第一篇：體外診斷試劑生產(chǎn)用凈化車(chē)間環(huán)境與控制要求

體外診斷試劑生產(chǎn)用凈化車(chē)間環(huán)境與控制要求

第一條 對(duì)生產(chǎn)環(huán)境有凈化要求的產(chǎn)品除應(yīng)當(dāng)滿(mǎn)足《體外診斷試劑生產(chǎn)實(shí)施細(xì)則》的通用 要求外，其生產(chǎn)環(huán)境還應(yīng)當(dāng)滿(mǎn)足本附錄的要求。不同潔凈級(jí)別生產(chǎn)區(qū)域的控制標(biāo)準(zhǔn)參見(jiàn)下表：

表 不同潔凈級(jí)別生產(chǎn)區(qū)域的控制標(biāo)準(zhǔn)

潔凈度級(jí)別 塵粒最大允許數(shù)/立方米 微生物最大允許數(shù) ≥0.5μm ≥5μm 沉降菌數(shù)/皿 100級(jí)

3,500 0 1 10,000級(jí) 350,000 2,000 3 100,000級(jí) 3,500,000 20,000 10 第二條 企業(yè)應(yīng)當(dāng)明確工藝所需的空氣凈化級(jí)別，進(jìn)入潔凈室(區(qū))的空氣必須凈化。

陰性、陽(yáng)性血清、質(zhì)粒或血液制品的處理操作應(yīng)當(dāng)在至少10，000級(jí)環(huán)境下進(jìn)行，與相鄰區(qū)域保持相對(duì)負(fù)壓，并符合防護(hù)規(guī)定。

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)試劑、免疫熒光試劑、免疫發(fā)光試劑、聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）試劑、金標(biāo)

試劑、干化學(xué)法試劑、細(xì)胞培養(yǎng)基、校準(zhǔn)品與質(zhì)控品、酶類(lèi)、抗原、抗體和其他活性類(lèi)組分的配制及分裝等產(chǎn)品的配液、包被、分裝、點(diǎn)膜、干燥、切割、貼膜、以及內(nèi)包裝等工藝環(huán)節(jié)，至少應(yīng)在100，000級(jí)凈化環(huán)境中進(jìn)行操作。無(wú)菌物料的分裝必須在局部百級(jí)。

普通化學(xué)類(lèi)診斷試劑的生產(chǎn)應(yīng)在清潔環(huán)境（符合本細(xì)則第二十條規(guī)定）中進(jìn)行。第三條 廠房應(yīng)當(dāng)具有防止昆蟲(chóng)和其他動(dòng)物進(jìn)入的設(shè)施。

第四條 企業(yè)應(yīng)當(dāng)提供潔凈區(qū)內(nèi)生產(chǎn)工藝流程圖和空氣調(diào)節(jié)、配電照明等平/立面圖。新建、改建、擴(kuò)建的潔凈區(qū)廠房應(yīng)當(dāng)提供有資質(zhì)的設(shè)計(jì)單位設(shè)計(jì)的圖紙。

第五條 在設(shè)計(jì)和建設(shè)廠房時(shí)，應(yīng)當(dāng)考慮使用時(shí)便于進(jìn)行清潔工作。潔凈室（區(qū)）的內(nèi)表

面應(yīng)平整光滑、無(wú)裂縫、接口嚴(yán)密、無(wú)顆粒物脫落，并能耐受清洗和消毒，墻壁與地面的交界處宜成弧形或采取其他措施，以減少灰塵積聚和便于清潔。

第六條 潔凈區(qū)應(yīng)當(dāng)配置空氣消毒裝置，有平面布置圖、編號(hào)和使用記錄。

第七條 潔凈室(區(qū))內(nèi)各種管道、燈具、風(fēng)口以及其他公用設(shè)施，在設(shè)計(jì)和安裝時(shí)應(yīng)考慮 使用中避免出現(xiàn)不易清潔的部位。

第八條 潔凈室(區(qū))應(yīng)當(dāng)根據(jù)生產(chǎn)要求提供足夠的照明。主要工作室的照度宜為300勒克 斯；對(duì)照度有特殊要求的生產(chǎn)部位可設(shè)置局部照明。廠房應(yīng)當(dāng)具有應(yīng)急照明設(shè)施。第九條 潔凈室(區(qū))的窗戶(hù)、天棚及進(jìn)入室內(nèi)的管道、風(fēng)口、燈具與墻壁或天棚的連接部 位均應(yīng)密封。

第十條 更衣室、浴室及廁所的設(shè)置不應(yīng)對(duì)潔凈室(區(qū))產(chǎn)生不良影響。

第十一條 潔凈車(chē)間安全門(mén)向安全疏散方向開(kāi)啟，平時(shí)密封良好，緊急情況發(fā)生時(shí)應(yīng)能保證 暢通。

第十二條 潔凈室(區(qū))內(nèi)應(yīng)使用無(wú)脫落物、易清洗、易消毒的衛(wèi)生工具，應(yīng)當(dāng)指定地點(diǎn)存放，存放地不應(yīng)對(duì)產(chǎn)品造成污染。

第十三條 操作臺(tái)（板）應(yīng)光滑、平整、無(wú)縫隙、不脫落異物，便于清洗、消毒，不使用木 質(zhì)或油漆臺(tái)面。

第十四條 潔凈室(區(qū))的空氣如可循環(huán)使用應(yīng)當(dāng)采取有效措施避免污染和交叉污染。第十五條 空氣潔凈級(jí)別不同的相鄰房間之間的靜壓差應(yīng)大于5帕，潔凈室(區(qū))與室外大氣 的靜壓差應(yīng)大于10帕，應(yīng)配備監(jiān)測(cè)靜壓差的設(shè)備，并定期監(jiān)控。

第十六條 潔凈室(區(qū))的溫度和相對(duì)濕度應(yīng)當(dāng)與試劑產(chǎn)品生產(chǎn)工藝要求相適應(yīng)。第十七條 潔凈室(區(qū))內(nèi)安裝的水池、地漏不得對(duì)物料產(chǎn)生污染。

第十八條 不同空氣潔凈度級(jí)別的潔凈室(區(qū))之間的人員及物料出入，應(yīng)有防止交叉污染的 措施。應(yīng)當(dāng)建立、執(zhí)行物料進(jìn)出潔凈區(qū)的清潔程序，有脫外包裝室、凈化室和雙層傳遞窗（或氣閘室）。第十九條 潔凈室(區(qū))和非潔凈室(區(qū))之間應(yīng)有緩沖設(shè)施，潔凈室(區(qū))人流、物流走向應(yīng)合 理。

第二十條 根據(jù)生產(chǎn)工藝要求，潔凈室(區(qū))內(nèi)設(shè)置的稱(chēng)量室和備料室，空氣潔凈度級(jí)別應(yīng)當(dāng) 與生產(chǎn)要求一致，并有捕塵和防止交叉污染的設(shè)施。

第二十一條 在凈化車(chē)間內(nèi)工作的人員應(yīng)穿著符合要求的工作服。工作服的選材、式樣及

穿戴方式應(yīng)與生產(chǎn)操作和空氣潔凈度級(jí)別要求相適應(yīng)，并不得混用。潔凈工作服的質(zhì)地應(yīng)光滑、不產(chǎn)生靜電、不脫落纖維和顆粒性物質(zhì)。無(wú)菌工作服必須包蓋全部毛發(fā)、胡須及腳部，并能阻留人體脫落物。第二十二條 不同空氣潔凈度級(jí)別使用的工作服應(yīng)當(dāng)分別清洗、整理，必要時(shí)消毒或滅菌。

工作服洗滌、滅菌時(shí)不應(yīng)帶入附加的顆粒物質(zhì)。工作服應(yīng)制定清洗周期。100，00級(jí)以上區(qū)域的潔凈工作服應(yīng)當(dāng)在潔凈區(qū)內(nèi)洗滌、干燥、整理，按要求滅菌。

第二十三條 潔凈室(區(qū))僅限于該區(qū)域生產(chǎn)操作人員和經(jīng)批準(zhǔn)的人員進(jìn)入。

第二十四條 進(jìn)入潔凈室(區(qū))的人員不得化妝和佩帶飾物，不得裸手直接接觸物料，凈室

(區(qū))應(yīng)定期消毒。使用的消毒劑不得對(duì)設(shè)備、物料和成品產(chǎn)生污染。消毒劑品種應(yīng)定期更換，防止產(chǎn)生耐藥菌株。

第二十五條 在凈化車(chē)間內(nèi)工作的生產(chǎn)人員應(yīng)有健康檔案。直接接觸產(chǎn)品的生產(chǎn)人員每年 至少體檢一次。

第二十六條 應(yīng)當(dāng)建立、執(zhí)行人員進(jìn)出潔凈區(qū)的清潔程序和管理制度，人員清潔程序合理。第二十七條 潔凈區(qū)的凈化系統(tǒng)、消毒及照明等裝置應(yīng)按規(guī)定進(jìn)行清潔、維護(hù)和保養(yǎng)并進(jìn) 行記錄。

第二十八條 在凈化車(chē)間內(nèi)工作的生產(chǎn)人員應(yīng)接受凈化車(chē)間衛(wèi)生管理制度、個(gè)人清潔衛(wèi)生 制度、凈化車(chē)間使用管理制度等內(nèi)容的培訓(xùn)，合格后持證上崗。

第二十九條 企業(yè)應(yīng)當(dāng)在驗(yàn)證的基礎(chǔ)上明確規(guī)定潔凈區(qū)環(huán)境監(jiān)測(cè)的項(xiàng)目和頻次，在靜態(tài)檢

測(cè)合格前提下，企業(yè)應(yīng)當(dāng)按照規(guī)定進(jìn)行潔凈室(區(qū))內(nèi)空氣溫濕度、壓差、風(fēng)速、沉降菌和塵粒數(shù)的定期監(jiān)測(cè)，并保存監(jiān)測(cè)記錄。

第三十條 生產(chǎn)激素類(lèi)試劑組分的潔凈室（區(qū)）應(yīng)當(dāng)采用獨(dú)立的專(zhuān)用的空氣凈化系統(tǒng)，且凈 化空氣不得循環(huán)使用。

第三十一條 強(qiáng)毒微生物操作區(qū)、芽胞菌制品操作區(qū)應(yīng)與相鄰區(qū)域保持相對(duì)負(fù)壓，配備獨(dú) 立的空氣凈化系統(tǒng)，排出的空氣不得循環(huán)使用。

第二篇：體外診斷試劑生產(chǎn)及質(zhì)量控制技術(shù)指導(dǎo)原則

附件1：

體外診斷試劑生產(chǎn)及質(zhì)量控制技術(shù)指導(dǎo)原則 ——酶聯(lián)免疫診斷試劑生產(chǎn)及質(zhì)量控制技術(shù)指導(dǎo)原則

（征求意見(jiàn)稿）

酶聯(lián)免疫診斷試劑是指在酶標(biāo)板上包被相關(guān)的抗原（或抗體）后，利用直接或間接的方法與待測(cè)樣品中的相關(guān)抗體（或抗原）反應(yīng)，形成的抗原抗體復(fù)合物再與相應(yīng)的酶標(biāo)記的抗體或抗原進(jìn)一步反應(yīng)，經(jīng)過(guò)酶催化底物發(fā)生顯色反應(yīng)，由形成的顏色的強(qiáng)弱來(lái)判斷樣本中相應(yīng)的抗體或抗原的存在。

為了規(guī)范酶聯(lián)免疫診斷試劑的生產(chǎn)和質(zhì)量控制，制定本技術(shù)指導(dǎo)原則。

本指導(dǎo)原則適用于應(yīng)用酶聯(lián)免疫法的第三類(lèi)診斷試劑（病原微生物）的生產(chǎn)和質(zhì)量控制，其他類(lèi)酶聯(lián)免疫診斷試劑參考本指導(dǎo)原則。國(guó)家藥品監(jiān)督管理部門(mén)將依據(jù)科學(xué)技術(shù)發(fā)展的需要，適時(shí)組織修訂。

一、基本原則

（一）酶聯(lián)免疫診斷試劑生產(chǎn)用的各種原料、輔料應(yīng)當(dāng)制定其相應(yīng)的質(zhì)量指標(biāo)，并應(yīng)符合有關(guān)法規(guī)的要求。

（二）酶聯(lián)免疫診斷試劑的生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)具備相應(yīng)的專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員、儀器設(shè)備以及適宜的生產(chǎn)環(huán)境，獲得《醫(yī)療器械生產(chǎn)許可證》；同時(shí)，生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)按照《體外診斷試劑生產(chǎn)實(shí)施細(xì)則（試行）》的要求建立相應(yīng)的質(zhì)量管理體系，形成文件和記錄，加以實(shí)施并保持有效運(yùn)行；生產(chǎn)企業(yè)還應(yīng)該通過(guò)《體外診斷試劑生產(chǎn)企業(yè)質(zhì)量管理體系考核評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)（試行）》的考核。

（三）酶聯(lián)免疫診斷試劑在研制時(shí)，應(yīng)當(dāng)遵循科學(xué)、規(guī)范的原則，各反應(yīng)條件的選擇和確定應(yīng)符合基本的科學(xué)原理。

（四）酶聯(lián)免疫診斷試劑生產(chǎn)過(guò)程中所用的各種材料及工藝，應(yīng)充分考慮可能涉及的安全性方面的事宜。

（五）生產(chǎn)和質(zhì)量控制的總體目標(biāo)：保證試劑使用安全、質(zhì)量穩(wěn)定、工藝可控、檢測(cè)有效。

二、原材料質(zhì)量控制

（一）主要生物原料

與診斷試劑的質(zhì)量最密切相關(guān)的生物原料主要包括各種生物活性抗原、重組抗原、單克隆杭體、多克隆抗體以及多肽類(lèi)、激素類(lèi)等生物原科。這類(lèi)原料可用于包被酶標(biāo)反應(yīng)板、標(biāo)記相關(guān)酶（辣根過(guò)氧化物酶、堿性磷酸酶等）、中和反應(yīng)用抗原或抗體、制備校準(zhǔn)品（標(biāo)準(zhǔn)品）等。一般應(yīng)按照工藝要求對(duì)這類(lèi)生物原料進(jìn)行質(zhì)量檢驗(yàn)，以保證其達(dá)到規(guī)定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。主要生物原料若為企業(yè)自己生產(chǎn)，其工藝必須相對(duì)穩(wěn)定；若購(gòu)買(mǎi)，其供應(yīng)商要求相對(duì)固定，不能隨意變更供應(yīng)商，如果主要原料（包括工藝）或其供應(yīng)商有變更，必須進(jìn)行原料驗(yàn)證，并進(jìn)行補(bǔ)充申報(bào)。

主要生物原料的常規(guī)檢驗(yàn)項(xiàng)目一般包括：

1、外觀

肉眼觀察，大部分生物原料為澄清透明的液體，不含異物、渾濁或搖不散的沉淀；或者為白色粉末，不含有其他顏色的雜質(zhì)；特殊生物原料應(yīng)具備相應(yīng)外觀標(biāo)準(zhǔn)。

2、純度和分子量

主要經(jīng)SDS-PAGE 電泳后，利用電泳掃描儀進(jìn)行分析，也可用其他適宜的方法，如高效液相法等。根據(jù)所檢測(cè)生物原料的分子量選擇適宜丙烯酸胺凝膠濃度進(jìn)行電泳。一般情況下，每個(gè)電泳道加樣量為5μg，同時(shí)用已知分子量標(biāo)準(zhǔn)作參照，采用合適的電泳電流和電泳時(shí)間；電泳后的凝膠可用考馬斯亮藍(lán)染色或銀染法染色。染色后的凝膠用電泳掃描儀分析原料的純度和分子量。作為診斷試劑用生物原材料，用銀染法染色后，純度一般都要大于90％；用考馬斯亮藍(lán)染色后，純度一般都要大于95％。

3、蛋白濃度

蛋白濃度可通過(guò)Lowry法、280nm 光吸收法、雙縮脲方法等進(jìn)行檢測(cè)；

4、效價(jià)

效價(jià)的測(cè)定一般根據(jù)蛋白含量測(cè)定結(jié)果，通過(guò)倍比稀釋法進(jìn)行。效價(jià)應(yīng)達(dá)到規(guī)定的要求。

5、功能性實(shí)驗(yàn)

功能性實(shí)驗(yàn)是指生物原料用于試劑盒實(shí)際生產(chǎn)中的情況，一般考查使用該原料的試劑的靈敏度、特異性和穩(wěn)定性等，并比較其與上批次原料的相關(guān)性。

（二）生物輔料

生物輔料指的是在生產(chǎn)過(guò)程中作為蛋白保護(hù)劑用途的一類(lèi)生物原料，主要包括小牛血清、山羊血清、牛血清白蛋白和酪蛋白等。這些生物原料均應(yīng)按照《中國(guó)生物制品主要原輔材料質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)（2000年版）》所規(guī)定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求進(jìn)行檢驗(yàn)，達(dá)到相應(yīng)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)后方應(yīng)用于生產(chǎn)。

生物輔料的供應(yīng)商同樣要求相對(duì)固定，不得隨意變更供應(yīng)商。

對(duì)于小牛血清或山羊血清、牛血清白蛋白以及酪蛋白等，還應(yīng)進(jìn)行功能性實(shí)驗(yàn)，即以其為原料配制10％濃度的稀釋液作為樣品，進(jìn)行酶聯(lián)免疫測(cè)定，均不得出現(xiàn)非特異性反應(yīng)。

對(duì)于標(biāo)記用酶，應(yīng)在產(chǎn)品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中明示所使用的標(biāo)記用酶的名稱(chēng)（如辣根過(guò)氧化物酶、堿性磷酸酶等），同時(shí)應(yīng)根據(jù)不同生產(chǎn)廠家的檢定方法和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢驗(yàn)，酶的純度RZ值（OD403nm/OD280nm）應(yīng)大于3.0。

（三）化學(xué)原材料

參照《中國(guó)生物制品主要原輔材料質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)（2000年版）》分析純級(jí)別進(jìn)行檢驗(yàn)。主要的檢測(cè)指標(biāo)包括：溶液外觀、一般鹽類(lèi)檢測(cè)、溶液pH值檢測(cè)、溶解情況檢測(cè)、干燥失重的檢測(cè)、熾灼殘?jiān)取?/p>

主要化學(xué)原材料的供應(yīng)商要求相對(duì)固定，不得隨意發(fā)生變更。化學(xué)原材料在購(gòu)入時(shí)，原材料的生產(chǎn)商必須提供該批次化學(xué)原材料的質(zhì)量質(zhì)量保證材料和質(zhì)量檢驗(yàn)報(bào)告，其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)達(dá)到生產(chǎn)所需的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

（四）其他物料

1、酶標(biāo)板（1）外觀

明亮處用肉眼觀察板條的外觀質(zhì)量。如有欠注、飛邊、骯臟、表面光潔度差，底部有波紋及劃傷等應(yīng)剔除。

（2）吸附能力和精密性

用一定濃度的正常人IgG包被板條，再用一定濃度的抗人IgG酶結(jié)合物吸附，通過(guò)顯色反應(yīng)，雙波長(zhǎng)酶標(biāo)儀（主波長(zhǎng)450nm，參考波長(zhǎng)630nm）讀數(shù)。計(jì)算CV值，批內(nèi)CV≤5％，批間CV≤10％。

2、液體試劑裝量瓶

包括陰陽(yáng)性對(duì)照、樣品稀釋液、洗滌液、酶結(jié)合物或酶稀釋液、底物或底物緩沖液等液體組分，均應(yīng)有相應(yīng)的裝量瓶，并建立相應(yīng)的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，如不同的液體試劑所用的裝量瓶規(guī)格、裝量瓶的顏色、瓶蓋的顏色等。

3、其他材料

包括試劑瓶標(biāo)簽、粘膠紙、鋁箔袋、襯墊、可密封塑料袋、說(shuō)明書(shū)、干燥劑和包裝外盒等，均應(yīng)符合相應(yīng)質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，如數(shù)量、規(guī)格等。

（五）企業(yè)質(zhì)控品 企業(yè)質(zhì)控品包括陰陽(yáng)性參考品的符合率、靈敏度（最低檢出量）、靈敏度、精密性（均一性）等質(zhì)控樣品，對(duì)于定量檢測(cè)試劑，還包括線性質(zhì)控品樣品。如該產(chǎn)品具有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品或參考品，應(yīng)使用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品（參考品）進(jìn)行標(biāo)化；若該診斷試劑沒(méi)有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品（參考品），則企業(yè)參考品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)不能低于國(guó)家藥品監(jiān)督管理部門(mén)已經(jīng)批復(fù)的第一家試劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

企業(yè)質(zhì)控品的基質(zhì)應(yīng)與診斷試劑的待測(cè)樣品的基質(zhì)基本一致，如待測(cè)樣品為血清/血漿，質(zhì)控品基質(zhì)也應(yīng)為血清/血漿。

三、試劑盒各組分的生產(chǎn)

酶聯(lián)免疫診斷試劑盒主要組分的生產(chǎn)包括酶標(biāo)記物的制備及滴配過(guò)程（酶工作液濃度確定）、各種工作溶液的配制、包被酶標(biāo)反應(yīng)板、分裝及包裝等步驟；并通過(guò)產(chǎn)品的半成品檢定和成品檢定兩個(gè)質(zhì)控過(guò)程來(lái)完成。

（一）各種工作液的配制

酶聯(lián)免疫診斷試劑研制生產(chǎn)過(guò)程中所用的工作液一般包括：包被液、封閉液、陰性陽(yáng)性對(duì)照、樣品稀釋液、洗滌液、酶結(jié)合物或酶稀釋液、底物或底物緩沖液、終止液等，對(duì)定量檢測(cè)試劑，還包括標(biāo)準(zhǔn)品（或校準(zhǔn)品）溶液。若陰性陽(yáng)性對(duì)照或其他液體組分涉及生物安全性問(wèn)題，制備時(shí)應(yīng)在相應(yīng)的生物安全實(shí)驗(yàn)室完成。

各種工作液在配制過(guò)程中應(yīng)嚴(yán)格按質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的配方進(jìn)行配制，充分混勻確保液體中的各種成分均勻，同時(shí)進(jìn)行相應(yīng)的質(zhì)量檢驗(yàn)并達(dá)到質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)后，方可使用或者分裝。對(duì)于定量檢測(cè)試劑，其標(biāo)準(zhǔn)品（或校準(zhǔn)品）溶液應(yīng)該在量值上具有溯源性。

應(yīng)對(duì)配制過(guò)程及配制的液體進(jìn)行的質(zhì)量控制，主要包括酶結(jié)合物的功能性實(shí)驗(yàn)及穩(wěn)定性；各種溶液的外觀、pH值及電導(dǎo)率的測(cè)定等；酶作用的底物應(yīng)測(cè)定在無(wú)相應(yīng)酶的情況下自身顯色的情況，并制定合理的限定指標(biāo)；終止液應(yīng)對(duì)其終止酶促反應(yīng)的能力進(jìn)行測(cè)定。

（二）包被酶標(biāo)反應(yīng)板

包被前應(yīng)對(duì)酶標(biāo)反應(yīng)板進(jìn)行質(zhì)量檢驗(yàn)，如尺寸、外觀、包裝、吸附性能、精密性等，并記錄酶標(biāo)反應(yīng)板的批號(hào)、數(shù)目、標(biāo)識(shí)。酶標(biāo)反應(yīng)板經(jīng)檢驗(yàn)合格后方能用于包被。不同批號(hào)的板條不能混用。

選擇經(jīng)檢定合格的包被原料（如抗原、抗體等），經(jīng)一定的方法確定最佳包被濃度和酶結(jié)合物工作濃度，按照診斷試劑的生產(chǎn)規(guī)程，配制包被緩沖液、封閉液，經(jīng)檢驗(yàn)合格后，包被酶標(biāo)反應(yīng)板，經(jīng)干燥后，已包被的酶標(biāo)反應(yīng)板用鋁箔紙封閉（內(nèi)置干燥劑），抽真空后，保存于2?8℃。

應(yīng)對(duì)包被過(guò)程進(jìn)行相應(yīng)的質(zhì)量控制，如包被用原料（抗原或者抗體等生物活性原料）的質(zhì)量檢驗(yàn)、包被液和封閉液的質(zhì)控（如配方、外觀、pH）、包被過(guò)程的監(jiān)控（包括包被和封閉的體積、溫度、濕度、時(shí)間等）、包被均一性檢驗(yàn)、干燥過(guò)程的監(jiān)控等。

（三）分裝和包裝 樣品稀釋液、洗滌液、酶結(jié)合物或酶稀釋液、底物或底物緩沖液等溶液應(yīng)嚴(yán)格按照質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的量進(jìn)行無(wú)菌處理后再分裝，分裝量的誤差應(yīng)小于<5%。

分裝及包裝均應(yīng)按照相應(yīng)的SOP的要求進(jìn)行。包裝前，應(yīng)嚴(yán)格檢查試劑盒的品名、批號(hào)等，核對(duì)各試劑盒各組分的數(shù)量，并在關(guān)盒前進(jìn)行復(fù)核。

四、質(zhì)量控制

（一）半成品質(zhì)量控制

1、半成品抽樣

檢驗(yàn)人員按試劑的批號(hào)，根據(jù)抽樣申請(qǐng)單抽取規(guī)定數(shù)量的半成品各組分，作號(hào)標(biāo)記、待檢。

2、半成品檢驗(yàn)

利用上一批檢定合格的試劑盒的相應(yīng)組分，對(duì)本批生產(chǎn)出的各種試劑盒組分分別進(jìn)行檢驗(yàn)，檢驗(yàn)結(jié)果達(dá)到產(chǎn)品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

半成品檢驗(yàn)，一般使用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品（參考品）或經(jīng)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品（參考品）標(biāo)化后的質(zhì)控品。若某類(lèi)試劑沒(méi)有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品（參考品），則使用企業(yè)參考品，但該企業(yè)參考品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)不能低于國(guó)家藥品監(jiān)督管理部門(mén)已經(jīng)批復(fù)的第一家試劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

檢測(cè)所抽樣的半成品的試劑盒性能，包括陰陽(yáng)性參考品的符合率、靈敏度（最低檢出量）、精密性等，均應(yīng)達(dá)到相應(yīng)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的要求，對(duì)精密性，一般情況下CV不得高于15％（采用競(jìng)爭(zhēng)抑制法的診斷試劑CV不得高于20％）。對(duì)定量檢測(cè)試劑，同時(shí)應(yīng)分析其線性相關(guān)系數(shù)和校準(zhǔn)品檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

企業(yè)應(yīng)該具有對(duì)每一批試劑的半成品進(jìn)行穩(wěn)定性研究。

（二）成品質(zhì)量控制

產(chǎn)品包裝完成后，質(zhì)檢人員根據(jù)試劑的批號(hào)、實(shí)際包裝量、抽樣申請(qǐng)單的要求進(jìn)行抽樣，同時(shí)填寫(xiě)抽樣數(shù)量和抽樣日期，并且由抽樣人簽名。抽樣數(shù)量應(yīng)包括檢定用數(shù)量和留樣數(shù)量。質(zhì)檢人員同時(shí)應(yīng)檢查相關(guān)原始記錄。

每一批酶聯(lián)免疫診斷試劑報(bào)批批量最低要求：達(dá)到1萬(wàn)人份/批。

1、檢驗(yàn)（1）成品檢驗(yàn)

一般使用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品（參考品）對(duì)成品進(jìn)行檢驗(yàn)，并達(dá)到質(zhì)控品的質(zhì)量要求。若該診斷試劑沒(méi)有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品（參考品），則使用企業(yè)參考品，但其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)不能低于國(guó)家藥品監(jiān)督管理部門(mén)已經(jīng)批復(fù)的第一家試劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

（2）穩(wěn)定性試驗(yàn)

在批放行前，每一批酶聯(lián)免疫診斷試劑需具備穩(wěn)定性研究資料。

第三篇：體外診斷試劑生產(chǎn)實(shí)施細(xì)則試題

《體外診斷試劑生產(chǎn)實(shí)施細(xì)則》考試題目

選擇題：

1.本《細(xì)則》為體外診斷試劑生產(chǎn)和質(zhì)量管理的基本要求，適用于體外診斷試劑的哪些過(guò)程：D A.生產(chǎn)、服務(wù)過(guò)程

B.設(shè)計(jì)開(kāi)發(fā)、生產(chǎn)、服務(wù)過(guò)程

D.設(shè)計(jì)開(kāi)發(fā)、生產(chǎn)、銷(xiāo)售和服務(wù)的全過(guò)程

C.生產(chǎn)、銷(xiāo)售、服務(wù)過(guò)程

2.某生產(chǎn)體外診斷試劑的公司以膠體金法生產(chǎn)的一試劑通過(guò)質(zhì)量體系考核后，若運(yùn)用膠體金法再生產(chǎn)一試劑，是否還用進(jìn)行質(zhì)量管理體系考核： B A.用

B.不用 C.視生產(chǎn)的具體試劑而定

D.沒(méi)有相關(guān)規(guī)定

3.本《細(xì)則》管理的體外診斷試劑的范圍是： C A.國(guó)家法定用于血源篩選的體外診斷試劑

B.采用放射性核元素標(biāo)記的體外診斷試劑 C.除去A、B以外，其他體外診斷試劑

D.沒(méi)有相關(guān)的規(guī)定

4.體外診斷試劑的生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)當(dāng)至少建立、實(shí)施、保持多少個(gè)程序文件：

B A.15 B.16 C.17 D.18

5.體外診斷試劑的生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)當(dāng)至少建立、實(shí)施保持多少個(gè)基本規(guī)程和記錄：

D A.20 B.21 C.22 D.23

填空：

1.體外診斷試劑的生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)至少有二名質(zhì)量體系內(nèi)部審核人員。

2.體外診斷試劑的生產(chǎn)企業(yè)的生產(chǎn)負(fù)責(zé)人和質(zhì)量負(fù)責(zé)人不得相互兼任。

3.體外診斷試劑的生產(chǎn)企業(yè)中從事高生物活性、高毒性、強(qiáng)傳染性、強(qiáng)致敏性等有特殊要求產(chǎn)品的生產(chǎn)和質(zhì)量檢驗(yàn)人員應(yīng)具備相關(guān)崗位操作資格或接受相關(guān)專(zhuān)業(yè)技術(shù)培訓(xùn)和防護(hù)知識(shí)培訓(xùn)。

4.生產(chǎn)體外診斷試劑的潔凈車(chē)間有嚴(yán)格的清潔要求，其中人流物流要分開(kāi)。

5.在生產(chǎn)體外診斷試劑的過(guò)程中產(chǎn)生的廢液、廢物等應(yīng)進(jìn)行無(wú)害化處理，應(yīng)當(dāng)符合相關(guān)的環(huán)保要求。

6.生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)當(dāng)建立完整的產(chǎn)品研制控制程序，對(duì)設(shè)計(jì)策劃、設(shè)計(jì)輸入、設(shè)計(jì)輸出、設(shè)計(jì)評(píng)審、設(shè)計(jì)驗(yàn)證、設(shè)計(jì)確認(rèn)、設(shè)計(jì)更改應(yīng)有明確規(guī)定。

7.體外診斷試劑的生產(chǎn)企業(yè)在對(duì)物料的采購(gòu)和驗(yàn)收過(guò)程中，應(yīng)按照物料的質(zhì)量要求制定入庫(kù)驗(yàn)收準(zhǔn)則。

8.體外診斷試劑的生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)對(duì)每批產(chǎn)品中關(guān)鍵物料進(jìn)行物料平衡核查。如有顯著差異，必須查明原因，在得出合理解釋?zhuān)_認(rèn)無(wú)潛在質(zhì)量事故后，方可按正常產(chǎn)品處理。

9.體外診斷試劑的生產(chǎn)企業(yè)在生產(chǎn)過(guò)程應(yīng)當(dāng)具有可追溯性，應(yīng)對(duì)物料及產(chǎn)品的追溯程度、追溯范圍、追溯途徑等進(jìn)行規(guī)定；應(yīng)建立批號(hào)管理制度，對(duì)主要物料、中間品和成品進(jìn)行批號(hào)管理，并 保存和提供可追溯的記錄。同一試劑盒內(nèi)各組分批號(hào)不同時(shí)應(yīng)盡量將生產(chǎn)日期接近的組分進(jìn)行組合，應(yīng)當(dāng)在每個(gè)組分的容器上均標(biāo)明各自的批號(hào)和有效期。整個(gè)試劑盒的有效期應(yīng)以效期最短組分的效期為準(zhǔn)。

10.體外診斷試劑的生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)當(dāng)建立留樣復(fù)驗(yàn)制度，規(guī)定留樣比例、留樣檢驗(yàn)項(xiàng)目、檢驗(yàn)周期和判斷準(zhǔn)則。留樣品應(yīng)在適宜條件下儲(chǔ)存，以保證復(fù)驗(yàn)要求。應(yīng)當(dāng)建立留樣品臺(tái)帳，及時(shí)記錄留樣檢驗(yàn)信息，留樣檢驗(yàn)報(bào)告應(yīng)當(dāng)注明留樣品批號(hào)、效期、檢驗(yàn)日期、檢驗(yàn)人、檢驗(yàn)結(jié)果等信息。留樣期滿(mǎn)后應(yīng)對(duì)留樣檢驗(yàn)報(bào)告進(jìn)行匯總、分析并歸檔。

11.體外診斷試劑的生產(chǎn)企業(yè)對(duì)不具備檢測(cè)能力的外購(gòu)物料，應(yīng)制定驗(yàn)收規(guī)程。可以委托檢驗(yàn)或試樣方式進(jìn)行驗(yàn)證。如委托檢驗(yàn)，受托方應(yīng)當(dāng)具備相應(yīng)的資質(zhì)條件，企業(yè)應(yīng)有委托檢驗(yàn)協(xié)議，并保存檢驗(yàn)報(bào)告和驗(yàn)收記錄。如試樣，企業(yè)應(yīng)有試樣驗(yàn)證的驗(yàn)收規(guī)程和記錄，并保存試樣批號(hào)、試樣生產(chǎn)記錄、檢測(cè)報(bào)告、操作人員、批準(zhǔn)人員簽字等相關(guān)記錄。

12.企業(yè)應(yīng)當(dāng)定期實(shí)施內(nèi)部質(zhì)量審核和管理評(píng)審，按照本細(xì)則要求對(duì)企業(yè)內(nèi)部質(zhì)量管理體系的運(yùn)行狀況進(jìn)行審核并出具審核報(bào)告。企業(yè)按照糾正和預(yù)防措施控制程序?qū)嵭凶圆椤⒆约m，保存審核報(bào)告和糾正、預(yù)防措施記錄。思考題：

1.公司在采購(gòu)和生產(chǎn)的很多環(huán)節(jié)都要求做全面、詳細(xì)的記錄，達(dá)到可追溯性。談?wù)勀銓?duì)這方面的理解 公司在采購(gòu)和生產(chǎn)的很多環(huán)節(jié)都要求做全面、詳細(xì)的記錄以達(dá)到可追溯性，例如在采購(gòu)原材料方面、在批生產(chǎn)批包裝方面、半成品成品的批號(hào)管理方面、產(chǎn)品的檢驗(yàn)記錄方面等。公司之所以做這些方面的規(guī)定，是出于對(duì)顧客負(fù)責(zé)的方面和對(duì)自身負(fù)責(zé)的方面考慮的。首先，從采購(gòu)原材料開(kāi)始，到半成品、成品的批號(hào)管理，再到產(chǎn)品的檢驗(yàn)記錄方面，這樣的話，如果發(fā)生了某批產(chǎn)品發(fā)生問(wèn)題，我們就可以不斷地溯源出導(dǎo)致產(chǎn)品發(fā)生問(wèn)題的地方，從而找出問(wèn)題、改正問(wèn)題，從而保障了產(chǎn)品的質(zhì)量，避免了公司的損失，保證了公司產(chǎn)品的不斷暢銷(xiāo)，這是出于對(duì)自身負(fù)責(zé)方面的考慮。其次，公司生產(chǎn)了產(chǎn)品，目的是幫助醫(yī)院檢測(cè)疾病，從而幫助患者恢復(fù)健康，如果我們的產(chǎn)品經(jīng)常出現(xiàn)不合格品，導(dǎo)致醫(yī)院的誤診，這就很可能會(huì)對(duì)患者造成很大傷害，甚至喪命；如果我們不斷完善溯源性制度，那么就能督促公司生產(chǎn)更合格的產(chǎn)品，從而能夠更好的幫助醫(yī)院檢測(cè)疾病；這是出于對(duì)顧客負(fù)責(zé)的方面考慮。

2.假如公司現(xiàn)在在生產(chǎn)某種體外診斷試劑，其中有一批產(chǎn)品被客戶(hù)反饋為不合格。公司領(lǐng)導(dǎo)要你去查找這批產(chǎn)品不合格的原因，并要求寫(xiě)一份檢測(cè)報(bào)告。你會(huì)怎么去調(diào)查，并且如何去寫(xiě)檢測(cè)報(bào)告。

假如公司生產(chǎn)的某種體外診斷試劑，其中有一批產(chǎn)品出現(xiàn)不合格。那么，我會(huì)根據(jù)公司產(chǎn)品的銷(xiāo)售記錄，查看這批產(chǎn)品的批號(hào)信息，它賣(mài)到了什么地方，以及同批號(hào)的其他產(chǎn)品是否也出現(xiàn)了相同情況。如果其他產(chǎn)品沒(méi)有出現(xiàn)異常，那么就按照銷(xiāo)售記錄、批號(hào)記錄、成品質(zhì)量監(jiān)測(cè)記錄、質(zhì)量監(jiān)控記錄、生產(chǎn)設(shè)備檢測(cè)記錄、原料購(gòu)買(mǎi)記錄、原料監(jiān)測(cè)記錄的順序，一步步查找出現(xiàn)問(wèn)題的地方。如果其他產(chǎn)品也出現(xiàn)了類(lèi)似的情況，那么除了要查以上情況之外，還要查看產(chǎn)品生產(chǎn)的技術(shù)文件以及第三方驗(yàn)證的文件等。

第四篇：體外診斷試劑生產(chǎn)及質(zhì)量控制技術(shù)指導(dǎo)原則--生物芯片

附件6: 體外診斷試劑生產(chǎn)及質(zhì)量控制技術(shù)指導(dǎo)原則 ——生物芯片類(lèi)試劑生產(chǎn)及質(zhì)量控制技術(shù)指導(dǎo)原則

前 言

本指導(dǎo)原則所定義的生物芯片診斷試劑是指將多個(gè)生物探針(包括DNA片段,寡核苷酸,抗原,抗體,組織,細(xì)胞等)按預(yù)先設(shè)計(jì)的排列方式固定在特制的基質(zhì)(包括玻璃片,尼龍膜,硝酸纖維素膜等)上,用特定的方法提取生物靶分子并進(jìn)行標(biāo)記,然后與固定在基質(zhì)上的生物探針特異性的結(jié)合,再用相應(yīng)的檢測(cè)設(shè)備(如激光掃描儀,CCD檢測(cè)儀等)和分析方法(包括軟件)進(jìn)行檢測(cè),記錄,分析,實(shí)現(xiàn)對(duì)生物靶分子的定性或定量檢測(cè)的試劑.根據(jù)芯片制作的主要原料和方法,生物芯片可分為核酸芯片,蛋白芯片,細(xì)胞芯片,組織芯片,芯片實(shí)驗(yàn)室等.本指導(dǎo)原則是針對(duì)核酸和蛋白為檢測(cè)靶分子生物芯片的生產(chǎn)及質(zhì)量控制技術(shù)指導(dǎo)原則,其它類(lèi)型靶分子檢測(cè)的芯片診斷試劑可參考本指導(dǎo)原則.由于生物芯片技術(shù)還在不斷發(fā)展,國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理部門(mén)可依據(jù)科學(xué)技術(shù)發(fā)展的需要,適時(shí)組織對(duì)本指導(dǎo)原則進(jìn)行修訂.一,基本原則

(一)生物芯片診斷試劑生產(chǎn)用的物料包括:原料,輔料和包裝材料.各種物料應(yīng)當(dāng)制定相應(yīng)的質(zhì)量指標(biāo),并應(yīng)符合有關(guān)法規(guī)的要求.(二)生物芯片診斷試劑的生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)具備相應(yīng)的專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員,相適應(yīng)的儀器設(shè)備和生產(chǎn)環(huán)境,獲得《醫(yī)療器械生產(chǎn)許可證》;應(yīng)當(dāng)按照《體外診斷試劑生產(chǎn)實(shí)施細(xì)則(試行)》的要求建立相應(yīng)的質(zhì)量管理體系,形成文件和記錄,加以實(shí)施并保持有效運(yùn)行;應(yīng)當(dāng)通過(guò)《體外診斷試劑生產(chǎn)企業(yè)質(zhì)量管理體系考核評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)(試行)》的考核.(三)生物芯片診斷試劑的研制應(yīng)當(dāng)按照科學(xué),規(guī)范的原則組織研發(fā),各反應(yīng)條件的選擇和確定應(yīng)符合基本的科學(xué)原理.(四)生物芯片診斷試劑生產(chǎn)過(guò)程中所用的物料及工藝,應(yīng)充分考慮可能涉及的安全性方面的事宜.二,物料質(zhì)量控制(一)核酸檢測(cè)芯片

核酸芯片檢測(cè)時(shí),從生物樣本中提取的核酸可用熒光標(biāo)記,金標(biāo)記和酶標(biāo)記.檢測(cè)方法包括光譜學(xué)方法和化學(xué)顯色.下面為熒光標(biāo)記芯片技術(shù)指導(dǎo)原則,采用金標(biāo)記和酶聯(lián)顯色等的生物芯片診斷試劑可參照核酸芯片和蛋白芯片相關(guān)部分.1,主要生物原料

核酸檢測(cè)芯片的主要生物原料包括模板DNA,dNTPs,引物,探針,標(biāo)記物等.應(yīng)按照工藝要求對(duì)這類(lèi)生物原料進(jìn)行質(zhì)量檢驗(yàn),以保證其達(dá)到規(guī)定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn).主要生物原料的供應(yīng)商要求相對(duì)固定,不得隨意變更供應(yīng)商.(1)模板DNA 重組DNA:經(jīng)測(cè)序驗(yàn)證,關(guān)鍵位置沒(méi)有錯(cuò)誤.1×TE溶解,濃度為1μg/μl以上,-20℃保存.(2)dNTPs(dATP/dUTP/dGTP/dCTP/dTTP)HPLC純,PCR級(jí),無(wú)DNase,RNase污染.-20℃以下保存.外購(gòu)者,由生產(chǎn)廠家提供質(zhì)量保證證明,達(dá)到生產(chǎn)要求.(3)引物

序列確證;進(jìn)行PCR擴(kuò)增后,克隆測(cè)序鑒定驗(yàn)證,建立引物標(biāo)準(zhǔn)品.生產(chǎn)中的引物原材料為凍干粉,PAGE純或HPLC純,外購(gòu)者,供應(yīng)商應(yīng)提供該產(chǎn)品的質(zhì)檢證明,如PAGE電泳結(jié)果或HPLC分析圖譜;自己合成的引物,需有PAGE電泳結(jié)果或HPLC分析圖譜.用標(biāo)準(zhǔn)DNA模板擴(kuò)增,電泳檢測(cè),譜帶單一,大小正確,與對(duì)照引物比較,產(chǎn)物量一致.符合視為合格引物.-20℃以下保存.(4)探針(用于陣列制備)重組DNA, 凍干粉(或1×TE溶解液):每種90μg以上,酶切鑒定分析圖譜.PCR產(chǎn)物,凍干粉(或1×TE溶解液):每種90μg以上,PCR電泳鑒定圖譜.合成寡核苷酸:PAGE純或HPLC純,每種90μg以上,提供該產(chǎn)品的PAGE電泳分析圖譜或HPLC分析圖譜.外購(gòu)者,供應(yīng)商應(yīng)提供質(zhì)量保證證明,達(dá)到生產(chǎn)要求.探針序列的正確性:應(yīng)用克隆鑒定的標(biāo)準(zhǔn)DNA雜交鑒定或進(jìn)行測(cè)序鑒定.外購(gòu)者,供應(yīng)商應(yīng)提供質(zhì)量保證證明,達(dá)到生產(chǎn)要求.純度和濃度檢測(cè):用電泳方法,電泳圖譜沒(méi)有雜帶,目標(biāo)條帶的強(qiáng)度與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)DNA條帶進(jìn)行參比計(jì)算其強(qiáng)度.純度較高的DNA,可用紫外分光光度計(jì)進(jìn)行定量.檢定合格后入庫(kù).避光,-20℃以下保存.(5)標(biāo)記物

含有激發(fā)光波長(zhǎng)和發(fā)射光波長(zhǎng)介于280680nm的所有熒光分子,HPLC純,供應(yīng)商應(yīng)提供質(zhì)量保證證明.(6)Taq DNA聚合酶

SDS-PAGE 檢測(cè),純度>95%,具DNA聚合酶活性,無(wú)核酸外切酶活性及核酸內(nèi)切酶活性,具熱穩(wěn)定性,94℃1小時(shí)后仍保持50%活性,由供應(yīng)商提供質(zhì)量保證.-20℃保存.(7)UNG(尿嘧啶糖基化酶)具尿嘧啶糖基化酶活性,無(wú)核酸外切酶及核酸內(nèi)切酶活性.1U UNG 37℃處理3分鐘后,103拷貝以下含U模板被降解后,不能產(chǎn)生擴(kuò)增產(chǎn)物,供應(yīng)商提供質(zhì)量保證.-20℃保存.(8)RT 酶

具有逆轉(zhuǎn)錄活性,供應(yīng)商提供質(zhì)量保證.-20℃保存.(9)RT-PCR酶

具逆轉(zhuǎn)錄酶活性和DNA聚合酶活性,無(wú)核酸外切酶活性及核酸內(nèi)切酶活性,具熱穩(wěn)定性,94℃1小時(shí)后仍保持50%活性.-20℃保存.(10)緩沖液

各類(lèi)酶制品需要的的反應(yīng)緩沖液由廠家隨酶制品提供,供應(yīng)商提供質(zhì)量保證.-20℃保存.2,主要生物輔料(1)雜交液

購(gòu)買(mǎi)成品者,供應(yīng)商提供質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),并按要求保存.自制雜交液,按半成品檢定標(biāo)準(zhǔn)要求進(jìn)行檢定.(2)酶類(lèi)

蛋白酶,核酸酶等,供應(yīng)商提供質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),并按要求保存.(3)核酸提取試劑

供應(yīng)商提供質(zhì)量保證,并按要求保存.如果是自制提取液,按半成品檢定要求.(4)魚(yú)精DNA 供應(yīng)商提供質(zhì)量保證,并按要求保存.(5)封閉用蛋白

包括牛血清白蛋白,奶粉等,提供質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),并按要求保存.3,主要化學(xué)原輔料 參照《中國(guó)生物制品主要原輔材料質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)(2000年版)》分析純級(jí)別進(jìn)行檢驗(yàn).主要的檢測(cè)指標(biāo)包括:溶液外觀,一般鹽類(lèi)檢測(cè),溶液pH值檢測(cè),溶解情況檢測(cè),干燥失重的檢測(cè),熾灼殘?jiān)?主要化學(xué)原材料的供應(yīng)商要求相對(duì)固定,不得隨意發(fā)生變更.化學(xué)原材料在購(gòu)入時(shí),原材料的生產(chǎn)商必須提供該批次化學(xué)原材料的質(zhì)量質(zhì)量保證材料和質(zhì)量檢驗(yàn)報(bào)告,其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)達(dá)到生產(chǎn)所需的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn).(1)無(wú)機(jī)類(lèi)

主要包括氯化鈉,氫氧化鈉,純化水等.(2)有機(jī)類(lèi)

主要包括有丙酮,乙醇,枸櫞酸,吐溫20,乙二胺四乙酸二鈉,氨基吡啉等.(3)特殊化學(xué)原料

聚乙二醇,多聚賴(lài)氨酸,丙烯酰胺,甲叉雙丙烯酰胺,N,N,N',N'-四甲基二乙胺(TEMED),溴化乙錠(EB),染色劑等.4,其他物料(1)載玻片

外觀:明亮處用肉眼觀察無(wú)缺刻,無(wú)劃傷等.規(guī)格按設(shè)計(jì)要求.激光掃描儀掃描(波長(zhǎng)為芯片檢測(cè)波長(zhǎng)):包被層基本均勻.(2)試管,吸頭,試劑瓶等

一次性使用,由生產(chǎn)廠家提供質(zhì)量保證,達(dá)到設(shè)計(jì)要求.(3)其他:說(shuō)明書(shū),包裝外盒等

參照國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局頒布的《體外診斷試劑說(shuō)明書(shū)編寫(xiě)指導(dǎo)原則》和《醫(yī)療器械說(shuō)明書(shū),標(biāo)簽和包裝標(biāo)識(shí)管理規(guī)定》執(zhí)行.(二)蛋白檢測(cè)芯片 1,主要生物原料

與生產(chǎn)的產(chǎn)品質(zhì)量最密切相關(guān)的生物原料包括各種活性抗原,重組抗原,單克隆杭體,多克隆抗體以及多肽類(lèi)生物原科.這類(lèi)原料可用于點(diǎn)膜,標(biāo)記相關(guān)酶,納米金,光學(xué)基團(tuán)及中和反應(yīng)用抗原或抗體等.使用前應(yīng)按工藝要求對(duì)這類(lèi)生物原料進(jìn)行質(zhì)量檢驗(yàn),以保證其達(dá)到規(guī)定的質(zhì)量要求.主要生物原料若為企業(yè)自己生產(chǎn),其工藝必須相對(duì)穩(wěn)定;若購(gòu)買(mǎi),其供應(yīng)商要求相對(duì)固定,不能隨意變更供應(yīng)商,如果主要原料(包括工藝)或其供應(yīng)商有變更,必須進(jìn)行原料驗(yàn)證,并進(jìn)行補(bǔ)充申報(bào).主要生物原料的常規(guī)檢驗(yàn)項(xiàng)目一般包括:(1)外觀

肉眼觀察,大部分生物原料為澄清透明的液體,不含異物,渾濁或搖不散的沉淀;或者為白色粉末,不含有其他顏色的雜質(zhì);特殊生物原料應(yīng)具備相應(yīng)外觀標(biāo)準(zhǔn).(2)純度和分子量

主要通過(guò)SDS-PAGE電泳和電泳結(jié)果掃描儀進(jìn)行檢測(cè),也可用其他適宜的方法,如高效液相法等.作為免疫診斷試劑用生物原材料,用銀染法染色后,純度一般都要大于90%;用考瑪氏亮藍(lán)染色后;純度一般都要大于95%.SDS凝膠電泳法測(cè)定分子量.(3)蛋白濃度

蛋白濃度可通過(guò)Lowry法,280nm光吸收法,雙縮脲方法等進(jìn)行檢測(cè);(4)效價(jià)

效價(jià)的測(cè)定一般根據(jù)蛋白含量測(cè)定結(jié)果通過(guò)倍比稀釋法進(jìn)行.效價(jià)應(yīng)達(dá)到設(shè)計(jì)規(guī)定的要求.(5)功能性實(shí)驗(yàn) 功能性實(shí)驗(yàn)是指生物原料用于試劑盒試劑實(shí)際生產(chǎn)中的情況,一般考查該原料使用后的試劑靈敏度,特異性和穩(wěn)定性.2,主要生物輔料

生物輔料指的是在生產(chǎn)過(guò)程中作為蛋白保護(hù)劑用途的一類(lèi)生物原料,主要包括小牛血清,山羊血清,牛血清白蛋白和酪蛋白等.這些生物原料均應(yīng)按照《中國(guó)生物制品主要原輔材料質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)(2000年版)》所規(guī)定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求進(jìn)行檢驗(yàn),達(dá)到相應(yīng)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)后方應(yīng)用于生產(chǎn).生物輔料的供應(yīng)商同樣要求相對(duì)固定,不得隨意變更供應(yīng)商.對(duì)于小牛血清或山羊血清,牛血清白蛋白以及酪蛋白等,還應(yīng)進(jìn)行功能性實(shí)驗(yàn),即以其為原料配制10%濃度的稀釋液作為樣品,進(jìn)行酶聯(lián)免疫測(cè)定,均不得出現(xiàn)非特異性反應(yīng).對(duì)于標(biāo)記用酶,應(yīng)在產(chǎn)品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中明示所使用的標(biāo)記用酶的名稱(chēng)(如辣根過(guò)氧化物酶,堿性磷酸酶等),同時(shí)應(yīng)根據(jù)不同生產(chǎn)廠家的檢定方法和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢驗(yàn),酶的純度RZ值(OD403nm/OD280nm)應(yīng)大于3.0.3,化學(xué)原輔料

參照《中國(guó)生物制品主要原輔材料質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)(2000年版)》分析純級(jí)別進(jìn)行檢驗(yàn).主要的檢測(cè)指標(biāo)包括:溶液外觀,一般鹽類(lèi)檢測(cè),溶液pH值檢測(cè),溶解情況檢測(cè),干燥失重的檢測(cè),熾灼殘?jiān)?主要化學(xué)原材料的供應(yīng)商要求相對(duì)固定,不得隨意發(fā)生變更.化學(xué)原材料在購(gòu)入時(shí),原材料的生產(chǎn)商必須提供該批次化學(xué)原材料的質(zhì)量質(zhì)量保證材料和質(zhì)量檢驗(yàn)報(bào)告,其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)達(dá)到生產(chǎn)所需的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn).(1)無(wú)機(jī)類(lèi)

主要包括氯化鈉,氫氧化鈉,純化水等.(2)有機(jī)類(lèi)

主要包括有丙酮,乙醇,枸櫞酸,吐溫20,乙二胺四乙酸二鈉,氨基吡啉等.(3)特殊化學(xué)原料

DAB(聯(lián)苯二胺),染色劑等.4,其他物料(1)基質(zhì)

以硝酸纖維素膜為例:孔徑符合設(shè)計(jì)要求(0.45μm,0.22μm等),均一性(厚度及毛細(xì)遷移速度±20%),尺寸(與標(biāo)識(shí)吻合)(2)瓶子和干燥劑

由生產(chǎn)廠家提供質(zhì)量保證,達(dá)到規(guī)定要求.(3)其他:說(shuō)明書(shū),包裝外盒等

應(yīng)參照國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局頒布的《體外診斷試劑說(shuō)明書(shū)編寫(xiě)指導(dǎo)原則》和《醫(yī)療器械說(shuō)明書(shū),標(biāo)簽和包裝標(biāo)識(shí)管理規(guī)定》執(zhí)行.三,試劑盒各組分的生產(chǎn)

生物芯片主要包括DNA芯片,蛋白芯片,組織芯片,細(xì)胞芯片以及芯片實(shí)驗(yàn)室等.生物芯片診斷試劑產(chǎn)品基本可分成二個(gè)部分,一部分是芯片,另一部分檢測(cè)用工作液.如果有配套的檢測(cè)儀器,還需對(duì)儀器及處理軟件的應(yīng)用加以說(shuō)明.(一)芯片的生產(chǎn)

芯片生產(chǎn)的基本過(guò)程包括探針的獲取方法,純化,點(diǎn)樣,固定.1,探針獲取

不同的芯片,主要是探針不同,生物芯片的探針主要包括以下幾類(lèi),其它探針可參考制定相應(yīng)的技術(shù)及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn).(1)DNA探針的獲取

探針的形式有PCR產(chǎn)物,克隆DNA,人工合成DNA片段等;要求有生產(chǎn)程序和質(zhì)量指標(biāo)及檢測(cè)方法,要進(jìn)行純化,有固定的純化程序.(2)抗原的生產(chǎn)

抗原的獲得方法包括細(xì)胞培養(yǎng),從生物材料中分離提取,基因工程表達(dá)以及合成肽等.基因工程表達(dá)產(chǎn)物又分為純抗原蛋白,融合蛋白等.(3)抗體

抗體分單克隆抗體和多克隆抗體.抗體制備包括細(xì)胞培養(yǎng),動(dòng)物腹水,基因工程表達(dá)等方式.(4)細(xì)胞和組織

包括細(xì)胞或組織類(lèi)型,固定方法.組織材料還包括固定,包埋,切片等.(5)芯片實(shí)驗(yàn)室,包括各種管道泵的制作等.2,陣列的排列設(shè)計(jì)

陣列的排列包括依次排列,隨機(jī)排列,對(duì)角線排列等,設(shè)計(jì)時(shí)需考慮重復(fù)次數(shù)等.3,點(diǎn)陣的制作

使用儀器的要確定型號(hào),程序;手工制作的也要有標(biāo)準(zhǔn)操作程序.4,固定:包括固定方式,固定的條件等.應(yīng)對(duì)芯片生產(chǎn)的過(guò)程進(jìn)行相應(yīng)的質(zhì)量控制,如點(diǎn)樣和固定過(guò)程的監(jiān)控,點(diǎn)樣均一性檢驗(yàn)等.(二)工作液配制

1,芯片生產(chǎn)所需試劑,包括細(xì)胞培養(yǎng)基,探針制備試劑,陣列制作和固定試劑等.2,樣品處理試劑,芯片檢測(cè)靶分子分為核酸和蛋白質(zhì).檢測(cè)核酸的樣品處理試劑包括臨床取樣,DNA提取或RNA提取試劑,逆轉(zhuǎn)錄試劑,PCR擴(kuò)增試劑,核酸標(biāo)記試劑等;檢測(cè)蛋白的處理試劑包括取樣試劑,蛋白稀釋液以及特殊試劑等.3,反應(yīng)液:檢測(cè)核酸時(shí)的反應(yīng)液包括預(yù)雜交液,雜交液,洗脫液等;檢測(cè)蛋白時(shí),包括封閉液,抗原/抗體反應(yīng)液,洗脫液,顯色液,顯色終止液等.(三)數(shù)據(jù)判讀

1,判斷標(biāo)準(zhǔn)及依據(jù),包括Cut off值的確定依據(jù).2,數(shù)據(jù)判讀方式:人工還是軟件判讀.3,如果是軟件判讀,應(yīng)提供軟件判斷的科學(xué)依據(jù)(包括生物學(xué)原理,數(shù)據(jù)獲取原理和判斷實(shí)驗(yàn)是否成立的依據(jù))以及實(shí)驗(yàn)測(cè)試的原始報(bào)告(或數(shù)據(jù)),并需要說(shuō)明:(1)軟件的來(lái)源:購(gòu)買(mǎi)或自己編制,是否獲得注冊(cè)等.(2)軟件的用途:包括對(duì)數(shù)據(jù)的分析,存儲(chǔ),解讀,含義等.(3)軟件的使用:基本的使用程序.四,半成品質(zhì)量控制(一)抽樣

檢驗(yàn)人員按批號(hào)抽取檢定需要數(shù)量的半成品,作好標(biāo)記,待檢.(二)質(zhì)控品

可用克隆并測(cè)序鑒定的DNA或經(jīng)特異性鑒定的抗原(或抗體).質(zhì)控品的基質(zhì)應(yīng)盡可能與被測(cè)物基質(zhì)相一致.(三)檢定要求 1,芯片檢定

(1)靈敏度:最低檢測(cè)限達(dá)到規(guī)定要求.(2)特異性:應(yīng)達(dá)到規(guī)定要求.若進(jìn)行全陰,全陽(yáng)和交叉反應(yīng)檢測(cè),全陰性檢測(cè)應(yīng)在沒(méi)有靶分子存在時(shí),所有檢測(cè)位點(diǎn)沒(méi)有檢測(cè)信號(hào);全陽(yáng)性檢測(cè)應(yīng)在加入足夠量的靶分子,所有檢測(cè)位點(diǎn)均有檢測(cè)信號(hào);交叉反應(yīng)檢測(cè)時(shí),用某一位點(diǎn)的靶分子檢測(cè),應(yīng)只有該位點(diǎn)有檢測(cè)信號(hào),其它位點(diǎn)不能有檢測(cè)信號(hào).(3)精密性(均一性):用比最低檢測(cè)限高一個(gè)數(shù)量級(jí)的質(zhì)控品,重復(fù)檢測(cè)10次,判定結(jié)果一致.考慮到芯片的多位點(diǎn)檢測(cè),因此要進(jìn)行全位點(diǎn)和單個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行檢測(cè).半成品檢定可以用克隆DNA和鑒定的抗原和抗體作質(zhì)控品.2,工作液的檢定

(1)物理檢測(cè):外觀顏色正常,沒(méi)有雜質(zhì).(2)質(zhì)量檢定:用被檢定的工作液檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)樣,檢測(cè)結(jié)果達(dá)到預(yù)定要求.五,成品質(zhì)量控制(一)生產(chǎn)批量

申報(bào)生產(chǎn)的批量每批原則上不低于1000人份.(二)抽樣

檢驗(yàn)人員按批號(hào)抽取檢定需要數(shù)量的半成品,做好標(biāo)記,待檢.(三)標(biāo)準(zhǔn)品(參考品)應(yīng)用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品或參考品進(jìn)行檢定,若無(wú)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品(參考品),可以使用企業(yè)參考品,但其標(biāo)準(zhǔn)不得低于第一家已經(jīng)獲得批準(zhǔn)的該類(lèi)試劑.(四)檢定要求

1,靈敏度:應(yīng)達(dá)到規(guī)定要求.2,特異性:應(yīng)達(dá)到規(guī)定要求.3,精密性(均一性):對(duì)某一樣本,重復(fù)10次,對(duì)病種的定性檢測(cè)結(jié)果一致.4,穩(wěn)定性(僅對(duì)蛋白芯片)37℃放置至少3天,靈敏度,特異性和精密度仍達(dá)到規(guī)定要求.熱加速破壞試驗(yàn)的時(shí)間長(zhǎng)短,可由生產(chǎn)單位根據(jù)不同產(chǎn)品在37℃貯存與常溫貯存(2℃8℃)中質(zhì)量變化的相關(guān)性來(lái)決定

第五篇：體外診斷試劑人員及庫(kù)房要求

體外診斷試劑人員及庫(kù)房要求

主管檢驗(yàn)師或具有檢驗(yàn)學(xué)相關(guān)專(zhuān)業(yè)大學(xué)以上學(xué)歷并從事檢驗(yàn)相關(guān)工作3年以上工作經(jīng)歷。

驗(yàn)收、售后服務(wù)人員：2人

應(yīng)具有檢驗(yàn)學(xué)中專(zhuān)以上學(xué)歷；

營(yíng)業(yè)場(chǎng)所：其面積應(yīng)與經(jīng)營(yíng)規(guī)模相適應(yīng)，但不得少于100平方米。倉(cāng)庫(kù)：應(yīng)設(shè)置符合診斷試劑儲(chǔ)存要求的倉(cāng)庫(kù)，其面積應(yīng)與經(jīng)營(yíng)規(guī)模相適應(yīng)，但不得少于60平方米。

冷庫(kù)：應(yīng)設(shè)置儲(chǔ)存診斷試劑的冷庫(kù)，其容積應(yīng)與經(jīng)營(yíng)規(guī)模相適應(yīng)，但不得小于20立方米。冷庫(kù)應(yīng)配有自動(dòng)監(jiān)測(cè)、調(diào)控、顯示、記錄溫度狀況和自動(dòng)報(bào)警的設(shè)備，備用發(fā)電機(jī)組或安裝雙路電路，備用制冷機(jī)組。