第一篇：HIV、梅毒檢測工作要點

黔東南州預防艾滋病、梅毒及乙肝母嬰傳播項目

工作方法要點

一，乙肝

乙肝表面抗原陽性母親所生的新生兒，須對新生兒免費注射“乙肝免疫球蛋白”1針（100單位）。并按計免程序注射“乙肝疫苗”。相關工作數據在月報表中反應出來，不需填個案表。

二、梅毒

必須明確一點：不論是哪一級醫院，只要用兩種不同的檢測方法（兩種方法：梅毒螺旋體抗原血清學試驗、非梅毒螺旋體抗原血清學試驗），就可以確診患者是不是梅毒，不必要到上級醫院確診。

1、若孕期“確診”為梅毒的孕婦，按國家方案中的“梅毒治療方案”正規治療兩個療程。其所生的新生兒在出生時檢測新生兒血清中的梅毒抗體（用非梅毒螺旋體抗原血清學試驗檢測）。可能出現以下三種情況：

（1)新生兒檢測陰性：可用國家方案“梅毒治療方案”中的預防性治療方法進行治療。(梅毒治療參看國家方案中的梅毒治療方案）

（2）新生兒檢測陽性：必須對母親及新生兒做滴度試驗，并比較新生兒及母親的滴度：若小兒的滴度小于母親分娩前滴度的4倍的，采用預防治療方法進行治療。若小兒的滴度大于母親分娩前滴度的4倍的，診為先天梅毒，按先天梅毒治療方案治療。（滴度試驗法見附件一）

2、對孕期沒有接受兩個療程正規治療的母所生的新生兒，不論檢測是否是陰性，都要進行預防性治療。

3、沒有進行滴度檢測的，不能診新生兒為先天梅毒，也就不存在進行先天梅毒的治療。目前診斷先天梅毒的唯一方法也就是進行滴度試驗及對比，因此請各縣一定要把這項工作開展起來。

4、因做滴度所消耗的試劑多一些，請各縣在做經費使用方案時，對作滴度試驗的給預提高報銷費用，才有利于工作的開展。

5、對當月的陽性個案須在當月的月報中反應出來，同時填報個案表上報我州保健院。

三、HIV

1、孕期HIV快速檢測陽性的孕婦，須做“確認試驗”（州級以上疾控中心方可做確認試驗）。待確認試驗結果出來后，證實為陽性的孕婦才進行管理（具體用藥“國家方案”中的治療法）。

2、產時用“快速檢測方法”檢測產婦為陽性的，對所生的新生兒要在24小時內服用抗病毒藥，并對其母親其做“確認試驗”（州疾控中心），將會出現以下兩種情況：

（1）母親確認試驗為陰性的，新生兒停止服藥。

（2）母親確認試驗陽性的，新生兒繼續服藥6周。并指導其要進行人工喂養。每三個月對嬰兒進行體檢，并網絡直報個案表及隨訪表。

附件一

非梅毒螺旋體抗原血清學試驗（實驗室滴度檢測）方法 采用倍數稀釋法對血清進行稀釋（新生兒須用靜脈血）a、吸50ul血清+TRUST或RPR試劑液懸液1滴＝1：1液 b、吸50ul血清到試管+50ul生理鹽水＝1：2液 c、取1：2液50ul+50ul生理鹽水＝1：4液 d、取1：4液50ul+50ul生理鹽水＝1：8液 e、取1：8液50ul+50ul生理鹽水＝1：16液 f、取1：16液50ul+50ul生理鹽水＝1：32液 g、取1：32液50ul+50ul生理鹽水＝1：64液.......................以此類稀釋進行

在各比例倍數液中加入TRUST或RPR試劑，則可以知道其滴度結果。請各縣將此法與縣里各醫療單位的化驗人員進行操作培訓，務必會作才行。

黔東南州婦幼保健院 2012.4.12

第二篇：2009HIV抗體檢測工作總結

2009HIV抗體檢測工作總結

一年來，我們一如既往的認真貫徹和落實《中國預防和控制艾滋病中長期規劃（1998-2010）》。HIV抗體檢測工作嚴格遵照《全國艾滋病檢測技術規范》（2004年版）和《江蘇省艾滋病檢測工作管理辦法》認真執行。3月份對臨床醫生進行了醫療安全教育和個人防護培訓，對護理人員進行標本采集和個人防護講座，保證了分析前質量控制，確保了HIV篩查實驗室的檢驗質量，防范了醫療糾紛。應臨床需要，HIV抗體檢測工作從每周1次增加為每周2次，為患者和臨床提供了更及時的服務。

今年，我院共檢測HIV抗體標本1381份，比去年增加了50%。門診免費檢測168人，檢出1例HIV抗體待復查標本，均按程序上報市疾控中心。參加了省臨檢中心傳染病質控，成績合格。著重強調個人防護，全年無職業暴露事件發生。

艾滋病問題是全世界面臨的重大公共衛生問題和社會問題，在下一個工作階斷，我們要繼續做好HIV抗體的質量控制，防止漏檢漏報；加強宣傳教育，提高檢測覆蓋面，防止艾滋的漫延。

泗洪縣人民醫院HIV篩查實驗室

2009-9-25

第三篇：預防HIV、梅毒、乙肝母嬰傳播試卷(含答案)

預防艾滋病母嬰傳播知識試題

科室 姓 名 分 數

一、填空題

1、艾滋病母嬰傳播途徑包括宮內傳播、產時傳播、產后母乳喂養傳播。

2、HIV感染母親所生的嬰兒在生后 12-18個月內，體內含有從母體帶來的抗體，此時嬰兒檢測艾滋病可能是 假陽性，但這并不表示 嬰兒已經感染了艾滋病病毒。

3、預防艾滋病、梅毒、乙肝母嬰傳播信息數據的收集、上報實行月報制，每月數據統計數段為上月21日至當月20日。

三、簡答題

1、簡述預防HIV母嬰傳播孕產期保健的目的與要求。

答：①孕早期及早發現HIV的孕產婦；②加強產前保健、注意監測胎兒宮內發育、及早確定抗病毒治療方案，為HIV感染的孕產婦及所生嬰兒備好孕期、分娩及產后需用的抗病毒藥物。③孕晚期指導HIV感染孕產婦及時服用抗病毒藥物，提供嬰兒喂養的咨詢。④產時按照用藥方案繼續產時用藥；提供安全助產服務；評估、建議人工喂養。⑤安全處理HIV感染產婦的惡露和排泄物；建議正確和堅持使用安全套預防性傳播和避孕；指導人工喂養的母親回奶注意問題及乳房護理。

2、簡述妊娠期梅毒的治療原則及其治療目標的特殊性。

答：治療原則：①診斷明確，未確診不能隨便治療；②早期診斷，及時治療；③劑量足夠，療程規則；④嚴格定期隨訪；⑤傳染源或性伴侶同時接受檢查和治療；⑥治療期間不應有性生活。

治療目標的特殊性：①妊娠早期治療：使胎兒不受感染；②妊娠晚期治療：是受感染的胎兒在分娩前治愈；③禁止使用四環素；④母體治療梅毒可影響胎傳梅毒的進展，而一旦發展至胎兒肝腫大和腹水階段，則母體治療對胎傳梅毒進展影響不大。

3、簡述梅毒感染孕產婦及所生兒童治療方案。

答：推薦方案：①普魯卡因青霉素G，80萬U/日,肌肉注射，連續15日；②芐星青霉素240萬U，兩臀肌注，每周一次，連續3次。

替代方案：①可用頭孢曲松，1克/日，肌內注射或靜脈給藥，連續10天；②青霉素過敏者可用紅霉素治療（禁用四環素、多西環素），紅霉素500mg,每日4次，口服，連服15天。

梅毒感染所生兒童的預防性治療方案：出生后應用芐星青霉素G，5萬單位/公斤體重，分兩臀肌肉注射。

4、簡述乙肝表面抗原陽性孕產婦及所生兒童干預措施。

答、對乙肝表面抗原陽性孕產婦，醫務人員應當詳細了解其肝炎病史及治療情況，密切監測肝臟功能，給予科學的營養支持和指導。對乙肝表面抗原陽性孕產婦所生新生兒在出生后24內注射乙肝免疫球蛋白（100國際單位）。再按照國家免疫規劃要求，完成24小時內及1月齡和6個齡兒童的三次乙肝免疫接種。

預防艾滋病母嬰傳播知識試題

科室 姓 名 分 數

一、填空題

1、艾滋病母嬰傳播途徑包括、、。

2、HIV感染母親所生的嬰兒在生后 內，體內含有從母體帶來的抗體，此時嬰兒檢測艾滋病可能是

，但這并不表示。

3、預防艾滋病、梅毒、乙肝母嬰傳播信息數據的收集、上報實行月報制，每月數據統計數段為。

三、簡答題

1、簡述預防HIV母嬰傳播孕產期保健的目的與要求。

2、簡述妊娠期梅毒的治療原則及其治療目標的特殊性。

3、簡述梅毒感染孕產婦及所生兒童治療方案。

4、簡述乙肝表面抗原陽性孕產婦及所生兒童干預措施

第四篇：預防HIV、梅毒、乙肝母嬰傳播試卷(含答案)

預防艾滋病母嬰傳播知識試題

科室 姓 名 分 數

一、填空題

1、艾滋病母嬰傳播途徑包括宮內傳播、產時傳播、產后母乳喂養傳播。

2、HIV感染母親所生的嬰兒在生后 12-18個月內，體內含有從母體帶來的抗體，此時嬰兒檢測艾滋病可能是 假陽性，但這并不表示 嬰兒已經感染了艾滋病病毒。

3、預防艾滋病、梅毒、乙肝母嬰傳播信息數據的收集、上報實行月報制，每月數據統計數段為上月21日至當月20日。

三、簡答題

1、簡述預防HIV母嬰傳播孕產期保健的目的與要求。

答：①孕早期及早發現HIV的孕產婦；②加強產前保健、注意監測胎兒宮內發育、及早確定抗病毒治療方案，為HIV感染的孕產婦及所生嬰兒備好孕期、分娩及產后需用的抗病毒藥物。③孕晚期指導HIV感染孕產婦及時服用抗病毒藥物，提供嬰兒喂養的咨詢。④產時按照用藥方案繼續產時用藥；提供安全助產服務；評估、建議人工喂養。⑤安全處理HIV感染產婦的惡露和排泄物；建議正確和堅持使用安全套預防性傳播和避孕；指導人工喂養的母親回奶注意問題及乳房護理。

2、簡述妊娠期梅毒的治療原則及其治療目標的特殊性。

答：治療原則：①診斷明確，未確診不能隨便治療；②早期診斷，及時治療；③劑量足夠，療程規則；④嚴格定期隨訪；⑤傳染源或性伴侶同時接受檢查和治療；⑥治療期間不應有性生活。

治療目標的特殊性：①妊娠早期治療：使胎兒不收感染；②妊娠晚期治療：是受感染的胎兒在分娩前治愈；③禁止使用四環素；④母體治療梅毒可影響胎傳梅毒的進展，而一旦發展至胎兒肝腫大和腹水階段，則母體治療對胎傳梅毒進展影響不大。

3、簡述梅毒感染孕產婦及所生兒童治療方案。

答：推薦方案：①普魯卡因青霉素G，80萬U/日,肌肉注射，連續15日；②芐星青霉素240萬U，兩臀肌注，每周一次，連續3次。

替代方案：①可用頭孢曲松，1克/日，肌內注射或靜脈給藥，連續10天；②青霉素過敏者可用紅霉素治療（禁用四環素、多西環素），紅霉素500mg,每日4次，口服，連服15天。

梅毒感染所生兒童的預防性治療方案：出生后應用芐星青霉素G，5萬單位/公斤體重，分兩臀肌肉注射。

4、簡述乙肝表面抗原陽性孕產婦及所生兒童干預措施。

答、對乙肝表面抗原陽性孕產婦，醫務人員應當詳細了解其肝炎病史及治療情況，密切監測肝臟功能，給予科學的營養支持和指導。對乙肝表面抗原孕產度所生新生兒沒在出生后24內注射乙肝免疫球蛋白（100國際單位）。再按照國家免疫規劃要求，完成24小時內及1月齡和6個齡兒童的三次乙肝免疫接種。

預防艾滋病母嬰傳播知識試題

科室 姓 名 分 數

一、填空題

1、艾滋病母嬰傳播途徑包括、、。

2、HIV感染母親所生的嬰兒在生后 內，體內含有從母體帶來的抗體，此時嬰兒檢測艾滋病可能是

，但這并不表示。

3、預防艾滋病、梅毒、乙肝母嬰傳播信息數據的收集、上報實行月報制，每月數據統計數段為。

三、簡答題

1、簡述預防HIV母嬰傳播孕產期保健的目的與要求。

2、簡述妊娠期梅毒的治療原則及其治療目標的特殊性。

3、簡述梅毒感染孕產婦及所生兒童治療方案。

第五篇：HIV不同病程分子生物學檢測

HIV不同病程分子生物學檢測及結果解讀

1310115117 劉航齊

一、HIV核酸檢測

HIV核酸檢測有定性和定量兩類,前者用于HIV感染的輔助診斷,后者常用于監測HIV感染者病程進展和抗病毒治療效果。

1.PCR檢測法(多聚酶鏈反應)PCR就是利用DNA聚合酶復制DNA的特性,把生物體內的 半保留增殖DNA的過程在體外實驗條件下完成。傳統的PCR技術比較簡便、快捷,但是容易導致“污染”,出現假陽性結果.另外,HIV基因多樣性,沒有一套引物可覆蓋所有HIV序列,使檢測敏感性受到限制。從而限制了PCR臨床診斷HIV。

不同病株存在遺傳變異性，進行PCR擴增時應選擇病毒基因組中的高度保守序列區設計引物。當核酸檢測陽性，應重復采集樣品進行復測，復測結果呈核酸陽性反應則判斷為核酸陽性，復測結果為核酸陰性反應則判為不確定結果，需進一步隨訪檢測。HIV核酸檢測陰性，只報告本次試驗結果陰性。2.刷狀DNA檢測法

刷狀DNA檢測法是定量檢測血漿中HIV-1型RNA的一種方法。該技術基于分支DNA信號擴大系 統,是人工合成的帶有側鏈DNA片段,在每條鏈上都可以標記可被激活的標記物。通過發光強度來定量,發光強度與HIV-RNA含量呈比例。

3.核酸序列擴增系統

核酸序列擴增系統又稱自主序列復制系列或再生長序列復制技術,是以RT-PCR為基礎,但它無需將逆轉錄和PCR擴增分作兩部進行，將靶核酸RT-DNA擴增和信號放大擴增。4.基因芯片技術

基因芯片技術是 20 世紀 90 年代末發展起來的新技術,是在厘米見方的固相載體上,將基因以微點陣的形式排列,應用核酸雜交的原理來檢測未知基因,具有操作簡單、自動化程度高、檢測靶分子種類多、成本低、結果客觀性強等特點基因表達、腫瘤診斷、遺傳病診斷、基因分型等諸多領域得到廣泛應用。對于抗 HIV逆轉錄酶和蛋白酶藥物的耐藥性分析、型檢測結果較好,但對非B亞型的耐藥性檢測存在漏檢和錯檢。

二、HIIV抗體的確證 目前我國HIV抗體確證實驗采用的方法是免疫印跡法，也就是westen blotting實驗，簡稱WB。WB實驗結果有3種，陰性，陽性，和不確定。對于不確定結果每3個月隨訪1次，共2次，仍屬可疑，則報告陰性；如隨訪期間HIV抗體出現陽性反應則報告陽性。雖然抗體確證不屬于分子生物學檢驗，但由于它在臨床中經常應用，因此列舉出來。下面是HIV抗體篩查流程。

三、分型

在HIV-1型內，根據env基因和gag基因序列的同源性差異可分為三個組：M組、O組和N組。M組內又分為A~K11個亞型，各亞型的基因離散率是25％~35％、同一亞型內的基因離散率是7％~20％。不同亞型可發生重組形成很多流行重組型。

目前HIV分型的方法主要集中在env、gag和pol區的某一段基因片段的分析。常用的方法有：SBT法、異源雙鏈核酸涌動實驗(HMA)、DNA酶聯免疫技術、基因芯片法、多重PCR法。

1.HMA：在HIV分型檢測中，利用PCR擴增evn或者gag一段核酸序列，同時將各亞型的標準質粒進行擴增，將病毒擴增產物和質粒擴增產物進行混合，經過變性和復性形成異源雙鏈產物，然后進行電泳，根據涌動速度確定亞型。

2.DEIA：該方法是將特異性DNA探針固定在酶標板上，用病毒基因的擴增產物與探針進行雜交，產物與探針形成雜交鏈，結合抗DNA雙鏈單克隆抗體后通過酶標二抗進行顯色，從而確定待測樣品的亞型。

3.多重PCR：利用多重PCR進行HIV亞型分析可以直接區別多種亞型。近年來，已針對gag、gp41基因區的亞型特異性引物用于多重PCR進行HIV基因分型，尤其是針對不同流行區的優勢流行株設計具有針對性的多種PCR引物，直接通過電泳進行亞種鑒別，不失為一種簡便易行的方法。

四、病毒載量的分子生物學檢測

病毒載量測定是對感染者或病人體內游離病毒核酸RNA含量的定量測定。通常使用血漿作為檢測樣品,根據不同要求改進的RNA提取技術使該試驗也可使用多種體液和組織。目前使用的病毒載量測定技術主要有3種:RT-PCR、分支DNA信號擴大系統和核酸序列擴增系統。三種技術均由核酸提取、擴增或信號放大、定量檢測四部分組成。

五、基因型耐藥性的分子生物學檢測

目前，HIV-1耐藥性基因型檢測主要是鑒定病毒基因組的特定區域是否存在與特定抗反轉錄病毒藥物的易感性降低相關的特定突變。

耐藥性基因型檢測方法種類很多，各類方法主要集中在耐藥性突變位點的檢測能力和耐藥性突變位點的評價能力上。耐藥性突變位點檢測即指得到序列信息，目前采用的方法主要是序列測定和雜交法等。

1.序列測定法

序列測定法是直接檢測HIV基因中與耐藥性相關聯的基因突變，方法是從HIV感染者血漿中提取病毒RNA，采用PT-PCR方法擴增和耐藥性密切相關的基因片段進行序列測定后，使用相關工具軟件，根據已建立的耐藥性突變位點數據庫進行耐藥位點分析。2.POLA分析法

美國凱斯西儲大學傳染病系ARTS實驗室研發了一種針對HIV-1pol基因片段的寡核苷酸鏈接分析法。該技術原理基于DNA連接酶的酶活性結構域對所覆蓋的4個堿基識別的高度敏感性以及結構域對所覆蓋的4個堿基識別的高度敏感性記憶液相芯片檢測的高通量，能同時對20中最常見的耐藥突變進行檢測。

圖1中,A:野生型和突變型模板各50%混合,進行連接識別反應;B:退火過程中,突變BCO的3’端和野生型模板之間發生一個錯配(左)而與含突變位點的模板完全互補(右);C:只有與突變模板完全互補的突變BCO與RCO,才能被DNA連接酶連接,而與突變模板有一個錯配的野生型BCO與RCO不能被連接酶作用;D:連接酶識別反應的產物與負載了抗標簽序列的微球共育。固定在微球上的RCOs 的生物素結合鏈霉親和素-R-藻紅蛋白報告分子。通過檢測報告分子的熒光強度確定樣品中突變模板的比例。該方法針對每個待檢突變位點設計2種探針:上游的微球捕獲探針（BCO）和下游的報告分子捕獲探針（RCO）。BCO的5’末端是24個寡糖核苷酸的標簽序列，能與特定微球上的抗體標簽序列互補結合,3’末端與待檢位點上游模板互補結合。針對每個位點設計一對BCO,一個與突變密碼子(如TAC編碼逆轉錄酶215位點處AZT(抗病毒藥物齊多夫定)抗性的Tvr)配對,另一個與野生型密碼子(如AAC編碼逆轉錄酶215位點處的Tyr)配對;每一對BCO的標簽序列不同,可結合不同熒光微球。RCO與待檢位點下游模板互補,其3 7端標記了生物素,與鏈霉親和素一R.藻紅蛋白(SA-PE)結合后,可通過液相芯片工作站進行定量檢測。研發人員又特別設計了用丁補償耐藥突變之外的模板多態性的競爭寡核苷酸(CMO)和用于去除降低敏感性的非特異性二級結構的寡核苷酸(DNO)。加入反應體系后,進一步提高了檢測的敏感陛,對其中17個 突變的檢測其敏感性低于0.1%,能全面揭示患者體內優勢及劣勢耐藥突變情況。

六、HIV的分子生物學治療

目前艾 滋病的防治研究主要是針對 HIV-1 進行的。自從 20 世紀 90 年代后高效抗反轉錄病毒治療(HAART)應用于艾滋病的臨床,使 HIV-1 患者的病毒載量下降及 CD4+T 細胞水平升高 ,降低了 HIV 的發病率和病死率,顯著地改變了 HIV-1 感染者發展到 AIDS 的進程。

1.反義 RNA 反義 RNA(antisense RNA)是指與 mRNA 或DNA 互補的小單鏈 RNA 分子,通過堿基配對形成 mRNA/ RNA 或 DNA/ RNA 的雜交雙鏈,從而抑制基 因表達并加速其降解。天然的反義 RNA 廣泛存在于 各類生物中,是細胞基因表達調控的一種方式。近幾年來很多研究通過人工合成的反義 RNA 靶向 HIV-1 蛋白及靶細胞受體等的基因,與靶基因配對形成無功能的雙鏈從而封閉或調節靶基因功能及產物表達,有效地阻斷 HIV 在細胞中的復制。

2.RNA 干擾

RNA 干擾(RNA interference,RNAi)是指小雙鏈RNA 在細胞內特異性地誘導與之同源互補的 mRNA 降解,抑制相應基因的表達,從而引起轉錄后基因沉默的現象。目前研究的有微小 RNA(microRNA, miRNA)、小干擾 RNA(small interfering RNA,siRNA)、短發夾 RNA(short hairpin RNA,shRNA)均能夠介導 RNA 干擾作用。miRNA 是一類廣泛存在于真核生物中的單鏈非編碼小分子 RNA,通過與細胞內靶 mR-NA 3’端-UTR 區不完全互補配對或與靶mRNA 完全 互補配對來發揮抑制mRNA翻譯或降解靶mRNA的作用。

參考文獻：[1] 邢玉蘭.艾滋病病原學診斷進展[J].中華檢驗醫學雜志,2001,24(3)[2]劉紅英.實驗診斷HIV方法的應用與進展[J].職業與健康,2005,21(12)[3]韓衛寧,高勇.HIV耐藥性及檢測方法最新進展[J].國際生物醫學工程雜志,2012,35(4)[4]田雅茹,焦艷梅,張彤等.抗HIV-1基因治療新進展[J].首都醫科大學學報,2014,35(1)