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PCR防污染措施

時(shí)間:2019-05-15 01:40:09下載本文作者:會員上傳
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第一篇:PCR防污染措施

【分享】PCR污染與對策

PCR污染與對策

PCR反應(yīng)的最大特點(diǎn)是具有較大擴(kuò)增能力與極高的靈敏性,但令人頭痛的問題是易污染,極其微量的污染即可造成假陽性的產(chǎn)生.污染原因

(一)標(biāo)本間交叉污染:標(biāo)本污染主要有收集標(biāo)本的容器被污染,或標(biāo)本放置時(shí),由于密封不嚴(yán)溢于容器外,或容器外粘有標(biāo)本而造成相互間交叉污染;標(biāo)本核酸模板在提取過程中,由于吸樣槍污染導(dǎo)致標(biāo)本間污染;有些微生物標(biāo)本尤其是病毒可隨氣溶膠或形成氣溶膠而擴(kuò)散,導(dǎo)致彼此間的污染.(二)PCR試劑的污染:主要是由于在PCR試劑配制過程中,由于加樣槍、容器、雙蒸水及其它溶液被PCR核酸模板污染.(三)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物污染.這是PCR反應(yīng)中最主要最常見的污染問題.因?yàn)镻CR產(chǎn)物拷貝量大(一般為1013拷貝/ml),遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于PCR檢測數(shù)個(gè)拷貝的極限,所以極微量的PCR產(chǎn)物污染,就可造成假陽就可形成假陽性.還有一種容易忽視,最可能造成PCR產(chǎn)物污染的形式是氣溶膠污染;在空氣與液體面摩擦?xí)r就可形成氣溶膠,在操作時(shí)比較劇烈地?fù)u動反應(yīng)管,開蓋時(shí)、吸樣時(shí)及污染進(jìn)樣槍的反復(fù)吸樣都可形成氣溶膠而污染.據(jù)計(jì)算一個(gè)氣溶膠顆粒可含48000拷貝,因而由其造成的污染是一個(gè)值得特別重視的問題.(四)實(shí)驗(yàn)室中克隆質(zhì)粒的污染:在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室及某些用克隆質(zhì)粒做陽性對照的檢驗(yàn)室,這個(gè)問題也比較常見.因?yàn)榭寺≠|(zhì)粒在單位容積內(nèi)含量相當(dāng)高,另外在純化過程中需用較多的用具及試劑,而且在活細(xì)胞內(nèi)的質(zhì)粒,由于活細(xì)胞的生長繁殖的簡便性及具有很強(qiáng)的生命力.其污染可能性也很大.污染的監(jiān)測

一個(gè)好的實(shí)驗(yàn)室,要時(shí)刻注意污染的監(jiān)測,考慮有無污染是什么原因造成的污染,以 便采取措施,防止和消除污染.對照試驗(yàn)

1.陽性對照:在建立PCR反應(yīng)實(shí)驗(yàn)室及一般的檢驗(yàn)單位都應(yīng)設(shè)有PCR陽性對照,它是PCR 反應(yīng)是否成功、產(chǎn)物條帶位置及大小是否合乎理論要求的一個(gè)重要的參考標(biāo)志.陽性 對照要選擇擴(kuò)增度中等、重復(fù)性好,經(jīng)各種鑒定是該產(chǎn)物的標(biāo)本,如以重組質(zhì)粒為陽 性對照,其含量宜低不宜高(100個(gè)拷貝以下).但陽性對照尤其是重組質(zhì)粒及高濃度陽 性標(biāo)本,其對檢測或擴(kuò)增樣品污染的可能性很大.因而當(dāng)某一PCR試劑經(jīng)自己使用穩(wěn) 定,檢驗(yàn)人員心中有數(shù)時(shí),在以后的實(shí)驗(yàn)中可免設(shè)陽性對照.2.陰性對照:每次PCR實(shí)驗(yàn)務(wù)必做陰性對照.它包括①標(biāo)本對照:被檢的標(biāo)本是血清就用 鑒定后的正常血清作對照;被檢的標(biāo)本是組織細(xì)胞就用相應(yīng)的組織細(xì)胞作對照.②試劑 對照:在PCR試劑中不加模板DNA或RNA,進(jìn)行PCR擴(kuò)增,以監(jiān)測試劑是否污染.3.重復(fù)性試驗(yàn)

4.選擇不同區(qū)域的引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增 防止污染的方法 一. 污染的預(yù)防

進(jìn)行PCR操作時(shí),操作人員應(yīng)該嚴(yán)格遵守一些操作規(guī)程,最大程度地降低可能出現(xiàn)的PCR污染或杜絕污染的出現(xiàn)。

(一)劃分操作區(qū):目前,普通PCR尚不能做到單人單管,實(shí)現(xiàn)完全閉管操作,但無論是否能夠達(dá)到單人單管,均要求實(shí)驗(yàn)操作在三個(gè)不同的區(qū)域內(nèi)進(jìn)行,PCR的前處理和后處理要在不同的隔離區(qū)內(nèi)進(jìn)行: 1.標(biāo)本處理區(qū),包括擴(kuò)增摸板的制備; 2.PCR擴(kuò)增區(qū),包括反應(yīng)液的配制和PCR擴(kuò)增;

3.產(chǎn)物分析區(qū),凝膠電泳分析,產(chǎn)物拍照及重組克隆的制備。

各工作區(qū)要有一定的隔離,操作器材專用,要有一定的方向性。如:標(biāo)本制備→PCR擴(kuò)增→產(chǎn)物分析→產(chǎn)物處理。

切記:產(chǎn)物分析區(qū)的產(chǎn)物及器材不要拿到其他兩個(gè)工作區(qū)。

(二)分裝試劑:PCR擴(kuò)增所需要的試劑均應(yīng)在裝有紫外燈的超凈工作臺或負(fù)壓工作臺配制和分裝。所有的加樣器和吸頭需固定放于其中,不能用來吸取擴(kuò)增后的DNA和其他來源的DNA: 1. PCR用水應(yīng)為高壓的雙蒸水;

2. 引物和dNTP用高壓的雙蒸水在無PCR擴(kuò)增產(chǎn)物區(qū)配制;

3. 引物和dNTP應(yīng)分裝儲存,分裝時(shí)應(yīng)標(biāo)明時(shí)間,以備發(fā)生污染時(shí)查找原因。

(三)實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng) 盡管擴(kuò)增序列的殘留污染大部分是假陽性反應(yīng)的原因,樣品間的交叉污染也是原因之一。因此,不僅要在進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)是謹(jǐn)慎認(rèn)真,在樣品的收集、抽提和擴(kuò)增的所有環(huán)節(jié)都應(yīng)該注意: 1.戴一次性手套,若不小心濺上反應(yīng)液,立即更換手套;

2.使用一次性吸頭,嚴(yán)禁與PCR產(chǎn)物分析室的吸頭混用,吸頭不要長時(shí)間暴露于空氣中,避免氣溶膠的污染;

3.避免反應(yīng)液飛濺,打開反應(yīng)管時(shí)為避免此種情況,開蓋前稍離心收集液體于管底。若不小心濺到手套或桌面上,應(yīng)立刻更換手套并用稀酸擦拭桌面;

4.操作多份樣品時(shí),制備反應(yīng)混合液,先將dNTP、緩沖液、引物和酶混合好,然后分裝,這樣即可以減少操作,避免污染,又可以增加反應(yīng)的精確度; 5.最后加入反應(yīng)模板,加入后蓋緊反應(yīng)管; 6.操作時(shí)設(shè)立陰陽性對照和空白對照,即可驗(yàn)證PCR反應(yīng)的可靠性,又可以協(xié)助判斷擴(kuò)增系統(tǒng)的可信性; 7.盡可能用可替換或可高壓處理的加樣器,由于加樣器最容易受產(chǎn)物氣溶膠或標(biāo)本DNA的污染,最好使用可替換或高壓處理的加樣器。如沒有這種特殊的加樣器,至少PCR操作過程中加樣器應(yīng)該專用,不能交叉使用,尤其是PCR產(chǎn)物分析所用加樣器不能拿到其它兩個(gè)區(qū); 8.重復(fù)實(shí)驗(yàn),驗(yàn)證結(jié)果,慎下結(jié)論。二. 追蹤污染源

如果不慎發(fā)生污染情況,應(yīng)從下面幾條出發(fā),逐一分析,排除污染。

(一)設(shè)立陰陽性對照:有利于監(jiān)測反應(yīng)體系各成分的污染情況。選擇陽性對照時(shí),應(yīng)選擇擴(kuò)增弱,且重復(fù)性好的樣品,因強(qiáng)陽性對照可產(chǎn)生大量不必要的擴(kuò)增序列,反而可能成為潛在的污染源。如果以含靶序列的重組質(zhì)粒為對照,100個(gè)拷貝之內(nèi)的靶序列就足以產(chǎn)生陽性擴(kuò)增。陰性對照的選擇亦要慎重,因?yàn)镻CR敏感性極高,可以從其它方法(Sourthern 印跡或點(diǎn)雜交等)檢測陰性的標(biāo)本中檢測出極微量的靶分子。此外,每次擴(kuò)增均應(yīng)包括PCR體系中各試劑的時(shí)機(jī)對照,即包括PCR反應(yīng)所需的全部成分,而不加模板DNA,這對監(jiān)測試劑中PCR產(chǎn)物殘留污染是非常有益的。如果擴(kuò)增結(jié)果中試劑對照為陽性結(jié)果,就是某一種或數(shù)種試劑被污染了。此時(shí),要全部更換一批新的試劑進(jìn)行擴(kuò)增,擴(kuò)增時(shí)設(shè)立不同的反應(yīng)管,每一管含有一種被檢測試劑,在檢出污染試劑后,應(yīng)馬上處理。

(二)環(huán)境污染:在排除試劑污染的可能性外,更換試劑后,若不久又發(fā)現(xiàn)試劑被污染了,如果預(yù)防措施比較嚴(yán)密,則考慮可能為環(huán)境污染。環(huán)境污染中常見的污染源主要有: 1.模板提取時(shí)真空抽干裝置; 2.凝膠電泳加樣器; 3.電泳裝置; 4.紫外分析儀;

5.切膠用刀或手術(shù)刀片; 6.離心機(jī);

7.冰箱門把手,冷凍架,門把手或?qū)嶒?yàn)臺面等;

此時(shí)可用擦拭實(shí)驗(yàn)來查找可疑污染源。1)用無菌水浸泡過的滅菌棉簽擦拭可疑污染源;2)0.1ml去離子水浸泡;3)取5ml做PCR實(shí)驗(yàn);4)電泳檢測結(jié)果。

8.氣溶膠。如果經(jīng)過上述追蹤實(shí)驗(yàn),仍不能查找到確切污染源,則污染可能是由空氣中PCR產(chǎn)物的氣溶膠造成的,此時(shí)就應(yīng)該更換實(shí)驗(yàn)場所,若條件不允許,則重新設(shè)計(jì)新的引物(與原引物無相關(guān)性)。三.污染處理

(一)環(huán)境污染

1.稀酸處理法:對可疑器具用1mol/L鹽酸擦拭或浸泡,使殘余DNA脫嘌呤;

2.紫外照射(UV)法:紫外波長(nm)一般選擇254/300nm,照射30min即可。需要注意的是,選擇UV作為消除殘留PCR產(chǎn)物污染時(shí),要考慮PCR產(chǎn)物的長度與產(chǎn)物序列中堿基的分布,UV照射僅對500bp以上長片段有效,對短片段效果不大。UV照射時(shí),PCR產(chǎn)物中嘧啶堿基會形成二聚體,這些二聚體可使延伸終止,但并不是DNA鏈中所有嘧啶均能形成二聚體,且UV照射還可使二聚體斷裂。形成二聚體的程度取決于UV波長,嘧啶二聚體的類型及與二聚體位點(diǎn)相鄰核苷酸的序列。在受照射的長DNA鏈上,形成二聚體缺陷的數(shù)量少于0.065/堿基,其他非二聚體的光照損傷(如環(huán)丁烷型嘧啶復(fù)合體,胸腺嘧啶乙二醇,DNA鏈間與鏈內(nèi)的交聯(lián)和DNA斷裂等)均可終止Taq DNA聚合酶的延伸。這些位點(diǎn)的數(shù)量與二聚體位點(diǎn)相當(dāng)。如果這些位點(diǎn)(0.13/堿基)在DNA分子上隨機(jī)分布,一個(gè)500bp片段的DNA分子鏈上將有32處損傷位點(diǎn),那么,105個(gè)這樣的分子中每個(gè)分子中會至少有一處損傷。相反,如果100bp的片段,每條鏈上僅有6處損傷,105個(gè)拷貝分子中將有許多分子沒有任何損傷。這就是UV照射有一定的片段長度限制的原因。

(二)反應(yīng)液污染

可采用下列方法之一處理:

1.DNase I法:PCR混合液(未加模板和Taq聚合酶)加入0.5U DNase I,室溫反應(yīng)30 min后加熱滅活,然后加入模板和Taq聚合酶進(jìn)行正常PCR擴(kuò)增。該方法的優(yōu)點(diǎn)是不需要知道污染DNA的序列;

2.內(nèi)切酶法:選擇識別4個(gè)堿基的內(nèi)切酶(如Msp I和Taq I等),可同時(shí)選擇幾種,以克服用一種酶只能識別特定序列的缺陷,室溫作用1h 后加熱滅活進(jìn)行PCR;

3.紫外照射法:未加模板和Taq聚合酶的PCR混合液進(jìn)行紫外照射,注意事項(xiàng)與方法同上述UV照射法; 4.g射線輻射法:1.5kGy的輻射可完全破壞0.1ng基因組DNA,2.0 kGy可破壞104拷貝的質(zhì)粒分子,4.0 kGy仍不影響PCR,但高于此限度會使PCR擴(kuò)增效率下降。引物可受照射而不影響PCR,g射線是通過水的離子化產(chǎn)生自由基來破壞DNA的。

(三)尿嘧啶糖苷酶(UNG)法

由于UV照射的去污染作用對500bp以下的片段效果不好,而臨床用于檢測的PCR擴(kuò)增片段通常為300bp左右,因此UNG的預(yù)防作用日益受到重視和肯定。

1.原理:在PCR產(chǎn)物或引物中用dU 代替dT。這種dU化的PCR產(chǎn)物與UNG一起孵育,因UDG可裂解尿嘧啶堿基和糖磷酸骨架間的N-糖基鍵,可除去dU而阻止TaqDNA聚合酶的延伸,從而失去被再擴(kuò)增的能力。UNG對不含dU的模板無任何影響。UNG可從單或雙鏈DNA中消除尿嘧啶,而對RNA中的尿嘧啶和單一尿嘧啶分子則無任何作用。

2.dUTP法:用dUTP代替dTTP,使產(chǎn)物中摻入大量dU。在再次進(jìn)行PCR擴(kuò)增前,用UNG處理PCR混合液即可消除PCR產(chǎn)物的殘留污染。由于UNG在PCR循環(huán)中的變性一步便可被滅活,因此不會影響含dU的新的PCR產(chǎn)物。

3.dU引物法:合成引物時(shí)以dU 代dT,這樣PCR產(chǎn)物中僅5%u2ca端帶dU。UNG處理后,引物失去了結(jié)合位點(diǎn)而不能擴(kuò)增。對長片段(1-2kb以上)的擴(kuò)增用dUTP法效率較用dTTP低,而用dU法就可克服這一缺點(diǎn)。dU引物最好將dU設(shè)計(jì)在3%u2ca端或近%u2ca端。該法僅能用于引物以外試劑的處理。

4.優(yōu)點(diǎn):可以去除任何來源的污染;UNG處理可以和PCR擴(kuò)增在同一個(gè)反應(yīng)管內(nèi)進(jìn)行;由于擴(kuò)增產(chǎn)物中有大量dU存在,可徹底消除污染源。

5.需注意的是摻入dUTP的DNA不應(yīng)對產(chǎn)物的任何操作有影響,在進(jìn)行PCR產(chǎn)物克隆時(shí),應(yīng)該轉(zhuǎn)化UNG-(UNG缺陷)大腸桿菌受體菌,否則轉(zhuǎn)化產(chǎn)物會被受體菌UNG消化掉。

(四)固相捕獲法

用于去除標(biāo)本中污染的核酸和雜質(zhì),原理如下:1)用一生物素標(biāo)記的單鏈RNA探針與待擴(kuò)核酸雜交,雜交區(qū)域是非擴(kuò)增區(qū);2)用包被鏈霉親和素的固相載體來捕獲帶有生物素探針的雜交核酸,通過漂洗可去除污染的擴(kuò)增產(chǎn)物和雜質(zhì);3)洗脫靶分子后用特異引物擴(kuò)增非RNA探針雜交區(qū)域。第2)步的漂洗后可用PCR檢測以確定標(biāo)本是否被擴(kuò)增產(chǎn)物或重組質(zhì)粒污染。

(五)RS-PCR法(RNA-specific PCR)

也稱為鏈特異性PCR,主要指用于RNA模板的特異性PCR法,該法可明顯降低假陽性而不影響PCR的敏感性。其關(guān)鍵在于設(shè)計(jì)引物,逆轉(zhuǎn)錄引物的3%u2ca端(A區(qū))有2 0個(gè)核苷酸左右為模板的特異性互不序列,5%u2ca端2 0個(gè)核苷酸(C區(qū))為附加修飾堿基。與mRNA逆轉(zhuǎn)錄后,經(jīng)超速離心使 cDNA與多余引物分開,再用和第二引物(C)以第一鏈cDNA為模板合成第二鏈cDNA,以后的PCR循環(huán)中用逆轉(zhuǎn)錄引物的B區(qū)和引物C進(jìn)行擴(kuò)增加尾cDNA,而污染的DNA或質(zhì)粒DNA才不會被擴(kuò)增。

(六)抗污染引物法

該對引物擴(kuò)增時(shí)通過病毒DNA克隆如入質(zhì)粒的位點(diǎn)。這一區(qū)域只存在完整的原病毒中,在重組質(zhì)粒中,這一區(qū)域分成兩個(gè)區(qū)域與克隆位點(diǎn)被。如果重組質(zhì)粒污染了標(biāo)本,也不能擴(kuò)增出任何條帶,即使出現(xiàn)了擴(kuò)增帶,其大小也與預(yù)期的不同。只有原病毒DNA才能被引物擴(kuò)增,因此只要出現(xiàn)預(yù)期大小的擴(kuò)增帶就可以證明標(biāo)本是陽性的,該法試用于環(huán)狀靶分子系列。

四.其它PCR檢測方法:

(一)兩步法:是指在用套式PCR方法擴(kuò)增某些含量低微的標(biāo)本時(shí),兩對引物在同一個(gè)管中以簡化步驟,減少污染。通常第一步進(jìn)行20-25個(gè)循環(huán),擴(kuò)增外引物片段;第二步再進(jìn)行10個(gè)循環(huán),擴(kuò)增內(nèi)引物片段。兩步法對內(nèi)外引物的Tm值有特殊要求,即內(nèi)外引物的退火溫度高(如68℃),在此溫度下內(nèi)引物不與模板退火,然后降低退火溫度(至55℃)再擴(kuò)增內(nèi)引物片段,這樣,在操作過程中,僅打開PCR反應(yīng)管一次,大大減少了污染的可能性。

(二)熒光法:亦稱熒光PCR技術(shù)(fluoresence PCR, F-PCR),是1995年由美國PE公司首先研制成功的,它融匯了PCR的靈敏性、DNA雜交的特異性和光譜技術(shù)精確定量的優(yōu)點(diǎn),電腦同步跟蹤,數(shù)據(jù)自動化處理,直接探測PCR過程中的變化以獲得定量的結(jié)果,不需要做PCR后處理或檢測,完全閉管操作。探針標(biāo)記除用TET和FAM外,還可用HEX、JOE作為報(bào)告熒光,3′端的淬滅基團(tuán)常用TAMRA。在探針保持完整時(shí),熒光報(bào)告基團(tuán)的熒光被熒光抑制基團(tuán)淬滅,而在探針被切斷后,熒光報(bào)告基團(tuán)才發(fā)出報(bào)告熒光,且熒光的強(qiáng)度與PCR產(chǎn)物的數(shù)量呈正比。熒光檢測儀器透過PCR管壁能直接檢測到熒光信號的波長和長度變化。

主要有以下優(yōu)點(diǎn):

1.探針特異性強(qiáng),假陽性率低; 2.操作快速,不需要PCR后處理;

3.定量范圍寬,HBV 0.4fg-4000fg/ml(102-106 Dane′s particle/ml); 4.閉管操作,PCR產(chǎn)物污染少; 5.靈敏度高。主要方法有: 1..熒光探針法:進(jìn)行熒光PCR檢測時(shí),要求熒光探針必須完全與靶基因互補(bǔ),長度以20-30個(gè)堿基為宜,必要時(shí)3′端磷酸化封閉,以防在擴(kuò)增時(shí)作為引物延伸。該方法利用Taq酶的3′→5′聚合酶活性及5′→3′外切酶活性,可以在鏈延伸過程中實(shí)現(xiàn)鏈替換,并將被替換的探針切斷,故可進(jìn)行定性與定量檢測。

熒光探針5′端標(biāo)記的TAMRA,在480nm激發(fā)下產(chǎn)生530nm的紅色熒光;3′端標(biāo)記的FAM,激發(fā)后產(chǎn)生綠色熒光。PE公司推出的TaqMan系統(tǒng),即采用雙熒光探針,如配合使用PCR擴(kuò)增與熒光檢測合二為一的儀器,可進(jìn)行實(shí)時(shí)(real-time)定量檢測。2.分子信標(biāo)法:分子信標(biāo)(molecular beacon)是一個(gè)發(fā)夾樣結(jié)構(gòu)的特異探針,其環(huán)狀部分與靶序列互補(bǔ)。在室溫時(shí),分子信標(biāo)的發(fā)夾緊閉,熒光淬滅。PCR擴(kuò)增時(shí),隨著溫度升高,發(fā)夾松開,與單鏈模板特異結(jié)合,發(fā)出熒光。熒光強(qiáng)度與模板呈正比,故可用于PCR產(chǎn)物的定性及定量。

第二篇:防塵防污染方案措施

編制依據(jù):

1、《中華人民共和國環(huán)境保護(hù)法》;

2、《中華人民共和國固體廢物污染環(huán)境防治法》;

3、《中華人民共和國大氣污染防治法》;

4、《中華人民共和國環(huán)境影響評價(jià)法》

揚(yáng)塵防止措施

1.建筑施工揚(yáng)塵已成為城市大氣污染主要源頭之一,為了控制施工現(xiàn)場揚(yáng)塵污染環(huán)境,結(jié)合工地的實(shí)際情況,特制定施工現(xiàn)場控制揚(yáng)塵污染實(shí)施方案。

2.項(xiàng)目部建立以項(xiàng)目經(jīng)理為第一責(zé)任人的環(huán)境保護(hù)體系,明確體系中各崗位的職責(zé)權(quán)限,規(guī)定相應(yīng)的工作程序,對所有參與體系的人員進(jìn)行必要的培訓(xùn)。

3建立并執(zhí)行施工現(xiàn)場環(huán)境保護(hù)檢查、獎罰制度。定期或不定期的對工地組織抽查。對成績突出的應(yīng)根據(jù)獎罰制度進(jìn)行獎勵,對表現(xiàn)較差的單位或個(gè)人應(yīng)給予處罰或批評。

4工地腳手架外側(cè)、物料提升機(jī)外側(cè)必須用密目式安全網(wǎng)封閉,封閉高度要高出作業(yè)面1.5米以上并定期清洗保潔。

5施工現(xiàn)場出入口地面實(shí)行硬化,場內(nèi)道路和作業(yè)場地按規(guī)定進(jìn)行硬化處理。

6水泥和其他易飛揚(yáng)、細(xì)顆粒散體材料,安排在庫內(nèi)存放或嚴(yán)密遮蓋,運(yùn)輸時(shí)要防止遺灑、飛揚(yáng),卸運(yùn)時(shí)采取碼放措施,減少污染。

7建筑材料、構(gòu)件、料具應(yīng)按照施工總平面布置劃定的區(qū)域內(nèi)堆放,水泥、石灰粉必須在庫房存放或嚴(yán)密遮蓋,砂、石等散體建筑材料和土方要采取表面固化、覆蓋等防揚(yáng)塵措施。多余土方及時(shí)清運(yùn)出場。

8施工現(xiàn)場建立保潔制度,有專人負(fù)責(zé)保潔工作,做到工完場地清,配備灑水設(shè)備及時(shí)灑水清掃,噴淋壓塵、降塵。

9嚴(yán)禁在施工現(xiàn)場排放有毒煙塵和氣體,不得在施工現(xiàn)場熔融瀝青,應(yīng)符合環(huán)保要求。

10施工現(xiàn)場設(shè)置垃圾站存放施工垃圾,施工垃圾按照有關(guān)市容和環(huán)境衛(wèi)生的管理規(guī)定及時(shí)清運(yùn)到指定地點(diǎn) 清理高空建筑施工垃圾,采用容器吊運(yùn),嚴(yán)禁凌空拋灑,清理垃圾過程中適量灑水降塵。

12工地出入口設(shè)置車輛沖洗、排水設(shè)施。駛?cè)虢ㄖさ氐倪\(yùn)輸車輛必須車身整潔,不得污染道路,運(yùn)輸車輛經(jīng)沖洗干凈后駛出建筑工地,必須有遮蓋和防護(hù)措施,防止建筑材料、垃圾和塵土飛揚(yáng)、灑落和流溢。

13出現(xiàn)四級以上的大風(fēng)天氣時(shí)禁止進(jìn)行土方和拆除工程施工。在大風(fēng)天氣,采取噴水等措施控制現(xiàn)場的揚(yáng)塵

14現(xiàn)場設(shè)計(jì)排水網(wǎng)絡(luò),廢水、雨水、生活污水經(jīng)沉淀后排入城市排水系統(tǒng)。

15工地因特殊情況停工應(yīng)及時(shí)整理,并做出必要的覆蓋。

16進(jìn)場后及時(shí)與當(dāng)?shù)丨h(huán)保主管部門進(jìn)行聯(lián)系,辦理有關(guān)手續(xù),在主管部門的監(jiān)督、指導(dǎo)下,開展環(huán)保工作。17嚴(yán)格按照公司的環(huán)境/職業(yè)健康安全管理體系文件標(biāo)準(zhǔn)要求,結(jié)合現(xiàn)場實(shí)際有針對性的開展揚(yáng)塵治理工作。

18現(xiàn)場土方、砂堆、石灰堆放揚(yáng)塵控制措施:采取覆蓋、表面臨時(shí)固化、及時(shí)淋水揚(yáng)塵。

19在土或材料的運(yùn)輸過程中,防止材料濺落及空氣污染。

20各進(jìn)出施工場地的車輛車輪在進(jìn)入施工現(xiàn)場及離場前保持清潔。21保持施工現(xiàn)場出入口處主要道路的環(huán)境衛(wèi)生。

22水泥搬運(yùn)揚(yáng)塵的控制措施:往攪拌機(jī)中倒水泥時(shí)輕拿輕放,及時(shí)覆蓋及清理。

二、防污染保護(hù)措施

施工中如何做好環(huán)保工作,保護(hù)好水環(huán)境和大氣環(huán)境,減小噪音,保證附近居民正常生活至關(guān)重要,依據(jù)我公司的環(huán)境方針:“守法利民,預(yù)防污染,締造綠色家園;節(jié)能降耗,持續(xù)改進(jìn),優(yōu)化周圍環(huán)境。”具體措施如下:

1、水環(huán)境保護(hù)措施

(1)施工廢水、生活污水按有關(guān)要求進(jìn)行處理,不得直接排入下水管道。

(2)施工機(jī)械的廢油廢水,采用隔油池等有效措施加以處理,不得超標(biāo)排放。

(3)生活污水采取二級生化或化糞池等措施進(jìn)行凈化處理,經(jīng)檢查符合標(biāo)準(zhǔn)后方準(zhǔn)排放。

2、固體廢棄物處理(1)施工營地和施工現(xiàn)場的生活垃圾,應(yīng)集中堆放。

(2)施工和生活中的廢棄物可經(jīng)當(dāng)?shù)丨h(huán)保部門同意后,運(yùn)至指定地點(diǎn),此外,工地設(shè)置封閉式廁所,派專門的人員清理打掃,并定期對周圍噴藥消毒,以防蚊蠅滋生,病毒傳播。

(3)報(bào)廢材料或施工中返工的挖除材料立即運(yùn)出現(xiàn)場并進(jìn)行處理。對于施工中廢棄的零碎配件,邊角料、水泥袋、包裝箱等及時(shí)收集清理并搞好現(xiàn)場衛(wèi)生,以保護(hù)自然環(huán)境與景觀不受破壞。

三、文明施工措施:

我公司將嚴(yán)格按照“集中施工、快速施工、文明施工”的十二字方針和建設(shè)部規(guī)定的建筑施工現(xiàn)場“三清、六好”的要求,總結(jié)我單位在其它類似工程施工中取得的經(jīng)驗(yàn),精心組織、合理安排,文明施工。

1、對進(jìn)場施工的隊(duì)伍簽訂文明施工協(xié)議,建立健全崗位責(zé)任制,把文明施工責(zé)任落到實(shí)處,提高全體施工人員文明施工自覺性與責(zé)任性

2、掛牌施工,標(biāo)明工程項(xiàng)目名稱、范圍、開竣工期限、工地負(fù)責(zé)人,設(shè)立監(jiān)督電話、接受社會監(jiān)督。

3、采用有效措施處理生產(chǎn),生活廢水,不得超標(biāo)排放,并確保施工現(xiàn)場無積水現(xiàn)象。在多雨季節(jié)應(yīng)配備應(yīng)急的抽水設(shè)備與突擊人員。

4、施工內(nèi)業(yè)資料齊全、整潔、數(shù)據(jù)可靠,辦公室內(nèi)按要求布置各類圖表,及時(shí)反映現(xiàn)場狀況及工程進(jìn)度狀況。

5、現(xiàn)場布局合理,材料、物品、機(jī)具、土方堆放符合要求。

6、加強(qiáng)夜間的安全保衛(wèi)工作,設(shè)夜間巡邏。

7、創(chuàng)建美好環(huán)境。在工地現(xiàn)場和生活區(qū)設(shè)置足夠的臨時(shí)衛(wèi)生設(shè)施,每天清掃處理,同時(shí),在生活區(qū)周圍種植花草、美化環(huán)境。8生活垃圾要集中堆放,統(tǒng)一搬運(yùn)至指定地點(diǎn)廢棄。

8、生活垃圾要集中堆放,統(tǒng)一搬運(yùn)至指定地點(diǎn)廢棄

9、施工期間,經(jīng)常對施工機(jī)械車輛道路進(jìn)行維修,確保道路晴雨暢通。

10、車輛在運(yùn)料過程中,對易飛揚(yáng)的物料用篷布覆蓋嚴(yán)密,且裝料適中,不得超限;車輛輪胎及車外用水沖洗干凈,保持道路的清潔。

11、認(rèn)真進(jìn)行現(xiàn)場調(diào)查,以避免破壞地下設(shè)施。在施工中發(fā)現(xiàn)文物時(shí)及時(shí)報(bào)告并做好現(xiàn)場保護(hù)工作。

12、工地內(nèi)木工加工間、易燃易爆倉庫嚴(yán)禁煙火,操作人員必須持證上崗,乙炔和氧氣瓶使用時(shí)其間距在5米以上,存放時(shí)必須封閉隔離木工加工間、倉庫、宿舍、伙房以及木料堆放場等場所,配備足滅火器材。

第三篇:夜間施工防污染措施

夜間施工防污染措施

根據(jù)上海市環(huán)保管理?xiàng)l例,結(jié)合本工程實(shí)際情況,特制定本措施:

項(xiàng)目部應(yīng)根據(jù)施工進(jìn)度安排無法避免在夜間施工的,應(yīng)提前向有關(guān)部門申報(bào)夜間施工的有關(guān)手續(xù)。夜間施工必須遵照國家及上海市環(huán)境管理?xiàng)l例,嚴(yán)禁盲目施工。

經(jīng)批準(zhǔn)后的夜間施工,我單位必須事先向周邊社區(qū)告示夜間施工情況和降低噪聲措施,按規(guī)定減少噪聲排放,而且不得將強(qiáng)光照明燈直接照射居民窗戶。特殊情況夜間作業(yè),盡量采取降噪措施,事先做好周圍群眾的工作。為了降低夜間施工中噪聲對環(huán)境的影響,采用如下措施:

(1)、人為噪聲的控制措施

施工現(xiàn)場提倡文明施工,建立健全控制人為噪聲的管理制度。盡量減少人為的大聲喧嘩,增強(qiáng)全體施工人員防噪聲擾民的自覺意識。通過統(tǒng)籌安排,合理計(jì)劃,最大限度地減少深夜高噪音施工的時(shí)間和次數(shù);教育工人在砼振搗時(shí)不得用振動器長時(shí)間振動鋼筋; 車輛進(jìn)出現(xiàn)場,專人指揮,不鳴笛等。

(2)、強(qiáng)噪聲機(jī)械的降噪措施

非夜間連續(xù)施工工序必須的施工機(jī)具一律停止使用,減少因施工現(xiàn)場加工制作產(chǎn)生的噪聲。盡量選用低噪聲設(shè)備有消聲降噪設(shè)備的施工機(jī)械。

浙江寶業(yè)建設(shè)集團(tuán)有限公司

花木老街改造工程項(xiàng)目部

2013.3.12

第四篇:防噪音、防塵、防污染措施

防噪音、防塵、防污染措施

一、為防止噪聲污染,采取如下具體措施:

1、施工現(xiàn)場提倡文明施工,建立健全控制人為噪聲的管理制度,盡量避免人為地大聲喧嘩,增強(qiáng)全體施工人員防噪聲擾民的自覺意識。采取先進(jìn)的聯(lián)系方式,避免如吹口哨的噪聲污染。

2、定期對施工作業(yè)人員進(jìn)行文明施工的教育,對施工生產(chǎn)有關(guān)管理人員(包括各班組施工負(fù)責(zé)人)定期進(jìn)行文明施工現(xiàn)場對噪聲控制要求的考核。

3、澆筑混凝土?xí)r盡量安排在6:00~22:00進(jìn)行,結(jié)構(gòu)施工階段噪聲晝間控制在70分貝以下,夜間控制在55分貝以下,并且經(jīng)常測試。特殊情況須在夜間施工時(shí),一方面要盡量采取降噪措施,另一方面要做好周圍居民工作,最大限度的減少擾民。

4、對強(qiáng)噪聲機(jī)械如電鋸電刨等,使用時(shí)須在封閉工棚內(nèi),盡量選用低噪聲或備有消聲降噪設(shè)備的施工機(jī)械;對使用時(shí)不能封閉的機(jī)械如振搗棒等,嚴(yán)格控制工作時(shí)間。

5、建筑物四周掛密目式安全網(wǎng)。

6、施工期間,尤其是夜間施工盡量減少撞擊聲、哨聲,禁止亂扔模板、拖鐵器及禁止大聲喧嘩等人為噪聲。

7、每月進(jìn)行兩次噪聲值監(jiān)測,并在夜間22:00以后進(jìn)行抽測,監(jiān)測方法執(zhí)行《建筑施工場界噪聲測量方法》(GBl2524—90)。

8、加強(qiáng)噪聲監(jiān)測,采取專人監(jiān)測、專人管理的原則,及時(shí)對施工現(xiàn)場超標(biāo)的有關(guān)因素進(jìn)行調(diào)整,達(dá)到施工噪聲不擾民的目的。

9、會同有關(guān)部門和領(lǐng)導(dǎo)及時(shí)妥善處理重大擾民問題,詳細(xì)記錄問題及處理結(jié)果,必要時(shí)及時(shí)上報(bào)監(jiān)理和甲方。

10、嚴(yán)格執(zhí)行<中華人民共和國建筑施工場界噪聲限值》(GB13—12523—90)制定的降噪聲制度。在施工過程中實(shí)施以下措施,以防止噪聲污染。

11、人為噪聲控制:

(1)提倡文明施工,建立健全控制人為噪聲污染的管理制度,增強(qiáng)全體施工人員的環(huán)保意識,提高防止噪聲擾民的自覺性,減少人為噪聲污染。

(2)在施工現(xiàn)場以及宿舍,嚴(yán)禁大聲喧嘩吵鬧、高聲歌唱或敲擊工具、餐具等。(3)作業(yè)中搬運(yùn)物件,必須輕拿輕放,嚴(yán)禁拋擲物件而造成噪聲。

(4)信號指揮人員在晚22時(shí)后,早上6時(shí)前,如有起重作業(yè),只可使用對講機(jī),不得用哨子指揮吊運(yùn)作業(yè)。

12、嚴(yán)格控制作業(yè)時(shí)間

(1)作業(yè)時(shí)間控制在晚間作業(yè)不得超過22時(shí),早晨作業(yè)不得早于6時(shí)。

(2)特殊情況需連續(xù)作業(yè)(或晚間作業(yè))的,則應(yīng)采取有效的降噪措施、并事先做好周圍群眾的工作,同時(shí)報(bào)工地所在地環(huán)保局備案后再施工。

13、強(qiáng)噪聲機(jī)械的降噪措施

(1)對施工現(xiàn)場內(nèi)的強(qiáng)噪聲機(jī)械實(shí)行封閉式作業(yè),即對電鋸、電刨、砂輪機(jī)、切割機(jī)等設(shè)備搭設(shè)封閉式機(jī)械棚,在搭設(shè)封閉棚條件不足時(shí),禁止夜間施工。以減少強(qiáng)噪聲的擴(kuò)散。并同混凝土運(yùn)輸單位洽商,混凝土車進(jìn)入現(xiàn)場后禁止大油門轟轉(zhuǎn)。

(2)澆混凝土用的振搗棒,由專業(yè)人員操作,不得在振搗作業(yè)中撬動鋼筋或模板,以防止發(fā)出強(qiáng)噪聲而污染環(huán)境、擾民。

(3)加強(qiáng)施工現(xiàn)場的噪聲監(jiān)測:按《建筑施工場界噪聲測量方法》(GB-12524)實(shí)施長期監(jiān)測,專人監(jiān)測,專人管理,發(fā)現(xiàn)有超過施工場界噪聲限值標(biāo)準(zhǔn)的,立即對現(xiàn)場超標(biāo)因素進(jìn)行整改,真正達(dá)到施工噪聲不擾民的目的。

二、為防止水污染,現(xiàn)場采取如下具體措施:

1、施工現(xiàn)場道路平整,做到不積水。

2、對現(xiàn)場油料集中保管,油料庫做好防滲、污、跑、冒、滴、漏處理。

3、攪拌機(jī)和運(yùn)輸車輛沖洗污水、地泵池污水等須設(shè)二級沉淀池后,排入市政污水管線或回收供灑水降塵用。

4、現(xiàn)場內(nèi)職工食堂污水經(jīng)過濾、沉淀、隔油后排入污水管線。

5、做好施工現(xiàn)場環(huán)境保護(hù)的監(jiān)督檢查工作,每月初、月中和月末對環(huán)境各項(xiàng)工作進(jìn)行一次檢查,對存在的問題及時(shí)解決,并做好文字記錄和存檔工作。

6、實(shí)行分類管理:

(1)現(xiàn)場儲存、使用的化學(xué)品(油漆、涂料)和含有化學(xué)成分的其他材料,控制泄漏、遺灑揮發(fā)。

(2)對油料、油漆、稀料、冷底子油、模板油、脫模劑、壓縮氣體、液化氣體:易燃液體、易爆固體、自燃物品、氧化劑、有機(jī)過氧化物等材料嚴(yán)格進(jìn)行采購、運(yùn)輸、存放、發(fā)放和使用控制管理。

(3)如發(fā)生大面積的遺灑、燃燒、爆炸等事故,按照《應(yīng)急準(zhǔn)備與響應(yīng)程序》的預(yù)案實(shí)施應(yīng)急處理。

7、施工現(xiàn)場環(huán)保工作管理細(xì)則

8、施工過程做到落地清減少廢棄物的產(chǎn)生。

9、對廢棄物進(jìn)行分類收集、區(qū)別處置的方法。固體廢棄物應(yīng)嚴(yán)格分類,按劃分的相應(yīng)貯存區(qū)域和貯存方式,整齊合理堆放,并有明確標(biāo)識。

10、有毒、有害廢棄物單獨(dú)放置在密閉容器或?qū)ζ溥M(jìn)行全封閉,并注明“有害”字樣。

11、木材等木作工程現(xiàn)場可再次利用的無毒無害廢棄物,可就地回收使用;鋼筋、包裝容器等木作工程現(xiàn)場不能再次利用的可回收無毒無害廢棄物,應(yīng)向項(xiàng)目部報(bào)批后處理。

12、可回收有毒有害廢棄物,項(xiàng)目部報(bào)批后處理。如廢油桶、廢塑料布、廢滅火器等向公司經(jīng)項(xiàng)目部處理并有記錄。

13、對不可回收利用的無毒無害廢棄物,項(xiàng)目部處理。

14、對不可回收利用的有毒有害廢棄物,應(yīng)根據(jù)國家法規(guī),采用密閉容器存放,防止二次污染。

15、生活廢棄物經(jīng)由項(xiàng)目部和清運(yùn)處置單位協(xié)商后進(jìn)行處理。

第五篇:防噪音、防塵、防污染措施

防噪音、防塵、防污染措施

云南昆鋼機(jī)械設(shè)備制造建安工程有限公司第十六直屬項(xiàng)目部

206年5月1日

防噪音、防塵、防污染措施

一、為防止噪聲污染,采取如下具體措施:

1、施工現(xiàn)場提倡文明施工,建立健全控制人為噪聲的管理制度,盡量避免人為地大聲喧嘩,增強(qiáng)全體施工人員防噪聲擾民的自覺意識。采取先進(jìn)的聯(lián)系方式,避免如吹口哨的噪聲污染。

2、定期對施工作業(yè)人員進(jìn)行文明施工的教育,對施工生產(chǎn)有關(guān)管理人員(包括各班組施工負(fù)責(zé)人)定期進(jìn)行文明施工現(xiàn)場對噪聲控制要求的考核。

3、澆筑混凝土?xí)r盡量安排在6:00~22:00進(jìn)行,結(jié)構(gòu)施工階段噪聲晝間控制在70分貝以下,夜間控制在55分貝以下,并且經(jīng)常測試。特殊情況須在夜間施工時(shí),一方面要盡量采取降噪措施,另一方面要做好周圍居民工作,最大限度的減少擾民。

4、對強(qiáng)噪聲機(jī)械如電鋸電刨等,使用時(shí)須在封閉工棚內(nèi),盡量選用低噪聲或備有消聲降噪設(shè)備的施工機(jī)械;對使用時(shí)不能封閉的機(jī)械如振搗棒等,嚴(yán)格控制工作時(shí)間。

5、建筑物四周掛密目式安全網(wǎng)。

6、施工期間,尤其是夜間施工盡量減少撞擊聲、哨聲,禁止亂扔模板、拖鐵器及禁止大聲喧嘩等人為噪聲。

7、每月進(jìn)行兩次噪聲值監(jiān)測,并在夜間22:00以后進(jìn)行抽測,監(jiān)測方法執(zhí)行《建筑施工場界噪聲測量方法》(GBl2524—90)。

8、加強(qiáng)噪聲監(jiān)測,采取專人監(jiān)測、專人管理的原則,及時(shí)對施工現(xiàn)場超標(biāo)的有關(guān)因素進(jìn)行調(diào)整,達(dá)到施工噪聲不擾民的目的。

9、會同有關(guān)部門和領(lǐng)導(dǎo)及時(shí)妥善處理重大擾民問題,詳細(xì)記錄問題及處理結(jié)果,必要時(shí)及時(shí)上報(bào)監(jiān)理和甲方。

10、嚴(yán)格執(zhí)行<中華人民共和國建筑施工場界噪聲限值》(GB13—12523—90)制定的降噪聲制度。在施工過程中實(shí)施以下措施,以防止噪聲污染。

11、人為噪聲控制:

(1)提倡文明施工,建立健全控制人為噪聲污染的管理制度,增強(qiáng)全體施工人員的環(huán)保意識,提高防止噪聲擾民的自覺性,減少人為噪聲污染。

(2)在施工現(xiàn)場以及宿舍,嚴(yán)禁大聲喧嘩吵鬧、高聲歌唱或敲擊工具、餐具等。(3)作業(yè)中搬運(yùn)物件,必須輕拿輕放,嚴(yán)禁拋擲物件而造成噪聲。

(4)信號指揮人員在晚22時(shí)后,早上6時(shí)前,如有起重作業(yè),只可使用對講機(jī),不得用哨子指揮吊運(yùn)作業(yè)。

12、嚴(yán)格控制作業(yè)時(shí)間

(1)作業(yè)時(shí)間控制在晚間作業(yè)不得超過22時(shí),早晨作業(yè)不得早于6時(shí)。

(2)特殊情況需連續(xù)作業(yè)(或晚間作業(yè))的,則應(yīng)采取有效的降噪措施、并事先做好周圍群眾的工作,同時(shí)報(bào)工地所在地環(huán)保局備案后再施工。

13、強(qiáng)噪聲機(jī)械的降噪措施

(1)對施工現(xiàn)場內(nèi)的強(qiáng)噪聲機(jī)械實(shí)行封閉式作業(yè),即對電鋸、電刨、砂輪機(jī)、切割機(jī)等設(shè)備搭設(shè)封閉式機(jī)械棚,在搭設(shè)封閉棚條件不足時(shí),禁止夜間施工。以減少強(qiáng)噪聲的擴(kuò)散。并同混凝土運(yùn)輸單位洽商,混凝土車進(jìn)入現(xiàn)場后禁止大油門轟轉(zhuǎn)。

(2)澆混凝土用的振搗棒,由專業(yè)人員操作,不得在振搗作業(yè)中撬動鋼筋或模板,以防止發(fā)出強(qiáng)噪聲而污染環(huán)境、擾民。

(3)加強(qiáng)施工現(xiàn)場的噪聲監(jiān)測:按《建筑施工場界噪聲測量方法》(GB-12524)實(shí)施長期監(jiān)測,專人監(jiān)測,專人管理,發(fā)現(xiàn)有超過施工場界噪聲限值標(biāo)準(zhǔn)的,立即對現(xiàn)場超標(biāo)因素進(jìn)行整改,真正達(dá)到施工噪聲不擾民的目的。

二、為防止水污染,現(xiàn)場采取如下具體措施:

1、施工現(xiàn)場道路平整,做到不積水。

2、對現(xiàn)場油料集中保管,油料庫做好防滲、污、跑、冒、滴、漏處理。

3、攪拌機(jī)和運(yùn)輸車輛沖洗污水、地泵池污水等須設(shè)二級沉淀池后,排入市政污水管線或回收供灑水降塵用。

4、現(xiàn)場內(nèi)職工食堂污水經(jīng)過濾、沉淀、隔油后排入污水管線。

5、做好施工現(xiàn)場環(huán)境保護(hù)的監(jiān)督檢查工作,每月初、月中和月末對環(huán)境各項(xiàng)工作進(jìn)行一次檢查,對存在的問題及時(shí)解決,并做好文字記錄和存檔工作。

6、實(shí)行分類管理:

(1)現(xiàn)場儲存、使用的化學(xué)品(油漆、涂料)和含有化學(xué)成分的其他材料,控制泄漏、遺灑揮發(fā)。

(2)對油料、油漆、稀料、冷底子油、模板油、脫模劑、壓縮氣體、液化氣體:易燃液體、易爆固體、自燃物品、氧化劑、有機(jī)過氧化物等材料嚴(yán)格進(jìn)行采購、運(yùn)輸、存放、發(fā)放和使用控制管理。

(3)如發(fā)生大面積的遺灑、燃燒、爆炸等事故,按照《應(yīng)急準(zhǔn)備與響應(yīng)程序》的預(yù)案實(shí)施應(yīng)急處理。

7、施工現(xiàn)場環(huán)保工作管理細(xì)則

8、施工過程做到落地清減少廢棄物的產(chǎn)生。

9、對廢棄物進(jìn)行分類收集、區(qū)別處置的方法。固體廢棄物應(yīng)嚴(yán)格分類,按劃分的相應(yīng)貯存區(qū)域和貯存方式,整齊合理堆放,并有明確標(biāo)識。

10、有毒、有害廢棄物單獨(dú)放置在密閉容器或?qū)ζ溥M(jìn)行全封閉,并注明“有害”字樣。

11、木材等木作工程現(xiàn)場可再次利用的無毒無害廢棄物,可就地回收使用;鋼筋、包裝容器等木作工程現(xiàn)場不能再次利用的可回收無毒無害廢棄物,應(yīng)向項(xiàng)目部報(bào)批后處理。

12、可回收有毒有害廢棄物,項(xiàng)目部報(bào)批后處理。如廢油桶、廢塑料布、廢滅火器等向公司經(jīng)項(xiàng)目部處理并有記錄。

13、對不可回收利用的無毒無害廢棄物,項(xiàng)目部處理。

14、對不可回收利用的有毒有害廢棄物,應(yīng)根據(jù)國家法規(guī),采用密閉容器存放,防止二次污染。

15、生活廢棄物經(jīng)由項(xiàng)目部和清運(yùn)處置單位協(xié)商后進(jìn)行處理。

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