第一篇：溶血現(xiàn)象對(duì)臨床生化檢驗(yàn)項(xiàng)目的影響分析

溶血現(xiàn)象對(duì)臨床生化檢驗(yàn)項(xiàng)目的影響分析

【摘要】目的：對(duì)溶血現(xiàn)象對(duì)臨床生化檢驗(yàn)項(xiàng)目的影響進(jìn)行深入分析。方法：抽選到我院接受健康體檢者的65例血樣標(biāo)本，每份量為6ml，均分置入兩個(gè)試管，選擇1個(gè)試管實(shí)施人工溶血操作，再對(duì)正常血樣和溶血標(biāo)本的檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行對(duì)比分析。結(jié)果：通過對(duì)比分析，溶血血清的檢驗(yàn)項(xiàng)Glu、ALP水平要低于正常血清，TP、ALT、Alb、AST、UA、TBIL及CHOL等指標(biāo)水平均要高于正常血樣，均存在差異，有統(tǒng)計(jì)意義（P＜0.05）。結(jié)論：溶血現(xiàn)象的產(chǎn)生對(duì)血生化檢驗(yàn)結(jié)果有一定影響，為確保臨床檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確度，應(yīng)有效避免溶血情況發(fā)生。【關(guān)鍵詞】溶血現(xiàn)象；生化檢驗(yàn)；影響

溶血現(xiàn)象是臨床血生化檢驗(yàn)中較為多見的影響性因素。如果待測(cè)血樣的紅細(xì)胞濃度高于血漿濃度，則會(huì)導(dǎo)致檢驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)較大偏差，并且溶血情況下白細(xì)胞、血小板等會(huì)破壞而釋

[1]放出某些成分，對(duì)生化檢驗(yàn)項(xiàng)帶來影響。為進(jìn)一步掌握溶血現(xiàn)象產(chǎn)生的影響，制定出針對(duì)性預(yù)防措施，本文65例到我院接受健康體檢者的血樣標(biāo)本生化檢驗(yàn)情況進(jìn)行分析，報(bào)告正文如下。

1.資料與方法 1.1一般資料

抽選2015年1月到2016年1月到我院進(jìn)行健康體檢者的65例血液樣本作為觀察對(duì)象。其中，男性37例，女性28例；年齡19到37歲，平均（25.1±3.8）歲。本組均在晨起空腹抽取靜脈血6ml，在平均置入兩個(gè)干燥試管內(nèi)。取其中1管進(jìn)行溶血處理，置入低溫冰箱（-45℃）進(jìn)行冷凍20min，再取出予以融化，1500r/min離心10min，將溶血血清予以分離；正常血樣在常溫環(huán)境下放置1h之后，通過相同離心處理，予以分離，但不進(jìn)行溶血，取出1ml為正常血清備用。1.2方法

本組患者均選用美產(chǎn)Beckmancx-7型全自動(dòng)血生化分析儀進(jìn)行檢測(cè)，質(zhì)控在正常范圍之中，質(zhì)控物為國(guó)產(chǎn)。對(duì)K+的測(cè)定應(yīng)用國(guó)產(chǎn)迅達(dá)電解質(zhì)分析設(shè)備及相應(yīng)試劑，每一份正常血清、溶血血清均行10次測(cè)定，選取平均值。

檢測(cè)指標(biāo)有血糖（Glu）、丙谷轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、總蛋白（TP）、堿性磷酸酶（ALP）、血尿酸（UA）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、總膽紅素（TBIL）、白蛋白（Alb）、總膽固醇（CHOL）等，均按照試劑盒相關(guān)規(guī)定操作。1.3統(tǒng)計(jì)處理

本組檢測(cè)資料均應(yīng)用SPSS18.5軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，用均數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示計(jì)量數(shù)據(jù)，再基于t檢驗(yàn)，P＜0.05表示存在差異，有統(tǒng)計(jì)意義。2.結(jié)果

通過對(duì)比分析，溶血血清的檢驗(yàn)項(xiàng)Glu、ALP水平要低于正常血清，TP、ALT、Alb、AST、UA、TBIL及CHOL等指標(biāo)水平均要高于正常血樣，均存在較大差異，有統(tǒng)計(jì)意義（P＜0.05），具體如表1：

表1 溶血血清和正常血清的生化檢驗(yàn)結(jié)果對(duì)比（x±s）檢驗(yàn)指標(biāo) 正常血清（n＝65）溶血血清（n＝65）t P值 GLU（mmol/L）

5.49±1.22

5.74±1.15

5.714

0.001 ALP（U/L）

124.71±7.31

84.25±4.17

10.203

0.001 TP（U/L）

59.31±6.24

62.27±6.23

7.152

0.005 ALT（U/L）

56.14±2.62

64.71±2.43

8.163

0.012 Alb（U/L）

32.24±4.31

36.19±4.25

5.252

0.004 AST（U/L）

57.10±2.57

66.43±2.46

6.187

0.001 UA（mmol/L）

356.25±10.47

362.15±10.23

5.223

0.026 TBIL（mmol/L）

10.28±0.49

13.52±0.81

4.116

0.032 CHOL（mmol/L）

4.92±1.35

7.40±1.73

3.156

0.013 3.討論

血生化分析是臨床檢測(cè)中重要內(nèi)容，其檢驗(yàn)結(jié)果是臨床診療的重要的指導(dǎo)依據(jù)，其準(zhǔn)確

[2]性和有效性，和臨床實(shí)際準(zhǔn)確度對(duì)體檢者有著重要意義。溶血現(xiàn)象是血生化檢驗(yàn)中影響最終結(jié)果的一個(gè)常見因素，該種現(xiàn)象的是由諸多因素共同影響產(chǎn)生的，主要有這兩個(gè)方面的因素：（1）體外因素，這是引起溶血現(xiàn)象產(chǎn)生的主要因素，包括物理方面，比如：冰凍、物理破壞；化學(xué)方面，比如血樣和表面活性劑相接觸；代謝方面，比如：遺傳疾病導(dǎo)致血細(xì)胞脆性提升；（2）體內(nèi)因素，該方面引起溶血現(xiàn)象的因素主要有生物方面，比如：惡性病癥；

[3]治療方面，比如：人工心臟瓣膜、藥物毒副作用等。對(duì)血清標(biāo)本測(cè)定是否出現(xiàn)溶血是臨床常規(guī)檢驗(yàn)中最為基本的環(huán)節(jié)，對(duì)某些疾病的檢出和診斷有重要意義，而溶血對(duì)臨床生化檢驗(yàn)項(xiàng)目有不同程度的影響，會(huì)導(dǎo)致血生化檢驗(yàn)指標(biāo)的變化，且溶血現(xiàn)象的嚴(yán)重度對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生的影響也是不同的。本研究結(jié)果顯示，溶血血清檢驗(yàn)項(xiàng)Glu、ALP等指標(biāo)要低于正常血清，TP、ALT、Alb、AST、UA、TBIL及CHOL等指標(biāo)水平均要高于正常血樣（P＜0.05）。

為預(yù)防和減少溶血現(xiàn)象的產(chǎn)生，應(yīng)不強(qiáng)化樣品制備技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)水平，可有效預(yù)防體外溶血發(fā)生；嚴(yán)格按血生化操作規(guī)范和技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)予以血樣采集，確保采集器具的干燥及清潔，包括

[4]針頭、試管及注射器等，禁用酒精消毒，以免發(fā)生溶血；止血帶包扎應(yīng)松緊適宜，進(jìn)針如有回血的，不應(yīng)過快將注射器活塞拔出，應(yīng)沿管壁緩緩注入試管，避免血泡產(chǎn)生過多而導(dǎo)致血細(xì)胞的破裂。血液在采樣之后不應(yīng)當(dāng)即置入冰箱冷凍，避免融化溶血；血樣擱置時(shí)間不應(yīng)過長(zhǎng)，要避免消毒液進(jìn)入到標(biāo)本，通常采血后在常規(guī)室溫環(huán)境下放置0.5h~1h，之后分離血清；如果發(fā)現(xiàn)標(biāo)本出現(xiàn)溶血，應(yīng)當(dāng)即采取有效的補(bǔ)救措施或指導(dǎo)患者再次抽血，以提升檢測(cè)結(jié)果的有效性和準(zhǔn)確性。

總而言之，在臨床生化檢驗(yàn)中應(yīng)重視溶血現(xiàn)象對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響，加強(qiáng)檢測(cè)操作控制和管理，確保血生化檢測(cè)的臨床可用性和安全性。參考文獻(xiàn)：

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第二篇：溶血標(biāo)本對(duì)部分生化指標(biāo)的影響

溶血標(biāo)本對(duì)部分生化指標(biāo)的影響

在工作中往往因各種原因?qū)е聵?biāo)本溶血，而血清標(biāo)本溶血時(shí)主要影響哪些指標(biāo)，測(cè)定結(jié)果是否真實(shí)可靠，是所有檢驗(yàn)工作者需要了解的問題。為了能及時(shí)客觀地分析指標(biāo)的變化是否具有臨床意義，應(yīng)當(dāng)詳細(xì)了解標(biāo)本溶血對(duì)各項(xiàng)生化指標(biāo)的影響。本文觀察了部分常用生化指標(biāo)在標(biāo)本溶血前后檢測(cè)結(jié)果的變化，旨在為標(biāo)本溶血時(shí)血液生化結(jié)果分析提供一定的參考依據(jù)，盡量增加生化測(cè)定數(shù)據(jù)的可利用性。1資料與方法

1.1 與試劑 HITACHI 7070全自動(dòng)（日本）。谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、總膽紅素（TBIL）、尿素氮（BUN）、肌酐（CRE）、膽固醇（CHO）、血糖（GLU）生化分析試劑盒，均購(gòu)自北京康大泰科醫(yī)學(xué)科技有限公司。

1.2 溶血的血清標(biāo)本的制備

健康體檢者50人，禁食不禁水12h，各抽取靜脈血4ml，分別注入兩支干燥試管各2ml。其中一支讓其自然凝固，另一支在血液凝固前用金屬棒攪拌使其溶血，然后以3000r/min離心10min，去上清液分別為未溶血和溶血的血清標(biāo)本。

1.3 生化指標(biāo)的測(cè)定

用己糖激酶法測(cè)定血清葡萄糖（GLU），連續(xù)檢測(cè)法測(cè)定谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）和谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST），重氮法測(cè)定總膽紅素（TBIL），尿素酶—GLDH法測(cè)定尿素氮（BUN），苦味酸法測(cè)定肌酐（CRE），氧化酶法測(cè)定膽固醇（CHO），以上指標(biāo)均用HITACHI 7070全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定。結(jié)果

溶血后AST、TBIL、ALT的值比溶血前的值高；CRE的值比溶血前的值低；GLU、BUN、CHO的值在溶血前后未見明顯改變。討論

3.1 谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）

人紅細(xì)胞中AST活性約為血漿中的40倍［1］。當(dāng)標(biāo)本溶血時(shí)，勢(shì)必引起血清中AST活性的升高，從而使溶血標(biāo)本的結(jié)果明顯高于未溶血標(biāo)本。AST主要是作為肝損傷的敏感指標(biāo)，測(cè)定結(jié)果的偏高會(huì)導(dǎo)致假陽性的產(chǎn)生。故出現(xiàn)溶血標(biāo)本應(yīng)當(dāng)在報(bào)告中注明。

3.2 谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）

細(xì)胞內(nèi)ALT含量比血漿中高約7倍，因此溶血后ALT含量測(cè)定的增高主要來源于細(xì)胞內(nèi)ALT的大量釋放。可見與AST相比，ALT受溶血影響輕些，故對(duì)標(biāo)本的要求低一些，但在分析結(jié)果時(shí)要注意考慮溶血的影響。

3.3 總膽紅素（TBIL）

筆者使用的試劑盒是用重氮法測(cè)定總膽紅素的，最后生成紫紅色的偶氮膽紅素，主要在波長(zhǎng)為540～560nm處有光吸收。而血紅蛋白在波長(zhǎng)540～550nm處有光吸收［2］，恰與偶氮膽紅素的比色波長(zhǎng)相近。因此溶血后紅細(xì)胞破裂時(shí)大量血紅蛋白進(jìn)入血清，勢(shì)必造成總膽紅素測(cè)定值的升高，是總膽紅素的正向干擾因素。此外，由于血紅蛋白與重氮試劑反應(yīng)形成的產(chǎn)物可破壞偶氮膽紅素，溶血對(duì)重氮法測(cè)定膽紅素同時(shí)存在負(fù)向干擾，使測(cè)定結(jié)果偏低，但該作用較輕微［3］，因此溶血后由于血紅蛋白對(duì)測(cè)定結(jié)果的干擾，膽紅素的測(cè)定結(jié)果往往偏高。

3.4 肌酐（CRE）

筆者使用的試劑盒是采用苦味酸法測(cè)定CRE的，而苦味酸特異性較差，易受其他還原性物質(zhì)影響，主要是維生素C、酮體、丙酮酸等假肌酐干擾［4］。假肌酐物質(zhì)也可與苦味酸形成顏色反應(yīng)，導(dǎo)致測(cè)定值偏差。這種假肌酐物質(zhì)紅細(xì)胞中最多，血清中較少，故溶血后紅細(xì)胞中假肌酐物質(zhì)是造成測(cè)定值發(fā)生偏差的主要原因。

3.5 溶血原因及防止

高亞英［5］等認(rèn)為溶血的原因主要是操作不當(dāng)和抽血器具不合格造成的。結(jié)合我們?nèi)粘９ぷ鞣治鲈斐扇苎目赡茉蛑饕ǎ海?）由于抽血困難，采血時(shí)定位進(jìn)針不準(zhǔn)、針尖在血管中探來探去造成血腫等而發(fā)生溶血。（2）注射器和針頭連接不緊，采血時(shí)空氣進(jìn)入，在抽取的血標(biāo)本中混有泡沫，這種混有泡

沫的血標(biāo)本，放置一定時(shí)間后泡沫破裂或迅速干燥，造成血細(xì)胞破壞而發(fā)生溶血。（3）血標(biāo)本在運(yùn)輸過程中過度震蕩或貯存不當(dāng)。（4）不合格的塑料制品會(huì)因聚合不完全而具有毒性，這種毒性可造成溶血。（5）試管質(zhì)量粗糙。因此，在采血、檢驗(yàn)過程中必須注意細(xì)心操作，并注意注射器、針頭和試管的質(zhì)量。在報(bào)告檢測(cè)結(jié)果時(shí)要注意溶血的影響，并在數(shù)據(jù)中加以標(biāo)注。

【參考文獻(xiàn)】 Thomas L,Haemolysis as influence and interference factor.The Journal of The International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine,1999,13(4).2 張敏，蒲彥武，闞玫.不同溶血度下20項(xiàng)生化試驗(yàn)結(jié)果分析.西北國(guó)防醫(yī)學(xué)雜志，1997，18（4）：273-274.3 邱谷.溶血對(duì)重氮法血清膽紅素測(cè)定的干擾分析.上海雜志，2000，15（6）：350.4 李影林.中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)全書（上卷）.北京：人民衛(wèi)生出版社，1997，641-860.5 高亞英，王曉明，蔣冬青，等.血液標(biāo)本溶血原因分析及控制.交通醫(yī)學(xué)，2002，16（1）：84.

第三篇：54例溶血標(biāo)本對(duì)肝功能檢驗(yàn)準(zhǔn)確性的影響分析

54例溶血標(biāo)本對(duì)肝功能檢驗(yàn)準(zhǔn)確性的影響分析

【摘 要】 目的 探討標(biāo)本溶血對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響。方法 采用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè) 54例正常人不溶血和溶血血清中的總膽紅素（TBIL）、直接膽紅素（DBIL）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（GGT）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、堿性磷酸酶（ALP）并進(jìn)行配對(duì)資料秩和檢驗(yàn)的統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果 TBIL、DBIL、TP、AST 的值在溶血和非溶血標(biāo)本之間有顯著差異（P <0.01）； ALB 的值在溶血和非溶血標(biāo)本之間無明顯差別。結(jié)論 溶血對(duì)肝功檢驗(yàn)有明顯的干擾和影響。

【關(guān)鍵詞】 溶血標(biāo)本 肝功能檢驗(yàn) 準(zhǔn)確性

低滲溶液或機(jī)械性振蕩等多種理化因素都可引起溶血，因此，溶血是臨床檢驗(yàn)工作難以避免的影響因素和難題川。溶血后的血液細(xì)胞成分對(duì)臨床檢驗(yàn)的生化指標(biāo)有一定的影響。為探討溶血標(biāo)本對(duì)臨床肝功能檢驗(yàn)準(zhǔn)確性的影響，我科對(duì)在我院體檢的健康人群不溶血標(biāo)本和溶血標(biāo)本分別進(jìn)行肝功能生化指標(biāo)測(cè)定，現(xiàn)將結(jié)果分析報(bào)告如下。資料與方法

1.1 臨床資料

研究對(duì)象為2011年12月在我院體檢的健康人54例，年齡28―49歲，無肝腎功能障礙和血液系統(tǒng)疾病。

1.2 方法

本次所有研究對(duì)象均在同一時(shí)間抽取空腹靜脈血4ml，分別注人兩支干燥試管中，每管2ml，其中一管離心5 min后，無肉眼可見的黃疽和乳糜血，直接測(cè)定；另一管先置于-40℃冰箱凍結(jié)30min后，待其融化，然后以同一離心方法分離溶血血清再進(jìn)行測(cè)定。取上述溶血血清和非溶血血清，分別測(cè)定 TBIL、DBIL、TP、ALB、GGT、ALT、AST、ALP 等項(xiàng)目。檢測(cè)試劑為日本第一化藥品株式會(huì)社產(chǎn)品，儀器采用日立 7170A 型全自動(dòng)生化分析儀，檢測(cè)時(shí)儀器性能良好，質(zhì)控在控制范圍內(nèi)，質(zhì)控物為挪威產(chǎn)品。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析處理，計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)。結(jié)果

54例體檢者的溶血血樣標(biāo)本和未溶血血樣標(biāo)本進(jìn)行肝功能檢驗(yàn)，其溶血血樣標(biāo)本中ALP、DBIL、GGT、TBIL濃度相對(duì)于未溶血血 樣 濃度 降低，溶血血樣標(biāo)本中ALT、TP、AST、ALB相對(duì)于未溶血血樣濃度增高，其對(duì)比結(jié)果見表1。討論

3.1 溶血的影響：溶血產(chǎn)生的原因很多，如止血帶結(jié)扎時(shí)間過長(zhǎng)，抽吸力過大、抽血不順利、容器不干凈、離心力過大等，不管何種原因引起的溶血均可產(chǎn)生檢驗(yàn)結(jié)果誤差。本結(jié)果顯示溶血標(biāo)本的肝功指標(biāo)與正常標(biāo)本測(cè)得值有顯著差異，結(jié)果升高或降低。

3.2 溶血原因及其防止：體外溶血可由物理因素（如機(jī)械性破壞、冰凍）、化學(xué)因素（如血樣接觸表面活性劑）和代謝性因素（如遺傳病引起的血細(xì)胞脆性增加）引起。體內(nèi)溶血?jiǎng)t可由物理因素（如人工心臟瓣膜或大血管手術(shù)后）、生物因素（如惡性瘧）和藥物毒性反應(yīng)等因素引起。對(duì)于反復(fù)出現(xiàn)的原因不明的溶血，有時(shí)需要鑒別。為減少失誤和誤差，提高檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，一旦發(fā)現(xiàn)溶血標(biāo)本，應(yīng)采取相應(yīng)的措施。一方面是重新抽取標(biāo)本或?qū)p度溶血標(biāo)本結(jié)果進(jìn)行較正。另一方面是從方法學(xué)上克服或減少溶血的干擾，如Hb對(duì)吸光度的干擾，可通過設(shè)置樣品空白或改用雙波長(zhǎng)比色，導(dǎo)數(shù)分光光度法和動(dòng)力學(xué)法等措施；屬于參與某一分析法化學(xué)反應(yīng)的溶血干擾，只能是改變所用試劑類型。隨著全自動(dòng)生化分析儀的普及，檢查血清標(biāo)本是否溶血，已成為試驗(yàn)過程中質(zhì)控的重要環(huán)節(jié)。

綜上所述，溶血會(huì)直接影響到臨床肝功能檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。為此臨床從采集血液標(biāo)本到檢測(cè)結(jié)束這個(gè)過程，要減少各種客觀因素引起血樣溶血。對(duì)于溶血標(biāo)本應(yīng)該及時(shí)采用補(bǔ)救措施進(jìn)行校正，以此降低溶血對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的影響，若嚴(yán)重溶血需要重新采集血樣，確保血液檢測(cè)的準(zhǔn)確率，為體檢者和患者提供準(zhǔn)確率高的檢測(cè)結(jié)果。

參考文獻(xiàn)

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第四篇：血清標(biāo)本溶血對(duì)血液生化指標(biāo)的影響

血清標(biāo)本溶血對(duì)血液生化指標(biāo)的影響45

血清標(biāo)本溶血對(duì)血液生化指標(biāo)的影響；李大磊1，史文華1，劉志峰1,2；1山東省天然藥物工程技術(shù)研究中心；2煙臺(tái)大學(xué)藥學(xué)院山東省煙臺(tái)市264005；摘要：目的探討血清標(biāo)本溶血對(duì)血液生化檢驗(yàn)結(jié)果的影；關(guān)鍵詞：溶血；生化檢驗(yàn)；；Theinfluenceofhemolysiso；LIDa-lei1，SHIWen-hua1，LI；1．ShandongEngineerin

血清標(biāo)本溶血對(duì)血液生化指標(biāo)的影響 李大磊1，史文華1，劉志峰1,2 1山東省天然藥物工程技術(shù)研究中心 2煙臺(tái)大學(xué)藥學(xué)院 山東省煙臺(tái)市 264005 摘要：目的 探討血清標(biāo)本溶血對(duì)血液生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響，為藥物安全性評(píng)價(jià)的長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)數(shù)據(jù)的分析提供一定的依據(jù)。方法 采用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)10份正常大鼠血液標(biāo)本在溶血前和溶血后血清葡萄糖(GLU)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、肌酐（Cre）、尿素氮(BUN)、膽固醇(CHO)、堿性磷酸酶(ALP)、總膽紅素(TBIL)、鈣（Ca++）、鎂（Mg++）、鈉（Na+）、鉀（K+）、氯（Cl-）的值，并進(jìn)行了比較和統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果 溶血后AST、TBIL、ALT、K+的值比溶血前的值高，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；Cre的值比溶血前的值低，統(tǒng)計(jì)差異顯著；GLU、TP、ALB、BUN、CHO、ALP、Ca++、Mg++、Na+、Cl-的值溶血前后未見明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的改變。結(jié)論 溶血對(duì)血清AST、TBIL、ALTK+、Cre有明顯的干擾影響，提請(qǐng)?jiān)诜治鰷y(cè)定結(jié)果時(shí)注意溶血情況。

關(guān)鍵詞：溶血；生化檢驗(yàn)；

The influence of hemolysis on sericem biochemical tests LI Da-lei1，SHI Wen-hua1，LIU Zhi-feng1,2 1．Shandong Engineering Research Center for Natural Drugs, Yantai, Shandong 264003 2．School of Pharmacy, Yantai University, Yantai, Shandong 264005 Abstraet：Aim To observe the influence of hemolysis on the results of biochemical tests.Methods The blood collected from the rat divided into 2 samples, one of which is to process hemolysis serum, the other is to process normal serum.The serum biochemical data were detected respectively, which include glucose(GLU), alanine aminotransferase(ALT), aspartate aminotransferase(AST), total protein(TP), albumin(ALB), creatinine(Cre), Blood uric nitrogen(BUN), cholesterol(CHO), alkaline phosphal ase(ALP), total bilinibin(TBIL), calcium(Ca++), magnesium(Mg++), natrium(Na+), kalium(K+), chlorin(Cl-).The data were treated with paired-test.Resluts The level of serum AST, TBIL, ALT and K+ increased in hemolysis samples than normal.The level of serum Cre in hemolysis samples is lower than normal.There is no significant difference in serum GLU, TP, ALB, BUN, CHO, Ca++, Mg++, Na+ and Cl-.These results indicate that hemolysis could interfere the results of serum AST, TBIL, ALT, K+ and Cre.The significance of hemolysis on serum biochemical analysis should be regarded in drug safety evaluation.Key words ：Hemolysis；Biochemical analysis 在新藥安全性評(píng)價(jià)的長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)中，血液生化指標(biāo)的分析對(duì)藥物毒性作用的了解和毒作用靶器官的判斷具有重要的意義，是評(píng)價(jià)藥物毒性的重要依據(jù)之一。

長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)的血液生化分析具有其特殊性，例如動(dòng)物尤其是小動(dòng)物的采血是不可重復(fù)的；血液生化測(cè)定結(jié)果的統(tǒng)計(jì)分析受數(shù)據(jù)資料數(shù)的限制等。在工作中往往因各種原因?qū)е聵?biāo)本溶血，溶血樣本不參與結(jié)果分析往往使統(tǒng)計(jì)資料數(shù)偏少，因此血清標(biāo)本溶血時(shí)主要影響哪些指標(biāo)，測(cè)定結(jié)果是否可以參與統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)的分析，是所有藥物安全性評(píng)價(jià)工作者需要了解的問題。為了能及時(shí)客觀地分析生化指標(biāo)的變化是否具有臨床意義，應(yīng)當(dāng)詳細(xì)了解標(biāo)本溶血對(duì)各項(xiàng)血液生化指標(biāo)的影響。目前國(guó)內(nèi)尚未見標(biāo)本溶血對(duì)藥物安全評(píng)價(jià)所要求的十幾項(xiàng)血清生化指標(biāo)影響的報(bào)道，本文觀察了藥物安全評(píng)價(jià)長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)中需要測(cè)定的生化指標(biāo)在標(biāo)本溶血前后檢測(cè)結(jié)果的變化，旨在為標(biāo)本溶血時(shí)血液生化結(jié)果分析提供一定的參考依據(jù)，盡量增加生化測(cè)定數(shù)據(jù)的可利用性。材料與方法 1.1 動(dòng)物來源 SD大鼠，清潔級(jí)。由山東綠葉制藥股份有限公司實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物合格證號(hào)為：魯動(dòng)質(zhì)字D20021133。

1.2 儀器與試劑

AUTOLAB全自動(dòng)生化分析儀（AMS，意大利）。血清電解質(zhì)分析儀(MEDICA，美國(guó)，EASYLYTE PLUS)，試劑原裝。血糖（GLU）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、肌酐（Cre）、尿素氮（BUN）、膽固醇（CHO）、堿性磷酸酶（ALP）、總膽紅素（TBIL）、鎂、鈣血液生化分析試劑盒，均購(gòu)自中生北控生物科技股份有限公司。

1.3 溶血的血清標(biāo)本的制備

取SD大鼠10只，雌雄各半。禁食不禁水12小時(shí)，用水合氯醛麻醉后腹主動(dòng)脈取血6ml，分別注入兩支干燥試管各3ml。其中一支讓其自然凝固，另一支在血液凝固前用金屬棒攪拌

使其溶血，然后以3 000 r*min-1離心10min，取上清液分別為未溶血和溶血的血清標(biāo)本。

1.4 生化指標(biāo)的測(cè)定

用葡萄糖氧化酶法測(cè)定血清葡萄糖(GLU)、連續(xù)監(jiān)測(cè)法測(cè)定谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、雙縮脲法測(cè)定總蛋白(TP)、溴甲酚綠法測(cè)定白蛋白(ALB)、苦味酸法測(cè)定肌酐（Cre）、兩點(diǎn)動(dòng)力法測(cè)定尿素氮(BUN)、酶比色法測(cè)定膽固醇(CHO)、連續(xù)監(jiān)測(cè)法測(cè)定堿性磷酸酶(ALP)、重氮法測(cè)定總膽紅素(TBIL)、鄰甲酚酞絡(luò)合酮比色法測(cè)定Ca++、二甲苯胺藍(lán)法測(cè)定Mg++的值，以上指標(biāo)均用AUTOLAB全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定。用EASYLYTE PLUS測(cè)定血清電解質(zhì)Na+、K+、Cl-的值。結(jié)果

溶血后AST、TBIL、ALT、K+的值比溶血前的值高；Cre的值比溶血前的值低，GLU、TP、ALB、BUN、CHO、Ca++、Mg++、Na+、Cl-的值在溶血前后未見明顯改變（表1）。

Table 1 The influence of sample hemolysis on biochemical tests（X±SD）biochemical datum AST(IU/L)ALT(IU/L)T-BIL(mg/dl)K+(mmol/l)ALP(IU/L)Cre(mg/dl)GLU(mg/dl)Cl-(mmol/l)TP(g/L)ALB(g/L)BUN(mg/dL)CHO(mg/dl)Ca++(mg/dl)Mg++(mg/dl)Na+(mmol/l)3 討論

3.1.谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)人紅細(xì)胞中AST活性約為血漿中的40倍[1]。當(dāng)標(biāo)本溶血時(shí)，勢(shì)必引起血清中AST活性的升高，從而使溶血標(biāo)本的結(jié)果明顯高于未溶血標(biāo)本。AST主要是作為肝損傷的敏感指標(biāo)，Normal Serum 131.5±19.5 42.8±8.5 0.13±0.05 4.6±0.3 255.5±112.4 0.83±0.18 105.5±22.4 107.4±3.7 60.2±4.6 17.2±1.8 20.5±3.8 48.7±6.9 18.8±7.2 1.5±0.8 133.8±1.9 Hemolysis serum 247.7±27.4** 49.9±6.3** 0.49±0.18** 5.9±0.5** 243.1±108.9** 0.61±0.19** 98.7±21.5* 109.0±2.6* 61.2±2.9 17.2±1.3 21.6±4.9 50.7±6.0 20.9±7.8 1.7±0.7 134.9±4.4 % 91.7 18.9 315.0 27.2-5.1-27.7-5.1 1.5 2.1 0.8 4.9 4.6 27.0 42.1 0.8 Compared with normal serum *P<0.05;**P<0.01.測(cè)定結(jié)果的偏高會(huì)導(dǎo)致假陽性的產(chǎn)生，嚴(yán)重影響了藥物毒性的判斷。故溶血標(biāo)本AST的測(cè)定結(jié)果不能用于統(tǒng)計(jì)結(jié)果分析，若出現(xiàn)溶血標(biāo)本，應(yīng)當(dāng)在報(bào)告中注明。

3.2 谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)細(xì)胞內(nèi)ALT含量比血漿中高約7倍，因此溶血后ALT含量測(cè)定的增高主要來源于細(xì)胞內(nèi)ALT的大量釋放。可見與AST相比，ALT受溶血影響輕些，故對(duì)樣品的要求低一些，如果標(biāo)本溶血不很嚴(yán)重，可以參與統(tǒng)計(jì)資料的處理，但在分析結(jié)果時(shí)要注意考慮溶血的影響。

3.3 總膽紅素(TBIL)中生北控生物科技股份有限公司的測(cè)定試劑盒是用重氮法測(cè)定總膽紅素的，最后生成紅紫色的偶氮膽紅素，主要在波長(zhǎng)為540nm～560nm處有光吸收。而血紅蛋白在波長(zhǎng)540nm～550nm處有光吸收[2]，恰與偶氮膽紅素的比色波長(zhǎng)相近。因此溶血后紅細(xì)胞破裂時(shí)大量血紅蛋白進(jìn)入血清，勢(shì)必造成總膽紅素測(cè)定值的升高，是總膽紅素測(cè)定的正向干擾因素。此外，由于血紅蛋白與重氮試劑反應(yīng)形成的產(chǎn)物可破壞偶氮膽紅素，溶血對(duì)重氮法測(cè)定膽紅素同時(shí)存在負(fù)向干擾，使測(cè)定結(jié)果偏低，但該作用較輕微[3]，因此溶血后由于血紅蛋白對(duì)測(cè)定結(jié)果的干擾，膽紅素的測(cè)定結(jié)果往往偏高。

3.4 鉀（K+）

鉀是細(xì)胞內(nèi)液的主要陽離子，約98％的鉀存于細(xì)胞內(nèi)，紅細(xì)胞內(nèi)鉀濃度約為105mmol/L，而血清中僅有3.5 mmol/L～5.4 mmol/L[4]。因此溶血造成血清鉀測(cè)定的增高主要來源于紅細(xì)胞內(nèi)中鉀的大量釋放。有報(bào)道表明血清游離血紅蛋白在 2.5～2.8g / L時(shí)血清鉀增高14%～16%，血清游離血紅蛋白達(dá) 6.6g / L時(shí)血清鉀增高可達(dá)41%[5]，因此在分析血清鉀的結(jié)果時(shí)引起注意。

3.5 肌酐（Cre）

中生北控生物科技股份有限公司的測(cè)定試劑盒是采用苦味酸法測(cè)定Cre的。而苦味酸特異性較差，易受其它還原性物質(zhì)影響，主要是維生素C、酮體、丙酮酸等假肌酐干擾[4]。假肌酐物質(zhì)亦可與苦味酸形成顏色反應(yīng)，導(dǎo)致測(cè)定值發(fā)生偏差。這種假肌酐物質(zhì)紅細(xì)胞中最多，血清中較少，故溶血后紅細(xì)胞中假肌酐物質(zhì)的釋放是造成測(cè)定值發(fā)生偏差的主要原因。

3.6 血清葡萄糖(GLU)中生北控生物科技股份有限公司的測(cè)定試劑盒是采用葡萄糖氧化酶法測(cè)定GLU，葡萄糖氧化酶法的特異性較強(qiáng)，干擾物較少，而過氧化氫酶易受到其它物的影響，如維生素C、谷胱苷肽均因能競(jìng)爭(zhēng)H2O2而導(dǎo)致負(fù)偏差[4]。3.7堿性磷酸酶(ALP)中生北控生物科技股份有限公司的測(cè)定試劑盒是采用連續(xù)監(jiān)測(cè)法測(cè)定ALP的。連續(xù)監(jiān)測(cè)法測(cè)定ALP是通過在405nm處連續(xù)監(jiān)測(cè)生成的黃色對(duì)硝基酚氧離子，根據(jù)單位時(shí)間內(nèi)吸光度的增加來算出ALP的活力，因此排除了血紅蛋白在波長(zhǎng)540nm～550nm處光吸收的影響。故溶血樣本ALP測(cè)定結(jié)果降低的原因可能是紅細(xì)胞破裂逸出了抑制ALP或底物反應(yīng)的物質(zhì)。

3.8 氯（Cl-）

血漿中氯約為103mmol/L，紅細(xì)胞中氯約為49~54mmol/L。溶血會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)的氯離子轉(zhuǎn)移到血清中，從而引起了血清氯離子測(cè)定值得升高。[4] 3.9溶血后對(duì)測(cè)定結(jié)果無明顯影響的項(xiàng)目主要包括總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、膽固醇(CHO)、Ca++、Mg++和Na+。溶血后測(cè)定結(jié)果與未溶血時(shí)比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。可能原因是這些項(xiàng)目的測(cè)定方法受溶血影響不大，因此在新藥的安全評(píng)價(jià)時(shí)可以列入統(tǒng)計(jì)資料中進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析和結(jié)果判定。

3.10 溶血原因及其防止

高亞英[6]等認(rèn)為溶血的原因主要是操作不當(dāng)和抽血器具不合格造成的。結(jié)合我們?nèi)粘９ぷ鞣治鲈斐扇苎目赡茉蛑饕ǎ海?）由于抽血困難，采血時(shí)定位進(jìn)針不準(zhǔn)、針尖在血管中探來探去造成血腫等而發(fā)生溶血。（2）注射器和針頭連接不緊，采血時(shí)空氣進(jìn)入，在抽取的血標(biāo)本中混有泡沫，這種混有泡沫的血標(biāo)本，放置一定時(shí)間后泡沫破裂或迅速干燥，造成血細(xì)胞破壞而發(fā)生溶血。（3）血標(biāo)本在運(yùn)輸過程中過度振蕩或貯存不當(dāng)。（4）不合格的塑料制品會(huì)因聚合不完全而具有毒性，這種毒性可造成溶血；（5）試管質(zhì)量粗糙。

因此，在采血、檢驗(yàn)過程中必須注意細(xì)心操作，并注意注射器、針頭和試管的質(zhì)量。樣本發(fā)生溶血后血清谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)不能參與統(tǒng)計(jì)結(jié)果的處理，其他指標(biāo)在參與統(tǒng)計(jì)結(jié)果處理時(shí)，注意分析溶血的影響，并在數(shù)據(jù)中加以標(biāo)注。

參考文獻(xiàn)

1.Thomas L, Haemolysis as influence and interference factor.The Journal of The International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine[J]，1999,13(4)２． 張敏，蒲彥武，闞玫． 不同溶血度下２０項(xiàng)生化試驗(yàn)結(jié)果分析． 西北國(guó)防醫(yī)學(xué)雜志[J]，1997,18(4):273-274.3.邱谷．溶血對(duì)重氮法血清膽紅素測(cè)定的干擾分析．上海醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志[J]，2000,15(6):350.4.李影林． 中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)全書（上卷）[M] ． 北京：人民衛(wèi)生出版社，1997,641-860.

第五篇：溶血標(biāo)本對(duì)生化檢驗(yàn)的準(zhǔn)確性干擾及糾正性回歸分析

溶血標(biāo)本對(duì)生化檢驗(yàn)的準(zhǔn)確性干擾及糾正性回歸分析

摘要：目的 探討溶血標(biāo)本對(duì)生化檢驗(yàn)的準(zhǔn)確性干擾及糾正性回歸分析。方法 選取健康志愿者共144例，對(duì)其的血液標(biāo)本進(jìn)行采集，并隨機(jī)分為兩組，觀察組患者接受溶血處理，并糾正分析生化檢驗(yàn)指標(biāo)的變化。結(jié)果 觀察組與對(duì)照組相比，其中ALT、TP、ALB、AST、Na+、Cl-、GLU、LDH顯著上升（P0.05）。選取單因素分析中的對(duì)生化檢驗(yàn)有顯著影響的指標(biāo)，建立多元回歸分析，發(fā)現(xiàn)回歸分析的校正范圍減少。結(jié)論 進(jìn)行生化檢驗(yàn)時(shí)，必須要保證血液采集、運(yùn)輸以及檢側(cè)過程的穩(wěn)定性，避免發(fā)生血液溶血，促進(jìn)檢驗(yàn)準(zhǔn)確度的有效提升。

關(guān)鍵詞：溶血標(biāo)本；生化檢驗(yàn)；準(zhǔn)確性；糾正性；回歸分析

血生化檢驗(yàn)在疾病的輔助診斷中得到廣泛的應(yīng)用，臨床發(fā)現(xiàn)溶血會(huì)對(duì)檢驗(yàn)指標(biāo)的準(zhǔn)確性造成影響，進(jìn)而影響到疾病的診治[1]。本次研究選擇健康志愿者的血液標(biāo)本以及溶血標(biāo)本為研究對(duì)象，采用對(duì)比的方法，并對(duì)溶血影響到生化指標(biāo)的準(zhǔn)確性干擾進(jìn)行糾正性的回歸分析，獲得良好效果，現(xiàn)具體報(bào)告如下。資料與方法

1.1一般資料 選取2013年3月～2014年4月我院征集的符合研究需求的144例健康志愿者為研究對(duì)象，隨機(jī)分為對(duì)照組與觀察組，對(duì)照組患者未做處理，觀察組患者接受溶血處理。對(duì)照組患者共72例，其中男34例，女38例，年齡在12～58歲，平均年齡為（36.9±2.1）歲；觀察組患者共72例，其中男36例，女36例，年齡在13～57歲，平均年齡為（37.1±1.4）歲。兩組一般資料差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。組間具有可比性。

1.2方法 所有患者晨起空腹?fàn)顟B(tài)下，采集10 ml的血液標(biāo)本，觀察組血液使用玻璃棒攪拌，進(jìn)行溶血處理，對(duì)照組患者不做處理。觀察組血液以速度為2500 r/min進(jìn)行離心運(yùn)動(dòng)，運(yùn)動(dòng)時(shí)間持續(xù)15 min，之后將血液中的雜質(zhì)排掉，留取血清。對(duì)血液的各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 通過統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 17.0完成對(duì)匯總數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，其中計(jì)量資料則使用平方值±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）形式，組間對(duì)比采取χ2檢驗(yàn)或者t檢驗(yàn)。結(jié)果對(duì)比以P<0.05作為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，以及有顯著性差異。結(jié)果

2.1溶血標(biāo)本影響生化檢驗(yàn)的Pearson單因素分析 觀察組與對(duì)照組相比，其中ALT、TP、ALB、AST、Na+、Cl-、GLU、LDH顯著上升，而TBA、TBIL以及DBIL有明顯下降，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。

2.2溶血標(biāo)本影響生化檢驗(yàn)的多元回歸分析 選取單因素分析中的對(duì)生化檢驗(yàn)有顯著影響的指標(biāo)，建立多元回歸分析，發(fā)現(xiàn)回歸分析的校正范圍減少。討論

血液的生化檢驗(yàn)是屬于對(duì)疾病進(jìn)行輔助檢查的一個(gè)重要項(xiàng)目，它的準(zhǔn)確性與疾病診斷的正確性息息相關(guān)[2]。血液標(biāo)本在采集過程以及檢驗(yàn)過程中，如果出現(xiàn)失誤、意外以及檢驗(yàn)方法不準(zhǔn)確的情況，則會(huì)造成血液溶血情況[3]。溶血是指血細(xì)胞內(nèi)外滲透壓失去平衡，最終使得細(xì)胞膜破損，細(xì)胞液成分進(jìn)入到血液中，造成血清生化指標(biāo)的改變，使得其與正常值存在差距[4]。因而必須要對(duì)影響溶血的因素進(jìn)行研究，預(yù)防臨床檢驗(yàn)中溶血情況的發(fā)生[5]。

生化檢驗(yàn)指標(biāo)受到多種因素的影響，而各個(gè)影響因素之間也存在相互促進(jìn)或者抑制的作用[6]。因此，本次研究不僅做了單因素分析，也做了多因素的糾正性回歸分析[7-8]。利用生化分析儀，對(duì)血清代償記錄，同時(shí)校正實(shí)際的測(cè)定結(jié)果。整個(gè)過程以美國(guó)CIA98效能作為對(duì)比檢驗(yàn)的精度標(biāo)準(zhǔn)，并最終得到校正值所對(duì)應(yīng)的的可接受性，作為判斷溶血為感染準(zhǔn)確性的生化因素[9]。在對(duì)其進(jìn)行單因素分析時(shí)，結(jié)果顯示：溶血影響生化測(cè)定中影響比較大的指標(biāo)是肝功能、心功能以及水電平衡指標(biāo)，對(duì)血液的腎功能影響比較小[10-11]。通過深入糾正分析，可以發(fā)現(xiàn)TBA、ALB以及LDH的預(yù)期可接受性要低于80%，是因?yàn)槿苎绊懙綔?zhǔn)確性的一個(gè)重要指標(biāo)，其他的指標(biāo)改變屬于繼發(fā)性的改變。

綜上所述，進(jìn)行生化檢驗(yàn)時(shí)，必須要保證血液采集、運(yùn)輸以及檢側(cè)過程的穩(wěn)定性，避免發(fā)生血液溶血，促進(jìn)檢驗(yàn)準(zhǔn)確度的有效提升。

參考文獻(xiàn)：

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