第一篇:無菌技術操作物品有效期說明
無菌技術操作物品有效期說明
1.無菌包:未開包的有效期為7天,如有效期從2012年5月18日至2012年5月24日(無菌包標簽上有注明);包內物品如一次未用完,剩下的物品24小時內有效。
2.一次性投遞包:未開包的有效期為7天,如有效期從2012年5月18日至2012年5月24日(一次性投遞包標簽上有注明)。
3.無菌持物鑷(或鉗):第一次使用時,從無菌包(未開的有效期為7天)內取出無菌持物鑷(或鉗)及罐。打開后,4小時內有效。
4.無菌貯槽:未開之間有效期為7天,如有效期從2012年5月18日至2012年5月24日(貯槽標簽上有注明);貯槽內物品如一次未用完,剩下的物品24小時內有效。
5.無菌棉球罐(或紗布罐):第一次使用時,從無菌包(未開的有效期為7天)內取出無菌棉球罐(或紗布罐),打開后,24小時內有效。
6.無菌溶液:有效期為某一特定時間,如有效期至2013年5月20日(瓶簽上有標明)。打開后,剩下的溶液不再作為無菌溶液使用,有效期24小時。7.一次性無菌手套:有效期為某一特定時間,如有效期至2013年5月20日(包裝袋上有標明)。
8.無菌棉簽:有效期為某一特定時間,如有效期至2013年5月20日(包裝袋上有標明)。打開后,4小時內有效。
9.安爾碘:有效期為某一特定時間,如有效期至2013年5月20日(瓶簽上有標明)。打開后,7天內有效。10.鋪好的無菌盤:有效期為4小時。
所有的無菌物品打開后要在合適的地方注明打開的日期和時間。(如幾月幾日、幾點)
第二篇:無菌技術操作教案
《護理學基礎》實驗教案
授課章節: 第三章 醫院內感染的預防與控制 重 點: 無菌技術操作 難 點: 無菌技術操作 教學方法: 實習示教 練習教學目的:
1、掌握無菌技術操作的原則
2、掌握無菌持物鉗、無菌容器、無菌包的使用方法
3、掌握取無菌溶液的方法及穿脫無菌手套的方法
4、掌握鋪無菌盤的操作步驟
5、掌握正確的洗手方法
6、了解鋪無菌盤的目的 學時分配:
1.評估 2min 2.計劃 3min 3.示教 10min 4.評估 3min 5.注意事項 2min 6.學生回示 4min 7.教師指導 6min 8.分組練習60min 教學內容:
實踐課 無菌技術
一、評 估
1、評估環境 無菌操作前評估環境是否清潔,干燥、寬敞,符合無菌技術要求。
2、評估用物 無菌巾包、無菌物品包、無菌容器及持物鉗、有蓋方盤、無菌手套、清潔治療盤、消毒液是否齊全及在有效期內。
3、操作者自身評估 護士著裝、手指指甲是否符合無菌技術的要求。
二、計 劃
1、預期目標:
(1)、操作符合無菌技術規范。
(2)、保證無菌物品、無菌溶液和無菌區域不被污染。
2、準備
三、實施(教師示教,操作程序見實驗指導)
四、評價
五、注意事項(口述)
六、學生回示
七、教師指導
八、學生分十六組練習,教師輔導 課后小結: 參考資料:
1、基礎護理學 主編 李小寒 人民衛生出版社
2、護理學基礎 主編 殷磊 人民衛生出版社
3、常用護理技術 主編 陽愛云 湖南科技出版社
4、與上書配套錄像
第三篇:無菌技術操作流程
無菌技術
用物準備:治療推車、治療盤2個、彎盤1個、無菌持物鉗、無菌治療包、無菌治療碗、無菌手套、無菌紗布缸、無菌溶液、棉簽、啟蓋器、碘伏。操作臺清潔、干燥、操作前禁止打掃衛生
操作步驟:“兩位老師好,我考試的項目是無菌技術,用物已經準備齊全,請問可以開始了嗎?”→洗手,戴口罩→攜用物至操作臺前→取治療盤放置于操作臺上→查看無菌持物鉗滅菌是否有效,包布有無破損、潮濕,是否在有效期內,取出鑷子罐置于治療臺上,在罐底端注明使用日期及時間→查看無菌治療巾包滅菌是否有效,包布有無破損、潮濕,是否在有效期內,解系帶放包布下,無菌包放置無障礙臺上依次打開,查看滅菌指示卡→用鑷子夾取無菌巾放于治療盤內→按原折痕包回無菌包包布,注明開包日期、時間并放置治療車上→無菌巾鋪巾【①單巾:雙手打開無菌巾雙層平鋪于治療盤內呈扇形折疊→開口邊向外;②雙巾:雙手持無菌巾近身一面兩角→由對側向近側平鋪于治療盤中,無菌面朝上→取另一塊無菌巾,用同樣的方法打開無菌巾,無菌面朝下,由近側向對側覆蓋于第一塊無菌巾上→雙手持上層無菌巾外面的兩角呈扇形折疊于對側,開口邊向外】→放無菌治療碗【查看無菌包滅菌是否有效,包布有無破損、潮濕,是否在有效期內→在手中打開無菌包布,查看滅菌指示卡→包布包裹手反放無菌治療碗至無菌盤中】→取無菌紗布【查看無菌容器有效期→打開無菌容器時,其蓋子朝上放在穩妥處或拿在手中→用鑷子夾取無菌紗布放于無菌治療碗內→用畢及時蓋好】→倒無菌溶液【檢查藥液瓶簽、是否在有效期內、瓶口有無松動、藥液質量是否符合要求→打開瓶蓋,沖洗瓶口→倒液體于治療碗內】→折無菌巾(寬邊向上雙折,窄邊向下單折)→注明鋪盤時間→消毒瓶口,注明開瓶日期時間→開啟無菌盤→戴無菌手套(先查對手套有效期及型號)→雙手取無菌治療碗→脫手套→整理用物,按院感要求分類處理→洗手(完成時間:4分鐘)
第四篇:無菌操作技術流程(推薦)
無菌技術操作流程
1、尊敬的各位評委老師大家好,我今天操作的項目是:無菌操作技術
2、整理著裝、手消毒液已開啟在有效期——七步洗手法——戴口罩
3、我準備的用物是:清潔治療盤——無菌持物鉗——鑷子筒——無菌治療巾——無菌治療包——無菌手套——無菌生理鹽水——無菌治療缸——碘伏——棉簽——彎盤2個——抹布2塊——物品已備齊,操作開始
4、評估環境:治療室環境寬敞、光線充足,治療車、治療臺清潔干燥符合無菌操作
5、拿盤、擦盤——快速洗手——無菌持物鉗及鑷子筒在有效期、包布無潮濕、無破損、3m膠帶變色均勻,滅菌合格——去3m膠帶貼桌上——打包——鑷子筒放好夾出化學指示卡(化學指示卡變色均勻,滅菌合格)——寫開啟時間于3m膠帶上——貼標簽于缸緣下2cm處(已開啟的持物筒有效期為4個小時)——無菌治療巾在有效期、包布無潮濕、無破損、3m膠帶變色均勻——打開治療巾——鑷子夾出化學指示卡(化學指示卡變色均勻,滅菌合格)——鑷子夾治療巾放入治療盤中——打開——鋪巾——檢查無菌治療包——打包(化學指示卡變色均勻,滅菌合格)—夾治療碗放于無菌治療巾上——無菌治療缸已開啟在有效期—夾取紗布——0.9%氯化鈉注射液250ml在有效期——清潔瓶身——快速洗手——檢查溶液——打開鋁蓋——消毒瓶蓋(棉簽、碘伏已開啟在有效期——消毒瓶蓋,打開瓶蓋——瓶簽在掌心,沖洗瓶口——向碗內倒入生理鹽水,蓋好瓶蓋,消毒瓶周2遍,記錄開啟時間(已開啟的生理鹽水有效期為24小時)——鋪好無菌盤——記錄鋪盤人及時間,已鋪好的無菌盤,有效期為4個小時——七步洗手法——選擇合適的無菌手套,檢查手套(無菌手套在有效期,包裝完好,擠壓無漏氣)——取出無菌手套——戴手套(按照規范方法戴手套)——手套戴好后雙手交叉(調整手套位置),雙手放于胸前——脫手套(按規范方法脫手套)——放入黃色垃圾袋中——醫療垃圾分類處理——七步洗手法——操作結束。
無菌技術是指在醫療護理操作過程中,保持無菌物品不被污染,防止一切微生物侵入或傳播給他人的一系列操作技術和管理方法,是預防醫院內感染的一項重要的基本措施。
無菌操作原則
1.環境清潔
進行無菌技術操作前30分鐘,停止清掃工作,減少走動,防止塵埃飛揚。2.工作人員要求
修剪指甲、戴好口罩、帽子。必要時穿無菌衣,戴無菌手套。
3.物品保管
無菌物品和非無菌物品應分別放置,并有明顯標志。無菌物品必須存放在無菌容器或無菌包內,不可暴露在空氣中,無菌包或無菌容器外要注明物品名稱、滅菌日期,物品按有效期先后順序擺放。
4.操作時要求
工作人員面向無菌區,用無菌持物鉗取無菌物品,手臂須保持在腰部水平或治療臺以上,注意不可跨越無菌區。操作時不可面向無菌區講話、咳嗽、打噴嚏。無菌物品懷疑被污染時,給予更換。
5.一人一物 一份無菌物品,僅供一位患者使用,防止交叉感染。
一 無菌持物鉗的使用
目的:
用于取放或傳遞無菌物品
注意事項:1無菌持鉗使用時,取出和放入時必須垂直提起和放入,不可觸碰到筒壁 和邊緣。夾取物品時也是垂直夾取。不可倒置和橫置。
2取遠處物品時,應當連同容器一起移至物品旁進行操作。
3無菌持物鉗不能夾取未滅菌的物品,也不能夾取油紗布(條、球)。
4無菌鉗使用時不能低于腰部。
5打開包后的干持物筒、持物鉗使用的有效期,≤4小時。
6不可直接從蓋孔中取、放無菌持物鉗。
7避免無菌持物鉗在空氣中暴露過久。
二無菌容器的使用
目 的:
無菌容器是用于盛放無菌物品并保持其無菌狀態的容器。
注意事項:1.夾取無菌容器內物品時,無菌持物鉗及無菌物品不可觸及容器的邊緣
2.移動無菌容器時,應托住底部,手不可觸及無菌容器邊緣 3.從無菌容器內取出的無菌物品,雖未使用,也不得在放回無菌容器內。4.無菌容器應定期滅菌,一般有限期為7天。
三.無菌包的使用
目 的:
用無菌包布包裹無菌物品,使無菌物品保持無菌狀態。
注意事項:1.一般無菌包布的有效期:夏季為7天,冬季為14天,如超過有效期則
不可使用。
2.開包時手不可觸及無菌區域,且包布的任何一角不能到操作臺面以下。3.如包布內有剩余物品,其有效期為24h。
四 無菌溶液取用法
目 的:
供無菌操作使用
注意事項:1.檢查溶液質量時要倒轉瓶體,對光檢查。
2.翻開瓶蓋時,手不可觸及瓶口。
3.倒無菌液時,瓶簽置于掌心,瓶口不可觸及無菌容器。4.已倒出的溶液雖未使用,也不可倒回瓶內。5.剩余的溶液如繼續使用,有效期為24h。
五.鋪無菌盤法
目 的:
通過鋪無菌治療巾,形成以無菌區域,放置無菌物品,供治療護理使用。
注意事項:1.操作時,非無菌物品及身體應與無菌盤保持適當的距離,身體部位不可跨域無菌區。
2.無菌盤應保持干燥,避免潮濕污染。
3.已鋪好的無菌盤應盡早使用,保留時間不得超過4h。
六.戴無菌手套法
目 的:
在某些醫療護理操作時為確保無菌效果操作者需戴無菌手套。
注意事項:1.未戴手套的手不可觸及無菌手套的外面,已戴手套的手不可觸及未戴手套的手及手套的內面。
2.戴手套后如發現手套有破損或不慎污染,應立即更換。
3.戴手套后,手臂不可下垂,應保持在腰以上,肩以下,兩側腋中線之間 的范圍內活動。
第五篇:無菌物品檢討書
篇一:使用違禁物品檢討書 使用違禁物品檢討書 尊敬的老師:
對于今天被學校組織沒收了違禁物品一事,我感到萬分的慚愧。學校一再強調遵守校紀校規,老師也時刻提醒我們,尤其是不要私用電器這方面。為此,我必須做出深刻的檢討。
今天下午,學校保衛處對宿舍樓進行了安全檢查,我們寢室的電水壺被沒收了。當老師拿走水壺時,我意識到了事情的嚴重性,除了擔心、害怕,更多的是深深的懊惱與后悔。作為學生,不觸犯校規,不違反紀律,做好自己的事是最基本的責任與義務。作為預備黨員,在學習、生活中起帶頭模范作用也是最基本的義務。作為星級宿舍成員,我們更要以身作則,嚴格遵守校紀校規。想想這些,更加覺得羞愧萬分,我犯了最基本的錯誤,更不要說起帶頭作用了。
我這次違反紀律的錯誤行為,首先是自己的思想、紀律意識太過薄弱。在做出錯誤行為之前完全沒有清楚認識到自己所作所為將產生的不良后果,以為這種隨波逐流的做法是一種無關緊要的行為,卻不知就是這種錯誤的想法給學校,更是給老師的管理工作帶來了巨大的麻煩與影響。
其次,我覺得我對自己的紀律要求不嚴格,各方面的約束能力還有所欠缺,安全觀念也很薄弱。學校制定的校紀校規,老師的三令五申無非都是從我們學生的角度出發,想為我們創造一個安全的學習、生活環境。一旦脫離學校、老師的監督管理,大肆使用違禁電器,后果將不堪設想。由于自身的種種不全面的錯誤意識,導致了這次事件的發生。我們的行為不僅給我們自己帶來了麻煩,在同學中也會造成不良影響,還會產生安全隱患,也破壞了老師的管理制度,更是傷害了老師對我們的期望與信任。
在此,我真的深刻意識到了自己犯了嚴重的錯誤,我知道我必須為自己犯的錯誤付出代價,承擔責任。我會以這次的錯誤行為作為警示,時時反省、批評和教育自己,自覺接受同學、老師的監督。
我也要通過這次事件,提高我的思想認識,強化責任措施。今后,我必須進一步深刻學習各種規范紀律,查找自己思想以及行為上的不足。更要對自己的言行舉止做嚴格要求,加強自己的規范紀律意識,遵守校紀校規,絕不違反。
通過這份檢討,我會讓自己牢記老師的教誨,讓自己時刻敲響警鐘。希望老師能認可我的悔過態度,對于這一切我將繼續深刻反省,希望老師能夠我們一個改過的機會,我們能保證今后絕不再犯。今后,我會嚴格遵守學校的各項規章制度,我們會相互督促,不會再讓老師以及學校的各位領導失望,不會再做出任何給年級抹黑的行為。請老師相信并監督。篇二:倉庫丟失物品的檢討書 倉庫丟失物品的檢討書 尊敬的老板:
對于倉庫丟失物品的事情,我感到非常遺憾,這很明顯就是我的過錯。我不應該這樣的馬虎懈怠工作,導致工作當中丟失掉這么多物品,給公司造成了巨大損失。
面對錯誤,我感到非常痛苦,我真的感覺非常對不起您。深刻地研究錯誤,我發現我自身存在這三方面問題:1,我太粗心了。2,我太不小心了。3,我沒有對工作有足夠重視。
現如今,我的錯誤已經發生,而且無法挽回,我覺得自己愧對公司,愧對于你,我真的是大錯特錯。現在,我只有進行徹底的悔改,才能贖清我的錯誤啊。
在此,我向您保證,從今往后我一定要嚴肅認真地對待這個倉庫管理工作。再也不在工作當中肆意粗心大意,一定要好好地做好這份倉管員的工作。此致!篇三:無菌檢測操作規程 無菌檢測作業指導書 1目的 規范公司產品的無菌檢測的工作流程和內容。2 適用范圍
生化實驗室內的無菌室。3職責
生化實驗室:無菌檢驗專員:負責公司產品的無菌檢測。4 定義
4.1 成 品:環氧乙烷(eog)滅菌后的產品。4.2 滅菌批:成品環氧乙烷(eog)滅菌的批次。5 工作流程圖
實驗前準備——實驗——實驗后整理 6 程序內容
6.1 檢測環境的要求
潔凈度10000級以下局部100級的超凈工作臺單向流空氣環境下,并且環境 潔凈度檢驗合格。
6.2培養基和稀釋液、沖洗液的制備 6.2.1培養基的制備:
依照《中國藥典》2010版第二部“無菌檢查法”中“培養基”一欄中的方 法準備,見附頁1。
6.2.2提取液,沖洗液的制備:
依照《中國藥典》2010版第二部“無菌檢查法”中“稀釋液、沖洗液及其 制備方法”一欄中的方法準備,見附頁1。6.3 無菌檢查方法的驗證
在第一次進行試驗或者檢驗因素發生變化時,應依照《中國藥典》2010版 第二部“無菌檢查法”中“方法驗證試驗”一欄中的方法進行,見附頁2。6.4 產品的檢驗
6.4.1 檢驗對象:環氧乙烷(eog)滅菌后的成品 6.4.2 檢驗頻次:按滅菌批次進行無菌檢驗。6.4.3 抽檢數量:
產品≤100件,10%或4件(取較大者)100件<產品≤500,10件
產品>500件,2%或20件(取較小者)6.4.4 檢驗方法:
具體方法依照《中國藥典》2010版第二部“無菌檢查法”中“供試品的無
菌檢查”一欄中的方法進行,采用薄膜過濾法,做陰性、陽性對照試驗,培養14天,祥見附頁2。
6.5結果判定:
依照《中國藥典》2010版第二部“無菌檢查法”中“結果判斷”一欄中的 方法進行,見附頁2。
一、培養基的制備
1.硫乙醇酸鹽流體培養基(用于培養好氧菌、厭氣菌)酪胨(胰酶水解)15g 氯化鈉 2.5g 葡萄糖 5g 新配制的0.1%刃天青溶液 1.0ml l-胱氨酸 0.5g(或新配制的0.2%亞甲藍溶液0.5ml)硫乙醇酸鈉0.5g(或硫乙醇酸0.3ml)瓊脂0.75g 水 1000ml 酵母浸出粉5g 除葡萄糖和刃天青溶液外,取上述成分混合,微溫溶解后,調節ph為弱堿性,煮沸,濾清,加入葡萄糖和刃天青溶液,搖勻,調節ph值使滅菌后為7.1±0.2,分裝至適宜的器 中,其裝量與容器高度的比例應符合培養結束后培養基氧化層(粉紅色)不超過培養基深度 的1/2。滅菌。在供試品接種前, 培養基氧化層的高度不得超過培養基深度的1/5,否則,須
經100℃水浴加熱至粉紅色消失(不超過20分鐘)迅速冷卻, 只限加熱一次,并應防止被污 染。硫乙醇酸鹽流體培養基置30~35℃培養。2.改良馬丁培養基(用于培養真菌)胨 5g 磷酸氫二鉀 1g 酵母浸出粉 2g 硫酸鎂0.5g 葡萄糖20g 水 1000ml 除葡萄糖外,取上述成分混合,微溫溶解,調節ph值約為6.8,煮沸,加入葡萄糖溶解 后,搖勻,濾清,調節ph值使滅菌后為6.4±0.2,分裝,滅菌。改良馬丁培養基置23~28℃培養。
二、提取液、沖洗液的制備
1.ph7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液取磷酸二氫鉀3.56g、磷酸氫二鈉7.23 g、氯化鈉 4.30g、蛋白胨1.0g,加水1000ml,微溫溶解,濾清,分裝,滅菌。2.0.9%氯化鈉溶液 取氯化鈉9g,加水1000ml,溶解,分裝,滅菌。
一、培養基的適用性檢查
1.無菌性檢查 取滅菌后的兩種培養基各5支,按規定溫度培養14天,均應無菌生長 2.靈敏度檢查 2.1.所需菌種
金黃色葡萄球菌[cmcc(b)26 003] 枯草芽孢桿菌[cmcc(b)63 501]生孢梭菌[cmcc(b)64 941] 白色念珠菌[cmcc(f)98001]黑曲霉[cmcc(f)98 003] 2.2菌液制備
2.2.1 將金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌的新鮮培養物分別接種至營養肉湯培養基中,35 ℃培養24小時,分別用0.9%無菌氯化鈉溶液稀釋成每毫升含50-100cfu的菌液。2.2.2 接種生孢梭菌的新鮮培養物至硫乙醇酸鹽流體培養基中,35℃培養24h,用0.9% 無菌氯化鈉溶液稀釋成每毫升含50-100cfu的菌液。
2.2.3 將白色念珠菌的新鮮培養物接種至改良馬丁培養基上,24℃培養48小時,用0.9% 無菌氯化鈉溶液稀釋成每毫升含50-100cfu的菌液。
2.2.4 將黑曲霉菌的孢子接種至改良馬丁瓊脂斜面培養基上,24℃培養5天,加入5毫 升0.9%無菌氯化鈉溶液,將孢子洗脫。然后用一支管口包有無菌棉花且能過濾菌絲的10毫 升吸管吸出孢子懸液至無菌試管內,用0.9%無菌氯化鈉溶液制成每毫升含孢子數50-100cfu 的孢子懸液。2.3 培養基接種
取每管裝量為12ml的硫乙醇酸鹽流體培養基9支,分別接種確定好稀釋級的金黃 色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌、生孢梭菌各2支,另1支不接種作為空白對照,培養3天;取每管裝量為9ml的改良馬丁培養基5支,分別接種確定好稀釋級的白色念珠 菌、黑曲霉各2支,另1支不接種作為空白對照,培養5天,逐日觀察結果。2.4 結果判斷
空白對照管應無菌生長,若加菌的培養基管均生長良好,判該培養基的靈敏度檢 查符合規定。
二、方法認證 1.所需菌種
大腸埃希菌[cmcc(b)44 102] 金黃色葡萄球菌[cmcc(b)26 003] 枯草芽孢桿菌[cmcc(b)63 501]生孢梭菌[cmcc(b)64 941] 白色念珠菌[cmcc(f)98001]黑曲霉[cmcc(f)98 003] 2.菌液制備
2.1 將大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌的新鮮培養物分別接種至營養肉湯 培養基中,35 ℃培養24小時,分別用0.9%無菌氯化鈉溶液稀釋成每毫升含50-100cfu的菌 液。
2.2 接種生孢梭菌的新鮮培養物至硫乙醇酸鹽流體培養基中,35℃培養24h,用0.9%無 菌氯化鈉溶液稀釋成每毫升含50-100cfu的菌液。
2.3 將白色念珠菌的新鮮培養物接種至改良馬丁培養基上,24℃培養48小時,用0.9% 無菌氯化鈉溶液稀釋成每毫升含50-100cfu的菌液。
2.4 將黑曲霉菌的孢子接種至改良馬丁瓊脂斜面培養基上,24℃培養5天,加入5毫升 0.9%無菌氯化鈉溶液,將孢子洗脫。然后用一支管口包有無菌棉花且能過濾菌絲的10毫升 吸管吸出孢子懸液至無菌試管內,用0.9%無菌氯化鈉溶液制成每毫升含孢子數50-100cfu的孢子懸液。3.薄膜過濾法:
對于二回路和注射器,用10ml注射器按10cm2:1ml吸取提取液,以10ml/min速度沖洗產品內壁;對于導管、導鞘,按作用部位剪成幾段(每段大約3cm),放入提取液中(按10cm2:1ml),提取30min,收集沖洗液(提取液)于無菌三角瓶中,將收集液倒于濾膜上,過濾,再用提取液沖洗濾膜,反復三次,在最后一次沖洗液中加入確定好稀釋級的試驗菌,過濾,取出濾膜接種至相應的培養基中,另取一裝有同體積培養基的平皿,加入等量的試驗菌,作為對照。按規定溫度培養3—5天。各試驗菌同法操作。4.直接接種法:(適用于麻醉針)
取裝有20ml硫乙醇酸鹽流體培養基的試管8個,分別接入確定好稀釋級的金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌、生孢梭菌各2個;取裝有15ml改良馬丁培養基的試管4個,分別接入確定好稀釋級的白色念株菌、黑曲霉各2個。其中1個接入供試品,另1個作為對照品,按規定的溫度培養3~5天。5.結果判斷
與對照管比較,如含供試品各容器中的試驗菌均生長良好,則供試品的該檢驗條件下無抑菌作用或其抑菌作用可以忽略不計,照此檢查法和檢查條件進行供試品的無菌檢查。如含供試品的任一容器中微生物生長微弱、緩慢或不生長,則供試品的該檢驗量在該檢驗條件下有抑菌作用,可采用增加沖洗量,或增加培養基的用量,更換濾膜品種等方法,消除供試品的抑菌作用,并重新進行方法驗證。
三、產品檢查
1.取規定量產品,對于二回路和注射器,用10ml注射器按10cm2:1ml吸取提取液,以10ml/min速度沖洗產品內壁;對于導管、導鞘,按作用部位剪成幾段(每段大約3cm),放入提取液中(按10cm2:1ml),提取30min,收集提取液于無菌三角瓶中,將沖洗液(提取液)分成三份,分別將其倒于三張濾膜上,過濾,再用沖洗液(提取液)沖洗濾膜,反復三次,取出濾膜,分別置于含20ml硫乙醇酸鹽流體培養基及改良馬丁培養基的試管中,其中一份做陽性對照用。對于麻醉針,按作用部位剪成幾段(每段大約3cm),并分成3份,分別置于含20ml硫乙醇酸鹽流體培養基及改良馬丁培養基的試管中,其中一份做陽性對照用。
3.陰性對照:方法同上,只是直接將沖洗液或提取液倒于濾膜上或直接加入培養基中。其上不得有菌生長。4.培養及觀察
上述含培養基的容器按規定的溫度培養14天。培養期間應逐日觀察并記錄是否有菌生長。如在加入供試品后、或在培養過程中,培養基出現渾濁,培養14天后,不能從外觀上判斷有無微生物生長,可取該培養基液適量轉種至同種新鮮培養基中或劃線接種于斜面培養基上,細菌培養2天、真菌培養3天,觀察接種的同種新鮮培養基是否再出現渾濁或斜面是否有菌生長;或取培養液涂片,染色,鏡檢,判斷是否有菌。
5、結果判斷
若供試品均澄清,或雖顯渾濁但經確證無菌生長,判供試品符合規定;若供試品管中任何一管顯渾濁并確證有菌生長,判供試品不符合規定,除非能充分證明試驗結果無效。當符合下列至少一個條件時,方可判試驗結果無效:
(1)無菌檢查試驗所用的設備及環境的微生物監控結果不符合無菌檢查法的要求;