第一篇：檢驗員四級 微生物檢驗技術+答案

微生物檢驗技術

一、判斷題（將判斷結果填入括號中，正確的填“√”，錯誤的填“×”）： 1.微生物可分為細菌、放線菌、霉菌和酵母菌四大類。（×）2.具有莢膜的肺炎雙球菌其毒力強。（√）

3.食用前將食品充分加熱可以防止一些食物中毒的發生。（√）4.細菌在不同生長條件下，形態可能有變化。（√）

5.根據細菌所含DNA的不同，可以將細菌分為革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性 菌兩大類。（×）

6.所有細菌僅需20~30分鐘即可繁殖一代。（×）

7.菌落是指一群在固體培養基表面繁殖形成肉眼可見的集團。（×）8.大腸桿菌是食品和飲用水衛生檢驗的指示菌，（×）9.真菌進化程度高于細菌，所以真菌為多細胞的微生物。（×）10.在微生物中，只有霉菌才能以菌絲體的形式進行生長。（×）11.酵母菌是一種多細胞的微生物。（×）

12.霉菌主要是通過產生各種有性孢子進行繁殖的。（×）

13.在固體培養基上生長時，霉菌的菌落較大，比較濕潤粘稠，不透明，呈現或緊或松的蜘蛛網狀、絨毛狀或棉絮狀。（×）

14.霉菌往往在干燥的環境中大量生長繁殖，有較強的陸生型。（×）15.微生物營養物質中氮源的功能是：提供氮素和能量來源。（×）

16.微生物吸收營養物質，單純擴散是利用濃度差，從濃度低的向濃度高的進行擴散。（×）

17.任何微生物培養基中均需含有碳源、氮源、無機鹽、生長因子和水分等五種營養物質。（×）

18.微生物在生命活動中需要的能量主要是通過生物氧化而獲得。（√）

19.微生物的分解代謝就是將復雜的大分子物質降解成小分子的可溶性物質。（√）

20.微生物的酶具有特殊的催化能力。可以在發酵工藝上利用任何一種酶來進行生產。（×）

21.細菌生長達到穩定期，菌體生長速度等于零，細菌停止生長。（×）22.不斷加溫可以增加細菌的生物化學反應速率和細菌的生長速度。（×）23.食品的主要營養成分各不相同，造成腐敗變質的微生物卻基本相同。（×）24.根據食品pH值范圍，可將食品劃分為酸性食品和堿性食品。（×）

25.結合水是以物理引力吸附在大分子物質上，不能作為溶劑或參與化學反應，因此也不能被微生物利用。（√）

26.微生物有嗜冷、嗜溫、嗜熱型，而每一群微生物又各有其最適宜生長的溫度范圍。（√）

27.滲透壓與微生物的生命活動有一定關系。少數的耐鹽菌、嗜鹽菌、耐糖菌、嗜糖菌可在多糖或多鹽的食品中生存。（×）

28.水在食品加工中是不可缺少的，水源或輸水管道、水箱發生污染，有可能造成食品的微生物污染蔓延。（√）

29.空氣的含菌量與空氣的含塵量呈非線性關系。（×）

30.用于盛放易腐敗食品的容器，不經清洗和消毒而連續使用，很容易引起食品的交叉污染。（√）31.在食品加工過程中，微生物的數量一般出現明顯的上升的趨勢。（×）32.食品被產毒霉菌菌株污染，就能檢測出霉菌毒素。（×）33.快速風干比緩慢風干對防止產生黃曲霉素有力。（√）

34.微生物檢驗接種是指將微生物的純種或含有微生物的材料轉移到適于它生長繁殖的人工培養基上或活的生物體被的過程。（√）

35.微生物檢驗傾注接種方法是取少許純菌或少許含菌材料（一般是液體材料）。先放入無菌的培養皿中，而后傾入已溶化并冷卻至40℃左右含有瓊脂的滅菌培養基上，使它與含菌材料均勻混合后，冷卻至凝固。（×）

36.微生物檢驗時，對已打開包裝但未使用完的器皿，可以重新包裝好留待下次使用。（×）

37.所有的微生物培養時都需要氧氣的參與。（×）

38.細菌檢驗的培養基中加入膽鹽可抑制革蘭氏陽性菌的生長，以有利于革蘭氏陰性菌的生長。（√）

39.在制備某些微生物檢驗培養基時需加入一些煌綠、玫瑰紅酸、孟加拉紅等物質作為培養基的指示劑。（×）

40.微生物檢驗培養基可根據配方，稱量于適當大小的燒杯中，由于其中干粉易吸潮，故稱量時要迅速。（√）

41.消毒是用物理、化學或生物學的方法殺死微生物的過程。（×）

42.由于微生物體積很小，細胞又較透明，不易觀察到其形態，故必須借助于染色的方法使菌體著色，增加與背景的明暗對比，才能在光學顯微鏡下較為清楚地觀察其個體形態和部分結構。（√）

43.微生物染色的染料按其組成成分可以分為自然染料和人工染料。（×）44.微生物染色時按照所用染料種類的不同，可把染色法分為單染色法、復染色法和特殊染色法。（√）

45.G+細菌經革蘭氏染色菌體呈紅色。（×）

46.微生物實驗室布局應采用單方向工作流程，避免交叉污染。（√）

47.無菌室的無菌程度測定方法：將已制備好的3~5個瓊脂平皿放置在無菌室工作位置的左中右等處，并開蓋暴露15min，然后倒置于36℃培養箱培養24小時，取出觀察。（×）

48.用于微生物檢驗所采的樣品必須有代表性，按檢驗目的采取相應的采樣方法。（√）

49.微生物檢驗的采樣方法，重量法通常用于采集中樣，拭子法用于采集一定面積的樣品。（√）

50.微生物檢驗采樣時，散裝食品的采樣是無菌采樣器采集5倍或以上檢驗單位的樣品，放入無菌容器內，總量應滿足微生物指標檢驗的要求。（√）51.微生物檢驗采樣時，盛樣容器的標簽上必須標明樣品名稱和樣品順序號以及其他需要說明的情況。（√）

52.微生物檢驗樣品制備的全部過程均應遵循無菌操作程序。開啟樣品容器前，先將容器表面擦干凈，然后用75%酒精消毒開啟部位及其周圍。（√）53.微生物檢驗時，含有二氧化碳的液體檢驗前，應用無菌操作程序先將液體倒入小瓶中，然后覆蓋紗布，輕輕振搖，使氣體完全逸出。（×）54.食品加工設備衛生檢驗的樣品采集方法有稱量法、刷子刷洗法。（×）55.表面擦拭法采樣檢出的活菌總數不高，同時常導致檢驗的結果不一致。所以需二人共同進行采樣工作。（√）56.食品加工環節衛生檢驗，如在清潔消毒或加工前后各取一份樣品，對衛生管理的評估更適合。（√）

57.空氣中霉菌檢驗是為了防止霉菌孢子引起皮癬、鵝口瘡、過敏性哮喘等疾病，以及對物品的污染。（×）

58.菌落總數測定是用來判定食品被細菌污染的程度及其衛生質量，它反映食品在生產加工過程中是否符合衛生要求，以便對被檢食品做出適當的衛生學評價。（√）

59.具備培養微生物的設備即能滿足菌落總數檢驗的需要。（×）60.菌落總數檢驗所用的培養基時營養瓊脂培養基。（×）

61.菌落總數檢驗在制10倍遞增稀釋液時，每遞增稀釋一次即用1支10ml滅菌吸管。（×）62.菌落總數培養時，如果樣品中可能含有在瓊脂培養基表面彌漫生長的菌落時，可在傾注凝固后的瓊脂表面覆蓋一薄層瓊脂培養基，凝固后翻轉平板，按培養條件培養。（√）

63.菌落總數報告時，若只有一個稀釋度平板上的菌落數在適宜計數范圍內，計算兩個平板菌落數的平均值，再將平均值乘以相應稀釋倍數，作為每克（或毫升）中菌落總數結果。（√）

64.大腸菌群是一群在36℃條件下培養24h能發酵乳糖、產酸產氣、需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽孢桿菌。（×）

65.大腸菌群檢驗所用恒溫培養箱的溫度是37℃±1℃。（×）66.大腸菌群檢驗中所用的鹽酸濃度是10mol/L。（×）

67.大腸菌群檢驗初發酵的程序是：檢樣制備→10倍系列稀釋→選擇任意三個稀釋度接種大腸菌群初發酵肉湯管。（×）

68.大腸菌群檢驗時樣品均液的pH應用鹽酸或氫氧化鈉調節至中性。（√）69.大腸菌群初發酵使用的培養基是月桂基胰蛋白胨肉湯。（×）70.霉菌和酵母菌檢驗時，橡膠乳頭和洗耳球是必備的實驗材料。（√）71.食品中霉菌和酵母菌檢驗的稀釋液與細菌檢驗的稀釋液完全相同。（×）72.霉菌和酵母菌的檢驗程序與細菌檢驗程序相同。（×）

73.霉菌、酵母菌檢驗樣液加入后，將冷至46℃左右的培養基注入平皿約15ml，并轉動平皿，混合均勻。（×）

74.霉菌、酵母菌計數的稀釋度選擇及菌落報告方式可參考國標的菌落總數檢驗方法。（√）

一、單項選擇題（選擇一個正確的答案，將相應的字母填入題內的括號中）： 1.一部分微生物與人類形成共生的關系，在自然界達到（C）A、動態平衡 B、數量增多 C、生態平衡 D、數量減少

2.影響食品安全的主要因素除了化學性污染、物理性污染外，還有（D）A、土壤污染 B、水源污染 C、空氣污染 D、生物性污染 3.細菌屬于原核細胞型微生物的理由是（D）

A、簡單的二分裂方式繁殖 B、單細胞生物 C、較其它生物小得多 D、核外無核膜包裹，核內無核仁

4.（C）不屬于非細胞型微生物的結構成分。A、DNA B、RNA C、脂肪 D、蛋白質 5.用納米作為度量單位的微生物是（A）A、病毒 B、霉菌 C、酵母菌 D、細菌 6.食品微生物檢驗的目的就是要為生產出安全、衛生、（C）的食品提供科學依據。

A、美觀 B、美味 C、符合標準 D、營養豐富

7.由微生物引起食品變質的基本條件是食品特性、環境條件、以及（C）。A、人員因素 B、加工因素 C、微生物的種類及數量 D、以上都是 8.螺旋菌按其彎曲程度不同分為螺菌、（D）和螺旋體。A、長桿菌 B、短桿菌 C、球菌 D、弧菌 9.細菌的基本形態是球菌、桿菌和（C）。

A、葡萄球菌 B、放線菌 C、螺旋菌 D、芽孢菌

10.細菌的細胞結構必須用光學顯微鏡的（C）才能觀察清楚。A、低倍鏡 B、高倍鏡 C、油鏡 D、聚光鏡 11.球菌的直徑一般約在（B）之間。A、（0.5~2）nm B、（0.5~2）um C、（0.5~2）mm D、（0.5~2）cm 12.細菌細胞壁的主要成分是（D）。

A、蛋白質 B、磷脂 C、幾丁質 D、肽聚糖

13.細胞膜的主要功能是控制細胞內外一些物質的（B）。

A、存儲遺傳信息 B、交換滲透 C、傳遞遺傳信息 D、維持細胞外形 14.因為（D），所以芽孢不是細菌的繁殖體。

A、絕大多數產生芽孢的細菌為革蘭式陽性細菌 B、不是所有細菌都產生芽孢 C、芽孢只在體外產生 D、一個芽孢發芽只能生成一個菌體 15．細菌芽胞內的耐熱性物質是（D）。

A、二氨基庚二酸 B、N—乙酰胞壁酸 C、β—羥基丁酸 D、2，6—吡啶二羧酸

16.細菌常以（B）進行繁殖。

A、斷裂增殖 B、二分裂法 C、通過孢子 D、通過芽孢 17.細菌與其它生物相比，繁殖速度快。這主要是因為（B），有利于和外界進行物質交換。

A、食譜雜、分布廣 B、體積小、表面積大 C、結構簡單、種類多 D、適應強、易變異

18.有芽孢的細菌菌落表面表現為（C）。

A、濕潤透明 B、濕潤光滑 C、干燥皺折 D、隆起皺折 19.細菌在液體培養基中，不會出現的現象是（C）。

A、使培養基渾濁 B、在液體表面形成膜 C、可能形成菌落 D、出現沉淀 20.在自然界中，微生物的種類繁多，其中（C）分布最廣。A、真菌 B、霉菌 C、細菌 D、病毒

21.真菌沒有葉綠素，因而不能利用（D）通過光合作用來制作食物，靠寄生或腐生生存。

22.從生物學的觀點來看，（B）不屬于真菌的特點。

A、沒有葉綠素 B、沒有完整的細胞核構造 C、無根、莖、葉分化 D、能通過有性或無性繁殖 23.酵母菌的基本形態為（A）。

A、卵形 B、桿形 C、方形 D、弧形 24.酵母菌和霉菌通常生長在（A）。

A、室溫下 B、37℃ C、55℃ D、這些都不是 25.霉菌菌絲由分支或（B）的菌絲組成。A、不分裂 B、不分支 C、分裂 D、分離 26.霉菌菌絲分為無隔膜和有（D）兩種。A、莢膜 B、菌膜 C、細胞膜 D、隔膜 27.酵母菌的繁殖方法主要是（D）。

A、孢子 B、斷裂增殖 C、二分裂法 D、芽殖

28.霉菌的繁殖方式多樣，但（C）不屬于霉菌的繁殖方法。A、斷裂增殖 B、有性孢子 C、芽殖 D、無性孢子 29.酵母菌在液體培養基中生長時，（B）是不應該出現的現象。A、變渾濁 B、不同色澤 C、產生沉淀 D、形成菌膜 30.酵母菌比較不易在（D）中生長繁殖。A、水果 B、蜜餞 C、蔬菜 D、肉類

31.微生物常會引起食物變質，但（C）在傳統發酵及近代發酵工業中，起著積極的作用。

A、細菌 B、藍細菌 C、霉菌 D、放線菌 32.磷酸鹽緩沖液、（C）等，是實驗中常用的無機鹽。A、牛肉膏 B、葡萄糖 C、氯化鈉 D、蛋白胨 33.微生物在滲透酶和提供能量的前提下，將體外的營養物質逆濃度運送至體內，這就是（C）的作用。

A、單純擴散 B、促進擴散 C、主動運輸 D、基團移位 34.營養物質最后必須透過（B）才能被微生物吸收。A、細胞壁 B、細胞膜 C、核質體 D、滲透酶 35.微生物中（A）屬于自養型微生物。

A、藍細菌 B、霉菌 C、腐生菌 D、寄生菌

36.微生物的氧化作用可根據最終電子受體的性質，分為有氧呼吸作用、無氧呼吸作用和（C）三種。

A、氧化作用 B、代謝作用 C、發酵作用 D、滲透酶作用 37.微生物體內的能量轉變就是（B）

A、新陳代謝 B、能量代謝 C、氧化作用 D、發酵作用 38.微生物必須通過胞外酶把蛋白質分解成（C），才能被吸收利用。A、丙酮酸 B、脂肪酶 C、氨基酸 D、乳酸

39.酶是由活的微生物體產生的、具有特殊催化能力和高度（B）的蛋白質。A、統一性 B、專一性 C、穩定性 D、系統性

40.微生物代謝的調節，實際上就是控制酶的（D）和活性的變化。A、種類 B、質量 C、能量 D、數量 41.外毒素是主要化學組成是（B）。

A、脂質 B、蛋白質 C、肽聚糖 D、脂多糖 42.微生物在代謝過程中能產生毒素，（C）不屬于細菌內毒素的主要化學組成。A、磷脂 B、脂多糖 C、蛋白質 D、脂蛋白 43.菌體最佳收獲期是在（C）。

A、延遲期 B、對數期 C、穩定期 D、衰亡期 44.大多數細菌、放線菌和霉菌都屬于（B）。

A、厭氧微生物 B、需氧微生物 C、兼性厭氧微生物 D、微需氧微生物 45.食品中含有蛋白質、糖類、脂肪、無機鹽、維生素和（A）等，這正契合了微生物生長的需要。

A、水 B、葡萄糖 C、鈣 D、磷

46.肉、魚等食品容易受到（C）分解能力很強的變形桿菌、青霉等微生物的污染。

A、脂肪 B、糖類 C、蛋白質 D、明膠 47.腌菜、酸泡菜是（B）微生物發酵制成的。A、大腸桿菌 B、乳酸菌 C、霉菌 D、細菌

48.酸性食品的腐敗變質主要是由（C）和霉菌引起的。A、芽孢桿菌 B、乳酸菌 C、酵母菌 D、細菌

49.食品的Aw值在0.60以下，則認為（D）不能生長。A、細菌 B、霉菌 C、酵母菌 D、微生物 50.將食品貯存在6.5℃環境中有利（A）生長。A、嗜冷菌 B、嗜溫菌 C、耐溫菌 D、耐冷菌

51.高溫微生物造成的食品變質主要為分解（C）而引起。A、脂肪 B、蛋白質 C、糖類 D、有機物

52.當食品中糖或鹽的濃度越高，滲透壓就越大，食品的Aw值則（B）。A、越大 B、越小 C、一樣 D、不一定

53.酵母菌和霉菌一般能耐受較高的滲透壓，常引起糖漿、（C）、果汁等高糖食品的變質。

A、水果 B、飲料 C、果醬 D、奶酪

54.一般來講，在有氧的環境中，食品變質速度（D）。A、減慢 B、不變 C、不一定 D、加快

55.把含水量少的脫水食品放在濕度大的地方，表面的水分（B）。A、緩慢增加 B、迅速增加 C、不會增加 D、迅速減少

56.相當一部分食品的原料都來自田地，而土壤素有（D）的“大本營”之說。A、蛋白質 B、礦物質 C、維生素 D、微生物

57.土壤中的（A）相對于其他微生物而言，所占比率最高，危害最大。A、細菌 B、酵母菌 C、霉菌 D、放線菌

58、水在食品加工中是不可缺少的，它是食品的（C）、清洗、冷卻、冰凍等生產環節中不可缺少的重要物質。

A、消毒 B、滅菌 C、配料 D、衛生

59.食品質量安全市場準入制度（QS）中對（A）用水有嚴格要求。A、工業 B、農業 C、民用 D、軍用 60.空氣中常見的微生物主要是（C）、耐紫外線的革蘭氏陽性球菌、芽孢桿菌以及酵母菌、霉菌的孢子等。

A、耐酸 B、耐冷 C、耐干燥 D、耐熱

61.空氣中的微生物與土壤和污水中的微生物相比（B）。A、數量多，分布極不均勻 B、數量少，分布極不均勻 C、數量多，分布均勻 D、數量少，分布均勻 62.食品制造儲藏的場所是鼠、蠅、蟑螂等動物出沒的場所，這些動物體表及（B）均有大量微生物，經常是微生物的傳播者。A、口腔 B、消化道 C、毛發 D、肢體

63.食品在加工前，原料大多營養豐富，在自然界中容易受到微生物的污染，加之運輸、儲藏等原因，很容易造成微生物的（A）。A、繁殖 B、減少 C、死亡 D、休眠 64.食品在加工過程中，要進行（A）、加熱或滅菌等工藝操作過程。這些操作過程若正常進行，可以使食品達到無菌或菌群減少的狀態。A、清洗 B、分級 C、揀選 D、包裝

65.企業的衛生管理包括環境衛生、生產設備衛生、食品從業人員衛生以及食品的（D）、銷售、運輸等環節的衛生。A、加熱 B、滅菌 C、采購 D、儲藏

66.真空或充氮包裝，可以減弱（B）的生長。

A、厭氧腐敗微生物 B、需氧腐敗微生物 C、耐氧腐敗微生物 D、需養兼性厭氧微生物

67.反映糞便污染程度的指示菌是大腸菌群、糞大腸菌群和（B）。A、志賀氏菌 B、大腸桿菌 C、沙門氏菌 D、變形桿菌 68.霉菌毒素通常具有（B）、無抗原性，主要侵害實質器官的特點。A、耐低溫 B、耐高溫 C、耐堿 D、耐酸

69.人畜一次性攝入含有大量霉菌毒素的食物，往往會發生（C）中毒，長期少量攝入會發生慢性中毒。

A、爆發性 B、慢性 C、急性 D、多發性 70.通常產生毒素的霉菌種類有：黃曲霉、（A）、鐮刀菌等中的一些種類。A、青霉 B、根霉 C、毛霉 D、黑曲霉

71.食品中為防止霉菌生長和毒素產生，通常采取驅除（B）的方法。A、CO2 B、O2 C、N2 D、H2 72.（A）不是食品工藝中霉菌毒素去除法。

A、煮沸法 B、活性炭法 C、酸性白土法 D、微生物去毒 73.微生物檢驗常用的分離工具有：接種鉤、接種圈和（A）等。A、接種針 B、玻璃平板 C、三角燒瓶 D、試管

74.接種針常用于微生物檢驗操作時的（D）接種方法。A、涂布 B、傾注 C、劃線 D、穿刺

75.微生物檢驗常用的接種和分離方法有點值、穿刺、浸洗和（B）等方法。A、標定 B、涂布 C、滴定 D、中和

76.微生物檢驗接種食品樣品前，先用肥皂洗手，然后用（B）酒精棉球將手擦干凈。

A.100% B.75% C.50% D.95% 77.微生物檢驗在接種前，接種環應經火焰燒灼全部金屬絲，可一邊轉動接種柄一邊慢慢地來回通過火焰（B）。A.二次 B.三次 C.四次 D.一次

78.微生物培養時用焦性沒食子酸、磷等用以（C）。

A.除去氫氣 B.除去二氧化碳 C.吸收氧氣以除氧 D.降低氧化還原電位 79.用于細菌檢驗的半固體培養基的瓊脂加入量為（D）%。A.0.5~1.0 B.0.5~0.8 C.0.1~0.5 D.0.2~0.5 80.微生物檢驗培養基中常見的酸堿指示劑有：酚紅、中性紅、溴甲酚紫、煌綠和（A）等。

A.甲基紅 B.美蘭 C.孟加拉紅 D.伊紅

81.瓊脂其本身并無營養價值，但是應用最廣的凝固劑。但多次反復融化，其凝固性會（C）。A.增加 B.不變 C.降低 D.消失

82.配制微生物檢驗培養基分裝三角瓶時，以不超過三角瓶容積的（A）為宜。A.2/3 B.1/3 C.1/2 D.3/5 83.滅菌是殺滅物體中或物體上所有微生物的繁殖體和（B）的過程。A.莢膜 B.芽孢 C.鞭毛 D.菌毛

84.干熱滅菌法一般是把待滅菌的物品包裝后，放入干躁箱中加熱至（A）。A.160℃，維持2h B.170℃，維持2h C.180℃，維持2h D.160℃，維持4h 85.（D）是能損傷細菌外膜的陽離子表面活性劑。A.福爾馬林 B.結晶紫 C.漂白粉 D.新潔爾滅 86.甲醛通常適用于（D）。

A.室內噴霧消毒地面 B.擦洗被污染的桌 C.排泄物 D.空氣熏蒸消毒（無菌室）。

87.影響滅菌與消毒的因素有很多，最主要是（B）、微生物污染程度、溫度、濕度的影響尤為重要。

A.微生物所依附的介質 B.微生物的特性 C.消毒劑劑量的大小 D.酸堿度

88.待滅菌的物品中含菌數越多時，滅菌越是（D）。A.顯著 B.容易 C.好 D.困難

89.微生物染色時酸性物質對于（C）染料較易吸附，且吸附作用穩固。A.中性 B.酸性 C.堿性 D.弱酸性

90.微生物染色的染料按其電離后染料離子所帶電荷的性質，分為酸性染料、堿性染料、（B）燃料和單純燃料四大類。

A.簡單 B.中性（復合）C.天然 D.人工（合成）91.微生物染色時一般常用堿性染料進行單染色，如（B）、孔雀綠、堿性復紅、結晶紫等。

A.品紅 B.美蘭 C.胭脂紅 D.煌綠 92.微生物單染色的基本步驟是（A）。

A.涂片、固定、染色、水洗 B.涂片、染色、水洗、固定 C.涂片、染色、固定、水洗 D.涂片、水洗、固定、染色

93.革蘭氏染色法將細菌分為G+G-兩大類，這是由他們的（D）結構和組成不同決定的。

A.鞭毛 B.細胞質 C.細胞膜 D.細胞壁 94.革蘭氏染色應選用（A）的菌染色。

A.幼齡期 B.成熟期 C.生長期 D.成長期

95.實驗設備應放置于適宜的環境條件下，便于維護、清潔、消毒和校準，并保持（C）的工作狀態。

A.整潔 B.良好 C.整潔與良好 D.正常

96.無菌室的要求：無菌室（包括緩沖間、傳遞窗）每3m2的面積應配備一根功率為（B）瓦的紫外線燈 A.25 B.30 C.40 D.60 97.安裝在無菌室內的紫外線燈應無燈罩，燈管距離地面不得超過（C）m。A.2.0 B.2.2 C.2.5 D.2.8 98.無菌室用的紫外線燈管每隔（B）需用酒精棉球擦拭，清潔燈管表面。以免影響紫外線的穿透力。

A.1周 B.兩周 C.一月 D.二月

99.無菌室每次使用前后應用紫外線滅菌燈消毒，照射時間不低于（A）min。關閉紫外線燈30min后才能進入。A.30 B.45 C.60 D.130 100.無菌室霉菌較多時，先用5%石炭酸全面噴灑室內，再用（A）熏蒸。A.甲醛 B.乳酸 C.甲醛和乳酸交替 D.丙二醇溶液 101.無菌室細菌較多時，可采用（C）熏蒸。

A.甲醛 B.乳酸 C.甲醛和乳酸交替 D.丙二醇溶液

102.微生物檢驗采樣后，為防止樣品中原有微生物的（D）發生變化，樣品在保存和運送過程中，應采取必要的措施。A.種類 B.特性 C.大小 D.數量

103.微生物檢驗樣品的中樣式從樣品（A）取得的混合樣品。A.各部分 B.一部分 C.大部分 D.指定部分 104.微生物檢驗樣品的大樣是指（B）樣品。A.一部分 B.一整批 C.全部 D.一件

105.微生物檢驗采樣時，即食類預包裝食品按（A）取樣，取的是最小零售預包裝。

A.相同批次 B.不同批次 C.相同原料 D.不同班次

106.微生物檢驗采樣時，非即食類預包裝小于500g的固態食品的取樣，是取相同批次的（A）零售預包裝。采樣總量應滿足微生物指標檢驗的要求.A.最小 B.最大 C.相同 D.類似

107.微生物檢驗采樣時，盛樣容器的標簽應（D）、清楚。A.清潔 B.清晰 C.整潔 D.完整 108.微生物檢驗采樣時，采樣標簽應（B），具防水性，字跡不會被擦掉或脫色。A.固定 B.牢固 C.穩固 D.耐久磨損 109.微生物檢驗采樣后，易腐和冷藏樣品的運送與保存時，應將樣品置于（A）℃環境中（如冰壺）保存。

A.0~4 B.2~5 C.4~8 D.8~10 110.微生物檢驗采樣后，冷凍樣品運送與保存時應始終處于冷凍狀態。可放入（C）℃以下的冰箱內，也可短時保存在包膜塑料隔熱箱內（箱內有干冰可維持在0℃以下）。

A.-20 B.-18 C.-15 D.-10 111.微生物檢驗時從樣品的均質到稀釋和接種，相隔時間不應超過（A）。A.15min B.30min C。45min D.60min 112.微生物檢驗時，半固體或粘性液體在樣品制備時，應將滅菌容器稱取混勻后的檢樣與預熱至（D）℃的滅菌稀釋液充分振搖混合。A.35 B.37 C.42 D.45 113.用于微生物檢驗的奶油、冰淇淋、冰棍和（B）等檢驗樣品制備時，應將稱取后的樣品與預先置于45℃水浴中的稀釋液混合，待溶解后（控制時間在15min內）再按操作程序檢驗。A.奶酪 B.糖果 C.酸奶 D.奶粉

114.用于微生物檢驗的液體樣品的制備時以無菌吸管吸取25ml樣品，加入置盛有225ml稀釋液內，制成1:10的樣品均液。飲料和（B）可以直接吸取原液。

A.醬油 B.酒類 C.牛奶 D.糟鹵

115.食品加工使用的一般容器和設備的衛生檢驗，是用一定量（A）反復沖洗與食品接觸的表面，采集、收集沖洗液作微生物檢驗。A.無菌生理鹽水 B.生理鹽水 C.無菌營養液 D.營養液

116.生產小用具表面擦拭法采樣作菌落檢驗時，檢驗結果報告用（D）營養液。A.cfu/100cm2 B.cfu/10cm2 C.cfu/1cm2 D.cfu/個

117.消毒后原有菌落總數減少（B）以上食品加工環節衛生檢驗清潔消毒效果評價良好。

A.90% B.80% C.70% D.60% 118.（C）不是空氣采樣的采樣方法。

A.過濾法 B.直接沉降法 C.氣流吸附法 D.氣流撞擊法 119.空氣中霉菌檢驗是為了防止霉菌孢子引起皮癬、鵝口瘡、過敏性哮喘等疾病，以及對（D）的污染。

A.環境 B.呼吸道 C.物品 D.食品

120.空氣中霉菌檢驗，可用馬鈴薯瓊脂培養基或（A）瓊脂培養基暴露在空氣中作直接沉降法檢驗。

A.玉米 B.血液 C.營養瓊脂 D.伊紅美蘭

121.菌落總數是指在（C）條件下，在中溫、一定時間內，在平板計數瓊脂培養基上生長的細菌菌落總數。

A.厭氧 B.微需氧 C.需氧 D.無菌

122.菌落總數檢驗所用恒溫培養箱的溫度是（A）。

A.36℃±1℃ B.36℃±2℃ C.42℃±1℃ D.42℃±1℃ 123.菌落總數檢驗的材料主要有：酒精燈、（B）、吸管、廣口瓶或三角瓶等。A.三角架 B.試管 C.滴定管 D.PH計

124.菌落總數檢驗所用的稀釋液有生理鹽水、蒸餾水和（D）等。A.肉浸液 B.BP緩沖液 C.酵母浸液 D.磷酸鹽緩沖液 125.菌落總數檢驗所用無菌生理鹽水的濃度是（B）。A、0.75％ B、0.85％ C、85% D、75% 126.菌落總數檢驗從制備樣品勻液到樣品接種完畢，全過程不得超過（A）min。A、15 B、20 C、25 D、30 127.菌落總數檢驗在樣品制備、稀釋時，稱取25g樣品置盛有（C）ml磷酸鹽緩沖液的無菌均質杯內均質。A、175 B、200 C、225 D、250 128.碳酸飲料在做菌落總數檢驗時，1:10的樣品均液是以無菌吸管吸取（C）制備的。

A、1ml樣品沿管壁緩慢注于盛有9ml稀釋液的無菌試管中 B、10ml樣品沿管壁緩慢注于盛有90ml稀釋液的無菌試管中 C、25ml樣品置盛有225ml稀釋液中 D、25ml樣品置盛有250ml稀釋液中

129.菌落總數檢驗樣液接種后，及時將涼至（C）平板計數瓊脂培養基傾注平皿，并轉動平皿使其混合均勻。

A、40℃ B、44℃ C、46℃ D、48℃

130.水產品的菌落總數檢驗所用恒溫培養的溫度是（A）。A、30℃±1℃ B、30℃±2℃ C、36℃±1℃ D、36±2℃ 131.水產品的菌落總數檢驗所用恒溫培養的時間是（D）。A、48h±2h B、48h±3h C、72h±2h D、72h±3h 132.菌落計數以菌落形成單位（B）表示。A、cfu B、CFU C、UFC D、ufc 133.菌落總數計數適當平板上若有蔓延菌落生長，其片狀不到平板的一半，而其中一半中菌落分布又很均勻，即可計算（B），代表一個平板菌落數。A、其中菌落分布很均勻菌落的總和 B、半個平板后乘以2 C、將片狀菌落與分布很均勻菌落相加

D、將兩個平板上片狀菌落與分布很均勻菌落相加，除以2 134.菌落總數報告時，若有三個連續稀釋度的平板菌落數，在1:10稀釋度的菌落是多不可計;在1:100稀釋度的菌落是325,330;在1:1000稀釋度的菌落是25,28，則樣品中菌落數為（A）。

A、27000 B、26500 C、32800 D、30000 135.大腸菌群主要來源于人畜糞便，作為（B）指標評價食品的衛生狀況。A、污染物 B、糞便污染 C、有害物質 D、致病菌

136.大腸菌群作為食品的衛生指標，其意義是推斷食品中有否污染（A）的可能。

A、腸道致病菌 B、腸道非致病菌 C、沙門氏菌 D、志賀氏菌 137.大腸菌群檢驗所用天平的感量是（B）g。A、1 B、0.1 C、0.01 D、0.001 138.大腸菌群檢驗初發酵所用的培養基是（A）。A、LST B、SS C、EMB D、BGLB 139．大腸菌群檢驗所用的培養基每管應分裝（B）ml。A、5 B、10 C、15 D、20 140.大腸菌群檢驗復發酵培養時間到，觀察顏色變化和導管內是否有氣泡產生，如（C）則可以作樣品中大腸菌群陽性結果報告。

A、產酸不產氣 B、產氣不產酸 C、產酸產氣 D、不產酸不產氣 141.大腸菌群檢驗樣液中和用的鹽酸濃度是（A）。A、1mol/L B、10mol/L C、1% D、10% 142.大腸菌群檢驗樣液中和用的氫氧化鈉濃度是(C)。A、1% B、10% C、1mol/L D、10mol/L 143.大腸菌群檢驗初發酵肉湯最長培養時間是（C）。A、24h±2h B、24h±3h C、48h±2h D、48h±3h 144.大腸菌群檢驗接種處發酵肉湯時每個稀釋度接種（B）管初發酵肉湯 A、2 B、3 C、4 D、5 145.大腸菌群檢驗福發酵試驗所用的培養基是（D）。A、LST B、SS C、EMB D、BGLB 146.大腸菌群檢驗復發酵試驗是在36℃±1℃培養，所需最長時間是（C）觀察生長情況。

A、24h±2h B、24h±3h C、48h±2h D、48h±3h 147.大腸菌群檢驗結果報告，時證實為大腸菌群陽性管數，查MPN檢索表，報告（A）A、每克（或毫升）樣品中大腸菌群的MPN值 B、CFU/g C、CFU/ml D、每100克（或毫升）樣品中大腸菌群的MPN值 148.大腸菌群檢驗結果報告時，以（C）（MPN）報告，是對樣品或菌密度的估測。

A、最大值 B、最小值 C、最可能數 D、95%的可能數

149.霉菌和酵母菌檢驗原理是依據霉菌和酵母菌通常在pH低、濕度高、（C）、低溫儲存等，并含有抗生素的食品中出現而制定的檢驗方法。A、高氮低鹽 B、高氮低糖 C、高鹽高糖 D、低糖低鹽

150．霉菌和酵母菌檢驗的意義是：在某些情況下，霉菌和酵母菌不僅造成食品的腐敗變質，有些霉菌還能夠合成有毒代謝產物（D）。A、抗生素 B、內毒素 C、外毒素 D、霉菌毒素 151.霉菌和酵母菌檢驗所用恒溫水浴鍋的溫度是（A）。

A、45℃±1℃ B、45℃±2℃ C、47℃±1℃ D、47℃±2℃ 152.霉菌和酵母菌檢驗所用的平板的直徑是（C）㎜。A、50 B、70 C、90 D、110 153.食品中常用于霉菌和酵母菌檢驗的培養基有馬鈴薯-葡萄糖瓊脂、孟加拉紅瓊脂和（B）培養基等。

A、巧克力平板 B、高鹽察氏 C、改良馬丁瓊脂 D、玫瑰紅鈉瓊脂 154.孟加拉紅培養基中添加的孟加拉紅具有抑制霉菌菌落的蔓延生長，同時還具有（B）的作用。

A、指示劑 B、抑制細菌 C、顯色劑 D、營養素

155.霉菌、酵母菌檢驗稀釋時，根據對樣品污染狀況的估計，選擇2—3個適宜連續稀釋度的樣品均液，（B）無菌培養皿內。A、每個稀釋度分別吸取1mL樣品均液加入兩個

B、在進行10倍遞增稀釋時，每個稀釋度分別吸取1mL樣品均液加入兩個 C、每個稀釋度分別吸取1mL樣品均液加入一個

D、在進行10倍遞增稀釋時，每個稀釋度分別吸取1mL樣品均液加入一個 156.霉菌和酵母菌檢驗制備樣品時，以無菌操作將檢樣25g（或25mL），放于225 mL稀釋液的玻塞三角瓶內，振搖（D）min，即為1:10的稀釋液。A、10 B、15 C、20 D、30 157．霉菌、酵母菌檢驗稀釋時，取1mL1：100稀釋液注入含有9mL滅菌水的試管內，振搖試管混合均勻，另換一支1mL滅菌吸管吹吸(D)次，制成1:1000的稀釋液。

A、50 B、30 C、10 D、5 158.霉菌、酵母菌檢驗稀釋時，用滅菌吸管吸取1:10稀釋液10mL，注入另一支無菌空試管中，另用帶橡皮乳頭的1mL滅菌吸管反復吹吸（B）次。A、80 B、50 C、30 D、5 159．霉菌、酵母菌檢驗接種時，待瓊脂凝固后，翻轉平皿，置（B）溫箱內培養。

A、20~25℃ B、25~28℃ C、25~30℃ D、28~32℃

160.霉菌、酵母菌檢驗接種，待瓊脂凝固后，翻轉平皿，置一定溫箱內培養，培養時間為（B）。

A、2d后開始觀察，共培養4d。B、3d后開始觀察，共培養5d。C、3d后開始觀察，共培養6d。D、4d后開始觀察，共培養7d。

161.霉菌、酵母菌培養過程中菌落觀察時要注意輕拿輕放，避免（A）散開，造成結果偏高。

A、孢子 B、菌絲 C、鞭毛 D、芽孢

162.霉菌、酵母菌數結果報告時，每克（或毫升）食品中所含數量以（A（ML）163.霉菌、酵母菌報告時，若有三個連續稀釋度的平板菌落數，霉菌在1：10稀釋度的菌落數為多不可計；1：100稀釋度的菌落是110，111；在1:1000稀釋度的菌落是9,8。則樣品中霉菌數為（B）。A、11100 B、11000 C、11050 D、110

第二篇：微生物檢驗員培訓資料

一.基礎知識

（一）微生物基礎知識

1.培養基

培養基是供微生物生長、繁殖、代謝的混合養料。由于微生物具有不同的營養類型，對營養物質的要求也各不相同，加之實驗和研究的目的不同，所以培養基的種類很多，使用的原料也各有差異，但從營養角度分析，培養基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、無機鹽、生長素以及水分等。另外，培養基還應具有適宜的pH值、一定的緩沖能力、一定的氧化還原電位及合適的滲透壓。

瓊脂是從石花菜等海藻中提取的膠體物質，是應用最廣的凝固劑。加瓊脂制成的培養基在98～100℃下融化，于45℃以下凝固。但多次反復融化，其凝固性降低。

任何一種培養基一經制成就應及時徹底滅菌，以備純培養用。一般培養基的滅菌采用高壓蒸汽滅菌。

（二）消毒與滅菌知識 5.2滅菌方法

滅菌是指殺死或消滅一定環境中的所有微生物，滅菌的方法分物理和化學滅菌法兩大類。本實驗主要介紹物理方法的一種，即加熱滅菌。

加熱滅菌包括濕熱和干熱滅菌兩種。通過加熱使菌體內蛋白質凝固變性，從而達到殺菌目的。蛋白質的凝固變性與其自身含水量有關，含水量越高，其凝固所需要的溫度越低。在同一溫度下，濕熱的殺菌效力比干熱大，因為在濕熱情況下，菌體吸收水分，使蛋白質易于凝固；同時濕熱的穿透力強，可增加滅菌效力。

（三）潔凈室行為規范

（四）實驗室安全知識

二.基本操作

（一）培養基配制、滅菌、使用和保藏

1.配制

1.1 按照培養基瓶簽所示，準確稱量一定培養基干粉于合適的容器，加純化水溶解。

1.2 根據培養基對pH的要求，用5%NaOH或5%HC1溶液調至所需pH。1.3 如需分裝，應先加熱攪拌，待培養基完全溶解并均一后進行。分裝時注意不要使培養基沾染在管口或瓶口，以免污染。液體分裝高度以試管高度的1/4左右為宜。固體分裝裝量為管高的1/5，半固體分裝試管一般以試管高度的1/3為宜；分裝三角瓶，其裝量以不超過三角瓶容積的一半為宜。

1.4 培養基經滅菌后，如需要作斜面固體培養基，則滅菌后立即擺放成斜面，斜面長度一般以不超過試管長度的1/2為宜；半固體培養基滅菌后，垂直冷凝成半固體深層瓊脂。

2.滅菌

2.1 按照培養基瓶簽所示的滅菌條件（溫度和時間）對配制好的培養基進行高壓滅菌。配制好的培養基應在2小時內進行滅菌。3.保藏和使用 3.1 液體培養基管

置專用不銹鋼筒內，2～25℃避光保存，3周內使用。在不銹鋼筒貼標簽，標明培養基名稱、培養基配制日期、高壓滅菌編號等信息。不同批次培養基不得置于同一不銹鋼筒內。3.2平板和接觸皿

置專用不銹鋼筒，標明培養基名稱、制備日期、培養基的滅菌編號，用保鮮膜密封筒口后，2～25℃避光保存，3周內使用。不同批次平板和接觸皿不得置于同一容器內。

3.3 培養基使用之前應預培養，合格后方可使用。

營養瓊脂培養基：25-35℃，預培養3天。硫乙醇酸鹽液體培養基：25-35℃，預培養2天。

虎紅瓊脂培養基和改良馬丁培養基：23-28℃，預培養3天。

（二）消毒劑配制和使用

1.0.1%新潔爾滅溶液的配制和使用

1.1基準處方：5%新潔爾滅溶液20ml ＋

注射用水980ml 1.2 作為手部和衣服浸泡消毒，設備、操作臺面和潔凈室六面擦洗消毒以及地漏消毒用，有效期為3個月。2.75%酒精的配制與使用

2.1 基準處方：95%乙醇790 ml ＋ 純化水210 ml 2.2 作為消毒雙手（手套），擦洗設備、操作臺等表面消毒劑，有效期為14天。

3.2%來蘇兒（甲酚皂）溶液的配制和使用

3.1 基準處方：50%來蘇兒（甲酚皂）溶液40 ml ＋ 純化水960 ml 3.2 拖擦地面用，臨用前配制。4.甲醛熏蒸 作為環境空氣和表面消毒劑。

操作步驟：關閉風機→無關人員撤出消毒區，操作人員戴防護手套和防毒面具→將設備及器具暴露于空氣中→將盛有甲醛溶液的不銹鋼飯盒置不銹鋼臺面→上層飯盒倒入需要體積的甲醛（10ml/m3，每只飯盒不得多于250ml），下層飯盒倒入300ml 95%或無水乙醇→點燃下層飯盒內乙醇，操作人員迅速離開→保留被消毒空間的甲醛氣體至少8小時→消毒結束后，開啟風機，直至消毒空間無甲醛刺激性氣味，方可進入工作。

5.臭氧消毒

5.1 作為環境空氣和表面消毒劑。

5.2 操作步驟：關閉風機→無關人員撤出消毒區，操作人員戴防護手套和防毒面具→將設備及器具暴露于空氣中→設定消毒時間，開啟臭氧法生器面→操作人員迅速離開→保留被消毒空間的臭氧氣體至少8小時→消毒結束后，開啟風機，直至消毒空間無臭氧氣味，方可進入工作。6.消毒劑交替使用

6.1 隔周交替使用0.1%新潔爾滅溶液和75%酒精進行手部消毒。6.2 隔周交替使用0.1%新潔爾滅溶液和2%來蘇爾溶液拖擦地面。6.3 潔凈區每月對空氣消毒一次，甲醛消毒6個月一次，其余時間采用臭氧消毒。

（三）微生物室設備與設施

1.高壓滅菌器

1.1原理：高壓蒸汽滅菌是將待滅菌的物品放在一個密閉的加壓滅菌鍋內，通過加熱，使滅菌鍋隔套間的水沸騰而產生蒸汽,待水蒸汽急劇地將鍋內的冷空氣從排氣閥中驅盡，然后關閉排氣閥，繼續加熱，此時由于蒸汽不能溢出，而增加了滅菌器內的壓力，從而使沸點增高，得到高于100℃的溫度。導致菌體蛋白質凝固變性而達到滅菌的目的。1.2 操作步驟：向高壓滅菌器滅菌艙內加水至排泄管口高度→放入待滅菌物品，關閉滅菌器蓋→開啟電源，設置滅菌溫度和時間以及排氣溫度→按start鍵開始滅菌（依次經歷：升溫—排氣—升壓—保壓—降壓—排氣—降溫）→滅菌結束后，取出滅菌物品，關閉電源→清潔滅菌艙。1.3 注意事項

待滅菌物品間應留適宜間隙，便于蒸汽穿透。

當溫度在80℃以上時，蓋將不會被打開；當溫度低于60℃時，即可開蓋。每次滅菌前應保持滅菌艙內水位在規定線以上。

干熱滅菌法常用于空玻璃器皿、金屬器具的滅菌。凡帶有膠皮的物品，液體及固體培養基等都不能用此法滅菌。

5.2.2.2干燥箱滅菌

將包扎好的物品放入干燥烘箱內，注意不要擺放太密，以免妨礙空氣流通；不得使器皿與烘箱的內層底板直接接觸。將烘箱的溫度升至160～170℃并恒溫1～2h，注意勿使溫度過高，超過170℃，器皿外包裹的紙張、棉花會被烤焦燃燒。如果是為了烤干玻璃器皿，溫度為120℃持續30分鐘即可。溫度降至60～70℃時方可打開箱門，取出物品，否則玻璃器皿會因驟冷而爆裂。

用此法滅菌時，絕不能用油、蠟紙包扎物品。

5.2.2.3火焰滅菌

直接用火焰灼燒滅菌，迅速徹底。對于接種環，接種針或其它金屬用具，可直接在酒精燈火焰上燒至紅熱進行滅菌。此外，在接種過程中，試管或三角瓶口，也采用通過火焰而達到滅菌的目的。

2.烘箱（干熱滅菌）

2.1 原理：通過使用干熱空氣殺滅微生物。一般是把待滅菌的物品放入電烘箱中烘烤，加熱至160～170℃維持2h（除熱原要求250℃維持1h）。2.2 操作步驟：將待滅菌物品正確包扎與加塞，以免滅菌后被外界污染→將包扎好的物品放入干燥烘箱內→ 3.超凈工作臺 4.培養箱 5.集菌儀 6.傳遞窗 7.潔凈室

（四）平板和接觸皿制備

將需倒平板的培養基，于水浴鍋中冷卻到45～50℃,立刻倒平板。

（五）微生物數量測定

三.檢驗項目

（一）微生物限度檢查

（二）無菌檢查

（三）環境監控檢查

（四）模擬灌裝檢查

（五）培養基靈敏度檢查

（六）菌株傳代與保藏

四.其它

（一）微生物形態觀察（菌落形態、染色與鏡檢）

（二）微生物分離純化培養

（三）API法鑒定微生物

（四）PCR法鑒定微生物

7思考

7.1制備培養基的一般程序是什么？

7.2做過本次實驗后，你認為在制備培養基時要注意些什么問題？

7.3滅菌在微生物學實驗操作中有何重要意義？

4試述高壓蒸汽滅菌的操作方法和原理。

5高壓蒸汽滅菌時應注意哪些事項？

標準菌種的保藏形式

我國提供的標準菌種通常是以凍干粉的形式包裝于熔封的厚玻璃容器中。在這種容器中，微生物通常與賦形劑共存，由于缺乏生長必須的環境條件，一般呈休眠狀態。

純培養

所謂微生物的純培養是指在一個微生物的菌落形成單位中，所有的微生物細胞或孢子都屬于生物學的同一個種。嚴格地說，純培養是在培養基上由一個細胞或孢子分裂、繁殖而產生的后代。在該細胞或孢子的生長過程種，不受其他微生物的侵犯，不會在培養物中產生另外微生物種的后代，在整個生長過程中不發生變異或死亡。獲取純培養的工作環境

1、潔凈工作室：環境潔凈度10000級下的局部100級的單向流空氣區域內，全過程必須無菌操作，防止微生物污染。

2、無菌隔離艙 獲取純培養的接種工具

1、接種環

2、接種針

3、接種鏟

4、接種鉤

5、其他玻璃器械 獲取純培養的其他器具

1、玻璃器皿：如各種規格培養皿。

2、微生物實驗室常用的設備，如高壓滅菌鍋、恒溫培養箱等 獲取純培養的主要技術－移植（又稱接種）

微生物的移植（或稱接種）是指將微生物接種在培養基上的操作。移植（又稱接種）的兩種方式－劃線 和穿刺

1、劃線法是指用接種工具將微生物細胞移植在固體培養基斜面或平板上的一種方法。

2、穿刺法是指用接種工具將微生物細胞移植到固體或半固體培養基內的一種方法。影響集菌培養效果的若干因素

?溫度 ?滲透壓 ?氧氣 ?光 ?pH值和氧化還原電位

?培養基 ?抗生素

驗證純培養的主要依據

1、用顯微鏡觀察時，全部的生物個體是相似的，如果是細菌，對革蘭氏染色反應應當是一致的。

2、將培養物制成懸液，重新傾注平板，或平板劃線培養后，所形成的全部菌落的形態應該是相似的。如果是細菌，將重新形成的菌落各作穿刺培養，其培養特征應當是一致的。

3、從重新分離的各菌落作生理特征觀測時，如對氮源的利用，對糖類的發酵或同化以及其他生理生化的測定，應呈現出一致性。定期移植保藏法

一般步驟為：將菌種接種在所要求的培養基上，置最適溫度下集菌培養。得到健壯的菌體（如有性孢子、無性孢子或細胞等）后，放于溫度較低、干燥處保藏，并且每隔一定時間重新移植培養一次。定期移植保藏法

1、細菌置4～6℃保藏，芽孢桿菌每3～6個月移植一次，其他細菌每月移植一次。

2、放線菌于4～6℃保藏，每3個月移植一次。

3、酵母菌于4～6℃保藏，每4～6個月移植一次。

4、絲狀真菌于4～6℃保藏，每3個月移植一次。

5、擔子菌于4～6℃保藏，每3個月移植一次。

6、保藏的濕度通常在50％～70％為宜。定期移植保藏法

1、需定期檢查

2、移植進行時，應仔細核對

3、集菌培養完成后，應比較培養特征

4、應注意觀察各代之間的變化 瓊脂斜面低溫保藏法

1、菌種的典型菌落接種至斜面，規定的溫度和時間培養，充分生長，硅膠塞換成無菌橡膠塞。4～6 ℃冰箱保藏

a:1～3個月移植一次，繼續保藏。

b:用半固體高層培養基穿刺培養，可保藏半年至一年。瓊脂斜面低溫保藏法

?適用細菌、霉菌、酵母菌及放線菌保藏 ?優點：簡便、大多數微生物適用

?缺點：保藏期短；傳代次數多；容易發生變異及污染。

?生孢梭菌用硫乙醇酸鹽培養基、乙型溶血性鏈球菌及肺炎球菌用血肉湯（瓊脂）培養基

液體石蠟保藏法

一般步驟為：準備液體石蠟并滅菌去水備用。獲得需要保藏菌種的純培養，將液體石蠟注入培養容器中，并完全覆蓋培養基。

液體石蠟液面以高出培養基上端0.5～1cm為宜 4～6 ℃冰箱保藏

液體石蠟保藏法 甘油冷凍保藏法

?將保藏菌種接種瓊脂斜面上，適宜溫度下培養適宜時間，用無菌接種環輕輕刮取菌苔，并通過接種環與試管壁之間的輕輕摩擦使菌種充分擴散到無菌水中，調證菌液濃度，向已制備好的菌懸液加入等體積的20％無菌甘油，輕輕振試管管，使內容物充分混合，分裝于無菌小管。甘油冷凍管最好在-30 ℃貯存。沙管保藏法 ?制備沙管 ?培養接種 ?制備菌懸液 ?混菌 ?干燥 ?保藏

?適合保藏芽孢桿菌、梭菌、放線菌和一些絲狀真菌。

土壤保藏法

?用土壤替代沙管保藏法中的河沙，其余操作與沙管保藏法相同 ?適合保藏土壤細菌、放線菌和絲狀真菌，時間為

2～6年。

硅膠保藏法

?用硅膠替代沙管保藏法中的河沙，其余操作與沙管保藏法相同 ?適合保藏酵母菌和某些絲狀真菌

濾紙保藏法

?保藏微生物細胞或孢子的載體為濾紙。

?對細菌、酵母菌、絲狀真菌等都有一定的效果，有些菌種最長可達

17年明膠片保藏法

?制備無菌營養明膠 ?制備無菌石蠟濾紙

?微生物培養并制成濃厚的懸液 ?在懸液中加入營養明膠

?將含微生物細胞或孢子的營養明膠滴于石蠟濾紙表面 ?干燥

?將形成的明膠片密封保藏

麩皮保藏法

?我國歷史悠久的微生物保藏法

?適于保藏根霉、曲霉、青霉、紅曲霉等屬和赤霉菌

梭氏真空干燥保藏法

?在小試管中放置菌懸液

。?小試管在大試管中放置 ?大試管在真空狀態下干燥 ?密封大試管

液體直接干燥保藏法

?需要加入保護劑 ?干燥之前不需凍結

?在干燥過程中為增大蒸發面積，可加入多孔材料 ?干燥后的容器應熔封

蒸餾水保藏法

?最為簡便的微生物保藏法

?微生物細胞或孢子保藏在蒸餾水中 ?保藏的容器應密封

?適于保藏棒狀桿菌、土壤桿菌和假單孢菌等

液氮冰箱超低溫保藏法

?需專用設備－液氮超低溫冰箱 ?菌懸液密封于安瓿管內，控速凍結 ?國外已普遍采用 ?保藏時間長

凍結真空干燥保藏法

?歷史悠久，又稱凍干法

?不產生孢子只產生菌絲體的絲狀真菌不宜采用該法 ?適用面廣 ?保藏時間可達10年以上

?多為菌種保藏機構采用

凍結真空干燥保藏法

?密封性好，可避免保藏期間的污染 ?保藏容器體積小，方便攜帶和貯藏 ?保藏時間更長，變異概率更低

普通微生物實驗室適用的保藏技術

?瓊脂斜面低溫保藏法 液體石蠟保藏法 低溫冷凍保藏法 甘油冷凍保藏法 ???

瓊脂斜面低溫保藏法

?細菌置4～6℃保藏，芽孢桿菌每3～6個月移植一次，其他細菌每月移植一次。4～6℃保藏，每3個月移植一次。4～6℃保藏，每4～6個月移植一次。4～6℃保藏，每4個月移植一次。?放線菌于?酵母菌于?絲狀真菌于?擔子菌于4～6℃保藏，每3個月移植一次。

50％～70％為宜。?保藏的濕度通常在菌種保藏的一般規定

1、菌種“代”的確定：2005版藥典規定，以干燥菌種管為第“0”代，由此得到的第一批子代為第一代，以此類推。

2、菌種傳代次數規定：2005版藥典規定不超過5代。

3、菌種應專人保藏、專柜貯藏，認真做好登記，統一編號，按期傳代，并做好有關檢驗記錄。

4、保存菌種傳代或凍干均應填寫專用記錄，菌種管上應有標簽，表明菌種編號、代次、批號、日期。

5、過期菌種應及時處理、登記，經121 ℃30分鐘滅菌消毒。實驗室菌種傳代操作步驟

?

1、接種前用1：1000新潔爾滅擦拭工作臺面，然后開紫外燈消毒30分鐘。

2、自冰箱取出保存工作用菌種，室溫放置20分鐘；溫度平衡后才能傳代。

3、實驗人員進入緩沖間，換鞋、穿無菌衣、戴口罩，用1：1000新潔爾滅溶液??消毒雙手，并將培養基及菌種移入陽性菌接種室。

?

4、點燃酒精燈，將菌種管塞子，通過火焰轉動使稍稍松動，以免接種時粘著打不開。

?

5、接種操作：左手拿住菌種管，將管口靠近火焰旁，右手拿接種棒，將白金耳燒紅約30秒，桿部通過火焰滅菌。挑取少量菌苔；另取，照上述方法在火焰旁打開塞子，將白金耳伸入管內斜面培養基的底部，從下到上將白金耳輕貼斜面培養基的表面作曲折移動。

?

5、接種后，將斜面置規定溫度、時間培養。取出觀察，菌種生長良好，換橡皮塞，貼上標簽，放入冰箱保存。

?

6、細菌一個月傳代一次，枯草芽孢桿菌、短小芽孢桿菌、生孢梭菌、白色念珠菌、黑曲霉可三個月傳代一次。菌種管理

?

1、標準菌種必須從認可的菌種收集途經獲得；實驗室必須建立和保存所有菌種的收集、貯藏、保存、確認試驗的記錄。

?

2、實驗室應有文件管理標準菌種（從原始菌種到工作用菌種）。該程序應包括：

a:標準菌種必須定期傳代，并做確認試驗，包括實驗室在所需要關鍵診斷指標，實驗室必須記錄并保存。

b：每一子菌種都應以適當標簽、標記來表示名稱、標準號、接種日期和傳代日期。

C:每一子菌種都應以標記從原始菌種傳代到工作用菌種的代數；記錄菌種生長的培養基及培養條件；菌種生存條件等。過期菌種處理

?過期菌種應及時清理、登記，并經

℃、30分鐘高壓消毒滅菌。

例1：金黃色葡萄球菌傳代保藏技術

?

1、購置金黃色葡萄球菌（如我所提供的菌種為第二代菌種），假定購置日期為5月21日。

??

2、準備10支營養瓊脂斜面，其中2支用于保藏，其余8支用于當月實驗。

3、于5月22日打開菌種管，接種菌種至上述10支斜面，35 ℃培養16～18小時。

?

4、將10支第三代菌種管做好標簽，置適宜溫度保藏。???5、5月22日至6月22日，可以使用上述第三代菌種管。

6、至6月22日，重復步驟2，得第四代菌種管。

7、至8月22日前，重新購置原種管。

例2：黑曲霉的傳代技術

?

1、制備孢子懸液：取滅菌水或生理鹽水

3～5ml，分2～3次小心滴加至菌種管內（試管斜面），反復振搖。傾取孢子懸液置另一滅菌試管。

?

2、涂布接種：用滅菌滴管吸取懸液滴加至改良馬丁瓊脂培養基斜面，每管滴加2～3滴，轉動試管，使懸液與斜面表面充分接觸 菌種確認試驗

?包括以下幾個方面：

1、菌落生長情況：目測

2、染色鏡檢：

3、生化試驗；(1)糖醇代謝試驗

（2）氨基酸和蛋白質代謝試驗

（3）碳源和氮源利用試驗

（4）酶類試驗

（5）其他試驗 短小芽孢桿菌

確認該菌未發生變異的主要方法為：

1、通過顯微鑒別，為不呈鏈狀排列的桿菌，革蘭氏染色為陽性。

2、營養瓊脂斜面上菌苔光滑，薄，閃光，蔓延，不粘著，常常是淺黃色。

3、生化試驗可選做明膠穿刺、淀粉水解和硝酸鹽還原，結果為明膠緩慢液化，淀粉水解陰性，硝酸鹽還原陰性。

枯草芽孢桿菌

確認該菌未發生變異的主要方法為：

1、通過顯微鑒別，為呈鏈狀排列的桿菌，不形成莢膜，革蘭氏染色為陽性。

2、營養瓊脂斜面上菌苔生長豐厚，粗糙，不透明，不閃光，蠟質，蔓延，奶油色至微褐色。

3、生化試驗可選做明膠穿刺、淀粉水解和硝酸鹽還原，結果明膠呈漏斗形至層狀液化，淀粉水解陽性，硝酸鹽還原陽性。大腸埃希菌

確認該菌未發生變異的主要方法為：

1、通過顯微鑒別，為成對和呈短鏈排列的近球形的桿菌，一般不形成莢膜，革蘭氏染色為陰性。

2、營養瓊脂斜面上菌苔通常白色，有時帶黃白色，濕潤，閃光，蔓延生長。

3、生化試驗可選做明膠穿刺和靛基質試驗、甲基紅試驗、V.P.試驗和檸檬酸鹽利用試驗，結果不液化明膠，靛基質試驗和甲基紅試驗陽性，V.P.和檸檬酸鹽利用試驗陰性。大腸埃希菌

該菌為微生物限度檢查規定不得檢出的控制菌，有一整套完整的鑒定手段，也可參考該方法用于判斷所保藏的菌種有無發生變異。

該鑒定方法主要內容即為經典的IMViC試驗，結果為++--。

銅綠假單孢菌

確認該菌未發生變異的主要方法為：

1、通過顯微鑒別，為單個，成對或呈短鏈排列的桿菌，有運動性，革蘭氏染色為陰性。

2、營養瓊脂斜面上菌苔生長旺盛，薄，白色，閃光，培養基變為綠色至暗褐色或黑色，發熒光。

3、生化試驗可選做明膠穿刺、吲哚和硝酸鹽還原試驗，結果迅速液化明膠，液體呈淺黃綠色或淺藍綠色，吲哚試驗陰性，硝酸鹽還原試驗陽性。

銅綠假單孢菌

該菌為微生物限度檢查規定不得檢出的控制菌，可利用氧化酶試驗和綠膿菌素試驗迅速判斷所保藏的菌種有無發生變異。乙型副傷寒沙門菌

確認該菌未發生變異的主要方法為：

1、通過顯微鑒別，為單個出現的桿菌，有運動性，革蘭氏染色為陰性。

2、營養瓊脂斜面上菌苔淺灰色，濕潤，光滑，半透明。

3、生化試驗可選做明膠穿刺、吲哚、硫化氫和硝酸鹽還原試驗，結果不液化明膠，吲哚試驗陰性，硫化氫陽性，硝酸鹽還原試驗陽性。

乙型副傷寒沙門菌

該菌為微生物限度檢查規定不得檢出的控制菌，可利用三糖鐵瓊脂斜面和血清試驗迅速判斷所保藏的菌種有無發生變異。藤黃微球菌

確認該菌未發生變異的主要方法為：

1、通過顯微鑒別，為呈堆團排列的球菌，革蘭氏染色為陽性。

2、營養瓊脂斜面上菌苔硫黃色到酪黃色，光滑，軟。

3、生化試驗可選做明膠穿刺、硫化氫和硝酸鹽還原試驗，結果緩慢液化明膠成漏斗形，硫化氫陽性，硝酸鹽還原試驗陽性。

金黃色葡萄球菌

確認該菌未發生變異的主要方法為：

1、通過顯微鑒別，為單個或成對呈短鏈和不規則堆團狀排列的球菌，革蘭氏染色為陽性。

2、營養瓊脂斜面上菌苔生長茂盛，半透明，光滑，平坦，濕潤，白色至淺黃色或橙色。

3、生化試驗可選做明膠穿刺、硝酸鹽還原和過氧化氫酶試驗，結果明膠呈囊狀液化，硝酸鹽還原試驗陽性，過氧化氫酶試驗陽性。金黃色葡萄球菌

該菌為微生物限度檢查規定不得檢出的控制菌，可利用血漿凝固酶試驗迅速判斷所保藏的菌種有無發生變異。生孢梭菌

確認該菌未發生變異的主要方法為：

1、通過顯微鑒別，菌體粗大單獨存在或呈短鏈排列，芽孢比菌體寬，芽孢呈梭形，革蘭氏染色為陽性。

2、過氧化氫酶試驗陽性。白色念珠菌

確認該菌未發生變異的主要方法為：

1、通過顯微鑒別，可見卵形細胞，有多邊芽殖現象，有假菌絲。

2、改良馬丁瓊脂斜面上菌苔生長茂盛，光滑，濕潤，菌落呈乳白色。黑曲霉

確認該菌未發生變異的主要方法為：

1、通過顯微鑒別，可見分隔菌絲體，分生孢子穗球形，黑色。

2、改良馬丁瓊脂斜面上菌苔呈黑褐色厚絨狀，色澤均一，無雜色，菌落呈黑色。

第三篇：2014微生物檢驗技術試題2013真題

病例標本送檢，一般常規進行的檢驗包括

A.直接涂片鏡檢，分離培養，生化反應和血清學試驗 B.藥敏試驗，動物實驗，生化反應和血清學試驗 C.直接涂片鏡檢，分離培養，藥敏試驗，動物試驗 D.直接涂片鏡檢，藥敏試驗，動物試驗和血清學試驗 E.染色鏡檢，藥敏試驗，動物試驗和血清學試驗 答案: A 解析: 醫療機構污水微生物樣品應采集 A.各科室沖洗流入下水道的污水 B.患者使用后流入的污水 C.污水貯存池內的污水

D.該機構污水最終排放口的污水 E.手術室流出的污水 答案: D 解析: 能形成草綠色溶血環的細菌是 A.甲型溶血性鏈球菌 B.表皮葡萄球菌 C.炭疽桿菌

D.丙型溶血性鏈球菌 E.嗜血桿菌 答案: A 解析: 同一水源，同一時間采集多類檢測指標的水樣時，應先采集哪項指標的水樣 A.揮發性酚 B.金屬 C.有機物 D.微生物 E.放射性 答案: D 解析: 用于PCR實驗的儀器稱為 A.色譜儀 B.質譜儀 C.酶標儀 D.紫外透射儀 E.DNA擴增儀 答案: E 解析: 6 PCR是

A.補體結合試驗 B.血凝抑制試驗 C.聚合酶鏈反應 D.酶聯免疫吸附分析 E.肥達反應 答案: C 解析: 不會使醫療機構污水中總游離余氯結果偏低的因素是 A.水樣經強光照射 B.水樣經過振蕩 C.水樣經過高溫 D.水樣立即檢測

E.水樣放置一段時間后檢測 答案: D

這是2013年微生物檢驗技術考試原題，因為時間匆忙，剛剛整理完50道題，請考生關注我的空間或者百度“新浪博客 衛生資格考試”，另有復習指導書電子版免費贈！游泳池水細菌總數培是 A.36℃，24h B.37℃,48h C.28℃,24h D.28℃,48h E.44℃,24h 答案: B 解析: 醋酸纖維膜電泳主要用于 A.小分子多肽分離 B.抗原或抗體分離 C.免疫球蛋白分離 D.鹽的分離 E.糖的分離 答案: C 解析: 生活飲用水采樣后如不能立即檢驗，其保存溫度和時間為 A.﹣2℃,4h B.﹣4℃,6h C.0℃,4h D.2℃,4h E.4℃,4h 答案: E 解析: 在做證實試驗時，挑取蠟樣芽胞桿菌在選擇性培養基上的典型菌落的數目為 A.5個 B.10個 C.15個 D.20個 E.25個 答案: A 解析: 紫外分光光度計測量蛋白濃度采用波長是 A.190nm B.220nm C.250nm D.280nm E.300nm 答案: D 解析: 高速離心機的轉速范圍是 A.2000～9000轉/分鐘 B.5000～10000轉/分鐘 C.10000～40000轉/分鐘 D.10000～60000轉/分鐘 E.8000～50000轉/分鐘 答案: C 解析: 關于病原微生物實驗活動管理，正確的是

A.從事病原微生物實驗活動在單位應具有相應等級的生物安全實驗室 B.生物安全三級，四級實驗室應通過國家生物安全認可

C.生物安全一級，二級實驗室不得從事高致病性病原微生物實驗活動

D.實驗室從事與高致病性病原微生物有關的科研項目，無需生物安全實驗室

E.實驗結束后，非保藏機構應及時將病原微生物就地銷毀或者移交保藏機構保管 答案: 解析: 分子篩層析法的原理是 A.凝膠介質形成多孔網狀結構 B.介質帶電荷不同 C.蛋白質的溶解度不同

D.蛋白質與介質吸附能力不同

E.蛋白質分子與其對應的配體異性結合 答案: A 解析: DNA用EB染色后，用何種光線激發觀察 A.目光 B.熒光 C.可見光 D.紫外光 E.激光 答案: D 解析: 瓊脂糖凝膠電泳分離DNA片段的最佳范圍為 A.10bp至50bp B.200bp至50kb C.500bp至100kb D.900bp至100kb E.1kb至100kb 答案: B 解析: 食品衛生微生物檢驗中，對進口食品的陽性檢測樣本保存期限是 A.3天 B.1個月 C.三個月 D.六個月 E.十個月 答案: D 解析: 在油性液體化妝品供檢樣品制備過程中，乳化條件是 A.28～32℃水浴中乳化 B.35～39℃水浴中乳化 C.40～44℃水浴中乳化 D.45～49℃水浴中乳化 E.50-54℃水浴中乳化 答案: C 解析: 對生活飲用水進行水質微生物檢測時，采集樣品的聚丙烯容器滅菌最常用的方法是 A.紫外線消毒 B.干熱滅菌 C.巴氏消毒 D.高壓蒸氣滅菌 E.次氯酸滅菌 答案: D 解析: 副溶血性弧菌在三糖鐵培養基中的反應不包括 A.底層變黃葡萄產酸產氣 B.斜面不變色 C.不產硫化氫 D.有動力 E.不分解蔗糖 答案: A 解析: 關于化妝品微生物檢驗，錯誤的是 A.進口產品應為市售包裝 B.產品應在有效期內 C.檢驗前樣品應保存在陰涼干燥處 D.檢驗時從2個以上包裝中取混合樣品 E.檢驗時用樣總量一般為5g或5ml 答案: E 解析: 民航飛機座艙內的臭氧主要來源是 A.大氣環境 B.機內儀器 C.機內座椅 D.機內人員活動 E.乖客攜帶的行李 答案: B 解析: 做ELISA反應時，用酶標比色測定的指標是 A.激發光 B.透射光 C.濾光度 D.透光度 E.吸光度 答案: E 解析: 《醫療機構污水排放要求》GB18466-2001，規定經處理和消毒后的醫療機構污水需檢測的指標不包括 A.總余氯 B.糞大腸菌群 C.腸道致病菌

D.結核病醫療機構增測結核桿菌 E.金黃色葡萄球菌 答案: E 解析: 在醫療工作中，對青霉素的耐藥株高達90%以上的菌株是 A.鏈球菌 B.肺炎球菌

C.金黃色葡萄球菌 D.傷寒桿菌 E.四聯球菌 答案: C 解析: 公共場所中無需進行細菌總數檢測的是 A.空氣

B.茶具，餐具 C.毛巾，床上臥具 D.理發用具

E.浴盆，臉（腳）盆 答案: 理發用具 解析: D 28 我國《病原微生物實驗室生物安全條例》中對病原微生物的分類和危害等級的描述是 A.分為三類，第三類危險程度最高 B.分為四類，第四類危險程度最低 C.分為四類，第一類危險程度最低 D.分為四類，第四類危險程度最高 E.分為三類，第一類危險程度最高 答案: B 解析: 沙門菌檢驗中使用的增菌液TTB是指 A.緩沖蛋白胨水

B.亞硒酸鹽胱氨酸增菌液 C.氯化鎂孔雀綠增菌液 D.四硫酸鈉煌綠增菌液 E.堿性蛋白胨水 答案: D 解析: 以下觀察結果中，不符合志賀菌的是 A.在TSI瓊脂上不發酵乳糖和蔗糖 B.在TSI瓊脂上發酵葡萄產酸不產氣 C.在TSI瓊脂上不產H2S D.動力陽性 E.革蘭陰性桿菌 答案: D 解析:

茶具及餐具微生物檢測樣品的測定中，錯誤的是 A.采用涂抹法采樣

B.采樣對象為清洗消毒后準備使用茶具或餐具 C.采樣面積為25c㎡大小 D.口唇接觸處

E.送檢時間為4h以內 答案: C 解析:

采集自來水常用的中和試劑是 A.硫代硫酸鈉 B.甘氨酸 C.卵磷脂 D.吐溫-80 E.卵磷脂和吐溫-80 答案: A 解析:

建立生物安全管理體系的主要目的不包括 A.防止病原微生物污染儀器 B.防止病原微生物污染環境 C.防止實驗室發生意外事故

D.防止病原微生物實驗者的自身感染 E.防止出現陰性實驗結果 答案: E 解析:

關于實驗室記錄管理要求，錯誤的是 A.實驗室記錄可輸入計算機或書面記錄 B.可將記錄保存于實驗室供留底查詢 C.輸入計算機的記錄應定期整理 D.書面記錄保存5年后可銷毀 E.相應的影像資料應長期保存 答案: D 解析:

關于食品采樣的敘述，錯誤的是 A.用無菌刀、勺和無菌容器采樣 B.每一個獨立包裝為一件 C.大樣為一整批樣品 D.中樣為200g E.小樣為25g 答案: B 解析:

單核細胞增生李斯特菌在哪個溫度范圍內易見到動力 A.37～42℃ B.35～37℃ C.20～25℃ D.10～20℃ E.0～4℃ 答案: 解析: C 37 醫療機構污水糞大腸菌群監測頻率是 A.每周不少于1次 B.每月不少于1次 C.每3月不少于1次 D.每半年不少于1次 E.每年不少于1次 答案: B 解析:

在核酸電泳中，不同構象DNA泳動率通常是 A.線性＞切口環狀＞超螺旋 B.超螺旋＞線性＞切口環狀 C.超螺旋＞切口環狀＞線性 D.線性＞超螺旋＞切口環狀 E.切口環狀＞超螺旋＞線性 答案: B 解析:

鑒定金黃色葡萄球菌重要的試驗是 A.吲哚試驗 B.嗜鹽性試驗 C.血漿凝固酶試驗 D.鏈激酶試驗 E.肝菌肽試驗 答案: C 解析:

HEPA過濾器一般采取的消毒方式是 A.戊二醛 B.甲醛熏蒸 C.電離輻射 D.75%乙醇 E.氯己定消毒 答案: B 解析:

對流電泳試驗中，常用的緩沖液是 A.巴比妥緩沖液 B.碳酸鹽緩沖液 C.醋酸鹽緩沖液 D.磷酸鹽緩沖液 E.硫酸鹽緩沖液 答案: A 解析:

微生物實驗室常用的測定細菌濃度的儀器名稱是 A.蛋白測序儀 B.紫外分光光度計 C.可見分光光度計 D.酶標儀 E.色譜儀 答案: C 解析:

對微生物實驗室廢棄物的處理，正確的做法是 A.高壓蒸汽滅菌或干烤處理 B.化學消毒劑或干烤處理

C.陰性檢測結果的標本不需處理可直接丟棄 D.高壓蒸汽滅菌或化學消毒劑處理 E.僅化學消毒劑處理 答案: D 解析:

關于食品中糞大腸菌群檢驗的敘述，錯誤的是 A.采用多管發酵法 B.將處理好的檢樣接種乳糖膽鹽培養基 C.將初發酵陽性培養物接種EC肉湯

D.將EC肉湯管中產氣者分別轉種于伊紅美藍平板 E.取典型菌落接種乳糖發酵管進行證實試驗 答案: E 解析:

濾膜集菌法監測醫療污水的結合桿菌時，需要抽濾的樣品量是 A.50ml B.100ml C.200ml D.300ml E.500ml 答案: C 解析:

檢驗食品中的志賀菌，首選的條件是 A.接種營養肉湯，36℃±1℃培養8h B.接種營養肉湯，36℃±1℃培養24h C.接種GN增菌液，36℃±1℃培養8h D.接種GN增菌液，36℃±1℃培養24h E.接種亞硒酸鹽胱氨酸增菌液，36℃±1℃培養18～24h 答案: C 解析:

進行食品的小腸結腸炎試驗時，所有的生化反應培養溫度是 A.20℃ B.26℃ C.30℃ D.36℃ E.42℃ 答案: 解析:

下列不屬于腸桿菌科的是 A.枸櫞酸桿菌屬 B.克雷伯菌屬 C.愛德華菌屬 D.鮑特菌屬 E.腸桿菌屬 答案: D 解析:

制備細菌外膜蛋白可用 A.SDS裂解 B.酚、氯仿作用 C.PEG6000作用 D.超聲波破碎

E.SDS及氯仿作用 答案: A 解析:

關于離子交換層析法的敘述，錯誤的是 A.主要用于分離和純化蛋白質 B.常用的介質是纖維素

C.原理是介質形成的篩孔網狀結構 D.流動相是梯度離子緩沖液

E.分步收集洗脫液使物質分離純化 答案: B 解析:

第四篇：微生物檢驗技術總結

微生物檢驗技術總結

一．名詞解釋

1.微生物：一群肉眼看不見的微小生物，如細菌、真菌、病毒。必須借助于光學顯微鏡或電子顯微鏡放大數百倍，千倍，甚至數萬倍才能觀察到的低等生物體。

2.細菌：是一類體積微小，結構簡單，以二分裂的方式繁殖，對抗生素敏感的原核細胞型單細胞微生物。

3.細菌的生化反應：利用生化試驗檢測細菌對各類基質的代謝作用及其代謝產物的試驗方法。

4.內毒素：是革蘭陰性菌細胞壁的脂多糖，當菌體死亡崩解后，才可釋放到菌體外。5.外毒素：是由革蘭陽性菌及部分革蘭陰性在生活過程中合成并可釋放到菌體外的毒性蛋白質，毒性強而且有高度的選擇性。

6.抗生素：是由某些微生物在代謝過程中產生的、能抑制或殺滅某些其他微生物和腫瘤細胞的微量生物活性物質。

7.正常菌群：在正常情況下，人體的體表及其與外界相通的腔道，（上呼吸道、口腔、泌尿生殖）都有一定種類和數量的微生物寄生，這些微生物通常對人體是無害的，甚至有益，8.條件致病菌：在正常情況下不致病，但在特定條件下能引起疾病的菌群，稱為條件致病或機會致病菌。

9.菌群失調：是指宿主某些部位正常菌群中各菌群之間的比例發生了大幅度的變化，由生理性組合轉變為病理性組合的狀態。

10.消毒;是指殺死物體上的病原微生物但不一定能殺死細菌芽孢的方法。

11.滅菌：是指殺滅物體上所有的微生物（包括病源微生物、非病源微生物、和細菌芽孢）的方法

12.無菌：是指沒有活的微生物存在。

13.無菌操作：防止微生物進入機體或其他操作對象的方法，二．填空題

1.微生物的類型：非細胞性微生物（病毒），原核細胞型微生物（細菌、放線菌、衣原體、支原體），真核細胞性微生物（真菌）2.寄居于人類的微生物可分為：（1）正常微生物群或正常菌群（2）條件致病微生物（3）病源微生物

3.革蘭陽性菌細胞壁特有組分

a)磷壁酸;由核糖醇和甘油殘基經磷酸二酯鍵交聯而成的多聚物。b)磷壁酸功能：抗原性強，是陽性菌表面重要抗原（分型），并與細菌的黏附（致病）有關。

c)表面蛋白：致病和抗原性有關。4.革蘭陰性菌細胞壁特殊組成

? 外膜：位于肽聚糖層外，由內向外依次為： 脂蛋白、脂質雙層、脂多糖 5革蘭陰性菌細胞壁特殊組成

脂蛋白:外膜最內層，連接肽聚糖和外膜層。

脂質雙層：結構類似細胞膜，中間鑲嵌有外膜蛋白——孔蛋白

6、革蘭陰性菌細胞壁特殊組成

? 脂多糖:由脂質A、核心多糖和O-特異多糖組成，又稱細菌內毒素。——外膜最外層 ? 周漿間隙 膜磷壁酸

Ｇ＋ 菌細胞壁

壁磷壁酸

特殊結構

表面蛋白：SPA、M蛋白

Ｇ－

脂質雙分子層

特殊結構

脂蛋白

類脂Ａ：毒性部分

(外膜)

脂多糖（LPS，內毒素）：

核心多糖：屬和組特異

特異多糖：種和型特異

7.。革蘭陰、陽性細菌細胞壁的比較

? 特征

革蘭陽性

革蘭陰性 ? 肽聚糖層次

～50

1～2 ? 化學組成肽聚糖

外膜

磷壁酸

肽聚糖

? 厚度

厚

薄

(20~80nm)

(10~15nm)? 外膜

無

有 ? 周漿間隙

存在于某些菌種

存在于全部菌種 ? 孔蛋白

無

有 ? 分子滲透性

高滲透性

低滲透性 8.細胞壁的功能

1.維持細菌細胞固有外形，保護細菌。2.和細菌細胞膜共同完成物質的交換。

3.細胞壁上的多種抗原決定簇，決定了抗原性。

9.細菌L型

? 即細胞壁缺陷細菌，細胞壁部分或完全缺陷的細菌

? 革蘭陽性菌的L型細菌稱為原生質體,必須在高滲環境中才可存活。? 革蘭陰性菌的L型稱原生質球,因其肽聚糖層受損后外膜仍存在，在低滲環境中仍有一定的抵抗力。

10.細菌L型特性

? 染色性發生改變，多為革蘭陰性。? 形態發生改變，呈多形性。? 僅能在高滲環境中存活

? 菌落表現為：油煎蛋樣、顆粒樣、絲狀 11.莢膜的功能

1、抗吞噬作用，與毒力有關。

2、抗有害物質損傷作用。

3、具有粘附作用，有助于細

菌的定植(和致病有關)

4、鑒定細菌

5、免疫原性

6、抗干燥作用

12.細菌的特殊結構 ? 鞭毛

? 附著于多種細菌（如大多數桿菌、少數球菌、全部弧菌及螺菌）菌體上的細長而呈波狀彎曲的絲狀物。

? 分為單毛菌、雙毛菌、叢毛菌、周毛菌

? 菌毛（詳見后述）

? 比鞭毛更為纖細、短而直的絲狀蛋白附屬物。? 分為普通菌毛、性菌毛

13.芽胞的功能和作用

1.對熱力、干燥、輻射、化學消毒劑等具有強大抵抗力； 2.可以是否殺死芽胞作為物品消毒滅菌判斷效果的指標；

3.芽胞在菌體的位置和直徑大小隨菌種不同有 助于細菌鑒別。14.細菌的菌毛(Ⅰ)

? 化學成分：菌毛蛋白，具有抗原性。? 功能：

普通菌毛：是一種粘附結構，又稱定植抗原，與致病性有關。

性菌毛：接合時傳遞遺傳物質

第五篇：2015年微生物檢驗技術高級職稱考試模擬題及答案

2015年微生物檢驗技術高級職稱考試模擬題及答案

單項選擇題每題1分以下每道考題有五個備選答案請選擇一個最佳答案。

1、CPE于普通光鏡下可見 A、染色質邊移

B、膜蛋白被病毒編碼蛋白取代 C、細胞變圓、脫落 D、膜通透性增加 E、核仁結構發生變化

正確答案C

2、包涵體檢查在下列哪種病毒感染中有重要意義 A、流感病毒 B、巨細胞病毒 C、呼吸道合胞病毒 D、EB病毒 E、副流感病毒

正確答案B

3、保藏病毒毒種最好的方法是 A、-20℃冷藏 B、液氮保存

C、50中性甘油保存 D、冷凍真空干燥法 E、動物接種

正確答案D

4、病毒包膜 A、是病毒的基本結構 B、是由病毒基因編碼的產物 C、不被脂溶劑除去 D、具有宿主細胞脂類的特性 E、與致病性無關

正確答案D

5、病毒不同于衣原體的特點是 A、能通過細菌濾器 B、對抗生素不敏感 C、可引起機體多部位感染 D、嚴格地細胞內寄生 E、在感染細胞內可形成包涵體

正確答案B

6、病毒的測量單位是 A、厘米 B、毫米 C、微米 D、納米

正確答案D

7、病毒的基本化學組成為 A、DNA蛋白質 B、RNA蛋白質 C、DNARNA蛋白質 D、DNARNA蛋白質包膜 E、核酸蛋白質

正確答案E

8、病毒的結構蛋白不包括 A、衣殼蛋白 B、早期蛋白 C、包膜蛋白 D、核蛋白 E、基質蛋白

正確答案B

9、病毒的特征中下述哪一項是不正確的 A、非細胞結構 B、只含一種核酸 C、必須在活細胞內增殖 D、二分裂法繁殖 E、對干擾素敏感

正確答案D

10、病毒的遺傳信息儲存部位在 A、染色體 B、質粒 C、DNA或RNA D、DNA E、RNA

正確答案C

11、病毒的增殖方式是 A、復制 B、二分裂 C、分枝 D、減數分裂 E、芽生

正確答案A

12、病毒分類的依據通常不包括 A、核酸 B、衣殼 C、包膜 D、刺突 E、形態

正確答案D 答案解析

對病毒分類的原則是 ①核酸類型與結構 ②病毒體的形狀和大小

③病毒體的形態結構衣殼的對稱性型、有無包膜

④對脂溶劑的敏感性等。病毒可根據傳播途徑或感染部位分為蟲媒病毒、腸道病毒、肝炎病毒、呼吸道病毒、性傳播病毒等。

13、病毒復制過程中可產生RNA-DNA雜交體的是 A、ssRNA病毒 B、dsRNA病毒 C、dsDNA病毒 D、逆轉錄病毒 E、一ssRNA病毒

正確答案D

14、病毒復制周期中隱蔽期是指 A、吸附 B、穿入 C、脫殼 D、生物合成 E、成熟裝配

正確答案D

15、病毒核衣殼的化學組成主要是 A、核酸 B、蛋白質 C、核酸和蛋白質 D、脂蛋白和糖蛋白

E、核酸、蛋白質、脂類和糖類

正確答案C

16、病毒可通過以下哪種途徑在體內傳播 A、胎盤或產道傳播 B、沿神經傳播 C、蟲媒傳播 D、水平傳播 E、消化道傳播

正確答案B

17、病毒滅活是指在理化因素作用下使病毒失去 A、血凝特性 B、抗原性 C、感染性 D、細胞融合特性 E、誘生INF的特性

正確答案C

18、病毒侵入細胞需首先吸附于細胞膜上特異受體下述哪一項是不正確的

A、病毒與受體相互作用決定了感染的細胞親嗜性 B、病毒與受體相互作用決定了病毒核酸是否具有感染性 C、病毒與受體相互作用可被中和抗體阻止

D、若宿主細胞表面的受體已被結合可出現病毒感染干擾現象 E、各種病毒的受體不同

正確答案E

19、病毒所合成的晚期蛋白的功能是 A、抑制宿主細胞蛋白質的合成 B、合成包涵體的基質蛋白 C、構成病毒衣殼蛋白 D、抑制宿主細胞核酸的合成 E、合成子代核酸所需要的DNA多聚酶

正確答案C

20、病毒特征的描述不正確的是 A、非細胞微生物 B、考復制方式增殖 C、多對抗生素不敏感 D、多對干擾素敏感 E、以出芽方式繁殖子代病毒

正確答案E

21、病毒體的基本結構為 A、核心 B、衣殼 C、包膜 D、核衣殼 E、核酸 正確答案D

22、病毒體是

A、有感染性的病毒顆粒 B、脫殼后仍有感染性的病毒核酸 C、有包膜的病毒顆粒 D、僅含核酸和衣殼的病毒顆粒

E、成熟的、完整的、具有感染性的病毒顆粒

正確答案E

23、病毒條件性突變株產生的原因是 A、病毒基因組突變 B、病毒基因交叉復活 C、病毒基因重組 D、病毒間互補作用 E、病毒間的加強作用

正確答案A

24、病毒以何種方式繁殖 A、二分裂繁殖 B、復制方式增殖 C、裂殖方式 D、芽生方式 E、孢子形成

正確答案B