃窗處于關(guān)閉位置后，打開紫外燈，對安全柜內(nèi)工作空間進(jìn)行滅菌。滅菌結(jié)束后，關(guān)閉紫外燈。安全柜使用前后均需滅菌。

4.2抬起玻璃門至正常工作位置。打開外排風(fēng)機(jī)。打開熒光燈及內(nèi)置風(fēng)機(jī)。檢查回風(fēng)格柵，使之不要被物品堵塞。在無任何阻礙狀態(tài)下，讓安全柜至少工作10分鐘。

4.3用消毒液徹底清洗手及手臂。穿上工作褂，戴橡膠手套并套在袖口上，如有必要的話，戴防護(hù)眼鏡和防護(hù)面罩。

4.4按實驗程序放入實驗材料，要將工作區(qū)域內(nèi)的污染物質(zhì)與潔凈物質(zhì)分開放置。盡量將所需要的物品在正式操作前全部放入安全柜，但不要過載，不要擋住前后風(fēng)口。4.5盡量避免使用可干擾安全柜內(nèi)氣流流動的裝置和程序。在操作期間，避免隨便移動材料，避免操作者的手臂在前方開口處頻繁移動，盡量減少氣流干擾。

盡量不要使用明火，接種環(huán)之類用紅外滅菌器滅菌。

4.6在操作過程中，如果有物質(zhì)溢出或液體濺出，在將物品移出安全柜前，要對其表面進(jìn)行消毒，為防止安全柜內(nèi)有任何殘留的污染物，在安全柜工作過程中，就要將安全柜內(nèi)表面全部消毒。所有接觸了污染材料的物體，在從安全柜中取出前，要進(jìn)行表面消毒。所有開口容器，從安全柜中拿出前要蓋好。

4.7全部工作結(jié)束后，用70%的乙醇或適當(dāng)?shù)闹行韵緞潦冒踩駜?nèi)表面，讓安全柜在無任何阻礙的情況下繼續(xù)至少工作5分鐘，以清除工作區(qū)域內(nèi)浮沉污染。

4.8關(guān)閉照明燈和安全柜風(fēng)機(jī)。關(guān)閉玻璃門，打開UV燈消毒。滅菌結(jié)束后，關(guān)閉UV燈。4.9定期抬起工作區(qū)域下面板，擦拭或沖洗工作面底下空間。

5.標(biāo)準(zhǔn)菌株安全操作規(guī)程

5.1標(biāo)準(zhǔn)菌株由專人保管。保管人負(fù)責(zé)建立標(biāo)準(zhǔn)菌株目錄；目錄至少應(yīng)包編號、菌株號、菌種名稱、來源、購買日期、購買數(shù)量、保存方法等。

5.2標(biāo)準(zhǔn)菌株應(yīng)做好標(biāo)識后，保存于專用冰箱中。

5.3標(biāo)準(zhǔn)菌株不能隨意轉(zhuǎn)借其它單位或個人，需要時，須經(jīng)實驗室負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)后方可提供。

5.4必須在生物安全柜中進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)菌株實驗，操作過程中，不要穿戴巳經(jīng)污染的防護(hù)性手套觸摸門柄、儀器或污染區(qū)以外區(qū)域，避免擴(kuò)大污染范圍。

5.5試驗結(jié)束后，操作過程中所有可能與生物危險物接觸或被污染的試驗器械和物品，能夠高壓消毒的必須高壓消毒，不能進(jìn)行高壓消毒的物品，應(yīng)使用有效的消毒劑消毒處理。

5.6 標(biāo)準(zhǔn)菌株傳代原則上不超過5代。

6.微生物培養(yǎng)物廢棄物安全處理程序

6.1 盡可能使用塑料器材代替玻璃器材,防止利器損傷。非一次性利器必須放入厚壁容器中并運(yùn)送到特定區(qū)域消毒，最好進(jìn)行高壓消毒。

6.2 禁止用手處理破碎的玻璃器具。裝有污染針、利器及破碎玻璃的容器在丟棄之前必須應(yīng)用次氯酸消毒液或其他有效藥品進(jìn)行消毒。

6.3 所有培養(yǎng)物、廢棄物在運(yùn)出實驗室之前須經(jīng)巴氏消毒液消毒處理或高壓滅菌后,置于專門污物袋內(nèi)，交由專業(yè)衛(wèi)生處理公司處置。

6.4 實驗設(shè)備在運(yùn)出修理或維護(hù)前必須進(jìn)行消毒。

7、微生物實驗室緊急事故處理辦法

7.1刺傷、切割傷或擦傷。受傷人員應(yīng)脫下防護(hù)服，清洗雙手和受傷部位，使用適當(dāng)?shù)钠つw消毒劑進(jìn)行消毒，必要時進(jìn)行醫(yī)學(xué)處理。同時記錄受傷原因和相關(guān)的微生物，并保留完整適當(dāng)?shù)尼t(yī)療記錄。

7.2潛在感染性物質(zhì)的食入。應(yīng)脫下受害人的防護(hù)服，進(jìn)行必要的醫(yī)學(xué)處理。報告食入材料的鑒定和事故發(fā)生的細(xì)節(jié)，并保留完整適當(dāng)?shù)尼t(yī)療記錄。7.3潛在危害性氣溶膠的釋放（在生物安全柜以外）。所有人員必須立即撤離相關(guān)區(qū)域，暴露人員應(yīng)接受醫(yī)學(xué)咨詢，同時立即通知實驗室負(fù)責(zé)人和生物安全負(fù)責(zé)人。為了使氣溶膠排出和使較大的粒子沉降，在一定時間內(nèi)嚴(yán)禁人員入內(nèi)，若實驗室沒有中央通風(fēng)系統(tǒng)，應(yīng)推遲進(jìn)入實驗室的時間，同時張貼“禁止進(jìn)入”的標(biāo)志。待氣溶膠排出、較大的粒子沉降后，在生物安全負(fù)責(zé)人的指導(dǎo)下，清理人員穿戴適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)服和呼吸保護(hù)裝備進(jìn)行污染的清除。

7.4容器破碎及感染性物質(zhì)的溢出。應(yīng)立即用布或紙巾覆蓋被感染性物質(zhì)污染或受感染性物質(zhì)溢灑的破碎物品，并倒上消毒劑。作用適當(dāng)時間后，將覆蓋物以及破碎物品清除，再用消毒劑擦拭污染區(qū)域。玻璃碎片應(yīng)用鑷子清理，已污染的布、紙巾和抹布等應(yīng)放在盛放污染性廢棄物的容器內(nèi)。如果用簸箕清理破碎物，應(yīng)對其進(jìn)行高壓滅菌或放在有效的消毒液內(nèi)浸泡消毒。所有操作過程中要求戴手套。

若實驗表格或其他打印或手寫材料被污染，應(yīng)將這些信息復(fù)制后，再將原件置于盛放污染性廢棄物的容器內(nèi)，按廢棄物處理的方式進(jìn)行處理。

7.5未裝可封閉離心桶的離心機(jī)內(nèi)盛有潛在感染性物質(zhì)的離心管發(fā)生破裂。如果機(jī)器正在運(yùn)行時發(fā)生破裂或懷疑發(fā)生破裂，應(yīng)關(guān)閉機(jī)器電源，讓機(jī)器密閉適當(dāng)時間（如30min），使氣溶膠沉積。如果機(jī)器停止后發(fā)現(xiàn)破裂，不開蓋或立即將蓋子蓋上，并密閉（如30min）。同時應(yīng)通知生物安全負(fù)責(zé)人。玻璃碎片應(yīng)使用鑷子，或用鑷子夾著棉花進(jìn)行清理。所有破碎的離心管、玻璃碎片、離心桶、十字軸和轉(zhuǎn)子都應(yīng)放入無腐蝕性的、已知對相關(guān)微生物具有殺滅活性的消毒劑內(nèi)進(jìn)行消毒。未破損的帶蓋離心管應(yīng)放在另一個有消毒劑的容器中，消毒后回收。離心機(jī)內(nèi)腔應(yīng)用適當(dāng)濃度的同種消毒劑多次擦拭，再用水沖洗后干燥。

清理時，應(yīng)戴結(jié)實的手套（如厚橡膠手套），必要時在外面再戴適當(dāng)?shù)囊淮涡允痔住Ｋ褂玫娜坎牧隙紤?yīng)按感染性廢棄物處理。

7.6在可封閉的離心桶（安全杯）內(nèi)離心管發(fā)生破裂。所有的密封離心桶都應(yīng)在生物安全柜內(nèi)裝卸。若懷疑在安全杯內(nèi)發(fā)生破損，應(yīng)松開安全杯蓋子并將離心桶高壓滅菌，也可采用化學(xué)消毒的方法進(jìn)行處理。

7.7生物安全柜內(nèi)生物危害溢出。等待至少5min，讓安全柜充滿氣溶膠，清理時應(yīng)穿戴實驗服，安全眼鏡和手套，且讓安全柜繼續(xù)工作。使用浸泡消毒劑的消毒紙巾吸附溢出物，進(jìn)行消毒處理應(yīng)保證一定的接觸時間（至少20min）。并用同樣的消毒紙巾擦拭安全柜內(nèi)壁、工作臺表面和柜內(nèi)所有設(shè)備。按照正確的生物廢棄物處理步驟處理被污染的物質(zhì)，將可回收的被污染物品放入生物危害物回收袋或高壓滅菌盤并且用報紙包起來，然后進(jìn)行消毒或清理。用消毒劑對無法進(jìn)行高壓滅菌的物品進(jìn)行至少20 min的消毒處理后再拿出安全柜。最后脫下個人防護(hù)服并放進(jìn)污染物收集袋中進(jìn)行高壓滅菌處理。若所要清理的物品達(dá)到2級生物安全水平或者更高，應(yīng)聯(lián)系生物安全辦公室負(fù)責(zé)人。

7.8使用消毒劑進(jìn)行清潔的具體步驟如下：用干紙巾覆蓋溢出物(用來吸附液體)后，再放上浸泡消毒液的紙巾，使消毒劑包圍溢出物，并確保消毒劑與污染溢出物充分接觸，盡可能減少氣溶膠的形成。對溢出物附近的所有物品進(jìn)行消毒處理，處理一定時間，使消毒劑的消毒作用得到充分發(fā)揮。使用正確的消毒劑擦拭設(shè)備，并按照正確的生物危害物處理程序處理被污染的物質(zhì)。對可回收利用的物品進(jìn)行消毒處理。

第五篇：微生物實驗室生物安全操作規(guī)程

微生物實驗室生物安全操作規(guī)程

tiger

一、目的

制訂本規(guī)則，保證實驗室工作人員的健康安全、實驗設(shè)備安全衛(wèi)生以及防止對外界環(huán)境造成污染。

二、適用范圍

適用于微生物實驗室人員人身安全、衛(wèi)生健康安全管理及設(shè)備安全。

三、職責(zé)

實驗室工作人員必需嚴(yán)格遵守安全操作規(guī)程。

四、安全操作規(guī)程： 1.員工安全操作規(guī)程

1.1 實驗室入口處須貼上生物危險標(biāo)志，注明危險因子、生物安全級別、負(fù)責(zé)人姓名和電話、進(jìn)入實驗室的特殊要求及離開實驗室的程序。

1.2 禁止非工作人員進(jìn)入實驗室。參觀實驗室等特殊情況須經(jīng)實驗室負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)后方可進(jìn)入，做好衛(wèi)生防護(hù)，并在有關(guān)人員陪同下方可進(jìn)入，同時注意做好環(huán)境維護(hù)及保密工作。

1.3 進(jìn)行感染性實驗時，禁止他人進(jìn)入實驗室，或必須經(jīng)實驗室負(fù)責(zé)人同意后方可進(jìn)入。免疫耐受或正在使用免疫抑制劑的工作人員必須經(jīng)實驗室負(fù)責(zé)人同意方可在實驗室工作。

1.4 接觸微生物或含有微生物的物品后，脫掉手套后和離開實驗室前要洗手。1.5 禁止在工作區(qū)飲食、吸煙、處理隱形眼鏡、化妝及儲存食物。1.6 盡量以移液器吸取液體，禁止口吸。

1.7 實驗過程中，嚴(yán)格按有關(guān)操作規(guī)程操作，降低濺出和氣溶膠的產(chǎn)生。

1.8 每天至少消毒一次工作臺面，活性物質(zhì)濺出后要隨時用75%乙醇或巴氏消毒液消毒。

1.9 工作人員應(yīng)接受必要的免疫接種和檢測(如乙型肝炎疫苗、卡介苗等)。工作人員要接受有關(guān)的潛在危險知識的培訓(xùn)，掌握預(yù)防暴露以及暴露后的處理程序。每年要接受一次最新的培訓(xùn)。人員暴露于感染性物質(zhì)時，及時向?qū)嶒炇邑?fù)責(zé)人匯報，并記錄事故經(jīng)過和處理方案。

1.10禁止將無關(guān)動物帶入實驗室。2.無菌室安全操作規(guī)程

2.1無菌培養(yǎng)室每天都要用0.2%的新潔爾滅拖洗地面一次(拖布專用)，紫外線照射消毒30min以上，超凈工作臺臺面每次實驗前要用75％酒精擦洗。然后紫外線消毒30min。操作用具如移液器、廢液缸、污物盒、試管架等用75%酒精擦洗后置于臺內(nèi)同時紫外線消毒。

2.2無菌室應(yīng)保持清潔，嚴(yán)禁堆放雜物，以防污染。

2.3無菌室應(yīng)備有工作濃度的消毒液，如5％的甲酚溶液，75％的酒精，0.1％的新潔爾滅溶液，等等。

2.4無菌室應(yīng)定期用適宜的消毒液滅菌清潔，以保證無菌室的潔凈度符合要求。2.5需要帶入無菌室使用的器械、平皿等一切物品，均應(yīng)包扎嚴(yán)密，并應(yīng)經(jīng)過適宜的方法滅菌。

2.6工作人員進(jìn)入無菌室前，必須用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在緩沖間更換專用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(或用75% 乙醇等消毒劑再次擦拭雙手)，方可進(jìn)入無菌室進(jìn)行操作。

2.7無菌室使用前必須打開無菌室的紫外燈輻照滅菌30分鐘，并且同時打開超凈臺進(jìn)行吹風(fēng)。操作完畢，應(yīng)及時清理無菌室，再用紫外燈輻照滅菌30分鐘。

2.8供試品在檢查前，應(yīng)保持外包裝完整，不得開啟，以防污染。檢查前，用75％的酒精棉球消毒外表面。

2.9每次操作過程中，均應(yīng)做陰性對照，以檢查無菌操作的可靠性。2.10吸取菌液時，必須用移液器吸取，切勿直接用口接觸吸管。

2.11接種針每次使用前后，必須通過火焰灼燒滅菌，待冷卻后，方可接種培養(yǎng)物。2.12帶有菌液的吸管，試管，培養(yǎng)皿等器皿應(yīng)浸泡在盛有5%來蘇爾溶液或巴氏消毒液的消毒桶內(nèi)消毒，24小時后取出沖洗。

2.13如有菌液灑在桌上或地上，應(yīng)立即用5%石碳酸溶液或3％的來蘇爾傾覆在被污染處至少30分鐘，再做處理。工作衣帽等受到菌液污染時，應(yīng)立即脫去，高壓蒸汽滅菌后洗滌。

2.14凡帶有活菌的物品，必須經(jīng)消毒后，才能在水龍頭下沖洗，嚴(yán)禁污染下水道。2.15無菌室應(yīng)每月檢查菌落數(shù)。在層流無菌風(fēng)開啟的狀態(tài)下，取內(nèi)徑90mm的無菌營養(yǎng)瓊脂平板5個，分別放置無菌室四周及中央位置，開蓋暴露30分鐘后，倒置于36℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時，取出檢查。100級潔凈區(qū)平板雜菌數(shù)平均不得超過1個菌落/平皿，10000級潔凈室平均不得超過3個菌落/平皿。如超過限度，應(yīng)用臭氧發(fā)生器等對無菌室進(jìn)行徹底消毒，直至重復(fù)檢查合乎要求為止。3.壓力蒸汽滅菌器的安全使用操作程序：

3.1堆放：將需滅菌的物品予以妥善包扎，各包之間留有空隙，依次堆放在滅菌桶的篩板上，以蒸汽穿透，提高滅菌效果。需滅菌物品外需黏上高壓指示膠帶以檢驗滅菌溫度是否達(dá)到要求。

3.2 加水：在鍋體內(nèi)注入生活用水，水位一定要超過電熱管2厘米以上（不宜過多）；連續(xù)使用時，每次操作前，必須補(bǔ)足上述水位，以免燒壞電熱管和意外發(fā)生。

3.3 密封：在每次使用高壓鍋前，都必須認(rèn)真檢查高壓鍋的出氣伐和安全閥，確保其狀態(tài)完好，如有故障，在故障排除之前不得使用高壓滅菌鍋。把堆放好物品的滅菌桶放在鍋體內(nèi)，蓋上鍋蓋并鎖緊。

3.4 加熱滅菌：將滅菌器接通與銘牌一致的電源，按下電源開關(guān)，接通電源，指示燈亮，表示電源已正常輸入本器，按下開始按紐電熱管開始加熱工作；滅菌期間工作人員需監(jiān)視高壓鍋指示面板上的壓力、溫度和時間等。

3.5 開蓋：滅菌結(jié)束后，切勿立即將滅菌鍋內(nèi)的蒸汽排出，否則：由于液體物品的溫度未能下降，而壓力蒸汽突然釋放，會使液體劇烈沸騰，造成溢出或容器爆裂。應(yīng)待壓力表指針歸零位后，方可開啟鍋蓋。4.生物安全柜操作規(guī)程

4.1確認(rèn)玻璃窗處于關(guān)閉位置后，打開紫外燈，對安全柜內(nèi)工作空間進(jìn)行滅菌。滅菌結(jié)束后，關(guān)閉紫外燈。安全柜使用前后均需滅菌。

4.2抬起玻璃門至正常工作位置。打開外排風(fēng)機(jī)。打開熒光燈及內(nèi)置風(fēng)機(jī)。檢查回風(fēng)格柵，使之不要被物品堵塞。在無任何阻礙狀態(tài)下，讓安全柜至少工作10分鐘。

4.3用消毒液徹底清洗手及手臂。穿上工作褂，戴橡膠手套并套在袖口上，如有必要的話，戴防護(hù)眼鏡和防護(hù)面罩。

4.4按實驗程序放入實驗材料，要將工作區(qū)域內(nèi)的污染物質(zhì)與潔凈物質(zhì)分開放置。盡量將所需要的物品在正式操作前全部放入安全柜，但不要過載，不要擋住前后風(fēng)口。放入.4.5盡量避免使用可干擾安全柜內(nèi)氣流流動的裝置和程序。在操作期間，避免隨便移動材料，避免操作者的手臂在前方開口處頻繁移動，盡量減少氣流干擾。盡量不要使用明火。

4.6在操作過程中，如果有物質(zhì)溢出或液體濺出，在將物品移出安全柜前，要對其表面進(jìn)行消毒，為防止安全柜內(nèi)有任何殘留的污染物，在安全柜工作過程中，就要將安全柜內(nèi)表面全部消毒。所有接觸了污染材料的物體，在從安全柜中取出前，要進(jìn)行表面消毒。所有開口容器，從安全柜中拿出前要蓋好。

4.7全部工作結(jié)束后，用70%的乙醇或適當(dāng)?shù)闹行韵緞潦冒踩駜?nèi)表面，讓安全柜在無任何阻礙的情況下繼續(xù)至少工作5分鐘，以清除工作區(qū)域內(nèi)浮沉污染。

4.8關(guān)閉照明燈和安全柜風(fēng)機(jī)。關(guān)閉玻璃門，打開UV燈消毒。滅菌結(jié)束后，關(guān)閉UV燈。4.9定期抬起工作區(qū)域下面板，擦拭或沖洗工作面底下空間。

5.標(biāo)準(zhǔn)菌株安全操作規(guī)程

5.1標(biāo)準(zhǔn)菌株由專人保管。保管人負(fù)責(zé)建立標(biāo)準(zhǔn)菌株目錄；目錄至少應(yīng)包編號、菌株號、菌種名稱、來源、購買日期、購買數(shù)量、保存方法等。

5.2標(biāo)準(zhǔn)菌株應(yīng)做好標(biāo)識后，保存于專用冰箱中。

5.3標(biāo)準(zhǔn)菌株不能隨意轉(zhuǎn)借其它單位或個人，需要時，須經(jīng)實驗室負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)后方可提供。

5.4必須在生物安全柜中進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)菌株實驗，操作過程中，不要穿戴巳經(jīng)污染的防護(hù)性手套觸摸門柄、儀器或污染區(qū)以外區(qū)域，避免擴(kuò)大污染范圍。

5.5試驗結(jié)束后，操作過程中所有可能與生物危險物接觸或被污染的試驗器械和物品，能夠高壓消毒的必須高壓消毒，不能進(jìn)行高壓消毒的物品，應(yīng)使用有效的消毒劑消毒處理。

6.微生物培養(yǎng)物廢棄物安全處理程序

6.1 盡可能使用塑料器材代替玻璃器材,防止利器損傷。非一次性利器必須放入厚壁容器中并運(yùn)送到特定區(qū)域消毒，最好進(jìn)行高壓消毒。

6.2 禁止用手處理破碎的玻璃器具。裝有污染針、利器及破碎玻璃的容器在丟棄之前必須應(yīng)用次氯酸消毒液或其他有效藥品進(jìn)行消毒。

6.3 所有培養(yǎng)物、廢棄物在運(yùn)出實驗室之前須經(jīng)巴氏消毒液消毒處理或高壓滅菌后,置于專門污物袋內(nèi)，交由專業(yè)衛(wèi)生處理公司處置。

6.4 實驗設(shè)備在運(yùn)出修理或維護(hù)前必須進(jìn)行消毒。

7、微生物實驗室緊急事故處理辦法

7.1刺傷、切割傷或擦傷。受傷人員應(yīng)脫下防護(hù)服，清洗雙手和受傷部位，使用適當(dāng)?shù)钠つw消毒劑進(jìn)行消毒，必要時進(jìn)行醫(yī)學(xué)處理。同時記錄受傷原因和相關(guān)的微生物，并保留完整適當(dāng)?shù)尼t(yī)療記錄。

7.2潛在感染性物質(zhì)的食入。應(yīng)脫下受害人的防護(hù)服，進(jìn)行必要的醫(yī)學(xué)處理。報告食入材料的鑒定和事故發(fā)生的細(xì)節(jié)，并保留完整適當(dāng)?shù)尼t(yī)療記錄。

7.3潛在危害性氣溶膠的釋放（在生物安全柜以外）。所有人員必須立即撤離相關(guān)區(qū)域，暴露人員應(yīng)接受醫(yī)學(xué)咨詢，同時立即通知實驗室負(fù)責(zé)人和生物安全負(fù)責(zé)人。為了使氣溶膠排出和使較大的粒子沉降，在一定時間內(nèi)嚴(yán)禁人員入內(nèi)，若實驗室沒有中央通風(fēng)系統(tǒng)，應(yīng)推遲進(jìn)入實驗室的時間，同時張貼“禁止進(jìn)入”的標(biāo)志。待氣溶膠排出、較大的粒子沉降后，在生物安全負(fù)責(zé)人的指導(dǎo)下，清理人員穿戴適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)服和呼吸保護(hù)裝備進(jìn)行污染的清除。

7.4容器破碎及感染性物質(zhì)的溢出。應(yīng)立即用布或紙巾覆蓋被感染性物質(zhì)污染或受感染性物質(zhì)溢灑的破碎物品，并倒上消毒劑。作用適當(dāng)時間后，將覆蓋物以及破碎物品清除，再用消毒劑擦拭污染區(qū)域。玻璃碎片應(yīng)用鑷子清理，已污染的布、紙巾和抹布等應(yīng)放在盛放污染性廢棄物的容器內(nèi)。如果用簸箕清理破碎物，應(yīng)對其進(jìn)行高壓滅菌或放在有效的消毒液內(nèi)浸泡消毒。所有操作過程中要求戴手套。

若實驗表格或其他打印或手寫材料被污染，應(yīng)將這些信息復(fù)制后，再將原件置于盛放污染性廢棄物的容器內(nèi)，按廢棄物處理的方式進(jìn)行處理。

7.5未裝可封閉離心桶的離心機(jī)內(nèi)盛有潛在感染性物質(zhì)的離心管發(fā)生破裂。如果機(jī)器正在運(yùn)行時發(fā)生破裂或懷疑發(fā)生破裂，應(yīng)關(guān)閉機(jī)器電源，讓機(jī)器密閉適當(dāng)時間（如30min），使氣溶膠沉積。如果機(jī)器停止后發(fā)現(xiàn)破裂，不開蓋或立即將蓋子蓋上，并密閉（如30min）。同時應(yīng)通知生物安全負(fù)責(zé)人。玻璃碎片應(yīng)使用鑷子，或用鑷子夾著棉花進(jìn)行清理。所有破碎的離心管、玻璃碎片、離心桶、十字軸和轉(zhuǎn)子都應(yīng)放入無腐蝕性的、已知對相關(guān)微生物具有殺滅活性的消毒劑內(nèi)進(jìn)行消毒。未破損的帶蓋離心管應(yīng)放在另一個有消毒劑的容器中，消毒后回收。離心機(jī)內(nèi)腔應(yīng)用適當(dāng)濃度的同種消毒劑多次擦拭，再用水沖洗后干燥。

清理時，應(yīng)戴結(jié)實的手套（如厚橡膠手套），必要時在外面再戴適當(dāng)?shù)囊淮涡允痔住Ｋ褂玫娜坎牧隙紤?yīng)按感染性廢棄物處理。

7.6在可封閉的離心桶（安全杯）內(nèi)離心管發(fā)生破裂。所有的密封離心桶都應(yīng)在生物安全柜內(nèi)裝卸。若懷疑在安全杯內(nèi)發(fā)生破損，應(yīng)松開安全杯蓋子并將離心桶高壓滅菌，也可采用化學(xué)消毒的方法進(jìn)行處理。

7.7生物安全柜內(nèi)生物危害溢出。等待至少5min，讓安全柜充滿氣溶膠，清理時應(yīng)穿戴實驗服，安全眼鏡和手套，且讓安全柜繼續(xù)工作。使用浸泡消毒劑的消毒紙巾吸附溢出物，進(jìn)行消毒處理應(yīng)保證一定的接觸時間（至少20min）。并用同樣的消毒紙巾擦拭安全柜內(nèi)壁、工作臺表面和柜內(nèi)所有設(shè)備。按照正確的生物廢棄物處理步驟處理被污染的物質(zhì)，將可回收的被污染物品放入生物危害物回收袋或高壓滅菌盤并且用報紙包起來，然后進(jìn)行消毒或清理。用消毒劑對無法進(jìn)行高壓滅菌的物品進(jìn)行至少20 min的消毒處理后再拿出安全柜。最后脫下個人防護(hù)服并放進(jìn)污染物收集袋中進(jìn)行高壓滅菌處理。若所要清理的物品達(dá)到2級生物安全水平或者更高，應(yīng)聯(lián)系生物安全辦公室負(fù)責(zé)人。

7.8使用消毒劑進(jìn)行清潔的具體步驟如下：用干紙巾覆蓋溢出物(用來吸附液體)后，再放上浸泡消毒液的紙巾，使消毒劑包圍溢出物，并確保消毒劑與污染溢出物充分接觸，盡可能減少氣溶膠的形成。對溢出物附近的所有物品進(jìn)行消毒處理，處理一定時間，使消毒劑的消毒作用得到充分發(fā)揮。使用正確的消毒劑擦拭設(shè)備，并按照正確的生物危害物處理程序處理被污染的物質(zhì)。對可回收利用的物品進(jìn)行消毒處理。