第一篇：微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)I標(biāo)準(zhǔn)答案

病原生物學(xué)實(shí)驗(yàn)I標(biāo)準(zhǔn)答案

（2006 ——2007 學(xué)年第 I 學(xué)期）

課程號(hào)：50128730課序號(hào)：0

適用專業(yè)年級(jí)： 04級(jí)醫(yī)學(xué)、口腔8年制學(xué)生人數(shù)：115

一、名詞解釋（10分/個(gè)，共20分）

1、革蘭染色：原理（細(xì)胞壁學(xué)說為重點(diǎn)）（3分），步驟（4分），結(jié)果（2分），意義（1分）

2、培養(yǎng)基：由適合于細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖所需的多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)配制而成的基質(zhì)（4分）。合格的培養(yǎng)基，需要具有充足的營(yíng)養(yǎng)，一定的酸堿度，且清亮無(wú)菌（6分）。

二、填空題（2分/個(gè)，共50分）

1、μm，油鏡，1000倍。

2、大小，形態(tài)，排列，染色性。

3、均勻渾濁，絮狀沉淀，菌膜生長(zhǎng)（或腐敗性惡臭）。

4、莢膜、鞭毛、芽孢。

5、電鏡觀察，鞭毛染色后光鏡下觀察，半固體接種（或懸滴觀察活菌運(yùn)動(dòng)）。

6、色素。

7、阿伯特（Alert）染色法，異染顆粒。

8、判斷細(xì)菌分解含硫氨基酸的能力，培養(yǎng)基中出現(xiàn)黑色的硫化鉛或硫化亞鐵沉淀。

9、抑菌圈的直徑大小。

10、動(dòng)物接種，雞胚培養(yǎng)，組織細(xì)胞培養(yǎng)。

三、問答題（30分）

標(biāo)本的選取（5分）；

劃線接種到血平板上，注意平板的選取（5分）；

370C培養(yǎng)18~24小時(shí)后，觀察菌落形態(tài)（描述金黃色葡萄球菌及乙型溶血性鏈球菌的菌落 形態(tài)）（5分）；

挑取可疑菌落進(jìn)行革蘭染色（描述金黃色葡萄球菌及乙型溶血性鏈球菌的鏡下形態(tài)）（5分）； 血漿凝固酶實(shí)驗(yàn)（3分）；

藥物敏感實(shí)驗(yàn)（3分）；

其他（如毒素檢測(cè)、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，生化反應(yīng)等）（4分）。

第二篇：醫(yī)學(xué)微生物學(xué)題+標(biāo)準(zhǔn)答案

醫(yī)學(xué)微生物學(xué)練習(xí)題： 1.細(xì)菌的形態(tài)和結(jié)構(gòu)

1.G+菌的細(xì)胞壁的特點(diǎn)是____________.A.較疏松

B.無(wú)磷壁酸

C.有脂多糖

D.有脂蛋白

E.肽聚糖含量多

2.細(xì)菌細(xì)胞壁的主要成分是____________.A.脂蛋白

B.肽聚糖

C.幾丁質(zhì)

D.膽固醇

E.脂多糖

3.革蘭陰性菌細(xì)胞壁的特殊組分是____________.A.肽聚糖

B.磷壁酸

C.外膜

D.脂質(zhì)雙層

E.脂多糖

4.溶菌酶溶菌作用的機(jī)制是____________.A.切斷肽聚糖的聚糖支架

B.抑制四肽側(cè)連與五肽交聯(lián)橋的聯(lián)結(jié)

C.干擾細(xì)菌DNA的復(fù)制

D.干擾細(xì)菌蛋白質(zhì)的合成 E.損害細(xì)胞膜

5.細(xì)菌的革蘭染色性不同是由于____________.A.細(xì)胞核結(jié)構(gòu)的不同

B.細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)的不同

C.細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)的不同

D.磷壁酸的有無(wú)

E.中介體的有無(wú)

6.青霉素的抗菌機(jī)制是____________.A.切斷肽聚糖的聚糖支架

B.抑制四肽側(cè)連與五肽交聯(lián)橋的聯(lián)結(jié)

C.干擾細(xì)菌DNA的復(fù)制

D.干擾細(xì)菌蛋白質(zhì)的合成 E.損害細(xì)胞膜

7.革蘭染色所用染液的順序是____________.A.稀釋復(fù)紅，碘液，乙醇，結(jié)晶紫

B.結(jié)晶紫，乙醇，碘液，稀釋復(fù)紅

C.結(jié)晶紫，碘液，乙醇，稀釋復(fù)紅

D.稀釋復(fù)紅，乙醇，結(jié)晶紫，碘液

E.稀釋復(fù)紅，結(jié)晶紫，碘液，乙醇

8.關(guān)于細(xì)胞壁的功能，下列哪項(xiàng)是錯(cuò)誤的____________.A.維持菌體固有的形態(tài)

B.保護(hù)細(xì)菌抵抗低滲環(huán)境

C.有助于維持菌體內(nèi)離子的平衡

D.是細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)器官

E.決定細(xì)菌菌體的抗原性

9.關(guān)于細(xì)菌L型的特性，下列錯(cuò)誤的是____________.A.高度多形性

B.革蘭染色陰性

C.去除抑制物后，可回復(fù)原有形態(tài)

D.仍有一定致病力

E.在低滲高瓊脂培養(yǎng)基上生長(zhǎng)

10.下列不屬于細(xì)菌特殊結(jié)構(gòu)的是____________.A.莢膜

B.質(zhì)粒

C.鞭毛

D.菌毛

E.芽胞

11.下列各種微生物不能通過除菌濾器的是____________.A.麻疹病毒

B.斑疹傷寒立克次體

C.支原體

D.L型細(xì)菌

E.以上都可以通過

12.質(zhì)粒是細(xì)菌的____________.A.核質(zhì)DNA

B.胞質(zhì)中核蛋白體

C.異染顆粒

D.中介體

E.核質(zhì)外DNA

13.關(guān)于細(xì)菌細(xì)胞壁的功能，敘述錯(cuò)誤的是____________.A.保持一定的形狀

B.控制滲透壓

C.抵抗青霉素

D.參與物質(zhì)交換

E.有噬菌體受體

14.細(xì)菌細(xì)胞膜與真核細(xì)胞膜不同之處在于____________.A.磷脂

B.甘油

C.糖脂

D.固醇類物質(zhì)

E.脂肪酸

15.與細(xì)菌致病力有關(guān)的結(jié)構(gòu)是____________.A.芽胞

B.異染顆粒

C.中介體

D.核蛋白體

E.菌毛

參考答案：

1.E 2.B 3.E 4.A 5.B 6.A 7.C 8.D 9.E 10.B 11.B 12.E 13.C 14.D 15.E 2.細(xì)菌的生理

1.下列物質(zhì)不是細(xì)菌合成代謝產(chǎn)物的一種是____________.A.色素

B.細(xì)菌素

C.熱原質(zhì)

D.抗毒素

E.抗生素

2.大腸菌素是屬于____________.A.色素

B.抗生素

C.內(nèi)毒素

D.外毒素

E.細(xì)菌素

3.人工培養(yǎng)病原微生物的最適宜溫度是37℃，但應(yīng)除外____________.A.大腸埃希菌

B.結(jié)核分枝桿菌

C.淺部真菌

D.痢疾志賀菌

E.霍亂弧茁

4.下列細(xì)菌中繁殖速度最慢的是____________.A.大腸桿菌

B.鏈球菌

C.腦膜炎奈瑟菌

D.結(jié)核分枝桿菌

E.變形桿菌

5.IMViC試驗(yàn)常用于鑒別____________.A.腸道桿苗

B.葡萄球菌

C.肺炎球菌

D.腦膜炎奈瑟菌

E.厭氧菌

6.消毒是指____________.A.殺滅物體上的所有微生物

B.殺死物體上所有病原微生物

C.殺死細(xì)菌芽胞

D.使物體上無(wú)活菌存在 E.抑制微生物生長(zhǎng)繁殖的方法

7.屬專性需氧菌的是____________.A.肺炎鏈球菌

B.結(jié)核分枝桿菌

C.破傷風(fēng)梭菌

D.金黃色葡萄球菌傷寒沙門菌

E.大腸埃希菌

8.不屬于生化反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)是____________.A.VP實(shí)驗(yàn)

B.外斐實(shí)驗(yàn)

C.糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn)

D.吲哚實(shí)驗(yàn)

E.甲基紅實(shí)驗(yàn)

9.細(xì)菌對(duì)糖的分解能力不同，主要是____________.A.營(yíng)養(yǎng)型不同

B.酶系統(tǒng)不同

C.糖的種類不同

D.氧氣存在與否

E.細(xì)胞膜通透性不同

10.去除熱原質(zhì)的最好的方法是____________.A.蒸餾法

B.高壓蒸汽滅菌法

C.濾過法

D.巴氏消毒法

E.干烤法

11.下列哪一項(xiàng)不是抗生素范疇____________.A.可由真菌產(chǎn)生

B.可由放線菌產(chǎn)生

C.可由細(xì)菌產(chǎn)生

D.只對(duì)產(chǎn)生菌有近緣關(guān)系菌有殺傷作用

E.對(duì)微生物有抑制作用

12.細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的方式是____________.A.二分裂

B.有絲分裂

C.孢子生殖

D.復(fù)制

E.出芽

13.下列有關(guān)菌落的敘述，錯(cuò)誤的是____________.A.可分為S、R和M型菌落

B.肉眼可見

C.由1個(gè)細(xì)菌形成

D.一個(gè)菌落包含成千上萬(wàn)個(gè)細(xì)菌

E.在液體培養(yǎng)基中生長(zhǎng)

14.研究細(xì)菌性狀應(yīng)選用____________.A.遲緩期

B.對(duì)數(shù)期

C.穩(wěn)定期

D.衰亡期

E.任何時(shí)期

15.細(xì)菌合成抗生素、外毒素多在____________.A.遲緩期

B.對(duì)數(shù)期

C.穩(wěn)定期

D.衰亡期

E.任何時(shí)期

16.細(xì)菌變異多發(fā)生在____________.A.遲緩期

B.對(duì)數(shù)期

C.穩(wěn)定期

D.衰亡期

E.任何時(shí)期

17.無(wú)機(jī)鹽對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)代謝的作用不包括____________.A.構(gòu)成菌體成分

B.調(diào)節(jié)菌體內(nèi)外滲透壓

C.細(xì)菌代謝能量的主要來源

D.促進(jìn)酶的活性

E.某些元素與細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖幾致病作用密切相關(guān)

18.屬于選擇培養(yǎng)基的是____________.A.血瓊脂平板

B.伊紅-美藍(lán)培養(yǎng)基

C.皰肉培養(yǎng)基

D.肉湯培養(yǎng)基

E.含鐵雙糖培養(yǎng)基

19.大腸桿菌IMViC試驗(yàn)的結(jié)果是：____________.A.一十一+

B.一一++

C.++一一

D.十一+一

E.十一一十

20.液體培養(yǎng)基主要用于：____________.A.分離單個(gè)菌落

B.C檢測(cè)細(xì)菌毒素

C.鑒別菌種

D.增菌

E.觀察細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)能力

21.關(guān)于熱原質(zhì)，錯(cuò)誤的敘述是：____________.A.大多由革蘭陰性細(xì)菌產(chǎn)生

B.是革蘭陰性細(xì)菌細(xì)胞壁中的脂多糖

C.注人人體或動(dòng)物體內(nèi)能引起發(fā)熱反應(yīng)

D.可被高壓蒸氣滅菌破壞

E.吸附劑及特殊石棉濾板可除去液體中大部分熱原質(zhì)

22.細(xì)菌合成代謝產(chǎn)物中與細(xì)菌鑒定有關(guān)的是：____________.A.內(nèi)毒素

B.熱原質(zhì)

C.抗生素

D.維生素

E.細(xì)菌素

參考答案：

1.D 2.E 3.C 4.D 5.A 6.B 7.B 8.B 9.B 10.A

11.D 12.A 13.E 14.B 15.C 16.D 17.C 18.B 19.C 20.D 21.D 22.E 3.消毒與滅菌

1.殺滅芽胞最常用和最有效的方法是：____________.A.紫外線照射

B.煮沸5min

C.巴氏消毒法

D.流通蒸氣滅菌法

E.高壓蒸氣滅菌法

2.下述不可能殺滅細(xì)菌芽胞的方法是：____________.A.煮沸法

B.巴氏消毒法

C.間歇滅菌法

D.干熱滅菌法

E.高壓蒸氣滅菌法

3.乙醇消毒劑常用的濃度是：____________.A.100％

B.95％

C.75％

D.50％

E.30％

4.關(guān)于紫外線，說法錯(cuò)誤的是____________.A.其殺菌作用與波長(zhǎng)有關(guān)

B.可損壞細(xì)菌的DNA構(gòu)型

C.265-266nm殺菌作用最強(qiáng)

D.其穿透力弱，故對(duì)人體無(wú)損害

E.紫外線適用空氣和物體表面的消毒

5.常用于空氣或物體表面的消毒____________.A.高壓蒸氣滅菌法

B.紫外線照射法

C.濾過除菌法

D.巴氏消毒法

E.干烤法

6.常用于基礎(chǔ)培養(yǎng)基滅菌____________.A.高壓蒸氣滅菌法

B.紫外線照射法

C.濾過除菌法

D.巴氏消毒法

E.干烤法

7.常用于手術(shù)器械的滅菌____________.A.高壓蒸氣滅菌法

B.紫外線照射法

C.濾過除菌法

D.巴氏消毒法

E.干烤法

8.常用于血清的除菌____________.A.高壓蒸氣滅菌法

B.濾過除菌法

C.紫外線照射法

D.巴氏消毒法

E.干烤法

9.將牛奶加熱62℃30分鐘的目的是____________.A.使牛奶中的蛋白質(zhì)變性，易于吸收

B.殺滅牛奶中的所有微生物

C.殺死牛奶中的病原菌

D.使牛奶不含活菌

E.防止或抑制微生物在牛奶中生長(zhǎng)和繁殖

10.滅菌方法錯(cuò)誤的是____________.A.手術(shù)室空氣-紫外線

B.排泄物-漂白粉

C.飲水-氯氣

D.含血清培養(yǎng)基-高壓蒸氣滅菌

E.溫度計(jì)-75%酒精

11.紫外線殺菌的主要機(jī)理是____________.A.損壞細(xì)胞膜

B.干擾DNA復(fù)制

C.損傷細(xì)胞壁

D.破壞酶系統(tǒng)

E.干擾蛋白質(zhì)的合成

參考答案：

1.E 2.B 3.C 4.D 5.B 6.A 7.A 8.B 9.C 10.D 11.B 7.細(xì)菌的感染與免疫

1.引起菌群失調(diào)的原因是____________.A.生態(tài)制劑的大量使用

B.正常菌群的遺傳特性明顯改變

C.正常菌群的耐藥性明顯改變

D.正常菌群的增殖方式明顯改變

E.正常菌群的組成和數(shù)量明顯改變

2.條件致病菌致病的條件____________.A.正常菌群的耐藥性改變

B.正常菌群的遺傳特性改變

C.腸蠕動(dòng)減慢使細(xì)菌增多

D.長(zhǎng)期使用廣譜抗生素

E.各種原因組成免疫功能亢進(jìn)

3.正常菌群的有益作用不包括____________.A.抗腫瘤作用

B.刺激機(jī)體的免疫應(yīng)答

C.合成維生素

D.與外來菌競(jìng)爭(zhēng)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)

E.刺激補(bǔ)體的合成

4.致病過程中引起兩次菌血癥的是____________.A.痢疾志賀菌

B.肉毒梭菌

C.白喉棒狀桿菌

D.傷寒沙門菌

E.淋球菌

5.病原菌在機(jī)體血液中大量繁殖產(chǎn)生毒性物質(zhì)，并隨血流到達(dá)其他器官，引起多發(fā)性膿腫，稱為____________.A.bacteremia

B.pyemia

C.endotoxemia

D.toxemia

E.septicemia

6.下列哪種結(jié)構(gòu)與細(xì)菌侵襲力有關(guān)____________.A.芽胞

B.莢膜

C.細(xì)胞壁

D.中介體

E.核糖體

7.類毒素與外毒素的區(qū)別在于前者_(dá)___________.A.有抗原性，但無(wú)毒性

B.無(wú)抗原性，有毒性

C.無(wú)抗原性，也無(wú)毒性

D.有抗原性，也有毒性

E.僅有半抗原性，無(wú)毒性

8.腦膜炎奈瑟菌侵入血流，大量繁殖產(chǎn)生內(nèi)毒素，引起全身中毒癥狀，稱為____________.A.菌血癥

B.敗血癥

C.毒血癥

D.膿毒血癥

E.以上都不是

9.常用人工被動(dòng)免疫的生物制品有____________.A.菌苗

B.疫苗

C.BCG

D.類毒素

E.抗毒素

10.能引起內(nèi)毒素休克的細(xì)菌成分是____________.A.肽聚糖

B.磷壁酸

C.LPS

D.O抗原

E.莢膜多糖

11.關(guān)于SHWARTZMAN現(xiàn)象的敘述，下列哪項(xiàng)是正確的____________.A.是DIC的局部表現(xiàn)

B.是一種免疫應(yīng)答反應(yīng)

C.兩次注射革蘭陰性菌可相同或不同

D.動(dòng)物局部可出現(xiàn)出血或壞死，但不會(huì)死亡

E.兩次注射間歇時(shí)間應(yīng)超過24小時(shí)

12.細(xì)菌代謝產(chǎn)物中，與致病性無(wú)關(guān)的是____________.A.毒素

B.透明質(zhì)酸酶

C.熱原質(zhì)

D.細(xì)菌素

E.血漿凝固酶

13.細(xì)菌致病力強(qiáng)弱主要取決于____________.A.基本結(jié)構(gòu)

B.特殊結(jié)構(gòu)

C.侵襲力和毒素

D.分解代謝產(chǎn)物

E.侵入機(jī)體的途徑

14.內(nèi)毒素不具有的毒性作用是____________.A.食物中毒

B.發(fā)熱

C.休克

D.DIC

E.白細(xì)胞反應(yīng)

15.關(guān)于內(nèi)毒素的敘述，下列錯(cuò)誤的是____________.A.來源于革蘭陰性菌

B.能用甲醛脫毒制成類毒素

C.其化學(xué)成分是脂多糖

D.性質(zhì)穩(wěn)定，耐熱

E.只有當(dāng)菌體死亡裂解后才釋放出來

16.關(guān)于外毒素的敘述，下列錯(cuò)誤的是____________.A.多由革蘭陽(yáng)性菌產(chǎn)生

B.化學(xué)成分是蛋白質(zhì)

C.耐熱，使用高壓蒸氣滅菌法仍不能將其破壞

D.經(jīng)甲醛處理可制類毒素

E.可刺激機(jī)體產(chǎn)生抗毒素

17.帶菌者是指____________.A.體內(nèi)帶有正常菌群者

B.病原菌潛伏在體內(nèi)，不向外排菌者

C.體內(nèi)帶有條件致病菌者

D.感染后，臨床癥狀消失，但體內(nèi)病原菌為被徹底清除，又不斷向外排菌者

E.感染后，臨床癥狀明顯，并可傳染給他人者

18.吞噬細(xì)胞吞噬細(xì)菌后，不可能出現(xiàn)的后果是____________.A.可引起組織損傷

B.細(xì)菌被殺死消化

C.細(xì)菌不被殺死，在細(xì)胞內(nèi)仍可繁殖

D.可引起細(xì)菌在體內(nèi)擴(kuò)散

E.細(xì)菌不被殺死，但發(fā)生變異

19.屬于神經(jīng)毒素的是____________.A.霍亂腸毒素

B.肉毒毒素

C.產(chǎn)氣莢膜梭菌Α毒素

D.白喉毒素

E.葡萄球菌表皮剝脫毒素

20.與細(xì)菌侵襲力有關(guān)的因素是____________.A.某些胞外酶

B.內(nèi)毒素

C.外毒素

D.芽胞

E.熱原質(zhì)

21.機(jī)體對(duì)結(jié)核分枝桿菌的免疫主要是____________.A.細(xì)胞免疫

B.體液免疫

C.溶菌酶的殺菌作用

D.補(bǔ)體的溶菌作用

E.中性粒細(xì)胞的吞噬作用

參考答案：1.A 2.D 3.E 4.B 5.B 6.B 7.A 8.B 9.E 10.C

11.C 12.D 13.C 14.A 15.B 16.C 17.B 18.B 19.B 20.A 21.A

8.細(xì)菌檢查方法與防治

1.下列那種疾病無(wú)特異預(yù)防方法____________.A.腸熱癥

B.百日咳

C.霍亂

D.鼠疫

E.食物中毒

2.機(jī)體獲得人工主動(dòng)免疫的方式是____________.A.注射抗毒素

B.通過胎盤從母體獲得

C.注射細(xì)胞因子

D.注射胎盤球蛋白

E.注射類毒素

3.用于緊急預(yù)防____________.A.抗毒素

B.胎盤球蛋白

C.兩者都是

D.兩者都不是

4.屬于自然被動(dòng)免疫的是____________.A.經(jīng)隱性感染或患病后獲得免疫力

B.經(jīng)注射類毒素獲得免疫力

C.經(jīng)注射丙種球蛋白獲得免疫力

D.經(jīng)注射細(xì)胞因子獲得免疫力

E.經(jīng)胎盤、初乳獲得免疫力

5.關(guān)于胎盤球蛋白的敘述，錯(cuò)誤的是____________.A.由健康產(chǎn)婦的胎盤和嬰兒臍帶中提取制備

B.主要含IGM

C.一般不會(huì)引起超敏反應(yīng)

D.主要用于麻疹、甲肝等病毒性疾病的緊急預(yù)防

E.免疫效果不如高效價(jià)的特異性免疫球蛋白

6.卡介苗是____________.A.活疫苗

B.死疫苗

C.類毒素

D.抗毒素

E.以上都不是

7.可用類毒素預(yù)防的疾病是____________.A.傷寒

B.痢疾

C.白喉

D.結(jié)核

E.百日咳

8.關(guān)于活疫苗的敘述，哪項(xiàng)是錯(cuò)誤的____________.A.經(jīng)人工培養(yǎng)獲得的變異株或從自然界篩選出

B.能在機(jī)體內(nèi)繁殖

C.免疫效果好且持久

D.比死疫苗易保存

E.比死疫苗用量小

參考答案：

1.E 2.E 3.C 4.E 5.B 6.A 7.C 8.D 23.病毒的基本形狀

1.不是易引起念珠菌感染的主要原因 ____________.A.與念珠菌病人接觸

B.菌群失調(diào)

C.長(zhǎng)期使用激素或免疫抑制劑

D.內(nèi)分泌功能失調(diào)

E.機(jī)體屏障功能遭破壞

2.白假絲酵母菌常引起____________.A.癬病

B.皮膚粘膜、內(nèi)臟感染

C.皮下組織感染

D.毒血癥

E.真菌中毒癥

3.關(guān)于新生隱球菌致病性的描述，錯(cuò)誤的是____________.A.是隱球菌屬中唯一致病的真菌

B.主要經(jīng)胃腸道進(jìn)入機(jī)體

C.在體質(zhì)極度衰弱者中引起內(nèi)源性感染

D.主要致病因素是莢膜

E.易侵犯中樞神經(jīng)系統(tǒng)引起腦膜炎

4.RNA病毒的基因復(fù)制一般在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，例外的是____________.A.小核糖核酸病毒科

B.逆轉(zhuǎn)錄病碌科

C.彈狀病毒科

D.副黏病毒科

E.呼腸孤病毒科

5.決定病毒感染性的關(guān)鍵物質(zhì)是：____________.A.殼粒

B.核酸

C.衣殼

D.剌突

E.包膜

6.對(duì)病毒核酸的錯(cuò)誤論述是：____________.A.可控制病毒的遺傳變異

B.可決定病毒的感染性

C.可作為基因工程的載體

D.每個(gè)病毒只有一種類型核酸

E.只有DNA才能攜帶遺傳信息

7.可直接作為mRNA翻譯蛋白質(zhì)的病毒核酸類型是____________.A.dsDNA

B.dsRNA

C.（——）ssRNA

D.（+）ssRNA

E.ssDNA

8.對(duì)病毒包膜的錯(cuò)誤敘述是；____________.A.對(duì)脂溶劑敏感

B.表面刺突與吸附細(xì)胞有關(guān)

C.具有病毒種，型抗原特異性

D.其化學(xué)組成與宿主細(xì)胞膜完全相同

E.可保護(hù)病毒

9.對(duì)病毒包膜的敘述中，錯(cuò)誤的是：____________.A.可引起免疫病理反應(yīng)

B.可刺激機(jī)體產(chǎn)生中和抗體

C.能和宿上細(xì)胞膜融合，利于病毒穿入

D.能保護(hù)病毒

E.除去包膜后病毒仍可保持感染性

10.對(duì)病毒特性的錯(cuò)誤敘述是：____________.A.以復(fù)制方式繁殖

B.測(cè)量單位是微米

C.只含一種核酸（DNA或RNA）

D.是專性細(xì)胞內(nèi)寄生物

E.對(duì)抗生素不敏感

11.包膜病毒體不能引起感染的部位是：____________.A.呼吸道

B.消化道

C.泌尿生殖道

D.皮膚黏膜

E.神經(jīng)系統(tǒng)

12.急性呼吸道感染的最常見病原微生物是：____________.A.真菌

B.細(xì)菌

C.支原體

D.衣原體

E.病毒

13.可將基因整合在宿主細(xì)胞基因上的病毒有____________.A.DSDNA病毒和（+）SSRNA病毒

B.SSDNA病毒和（+）SSRNA病毒

C.DSRNA病毒和逆轉(zhuǎn)錄病毒

D.（+）SSRNA病毒和逆轉(zhuǎn)錄病毒

E.逆轉(zhuǎn)錄病毒和DSDNA病毒

14.病毒與立克次體的相同點(diǎn)是：____________.A.均為非細(xì)胞型微生物

B.均只含一種類型核酸

C.均不能在無(wú)生命培養(yǎng)基亡生長(zhǎng)

D.均對(duì)抗生素不敏感

E.均以復(fù)制方式繁殖

15.大多數(shù)動(dòng)物病毒的形態(tài)屬于：____________.A.球形

B.桿形

C.磚形

D.彈形

E.蝌蚪形

16.病毒衣殼的生物學(xué)意義不包括：____________.A.保護(hù)病毒核酸

B.介導(dǎo)病毒吸附易感細(xì)胞

C.構(gòu)成病毒特異性抗原

D.本身具有感染性

E.根據(jù)其殼微粒的數(shù)目鑒定病毒

17.下述病毒衣殼的特點(diǎn)中，錯(cuò)誤的是：____________.A.由多肽構(gòu)成的殼微粒組成 B.表面突起稱刺突

C.可增加病毒的感染性

D.呈對(duì)稱排列

E.可保護(hù)病毒核酸

18.關(guān)于病毒體，最正確的描述是：____________.A.是有感染性的病毒顆粒

B.是脫去衣殼仍有感染性的病毒核酸

C.是有刺突的包膜病毒顆粒

D.是可獨(dú)立存在于細(xì)胞外的病毒顆粒

E.是結(jié)構(gòu)完整的，具有感染性的成熟病毒顆粒

19.大多數(shù)包膜病毒體對(duì)乙醚敏感是因?yàn)椋篲___________.A.包膜表面刺突如血凝衰含大量脂類

B.病棗衣殼含脂質(zhì)

C.核酸對(duì)乙醚敏感

D.包膜含大量類脂

E.包膜表面有乙醚受體

20.下列病毒的特征中錯(cuò)誤的是；____________.A.只含DNA或RNA

B.嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生

C.有易感細(xì)胞的受體

D.對(duì)干擾素敏感

E.能通過細(xì)菌過濾器

21.痘病毒的形態(tài)：____________.A.球狀

B.桿狀

C.磚塊狀

D.蝌蚪狀

E.彈頭狀

22.狂犬病毒的形態(tài)：____________.A.球狀

B.桿狀

C.磚塊狀

D.蝌蚪狀

E.彈頭狀

23.流感病毒衣殼：____________.A.裸骸二十面體對(duì)稱型

B.有包膜二十面體對(duì)稱型

C.裸露螺旋對(duì)稱型

D.有包膜螺旋對(duì)稱型

E.復(fù)合對(duì)稱型

24.可直接作為MRNA翻譯蛋白的病毒核酸類型是____________.A.單股正鏈RNA

B.單股負(fù)鏈RNA

C.雙股RNA

D.雙股DNA

E.單股DNA

25.子代病毒釋放的途徑中不包括____________.A.細(xì)胞裂解釋放

B.細(xì)胞融合釋放

C.通過細(xì)胞間橋釋放

D.出芽釋放

E.整合釋放

26.病毒感染細(xì)胞的宿主范圍主要取決于____________.A.細(xì)胞表面的受體

B.病毒表面的接觸蛋白

C.病毒表面的血凝素

D.病毒的衣殼

E.病毒的包膜

27.逆轉(zhuǎn)錄病毒的核酸類型為____________.A.單股負(fù)鏈RNA

B.單股正鏈RNA

C.單股正鏈DNA

D.單股負(fù)鏈DNA

E.單股正鏈RNA二聚體

28.計(jì)算病毒體數(shù)量的單位是；____________.A.LD50（半數(shù)致死量）

B.DS0（半數(shù)感染量）

C.蝕斑

D.每毫升中的蝕斑形成單位

E.菌落

29.多數(shù)病毒的脫殼有賴于：____________.A.病毒的脫殼酶

B.病毒的溶酶體酶

C.病毒的蛋白酶

D.細(xì)胞的溶酶體酶

E.細(xì)胞的核酸酶

30.輔助病毒的作用是：____________.A.增加另一種病毒的產(chǎn)量

B.抑制干擾素的產(chǎn)生

C.與另一種病毒發(fā)生基因重組

D.為缺陷病毒提供其所需要的基因產(chǎn)物

E.缺陷病毒提供其需要的基因

31.逆轉(zhuǎn)錄病毒特有的酶是：____________.A.依賴DNA的DNA聚合酶

B.依賴RNA的RNA聚合酶

C.依賴DNA的RNA聚合酶

D.依賴RNA的DNA聚合酶

E.胸腺嘧啶激酶

32.病毒遺傳信息從RNA轉(zhuǎn)為DNA的過程稱為：____________.A.基因變異

B.基因轉(zhuǎn)化

C.噬菌體轉(zhuǎn)導(dǎo)

D.逆轉(zhuǎn)錄

E.基因重組

33.正鏈RNA病毒的核酸特點(diǎn)是：____________.A.自身帶有聚合酶

B.需轉(zhuǎn)錄后才能翻譯病毒蛋白

C.可直接作為MRNA翻譯病毒蛋白

D.只能攜帶部分遺傳信息

E.3’端自身折疊起引物作用

1.A 2.B 3.B 4.B 5.B 6.E 7.D 8.D 9.E 10.B

11.B 12.E 13.E 14.C 15.A 16.B 17.B 18.E 19.D 20.C

21.C 22.E 23.D 24.A 25.E 26.A 27.E 28.D 29.D 30.D

31.D 32.D 33.C

24病毒的感染與免疫

1.下列病毒中，通過神經(jīng)播散引起全身感染的是____________.A.巨細(xì)胞病毒

B.EB病毒

C.單純皰疹病毒

D.狂犬病毒

E.人類免疫缺陷病毒

2.可通過血流播散引起全身感染的病毒是：____________.A.鼻病毒

B.流感病毒

C.麻疹病毒

D.呼吸道合胞病毒

E.單純皰疹病毒

3.在下列病毒中，不通過垂直傳播的是____________.A.乙型肝炎病毒

B.EB病毒

C.人類免疫缺陷病毒

D.單純皰疹病毒

E.流感病毒

4.中和抗體的主要作用是：____________.A.阻止病毒基因的表達(dá)

B.阻止病毒吸附細(xì)胞

C.阻止病毒脫殼和穿入

D.阻止病毒的生物合成 E.阻上病毒的釋放

5.病毒引起細(xì)胞病變的機(jī)制中，與免疫損傷有關(guān)的是：____________.A.病毒衣殼蛋白對(duì)細(xì)胞的毒性

B.病毒出芽造成細(xì)胞膜損傷

C.病毒改變細(xì)胞膜抗原引起細(xì)胞損傷

D.病毒包涵體對(duì)細(xì)胞的損傷

E.病毒的酶抑制細(xì)胞的代謝

6.關(guān)于病毒的致病機(jī)制，錯(cuò)誤的敘述是：____________.A.病毒在細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制抑制了細(xì)胞的正常代謝

B.病毒合成侵襲性酶類使細(xì)胞裂解

C.病毒基因組與細(xì)胞DNA整合，使之發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化

D.病毒感染使細(xì)胞互相融合而死亡

E.病毒感染細(xì)胞膜抗原改變，引起機(jī)體免疫病理反應(yīng)

7.包膜病毒的感染一般不直接導(dǎo)致細(xì)胞：____________.A.膜抗原性改變

B.轉(zhuǎn)化

C.融合 D.裂解

E.出現(xiàn)包涵體

8.I型干擾素是：____________.A.活化T細(xì)胞釋放的殺病毒蛋白

B.病毒感染機(jī)體產(chǎn)生的免疫球蛋白

C.細(xì)胞感染病毒后產(chǎn)生的糖蛋白

D.細(xì)胞感染病毒后產(chǎn)生的脂蛋白

E.抗病毒的化學(xué)療劑

9.于擾索抗病毒的作用機(jī)制是：____________.A.誘發(fā)細(xì)胞產(chǎn)生抗病毒蛋白

B.直接抑制病毒的生物合成

C.直接抑制病毒的釋放

D.阻礙病毒吸附于敏感細(xì)胞

E.與病毒結(jié)合，阻止其脫殼

10.干擾素的生物活性中不包括：____________.A.抗毒素

B.抗病毒

C.抗腫瘤

D.增強(qiáng)NK細(xì)胞的殺傷活性

E.增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬功能

11.干擾素的抗病毒作用特點(diǎn)中不包括：____________.A.間接滅活病毒

B.選擇性作用于病毒感染細(xì)胞

C.種屬特異性

D.高活性

E.只能針對(duì)某種病毒，作用有特異性

12.滅活下列病毒所需溫度最高的是：____________.A.流感病毒

B.乙型肝炎病毒

C.流行性乙型腦炎病毒

D.麻疹病毒

E.甲型肝炎病毒

13.關(guān)于理化因素對(duì)病毒的影響，正確的敘述是：____________.A.大多數(shù)病毒耐冷不耐熱

B.60C30分鐘能殺死所有病毒

C.包膜病毒體比無(wú)包膜病毒體更耐受反復(fù)凍融

D.紫外線不能滅活病毒

E.脂溶劑能破壞病毒衣殼

14.病毒滅活是指在理化因素作用下使病毒失去：____________.A.抗原性

B.感染性

C.血凝特性

D.誘生于擾素的能力

E.融合細(xì)胞特性

15.病毒凝集紅細(xì)胞（血凝試驗(yàn)）的機(jī)制是：____________.A.紅細(xì)胞表面抗原和血凝素抗體結(jié)合 B.紅細(xì)胞表面受體與病毒表面血凝素結(jié)合 C.紅細(xì)胞表面病毒抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合 D.病毒與結(jié)合在紅細(xì)胞表面的抗體結(jié)合 E.紅細(xì)胞上的血凝素與病毒結(jié)合

16.進(jìn)行病毒病原學(xué)檢查的標(biāo)本遞送要求是：____________.A.孵箱保存

B.室溫保存

C.加入防腐劑

D.冷藏速送

E.加入含抗生素和蛋白的運(yùn)輔培養(yǎng)基中冷凍速送

17.可從糞便標(biāo)本中分離的一組病毒是；____________.A.甲型肝炎病毒、乙型腦炎病毒

B.狂犬病毒、輪狀病毒

C.脊髓灰質(zhì)炎病毒、輪狀病毒

D.乙型肝炎病毒、戊型肝炎病毒

E.EB病毒、埃可病毒

18.檢查包涵體可作為：____________.A.病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖的標(biāo)志之一

B.衡量病毒毒力強(qiáng)弱的標(biāo)準(zhǔn)

C.診斷乙型腦炎病毒感染

D.鑒定病毒的特異性依據(jù)

E.測(cè)定病毒數(shù)量的指標(biāo)

19.細(xì)胞病變效應(yīng)不包括：____________.A.細(xì)胞圓縮、脫落

B.細(xì)胞融合

C.形成包涵體

D.干擾現(xiàn)象

E.細(xì)胞裂解

20.判斷流感病毒接種雞胚尿囊腔是否生長(zhǎng)應(yīng)選：____________.A.紅細(xì)胞吸附試驗(yàn)

B.血凝試驗(yàn)

C.血凝抑制試驗(yàn)

D.間接血凝試驗(yàn)

E.補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)

21.用于估計(jì)病毒感染性強(qiáng)弱和數(shù)量的實(shí)驗(yàn)方法；____________.A.蝕斑形成試驗(yàn)

B.TCIDS0或ID50測(cè)定

C.ELLSA

D.PCR

E.EIA

22.可用于制備病毒滅活疫苗的理化因素是：____________.A.紫外線

B.甲醇

C.甲醛

D.乙醇

E.乙醛

23.預(yù)防病毒病最有效的方法是：____________.A.使用抗毒素

B.使用抗病毒化學(xué)療劑

C.使用中草藥

D.使用疫苗

E.使用抗菌藥物

24.脊髓灰質(zhì)炎病毒糖九疫苗后，機(jī)體可產(chǎn)生：____________.A.血清LGG、IGM

B.血清LGG、腸黏膜局部SIGA

C.血清LGG、咽部黏膜局部SIGA

D.血清IGA和LGG

E.腸黏膜局部SIGA

25.下述藥物中，對(duì)治療病毒感染無(wú)效果的是：____________.A.干擾素

B.抗生索

C.聚肌苷酸

D.黃連、黃芩

E.三氮唑核苷

26.接～R活疫苗后，體內(nèi)產(chǎn)生的抗體種類主要是____________.A.IgG、SIgA

B.IgD

C.IgE

D.IgG

E.IEM

27.滅活疫苗的缺點(diǎn)不包括：____________.A.需多次注射

B.免疫維持時(shí)間短

C.疫苗成本高

D.誘導(dǎo)細(xì)胞免疫反應(yīng)差

E.可發(fā)生干擾現(xiàn)象降低免疫效果

28.我國(guó)目前應(yīng)用的乙型肝炎疫苗屬于：____________.A.減毒活疫苗

B.滅活疫苗

C.亞單位疫苗

D.多價(jià)疫苗

E.基因重組疫苗

1.D 2.C 3.E 4.B 5.C 6.B 7.D 8.C 9.A 10.A

11.E 12.B 13.A 14.B 15.B 16.E 17.C 18.A 19.D 20.B

21.B 22.C 23.D 24.B 25.B 26.D 27.E 28.E

第三篇：微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)

細(xì)菌群體生長(zhǎng)表現(xiàn)為細(xì)胞數(shù)目的增加或細(xì)胞物質(zhì)的增加。測(cè)定細(xì)胞數(shù)目的方法有顯微鏡直接計(jì)數(shù)法(direct microscopic count)、平板菌落計(jì)數(shù)法(plate count)、光電比油法(turbidity estimation by spectrophotometer)、最大或然數(shù)法(most probable number MPN)以及膜過濾法(membrane filtration)等。測(cè)定細(xì)胞物質(zhì)的方法有細(xì)胞干重的測(cè)定，細(xì)胞某種成分如氮的含量、RNA和DNA的含量測(cè)定，代謝產(chǎn)物的測(cè)定等。總之，測(cè)定微生物生長(zhǎng)量的方法很多，各有優(yōu)缺點(diǎn)，工作中應(yīng)根據(jù)具體情況要求加以選擇。本實(shí)驗(yàn)主要介紹生產(chǎn)、科研工作中比較常用的顯微鏡直接計(jì)數(shù)法、平板菌落計(jì)數(shù)法和光電比濁計(jì)數(shù)法。

一 顯微鏡直接計(jì)數(shù)法

（一）目的要求

1．明確血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)的原理。

2．掌握使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板進(jìn)行微生物計(jì)數(shù)的方法。

（二）基本原理

顯微鏡直接計(jì)數(shù)法是將小量待測(cè)樣品的懸浮液置于一種特別的具有確定面積和容積的載玻片上(又稱計(jì)菌器)，于顯微鏡下直接計(jì)數(shù)的一種簡(jiǎn)便、快速、直觀的方法。目前國(guó)內(nèi)外常用的計(jì)菌器有：血細(xì)胞計(jì)數(shù)板、Peteroff-Hauser計(jì)菌器以及Hawksley計(jì)菌器等，它們都可用于酵母、細(xì)菌、霉菌孢子等懸液的計(jì)數(shù)，基本原理相同。后兩種計(jì)菌器由于蓋上蓋玻片后，總?cè)莘e為0.02mm3，而且蓋玻片和載波片之間的距離只有0.02mm，因此可用油浸物鏡對(duì)細(xì)菌等較小的細(xì)胞進(jìn)行觀察和計(jì)數(shù)。除了用這些計(jì)菌器外，還有在顯微鏡下直接觀察涂片面積與視野面積之比的估算法，此法一般用于牛乳的細(xì)菌學(xué)檢查。顯微鏡直接計(jì)數(shù)法的優(yōu)點(diǎn)是直觀、快速、操作簡(jiǎn)單。但此法的缺點(diǎn)是所測(cè)得的結(jié)果通常是死菌體和活菌體的總和。目前已有一些方法可以克服這一缺點(diǎn)，如結(jié)合活菌染色微室培養(yǎng)（短時(shí)間）以及加細(xì)胞分裂抑制劑等方法來達(dá)到只計(jì)數(shù)活菌體的目的。本實(shí)驗(yàn)以血球計(jì)數(shù)板為例進(jìn)行顯微鏡直接計(jì)數(shù)。另外兩種計(jì)菌器的使用方法可參看各廠商的說明書。

用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板在顯微鏡下直接計(jì)數(shù)是一種常用的微生物計(jì)數(shù)方法。該計(jì)數(shù)板是一塊特制的載玻片，其上由四條槽構(gòu)成三個(gè)平臺(tái)；中間較寬的平臺(tái)又被一短橫槽隔成兩半，每一邊的平臺(tái)上各列有一個(gè)方格網(wǎng)，每個(gè)方格網(wǎng)共分為九個(gè)大方格，中間的大方格即為計(jì)數(shù)室。血細(xì)胞計(jì)數(shù)板構(gòu)造如圖l5-1。計(jì)數(shù)室的刻度一般有兩種規(guī)格，一種是一個(gè)大方格分成25個(gè)中方格，而每個(gè)中方格又分成16個(gè)小方格(圖15—2)；另一種是一個(gè)大方格分成16個(gè)中方格，而每個(gè)中方格又分成25個(gè)小方格，但無(wú)論是哪一種規(guī)格的計(jì)數(shù)板，每一個(gè)大方格中的小方格都是400個(gè)。每一個(gè)大方格邊長(zhǎng)為lmm，則每一個(gè)大方格的面積為lmm2，蓋上蓋玻片后，蓋玻片與載玻片之間的高度為0.lmm，所以計(jì)數(shù)室的容積為0.lmm3(萬(wàn)分之一毫升)。

圖15—1 血細(xì)胞計(jì)數(shù)板構(gòu)造

（一）圖15—2 血細(xì)胞計(jì)數(shù)板構(gòu)造

（二）A.正面圖；B.縱切面圖； 放大后的方格網(wǎng)，中間大方格為計(jì)數(shù)室

1.血細(xì)胞計(jì)數(shù)板；2.蓋玻片；3.計(jì)數(shù)室

計(jì)數(shù)時(shí)，通常數(shù)五個(gè)中方格的總菌數(shù)，然后求得每個(gè)中方格的平均值，再乘上25或16，就得出一個(gè)大方格中的總菌數(shù)，然后再換算成lml菌液中的總菌數(shù)。

設(shè)五個(gè)中方格中的總菌數(shù)為A，菌液稀釋倍數(shù)為B，如果是25個(gè)中方格的計(jì)數(shù)板，則

1mL菌液中的總菌數(shù)=A/5×25×104×B=50000A·B（個(gè)）

同理，如果是16個(gè)中方格的計(jì)數(shù)板，1mL菌液中的總菌數(shù)=A/5×16×104×B=32000A·B（個(gè)）

（三）器材

1．菌種 釀酒酵母

2．儀器或其他用具 血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，顯微鏡，蓋玻片，無(wú)菌毛細(xì)滴管。

（四）操作步驟

l．菌懸液制備

以無(wú)菌生理鹽水將釀酒酵母制成濃度適當(dāng)?shù)木鷳乙骸?/p>

2．鏡檢計(jì)數(shù)室

在加樣前，先對(duì)計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室進(jìn)行鏡檢。若有污物，則需清洗，吹干后才能進(jìn)行計(jì)數(shù)。

3．加樣品

將清潔干燥的血細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋上蓋玻片，再用無(wú)菌的毛細(xì)滴管將搖勻的釀酒酵母菌懸液由蓋玻片邊緣滴一小滴，讓菌液沿縫隙靠毛細(xì)滲透作用自動(dòng)進(jìn)入計(jì)數(shù)室，一般計(jì)數(shù)室均能充滿菌液。

取樣時(shí)先要搖勻菌液；加樣時(shí)計(jì)數(shù)室不可有氣泡產(chǎn)生。

4．顯微鏡計(jì)數(shù)

加樣后靜止5min，然后將血細(xì)胞計(jì)數(shù)板置于顯微鏡載物臺(tái)上，先用低倍鏡找到計(jì)數(shù)室所在位置，然后換成高倍鏡進(jìn)行計(jì)數(shù)。

調(diào)節(jié)顯微鏡光線的強(qiáng)弱適當(dāng)，對(duì)于用反光鏡采光的顯微鏡還要注意光線不要偏向一邊，否則視野中不易舌清楚計(jì)數(shù)室方格線，或只見豎線或只見橫線。

在計(jì)數(shù)前若發(fā)現(xiàn)菌液太濃或太稀，需重新調(diào)節(jié)稀釋度后再計(jì)數(shù)。一般樣品稀釋度要求每小格內(nèi)約有5~10個(gè)菌體為宜。每個(gè)計(jì)數(shù)室選5個(gè)中格(可選4個(gè)角和中央的一個(gè)中格)中的菌體進(jìn)行計(jì)數(shù)。位于格線上的菌體一般只數(shù)上方和右邊線上的。如遇酵母出芽，芽體大小達(dá)到母細(xì)胞的一半時(shí)，即作為兩個(gè)菌體計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)一個(gè)樣品要從兩個(gè)計(jì)數(shù)室中計(jì)得的平均數(shù)值來計(jì)算樣品的含菌量。

5．清洗血細(xì)胞計(jì)數(shù)板

使用完畢后，將血細(xì)胞計(jì)數(shù)板在水龍頭用水沖洗干凈，切勿用硬物洗刷，洗完后自行晾干或用吹風(fēng)機(jī)吹干。鏡檢，觀察每小格內(nèi)是否有殘留菌體或其他沉淀物。若不干凈，則必須重復(fù)洗滌至干凈為止。

（五）實(shí)驗(yàn)報(bào)告

l．結(jié)果

將結(jié)果記錄于下表中。A表示五個(gè)中方格中的總菌數(shù)；B表示菌液稀釋倍數(shù)。

各中格中菌數(shù)AB二室平均值菌數(shù)/ml

12345

第一室

第二室

2．思考題

(1)根據(jù)你的體會(huì)，說明用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)的誤差主要來自哪些方面?應(yīng)如何盡量減少誤差．力求準(zhǔn)確?

(2)某單位要求知道一種干酵母粉中的活菌存活率，請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)1～2種可行的檢測(cè)方法。

二平板菌落計(jì)數(shù)法

（一）目的要求

學(xué)習(xí)習(xí)近平板菌落計(jì)數(shù)的基本原理和方法。

（二）、基本原理

平板菌落計(jì)數(shù)法是將待測(cè)樣品經(jīng)適當(dāng)稀釋之后，其中的微生物充分分散成單個(gè)細(xì)胞，取一定量的稀釋樣液接種到平板上，經(jīng)過培養(yǎng)，由每個(gè)單細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖而形成肉眼可見的菌落，即一個(gè)單菌落應(yīng)代表原樣品中的一個(gè)單細(xì)胞。統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)，根據(jù)其稀釋倍數(shù)和取樣接種量即可換算出樣品中的含菌數(shù)。但是，由于待測(cè)樣品往往不易完全分散成單個(gè)細(xì)胞，所以，長(zhǎng)成的一個(gè)單菌落也可來自樣品中的2～3或更多個(gè)細(xì)胞。因此平板菌落計(jì)數(shù)的結(jié)果往往偏低。為了清楚地闡述平板菌落計(jì)數(shù)的結(jié)果，現(xiàn)在已傾向使用菌落形成單位(colony-forming units，cfu)而不以絕對(duì)菌落數(shù)來表示樣品的活菌含量。

平板菌落計(jì)數(shù)法雖然操作較繁，結(jié)果需要培養(yǎng)一段時(shí)間才能取得，而且測(cè)定結(jié)果易受多種因素的影響，但是，由于該計(jì)數(shù)方法的最大優(yōu)點(diǎn)是可以獲得活菌的信息，所以被廣泛用于生物制品檢驗(yàn)(如活菌制劑)，以及食品、飲料和水(包括水源水)等的含菌指數(shù)或污染程度的檢測(cè)。

（三）器材

1．菌種 大腸桿菌菌懸液。

2．培養(yǎng)基 牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基。

3．儀器或其他用具lm1無(wú)菌吸管，無(wú)菌平皿，盛有4.5ml無(wú)菌水的試管，試管架，恒溫培養(yǎng)箱等。

（四）操作步驟

l．編號(hào)

取無(wú)菌平皿9套，分別用記號(hào)筆標(biāo)明10-

4、10-

5、10-6。(稀釋度)各3套。另取6支盛有4.5mL無(wú)菌水的試管，依次標(biāo)是10-

1、10-

2、10-

3、10-

4、10-

5、10-6。

2．稀釋

用lmL無(wú)菌吸管吸取lmL已充分混勻的大腸桿菌菌縣液(待測(cè)樣品)，精確地放0.5ml至10-1的試管中，此即為10倍稀釋。將多余的菌液放回原菌液中。

OptionsEmail Replies將10-1試管置試管振蕩器上振蕩，使菌液充分混勻。另取一支lml吸管插入10?1試管中來回吹吸菌懸液三次，進(jìn)一步將菌體分散、混勻。吹吸菌液時(shí)不要太猛太快，吸時(shí)吸管伸人管底，吹時(shí)離開液面，以免將吸管中的過濾棉花浸濕或使試管內(nèi)液體外溢。用此吸管吸取10-1菌液lmL，精確地放0.5mL至10-2試管中，此即為100倍稀釋。……其余依次類推，整個(gè)過程如圖15-3所示。

放菌液時(shí)吸管尖不要碰到液面，即每一支吸管只能接觸一個(gè)稀釋度的菌懸液，否則稀釋不精確，結(jié)果誤差較大。

3，取樣

用三支1mL無(wú)菌吸管分別吸取10-

4、10-5和10-6。的稀釋菌懸液各lmL，對(duì)號(hào)放入編好號(hào)的無(wú)菌平皿中，每個(gè)平皿放0.2mL。

不要用lmL吸管每次只靠吸管尖部吸0.2mL稀釋菌液放入平皿臼，這樣容易加大同一稀釋度幾個(gè)重復(fù)平板間的操作誤差。

圖15—3平板菌落計(jì)數(shù)操作步驟

4．倒平板．

盡快向上述盛有不同稀釋度菌液的平皿中倒入融化后冷卻至45℃左右的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基約15毫升/平皿，置水平位置迅速旋動(dòng)平皿，使培養(yǎng)基與菌液混合均勻，而又不使培養(yǎng)基蕩出平皿或?yàn)R到平皿蓋上。由于細(xì)菌易吸附到玻璃器皿表面，所以菌液加入到培養(yǎng)皿后，應(yīng)盡快倒入融化并于已冷卻至45℃左右的培養(yǎng)基，立即搖勻，否則細(xì)菌將不易分散或長(zhǎng)成的菌落連在一起，影響計(jì)數(shù)。

待培養(yǎng)基凝固后，將平板倒置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

5．計(jì)數(shù)

培養(yǎng)48h后，取出培養(yǎng)平板，算出同一稀釋度三個(gè)平板上的菌落平均數(shù)，并按下列公式進(jìn)行計(jì)算，每毫升中菌落形成單位(cfu)=同一稀釋度三次重復(fù)的平均菌落數(shù)×稀釋倍數(shù)×5

一般選擇每個(gè)平板上長(zhǎng)有30~300個(gè)菌落的稀釋度計(jì)算每毫升的含菌量較為合適。同一稀釋度的三個(gè)重復(fù)對(duì)照的菌落數(shù)不應(yīng)相差很大，否則表示試驗(yàn)不精確。實(shí)際工作中同一稀釋度重復(fù)對(duì)照平板不能少于三個(gè)，這樣便于數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，減少誤差。由10-

4、10-

5、10-6三個(gè)稀釋度計(jì)算出的每毫升菌液中菌落形成單位數(shù)也不應(yīng)相差太大。

平板菌落計(jì)數(shù)法，所選擇倒平板的稀釋度是很重要的。一般以三個(gè)連續(xù)稀釋度中的第二個(gè)稀釋度倒平板培養(yǎng)后所出現(xiàn)的平均菌落數(shù)在50個(gè)左右為好，否則要適當(dāng)增加或減少稀釋度加以調(diào)整。

平板菌落計(jì)數(shù)法的操作除上述傾注倒平板的方式以外，還可以用涂布平板的方式進(jìn)行。二者操作基本相同，所不同的是后者先將牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基融化后倒平板，待凝固后編號(hào)，并于37℃左右的溫箱中烘烤30min，或在超靜工作臺(tái)上適當(dāng)吹干，然后用無(wú)菌吸管吸取稀釋好的菌液對(duì)號(hào)接種于不同稀釋度編號(hào)的平板上，并盡快用無(wú)菌玻璃涂棒將菌液在平板上涂布均勻，平放于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上20～30min，使菌液滲入培養(yǎng)基表層內(nèi)，然后倒置37℃的恒溫箱中培養(yǎng)24～48h。

涂布平板用的菌懸液量一般以0.1ml較為適宜，如果過少菌液不易涂布開，過多則在涂布完后或在培養(yǎng)時(shí)菌液仍會(huì)在平板表面流動(dòng)，不易形成單菌落。

五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告

1．結(jié)果

2．將培養(yǎng)后菌落計(jì)數(shù)結(jié)果填入下表

稀釋度10-410-510-6

Cfu數(shù)/平板123平均123平均123平均

每毫升中的cfu

2．思考題

(1)為什么融化后的培養(yǎng)基要冷卻至45℃左右才能倒平板?

(2)要使平板菌落計(jì)數(shù)準(zhǔn)確，需要掌握哪幾個(gè)關(guān)鍵?為什么?

(3)試比較平板菌落計(jì)數(shù)法和顯微鏡下直接計(jì)數(shù)法的優(yōu)缺點(diǎn)及應(yīng)用。

(4)當(dāng)你的平板上長(zhǎng)出的菌落不是均勻分散的而是集中在一起時(shí)，你認(rèn)為問題出在哪里?

(5)用倒平板法和涂布法計(jì)數(shù)，其平板上長(zhǎng)出的菌落有何不同?為什么要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間(48h)后觀察結(jié)果?

三 光電比濁計(jì)數(shù)法

一、目的要求

1．了解光電比濁計(jì)數(shù)法的原理。

2．學(xué)習(xí)、掌握光電比濁計(jì)數(shù)法的操作方法。

二、基本原理

當(dāng)光線通過微生物菌懸液時(shí)，由于菌體的散射及吸收作用使光線的透過量降低。在一定的范圍內(nèi)，微生物細(xì)胞濃度與透光度成反比，與光密度成正比，而光密度或透光度可以由光電池精確測(cè)出(圖15-4)。因此，可用一系列已知菌數(shù)的菌懸液測(cè)定光密度，作出光密度—菌數(shù)標(biāo)準(zhǔn)曲線。然后，以樣品液所測(cè)得的光密度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線中查出對(duì)應(yīng)的菌數(shù)。制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)，菌體計(jì)數(shù)可采用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，平板菌落計(jì)數(shù)或細(xì)胞干重測(cè)定等方法。本實(shí)驗(yàn)采用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。

光電比濁計(jì)數(shù)法的優(yōu)點(diǎn)是簡(jiǎn)便、迅速，可以連續(xù)測(cè)定，適合于自動(dòng)控制。但是，由于光密度或透光度除了受菌體濃度影響之外，還受細(xì)胞大小、形態(tài)、培養(yǎng)液成分以及所采用的光波長(zhǎng)等因素的影響。因此，對(duì)于不同微生物的菌懸液進(jìn)行光電比濁計(jì)數(shù)應(yīng)采用相同的菌株和培養(yǎng)條件制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。光波的選擇通常在400~700nm之間，具體到某種微生物采用多少還需要經(jīng)過最大吸收波長(zhǎng)以及穩(wěn)定性試驗(yàn)來確定。另外，對(duì)于顏色太深的樣品或在樣品中還含有其他干擾物質(zhì)的懸液不適合用此法進(jìn)行測(cè)定。

圖15—4 比濁法測(cè)定細(xì)胞濃度的原理

（三）器材

1．菌種 釀酒酵母培養(yǎng)液

2．儀器或其他用具 721型分光光度計(jì)，血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，顯微鏡，試管，吸水紙，無(wú)菌吸管，無(wú)菌生理鹽水等。

（四）操作步驟

1．標(biāo)準(zhǔn)曲線制作

（1）編號(hào) 取無(wú)菌試管7支，分別用記號(hào)筆將試管編號(hào)為1、2、3、4、5、6、7。

（2）調(diào)整菌液濃度 用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)培養(yǎng)24小時(shí)的釀酒酵母菌懸液，并用無(wú)菌生理鹽水分別稀釋調(diào)整為每毫升1×106、2×106、4×106、6×106、8×106、10×106、12×106含菌數(shù)的細(xì)胞懸液。再分別裝入已編好號(hào)的1至7號(hào)無(wú)菌試管中。

（3）測(cè)OD值 將1至7號(hào)不同濃度的菌懸液搖均勻后于560nm波長(zhǎng)、1cm比色皿中測(cè)定OD值。比色測(cè)定時(shí)，用無(wú)菌生理鹽水作空白對(duì)照，并將OD值填入下表

管號(hào)12345678

細(xì)胞數(shù)106/ml

光密度（OD）

每管菌懸液在測(cè)定OD值時(shí)均必須先搖勻后再倒入比色皿中測(cè)定

(4)以光密度(OD)值為縱坐標(biāo)，以每毫升細(xì)胞數(shù)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2．樣品測(cè)定

將待測(cè)樣品用無(wú)菌生理鹽水適當(dāng)稀釋，搖均勻后，用560nm波長(zhǎng)、lcm比色皿測(cè)定光密度。測(cè)定時(shí)用無(wú)菌生理鹽水作空白對(duì)照。

各種操作條件必須與制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)的相同，否則，測(cè)得值所換算的含菌數(shù)就不準(zhǔn)確。

3．根據(jù)所測(cè)得的光密度值，從標(biāo)準(zhǔn)曲線查得每毫升的含菌數(shù)。

（五）實(shí)驗(yàn)報(bào)告

l．結(jié)果

每毫升樣品原液菌數(shù)=從標(biāo)準(zhǔn)曲線查得每毫升的菌數(shù)×稀釋倍數(shù)

2．思考題

(1)光電比濁計(jì)數(shù)的原理是什么?這種計(jì)數(shù)法有何優(yōu)缺點(diǎn)?

(2)光電比濁計(jì)數(shù)在生產(chǎn)實(shí)踐中有何應(yīng)用價(jià)值?

(3)本實(shí)驗(yàn)為什么采用560nm波長(zhǎng)測(cè)定酵母菌懸液的光密度?如果你在實(shí)驗(yàn)中需要測(cè)定大腸桿菌生長(zhǎng)的OD值，你將如何選擇波長(zhǎng)?

四 大腸桿菌生長(zhǎng)曲線的測(cè)定

(一)目的要求

1．通過細(xì)菌數(shù)量的測(cè)量了解大腸桿菌的生物特征和規(guī)律，繪制生長(zhǎng)線。

2．復(fù)習(xí)光電比濁法測(cè)量細(xì)菌數(shù)量的方法。

(二)基本原理

大多數(shù)細(xì)菌的繁殖速率很快，在合適的條件下，一定時(shí)期的大腸桿菌細(xì)胞每20min分裂一次。將一定量的細(xì)菌轉(zhuǎn)入新鮮液體培養(yǎng)基中，在適宜的條件下培養(yǎng)細(xì)胞要經(jīng)歷延遲期，對(duì)數(shù)期、穩(wěn)定期和衰亡期四個(gè)階段。以培養(yǎng)時(shí)間為橫坐標(biāo)，以細(xì)菌數(shù)目的對(duì)數(shù)或生長(zhǎng)速率為縱坐標(biāo)作圖所繪制的曲線稱為該細(xì)菌的生長(zhǎng)曲線。不同的細(xì)菌在相同的培養(yǎng)條件下其生長(zhǎng)曲線不同，同樣的細(xì)菌在不同的培養(yǎng)條件下所繪制的生長(zhǎng)曲線也不相同。測(cè)定細(xì)菌的生長(zhǎng)曲線，了解其生長(zhǎng)繁殖規(guī)律，這對(duì)人們根據(jù)不同的需要，有效地利用和控制細(xì)菌的生長(zhǎng)具有重要意義。

用于測(cè)定細(xì)菌細(xì)胞數(shù)量的方法已在上述實(shí)驗(yàn)作了介紹。本實(shí)驗(yàn)用分光光度計(jì)(spectrophotometer)進(jìn)行光電比濁測(cè)定不同培養(yǎng)時(shí)間細(xì)菌懸浮液的OD值，繪制生長(zhǎng)曲線。也可以直接用試管或帶有測(cè)定管的三角瓶(圖15-5)測(cè)定“klett units”值的光度計(jì)。如圖15—6所示，只要接種1支試管或1個(gè)帶測(cè)定管的三角瓶，在不同的培養(yǎng)時(shí)間(橫坐標(biāo))取樣測(cè)定，以測(cè)得的klett units為縱坐標(biāo)，便可很方便地繪制出細(xì)菌的生長(zhǎng)曲線。如果需要，可根據(jù)公式1 klett units=OD/0.002換算出所測(cè)菌懸液的OD值。

圖15—5 帶側(cè)臂試管的三角燒瓶

(三)器材

1．菌種 大腸桿菌

2．培養(yǎng)基 LB液體培養(yǎng)基70ml，分裝2支大試管(5ml/支)，剩余60ml裝入250ml的三角瓶。

3．儀器或其他用具 722型分光光度計(jì)，水浴振蕩搖床，無(wú)菌試管，無(wú)菌吸管等。

圖15—6 直接用試管測(cè)OD值

(四)操作步驟

1．標(biāo)記

取11支無(wú)菌大試管，用記號(hào)筆分別標(biāo)明培養(yǎng)時(shí)間，即0、1.5、3、4、6、8、10、12、14、16和20h。

2．接種

分別用5ml無(wú)菌吸管吸取2.5ml大腸桿菌過夜培養(yǎng)液(培養(yǎng)10~12h)轉(zhuǎn)入盛有50ml LB液的三角瓶?jī)?nèi)，混合均勻后分別取5ml混合液放入上述標(biāo)記的11支無(wú)菌大試管中。

3．培養(yǎng)

將已接種的試管置搖床37℃振蕩培養(yǎng)(振蕩頻率250r/min)，分別培養(yǎng)0、1.5、3、4、6、8、10、12、14、16和20h，將標(biāo)有相應(yīng)時(shí)間的試管取出，立即放冰箱中貯存，最后一同比濁測(cè)定其光密度值。

4．比濁測(cè)定

用未接種的LB液體培養(yǎng)基作空白對(duì)照，選用600nm波長(zhǎng)進(jìn)行光電比濁測(cè)定。從早取出的培養(yǎng)液開始依次測(cè)定，對(duì)細(xì)胞密度大的培養(yǎng)液用LB液體培養(yǎng)基適當(dāng)稀釋后測(cè)定，使其光密度值在0.1~0.65之內(nèi)(測(cè)定OD值前，將待測(cè)定的培養(yǎng)液振蕩，使細(xì)胞均勻分布)。

本操作步驟也可用簡(jiǎn)便的方法代替：

1．用1ml無(wú)菌吸管取0.25ml大腸桿菌過夜培養(yǎng)液轉(zhuǎn)入盛有3~5ml LB液的試管中、混勻后將試管直接插入分光光度計(jì)的比色糟中，比色糟上方用自制的暗盒將試管及比色暗室全部罩上，形成一個(gè)大的暗環(huán)境，另以1支盛有LB液但沒有接種的試管調(diào)零點(diǎn)，測(cè)定樣品中培養(yǎng)0h的OD值。測(cè)定完畢后，取出試管置37℃繼續(xù)振蕩培養(yǎng)。

2．分別在培養(yǎng)0、1.5、3、4、6、8、10、12、14、16和20h，取出培養(yǎng)物試管按上述方法測(cè)定OD值。該方法準(zhǔn)確度高、操作簡(jiǎn)便。但須注意的是使用的2支試管要很干凈，其透光程度愈接近，測(cè)定的準(zhǔn)確度愈高。

(五)實(shí)驗(yàn)報(bào)告

1．結(jié)果

(1)將測(cè)定的OD600值填入下表：

培養(yǎng)時(shí)間對(duì)照 0 1.5 3 4 6 8 10 12 14 16 20

光密度值OD600

(2)繪制大腸桿菌的生長(zhǎng)曲線。

2．思考題

(1)如果用活菌計(jì)數(shù)法制作生長(zhǎng)曲線，你認(rèn)為會(huì)有什么不同？?jī)烧吒饔惺裁磧?yōu)缺點(diǎn)？

(2)細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖所經(jīng)歷的四個(gè)時(shí)期中，哪個(gè)時(shí)期其代時(shí)最短？若細(xì)胞密度為103/ml，培養(yǎng)4.5h后，其密度高達(dá)2×108/ml，計(jì)計(jì)算出其代時(shí)。

(3)次生代謝產(chǎn)物的大量積累在哪個(gè)時(shí)期？根據(jù)細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的規(guī)律，采用哪些措施可使次生代謝產(chǎn)物積累更多？

評(píng)論這張

第四篇：微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)考試題

《微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)》試題

1、在進(jìn)行高壓蒸汽滅菌時(shí)，是否只要滅菌鍋壓力表到達(dá)所需的值時(shí)鍋內(nèi)就能獲得所需的滅菌溫度？為什么？

2、在手提式高壓滅菌鍋的蓋上有哪些部件？它們各起什么作用？

3、高壓蒸汽滅菌鍋的操作有哪幾個(gè)步驟？每一步驟應(yīng)注意哪些問題？

4、在微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中，常用于配制固體培養(yǎng)基的凝固劑是什么？它有哪些特性？如何使用？

5、環(huán)境樣品梯度稀釋、涂布平板法分離微生物時(shí)，如何選擇不同稀釋梯度樣品的涂布順序？為什么？

6、在革蘭氏染色實(shí)驗(yàn)中，為什么會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性和假陰性？如何避免？

7、在革蘭氏染色實(shí)驗(yàn)中，不經(jīng)復(fù)染這一步，能否區(qū)別革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌和革蘭氏陰性細(xì)菌？為什么？

8、為何用計(jì)數(shù)板可以計(jì)得樣品中的總菌值？如何計(jì)算樣品中的菌體濃度？

9、血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)時(shí)，計(jì)數(shù)室內(nèi)如有氣泡會(huì)對(duì)結(jié)果產(chǎn)生怎樣的影響？如何避免產(chǎn)生氣泡？

10、試分析血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法的誤差來源，并提出減少誤差的方法和措施。

要求把題目和答案寫在實(shí)驗(yàn)報(bào)告紙上，統(tǒng)一收齊后和第一次實(shí)驗(yàn)報(bào)告一起送到我辦公室-生科樓104。

第五篇：微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)考核辦法

本科微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)考核辦法

考核方式：按學(xué)號(hào)順序逐一進(jìn)場(chǎng)應(yīng)考。考核內(nèi)容共8項(xiàng)，每位同學(xué)通過抽簽考其中的一項(xiàng)內(nèi)容。考核時(shí)間：每人限6分鐘內(nèi)完成。

考核地點(diǎn)：微免實(shí)驗(yàn)課上課的實(shí)驗(yàn)室

考核內(nèi)容及要求如下：

1、顯微鏡（油鏡）的使用和保護(hù)方法

（1）、提供一張細(xì)菌玻片標(biāo)本，要求能正確使用油鏡觀察到細(xì)菌的基本形態(tài)。

（2）、掌握顯微鏡（油鏡）保護(hù)方法

2、血清對(duì)倍稀釋法

（1）、用生理鹽水將血清進(jìn)行對(duì)倍稀釋，終濃度達(dá)到1/ 2、1/ 4、1 /8三個(gè)稀釋度。

（2）、掌握血清對(duì)倍稀釋的原理及方法，能正確使用刻度吸管。

3、玻片凝集試驗(yàn)

（1）、要求用傷寒診斷血清，采用玻片凝集試驗(yàn)的方法檢測(cè)待檢細(xì)菌是否為傷寒桿菌。

（2）、要求操作方法、步驟正確，能準(zhǔn)確判斷結(jié)果。

（3）、無(wú)菌操作正確。

4、革蘭氏染色法

（1）、口試回答細(xì)菌涂片的制作方法

（2）、將一張已涂好的細(xì)菌玻片進(jìn)行革蘭氏染色

（3）、要求染色步驟及各項(xiàng)染色時(shí)間正確，操作熟練。

5、細(xì)菌的劃線分離培養(yǎng)技術(shù)

（1）、將細(xì)菌分區(qū)劃線到普通瓊脂平碟上。

（2）、要求劃線分區(qū)正確，接種劃線手法正確、熟練。

（3）、無(wú)菌操作正確。

6、液體和半固體培養(yǎng)基的細(xì)菌接種方法（無(wú)菌操作）

（1）、將菌種接種到液體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基內(nèi)。

（2）、要求各環(huán)節(jié)無(wú)菌操作正確。

7、細(xì)菌在培養(yǎng)基中生長(zhǎng)情況及細(xì)菌特殊結(jié)構(gòu)觀察

（1）、正確描述固體培養(yǎng)基的菌落、菌苔。

（2）、正確描述液體培養(yǎng)基中的細(xì)菌生長(zhǎng)情況。

（3）、正確觀察出鏡下細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)。

8、抗酸染色法

（1）、正確回答抗酸染色的各個(gè)步驟（包括用加熱法或不加熱法 初染的時(shí)間）。

（2）、操作技術(shù)手法正確熟練

（3）、脫色程度控制較好。

注：經(jīng)一次考核不及格者，可在全班同學(xué)考核結(jié)束后，允許補(bǔ)考一次。補(bǔ)考成績(jī)通過后只計(jì)及格。