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食品中匹可硫酸鈉的測定

（BJS

201911）

范圍

本標準規(guī)定了食品（含保健食品）中匹可硫酸鈉的高效液相色譜-串聯(lián)質譜聯(lián)用測定方法。

本標準適用于果凍、蜜餞、糖果、飲料等食品（含與上述基質相同的保健食品及片劑、硬膠囊劑保健食品）中匹可硫酸鈉的測定。

原理

試樣粉碎后經水或甲醇溶液提取，必要時經聚酰胺凈化后，經反相色譜柱分離，電噴霧離子源離子化，多反應離子監(jiān)測檢測，外標法定量。

試劑和材料

除另有規(guī)定，本方法所用試劑均為分析純，水為GB/T

6682規(guī)定的一級水。

3.1

試劑

3.1.1乙腈（CH3CN）：色譜純。

3.1.2

甲醇（CH3OH）。

3.1.3

無水乙醇（CH3CH3OH）。

3.1.4

氨水（NH3?H2O）：濃度25

%~28

%。

3.1.5乙酸銨（CH3COONH4）：色譜純。

3.1.6

三氯乙酸（C2HCl3O2）。

3.1.7聚酰胺固相萃取柱：取1

g聚酰胺粉（層析用，200目），用10

mL水活化，并裝填于帶有適量脫脂棉花的10

mL一次性注射器中。亦可采用商品化固相萃取小柱（1000

mg，6

cc），使用前用水活化，或按商品說明書進行活化操作。

3.2

試劑配制

3.2.1

三氯乙酸溶液（1

%）：稱取10

g三氯乙酸（3.1.6），加1000

mL水溶解。

3.2.2

%甲醇溶液：量取700

mL甲醇（3.1.2），加水定容至1000

mL。

3.2.3無水乙醇-氨水-水溶液（7+1+2，體積比）：量取100

mL氨水（3.1.4），700

mL無水乙醇（3.1.3），水200

mL，混勻。

3.2.4乙酸銨溶液（10

mmol/L）:稱取0.77

g乙酸銨（3.1.5），加入1000

mL水溶解，經0.22

μm水相微孔濾膜過濾后備用。

3.3

標準品：匹可硫酸鈉，其中文名稱、英文名稱、CAS號、分子式、相對分子質量、結構式見附錄A。

3.4

標準溶液配制

3.4.1

標準儲備液（1000

mg/L）：準確稱取匹可硫酸鈉標準品10

mg（精確至0.00001

g），置于10

mL容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，制成濃度為1000

mg/L標準儲備液，4℃避光保存，有效期1個月。

3.4.2

標準使用液（5

mg/L）：取標準儲備液（3.4.1）1

mL于200

mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，制成濃度為5

mg/L的標準使用液，4℃避光保存，有效期7天。

3.4.3

標準系列工作溶液：準確量取標準使用液（3.4.2）適量，用水配制成質量濃度為5

ng/mL、10

ng/mL、50

ng/mL、100

ng/mL、250

ng/mL、500

ng/mL，或依儀器響應和實際情況配制適當濃度的標準系列工作溶液。

3.5

材料

3.5.1

微孔濾膜：0.22

μm，PES濾膜和PTFE濾膜。

儀器與設備

4.1液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質譜儀，配電噴霧（ESI）離子源。

4.2

分析天平：感量分別為0.0001

g和0.00001

g

4.3

超聲波水浴。

4.4

恒溫水浴鍋。

4.5

固相萃取裝置。

試樣制備

5.1

果凍、蜜餞、糖果、固體飲料、片劑、硬膠囊劑

取適量代表性樣品（硬膠囊劑取內容物），采用搗碎、剪碎或研碎等方式混勻，裝入潔凈容器中，密封并標記。

5.2

液體飲料

充分混勻，直接取用。

分析步驟

6.1

試樣提取

6.1.1

果凍

稱取1

g（精確到0.001

g）試樣于50

mL離心管中，加入20

mL水，80

℃水浴至膠質溶散，水浴過程中注意搖散，提取液轉移至25

mL容量瓶中，加入2.5

mL三氯乙酸溶液（3.2.1），用水定容至25

mL，待凈化。若提取液渾濁，可取適量8000

r/min離心5

min，上清液待凈化。

6.1.2

蜜餞

稱取1

g（精確到0.001

g）試樣于50

mL離心管中，準確加入40

mL水，超聲提取15

min，8000

r/min離心5

min，上清液轉移至50

mL容量瓶中，用5mL水洗滌殘渣，洗滌液并入同一容量瓶，加入5

mL三氯乙酸溶液（3.2.1），用水定容至50

mL，待凈化。

6.1.3糖果

6.1.3.1壓片糖果

稱取0.5

g（精確到0.0001

g）試樣于50

mL離心管中，準確加入10

mL

%甲醇溶液（3.2.2），渦旋30

s，超聲提取30

min，8000

r/min離心5

min。取上清液1

mL于5

mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，過PTFE微孔濾膜，待測。可根據(jù)實際濃度用水適當稀釋至線性范圍內，供液相色譜-質譜聯(lián)用儀分析。

6.1.3.2其他糖果

稱取1

g（精確到0.001

g）試樣于小燒杯中，加入40

mL水，80℃水浴至樣品溶解（膠基糖果水浴15min，水浴過程中注意搖散），轉移至50

mL容量瓶中，用5

mL水洗滌燒杯，洗滌液并入同一容量瓶，加入5

mL三氯乙酸溶液（3.2.1），用水定容至50

mL，待凈化。若提取液渾濁，可取適量8000

r/min離心5

min，上清液待凈化。

6.1.4

固體飲料

稱取1

g（精確到0.001

g）試樣于50

mL離心管中，加入25

mL水，80℃水浴10

min，8000

r/min離心5

min，收集提取液，加入20

mL水洗滌殘渣，渦旋30

s，8000

r/min離心5

min，合并兩次提取液，于提取液中加入5

mL三氯乙酸溶液（3.2.1），用水定容至50

mL。若提取液渾濁，可取適量8000

r/min離心5

min，上清液待凈化。

6.1.5

液體飲料

稱取1

g（精確到0.001

g）試樣于25

mL具塞比色管中，加入20

mL水，80℃水浴10

min，放冷后加入2.5mL三氯乙酸溶液（3.2.1），用水定容至25

mL。若提取液渾濁，可取適量8000

r/min離心5

min，上清液待凈化。

6.1.6

片劑、硬膠囊劑

同“6.1.3.1壓片糖果”。

6.2

試樣凈化

6.2.1果凍、液體飲料

取10

mL待凈化液至已活化的聚酰胺固相萃取柱（3.1.7）內，待溶液流盡后，依次用10

mL水、15

mL

%甲醇溶液（3.2.2）洗滌，20

mL無水乙醇-氨水-水溶液（3.2.3）洗脫，收集洗脫液于80

℃水浴上蒸發(fā)至近干，用水定容至10

mL，過0.22

μm

PES或PTFE濾膜，待測?？筛鶕?jù)實際濃度用水適當稀釋至線性范圍內，供液相色譜-質譜聯(lián)用儀分析。

6.2.2蜜餞、其他糖果、固體飲料

凈化操作同“5.2.1果凍、蜜餞、液體飲料”，洗脫液于80

℃水浴上蒸發(fā)至近干，用水定容至5

mL，過0.22

μm

PES或PTFE濾膜，待測?？筛鶕?jù)實際濃度用水適當稀釋至線性范圍內，供液相色譜-質譜聯(lián)用儀分析。

6.3

空白試樣

稱取空白試樣適量，與試樣同法處理，制得空白基質溶液。

6.4

儀器參考條件

6.4.1

色譜條件

6.4.1.2色譜柱：C18柱，2.1

mm×100

mm，2.6

μm，或同等性能的色譜柱。

6.4.1.2

流動相：10

mmol/L乙酸銨溶液+乙腈（85+15）

6.4.1.3

流速：0.3

mL/min

6.4.1.4

柱溫：35℃

6.4.1.5進樣量：5

μL

6.4.2質譜條件

6.4.2.1離子源：電噴霧離子源（ESI）。

6.4.2.2

掃描方式：正離子掃描。

6.4.2.3檢測方式：多反應模式（MRM）。

6.4.2.4干燥氣、霧化氣、鞘氣、碰撞氣等均為高純氮氣或其他合適氣體，使用前應調節(jié)相應參數(shù)使質譜靈敏度達到檢測要求，噴霧電壓、離子源溫度、干燥氣溫度、鞘氣溫度、鞘氣流量等參數(shù)應優(yōu)化至最佳靈敏度。

6.4.2.5參考監(jiān)測離子對和參考參數(shù)

表1匹可硫酸鈉定性、定量離子和質譜分析參數(shù)參考值

名稱

母離子

子離子

去簇電壓（V）

碰撞能（V）

匹可硫酸鈉

438.2

183.9*

120

438.2

278.2

120

*定量離子對

6.5

試樣測定

將標準系列工作溶液和試樣溶液分別注入高效液相色譜-質譜聯(lián)用儀中測定。根據(jù)保留時間和相對離子對豐度比定性，外標峰面積定量。

表2

定性確證時相對離子豐度的最大允許偏差

相對離子豐度（%）

>50

>20—50

>10—20

≤10

允許的相對偏差（%）

±20

±25

±30

±50

空白試驗

除不加試樣外，均按試樣同法處理。

結果計算

試樣中匹可硫酸鈉的含量按下式計算：

式中：

X—食品中匹可硫酸鈉（以C18H13NNa2O8S2?H2O計）的含量，mg/kg；

c—試品溶液中匹可硫酸鈉（以C18H13NNa2O8S2?H2O計）的濃度，ng/mL；

V—試品稀釋液體積，mL；

1000—單位換算；

m—試品質量，g。

計算結果以重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的算術平均值表示，結果保留三位有效數(shù)字。

檢測方法的靈敏度、精密度、專屬性

9.1

靈敏度

果凍、蜜餞、其他糖果、飲料取樣量為1

g，稀釋倍數(shù)為25時，定量限為0.125

mg/kg，檢出限為0.05

mg/kg；壓片糖果、片劑、硬膠囊劑取樣量為0.5

g，稀釋倍數(shù)為50時，定量限為0.5

mg/kg，檢出限為0.2

mg/kg。

9.2精密度

在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的15%。

9.3

專屬性

空白試驗應無干擾。

附錄A

匹可硫酸鈉相關信息

表A.1

匹可硫酸鈉名稱、CAS號、分子式、分子量、結構式

名稱

CAS號

分子式

分子量

結構式

匹可硫酸鈉

Sodium

picosulfate

10040-45-6

C18H13NNa2O8S2

481.41

附錄B

標準色譜圖

B.1

標準品總離子流色譜圖（250ng/mL）

B.2標準品提取離子（定量）色譜圖（250ng/mL）

B.3標準品提取離子（定性）色譜圖（250ng/mL）

本方法負責起草單位：廣東省藥品檢驗所

驗證單位：廣東省食品檢驗所（廣東省酒類檢測中心）、廣東省食品工業(yè)研究所有限公司（廣東省質量監(jiān)督食品檢驗站）、國家糖業(yè)質量監(jiān)督檢驗中心、上海食品藥品檢驗所、中國檢驗檢疫科學院、中國食品藥品檢定研究院

主要起草人：何嘉雯、溫家欣、賴宇紅、劉亞雄、羅卓雅、方繼輝