第一篇：酵母菌分類學的研究進展王志偉

酵母菌分類學的研究進展

07級農學系生物技術2班王志偉0701024208

一、摘要隨著生物技術的發展,一些新方法應用于酵母菌分類中,使酵母菌分類學研究從過去的傳統分類系統過渡到以遺傳特征（DNA序列）為主要依據的現代分類系統。本文將介紹脈沖電泳核型分析(PFGE)、PCR-LFP和RAPD 3種分子生物技術的方法、原理,以及在酵母菌分類鑒定方面的應用現狀,并指出了各種技術的局限性和應用前景。

關鍵詞：脈沖電泳核型分析(PFGE)PCR-LFPRAPD應用進展

二、簡介經典分類學方法在酵母菌分類中的應用

經典分類學方法是酵母菌分類學方法的基礎,包括形態學特征和生理生化特征。形態學特征包括宏觀特征(菌落特征)、微觀特征(細胞形態、無性繁殖方式、有性生殖方式、孢子類型、假菌絲的形成)等;生理生化特征包括對糖發酵和碳、氮源化合物同化的能力,對外源維生素的依賴性和不同溫度下的生長能力等生理學特性。但是，隨著酵母菌資源庫不斷豐富和新種不斷被發現，單靠經典的形態學和生理生化差異作為酵母菌種間鑒別依據有時是不夠的。所以現在該法只能作為酵母鑒定系統的基礎輔助其他分類方法使用。

三、分子分類學方法在酵母分類中的應用

rDNA序列分析是近年來廣泛應用的用于判斷不同分類群親緣關系遠近的指標, 在rDNA中, 26SrDNA(LSU)和18SrDNA(SSU)以串聯重復的方式排列,在細胞內有數以百計的拷貝,增加了擴增成功的可能性。rDNA內某些片段具有高度的保守性,同一細胞內不同拷貝的rRNA基因序列,因協同進化作用而被均一化,因此每一拷貝的序列是相同的。當前酵母分類中最為常用的包括18SrDNA、26SrDNA D1/D2區、ITS區等[1]。序列分析的大致流程是:活化菌株,提取目的菌株的基因組DNA,并以此為模板使用酵母菌通用引物擴增相應的區域,擴增產物經電泳檢測,純化后進行測序;將測序得到的序列提交到Genbank等核苷酸數據庫,與庫中所有酵母菌的同源序列進行相似性比較,與相似度最高的序列的堿基差異越小, 成為該序列所對應菌種的可能性就越大。也可以從核苷酸數據庫中下載同源序列,構建系統發育樹,研究菌株的系統發育地位。

3.1脈沖電泳核型分析(PFGE)：

脈沖電泳是一種可在瓊脂糖凝膠中將不同大小的完整染色體DNA分子分開的技術；核型分析就是應用脈沖電泳方法發展起來的一種新的實驗技術,把整個染色體包埋在瓊脂糖凝膠中,依賴染色體的大小和立體結構（代表了一個生物所含有遺傳物質的多少及其組成形態,該特征隨物種變化而變化,因而具有特定的系統分類學意義）及在凝膠中的不同遷移速度把基因組分離成染色體帶[2 ]。簡要的實驗步驟包括原生質體制備、制膠、電泳、凝膠的溴化乙錠染色觀察4個過程。而影響PFGE 成敗的因素主要有兩種:一是完整染色體DNA 的制備,二是合適的脈沖電泳條件。脈沖電泳的原理是通過電場不斷改變, 迫使DNA分子的泳動方向做相應的改變,小的DNA分子比大的變形快,故前者比后者泳動速度快,從而將不同大小的DNA分子分開[3]。隨著脈沖電泳儀的改進以及完整染色體DNA提取方法的發展,脈沖電泳技術越來越多的被應用于酵母菌的分類學研究中，又因為PFGE分析帶型清晰易辨、分辨力較強,可達10000 kb 以上,適用于近緣關系菌株的分類研究，可作為變種鑒別和種內分型的新基因型方法，故而它對于釀酒酵母菌在傳統方法分屬后的進一步分類有重要作用。

3.2限制性片段長度多態性DNA(PCR-LFP)

RFLP即限制性片段長度多態性(restriction ragment length polymorphism)是REFP 的改進形式,它采用DNA 探針和分子雜交技術,特異性更強。PCR-LFP 是將PCR擴增的基因組DNA用限制性內切酶酶解,經電泳分離后表現的限制性片段長度差異，酵母基因組含有豐富的遺傳信息,且有較大差異,不同菌株的同源序列（5.8S-ITS區域的PCR-RFLP使用得最為廣泛[4]）肯定具有不完全一致的酶切位點，,這為該方法在酵母菌分類上的應用提供了可能。，核糖體存在于所有生物細胞中,幾乎有一個共同的起源,而且某些rRNA 序列對所有的同源生物是相當保守的,從而可以確定所有生物的分類地位。核基因組rDNA 的內轉錄區間ITS(Internal Transcribed Spacer)適用于種以下的分類和鑒定。利用引物擴增rDNA 的ITS 區域,用限制性內切酶消化,不用雜交,也可獲得RFLP圖譜。FERNANDEIESPLNAR 等擴增5.8SrRNA ,包括了內轉錄區間ITS1和ITS2 ,擴增后的基因數目從700～870 bp不等,以此對酵母菌進行RFLP鑒定分析[3 ]。

Kuhlea 等(2001)用PCR-FLP分析法分析了啤酒中的酵母類群CECT-ATA聯盟建立了一個網上酵母菌鑒定數據庫(http: / /www.tmdps.cn /)里面存儲了酵母菌5.8S-ITS 片段及經Cfo I、Dde I、Hae III, HinfI限制酶酶切后的信息,只需將菌株擴增的5.8 S-ITS片段大小和經酶酶切后的片斷數量及大小

[5]輸入數據庫,就可快速簡單地鑒定一個菌株到種。

3.3 隨機擴增多態DNA(RAPD)

RAPD(隨機擴增多態DNA)是在PCR 技術的基礎上發展起來的一項多態分析新技術。其原理是利用大約10 個堿基的隨機引物以PCR 技術為基礎，對整個基因組DNA 進行擴增，得到多個片斷，再利用聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）檢測個體間擴增出的片斷的多態性，可以辨別出菌株間基因組DNA 內核苷酸序列存在的微小變異[6]。由于該方法中選用引物的堿基是隨機的,所用引物可達成百上千,可檢測到生物體的整個基因組,既能檢測有功能的基因編碼區,又能檢測到重復序列區。與RFLP相比RAPD 大大減少了如制備克隆、Southern印記、分子雜交

[7]等準備工作,簡化了技術過程所需的條件 ,它以隨機寡核苷酸為引物,比RFLP

多態片段短許多,更方便種與亞種的鑒別。

RAPD 的主要缺點有: ①RAPD 標記中的EB 染色帶往往是一種混合標記,是在基因組DNA 中擴增位點不一,長度可能相同或不同的一組片段的混合片段標記;②RAPD 的擴增帶多為顯性標記,不能區分個體基因型是純合型還是雜合型;③穩定性和重復性較差。

四、展望

酵母菌分類學方法的發展趨勢應該是向著簡便、快捷、準確、合理的方向發展。就當前情況來看,任何一種方法都不完美,只有將各種方法結合起來使用,才能達到令人滿意的鑒定效果。隨著生物技術正越來越多地應用于酵母菌的鑒定，目前流行的鑒定程序是,首先對酵母菌進行形態特征, 在此基礎上對DNA測序分析,多種方法綜合運用就會得到較為滿意的結果。分子分類學方法的研究為酵母菌的分類展示了廣闊的前景和越來越重要的作用。

五、參考文獻：

[1] 王慶國.劉天明.酵母菌分類學方法研究進展微生物學雜志 2007年5月第27卷第3期

[2] 劉永翔.劉作易脈沖電泳技術在真菌研究中的應用貴州農業科學 2004 ,32(5):82～83

[3] 毛志群.張偉.馬雯.分子生物技術在酵母菌分類中的應用進展河北農業大學學報2002年5月第25 卷增刊

[4] 盧君.李艷釀 分子生物學技術在葡萄酒相關酵母菌分類鑒定中的應用及研究進展酒科技2009 年第6 期（總第180 期）

[5] KUHL E A , J ESPEREN L , GLOVER R L K.Identification and characterization of S accaromyces cerevisiae strains isolated from West African sorghum beer[J ].Yeast ,2001 ,18(1):106938

第二篇：王偉簡介

王偉簡介

王偉，性別：女，出生時間：1977年5月26日，1996年畢業于長春煤炭工業學校師范專業，2006年學習漢語言文學，2009年畢業于渤海大學中文系，本科學歷。

教學中潛心鉆研教材教法，廣采他山之石。先后參加南票區、葫蘆島市教師培訓。課前，她圍繞新課改理念，深刻領會新課標內涵，準確把握、認真鉆研教材，制定科學合理的教學目標。課堂中，她把各種教學方法有機地結合起來，閱讀教學做到融整體把握、突出重點、品味語言、領悟寫法為一體，實現師生、生生之間平等對話，合作交流，她的課因學生個性的張揚而美麗，因教學理念的前衛而精彩。多節公開課已錄入南票區教育局“名師俱樂部”。

她所帶的中隊常年堅持“陽光助殘”，幫助雙目失明的孤身盲人——楊振榮，多年來風雨無阻，從不間斷，孩子們與楊爺爺朝夕相處，不是親人，勝似親人。時光流轉，歲月更迭，雖然隊員們更換了一批又一批，但“雷鋒助殘中隊”陽光助殘活動始終如一，一如既往，陽光助殘的接力棒在一批又一批的隊員手中不斷地傳承著。“雷鋒助殘中隊”曾經被遼寧省評為“英雄中隊”，“雷鋒助殘中隊”的事跡先后在葫蘆島電視臺、遼寧電視臺、中央電視臺等各家媒體不斷播放。王偉本人參加了遼寧電視臺《中國好人》“你是我的眼”節目的錄制。辛勤耕耘換來累累碩果，多年來曾經榮獲“葫蘆島市基礎教育課程改革實驗工作先進個人”、“葫蘆島市優秀班主任”、“葫蘆島市骨干教師”、“葫蘆島市家長學校骨干教師”、“南票區優秀教師”，所帶班

級曾經榮獲“遼寧省英雄中隊”、“葫蘆島市紅旗中隊”、“葫蘆島市三好班級”、“南票區三好班級”，《我愛我班》被評為葫蘆島市優秀班會、《感恩》一課在南票區教學競賽中被評為優質課。

成績不能滿足，榮譽催人奮進。作為一名教師，覺得自己始終要踐行為人之道，從師之道。特別是在實施教師績效考核的今天，她覺得教師更要講敬業和奉獻。她始終就是這樣去做的，堅守著三尺講臺辛勤耕耘、開拓創新、默默奉獻。她相信她的未來不是夢，因為，在她的心中，學生永遠是天使，她就是為天使修補翅膀的人。

第三篇：邀請函王偉

主辦單位：清鎮市新發現信息周報

承辦單位：待定

贊助單位:

支持單位:

合作單位： 貴州天運成企業管理咨詢有限公司貴州六度文化傳播有限公司清鎮市市政府誠信辦(擬定)

尊敬的董事長/總經理

您好！我們誠摯的邀請您參加“新發現商務”論壇，期待您的光臨。論壇的核心是通過客戶的交流資源共享由此帶動的一系列其它領域的商務模式創新，幫助清鎮中小企業及個商界人士降低成本快速發展。我們將邀請本土的是人類經濟發展史中前所未有的科學技型、創新新型經濟。移動互聯網新技術、50年以來的第5個財富周期，每個周期的贏家往往比上一個周期的贏家創造更大的財富。新的贏家不斷涌現，把握新的財富周期、順應行業趨勢、利用移動互聯網，中小企業就能實現快速成長。移動智庫，包括政府領導、知名學者、戰略管理專家和新經濟營銷專家等，共同為中小企業出謀劃策，幫助中國的中小企業快速建立渠道、快速樹立品牌、快速營銷突破、順應產業趨勢，智庫在全國開展巡回活動，幫助中小企業快速成長。

【會議時間】：2011年 月日星期六 下午13:30

【會議地址】：清鎮市東風發電廠新發現廣告四樓

【參會對象】：僅限企業法人、董事長、總經理、清鎮市內個體戶。

【參會要求】：憑邀請函參加會議。僅限一人參加，無邀請函謝絕入場、參會企業商家客戶均有機會獲得新發現提供的廣告支持及企業管理咨詢服務……

【會議內容概述】：廣告與產品的利潤關系;中小型企業如何做有效宣傳廣告定位;清鎮市目前的各類廣告運作模式解析；企業主如何選擇適合自己的廣告，如何應用廣告開發新市場建立銷售渠道，廣告與商人，參會嘉賓確認回執單

要求：請填寫好回執單并加蓋公章回轉至0851-2529277（請及時回執，座位有限）會務專線：熱線電話：0851-2529277***劉先生

第四篇：周口市電化教育先進個人事跡材料 西夏二中 王志偉

周口市電化教育先進個人事跡材料

西華縣西夏鎮第二初級中學

王志偉

王志偉，男，現年39歲，畢業于河南教育學院，中學二級教師，在西華縣西夏鎮第二初級中學工作。上班以來，一直擔任學校八年級的英語教學工作，據學校工作的需要，我還兼職負責學校的多媒體教室、電腦室、衛星接收室和 光盤播放室的管理和維護工作。自從去年我縣實施義務教育電教裝備薄改以后，我還負責學校的網絡設備和教室教學一體機的日常管護工作。

作為學校一名普通的教育工作者，在工作上，勤勤懇懇，無私奉獻。辛勤的付出，工作中認認真真。得到了上級和學校領導及同事們的信任與尊重。在我的日常管護下，學校的電教設備完好無損，運行正常。不僅保障了學校電教工作的正常開展，還多次成功地舉辦了縣級優質示范課的評選活動。得到縣局和學校領導的表揚和肯定。

信息技術變革教育。2010年，國務院審議通過了《國家中長期教育改革和發展規劃綱要(2010-2020年)》。《綱要》中明確提出：信息技術對教育發展具有革命性影響，必須予以高度重視。到2020年，基本建成覆蓋城鄉各級各類學校的數字化教育服務體系，促進教育內容、教學手段和方法現代化。充分利用優質資源和先進技術，創新運行機制和管理模式，整合現有資源，構建先進、高效、實用的數字化教育基礎設施。加快終端設施普及，推進數字化校園建設，實現多種方式接入互聯網。重點加強農村學校信息基礎建設，縮小城鄉數字化差距。

針對以上情況，我深感責任重大。作為一名青年教師，在政治思想方面，要讓自己健康向上，正確引導和影響身邊的同事和學生。在業務上，我積極參加市縣舉行的各種培訓和學習活動。還通過電視、互聯網了解國家大政方針，時刻把教育政策和正確的輿論導向放在第一位，在平凡的工作中，自覺地用中小學教師行為規范來約束自己。做好工作中的每一件事。

教育就是服務。做電教管理工作，我認為搞好服務就是本職工作。竭盡所能為全校師生服務，才是工作的重點。西夏二中是一所農村中學，辦學條件有限，教師隊伍缺乏。學校的電教設備在管理和維護工作方面不可或缺，學校領導比較重視，我也樂于付出。在學校領導安排任務之后，我總是第一時間出色完成，從不計個人得失。

微信公眾平臺，是傳播信息，凝聚情感的校園新媒體。2014年10月底，我校成功開通了微信公眾平臺，我擔負起每天的微信發布任務。通過微信平臺，我們及時傳播國家的教育政策和法規、校內外的教育信息和現代家教理念。微信平臺的開通，我們加強了家校聯系，提升了辦學品質。得到了上級領導和社會的好評。

強化信息技術應用。提高教師應用信息技術水平，更新教學觀念，改進教學方法，提高教學效果。2014年底，周口市信息技術能力提升國培教育工程動員會在西華召開。我作為西夏二中的教師代表參加了西華縣國培輔導教師培訓班。在培訓班上，從北京奧鵬專家那里學到了新的教育理念。再次感到現代信息技術教育在教育發展中的重要性。日前，國培工作正在積極推進。我在做好本職教學工作的同時，還在不斷認真做好我縣初中英語07班的國培輔導工作。

為了加快推行學校的網絡化、辦公計算機化、無紙化，我和同事積極配合。電腦和網絡一旦出現問題，我都積極主動去幫他們解決。由于自己的無私和熱心，我在學校也成了大忙人。幾年來，我在工作上的努力和付出，也得到了學校領導和同事們的一致好評。我個人認為，作為一個人還是多一份善良為好，幫助他人，快樂自己。

西夏二中自從接了網絡光纖以來，我利用網絡這個“平臺”，建立了校園教師課改交流QQ群。利用網絡，本校教師可以相互交流教學心得，極大的提高了教師的電教操作技能。在滿足學生學習的同時，為我校信息技術的發展奠定了良好的基礎。

成績的取得，已屬過去。在今后教育教學管理工作中，我會更加珍惜機會、奮進不止，為辦好西華人民滿意教育事業，做出更大的貢獻！

第五篇：王志偉評李寶環的主題班會課

評李寶環的主題班會課

王志偉

1.目標：

這節課的目標制定的合理有效，貼地皮，接地氣；英雄在學生的心目中往往是遙遠的，觸不可及的，李老師的這節課從海林本土的英雄楊子榮出發，切入主題，學生易于接受，整節課不在于對英雄實際和精神的歌功頌德，而是結合學生實際從小處著手，潤物無聲的陶冶學生的情操，樹立正確的三觀。

2.策略：

（1）整體感知策略：列舉董存瑞、雷鋒、魯迅、袁隆平的事例，學生感知英雄，引入課題。

（2）小組討論策略：不單純講述楊子榮的事跡，而是組織學生討論，讓思維碰撞。

（3）媒體輔助策略：李老師精心搜索的楊子榮視頻，幫助學生深入了解英雄的精神。

（4）問題引領策略：李老師這節班會課的精彩之處，就在于問題提出的恰到好處，教師引導的水到渠成，學生在李老師的引導下思考老師的問題，發表自己的見解，陶冶了情操，升華了人格。

（5）氛圍感染策略：最后一環的宣誓，振奮人心，學生受到這種易氣氛的感染和熏陶。

3.評價：結合實際的問題可以再精心設計，再當時的氛圍中，有思維綁架的嫌疑！