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5年質(zhì)量工程師工作心血總結(jié)

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第一篇:5年質(zhì)量工程師工作心血總結(jié)

5年質(zhì)量工程師工作心血總結(jié)

非常感謝公司領(lǐng)導(dǎo)能給派遣自己到南京分公司寶學(xué)習(xí)和實(shí)踐的機(jī)會(huì),時(shí)間總是不等你,一年的委派期馬上就要結(jié)束了(2011年5月10日——2012年5月10 日)。

本人大學(xué)畢業(yè)工作5年了(2009年6月-2012年6月)2009年6月22日—2009年7月22日質(zhì)量部實(shí)習(xí);

2009年7月22日-2011年5月11日制動(dòng)盤業(yè)務(wù)單元的QE工作; 2011年5月10日-2012年5月10日派遣南京分公司管理質(zhì)量 三年的工作實(shí)踐中學(xué)習(xí)經(jīng)歷概述,主要包含五個(gè)方面:1,離開學(xué)校,堅(jiān)持質(zhì)量信仰;2,公司面試實(shí)習(xí),理想和信仰讓自己充滿激情,腳踏實(shí)地的學(xué)習(xí);3制動(dòng)盤QE工作2年,打下堅(jiān)實(shí)的質(zhì)量管理工具使用基礎(chǔ);4南京1年,再接再厲,全面了解TRW工廠質(zhì)量管理活動(dòng)規(guī)律(CMPA,PMA).5制定自己未來三年計(jì)劃。第一,離開學(xué)校,堅(jiān)持質(zhì)量信仰;

畢業(yè)于重慶理工大學(xué)汽車學(xué)院工業(yè)工程專業(yè),專業(yè)下設(shè)《質(zhì)量管理與產(chǎn)品可靠性》課程,第一次接觸并了解質(zhì)量管理發(fā)展歷史和一些理論,如,抽樣樣本量,小概率事件,標(biāo)準(zhǔn)差,質(zhì)量環(huán),控制圖,6sigma等等專業(yè)名稱,所有的理論都讓自己好奇,產(chǎn)生興趣去學(xué)習(xí)和研究質(zhì)量管理工作在企業(yè)的運(yùn)行規(guī)律,為了了解質(zhì)量活動(dòng)的運(yùn)行規(guī)律,到民營企業(yè)去實(shí)習(xí),實(shí)習(xí)期間了解到企業(yè)的質(zhì)量管理活動(dòng),以及汽車行業(yè)強(qiáng)制執(zhí)行國際質(zhì)量活動(dòng)標(biāo)準(zhǔn)TS16949,在校論文答辯期間,大量的翻閱質(zhì)量管理的文獻(xiàn)和論文,并完成自己的畢業(yè)論文《如何在民營企業(yè)中有效的推行TS16949_以惠正機(jī)械有限公司為例》,對質(zhì)量的濃厚興趣和熱愛讓我渴望更加深刻的學(xué)習(xí)他,研究其運(yùn)行規(guī)律,但是只是從理論上了解是遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠的。在馬克思理論中明確;“實(shí)踐是檢驗(yàn)真理的最好方法”;在古語中有:“天行健,君子以自強(qiáng)不息,地勢坤,君子以厚德載物”就是一個(gè)道理,任何事物都有其本身運(yùn)行的規(guī)律,人只有不斷努力學(xué)習(xí),實(shí)踐才能了解和掌握其客觀規(guī)律,總結(jié)理論為人們所用。自己本來是農(nóng)村出來的小孩,比別人差了幾代人,別人在走的時(shí)候,自己就得快跑,慢慢的自己喜歡奔跑的感覺,學(xué)習(xí)和努力讓感覺自己時(shí)刻都在奔跑的感覺,所以喜歡質(zhì)量,了解質(zhì)量,研究質(zhì)量,努力去實(shí)踐質(zhì)量管理活動(dòng),現(xiàn)在物欲橫流的社會(huì),誘惑和利益很多,選擇一種信仰,并堅(jiān)持這份信仰,那么就會(huì)一直在奔跑。希望通過自己努力學(xué)習(xí)和研究質(zhì)量管理活動(dòng)運(yùn)行規(guī)律,讓其為我所用,為重慶民營企業(yè)的發(fā)展獻(xiàn)一份力,讓重慶的摩托城變成想美國底特律一樣的汽車城。懷揣空空的理想是不行的,任何理論都必須要實(shí)踐來檢驗(yàn),實(shí)踐是真理最好的檢驗(yàn)。懷著對質(zhì)量的熱愛,和夸張的理想,自己做出了人生的第一個(gè)選擇,一,選擇從事質(zhì)量管理工作;二,選擇努力進(jìn)入南方天合底盤系統(tǒng)有限公司,一個(gè)雙500強(qiáng)的企業(yè),其中外方為美資公司TRW ,100年一直是給福特配套,而福特,通用質(zhì)量管理活動(dòng)規(guī)律的歸納就是現(xiàn)在汽車行業(yè)強(qiáng)制推行的TS16949,能夠進(jìn)入這樣的企業(yè),就可以了解和學(xué)習(xí)實(shí)踐100多年總結(jié)下來的質(zhì)量管理活動(dòng)的規(guī)律是自己的榮幸。

第二,司面試實(shí)習(xí),理想和信仰讓自己充滿激情,腳踏實(shí)地的學(xué)習(xí); 首先,公司面試,理想和信仰讓自己充滿激情;

面試兩個(gè)問題:1“為什么一個(gè)干了十年鑄造的老工程師我沒有要,而選擇一個(gè)剛剛畢業(yè)的大學(xué)生”;2“為什么這么多大學(xué)生中我要選擇你這個(gè)呢”兩個(gè)問題回答:“一個(gè)老工程師是不是您需要的,您一眼都能夠看出來,而剛剛畢業(yè)的大學(xué)生就想毛坯一樣,能否被加工成合格品,就要看他自己努力和學(xué)習(xí)。“很多的大學(xué)生畢業(yè)就等于失業(yè),而我不是,我知道自己喜歡什么,要得到什么”就這樣我獲得了一個(gè)月實(shí)習(xí)的機(jī)會(huì),當(dāng)時(shí)心喜若狂。

其次,公司實(shí)習(xí),讓自己腳踏實(shí)地學(xué)習(xí);

實(shí)習(xí)一個(gè)月期間秉著“天將降大任于世人也,必先苦其心志,牢其脛骨,餓其體膚”!不怕苦不累的精神,自己需要投入120%熱情和精力來學(xué)習(xí),例如首對公司主要運(yùn)用產(chǎn)品和生產(chǎn)線進(jìn)行了解,識別,記錄;對CD345鉗裝配線現(xiàn)場的S.O.S與控制計(jì)劃相比對;跟著李川老師學(xué)習(xí),機(jī)加質(zhì)量問題處理,控制圖對過程能力識別;跟彭渝老師學(xué)習(xí),了解總泵機(jī)加和裝配,c307制動(dòng)盤機(jī)加線。跟周興偉老師學(xué)習(xí),了解公司的基本運(yùn)營,質(zhì)量手冊和各個(gè)過程的作業(yè)指導(dǎo)書;對現(xiàn)場11系統(tǒng)進(jìn)行初步的學(xué)習(xí),并發(fā)現(xiàn)質(zhì)量控制的體系;跟卿明老師學(xué)習(xí),學(xué)習(xí)6-sigma,及其了解他在實(shí)際應(yīng)用的作用;利用晚上的時(shí)間學(xué)習(xí)質(zhì)量五大工具,11系統(tǒng),SPS精益生產(chǎn)手冊。

一個(gè)月結(jié)束了:一份耕耘,一份收獲。在收獲知識的同時(shí),也收獲自己人生發(fā)展路上最好的老師,細(xì)心講解工藝的老師傅;和耐心指導(dǎo)傳授知識的同事;更理解質(zhì)量管理活動(dòng)的重要意義,長期不斷發(fā)展,新理論不斷更新。(解決問題的成本遠(yuǎn)遠(yuǎn)的大于問題預(yù)防的成本;任何忽略作業(yè)指導(dǎo)書上要求的做法,都有可能給公司帶來巨大的損失)從而讓自己更加堅(jiān)定自己的信仰是正確的。

第三,制動(dòng)盤QE工作2年,打下堅(jiān)實(shí)的質(zhì)量管理工具使用基礎(chǔ); 這兩年整個(gè)公司質(zhì)量管理活動(dòng)正處在高潮的階段,為獲得福特的Q1而努力,制動(dòng)盤業(yè)務(wù)單元是當(dāng)時(shí)一個(gè)重點(diǎn),制定現(xiàn)場質(zhì)量管理活動(dòng)提升計(jì)劃,過程能力提升計(jì)劃,整個(gè)項(xiàng)目歷時(shí)一年之久,大大小小事情做了很多,主要有以下四個(gè)方面;1,改善制動(dòng)盤計(jì)數(shù)型不良品隔離箱,對不良品進(jìn)行編號,實(shí)物和不良品審理單一一對應(yīng),嚴(yán)格控制不良品的轉(zhuǎn)移活動(dòng)。2,引進(jìn)馬波斯先制動(dòng)盤測量系統(tǒng),縮小測量變差,提高SC項(xiàng)目CPK過程能力,并定期完成MSA,形成趨勢圖,向客戶展示質(zhì)量管理活動(dòng)的表現(xiàn)狀態(tài)。3,執(zhí)行K表CPK監(jiān)控系統(tǒng),形成趨勢圖,定期向客戶展示其過程能力。4,引進(jìn)SPC監(jiān)控系統(tǒng),及時(shí)識別過程變差原因,進(jìn)行有效預(yù)防的管理活動(dòng),并有效進(jìn)行刀具管理。為獲得Q1的質(zhì)量管理活動(dòng)經(jīng)歷一年之久,爭強(qiáng)客戶的信任度,并獲的福特馬自達(dá)J68,J53等一系列的新項(xiàng)目。這個(gè)也有整個(gè)制動(dòng)盤團(tuán)隊(duì)共同努力一份辛苦。質(zhì)量的五大工具,新/舊七大質(zhì)量工具,質(zhì)量活動(dòng)PDCA管理規(guī)律,問題管理程序,機(jī)加檢查技術(shù),3L5W,8D等等質(zhì)量工具反復(fù)實(shí)踐,并使用質(zhì)量工具在與團(tuán)隊(duì)成員和客戶進(jìn)行有效溝通,為自己打下堅(jiān)實(shí)質(zhì)量工具使堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。

第四,南京1年,再接再厲,全面了解TRW工廠質(zhì)量管理活動(dòng)規(guī)律(CMPA,PMA)

南京工廠質(zhì)量管理活動(dòng)也不在僅僅是一個(gè)業(yè)務(wù)單元那么單一,而是相當(dāng)于一個(gè)公司的質(zhì)量管理活動(dòng)的管理范疇,更有機(jī)會(huì)接觸到TRW對一個(gè)分公司經(jīng)營運(yùn)行,質(zhì)量管理活動(dòng)標(biāo)準(zhǔn)要求。對自己來說是一個(gè)難得的學(xué)習(xí)和實(shí)踐的質(zhì)量管理活動(dòng)規(guī)律的機(jī)會(huì)。懷揣著自己的信仰,來到人生底不熟的南京,遠(yuǎn)離家鄉(xiāng),奉獻(xiàn)青春,無怨無悔!2011年5月10日達(dá)到南京到2012年5月10 日,整整一年的時(shí)間,過完春,夏,秋,冬四季;這一年,大大小小事還是做了不少,主要有以下4個(gè)方面:1.客戶交流,完成轉(zhuǎn)產(chǎn)的工程變更;2,質(zhì)量檢測量具,檢測設(shè)備,檢測技術(shù)全面學(xué)習(xí)和轉(zhuǎn)移;3,了解SQE,CQE,QE工作,構(gòu)建質(zhì)量管理框架;4,了解審核。

首先:客戶交流,質(zhì)量體系建設(shè)與審核。

南京工廠建立,是公司三年來同時(shí)發(fā)生工程變更產(chǎn)品最多,任務(wù)量最多的一次質(zhì)量管理活動(dòng),包括長安項(xiàng)目10項(xiàng),馬自達(dá)項(xiàng)目8項(xiàng)。而有計(jì)劃的與客戶溝通,完成整個(gè)變更管理活動(dòng),獲得客戶批準(zhǔn)PSW成為南京團(tuán)隊(duì)的首要任務(wù)。通過努力與公司各個(gè)部門有效溝通,制定有效的客戶交流計(jì)劃,最終通過團(tuán)隊(duì)努力,按照TRW變更管理活動(dòng)要求,完成長安全部項(xiàng)目,馬自達(dá)7項(xiàng)產(chǎn)品場地變更工程變更活動(dòng),并獲得客戶批準(zhǔn)。

其次:質(zhì)量檢測量具,檢測設(shè)備,檢測技術(shù)全面學(xué)習(xí)和轉(zhuǎn)移。南京團(tuán)隊(duì)成立只有12人,分管不同領(lǐng)域,而檢測量具,檢測設(shè)備,檢測原理整體轉(zhuǎn)移量具類型多,檢測設(shè)備技術(shù)高,任務(wù)量大,時(shí)間緊等多重困難。但通過團(tuán)隊(duì)努力,制定有效檢測人員培訓(xùn)和自己學(xué)習(xí)計(jì)劃和檢測設(shè)備驗(yàn)收計(jì)劃,最后有效完成包括三坐標(biāo),萬能拉伸試驗(yàn)機(jī),粗糙輪廓度儀等14臺檢測設(shè)備的調(diào)試,人員培訓(xùn),和設(shè)備驗(yàn)收工;完成轉(zhuǎn)移長安,馬自達(dá)產(chǎn)品過程控制量具379件,全部建立量具清單以及周期檢定信息庫,轉(zhuǎn)移量具圖紙300多件,50多種傳感器計(jì)量接受標(biāo)準(zhǔn)。完成人員委外培訓(xùn)5人次,內(nèi)部培訓(xùn)15人次。再次:了解SQE,CQE,QE工作,構(gòu)建質(zhì)量管理框架。

SQE工作:對供應(yīng)商管理做得“一張一弛”;先后引進(jìn)來料動(dòng)態(tài)抽樣程序,有效的對供應(yīng)商來料件監(jiān)督檢查,識別風(fēng)險(xiǎn),供應(yīng)商有效改進(jìn)的質(zhì)量活動(dòng);CQE工作:及時(shí)解決客戶抱怨問題,能夠通過常見物理現(xiàn)象與客戶有效溝通,消除客戶質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)顧慮,樹立權(quán)威。QE:工程變更產(chǎn)品全部實(shí)現(xiàn)DLN先期質(zhì)量保證計(jì)劃,讓南京團(tuán)隊(duì)所有人員對轉(zhuǎn)產(chǎn)項(xiàng)目產(chǎn)品,客戶要求,及時(shí)識別變更后風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn),有效避免客戶的批量性抱怨。

最后,學(xué)習(xí)并遵循TRW質(zhì)量活動(dòng)運(yùn)行規(guī)律,明確TRW對所有新建分公司的標(biāo)準(zhǔn)要求核心制造審核(Core Manuf.Process Audit StandardizationCriteria)和生產(chǎn)管理審核(enhanced PMA communication CMPA3.pdf

圖表2生產(chǎn)線建立,切換管理 圖表1產(chǎn)品/程序變更管理

圖表3不良品管理

圖表4量具管理

圖表6來料質(zhì)量控制

圖表8(設(shè)備,工裝,量具)全部的預(yù)防性維護(hù)

圖表7標(biāo)識和追溯流程

圖表9生產(chǎn)線建立,切換管理

圖表10人員培訓(xùn)和資質(zhì)

第二篇:質(zhì)量工程師工作職責(zé)

1.參與新產(chǎn)品開發(fā)或國產(chǎn)化工作,編制質(zhì)量文件。

2.負(fù)責(zé)生產(chǎn)現(xiàn)場的質(zhì)量控制和產(chǎn)品質(zhì)量評審。

3.負(fù)責(zé)質(zhì)量事故的調(diào)查分析,制定糾正預(yù)防措施。

4.對批量生產(chǎn)產(chǎn)品負(fù)責(zé)質(zhì)量監(jiān)控,組織質(zhì)量改進(jìn)。

5.負(fù)責(zé)對檢驗(yàn)員和生產(chǎn)線操作工的業(yè)務(wù)指導(dǎo)。

6.負(fù)責(zé)與顧客聯(lián)系,產(chǎn)品批量認(rèn)可和生產(chǎn)件批準(zhǔn)等事項(xiàng)。

第三篇:質(zhì)量工程師半年總結(jié)

質(zhì)量工程師半工作總結(jié)

——每天進(jìn)步一點(diǎn)點(diǎn)

本人與201*年*月份加入**公司,擔(dān)任質(zhì)量工程師的崗位,目前負(fù)責(zé)第一車間(機(jī)加工)。截至到今,我已經(jīng)順利地完成了從試用狀態(tài)到正式工作狀態(tài)的轉(zhuǎn)換。在此,感謝公司領(lǐng)導(dǎo)的信任,為我提供了一個(gè)體現(xiàn)業(yè)務(wù)能力和提高專業(yè)水平的平臺。

試用期階段(201*.**-201*.**):

經(jīng)過在試用期的學(xué)習(xí)和工作,我對公司生產(chǎn)的連接器有了充分的了解,對國內(nèi)機(jī)車行業(yè)的現(xiàn)狀和行業(yè)要求有了一定的了解,同時(shí)我對連接器的設(shè)計(jì)思路、零件加工工藝、質(zhì)量要求、控制手段和檢驗(yàn)方法有了具體、形象的認(rèn)識。

對新工作環(huán)境的認(rèn)識、學(xué)習(xí):

1、第一車間產(chǎn)品根據(jù)配合關(guān)系可以分為插針和插孔、軸和套、罩和罩座三大類;根據(jù)加工的方式可以分為數(shù)車、儀表車、自動(dòng)車、普車、銑車、鉗工和沖床七種主要方式;

2、現(xiàn)場檢驗(yàn)人員日常工作任務(wù)為首/末檢、巡檢、入庫檢驗(yàn)和報(bào)告異常;

3、第一車間在制產(chǎn)品有種類多、單批量小和加工精度適中(針孔件除外外)的生產(chǎn)特點(diǎn),如果在質(zhì)量管理中明確控制重點(diǎn)可以有效的降低劣質(zhì)質(zhì)量成本和提高質(zhì)量管理的效率。試用期間主要兩起質(zhì)量異常處理:

1、鋁毛坯(A104)在銑邊時(shí)發(fā)現(xiàn)邊緣鋁料剝落

a、協(xié)同工藝員進(jìn)行工藝驗(yàn)證;b、異常原因分析和不合格品控制;c、異常坯料后續(xù)跟蹤;

2、裝配車間發(fā)生A104罩與罩座配合失差

a、失效原因分析和驗(yàn)證;b、驗(yàn)證結(jié)果確認(rèn)和不合格品糾正;

在第一車間進(jìn)行了SPC(過程統(tǒng)計(jì)管理)的試點(diǎn),完成了如下工作:

1、編制過程統(tǒng)計(jì)管理方案和工作流程(未發(fā)布);

2、編制了工藝流程圖、FEMA和控制計(jì)劃(未審核);

3、安裝、應(yīng)用了質(zhì)量分析軟件(minitab);針對目前一車間現(xiàn)狀推廣推廣過程統(tǒng)計(jì)管理進(jìn)行經(jīng)驗(yàn)總結(jié):

1、第一車間開展過程統(tǒng)計(jì)管理至少需要工藝人員和質(zhì)量人員兩方協(xié)同配合完成;

2、按照控制計(jì)劃進(jìn)行質(zhì)量管理可以提高檢驗(yàn)人員的檢驗(yàn)效率,保證檢驗(yàn)結(jié)果的真實(shí)性和提高過程檢驗(yàn)的易操作性;

3、過程統(tǒng)計(jì)管理細(xì)化了質(zhì)量管理方式,簡化了現(xiàn)場檢驗(yàn)人員的操作要求,可以提高第一車間的質(zhì)量保證水平。正式工作階段(201*.**-201*.**)

主要負(fù)責(zé)一車間檢驗(yàn)工作的監(jiān)督和管理、過程異常產(chǎn)品的及時(shí)處理和質(zhì)量管理文件的編輯。現(xiàn)對這兩個(gè)月的主要工作進(jìn)行總結(jié):

一、檢驗(yàn)規(guī)范編制、更新;

二、質(zhì)量管理文件修訂、實(shí)施和保持。

1、首件鑒定管理性文件修改;

2、表面噴涂檢驗(yàn)規(guī)范修訂(增加噴涂件首次鑒定具體要求);

3、表面噴涂檢驗(yàn)規(guī)范修訂(增加噴涂零件防護(hù)項(xiàng));

三、外部客訴處理; 1)A系統(tǒng)插針尺寸異常; 2)電纜接頭狀態(tài)異常; 3)芯插孔尺寸異常; 4)39芯插針針頭長度超差 ; 5)8芯插孔錐度超差; 6)B44罩座手把干涉

(主要工作內(nèi)容:異常情況調(diào)查,分析結(jié)論整理,處理方案(或建議)提交)。

四、內(nèi)部質(zhì)量異常處理

1、鋁管(規(guī)格55*20,標(biāo)號6061)材料缺陷處理(裂紋)評審和不合格品處理;

2、KC20插座體氣孔評審、過程控制和不合格品處理;

3、B77罩表面缺陷評審、過程控制和不合格品處理;

4、KC20插套設(shè)備異常過程控制和不合格品處理;

5、KC20插銷因新增設(shè)備性能未穩(wěn)導(dǎo)致尺寸偏移的評審、過程控制和不合格品處理;

6、B77罩氣孔評審、過程控制和不合格品處理;

7、連接板(大紅尼龍)庫存件技術(shù)狀態(tài)異常的隱患排查和糾正;

8、KC20插銷(A型)混裝庫存隱患排查(庫存零件和成品);

9、管接頭(有裂紋)強(qiáng)度驗(yàn)證和結(jié)果確認(rèn);

10、B77罩(安裝面不平)防水驗(yàn)證、結(jié)果確認(rèn)和糾正;

(主要工作內(nèi)容:異常原因初步分析,評估評審需求,制定評審目的和計(jì)劃,組織評審,評審結(jié)果跟蹤)。

五、其他方面:

1出廠檢驗(yàn)流程及產(chǎn)品的熟悉

2、針對一車間現(xiàn)場檢驗(yàn)人員(QC)進(jìn)行技能培訓(xùn);

1、報(bào)告單填寫培訓(xùn);

2、制程異常報(bào)告單填寫培訓(xùn);

3、質(zhì)量異常描述和初步統(tǒng)計(jì)培訓(xùn);

“學(xué)而不思則罔,思而不學(xué)則殆”。借年中總結(jié)這個(gè)機(jī)會(huì)對已經(jīng)過去的半年進(jìn)行系統(tǒng)的回顧和總結(jié)使我發(fā)現(xiàn)很多在日常繁忙的工作中忽視卻仍存在改良優(yōu)化空間方面,如檢驗(yàn)規(guī)范的優(yōu)化可以解決沒有控制計(jì)劃的現(xiàn)在和通過檢驗(yàn)規(guī)范的關(guān)鍵工序界定也可以解決SPC中基礎(chǔ)數(shù)據(jù)難以收集的問題等等。

“每天進(jìn)步一點(diǎn)點(diǎn)”是我在一個(gè)國內(nèi)名企中感受到的企業(yè)文化,在接下來的工作中我會(huì)盡我所能的逐步完善一車間的質(zhì)量管理細(xì)節(jié),在提高一車間質(zhì)量水平的同時(shí)也創(chuàng)造我個(gè)人的職業(yè)價(jià)值。謝謝!

第四篇:【整理總結(jié)】關(guān)于MTT實(shí)驗(yàn)總結(jié)--心血啊!

【整理總結(jié)】關(guān)于MTT實(shí)驗(yàn)總結(jié)--心血啊!

MTT分析法以活細(xì)胞代謝物還原劑3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide, MTT噻唑藍(lán)為基礎(chǔ)。MTT為黃色化合物,是一種接受氫離子的染料,可作用于活細(xì)胞線粒體中的呼吸鏈,在琥珀酸脫氫酶和細(xì)胞色素C的作用下tetrazolium環(huán)開裂,生成藍(lán)色的formazan結(jié)晶,formazan結(jié)晶的生成量僅與活細(xì)胞數(shù)目成正比(死細(xì)胞中琥珀酸脫氫酶消失,不能將MTT還原)。還原生成的formazan結(jié)晶可在含50%的N,N-二甲基甲酰胺和20%的十二甲基磺酸鈉(pH 4.7)的MTT溶解液中溶解,利用酶標(biāo)儀測定490 nm處的光密度OD值,以反映出活細(xì)胞數(shù)目。也可以用DMSO來溶解。

MTT粉末和溶液保存時(shí)都需要避光,用鋁箔紙包好就可以。實(shí)驗(yàn)的時(shí)候我一般關(guān)閉超凈臺上的日光燈來避光,覺得這樣比較好。

MTT

步驟如下:

1:接種細(xì)胞:用含10%胎小牛血清得培養(yǎng)液配成單個(gè)細(xì)胞懸液,以每孔

1000-10000個(gè)細(xì)胞接種到96孔板,每孔體積200ul.2:培養(yǎng)細(xì)胞:同一般培養(yǎng)條件,培養(yǎng)3-5天(可根據(jù)試驗(yàn)?zāi)康暮鸵鬀Q定培養(yǎng)時(shí)間)。

3:呈色:培養(yǎng)3-5天后,每孔加MTT溶液(5mg/ml用PBS

配)20ul.繼續(xù)孵育4小時(shí),終止培養(yǎng),小心吸棄孔內(nèi)培養(yǎng)上清液,對于懸浮細(xì)胞需要離心后再吸棄孔內(nèi)培養(yǎng)上清液。每孔加150ul DMSO,振蕩10分鐘,使結(jié)晶物充分融解。

4:比色:選擇490nm波長,在酶聯(lián)免疫監(jiān)測儀上測定各孔光吸收值,記錄結(jié)果,以時(shí)間為橫坐標(biāo),吸光值為縱坐標(biāo)繪制細(xì)胞生長曲線。

注意事項(xiàng):

(1)選擇適當(dāng)?shù)眉?xì)胞接種濃度。

(2)避免血清干擾:一般選小于10%的胎牛血清的培養(yǎng)液進(jìn)行試驗(yàn)。在呈色后盡量吸盡孔內(nèi)殘余培養(yǎng)液。

(3)設(shè)空白對照:與試驗(yàn)平行不加細(xì)胞只加培養(yǎng)液的空白對照。其他試驗(yàn)步驟保持一致,最后比色以空白調(diào)零。

MTT實(shí)驗(yàn)吸光度最后要在0-0.7之間,超出這個(gè)范圍就不是直線關(guān)系,IC50是半抑制率,意思是抑制率50%的時(shí)候藥物的濃度。把藥品稀釋成不同的濃度,然后計(jì)算各自的抑制率,以藥品的濃度為橫坐標(biāo),抑制率為縱坐標(biāo)作圖,然后得到50%抑制率時(shí)候的藥品濃度,就是IC50。要點(diǎn):藥品2倍稀釋,多做梯度,做點(diǎn)線圖即可!

舉個(gè)例子:各組濃度0.1、0.01、0.001、0.0001、0.00001、0.000001,稀釋倍數(shù)為10,最大濃

度為0.1,抑制率為0.95、0.80、0.65、0.43、0.21,0.06。代入計(jì)算公式: Pm=0.95 Pn=0.06

P=0.95+0.80+0.65+0.43+0.21+0.06=3.1 Xm=lg0.1=-1 lgI=lg0.1/0.01=1

lgIC50=-1-1*(3.1-(3-0.95-0.06)/4)=-3.6025 IC50=0.00025

有一個(gè)公式可供參考;lgIC50=Xm-I(P-(3-Pm-Pn)/4)Xm:lg 最大劑量 I:lg(最大劑量/相臨劑量)P:陽性反應(yīng)率之和 Pm:最大陽性反應(yīng)率 Pn:最小陽性反應(yīng)率

抑制率=1-加藥組OD值/對照組OD值

公式中的最大最小陽性反應(yīng)率就是最大最小抑制率例:

用96孔板培養(yǎng)SMMC-7721肝癌做MTT測細(xì)胞活力,應(yīng)該加多少1640培養(yǎng)基,多少M(fèi)TT和DMSO合適?根據(jù)書上說的加200ul1640,20ulMTT,150ulDMSO 加DMSO之前要盡量去掉培養(yǎng)液,便于DMSO溶解甲臜顆粒進(jìn)行比色測定

一般每孔4000個(gè)細(xì)胞為宜,既細(xì)胞濃度在20000個(gè)/ml,MTT加20ul,作用四小時(shí)后洗掉上清液,注意不要將甲瓉洗掉,然后每孔加150ul DMSO,在脫色搖床上振蕩10分鐘,然后測吸光值。

一般要低于IC50,避免非調(diào)亡性殺傷的細(xì)胞太多,造成流式細(xì)胞儀檢測碎片太多。我一般用1/2-1/3的IC50,作用時(shí)間為36h。一般腫瘤細(xì)胞系空白處理的調(diào)亡率應(yīng)低于1%,用藥后一般為5-10%(Annexin V),細(xì)胞周期的亞G0峰比較明顯.呵呵,寫得不錯(cuò),頂一個(gè)

謝謝樓主辛苦了~

寫的好,謝謝

樓主說細(xì)胞放進(jìn)96孔板后培養(yǎng)3~5天,這樣好象不行,細(xì)胞經(jīng)過那么長時(shí)間的生長早就長滿了,會(huì)產(chǎn)生細(xì)胞之間的生長抑制,我覺的細(xì)胞再生長一天就可以了,還有利用酶標(biāo)儀測定570nm處的光密度OD值也可以.

多謝樓主的辛勤勞動(dòng)。

我是新手想做MTT和IC50。請同行多指點(diǎn)

感謝,共同努力!

不錯(cuò),正好用的上.呵呵,貌似不是你的心血?網(wǎng)上到處都是

不錯(cuò),很有幫助!

我覺得就算網(wǎng)上到處都是,樓主也是將好的經(jīng)驗(yàn)和大家分享,這就是我們園子所倡導(dǎo)的我?guī)腿巳?人人幫我啊!還是要感謝樓主工作的!

八錯(cuò)!

謝謝樓主了

不錯(cuò)不錯(cuò)~辛苦啦

謝謝樓主!

致謝!

要學(xué)習(xí)一下 謝謝LZ

不易!

對于我這種新人來說真是太好了!我長本事后也要這樣!嘿嘿 謝謝摟主!

“MTT實(shí)驗(yàn)吸光度最后要在0-0.7之間,超出這個(gè)范圍就不是直線關(guān)系”請問摟主你這是針對波長490而言還是對所有的波長而言呢 我的測定值就有1以上的,是不是不對啊

第五篇:信訪舉報(bào)工作質(zhì)量年總結(jié)

初發(fā)階段,避免事態(tài)的進(jìn)一步擴(kuò)大和矛盾的激化,我們嚴(yán)把初信初訪關(guān),對事實(shí)清楚、證據(jù)確鑿,性質(zhì)嚴(yán)重的違紀(jì)線索,立即立案進(jìn)行查處;對不明~、舉報(bào)失實(shí)的來信來訪,注意耐心細(xì)致的做好解釋說明工作,給予明確答復(fù);對無中生有、造謠生事、惡意報(bào)復(fù)的進(jìn)行嚴(yán)厲的批評教育,并按有關(guān)規(guī)定給以相應(yīng)的紀(jì)律處分和組織處理,真正做到了給違紀(jì)者一個(gè)懲處,給舉報(bào)者一個(gè)明白,給誣告者一個(gè)教訓(xùn),大力營造了鼓勵(lì)人們干事業(yè)、支持人們干成事業(yè)的有利氛圍;“落實(shí)關(guān)”:即堅(jiān)持“有信必閱、有案必查、一查到底”的原則,對經(jīng)調(diào)查確實(shí)構(gòu)成違紀(jì)的每一起信訪案件,都嚴(yán)格按照“二十四字”的辦案要求,集中力量、集中時(shí)間迅速查辦,切實(shí)做到快閱、塊轉(zhuǎn)、快立案、快查辦、快結(jié)案,從不拖泥帶水,借故推諉。這樣既使問題在短時(shí)間內(nèi)得到妥善解決,又防止了矛盾升級,取得了事半功倍的效果。全年共受理群眾來信來訪、電話舉報(bào)12件次。其中,來信2件次,來訪2件次,電話舉報(bào)8件次。已全部處結(jié),信訪案件按期結(jié)案率和優(yōu)質(zhì)結(jié)案率達(dá)到了100%,初信初訪一次結(jié)案率達(dá)到了95%以上,做到了件件有著落,事事有結(jié)果。

三是積極探循規(guī)律,消除信訪誘因。任何信訪問題都有誘發(fā)、醞釀、形成的過程。因此,我們注重找準(zhǔn)規(guī)律,超前防范,消除誘因,增強(qiáng)了工作的主動(dòng)性。做到了對于普遍性的問題早定制度,約束在前;對于傾向性的問題早定措施,防范在前;對于苗頭性的問題早打招呼,教育在前。一是敏感性問題超前防范。如今年我礦電廠設(shè)備招標(biāo)過程中,涉及設(shè)備達(dá)數(shù)十臺套,資金多達(dá)數(shù)千萬元,我們敏感意識到,這項(xiàng)工作不僅是全礦職工家屬關(guān)注的熱點(diǎn),更是一個(gè)極有可能引發(fā)信訪問題的焦點(diǎn)。為此,我們始終抓住一個(gè)“嚴(yán)”字不放松,對整個(gè)招標(biāo)過程進(jìn)行了全過程監(jiān)督,隨時(shí)聽取群眾意見,接受群眾監(jiān)督,杜絕了各類作弊現(xiàn)象,實(shí)現(xiàn)了陽光作業(yè),沒有出現(xiàn)一人上訪.二是堅(jiān)持抓宣傳、造聲勢,在源頭治理上下功夫。從依法規(guī)范信訪行為入手,按照抓早抓小抓苗頭的原則,狠抓了信訪源頭治理工作。將5月份作為“信訪法規(guī)宣傳月”,充分利用廣播、電視、黑板報(bào)、宣傳欄等形式,廣泛宣傳《監(jiān)察機(jī)關(guān)舉報(bào)辦法》、《信訪條例》等法規(guī),把職工群眾的上訪活動(dòng)引導(dǎo)到法制的軌道上來,達(dá)到了信訪干部能熟練地掌握和運(yùn)用信訪法規(guī),信訪群眾人人遵守信訪法規(guī),維護(hù)正常信訪秩序的目的,信訪人員處理信訪問題的能力得到顯著提高。同時(shí)我們堅(jiān)持從關(guān)鍵人物入手,狠抓了黨員、干部、上訪群眾的“三個(gè)教育”。對群眾,重點(diǎn)教育其克服信訪的隨意性、盲目性和片面性;對黨員,重點(diǎn)使其熟悉黨的各項(xiàng)紀(jì)律,不參與上訪;對基層干部,引導(dǎo)他們增強(qiáng)依法行政、廉政勤政意識,防止失誤,減少信訪誘發(fā)因素,起到了“活血化瘀”,清源截流的作用。

二、存在的問題及今后打算

通過開展“信訪舉報(bào)工作質(zhì)量年”活動(dòng),進(jìn)一步增強(qiáng)了化解矛盾,解決信訪問題的能力,提高了信訪工作的質(zhì)量,有力的推動(dòng)了黨風(fēng)廉政建設(shè)工作的深入開展,保障了全礦的政治基礎(chǔ)穩(wěn)定,進(jìn)一步鞏固和發(fā)展了我礦安定團(tuán)結(jié),政通人和,人心思上、人心思干的的良好局面。但同時(shí)我們也清醒地看到,盡管我們做了大量扎實(shí)有效的工作,但工作中還存在一些不容忽視的問題,如黨風(fēng)廉政監(jiān)督員的作用發(fā)揮還不夠突出,對兩員隊(duì)伍的日常管理還不夠規(guī)范,個(gè)別信訪問題的信息反饋還不夠及時(shí)等等。在今后的工作中,我們將緊緊圍繞企業(yè)穩(wěn)定大局,繼續(xù)堅(jiān)持“穩(wěn)定壓倒一切”的指導(dǎo)思想不動(dòng)搖,積極探索新形勢下加強(qiáng)紀(jì)檢信訪工作的新方法、新路子,鞏固和發(fā)展好信訪舉報(bào)質(zhì)量年活動(dòng)的成果。重點(diǎn)是要進(jìn)一步加強(qiáng)陣地建設(shè),做好日常接待工作,創(chuàng)造良好的信訪環(huán)境。加強(qiáng)對“兩員”隊(duì)伍的思想、組織和作風(fēng)整頓,切實(shí)解決“兩員”隊(duì)伍中個(gè)別人履行職責(zé)較差,作用發(fā)揮不力的問題。進(jìn)一步增強(qiáng)政治敏感性,加大不穩(wěn)定因素排查力度,做到早發(fā)現(xiàn),早解決,早處理。對職工群眾反映的問題,實(shí)行‘首問制”,誰接待、誰負(fù)責(zé),一包到底,最大限度的讓職工群眾滿意,使上級領(lǐng)導(dǎo)放心,切實(shí)把“三個(gè)代表”重要思想貫穿于工作的始終,為企業(yè)的改革發(fā)展穩(wěn)定積極創(chuàng)造一個(gè)更加有利的政治環(huán)境。

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