第一篇：無菌檢查方法的驗證

無菌檢查方法的驗證

無菌檢查方法是為了檢查藥典要求無菌的制劑及其他制品是否無菌而建立的試驗方法，是作為無菌產品批放行的重要依據及藥監部門對無菌產品質量監管的一個重要項目。因此如何確保無菌檢查方法的準確可靠至關重要，而檢查方法的驗證是保證檢查結果的公正、科學和準確的基礎，因此各個主要國家的GMP或藥典都對無菌檢查方法的驗證提出了嚴格的要求，2010版中國藥典對分析方法驗證和檢查的要求也有大幅度的提高，同時也是GMP檢查中檢查的重點和容易發現問題的區域。

驗證要求與方法

無菌檢查方法驗證一般分為前驗證和再驗證兩種。

前驗證，也稱預驗證，指在無菌分析方法正式使用前，按照預定驗證方案進行的驗證。如果沒有充分的理由，任何檢查方法必須進行前驗證。

再驗證，指某一檢查方法經過驗證并在使用一段時間后進行的，旨在證實已驗證狀態沒有發生飄移而進行的重新驗證及對檢查方法進行修訂、改變時進行的驗證。

通常一個無菌產品的檢查流程為：首先基于產品的劑型、溶解度等性質，按照藥典的要求確定是否需要進行前處理;然后根據產品的特性是否有抑菌性，確定是否需要增加去除產品抑菌性的方法;最后驗證整個檢查方法中用到的一切及試驗過程中的每一個環節包括樣品的預處理方式、檢查過程、培養條件等均不影響樣品中微生物的生長。

這里，驗證的重點環節包括：

前處理方法直接影響后續步驟的效果和重現性，應是驗證的重點。

供試品中抑菌活性的去除是當前驗證工作的重點，尤其強調應充分驗證供試品本身對微生物生長的影響。

具體的驗證方法如下：

菌種的選擇

無菌檢查方法驗證中通常選擇以下6種試驗中常用的控制菌的標準菌株，它們分別代表不同類型的菌種：枯草芽孢桿菌 [CMCC(B)63 501]代表藥品中常見的污染菌——芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌 [CMCC(B)26 003]代表革蘭陽性菌、生孢梭菌 [CMCC(B)64 941]代表厭氧菌、大腸埃希菌 [CMCC(B)44 102]代表革蘭陰性菌、白色念珠菌 [CMCC(F)98 001]代表酵母菌、黑曲霉菌 [CMCC(F)98 003]代表霉菌。

菌液的制備

接種金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、枯草芽孢桿菌的新鮮培養物至營養肉湯培養基中或營養瓊脂培養基上，接種生孢梭菌的新鮮培養物至硫乙醇酸鹽流體培養基中，30~35 ℃培養18~24h;接種白色念珠菌的新鮮培養物至改良馬丁培養基中或改良馬丁瓊脂培養基上，23~28℃培養24~48h，上述培養物用0.9%無菌氯化鈉溶液制成每1ml含菌數小于100cfu的菌懸液。接種黑曲霉的新鮮培養物至改良馬丁瓊脂斜面培養基上，23~28 ℃培養5~7天，加入3~5ml含0.05%(ml/ml)聚山梨酯80的0.9%無菌氯化鈉溶液，將孢子洗脫。然后，采用適宜的方法吸出孢子懸液至無菌試管內，用含0.05%(ml/ml)聚山梨酯80的0.9%無菌氯化鈉溶液制成每1ml含孢子數小于100cfu的孢子懸液。

樣品的前處理

無菌產品中每個成分應該是均勻的，因此只要確定在驗證的方法中，按所需的總接種量即可，而不必像樣品日常檢測中按規定的容器數取樣。

如果制備樣品時需要使用溶解劑、稀釋劑、助溶劑、破乳劑等溶劑，需要確保這些溶劑是有效的，并且其使用對微生物生長無影響;或者制備過程中需要對樣品進行加熱助溶、離心等操作時，需要確保加熱的溫度、離心速度和離心時間等對微生物生長或分布無影響。不需前處理的樣品免做。

消除樣品抑菌性的方法

無抑菌性樣品的驗證方法：依據產品溶解性和微生物限度選擇合適的中性稀釋劑溶解和稀釋，用直接接種法驗證，常用中性稀釋液或淋洗液。

對于具有抑菌性樣品的驗證方法，首先確定樣品的抑菌作用(抑細菌、真菌試驗驗證)，選擇敏感標準菌株對供試品抑菌活性去除效果檢查(陽性菌回收試驗)。常用的消除樣品抑菌活性的方法如下：

稀釋法：利用降低供試品的相對濃度，將樣品稀釋至最低抑菌濃度下進行。如：取規定量的樣品溶液至較大量的培養基中，使單位體積內的樣品含量減少，至不含抑菌作用。

薄膜過濾法：利用體積差異分離，通過薄膜過濾，微生物被截于濾膜，培養薄膜觀察有無微生物生長。通常薄膜孔徑應不大于0.45μm，直徑一般為50?mm，若采用其他直徑的濾膜，沖洗量應進行相應的調整。濾器和濾膜在使用前采用適宜的方法進行滅菌。使用時應保證濾膜在過濾前后的完整性。水溶性供試液過濾前先將少量的沖洗液過濾以潤濕濾膜。油類供試液其濾膜和濾器在使用前應充分干燥。

供試液經過濾膜過濾后，若需要用沖洗液沖洗濾膜，每張濾膜每次沖洗量為100?ml。總沖洗量不得超過1000ml。

化學中和法：利用化學(生物)專屬性滅活，常用中和劑或滅活方法有：對氨基苯甲酸、卵磷脂、聚山梨酯-80等。對化學中和劑不敏感的樣品，用酶中和，如β-內酰胺酶。

聯合使用：將以上兩種或幾種方法組合運用，以消除樣品的抑菌性。適用于抑菌作用較強的中西藥制劑。

其次按照以下要求制備3組樣品：

樣品組：選擇以上適當的方法中和樣品，加入少量驗證微生物(接種量少于100?cfu)。

對照組：0.1%蛋白胨或pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液,加少量微生物(接種量少于100?cfu)。

陽性對照組：將試驗菌株直接接種于培養基中(接種量少于100cfu)。

最后結果分析如下：

樣品組與對照組微生物生長數量相似，表明中和劑的中和方式有效消除了樣品的抑菌性(即有效性)，如果對照組與陽性對照組的微生物數量相似，表明樣品預處理、消除樣品抑菌性的方法、檢測程序和培養條件等均不影響微生物生長(即無毒性)。樣品如無抑菌性，省去對照組試驗，樣品組與陽性對照組直接比較。樣品組微生物生長數量不及陽性對照組微生物生長數量，表明樣品的預處理、試驗用器具材料、培養條件等方面存在對微生物生長不利的因素。

為考查驗證方法的穩定性和重現性，驗證至少需3個不同批次的同類樣品，分別進行3次驗證試驗。

無菌檢查方法驗證試驗設計

薄膜過濾法：按照藥典的要求取每種培養基規定接種的樣品總量按薄膜過濾法過濾、沖洗，在最后一次的沖洗液中加入小于100cfu的試驗菌，過濾。取出濾膜接種至硫乙醇酸鹽流體培養或改良馬丁培養基中，或將培養基加至濾桶內。另取一裝有同體積培養基的容器，加入等量試驗菌，作為對照。按照藥典的要求的溫度和時間進行培養。

直接接種法：取符合直接接種法培養基用量要求的硫乙醇酸鹽流體培養基8管，分別接入小于100cfu的金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、枯草芽孢桿菌、生孢梭菌各2管;取符合直接接種法培養基用量要求的改良馬丁培養基4管，分別接入小于100?cfu的白色念珠菌、黑曲霉各2管。其中1管接入每支培養基規定的供試品接種量，另1管作為對照，按照藥典的要求的溫度和時間進行培養。

結果判斷

同對照管比較，如含供試品各容器中的試驗菌均生長良好，則說明驗證通過;如含供試品的任一容器中的試驗菌生長微弱、緩慢或不生長，驗證失敗，應采用增加沖洗量、增加培養基的用量、使用中和劑和滅活劑、更換濾膜等方法，消除供試品的抑菌作用，重新進行驗證。

新GMP檢查重點

首先要檢查方法驗證方案設計的科學性和完整性，是否有與藥典方法相悖的地方，尤其是產品本身的抑菌性，檢查方法的選擇，是直接接種法還是薄膜過濾法等。

無菌檢查方法驗證的硬件是否具備及是否已經進行了相關的確認。如使用黑曲霉菌是否具有生物安全柜并進行確認，無菌室的確認及日常監測，培養箱的型號及數量和進行確認的情況等，智能集菌器、全封閉無菌試驗過濾培養器的型號、性能，濾膜是否符合規定等。

驗證中各個環節有關數據的真實性，如產品本身抑菌性試驗數據，菌種回收率和培養基適用性和靈敏度檢查數據，菌種的傳代、銷毀和使用記錄，無菌檢查操作記錄、培養記錄等。

無菌檢查中偏差的處理是否真的找到了根本原因，是否在沒有確切的原因前就對樣品重新檢查并依據新的檢查結果放行產品。

驗證的方法與無菌檢查操作規程和無菌檢查記錄是否完全一致，如操作步驟、檢查方法、檢查環境、試驗耗材均需與實際檢查操作規程及驗證過程完全相符。

為了考查驗證方法的穩定性和重現性，驗證時是否至少采用了3個不同批次的同類樣品，分別進行了3次驗證試驗。

使用新的濾膜或過濾器(不同廠家或批號、型號)是否重新進行樣品試驗組、蛋白胨對照組和陽性對照組的驗證確認。

除非樣品不能采用過濾的方法(難溶解)，企業是否采用全封閉的薄膜過濾法。

菌液的保存條件和保存期限是否符合藥典的要求，對于黑曲霉孢子懸液是否有驗證的資料。

無菌檢查的注意事項

培養基的適用性檢查包括培養基的無菌性檢查和培養基的靈敏度檢查。

中國藥典附錄中規定的檢驗數量不包括陽性對照用樣品量，雖然附錄另處有專門說明，仍然容易忽略。

無菌檢查時應強調“檢驗數量”，主要是保證試驗結果的代表性，而陽性對照試驗和驗證時僅須滿足“檢驗量”總量要求即可，以保證試驗結果的可靠性，驗證試驗可以由此減少大量的樣品;

工作菌株的傳代次數不得超過5代，以防止過度的傳代增加菌種變異的風險。這里“代”的定義是指，活的培養物接種到微生物生長的新鮮培養基中培養，任何亞培養的形式均被認為是轉種或傳代一次。

菌液加入，按規定應在最后一次沖洗液中加入陽性菌液，主要是考慮過濾器的有效性。過濾器的有效性應由提供企業控制，用戶可采用適當方法抽查(如檢查陽性菌液通過濾筒的流出液)。

實驗室菌種的處理和保存的程序應標準化，以盡可能減少菌種污染和變異。

試驗時菌懸液并不是只要活的菌體就行，而是要保持旺盛的生命力，所以菌懸液存放時間不能太長。

菌液制備后若在室溫下放置，應在2?h內使用，若保存在2～8℃，可在24?h內使用。黑曲霉孢子懸液可保存在2～8℃，在驗證過的貯存期內使用。

薄膜過濾法采用大樣品量集菌的方法，具有代表性，不易漏檢，儀器操作相對簡單。該系統是全封閉過濾系統，避免了操作過程中外源性微生物的污染，對試驗結果的可信性影響較小。因此無菌試驗采用薄膜過濾法還是直接接種法并不依賴于驗證結果，而是取決于樣品的特性，如能采用過濾的方法均應采用薄膜過濾法檢查。

若樣品含有抑菌成分，當采用薄膜過濾法時，應先將供試液稀釋后在過濾，這樣可以減少濾膜對樣品的吸附，減少沖洗量，進而減少微生物的損失或傷害。

無菌檢查應作為穩定性考察的項目進行，以便對產品有效期的制定和合理的確定儲存條件提供重要的依據。

陽性結果的調查：在無菌檢查中必須小心防止任何可能污染樣品的行為。一旦發現微生物生長，該批產品就被判斷非無菌，必須進行調查。只有可以造成微生物生長的明確原因被找出，方可認為最初的陽性測試結果無效。只有確定且書面記載的證據清楚地證明污染發生在測試過程中，方可進行重新測試。如果已有證據不明確，產品也必須按照不符合無菌需求的產品那樣拒絕放行并報廢。在綜合考慮所有與產品制造和樣品測試相關的因素后，必須匯總成為書面的調查報告，涵蓋確切的結論和整改措施。

試驗操作流程及數據的關聯性、銜接及可追溯性。如儀器使用記錄和試驗記錄的一致，智能集菌器型號數量與試驗記錄一致，菌種收、存、使用記錄與試驗記錄的一致。

第二篇：控制菌檢查方法驗證操作規程

GMP管理文件

題

目

控制菌檢查方法驗證操作規程

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審

核

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準

制訂日期

審核日期

批準日期

頒發部門

質量部

生效日期

分發部門

化驗室

一、目的：為使控制菌檢查的操作規范化、制度化，故建立此規程

二、適用范圍：控制菌檢查必須按本規程執行。

三、責任者：微生物限度檢查化驗員，質量檢測中心主任。

四、正文：

1、控制菌檢查方法適應性試驗1、1

供試液的制備

取樣品10g，用胰酪大豆胨液體培養基（TSB），作為稀釋液制成1：10供試液，混勻，在20～25℃培養,培養時間應使供試品中的細菌充分恢復但不增殖（約2小時）。

1.2

試驗菌

大腸埃希菌和銅綠假單胞菌

1.3適用性試驗

取相當于1mL供試品的上述預培養物及不大于100cfu的大腸埃希菌和銅綠假單胞菌分別接種至適宜體積腸道菌增菌液體培養基中，30～35℃培養24小時后，劃線接種于紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養基平板上，30～35℃培養18小時。應能分別檢出所加大腸埃希菌和銅綠假單胞菌相應的反應特征.1.4結果判斷

上述試驗若檢出試驗菌，按此供試液制備法和控制菌檢查方法進行供試品檢查；若未檢出試驗菌，應消除供試品的抑菌活性，并重新進行

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題

目

控制菌檢查方法驗證操作規程

編碼：

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方法適用性試驗。

1.5耐膽鹽革蘭氏陰性菌的檢查

供試液的制備和預培養：取樣品10g，用胰酪大豆胨肉湯瓊培養基（TSB），作為稀釋液制成1：10供試液，混勻，在20～25℃培養,培養時間應使供試品中的細菌充分恢復但不增殖（約2小時）

1.5.1定性試驗：

除另有規定外，取相當于1g或ml供試品的預培養物接種至適應體積（經方法適用性試驗確定）腸道增菌液培養基中，30～35℃培養24～48小時后，劃線接種于紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養基的平板上，30～35℃

培養18～24小時。

判斷結果：如果平板上無菌生長，判供試品未檢出耐膽鹽革蘭氏陰性菌。

1.5.2定量檢查：

選擇和分離培養：取相當于0.1g、0.01g和0.001g（或0.1ml、0.01、0.001ml）供試品的預培養物或其稀釋劑分別接種至適應體積（經方法適用性試驗確定）腸道增菌液體培養基中，30～35℃培養24～48小時后，上述每一培養物分別劃線接種于紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養基的平板上，30～35℃

培養18～24小時。

判斷結果：若紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養基平板上有菌落生長，則對應培養管為陽性，否則為陰性。

第三篇：實驗室能力驗證方法

實驗室能力驗證方法

第一條 為建立規范的安全生產檢測檢驗機構能力驗證工作機制，根據國家安全生產監督管理總局（以下簡稱國家總局）賦予省級煤礦安全生產監察局的職責，制定本辦法。

第二條 本辦法所稱的能力驗證，是指利用實驗室間指定檢測數據的比對，確定實驗室從事特定測試活動的技術能力。

第三條 能力驗證活動應當遵循科學合理、操作可行、非營利性和避免不必要的重復驗證的原則。

第四條 安徽煤礦安全生產監察局依照有關國家標準、國際準則制定有關實驗室能力驗證工作的基本規范和實施規則，統一監管和綜合協調能力驗證活動。

第五條 能力驗證的組織者應當建立并保存能力驗證檔案及相關記錄，包括：

（一）實施能力驗證的有關文件；

（二）能力驗證的提供者的資質證明；

（三）能力驗證的組織者對能力驗證的提供者的確認記錄；

（四）能力驗證的參加者名單；

（五）能力驗證的技術報告；

（六）能力驗證結果和后續處理文件。

第六條 能力驗證的組織者應當于每年年底向國家總局報告下一的能力驗證計劃，包括：名稱、目的、能力驗證的內容和關鍵技術要素設計、組織單位、實施時間、擬參加實驗室的范圍和數量、能力驗證提供者的資質證明和審核材料等。

第七條 能力驗證的提供者應當符合相關國家標準或者技術規范的要求，其技術能力在相應領域和關鍵技術要素方面領先，并具備可持續性。

第八條 安徽煤礦安全生產監察局組織有關方面專家，對能力驗證的提供者是否符合相關國家標準或者技術規范的要求進行評價。符合要求的，省局確定其作為能力驗證的提供者。

省局鼓勵能力驗證的組織者利用經過國家認監委確定的能力驗證的提供者。

第九條 能力驗證的參加者應當向能力驗證的組織者及時反饋相關信息，并保存相關記錄。

能力驗證結果離群的，應當采取相應的糾正措施。

第十條 能力驗證的組織者應當及時向國家總局通報能力驗證計劃的完成情況、能力驗證結果、后續處理措施等有關事項。

第十一條

第十二條 省局在能力驗證活動完成后向有關方面通報能力驗證活動的結果。同時向社會報告能力驗證結果，定期公布能力驗證滿意結果的實驗室名單。

第十三條 達到滿意結果的安全生產檢測檢驗機構和能力驗證的提供者，在規定時間內接受安全生產檢測檢驗機構資質認定評審時，可以免于該項目的現場試驗。

鼓勵各有關方面利用能力驗證的結果，優先推薦或者選擇達到滿意結果的安全生產檢測檢驗機構承擔省局委托、授權或者指定的檢驗檢測任務。

第十四條 能力驗證的組織者應當對能力驗證的提供者和能力驗證的實施過程實施有效管理。

第十五條 對于能力驗證的結果可疑或者離群的安全生產檢測檢驗機構機構，能力驗證的組織者應當要求其在規定期限內進行整改并驗證整改效果，也可視情況暫停或者撤銷其相關項目的資質認定或者認可，暫停其承擔省局授權、委托或者指定的檢驗檢測任務的資格，直到完成糾正活動并經能力驗證的組織者確認后，方可恢復或者重新獲得認可以及承擔省局授權、委托或者指定的檢驗檢測任務的資格。

第十六條 能力驗證的提供者違反職業道德，弄虛作假或者泄露機密的，省局應當取消其承擔能力驗證的提供者的資格。

能力驗證的參加者弄虛作假、進行串通，經查屬實的，能力驗證組織者視其結果為不滿意。情節惡劣的，省局應當取消其相應項目的檢測資質資格，并報告國家總局備案。

第十七條 省局可以采取組織專家評議、向實驗室征求意見、抽查檔案、要求能力驗證的組織者和提供者報告能力驗證的實施情況等方式，對實驗室能力驗證活動進行監督。

第十八條 能力驗證的參加者對能力驗證的結果有異議的，可以向能力驗證組織者進行申訴；對違規行為可以向能力驗證組織者或者國家總局進行投訴。

第十九條 下列用語的含義：

本辦法所稱能力驗證的提供者，是指從事能力驗證的設計和實施的安全生產檢測檢驗機構。

本辦法所稱能力驗證的參加者，是指參加實驗室間比對，以確定校準或者檢測能力的安全生產檢測檢驗機構。

本辦法所稱的結果可疑，是指按照有關的技術統計方法確定的能力驗證結果界于標準認可值（或者中位值）之間的結果。

本辦法所稱的離群（即結果離群），是指按照有關的技術統計方法確定的明顯偏離標準值（或者中位值）的結果。

第二十一條 本辦法由安徽煤礦安全生產監察局負責解釋。

第二十二條 本辦法自二0一三年十二月一日起施行。

第四篇：方法驗證專屬性驗證試驗（本站推薦）

鹽霉素專屬性驗證（強制降解試驗）

1、酸降解試驗

稱取樣品3.2g,加0.1N的鹽酸40ml溶解，再每隔4小時吸取2ml，加稀釋劑定容，檢測含量。考察是否降解，連續測定直到降解。

2、堿降解試驗

稱取樣品3.2g,加0.1N的氫氧化鈉40ml溶解，再每隔4小時吸取2ml，加稀釋劑定容，檢測含量。考察是否降解，連續測定直到降解。

3、高溫降價

將考察樣品存放在80℃烘箱中考察5-10天，每天取出檢測1次。

4、高濕降價

將考察樣品存放在相對濕度92.5%，25℃（取干燥器，放入硝酸鉀飽和溶液），考察5-10天，每天取出檢測1次。

5、光降解試驗

將考察樣品存放一百二十萬勒克斯（Lx）×小時的冷白熒光燈照射，再經200瓦小時/平方米的紫外熒光燈照射。

6、氧化降解試驗

將考察樣品3.2g，加入不同濃度的雙氧水40ml溶解，再每隔4小時吸取2ml，加稀釋劑定容，檢測含量。考察是否降解，連續測定直到降解。

第五篇：實驗測定方法的驗證

檢測限是指試樣中的被分析物能夠被檢測到的最低量，但不一定要準確定量。該驗證指標的意義在于考察方法是否具備靈敏的檢測能力。判斷方法有非儀器分析目視法（直觀法）與信噪比法

定量限系指樣品中被測物能被定量測定的最低量，其測定結果應具一定準確度和精密度。定量限體現了分析方法是否具備靈敏的定量檢測能力。雜質定量試驗，需考察方法的定量限，以保證含量很少的雜質能夠被準確測出。雜質和降解產物用定量測定方法研究時，應確定方法的定量限。判斷方法有信噪比法。

線性系指在設計的范圍內，測試結果與試樣中被測物濃度直接呈正比關系的程度。范圍系指能達到一定精密度、準確度和線性，測試方法適用的高低限濃度或量的區間。范圍應根據劑型和分析方法的具體應用和線性、準確度、精密度結果和要求確定。

故檢測限、定量限、線性常用對照品試驗。

準確度系指用該方法測定的結果與真實值或認可的參考值接近的程度。對于制劑一般以回收率試驗來進行驗證。中藥制劑及生物藥物分析中，常采用加樣回收率法（在已知含量的樣品A中加入一定量的對照品B），化藥制劑常采用回收率法（在空白輔料中加入原料藥對照品C，還應作單獨輔料的空白測定D），要求至少測定高、中、低三個濃度，每個濃度測定三次，共提供9個數據進行評價。加樣回收率=（測定值M –樣品中含量A）/加入標準品值B×100%

回收率＝（測定值M-空白值D）/ 加入量C×100%

回收率的RSD一般應為2%以內。

精密度系指在規定的測試條件下，同一個均勻樣品，經多次取樣測定所得結果之間的接近程度。精密度一般用偏差、標準偏差或相對標準偏差表示。精密度包括：重復性、中間精密度、重現性。

故準確度及精密度則需用供試品及對照品試驗。

一、準確度(回收率)

準確度系指用該方法測定的結果與真實值或參考值接近的程度，一般以回收率(%)表示。準確度應在規定的范圍內建立。

1．含量測定方法的準確度

原料藥可用已知純度的對照品或樣品進行測定，或用本法所得結果與已建立準確度的另一方法測定的結果進行比較。制劑可用含已知量被測物的各組分混合物進行測定。

如不能得到制劑的全部組分，可向制劑中加入已知量的被測物進行測定，或與另一個已建立準確度的方法比較結果。

如該法已建立了精密度、線性和專屬性，準確度有時也能推算出來，不必再做。

2．雜質定量測定的準確度

可向原料藥或制劑中加入已知量雜質進行測定。

假如不能得到雜質或降解產物，可用本法測定結果與另一成熟的方法進行比較，如藥典標準方法或經過驗證的方法。如不能測得雜質或降解產物的相對響應因子，則可用原料藥的響應因子。

應明確證實單個雜質和雜質總量相當於主成分的重量比(%)，或是面積比(%)。

3．數據要求

在規定范圍內，至少用9次測定結果進行評價，例如制備3個不同濃度的樣品，各測定3次。

應報告已知加入量的回收率(%)，或測定結果平均值與真實值之差及其可信限。

所以加樣回收率反映的是方法的準確度，是評價方法好壞的指標這一，是誤差理論在藥物質量標準中的具體應用。準確度=(測量值-真實值)/真實值*100%。

實際工作中，其實不存在藥物的真實值的(我們所有的數據都是測量值，都是人們用一定的方法測出來的)。其他領域也一樣。

於是人們找一種比較可靠的得到的值規定為真實值。這就是加樣回收率的方法。

比如，為了評價阿司匹林片劑的含量測定方法，用天平稱一定量(如：100mg)的對照品，加入到阿司匹林的片劑輔料中，這一定量的對照品就是真實值。用建立的方法測出來是99mg，這個方法的準確度就是99%，或加樣回收率是99%，根據藥品的具體情況，當這個回收率達到一定范圍時(比如99%-101%)就認為方法是準確的。

在你標準曲線的范圍內的高中低，一般是中間濃度一個，然后低于中間濃度20%一個，高于中間濃度20%一個

不論是擬采用什么方法，就是加樣回收測定，高中低三個劑量，在你的線性范圍內，每個樣品測定三次，最好和試驗一起，沒有系統誤差