第一篇：食品衛(wèi)生檢驗(yàn)

案例:

如果你是一位食品企業(yè)的質(zhì)量主管，為保證員工能準(zhǔn)確測(cè)定食品中的微生物指標(biāo)，減少由于用具的不清潔帶來的污染。請(qǐng)制定一個(gè)微生物指標(biāo)檢測(cè)常用的新進(jìn)和用后玻璃器皿的清洗標(biāo)準(zhǔn)。

一、微生物指標(biāo)檢測(cè)常用的新進(jìn)玻璃器皿的清洗標(biāo)準(zhǔn)：

1、用任何洗滌方法都不得將玻璃器皿有所損傷,不能用有腐蝕作用的化學(xué)藥劑腐蝕玻璃器皿,玻璃器皿清洗后不能留下刮痕或裂痕。

2、新進(jìn)玻璃器皿（包括載玻片、蓋玻片、試管、吸管、平皿、三角瓶等）含有游離堿，以中和其堿質(zhì)必須用2%的鹽酸浸泡數(shù)小時(shí)，以中和其堿質(zhì)，后用水沖洗干凈，烘干至無水滴。

3、洗凈的玻璃儀器應(yīng)不掛水珠，如果仍掛水珠，則需將儀器重復(fù)洗滌直至達(dá)到要求為止。

4、新的濾器應(yīng)以熱的鹽酸或鉻酸洗液邊抽濾邊清洗，再用蒸餾水洗凈。

二、微生物指標(biāo)檢測(cè)常用的用后玻璃器皿的清洗標(biāo)準(zhǔn)：

1、用任何洗滌方法都不得將玻璃器皿有所損傷,不能用有腐蝕作用的化學(xué)藥劑腐蝕玻璃器皿,玻璃器皿清洗后不能留下刮痕或裂痕。

2、用洗衣粉、洗滌液、去污粉或肥皂清洗污垢，后用清水洗凈，烘干至無水滴。

3、污染細(xì)菌的器材洗凈后，需經(jīng)高壓滅菌或煮沸消毒。

4、用過的載玻片放入1％洗衣粉溶液中煮沸20～30min（注意溶液一定要浸沒玻片，否則會(huì)使玻片鈣化變質(zhì)），待冷卻后，逐個(gè)用自來水洗凈，浸泡于95％的乙醇中備用。蓋玻片散入1％的洗衣粉溶液中，煮沸1min，待稍冷后再煮沸1min，如此重復(fù)2～3次（如煮沸時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)使玻片鈣化變白且變脆易碎）。待冷卻后用自來水沖洗。洗凈后于95％的乙醇中浸泡。帶有活菌的載玻片或蓋玻片可先浸在5％石炭酸，或2～3％來蘇水，或0.1％升汞溶液中消毒24～48小時(shí)后，再按上述方法洗滌。使用前，可用干凈紗布擦去酒精，并經(jīng)火焰微熱，使殘余酒精揮發(fā)，再用水滴檢查，如水滴在玻片上均勻散開，方可使用。

5、血球計(jì)數(shù)板（或Petrof Hausser細(xì)菌計(jì)數(shù)板）使用后應(yīng)立即在水龍頭下用水沖凈，必要時(shí)可用95％酒精浸泡，或用酒精棉輕輕擦拭，切勿用硬物洗刷或抹擦，以免損壞網(wǎng)格刻度。洗滌完畢鏡檢計(jì)數(shù)區(qū)是否殘留菌體或其他沉淀物，若不干凈，則必須重復(fù)洗滌至潔凈為止。洗凈后自行晾干或用吹風(fēng)機(jī)吹干，放入盒內(nèi)保存。

6、若器皿要盛高純度的化學(xué)藥品或者做較精確的實(shí)驗(yàn)，可先在洗液中浸泡過夜，再用自來水沖洗，最后用蒸餾水洗2～3次。洗刷干凈的玻璃器皿烘干備用。染菌的玻璃器皿，應(yīng)先經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌20～30min后取出，趁熱倒出容器內(nèi)的培養(yǎng)物，再用熱的洗滌劑溶液洗刷干凈，最后用水沖洗。染菌的移液管和毛細(xì)吸管，使用后應(yīng)立即放入5％的石炭酸溶液中浸泡數(shù)小時(shí)，先滅菌，后再?zèng)_洗。

7、洗凈的玻璃儀器應(yīng)不沾油膩不掛水珠，如果仍掛水珠，則需將儀器重復(fù)洗滌直至達(dá)到要求為止。

第二篇：《食品衛(wèi)生檢驗(yàn)》試題（精選）

2009-2010 學(xué)年

第三篇：對(duì)我國(guó)動(dòng)物性食品衛(wèi)生檢驗(yàn)狀況調(diào)查

對(duì)我國(guó)動(dòng)物性食品出入境衛(wèi)生檢驗(yàn)狀況調(diào)查

摘要：

動(dòng)物性食品安全是當(dāng)今社會(huì)生活中人們最關(guān)心的問題之一，世界各國(guó)因動(dòng)物性食品所致的食源性疾病發(fā)病率不斷上升，重大食品污染時(shí)間頻頻發(fā)生，這些事件嚴(yán)重影響了大眾的健康，因此，動(dòng)物性食品安全已成為全球性、關(guān)系公眾健康的重大問題。關(guān)鍵詞 ：

動(dòng)物性食品 問題 健康 出入境檢驗(yàn)

正文: 動(dòng)物性食品衛(wèi)生學(xué)(animal derived food hygiene)是以獸醫(yī)學(xué)和公共衛(wèi)生學(xué)的理論為基礎(chǔ),從預(yù)防觀點(diǎn)出發(fā),研究肉、蛋、乳和水產(chǎn)等動(dòng)物性食品的預(yù)防性和生產(chǎn)性衛(wèi)生監(jiān)督，產(chǎn)品衛(wèi)生質(zhì)量的鑒定、控制及其最合理的加工利用，以保證生產(chǎn)、經(jīng)營(yíng)的正常進(jìn)行和保障人、畜的健康，防止疾病傳播和增進(jìn)人類福利的綜合性應(yīng)用科學(xué)。它主要研究如何保證人們獲得符合衛(wèi)生要求，適于人類消費(fèi)的動(dòng)物食品，防止人獸共患病原體和其他可能存在的有害因素經(jīng)由動(dòng)物性產(chǎn)品對(duì)人體健康造成危害，并防止畜禽疾病的傳播，力求既能保障食用者安全，又能充分利用畜產(chǎn)資源和促進(jìn)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。

動(dòng)物性食品的主要特點(diǎn)所謂動(dòng)物性食品是指來源于豬、牛、羊、馬、驢、鹿、狗、兔、駝、禽以及水產(chǎn)動(dòng)物可供人類食用的肉、乳、蛋、魚及制品和副產(chǎn)品。動(dòng)物性食品是人類最重要和必需的食品 ,它在人類食品中的比重隨著社會(huì)的進(jìn)步和人們生活水平的提高而日益增大。1997年我國(guó)動(dòng)物性食品總產(chǎn)量達(dá)6 200萬噸,人年均占有量已由1978年的O.5 kg迅速增加至52.9 kg，動(dòng)物性食品的種類也大為豐富,但動(dòng)物性食品的安全存在較多的問題,尤其獸藥殘留問題突出,多次較大規(guī)模的“瘦肉精”中毒事件引起港人和內(nèi)地及有關(guān)部門極大的震動(dòng),使動(dòng)物性食品的安全的問題再次突出得到了體現(xiàn)。傅武勝[1]

1、檢疫的概念: 檢疫即根據(jù)國(guó)家法律法規(guī)規(guī)定，對(duì)有關(guān)生物體（包括人類、動(dòng)物和植物等）及其產(chǎn)品和其他相關(guān)物品，實(shí)施科學(xué)的檢驗(yàn)鑒定與處理，以防止有害生物（包括人類和動(dòng)物致病菌、病毒、寄生蟲及植物性病、蟲、雜草等）傳入國(guó)境或在國(guó)內(nèi)蔓延及在國(guó)際間傳播的一項(xiàng)強(qiáng)制性行政措施。檢疫有兩種基本屬性：（1）強(qiáng)制性。即檢疫是國(guó)家采取的強(qiáng)制性行政措施，任何單位和個(gè)人不得干擾或阻止。它受法律保護(hù)。因此，許多國(guó)家，包括我們國(guó)家都制定了相關(guān)的法律法規(guī)；（2）預(yù)防性。即檢疫可以防止疫病傳入。而不是等疫病傳入后再去控制。否則，不僅效果差，而且難度大，且代價(jià)高。

動(dòng)物檢疫是遵照國(guó)家法律，運(yùn)用強(qiáng)制性手段和科學(xué)技術(shù)方法，預(yù)防或阻斷動(dòng)物疫病的發(fā)生以及從一個(gè)地區(qū)到另一個(gè)地區(qū)間的傳播。

2、動(dòng)物檢疫的目的和任務(wù)：

（1）保護(hù)農(nóng)、林、牧、漁業(yè)生產(chǎn)。眾所周知，農(nóng)、林、牧、漁業(yè)生產(chǎn)在世界各國(guó)國(guó)民經(jīng)濟(jì)中占有非常重要的地位。采取一切有效的措施免受國(guó)內(nèi)外重大疫情的災(zāi)害，是每個(gè)國(guó)家動(dòng)物檢疫部門的重大任務(wù)。（2）促進(jìn)經(jīng)濟(jì)貿(mào)易的發(fā)展。當(dāng)前國(guó)際間動(dòng)物及動(dòng)物產(chǎn)品貿(mào)易的成交與否，具有優(yōu)質(zhì)、健康的動(dòng)物和產(chǎn)品是關(guān)鍵。動(dòng)物檢疫工作不可缺少、事關(guān)重要。（3）保 張曉（1990.9—）男，2009年畢業(yè)于保定職業(yè)技術(shù)學(xué)院畜牧獸醫(yī)系，河北省石家莊市趙縣人。聯(lián)系電話：*** QQ：971370017 護(hù)人民身體健康。動(dòng)物及其產(chǎn)品與人的生活密切相關(guān)。許多疫病是人畜共患的傳染病，據(jù)有關(guān)方面不完全統(tǒng)計(jì)，目前動(dòng)物疫病中，人畜共患的傳染病已達(dá)196種。1996年在世界范圍內(nèi)引起的瘋牛病（BSE）**其主要原因是與人的健康有關(guān)而風(fēng)靡世界。動(dòng)物檢疫對(duì)保護(hù)人民身體健康具有非常重要的現(xiàn)實(shí)意義。

3、我國(guó)檢疫的法律法規(guī)：

目前涉及動(dòng)物檢疫方面的法規(guī)有《中華人民共和國(guó)進(jìn)出境動(dòng)植物檢疫法》、《中華人民共和國(guó)進(jìn)出境動(dòng)植物檢疫法實(shí)施條例》和《中華人民共和國(guó)動(dòng)物防疫法》以及有關(guān)的配套法規(guī)，如《中華人民共和國(guó)進(jìn)境動(dòng)物一、二類傳染病、寄生蟲病名錄》、《中華人民共和國(guó)禁止攜帶、郵寄進(jìn)境的動(dòng)物、動(dòng)物產(chǎn)品及其他檢疫物名錄》等。《進(jìn)出境動(dòng)植物檢疫法》是中國(guó)動(dòng)植物檢疫的一個(gè)重要法律，它對(duì)動(dòng)物檢疫的目的、任務(wù)、制度、工作范圍、工作方式以及動(dòng)檢機(jī)關(guān)的設(shè)置和法律責(zé)任等作了明確的規(guī)定。《進(jìn)出境動(dòng)植物檢疫法》和《動(dòng)物防疫法》都是為了預(yù)防和消滅動(dòng)物傳染病、寄生蟲病，保護(hù)畜牧業(yè)生產(chǎn)和人民身體健康而制定的。而《進(jìn)出境動(dòng)植物檢疫法》主要是進(jìn)出境動(dòng)物檢疫方面的內(nèi)容，《動(dòng)物防疫法》是立足國(guó)內(nèi)動(dòng)物檢疫和檢疫方面的規(guī)定。

4、動(dòng)物產(chǎn)地檢疫：

出入境檢驗(yàn)檢疫機(jī)構(gòu)派員在動(dòng)物、動(dòng)物產(chǎn)品生產(chǎn)基地實(shí)施的檢疫稱為產(chǎn)地檢疫。

產(chǎn)地檢疫是出入境檢驗(yàn)檢疫把關(guān)的前伸，有利于將檢疫工作深入到生產(chǎn)第一線，利于對(duì)生產(chǎn)、加工部門進(jìn)行技術(shù)指導(dǎo)，使生產(chǎn)單位按檢疫要求加強(qiáng)管理、把好質(zhì)量關(guān)，避免將不符合檢疫要求的動(dòng)物、動(dòng)物產(chǎn)品運(yùn)往口岸造成損失。對(duì)出口動(dòng)物、動(dòng)物產(chǎn)品實(shí)施產(chǎn)地檢疫也是近年來國(guó)外檢疫機(jī)關(guān)提出的要求。開展產(chǎn)地檢疫有利于檢疫人員及時(shí)了解出口動(dòng)物、動(dòng)物產(chǎn)品上感染的有害生物情況，并及時(shí)采取有效措施控制有害生物的發(fā)生，利于提高產(chǎn)品質(zhì)量。我國(guó)出入境檢驗(yàn)檢疫機(jī)構(gòu)及國(guó)外出入境檢疫機(jī)構(gòu)也經(jīng)常派檢疫人員赴出口國(guó)對(duì)擬出口的動(dòng)物、動(dòng)物產(chǎn)品實(shí)施產(chǎn)地檢疫，有效控制有害生物的傳播，了解掌握有害生物的發(fā)生、為害資料，為檢疫科學(xué)決策提供依據(jù)。

5、我國(guó)出入境動(dòng)植物檢疫的主要程序：

5.1.檢疫審批：凡輸入、攜帶、郵寄動(dòng)物、動(dòng)物產(chǎn)品、及其他繁殖材料，貨主、物主或代理人必須事先申請(qǐng)辦理檢疫審批手續(xù)。

5.2.報(bào)檢：輸入、輸出應(yīng)檢物，貨主或代理人應(yīng)按要求填寫報(bào)檢單，向口岸出入境檢驗(yàn)檢疫機(jī)構(gòu)報(bào)檢。

5.3.檢疫：包括現(xiàn)場(chǎng)檢疫、實(shí)驗(yàn)室檢疫、隔離檢疫。現(xiàn)場(chǎng)檢疫：輸入、輸出應(yīng)檢物抵達(dá)口岸時(shí)，檢疫人員登機(jī)、登輪、登車或到貨物停放場(chǎng)所實(shí)施檢疫；實(shí)驗(yàn)室檢疫：檢疫人員按有關(guān)規(guī)定或要求對(duì)輸入、輸出的檢疫物作動(dòng)物疫病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)；隔離檢疫：動(dòng)物在入境后或出境前，必須在出入境檢驗(yàn)檢疫機(jī)關(guān)指定的隔離場(chǎng)作隔離檢疫（大、中動(dòng)物45天，小動(dòng)物30天）。5.4 檢疫結(jié)果的判定和出證：根據(jù)檢疫結(jié)果，按照我國(guó)與有關(guān)國(guó)家或地區(qū)簽定的雙邊檢疫議定書或協(xié)議中的規(guī)定，國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，參考有關(guān)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)出證。

6、對(duì)檢出《入境動(dòng)物一、二類傳染病、寄生蟲病名錄》規(guī)定疾病的動(dòng)物和動(dòng)物產(chǎn)品處理：

輸入動(dòng)物，經(jīng)檢疫不合格的，由口岸出入境檢驗(yàn)檢疫機(jī)構(gòu)簽發(fā)《檢疫處理通知單》，通知貨主或者其代理人作如下處理：1.檢出一類傳染病、寄生蟲病的動(dòng)物，連同其同群動(dòng)物全群退回或者全群撲殺并銷毀尸體；2.檢出二類傳染病、寄生蟲病的動(dòng)物，退回或者撲殺，同群其它動(dòng)物在隔離場(chǎng)或者其它指定地點(diǎn)隔離觀察。輸入動(dòng)物產(chǎn)品和其它檢疫物經(jīng)檢疫不合格的，由口岸出入境檢驗(yàn)檢疫機(jī)構(gòu)簽發(fā)《檢疫處理通知單》，通知貨主或者其代理人作除害、退回或者銷毀處理。經(jīng)除害處理合格的，準(zhǔn)予入境。

附錄：

動(dòng)物疫情報(bào)告制度

一、為加強(qiáng)動(dòng)物疫情報(bào)告工作，及時(shí)、全面、準(zhǔn)確地掌握全鎮(zhèn)疫情動(dòng)態(tài)，針對(duì)疫情制定相應(yīng)的緊急防治措施，做好防范工作，根據(jù)《動(dòng)物防疫法》及有規(guī)定，制定本制度。

二、里耶鎮(zhèn)動(dòng)物防疫站負(fù)責(zé)全鎮(zhèn)動(dòng)物疫情報(bào)告管理工作。

三、動(dòng)物防疫站配備具有助理獸醫(yī)師以上職稱的專職防疫管理人員，并建立健全疫情管理制度和疫情檔案。

四、各村配備動(dòng)物防疫信息員，負(fù)責(zé)疫情信息記錄和報(bào)告。

五、村疫情信息員于每月20日向鎮(zhèn)動(dòng)物防疫站書面匯報(bào)本村 的疫情情況，于每月25日向縣動(dòng)物防疫機(jī)構(gòu)報(bào)告。

六、有疫病流行或發(fā)現(xiàn)新的動(dòng)物疫病時(shí)，及時(shí)上報(bào)縣動(dòng)物防疫機(jī)構(gòu)，同時(shí)采取緊急撲救措施，查明疫源，防止疫情蔓延。

七、各類疫情報(bào)表要認(rèn)真填寫，不得瞞報(bào)、謊報(bào)、遲報(bào)或阻礙他人報(bào)告動(dòng)物疫情，對(duì)因工作失職造成疫情擴(kuò)散的，依法追究法律責(zé)任。

參考文獻(xiàn)：

【1】陳武勝:我國(guó)動(dòng)物性食品中獸藥殘留的危害、現(xiàn)狀和對(duì)策

第四篇：食品衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室操作技術(shù)要求

食品衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室操作技術(shù)要求

第一節(jié)實(shí)驗(yàn)室管理制度

一、實(shí)驗(yàn)室管理制度

1．實(shí)驗(yàn)室應(yīng)制定儀器配備管理、使用制度，藥品管理、使用制度，玻璃器皿管理、使用制度，并根據(jù)安全制度和環(huán)境條件的要求，本室工作人員應(yīng)嚴(yán)格掌握，認(rèn)真執(zhí)行。2．進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室必須穿工作服，進(jìn)入無菌室換無菌衣、帽、鞋，戴好口罩，非實(shí)驗(yàn)室人員不得進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，嚴(yán)格執(zhí)行安全操作規(guī)程。

3．實(shí)驗(yàn)室內(nèi)物品擺放整齊，試劑定期檢查并有明晰標(biāo)簽，儀器定期檢查、保養(yǎng)、檢修，嚴(yán)禁在冰箱內(nèi)存放和加工私人食品。

4．各種器材應(yīng)建立請(qǐng)領(lǐng)消耗記錄，貴重儀器有使用記錄，破損遺失應(yīng)填寫報(bào)告；藥品、器材、菌種不經(jīng)批準(zhǔn)不得擅自外借和轉(zhuǎn)讓，更不得私自拿出。5．禁止在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)吸煙、進(jìn)餐、會(huì)客、喧嘩，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不得帶入私人物品，離開實(shí)驗(yàn)室前認(rèn)真檢查水電，對(duì)于有毒、有害、易燃、污染、腐蝕的物品和廢棄物品應(yīng)按有關(guān)要求執(zhí)行。

6．負(fù)責(zé)人嚴(yán)格執(zhí)行本制度，出現(xiàn)問題立即報(bào)告，造成病原擴(kuò)散等責(zé)任事故者，應(yīng)視情節(jié)直至追究法律責(zé)任。

二、儀器配備、管理使用制度

1．食品微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)具備下列儀器：培養(yǎng)箱、高壓鍋、冰箱、顯微鏡、超凈臺(tái)、普通天平、干燥箱、均質(zhì)器、恒溫水浴箱、菌落計(jì)數(shù)器。

2.實(shí)驗(yàn)室所使用的儀器、容器應(yīng)符合標(biāo)準(zhǔn)要求，保證準(zhǔn)確可靠，凡計(jì)量器具須經(jīng)計(jì)量部門檢定合格方能使用。

3．實(shí)驗(yàn)室儀器安放合理，貴重儀器有專人保管，建立儀器檔案，并備有操作方法，保養(yǎng)、維修、說明書及使用登記本，做到經(jīng)常維護(hù)、保養(yǎng)和檢查，精密儀器不得隨意移動(dòng)，若有損壞需要修理時(shí)，不得私自拆動(dòng)，應(yīng)寫出報(bào)告，通知管理人員，由經(jīng)理同意填報(bào)修理申請(qǐng)，送儀器維修部門。

4.各種儀器（冰箱、溫箱除外），使用完畢后要立即切斷電源，旋鈕復(fù)原歸位，待仔細(xì)檢查后，方可離去。5．一切儀器設(shè)備未經(jīng)設(shè)備管理人員同意，不得外借，使用后按登記本的內(nèi)容進(jìn)行登記。

6．儀器設(shè)備應(yīng)保持清潔，一般應(yīng)有儀器套罩。

7．使用儀器時(shí)，應(yīng)嚴(yán)格按操作規(guī)程進(jìn)行，對(duì)違反操作規(guī)程的因管理不善致使儀器損壞，要追究當(dāng)事者責(zé)任。

三、藥品管理、使用制度1．依據(jù)本室檢測(cè)任務(wù)，制定各種藥品試劑采購計(jì)劃，寫清品名、單位、數(shù)量、純度、包裝規(guī)格，出廠日期等，領(lǐng)回后建立賬目，專人管理，每半年做出消耗表，并清點(diǎn)剩余藥品。2．藥品試劑陳列整齊，放置有序、避光、防潮、通風(fēng)干燥，瓶簽完整，劇毒藥品加鎖存放、易燃、揮發(fā)、腐蝕品種單獨(dú)貯存。

3．領(lǐng)用藥品試劑，需填寫請(qǐng)領(lǐng)單，由使用人和室負(fù)責(zé)人簽字，任何人無權(quán)私自出借或饋送藥品試劑，本單位科、室間或與外單位互借時(shí)需經(jīng)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人簽字。

4．稱取藥品試劑應(yīng)按操作規(guī)范進(jìn)行，用后蓋好，必要時(shí)可封口或黑紙包裹，不使用過期或變質(zhì)藥品。

四、玻璃器皿管理、使用制度1．根據(jù)測(cè)試項(xiàng)目的要求，申報(bào)玻璃儀器的采購計(jì)劃、詳細(xì)注明規(guī)格、產(chǎn)地、數(shù)量、要求，硬質(zhì)中性玻璃儀器應(yīng)經(jīng)計(jì)量驗(yàn)證合格。2．大型器皿建立賬目，每年清查一次，一般低值易耗器皿損壞后隨時(shí)填寫損耗登記清單。

3．玻璃器皿使用前應(yīng)除去污垢，并用清潔液浸泡24 h后，用清水沖洗干凈備用。

4．器皿使用后隨時(shí)清洗，染菌后應(yīng)嚴(yán)格高壓滅菌，不得亂棄亂扔。

五、安全制度

1．進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作衣、帽、鞋必須穿戴整齊。2．在進(jìn)行高壓、干燥、消毒等工作時(shí)，工作人員不得擅自離現(xiàn)場(chǎng)，認(rèn)真觀察溫度、時(shí)間，蒸餾易揮發(fā)、易燃液體時(shí)，不準(zhǔn)直接加熱，應(yīng)置水浴鍋上進(jìn)行。3．嚴(yán)禁用口直接吸取藥品和菌液，按無菌操作進(jìn)行，如發(fā)生菌液、病原體濺出容器外時(shí)，應(yīng)立即用有效消毒劑進(jìn)行徹底消毒，安全處理后方可離開現(xiàn)場(chǎng)。

4．工作完畢，兩手用清水肥皂洗凈，必要時(shí)可用新潔爾滅、過氧乙酸泡手，然后用水沖洗，工作服應(yīng)經(jīng)常清洗，保持整潔，必要時(shí)高壓消毒。

5．實(shí)驗(yàn)完畢，即時(shí)清理現(xiàn)場(chǎng)和實(shí)驗(yàn)用具，對(duì)染菌帶毒物品，進(jìn)行消毒滅菌處理。6．每日下班，尤其節(jié)假日前后認(rèn)真檢查水、電和正在使用的儀器設(shè)備，關(guān)好門窗，方可離去。

六、環(huán)境條件要求1．實(shí)驗(yàn)室內(nèi)要經(jīng)常保持清潔衛(wèi)生，每天上下班應(yīng)進(jìn)行清掃整理，桌柜等表面應(yīng)每天用消毒液擦拭，保持無塵，杜絕污染。2．實(shí)驗(yàn)室應(yīng)井然有序，不得存放實(shí)驗(yàn)室外及個(gè)人物品、儀器等，實(shí)驗(yàn)室用品要擺放合理，并有固定位置。

3．隨時(shí)保持實(shí)驗(yàn)室衛(wèi)生，不得亂扔紙屑等雜物，測(cè)試用過的廢棄物要倒在固定的箱筒內(nèi)，并及時(shí)處理。

4．實(shí)驗(yàn)室應(yīng)具有優(yōu)良的采光條件和照明設(shè)備。

5．實(shí)驗(yàn)室工作臺(tái)面應(yīng)保持水平和無滲漏，墻壁和地面應(yīng)當(dāng)光滑和容易清洗。

6．實(shí)驗(yàn)室布局要合理，一般實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有準(zhǔn)備間和無菌室，無菌室應(yīng)有良好的通風(fēng)條件，無菌室內(nèi)空氣測(cè)試應(yīng)基本達(dá)到無菌。

7．嚴(yán)禁利用實(shí)驗(yàn)室作會(huì)議室及其他文娛活動(dòng)和學(xué)習(xí)場(chǎng)所。

第二節(jié)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)操作要求

一、無菌操作要求

食品微生物實(shí)驗(yàn)室工作人員，必須有嚴(yán)格的無菌觀念，許多試驗(yàn)要求在無菌條件下進(jìn)行，主要原因：一是防止試驗(yàn)操作中人為污染樣品，二是保證工作人員安全，防止檢出的致病菌由于操作不當(dāng)造成個(gè)人污染。

1．接種細(xì)菌時(shí)必須穿工作服、戴工作帽。2．進(jìn)行接種食品樣品時(shí)，必須穿專用的工作服、帽及鞋子，應(yīng)放在無菌室緩沖間，工作前經(jīng)紫外線消毒后使用。3．接種食品樣品時(shí)，應(yīng)在進(jìn)無菌室前用肥皂洗手，然后用75％酒精棉球?qū)⑹植粮蓛簟?/p>

4．進(jìn)行接種所用的吸管，平皿及培養(yǎng)基等必須經(jīng)消毒滅菌，打開包裝未使用完的器皿，不能放置后再使用，金屬用具應(yīng)高壓滅菌或用95%酒精點(diǎn)燃燒灼三次后使用。

5．從包裝中取出吸管時(shí)，吸管尖部不能觸及外露部位，使用吸管接種于試管或平皿時(shí)，吸管尖不得觸及試管或平皿邊。6．接種樣品、轉(zhuǎn)種細(xì)菌必須在酒精燈前操作，接種細(xì)菌或樣品時(shí)，吸管從包裝中取出后及打開試管塞都要通過火焰消毒。

7．接種環(huán)和針在接種細(xì)菌前應(yīng)經(jīng)火焰燒灼全部金屬絲，必要時(shí)還要燒到環(huán)或針與桿的連接處，接種結(jié)核菌和烈性菌的接種環(huán)應(yīng)在沸水中煮沸5min，再經(jīng)火焰燒灼。

8．吸管吸取菌液或樣品時(shí)，應(yīng)用相應(yīng)的橡皮頭吸取，不得直接用口吸。

二、無菌間使用要求

1．無菌間應(yīng)設(shè)有與無菌間大小相應(yīng)的緩沖間及推拉門，另設(shè)有0.5-0.7m2的小窗，以備進(jìn)

入無菌間后傳遞物品。2．無菌間內(nèi)應(yīng)保持清潔，工作后用消毒液消毒，擦拭工作臺(tái)面，不得存放與實(shí)驗(yàn)無關(guān)的物品。

3．無菌間使用前后應(yīng)將門關(guān)緊，打開紫外消毒車，需30W紫外燈，距離在1.0m處，照射時(shí)間不少于30min，使用紫外燈，應(yīng)注意不得直接在紫外線下操作，以免引起損傷，燈管每隔兩周需用酒精棉球輕輕擦拭，除去上面灰塵和油垢，以減少紫外線穿透的影響。

4．處理和接種食品標(biāo)本時(shí)，進(jìn)入無菌間操作，不得隨意出入，如需要傳遞物品，可通過小窗傳遞。

三、消毒滅菌要求

微生物檢測(cè)用的玻璃器皿、金屬用具及培養(yǎng)基、被污染和接種的培養(yǎng)物等，必須經(jīng)滅菌后方能使用。

（一）干熱和濕熱高壓蒸氣鍋滅菌方法

1．滅菌前準(zhǔn)備（1）所有需要滅菌的物品首先應(yīng)清洗晾干，玻璃器皿如吸管、平皿用紙包裝嚴(yán)密，如用金屬筒應(yīng)將上面通氣孔打開。（2）裝培養(yǎng)基的三角瓶塞，用紙包好，試管蓋好蓋，用紗布包好。2．裝放

（1）干熱滅菌器：裝放物品不可過擠，且不能接觸箱的四壁。（2）高壓蒸氣鍋：放置滅菌物品分別包扎好，直接放入消毒筒內(nèi)，物品之間不能過擠。3．設(shè)備檢查（1）檢查門的開關(guān)是否靈活，橡皮圈有無損壞，是否平整。（2）檢查壓力表蒸氣排盡時(shí)是否停留在零位，關(guān)好門和蓋，通蒸氣或加熱后，觀察是否漏氣，壓力表與溫度計(jì)所標(biāo)示的狀況是否吻合，管道有無堵塞。

（3）對(duì)有自動(dòng)電子程序控制裝置的滅菌器，使用前應(yīng)檢查規(guī)定的程序，是否符合于進(jìn)行滅菌處理的要求。4．滅菌處理(1)干熱滅菌法：此法適應(yīng)于在干熱情況下，不損壞、不變質(zhì)、不蒸發(fā)的物品、較常用于玻璃器皿、金屬制品、陶瓷制品等的滅菌。

a．器械器皿應(yīng)清洗后再干燥，以防附著在表面的污物炭化。

b．滅菌時(shí)安放物品不能過擠，不要直接接觸底和箱壁，物品之間留有空隙。

c．滅菌時(shí)將箱門關(guān)緊，接上電源，先將排氣孔打開約30min，排除滅菌器中的冷空氣，溫度升至160℃調(diào)節(jié)指示燈，維持1.5 –2h。d．滅菌完畢后或溫度升溫過程中，須在60℃以下才能打開箱門。(2)立式壓力蒸氣滅菌器的使用應(yīng)按下列步驟進(jìn)行：

a．立式高壓鍋加水16L（重復(fù)使用時(shí)應(yīng)將水量補(bǔ)足，水變混濁需更換）.b．蓋好頂蓋擰緊，勿使漏氣；立式壓力鍋通上電源，并打開頂蓋上的排氣閥放掉冷氣（水沸騰后排氣10-15min）。

c．關(guān)閉排氣閥，使蒸氣壓上升到規(guī)定要求，并維持規(guī)定時(shí)間（按滅菌物品性質(zhì)與有關(guān)情況而定）。d．達(dá)到規(guī)定時(shí)間后，對(duì)需干燥的物品，立即打開排氣閥排出蒸氣，待壓力恢復(fù)到零時(shí)，自然冷卻至60℃后開蓋取物；如為液體物品，不要打開排氣閥，而應(yīng)立即將鍋去除熱源，待自然冷卻，壓力恢復(fù)至零，溫度降到60℃以下再開蓋取物，以防突然減壓液體劇烈沸騰或容器爆破。5．滅菌溫度與時(shí)間(1)干熱滅菌器滅菌溫度160℃，1.5-2h。

(2)壓力蒸氣滅菌鍋滅菌溫度與時(shí)間見表1。

表1

物品滅菌時(shí)間

115℃121℃

不含糖等耐熱物質(zhì)培養(yǎng)基

含糖類等不耐熱培養(yǎng)基染菌培養(yǎng)物器械器皿15-20min30min30min

（二）間歇滅菌方法

1．此滅菌方法系利用不加壓力的蒸氣滅菌，某些物質(zhì)經(jīng)高壓蒸氣滅菌容易破壞，可用此法滅菌。

（1）將欲滅菌物品置于鍋內(nèi)，蓋上頂蓋，打開排水口，使器內(nèi)余水排盡。（2）關(guān)閉排水口，打開進(jìn)氣門，根據(jù)需要消毒10～20min。

（3）滅菌完畢關(guān)閉進(jìn)氣門，取出物品待冷至室溫溫度，放入37℃溫箱過夜，次日仍按上述方法消毒，如此三次，即可達(dá)到滅菌目的。

2．煮沸消毒：可用煮鍋或煮沸消毒器，水沸騰后再煮5～15min，也可在水中加入2﹪石炭酸煮沸5min，加入0.02﹪甲醛，80℃煮60min均可達(dá)到滅菌目的，但選用煮沸消毒的增消劑時(shí)，應(yīng)注意對(duì)物品的腐蝕性.3．滅菌處理：滅菌后物品，按正常情況已屬無菌，從滅菌器中取出應(yīng)仔細(xì)檢查放置，以免再度污染。

(1)物品取出，隨即檢查包裝的完整性，若有破壞或棉塞脫掉，不可作為無菌物品使用。

(2)取出的物品，如為包裝有明顯的水浸者，不可作為無菌物品使用。(3)培養(yǎng)基或試劑等，應(yīng)檢查是否符合達(dá)到滅菌后的色澤或狀態(tài)，未達(dá)到者應(yīng)廢棄。

(4)啟閉式容器，在取出時(shí)應(yīng)將篩孔關(guān)閉。(5)取出的物品掉落在地或誤放不潔之處，或沾有水液，均視為受到污染，不可作為無菌物品使用。(6)取出的合格滅菌物品，應(yīng)存放于貯藏室或防塵柜內(nèi)，嚴(yán)禁與未滅菌物品混放。

(7)凡屬合格物品，應(yīng)標(biāo)有滅菌日期及有效期限。(8)每批滅菌處理完成后，記錄滅菌品名、數(shù)量、溫度、時(shí)間、操作者。

四、有毒有菌污物處理要求 微生物實(shí)驗(yàn)所用實(shí)驗(yàn)器材、培養(yǎng)物等未經(jīng)消毒處理，一律不得帶出實(shí)驗(yàn)室。1．經(jīng)培養(yǎng)的污染材料及廢棄物應(yīng)放在嚴(yán)密的容器或鐵絲筐內(nèi)，并集中存放在指定地點(diǎn)，待統(tǒng)一進(jìn)行高壓滅菌。

2．經(jīng)微生物污染的培養(yǎng)物，必須經(jīng)121℃30min高壓滅菌。3．染菌后的吸管，使用后放入消毒液中，最少浸泡24h（消毒液體不得低于浸泡的高度）再經(jīng)121℃30 min高壓滅菌。

4．涂片染色沖洗片的液體，一般可直接沖入下水道，烈性菌的沖洗液必須沖在燒杯中，經(jīng)高壓滅菌后方可倒入下水道，染色的玻片放入消毒液中浸泡24 h后，煮沸洗滌。做凝集試驗(yàn)用的玻片或平皿，必須高壓滅菌后洗滌。

5．打碎的培養(yǎng)物，立即用消毒液噴灑和浸泡被污染部位，浸泡半小時(shí)后再擦拭干凈。污染的工作服或進(jìn)行烈性試驗(yàn)所穿的工作服、帽、口罩等，應(yīng)放入專用消毒袋內(nèi)，經(jīng)高壓滅菌后方能洗滌。

五、培養(yǎng)基制備要求

培養(yǎng)基制備的質(zhì)量將直接影響微生物生長(zhǎng)。因?yàn)楦鞣N微生物對(duì)其營(yíng)養(yǎng)要求不完全相同，培養(yǎng)目的的不同，各種培養(yǎng)基制備要求如下：

1．根據(jù)培養(yǎng)基配方的成分按量稱取，然后溶于蒸餾水中，在使用前對(duì)應(yīng)用的試劑藥品應(yīng)進(jìn)行質(zhì)量檢驗(yàn)。

2．PH測(cè)定及調(diào)節(jié)：PH測(cè)定要在培養(yǎng)基冷至室溫時(shí)進(jìn)行，因在熱或冷的情況下，其PH有一定差異，當(dāng)測(cè)定好時(shí)，按計(jì)算量加入堿或酸混勻后，應(yīng)再測(cè)試一次。培養(yǎng)基PH值一定要準(zhǔn)確，否則會(huì)影響微生物的生長(zhǎng)或影響結(jié)果的觀察。但需注意因高壓滅菌可影響一些培養(yǎng)基的PH降低或升高，故不宜滅菌壓力過高或次數(shù)太多，以免影響培養(yǎng)基的質(zhì)量，指示劑、去氧膽酸鈉、瓊脂等一般在調(diào)完P(guān)H后再加入。

3．培養(yǎng)基需保持澄清，便于觀察細(xì)菌的生長(zhǎng)情況，培養(yǎng)基加熱煮沸后，可用脫脂棉花或絨布過濾，以除去沉淀物，必要時(shí)可用雞蛋白澄清處理，所用瓊脂條要預(yù)先洗凈晾干后使用，避免因瓊脂含雜質(zhì)而影響透明度。

4．盛裝培養(yǎng)基不宜用鐵、銅等容器，使用洗凈的中性硬質(zhì)玻璃容器為好。

5．培養(yǎng)基的滅菌既要達(dá)到完全滅菌目的，又要注意不因加熱而降低其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，一般121℃

15min即可，如為含有不耐高熱物質(zhì)的培養(yǎng)基如糖類、血清、明膠等，則應(yīng)采用低溫滅菌或間歇法滅菌，一些不能加熱的試劑如亞碲酸鉀、卵黃、TTC、抗菌素等，待基礎(chǔ)瓊脂高壓滅菌后涼至50℃左右再加入。

6．每批培養(yǎng)基制備好后，應(yīng)做無菌生長(zhǎng)試驗(yàn)及所檢菌株生長(zhǎng)試驗(yàn)。如果是生化培養(yǎng)基，使用標(biāo)準(zhǔn)菌株接種培養(yǎng)，觀察生化反應(yīng)結(jié)果，應(yīng)呈正常反應(yīng)，培養(yǎng)基不應(yīng)貯存過久，必要時(shí)可置4℃冰箱存放。

7．目前各種干燥培養(yǎng)基較多，每批需用標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行生長(zhǎng)試驗(yàn)或生化反應(yīng)觀察，各種培養(yǎng)基用相應(yīng)菌株生長(zhǎng)試驗(yàn)良好后方可應(yīng)用，新購進(jìn)的或存放過久的干燥培養(yǎng)基，在配制時(shí)也應(yīng)測(cè)PH，使用時(shí)需根據(jù)產(chǎn)品說明書用量和方法進(jìn)行。

8．每批制備的培養(yǎng)基所用化學(xué)試劑、滅菌情況及菌株生長(zhǎng)試驗(yàn)結(jié)果、制作人員等應(yīng)做好記錄，以備查詢。

六、樣品采集及處理要求

1．所采集的檢驗(yàn)樣品一定要具有代表性，采樣時(shí)應(yīng)首先對(duì)該批食品原料、加工、運(yùn)輸、貯藏方法條件、周圍環(huán)境衛(wèi)生狀況等進(jìn)行詳細(xì)調(diào)查，檢查是否有污染源存在。

2．根據(jù)食品的種類及數(shù)量，采樣數(shù)量及方法應(yīng)按標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法的要求進(jìn)行。

3．采樣應(yīng)注意無菌操作，容器必須滅菌，避免環(huán)境中微生物污染，容器不得使用煤酚皂溶液，用新潔爾滅、酒精等消毒藥物滅菌，更不能含有此類消毒藥物或抗生素類藥物，以避免殺死樣品中的微生物，所用剪、刀、匙用具也需滅菌方可應(yīng)用。

4．樣品采集后應(yīng)立即送往檢驗(yàn)室進(jìn)行檢驗(yàn)，送檢過程中一般不超過3h，如路程較遠(yuǎn)，可保存在1～5℃環(huán)境中，如需冷凍者，則在凍存狀態(tài)下送檢。

5．檢驗(yàn)室收到樣品后，進(jìn)行登記（樣品名稱、送檢單位、數(shù)量、日期、編號(hào)等），觀察樣品的外觀，如果發(fā)現(xiàn)有下列情況之一者，可拒絕檢驗(yàn)。

(1)樣品經(jīng)過特殊高壓、煮沸或其他方法殺菌者，失去代表原食品檢驗(yàn)意義者。

(2)瓶、袋裝食品已啟開者，食品已折碎不完整者，即失去原食品形狀者（食物中毒樣品除外）。

(3)按規(guī)定采樣數(shù)量不足者。

對(duì)送檢符合要求的樣品，檢驗(yàn)室收到后，應(yīng)立即進(jìn)行檢驗(yàn)，如果條件不具備，應(yīng)置4℃冰箱存放，及時(shí)準(zhǔn)備創(chuàng)造條件，然后進(jìn)行檢驗(yàn)。

6．樣品檢驗(yàn)時(shí)，根據(jù)其不同性狀，進(jìn)行適當(dāng)處理。

(1)液體樣品接種時(shí)，應(yīng)充分混合均勻，按量吸取進(jìn)行接種。

(2)固體樣品，用滅菌刀、剪取其不同部位共25g，置于225ml滅菌生理鹽水或其他溶液中，用均質(zhì)器攪碎混勻后，按量吸取接種。

(3)瓶、袋裝食品應(yīng)用滅菌操作啟開，根據(jù)性狀選擇上述方法處理后接種。

七、樣品檢驗(yàn)、記錄和報(bào)告的要求

1．檢驗(yàn)室收到樣品后，首先進(jìn)行外觀檢驗(yàn)，及時(shí)按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法進(jìn)行檢驗(yàn)，檢驗(yàn)過程中要認(rèn)真、負(fù)責(zé)、嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，避免環(huán)境中微生物污染。

2．樣品檢驗(yàn)過程中所用方法、出現(xiàn)的現(xiàn)象和結(jié)果等均要用文字寫出試驗(yàn)紀(jì)錄，以作為對(duì)結(jié)果分析、判定的依據(jù)，記錄要求詳細(xì)、清楚、真實(shí)、客觀、不得涂改和偽造。

第五篇：食品衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室操作要求

食品衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室操作要求

食品微生物實(shí)驗(yàn)室工作人員，必須有嚴(yán)格的無菌觀念，許多試驗(yàn)要求在無菌條件下進(jìn)行，主要原因：一是防止試驗(yàn)操作中人為污染樣品，二是保證工作人員安全，防止檢出的致病菌由于操作不當(dāng)造成個(gè)人污染。

一、無菌操作要求

1.接種細(xì)菌時(shí)必須穿工作服、戴工作帽。

2.進(jìn)行接種食品樣品時(shí)，必須穿專用的工作服、帽及拖鞋，應(yīng)放在無菌室緩沖間，工作前經(jīng)紫外線消毒后使用。

3.接種食品樣品時(shí)，應(yīng)在進(jìn)無菌室前用肥皂洗手，然后用75％酒精棉球?qū)⑹植粮蓛簟?/p>

4.進(jìn)行接種所用的吸管，平皿及培養(yǎng)基等必須經(jīng)消毒滅菌，打開包裝未使用完的器皿，不能放置后再使用，金屬用具應(yīng)高壓滅菌或用95%酒精點(diǎn)燃燒灼三次后使用。

5.從包裝中取出吸管時(shí)，吸管尖部不能觸及外露部位，使用吸管接種于試管或平皿時(shí)，吸管尖不得觸及試管或平皿邊。

6.接種樣品、轉(zhuǎn)種細(xì)菌必須在酒精燈前操作，接種細(xì)菌或樣品時(shí)，吸管從包裝中取出后及打開試管塞都要通過火焰消毒。

7.接種環(huán)和針在接種細(xì)菌前應(yīng)經(jīng)火焰燒灼全部金屬絲，必要時(shí)還要燒到環(huán)和針與桿的連接處，接種結(jié)核菌和烈性菌的接種環(huán)應(yīng)在沸水中煮沸5min，再經(jīng)火焰燒灼。

8.吸管吸取菌液或樣品時(shí)，應(yīng)用相應(yīng)的橡皮頭吸取，不得直接用口吸。

二、無菌間使用要求

1.無菌間通向外面的窗戶應(yīng)為雙層玻璃，并要密封，不得隨意打開，并設(shè)有與無菌間大小相應(yīng)的緩沖間及推拉門，另設(shè)有0.5-0.7m2的小窗，以備進(jìn)入無菌間后傳遞物品。

2.無菌間內(nèi)應(yīng)保持清潔，工作后用2%-3%煤酚皂溶液消毒，擦拭工作臺(tái)面，不得存放與實(shí)驗(yàn)無關(guān)的物品。

3.無菌間使用前后應(yīng)將門關(guān)緊，打開紫外燈，如采用室內(nèi)懸吊紫外燈消毒時(shí)，需30W紫外燈，距離在1.0m處，照射時(shí)間不少于30min，使用紫外燈，應(yīng)注意不得直接在紫外線下操作，以免引起損傷，燈管每隔兩周需用酒精棉球輕輕擦拭，除去上面灰塵和油垢，以減少紫外線穿透的影響。

4.處理和接種食品標(biāo)本時(shí)，進(jìn)入無菌間操作，不得隨意出入，如需要傳遞物品，可通過小窗傳遞。

5.在無菌間內(nèi)如需要安裝空調(diào)時(shí)，則應(yīng)有過濾裝置

三、消毒滅菌要求

微生物檢測(cè)用的玻璃器皿、金屬用具及培養(yǎng)基、被污染和接種的培養(yǎng)物等，必須經(jīng)滅菌后方能使用。

（一）干熱和濕熱高壓蒸氣鍋滅菌方法

1．滅菌前準(zhǔn)備

（1）所有需要滅菌的物品首先應(yīng)清洗晾干，玻璃器皿如吸管、平皿用紙包裝嚴(yán)密，如用金屬筒應(yīng)將上面通氣孔打開。

（2）裝培養(yǎng)基的三角瓶塞，用紙包好，試管蓋好蓋，注射器須將管芯抽出，用紗布包好。

2．裝放

（1）干熱滅菌器：裝放物品不可過擠，且不能接觸箱的四壁。

（2）大型高壓蒸氣鍋：放置滅菌物品分別包扎好，直接放入消毒筒內(nèi)，物品之間不能過擠。

3．設(shè)備檢查

（1）檢查門的開關(guān)是否靈活，橡皮圈有無損壞，是否平整。

（2）檢查壓力表蒸氣排盡時(shí)是否停留在零位，關(guān)好門和蓋，通蒸氣或加熱后，觀察是否漏氣，壓力表與溫度計(jì)所標(biāo)示的狀況是否吻合，管道有無堵塞。

（3）對(duì)有自動(dòng)電子程序控制裝置的滅菌器，使用前應(yīng)檢查規(guī)定的程序，是否符合于進(jìn)行滅菌處理的要求。

4．滅菌處理

(1)干熱滅菌法：此法適應(yīng)于在干熱情況下，不損壞、不變質(zhì)、不蒸發(fā)的物品、較常用于玻璃器皿、金屬制品、陶瓷制品等的滅菌。

① 器械器皿應(yīng)清洗后再干烤，以防附著在表面的污物炭化。

②滅菌時(shí)安放物品不能過擠，不要直接接觸底和箱壁，物品之間留有空隙。

③菌時(shí)將箱門關(guān)緊，接上電源，先將排氣孔打開約30min，排除滅菌器中的冷空氣，溫度升至160℃調(diào)節(jié)指示燈，維持1.5 –2h。

④ 滅菌完畢后或溫度升溫過程中，須在60℃以下才能打開箱門。

(2)手提式高壓鍋或立式壓力蒸氣滅菌器的使用應(yīng)按下列步驟進(jìn)行：

①手提式高壓鍋在主體內(nèi)加入3L清水，立式高壓鍋加水16L（重復(fù)使用時(shí)應(yīng)將水量補(bǔ)足，水變混濁需更換）.②手提式壓力鍋將頂蓋上的排氣管插入消毒桶內(nèi)壁的方管中（無軟管或軟管銹蝕破裂的滅菌器不得使用）。

③蓋好頂蓋擰緊，勿使漏氣；置滅菌器于火源上加熱，立式壓力鍋通上電源，并打開頂蓋上的排氣閥放了冷氣（水沸騰后排氣10-15min）。

④關(guān)閉排氣閥，使蒸氣壓上升到規(guī)定要求，并維持規(guī)定時(shí)間（按滅菌物品性質(zhì)與有關(guān)情況而定）。

⑤達(dá)到規(guī)定時(shí)間后，對(duì)需干燥的物品，立即打開排氣閥排出蒸氣，待壓力恢復(fù)到零時(shí)，自然冷卻至60℃后開蓋取物，如為液體物品，不要打開排氣閥，而應(yīng)立即將鍋去除熱源，待自然冷卻，壓力恢復(fù)至零，溫度降到60℃以下再開蓋取物，以防突然減壓液體劇烈沸騰或容器爆破。

(3)臥式壓力鍋蒸氣滅菌器的使用按下列步驟進(jìn)行：

① 關(guān)緊鍋門，打開進(jìn)氣閥，將蒸氣引入夾層進(jìn)行預(yù)熱，夾層內(nèi)冷空氣經(jīng)阻氣器自動(dòng)排出。

②夾層達(dá)到預(yù)定溫度后，打開鍋室進(jìn)氣閥，將蒸氣引入鍋室，鍋室內(nèi)冷空氣經(jīng)鍋室阻氣器自動(dòng)排出。

③ 待鍋室達(dá)到規(guī)定的壓力與溫度時(shí)，調(diào)節(jié)進(jìn)氣閥，使保持恒定至

④自然或人工降溫至60℃再開門取物，不得使用快速排出蒸氣法，以防突然降壓，液體劇烈沸騰或容器爆破。

⑤使用自動(dòng)程序控制式壓力蒸氣滅菌器，在放好物品關(guān)緊門后，應(yīng)根據(jù)物品類別按動(dòng)相應(yīng)開關(guān)，以便按要求程序自動(dòng)進(jìn)行滅菌，滅菌時(shí)必須利用附設(shè)儀表記錄溫度與時(shí)間以備查，操作要求應(yīng)嚴(yán)格按照廠家說明書進(jìn)行。

5．滅菌溫度與時(shí)間(1)干熱滅菌器滅菌溫度160℃，1.5-2h。(2)壓力蒸氣滅菌鍋滅菌溫度與時(shí)間

（二）間歇滅菌方法

1.滅菌方法系利用不加壓力的蒸氣滅菌，某些物質(zhì)經(jīng)高壓蒸氣滅菌容易破壞，可用此法滅菌。

（1）將欲滅菌物品置于鍋內(nèi)，蓋上頂蓋，打開排水口，使器內(nèi)余水排盡。

（2）關(guān)閉排水口，打開進(jìn)氣門，根據(jù)需要消毒10～20min。

（3）滅菌完畢關(guān)閉進(jìn)氣門，取出物品待冷至室溫溫度，放入37℃溫箱過夜，次日仍按上述方法消毒，如此三次，即可達(dá)到滅菌目的。

2．血清凝固器使用方法，培養(yǎng)基中含有血清或雞蛋特殊成份時(shí)，因高熱會(huì)破壞其營(yíng)養(yǎng)成份，故用低溫，可使血清凝固，又可達(dá)到滅菌目的。

(1)在使用該法滅菌的血清等分裝時(shí)，需嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，試管、平皿也經(jīng)滅菌后使用。

(2)將培養(yǎng)基按要求使成斜面或高層，加足水后，接上電源，升溫75～90℃1h滅菌，放37℃溫箱過夜，再如此滅菌三次。

3．煮沸消毒：可用煮鍋或煮沸消毒器，水沸騰后再煮5～15 min，也可在水中加入2﹪石炭酸煮沸5min，加入0.02﹪甲醛, 80℃煮60 min均可達(dá)到滅菌目的, 但選用煮沸消毒的增消劑時(shí), 應(yīng)注意對(duì)物品的腐蝕性.4．滅菌處理:滅菌后物品,按正常情況已屬無菌,從滅菌器中取出應(yīng)仔細(xì)檢查放置,以免再度污染。

(1)物品取出,隨即檢查包裝的完整性,若有破壞或棉塞脫掉,不可作為無菌物品使用。

(2)取出的物品,如為包裝有明顯的水浸者,不可作為無菌物品使用。

(3)培養(yǎng)基或試劑等,應(yīng)檢查是否符合達(dá)到滅菌后的色澤或狀態(tài),未達(dá)到者應(yīng)廢棄。

(4)啟閉式容器,在取出時(shí)應(yīng)將篩孔關(guān)閉。

(5)取出的物品掉落在地或誤放不潔這處,或沾有水液,均視為受到污染,不可作為無菌物品使用。

(6)取出的合格滅菌物品,應(yīng)存放于貯藏室或防塵柜內(nèi),嚴(yán)禁與未滅菌物品混放。

(7)凡屬合格物品,應(yīng)標(biāo)有滅菌日期及有效期限。

(8)每批滅菌處理完成后,記錄滅菌品名、數(shù)量、溫度、時(shí)間、操作者。

四、有毒有菌污物處理要求

微生物實(shí)驗(yàn)所用實(shí)驗(yàn)器材、培養(yǎng)物等未經(jīng)消毒處理，一律不得帶出實(shí)驗(yàn)室。

1.經(jīng)培養(yǎng)的污染材料及廢棄物應(yīng)放在嚴(yán)密的容器或鐵絲筐內(nèi)，并集中存放在指定地點(diǎn)，待統(tǒng)一進(jìn)行高壓滅菌。

2.經(jīng)微生物污染的培養(yǎng)物，必須經(jīng)121℃30min高壓滅菌。

3.染菌后的吸管，使用后放入5﹪煤酚皂溶液或石炭酸液中，最少浸泡24h（消毒液體不得低于浸泡的高度）再經(jīng)121℃30min高壓滅菌。

4.涂片染色沖洗片的液體，一般可直接沖入下水道，烈性菌的沖洗液必須沖在燒杯中，經(jīng)高壓滅菌后方可倒入下水道，染色的玻片放入5﹪煤酚皂溶液中浸泡24h后，煮沸洗滌。做凝集試驗(yàn)用的玻片或平皿，必須高壓滅菌后洗滌。

5.打碎的培養(yǎng)物，立即用5﹪煤酚皂溶液或石炭酸液噴灑和浸泡被污染部位，浸泡半小時(shí)后再擦拭干凈。

污染的工作服或進(jìn)行烈性試驗(yàn)所穿的工作服、帽、口罩等，應(yīng)放入專用消毒袋內(nèi)，經(jīng)高壓滅菌后方能洗滌。

五、培養(yǎng)基制備要求

培養(yǎng)基制備的質(zhì)量將直接影響微生物生長(zhǎng)。因?yàn)楦鞣N微生物對(duì)其營(yíng)養(yǎng)要求不完全相同，培養(yǎng)目的的不同，各種培養(yǎng)基制備要求如下：

1．根據(jù)培養(yǎng)基配方的成分按量稱取，然后溶于蒸餾水中，在使用前對(duì)應(yīng)用的試劑藥品應(yīng)進(jìn)行質(zhì)量檢驗(yàn)。

2．PH測(cè)定及調(diào)節(jié)：PH測(cè)定要在培養(yǎng)基冷至室溫時(shí)進(jìn)行，因在熱或冷的情況下，其PH有一定差異，當(dāng)測(cè)定好時(shí)，按計(jì)算量加入堿或酸混勻后，應(yīng)再測(cè)試一次。培養(yǎng)基PH值一定要準(zhǔn)確，否則會(huì)影響微生物的生長(zhǎng)或影響結(jié)果的觀察。但需注意因高壓滅菌可影響一些培養(yǎng)基的PH降低或升高，故不宜滅菌壓力過高或次數(shù)太多，以免影響培養(yǎng)基的質(zhì)量，指示劑、去氧膽酸鈉、瓊脂等一般在調(diào)完P(guān)H后再加入。

3．培養(yǎng)基需保持澄清，便于觀察細(xì)菌的生長(zhǎng)情況，培養(yǎng)基加熱煮沸后，可用脫脂棉花或絨布過濾，以除去沉淀物，必要時(shí)可用雞蛋白澄清處理，所用瓊脂條要預(yù)先洗凈晾干后使用，避免因瓊脂含雜質(zhì)而影響透明度。

4．盛裝培養(yǎng)基不宜用鐵、銅等容器，使用洗凈的中性硬質(zhì)玻璃容器為好。

5．培養(yǎng)基的滅菌既要達(dá)到完全滅菌目的，又要注意不因加熱而降低其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，一般121℃15min即可，如為含有不耐高熱物質(zhì)的培養(yǎng)基如糖類、血清、明膠等，則應(yīng)采用低溫滅菌或間歇法滅菌，一些不能加熱的試劑如亞碲酸鉀、卵黃、TTC、抗菌素等，待基礎(chǔ)瓊脂高壓滅菌后涼至50℃左右再加入。

6．每批培養(yǎng)基制備好后，應(yīng)做無菌生長(zhǎng)試驗(yàn)及所檢菌株生長(zhǎng)試驗(yàn)。如果是生化培養(yǎng)基，使用標(biāo)準(zhǔn)菌株接種培養(yǎng)，觀察生化反應(yīng)結(jié)果，應(yīng)呈正常反應(yīng)，培養(yǎng)基不應(yīng)貯存過久，必要時(shí)可置4℃冰箱存放。

7．目前各種干燥培養(yǎng)基較多，每批需用標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行生長(zhǎng)試驗(yàn)或生化反應(yīng)觀察，各種培養(yǎng)基用相應(yīng)菌株生長(zhǎng)試驗(yàn)良好后方可應(yīng)用，新購進(jìn)的或存放過久的干燥培養(yǎng)基，在配制時(shí)也應(yīng)測(cè)PH，使用時(shí)需根據(jù)產(chǎn)品說明書用量和方法進(jìn)行。

8．每批制備的培養(yǎng)基所用化學(xué)試劑、滅菌情況及菌株生長(zhǎng)試驗(yàn)結(jié)果、制作人員等應(yīng)做好記錄，以備查詢。

六、樣品采集及處理要求

1．所采集的檢驗(yàn)樣品一定要具有代表性，采樣時(shí)應(yīng)首先對(duì)該批食品原料、加工、運(yùn)輸、貯藏方法條件、周圍環(huán)境衛(wèi)生狀況等進(jìn)行詳細(xì)調(diào)查，檢查是否有污染源存在。

2．根據(jù)食品的種類及數(shù)量，采樣數(shù)量及方法應(yīng)按標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法的要求進(jìn)行。

3．采樣應(yīng)注意無菌操作，容器必須滅菌，避免環(huán)境中微生物污染，容器不得使用煤酚皂溶液，用新潔爾滅、酒精等消毒藥物滅菌，更不能含有此類消毒藥物或抗生素類藥物，以避免殺死樣品中的微生物，所用剪、刀、匙用具也需滅菌方可應(yīng)用。

4．樣品采集后應(yīng)立即送往檢驗(yàn)室進(jìn)行檢驗(yàn)，送檢過程中一般不超過3h，如路程較遠(yuǎn)，可保存在1～5℃環(huán)境中，如需冷凍者，則在凍存狀態(tài)下送檢。

5．檢驗(yàn)室收到樣品后，進(jìn)行登記（樣品名稱、送檢單位、數(shù)量、日期、編號(hào)等），觀察樣品的外觀，如果發(fā)現(xiàn)有下列情況之一者，可拒絕檢驗(yàn)。

(1)樣品經(jīng)過特殊高壓、煮沸或其他方法殺菌者，失去代表原食品檢驗(yàn)意義者。

(2)瓶、袋裝食品已啟開者，熟肉及其制品、熟禽等食品已折碎不完整者，即失去原食品形狀者（食物中毒樣品除外）。

(3)按規(guī)定采樣數(shù)量不足者。

對(duì)送檢符合要求的樣品，檢驗(yàn)室收到后，應(yīng)立即進(jìn)行檢驗(yàn)，如果條件不具備，應(yīng)置4℃冰箱存放，及時(shí)準(zhǔn)備創(chuàng)造條件，然后進(jìn)行檢驗(yàn)。

6．樣品檢驗(yàn)時(shí)，根據(jù)其不同性狀，進(jìn)行適當(dāng)處理。

(1)液體樣品接種時(shí)，應(yīng)充分混合均勻，按量吸取進(jìn)行接種。

(2)固體樣品，用滅菌刀、剪取其不同部位共25g，置于225ml滅菌生理鹽水或其他溶液中，用均質(zhì)器攪碎混勻后，按量吸取接種。

(3)瓶、袋裝食品應(yīng)用滅菌操作啟開，根據(jù)性狀選擇上述方法處理后接種。

七、記錄和報(bào)告的要求

1．檢驗(yàn)室收到樣品后，首先進(jìn)行外觀檢驗(yàn)，及時(shí)按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法進(jìn)行檢驗(yàn)，檢驗(yàn)過程中要認(rèn)真、負(fù)責(zé)、嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，避免環(huán)境中微生物污染。

2．樣品檢驗(yàn)過程中所用方法、出現(xiàn)的現(xiàn)象和結(jié)果等均要用文字寫出試驗(yàn)紀(jì)錄，以作為對(duì)結(jié)果分析、判定的依據(jù)，記錄要求詳細(xì)、清楚、真實(shí)、客觀、不得涂改和偽造。

八、特殊樣品檢驗(yàn)時(shí)的前處理

1.食品微生物檢測(cè)需用滅菌蒸餾水進(jìn)行稀釋的樣品有醬腌菜、醬油 2.對(duì)食醋樣品的前處理是用20%-30%滅菌碳酸鈉溶液調(diào)PH至中性

3.袋裝鮮奶樣品進(jìn)行微生物檢驗(yàn)時(shí)的處理用無菌手續(xù)吸取25mL檢樣+225mL稀釋液 4.碳酸飲料等樣品的前處理應(yīng)開蓋后將氣體待充分排出，用無菌手續(xù)吸取25mL檢樣+225mL稀釋液

5.冷凍食品應(yīng)在45 ℃以下不超過15 min，或2 ℃～5 ℃不超過18 h 解凍后進(jìn)行檢驗(yàn)