第一篇：半保留復制實驗證明

半保留復制實驗證明 Watson和Crick在他們發表在1953年4月25日的Nature上的具有劃時代意義的題為“Molecular structure of Nucleic Acids”論文的最后一段這樣寫道：“It has not escaped our notice that the specific pairing we have postulated immediately suggests a possible copying mechanism for the genetic material.The structure itself suggested that each strand could separate and act as a template for a new strand,therefore doubling the amount of DNA, yet keeping the genetic information,in the form of the original sequence,intact.”翻譯成中文的意思是，“特定的堿基配對性質讓我們立刻注意到遺傳物質可能的復制機制。結構(雙螺旋)的本身意味著每一條鏈可以分離開來，作為新鏈的模板，于是DNA的量加倍了，而且保證了遺傳物質以原封不動的序列形式存在。”在文中，他們雖然并沒有提及DNA復制的具體機制，但已經就DNA復制的可能采取的是一種半保留方式做了大膽的預測。然而，細胞內DNA復制是不是就是以這種方式進行的，光憑預測是不夠的，還必須用實驗去驗證。由Meselson和Stahl(圖32－50)設計的被譽為生物學最美麗的實驗“the most beautiful experiment in biology”最終證明了Watson和Crick預測的正確性。

1953年，Meselson在加州理工學院(Caltech)開始了以化學為專業的研究生階段的學習。他進了Pauling的實驗室，最終完成了其博士論文第二個階段關于N,N-二甲基丙二酰胺(N，N-dimethyl malonamide,)晶體結構的工作。這部分工作的重點是確定這個分子中含有的肽鍵是不是共平面的，即是否與Pauling的共振理論相符。與他的博士論文的第一個部分關于大分子的密度梯度平衡沉降技術在DNA研究上的應用相比，這一部分鮮為人知。身為Pauling的弟子，在聽過Pauling開設的有關化學鍵的課程以后，他對當H被其同位素氚(2H)取代以后氫鍵的相對強度產生了興趣。就在他對氚參入到生物分子以后，生物體如何能夠生存下來的問題發生興趣的時刻，Meselson正好去聽了Jacques Monod在Caltech做的有關細菌誘導酶合成的學術報告。Meselson推測，如果細菌能在重水里培養，然后被轉移到一般的水里培養以后一旦加入誘導物，則任何新合成的蛋白質就應該具有正常的密度，與原來老的蛋白質的密度是有差別的，利用密度差異可以將“老”的蛋白質和新合成的蛋白質分開。事實上，如果在一個具有中間密度的溶液中離心，“老”的蛋白質可能沉降下來，而新合成的蛋白質應該懸浮在上面。

不久，他開始將注意力轉移到DNA復制的問題。在與Max Delbrück進行了有關DNA雙螺旋結構和可能的復制方式的一番熱烈的討論以后，他突然想到相同的方法也許可以用來研究DNA復制。于是，他決定要投入精力去確定DNA復制是否就是按照Watson和Crick預測的半保留的方式進行的。與此決定無關的一件事也許對其最后的成功帶來決定性的影響：1954年的夏天，Meselson去馬里蘭州位于Woods Hole的海洋生物實驗室協助Watson進行一些滴定實驗，以獲得RNA雙螺旋結構的證據。巧合的是，來自Rochester大學的Frank Stahl博士也在Woods Hole修生理學課程。一天正當Stahl在樹下思考噬菌體遺傳性的一個問題的時候，他們相遇了，并從此成為了朋友和學術伙伴。就在Meselson對噬菌體遺傳學還似懂非懂的時候，他在微積分上的專長幫助Stahl解決了問題。于是，他們變得更加熟悉了，不久Meselson提出了利用Stahl在研究噬菌體DNA上的特長使用噬菌體DNA來合作研究DNA復制的可能性。他還提出了使用氚來重標記DNA的設想，以此用密度梯度離心來分離重的DNA和輕的DNA。然而，他們很快就意識到使用噬菌體DNA進行實驗帶來的復雜性問題，因為噬菌體DNA之間存在高頻的重組事件，由此引起親代和子代DNA片段的交換是可以預見的，這勢必會影響到結果的分析。幸運的是，Stahl已經打算去Caltech做博士后研究，以方便以后的討論和合作。既然噬菌體行不通，較為簡單的單細胞系統——E.coli也許是一個不錯的選擇。后來Meselson想知道更多有關DNA合成前體分子性質的知識，在文獻調研中，得知胸腺嘧啶的類似物——5-溴尿嘧啶(5-bromouracil，5-BrU)能夠代替T參入到正在合成的DNA分子之中。5-BrU相當于T，除了由Br原子代替嘧啶環C5上的甲基以外。Br與甲基具有幾乎相同的范德華半徑，但由于5-BrU與T的離子化程度不同，Meselson想到也許可以用5-BrU標記DNA，然后利用電泳的方法將它與含有T的DNA分離開來。特別重要的是，他特別想到含有5-BrU的DNA要比含有T的DNA重得多！于是，他考慮使用5-BrU來重標記DNA以驗證DNA半保留復制的可能性。因為需要超離心技術的關系，他認識了Caltech的超離心技術奇才Jerry Vinograd，并學會了如何操作當時最先進的Beckman Spinco E型超離心機。在Vinograd悉心指導下，Meselson開始嘗試用7 mol/L的CsCl重鹽溶液來沉降DNA。使用CsCl的主意來自他認為可以將重標記的DNA與輕DNA分開來的設想——重標記DNA沉降下來，輕DNA懸浮在表面。然而，令他們驚詫的是，在高速離心場下，一種鹽密度梯度很快就形成了，而且DNA遷移到與其等密度的區域，形成很窄的條帶。于是有關密度梯度離心的概念被Meselson提出來了，相關的論文后來發表在1957年5月份的Proceedings of National Academy Science上。論文中的圖和理論計算實際上是他博士論文第一部分的內容。論文中還記錄了含有5-BrU的DNA(在含有5-BrU培養基中培養的受T4噬菌體感染E.coli中，得到被5-BrU標記的T4噬菌體DNA)在密度梯度離心中的沉降情況。結果顯示，被5-BrU標記的DNA條帶所處位置的密度是

1.8g/cm3，而含有T的DNA所在位置的密度是1.7g/cm3。盡管文中沒有提到使用這種方法研究DNA復制，但用于研究完整病毒和生物大分子的報道還是非常富有開創性的。

似乎幸運之神正在一步一步地將Meselson和Stahl帶到研究DNA復制的里程碑的實驗設計思路上去。他們本來想用5-BrU去重標記DNA的，但后來擔心5-BrU能誘發DNA突變和因此細胞產生的毒性，以及能否獲得標記的均一性的問題，他們決定使用15NH4Cl作為唯一N源的合成培養基去培養E.coli以獲得被15N標記的重DNA。他們首先將E.coli放在15NN4Cl培養基中連續培養十幾代，得到了幾乎都被15N標記的E.coli DNA；然后，隨著細菌的指數生長，用10倍過量的14NH4Cl稀釋培養基。期間在不同的時段，將DNA從細菌中抽取出來，并使用CsCl密度梯度離心的方法進行分析。

他們的結果是，起初完全被15N標記的DNA具有單一的條帶，而在14NH4Cl培養基中培養的第一代細菌中的DNA的密度介于15N-DNA和14N-DNA之間，為雜交帶DNA(15N/14N-DNA)。隨著雜交帶的出現，親代的條帶(15N-DNA)消失了。而在第二代細菌中，得到幾乎等量的14N-DNA和雜交帶DNA。隨著培養代數的增加，雜交帶始終存在，而且它的量維持不變，但14N-DNA的量越來越多。由此可以得出結論，DNA復制以半保留的方式進行。為了進一步確認這一點，Meselson和Stahl在密度梯度離心之前用熱變性處理CsCl溶液中DNA樣品(100℃下30 min)，結果發現，雜交DNA分成了15N-DNA和14N-DNA兩條帶。不久，他們將數據整理，投給了PNAS，并很快得以發表。

第二篇：實驗半期總結

河溪小學實驗室半期總結

---張福

這學期領導從上到下都非常重視實驗教學，對實驗教學有了很多新的要求，自然而然對理化生實驗室各個方面都加強了管理，引導我們去管理、要求年級上按照新的要求來做，同時做了任何一件事都要留下“痕跡”，要有表表冊冊，各種數據來支撐，把我們做的事情記錄下來，加強痕跡管理。這些都是實驗室在變化的地方，也是我們需要努力改進的地方。

一、實驗方面

1.演示實驗

演示實驗主要集中在物理和化學兩個學科上，按照要求理化演示實驗開出率保證在99%以上，高標準高質量的保證一線教學需要，這是我們的本職工作，再累再辛苦我們都不會抱怨一句，堅決服務好老師和學生。

2.學生分組實驗

開學初，就按照領導要求，和備課組積極溝通，要求備課組制定分組實驗目錄，其目的就是督促年級上，保證分組實驗的開出率，凡是能做的學生分組實驗都一定要按時開齊。到目前為止統計的情況來看，化學和生物學科都做了2輪，下一輪也在計劃當中，物理也在準備階段。

二、管理方面 1.領導重視實驗教學，對各方面都加強了管理，要把實驗室打造出一個全新的面貌，為此我們也對各備課組也加強了管理，借還制度的完善，學生分組實驗提高要求，新的實驗目錄制定。常統計三個實驗室實驗開設情況，及時匯報，讓領導知道實驗教學開展情況如何

三、問題和建議

在本期的實驗教學中，雖然取得了一定的成績，但也存在著不少問題，主要表現在以下幾個方面:

1、儀器借用還不充分，還有待加強。

2、課外活動開展的條件還有待改善，特別是相關器材還需要購進，保證課外實驗順利開展。

3、實驗教研還有待加強，讓教研為教學服務的意識不足，存在著為研而研，實踐不足的弊病。

4、教師培訓中的自我培訓意識有待加強。

5、儀器維修作為實驗室管理人員來說還需要加強學習。

6、實驗教學就和其它學科進行優化整合，讓其它學科促進實驗教學，也讓實驗教學促進其它學科的教學。

2017.11.8

第三篇：實驗證明

實驗證明

知識小結：

1、為了證明某種結論或某種推斷，設計相應的實驗方法，當出現預料的某種實驗現象時，就可以得到證明。選擇的實驗方法力求簡單易行、實驗現象明顯。

2、初中化學里的實驗證明題，一般都是證明某種成分，或某種物質含有的某種成分，以定性證明為主。

3、應熟悉常見的檢驗方法，如檢驗水、二氧化碳、一氧化碳、氫氣和碳酸鹽及氯離子、硫酸根離子、銨根離子等等。檢驗時要注意排除干擾，避免誤檢。

例題分析：

1、怎樣用實驗證明下列事實或結論？寫出實驗操作步驟、實驗現象、實驗結論及有關化學反應方程式。

（1）酒精中含有少量水分。

（2）生石灰中含有未“燒透”的石灰石。

（3）氫氧化鈉溶液長期露置在空氣中，已部分變質。

2、實驗室用鋅粒跟稀硫酸反應制取氫氣（其中含有水蒸氣），現要求證明氫氣具有還原性，及氫氣氧化后的產物是水，試從下圖中選出所需的裝置（各裝置可重復選用），并從左到右連成一套實驗裝置，完成實驗要求。回答：

（1）裝置連接順序（填序號）→→→→。

（2）在C、D裝置中反應的化學方程式：。

（3）證明氫氣具有還原性的和氧化產物是水的現象。

提高練習：

1、為了證明鹽酸中是否含有少量的硫酸，可以：

A：加入少量氯化鋇溶液，觀察是否有白色沉淀；

B：加入少量硝酸銀溶液，觀察是否有白色沉淀；

C：加入少量鋅粒，觀察是否有氣泡產生；

D：加入少量碳酸鈉溶液，觀察是否有氣泡產生。

2、為了證明某氣體中含有水蒸氣和氫氣，選用下圖裝置連接成一套裝置的順序為： A：甲→乙→丙→丁；B：丁→丙→甲→丁→乙；

C：丁→乙→丁→甲→丁；D：甲→丁→乙→丙。

3、某混合氣體由二氧化碳、氫氣、一氧化碳和水蒸氣組成。試胳膊下列A~E五種裝置（假設每步反應都完全，每種裝置限用一次），設計一個實驗程序，用來證明該混合氣體中確實。

4、欲證明某硫酸鈉溶液中含有氯化鈉。試回答：

（1）取少量樣品，放在試管里，加入過量的溶液。

（2）檢驗溶液中硫酸根離子已全部沉淀的方法。

（3）取上層清液于另一試管中，滴加溶液，看到，證明有氯離子。

6、為了證明某混合氣體是二氧化碳和一氧化碳的混合氣體，做以下實驗：

（1）使混合氣體通過盛的洗氣瓶，看到，證明混合氣體中含有二氧化碳。

（2）再使混合氣體通過盛溶液的洗氣瓶，使混合氣體中的二氧化碳全部吸收，反應的化學方程式是。

（3）再將剩余氣體通過灼熱的，看到，反應的化學方程式是。

（4）最后將剩余氣體通過，看到，說明一氧化碳的（填氧化或還原）產物是二氧化碳。

第四篇：戶檔保留證明

畢業生學號：_________

用 人 單 位 接 收 證 明

（申請戶檔暫留畢業生用）

中國人民大學：

茲證明，貴校_________學院_________專業_______屆畢業生_________（姓名），已被我單位錄用，落戶手續正在辦理中，請學校為其保留戶口、檔案。

單位名稱：_________

單位性質：黨政機關科研單位中初教育高等教育其他事業國有企業

三資企業其他企業部隊（請在對應項劃 √）

單位所在地：_____省_____市_____區

單位聯系人：_________

單位聯系電話：_________

畢業生本人聯系方式（手機）：_________

單位公章

第五篇：重慶村社區證明事項保留清單

重慶市村（社區）證明事項保留清單

（共10項）

要求序事項名稱 號

單位 證明提供

證明用途

依據

備注

家庭經濟狀況證1

明 司法行政部門 申請法律援助、認定法律援助資格

《重慶市法律援助條例》第二十六條

村（居）民委員會提供證明

在辦理國內公民收養登記中證明收養人有無子女、撫養國內公民辦理收2

養證明

女情況等 民政部門 教育被收養人能力情況，送養人有特殊困難無力撫養子

1．《中國公民收養子女登記辦法》第五條

村（居）民委員會

2．《民政部關于規范生父母有特殊困難無力撫養的子

提供證明

女和社會散居孤兒收養工作的意見》第四條

村（居）民委員會城鄉低保申請人3

信息證明 民政部門 調查核實申請人員信息、經濟情況等，辦理城鄉低保證

2．《重慶市城鄉居民最低生活保障條例》第五條

查核實

1．《社會救助暫行辦法》第十一條

社區專干協助調特困人員救助供調查核實申請人員信息、經濟情況等，辦理特困人員救4 養申請人信息證明 民政部門

助供養資格證

《農村五保供養工作條例》第七條

村（居）民委員會社區專干協助調查核實

對未成立業委會的居民小區住宅改為經營性用房，依法住所（經營場所）5

證明 部門

所用于從事經營活動提供證明，辦理工商登記 工商行政管理登記住所（經營場所備案）；對無法提供產權證明的場

《重慶市物業管理條例》第六十條

提供證明 村（居）民委員會

1．《中華人民共和國農村土地承包經營權證管理辦法》農村土地承包經用于農村土地承包經營權證變更；辦理農村土地承包經6 營權證辦理變更事項證明

辦法》第五十條 農業部門

營權證

2．《重慶市實施〈中華人民共和國農村土地承包法〉

簽署意見

第七條、第十四條

農村土地發包人

1．《流動人口計劃生育工作條例》第八條

村（居）民委員會證明已婚夫妻生育情況；城鎮職工計劃生育年老獎勵；衛生計生行政7 婚育情況證明

部門

辦理再生育登記時核實生育情況并簽署意見

三條

3．《重慶市人口與計劃生育條例》第二十條、第二十

委員會提供證明 農村計劃生育家庭獎勵扶助；計劃生育家庭特別扶助；

第八條

意見；村（居）民

2．《全國計劃生育家庭特別扶助制度信息管理規范》

調查核實并簽署城鄉規劃主管鄉村建設規劃許部門、鄉（鎮）8 可村民委員會書政府、街道辦事面意見

處 體經濟組織用地范圍申請住宅建設

七條 證明申請人為本集體經濟組織成員、同意申請人在本集

2．《重慶市農村村民住宅規劃建設管理暫行辦法》第簽署意見

1．《重慶市城鄉規劃條例》第五十八條、五十九條

村（居）民委員會

1．《就業服務與就業管理規定》第四十一條、第六十

村（社區）公共就就業創業登記申9

請人信息證明 人力社保部門 記載就業和失業狀況，申請就業援助，辦理就業創業證

2．《人力資源社會保障部關于進一步完善就業失業登

核實或提供證明

記管理辦法的通知》第四條 二條、第六十三條

業服務機構調查

村（居）民委員會

1．《征兵工作條例》第二十一條 政治考核證明 征兵辦公室 對體格檢查合格的應征公民進行政治審查

2．《征兵政治考核工作規定》第二十條

署意見 調查走訪人員簽