第一篇：分子生物學教學改革總結2014-7-7

高校課堂教學改革工作總結

（陳珂珂）

本學期在2012級生物技術專業進行了《分子生物學》課程教學改革的初步嘗試，以改變傳統的“教師教、學生學”的死板的課堂教學為目的，促進學生的學習積極性和對知識掌握的牢固性，我從兩個方面著手進行了改革，改革的效果和不足總結如下：

一、課堂測試及課后作業

大學的教學比較開放，教師對課堂的管理較中學松懈很多，教師對學生知識的掌握程度了解度不夠，學生基本靠自主學習，有部分同學的學習就比較盲目無重點。同時在課下，教師監督不到位的情況下，很多同學就隨波逐流，放縱自我。期末考試就靠臨時抱佛腳，考試成績也并不理想。

因此，本學期開始，除了在課堂上對重點難點反復強調講解之外，在本章節結束后，也會對本章的重點知識布置課后作業，促使學生在課下也能夠復習課堂內容，及時消化吸收。同時對于一些比較難以理解的內容，利用這種形式也促使學生能夠主動查閱少量的文獻資料。在課程進行一半時，進行課堂測驗，檢驗學生對前面課程內容的掌握情況，以在今后的教學中更好的有的放矢。

本學期共布置了2次課后作業，進行了1次課堂測驗。從結果來看，課后作業完成較好，但不乏部分同學抄襲的痕跡。從課堂測驗的分數來看，大部分同學能夠掌握理解大部分的知識，少部分同學測試成績很不理想。

二、討論教學

在分子生物學的教學中，設置了兩個專題講述，一個是PCR技術，在實驗課中完成。二是人類基因組計劃，由學生討論完成。討論式教學的目的是為了增加課堂的趣味性，及學生參與的積極性，從中也能檢驗出學生的提出問題解決問題的能力、自我收集材料的能力，小組成員之間的相互配合情況等等方面的素質。

1.教學程序，提前3周由教師提出計劃，簡單介紹人類基因組計劃（HGP），將專題內容分為5個小部分，分組進行資料查詢和ppt制作，以小組為單位匯報，其他小組提問，由教師打分，總時間為2個課時。小組匯報內容分別是：（1）HGP介紹

（2）HGP之遺傳圖譜的繪制

（3）HGP之物理圖譜的繪制

（4）HGP之序列圖譜的繪制

（5）HGP之轉錄圖譜的繪制

根據學生的講述，最后將提出的問題進行匯總，并以課后作業的形式布置給學生，讓其在課下繼續查閱文獻資料，進行回答。問題如下：

（1）HGP的意義何在？

（2）繪制遺傳圖譜時，分子標記有哪些？（3）物理圖譜和遺傳圖譜的區別？（4）什么是STS標簽，并舉例說明？（5）EST序列是什么？作用是什么？（6）DNA測序方法有哪些？ 2.效果

討論的效果沒有達到預期效果，學生的ppt制作、講解及對內容的理解充分。大家除了對小故事很感興趣外，對于專業的知識不慎熱衷，查閱資料不充分，對于前沿的英文文獻置之不理。這也充分說明學生的自主學習能力還不夠，教師的督促也不能有絲毫的放松。

3.不足

這次討論課存在著很多的不足。第一，高估了學生的知識儲備，設置的專題有點難度，不夠大眾化。第二，教師的不足，在任務布置下去之后，沒有及時的進行監督檢查。第三，課時設置不足，在以小組為單位的討論中，由于時間限制，兼顧不到每個人的發言。

總結：這次嘗試不是很成功，這些經驗不足的積累，以期指導今后的教學改革工作。

第二篇：分子生物學課程教學改革初探

分子生物學課程教學改革初探

摘要：文章總結了在十余年分子生物學教學過程中，不斷開展的對教師自身綜合素質和能力、教學內容、教學方法和教學手段的改革探索，旨在提高分子生物學的教學效果。實踐證實，新的教學模式，在傳授學生專業知識的同時，激發了學生的學習興趣，改進了學生的學習方法，也逐步提高了學生的自主學習能力，從而滿足了社會對高素質創新型生物人才的需求。

關鍵詞：分子生物學；課程教學；改革研究；創新生物學人才

中圖分類號：G642.0 文獻標志碼：A 文章編號：1674-9324（2016）26-0128-03

前言：

分子生物學的目標是在分子水平上闡明細胞活動的規律，從而揭示生命的本質[1]。雖然它在生物類專業課程體系中充當著重要角色，對生命科學的發展起著至關重要的作用，但是分子生物學的教學卻因為課程內容多，學科交叉廣，理解難度高，信息量大，知識更新快而使教學效果差強人意，集中表現為教師授課難和學生學習難。這種現狀不但困擾著老師和同學，也與大學培養高素質創新型人才的目標不相適應。如何克服分子生物學課堂教學的“瓶頸”？本人在從事十多年的分子生物學教學過程中，努力研究和探索多種形式的教學改革，力求提升教學效果和教學質量。

一、教學內容的合理組織

分子生物學的教學除了選用好的教材，制定完善的教學大綱，如何組織教學內容是教學的一個非常重要環節[2]。教學內容呈現給學生的應該是完整、清晰的、有層次、條理的知識。我們在組織教學的過程中，首先從提高自身學科素養著手。“一本教材書，數種參考書”，除分子生物學國內、國外各類版本外，與分子生物學相互交叉和滲透的其他學科，如細胞生物學、生物化學、遺傳學，我們也都進行了系統的學習和強化，不斷夯實專業知識、拓展專業領域，基本構建了分子生物學完整的知識體系，具備了對教材處理的前提。既避免了教學中各學科的重復，也進一步凝練了知識。此外，我們還通過網絡教學平臺向全國優秀教師學習，在不斷的探索中總結出了教學內容合理組織的一些思路。

1.思維導學模式。在DNA復制教學環節，知識點多，并且較分散，很容易在教學中造成學習困難和知識混淆的現象，針對這章教學的特點，我們采用了思維導學模式，收到了非常好的教學效果。

2.重點、難點解讀。本科教學形式多樣化，也更提倡學生的自主學習，但并不是淡化了教師的教學，反而對教師提出了更高的要求[3]。教師必須圍繞每堂課的教學目的，合理組織和引導學生理解并掌握教學的重點和難點內容。

比如在講解染色體端粒末端修復機制中，教師首先要從教材的知識結構中梳理出重點。染色體端粒末端修復機制的知識點包括：（1）引物切除造成的遺傳信息缺失；（2）端粒末端的特點；（3）體細胞和性細胞末端修復機制的不同；（4）DNA結構的變化；（5）端粒酶的修復機制。梳理知識點后，總結教學重點：一是引物切除后損傷修復在體細胞和性細胞中的不同；二是四鏈DNA結構；三是端粒酶的修復機制。其中端粒酶修復機制的講授是學生學習的難點。難點集中在端粒酶的性質和修復發生的過程。

經過對教學內容中重點和難點的準確把握和合理組織，教師才能在課堂教學中突出重點、突破難點，讓學生的課堂學習無障礙。

二、教學方法和手段的改進

教學方法的推陳出新，是教學改革的重要內容[4]。為發揮學生作為教學主體的能動性，我們根據具體的教學內容設置了啟發式、聯想式、探究式等多種教學方法[5]，讓學生參與到教學過程中，不僅活躍了課堂氣氛，而且在分享知識的同時，更注重教會學生靈活掌握學習的方法。

1.啟發式教學。啟發的目的在于舉一反三，觸類旁通。針對每一次的課堂教學，設計一些拋磚引玉的問題，供學生思考與討論，這成為了分子生物學理論教學的重要組成部分。如進行到真核生物基因表達調控學習環節，提出甲基化修飾的生物學意義，這個問題覆蓋范圍廣，涉及到了DNA復制的調節、蛋白質和DNA甲基化修飾對基因表達的調控，以及Epigenetic（表觀遺傳學）方面的知識。通過提出問題―討論分析―不斷啟發―再討論分析―歸納總結―解決問題這一系列的互動教學活動，充分調動了學生課堂學習的主動性和積極性，在不斷的討論分析中通過展示不同的思維、發表各自的觀點，不但有利于促進學生在學習中發現問題、解決問題，而且有利于學生通過對基礎知識的消化、理解來達到理論的升華、拓展[4]。

2.聯想式教學。分子生物學是在生物化學、細胞生物學和遺傳學的基礎上發展而來[6]，因此知識相互交叉、相互滲透。在授課的過程中，教師一方面要避免重復，一方面要通過聯想知識點適時培養學生的發散性思維，提高學生對知識的遷移能力和整合能力。如在講解化學修飾對基因的表達調控時，將細胞生物學中的信號轉導有機結合，使學生了解基因表達調控對細胞信號轉導的作用機制。

3.探究式教學。在分子生物學教學中，每一個理論知識的背后都是科學研究的重大突破。如確定遺傳物質是DNA的兩大經典實驗，我們以探究的形式呈現教學內容，從實驗設計，到結果顯示，再經過討論分析并得出結論，以課題研究的角度，研究人員的身份引導學生進入學習角色，將學科概念、理論產生的起因和過程展示給學生，啟發學生努力探索，走近科學，讓學生從中領悟知識形成的探究性和科學性，逐漸培養具有創新意識和能力的高素質研究型人才。

4.多媒體多樣化教學。分子生物學的教學內容具有微觀性、復雜性、抽象性和動態性。傳統的教學手段無法滿足教學的需求，而多媒體技術則具有聲像俱佳、動靜皆宜的特點[7]，是傳統教學無法比擬的。多年來我們不斷補充和完善教學手段，逐漸形成了獨具特色的多媒體教學課件。

多媒體圖像處理清晰直觀，文字表述簡潔明了、主題突出。課件中的圖像來源于國內外的網絡數據平臺。如講述DNA半保留復制機理時[8]，首先將DNA可能存在的幾種復制方式用圖像展現，并利用Meselson和Stahl設計的DNA復制同位素示蹤實驗和密度梯度離心實驗來進行結果驗證，引導學生明確掌握DNA半保留復制特點，并結合文字，通過圖文并茂的多媒體課件，將教學內容中的背景知識、基本概念、基本理論，以及靜態、抽象的微觀知識清晰講解。

多媒體課件動靜結合、聲像互動。對于生命過程中動態的知識點，比如DNA的復制、RNA的轉錄、蛋白質的翻譯過程，可以將這些復雜的生命過程利用多媒體手段做成動畫并配以文字和聲像，形象直觀地展現給學生，既加深了學生對知識的理解，也提高了其學習效率。

三、知識領域的拓展

分子生物學的教學內容除包含基礎理論知識外，還有大量理論應用的研究方法部分。我們在教學中不僅僅將知識局限在教材中，利用課堂教學不斷引導學生去了解本學科相關領域內的研究熱點、最新進展、發展趨勢[8]，以及生物技術在生產實踐中的廣泛應用。

1.專題講座與專題討論。專題講座是教師根據教學內容，自己組織參考資料對教學內容的延伸與拓展。比如在講授“SNP技術”時，先從遺傳標記分析的發展著手，把一代、二代的標記分析做知識性的回顧，再將納入教材的第三代標記分析“SNP”做詳細的講解，引導大家理解什么是單核苷酸多態性，核苷酸多態性研究的生物學意義以及在醫學、農業、畜牧等多種領域的發展與應用。通過這種方式激發了學生的學習熱情和求知欲，也使教師不斷地進行知識的更新，及時了解本學科當前發展的趨勢、研究的熱點以及爭論的問題。

專題討論則是以學生為主體，根據課程教學內容，組織學生就某一個專題自行查閱、組織文獻資料，并在課堂上展開討論[9]。比如在講授基因重組的教學內容時，設計“轉基因的利與弊”供學生討論。引導學生思考基因工程藥物和轉基因動植物對社會產生的巨大影響，讓知識離開課本走進生活，從而喚起學生學習的興趣和探索未知領域的欲望。這不僅使學生更加深入、系統地理解所學知識，并且培養了學生靈活運用知識的能力[10]。

2.生物信息技術與數據庫。生物信息技術已經發展成為分子生物學研究方法中不可分割的一部分，比如在“PCR技術”的專題講座中，不僅要對實驗目的、原理、操作以及應用進行講解，還要特別對引物設計的生物信息技術進行補充，介紹學生對一些常規的生物信息技術軟件Primer6.0、DNAman、Olig6.0、DNAStar、Cluster等有一個基本的認知度。

在整個分子生物學的教學中，學生需要自行查閱和組織各種文獻資料，因此，必須特別強調互聯網資源運用的重要性。教師通過介紹中國知網、維普、清華同方、NCBI等幾個常用資源庫，使學生了解如何利用資源庫進行查詢，對互聯網資源的熟練應用使學生的知識體系得以完善，學生通過自身的努力來提高信息收集和辨別的能力，培養了學生的自學能力。

四、教學改革中應該注意的問題

1.教師的專業修養與教學基本功。教師在教學中具有雙重身份，既是一名導演，又是一名演員。作為導演，首先需要有最新的教學理念，整個教學過程中適時設問、適時討論、適時啟發。其次要有較強的課堂組織能力，根據學生的學習情況，把握課堂節奏，調動學生課堂學習激情，使教學有的放矢。否則會在教學中出現“啟而不發”和論證條理不清的現象；作為演員，還要有良好的課程駕馭能力，通過教師扎實的專業知識、廣泛的認知領域、全面的知識結構，呈現給學生的是一個豐盛的知識大餐，而不是一鍋夾生飯。因此作為教師，必須從理論水平、科研水平、思維水平這3個方面提高教師自身的專業素質，此外，還要掌握適合自己的各項教學技能。

2.多媒體教學的合理應用。多媒體教學只是一種提高教學效果的輔助手段，是為教師的教學和學生的學習服務的，只有運用合理才可能達到好的效果。因此盡量避免在多媒體教學課件上出現過多的文字，否則多媒體成了教學活動中的主體，老師由照本宣科轉變為扮演放映員和播音員的角色。學生的學習興趣不高，教學效果也就適得其反。多媒體和傳統教學只有合理地結合，取長補短，才能在課堂教學中體現出其真正的價值。

總之，教學改革的目標是幫助學生建立學科知識體系，培養學生良好的科學素養，提升學生后繼學習的能力。正如葉圣陶先生所說：“教師的教學，不在于給學生搬去可以致富的金子。而在于給學生點金的指頭。”目前，我們關于分子生物學課堂教學改革還處于不斷探索和實踐階段，除了需要不斷地提高教師自身的學科修養和科研素質外，也以“夯實基礎、拓展知識、增強能力、提高素質”[8]作為教學的目的和人才培養目標，努力在今后把教學工作開展得更加有生有色，為社會培養更多高素質創新型人才。

參考文獻：

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第三篇：分子生物學綜合性實驗教學改革和探索

分子生物學綜合性實驗教學改革和探索

摘 要：分子生物學是一門實踐性較強的前沿學科，實驗教學是其重要組成部分。安徽師范大學借助教育部“國家級雙語教學示范課程建設項目”的機遇，對分子生物學實驗教學的建設與改革進行了探索。該文介紹了安徽師范大學分子生物學綜合實驗改革的背景、理念及目標，提出了綜合性實驗教學體系的設計，這種改革方式不僅能提高學生對實驗的參與度和關心度，還能將理論知識系統化，并形成一種整體思維方式。

關鍵詞：分子生物學；綜合性實驗；改革

中圖分類號 G642.0 文獻標識碼 A 文章編號 1007-7731（2014）10-126-03

綜合性實驗也稱為復合型實驗，是對學生實驗技能和實驗方法進行綜合訓練的一種大實驗，其內容組合了多項單個實驗，是一個系統的、連續的過程，類似于一個比較完整的科研過程，前一實驗內容作為后一實驗內容的基礎，實驗間聯系性強。它一方面要求對理論知識有較強的綜合能力，可以培養學生對知識的綜合能力及應變能力，另一方面其復雜性也可以極大地提高學生對實驗結果的關注度，提升實踐操作的興趣和能力[1]。2001 年8月，教育部印發了《關于加強高等學校本科教學工作提高教學質量的若干意見》，要求各高等學校積極推動使用英語等外語進行教學[2]。安徽師范大學分子生物學雙語教學于2009年獲得教育部“國家級雙語教學示范課程建設項目”，其實驗教學也是建設內容之一。本文總結了安徽師范大學在分子生物學綜合性實驗改革中的背景、目標和建設體系等內容。分子生物學綜合性實驗改革背景

分子生物學是在分子水平研究生命本質的一門學科，是當前生命科學中發展最快并與其他學科廣泛交叉及相互滲透的前沿學科[3]，是生物科學、生物技術和應用生物科學等專業的基礎課程，在此基礎上開設其他專業方向課程，如基因工程、酶工程、發酵工程和分子免疫學等。

以往我校分子生物學實驗內容設置是選取相對經典的驗證性實驗，忽略了實驗項目之間的內在聯系，導致實驗項目相對孤立、缺乏知識邏輯、項目間的邏輯順序不合理等問題，一般采用理論教學與實驗教學穿插的方式進行教學，每次實驗間隔的時間較長，不利于學生知識的系統化；且由于各課程間缺乏交流，導致不同課程間的某些實驗項目相同或相似，如分子生物學、遺傳學、生物化學、基因工程、細胞生物學等學科，在實驗項目上均出現同質化現象，同一個實驗項目在不同實驗指導教材中反復出現。

近年來，我校雖然多次對實驗教學考核方式進行了調整，目前考核方式為平時成績占60%，期末考試成績占40%，但是對各部分的具體要求未有明確說明。這種考核方式對學生的激勵作用不大，不能很好地調動學生學習的積極性和主動性。以上這些問題影響了學生對實驗的興趣及主動性，甚至出現學生輕視實驗教學的現象，不僅不利于教學質量的提高，也不利于學生能力的培養。綜合性實驗設置的理念及目標

2.1 設置理念 分子生物學涉及面廣、知識更新快，在我校其理論課程以雙語為教學手段，學生在理論素養和專業外語方面具有較好的基礎。通過設置綜合性實驗讓學生形成良好的整體思維，將理論課程中學習到的知識系統化，增強實踐能力，使學生在理論素養、專業外語、思維模式和實踐能力等方面的能力均得到提高，培養出能適應生物學專業突飛猛進的高素質人才。

2.2 設置目標 一是摒除現有問題，改變我校以往以“點”形式為設置實驗課程，重點突出課程內和課程間知識的系統性和整體性。先將基礎實驗課程設置為綜合性實驗，將單個實驗項目的“點”串聯成“線”，再通過在基礎課程實驗上設置專業方向課程實驗，逐步形成“面”。二是使學生掌握扎實的分子生物學基礎技術實踐能力，并最終使學生將知識系統化，學會整體思維方式。三是提高學生對實驗的重視度、參與度和興趣度。綜合性實驗教學體系的設計

3.1 建立整體貫通的實驗內容 根據我院分子生物學在各專業的定位、學科特點、存在的問題及課程設置目標，為學生設計一套完整的分子克隆技術實驗作為分子生物學基礎綜合性實驗，后繼的高級實驗技術將在專業方向課程中以此為基礎繼續開設，如在基因工程中學習蛋白質表達及檢測技術，在酶工程中學習蛋白質純化技術和酶學性質分析技術等。分子生物學實驗共設36學時，7d內完成教學，學生在實驗指導教師的指導下完成整個操作流程，所有操作均由學生完成，提高學生的參與度，改變學生以往只按步驟做實驗，不參與前期準備的狀況。流程如圖1所示。

為了保證綜合性實驗的連貫性，我校實施了實驗教學月來集中強化訓練。將理論課設置在學期前段，上調理論課周學時，整個理論教學過程要在前13周內完成，在后期設置了為期30d的實驗教學月。在實驗教學月中，各年級的所有實驗均在此期間完成，由于實驗具有連貫性和整體性，實驗項目環環相扣，故將基礎實驗設置在前，其他專業方向實驗設置在后，每門實驗同時開設4個平行教學班。

3.2 完善基礎設施和教材建設 在上述實驗目標和實驗內容的基礎上，我院對相關的基礎設施進行了改造和建設，先期配置了4間多媒體公用實驗室，共享了部分儀器設備，改變了以往為每門課程專門配備儀器設備的模式；同時在方案的基礎上，配備了空缺儀器，保證每4人能共有一套基礎儀器。

教材建設也是教學改革的一部分，教學效果設想和試驗最終都要體現和落實在教材建設上，而作為教學改革的物化成果，教材的質量對學校教學改革的效果有很大影響[4]。我校分子生物學在建設國家級雙語教學示范課程建設項目時，已為理論課程選用和編寫了一批實用教材[5]。為了配合綜合性實驗教學和雙語教學，首先應將各課程的實驗進行優化組合編寫一套符合各專業特點的實驗教材，盡可能地使整個大學過程的實驗教學體系完整化、系統化，并分段實施教學，避免不同課程之間過于獨立，實驗項目重復等問題；其次，在雙語教師和實驗技術人員的共同努力下編寫了一本分子生物學英文實驗教材并投入使用；最后輔以現有的實驗教材作為補充。

3.3 運用現代化的教學手段 分子生物學實驗課程是一門對操作要求極為嚴格的實驗，同時綜合性實驗也要求學生對很多未接觸過的技術要有直觀的印象。運用多媒體和網絡技術是我院采用的主要教學手段，課件、操作錄像、網站資源和相關軟件都是綜合實驗教學的一部分。課件和操作錄像是指導學生了解實驗思路的必要條件，也是指導學生規范操作的主要手段。網站資源對現代分子生物學實驗有極大的參考作用，如文獻和基因序列查找時可以應用NCBI等網站；在DNA雙酶切實驗時，可以使用試劑公司網站查找最佳反應緩沖液、反應時間和條件等；國內外最新的實驗技術，既豐富了教學內容，又可以提高學生的學習興趣；生物學軟件是現代分子生物學實驗中必不可少的，教學過程中應用多媒體可以直接指導學生對部分軟件和網絡的使用，如引物設計軟件、序列比對軟件和統計學軟件等。

3.4 組建高水平的教學團隊 我院以國家級雙語教學示范課程建設項目為依托，組建了一批高素質的雙語教學師資隊伍[5]；課程組堅持讓教授走進實驗室指導本科生實驗，并要求各位教師在實驗過程中介紹自己的研究課題，激發學生的興趣；每個教學班級輔以2名相關專業研究生協助指導學生的操作過程，保證操作規范性；同時優秀的實驗技術人員是實驗順利進行的基本保障。

3.5 建設綜合的評價體系 實驗課程評價體系是保證教學質量的關鍵之一，構建科學的實驗考核體系，可以提高實驗教學質量和學生對實驗課的關注度與興趣度。實驗成績評定包括平時成績、操作考試和理論考試成績3方面內容，其中平時成績占60%、操作考試占20%、理論考試占20%。平時成績包括出勤、實驗報告、課堂態度、操作規范程度等。其中，實驗報告改變了單個實驗項目的報告形式，而是要求學生按照整體思維，用科研論文的形式撰寫實驗的思路，列舉實驗材料和儀器設備，陳述實驗步驟和方法、分析并討論實驗結果，著重培養學生總結實驗結果和撰寫科研論文的能力；操作考試主要考察學生實驗過程是否規范，以及在沒有指導下的操作能力；理論考試主要是對實驗理論、方法原理及運用等進行閉卷考試，促使學生將理論知識與實際操作相結合。

參考文獻

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第四篇：分子生物學總結

SectionA 1 三個域：真細菌，古細菌，真核生物 2 組裝中的主要作用力：非共價健作用力

SectionB 1 蛋白質純化的分析方法

正電荷：天冬氨酸 谷氨酸

負電荷：賴氨酸 精氨酸

組氨酸

極性：天冬酰胺 谷氨酰胺

蘇氨酸 絲氨酸 半胱氨酸

非極性：脂肪族 甘氨酸 丙氨酸 纈氨酸 亮氨酸

異亮氨酸 甲硫氨酸 脯氨酸

芳香族 苯丙氨酸

酪氨酸 色氨酸 Cys 二硫鍵 Gly 無手性 Pro 亞氨基酸

芳香族氨基酸最大吸收峰280mm 3 蛋白質的一級(決定蛋白折疊及其最后的形狀的最重要的因素)：氨基酸脫水縮合形成肽鏈 N端到C端

共價鍵

二級：多肽鏈中空間結構鄰近的肽鏈骨架通過氫鍵形成的特殊結構。

α轉角

β螺旋 氫鍵為主要作用力

三級： 多肽鏈中的所有二級結構和其他松散肽鏈區域（散環結構）通過各種分子間作用力（非共價鍵為主），彎曲、折疊成具有特定走向的緊密球狀構象。

非共價鍵

四級： 許多蛋白分子由多條多肽鏈（亞基，subunits）構成。組成蛋白的各亞基以各種非共價鍵作用力為主，結合形成的立體空間結構即為四級結構。非共價鍵 偶極：電子云在極性共價鍵的兩原子間不均勻分布，使共價鍵兩端的原子分別呈現不同的電性

兼性離子：具有正電荷（堿性），又具有負電荷（酸性）的分子 雙極性分子：

Section C 1核酸的光學特性：

增色性：一種化合物隨著結構的改變對光的吸收能力增加的現象 減色性：一種化合物隨著結構的改變對光的吸收能力減少的現象 Reason: 堿基環暴露在環境中的越多，對紫外的吸收力越強 Absorbance（吸收值）：Nucleotide > ssDNA/RNA > dsDNA 核酸的最大吸收峰260mm(堿基有芳香環)芳香族氨基酸最大吸收峰280mm A260/A280:

純的 dsDNA：1.8 純的 RNA：2.0 純的 Protein：0.5 2 Tm 值（熔解溫度）：熱變性時，使得DNA雙鏈解開一半所需要的溫度。

Tm=2x(A+T)+ 4x(G+C)

Tm值與DNA分子的長度，及GC的含量成正比

Annealing（退火）:熱變性的DNA經過緩慢冷卻后復性

快速冷卻： Stay as ssDNA

緩慢冷卻: 復性成dsDNA 3 脫氧核糖核酸與核糖核苷酸得到畫法 支持雙螺旋結構的兩個實驗：查戈夫規則

X射線晶體衍射 5 雙螺旋的內容：

雙鏈之間的關系：DNA分子由兩條鏈組成

雙鏈反向平行(5’?3’ 方向)

兩鏈的堿基通過氫鍵互補配對，A:T;G:C。

雙鏈序列反向互補

各基團排列方式：糖-磷酸骨架DNA分子排列在外;

堿基對平面相互平行，排列在DNA分子的內部。空間結構為：右手雙螺旋結構

每轉一圈~10個堿基對，每一圈長度33.2A

雙鏈螺旋中形成大溝，小溝。堿對DNA的影響：高pH值對DNA的影響比低pH值的要小。

高 pH 值(pH>11)會改變堿基構象，使DNA變性（雙鏈解旋，成單鏈）

RNA的影響：高pH值，2’羥基會攻擊磷酸二酯鍵，使其斷裂，形成2’，3’-環式磷酸二酯鍵，從而使RNA分子斷裂 共價閉合環狀DNA(convalently closed circular DNA, cccDNA）。即通過共價鍵結合形成的封閉環狀DNA分子。超螺旋DNA（Supercoil DNA）:松弛型雙鏈DNA進一步旋轉后，再形成閉環結構時，就會形成DNA超螺旋結構

L=T+W 判斷是否為超螺旋 正負超螺旋 拓撲異構酶：暫時斷裂DNA分子中一條或兩條單鏈上的磷酸二酯鍵，改變DNA分子的連接數及拓撲狀態。

功能：消除DNA復制和轉錄等過程產生的超螺旋。

細胞中，Ⅰ型酶與Ⅱ型酶的活性保持一種平衡狀態。Ⅱ型酶的“使DNA超螺旋化” 與Ⅰ型酶“使DNA松馳化” 相抗衡，從而使DNA保持適當的超螺旋密度。EB: 嵌入DNA配對堿基之間，使DNA分子在嵌入處局部解旋，增加ccDNA其它部位的正超螺旋 Type II RE

二型限制性內切酶:識別位點一般為４～8個堿基對的回文序列

如：EcoRI

5’-GAATTC-3’

3’-CTTAAG-5

Section D 1 染色體的折疊：串珠結構 ：核心組蛋白:H2A, H2B, H3 and H4.連接組蛋白 H1

核小體

30nm纖絲

高級環狀結構（染色質的最高結構）

緊密纏繞結構 著絲粒：兩側是大量的名叫衛星DNA的重復序列

端粒：上百個短的重復序列

作用：端粒DNA 形成特殊的環狀二級結構，保護染色體末端不被核酸外切酶降解。

抵消DNA復制時每一輪復制都導致兩末端形成的后隨鏈比母鏈要短一截的現象對染色體的影響 異染色質：高度濃縮，無轉錄活性

常染色質：結構松散，有轉錄活性

DNaseI 敏感區域：對區域內DNA的轉錄活躍

串珠結構

DNaseI 超敏感區域：轉錄活躍的基因的調控區域

DNA裸露 4 原核染色體結構：非特異性DNA結合蛋白：類組蛋白

位點特異性DNA結合蛋白：與特殊的DNA序列結合

有其他特殊的生理功能：RNA polymerases

對結構域的形成也很重要

復性動力曲線：

Low C0t: 高重復 衛星DNA Moderate C0t : 中重復 串聯基因簇

反轉座子 High C0t :單拷貝或低重復

大腸桿菌基因組 染色體結構對基因轉錄的影響

CpG 抑制→CpG位點中的胞嘧啶的C-5常發生甲基化(CpG甲基化），CpG 甲基化可能可以DNA轉錄被限制→哺乳動物基因組中，有些區域含有很多未甲基化的CpG 位點，被稱為CpG 孤島。

甲基化—轉錄抑制

去甲基化—恢復轉錄

組蛋白的乙酰化：核心組蛋白N-端的Lys被乙酰化，DNA與核心組蛋白體解聚。Gene 表達被激活

去乙酰化：抑制 gene表達

組蛋白的磷酸化:對組蛋白 H1 磷酸化，抑制基因表達 其他組蛋白中心法則

Section E 1 DNA復制：細胞中，一條雙鏈DNA分子通過堿基配對，形成兩條與其序列相同的DNA雙鏈分子的過程。2

確定DNA半保留復制

半不連續復制 3 復制的基本步驟 復制為雙向

大腸桿菌的復制：

起始AT含量高的區域

參與蛋白：DnaA（復制起始因子)：識別并結合于重復序列上，驅使富含AT的重復序列解鏈，需負超螺旋，及ATP

DnaB(DNA解旋酶):DNA雙鏈解旋，形成復制叉

SSB:(單鏈結合蛋白):保持解旋部分的單鏈狀態

DnaG(引發酶/引物酶):RNA引物合成，引發復制 延伸

參與蛋白：DNA Pol III全酶：負責新鏈的合成:前導鏈，岡崎片段

DNA pol

I：復制中除去引物，填補引物處空缺

終止： 真核生物的復制：

一個細胞周期內，一個DNA分子只能復制一次

Section F 1 復制忠實性的機制：

DNA復制的高精度：模板連和進入核苷酸在DNA聚合酶的作用位點正確配對

3’到5’外切核酸酶對錯誤堿基的校正

錯配修復 2 holiday模型 3

Section K 編碼鏈 模板鏈 2 大腸桿菌的轉錄

RNAP酶：核心酶：a 亞基：aNTD對核心酶的組裝很重要。

aCTD在識別啟動子、調節轉錄水平中起著非常重要的作用。

b 亞基：RNAP的催化中心。

與模板DNA、RNA產物、及底物核糖核苷酸緊密結合。

抗生素利福平結合在在b 亞基上，可以抑制RNAP的轉錄活性。

利福平只抑制轉錄的起始。

利迪鏈菌素只抑制延伸而不抑制轉錄起始

b’ 亞基：可能與RNAP的催化有關。

肝素與b’亞基結合后，能干擾RNAP與DNA的結合，抑制轉錄。

w 亞基：可能與RNAP的組裝及維持RNAP結構的穩定性有關

s factor(s因子)：s factor 在啟動子特異性識別過程中至關重要 移動慢的原因：可以保持與翻譯同步。

與有些基因轉錄調控相關。

有利于轉錄終止

RNAP沒有3’ →5’外切酶活性，不能進行轉錄校正。其錯配率達10-4。RNAP倒退暴露新合成的錯配堿基，可以有利于其他輔助核酸酶將錯配堿基切除，增加轉錄的忠實性。s70基礎啟動子的一般結構

-10 序列：它對轉錄起始時，RNAP打開DNA雙鏈的過程非常重要。-

10序列到TSS位點的距離對轉錄效率也有很大的影響-35 序列：增強RNAP s factor 的識別能力及與DNA的結合能力 4 影響啟動子效率的DNA序列：

核心啟動子的序列：與保守序列越像，效率越高。

TSS周圍序列：影響起始效率。

轉錄單位的前30個核苷酸的堿基序列：影響RNAP從啟動子處移動出去（啟動子區清空）的速率。

核心啟動子附近的調控元件。轉錄的起始：開放復合物 閉合復合物 無效起始

延伸：啟動子的清空，鏈的延伸轉錄泡，s因子的循環利用

終止：依賴性 不依賴性

反復重復序列

Section L 1.順式作用元件（cis-acting elements）：一般為DNA上較為保守的、有著特異性序列或結構的特定區域。它們只能影響與其在同一條染色體上的基因的活動。如：啟動子，轉錄激活因子結合位點等。

反式作用基因/調節基因（trans-acting genes，regulator genes）

可以影響與他們不在同一條染色體上的基因的表達水平的DNA元件。2 乳糖操縱子 色氨酸操縱子 正負調控都可以有誘導和阻遏兩種調控方式。

正控誘導：誘導因子活化激活因子，使其可以增加基因的表達。（Lac operon，CRP調控）正控阻遏：共阻遏物使激活因子失活，減少基因的表達。負控誘導：誘導因子使阻遏蛋白失活，增加基因的表達。（Lac operon，lac repressor）負控阻遏:共阻遏物活化阻遏蛋白，使其可以降低基因的表達。（Trp operon，trp repressor）

Section M 增強子 沉默子 TFIID：可與多種核心啟動子元件或特異性轉錄因子結合，啟動二類轉錄預起始復合物組裝的通用轉錄因子。

TBP(TATA-box binding protein):可識別并結合TATA-box TAFII（TBP-associated factor II）：TBP關聯蛋白，TFIID中與TBP形成復合體的所有蛋白，～13個。

TFII H的結構與功能：蛋白激酶(4 個亞基)：催化蛋白磷酸化。將NTP（一般為ATP）的g-磷酸基團轉移到蛋白上。

磷酸化 RNA pol II 中的CTD 結構域。TFIIE 刺激TFIIH介導的磷酸化反應。DNA 解旋酶/ATPase(5 亞基)：

水解ATP，利用其能量打開DNA的雙鏈 TBP(TATA-binding protein): 確保 RNA Pol I能正確定位到轉錄起始區域上。

SP1 為組成性表達的轉錄因子，在所有的細胞中都存在，與基因本底表達水平有關 SL1，選擇因子,RNA Pol I起始轉錄所必需的因子 CTD:羧基末端結構域，的磷酸化狀態與轉錄進程有關

轉錄起始時期，CTD結構域一般處于去磷酸化形式，與結合啟動子有關。

轉錄延伸時期，CTD結構域常處于磷酸化形式，與mRNA的加工有關。

Section N 1 DNA-binding domains（DBD）:DNA結合結構域

螺旋-轉角-螺旋結構（域）

鋅指結構（域）

堿性結構（域）

Dimerization domains：二聚體化結構域

亮氨酸拉鏈 螺旋 散環 螺旋 DBD+DM 激活結構域 酸性激活結構域 富含谷氨酰胺結構域 富含脯氨酸的結構域 LBD

Section O 真核生物中mRNA 加工的一般過程 5’加帽: CTD作用：轉錄起始時，參與加帽反應的三種酶結合在RNA Pol II的CTD結構域上。轉錄產物剛開始合成時，即對其5’端進行加帽反應。

作用：防止降解：核糖核酸酶一般不能降解帽結構中的三磷酸鍵

幫助轉運mRNA到細胞質中

增強翻譯水平：mRNA需要帽結合蛋白的幫助才能更好的與核糖體結合 幫助去除pre-mRNA中的第一個內含子。3’加Poly(A)尾：

作用：防止被核酸酶降解：增加mRNA的穩定性

有助于mRNA從細胞核到細胞質的轉運

參與pre-mRNA的最后一個內含子的剪接。

增強mRNA的翻譯水平，增加基因的表達 剪接 甲基化 2 核酶有：有催化功能的RNA即為核酶

U2 U6 RNAP 3 RNA的多樣性：可變加工，反式剪接，RNA編輯 原核生物核糖體

真核生物核糖體 原核rRNA 加工的大致過程：形成多個莖環結構，與蛋白結合形成RNP，核苷酸修飾，逐級切割

真核rRNA 加工的大致過程：甲基化，切割。內含子剪接 原核tRNA 加工的大致過程:將多順反子前體切割，分離出單順反子前體

單順反子前體進一步被切割，形成與成熟tRNA長度一致分子（RNases D, E, F，P

.堿基修飾，形成成熟tRNA 真核tRNA 加工的大致過程：5’-末端成熟，3’-末端成熟（添加5’-CCA-3’）去除內含子 7 miRNA and siRNA的調控機制：mRNA降解，抑制翻譯，抑制轉錄

Section P 1 遺傳密碼的特性:

蛋白的編碼信息由三聯體密碼子組成。

密碼子為連續的，之間無間隔、無重疊。

除三個終止密碼子之外，每個密碼子對應一種氨基酸

有密碼簡并現象。即：多個密碼子對應同一種氨基酸。

標準遺傳密碼子在各類生物中基本通用，不過少數生物體或細胞器中，有一些密碼子對應的氨基酸與標準的不同。

生物對同義密碼子的使用經常有偏好性。不同生物的密碼子偏好性不同。

基因一般不重疊。一段核酸分子一般只有一個開放閱讀框（open reading frame, ORF/可讀框），被翻譯成一個蛋白。

有些物種也有重疊基因的現象。開放閱讀框:ORF 從起始密碼子ATG 到終止密碼子

TGA,TAA or TAG 之間的連續的蛋白編碼序列

CDS 編碼序列 當ORF可以預測一個蛋白時 3 tRNA 二級結構:三葉草結構 4 tRNA的特異性加載：（翻譯的高保真性）

氨酰-tRNA合成酶對相應tRNA分子有很強的專一性：第二密碼子：

氨酰-tRNA合成酶接受相應氨基酸時有很強的忠實性：校正：雙篩選機制—酶的活性中心，酶中的編輯位點 氨酰-tRNA（AA-tRNA）： 3’-end加載了一個氨基酸的tRNA分子。是在蛋白質合成中，將密碼子轉換氨基酸的適配器。

Section Q 1 密碼子與反密碼子的反向互補配對 一個tRNA可識別的密碼子數由反密碼子的第一位堿基決定

擺動學說：第三位密碼子與第一位反密碼子的配對可以擺動

反密碼子第一位為A或C時，配對無搖擺現象。3 核糖體的E，P，A位點 A位：接受AA-tRNA部位.除了起始氨酰-tRNA，其他所有AA-tRNA都只能進A位點。P位：肽酰基-tRNA結合部位。起始氨酰-tRNA也進入此位點。E位：空載tRNA離開核糖體的位點。4 核糖體各亞基的功能

核糖體小亞基功能：結合mRNA

促進密碼子與反密碼子的正確結合 mRNA移位

大亞基的功能A位、P位、肽酰轉移酶（轉肽酶）中心等在大亞基上。

負責攜帶AA-tRNA、肽鍵/肽鏈的形成 5 翻譯的基本內容 核糖體與mRNA結合

氨酰tRNA逐個進入核糖體

氨酰tRNA通過反密碼子與mRNA互補配對 氨酰tRNA分子的氨基酸之間形成肽鍵。空載tRNA的釋放 肽鏈的釋放

第五篇：現代分子生物學總結

醫學細胞與分子生物學習題庫

一、名詞解釋

1．基因組

2．基因文庫

3．衛星DNA

4．SD序列

5．分子克隆

6．載體

7．反式作用因子

8．粘性末端

9．限制性內切酶

10．cDNA文庫

11．轉化率

12．質粒拷貝數

13．體外重組

14．感受態細胞

15．探針

16．核酸雜交

17．陽性克隆

18．固相雜交

19．解鏈溫度

20．C值悖理

21．基因家簇

22．反義RNA

23．RNA干擾

24．魔斑

25．順式作用元件

二．填空題

1.真核生物基因組DNA序列可分為（）、（）和（）。

2.真核生物基因組高度重復序列包括（）、（）、（）和（）四種。

5.原核生物轉錄水平調控的方式有（）和（）兩種方式；前者又可分為（）和（）；后者可分為（）和（）。

6.真核生物基因表達調控包括（）、（）、（）、（）和（）五個層次。

7.真核生物基因組DNA水平的調控包括（）、（）、（）、（）和（）五種方式。

8.反式作用因子可劃分為（）、（）和（）三類。

12.影響雜交的因素有（）、（）、（）、（）和（）。

15.逆轉錄酶是多功能酶，具有（）、（）、（）三種功能，但無（）作用。

16.DN的損傷突變類型有（）、（）、（）、（）和（）。

17.引起DNA損傷突變的因素是（）、（）、（）、（）和（）。

18.DNA的損傷修復方式有（）、（）、（）和（）。

20.病毒基因組可由（）或（）組成；細菌基因組由一條（）組成；真核生物基因組由（）和（）形成（）。

21.原核生物基因表達調控的方式有（）和（）；其中（）是主要的方式。

22.、操縱子由（）、（）和（）組成；受（）產物的調控。

23．順式作用元件按功能可劃分為（）、（）、（）和（）。

24．分子克隆技術的操作包括（）、（）、（）和（）等四個基本過程。

25．限制性內切酶分為（）、（）、（）三種，其中只

有（）在基因工程操作中被應用。

26.限制性內切酶識別（）序列； DNA分子在該酶切割下可產生（）、（）或（）末端。

27．分子克隆中常用的工具酶有（）、（）、（）和（）。

28．分子克隆中常用的載體有（）、（）、（）和（）。

29．目的基因制備的常用方法有（）、（）、（）。

30．體外重組常用方法有（）、（）、（）和（）。

31．重組體導入原核生物細胞中的常用方法有（）和（）；重組體導入真核生物細胞中的常用方法有（）、（）和（）。

32．重組體的篩選方法有（）、（）、（）、（）。

33．cDNA文庫的構建步驟是（）、（）（）、（）。

34．常用的核酸探針包括（）、（）和（）。

35．放射性同位素標記常用的標記方法有（）、（）、（）。

36．分子克隆中常用的非放射性同位素標記物有（）、（）、（）等；常用的標記方法有（）、（）。

37．核酸雜交技術可分為（）和（）兩種類型；后者又可分為（）和（）。

39．PCR技術的基本過程是（）、（）、（）。

40．影響PCR的因素有（）、（）、（）、（）、（）。

41．PCR反應的特點是（）、（）、（）、（）。

45．限制性核酸內切酶的作用特點是（）、（）、（）、（）。

50．DNA切除修復需要的酶有（）、（）和（）。

三、判斷題

1、生物越高度，基因組越龐大，基因數目就越多。（）

2、真核生物結構基因都是單拷貝，rRNA基因為多拷貝。（）

3、同基因是一類結構上完全相同，表達產物功能也相同的一組基因。（）

4、真核細胞基因轉錄產物為單順反子。（）

5、原核細胞基因轉錄產物為多順反子。（）

6、真核生物基因組中不編碼的區域多于編碼的區域。（）

7、衛星DNA實際上是出現在非編碼區的串聯重復序列。

8、串聯重復序列是形成衛星DNA 的基礎。

9、所有真核生物基因組中都有α衛星DNA。

10、高度重復序列在真核生物細胞基因組中重復出現可達106次以上。

11、中度重復序列的長度和拷貝數很不均一。

12、短分散片段重復順序的平均長度約為3500-5000bp。

13、長分散片段重復順序的平均長度約為300bp。

14、中度重復序列大多不編碼蛋白質。

15、高度重復序列中有一些可編碼蛋白質。

16、中度重復順序一般具有種特異性。

17、每種組蛋白的基因在同一種生物中拷貝數是相同的。

18、不同生物中組蛋白基因在基因組中的排列不一樣。

19、端粒是所有生物染色體末端的一種特殊結構。

20、以RNA為模版合成出的DNA鏈叫負股鏈。

21、顛換是指原為嘧啶突變后變為嘌呤。

22、置換是指原為嘧啶突變后變為嘌呤。

23、重組修復也叫復制后的修復。

24、原核細胞和真核細胞中許多mRNA都是多順反子轉錄產物。

25、限制性內切酶切割的DNA片段都具有粘性末端。

26、原核生物中mRNA一般不需要轉錄后加工。

27、增強子并沒有啟動子活性，卻具有增強啟動子活性，促進轉錄起始的效能。

28、在雙向復制中一條鏈按5′→3′的方向合成，另一條鏈按3′→5′的方向合成。

29、原核細胞和真核細胞復制在多個位點同時起始進行。

30、真核細胞的基因是不連續的，轉錄出來的所有RNA都必須經過加工。（31、生物DNA分子的大小等于基因的總和。（）

32、所有多肽鏈經核糖體翻譯出來即有正常生理功能。

33、核糖體是蛋白質和rRNA構成的功能復合體。

34、機體的各種細胞中含有相同的遺傳信息，所以有相同的表達，35、在負控誘導系統中，阻遏蛋白不與效應物結合時，結構基因不轉錄。

36、在負控阻遏系統中，阻遏蛋白不與效應物結合時，結構基因不轉錄。

37、CAP結合在啟動子上時，能促進RNA聚合酶與啟動子結合，促進轉錄。）

38、CAP首先與cAMP形成復合物才能與啟動子結合。

39、RBS是指mRNA起始密碼AUG前的一段非翻譯區。

40、反義RNA由反義基因轉錄而來。

41、轉錄后基因沉默被稱為RNAi。

42、細胞中蛋白質合成旺盛時，mRNA鏈上核糖體數量就多，poly（A）也較長。

43、限制性核酸內切酶是原核生物所特有的酶。

44、只有Ⅱ型限制性核酸內切酶在分子生物學中被應用。

45、COS區是指λ噬菌體粘性末端構成的區域。

53、基因擴增是指某些基因的拷貝數大量增加的現象。

54、基因重排是DNA水平調控的重要方式之一

55、所有核酸的合成都是以堿基配對為基礎的。

56、甲基化程度與基因的表達一般呈反比關系。

57、基因的甲基化程度愈高，其表達則降低。

58、去除組蛋白基因轉錄活性降低。

59、常染色質:結構松散，基因不表達。

60、異染色質:結構緊密，基因表達。

61、有基因表達活性的染色質DNA對DNaseⅠ更敏感。

62、真核生物基因調控主要也是在轉錄水平上進行的。

四、選擇題：

1.原核生物基因組中的復制起始點有（）

A．1個B．2個C．多個D．1000個以上

2．真核生物基因組中的復制起始點有（）

A．1個B．2個C．多個D．1000個以上

3.真核生物基因之間的間隔區與基因組大小（）

A．有關B．無關C．成正比E．成反比

４.衛星DNA的長度一般為()

A．5-10bpB．300bpC．100bpD．500-1000bp

５.在大腸桿菌細胞中DNA復制的保真性主要是下列哪個酶的作用（A．DNA聚合酶ⅠB．DNA聚合酶Ⅱ

C．DNA聚合酶ⅢD．DNA連接酶

６.既有內切酶活力，又有連接酶活力的是

A．拓撲異構酶B．DNA聚合酶Ⅱ

C．解螺旋酶D．DNA連接酶）

7.轉錄過程中遺傳信息的轉遞方向是()

A．DNA→RNAB．RNA→DNAC．DNA→DNAD．RNA→RNA

8.hnRNA是()

A．存在于細胞核內的tRNA前體B.存在于細胞核內的mRNA前體

C.存在于細胞核內的rRNA前體D.存在于細胞核內的snRNA前體

9.以RNA為模板合成DNA的酶是（）

A．DNA聚合酶ⅢB．DNA聚合酶ⅠC．RNA聚合酶D．反轉錄酶

10.蛋白質的生物合成中肽鏈延伸方向是（）

A．5→3B．從N端到C端C．3→5D．從C端到N端，，11.蛋白質翻譯后的加工主要包括（）。

A．氨基酸側鏈修飾B．水解修飾

C．二硫鍵的形成D． 上述各種修飾都包括

12.操縱子調控系統屬于哪一種水平的調控（）

A．復制水平的調節B。轉錄水平的調節

C．翻譯水平的調節D。轉錄后加工的調控

13.與乳糖操縱子操縱基因結合的物質是（）

A．RNA聚合酶B．DNA聚合酶C．阻遏蛋白D．誘導物

14、參與線粒體DNA復制的酶是（）

A．polαB．polδC．polβD．polγ

15、參與領頭鏈DNA復制的酶是（）

A．polαB．polδC．polβD．polγ

16、端粒酶是一種()

A．逆轉錄酶B．RNA聚合酶C．DNA聚合酶D．DNA酶

17.含稀有堿基最多的RNA是（）

A．mRNAB、rRNAC．5S-rRNAD．tRNA

18.大腸桿菌DNA連接酶需要下列哪一種輔助因子？（）

A．FAD作為電子受體B．NADP+作為磷酸供體

C．NAD+形成活性腺苷酰酶D．NAD+作為電子受體

19.真核生物RNA聚合酶I催化轉錄的產物是（）

A．mRNAB．45S-rRNAC．5S-rRNAD．tRNA

20.魔斑是指（）

A．ppGppB．cAMPC．cGMPD．7mGppp

21.CAP復合體與操縱子結合的部位是（）

A．啟動子B．操縱基因C．結構基因D．調節基因

22.基因的甲基化修飾一般發生在（）

A．CpGB．ApGC．GpTD．TpG

23.有基因表達活性的染色質DNA對下列那個酶敏感性增加？（）

A．DNaseⅠB．DNA polⅠC．DNA polⅡD.Rnase H

24.真核生物的RNA聚合酶識別的是（）

A．啟動子B．增強子C．TF-DNA復合體D．RF

25.在分子生物學中被應用的限制性核酸內切酶是（）

A．Ⅰ型B．Ⅱ型C．Ⅲ型D．以上都沒用

26.限制性核酸內切酶錯位切割產生（）

A．粘性末端B．平頭末端C．3’-磷酸D．5’-羥基

27.大腸桿菌DNA連接酶只能連接（）

A．粘性末端B．平頭末端C．3’-磷酸D．5’-羥基

28.pBR322是（）

A．復制型載體B．表達型載體C．穿梭載體D．噬菌體載體

29、pUC載體是（）

A．復制型載體B．表達型載體C．穿梭載體D．噬菌體載體

30.M13噬菌體是（）

A．單鏈DNA噬菌體B．雙鏈DNA噬菌體

C．RNA噬菌體D．都不是

31、B．表達型載體C．穿梭載體D．噬菌體載體

五．問答題

1．分子克隆中常用的工具酶有哪些？各有何用途？

2．何謂載體？分子克隆中常用的載體有哪些？理想的載體應具備哪些條件？

3．何謂PCR？試述PCR基本技術原理和影響因素。

4．常用的核酸探針有哪些類型？各有何優缺點？

5．將目的DNA與載體DNA連接起來的方法有哪些？并用文或圖表示各種連接過程。

6．簡述原核生物與真核生物基因組結構特點。

9．體外重組常用的連接方法有哪些？各有何優缺點？

13．何謂核酸雜交？常用的雜交方法有哪些？

28.何謂宿主細胞？分子克隆中常用的宿主細胞有哪些？宿主細胞應具備哪些條件？

31.簡述重組體導入哺乳動物細胞的方法

35、DNA損傷修復有哪些類型？試述各類型的修復方式。