第一篇：腫瘤標(biāo)志物檢測的質(zhì)量保證

腫瘤標(biāo)志物檢測的質(zhì)量保證

一、腫瘤標(biāo)志物的定義

腫瘤標(biāo)志物（tumor marker，TM）是指在腫瘤的發(fā)生和增殖過程中，由腫瘤細(xì)胞本身所產(chǎn)生的或者是由機(jī)體對腫瘤細(xì)胞反應(yīng)而產(chǎn)生的，反映腫瘤存在和生長的一類物質(zhì)，包括蛋白質(zhì)、激素、酶（同工酶）、多胺及癌基因產(chǎn)物等。腫瘤患者血液或體液中腫瘤標(biāo)志物的檢測，對腫瘤的輔助診斷、鑒別診斷、療效觀察、病情監(jiān)測以及預(yù)后的評價(jià)具有一定的價(jià)值。

腫瘤標(biāo)志物存在于細(xì)胞漿和細(xì)胞核中，與細(xì)胞表面膜相連，在血液中進(jìn)行循環(huán)。腫瘤標(biāo)志物可以在血清、血漿、其他體液、組織提取物或石蠟固定的組織中檢測到。大多數(shù)腫瘤標(biāo)志物可以用免疫學(xué)的技術(shù)進(jìn)行檢測。

二、影響腫瘤標(biāo)志物檢測的因素 1.樣本采集對檢測的影響

如前列腺按摩、前列腺穿刺、射精、導(dǎo)尿和直腸鏡檢查后，血液PSA和PAP值可升高；肝、腎功能異常和膽道排泄不暢、膽汁淤滯等均可造成腫瘤標(biāo)志物如 CEA、ALP、GGT、細(xì)胞因子等濃度增高；某些藥物影響腫瘤標(biāo)志物的濃度，如抗雄激素治療前列腺癌時(shí)可抑制PSA產(chǎn)生，導(dǎo)致 PSA 假陰性結(jié)果；唾液和汗液污染標(biāo)本可使SCC升高。由于紅細(xì)胞和血小板中也存在神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE），因此，樣本溶血或放置時(shí)間過長（且未分離血清保存）可使血液中NSE濃度增高。采血管內(nèi)的促凝劑或抗凝劑，對某些項(xiàng)目的測定有干擾。2.樣本保存對檢測的影響

血液標(biāo)本采集后應(yīng)及時(shí)離心,分離血清或血漿盡快測定,或保存于4℃冰箱中；若在2～3個(gè)月內(nèi)測定,則應(yīng)低溫冰凍保存,防止反復(fù)凍融。酶類和激素類TM不穩(wěn)定,如fPSA和HCG,半壽期短,易降解,應(yīng)及時(shí)測定。3.腫瘤病人自身狀況的影響

腫瘤患者自身的狀況影響腫瘤標(biāo)志物的檢出及血液中腫瘤標(biāo)志物的濃度，包括：①腫瘤的大小和腫瘤細(xì)胞的數(shù)目：腫瘤越大、腫瘤細(xì)胞的數(shù)目越多，血液中TM越高。②腫瘤細(xì)胞自身的分化程度：腫瘤細(xì)胞的分化程度越差，惡性程度越高，血液中TM越高。③腫瘤的分期不同：腫瘤越晚期，血液中TM越高。④腫瘤細(xì)胞表達(dá)和合成腫瘤標(biāo)志物的程度：腫瘤細(xì)胞表達(dá)和合成的TM程度越高，血液中TM越高，反之，血液中TM較低。⑤腫瘤細(xì)胞的壞死和壞死程度：腫瘤細(xì)胞壞死后，釋放出TM，使血液中TM升高，壞死程度越大，血液中TM升高越明顯。⑥TM在體內(nèi)的降解和排泄：若肝臟、腎臟功能差，排泄速度慢，則TM在體內(nèi)明顯升高。⑦假陽性和假陰性；有些疾病如炎性疾病，結(jié)締組織病和生理變化如妊娠時(shí)，有些標(biāo)志物的表達(dá)也升高，可導(dǎo)致假陽性；而有些腫瘤標(biāo)志物較少或腫瘤細(xì)胞被封閉，抗原抗體形成免疫復(fù)合物，血循環(huán)差等都可導(dǎo)致腫瘤標(biāo)志物不能被檢出，導(dǎo)致假陰性。⑧生物學(xué)因素的影響: 隨年齡的增長PSA升高;老年人CA199、CA153、CEA等可升高。部分婦女在月經(jīng)期CA125和CA199可增高，妊娠期血液中AFP和CA125含量明顯升高；長期吸煙會(huì)使血液中CEA含量偏高。⑨非法表達(dá)與假基因轉(zhuǎn)錄：非法表達(dá)指有些基因在腫瘤組織中表達(dá)，在正常組織中不應(yīng)該表達(dá)而有少量表達(dá)；假基因轉(zhuǎn)錄，指假基因轉(zhuǎn)錄為mRNA，一般情況下不翻譯為蛋白質(zhì)。在定性的檢測mRNA和蛋白質(zhì)時(shí)，這兩種情況都可以影響檢測的準(zhǔn)確性和特異性，導(dǎo)致假陽性。⑩患者血液中有噬異性抗體存在，可導(dǎo)致TM假陽性結(jié)果，要將此抗體消除后再檢測。

因此，腫瘤患者的腫瘤標(biāo)志物基礎(chǔ)測定值對于觀察療效、預(yù)測復(fù)發(fā)有非常重要價(jià)值。對腫瘤標(biāo)志物檢測正常的腫瘤患者，還可以做如下解釋：療效顯著、未復(fù)發(fā)未轉(zhuǎn)移；未選擇到恰當(dāng)?shù)哪[瘤標(biāo)志物，提供錯(cuò)誤信息；是一種目前還未發(fā)現(xiàn)的腫瘤細(xì)胞亞型。

三、腫瘤標(biāo)志物檢測的質(zhì)量保證

（一）腫瘤標(biāo)志物檢測前的要求

對病人的信息進(jìn)行充分了解，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

檢測前樣本的保存：血液標(biāo)本采集后應(yīng)及時(shí)離心，保存于4℃冰箱中，24小時(shí)內(nèi)測定；如在短期內(nèi)測定，則應(yīng)-20℃保存，長期保存應(yīng)置于-70℃ 冰箱, 標(biāo)本應(yīng)防止反復(fù)凍融。酶類和激素類腫瘤標(biāo)志物不穩(wěn)定，易降解，應(yīng)及時(shí)測定或低溫保存。

（二）腫瘤標(biāo)志物分析檢測的要求 滿意的測試結(jié)果來自于符合要求的標(biāo)本以及經(jīng)過室內(nèi)質(zhì)控（IQC）和實(shí)驗(yàn)室間質(zhì)量評價(jià)（EQA）監(jiān)測評價(jià)的有效的實(shí)驗(yàn)方法。室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評的監(jiān)測評價(jià)包括實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性、采用的標(biāo)準(zhǔn)、所用基質(zhì)的影響、動(dòng)力學(xué)范圍、參考品、穩(wěn)定性、分析結(jié)果的理論數(shù)據(jù)、實(shí)驗(yàn)方法。

腫瘤標(biāo)志物測定方法很多，有放射免疫測定法，酶聯(lián)免疫測定法，化學(xué)發(fā)光免疫測定法等，每種測定方法有自己的精密度和重復(fù)性，但手工操作的方法重復(fù)性較差，誤差比較大，操作時(shí)要特別認(rèn)真；用自動(dòng)化儀器進(jìn)行測定，重復(fù)性好，誤差小，實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析內(nèi)和分析間變異系數(shù)可以達(dá)到<5%和<10%，具有手工分析難以比擬的優(yōu)勢。各實(shí)驗(yàn)室還應(yīng)注意影響實(shí)驗(yàn)特異性的因素。

不同的試劑盒測定也有差異,其原因是由于使用的單克隆抗體針對抗原的位點(diǎn)不同所致。有時(shí)即使使用同一抗體，也可能因抗原異質(zhì)性（如原發(fā)腫瘤轉(zhuǎn)移后，失去了原有的抗原性而停止分泌原有的腫瘤抗原）或基質(zhì)的影響而得到不同的結(jié)果。有研究報(bào)道，使用12種不同的CEA試劑盒檢測某一混合血清中CEA的濃度，結(jié)果其差異超過100%。導(dǎo)致分析間誤差的主要原因是沒有測定的標(biāo)準(zhǔn)化，包括缺乏統(tǒng)一的抗原、抗原成分、校正品和參考方法等。因此，在工作中要盡量使用同一種方法，同一種儀器和同一廠家的試劑盒進(jìn)行測定。1.室內(nèi)質(zhì)量控制（IQC）的要求

腫瘤標(biāo)志物很少有參考方法，要堅(jiān)持作室內(nèi)質(zhì)控圖，以均值為靶值，來判斷試驗(yàn)的穩(wěn)定性和重復(fù)性。

①重復(fù)性：理想的分析批內(nèi)誤差應(yīng)<5%；批間誤差<10%。②建立測定認(rèn)可的標(biāo)準(zhǔn)：選擇合適的IQC標(biāo)準(zhǔn)。

③樣品與病人血清盡可能相似：僅僅采用試劑盒所附的質(zhì)控品是不夠的，還應(yīng)包括獨(dú)立來源的可靠的血清基質(zhì)質(zhì)控品。

④IQC樣品的濃度適合臨床應(yīng)用：應(yīng)包括腫瘤標(biāo)志物的陰性和低值陽性質(zhì)控品，需要較寬的濃度范圍；評價(jià)高濃度樣本稀釋后的測定準(zhǔn)確度。

⑤評價(jià)實(shí)驗(yàn)的干擾因素：要求對實(shí)驗(yàn)的干擾因素（嗜異性和其他抗體、血凝試管中的凝血試劑等）進(jìn)行檢查。2.實(shí)驗(yàn)室間質(zhì)量評價(jià)（EQA）的要求 ①適宜濃度的EQA樣本：EQA樣本應(yīng)具有適宜的工作濃度范圍，但有時(shí)會(huì)需要較高濃度的EQA樣本來評價(jià)實(shí)驗(yàn)的稀釋步驟。對于某些分析（如：AFP、hCG）用無分析物血清檢查基線的可靠性是很重要的。

②實(shí)驗(yàn)“穩(wěn)定性”的評價(jià)：在一定時(shí)間內(nèi)（6-12個(gè)月）重復(fù)進(jìn)行相同樣本的測試，對實(shí)驗(yàn)室內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性進(jìn)行評價(jià)。

③驗(yàn)證靶值的精確度和穩(wěn)定性：指無現(xiàn)成參考方法時(shí)，需要對所使用的方法進(jìn)行以下驗(yàn)證：穩(wěn)定性：對同一樣本進(jìn)行重復(fù)測定；用已知濃度的相關(guān)國際標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行回收率實(shí)驗(yàn)；對不同實(shí)驗(yàn)室間的檢測結(jié)果（參考值范圍、結(jié)果累計(jì)報(bào)告等）進(jìn)行比較。

3.腫瘤標(biāo)志物測定的標(biāo)準(zhǔn)化問題

要保證TM檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和各實(shí)驗(yàn)室之間的可比性,首先診斷產(chǎn)品要達(dá)到國際標(biāo)準(zhǔn)(IS),有統(tǒng)一的參考方法和國際參考品(IRR)。但目前尚無公認(rèn)的參考方法,能得到的國際標(biāo)準(zhǔn)品僅有AFP、CEA、HCG和PSA四種,而CA系列的TM至今還沒有國際標(biāo)準(zhǔn),這為TM測定的準(zhǔn)確性和質(zhì)量控制帶來了困難。

涉及到免疫測定標(biāo)準(zhǔn)化的組織有世界衛(wèi)生組織（WHO）生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化專家委員會(huì)（The Expert Committee on Biological Standardization，ECBS），負(fù)責(zé)建立生物物質(zhì)的國際標(biāo)準(zhǔn)及參比材料。WHO通過國家生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn)和質(zhì)控物研究所（National Institute for Biological Standards and Control，NIBSCC）提供大多數(shù)多肽激素和一些腫瘤標(biāo)志物的國際標(biāo)準(zhǔn)品。一些地區(qū)性組織也制備標(biāo)準(zhǔn)品，如美國的疾病控制中心（Centers of Disease Control，CDC）、美國病理學(xué)家協(xié)會(huì)的國家委員會(huì)（National Committee of the College of American Pathologists）、國家衛(wèi)生研究所（National Institute of Health，NIH）等提供用于研究目的的多肽激素標(biāo)準(zhǔn)品。國際癌癥生物學(xué)和醫(yī)學(xué)學(xué)會(huì)（International Society of Onco-developmental Biology and Medicine）已啟動(dòng)一個(gè)腫瘤標(biāo)志物抗原決定簇繪圖計(jì)劃。

4.抗原、抗體和基質(zhì)效應(yīng)對腫瘤標(biāo)志物測定的影響

抗原抗體反應(yīng)是指抗原與相應(yīng)抗體間所發(fā)生的特異性結(jié)合反應(yīng),受抗原抗體的性質(zhì)、活性、效價(jià)、反應(yīng)比例及環(huán)境(如電解質(zhì),pH 值,溫度)等因素影響。在TM測定中應(yīng)注意:①確認(rèn)樣品中被檢抗原和校準(zhǔn)品中抗原的一致性。②制備抗體時(shí)使用的抗原和樣品中抗原的一致性。③抗原過剩的識(shí)別。④試劑使用的是多克隆抗體，則抗體的純度很重要；試劑使用的是混合單克隆抗體則每批抗血清內(nèi)各單克隆抗體的組成及相對比例很重要，并要保持恒定。另外，很多腫瘤標(biāo)志物是糖蛋白或粘蛋白，糖基化的不均一性可能導(dǎo)致其免疫反應(yīng)性某些變化，從而引起測定結(jié)果的差異。⑤校準(zhǔn)品穩(wěn)定、無混濁。⑥抗原抗體反應(yīng)時(shí)所處的基體（基質(zhì)）狀況應(yīng)保持恒定和一致。

免疫反應(yīng)的基質(zhì)效應(yīng)是指干擾抗原、抗體反應(yīng)而與分析物本身無關(guān)的所有非特異性因素(即基質(zhì))對分析物反應(yīng)的影響。基質(zhì)效應(yīng)通常由蛋白質(zhì)、電解質(zhì)、補(bǔ)體、類風(fēng)濕因子、抗人球蛋白抗體、藥物、添加劑和各種污染物引起。標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的基質(zhì)與待測血清標(biāo)本不一樣,標(biāo)準(zhǔn)品的基質(zhì)通常是含蛋白的緩沖溶液；標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品都是經(jīng)過加工處理的,如冰凍、冷凍干燥、加穩(wěn)定劑或添加某些分析物等,而臨檢所用的測定方法、儀器、試劑等都是以人新鮮血清標(biāo)本為模板的,對血清標(biāo)本測定有可靠性,而對加工處理過的物質(zhì)不一定可靠。對于基質(zhì)效應(yīng)，需要注意以下幾點(diǎn)：①同一基質(zhì)狀態(tài)的基質(zhì)效應(yīng)隨方法及檢測條件而異。②基質(zhì)效應(yīng)是絕對的，只要處理過的樣品和測定樣品的基質(zhì)狀態(tài)不一，一定有基質(zhì)效應(yīng)；基質(zhì)效應(yīng)又是相對的，只要認(rèn)可某一方法的基質(zhì)效應(yīng)可忽略不計(jì)，或者由基質(zhì)效應(yīng)對某方法引入的誤差在可接受水平，那么衡量另一方法是否具有基質(zhì)效應(yīng)時(shí)，應(yīng)作方法學(xué)比較。若處理過的樣品和測定樣品的結(jié)果分布不同，說明基質(zhì)效應(yīng)明顯。反之屬可接受。也即認(rèn)為“無” 基質(zhì)效應(yīng)。③嚴(yán)格講，不同批號試劑，它們產(chǎn)生的基質(zhì)效應(yīng)也不一致。度量有無基質(zhì)效應(yīng)，或者了解不同方法間的可比性，最佳樣品是人新鮮樣本。④一定要懂得單一標(biāo)準(zhǔn)液，校準(zhǔn)品，質(zhì)控品和新鮮樣品間的區(qū)別，并正確使用。不應(yīng)用質(zhì)控品作為校準(zhǔn)品去校準(zhǔn)儀器，不僅是基質(zhì)差異，而且是校準(zhǔn)品和質(zhì)控品定值的水平不一。室內(nèi)質(zhì)控用的質(zhì)控品僅用于各檢驗(yàn)科日常工作中重復(fù)性和精密度的控制。由于各檢驗(yàn)科的檢驗(yàn)方法和廠商定值的方法不一致，不可將定值血清的靶值來定值。⑤衡量某一方法或試劑是否準(zhǔn)確可靠，唯一可信的方法是使用人新鮮樣本進(jìn)行比較，僅以控制品測定值相似或等于定值，不足以說明方法的準(zhǔn)確度。⑥校準(zhǔn)品是公司指定用來校準(zhǔn)某測定系統(tǒng)（儀器＋試劑＋方法程序）的，是考慮到它具有基質(zhì)效應(yīng)的情況下，人為賦予校準(zhǔn)品的校準(zhǔn)值。因此校準(zhǔn)品必須專用于某一測定系統(tǒng)。應(yīng)鼓勵(lì)檢驗(yàn)科使用儀器廠商指定的試劑和校準(zhǔn)品。⑦同一個(gè)校準(zhǔn)品用于不同儀器時(shí)，應(yīng)該有不同的校準(zhǔn)值。不輕易使用某一校準(zhǔn)品的校準(zhǔn)值對于各種儀器作校準(zhǔn)。5.引起腫瘤標(biāo)志檢測錯(cuò)誤結(jié)果的潛在因素

①高濃度hook效應(yīng)：通常情況下，腫瘤標(biāo)志物的濃度范圍會(huì)有好幾個(gè)數(shù)量級的差別，因此有可能需要確認(rèn)高濃度的樣本產(chǎn)生的hook效應(yīng)，以避免低值結(jié)果的錯(cuò)誤報(bào)告。這對于首次進(jìn)行腫瘤標(biāo)志物檢測的病人猶為重要。（可以通過使用高結(jié)合力的固相抗體、分析兩個(gè)稀釋度的樣本、或通過后續(xù)的分析步驟包括清洗步驟來減少hook效應(yīng)。）

②樣本間的攜帶：檢測高濃度的樣本會(huì)產(chǎn)生樣本間攜帶的潛在問題，因此有必要對此進(jìn)行隨時(shí)檢查。

③嗜異性或人抗鼠抗體（HAMA）的干擾：IgG抗體可以和測定中使用的抗體進(jìn)行反應(yīng)。通常情況下，由于進(jìn)行影像檢查和治療而使病人接觸鼠單克隆抗體，由此而產(chǎn)生的人抗鼠抗體會(huì)使腫瘤標(biāo)志物的檢測出現(xiàn)錯(cuò)誤結(jié)果。（可以通過使用阻斷劑對樣本進(jìn)行前處理、在反應(yīng)基質(zhì)中加入非免疫的鼠血清或?qū)颖具M(jìn)行稀釋后再進(jìn)行分析的方法來減少HAMA的干擾。）

（三）腫瘤標(biāo)志物分析檢測后的要求

①通過詢問醫(yī)生獲取病人的臨床信息：有必要鼓勵(lì)臨床醫(yī)生提供帶有說明的簡短的臨床信息（如手術(shù)后、化療后等），這有助于確認(rèn)偶然誤差（如可能出現(xiàn)的儀器上加錯(cuò)標(biāo)本等）。另外，當(dāng)改變TM 檢測方法和試劑時(shí),必須通知臨床,避免對結(jié)果的誤判。實(shí)驗(yàn)室還應(yīng)印發(fā)宣傳資料介紹TM標(biāo)本采集的注意事項(xiàng),并提出TM 檢測的合適頻率供臨床參考。這些措施對提高檢測質(zhì)量,用好TM非常有用。②參考值范圍的有效性：通常來自相應(yīng)的健康人群的參考值范圍與初始治療前的腫瘤病人有很好的相關(guān)性。因此，病人自己的“基線”值對于腫瘤標(biāo)志物的測定結(jié)果具有非常重要的參考意義。只有基于有效的參考范圍，增高甚至在參考范圍增高才有臨床顯著床意義，但須進(jìn)行進(jìn)一步的工作。

③了解顯著變化或臨床相關(guān)變化的組成因素：應(yīng)包括生物學(xué)變異和分析數(shù)據(jù)的變異。一般病人的結(jié)果在排除檢測方法引起的誤差后，上升或下降25％都有臨床價(jià)值。對于測定結(jié)果升高的標(biāo)本必須復(fù)查，以防測定誤差。

④改變方法時(shí)應(yīng)進(jìn)行方案確認(rèn)：有助于確認(rèn)由于改變方法而引起的腫瘤標(biāo)志物檢測結(jié)果的差異。（可能需要對以前檢測過的樣本再用新的方法進(jìn)行檢測來確認(rèn)結(jié)果的差異。）

⑤必須知道腫瘤標(biāo)志物的半壽期：TM的半壽期是指腫瘤組織被完全切除后血液循環(huán)中TM濃度下降到50%的時(shí)間。這有助于選擇TM的監(jiān)測時(shí)間和解釋TM濃度變化與臨床療效和腫瘤復(fù)發(fā)的關(guān)系。若復(fù)查間隔時(shí)間太短,將誤認(rèn)為腫瘤未被完全切除；間隔時(shí)間太長,將無法區(qū)分是腫瘤復(fù)發(fā)還是療效欠佳。一般應(yīng)在治療結(jié)束后5個(gè)半壽期采血為好,這時(shí)原有的TM約97%已被清除。主要TM的生物半壽期: CA199為4～8天；CA153為5～7天；CA125為5天；CA724為3～7天；細(xì)胞角質(zhì)蛋白19片段(CYFRA21)為1天；AFP2～8天；CEA2～8天；PSA2～3天；fPSA12～18小時(shí)；HCG12～36小時(shí)；NSE 1天；SCC1天。

⑥腫瘤標(biāo)志物臨床應(yīng)用的比較：首先需要得到有關(guān)腫瘤標(biāo)志物臨床應(yīng)用的信息，再由有關(guān)的專業(yè)組織進(jìn)行考察比較。

六、常用腫瘤標(biāo)志物檢測中的注意事項(xiàng)

CA15-3

分析測試前準(zhǔn)備和樣本貯存：進(jìn)行CA15-3的檢測可以采用新鮮分離的血清樣本。CA15-3在4℃下可以穩(wěn)定24小時(shí)。建議將血清貯存于-20℃（短期）或-70℃（長期），以備復(fù)試時(shí)使用。若需長期貯存，則不能使用變性膠（CA15-3在變性膠的存在下表現(xiàn)出明顯的不穩(wěn)定）。

分析中的注意事項(xiàng)：每個(gè)實(shí)驗(yàn)室都應(yīng)對CA15-3的分析方法、分析精密度和參考值范圍進(jìn)行驗(yàn)證，以確定臨床診斷的界限值。分析后結(jié)果報(bào)告的注意事項(xiàng)：應(yīng)進(jìn)行進(jìn)一步的研究來確認(rèn)性別、種族、年齡和絕經(jīng)情況對正常人和乳腺癌病人CA-153表達(dá)的影響，制訂出腫瘤標(biāo)志物的參考值范圍。CA125 分析前注意事項(xiàng)：含糖的血清腫瘤標(biāo)志物一般在常規(guī)實(shí)驗(yàn)室室溫條件下有一定程度的穩(wěn)定性。然而樣本的快速處理對于減少分解是十分必要的。新鮮分離的血清應(yīng)該立即進(jìn)行CA125的測定。血清樣本應(yīng)于4℃下存放或凍存于-20℃（短期）或-70℃（長期），以備復(fù)試時(shí)使用。

分析中的注意事項(xiàng)：NACB認(rèn)為，CA125的測定結(jié)果用于病情監(jiān)測，CV值應(yīng)<15%。在此CV值下，95%可信限的范圍是21～39U/ml，平均30U/ml。EGTM建議，腫瘤標(biāo)志物自動(dòng)化測定的批內(nèi)變異應(yīng)<10%，并應(yīng)考慮生物變異和分析的不精確度。分析后結(jié)果報(bào)告的注意事項(xiàng)：由于各廠家的檢測試劑盒檢測結(jié)果略有不同，因此應(yīng)在報(bào)告中附加試劑盒標(biāo)明的正常值范圍。SCCA 分析前注意事項(xiàng)：由于唾液、汗液和呼吸分泌物中存在大量SCCA，因此血樣應(yīng)避免暴露于皮膚和唾液。

分析中的注意事項(xiàng)：SCCA測定的平均日間變異為24%，因此在監(jiān)測疾病復(fù)發(fā)時(shí)，應(yīng)分別考慮其Cut-off值。

分析后結(jié)果報(bào)告注意事項(xiàng)：應(yīng)同時(shí)報(bào)告試劑盒生產(chǎn)廠家標(biāo)明的正常值范圍。PSA 分析前注意事項(xiàng)：NACB對用于PSA測定的標(biāo)本的采集和處理作出如下建議：因?yàn)橛性S多因素都會(huì)影響PSA的含量，所以應(yīng)確保在任何有關(guān)前列腺的活動(dòng)之前進(jìn)行血樣的抽取，也就是說，在射精后至少24小時(shí)（如果在24小時(shí)以內(nèi)，應(yīng)注意最后一次射精的時(shí)間）、前列腺炎癥消退、前列腺活檢、經(jīng)尿道的前列腺切除后數(shù)周再進(jìn)行游離PSA的檢測。由靜脈抽取的血樣應(yīng)在3小時(shí)內(nèi)離心分離出血清。血清樣本在冰箱中可保存24小時(shí)以上，但應(yīng)于24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行測定，否則就應(yīng)將樣本凍存于-20℃以下（最好在-30℃以下避免結(jié)晶），長期保存溫度應(yīng)在-70℃以下。考慮到以上對樣本的要求在日常工作中可能較難達(dá)到，EGTM建議根據(jù)采集樣本時(shí)病人的情況而使用特定的分析參考值。分析和結(jié)果報(bào)告注意事項(xiàng)：結(jié)果報(bào)告中應(yīng)注明，單次PSA的檢測結(jié)果不能用于前列腺癌的診斷和判定，應(yīng)該和物理檢查結(jié)合使用。結(jié)果報(bào)告中還應(yīng)分別注明分析實(shí)驗(yàn)的靈敏度和正常值參考范圍，并說明結(jié)果不能用作評判惡性腫瘤是否存在的證據(jù)，除非有另外一些檢測結(jié)果說明一定程度上升高的PSA水平不是由于良性前列腺組織疾病所引起的。報(bào)告中還應(yīng)注明PSA分析（試劑、儀器）的生產(chǎn)商，并聲明測定結(jié)果不能和用其他方法得到的結(jié)果進(jìn)行互換。對病人的治療后監(jiān)測，單次PSA檢測結(jié)果不能用于前列腺癌復(fù)發(fā)的診斷。根部前列腺切除手術(shù)后，PSA的持續(xù)升高（基于多次PSA的檢測結(jié)果）指示疾病的復(fù)發(fā)，若用超靈敏度分析進(jìn)行根部前列腺切除手術(shù)后的跟蹤隨訪（超靈敏度分析唯一的臨床應(yīng)用），應(yīng)對實(shí)驗(yàn)的靈敏度進(jìn)行驗(yàn)證，并將其報(bào)告給臨床醫(yī)生，更重要的是要研制出質(zhì)控品并達(dá)到要求的靈敏度。有些較低的檢測結(jié)果在生物學(xué)變異范圍內(nèi)可能會(huì)變得很高，因此持續(xù)升高的PSA水平應(yīng)該引起高度重視。EGTM的觀點(diǎn)是PSA超靈敏度分析實(shí)驗(yàn)的結(jié)果不應(yīng)用于決定臨床治療方案。肺癌標(biāo)志物

分析測試前的注意事項(xiàng)：用于肺癌腫瘤標(biāo)志物檢測的樣本應(yīng)存放于4℃（短期）和-70℃（長期）。當(dāng)融化冰凍樣本進(jìn)行細(xì)胞角蛋白測定時(shí)，應(yīng)避免樣本的劇烈混合，因?yàn)閯×艺鹗幒蠹?xì)胞角蛋白可能會(huì)附著在試管壁上。用于NSE檢測的樣本應(yīng)在采集的血液凝集后60分鐘內(nèi)進(jìn)行分離，注意避免存在于紅細(xì)胞內(nèi)的NSE漏出。溶血的樣本不能進(jìn)行NSE檢測。用于SCCA檢測的樣本應(yīng)避免皮膚和唾液的污染，因?yàn)檫@可能導(dǎo)致結(jié)果的錯(cuò)誤升高。腎功能障礙會(huì)顯著影響CYFRA21-1和SCCA的檢測結(jié)果，因此，對高檢測結(jié)果的病人應(yīng)觀察其身體狀況。

第二篇：7項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物檢測試劑盒A

7項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物檢測試劑盒A 【產(chǎn)品名稱】

通用名稱：7項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物檢測試劑盒（微陣列化學(xué)發(fā)光免疫分析法）

英文名稱： Seven Tumor Markers Test Kit(Microarray Chemiluminescent Immunoassay)【包裝規(guī)格】

100人份/盒

【預(yù)期用途】

本產(chǎn)品用于體外定量檢測人血清樣本中的糖鏈抗原19-9（CA19-9）、糖鏈抗原125（CA125）、糖鏈抗原724（CA724）、神經(jīng)元烯醇化酶（NSE）、癌胚抗原（CEA）、細(xì)胞角蛋白19片段（Cyfra21-1）、胃泌素釋放肽前體（Pro-GRP）7種腫瘤標(biāo)志物的濃度。

【檢驗(yàn)原理】

本產(chǎn)品由蛋白芯片、酶標(biāo)二抗反應(yīng)液、檢測液及其他試劑配套組成。應(yīng)用雙抗體夾心法原理定量檢測人血清中的7種腫瘤標(biāo)志物的濃度。

第一步反應(yīng)：待測血清與芯片反應(yīng)，芯片表面的7種腫瘤標(biāo)志物的單克隆抗體與樣品中潛在的相應(yīng)抗原結(jié)合，反應(yīng)結(jié)束芯片經(jīng)洗滌后進(jìn)行第二步反應(yīng)。第二步反應(yīng)：將芯片轉(zhuǎn)入預(yù)加了酶標(biāo)二抗反應(yīng)液的反應(yīng)杯中，進(jìn)一步反應(yīng)形成抗體-抗原-抗體的雙抗夾心結(jié)構(gòu)，反應(yīng)結(jié)束芯片經(jīng)洗滌后檢測反應(yīng)信號。

信號檢測：將芯片轉(zhuǎn)移入預(yù)加了發(fā)光底物的反應(yīng)杯中，利用致冷CCD對芯片反應(yīng)區(qū)進(jìn)行成像，讀取點(diǎn)陣灰度值。

報(bào)告結(jié)果：以不同濃度的校準(zhǔn)品作為樣本進(jìn)行檢測，作出灰度——濃度定量標(biāo)準(zhǔn)曲線，通過該標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算血清樣本中不同指標(biāo)的相應(yīng)濃度，報(bào)告檢測結(jié)果。

【適用儀器】

江蘇三聯(lián)生物工程有限公司全自動(dòng)生物芯片閱讀儀SLXP-001、SLXP-002。

【儲(chǔ)存條件及有效期】

2～8 ℃保存，有效期6個(gè)月。

【醫(yī)療器械注冊證編號】

國械注準(zhǔn)20153400230

7項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物檢測試劑盒B 【產(chǎn)品名稱】

通用名稱：7項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物檢測試劑盒（微陣列化學(xué)發(fā)光免疫分析法）

英文名稱： Seven Tumor Markers Test Kit(Microarray Chemiluminescent Immunoassay)【包裝規(guī)格】

100人份/盒

【預(yù)期用途】

本產(chǎn)品用于體外定量檢測人血清中的糖鏈抗原19-9（CA19-9）、糖鏈抗原125（CA125）、糖鏈抗原724（CA724）、癌胚抗原（CEA）、細(xì)胞角蛋白19片段（Cyfra21-1）、胃蛋白酶原I（PG I）以及胃蛋白酶原II（PG II）7種腫瘤標(biāo)志物的濃度。

【檢驗(yàn)原理】

本產(chǎn)品由蛋白芯片、酶標(biāo)二抗反應(yīng)液、檢測液及其他試劑配套組成。應(yīng)用雙抗體夾心法原理定量檢測人血清中的7種腫瘤標(biāo)志物的濃度。

第一步反應(yīng)：待測血清與芯片反應(yīng)，芯片表面的7種腫瘤標(biāo)志物的單克隆抗體與樣品中潛在的相應(yīng)抗原結(jié)合，反應(yīng)結(jié)束芯片經(jīng)洗滌后進(jìn)行第二步反應(yīng)。

第二步反應(yīng)：將芯片轉(zhuǎn)入預(yù)加了酶標(biāo)二抗反應(yīng)液的反應(yīng)杯中，進(jìn)一步反應(yīng)形成抗體-抗原-抗體的雙抗夾心結(jié)構(gòu)，反應(yīng)結(jié)束芯片經(jīng)洗滌后檢測反應(yīng)信號。

信號檢測：將芯片轉(zhuǎn)移入預(yù)加了發(fā)光底物的反應(yīng)杯中，利用致冷CCD對芯片反應(yīng)區(qū)進(jìn)行成像，讀取點(diǎn)陣灰度值。

報(bào)告結(jié)果：以不同濃度的校準(zhǔn)品作為樣本進(jìn)行檢測，作出灰度——濃度定量標(biāo)準(zhǔn)曲線，通過該標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算血清樣本中不同指標(biāo)的相應(yīng)濃度，報(bào)告檢測結(jié)果。【適用儀器】

江蘇三聯(lián)生物工程有限公司全自動(dòng)生物芯片閱讀儀SLXP-001、SLXP-002。

【儲(chǔ)存條件及有效期】

2～8 ℃保存，有效期6個(gè)月。

【醫(yī)療器械注冊證編號】

國械注準(zhǔn)20153400234 6項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物檢測試劑盒

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱：6項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物檢測試劑盒（微陣列化學(xué)發(fā)光免疫分析法）

英文名稱：Six Tumor Markers Test Kit(Microarray Chemiluminescent Immunoassay)【包裝規(guī)格】

100人份/盒

【預(yù)期用途】

本產(chǎn)品用于體外定量檢測人血清樣本中的甲胎蛋白（AFP）、癌胚抗原（CEA）、糖鏈抗原19-9（CA19-9）、糖鏈抗原125（CA125）、糖鏈抗原724（CA724）以及細(xì)胞角蛋白19片段（Cyfra21-1）6種腫瘤標(biāo)志物濃度。【檢驗(yàn)原理】

本產(chǎn)品由蛋白芯片、酶標(biāo)二抗反應(yīng)液、檢測液及其他試劑配套組成。應(yīng)用雙抗體夾心法原理定量檢測人血清中的6種腫瘤標(biāo)志物的濃度。

第一步反應(yīng)：待測血清與芯片反應(yīng)，芯片表面的6種腫瘤標(biāo)志物的單克隆抗體與樣品中潛在的相應(yīng)抗原結(jié)合，反應(yīng)結(jié)束芯片經(jīng)洗滌后進(jìn)行第二步反應(yīng)。

第二步反應(yīng)：將芯片轉(zhuǎn)入預(yù)加了酶標(biāo)二抗反應(yīng)液的反應(yīng)杯中，進(jìn)一步反應(yīng)形成抗體-抗原-抗體的雙抗夾心結(jié)構(gòu)，反應(yīng)結(jié)束芯片經(jīng)洗滌后檢測反應(yīng)信號。

信號檢測：將芯片轉(zhuǎn)移入預(yù)加了發(fā)光底物的反應(yīng)杯中，利用致冷CCD對芯片反應(yīng)區(qū)進(jìn)行成像，讀取點(diǎn)陣灰度值。

報(bào)告結(jié)果：以不同濃度的校準(zhǔn)品作為樣本進(jìn)行檢測，作出灰度——濃度定量標(biāo)準(zhǔn)曲線，通過該標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算血清樣本中不同指標(biāo)的相應(yīng)濃度，報(bào)告檢測結(jié)果。

【適用儀器】

江蘇三聯(lián)生物工程有限公司全自動(dòng)生物芯片閱讀儀SLXP-001、SLXP-002。

【儲(chǔ)存條件及有效期】

2～8 ℃保存，有效期6個(gè)月。

【醫(yī)療器械注冊證編號】

國械注準(zhǔn)20153400232 12項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物檢測試劑盒（女）

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱：12項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物檢測試劑盒（微陣列化學(xué)發(fā)光免疫分析法）

英文名稱： Twelve Tumor Markers Test Kit(Microarray Chemiluminescent Immunoassay)【包裝規(guī)格】

100人份/盒

【預(yù)期用途】

本產(chǎn)品用于體外定量檢測女性患者血清樣本中的糖鏈抗原19-9（CA19-9）、糖鏈抗原125（CA125）、糖鏈抗原724（CA724）、甲胎蛋白（AFP）、神經(jīng)元烯醇化酶（NSE）、癌胚抗原（CEA）、細(xì)胞角蛋白19片段（Cyfra21-1）、糖鏈抗原153（CA15-3）、β-人絨毛膜促性腺激素（β-HCG）、胃蛋白酶原（IPGI）、胃蛋白酶原II（PGII）以及胃泌素釋放肽前體（Pro-GRP）12種腫瘤標(biāo)志物的濃度。

【檢驗(yàn)原理】

本產(chǎn)品由蛋白芯片、酶標(biāo)二抗反應(yīng)液、檢測液及其他試劑配套組成。應(yīng)用雙抗體夾心法原理定量檢測人血清中的12種腫瘤標(biāo)志物的濃度。第一步反應(yīng)：待測血清與芯片反應(yīng)，芯片表面的12種腫瘤標(biāo)志物的單克隆抗體與樣品中潛在的相應(yīng)抗原結(jié)合，反應(yīng)結(jié)束芯片經(jīng)洗滌后進(jìn)行第二步反應(yīng)。

第二步反應(yīng)：將芯片轉(zhuǎn)入預(yù)加了酶標(biāo)二抗反應(yīng)液的反應(yīng)杯中，進(jìn)一步反應(yīng)形成抗體-抗原-抗體的雙抗夾心結(jié)構(gòu)，反應(yīng)結(jié)束芯片經(jīng)洗滌后檢測反應(yīng)信號。

信號檢測：將芯片轉(zhuǎn)移入預(yù)加了發(fā)光底物的反應(yīng)杯中，利用致冷CCD對芯片反應(yīng)區(qū)進(jìn)行成像，讀取點(diǎn)陣灰度值。

報(bào)告結(jié)果：以不同濃度的校準(zhǔn)品作為樣本進(jìn)行檢測，作出灰度——濃度定量標(biāo)準(zhǔn)曲線，通過該標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算血清樣本中不同指標(biāo)的相應(yīng)濃度，報(bào)告檢測結(jié)果。

【適用儀器】

江蘇三聯(lián)生物工程有限公司全自動(dòng)生物芯片閱讀儀SLXP-001、SLXP-002。

【儲(chǔ)存條件及有效期】

2～8 ℃保存，有效期6個(gè)月。

【醫(yī)療器械注冊證編號】

12項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物檢測試劑盒（男）

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱：12項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物檢測試劑盒（微陣列化學(xué)發(fā)光免疫分析法）英文名稱： Twelve Tumor Markers Test Kit(Microarray Chemiluminescent Immunoassay)【包裝規(guī)格】

100人份/盒

【預(yù)期用途】

本產(chǎn)品用于體外定量檢測男性患者血清樣本中的糖鏈抗原19-9（CA19-9）、糖鏈抗原125（CA125）、糖鏈抗原724（CA724）、甲胎蛋白（AFP）、神經(jīng)元烯醇化酶（NSE）、癌胚抗原（CEA）、細(xì)胞角蛋白19片段（Cyfra21-1）、前列腺特異性抗原（T-PSA）、游離前列腺特異性抗原（F-PSA）、胃蛋白酶原I（PGI）、胃蛋白酶原II（PGII）以及胃泌素釋放肽前體（Pro-GRP）12種腫瘤標(biāo)志物的濃度。

【檢驗(yàn)原理】

本產(chǎn)品由蛋白芯片、酶標(biāo)二抗反應(yīng)液、檢測液及其他試劑配套組成。應(yīng)用雙抗體夾心法原理定量檢測人血清中的12種腫瘤標(biāo)志物的濃度。

第一步反應(yīng)：待測血清與芯片反應(yīng)，芯片表面的12種腫瘤標(biāo)志物的單克隆抗體與樣品中潛在的相應(yīng)抗原結(jié)合，反應(yīng)結(jié)束芯片經(jīng)洗滌后進(jìn)行第二步反應(yīng)。

第二步反應(yīng)：將芯片轉(zhuǎn)入預(yù)加了酶標(biāo)二抗反應(yīng)液的反應(yīng)杯中，進(jìn)一步反應(yīng)形成抗體-抗原-抗體的雙抗夾心結(jié)構(gòu)，反應(yīng)結(jié)束芯片經(jīng)洗滌后檢測反應(yīng)信號。信號檢測：將芯片轉(zhuǎn)移入預(yù)加了發(fā)光底物的反應(yīng)杯中，利用致冷CCD對芯片反應(yīng)區(qū)進(jìn)行成像，讀取點(diǎn)陣灰度值。

報(bào)告結(jié)果：以不同濃度的校準(zhǔn)品作為樣本進(jìn)行檢測，作出灰度——濃度定量標(biāo)準(zhǔn)曲線，通過該標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算血清樣本中不同指標(biāo)的相應(yīng)濃度，報(bào)告檢測結(jié)果。

【適用儀器】

江蘇三聯(lián)生物工程有限公司全自動(dòng)生物芯片閱讀儀SLXP-001、SLXP-002。

【儲(chǔ)存條件及有效期】

2～8 ℃保存，有效期6個(gè)月。

【醫(yī)療器械注冊證編號】

國械注準(zhǔn)20153400231

國械注準(zhǔn)20153400233

第三篇：常用的乳腺癌腫瘤標(biāo)志物檢查項(xiàng)目

常用的乳腺癌腫瘤標(biāo)志物檢查項(xiàng)目

1.血清癌抗原15-3(CA15-3)

臨床意義：①在乳腺癌早期診斷中，檢查血清CA15-3可作為一種乳腺良惡性病變鑒別、乳腺癌確診的有效輔助手段。②CA15-3是目前監(jiān)測乳腺癌術(shù)后復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移情況較為理想的血清腫瘤標(biāo)志物。往往在術(shù)前測一次CA15-3，以便與術(shù)后測的CA15-3做比較，若術(shù)前異常增高的CA15-3水平術(shù)后明顯下降，則表明患者的病情在一定程度上得到控制。③CA15-3可用于指導(dǎo)臨床治療，如患者CA15-3水平持續(xù)升高，則表明病情繼續(xù)發(fā)展，應(yīng)全面檢查，必要時(shí)開始或加強(qiáng)化療、放療或改用內(nèi)分泌治療等。

2.血清癌胚抗原(CEA)

臨床意義：CEA是一種胚胎性抗原，存在于3~6個(gè)月正常胎兒的消化道內(nèi)皮細(xì)胞中，在胚胎后期和嬰兒出生后，CEA逐漸消失，而患癌后會(huì)在體內(nèi)重新出現(xiàn)。它也是預(yù)示腫瘤可能復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移的重要指標(biāo)之一。臨床上，常常和CA15-3聯(lián)檢用于乳腺癌的術(shù)后監(jiān)測。當(dāng)CA15-3和CEA的值同時(shí)持續(xù)升高并保持較高的水平時(shí)，就更應(yīng)考慮乳腺癌有轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)的可能。

3.血清癌抗原125(CA125)

臨床意義：CA125是一種卵巢相關(guān)抗原，可見于卵巢上皮癌、子宮內(nèi)膜癌、乳腺癌等惡性腫瘤。盡管其對乳腺癌的診斷敏感度不如卵巢癌，但與其他腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合測定，能提高乳腺癌診斷的準(zhǔn)確率。

4.血清癌抗原19-9(CA19-9)

臨床意義：CA19-9在胰腺癌、結(jié)腸癌等消化系統(tǒng)惡性腫瘤和乳腺癌時(shí)均出現(xiàn)異常升高。常常與其他腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合測定，應(yīng)用于乳腺癌的診斷。

病理組織化驗(yàn)

臨床上，在確診為乳腺癌并進(jìn)行手術(shù)切除后，需要對切除的組織做病理化驗(yàn)。常用病理化驗(yàn)“乳癌五項(xiàng)” 如下：

PCNA(增殖細(xì)胞核抗原

P53基因

癌基因

ER(雌激素受體

PR(孕激素受體 得出的結(jié)果用陽性(+、++、+++、++++)和陰性(-)表示。其中ER、PR陽性說明是激素依賴性乳腺癌，內(nèi)分泌治療有效率高，反之內(nèi)分泌治療的效果不好;而PCNA(增殖細(xì)胞核抗原)、P53基因、癌基因C-erbB-2這三項(xiàng)指標(biāo)的陽性對于乳腺癌患者就不那么好了，它們的陽性加號越多，說明腫瘤的侵襲性越高，越容易復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移，預(yù)后也差。更多資訊咨詢 ***

人參皂苷Rh2斬?cái)嗳橄侔┠ё?/p>

人參是自古以來研究較多的名貴中藥材，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，人參具有抗腫瘤、抗衰老、抗輻射等多種生物活性作用，其主要活性成分是人參皂苷。迄今為止，從人參中分離并確定了結(jié)構(gòu)的皂苷有40余種，通過對各種人參皂苷抗腫瘤作用的比較發(fā)現(xiàn)，人參皂苷Rh2抑制癌細(xì)胞增殖作用的能力最強(qiáng)，是人參皂苷中的最主要抗癌活性成分。人參皂苷Rh2通過抑制癌細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)癌細(xì)胞分化凋亡對多種腫瘤有效，也為乳腺癌的治療提供了新的武器。

朱君榮、孫建國等人研究了人參皂苷Rh2對雌激素依賴性人乳腺癌T47D 細(xì)胞增殖和凋亡的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，T47D細(xì)胞經(jīng)Rh2作用后生長受抑制，呈劑量依賴性和時(shí)間依賴性，半數(shù)抑制濃度為 21.6 μg/mL；光學(xué)顯微鏡顯示T47D細(xì)胞經(jīng)Rh2作用后呈較明顯的凋亡形態(tài)學(xué)改變；流式細(xì)胞儀檢測證實(shí)，Rh2能在一定濃度 范圍內(nèi)誘導(dǎo)T47D細(xì)胞凋亡，將細(xì)胞周期阻滯于G1期，并使Caspase-3表達(dá)增加。說明Rh2 能抑制T47D細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)其凋亡，對乳腺癌有效。

究所高峰等人通過實(shí)驗(yàn)證實(shí)，人參皂苷Rh2對正常小鼠和犬的神經(jīng)系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)無明顯影響，這與其他抗癌化療藥物有明顯不同。

正因?yàn)槿藚⒃碥誖h2的高效、低毒，在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時(shí)不損害正常細(xì)胞，被稱為“癌細(xì)胞狙擊手”。同時(shí)它還是“免疫細(xì)胞激活劑”，可通過激活免疫細(xì)胞功能，而發(fā)揮人體自身免疫系統(tǒng)對癌細(xì)胞的清除，利于患者康復(fù)。

第四篇：腫瘤檢測樣本

1、新鮮組織(包括手術(shù)和活檢組織)腫瘤新鮮冷凍材料可提取出最高品質(zhì)的DNA、RNA。在手術(shù)現(xiàn)場取樣的情況也比較多，但需要在顯微鏡下確認(rèn)腫瘤細(xì)胞含量。周圍炎癥嚴(yán)重的腫瘤、黏液產(chǎn)生過高的腫瘤、病變中心廣泛纖維化的腫瘤細(xì)胞不能采集，以免產(chǎn)生假陰性結(jié)果。切割后取其中一半，并利用另一半切面制作組織標(biāo)本，然后進(jìn)行確認(rèn)。

手術(shù)切除的組織樣本理想的保存方法是迅速置于液氮中，然后保存于液氮罐或-80℃冰箱，這一過程應(yīng)在手術(shù)樣本離體后30分鐘內(nèi)完成。由于組織樣本通常需先進(jìn)行病理學(xué)分析，在分析完成后應(yīng)盡早將組織樣本置于穩(wěn)定劑中，避免核酸降解。

2、石蠟包埋組織（formalin-fixed paraffin-embedded，F(xiàn)FPE）

10%中性福爾馬林固定手術(shù)切除樣本，按病理學(xué)操作規(guī)范進(jìn)行取材。制作石蠟切片時(shí)，切取5片連續(xù)切片，其中1片進(jìn)行HE染色，確認(rèn)腫瘤細(xì)胞的含量。在高靈敏度檢測方法中，可考慮使用活檢標(biāo)本。

DNA容易受固定的影響，長時(shí)間（1周以上）浸泡在福爾馬林中的樣本的DNA會(huì)被片段化，不能檢出突變。活檢材料的固定時(shí)間一般是24小時(shí)，對于穿刺等活檢樣本，固定時(shí)間控制在6~24小時(shí)為佳。

3、胸腹水等細(xì)胞學(xué)樣本

用胸腹水中的腫瘤細(xì)胞用于基因檢測時(shí)，必須確認(rèn)腫瘤細(xì)胞，穿刺獲得胸腹水樣本提交給細(xì)胞病理檢查之后，剩余液體冷藏/冷凍保存，也可在含有細(xì)胞成分的離心沉淀中加入含有蛋白質(zhì)變性劑的緩沖液（AL緩沖液，Qiagen公司）等室溫保存。由于細(xì)胞學(xué)樣本的腫瘤細(xì)胞含量較低，因此必須使用高靈敏度檢測方法。

4、血漿樣本

循環(huán)DNA(circulating free DNA，cfDNA)是存在于血漿中的游離DNA，腫瘤來源的DNA占血漿游離DNA的比例在不同腫瘤及病例中相差懸殊（0.01~93%），從而限制了外周血在腫瘤分子檢測時(shí)的應(yīng)用。目前已有多篇文獻(xiàn)證實(shí)可利用從血漿游離DNA檢出突變，但需要使用ARMS法等靈敏度非常高的檢測方法。

采集外周血提取血漿游離DNA進(jìn)行檢測，取樣時(shí)應(yīng)使用一次性密閉EDTA抗凝真空采血管，采集6~10ml全血，冷藏運(yùn)輸，6小時(shí)內(nèi)分離血漿，提取游離DNA，保存到-80℃冰箱中，并避免反復(fù)凍融。如外周血需長時(shí)間運(yùn)輸，建議用商品化的游離DNA樣本保存管，在常溫條件下，cfDNA在全血中可穩(wěn)定保存7天。

第五篇：腫瘤標(biāo)記物檢測

腫瘤標(biāo)記物檢測及臨床意義

腫瘤標(biāo)志物是腫瘤細(xì)胞本身存在或分泌的特異性物質(zhì)，應(yīng)具備以下一些特征：必須由惡性腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生，并可在血液、組織液、分泌液或腫瘤組織中測出；不應(yīng)該存在于正常組織和良性疾病中；某一腫瘤的腫瘤標(biāo)志物應(yīng)該在該腫瘤的大多數(shù)患者中檢測出來；臨床上尚無明確腫瘤證據(jù)之前最好能測出；腫瘤標(biāo)志物的量最好能反映腫瘤的大小；在一定程度上能有助于估計(jì)治療效果、預(yù)測腫瘤的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。理想的腫瘤標(biāo)志物應(yīng)符合上述各項(xiàng)特征。然而，實(shí)際上凍存在絕對理想的腫瘤標(biāo)志物。現(xiàn)今所知的腫瘤標(biāo)志物中，絕大多數(shù)不但存在于惡性腫瘤中，而且也存在于良性腫瘤、胚胎組織，甚至正常組織中。因此，這些腫瘤標(biāo)志物并非惡性腫瘤的特異性產(chǎn)物，但在惡性腫瘤患者中明顯增多。故有人將腫瘤標(biāo)志物稱為腫瘤相關(guān)抗原。

腫瘤標(biāo)志物可以分成以下幾大類：腫瘤胚胎性抗原，如甲胎蛋白（AFP）、癌胚抗原（CEA）；異位激素（ACTH），血清鐵蛋白（Fer/SF），血B2微球蛋白（B2-MG），神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE），細(xì)胞角蛋白19片段（CYFRA21-1）,前列腺酸性磷酸酶（PAP）,總前列腺特異性抗原（TPSA），游離前列腺特異性抗原（FPSA），EB病毒抗體（EB-IGM）,糖類抗,CA-50）,糖類抗原（CA-72-4），糖類抗原（CA-19-9），糖類抗原(CA24-2),糖類抗原（CA-125）,糖類抗原（CA15-3），各項(xiàng)腫瘤標(biāo)記物都有它的臨床意義。

1.AFP原發(fā)性肝癌最敏感、最特異的指標(biāo)，適用于大規(guī)模普查，如果成人血AFP值升高，則表示有患肝癌的可能AFP含量顯著升高一般提示原發(fā)性肝細(xì)胞癌，但陰性并不能排除原發(fā)性肝癌。AFP水平在一定程度上反應(yīng)腫瘤的大小，其動(dòng)態(tài)變化與病情有一定的關(guān)系，是顯示治療效果和預(yù)后判斷的一項(xiàng)敏感指標(biāo)。AFP值異常高者一般提示預(yù)后不佳，其含量上升則提示病情惡化。通常手術(shù)切除肝癌后二個(gè)月，AFP值應(yīng)降至20ng/ml以下，若降的不多或降而復(fù)升，提示切除不徹底或有復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移的可能。在轉(zhuǎn)移性肝癌中，AFP值一般低于350-400ng/ml。正常參考值0-15ng/ml

2．癌胚抗原（CEA）

在正常成人的血液中CEA很難測出。CEA是一種重要的腫瘤相關(guān)抗原，70~90%的結(jié)腸腺癌患者CEA高度陽性，在其它惡性腫瘤中的陽性率順序?yàn)槲赴?0~90％）、胰腺癌（70~80％）、小腸腺癌（60~83％）、肺癌（56~80％）、肝癌（62~75％）、乳腺癌（40~68％）、泌尿系癌腫（31~46％）。胃液（胃癌）、唾液（口腔癌、鼻咽癌）以及胸腹水（肺癌、肝癌）中CEA的陽性檢測率更高，因?yàn)檫@些腫瘤“浸泡液”中的CEA可先于血中存在。CEA含量與腫瘤大小、有無轉(zhuǎn)移存在一定關(guān)系，當(dāng)發(fā)生肝轉(zhuǎn)移時(shí)，CEA的升高尤為明顯。CEA測定主要用于指導(dǎo)各種腫瘤的治療及隨訪，對腫瘤患者血液或其他體液中的CEA濃度進(jìn)行連續(xù)觀察，能對病情判斷、預(yù)后及療效觀察提供重要的依據(jù)。CEA的檢測對腫

瘤術(shù)后復(fù)發(fā)的敏感度極高，可達(dá)80%以上，往往早于臨床、病理檢查及X光檢查。

3．癌抗原125（CA125）

CA125是卵巢癌和子宮內(nèi)膜癌的首選標(biāo)志物，如果以65U/ml為陽性界限，Ⅲ-Ⅳ期癌變準(zhǔn)確率可達(dá)100%。CA125迄今為止是用于卵巢癌的早期診斷、療效觀察、預(yù)后判斷、監(jiān)測復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移的最重要指標(biāo)。CA125測定和盆腔檢查的結(jié)合可提高試驗(yàn)的特異性。對輸卵管癌、子宮內(nèi)膜癌、子宮頸癌、乳腺癌和間皮細(xì)胞癌診斷的符合率也很高，良性病變陽性率僅2%。CA125水平的升高是女性生殖系腫瘤復(fù)發(fā)的信號。正常參考值：0.1～35 U/ml。

4．癌抗原15-3（CA15-3）

CA15-3是乳腺癌的最重要的特異性標(biāo)志物。30%-50%的乳腺癌患者的CA15-3明顯升高，其含量的變化與治療效果密切相關(guān)，是乳腺癌患者診斷和監(jiān)測術(shù)后復(fù)發(fā)、觀察療效的最佳指標(biāo)。正常參考值：0.1～25 U/ml

5．癌抗原19-9（CA19-9）

CA19-9是胰腺癌，胃癌，結(jié)、直腸癌、膽囊癌的相關(guān)標(biāo)志物，大量研究證明CA19-9濃度與這些腫瘤大小有關(guān)，是至今報(bào)道的對胰腺癌敏感性最高的標(biāo)志物。胰腺癌患者85%-95%為陽性，CA19-9測定有助于胰腺癌的鑒別診斷和病情監(jiān)測。正常參考值：0.1～27 U/ml

6．癌抗原72-4（CA72-4）

CA72-4是目前診斷胃癌的最佳腫瘤標(biāo)志物之一，對胃癌具有較高的特異性，其敏感性可達(dá)28-80%，若與CA19-9及CEA聯(lián)合檢測可以監(jiān)測70％以上的胃癌。

CA72-4對其他胃腸道癌、乳腺癌、肺癌、卵巢癌也有不同程度的檢出率。CA72-4與CA125聯(lián)合檢測，作為診斷原發(fā)性及復(fù)發(fā)性卵巢腫瘤的標(biāo)志，特異性可達(dá)100%。

正常參考值：0.1～7 U/ml

CA242是一種新的腫瘤相關(guān)抗原，當(dāng)消化道發(fā)生腫瘤時(shí)，其含量升高

CEA與CA242聯(lián)合檢測可提高敏感性，與單獨(dú)采用CEA檢測相比，對結(jié)腸癌可提高40-70%，對直腸癌提高達(dá)到47-62%。CEA與CA242無相關(guān)性，具有獨(dú)立的診斷價(jià)值，且二者之間具有互補(bǔ)性。

正常參考值：0～17 U/ml

CA50是胰腺和結(jié)、直腸癌的標(biāo)志物，是最常用的糖類抗原腫瘤標(biāo)志物，因其廣

泛存在胰腺、膽囊、肝、胃、結(jié)直腸、膀胱、子宮，它的腫瘤識(shí)別譜比CA19-9廣，因此它又是一種普遍的腫瘤標(biāo)志相關(guān)抗原，而不是特指某個(gè)器官的腫瘤標(biāo)志物。

另有報(bào)導(dǎo)萎縮性胃炎患者胃液CA50的濃度與正常人比較有顯著改變。通常認(rèn)為萎縮性胃炎是癌前高危期，因此CA50可作為癌前診斷指標(biāo)之一。在胰腺炎、結(jié)腸炎和肺炎發(fā)病時(shí)，CA50也會(huì)升高，但隨炎癥消除而下降。

9．非小細(xì)胞肺癌相關(guān)抗原（CYFRA 21-1）

CYFRA 21-1是非小細(xì)胞肺癌最有價(jià)值的血清腫瘤標(biāo)志物，尤其對鱗狀細(xì)胞癌患者的早期診斷、療效觀察、預(yù)后監(jiān)測有重要意義

CYFRA 21-1與良性肺部疾病（肺炎、結(jié)核、慢性支氣管炎、支氣管哮喘、肺氣腫）的鑒別特異性比較好。

正常參考值：0.10～4 ng/ml

10．小細(xì)胞肺癌相關(guān)抗原（神經(jīng)元特異性烯醇化酶，NSE）

NSE被認(rèn)為是監(jiān)測小細(xì)胞肺癌的首選標(biāo)志物，60-80%的小細(xì)胞肺癌患者NSE升高

血清NSE水平的測定對于神經(jīng)母細(xì)胞瘤的監(jiān)測療效和預(yù)報(bào)復(fù)發(fā)均具有重要參考價(jià)值，比測定尿液中兒茶酚胺的代謝物更有意義。

另外對胺前體攝取脫羧細(xì)胞瘤、精原細(xì)胞瘤及其它腦腫瘤的診斷也有重要意義。

正常參考值：0～16 ng/ml

11．鱗狀細(xì)胞癌抗原（SCC）

鱗狀細(xì)胞癌抗原(SCC)是一種特異性很好而且是最早用于診斷鱗癌的腫瘤標(biāo)志物。SCC在正常的鱗狀上皮細(xì)胞中抑制細(xì)胞調(diào)亡和參與鱗狀上皮層的分化，在腫瘤細(xì)胞中參與腫瘤的生長，它有助于所有鱗狀上皮細(xì)胞起源癌的診斷和監(jiān)測，對子宮頸癌有較高的診斷價(jià)值：對原發(fā)性宮頸鱗癌敏感性為44%-69%；復(fù)發(fā)癌敏感性為67%-100%，特異性90%-96%；正常參考值：< 1.5 mg/L

12．總前列腺特異性抗原（TPSA）

PSA是前列腺癌的特異性標(biāo)志物，也是目前公認(rèn)的唯一具有器官特異性腫瘤標(biāo)志物。血清TPSA升高一般提示前列腺存在病變（前列腺炎、良性增生或癌癥

TPSA測定還可用于監(jiān)測前列腺癌患者或接受激素治療患者的病情及療效，90%前列腺癌術(shù)后患者的血清TPSA值可降至不能檢出的痕量水平，若術(shù)后血清TPSA值升高，提示有殘存腫瘤。放療后療效顯著者，50％以上患者在2個(gè)月內(nèi)血清TPSA降至正常。

正常參考值：0.01～4.0 ng/ml

13．游離前列腺特異性抗原（FPSA）

單項(xiàng)的血清總PSA（TPSA）測定不能明確鑒別前列腺癌和良性的前列腺增生，主要是因?yàn)樵跐舛?-20ng/ml范圍內(nèi)，二組病人有交叉。而FPSA/TPSA不受此因素及年齡的影響，通過FPSA/TPSA比值達(dá)到鑒別前列腺癌或良性的前列腺增生的目的FPSA檢測主要適用于未經(jīng)治療、TPSA值為2-20ng/ml病人，當(dāng)TPSA值低于2ng/ml或高于20ng/ml時(shí)，F(xiàn)PSA/TPSA比值并不能用于鑒別前列腺癌和良性的前列腺增生。

正常參考值：0.01～2.0 ng/ml FPSA/TPSA：> 0.15

14．α-L-巖藻糖苷酶（AFU）

AFU是是對原發(fā)性肝細(xì)胞性肝癌檢測的又一敏感、特異的新標(biāo)志物。原發(fā)性肝癌患者血清AFU活力顯著高于其它各類疾患（包括良、惡性腫瘤）。血清AFU活性動(dòng)態(tài)曲線對判斷肝癌治療效果、估計(jì)預(yù)后和預(yù)報(bào)復(fù)發(fā)有著極其重要的意義

正常參考值：234～414 μmol/L

15．EB病毒抗體（EBV-VCA）

EB病毒陽性、鼻咽癌家族史、鼻咽癌的高發(fā)區(qū)、身體免疫力低下，都可能是患鼻咽癌的高危因素。從理論上講，如EB病毒檢查陽性者，僅是代表患者以前曾經(jīng)受過EB病毒感染，但它是否是鼻咽癌發(fā)病的直接原因，目前尚無定論。但臨床實(shí)踐，科學(xué)研究表明，陽性者患鼻咽癌的機(jī)會(huì)比陰性者大得多。正常參考值：EBV-VCA抗體 陰性

16．腫瘤相關(guān)物質(zhì)（TSGF）

TSGF腫瘤相關(guān)物質(zhì)聯(lián)合檢測（原名惡性腫瘤特異性生長因子）是一種可以簡便快速地用于惡性腫瘤早期輔助診斷的新型的腫瘤標(biāo)志物，對療效觀察、人群查體亦有很高的應(yīng)用價(jià)值。

惡性腫瘤患者血清中TSGF含量顯著升高，不同種類的惡性腫瘤間差異不明顯；而良性腫瘤與健康人群間無顯著差異，TSGF是良、惡性腫瘤的鑒別指標(biāo)，可在輔助診斷惡性腫瘤方面發(fā)揮作用正常參考值：正常人TSGF濃度范圍為47±17U/ml；＜64U/ml為陰性；≥64U/ml而＜71U/ml為可疑；≥71U/ml為陽性。

17．鐵蛋白（SF）

鐵蛋白升高可見于下列腫瘤：急性白血病、何杰金氏病、肺癌、結(jié)腸癌、肝癌和前列腺癌。檢測鐵蛋白對肝臟轉(zhuǎn)移性腫瘤有診斷價(jià)值，76%的肝轉(zhuǎn)移病人鐵蛋白含量高于400μg/L，當(dāng)肝癌時(shí)，AFP測定值較低的情況下，可用鐵蛋白測定值補(bǔ)充，以提高診斷率。

正常參考值：男性：30～400 μg/L 女性：13～150 μg/L

18．β2-微球蛋（β2-MG）

β2-MG是惡性腫瘤的輔助標(biāo)志物，也是一些腫瘤細(xì)胞上的腫瘤相關(guān)抗原。在惡性血液病或其它實(shí)質(zhì)性癌瘤中，突變細(xì)胞合成和分泌β2-MG，可使病人血清中濃度顯著上升，在淋巴系統(tǒng)腫瘤如慢性淋巴細(xì)胞白血病、淋巴細(xì)胞肉瘤、多發(fā)性骨髓瘤等中尤為明顯，在肺癌、乳腺癌、胃腸正常參考值：1.58～3.55 μg/ml

道癌及子宮頸癌等中也可見增高。

正常參考值：1.58～3.55 μg/ml

19．胰胚胎抗原（POA）

胰胚胎抗原是胰腺癌的又一新型、敏感、特異的新標(biāo)志物，胰腺癌的POA的陽性率為95%

正常參考值：0～7 U/ml

20．胃泌素前體釋放肽（PROGRP）

胃泌素前體釋放肽是一種新的小細(xì)胞肺癌標(biāo)志物。PROGRP是腦腸激素的一種，是小細(xì)胞肺癌增殖因子胃泌素釋放肽的前體。PROGRP作為小細(xì)胞肺癌標(biāo)志物有以下特點(diǎn)：1.針對小細(xì)胞肺癌的特異性非常高；2.較早期的病例有較高的陽性率；3.健康者與患者血中濃度差異很大，因而檢測的可靠性很高。

正常參考值: 4～6 pg/ml

現(xiàn)在臨床對一些腫瘤項(xiàng)目進(jìn)行一些組合檢查腫瘤普查：

1、腫瘤普查四項(xiàng)：AFP、CEA、Fer、β2-MG2、腫瘤三項(xiàng)：AFP、CEA、CA1993、婦科腫瘤五項(xiàng)：AFP、CEA、CA125、CA153、CA1994、卵巢癌二項(xiàng)：CA125、CEA5、乳腺癌二項(xiàng)：CA153、CA1996、消化道腫瘤六項(xiàng)：AFP CEA CA199 CA242 CA724 CA507、肝膽腫瘤五項(xiàng)：AFP CEA CA199 CA125 CA508、胃癌三項(xiàng)：CEA CA724 CA1999、肺癌三項(xiàng)：CEA NSE CYFRA21110、前列腺癌三項(xiàng)：PSA FPSA PAP11、前列腺癌兩項(xiàng)：PSA FPSA