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精準醫(yī)學與臨床病理學的發(fā)展

時間:2019-05-12 11:52:15下載本文作者:會員上傳
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第一篇:精準醫(yī)學與臨床病理學的發(fā)展

精準醫(yī)學與臨床病理學的發(fā)展

摘要:通過病因,發(fā)病的形態(tài)變化,功能的損害進行對疾病的發(fā)生過程和發(fā)展規(guī)律而進行研究的學科叫做病理學。而對疾病進行預防和治療,通常考慮個體之間的基因差異,環(huán)境導致的差異和個人生活方式的差異所影響的是屬于精準醫(yī)學,目前精準醫(yī)學主要是在某些癌癥方面發(fā)揮重要,并未將其應用到大部分疾病的診斷中。關鍵詞:精準醫(yī)學;臨床病理學

美國的總統(tǒng)奧巴馬在2015年1月在國情咨文中正式宣布在國策中增加“精準醫(yī)學計劃”,一個美國學者在2月通過雜志發(fā)表了關于精準醫(yī)學新計劃文章,提出精準醫(yī)學目前短期目標是為了使得癌癥的治療能有更好的新手段,而長期目標是為了讓其他醫(yī)療疾病能有更好的資料,提供更有價值的信息來促進醫(yī)療事業(yè)發(fā)展。1.精準醫(yī)學

(一)精準醫(yī)學的含義是以當今醫(yī)療為主要的基礎,然后隨著各種基因組測序技術,生物信息,大數據等新型應用的進步而交叉進行的新型醫(yī)學。精準醫(yī)學是通過蛋白質,基因等各種醫(yī)學技術,把人的數據和疾病的各種數據類型進行有標志性的分析和鑒定,并對它們進行應用,從而尋找正確的疾病產生原因和治療的關鍵點,并對每一種疾病的不同種狀態(tài)和過程進行分類和判斷,從而進行有限管理,實現對每種疾病的精準判斷,提高疾病治愈率和對[1]治療的效益。

(二)我國現如今在進行小康社會,更加注重全民健康的標準,開展了一系列關于健康保障的工程,針對全民健康需要,提出了要加快對國內醫(yī)藥品安全的監(jiān)督,以國產代替進口,從而降低醫(yī)療的成本;要發(fā)展精準醫(yī)學的技術,提高醫(yī)院的醫(yī)療技術水平;提高基層的醫(yī)療水平,加強規(guī)范基層醫(yī)院管理;推動經濟增長,實現全面小康社會,促進經濟發(fā)展水平。

(三)精準醫(yī)學總目標是為人民群眾提供更為貼心,精準,高效,便民的健康服務,建立起符合國際水準的精準醫(yī)學的研究體系,要把握住相關的核心價值技術,研發(fā)國產新型的設備,提高對重大醫(yī)療的防治水平,加快推進健康產業(yè)的發(fā)展,推動醫(yī)藥衛(wèi)生健康的改革,為全中國人民建設一個安全健康的社會。2.臨床病理學

2.1臨床病理學的含義

臨床病理學是用精準的判斷在臨床上實現對疾病的治療,常見的是對腫瘤細胞的增值進行遏制,從中促進癌癥細胞的分化和死亡。這便要求對疾病的判斷要有準確細致的分類,還要根據臨床的檢查,病理的變化,分子的診斷等一系列專業(yè)經驗來進行判斷。由于其專業(yè)的特殊性,不僅僅要求病理醫(yī)生學會關于對病理的診斷和解剖,還要對分子病理的結果進行有效的判斷。

2.2臨床病理學的作用

(一)病理學是以組織學的診斷作為基礎作用,組織學作為傳統(tǒng)的組織使用,是一種重要的發(fā)揮診斷作用的學科。只有在病理醫(yī)生正確判斷出各種不同疾病的生長級別,才能對疾病標識物進行有效的判斷,并做出準確的病理技術診斷。而病理醫(yī)生在組織學的基礎下進行分析,應用各種相應的技術和檢測方法對疾病做出更加準確的分析。在當今的醫(yī)療時代,臨床對病理學的診斷提出了更加嚴格的要求和更加嚴謹的態(tài)度,未來的病理報告是運用傳統(tǒng)的組織學和創(chuàng)新的病理學相結合,從而對臨床病理提供更加全面,準確和高效的病理報告。

(二)分子病理學在疾病分析中占據重要的地位。根據對疾病的判斷,分子病理的診斷技術是對傳統(tǒng)診斷的補充和完善。在面對疾病的隱藏性基因表達時,需要分子病理學對疾病進行更加深入和更加完善全面的表達。因此分子病理學在疾病的分析中占有核心地位,使得更加深入準確的,全面而又規(guī)范的對疾病進行有效的分析,提高對疾病的準確性判斷,以達到對疾病的更好控制。

(三)病理學的應用有利于揭示疾病的病理特征,早日發(fā)現疾病的問題,并為疾病的治療進行有效的治療。如對腫瘤患者進行檢測高危因素等預后分子指標,從分子水平判斷腫瘤的生物學行為及其預后的結果,能夠有效的提高對腫瘤患者的治療水平和提高對腫瘤疾病的判斷準確性。由于疾病的變化不穩(wěn)定性,所以依靠病理學對疾病的診斷,能夠有效的對疾病發(fā)生病變時進行預防和判斷,提高病人治愈率和對治療的信心。2.3臨床病理診斷的發(fā)展

臨床病理診斷不僅僅要求病理醫(yī)生對腫瘤進行診斷,而且還要求提供給每一位患者直接相關的信息必須是詳盡、精準、具個性化。在精確的醫(yī)學時代,要依靠醫(yī)生專業(yè)的技術和實踐經驗,還要對病理的設備進行升級,提高醫(yī)生的對病理的準確判斷,形成一個高要求,高標準的體系。在未來的病理報告中,不僅要做到提供準確的組織病理診斷,還要對分子病理精準診斷,為患者和醫(yī)生提供判斷。3.結束語

綜上所述,精準醫(yī)學時代的出現,對醫(yī)療水平的提高帶來了新的生機,也為病理科帶來了挑戰(zhàn)和發(fā)展。著名的鐘南山院士曾說過“臨床病理水平是衡量國家醫(yī)療質量的重要標志”。病理醫(yī)生在精準醫(yī)療的時代中將發(fā)揮著至關重要的作用,因為病理醫(yī)生不僅僅是醫(yī)學的希望,更多的是改善患者未來美好生活的希望。總而言之,精準醫(yī)學是轉變醫(yī)學研究的一大重點目標,是推動中國精準醫(yī)學計劃發(fā)展,實現全面小康的健康社會的又一新起點。即使現在精準醫(yī)學面臨許多嚴峻的挑戰(zhàn),但是通過醫(yī)學研究者的共同努力,一定可以推動具有中國社會主義特色的精準醫(yī)學計劃的有效實現。參考文獻:

[1]詹啟敏.中國精準醫(yī)學發(fā)展的戰(zhàn)略需求和重點任務[J].中華神經創(chuàng)傷外科電子雜志,2015,01(5):1-3.[2]羅莉.精準醫(yī)學與臨床病理學的發(fā)展[J].武警醫(yī)學,2016,27(2):109-112.[2]

第二篇:病理學臨床病例討論

病理學臨床病理討論

病例討論

(一)病史摘要:

李×,男,農民,38歲,與本村張××打架時,被張用棍棒猛擊左小腿后側腓腸肌處,該處皮膚略有損傷,事后小腿腫脹、疼痛難忍。第2天出現紅、腫、熱、痛,第3天體溫上升達390·5C。第4天下肢高度腫脹,下達足背,最大周徑為48cm,疼痛更甚,在皮膚裂口處流出血水。在當地醫(yī)院用大量抗生素治療,未見療效。第6天,左足拇趾呈污黑色。第10天黑色達足背,與正常組織分界不清。隨后到當地縣醫(yī)院治療,行左下肢截肢術。

病理檢查:

左下肢高度腫脹,左足部污黑色,縱行剖開動、靜脈后,見動、靜脈血管腔內均有暗紅色與灰白色相間的固體物阻塞,長約10cm,與管壁粘著。固體物鏡檢為混合血栓。

討論題:

病人所患何病,其發(fā)生機制是什么?

病例討論

(二)病史摘要:

男性,43歲,系突然死亡,由法院委托作病理解剖,檢查死亡原因。死者生前身體健壯,無任何疾患。1986年9月23日晚飯后曾帶其小孩外出游玩,晚11時回家后,被王××叫到馬××家解決家庭糾紛,至半夜2時回家,返家后即言不適,此時患者面色蒼白,出冷汗,胸悶不適,回家后一小時死亡。尸檢所見:

升主動脈及主動脈弓內膜散在有黃白色粥樣斑塊,左冠狀動脈內膜也有黃白色粥樣斑塊,管腔狹窄,前降支距動脈口2cm處有血栓形成,血栓長1.5cm,左心室輕度擴張,心肌未見梗死,肺、肝、脾、腎充血狀。

病理診斷:冠狀動脈(左前降支)粥樣硬化及血栓形成,主動脈粥樣硬化,左心室輕度擴大,肺、肝、脾、腎淤血。討論題:

該病人迅速死亡,你考慮死亡原因是什么?

病例討論

(三)病史摘要:

男性,25歲,于1990年4月23日因畏寒、發(fā)熱10天,胸痛、盜汗一周入院。10天前因夜間起床受涼后畏寒、發(fā)熱。7天前夜間突然感覺右胸下部疼痛,在說話、呼吸、活動時加重,同時夜間有盜汗。次

日去醫(yī)院檢查及胸部透視,以右側滲出性胸膜炎、胸腔積液收入院。入院后臥床休息,第10天下床在室內大便,便后上床,突然胸痛,隨之呼吸困難,全身紫紺,搶救無效,很快呼吸、心跳停止而死亡。尸檢所見:

右下肢輕度水腫,唇及指甲明顯紫紺。右胸膜有纖維性粘連并有結核病變,右肺呈暗紅色,質較實,切面亦呈暗紅色,含多量淡紅色泡沫狀液體。在右肺動脈內有一長5cm的血栓性栓子,表面干燥、粗糙,并有紅白相間的條紋,與肺動脈壁不粘連,阻塞肺動脈腔。

病理診斷:右肺動脈栓塞,右側結核性胸膜炎。討論題:

結合尸檢發(fā)現,解釋此病例由發(fā)病至死亡過程。病人死亡的原因是什么?

病例討論

(四)病史摘要:

女性,25歲,足月妊娠,于1998年2月16日10時,自然破膜,約10分鐘后,出現寒戰(zhàn)及呼吸困難。立即給予高流量氧吸入,地塞米松、阿托品和速尿等。因病情惡化,繼續(xù)給予阿托品、654-

2、氨茶堿、西地蘭。出現呼吸改變后,給予“呼吸三聯”藥物靜脈推注,行人工呼吸,心臟按摩,并給予“心臟三聯”藥物行心內注射,于2月17日清晨0時40分因搶救無效而死亡。尸檢所見:

雙肺明顯水腫、淤血及出血,部分區(qū)域實變,切面紅褐色,用刀刮之,用血性液體順刀流下。鏡下:肺部多數血管內可見數量不等的有形羊水成分,如胎糞、胎脂、角化物、及角化細胞等,但以角化物為多。大部分肺泡腔充滿水腫液,部分區(qū)域有出血,且較嚴重,肺泡腔內充滿紅細胞。全身各臟器充血水腫,心肌有變性。子宮足月妊娠,死胎,胎兒臍帶繞頸一周半,兩肺可見羊水吸入。

病理診斷:①雙肺羊水栓塞,肺水腫;②足月妊娠,死胎。討論題:

羊水栓塞的發(fā)生機制及產婦的死亡原因。

病例討論

(五)病史摘要:

王××,男性,32歲,農民,因右小腿腫脹疼痛兩天就診。兩天前右小腿輕微擦傷出現疼痛,自己在家拔火罐,貼傷濕止痛膏未奏效,小腿部出現明顯紅腫,繼而蔓延到右側大腿,隨到醫(yī)院診治。體檢:T:

38.40

C,P88次/分,R26次/分,Bp16/10kPa(120/75mmHg)。神志清楚,急性病容,皮膚鞏膜無黃染。腹部平軟。右側腰部輕度紅腫,右側大腿、小腿明顯腫脹,顏色暗紅,皮溫稍高,膝關節(jié)活動受限。實驗實檢查:WBC18×109/L,N0.90,尿和大便常規(guī)檢查未見異常。治療經過:入院后積極抗感染治療,采用大劑量抗生素靜脈滴注。入院當晚,病情惡化,病人出現煩躁不安,面色蒼白,出冷汗,四肢冰涼,脈搏細弱,血壓8/4kPa(60/30mmHg),隨既心跳停止,搶救無效而死亡。尸檢所見:

青年男尸,發(fā)育正常,營養(yǎng)良好。右側腋窩下可觸及腫大淋巴結3枚,右側腰部大片紅腫,右側大腿及小腿明顯腫脹,暗紅色,張力增高,周徑比左側分別增大5.4cm和3.8cm,足部出現輕度腫脹。切面可見血性液體滲出。腹腔內可見少量淡黃色液體,腹腔各臟器外觀未見異常。鏡檢:心肌細胞輕度腫脹,橫紋消失,胞漿內可見少量紅染顆粒。肝細胞輕度腫脹,可見多量粉染顆粒,部分肝細胞內可見圓形空泡。腎近曲小管上皮細胞腫脹,刷狀緣消失。右側腋窩下淋巴結內可見充血水腫以及大量中性粒細胞浸潤。各器官組織均可見明顯的血管擴張充血。右側大腿及小腿皮下組織和肌肉組織高度水腫,血管高度擴張充血,肌纖維之間空隙增大,在肌纖維和脂肪組織中可見大量中性粒細胞彌漫浸潤,部分皮下脂肪組織和肌肉組織壞死,陰囊和腰部病變基本同上。討論題:

⑴根據尸檢材料,作出病理診斷,并找出診斷依據。⑵結合病史討論疾病的發(fā)生發(fā)展過程和死亡原因。

病例討論

(六)病史摘要:

張××,男性,12歲,兩周前左側面部長一瘡癤,腫脹疼痛,數天后,被其母用針扎穿并擠出膿性血液。兩天后發(fā)生寒戰(zhàn)、高熱、頭痛、嘔吐,經治療未見好轉,且病情加重,昏迷抽搐而入院。

體檢:營養(yǎng)不良,發(fā)育較差,神志不清,T390

C,P140次/分,R35次/分。面部有一2cm×3cm的紅腫區(qū),略有波動感。

化驗:白細胞總數:22×109/L,中性粒細胞:0.87。血培養(yǎng)金黃色葡萄球菌陽性。尸檢摘要:

發(fā)育、營養(yǎng)差,面部有一2cm×3cm的紅腫區(qū),切開有膿血液流出。顱腔:大腦左額區(qū)有大量灰黃色膿液填充,腦組織壞死,有4cm×4cm×5cm的膿腔形成。切片觀察:腦組織壞死,大量中性粒細胞浸潤,并見肉芽組織。

討論題:

⒈根據資料對本病例作何診斷? ⒉本例腦部病變是怎樣引起的? ⒊從本病例中應吸取什么教訓?

病例討論

(七)病史摘要:

唐××,男,50歲。上腹部疼痛15年,常在飯后1~2小時疼痛發(fā)作,但近二年余疼痛無規(guī)律,近半年腹痛加劇,經常嘔吐。兩個月來,面部及手足浮腫,尿量減少,食欲極差。半小時前排黑色柏油樣大便,并嘔吐鮮血,突然昏到,急診入院。體檢:消瘦、面色蒼白,四肢厥冷,血壓:8/5kPa,心音快而弱。兩腋下及左鎖骨上淋巴結顯著腫大,質硬。

化驗:WBC5×109

/L,N0.70,L0.25,M0.04。患者入院后出血不止,血壓急劇下降,搶救無效死亡。尸檢摘要:

全身水腫,兩下肢及背部為甚。胸腹腔內分別有500ml淡黃色澄清液體。胃小彎幽門區(qū)有4cm×5cm×5cm腫塊一個,質硬,表面出血壞死呈潰瘍狀。取腫塊處胃粘膜作病理檢查,鏡下見局部正常胃粘膜破壞,異型細胞生長,細胞大,核大,染色深,可見不對稱核分裂像,腺上皮增生,腺體大小不一,排列紊亂,異型腺體已穿過粘膜肌層浸潤達胃肌層及漿膜。肝大、黃色、質軟、油膩,鏡下見肝細胞內有大小不等之圓形空泡,核被擠向一側,無異型性,蘇丹Ⅲ染色呈桔紅色。腎小管上皮細胞腫大,腎小管腔狹窄,腎小管上皮細胞內滿布針尖大小伊紅色顆粒。討論題:

⒈作出病理診斷,并按病變發(fā)展解釋患者出現各種臨床表現。

⒉肝、腎發(fā)生什么病變,分析其原因。⒊患者死亡原因是什么?

病例討論

(八)病史摘要:

患者,女,40歲,農民。一月前,出現咳嗽、咳帶血絲痰,半月前患者感乏力并發(fā)熱、喀血。四天前患者開始出現聲嘶,頭痛,頭暈,時有神志不清。

入院檢查:T380

C,P105次/分,R17次/分,BP16/10.6kPa,神志不清,瞳孔正常,頸部淋巴結可觸及。胸透發(fā)現左肺上葉肺不張。血常規(guī):RBC3.8

×1012/L,Hb75g/L,WBC15.8×109

/L。入院后一周,患者突然感覺左下胸銳痛,左胸濁音,呼吸音降低,胸腔穿刺放出400ml血性液體,胸水涂片,查見癌細胞。X線顯示左胸腔積液,左肺膨脹不全。患者全身情況差,治療無效而死亡。尸檢所見:

左鎖骨上淋巴結腫大,左胸腔內約有350ml黃色混濁液體。雙側肺門淋巴結均有灰白色瘤組織轉移。支氣管內有白色粘液和膿性分泌物,左支氣管和分支均被瘤組織浸潤并且被阻塞。左肺高度萎縮,肺表面及小支氣管周圍均有瘤組織浸潤,左肺上部近邊緣處有一膿腫,直徑3cm,右肺也有小的轉移性瘤結節(jié)。肺門淋巴結和縱隔淋巴結被瘤組織浸潤而粘連成塊,雙側鎖骨上淋巴結也發(fā)生轉移。鏡檢:見圓形或橢圓形分化極差的瘤細胞密布于支氣管壁內及周圍組織并散布于肺泡、血管和淋巴管內。肝:重1240g,表面有略突起的轉移性瘤結節(jié),直徑最大約0.5cm,鏡下見肝血竇內有多個小的瘤細胞群。脾、胰、腎中均見成群的瘤細胞浸潤。討論題:

⒈作出完整的病理診斷。

⒉病人為什么會出現聲音嘶啞?肺部出現肺不張和肺膿腫應如何解釋?

病例討論

(九)病史摘要:

李某,男,50歲。半年前,背米時突然感覺心前區(qū)疼痛,同時感左上臂、左肩疼痛,伴氣急、肢體冷、面色蒼白,出冷汗,經治療休息后緩解。以后,每當勞累后,心前區(qū)疼痛等上述癥狀時有發(fā)生。數周前上五層樓后,心前區(qū)劇痛,冷汗淋漓,以后出現呼吸困難、咳嗽、咳粉紅色泡沫痰等癥狀,聽診兩肺濕性羅音。今早晨解大便時,突然昏到,神志不清,經搶救無效,次日死亡。尸檢所見: 左心室肥大,左心室前壁有多個不規(guī)則白色瘢痕灶,其心內膜面有一拇指大附壁血栓。左冠狀動脈前降支粥樣硬化,其內血栓形成,血管腔閉塞。大腦左半球內小動脈粥樣硬化,小動脈瘤形成。左側內囊,見桃核大壞死灶(軟化灶)一個,并見多量出血。雙肺體積增大,切面可見泡沫狀液體自切面溢出。討論題:

⒈對本病例應作何診斷?

⒉請按病變發(fā)展過程、結合尸檢所見,解釋上述各種臨床表現。

⒊患者的死亡原因是什么?

病例討論

(十)病史摘要:

趙某,女,32歲。心悸、氣急、不能平臥一年,癥狀加重一周。患者幼時扁桃體經常發(fā)炎、發(fā)熱。1

2歲時出現兩膝關節(jié)紅腫疼痛,以后肩、髖、踝關節(jié)也相繼腫痛,呈游走性,反復發(fā)作,伴發(fā)熱。當時醫(yī)院檢查抗“O”增高,血沉加快。兩周后又出現心悸,活動后加重,經治療后有所好轉。20年來這些癥狀時好時發(fā),且日漸加重,紫紺明顯。近半年來出現夜間端坐呼吸,不能平臥。一周前心悸、氣促加劇,伴少尿、腹脹,雙下肢浮腫入院。

體檢:半臥位,兩頰暗紅,紫紺,P115次/分,R30次/分,Bp14/8kPa(105/60mmHg),體溫正常,兩下肢浮腫,右下肢為甚,且左下肢呈暗紅色。心尖搏動在左鎖骨中線第五肋間外2cm處,心前區(qū)聞及Ⅲ級收縮期雜音和Ⅱ級舒張期雜音,兩肺下葉聞及濕性羅音,以左下葉為甚。肝右肋下4cm,質地中等,有壓痛。

患者住院后雖經積極治療,但癥狀未見改善,昨日起床去廁所,突然氣急、紫紺加重,并發(fā)生休克,搶救無效死亡。尸檢所見:

①二尖瓣狹窄及關閉不全,左右心均擴大;②左肺見多處楔形實變區(qū)(灰紅色);③右腎有一楔形灰白色凹陷病灶;④肝、脾、肺淤血;⑤右下肢股靜脈血栓形成;⑥肺動脈主干的左分支內有4cm長,直徑1cm的血栓;⑦左心房后壁內膜粗糙,有瘢痕。討論題:

⒈作出病理診斷。

⒉以病理變化解釋患者的各種癥狀及體征。⒊患者死亡原因是什么?

病例討論

(十一)病史摘要:

張某,男性,62歲,因突然昏迷2小時而入院。患者10年前發(fā)現有高血壓,血壓24~34/13~16kPa。近年來常感心悸,尤以體力活動時顯著。近半個月來常覺后枕部頭痛、頭暈、四肢發(fā)麻。今晨上廁所時突然跌到,不省人事,左側上下肢不能活動并有小便失禁。

體檢:T380

C,P60次/分,Bp28/16kPa。神志昏迷,呼吸深沉,鼾聲大,面色潮紅,左側鼻唇溝較淺。頸項強直。心尖搏動明顯,呈抬舉樣,心濁音界向左略擴大,心律齊,主動脈瓣第二心音亢進。左側上下肢呈弛緩性癱瘓,腱反射消失。化驗:WBC18.5×109

/L,N0.80,L0.20。尿:蛋白(++),紅細胞(+),管型(+),腦脊液呈血性。

入院后給予吸氧、降壓藥、脫水劑及止血藥等治療,療效不明顯,患者昏迷不斷加深,繼之呼吸不規(guī)則,終因呼吸、心跳停止而死亡。尸檢所見: 腦右側內囊處可見3cm×2cm×2cm之血腫,局部腦組織壞死、出血,腦室內見大量凝血塊,腦橋、中腦部分區(qū)域亦可見出血灶。心臟增大約為死者右拳1.5倍,左心室壁顯著增厚,乳頭肌增粗。鏡檢:心肌纖維明顯變粗,核亦肥大。兩腎體積縮小,表面呈細顆粒狀,切面皮質變薄,皮髓質分界不清。鏡檢:入球小動脈及腎小球玻璃樣變,腎小管萎縮、消失,殘留腎小球及腎小管代償性肥大。腎間質纖維組織增生,散在淋巴細胞浸潤。脾中央動脈玻璃樣變。討論題:

⒈本病例患的是什么病?死亡原因是什么?

⒉請對心臟病變作出診斷,并指出其相應的癥狀和體征。

⒊腎臟病變與高血壓的關系如何?

病例討論

(十二)病史摘要:

患者劉××,男性,68歲,因心悸、氣短、腹脹、雙下肢浮腫五天來院就診。10年來病人經常出現咳嗽、咳痰,尤以冬季為甚。近五年以來,自覺心悸、氣短、活動后加重,有時雙下肢浮腫,但經過休息可以緩解。5天前因受涼病情加重,出現腹脹,不能平臥。病人有吸煙史48年。體格檢查:病人端坐呼吸,神智清楚,口唇紫紺,頸靜脈怒張,桶狀胸,心音遙遠,肝臟下緣在右鎖骨中線肋緣下4cm,劍突下8cm,脾臟在肋緣下可以觸及,腹部叩診可聽見移動性濁音,雙下肢凹陷性浮腫。化驗室檢查:WBC12.0×109/L,PaO29.8kPa(74mmHg),PaCO28.0kPa(60mmHg)。討論題:

⒈根據學過的病理學知識,為該病人作出診斷,并提出診斷依據。

⒉試分析病人患病的原因和疾病的發(fā)展演變過程。

病例討論

(十三)病史摘要:

患者王××,男性,59歲,10天前因高熱3天入院。入院前4個月以來,病人有咳嗽,痰中帶血,爾后出現胸悶、氣短,食欲不振,明顯消瘦,并時有低熱。于入院前3天突發(fā)寒戰(zhàn)高熱,體溫維持在380

C~400C之間。既往身體健康,吸煙37年。體格檢查:T380C,P92次/分,R26次/分,神志清楚,急性病容。皮膚可見出血點,脾臟腫大。左鎖骨上可觸及直徑1cm~2cm的淋巴結4枚,質地硬,無壓痛。實驗室檢查:Hb68g/L,WBC26×109

/L,N0.98。胸部拍片顯示左肺下葉主支氣管阻塞,近肺門處可見5cm×6cm大小的致密陰影,左肺下葉內可見一直徑4cm的空洞。入院后進行積極抗感染治療,但病情沒有緩解。24小時前心率增快,脈搏細弱,血壓下降,而后陷入昏迷,經搶救無效死亡。尸檢所見:

老年男尸,明顯消瘦,皮色蒼白,前胸及四肢皮膚可見多數出血點,左鎖骨上淋巴結腫大,質地較硬。雙下肢凹陷性浮腫。

⑴肺:見左肺門處有一不規(guī)則腫塊,6cm×5cm×5cm,質硬,切面灰白色。鏡檢:腫塊由異常增生的細胞構成,細胞呈巢狀排列,腫瘤細胞體積較大,巢周圍細胞呈短梭形,中間呈不規(guī)則形,病理性核分裂像多見,可見單個細胞角化,巢間為纖維組織。⑵肝臟:肉眼見包膜緊張,切面外翻,右葉被膜下見3個直徑2.5cm的灰白色結節(jié),中心可見壞死出血。鏡檢:灰白色圓形結節(jié)的組織結構與肺門腫塊相同。

⑶腎臟:肉眼可見被膜下有多數小膿點。鏡檢可見腎小管上皮細胞腫脹,內含大量紅染顆粒,皮質和髓質內可見多數小膿點。討論題:

⒈分析該病人患有哪些疾病?并找出診斷依據。⒉根據病史分析各種疾病的相互關系。

病例討論

(十四)病史摘要:

患者,男性,4歲。發(fā)熱、咳嗽、咳痰10天,近

2天加重,并出現哮喘。體檢:T390

C,P160次/分,R25次/分。患兒呼吸急促、面色蒼白、口唇發(fā)紺、精神萎靡、鼻翼扇動,雙瞳孔等大等圓,頸軟。雙肺散在中、小水泡音,心音鈍,心律齊。實驗室檢

查:WBC21×109

/L,N0.78,L0.17。X線檢查:左、右肺下葉可見灶狀陰影。

臨床診斷:小葉性肺炎,心力衰竭,入院后曾肌內注射青霉素、鏈霉素,靜脈輸入紅霉素等,病情逐漸加重,治療無效死亡。尸檢所見:

肺:左、右肺下葉背部散在實變區(qū),切面可見散在粟粒至蠶豆大小不整形灰黃色病灶。鏡下,病灶中可見細支氣管壁充血并有中性粒細胞浸潤,管腔中充滿大量中性粒細胞及脫落的上皮細胞,其周圍肺泡腔內可見漿液和炎癥細胞。討論題:

⒈臨床診斷是否正確?根據是什么? ⒉患者死因是什么?

病例討論

(十五)病史摘要: 男性,47歲,農民。浮腫、腹脹3個月,近一周加重。現病史:患者于4年前罹患肝炎,屢經治療,反復多次發(fā)病。近兩年全身疲乏,不能參加勞動,并有下肢浮腫。近3個月腹部逐漸膨脹,一周前因過度勞累同時大量飲酒,腹脹加重。患者食欲不振,大便溏瀉,每日3~4次,小便量少而黃。

既往史:患者常年嗜酒,除4年前罹患肝炎外無其它疾病。

體格檢查:面色萎黃,鞏膜及皮膚輕度黃染,頸部兩處有蜘蛛痣,心肺未見異常。腹部膨隆,腹圍93cm,有中等腹水,腹壁靜脈曲張,肝臟于肋緣下未觸及,脾大在左肋緣下1.5cm。下肢有輕度浮腫。

實驗室檢查:RBC3.27×1012/L,Hb70g/L;血清總蛋白52.3g/L,白蛋白24.2g/L,球蛋白28.1g/L;黃疸指數18單位,谷丙轉氨酶102單位。X線食管靜脈造影提示食管下段靜脈曲張。臨床診斷:肝硬化(失代償期)。討論題:

⒈你是否同意本病的診斷?為什么?

⒉病人為什么會出現腹壁靜脈曲張和食管下段靜脈曲張?請有病理學知識解釋。

⒊本例患者的黃疸、腹水、浮腫、脾大怎么產生的? ⒋本例肝臟可能出現哪些大體和鏡下改變?

病例討論(十六)病史摘要:

女性,7歲,全身浮腫4天,呼吸困難1天,于1969年10月19日急癥入院。患兒于本月13日早晨起床時兩眼瞼開始出現輕度浮腫,后逐漸加重,并遍及顏面、四肢以及全身,尿量減少,但一般情況尚好。至15日夜間開始出現呼吸困難伴有輕度發(fā)熱,自述兩側上胸痛。入院當天下午,呼吸困難明顯加重,無尿。患兒于兩月前下肢發(fā)生多個膿皰瘡,至今仍有少數未愈,余無特殊病史。

體格檢查:T380C,P124次/分,R42次/分,Bp20/8kPa。營養(yǎng)、發(fā)育中等,煩躁,呼吸困難,不能平臥,呈急性病容,口周發(fā)紺,鼻翼扇動,全身有凹陷性水腫,兩下肢有少數膿皰瘡。兩側頸靜脈輕度怒張。心界稍擴大,心音弱,無雜音,心率124次/分,律齊,兩肺可聞及少許濕羅音。腹部膨隆,有輕度移動性濁音,肝右肋下5cm,邊緣鈍,質地中等,有壓痛。

實驗室檢查:血象:RBC3.6×1012/L,Hb96g/L;WBC13.9×109/L,N0.74,L0.23,M0.01,E0.02。尿常規(guī):蛋白(+++),紅細胞(++),WBC1~3個/低倍,顆粒管型0~1個/高倍。酚紅試驗:2小時酚紅排泄總量45%,血非蛋白氮37.2mg/dl,血沉1小時

26mm。X線:心臟擴大、心搏減弱,肺呈淤血表現。入院后經利尿、強心治療后,病情未見好轉而死亡。尸檢所見:

兩側腎臟呈對稱性腫大,包膜緊張,表面光滑,色澤紅,表面有小點狀出血,切面皮質增厚,紋理模糊,但與髓質界限清楚。心臟擴大,肺呈淤血、水腫改變。討論題:

⒈對本病作出病理診斷,其在組織學上可有哪些改變?

⒉根據病理變化解釋臨床癥狀。⒊該病例死因上什么?

病例討論(十七)病史摘要:

李×,女性,28歲,已婚,惡寒發(fā)熱6天,腰酸、腰痛、尿頻、尿急、尿痛3天。現病史:3天前覺腰部酸痛難受,排尿次數增多,每天多達20次左右,尿頻、尿急、尿痛癥狀明顯。既往史:半年前曾有“膀胱炎”病史,出院后,每日小便次數比往日增多,無尿痛。

體檢:T400

C,P135次/分,R25次/分,Bp17.95/9.98kPa。心肺無異常,肝脾未觸及,右腎區(qū)(脊肋角)有明顯叩擊痛。實驗室檢查:WBC17.95×109

/L,N0.85,L0.15。尿常規(guī):蛋白(+),紅細胞(+),白細胞(+++),未發(fā)現管型。早晨中段尿培養(yǎng)有大腸桿菌生長,菌落計數11萬/ml尿。討論題:

⒈患者所患何病?其診斷依據是什么? ⒉試分析膀胱炎與本次發(fā)病的關系如何? ⒊本例尿檢查未發(fā)現管型,為什么?

病例討論(十八)病史摘要:

患者,女,60歲,一年前有不規(guī)則陰道出血及大量惡臭白帶。半年前開始腹痛,有膿血便,量不多,每日3~4次,同時有里急后重,無發(fā)熱,食欲尚可。3個月前左下肢腫脹并伴有腰骶部疼痛,小便正常,無咳嗽咳痰。30年前曾有結核病史。體檢:Bp20/12kPa(150/90mmHg),輕度貧血貌,體質消瘦,心肺(-)。腹稍脹,下腹部有壓痛,左側腹股溝有一不規(guī)則腫塊,固定不易推動,下腹壁及左下肢水腫。肛門指診:直腸前壁可觸及一稍硬而不規(guī)則的腫塊,有壓痛,指套帶血。婦科檢查:外陰水腫,陰道不規(guī)則狹窄,宮頸外口有一菜花狀腫塊突入陰道,并浸潤陰道壁。活檢,病理報告為鱗狀細胞癌。化驗檢查: 血常規(guī):Hb85g/L;WBC5.6×109/L,N0.72,L0.28。大便常規(guī):膿血便,紅細胞(+++),膿細胞(+),紅細胞(++)。討論題:

⒈該病人應診斷為什么病? ⒉膿血便的原因是什么?

⒊下肢水腫的發(fā)生機制是什么?

病例討論(十九)病史摘要:

女性,30歲,農民。1年前人工流產一次,近2個月來陰道不規(guī)則出血,時常有咳嗽、咯血、胸痛、頭痛、抽搐等癥狀,伴全身乏力,食欲減退。死前一天早晨起床后突感頭痛,隨即倒地,昏迷,瞳孔散大,呼吸、心跳停止。尸檢所見:

患者消失貧血狀,腹腔內有血性液體約400ml,雙側胸腔中也有同樣性狀液體100ml。

心臟:重320g,外膜光滑,未見增厚、粘連。脾臟:重160g。肝臟:重3200g,表面有數個1~2.5cm直徑的出血結節(jié),結節(jié)中心出血壞死,中心凹陷,形成癌臍,切面上見數個出血結節(jié),有融和。肺:表面有1cm直徑的結節(jié)伴出血、壞死。左右兩側腎各120g,未見病變。腦表面有多個出血性病灶,直徑1.5cm,腦組織水腫。子宮后壁見直徑3cm的出血性結節(jié),質脆而軟,浸潤子宮肌層并穿破肌壁達漿膜,在子宮后盆腔也有不規(guī)則出血性腫塊,兩側卵巢上可見黃體囊腫。討論題:

作出病理診斷并解釋臨床表現。

病例討論(二十)病史摘要:

患者,女性,31歲,因心悸、怕熱多汗,食欲亢進,消瘦無力,體重減輕,來院就診。

體格檢查:T370C,P98次/分,R20次/分,Bp20/9.3kPa(150/70mmHg)。雙眼球突出,瞼裂增寬。雙側甲狀腺彌漫性對稱性中度腫大,聽診有血管雜音。心率98次/分,心尖部可聞及Ⅰ級收縮期雜音。肺部檢查無異常發(fā)現。腹平軟,肝脾未觸及。

基礎代謝率+57%(正常范圍-10%~+15%)。T3、T4水平升高,甲狀腺攝I131率增高。入院后行甲狀腺次全切術,標本送病理檢查。病理檢查:

肉眼見甲狀腺彌漫性腫大,但仍保持甲狀腺原有形狀,表面光滑。切面結構致密,略呈分葉狀,質實,灰紅色,呈新鮮牛肉狀外觀。

鏡下可見甲狀腺濾泡彌漫性增生,上皮細胞呈柱狀,并形成乳頭狀結構突向濾泡腔。濾泡腔較小,腔內膠質少而稀薄,靠近上皮邊緣有成排的吸收空泡。間質血管豐富,明顯充血,有大量淋巴細胞浸潤并有淋巴濾泡形成。討論題:

根據上述資料,請寫出病理診斷并提出診斷依據。

病例討論(二十一)病史摘要:

患者,男性,6歲,一個多月來反復發(fā)熱,食欲減退,盜汗。近一周頭痛,噴射性嘔吐,嗜睡,陣發(fā)

性強直性抽搐。實驗室查:WBC13×109

/L,N0.70,L0.12,M0.17,E0.01。血沉48mm/h。T40.20C,住院15天,治療無效,病情惡化,呼吸困難,搶救無效死亡。尸檢所見:

右肺上葉下部肺膜下有一灰白色病灶,并與下葉肺膜粘連,切面病灶大小為2.5cm×1.5cm,全為干酪樣壞死物。兩肺均可見多數散在的灰白色粟粒大小結核結節(jié)。肝脾均可見粟粒樣結核結節(jié)。

腦膜有多量散在的粟粒結節(jié),腦回扁平,腦溝變淺,腳間池、腦橋池等處的蛛網膜下腔內存有多量灰黃色膠凍樣液體。切面腦室擴張,室管膜表面有灰白色滲出物附著,兩側間腦實質有小軟化灶。鏡下見腦膜普遍充血水腫,有多量結核結節(jié),并有大量淋巴細胞等炎性細胞浸潤。討論題:

患兒死前作何診斷?其依據是什么?

病例討論(二十二)病史摘要:

患者,男性,18歲。因持續(xù)性發(fā)熱伴腹瀉8天,今日解黑便一次而入院。體檢:急性病容,表情淡漠。

體溫:39.90

C,脈搏:90次/分,呼吸30次/分,肝肋下2cm,質軟。脾肋下1.5cm,質軟。白細胞總數3.3×109/L,中性粒細胞0.65,淋巴細胞0.32。肥達反應陽性。血培養(yǎng)有傷寒桿菌。入院二周后熱退,食欲好轉,某日中午進食后而感腹脹,傍晚突然出現下腹劇烈疼痛,伴惡心嘔吐。檢查:腹肌緊張,右下腹壓痛、反跳痛明顯。體溫:38.50

C,白細胞

總數13×109

/L,中性粒細胞0.85,即進行手術,術中見回腸下端穿孔。討論題:

⒈對該患者作何診斷?為什么? ⒉你從本病例中應吸取哪些教訓? 病例討論(二十三)病史摘要:

患者,21歲,因頭痛、發(fā)熱、嘔吐急癥入院。患者于25天前因受冷感冒頭痛,伴畏寒、發(fā)熱(體溫不詳),以后頭痛加劇,呈刺跳痛,尤以前額為甚。10天前開始嘔吐,呈噴射狀,內容為事食物,無血,當地醫(yī)院按感冒治療(藥物不詳),癥狀無改善。2天前感雙下肢麻木,乏力,轉入我院。既往無特殊病史。

體檢:T400C,P110次/分,Bp19.2/9.6kPa(114/72mmHg)。患者痛苦病容,嗜睡,神志恍惚與醫(yī)生合作欠佳,雙瞼無水腫,瞳孔等大對稱,對光反射存在,頸硬,無頸靜脈怒張。心、肺檢查未見異常,腹部稍凹陷,全腹有壓痛。神經系統(tǒng)檢查:淺反射及腹壁反射減弱,淺感覺存在,深反射減弱,膝反射及跟腱反射未引出,頸強直,克氏征、布氏征陽性。化驗檢查:WBC9.2×109

/L,N0.59,L0.41。腦脊液檢查:壓力高,糖低,蛋白高,細胞數高,氯化物顯著減少,查見抗酸桿菌。X線檢查:雙肺上部各有一個結節(jié)狀陰影,邊緣見模糊的云霧狀陰影。討論題:

⒈患者的主要病變是什么?診斷依據是什么? ⒉本例的癥狀、體征、化驗陽性是怎樣引起的? ⒊本例各病之間的關系如何?

病例討論(二十四)病史摘要:

患者,男,37歲,因上腹部腫塊4月余來我院門診檢查。胸透見橫膈抬高,以右側為著。胸透后下樓時突然面色蒼白,四肢厥冷,即緊急搶救。

體檢:端坐呼吸,不能平臥。心音弱,心率慢,血壓測不到,肺呼吸音粗糙。肝左葉腫大,下界劍突下三指,有飽滿感,邊緣清楚。經搶救無效,半小時后死亡。

尸檢所見:

心包顯著擴大,18cm×16cm×12cm,內含暗紅色“膿液”約1500ml。肝重800g,左葉中部見一12cm×10cm×10cm之單房性“膿腫”,內含咖啡色粘稠“膿液”,有似爛魚腸的腐臭味。“膿腫”膈面肝組織及膈肌菲薄,與心尖部心包緊密粘連,并見一通向心包腔的穿孔(直徑1cm)。回腸末端有數個潰瘍,形狀、大小不一,最大者2cm×1.5cm,邊緣略呈潛行性。腹腔內含草黃色液體約70ml,腸系膜淋巴結普遍腫大,質軟。

顯微鏡檢查:于肝“膿腫”及腸潰瘍周邊部分查見阿米巴滋養(yǎng)體。討論題:

⒈從病理學角度分析本病的發(fā)生、發(fā)展及死亡原因?

⒉本病例的病理診斷及其依據是什么? ⒊總結本病例的病理臨床特點?

1.臨床檢查參考值:

成人心臟 男:300g 女:250g 2.臨床檢查參考值: 白細胞計數及分類

成人(4~10)×109

/L(4000~10000/μl)

兒童(5~12)×109

/L(5000~12000/μl)中性粒細胞(N)0.50~0.70(50%~70%)嗜酸性粒細胞(E)0.005~0.05(0.5%~5%)淋巴細胞(L)0.20~0.40(20%~40%)單核細胞(M)0.03~0.08(3%~8%)紅細胞計數(RBC)

男性4.0~5.5×1012

/L(400萬~550萬/μl)

女性3.5~5.0×1012

/L(350萬~500萬/μl)血紅蛋白(Hb)

男性120~160g/L(12~16g/dl)女性110~150g/L(11~15g/dl)3.臨床檢查參考值:

體溫(T)36.3~37.30

C 血壓(BP)

收縮壓≤18.6kPa(140mmHg)舒張壓≤12kPa(90mmHg)心率(P)60~100次/分 呼吸頻率(R)16~20次/分 4.臨床檢查參考值: 動脈血氧分壓(PaO2)

12.7~13.3kPa(95~100mmHg)動脈血二氧化碳分壓(PaCO2)4.7~6.0kPa(34~45mmHg)5.臨床檢查參考值:

血清總蛋白60~80g/L(6~8g/dl)白蛋白40~55g/L(4~4.5g/dl)球蛋白20~30g/L(2~3g/dl)白蛋白 /球蛋白比值1.5~2.5:1 谷丙轉氨酶Reitman法(40Kμ)6.臨床檢查參考值:

2小時酚紅排泄總量>55%

血非蛋白氮14.3~25.0mmol/L(20~35mg/dl),紅細胞沉降率 Westergren法 男性≤10mm/h 女性≤15mm/h

第三篇:臨床醫(yī)學教育與醫(yī)學人才培養(yǎng)

臨床醫(yī)學教育與醫(yī)學人才培養(yǎng)

臨床教學是高等醫(yī)學院校學生在校期間的終末環(huán)節(jié),它為理論提供了實踐的機會,是醫(yī)學生向臨床醫(yī)生過渡的最重要階段。可為培養(yǎng)高質量的合格醫(yī)學人才奠定堅實的基礎。本文提出了強化臨床醫(yī)學教育與醫(yī)學人才培養(yǎng)的重要性,進一步探索臨床教育教學方法及完善臨床教育教學管理策略。

醫(yī)學教育分為基礎醫(yī)學教育與臨床醫(yī)學教育兩大部分,是實踐性強的專業(yè)技能教育。臨床階段的學習是培養(yǎng)醫(yī)學生職業(yè)道德素質、專業(yè)知識結構、臨床綜合技能的重要途徑,是醫(yī)學生從事臨床工作之前職業(yè)訓練的重要階段,是深化理論知識、提高綜合素質、培養(yǎng)獨立工作能力的重要環(huán)節(jié)[1]。作為高等醫(yī)學院校,是基礎教育和臨床教育相結合的一個整體。基礎教育重在理論教育,而臨床教學是高等醫(yī)學院校學生在校期間的終末環(huán)節(jié),它為理論提供了實踐的機會,是醫(yī)學生向臨床醫(yī)生過渡的最重要階段。所以臨床醫(yī)學教育為培養(yǎng)高質量的合格的醫(yī)學人才奠定了堅實的基礎。

強化臨床教育教學的重要性臨床教師的水平、教學方法等直接影響了醫(yī)學人才的培養(yǎng)質量。附屬醫(yī)院本身承擔繁重的醫(yī)療工作,同時還承擔醫(yī)學院大量的臨床教學任務。教學意識淡化是臨床教學工作中一個長期存在的問題。如何增強臨床醫(yī)生的教學觀念、明確醫(yī)教研并重的意義,樹立“醫(yī)療是命脈、教學是基礎、科研是精髓、質量是根本”的意識顯得尤為重要。

為了提高臨床教學意識,我們通過召開教學經驗交流會,使醫(yī)院堅定醫(yī)教研并重的理念,認識到臨床教學對提高醫(yī)院醫(yī)療水平、科研能力等醫(yī)院內涵建設方面具有不可替代的促進作用,為醫(yī)院的長遠發(fā)展起到推動作用。教學工作同時可以督促臨床教師不斷學習,多方面了解國內外學術領域新進展,提高自身業(yè)務水平,增強自身的綜合實力,從而極大地促進教學意識的提高。有人把醫(yī)、教、研三者的地位和作用概括為:醫(yī)療是今天,科研是明天,教育是未來。重視臨床醫(yī)學教育,培養(yǎng)高質量的醫(yī)學人才,是保證附屬醫(yī)院可持續(xù)發(fā)展的基石。

探索臨床教育教學方法 重視崗前教育 醫(yī)學生由課堂到病房,角色發(fā)生了變化,崗前教育就顯得十分重要。為了使醫(yī)學生緊跟醫(yī)學發(fā)展的新形勢,應將“醫(yī)師資格方案”、“執(zhí)業(yè)醫(yī)師資格實踐技能考核實施”、“實習帶教管理與醫(yī)療保障制度改革同步”[2]等相關內容,以及“醫(yī)療安全與法制教育”、“缺陷病歷分析”、“醫(yī)院感染知識”、“突發(fā)公共衛(wèi)生事件應急條例”等內容納入實習大綱,不斷完善崗前培訓的內容,并對醫(yī)學生進行入科前指導、觀摩實際操作等,為他們進入科室、病房后的系統(tǒng)培訓打好基礎。

加強臨床技能訓練,提高教育教學質量 在教學實踐中,應把臨床基本技能教學改革作為教學研究的重點,使畢業(yè)實習學生熟練掌握基本技能。近年來,作為附屬醫(yī)院,我院將“學生的臨床技能訓練和臨床實踐能力的培養(yǎng)”放在了重要位置。第一,安排專人負責學生技能操作訓練。第二,我們建立了適合臨床教學的臨床技能培訓中心,為學生的學習提供了良好的培訓場所。第三,擬定了適合我院的一對一操作技能培訓制度,對專業(yè)教研室的老師進行嚴格選拔,對所在科室實習學生專一負責,并要求學生對一些基本的技能操作如四大穿刺、消毒鋪巾、切開縫合、換藥拆線等必須熟練掌握。我們對帶教老師進行定期的考核,提高了臨床教學質量和教學效果。

臨床綜合能力多站考試(簡稱MSECS)的教學,重視臨床實踐能力 臨床綜合能力多站考試(Multi-ple Station Examination of Clinical Skills,簡稱MSECS)是以檢查基本技能和臨床思維為重點的一種新型考試方法,在一定程度上能克服重讀書輕實踐的弊端,能更全面地評價學生的知識和技能[3]。考試客觀、公正,愛傷觀念強,且考試方式、內容與執(zhí)業(yè)醫(yī)師考試接軌。以往臨床技能考試方法的缺陷與不足,已被越來越多的國內外醫(yī)學教育專家們關注和重視。

學生多選題考試的得分與重要的臨床技能無關。在此類考試中死記硬背下來的知識無法保證至臨床實踐中仍能記住并得到運用,存在著考試方法本身的缺陷。通常采用的由各實習醫(yī)院帶教醫(yī)師對學生臨床技能評分的做法也不盡人意。我們具體的做法可以與執(zhí)業(yè)醫(yī)師的考試形式相同。MSECS的應用是提高教學質量的有效方法。其考核重點是基本技能和臨床思維能力,在一定程度上促使學生既重視理論學習更重視臨床實踐,應成為以后考核方式改革的趨勢。

完善臨床教育教學管理 促進教育教學管理的規(guī)范化和制度化 在臨床教育教學實踐中,我院一貫堅持以質量為核心,根據各主要教學環(huán)節(jié)的標準及臨床教學基地建設的基本要求,制定了一系列教學管理規(guī)章制度,如《教學規(guī)范手冊》、《臨床醫(yī)學實習醫(yī)師職責》、《實習生管理規(guī)定》、《實習醫(yī)師守則》、《醫(yī)患溝通規(guī)范手冊》等文件。

并根據形勢發(fā)展的需要不斷完善教學病種收治制度、教學查房制度、疑難病例討論制度、實習醫(yī)生病歷書寫制度等,形成了規(guī)范有效的教學質量保證機制。對規(guī)范日常教學管理,保證教學有序進行以及提高教學和管理質量提供了制度保障。在臨床教育教學過程中,我們以教學環(huán)節(jié)管理為切入點,按照理論授課、課間見習、畢業(yè)實習及考核考試等不同的教學環(huán)節(jié)進行督導,特別注重發(fā)揮教研室的主導作用,確保教育教學質量。

充分調動教師教學的積極性,加強教研室及師資隊伍建設 在臨床教育教學過程中,教師的工作態(tài)度、業(yè)務水平、教學方法等與教學效果息息相關。臨床教師具有醫(yī)師和教師雙重身份,尤其是青年教師往往存在教學經驗不足,臨床帶教的規(guī)范性、系統(tǒng)性等方面亦存在差距,這就需要提高臨床教師的教學水平與素質。具體方法:對分配來我院工作的青年醫(yī)師進行教育理論崗前培訓,使其明確自己的教師職責。具體培訓內容包括思想道德、專業(yè)水平、教學能力和基礎理論等方面,可選派教學經驗豐富的教授進行專題講座或示范教學查房,嚴格要求青年教師規(guī)范教學文檔,抓好教學環(huán)節(jié)的培訓。教研室主任要對青年教師嚴格考核,經同意并試講通過后才允許進行理論授課。通過培訓可以激勵青年醫(yī)師刻苦學習,苦練教學和醫(yī)療基本功,達到充實和更新理論知識、拓寬知識面、全面提高教師素質的目的。

我院實施業(yè)績量化考核獎懲機制,對教學工作的先進科室和優(yōu)秀教師進行表彰和獎勵,逐步實現將教學工作量與獎勵及職稱評定掛鉤,充分體現了對臨床教師辛勤工作的尊重和肯定。鼓勵教師參與教學研究和創(chuàng)新,從而對本科臨床教學起到了促進、強化及提高的作用。我院根據專業(yè)特點設診斷學、內科學、外科學、婦產科學、兒科學、醫(yī)學影像學、口腔科學等27個教研室,教研室設置齊全。目前我院本科臨床教學及實習帶教教師全部具有本科以上學歷,并且相當一部分老師為碩士及博士學歷,注重師資隊伍梯隊建設,為提高臨床醫(yī)學教育教學水平奠定了堅實的基礎。

對臨床教育教學進行監(jiān)督指導提高教育教學質量是教學工作的核心,對其實施有效的質量監(jiān)督是促進教育教學質量不斷改進、提高和完善的重要手段。一個完整的教學質量監(jiān)督體系總體包括兩個方面:一是內部監(jiān)督體系和自我評價,二是上級主管部門的監(jiān)督和評價。

附屬醫(yī)院建立完善的教學質量監(jiān)督體系是保證教學質量的有效環(huán)節(jié),是實現良性循環(huán)運行機制的重要保證,可推進醫(yī)院自身教育質量、教學水平的不斷提高。實施內部教學質量監(jiān)督不僅要對教學過程或教學部門進行監(jiān)督,還要對醫(yī)院的各個教學工作環(huán)節(jié)進行監(jiān)督,從而發(fā)現潛藏的或由來已久的影響教學質量的各種問題,并尋找出積極可行的解決辦法[4]。

小結:醫(yī)學院校教學管理部門對臨床教學進行監(jiān)督指導,可以使附屬醫(yī)院和教學醫(yī)院教學工作進一步規(guī)范化、科學化,使教學管理部門、教師和學生按行為準則辦事,并可及時發(fā)現問題、解決問題和總結經驗,促進教學管理工作的持續(xù)改進,推動教學各環(huán)節(jié)的工作協調進行,最終達到不斷提高教學質量的目的。更多相關參考:。

第四篇:血栓的病理學研究及與臨床聯系

血栓的病理學研究及與臨床聯系

一、? 下列關于混合血栓的說法,錯誤的是()C ? 血栓的類型不包括()D ? 混合血栓的鏡下構成,說法不正確的是()D ? 下列關于透明血栓的說法錯誤的是()C ? 下列關于白色血栓的說法,錯誤的是()B ? 股靜脈內較大的血栓完全機化需要多久()B ? 下列哪一項不屬于附壁血栓()B ? 下列關于紅色血栓的說法錯誤的是()A ? 下列關于白色血栓的形態(tài),說法錯誤的是()A ? 血栓的結局不包括()A

二、? 心血管內膜損傷導致血栓形成常見疾病不包括()B ? 下列哪種疾病不易形成血栓()D ? 正常血流中,紅細胞和白細胞在血流中的(),其外是血小板,最外層是血漿 B ? 有利于血栓形成的血流狀態(tài)改變不包括()C ? 靜脈血栓多見的原因不包括()C ? 內皮細胞損傷促進血小板的活化,表現為()D ? 血液凝固性增加的常見原因不包括()B ? 動脈和心臟血栓形成的原因是()B ? 血栓形成第一步是()A ? 靜脈血栓形成的原因是()A

三、? 血栓形成過程中,對于血小板黏集的說法,錯誤的是()C ? 在血栓形成過程中,血栓頭是指()D ? 血小板血栓鏡下特點,錯誤的是()C ? 在血栓形成過程中,血栓尾是指()B ? 血栓形成的起始點是()D ? 血栓形成過程中,血小板黏附的特點是()B ? ? 臨床上,常用()防治血栓性疾病,因其具有抑制血小板凝集等抗凝作用。A 血栓形成過程中,對于血小板的黏附說法錯誤的是()A

四、? 下列哪項不屬于血栓形成阻塞動脈血管后的臨床表現()B ? 腦萎縮的病理變化不包括()B ? 在血栓運行途徑中,隨血流方向通過主動脈系統(tǒng)和左心最常阻塞于()B ? ? ? ? ? ? ? 阻塞血管的異常物質成為栓子,下列不屬于栓子的是()D 血栓對機體不利的影響不包括()A 血栓對機體的影響取決于下列哪些因素()C 風濕性心臟病二尖瓣狹窄的病理表現可呈()A 體循環(huán)動脈栓塞血栓()來自于左心 D 在血栓運行途徑中,隨血流方向通過靜脈系統(tǒng)和右心可引起()A 血栓形成阻塞動脈血管后所致腦功能下降,其表現不包括()C

五、? 下列關于血栓形成的說法,正確的是()B ? 正常血液中存在凝血系統(tǒng)和抗凝血系統(tǒng),處于()狀態(tài) C ? 損傷的內皮細胞的促凝作用不包括()C ? 血栓形成的條件不包括()D ? 關于心血管內皮細胞的說法,錯誤的是()B ? 血栓性疾病的兩種病理過程包括()D ? 完整內皮細胞的抗凝作用不包括()A ? 在凝血系統(tǒng)中,凝血因子激活,產生(),形成微量的纖維蛋白沉著于心、血管內膜上,保證了血液潛在的可凝固性 A

第五篇:《臨床技術操作規(guī)范 病理學分冊》(范文)

《臨床技術操作規(guī)范?病理學分冊》

第1章 總 則

一、為提高病理學診斷質量,促進臨床工作,依據《中華人民共和國執(zhí) 業(yè)醫(yī)師法》精神,結合醫(yī)院病理科工作的特點,制定本規(guī)范。

二、醫(yī)院病理科和承擔醫(yī)院病理科任務的醫(yī)學院校病理教研室的主要臨 床任務是通過活體組織病理學檢查(簡稱活檢)、細胞病理學檢查(簡 稱細胞學檢查)和尸體剖檢(簡稱尸檢)等作出疾病的病理學診斷(或 稱病理診斷)。具有一定規(guī)模的病理科,應積極開展教學、培訓病理醫(yī) 師和科學研究等項工作。

三、病理學診斷是病理醫(yī)師應用病理學知識、有關技術和個人專業(yè)實踐 經驗,對送檢的患者標本(或稱檢材,包括活體組織、細胞和尸體等)進行病理學檢查,結合有關臨床資料,通過分析、綜合后,作出的關于 該標本病理變化性質的判斷和具體疾病的診斷。病理學診斷為臨床醫(yī)師 確定疾病診斷、制定治療方案、評估疾病預后和總結診治疾病經驗等提 供重要的、有時是決定性的依據,并在疾病預防,特別是傳染病預防中 發(fā)揮重要作用。

四、病理學診斷報告書(或稱病理診斷報告)是關于疾病診斷的重要醫(yī) 學文書。當涉及醫(yī)、患間醫(yī)療爭議時,相關的病理學診斷報告書具有法 律意義。病理學診斷報告書應由具有執(zhí)業(yè)資格的注冊主治醫(yī)師以上(含 主治醫(yī)師)的病理醫(yī)師簽發(fā)。各醫(yī)院可酌情準予條件適宜的高年資病理 科住院醫(yī)師試行簽署病理學診斷報告書。低年資病理科住院醫(yī)師、病理 科進修醫(yī)師和非病理學專業(yè)的醫(yī)師不得簽署病理學診斷報告書。

五、病理學檢查是臨床醫(yī)師與病理醫(yī)師為確立疾病診斷而進行的合作行 為,是有關臨床科室與病理科之間特殊形式的會診。臨床醫(yī)師和病理醫(yī) 師雙方皆應認真履行各自的義務和承擔相應的責任。

六、病理學檢查申請單是臨床醫(yī)師向病理醫(yī)師發(fā)出的會診邀請單。病理 學檢查申請單的作用是:臨床醫(yī)師向病理醫(yī)師傳遞關于患者的主要臨床 信息(包括癥狀、體征、各種輔助檢查結果和手術所見等)、診斷意向 和就具體病例對病理學檢查提出的某些特殊要求,為進行病理學檢查和 病理學診斷提供重要的參考資料或依據。病理學檢查申請單是疾病診治 過程中的有效醫(yī)學文書,各項信息必須真實,應由主管患者的臨床醫(yī)師 親自(或指導有關醫(yī)師)逐項認真填寫并簽名。

七、臨床醫(yī)師應保證送檢標本與相應的病理學檢查申請單內容的真實性 和一致性,所送檢材應具有病變代表性和可檢查性,并應是標本的全 部。

八、患者或患者的授權人應向醫(yī)師提供有關患者的真實信息(包括姓 名、性別、年齡、病史和可能涉及診斷需要的隱私信息)。病理醫(yī)師應 尊重和保護患者的隱私。患者或患者的授權人應保證其自送檢材的真實 性、完整性和可檢查性。

九、病理科應努力為臨床、為患者提供優(yōu)質服務,遵照本規(guī)范的要求加 強科室建設,制訂完善的科室管理制度,并實施有效的質量監(jiān)控。

十、病理科工作人員應恪盡職守,做好本職工作。病理醫(yī)師應及時對標 本進行檢查和發(fā)出病理學診斷報告書,認真對待臨床醫(yī)師就病理學診斷 提出的咨詢,必要時應復查有關的標本和切片,并予以答復。病理科技 術人員應嚴格執(zhí)行本規(guī)范的技術操作規(guī)程,提供合格的病理學常規(guī)染色 片、特殊染色片和可靠的其他相關檢測結果,并確保經過技術流程處理 的檢材真實無誤。

第2章 病理學檢查常規(guī)

第一節(jié) 普通活體組織病理學檢查常規(guī)

一、申請單和標本的驗收

(一)病理科應有專人驗收普通活體組織病理學檢查(常規(guī)活檢)申 請單和送檢的標本。

(二)病理科驗收人員必須:

1. 同時接受同一患者的申請單和標本。

2. 認真核對每例申請單與送檢標本及其標志(聯號條或其他寫明患者 姓名、送檢單位和送檢日期等的標記)是否一致;對于送檢的微小標 本,必須認真核對送檢容器內或濾紙上是否確有組織及其數量。發(fā)現疑 問時,應立即向送檢方提出并在申請單上注明情況。

3.認真檢查標本的標志是否牢附于放置標本的容器上。

4.認真查閱申請單的各項目是否填寫清楚,包括:①患者基本情況[姓 名、性別、年齡,送檢單位(醫(yī)院、科室)、床位、門診號/住院號、送 檢日期、取材部位、標本數量等],②患者臨床情況[病史(癥狀和體 征)、化驗/影象學檢查結果、手術(包括內鏡檢查)所見、既往病理學 檢查情況(包括原病理號和診斷)和臨床診斷等]。5.在申請單上詳細記錄患者或患方有關人員的明確地址、郵編及電話號 碼,以便必要時進行聯絡,并有助于隨訪患者。

(三)驗收標本人員不得對申請單中由臨床醫(yī)師填寫的各項內容進行改動。

(四)下列情況的申請單和標本不予接收:

1.申請單與相關標本未同時送達病理科;

2.申請單中填寫的內容與送檢標本不符合;

3.標本上無有關患者姓名、科室等標志;

4.申請單內填寫的字跡潦草不清;

5.申請單中漏填重要項目;

6.標本嚴重自溶、腐敗、干涸等;

7.標本過小,不能或難以制做切片;

8.其他可能影響病理檢查可行性和診斷準確性的情況。

病理科不能接收的申請單和標本一律當即退回,不予存放。

(五)臨床醫(yī)師采取的標本應盡快置放于盛有固定液(4%中性甲醛,即1 0%中性福爾馬林)的容器內,固定液至少為標本體積的5倍。對于需作 特殊項目檢查(如微生物、電鏡、免疫組織化學、分子生物學等)的標 本,應按相關的技術要求進行固定或預處理。

(六)病理醫(yī)師只對病理科實際驗收標本的病理診斷負責。

(七)病理科應建立與送檢方交接申請單和標本的手續(xù)制度。具體交接方 法由各醫(yī)院病理科自行制訂。

二、申請單和標本的編號、登記

(一)病理科驗收人員應在已驗收的申請單上注明驗收日期并及時、準確 編號(病理號),并逐項錄入活檢標本登記簿或計算機內。嚴防病理號 的錯編、錯登。

(二)標本的病理號可按年編序,或連續(xù)性(不分)編序。(三)同一病例同一次的申請單、活檢標本登記簿(包括計算機錄入)、放置標本的容器、組織的石蠟包埋塊(簡稱蠟塊)及其切片等的病理號 必須完全一致。

(四)病理科應建立驗收人員與組織取材人員之間申請單和標本的交接制度。具體交接方法由各醫(yī)院病理科自行制訂。

(五)在病理科內移送標本時,必須確保安全,嚴防放置標本的容器傾 覆、破損和標本的散亂、缺失等。

三、標本的預處理

標本驗收人員對已驗收的標本酌情更換適宜的容器,補充足量的固定 液;對于體積大的標本,值班取材的病理醫(yī)師在不影響主要病灶定位的 情況下,及時、規(guī)范地予以剖開,以便充分固定。

四、標本的巨檢、組織學取材和記錄

對于核驗無誤的標本,應按照下列程序進行操作:①肉眼檢查標本(巨 檢);②切取組織塊(簡稱取材);③將巨檢和取材情況記錄于活檢記 錄單上(活檢記錄單印于活檢申請單的背面)。巨檢和取材的技術操作 參見第3章第四節(jié)。

巨檢和取材時的注意事項:

(一)巨檢和取材必須由病理醫(yī)師進行,應配備人員負責記錄。

(二)巨檢和取材過程中,應嚴防污染工作人員和周圍環(huán)境。

(三)標本一般應經適當固定后再行取材。已知具有傳染性(例如結核 病、病毒性肝炎等)的標本,應在不污染環(huán)境和/或不擴散傳染的原則 下,經必要的初步巨檢或切開后,立即置于盛有足量固定液的專用容器 內,充分固定后再行常規(guī)巨檢和取材。

(四)病理醫(yī)師在對每例標本進行巨檢和取材前,應與記錄人員認真核對 該例標本及其標志與申請單的相關內容是否一致。若對申請單填寫的內 容或/和標本有疑問(例如患者姓名有誤,標本內容、數量、病變特征 與申請單填寫的情況不符等),應暫行擱置,盡快與送檢方聯系,查明 原因,確保無誤后,再行巨檢和取材。必要時,可邀請有關臨床醫(yī)師共 同檢查標本和取材。對于有疑問的標本,在消除疑問前不得進行巨檢和 取材,應將有關標本連同其申請單一并暫時妥存。

(五)病理醫(yī)師進行巨檢和取材時,記錄人員應根據病理申請單內容,向 巨檢醫(yī)師報告患者的基本臨床情況、手術所見、標本情況(采取部位、數量等)和送檢醫(yī)師的特殊要求等,并如實、清楚地將病理醫(yī)師的口頭 描述記錄于活檢記錄單上。必要時,應在活檢記錄單上(或另附紙)繪 簡圖顯示巨檢所見和標示取材部位。取材者應核對記錄內容。

(六)具有醫(yī)學學術價值的標本可攝影存檔,并酌情妥為保存。

(七)病理科宜積極推行巨檢和取材的錄音記錄。每次巨檢和取材結束 后,應由專人立即對錄音內容進行文字整理,記錄于活檢記錄單上(手 錄或用計算機錄入、打印)。有關的錄音資料應保存至病理診斷報告書 發(fā)出后兩周。

(八)細小標本取材時,可用伊紅點染并用軟薄紙妥善包裹。

(九)每例標本取材前、后,應用流水徹底清洗取材臺面和所有相關器 物,嚴防檢材被無關組織或其他異物污染,嚴防細小檢材被流水沖失。

(十)巨檢和取材必須按照本規(guī)范的要求進行操作(參見第3章第四 節(jié))。對于由不同部位或不同病變區(qū)域切取的組織塊,應在其病理號之 后再加編次級號(例如:-1,-2,-3,??;A,,B,C,??等)。

(十一)巨檢/取材者和記錄人員應相互配合、核查,確保所取組織塊及 其編號標簽準確地置于用于脫水的容器(脫水盒等)內。

(十二)標本巨檢和取材后剩余的組織/器官應置入適當容器內,添加適 量4%中性甲醛并附有相關病理號和患者姓名等標志,然后按取材日期有 序地妥為保存。取材剩余的標本一般保存至病理診斷報告書發(fā)出后兩 周。

(十三)病理醫(yī)師在每批標本巨檢和取材后,應與記錄人員共同核對取材 內容,并在活檢記錄單/取材工作單上簽名和簽署日期。

(十四)取材后剩余的病理標本屬于污染源,應遵照有關規(guī)定處理。

(十五)巨檢/取材醫(yī)師或記錄人員與制片的技術人員認真辦理交接手 續(xù)。具體交接方法由各醫(yī)院病理科自行制訂。

五、組織切片制備的基本要求

(一)組織制片過程中,應確保切片號與蠟塊號一致。

(二)制片工作一般應在取材后2個工作日內完成(不含需要脫鈣、脫脂 等特殊處理的標本)。

(三)制片完成后,技術人員應檢查制片質量,并加貼標有本病理科病理 號的標簽。常規(guī)石蠟-HE染色片的優(yōu)良率應≥95%,優(yōu)秀率不<35%。不合格切片應立即重做。切片質量的基本標準參見第3章第一節(jié)的附 表。

(四)制片過程發(fā)生意外情況時,有關技術人員和技術室負責人應及時向 科主任報告,并積極設法予以補救。

(五)制片完成后,技術人員應將所制切片與其相應的活檢記錄單/取材 工作單等進行認真核對,確認無誤后,將切片連同相關的活檢申請單/ 活檢記錄單/取材工作單等一并移交給病理醫(yī)師。雙方經核對無誤后,辦理移交簽字手續(xù)。具體交接方法由各醫(yī)院病理科自行制訂。

(六)常規(guī)活檢組織切片制備技術的基本要求參見第3章第一節(jié)。

六、組織切片的光學顯微鏡檢查和病理診斷

(一)病理醫(yī)師進行病理診斷時:

1.應認真閱讀申請單提供的各項資料,必要時(尤其是疑難病例),應 向有關臨床醫(yī)師了解更多的臨床信息。

2.應認真閱讀活檢記錄單中關于標本巨檢的描述;負責復檢的病理醫(yī)師 必要時親自觀察標本,補充或訂正病變描述,指導或親自補取組織塊。

3.應了解患者既往病理學檢查情況(包括切片的病理診斷和有關文字記 錄):①由本病理科既往受理者,必須及時調閱相關切片等病理學檢查 資料;②非本病理科既往受理者,應積極協助患者從有關病理科商借相 關切片等病理學檢查資料參閱。

4.應在活檢記錄單上簽署“醫(yī)囑”,告知技術人員進行必要的深切片、連切片、特殊染色和其他相關技術檢測。

5.應全面、細致地閱片,注意各種有意義的病變。

(二)進行初檢的病理醫(yī)師,應提出初診意見,送交主檢病理醫(yī)師復查。

(三)主檢病理醫(yī)師對難以明確診斷的病例,可以:

1.提請科內上級醫(yī)師會診或進行科內讀片討論(會診);

2.與有關臨床醫(yī)師進行臨床-病理會診;

3.必要時約見患者(尤其門診患者)或患者親屬(或其他患方相關人 員),了解病情,說明病理診斷的疑難情況和延期簽發(fā)病理學診斷報告 書的原因等;

4.于簽發(fā)病理學診斷報告書前進行科外病理會診(“診斷報告前病理會 診”),應將各方面會診意見的原件(或復印件)作為檔案資料貼附于有 關患者的活檢記錄單中備查;

5.必要時,建議臨床醫(yī)師重復活檢,或密切隨查。

(四)主檢病理醫(yī)師根據常規(guī)切片的鏡下觀察,結合標本巨檢、相關技術 檢查結果、有關臨床資料和參考病理會診意見等,作出病理診斷或提出 病理診斷意見(意向),清楚地書寫于活檢記錄單的有關欄目中、并親 筆簽名。各方會診意見不

一、難以明確診斷時,主檢醫(yī)師可參考會診意 見酌情診斷,或在病理學診斷報告書中將各方會診意見列出,供臨床醫(yī) 師參考。

(五)對打印的病理學診斷報告書,主檢病理醫(yī)師應與活檢記錄單上的病 理診斷文字進行核對,并親筆簽名。[參見本節(jié)下文:“

八、常規(guī)活檢 病理學診斷報告書及其簽發(fā)”]

七、相關診斷技術的選用

病理醫(yī)師可借助于組織化學染色(包括特殊染色)、免疫組織化學染 色、電子顯微鏡技術、分子生物學技術、流式細胞技術等相關診斷技術 檢查提供的佐證,對某些病例(尤其是疑難病例)進行病理診斷。(參 見第4章)

八、病理學診斷報告書及其簽發(fā)

(一)病理診斷表述的基本類型

Ⅰ類:檢材部位/疾病名稱/病變性質明確和基本明確的病理診斷。

Ⅱ類:不能完全肯定疾病名稱/病變性質,或是對于擬診的疾病名稱/病 變性質有所保留的病理診斷意向,可在擬診疾病/病變名稱之前冠以諸 如病變可“符合為”、“考慮為”、“傾向為”、“提示為”、“可能 為”、“疑為”、“不能排除(除外)”之類的詞語。

Ⅲ類:檢材切片所顯示的病變不足以診斷為某種疾病(即不能做出Ⅰ類 或

Ⅱ類病理診斷),只能進行病變的形態(tài)描述。

Ⅳ類:送檢標本因過于細小、破碎、固定不當、自溶、嚴重受擠壓(變 形)、被燒灼、干涸等,無法做出病理診斷。

(二)病理學診斷報告書的基本內容

1.患者的基本情況,包括病理號,姓名,性別,年齡,送檢醫(yī)院/科室(住院/門診),住院號/門診號,送檢/收驗日期等。

2.巨檢病變和鏡下病變要點描述(一般性病變和細小標本可酌情簡述或 省略)。

3.與病理診斷相關技術的檢查結果。

4.病理診斷的表述(參見上文“病理診斷表述的基本類型”)。

5.對于疑難病例或作出Ⅱ、Ⅲ類病理診斷的病例,可酌情就病理診斷及 其相關問題附加:①建議(例如進行其他有關檢查、再做活檢、科外病 理學會診、密切隨診/隨訪等);②注釋/討論。

6.經過本病理科或/和科外病理會診的病例,可將各方病理會診 意見列于該例患者的病理學診斷報告書中。

(三)病理學診斷報告書的書寫要求

1.病理學診斷報告書的文字表述力求嚴謹、恰當、精練、條理和層 次清楚。

2.病理學診斷報告書應為一式二份,一份交予送檢方,另一份隨同患者 的病理學檢查申請單/病理學檢查記錄單一并存檔。主檢病理醫(yī)師必須 在每一份病理學診斷報告書上簽名,不能以個人印章代替簽名,不能由 他人代為簽名;主檢病理醫(yī)師簽名的字跡應能辨認。

3.手書的病理學診斷報告書必須二聯復寫,必須文字規(guī)范、字跡清楚,不得潦草、涂改。

4.手書和計算機打印的病理學診斷報告書中的關鍵性文字,例如

“癌”、“瘤”、“陽性”、“陰性”和數字等,要認真核對,不得有 誤。

5.計算機打印的圖文病理學診斷報告書提供的病變圖象要準確,具有典 型(代表)性,放大倍數適當。

6.患者的基本情況項目必須嚴格按照送檢臨床醫(yī)師填寫的文字抄寫或用 計算機輸錄于病理學診斷報告書中,并認真核查無誤,簽發(fā)報告書的病 理醫(yī)師和病理科的其他人員都不得改動。7.病理醫(yī)師不得簽發(fā)虛假的病理學診斷報告書,不得向臨床醫(yī)師和患方 人員提供有病理醫(yī)師簽名的空白病理學診斷報告書。

(四)病理學診斷報告書的發(fā)送

1.病理科自接受送檢標本至簽發(fā)該例病理學診斷報告書的時間,一般情 況下為5個工作日以內;

2.由于某些原因(包括深切片、補取材制片、特殊染色、免疫組 織化學染色、脫鈣、疑難病例會診或傳染性標本延長固定時間等)延遲 取材、制片,或是進行其他相關技術檢測,不能如期簽發(fā)病理學診斷報 告書時,應以口頭或書面告知有關臨床醫(yī)師或患方,說明遲發(fā)病理學診 斷報告書的原因。

3.病理科應有專人發(fā)送病理學診斷報告書。住院患者的病理學診斷報告 書應發(fā)送至有關臨床科室。病理科所在醫(yī)院門診患者和外院患者病理學 診斷報告書的發(fā)送方法,由各醫(yī)院病理科自行制訂。

4.病理學診斷報告書的經收人員(包括患方人員)必須履行簽收手續(xù)。

5.病理科已發(fā)出的病理學診斷報告書被遺失時,一般不予補發(fā);必要 時,經病理科主任同意可以抄件形式補發(fā)。

九、資料管理

普通活體組織病理學檢查的資料必須妥善管理,有關規(guī)定參見本章第五 節(jié)。

十、會 診

病理學會診是普通活體組織病理學診斷過程的重要環(huán)節(jié),有關規(guī)定參見本章第 六節(jié)。

第二節(jié) 手術中快速活體組織病理學檢查常規(guī)

一、概 述

(一)手術中快速活體組織病理學檢查(快速活檢)是臨床醫(yī)師在實施手術 過程中,就與手術方案有關的疾病診斷問題請求病理醫(yī)師快速進行的急會診,尤其需要臨床醫(yī)師與病理醫(yī)師間的密切合作。

(二)快速活檢要求病理醫(yī)師在很短時間內,根據對切除標本的巨檢和組織塊快 速冷凍切片(或快速石蠟切片)的觀察,向手術醫(yī)師提供的參考性病理診斷意 見。與常規(guī)石蠟切片的病理診斷相比,快速活檢會診具有更多的局限性和誤診 的可能性。有的病例難以快速診斷,需要等待常規(guī)石蠟切片進一步明確診斷。因此,應向臨床醫(yī)師說明快速活檢的:①局限性、②適用范圍、③慎用范圍和 ④不宜應用范圍。

(三)有關臨床醫(yī)師應于手術前向患者和/或患者授權人說明快速活檢的意義和 局限性等,取得患者和/或患方的知情和理解。患者和/或患者授權人應在由 醫(yī)院制定的《手術中快速活檢患方知情同意書》簽署意見和簽名。

(四)主持手術的臨床醫(yī)師應在手術前一天向病理科遞交快速活檢申請單,填寫 患者的病史,重要的影象學、實驗室檢查結果和提請病理醫(yī)師特別關注的問題 等。盡可能不在手術進行過程中臨時申請快速活檢。

(五)手術中快速活檢應由經過該項工作訓練的主治醫(yī)師以上的病理醫(yī)師主持。尚不具備相應條件的病理科不應勉強開展手術中快速活檢。

(六)負責快速活檢的主檢病理醫(yī)師應了解患者的①臨床情況,②手術所見,③ 既往有關的病理學檢查情況。

二、適用范圍

(一)需要確定病變性質(如腫瘤或非腫瘤/良性腫瘤或惡性腫瘤等),以

決定手術方案的標本。

(二)了解惡性腫瘤的擴散情況,包括腫瘤是否浸潤相鄰組織、有無區(qū)域淋 巴結轉移等。

(三)確定腫瘤部位的手術切緣有無腫瘤組織殘留。

(四)確認切除的組織,例如甲狀旁腺、輸卵管、輸精管及異位組織等。

三、慎用范圍

涉及截肢和其他會嚴重致殘的根治性手術切除的標本。需要此類手術治療的患者,其病變性質宜于手術前通過常規(guī)活檢確定。

四、不宜應用范圍

(一)疑為惡性淋巴瘤。

(二)過小的標本(檢材長徑≤0.2cm者)。(三)術前易于進行常規(guī)活檢者。

(四)脂肪組織、骨組織和鈣化組織。

(五)需要依據核分裂象計數判斷良、惡性的軟組織腫瘤。(六)主要根據腫瘤生物學行為特征而不能依據組織形態(tài)判斷良、惡性的腫瘤。(七)已知具有傳染性的標本(例如結核病、病毒性肝炎、艾滋病等)。

五、申請單和標本的驗收、編號和登記

手術中快速活體組織病理學檢查申請單和標本的驗收、編號和登記參照本章第一節(jié)中“一”至“三”項的有關規(guī)定。

六、標本的巨檢、取材和記錄

(一)病理科驗收快速活檢申請單和標本后,應參照本章第一節(jié)中“四”項的有關規(guī)定,立即進行標本的巨檢、取材和記錄。

(二)主持快速活檢的病理醫(yī)師應親自參與標本的巨檢和取材(或指導取 材)。

(三)通常選取具有代表性的病變組織1~2塊,需要時,增加取材塊數。

七、組織切片的制備(一)冷凍切片

1.完成冷凍HE染色切片制備的時間通常應為20~25分鐘。

2.恒冷箱切片機制片:至少應于切片前1小時開機預冷,冷室溫度一般為-15~-20℃。常規(guī)開展冷凍切片快速病理學診斷的病理科,恒冷箱切片機宜處于24小時恒溫待機狀態(tài)。

3.其他方法的冷凍切片制備參見第3章第一節(jié)。(二)快速石蠟切片

1.完成快速石蠟-HE染色切片的時間通常為30分鐘。2.快速石蠟切片的制備方法參見第3章第一節(jié)。

(三)制備好的冷凍/快速石蠟-HE染色切片,加貼標有本病理科病理號的 標簽后,立即交由主檢病理醫(yī)師進行診斷。

八、手術中快速活檢會診意見及其簽發(fā)

(一)有條件的病理科宜由兩位中/高級稱職的病理醫(yī)師共同簽署快速活檢的病理診斷意見。對于病變疑難、手術切除范圍廣泛和會嚴重致殘的手術中快速活檢,應由兩位高級稱職的病理醫(yī)師共同簽署會診意見。主檢病理醫(yī)師簽名的字跡應能辨認。

(二)快速活檢診斷意見一般在收到送檢標本后40分鐘內發(fā)出;同一時間段內相繼收到的多例患者標本或是同一例患者的多次標本,其發(fā)出報告的時間依次類推。對于疑難病變,可酌情延時報告。

(三)對于難以即時快速診斷的病變(例如病變不典型、交界性腫瘤病變或送檢組織不足以明確診斷等),主檢病理醫(yī)師應向手術醫(yī)師說明情況,恰如其分地簽發(fā)病理診斷意見或告知需要等待常規(guī)石蠟切片進一步明確病理診斷。

(四)主檢病理醫(yī)師簽署的快速活檢病理診斷意見,宜以文字形式報告(具體發(fā)出方式由各醫(yī)院自行決定)。快速活檢病理診斷意見報告書發(fā)出前應認真核對無誤。

九、冷凍切片后剩余組織的處理

(一)冷凍切片后剩余的冷凍組織(簡稱 “凍對”)和冷凍切片取材后剩余、未曾冷凍的組織(簡稱“凍剩”),均應保存,用以制備常規(guī)石蠟切片,以便與冷凍切片進行對照觀察。

(二)“凍對”/“凍剩”組織的蠟塊和切片需與同一病例手術后送檢的切除標本編為同一病理號,并作出綜合性診斷。

(三)當冷凍切片病理診斷意見與其“凍對”組織的常規(guī)石蠟-HE片的 病理診斷不一致時,該例的病理診斷一般應以石蠟-HE片診斷為準。

十、資料管理

手術中快速活體組織病理學檢查的資料必須妥善管理,有關規(guī)定參見本章第五節(jié)。

第三節(jié) 細胞病理學檢查常規(guī)

一、申請單和標本的驗收、編號和登記

(一)病理科應參照本章第一節(jié)(常規(guī)活體組織病理學檢查常規(guī))中“一” 和“二”項的規(guī)定,進行細胞病理學檢查(細胞學檢查)申請單和標本的驗收、編號和登記。

(二)用于細胞學檢查的標本必須新鮮,取材后應盡快送至病理科(或細胞病理學室,下同);病理科核驗檢材無誤后,應盡快進行涂片和染色。

(三)病理科驗收標本人員不得對申請單中由臨床醫(yī)師填寫的各項內容進行改動。

二、細胞涂片、組織印片和壓片的基本要求

(一)細胞涂片、組織印片和壓片(參見第3章第二節(jié))。(二)腫物細針穿刺物涂片

1.應由掌握細針穿刺技術的注冊醫(yī)師或注冊助理醫(yī)師,按照細針穿刺技術操作常規(guī),親自對確有適應癥且無禁忌癥的患者采取穿刺物。2.適應癥:通常為:

(1)淺表腫物:乳腺、甲狀腺、涎腺、淋巴結、前列腺、皮下軟組織和骨等。(2)胸腔腫物:肺、胸膜和縱隔等。

(3)腹腔腫物:肝、胰、腎、腎上腺、腹腔內、腹膜后和盆腔內等。(4)顱內腫物。

3.禁忌癥:患者有難以控制的咳嗽、肺動脈高壓癥、進行性肺氣腫、出血 性體質及“暈針史”等。

(三)對于核驗無誤的送檢標本,應立即依序進行:①涂片、印片或 壓片,②固定和③染色。

三、細胞病理學診斷報告書及其簽發(fā)

(一)細胞病理學診斷可為臨床醫(yī)師診斷疾病(尤其是腫瘤)提供重要參考 依據。

(二)細胞病理學診斷報告書必須由具有主檢資格的注冊病理醫(yī)師簽署后發(fā)出。主檢病理醫(yī)師簽名的字跡應能辨認。(三)細胞病理學診斷表述的基本類型

1.直接表述性診斷:適用于穿刺標本的細胞病理學診斷報告。根據形態(tài)學觀察的實際情況,對于某種疾病/病變做出肯定性(Ⅰ類)、不同程度意向性(Ⅱ類)細胞學診斷,或是提供形態(tài)描述性(Ⅲ類)細胞學診斷,或是告知無法做出(Ⅳ類)細胞學診斷。[參考本章第一節(jié)的八(一)項:“病理學診斷表述的基本類型”]

2.間接分級性診斷:用于查找惡性腫瘤細胞的診斷。Ⅰ級:未見惡性細胞 Ⅱ級:查見核異質細胞 Ⅱa:輕度核異質細胞 Ⅱb:重度核異質細胞 Ⅲ級:查見可疑惡性細胞 Ⅳ級:查見高度可疑惡性細胞 Ⅴ級:查見惡性細胞

(四)細胞病理學診斷的局限性(假陰性或假陽性診斷)

1.假陰性:是指在惡性腫瘤患者的有關標本中未能查見惡性細胞。假陰性

率一般為10%左右。因此,細胞病理學檢查的陰性結果并不能否定臨床醫(yī)師的惡性腫瘤診斷。

2.假陽性:是指在非惡性腫瘤患者的有關標本中查見了“惡性細胞”。假陽 性率通常≤1%。因此,細胞病理學診斷應密切結合患者的臨床資料,對于臨床上未考慮為惡性腫瘤患者的陽性細胞學診斷應持慎重態(tài)度。(五)細胞病理學診斷報告書的基本內容

1.患者的基本情況項目,包括病理號、姓名、性別、年齡、送檢醫(yī)院/科室(住院/門診)、住院號/門診號、送檢/收驗日期等。

2.細胞病理學診斷的表述(參見上項“細胞病理學診斷報告表述的基本類型”)。

3.必要時或條件允許時,可酌情就細胞病理學診斷及其相關問題附加:①

某些建議(例如進行其他有關檢查、再做活檢、病理科外病理學會診、密切隨查/隨訪等);②注釋/討論。

4.經過本病理科或/和科外病理會診的病例,可將各方的細胞病理學診斷意見附于該例的細胞病理學診斷報告書中。(六)細胞病理學診斷報告書的書寫要求

1.參照本章第一節(jié)(“常規(guī)活體組織病理學檢查常規(guī)”)中“八

(二)”項的有關規(guī)定。

2.計算機圖文打印的細胞病理學診斷報告書提供的細胞學圖象應具有典型(代表)性,放大倍數適當。

(七)細胞病理學診斷報告書的發(fā)送

1.病理科自接受送檢標本至簽發(fā)細胞病理學診斷報告書的時間,一般情況 下為1~2個工作日。

2.因某些原因(包括特殊染色、免疫組化染色、疑難會診等)不能如期簽發(fā)細胞病理學診斷報告書時,應以口頭或書面告知有關臨床醫(yī)師或患方,說明遲發(fā)報告書的原因。

3.病理科應有專人發(fā)送細胞病理學診斷報告書。住院患者的細胞病理學診 斷報告書應發(fā)送至有關臨床科室;本院門診患者和外院患者的細胞病理學診斷報告書的發(fā)送方法由各醫(yī)院病理科自行制定。

4.細胞病理學診斷報告書的經收人員(包括患方人員)必須履行病理科規(guī) 定的簽收手續(xù)。

5.已由病理科發(fā)出的細胞病理學診斷報告書被遺失時,一般不予補發(fā);必 要時,經病理科主任同意可以抄件形式補發(fā)。

四、資料管理

細胞病理學檢查的資料必須妥善管理,有關規(guī)定參見本章第五節(jié)。

五、會 診

細胞病理學會診是細胞病理學診斷過程的重要環(huán)節(jié),有關規(guī)定參見本章第六節(jié)。

第四節(jié) 尸體剖檢(尸檢)的診斷常規(guī)

一、尸檢的受理

(一)必須遵照國家有關規(guī)定受理尸檢。

(二)受理尸檢范圍:①普通病理尸檢;②涉及醫(yī)、患爭議的尸檢(由衛(wèi)生 行政主管部門指定的尸檢機構實施)。

(三)受理尸檢部門:具備獨立尸檢能力的①醫(yī)院病理科,②醫(yī)學院校的病理學教研室,③經醫(yī)政部門注冊的病理診斷中心。

(四)主持尸檢(主檢)人員:應是接受過尸檢訓練、具有中級以上專業(yè)職稱的病理學醫(yī)師或病理學教師。必要時,邀請法醫(yī)參與尸檢。

(五)申請或委托尸檢方:①有關醫(yī)院,②衛(wèi)生行政部門,③司法機關,④死者的親屬或代理人,或⑤被受理尸檢方認可的其他申請或委托方。

(六)申請或委托尸檢方必須向受理尸檢方遞交:①死者的死亡證明,②有申請或委托方當事人簽名、負責人簽名和加蓋委托單位公章的尸檢申請書或委托書,③逐項認真填寫的尸檢申請書(包括死者的臨床資料要點和其他需要說明的情況)。

(七)死者親屬或代理人簽署說明尸檢有關事項的《死者親屬或代理人委托 尸檢知情同意書》(由受理尸檢方制定),確認以下事項: 1.同意有關受理尸檢機構對于死者進行尸檢。

2.授權主持尸檢人員根據實際需要確定尸檢的術式、范圍、臟器或組織的取留及其處理方式。

3.主持尸檢人員負責遺體尸檢后的體表切口縫合,不參與尸檢后遺體的其 他安置事項。

4.明確新生兒和圍生期胎兒尸檢后的尸體處理方式。

5.同意對尸檢過程進行必要的攝影、錄像,并確認是否同意教學示教。6.尸檢病理學診斷報告書可提供死者所患的主要疾病和死因;難以作出明 確結論時,可僅提交病變描述性尸檢報告。7.尸檢病理學診斷報告書發(fā)送給委托尸檢方。(八)下列情況的尸檢可不受理:

1.委托尸檢手續(xù)不完備者(包括未按規(guī)定交納尸檢費用者);

2.拒簽《死者親屬或代理人委托尸檢知情同意書》者(包括對于尸檢的術 式、范圍、臟器或組織的取留及其處理方式等持有異義從而影響尸檢實施和尸檢結論形成者);

3.委托尸檢方與受理尸檢方就涉及尸檢的某些重要問題未能達成協議者; 4.死者死亡超過48小時未經冷凍、或冷凍超過7日者;

5.疑因或確因烈性傳染病死亡的病例,尸檢方不具備相應尸檢設施條件者; 6.因其他情況不能受理者。

二、尸檢前的準備工作(一)尸檢室環(huán)境的準備。

(二)尸檢基本器材和工作服的準備。

(三)安排實施尸檢的專業(yè)人員和技術人員。(四)將擬行剖驗的尸體移送至尸檢室。

(五)主持尸檢人員確認尸檢手續(xù)完備(死亡證明、尸檢申請書或委托書、死者的臨床資料要點等),并請死者親屬或委托代理人確認尸體。

(六)主持尸檢人員認真閱讀、熟悉有關死者的臨床資料要點(必要時閱讀死者的生前病歷),了解申請或委托方對于尸檢的要求和尸檢時需要注意的問題。(七)進行尸檢編號并登錄于尸檢登記薄上。

(八)尸檢過程現場文字(或語音)記錄、攝影或錄象工作的準備。

三、尸檢的衛(wèi)生管理

(一)制訂尸檢室衛(wèi)生管理制度并認真實施。

(二)尸檢人員和尸檢室內其他人員必須認真做好個人和工作環(huán)境的衛(wèi)生防護。(三)疑為或確診為烈性傳染病死者的尸檢,必須遵照傳染病尸檢的有關規(guī) 定進行操作。

(四)尸檢結束后衛(wèi)生處置

1.認真清洗尸檢臺和尸檢室,并進行環(huán)境消毒。2.認真清洗尸檢工作服和器械等,并進行消毒。3.按照有關規(guī)定認真處理尸檢污物。4.尸檢人員在專用衛(wèi)生間內淋浴。

5.進行上述各項衛(wèi)生處置過程中必須嚴防污染有關人員和尸檢室內、外環(huán)境。

四、尸檢的技術操作

尸檢的技術操作規(guī)范參見第3章的第三節(jié)。

五、尸檢組織的切片制備

尸檢組織切片制備的技術操作規(guī)范參見第3章第一節(jié)。

六、尸檢組織的病理學相關技術檢查

尸檢組織病理學相關技術檢查的規(guī)范參見第4章。

七、尸檢組織切片的光學顯微鏡檢查和病理學診斷

(一)光鏡檢查切片,客觀地描述和記錄各系統(tǒng)、器官的病變要點;

(二)在綜合鏡檢和巨檢(肉眼檢查)所見的基礎上,結合死者生前的臨床資料等形成尸檢的病理診斷。

(三)有關鏡檢診斷的其他事項參見本章第一節(jié)的一

(六)項(“組織切片的光學顯微鏡檢查和病理學診斷”)。

八、尸檢檔案資料(一)基本內容

1.一般資料:包括死者的尸檢號、姓名、性別、年齡、籍貫、民族、出

生地、住址、死亡時間、尸檢時間和地點、相關醫(yī)院(臨床科室、住院號/門診號/急癥號)、委托或申請尸檢單位及主持尸檢人員和助手等。2.尸檢申請書或委托書。3.有關的臨床資料。

4.由死者親屬或代理人簽署的《死者親屬或代理人委托尸檢知情同意書》。5.尸檢所見(附有必要的圖像資料)。包括:(1)對有關尸體及其死亡征象的確認。(2)體表檢查所見。

(3)體腔(胸腔、心包腔、腹腔)檢查所見。

(4)臟器檢查所見:依序逐個描述各臟器的肉眼檢查和光學顯微鏡檢查所見。(5)特殊檢查結果。例如毒物、病原生物學等檢查(附有關檢查報告)。

6.病理學診斷和尸檢病理學診斷報告書副本(參見下項“尸檢病理學診斷報告書及其簽發(fā)”)。7.死亡原因。8.小結。

9.討論。包括:

(1)主要疾病及其診斷依據、發(fā)生和發(fā)展特點。

(2)主要疾病/病變之間、主要疾病與繼發(fā)/伴發(fā)疾病之間的相互關系。(3)從臨床與病理相結合的角度,參考有關文獻,進行討論。

10.其他資料。包括照片及其底片、幻燈片、圖表、臨床病理討論記錄、參考文獻和電子信息資料等。

(二)受理尸檢單位,應積極實施尸檢檔案資料的計算機管理。

九、尸檢病理學診斷報告書及其簽發(fā)

(一)尸檢病理學診斷報告書(簡稱尸檢報告書或尸檢報告)是關于尸檢的正式病理學報告。

(二)尸檢病理學診斷報告書的基本內容:①主要疾病(與死亡直接相關的疾病);②繼發(fā)疾病(與主要疾病密切相關的疾病);③伴發(fā)疾病(與主要疾病無密切關系的疾病)。可酌情進行死因分析、小結和討論。疾病診斷力求使用國際醫(yī)學規(guī)范術語,并按各疾病的致死重要性和因果關系排序。

(三)尸檢病理學診斷報告書必須由主檢人員簽名后發(fā)出。主檢人員簽名的字跡應能辨認。

(四)尸檢病理學診斷報告書應一式兩份(正本和副本),兩份報告書具有

同等效力。報告書的正本隨同其他尸檢資料一并歸檔,報告書的副本發(fā)給委托尸檢方。手書的尸檢病理學診斷報告書應二聯復寫,必須文字規(guī)范、字跡清楚,不得涂改。

(五)尸檢病理學診斷報告書通常在尸檢后45個工作日內發(fā)出。由于病變復 雜或其他原因不能按時發(fā)出尸檢病理學診斷報告書時,可酌情延遲發(fā)出并應向委托尸檢方說明遲發(fā)原因。

十、尸檢資料的管理

尸檢資料必須妥善管理,有關規(guī)定參見本章第五節(jié)。

第五節(jié) 病理學檢查資料的管理

一、概 述

(一)常規(guī)活檢、手術中快速活檢、細胞病理學檢查和尸檢等的文字資料(含電子信息資料)、非文字資料(組織的石蠟包埋塊、切片等)以及其他相關資料均為有價值的醫(yī)學資料,皆由受理病理學檢查的病理科按照本規(guī)范規(guī)定的期限妥為保存。病理科必須設立病理檔案資料室和制訂病理檔案資料管理制度(包括病理檢查資料的歸檔、借用和歸還手續(xù)等),并有專人管理。應積極實行病理學檢查資料的計算機管理。

(二)各種病理學檢查的文字資料應裝訂成冊保存。

(三)據以做出常規(guī)活檢、快速活檢、尸檢病理學診斷的原始組織學切片和

查見腫瘤細胞或可疑腫瘤細胞的玻片必須妥善保存。未查見惡性腫瘤細胞的玻片,于診斷報告書發(fā)出后保存2周。

二、患者查詢病理學檢查資料的期限(一)門診患者為送檢后15年。(二)住院患者為送檢后30年。

三、活檢、尸檢大體標本的保存期限(一)活檢:自簽發(fā)病理學診斷報告書之日起保存2~4周,具體保存期限由 各醫(yī)院自行規(guī)定。(二)尸檢

1.普通病理尸檢:自簽發(fā)病理學診斷報告書之日起保存3個月。2.涉及醫(yī)、患爭議的尸檢:按照尸檢前有關各方簽署的協議辦理。

四、病理學檢查資料的借用

(一)醫(yī)院必須制訂關于借用病理學檢查資料的辦法并嚴格實施。(二)關于患方借用病理組織學切片,應注意:

1.患方人員申請借用有關患者的活檢切片、尸檢切片時,應按照醫(yī)院制定 的有關規(guī)定辦理手續(xù)。

2.申請借用切片的患方人員必須:①出示本人身份證等有效證件并保留其復印件;②填寫借片申請單并簽名;③支付規(guī)定的借片押金(待歸還切片時退還)。

3. 病理科據以作出診斷的原始切片一般不外借,通常借出(或售出)相關 病例的復制切片。復制切片借出(或售出)前,應確認該切片的病變與原切片相同或基本相同。

4. 患方借出的切片應妥善保存,必須在規(guī)定的期限內歸還。患方借出的切 片若有破損、丟失等,應按規(guī)定支付賠償金,并承擔相應責任。

5.病理科因故不能向患方出借或出售有關切片時,由雙方協商解決病理學會診問題。病理科可酌情允許患方邀請外院的病理醫(yī)師前來病理科閱片;有條件的單位可酌情進行遠程病理會診。

(三)關于患方借用細胞病理學玻片

1.一個病例的同一次檢查有多張查見惡性腫瘤細胞的“陽性片”或“可疑 陽性片”時,可允許患方借用其中的一張。借用手續(xù)參見上項(二)。

2.一個病例僅有一張為查見惡性腫瘤細胞的“陽性片”或“可疑陽性片”時,該陽性片或可疑陽性片原則上不予外借。其會診問題由雙方協商解決。病理科可酌情允許患方邀請外院的病理醫(yī)師前來病理科閱片。(四)關于借用檢材組織的石蠟包埋塊

1.活檢和尸檢檢材組織的石蠟包埋塊(簡稱蠟塊)是無法復制的病理學檢 查資料,屬于診斷病理學的重要基礎檔案,原則上不外借。必要時,可由病理科向患方提供未經染色的切片(通稱白片)。

3. 患方外借病理切片會診時,受理會診的病理科若確實需要有關病例病理 檢材的蠟塊,可由有關病理科雙方協商解決。

第六節(jié) 病理學會診

一、具有一定規(guī)模的病理科應定期舉行科內病理會診或讀片討論會。

二、積極推動建立地域性病理會診中心。

三、加強臨床-病理會診。

四、應由具有高級職稱的病理醫(yī)師接受病理科內、外的病理學會診。

五、接受外院的病理會診時,由會診的病理醫(yī)師簽發(fā)《病理學會診咨詢意見書》,并在該《意見書》上寫明:“病理醫(yī)師個人會診咨詢意見,僅供原病理診斷的病理醫(yī)師參考”。由作出原病理診斷的病理醫(yī)師自行決定是否采納病理會診咨詢意見和采納的程度。做出原診斷的病理科應將《病理會診咨詢意見書》的原件或其復印件貼附于有關患者的病理檢查記錄單上,一并歸檔。

六、加做相關技術檢測方能作出診斷的會診病例,會診醫(yī)師應在《意見書》中予以說明,并向患方進行適當解釋。

七、對病理診斷時間較為長久病例的會診,應考慮到做出原診斷時期的診斷病理學理論、技術水平、相應病變/疾病的定性診斷標準和原診斷病理科當時的客觀條件。

八、有條件的病理科可開展遠程病理會診。

第七節(jié) 病理科的基本設施

一、病理科基本設施的指導原則

(一)保證病理科完成基本工作任務。(二)保護病理工作人員免受污染。(三)保護環(huán)境免受污染。

二、病理科的基本工作空間

(一)病理科的常規(guī)工作需要在下列的各自獨立的房間內進行:

1.收發(fā)室(檢材的接收、登記,病理診斷報告書的發(fā)放,病理資料查詢等)2.巨檢和取材室(檢材的肉眼檢查和切取組織塊,貯存取材后的剩余檢材)3.常規(guī)切片前的預處理室(組織塊的脫水、透明和浸蠟)4.制片室(石蠟切片/冷凍切片/細胞學涂片的制做和染色)5.病理組織學診斷室

6.細胞病理學診斷(酌情附設組織穿刺室)7.病理會診室 8.病理檔案資料室

9.大體標本制作室和陳列室

10.尸檢室及其配套空間(三級醫(yī)院建立,包括準備室、尸檢室、肉眼檢查和取材室、更衣/淋浴室、標本儲藏室等)11.儲藏室 12.淋浴室 13.辦公室

(二)較高技術層次的病理科還應設置: 1.特殊染色和免疫組織化學染色實驗室 2.細胞遺傳和分子病理學實驗室

3.其他特殊檢測實驗室(例如超薄切片制備、電鏡檢測、細胞培養(yǎng)、流式細胞術和其他新技術實驗室)

4.圖書/電子信息/學術活動室 5.進修病理醫(yī)師教室。

三、病理科常規(guī)活檢和快速活檢工作的基本設施(一)收發(fā)室 1. 辦公設施

2. 紫外線消毒柜(用于活檢申請單等消毒)3. 合于個人和環(huán)境防污染要求的上、下水系統(tǒng) 4. 其他相關設備

(二)病理標本巨檢和取材室

1.便于清洗、消毒的屋頂、室壁和地面裝修 2.室內紫外線消毒設備 3.室內高效通風設施

4.封閉式高效能通風柜廚(用于巨檢和取材,應便于清洗、消毒,并安裝足夠照明和紫外線消毒設備)5.合于個人和環(huán)境防污染要求的上、下水系統(tǒng)(包括獨立的污水排泄系統(tǒng)和污水處理池)

6.流水沖洗裝置

7.冷水和熱水供給系統(tǒng)

8.自動錄音設備(酌情安裝,用于記錄醫(yī)師巨檢標本時的語言描述)9.標本儲存柜(安裝排風設備)10.隔離服裝(消毒后使用)11.其他相關設備。

(三)常規(guī)切片的預處理室和常規(guī)/快速制片室

1.排放有毒物質的室內高效通風設施(用于組織塊和石蠟切片的 人工脫水流程)

2.符合個人和環(huán)境防污染要求的上、下水系統(tǒng)(包括獨立的污水排泄系統(tǒng)和污水處理池)

3.室內紫外線消毒設備

4.封閉式高效能通風柜廚(用于人工脫水流程)5.實驗臺

6.脫水設備:①人工脫水器具或/和②半自動或全封閉自動脫水機 7.組織塊石蠟包埋機 8.石蠟切片機

*9.恒溫冷凍切片機

*10.石蠟快速切片機 [* 9和10:兩項皆配備或配備一項] #11.一次性切片刀及其配套部件

#12.切片刀和磨刀機 [# 11和12:兩項皆配備或配備一項] 13.冰箱 14.恒溫箱 15.烤箱

16.有關試劑和試劑柜 17.天平

18.染色用器具

19.普通光學顯微鏡(用于染色質量控制)20.其他相關設備

(四)特殊染色和免疫組織化學染色實驗室

1.用于染色的實驗室環(huán)境設施和染色的常規(guī)設備[參見上文:(三)常規(guī)切片的預處理室和制片室]

2.微波爐或其他抗原修復設備 3.有關試劑和試劑柜

4.自動免疫組化染色儀(具有一定規(guī)模的病理科,酌情)5.其他相關設備

(五)病理組織學診斷室和病理會診室

1.雙筒顯微鏡(每名病理醫(yī)師配備一臺)

*2.雙頭和/或多頭顯微鏡(用于共覽會診和培訓示教)

*3.計算機和打印機(酌情連接局域網,用于病理學檢查資料的儲存和調閱)*4.顯微攝影設備,計算機圖像分析、電子圖像存儲和放映設備 [* 2~4:具有一定規(guī)模的病理科配置] 5.遠程會診系統(tǒng)(酌情)6.其他相關設備(六)病理檔案資料室

1.用于儲存切片、蠟塊和文字資料的柜具

2.計算機和打印機(酌情連接局域網,用于病理學檢查資料的儲存和調閱)3.秘書辦公設施(具有一定規(guī)模的病理科)4.其他相關設備

(七)必要的專業(yè)參考書和基本的專業(yè)期刊(具有一定規(guī)模的病理科應設立 圖書資料室)

(八)病理大體標本制作室和陳列室 1.制作病理大體標本的工具

2.用于陳列病理大體標本的展覽柜(配備照明裝置)3.其他相關設備

(九)辦公室:必要的辦公設備(十)儲藏室:必要設施(十一)淋浴室:必備設施

四、細胞病理學檢查工作的基本設施(一)腫物穿刺取材室:

1.便于清洗、消毒的屋頂、室壁和地面裝修 2.室內紫外線消毒設備

3.用于實施穿刺術的檢查床、椅 4.穿刺用器械和器械柜

5.穿刺用、急救用藥物和藥品柜 6.其他相關設備

(二)細胞學涂片制片室:

1.用于染色的實驗室環(huán)境設施和常規(guī)設備[參見本節(jié)的三(三)項:“常規(guī)切片的預處理室和常規(guī)/快速制片室”])2.可調速離心機

3.自動細胞病理學檢查系統(tǒng)(具有一定規(guī)模的病理科,酌情)4.其他相關設備

(三)細胞病理學診斷室:參見本節(jié)的三(五)項(病理組織學診斷室和病理會診室)。

(四)獨立設置(不隸屬于病理科)的細胞病理學科室:需要其他必要空間的基本設備(參見本節(jié)的 “

三、病理科常規(guī)和快速活檢工作的基本設備”)。

五、尸檢工作的基本設施(一)尸檢準備室

1. 尸檢專用器械和柜具 2. 參與尸檢人員用隔離用衣物和消毒器物 3. 辦公設施 4. 消毒設施

5. 其他相關設備(二)普通尸檢室

1.便于清洗、消毒的屋頂、室壁和地面裝修 2.室內紫外線消毒設備 3.室內高效通風設施

4.設計合理、適用的尸檢臺[具有合于個人和環(huán)境防污染要求的上、下水系統(tǒng)(包括獨立的污水排泄系統(tǒng)和污水處理池),便于清洗、消毒。] 5.適宜的照明裝置 6.冷水和熱水供給系統(tǒng)

7.階梯式看臺(示教用)8.其他相關設備

(三)傳染病用尸檢室:嚴格按照關于傳染病管理法規(guī)的要求建設。(四)更衣/淋浴室:必備設施

(五)病理標本巨檢和取材室[參見本節(jié)的三(二)項:“病理標本巨檢和取材室”]

(六)常規(guī)切片室:隸屬于病理科的尸檢室可不另設(參見本節(jié)的三(三)項:“常規(guī)切片的預處理室和常規(guī)/快速制片室”)(七)標本儲藏室:必要設施

六、病理學相關技術實驗室的基本設施

應用特殊染色和組織化學、免疫組織化學、塑料包埋組織切片制備、電子顯微鏡超微病理診斷檢材制備、圖像分析、流式細胞分析(FCM)、聚合酶鏈反應(PCR)、細胞和分子細胞遺傳學、病理學攝影技術和其他新開發(fā)、引進的病理學相關技術的病理科,應個根據有關技術要求,建立具有必備基本設施的實驗室。

《臨床技術操作規(guī)范?病理學分冊》/ 第三章 病理學基本技術規(guī)范

第一節(jié) 病理組織學診斷檢材的制備技術

一、組織的固定

㈠凡需要進行病理組織學檢查的標本(器官或組織),于離體(活體或尸體)后,應盡快置放(浸泡)于裝有足夠量固定液的容器中固定。固定液量應為被固定標本體積的5~10倍。置放標本的容器大小視標本和固定液的體積而定,應適當大一些。臨床科室切取的標本置放于容器中固定后,應盡快送交病理科繼續(xù)固定。未能及時、充分固定的干涸或腐敗標本不能再進行固定和用于制做切片。

㈡常規(guī)固定液為4%中性甲醛(10%中性福爾馬林),應預先多量配制貯存,以備隨時使用。小標本的固定時間為4~6小時,大標本為18~24小時或更久。㈢根據病理學特殊檢查(特殊染色和組織化學染色、免疫組織化學染色和原位核酸分子雜交染色、電鏡觀察等)的需要,應選用其他適宜的固定液進行固定[參見后述的“㈦固定液的常用種類和制備”]。㈣器官、組織固定的基本方法 [另參見本章第四節(jié)(病理標本的肉眼檢查和組織學切片取材技術)]

1.食管、胃、腸、膽囊、膀胱等空腔器官:依規(guī)范方法剪開后,按其自然狀態(tài)平鋪于硬紙板上(重點暴露黏膜面或內表面的病變處),并用大頭針將標本邊緣處固定于紙板上,然后放入4%中性甲醛中固定(黏膜面或內表面朝向容器的液面,并覆蓋薄層脫脂棉)。

2.肝、脾:由器官背面,沿其長軸每間隔1.5~2.0cm縱向平行剖開,切成數片。將每片肝或脾輕輕地平放于裝有4%中性甲醛的容器中,容器底面襯以脫脂棉。應避免標本彎曲和相互間的疊壓。

3.肺葉:放入固定液中的肺葉漂浮于液面,需在肺表面覆蓋薄層脫脂棉。必要時從支氣管注入適量4%中性甲醛。

4.腎:沿腎外緣中線朝腎門方向作一水平切面(深達于腎盞),再行固定。5.淋巴結:先用4%中性甲醛固定1小時后,再沿其長軸切成數片(厚2 ~3mm),繼續(xù)固定。

6.骨組織:先鋸成小片(若是長骨應作橫向鋸片),在4%中性甲醛中固定24小時后,再進行脫鈣。

7.微小組織或液體沉淀物:先用拭紙或濾紙妥為包裹(需用大頭針扎牢),然后放入專用小盒內進行中性4%甲醛固定,以防檢材遺失。

8.凡進入固定程序的標本必須連帶其正確無誤的病理檢驗號(病理號)。㈤多數固定液對人體有害,需要防護,必須在封閉的通風條件下進行操作。㈥組織塊的切取和固定:①由較大標本切取用于制作切片的組織塊(取材)時,應與標本的斷面平行,組織塊厚度一般為0.3 cm(不應>0.5cm),面積一般在1~1.5×1~1.5以內。②切取組織塊的形狀,在充分包括肉眼病變的前提下盡量規(guī)則些(例如方形、矩形、三角形等);由一個標本切取的多塊組織的形狀有所不同,便于蠟塊與其相應切片的核對。③固定組織塊的固定液量,一般應為組織塊總體積的5~10倍以上。④室內常溫(25℃左右)下的固定時間為3~24小時;低溫(4℃)下的固定時間應延長。⑤固定組織塊的容器要大一些。⑥組織塊固定期間需要間斷地輕搖或攪動固定液以利于固定液的滲入。㈦常用固定液

1.4%中性甲醛(10%中性福爾馬林)固定液

甲醛(40%)100 ml 無水磷酸氫二鈉 6.5g 磷酸二氫鈉 4.0g 蒸餾水 900ml 2.乙醇-甲醛(酒精-福爾馬林,AF)固定液 甲醛(40%)100ml 95%乙醇 900ml [說明]一般組織塊經乙醇-甲醛固定1~2小時后,即可移入95%乙醇內脫水。

3.Carnoy固定液 無水乙醇 60ml 氯仿 30ml 冰醋酸 10ml [說明]組織化學染色的常用固定液,組織經Carnoy液固定1~2小時后,即可移入無水乙醇中脫水。4.Zenker固定液 升汞 5.0g 重鉻酸鉀 2.5g 硫酸鈉 1.0g 蒸餾水(加至)100ml [說明]配制本液時,先將升汞溶于蒸餾水中、加溫至40~50℃溶解后,再加入重鉻酸鉀,最后加入硫酸鈉,貯存待用。使用前加入5ml冰醋酸,混合。組織塊需固定12~24小時。切片染色前,需進行脫汞沉淀處理。5.Bouin固定液

飽和苦味酸水溶液(約1.22%)75ml 甲醛(40%)25ml 冰醋酸 5ml [說明]本液臨用時配制。組織塊置于Bouin液固定12~24小時即可(小塊組織只需固定數小時)。經Bouin液固定的組織被苦味酸染成黃色,可用水洗滌12小時后進入乙醇脫水(兼脫色)。不必將組織中的黃色除凈(殘存于組織中的苦味酸無礙染色)

6.過碘酸-賴氨酸-多聚甲醛固定液(PLP)A液:賴氨酸 1.827g 蒸餾水 50ml 0.1mol/L磷酸鹽緩沖液(pH7.4)50ml B液:8%多聚甲醛水溶液 100ml [說明]本液臨用時配制:取A液3份、B液1份,混合后,加入過碘酸鈉,使液體終濃度為2%。組織塊在4℃下固定36~54小時。本液對細胞結構和抗原性保存較好。

7.B5(醋酸鈉-升汞-甲醛)固定液 無水醋酸鈉 1.25g 升汞 6.0g 蒸餾水 90ml [說明]將以上物質混合、溶解,使用前加入甲醛10ml。本液多用于固定淋巴組織。染色前應進行脫汞沉淀處理。如不加甲醛稱為B4固定液(蒸餾水為100 ml)。

8.丙酮固定液

冷丙酮(4℃)固定液用于酶組織化學染色。細胞標本的免疫組化染色也常用冷丙酮固定10分鐘。

二、常規(guī)石蠟包埋組織切片(常規(guī)切片)的制備

㈠組織塊依序進行:①水洗,②脫水,③透明,④浸蠟,⑤包埋和⑥切片。㈡組織切片制備及其HE染色過程中使用的乙醇、丙酮、二甲苯、石蠟等為 易燃、有毒物,必須專人管理,2m以內不得有明火,局部環(huán)境應有良好的通風和消防設施。

㈢常規(guī)切片的手工操作(步驟次序和各步驟的持續(xù)時間)1.水洗:用流水沖洗已經固定的組織塊30min。2.脫水(常溫下)

(1)乙醇-甲醛(AF)液固定 60~120min(2)80%乙醇 60~120min(3)95%乙醇Ⅰ 60~120min(4)95%乙醇Ⅱ 60~120min(5)無水乙醇Ⅰ 60~120min(6)無水乙醇Ⅱ 60~120min(7)無水乙醇Ⅲ 60min [注意事項]①未經充分固定的組織不得進入脫水程序。②用于脫水的試劑容積應為組織塊總體積的5~10倍以上。③自低濃度乙醇向高濃度乙醇逐級移進脫水。④脫水試劑應及時過濾、更換(500ml乙醇可用于500個組織塊脫水;加入硫酸銅的無水乙醇變藍時,提示需要更換)。⑤較大組織塊的脫水時間長于較小者,應將兩者分開進行脫水。⑥組織置于無水乙醇內的時間不宜過長(以免硬化)。⑦丙酮脫水性能強,會使組織塊過縮、硬脆,不宜用以替代無水乙醇。3.透明

(1)二甲苯Ⅰ 20min(2)二甲苯Ⅱ 20min(3)二甲苯Ⅲ 20min [注意事項]①二甲苯的容積應為組織塊總體積的5~10倍以上。②組織塊在二甲苯中透明的時間不宜過長(以防組織硬、脆),并依不同種類組織及其大小而異;組織呈現棕黃或暗紅色透明即可。③二甲苯應及時過濾、更換。④組織經二甲苯適度處理后不顯透明時,常提示該組織的固定或脫水不充分,應查找原因并妥善處理。4.浸蠟

(1)石蠟Ⅰ(45~50℃)60min(2)石蠟Ⅱ(56~58℃)60min(3)石蠟Ⅲ(56~58℃)60min [注意事項]①熔化石蠟必須有專人負責,必須在熔蠟箱內或水浴中(70 ℃)進行,不得用明火加溫。②熔蠟的容積應為組織塊總體積的5~10倍以上。③組織塊經二甲苯適度透明后方可轉入浸蠟過程,應盡可能減少將透明后組織塊表面的二甲苯帶入熔蠟中。④浸蠟時間適宜,過短時浸蠟不充分(組織過軟),過長時組織硬脆。⑤熔蠟應及時過濾、更換。5.包埋

(1)先將熔化的石蠟傾入包埋模具中,再用加熱的彎曲鈍頭鑷子輕輕夾取已經過浸蠟的組織塊,使組織塊的最大面或被特別指定處的組織面向下埋入熔蠟中;應將組織塊平正地置放于包埋模具底面的中央處;包埋于同一蠟塊內的多塊細小組織應彼此靠近并位于同一平面上;腔壁、皮膚和黏膜組織必須垂直包埋(立埋)。

(2)將與組織塊相關的病理號小條置入包埋模具內熔蠟的一側。

(3)待包埋模具內的熔蠟表面凝固后,即將模具移入冷水中加速凝固。

(4)從包埋模具中取出凝固的包埋蠟塊(簡稱蠟快),用刀片去除組織塊周圍的過多石蠟(組織塊周圍保留1~2mm石蠟為宜)。將包埋蠟塊修整成為規(guī)則的正方形或長方形。

(5)將病理號小條牢固地烙貼在蠟塊一側(編號應清晰可見)。(6)把修整好的蠟塊烙貼在支持器上,以備切片。(7)使用包埋機的方法按有關廠商的說明書操作。(8)注意事項

①應將組織塊嚴格分件包埋。包埋時一定要首先認真核對組織塊的病理號(包括亞號)、塊數和取材醫(yī)師對包埋面的要求,準確地包入相應的病理號小條。發(fā)生包埋差錯時,必須立即與取材醫(yī)師和病理科當班負責人取得聯系,及時處置。

②必須嚴防各種異物污染,勿將無關組織(包括縫線、紙屑或其他異物(尤其是硬質異物)埋入蠟塊內。

③包埋過程要操作迅速,以免組織塊尚未埋妥前熔蠟凝固。

④包埋用的熔蠟應純凈,熔點適宜。浸蠟Ⅰ用軟蠟(熔點為45~50℃),浸蠟Ⅱ、Ⅲ和包埋用蠟均用硬蠟(熔點為56~58℃)。⑤包埋用熔蠟使用前應將先靜置沉淀、過濾。

⑥熔蠟時不得使用明火,以防燃燒。包埋用熔蠟的溫度應<65℃;包埋用的鑷子不可加溫過高,以免燙傷組織。6.切片

(1)切片刀或一次性切片刀片必須鋒利。使用切片刀時,必須精心磨備(在低倍顯微鏡下確認刀刃無缺口);使用一次性切片刀片時,應及時更新。(2)載玻片必須潔凈、光亮。

(3)將切片刀或刀片安裝在持刀座上(以15°為宜)。

(4)將蠟塊固定于持支持器上,并調整蠟塊和刀刃至適當位置(刀刃與蠟塊表面呈5°夾角)。

(5)細心移動刀座或蠟塊支持器,使蠟塊與刀刃接觸,旋緊刀座和蠟塊支持器。

(6)修塊(粗切):用右手勻速旋轉切片機輪,修切蠟塊表面至包埋其中的組織塊完整地全部切到。修塊粗切片的厚度為15~20μm。[注意:對于醫(yī)囑再次深切片(特別是在原切片中發(fā)現了有意義病變而進行的深切片),應盡量少修塊,以盡量好地獲得有關病變的連續(xù)性。]

(7)調節(jié)切片厚度調節(jié)器(一般為4~6μm),進行切片,切出的蠟片應連續(xù)成帶,完整無缺,厚度適宜(3~5μm)、均勻,無刀痕、顫痕、皺折、開裂、缺損、松解等。

(8)以專用小鑷子輕輕夾取完整、無刀痕、厚薄均勻的蠟片,放入伸展器的溫水中(45℃左右),使切片全面展開。[注意:必須水溫適宜、潔凈(尤其是水面);每切完一個蠟塊后,必須認真清理水面,不得遺留其它病例的組織碎片,以免污染。]

(9)將蠟片附貼于涂有蛋白甘油或經3-氨丙基-三乙氧基硅烷(3-aminopropyltriethoxy silane,APES)處理過的載玻片上(HE染色時酌情使用,可省略,必要時)。蠟片應置放在載玻片右(或左)2/3處的中央,留出載玻片左(或右)1/3的位置用于貼附標簽。蠟片與載玻片之間無氣泡。

(10)必須立即在置放了蠟片的載玻片一端(待貼標簽的一端),用優(yōu)質記號筆或刻號筆準確、清楚標記其相應的病理號(包括亞號)。[注意:必須確保載玻片上的病理號與相關組織石蠟包埋塊的病理號完全一致,不得錯寫或漏寫病理號。]

(11)將置放了蠟片的載玻片呈45℃角斜置片刻;待載玻片上的水分流下 后,將其置于烤箱中烘烤(60~62℃,30~60min),然后即可進行染色。(12)注意事項 ①組織塊固定、脫水、透明和浸蠟的質量直接影響切片制備。切片過程中遇到的困難首先應注意從切片前的上述各環(huán)節(jié)中尋找原因。

②切片機的質量是制備優(yōu)質切片的重要前提。要使用質量好的切片機,規(guī)范地切片,精心維護切片機。

③經由內窺鏡、穿刺等獲取的細小組織,應間斷性連續(xù)切片多面(一般至少制備6張蠟片,必要時制備更多張)。需作特殊染色、免疫組化染色等的病例,可預制蠟片備用。

④切片人員應細心操作,防范被切片刀具割傷。

㈣常規(guī)切片的自動組織處理機操作(步驟次序和各步驟的持續(xù)時間,總計需要14小時)

1.乙醇-甲醛(AF)固定液 2×60min 2.95%乙醇Ⅰ 2×60min 3.95%乙醇Ⅱ 2×60min 4.無水乙醇Ⅰ 60min 5.無水乙醇Ⅱ 60min 6.二甲苯Ⅰ 30min 7.二甲苯Ⅱ 30min 8.石蠟Ⅰ 30min 9.石蠟Ⅱ 60min 10.石蠟Ⅲ 90min 11.包埋

(1)手工常規(guī)包埋:參見上述的“㈠手工操作”項。(2)用組織包埋機時,按有關廠商說明書的規(guī)定操作。13.切片:參見上述的“㈠手工操作”項。14.注意事項

(1)必須按有關說明書的規(guī)定,使用和維護自動組織處理機、包埋機、磨刀機、封蓋玻片機等儀器等。

(2)要嚴防因停電、機械故障等造成的組織塊損壞。一旦發(fā)生此類事故,必須及時向科主任報告,盡快采取應急措施妥善處置。

(3)使用自動組織處理機時:①合理設定的運行時間(充分利用夜間)。②固定、脫水的環(huán)境溫度不得>30℃。③乙醇、二甲苯和熔蠟的容積,要大于組織塊總體積的5~10倍以上,并應經常過濾,保持清潔;應經常檢查試劑的濃度,及時更新。④對于多量組織塊,可按其大小分批進行處理;小塊組織可適當縮短處理時間。

三、快速石蠟包埋組織切片的制備 ㈠煮沸固定切片法

1.固定:切取大小適宜(厚度<2mm)的組織塊,盡快置入裝有5~8ml 10%中性4%甲醛的試管中煮沸1min,然后已入冷水中。2.脫水

(1)將已經煮沸固定的組織塊取出,用刀片將其厚度修切至<1.5mm,隨 即置入盛有5~8 ml丙酮的試管中,煮沸2 min,然后將丙酮傾棄。

(2)再向該試管中重新加入5~8 ml丙酮并煮沸2min。如此重復3~4次。3.浸蠟:將已經丙酮脫水的組織塊由試管中取出,用吸水紙去除其表面液體,隨即置入75~80℃熔化的石蠟中,待組織塊下沉、不再出現氣泡時(約需30s),即可包埋。4.包埋、切片和染色。

(1)用熱鑷子將預制的蠟塊表面熔化,埋入已經浸蠟的組織塊。

(2)待埋入組織塊的蠟塊表面凝固后,即用載玻片輕壓蠟塊表面片刻,使 蠟塊表面平整。

(3)將蠟塊置入冰水中,使其變硬。

(4)迅速切片,裱片后用吸水紙去除載玻片上的水分。(5)將載玻片用火焰烘干(勿距火焰太近)。(6)迅速進行HE染色。5.注意事項

(1)為了盡量縮短制片時間,必須預先作好有關準備工作,備齊取材用具、試管、固定液、丙酮、酒精燈、火柴(或其他引火器)、包埋用蠟塊、載玻片和染色試劑等,放在固定部位待用。

(2)全部制片過程一般在20~25min內完成。

(3)制片后剩余組織塊應作常規(guī)石蠟包埋切片染色,進一步診斷。(4)含脂肪較多的組織,須經多次丙酮處理。

(5)用于組織固定、脫水、透明的試劑和浸蠟用的石蠟應及時過濾、更換。(6)丙酮、乙醇、二甲苯等為易燃物,進行上述各項流程時,2m距離內不得存在明火。加溫脫水和浸蠟過程必須應用隔水溫箱,不得使用干烤箱操作。㈡超聲波快速處理儀石蠟切片法(參照有關廠商的說明書操作)。

四、冷凍組織切片的制備

㈠應用恒冷箱切片機制備切片:是目前最適用方法。恒冷箱切片機種類較多,應嚴格按有關廠商的說明書操作。用于切片的標本必須未曾固定。㈡應用開放式冷凍切片機制備切片 1.二氧化碳制冷切片

(1)將組織塊放在冷凍臺上,滴加OCT或羥甲基纖維素液于組織塊周圍(將組織塊包埋),使固定在切片機上的切片刀接近組織塊表面。

(2)間斷開放液態(tài)二氧化碳桶的開關,噴凍組織塊和切片刀,使組織塊凍結和切片刀制冷。

(3)迅速移動切片刀進行切片:先將組織塊修平,然后調節(jié)厚度至8~12μm處進行切片。

(4)用毛筆將切片展開,貼附于載玻片上,稍干后,置于冷凍切片固定液中固定1min,隨即進行HE染色。也可用毛筆將切片托入水中,再用玻璃彎針將切片移至染色皿中進行染色。

(5)組織塊也可先在4%中性甲醛中煮沸固定1min,水洗后再行冷凍切片。2.半導體致冷切片

(1)切片刀與持刀器之間要間隔一層云母片或硬紙片。將冷刀致冷器粘在刀面上。

(2)將組織冷凍臺安裝在半導體切片機上。

(3)將冷凍臺和切片刀致冷器上的導線連接在控制臺直流電源上(注意:正負電極不可接反)。

(4)連接致冷器的冷卻水管并開始放水,然后開啟電源;冷卻水管中的水流量不宜過大,在使用過程不得斷水。

(5)調整冷凍溫度調節(jié)器,至切片刀和冷凍臺呈現霜凍。(6)將新鮮組織塊或已固定的組織放在冷凍臺中央,滴加水或OCT,或用水調成糊狀的甲基纖維素于組織塊周圍(將組織塊包埋)。(7)待組織塊冷凍適當后,進行切片。

(8)對于未經固定的新鮮組織,用毛筆將制作滿意的切片展平,立即裱貼于蓋玻片或載玻片上,待冷凍的切片剛要融化時,立即將其置于冷凍切片固定液中固定1min。對于已經固定的組織塊,可用毛筆將制作滿意的切片托入水中,再用玻璃彎針將切片移至染色皿中進行染色。

(9)切片完畢后,先關閉電源,再關閉冷卻水,待冰霜融化后擦干機器,加罩。

3.甲醇致冷切片(按有關廠商的儀器說明書操作)。4.氯乙烷致冷切片

(1)將新鮮的或已經固定的組織塊置于支持器中央,加少許水或OCT。

(2)連續(xù)噴射氯乙烷于組織塊上,待組織塊凍結后,改為間歇噴射,使凍結適度,立即切片。使用氯乙烷時應注意防火、防爆。

(3)進行組織切片的裱貼、固定和染色(與上述方法相同)。㈢注意事項

1.制作冷凍切片所需的試劑和設備等應處于隨時可供使用狀態(tài)。

2.切取的組織塊大小適宜(厚度<2mm),并盡快置于冷凍組織切片機上制備切片。

3.調節(jié)冷凍程度,試切合適時便迅速切片。冷凍不足無法切片,冷凍過度 切片易碎。

4.冷凍切片固定液(1)乙醚-乙醇液

無水乙醚 1份 95%乙醇 1份

(2)乙醇-冰醋酸液

95%乙醇 100ml 冰醋酸 3~5滴

五、脫鈣方法

骨和其他鈣化組織,通常需要脫去鈣鹽后進行切片。骨組織脫鈣前需先行固定。

㈠常規(guī)脫鈣法:

1. 將骨組織鋸成薄片(約1×1×0.3cm)。2. 在AF中或4%中性甲醛中固定6~12h。

3. 將骨片置于5%硝酸(急需時可置于37℃溫箱)中脫鈣,至用針輕刺可 入時為止,約需12~24h(小塊骨組織脫鈣僅需2~3h),其間可更新脫鈣液2~3次。

4. 流水沖洗1~2h。

5. 移入5%甲明礬液,2~4h。6. 流水沖洗2~3h。7. 按常規(guī)脫水。8.石蠟包埋。㈡電解脫鈣法:

將骨片置于裝有8%硝酸和10%甲酸混合液的電泳槽(有蓋的方形玻璃標本 缸或燒杯)內的陽極處,6V直流電源下持續(xù)電解30min~3h,至用針輕刺可入時為止。

㈢骨髓組織脫鈣:可浸泡于苦味酸乙醇飽和液(占85%)、甲醛(占10%)和冰醋酸(占5%)的混合液中(同時進行固定和脫鈣)。㈣注意事項

1.骨片等脫鈣組織的厚度適宜。

2.脫鈣組織與脫鈣液的體積比>1:30。

3.脫鈣過程中應不時搖動,多次更換脫鈣液。4.脫鈣時間不可過長。

5.微波處理可加速脫鈣過程。

6.脫鈣后的組織必須用流水充分沖洗。

7.用于包埋的石蠟硬度適中(不要過軟或過硬)。

六、蘇木素-伊紅(HE)染色

HE染色是應用最廣泛的組織病理學常規(guī)染色技術。㈠染色程序

1.石蠟切片HE染色(常規(guī)HE染色)

(1)二甲苯Ⅰ 5~10min(2)二甲苯Ⅱ 5~10min(3)無水乙醇Ⅰ 1~3min(4)無水乙醇Ⅱ 1~3min(5)95%乙醇Ⅰ 1~3min(6)95%乙醇Ⅱ 1~3min(7)80%乙醇 1min(8)蒸餾水 1min(9)蘇木素液染色 5~10min(10)流水洗去蘇木素液 1min(11)1%鹽酸-乙醇 1~3s(12)稍水洗 1~2s(13)返藍(用溫水或1%氨水等)5~10s(14)流水沖洗 1~2min(15)蒸餾水洗 1~2min(16)0.5%伊紅液染色 1~3min(17)蒸餾水稍洗 1~2s(18)80%乙醇 1~2s(19)95%乙醇Ⅰ 2~3min(20)95%乙醇Ⅱ 2~3min(21)無水乙醇Ⅰ 3~5min(22)無水乙醇Ⅱ 3~5min(23)石炭酸-二甲苯 3~5min(24)二甲苯Ⅰ 3~5min(25)二甲苯Ⅱ 3~5min(26)二甲苯Ⅲ 3~5min(27)中性樹膠封固

注:①(12)和(13)項可省去,但(14)的沖水時間需延長至10~15min(細胞核顯示更清晰)。

②(23)項可用無水乙醇代替;北方地區(qū)可省略。2.冰凍切片HE染色

(1)冰凍切片固定 10~30s(2)稍水洗 1~2s(3)蘇木素液染色(60℃)30~60s(4)流水洗去蘇木素液 5~10s(5)1%鹽酸-乙醇 1~3s(6)稍水洗 1~2min(7)返藍(用溫水或1%氨水等)5~10s(8)流水沖洗 15~30s(9)0.5%伊紅液染色 1~2min(10)蒸餾水稍洗 1~2min(11)80%乙醇 1~2min(12)95%乙醇 1~2min(13)無水乙醇Ⅰ 1~2min(14)無水乙醇Ⅱ 1~2min(15)石炭酸-二甲苯 2~3min(16)二甲苯Ⅰ 2~3min(17)二甲苯Ⅱ 2~3min(18)中性樹膠封固

注:①(7)和(8)項可省去,但(9)的沖水時間需延長至10~15min(細胞核顯示更清晰)。

②(15)項可用無水乙醇代替;北方地區(qū)可省略。

㈡染色結果:細胞核呈藍色,細胞漿、肌纖維、膠原纖維和紅細胞呈不同程度的紅色。鈣鹽和細菌可呈藍色或紫藍色。㈢染色注意事項

1.切片染色前,應徹底脫蠟。

2.用含有升汞液體固定的組織,其切片染色前應先脫去汞鹽:(1)石蠟切片脫蠟至水洗

(2)Lugol液 20min(3)流水沖洗 5min(4)95%乙醇 10min(5)水洗 1min(6)5%次亞硫酸鈉水溶液 5min(7)流水沖洗 5min(8)顯微鏡觀察除汞滿意后,轉入HE染色 3.脫除福爾馬林色素(必要時):(1)石蠟切片脫蠟至水洗

(2)1%NaOH(1ml)與80%乙醇(99ml)混合液 10min(3)流水沖洗 5min(4)轉入HE染色

4.嚴格執(zhí)行HE染色流程,用顯微鏡控制細胞核的蘇木素染色質量。HE染片應著色鮮艷,紅、藍分明,對比清晰。5.載玻片自二甲苯中取出后,應立即用潔凈、光亮的蓋玻片和稠度適宜的中性樹膠濕封載玻片。封蓋處內無氣泡,外無溢膠。封片時必須進行操作人員和局部環(huán)境的二甲苯污染防護。不應將組織切片烤干或風干后再行封片。

6.必須在載玻片的一端牢貼標簽。標簽上應印有病理科所在的醫(yī)院名稱。標簽上應清楚顯示有關的病理號及其亞號;標簽上的病理號應準確無誤,無涂改。7.制片完成后,技術人員應對切片與其相應的病理學檢查記錄單或取材工作記錄單認真進行核對;確認無誤后,將制備好的切片連同相關的活檢申請單/活檢記錄單以及取材工作單等一并移交給有關的病理醫(yī)師;交接雙方經核對無誤后,辦理移交簽字手續(xù)。

8.石蠟切片-HE染色的優(yōu)良率(甲、乙級切片所占的比率)應≥85%。石蠟切片-HE染色質量的基本標準列于附表。

9.制片工作一般應在取材后2個工作日內完成(不含進行脫鈣、脫脂等需要特殊處理的標本)。

10.制片過程出現意外情況時,技術室人員應及時向病理醫(yī)師和科主任報告,設法予以補救。

附表 常規(guī)石蠟包埋-HE染色切片質量的基本標準

優(yōu) 質 標 準

滿 分 質 量 缺 陷 減 分

⒈組織切面完整,①組織稍不完整:減1~3分 ②不完整:減4~10分

內鏡咬檢、穿刺標本切面數 10 ③未達到規(guī)定面數:減5分

⒉切片薄(3~5μm),厚薄均勻 10 ①切片厚(細胞重疊),影響診斷:減6~10分

②厚薄不均勻:減3~5分

⒊切片無刀痕、裂隙、顫痕 10 ①有刀痕、裂隙、顫痕,尚不影響診斷:減2分

②有刀痕、裂隙、顫痕,影響診斷:減5分

⒋切片平坦,無皺褶、折疊 10 ①有皺褶或折疊,尚不影響診斷:各減2分

②有皺褶折或折疊,影響診斷:各減5分

⒌切片無污染 10 有污染:減10分

⒍無氣泡(切片與載玻片間/ 10 ①有氣泡:減3分 蓋片與切片、載玻片間),②膠液外溢:減3分

蓋片周圍無膠液外溢

⒎透明度好 10 ①透明度差:減1~3分

②組織結構模糊:減5~7分

⒏細胞核與細胞漿染色對比清晰 10 ①細胞核著色灰淡或過藍:減5分

②紅(細胞漿)與藍(細胞核)對比不清晰:減5分

⒐切片無松散,裱貼位置適當 10 ①切片松散:減5分

②切片裱貼位置不當:減5分

⒑切片整潔,①切片不整潔:減3分

標簽端正粘牢,編號清晰 10 ②標簽粘貼不牢:減3分

③編號不清晰:減4分

合 計 100

切片質量分級標準: ①甲級片: ≥90分(優(yōu))

②乙級片:75~89分(良)

③丙級片:60~74分(基本合格)

④丁級片: ≤59分(不合格)

㈣HE染色試劑的配制 1.蘇木素染液

(1)Harri蘇木素染液

蘇木素 1g 無水乙醇 10ml 硫酸鋁鉀 20g 蒸餾水 200ml 氧化汞 0.5g 冰醋酸 8ml 先用無水乙醇溶解蘇木素,用蒸餾水加熱溶解硫酸鋁鉀;然后將該兩液合并煮沸,加入氧化汞,繼續(xù)加熱和攪拌溶液至深紫色,隨即用冰水冷卻,恢復至室溫后過濾備用。使用前加入冰醋酸并混勻、過濾。

(2)Gill改良蘇木素液

蘇木素 2g 無水乙醇 250ml 硫酸鋁鉀 17g 蒸餾水 750ml 碘酸鈉 0.2g 冰醋酸 20ml 先用無水乙醇溶解蘇木素,用蒸餾水溶解硫酸鋁鉀;然后將該兩液混合,再依次加入碘酸鈉和冰醋酸。使用前過濾。

(3)Mayer改良蘇木素液

A液:蘇木素 2g 無水乙醇 40ml B液:硫酸鋁鉀 100g 蒸餾水 600ml 將蘇木素溶于無水乙醇中(A液);稍加熱,使硫酸鋁鉀溶于蒸餾水中(B液)。將A液與B液混合后煮沸2min,再用蒸餾水補足至600 ml,加入400mg碘化鈉充分混勻。染液呈紫紅色。2.鹽酸-乙醇分化液

濃鹽酸 1 ml 70%乙醇 99 ml 3.伊紅液

(1)0.25~0.5%伊紅Y水溶液

伊紅Y 0.25~0.5 g 蒸餾水 100 ml 冰醋酸 1滴

(2)0.5%伊紅Y-氯化鈣水溶液

伊紅Y 0.5 g 蒸餾水 100 ml 無水氯化鈣 0.5 g(3)0.25~0.5%伊紅Y-乙醇溶液。

伊紅Y 0.25~0.5 g 80%乙醇 100 ml 4.石炭酸-二甲苯混合液

石炭酸 1份 二甲苯 3份 第二節(jié) 細胞學診斷檢材的制備技術

一、細胞涂片、組織印片和壓片的制備

(一)涂片質量的基本要求

1.將檢材涂布于載玻片的右(或左)2/3處,另1/3部位粘貼標簽。2.單向涂布檢材,避免細胞變形。3.均勻涂布檢材,涂片厚薄適當。

4.紅細胞過多的涂片,可酌情進行溶解紅細胞處理。

(二)涂片方法

1.涂抹法:用棉簽或針頭將標本單向、均勻地涂抹于載玻片上。2.拉片法:將一滴檢材置于一張載玻片上,再用另一張載玻片疊加其 上并予輕壓,再將該兩張載玻片朝反向拉動,從而獲得兩張涂片。3.推片法:將一滴檢液置于載玻片的右端,再用另一張窄邊光滑的載

玻片作為推片,并以與滴液載玻片成40°夾角、自右向左勻力推動檢液,形成涂片。

(三)痰涂片的制作

1.送檢的痰液應是由肺內咳出,最好是清晨空腹時自肺內深咳出的痰液。2.核查無誤的收驗痰液,應立即制作涂片(通常為2~3張)。3.用細簽或無鉤鑷子挑取痰液置于載玻片上,并左右往復薄涂,隨即投入固定液中。

4.痰液中呈現下列性狀的成分可能含有癌細胞,應注意挑取制作涂片:①血絲;②灰白色痰絲(形如白色細線,微細螺旋狀,牽引時可伸長);③透明痰液(可拉成較長細絲)。[及時在細胞學檢查申請單上記錄痰液性狀] 5.檢查痰液中的腫瘤細胞,一般應連續(xù)送檢3次。

(四)黏膜、皮膚表面刮取(刷取、拉取)物和分泌物的涂片的制作

1.陰道排出物、子宮頸刮取物涂片:通常由婦產科醫(yī)師將已制作、固定后的涂片送交病理科檢查。[注意由子宮頸外口上皮移行帶刮取細胞涂片]

2.支氣管鏡、胃鏡等內腔鏡的黏膜刷取物涂片(黏膜刷片):刷片通常由內腔鏡醫(yī)師制作、固定后送交病理科檢查。

3.食管、胃拉網涂片:由食管拉出的套網氣囊適量放氣后,將氣囊套網在載玻片滾動涂片,尤應將套囊上血絲、灰白色物制作涂片;涂片通常由有關臨床醫(yī)師將已制作、固定后的刷片送交病理科檢查。套網中的小塊組織可用來制作石蠟包埋切片。

4.眼、耳、鼻、咽、口腔、皮膚等處病變(潰瘍性病變等)的分泌物涂片。

(五)液體涂片的制作

液體標本(檢材)包括乳頭溢液、胸水、腹水、尿液、胃液、腦脊液、穿

刺液、沖洗液、灌注液等。除乳頭溢液外,其他液體檢材一般均應先行離心(2000r/min,10~20min)后,取其沉淀物制作涂片;液體檢材也可用細胞涂片離心機(cytospin)直接制作細胞涂片。制作好的涂片應立即固定和染色。[及時在細胞學檢查申請單上記錄液體標本的性狀和數量]

液體標本的離心沉淀物較多時,將制作涂片后剩余的沉淀物固定于4%中性甲醛中1h,然后用檫鏡紙或綢布將其包裹,制作石蠟包埋切片。1.乳頭溢液:直接滴于載玻片上制作涂片。

(1)患者乳腺觸及腫物時:用手指自腫物遠方沿乳腺導管引流方向輕力按 模擠壓,獲取溢液,宜取中段溢液和血性溢液涂片。

(2)患者乳腺未觸及腫物時:可自乳暈周圍向乳腺外周輕力按模擠壓,獲取溢液。

2.胸水和腹水

(1)由患者體內抽取的胸水或腹水應盡快送交病理科驗收,檢液量以200~500ml為宜。因故(例如遠途)延時送達時,需在標本中加入40%的甲醛(加入量為送檢胸水、腹水量的1/5),或加入等量的50%乙醇-生理鹽水。

(2)胸水、腹水的離心:采取容器底部的液體10ml(包括可能存在的沉淀物),移入離心管內進行離心。

(3)離心后,傾去全部上清液,將離心管底部含有沉淀物的液體搖勻并用吸管吸出適量,滴注于載玻片上,制作涂片。3.尿液

(1)制作方法同胸、腹水。

(2)尿液含有膠狀物時,應先將其除去。清除方法:用0.5ml/L氫氧化鈉調節(jié)尿液Ph至6.0;離心后,傾去上清液,再向沉淀物中加入95%乙醇5~10ml/L(固定細胞),靜置5min后加入蒸餾水并輕搖(溶去膠狀物);再次離心后,取沉淀物制作涂片。檢查尿液中的腫瘤細胞,一般應連續(xù)送檢3次。4.胃液、胃沖洗液:制作方法同胸、腹水。5.腦脊液

(1)制作方法同胸、腹水。

(2)腦脊液內細胞一般較少,可用微孔濾膜過濾法、沉淀法或纖維捕捉法收集細胞,制作涂片。

6.沖洗液、灌洗液、穿刺液涂片的制作:參見上述的胸水、腹水項。

二、腫物細針穿刺物涂片的制備

(一)實施細針穿刺術前的準備工作

1.實施細針穿刺術的病理醫(yī)師應先了解患者臨床情況,向患者和/或患者授權人說明實施穿刺術的意義、局限性和其他相關問題等,取得患者和/或患方的知情和理解,并簽署由各醫(yī)院制訂的《申請實施細針穿刺術細胞病理學診斷患方知情同意書》。

2.合格的手術操作環(huán)境。

3.必備的適用手術器械和其他相關設施。

(二)腫物穿刺術的操作要點:

1.確認腫物部位并估計其大小、與皮表距離和質地(實/囊性、硬度等),以指導穿刺的方向、深度和用力程度。2.必須嚴格實行無菌操作。

3.根據腫物大小及其血供情況選擇適用型號的穿刺用針頭。穿刺用針頭的外徑為0.6~0.9mm,安置在2ml或10ml的一次性空注射器上。4.針吸法穿刺術操作要點

(1)進行穿刺前,先將安裝了穿刺用針頭的空注射器管芯外拉2cm;然后,用手固定腫物,將安裝在空注射器上的穿刺用針頭刺入腫物(注射器內無空氣)。

(2)迅速上下提插注射器管芯10~20次(其間變換針頭方向3~4次),遂使腫物不同部位的多較內容吸進入針頭和注射器內。

(3)將注射器與針頭分離(管內負壓因而解除);隨后,再將該注射器與仍插于腫物內的針頭相接,拔出針頭,穿刺結束。

(4)迅速推動注射器的管芯,盡快地將位于穿刺針頭內的少量吸出物排射在2~3張清潔的載玻片上,進行涂片。

5.涂片方法:用針頭將載玻片上的吸出物輕輕均勻撥開,或用推片法朝一個方向展開(不可雙向往返推移)。

6.吸出物過少時,可用向離心管內沖洗穿刺針頭;再將沖洗液離心,然后取其沉淀物涂片[參見上述一

(五)項“液體涂片的制作”]。

7.吸出物較多時,可適量50%乙醇-生理鹽水液將涂片后注射器和針頭內剩余的吸出物沖洗至離心管中,離心后,取其沉淀物制作常規(guī)石蠟包埋切片。8.吸出物中含有細小組織塊時,應將其制作常規(guī)石蠟包埋切片。

9.內臟腫物穿刺時,必須在影象學檢查的引導下用較長細針進行穿刺。10.穿刺操作完成后,即在細胞病理學檢查單上書寫穿刺記錄。

三、組織印片、壓片的制備

(一)組織印片:

1.用鋒利刀片剖開剛切取的新鮮腫瘤組織或淋巴結等,然后用清潔載玻片輕壓于組織剖面處,將組織表面的細胞成分印在玻片上。用稍微加溫的載玻片制備印片時,可印得較多細胞。

2.制作淋巴結印片前,應先用濾紙吸去淋巴結切面上的血液、組織液。

(二)壓片:

1.選取微小薄片組織平鋪于一張載玻片上,再用另一張載玻片疊加其上并予輕壓。

2.腦組織質軟,易于制作壓片;稍硬的組織需切成細碎薄片制作壓片。

四、涂片的固定

(一)用于HE染色和巴氏染色的涂片必須濕固定,即涂片后立即進行固定。乳頭溢液涂片和液體標本離心沉淀物涂片,應待涂膜潮干(即周膜稍干而其中央區(qū)域未干)時進行固定。用于瑞氏染色、May-Grünwald姬姆薩染色和免疫細胞化學染色的涂片,必須干固定,即待涂片稍干后再進行固定。

(二)固定液

1.乙醇-冰醋酸液:95%乙醇∶冰醋酸=99∶1。常用。

2.乙醇-乙醚液:95%乙醇49.5ml, 乙醚49.5ml, 冰醋酸1ml。較常用。3.甲醇:滴加在干燥涂片上,用于瑞氏染色、May-Grünwald姬姆薩染色 和免疫細胞化學染色。

4.丙酮:適用于酶類染色。

5.Carnoy液:由無水乙醇、氯仿、冰醋酸按6:3:1比例混成,適用于顯

示核酸、糖原、黏液染色。涂片在Carnoy液固定3~5min后,應移入95%乙醇中繼續(xù)固定。

6.對于液體標本的離心沉淀物、食管拉網獲取的小塊組織或吸出物中的細小組織塊等,固定于4%中性甲醛液中1h,然后制作常規(guī)石蠟包埋切片。

(三)固定方法 1.浸入法:

(1)將稍為干燥(不能完全干燥)的涂片直接浸泡于固定液內至少15 ~ 30min。

(2)因細胞容易脫落,宜以一個盛有固定液的容器只固定一例標本的涂片;一個容器固定多例涂片時,有可能造成的腫瘤細胞交叉污染。(3)必要時可將標本涂在硅化載玻片上,以防脫落。(4)固定液重復使用時,應先用濾紙過濾。

(5)95%乙醇固定液多次重復使用時,需測定其濃度比重,乙醇濃度低于90%時應予棄用。

2.滴加法:將固定液滴加于平放的干燥涂片上,應避免因固定液揮發(fā)造成沉淀。

(四)固定后未染色涂片的保存或郵寄:涂片固定15min后取出,立即滴加數滴甘油于涂膜上。對該涂片進行染色前,應先將其置于95%乙醇中溶去甘油。

五、涂片的染色

最常用于細胞病理學涂片檢查的是蘇木素-伊紅(HE)染色和巴氏染色。一些特殊染色、組織化學染色和免疫組織化學染色也用于細胞病理學的涂片檢查(參見第4章第一、二節(jié))。

(一)蘇木素-伊紅(HE)染色(參見本章第一節(jié)的“六”項)。

(二)巴氏(Papanicolaou)染色

巴氏染色時,細胞透明度好,細胞結構清晰,色彩豐富而鮮艷,主要用于婦科細胞學涂片、痰涂片和富含鱗狀上皮細胞的涂片檢查。1.試劑配制

(1)Harri蘇木素液(參見本章第一節(jié)的“六”項)(2)鹽酸-乙醇液

濃鹽酸 1ml 70%乙醇 99ml(3)橙黃G6液

橙黃G6 0.5g 蒸餾水 5ml 無水乙醇 95ml 磷鎢酸 0.015g 先將橙黃G溶于蒸餾水中,再加入無水乙醇,然后加入磷鎢酸。

(4)EA36染液

①EA36儲備液

A液:亮綠0.5g,溶于5ml蒸餾水中,溶解后加入無水乙醇至100ml。B液:伊紅0.5g,溶于5ml蒸餾水中,溶解后加入無水乙醇至100ml。C液:俾士麥棕0.5g,溶于5ml蒸餾水中,溶解后加入無水乙醇至100ml。

②EA36工作液

EA36儲備液的A液 45 ml EA36儲備液的B液 45 ml EA36儲備液的C 液 10 ml 磷鎢酸 0.2 g 碳酸鋰飽和水溶液 1 滴 2.染色程序

(1)將已經固定的涂片置于80%乙醇中2 min。

(2)蒸餾水洗2 min。

(3)蘇木素液染核10~12 min,自來水洗。

(4)鹽酸-乙醇液分化約20~30s,至涂片呈淡橙紅色。

(5)流水沖洗10~15min,蒸餾水洗。

(6)依次用80%、95%乙醇脫水,各2min。

(7)橙黃G6液染色3~5min。

(8)95%乙醇洗2~3次,洗去多余染液。

(9)EA36工作液染色3~5 min。

(10)95%乙醇洗2~3次,洗去多余染液。

(11)無水乙醇脫水,二甲苯透明,中性樹膠封片。

3.染色結果:細胞核呈深藍色,核仁呈紅色;不同分化類型的鱗狀上皮細胞,其胞漿顏色各異:角化細胞呈粉紅色,不全角化細胞呈橙黃色,角化前細胞呈淡藍或淡綠色;紅細胞呈橙紅或鮮紅色,白細胞的胞漿呈淡藍綠色;粘液呈淡藍或粉紅色。

(三)瑞氏(Wright)染色

瑞氏染色一般用于血液涂片,也可用于檢查腫瘤細胞。1.試劑配制

(1)瑞氏染液

瑞氏染料 1g 甲醇 600ml 將瑞氏染料放入研缽內,加入適量甲醇與之混合研磨,使染料逐漸溶解。將溶解的染液傾入另一玻璃瓶內,然后再加入適量甲醇繼續(xù)研磨;未溶解的染料如此反復多次,直至染料完全溶解、甲醇用完為止。染液避光保存?zhèn)溆谩?/p>

(2)磷酸鹽緩沖液

無水磷酸氫二鈉 6.5g 磷酸二氫鈉 4g 蒸餾水 1 000ml pH:6.5~7.0 2.染色程序

(1)涂片自然干燥。

(2)滴加瑞氏液染色1min。

(2)滴加等量的磷酸緩沖液,輕輕搖蕩玻片或用洗耳膠球在玻片上輕輕吹 氣,使兩液體混合均勻,持續(xù)10~15min。(4)流水洗去染液。

(5)涂片風干后,二甲苯透明,中性樹膠封片。

3.染色結果:胞核呈紫紅色,胞漿呈紫藍色,粘液呈粉紅色或淡藍色。

(四)May-Grünwald-姬姆薩(Giemsa)染色

May-Grünwald-姬姆薩染色適用于造血系統(tǒng)的細胞涂片和鑒別惡型淋巴瘤的類型。May-Grünwald原液和姬姆薩原液配制繁瑣,可直接購買。1.試劑配制

(1)May-Grünwald工作液

May-Grünwald原液 1份

蒸餾水 6~10份

使用前配制。

(2)姬姆薩工作液

姬姆薩原液 1份 蒸餾水 6~10份

使用前配制。2.染色程序

(1)涂片自然干燥,蒸餾水洗1~2min。(2)May-Grünwald工作液染15~30min。

(3)自來水沖洗,洗去載玻片上的染液,蒸餾水稍洗。

(4)姬姆薩工作液染15~30min。

(5)自來水沖洗,洗去載玻片上的染液。

(6)涂片風干后,二甲苯透明,中性樹膠封片。3.染色結果:胞核呈紫紅色,胞漿和核仁呈藍紫色。

(五)Rakoff染色

Rakoff染色用于陰道細胞學涂片快速測定雌激素水平。1. 試劑配制

(1)5%淡綠水溶液 83ml(2)1%伊紅水溶液 17ml 將兩液混合后使用。2.染色程序

(1)用細胞刷沿陰道側壁刷取黏膜鱗狀上皮細胞,放入裝有1~2ml生理鹽水的試管內。(2)在試管內滴入3滴Rakoff染液,用細胞刷在染液中輕搖混合。

(3)將1~2滴混合液滴于載玻片上,制成涂片。(4)待涂片干燥后,用中性樹膠封片。

染色結果:鱗狀上皮細胞的嗜酸性和嗜堿性胞漿區(qū)分明顯。角化前細胞的核呈網狀,角化細胞的固縮核呈基本不著色的空泡狀。

(六)猩紅-固綠染色

猩紅-固綠染色用于顯示性染色體。1.試劑配制(1)猩紅染液

水溶性比布里西猩紅 1.0g 磷鎢酸 0.3g 冰醋酸 5.0ml 50%酒精 100ml(2)固綠染液: 固綠 0.5g 磷鉬酸 0.3g 磷鎢酸 0.3g 冰醋酸 5.0ml 50%乙醇 100ml 2. 染色步驟

(1)涂片經95%乙醇固定后,置于70%乙醇中2min。

(2)猩紅染液中5min。(3)50%乙醇中漂清多余染液。

(4)固綠染液中分化2~5h。每小時在顯微鏡下觀察胞漿和網狀核膜是否呈現綠色;如果綠色滿意,立即取出涂片(一般約需4h)。固縮核呈鮮紅色。

(5)50%乙醇中5min。

(6)依次置于70%、95%和無水乙醇中各2min。

(7)置于二甲苯溶液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中透明,各2min。

(8)中性樹膠封片。

染色結果:胞核呈淡綠色;性染色質呈粉紅色、V字形或貼著于細胞膜呈三角形。在性染色質周圍可見空泡。

(七)Fouchet染色

Fouchet染色用于顯示膽色素。1.染液配制 Fouchet染液

A液:25%三氯醋酸水溶液 B液:10%三氯化鐵水溶液

A、B液皆小量新鮮配制為宜。使用時,取A、B液各30ml混勻(當天使用)。

2.染色步驟

(1)涂片經95%酒精固定后,置于蒸鎦水中漂洗。

(2)Fouchet液中染5min。

(3)蒸鎦水Ⅰ、Ⅱ中各1min。

(4)苦味品紅溶液中染5min。(5)95%乙醇Ⅰ、Ⅱ中漂洗。

(6)無水乙醇Ⅰ、Ⅱ中脫水。

(7)二甲苯Ⅰ、Ⅱ中透明,中性樹膠封片。

3.染色結果:膽色素呈橄欖綠色,膠原纖維呈紅色,涂片背景呈黃色。

(八)硫酸亞鐵染色

硫酸亞鐵染色用于顯示黑色素。1.試劑配制

(1)2.5%硫酸亞鐵水溶液(2)鐵氰化鉀醋酸液 鐵氰化鉀 1g 蒸餾水 99ml 冰醋酸 1ml(3)1%冰醋酸水溶液

(4)核固紅液[參見第4章第一節(jié)的八

(三)項(愛先藍法)] 2.染色程序

(1)涂片經95%酒精固定后,置于蒸鎦水中漂洗1~2min。(2)2.5%硫酸亞鐵溶液中1h。

(3)蒸鎦水Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中漂洗,各1min。(4)鐵氰化鉀醋酸液中30min。(5)1%冰醋酸液中1min。(6)蒸鎦水漂洗。

(7)核固紅液中染1~2min。(8)蒸鎦水漂洗。

(9)依次95%乙醇、無水乙醇脫水,二甲苯透明,中性樹膠封片。3.染色結果:黑色素呈深綠或深藍色,涂片背景呈紅色或粉紅色。

(九)快速硝酸銀染色

快速硝酸銀染色用于顯示卡氏肺囊蟲和真菌。1.試劑配制

(1)硝酸銀烏洛托品

常備液:3%烏洛托品溶液100ml與5%的硝酸銀溶液5ml充分混合。

工作液:常備液25ml、蒸鎦水25ml與5%硼酸鈉2ml充分混合。(2)固綠

常備液:固綠0.2g充分溶解于0.2%冰醋酸液100ml中。

工作液:常備液10ml與蒸鎦水40ml混合(3)5%鉻酸溶液

1%亞硫酸氫鈉溶液 0.2%氯化金溶液 2%硫代硫酸鈉溶液 2.染色步驟

(1)涂片經95%乙醇固定后,置于蒸鎦水中漂洗1min。(2)5%鉻酸溶液(43℃水浴)中2min。(3)5%鉻酸溶液(58℃水浴)中15min。(4)自來水漂洗。

(5)1%亞硫酸氫鈉溶液中30s。(6)自來水沖洗15s。

(7)蒸鎦水Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ漂洗各1min。(8)硝酸銀工作液(43℃水浴)中2min。(9)硝酸銀工作液(58℃水浴)中23min。(10)蒸鎦水Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ漂洗。(11)0.2%氯化金溶液中30s。(12)蒸鎦水Ⅰ、Ⅱ漂洗。

(13)2%硫代硫酸鈉溶液中1min。(14)自來水沖洗15s。(15)固綠工作液中染30s。(16)自來水沖洗15s。(17)蒸鎦水Ⅰ、Ⅱ漂洗。

(18)95%酒精、無水酒精脫水,二甲苯透明,中性樹膠封片。

3.染色結果:卡氏肺囊蟲和真菌皆呈黑色,形狀清晰;糖原和黏蛋白呈玫瑰色或灰色;涂片背景呈淡綠色。

(十)高碘酸-無色品紅(PAS)染色

PAS染色用于顯示多糖(糖原及黏蛋白等)。[參見第4章第一節(jié)的八

(一)項(高碘酸-無色品紅法)]

[《臨床技術操作規(guī)范?病理學分冊》/第四章 病理學相關技術規(guī)范] 第九節(jié) 病理學攝影技術

一、概 述

(一)病理醫(yī)師根據病理學診斷、教學和研究的需要確定病理學攝影的內容,進行客觀、準確的圖像記錄。

(二)病理學攝影的客體包括:①患者體表病征,②大體標本(手術切除和尸檢標本的肉眼病變),③組織學切片(光學顯微鏡下病變),④超薄切片(透射電子顯微鏡下超微病變),⑤冷凍蝕刻標本(掃描電子顯微鏡下超微病變),⑥細胞培養(yǎng)標本,⑦細胞和分子細胞遺傳學檢測結果,⑧尸檢過程,⑨動物實驗標本和⑩文字、圖像資料翻拍等。

二、普通攝影

(一)普通攝影是應用普通照相機拍攝客體的圖像,包括患者體表病征,大體標本的肉眼病變,尸檢過程,動物實驗標本和文字、圖像資料等。攝影時應注意病征或病變顯示、光照、角度等,適度調節(jié)距離、光圈、速度。

(二)患者體表病征攝影

1.需征得患者或患方有關人員同意。2.應遮蓋患者的面容和隱私部位。

(三)大體標本攝影

1.于標本下面鋪墊色澤反差鮮明、協調的平整背景(紙或布),并需置放標尺和相關標本的病理號,必要時添加箭頭等符號標志指示重點部位。2.因照相機固定于翻拍機上,宜選用較慢的快門速度,以增加景深。

(四)尸檢過程攝影

1.宜用28~135mm變焦鏡頭的135相機進行攝影。

2.重要病變的原位攝影:應包括局部肉眼病變特征(“近拍”)及其與毗鄰結構的解剖關系(“全景”),突出重要病變,兼顧顯示全貌。3.離體標本攝影[參見上文:“

(二)大體標本攝影”]

(五)文字、圖像資料翻拍 1.應用翻拍機進行攝影。

2.在翻拍相機的兩側一般至少安裝2~4盞100W燈光,與照明直線呈45o角,以使光線均勻。攝影條件可用測光表確定。

(六)底片的選擇

1.黑白攝影:擴印照片者,可用ASA100速度底片;制作幻燈片者可用ASA25~50速度底片。2.彩色攝影:

(1)用日光型彩色底片攝影時,需用雷登80系列平衡濾色片把色溫調到5600oK狀態(tài);用燈光照射者,無需平衡濾色片。

(2)用燈光型彩色底片在日光下攝影時,需用平衡濾色片把色溫調到3200oK狀態(tài)。

三、光學顯微鏡(光鏡)攝影

(一)光鏡顯微攝影是應用顯微照相機拍攝通過光學顯微鏡放大40~1000倍的客體圖像。

(二)攝影用顯微鏡性能要求 1.具有攝影目鏡筒。

2.能通過目鏡筒對圖像進行對焦。3.具有光鏡選擇移動桿。

4.物鏡具有分辨率良好平視場象。

5.聚光鏡具有孔徑光闌和調節(jié)光軸中心的機構。6.具有視場光闌。

7.光源亮度足夠,電壓可以調節(jié)。8.具有插入濾色鏡的槽口。

(三)顯微攝影的基本裝置

1.具有自動輸片機構的35mm照相機背。

2.具有對不同光照條件進行光路調節(jié)的調節(jié)桿。3.具有能對不同標本面積進行自動測光的裝置。

4.具有與顯微鏡相連接的接圈、平場消色差物鏡(Splan,Dplan)和聚光鏡。5.具有顯微攝影控制臺。目前較常用的有日產Olympus PM-10及PM-20等顯微攝影裝置。常用參數項目包括:①快門按鈕(EXPOSE),②底片類型選擇鍵(FORMAT),③感光度旋鈕(ASA/ISO),④倒易律失效的補償旋鈕(RECIPROCITY),⑤曝光增減旋鈕(EXPOSURE ADJ),⑥快門速度調節(jié)旋鈕(MODE/EXPOSURE TIME),⑦卷片按鈕(OFF/MINDING),⑧停片進片按鈕(NO WINDING),⑨自動曝光鎖按鈕(AEOCK),⑩時間回憶按鈕(TIME RECALL)。

(四)顯微攝影要點

1.顯微照相機必須安放穩(wěn)定,具有一定防震性,室內光線應暗些以避免散射光進入目鏡。

2.選擇適當的彩色或黑白底片裝入照相機身(暗盒)。拍攝常規(guī)HE染色、特殊染色、免疫組化染色切片的病變,宜用感光度ASA為100的彩色或黑白底片;拍攝培養(yǎng)細胞和免疫熒光染色標本,宜用感光度ASA為400的彩色或黑白底片。

3.調節(jié)照明和光照

(1)打開電源,調節(jié)電壓(約在9伏)。(2)視場光闌收縮到取景框邊緣外。

(3)孔徑光闌調到物鏡孔徑數值的60%~80%,例如孔徑為0.25的10×物鏡,聚光鏡上光闌應調到:0.25×60%~80%=0.15~0.2。(4)光通路調節(jié)

①常規(guī)攝影:先將視野與照明合軸、再將聚光鏡調中,使光線同時調到①觀察目鏡和②取景目鏡的視野之中,以便于邊觀察邊曝光攝影。如圖像分布均勻,將曝光增減旋鈕(EXPOSURE ADJ)調至“1”處。

②暗視野、熒光和偏振光攝影:將光線100%調到取景目鏡的視野之中,用調焦鏡觀察視野中的標本圖像,進行攝影。如圖像分布不均勻,應將曝光增減旋鈕調于0.25~4之間。

4.調節(jié)和校準取景目鏡于標準狀態(tài):旋轉調焦鏡鏡筒上的圓環(huán),使取景框中央的雙十字線達到最清晰。

5.將切片等標本放置在載物臺上,先用觀察目鏡選定攝影圖像,再用取景目鏡調整攝影圖像,并轉動微調旋鈕,同時使圖像與取景框中的雙十字線像達到最清晰。

6.用彩色底片攝影時,必須用色溫計調節(jié)色溫:①將光通路100%到達色溫計上(由調焦鏡中看不到光線);②觀察色溫指示表,用平衡濾色鏡(使用日光型底片時用雷登80系列)和燈光亮度將色溫調至最佳色溫點(日光型底片的色溫點為5600K左右,燈光型底片的色溫點定為3200K左右)

7.用黑白底片攝影時,必須按下列對應關系選擇濾色片以提高圖像反差和清晰度:

標本顏色 紅 橙 黃 綠 深藍 濾 色 鏡 藍、綠 藍、綠 藍 紅、藍 深綠、橙

8.檢查光線可達到底片的位置,確定正確的曝光時間和進行曝光;或用自動攝影控制臺上的按鍵曝光。

9.記錄圖像的攝影日期、攝影編號、樣品編號、放大倍數、內容、攝影條件和備注等。

10.將已全部攝影過的底片退回底片暗盒內,取出底片并進行暗室沖洗等后期處理。

四、電子顯微鏡(電鏡)攝影

(一)透射電鏡攝影

1.檢查電鏡工作狀態(tài),確認樣本無漂移現象,選擇好曝光條件。2.調節(jié)好燈絲像,消正像散。3.選擇視野,確定放大倍數。

4.調整物鏡光闌:樣品反差較強時,使用較大的物鏡光闌孔,直至反差適中為止;反差小時,宜用較小的光闌孔。

5.樣本聚焦在低倍電鏡(<1500倍)圖像時,可采用搖擺聚焦法用肉眼定位;樣品聚焦在高倍電鏡(>1500倍)圖像時,除用肉眼觀察定位外,還需采用系列拍照法:于確定焦點后,用細調鈕聚焦,增加物鏡電流,每調動一級最小鈕拍攝一張底片,總計拍攝4~5張,從中選擇最佳底片。6.放平熒光屏,傳送底片使之進入攝影位置。

7.調定曝光亮度和速度,然后啟動快門進行曝光;曝光結束后,將底片送入儲存盒內。將底片全部攝影的儲存盒取出,進行暗室沖洗等后期處理。

8.用于透射電鏡攝影的底片一般為色盲片(對紅光不感光),曝光時間為2~4s,ASA[中文?]為8~25s。

(二)掃描電鏡攝影 1.檢查電鏡工作狀態(tài)

(1)加速電壓強度的選擇:取決于樣品的性質、圖像反差和放大倍率。高倍觀察時一般需要較高的加速電壓,低倍觀察時需要較低的加速電壓。

(2)聚光鏡電流的選擇:在保證圖像亮度和反差要求前提下,盡可能加大聚光鏡電流,以提高照片分辨力,加大景深。

(3)物鏡光闌孔的選擇:對于表面結構高低差異大的樣本可用較小的光闌孔,以獲較大景深;低倍鏡下觀察時,可選用較大光闌孔,以增加視野內的信號強度。

(4)選擇攝影掃描速度。

(5)視野選擇:與透射電鏡相同。

2.確定曝光時間。在掃描電鏡照相機處于光關?F8或F11情況下,照片的曝光時間在50~100s之間。

3.樣品的聚焦程度主要依靠操作人員的肉眼觀察。拍攝較低放大倍數(<1000倍)的圖像,以調節(jié)粗聚焦鈕為主;拍攝較高放大倍數(>1000倍)圖像,應先調節(jié)粗聚焦鈕,再調節(jié)細聚焦鈕。

4.圖像消像散:①先調節(jié)X方向旋鈕,消除X方向的像散;②再調節(jié)Y方向旋鈕,消除Y方向的像散;③最后再調節(jié)細聚焦鈕,直到圖像最清晰為止。

5.調節(jié)高度和反差:掃描電鏡一般裝有亮度和反差自動調節(jié)按鈕,按動該鈕即可得到反差適當的圖像。

6.拍攝:將照相機中的底片調至攝影位置,按動面板上的攝影快門鈕,熒光屏上便由上而下自動掃描圖像;掃描結束后,即完成一幅照片拍攝。

7.底片選擇:掃描電鏡裝有120或135照相機,故一般選擇感光速度為ASA100的120或135膠卷,;裝有Polaroid后背相機的掃描電鏡,可進行一次成像。

8.記錄圖像的攝影日期、攝影編號、樣本編號、放大倍數、內容、攝影條件和備注等。

五、暗室技術

(一)暗室技術用于:①普通攝影、顯微鏡攝影和電鏡攝影底片的沖洗,及其照片的洗印和放大;②幻燈片的制作等。

(二)攝影底片的沖洗操作程序

①于完全黑暗中取出全色底片(色盲片或電鏡底片可在紅燈下取出)→ ②將底片卷入螺旋形的槽內或顯影架上 → ③清水濕潤2min → ④顯影3~12min(20℃)→ ⑤定影10~20min(20℃)→ ⑥水洗30min → ⑦涼干底片 → ⑧分類裝入底片袋內,并做好記錄。

(三)試劑配制

1.顯影液:有多種配方,組成成分大同小異。下列的D‐11配方兼用于沖洗底片和照片的洗印和放大顯影: 水(50℃)500ml 米吐爾 1.0g 無水亞硫酸鈉 75 g 對苯二酚 9.0g 無水碳酸鈉 25 g 溴化鉀 5 g 加水至1 000ml 沖洗電鏡底片、色盲片和制做幻燈片、顯影照片等,需要極強反差,可用以上配方的原液顯影。普通攝影用的全色底片對反差要求不很高,可將原液用清水稀釋成1:2~1:4的工作液。2.停影液

水 750ml 28%醋酸 48ml 加水至1000ml 3.定影液:較常用下列的F‐5酸性堅膜定影液 水(50℃)600ml 硫代硫酸鈉 240g 無水亞硫酸鈉 15g 28%醋酸 48ml 硼砂(結晶)7.5g 硫酸鋁鉀 15 g 加水至1000ml

(四)照片的洗印和放大

洗印和放大照片一般使用黑白放大相紙。這類相紙根據反差分為特軟性、軟性、中性、硬性和特硬性等5種,即0、1、2、3、4號相紙。較常用者為3號相紙。

1.洗印:在印相箱中操作(一般裝有自動定時曝光控制器),主要用于制做透射電鏡攝影的照片。已經曝光的像紙進入沖洗操作程序(同底片的沖洗程序)。

2.放大:在放大機上操作,主要用于制做顯微鏡攝影的照片。(1)操作程序

①放大鏡頭焦距的選擇參見下表:

底片規(guī)格 135 120 120 120 120(16張)(12張)(10張)(8張)負 片 負 片 負 片 底片尺寸

(mm×mm)24×36 45×60 60×50 60×70 60×90 80×105 90×120 108×125 鏡頭焦距

(mm)50 75 75~80 80~90 90~105 135 150 175

②裝入底片:將底片的乳劑面向下,目測聚焦,使放大的圖像結構清晰。③選擇相紙:常用3號放大紙。

④確定鏡頭光圈和曝光時間:對于正常反差的底片,將鏡頭光圈縮小到f/5.6至f/8之間,曝光時間控制在8~20s為宜。⑤將曝光后放大紙進入顯影、定影程序中。

六、數碼攝影技術

數碼攝影通常包括:①拍攝、②下載(將所拍攝的照片由數碼相機下載到電腦中)、③修飾(加工處理等后期制作)和④分享(將經過修飾的照片輸出,例如打印等)4個步驟。

(一)選擇適當的照片質量要求

數碼相機的照片質量(解像度)分為①精細、②正常、③經濟等檔次。圖像質量越好,每張照片占用的存儲空間越大,在相同內存的情況下,解存儲的照片數量越小。因此,在拍攝之前,應先根據需要,設定對于照片的質量要求,即設定壓縮比。

設定壓縮比的原則是:①對照片質量要求越低,壓縮比可越高;②只在監(jiān)視器或電視機上觀察圖像而不打印時,壓縮比可高些,可選擇“正常”甚至“經濟”檔拍攝儲存量小的圖像。③需要打印照片(尤其欲獲大幅彩色照片)時,壓縮比越低越好,應選擇“精細”檔,最好選擇不壓縮的拍攝存儲方式。

(二)力求曝光準確

1.數碼相機的感光度最低為ISO60,最高為ISO6400,多在ISO100左右。ISO額定值較低時,解像度高、色調范圍寬和反差低;ISO額定值較高時,解像度低、色調范圍寬和反差高。2.選擇感光度的原則:(1)檢查光線是否足夠。

(2)盡量用較低的感光度拍攝。

(3)曝光時間不要過長。照度低時,應盡量利用閃光拍攝。避免進行高感光度的長時間曝光。

(4)曝光準確與否決定于對照片質量的要求。

(三)注意對焦條件。

(四)注意用光。

(五)準確使用快門和光圈:宜用自動模式(Auto)拍攝。使用手動相機或將自動相機設置于手動模式時,需要隨時進行調整。

(六)正確設定白平衡:拍攝前設定自動白平衡,或是將白平衡調整設定在與拍攝光照條件一致的檔上。

(七)正確使用存儲媒介:向數碼相機內插入移動式存儲卡時,一定要到位;從相機中取出存儲卡時,要防止滑落到堅硬的物面上,以免不能讀取照片的某些數據,甚至損壞存儲卡。

(八)勿距攝影客體過遠:適當拍攝距離為5~15尺。拍攝小物體、文件等時,應啟動數碼相機的近攝功能。

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