第一篇:關于血細胞分析儀的幾個問題
關于血細胞分析儀的幾個問題
一. 發展簡史
1947年美國科學家庫爾特(W.H.Coulter)發明了用電阻法計數粒子的專利技術。1956年他又將這一技術應用于血細胞計數獲得成功,其原理是根據血細胞非傳導的性質,以電解質溶液中懸浮血細胞在通過計數小孔時引起的電阻變化進行檢測為基礎,進行血細胞計數和體積測定,這種方法稱為電阻法或庫爾特原理。1962年,我國第一臺血細胞計數儀在上海研制成功。到了60年代未血細胞分析儀除可進行血細胞計數外,還可以同時測定HGB血紅蛋白。70年代,血小板計數儀問世。80年代,開發了白細胞分類(3分類及5分類)。90年代,開發出了可對網狀紅細胞進行計數的血細胞分析儀,同時5分類及幼稚細胞檢測更成熟,并發展成為血細胞分析流水線。
二. 如何選購血細胞分析儀
當前,在我國境內銷售的的血細胞分析儀品牌很多,給醫院的選購造成了一定的麻煩。如日本SYSMEX公司(東亞醫用電子株式會社)的血細胞分析儀系列、美國庫爾特公司(現已被貝克曼收購)的血細胞分析儀系列、日本光電公司的血細胞分析儀系列、美國丹能公司以及瑞典博爾醫療公司的血細胞分析儀系列。因此建議醫院購買時從以下幾個角度考慮:
1.實用性。醫院應該根據自身的能力和標本量來決定購買何種檔次的機器,不要盲目攀比,爭相購買高檔機器,從而造成儀器購置的浪費。
2.儀器性能。這是最關鍵的一個因素。不能完全相信廠家的宣傳,要多聽取專家意見和到友鄰單位了解。
3.價格比。衡量同檔次機器的價格。
4.售后服務。俗話說:救人如救火。對機器也是一樣,機器損壞待修時間過長會造成病人對醫院的信譽度下降,久而久之就會造成病人的流失。所以,機器的售后服務也是一個必須考慮的因素。
5.輔助設備、試劑、消耗品和零配件價格。要建立請專家進行論證的制度,糾正過去由院長一人說了算的錯誤做法。
三. 如何驗收血細胞分析儀
1.驗收前準備工作:仔細閱讀說明書;按說明書要求準備儀器的工作環境和相關的外部設備;成立驗收小組;擬定驗收計劃。
2.開箱:必要時請商檢局派人參加;開箱后按照裝箱單清點物品是否和裝箱單一致。
3.安裝:應該對安裝過程進行詳細的記錄。
4.驗收儀器的技術性能指標
(1)測定儀器試劑的本底;
(2)檢測儀器的精密度:用高、中、低值新鮮血標本各測10次,計算X-S、CV值,取20~30個標本隨機排列,各測3次,求出總重復性CV%,它代表批內精度、儀器穩定性、互染等因素的總和;
(3)互染率:取高、低兩個濃度全血(高、低值相差4~5倍),先測定高濃度3次,接著測低濃度3次,再測高濃度3次,計算高對低、低對高的互染率;
(4)線性:取全血標本,用鹽水稀釋相當于全血的90%、80%、70%……,測得RBC、WBC、HGB結果做y=a+bx,a接近于0,b接近于1;
(5)校準:應由廠家提供全血校準物(低檔儀器用校準顆粒及HGB校準液)進行校準;
(6)上述指標必須符合該儀器的出廠指標,才算驗收合格。由驗收小組成員、安裝工程師及設備科同志簽字后存檔。
四. 如何對血細胞分析儀進行校準
儀器經使用一個階段后應該作一次全面的校準,因為儀器本身是個比較器。一旦儀器產生漂移將帶來分析誤差及不精密度,所以儀器應該經常定期校準。
1. 儀器校準前準備:徹底清洗管道,去除管道中的殘留血液、吸附的蛋白和纖維等,然后測定試劑空白,本底必須符合要求。
2. 校準物準備:檢查校準物是否在有效期內,外觀有無變質。從冰箱中取出后,必須平衡至室溫,輕輕混勻,小心打開瓶蓋,勿使血液濺出,分裝成兩瓶。
3. 在儀器上測定校準物,連續測定11次。第1次結果棄置不用,將2至11次結果計算S,絕對誤差,相對誤差。
4. 核對實測結果與校準物所示結果,檢查實測結果有無升高或下降的趨向性。
5. 判斷校準結果:校準標準要求如下表1。(1)如果各參數的絕對值誤差和相對誤差小于一級要求,屬合格范圍,不須作任何校準。(2)如果參數大于一級要求,小于二級要求,可按說明書要求調整系數。當調整后,可再測定另一瓶全血標準物,理應達到小于一級要求水平。(3)如果結果大于二級要求,則需通知廠家派工程師修理或調整,為保證病人標本測試質量,該儀器應暫停使用。
6. 表1校準標準 要求
絕對誤差 相對誤差
一級要求 二級要求 一級要求 二級要求
WBC 0.1×109/l 0.4×109/l 1.25% 5%
RBC 0.03×1012/l 0.08×1012/l 0.7% 8.0%
HGB 1g/l 8g/1 0.78% 3.0%
HCT 0.8% 1.7% 2.0% 4.5%
MCV 1.0fl 8.0fl 1.18% 2.5%
PLT 6.0×109/l 20.0×109/l 2.7% 9.0%
MPV 0.50fl 8.0fl 5% 20%
五.使用血細胞分析儀的注意事項
為了保證使用血細胞分析儀得出的結果能夠盡量反映病人的真實情況,在使用時必須注意以下幾方面:
1. 血樣:由于靜脈血受外界因素影響較小,成份比較穩定,檢測結果準確度高重復性好,因此除嬰兒外,建議取血者均應采用靜脈血。如果采集未梢血時,注意不可局部過度擠壓,避免血液中混入大量的組織液,而且易激活凝血系統產生局部凝血,導致檢測結果的誤差;第一滴血由于細胞成分不穩定應棄掉,用第二滴血進行檢測。
2. 抗凝:使用拘櫞酸鹽抗凝劑時間過長易結晶,細胞形態易發生變化,影響計數結果的準確性;草酸鹽易使血小板產生凝集,并可使白細胞形態發生變化,影響計數結果及分類;而肝素抗凝過量易引起白細胞凝集和血小板減少;EDTA-2Na較EDTA-2K的可溶性低,血小板凝集的可能性大。因此國際血液學標準委員會(ICSH)1993年發表的文件中建議使用EDTA-2K作為血細胞分析儀的抗凝劑,用量為1.5~2.2mg/ml血。
3. 采血后用塞子密閉,室溫保存不超過6小時。
4. 稀釋:稀釋器、吸樣管要經過校準。吸血后吸樣管外的血液要完全擦干凈。血液稀釋后要盡快測定,否則易引起“稀釋性溶血”。
5. 混勻:檢測前混勻很重要,如果無旋轉式混勻器應顛倒混勻至少8次。
6. 試劑:血細胞分析儀對試劑的要求非常嚴格,要求有嚴格的滲透壓標準、穩定的導電率、高標準的純凈度以及對儀器管道和閥路無腐蝕作用。因此溶血劑、稀釋液及清洗劑等最好選用原廠配套產品。
7. 白細胞分類:首先必須明確,迄今為止,世界上無論多先進的血細胞分析儀,進行的白細胞分類都只是一種過篩手段,并不能完全取代人工鏡檢分類。要堅決糾正有些單位用了血細胞分析儀就丟掉鏡檢的錯誤思想。
8. 質量控制:血液分析必須建立嚴格的質量控制制度,才能保證結果的可靠性。
六.現代血細胞分析儀的主要進展
隨著高科技的引用和基礎醫學的發展,各種先進的血細胞分析測試技術被應用到血細胞分析儀上。1987年Coulter公司發明的VCS(Volume,V,體積;Conductivity,C,電導性;
Scatter,S,光散射)技術可使血細胞未經任何處理,在與體內形態完全相同的自然狀態下得出檢測結果。而在SYSMEX的NE-8000和SF-3000血細胞分析儀中采用了阻抗和射頻技術聯合的白細胞分類法。進入90年代后,儀器的自動化程度增高(達到120份/小時);可進行多參數分析(高達30余項);精密度高(重復計數;保證微孔管清潔;取中段血;運動流式細胞計數原理;鞘流原理……);向5分類及鑒別幼稚細胞發展;準確度好,全面質量管理,保證儀器檢測可靠性;具有智能化,可對同一病人診斷的前后進行對比,提出綜合意見,確定診斷方向;更加注意保護操作人員的安全(SLS-Hb、自動混勻、進樣、吸樣針內外清洗等);向流水線發展,將血細胞分析儀、網織紅細胞計數儀、推片、染色機聯成流水操作線。最后,再強調一下,堅決反對用了血細胞分析儀后就不進行鏡下復檢和分類的錯誤傾向。
第二篇:自動血細胞分析儀操作規程
4.操作程序 4.1開機啟動
首先開啟儀器主機側面板的電源開關,然后開電腦主機,儀器主機前面板狀態指示燈變為橙綠閃爍,儀器主機初始化后開始自檢,自檢時儀器會自動灌注稀釋液、清洗液及溶血劑,并清洗液路。自檢完成后,儀器進入血液細胞分析窗口。
4.2本底測試
4.2.1放置潔凈的空試管于采樣針下,應確保采樣針輕挨試管底部。在血液細胞分析窗口,點擊“排液”圖標,儀器通過采樣針排出稀釋液到試管中。
4.2.2在血液細胞分析窗口,點擊“編號”圖標,進入下一個編號操作,輸入“0”,再點擊“確定”按鈕返回血液細胞分析窗口。(注意:儀器系統軟件將本底測試的順序號設定為0,試測試數據將不存儲在儀器中,但禁止將血液樣本的順序號設定為0)。
4.2.3將盛有稀釋液的試管放在采樣針下,按儀器前面板的“RUN”鍵,待聽到“滴”的一聲后,方可移走試管。儀器開始自動計數、測量。
4.2.4計數過程中,在窗口的右下方有WBC、RBC的計數計時器,顯示WBC、RBC的計數時間。當計數時間過長或過短時,儀器會發出故障報警,并給出報警提示。若出現報警提示,即參照說明第9章《故障處理》進行處理。
4.3質量控制
首次裝機或在每天進行血液樣本測試之前必須對儀器進行質控,具體參照說明第5章《質量控制》進行處理。
4.4標定
若本底測試,質控結果達不至要求,且某些參數漂移變化較大,則必須對儀器進行重新標定,具體參照說明第6章《標定》進行處理。
4.5血液樣本的采集
4.5.1由于所有的臨床樣本、質控物、標定物均可能含有人血或人的血清,具有潛在的傳染性,因此在處理這些物品時必須遵守已建立的實驗室或臨床操作規程,穿好工作服,戴好醫用手套及安全眼鏡。
4.5.2采血過程避孕必須干凈、無污染,必須使用合格的抗凝劑。嚴禁劇烈搖動采血管。在室溫下,靜脈血只能保存4個小時,若在短時間內不能將血樣處
理完畢,須將血樣存放于2℃~8℃的冷藏室內保存。
4.5.3靜脈血(全血)的采集
利用靜脈穿刺采取靜脈血,放于含有抗凝劑(EDTA-K2·2H2O)的干凈試管內,抗凝劑能夠保持紅細胞、白細胞的形態不變,同時可抑制血小板聚集。輕輕搖動試管5-10次,將試管內的血液徹底搖勻。
4.5.4末梢血(預稀釋)的采集
末梢血的采集一般采用局部穿刺法,典型的采集方法是從指端穿刺采集,采血管用20μL定容采血管。指端穿刺采集血液樣本時,不能過分擠壓穿刺部位,避免組織液混入血液,造成測試分析結果不準確。
4.6全血模式與預稀釋模式的轉換
4.6.1在電腦工作界面點擊“全血”標識,屏幕上將彈出“轉換到預稀釋模式”,點擊“是”,轉換成“預稀釋工作模式”,同時屏幕上的標識變成“稀釋”標識。
4.7血樣計數、分析 4.7.1預稀釋模式
a)將潔凈的空試管置于采樣針下,在血細胞分析窗口,點擊“排液”圖標,儀器通過采樣針排出稀釋液到試管中。
b)試管移出,將20μL定容采血管內的血樣迅速注入到準備好的盛有稀釋液的試管中,并輕輕搖動試管,使血樣與稀釋液混勻。
c)將試管放于采樣針下,應確保采樣針輕挨試管底部。
d)按儀器前面板的“RUN”鍵,待聽到“滴”的一聲后,方可移走試管。e)儀器開始自動分析樣本,請等待分析結果。4.7.2全血模式
a)輕輕搖動盛有標本的試管,血樣充分混勻后,將試管置于采樣針下。b)按儀器前面的“RUN”鍵,待聽到“滴”的一聲后,方可移走試管。c)儀器開始自動分析樣本,請等待分析結果。
注意:在“預稀釋”模式下,必要時可將剩余樣本再進行一次計數。4.8樣本資料的輸入 4.8.1手工資料的輸入
在血液細胞分析窗口,點擊“資料”圖標,彈出資料編輯窗口后,用鼠標點擊需要輸入項目的文本框并輸入資料。資料輸入完畢后,用點擊“確定”按鈕,儀器保存當前編號的資料并返回血液細胞分析窗口。
點擊“下一個”按鈕,可輸入下一個編號的資料,這樣就可以批量輸入樣本資料,然后批量樣本測量。點擊“取消”按鈕,儀器取消本次輸入的資料并返回血液細胞分析窗口。
注意:序號0是儀器本底測試的專用序號,在正式的血液標本測試時請勿輸入此序號。
4.9測量結果分析、處理
儀器提供豐富、便捷的測量結果分析、處理功能。點擊“圖形”圖標,可以修改分析結果。
點擊“傳輸”圖標,可以將當前樣本數據傳輸到網絡。
點擊“記錄”圖標,可以將當前樣本數據的分析報告,通過內置記錄儀打印出來。
點擊“打印”圖標,可以將當前樣本數據的分析報告或瀏覽歷史詳細的報告,通過外置打印機打印出來。
點擊“報警音”圖標,可以關閉故障的警報音,再次點可恢復報警音。點擊“幫助”圖標,可以進入幫助窗口,獲得版本號等信息,點擊“詳細”按鈕,進入幫助文件獲得需要的幫助。
如果儀器分析所得到的參數的數值超過系統所設定的參數界限,儀器會用不同的顏色進行標記。
藍色表示測試參數值低于系統設定的下限;紅色表示測試參數值超過系統設定的上限。
如果計數時間低于系統內部設定的時間,則儀器會提示“WBC氣泡”或“RBC氣泡”,同時在檢測結果前顯示“B”。
如果計數時間高于系統內部設定的時間,則儀器會提示“WBC堵孔”或“RBC堵孔”,同時在檢測結果前顯示“C”。
當WBC直方圖出現報警時,R1,R2,R3,R4,RM分別表示如下含義: *R1報警:提示淋巴細胞左側區域異常,可能原因:RBC溶血不全、血小板凝
結、巨大血小板、瘧原蟲、有核紅細胞、異常淋巴細胞、冷凝球蛋白及脂類克立等。
*R2報警:提示淋巴和單核細胞間區域異常,可能原因:異型淋巴細胞、異常淋巴細胞、姜細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞增多、原幼細胞等存在。
*R3報警:提示單核細胞與粒細胞之間區域異常,可能原因:有未成熟粒細胞、異常細胞和嗜酸性粒細胞存在。
*R4報警:提示粒細胞右側區域異常,可能原因:粒細胞增多。
*RM報警:提示在白細胞的分區中,除以上區域外的多區存在異常,可能原因:以上多種原因共同存在。
當PLT的直方圖出現異常時,其右側會出現Pm報警提示,Pm報警的具體含義為:
*PM報警:提示血小板與紅細胞交界處區域異常,可能原因:有血小板凝結、大血小板、小的紅細胞、細胞碎片和纖維蛋白存在。
注意:若系統測試所得到的參數數值為“***”,表示本次測試數據為無效數據。(測試本底除外)
注意:當PLT直方圖出現Pm報警時,參數PDW的測試值有可能為“***”。注意:當WBC的測試結果的數值小于0.5*109/L時,白細胞分類可能不準確,白細胞分類可能不準確,建議手工復查。
4.10報告輸出
儀器提供內置熱敏記錄儀和外接打印機兩種設備,可根據用戶的需要配置。當血液樣本分析完成后:
點擊“傳輸”圖標,可以將當前樣本數據傳輸到網絡。
點擊“記錄”圖標,可以將當前樣本數據的分析報告,通過內置記錄儀打印出來。
點擊“打印”圖標,可以將當前樣本數據的分析報告或瀏覽歷史詳細的報告,通過外置打印機打印出來。
當“自動打印”被選中:
若“記錄儀”被選中,內置記錄儀會自動打印出測試報告; 若“外接打印機”被選中,外接打印機會自動打印出測試報告;
若同時被選中,則記錄儀和打印機可以同時輸出報告。若“自動傳輸”被選中,儀器會自動將測試數據傳輸到網絡。
記錄儀、打印機、傳輸及測試報告的格式再“設置”窗口進行設置,具體設置方法、步驟請參考參照本說明書第4章《儀器設置》。
4.11分析結果修改
當操作者認為儀器的WBC、RBC、PLT浮動解表自動分類不能滿足臨床或實驗室的特殊樣本的分類需求,操作者可以根據臨床或實驗室的實際情況,采用人工移動分類界標進行WBC、RBC、PLT的調整。
注意:不必要或不正確的人工移動分類界標,可能導致不可信的分析結果。在用于臨床前建議用鏡檢驗證。
具體方法、步驟如下:
a)在血液細胞分析窗口,點擊“圖形”圖標,此時WBC直方圖被選中,其圖形被紅白相間的矩形框包圍,點擊屏幕下方的“參數”圖標可以選擇需要調整的WBC、RBC、PLT直方圖參數。
b)確定要修改的直方圖參數后,點擊“分類”圖標,選擇需要調整的分類限,選中的分類限會由綠色虛線變為粉紅色實線。
c)根據需要點擊“左移”圖標或“右移”圖標,可分別向左或右移動選中的分類線,在直方圖的左下方同時顯示選中的分類線的數值,同時相應的檢測結果也隨著分類線的移動面變化。
d)調整完成后,點擊“返回”圖標,出現提示對話框,點擊“取消”圖標可以取消本次調整結果,點擊“確定圖標則存儲本次調整結果。
4.12關機
a)在血液細胞分析窗口,點擊屏幕右上角的“關機”圖標,屏幕彈出關機窗口。
b)若關閉儀器,點擊“是”。
c)儀器開始對液路進行保養、清洗,關機程序運行完畢后,儀器會自動退出系統,此時關閉儀器后面板的電源開關。
d)清理工作臺并處理廢液。
注意:禁止違規進行關機操作,否則將導致儀器性器性能和可靠性的降低。
5.支持性文件
5.1 URIT-3300全自動血液細胞分析儀使用說明書。5.2LZCDC-BX04檢測設備操作規程編寫要求。
第三篇:血細胞分析儀的基本結構
血細胞分析儀的基本結構
血細胞分析儀的基本結構介紹:
各類型血細胞分析儀結構各不同。但大都由機械系統、電學系統、血細胞檢測系統、血紅蛋白測定系統、計算機和鍵盤控制系統等,以不同的形式組成。
1.機械系統
各類型的血細胞分析儀雖結構各有差異,但均有機械裝置(如全自動進樣針、分血器、稀釋器、混勻器、定量裝置等)和真空泵,以完成樣品的吸取、稀釋、傳送、混勻,以及將樣品移入各種參數的檢測區。此外,機械系統還發揮清洗管道和排除廢液的功能。
2.電學系統
電路中主電源、電壓元器件、控溫裝置、自動真空泵電子控制系統以及儀器的自動監控、故障報警和排除等。
3.血細胞檢測系統
國內常用的血細胞分析儀,使用的檢測技術可分為電阻抗檢測和光散射檢測兩大類。
1)電阻抗檢測技術:由信號發生器、放大器、甄別器、閾值調節器、檢測計數系統和自動補償裝置組成。這類主要用在二分類或三分類儀器中。
2)光散射檢測技術:主要由激光光源、檢測區域裝置和檢測器組成。
激光源:多采用氬離子激光器,以提供單色光。
監測區域裝置:主要由鞘流形式的裝置構成,以保證細胞混懸液在檢測液流中形成單個排列的細胞流。
檢測器:散射光檢測器系光電二極管,用以收集激光照射細胞后產生的散射光信號;熒光檢測器系光電倍增管,用以接受激光照射熒光染色后細胞產生的熒光信號。
這類檢測技術主要應用于“五分類、五分類+網織紅”的儀器中。
4.血紅蛋白測定系統由光源、透鏡、濾光片、流動比色池和光電傳感器組成。
5.計算機和鍵盤控制系統。
第四篇:血細胞分析儀簡介
血細胞分析儀簡介
血細胞分析儀又叫血液細胞分析儀、血球儀、血球計數儀等,是醫院臨床檢驗應用非常廣泛的儀器之一,隨著近幾年計算機技術的日新月異的發展,血細胞分析的技術也從三分群轉向五分群,從二維空間進而轉向三維空間,而且我們也注意到現代血細胞分析儀的五分類技術許多采用了和當今非常先進的流式細胞儀相同的技術,如散射光檢測技術、鞘流技術、激光技術等等。
一、發展歷史
20世紀初期,莫爾德蘭采用光電器進行血細胞計數;1947年拉格克蘭茨采用高效光電倍增管加上光電掃描技術及暗視野照明法進行學習吧檢測分析,克服了莫爾德蘭光電法中存在的問題,可試用于臨床;1958年,庫爾特在前人的基礎上,采用電阻率變化與電子技術相結合的方法,研制出性能比較穩定、操作比較方便的血液分析儀,稱為庫爾特電子血球計數器。20世紀60年代,以庫爾特原理為基礎的各種類型血液分析儀應運而生并廣泛應用,逐步替代了傳統的顯微鏡常規操作。70年代,在庫爾特原理上開發出了以激光鞘流技術為基礎的各類血液分析儀。80年代初推出了雙通道儀器,除可直接計數血小板外,還能得到淋巴細胞總數和百分數等14個參數。90年代以來,有的學者根據幼稚細胞和成熟細胞膜的結構差異進行細胞分類,特別是對幼稚細胞的檢測,為血細胞計數儀開創了新的領域。基本原理
根據血細胞信號的獲取方式不同,其原理可以歸納為5種:光電式、電容式、電阻式、離心式和激光散射式。
二、檢測方法
1.體積、電導、激光散射法(VCS)
這是Beckman-Coulter公司生產的血細胞分析儀所采用的經典分析方法,它集三種物理學檢測技術于一體,在細胞處于自然原始的狀態下對其進行多參數分析。該方法也稱為體積、電導、激光散射血細胞分析法。此技術采用在標本中首先加入紅細胞溶血劑溶解掉紅細胞,然后加入穩定劑來中和紅細胞溶解劑的作用,使白細胞表面、胞漿和細胞體積保持穩定不變。然后應用鞘流技術將細胞推進到流動細胞計數池(Flowcell)中,接受儀器VCS三種技術的檢測。
V代表體積(Volume)測量法,是采用經典的庫爾特專利技術,用低頻電流準確分析細胞體積。體積是區分白細胞亞群的一個重要的參數,它可有效區分體積大小差異顯著的淋巴細胞和單核細胞。
C代表高頻電導性(Conductivity),采用高頻電磁探針原理測量細胞內部結構間的差異,也是該公司的專利技術。細胞膜對高頻電流具有傳導性,當電流通過細胞時,細胞核的化學組份可使電流的傳導性產生變化,其變化量可以反映出細胞內含物的信息。該參數可用來區分體積相近而內部性質不同的細胞群體,如淋巴細胞和嗜堿性粒細胞,由于它們的細胞核特性不同而在傳導性參數上有所區別。
S代表激光散射(Scatter)測量技術,采用氦氖激光源發出的單色激光掃描每個細胞,收集細胞在10°~70°角度內出現的散射光(MALS)信號。該激光束可穿透細胞,探測細胞內核分葉狀況和胞漿中的顆粒情況,提供有關細胞顆粒性的信息,可以區分出顆粒特性不同的細胞群體。例如細胞內顆粒粗的要比顆粒細的散射光更強,因此可以用于區分粒細胞中的嗜中性、嗜酸性和嗜堿性三種細胞。
2.電阻抗、射頻與細胞化學聯合檢測技術
典型機型如SysmexSE-9000/SE-9500/XE-2100等。這類儀器共有四個不同的檢測系統,將標本用特殊細胞染色技術處理后再應用RF和DC技術對白細胞進行分類和計數。其共采用如下四個檢測系統:
嗜酸性粒細胞檢測系統:該系統是利用電阻抗方式計數。血液經分血器分血后部分與嗜酸性粒細胞計數溶血劑混合,特異的溶血劑使嗜酸性粒細胞以外的所有細胞均溶解或萎縮,這種含完整嗜酸性粒細胞的液體經阻抗電路計數。
嗜堿性粒細胞系統:該系統檢測原理與嗜酸性粒細胞相同,不同的是其溶血劑只能保留血液中的嗜堿性粒細胞。
淋巴、單核、粒細胞(中性粒細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞)檢測系統:該系統采用電阻抗與射頻聯合檢測方式,使用作用較溫和的溶血劑,對核及細胞型態影響不大。在內外電極上存在直流和高頻兩個發射器。由于直流電不能達到細胞質及核質,而射頻電能透入胞內測量核大小和顆粒多少,因此這兩種不同的脈沖信號的個數及高低綜合反映了細胞數量、大小(DC)和核及顆粒密度(RF)。由于淋巴細胞、單核細胞及粒細胞的大小、細胞質含量、核形態與密度均有較大差異,故可通過掃描得出其比例。幼稚細胞檢測系統:該系統也是利用電阻抗方式計數。其原理是由于幼稚細胞上的脂質較成熟細胞少,在細胞懸液中加入硫化氨基酸后,由于脂質占位不同,結合在幼稚細胞上的硫化氨基酸較成熟細胞多,且對溶血劑有抵抗作用,故能保持幼稚細胞的形態完整而溶解成熟細胞,即可通過阻抗法檢測。3.激光散射和細胞化學染色技術
在白細胞分類上,儀器采用兩個通道進行,一個為過氧化酶檢測通道,另一個為嗜堿細胞檢測通道。
過氧化酶反應(peroxidase,POX)是血涂片染色的一個常用細胞化學染色方法,用于鑒別原始細胞與成熟的粒細胞,鑒別粒細胞與非粒細胞。染色后的細胞內無藍黑色顆粒出現為陰性反應,出現細小顆粒或稀疏樣分布的黑色顆粒為弱陽性反應,出現黑色粗大而密集的顆粒為強陽性反應。過氧化物酶主要存在于粒細胞系和單核細胞系中,各類白細胞對過氧化物酶的反應是這樣的:早期的原始粒細胞為陰性,早幼粒以后的各階段都含有過氧化物酶,并隨著細胞的成熟過氧化酶含量逐漸增強,中性分葉核粒細胞會出現強陽性反應,嗜酸性粒細胞具有最強的過氧化物酶反應,嗜堿粒細胞不含此酶呈陰性反應。在單核細胞系統,除早期原始階段外,幼稚單核和單核細胞會出現較弱的過氧化物酶反應。淋巴細胞、幼稚紅細胞、巨核細胞等都為過氧化物酶陰性反應。過氧化酶檢測通道就是根據這個原理設計的,它檢測每一個通過流動計數池中的白細胞,經過激光照射所產生的過氧化酶散射光吸收率,來當然試劑和輔助試劑均進行了改良。1)過氧化酶最強陽性的嗜酸性粒細胞; 2)過氧化酶強陽性的嗜中性分葉核粒細胞; 3)體積較大、過氧化酶弱陽性的單核細胞; 4)體積較小、過氧化物酶陰性的淋巴細胞;
5)體積大于淋巴細胞且過氧化物酶陰性的未染色大細胞,此類細胞增加提示幼稚或原始的各類細胞可能出現。
在嗜堿細胞通道中采用的檢測原理是:專用的嗜堿細胞試劑將除了嗜堿細胞以外的白細胞除去細胞膜,使其裸核化并體積變小,僅將嗜堿性粒細胞保持原有狀態,體積明顯大于其他類的白細胞。4.多角度偏振光激光散射技術
美國雅培公司(ABBOTT)推出的血細胞分析儀,在白細胞分類中采用獨特的多角度偏振光散射(MAPSS)技術,其所生產的血細胞計數儀從CELL-DYN 3000,3200,3500,3700,4000,以及Sapphire(藍寶石),在白細胞分類上均采用了MAPSS技術。該技術基本原理是細胞在激光束的照射下,在多個角度都產生散射光,儀器在四個角度的四個檢測器將接收到的相應的散射光信號,然后經過微處理器分析處理,將各類細胞安置在散點圖上的相應位置,并計算出白細胞分類結果。
多角度偏振光散射白細胞分類技術(Multi—Angle Polatised Scatter Separation of white cell,MAPSS)其原理是一定體積的全血標本用鞘流液按適當比例稀釋。其白細胞內部結構近似于自然狀態,因嗜堿性粒細胞顆粒具有吸濕的特性,所以嗜堿性粒細胞的結構有輕微改變。紅細胞內部的滲透壓高于鞘液滲透壓而發生改變,紅細胞內的血紅蛋白從細胞內游離出來,而鞘液內的水分進入紅細胞中,細胞膜的結構仍然完整,但此時的紅細胞折光指數與鞘液的相同,故紅細胞不干擾白細胞檢測。在鞘流系統的作用下,樣本被集中為一個直徑30μm的小股液流,該液流將稀釋的血細胞單個排列,然后通過激光束,激光照射于細胞上,在各個方向都有其散射光出現。
1)0°為前向角散射光,可粗略地測定細胞大小;
2)10°為狹角散射光,可測細胞結構及其復雜性的相對特征; 3)90°垂直光散射,主要對細胞內部顆粒和細胞成分進行測量。4)90°為消偏振光散射,基于顆粒可以將垂直角度的偏振激光消偏振的特性,將嗜酸細胞從中性粒細胞和其它細胞中分離出來。
5)這四個角度同時對單個白細胞進行測量和分析后,即可將白細胞劃分為嗜酸性粒細胞、中性粒細胞、嗜堿性粒細胞、淋巴細胞和單核細胞5種。ABBOTT的五分類法定量很有意思,不用傳統的體積定量,而是采用數量定量,每次計數時完成10000個細胞測定即停止。
三、分類結構 1.分類
⒈)按自動化程度分:半自動血細胞分析儀、全自動血細胞分析儀和血細胞分析工作站、血細胞分析流水線;
⒉)按檢測原理分:自動化血液細胞分析儀按其工作原理主要可分為電阻型、激光型和運用多項高新技術的綜合運用型(應用流式細胞術,細胞化學染色,特殊細跑質去除法等)。?電阻型血液分析儀
血液按一定比例稀釋后經負壓吸引通過儀器的一個微孔小管,由于血細胞與稀釋液相比是相對不良導體,當每個血細跑通過微孔時均擠代等體積的稀釋液在電路上形成一短暫的電阻而導致電壓的變化,產生相應的脈沖信號并經放大、甄別后被累加記錄。脈沖數被轉換為細胞數量;脈沖的高低與細胞體積大小成正比,經計算機處理得出各種血細胞的數量、血細胞體積大小的平均數、變異系數、占全血體積的百分比和體積大小分布直方圖等。一般儀器分為紅細胞/血小板和白細胞/血紅蛋白兩個通道,白細胞/血紅蛋白通道需加入溶血劑使紅細胞破壞后測定血紅蛋白、白細胞數量和粗略分類(按溶血后白細胞體積大小分出兩類或三類白細胞)。
由于電阻型血液細胞分析儀操作簡便、快速、分析參數較多、價格便宜,目前已在國內普遍使用。?激光型血液分析儀
血液按一定比例稀釋后形成一個極細的液流穿過激光束,每個血細胞被激光照射后產生光散射并被光電倍增管接收。細胞的前向角散射與細胞的體積大小有關、側向角(或高角)散射與細胞的內部結構、顆粒性質等有關,細胞數量則與細胞通過激光束時光散射的脈沖次數相同。各種檢測信號被放大、甄別后經計算機處理可得到各種血細胞的數量和體積大小的平均數、變異系數、占全血體積的百分比及體積大小分布直方圖等.血紅蛋白測定同電阻型儀器.白細胞可分為三類細胞。
激光型比電阻型儀器穩定,不易受外電場的干擾,但激光管壽命有限。
?綜合型血液分析儀
此類儀器是多種先進的細胞分析技術的高度綜合應用,對血細胞的分析參數更多,結果也更準確。如Coulter VCS血細胞分析儀就采用了體積分析、高頻傳導和激光散射等多項技術,Technicon H*3血細胞分析儀則采用了激光流式細胞分析、細胞化學染色、細胞分光光度術等多項技術。Technicon H*3的分析參數可達四十余項,對紅細胞除可作一般分析外尚可對單個細胞內血紅蛋白含量、濃度、細胞大小不等、高低色素性變化做出定量描述,而且可測定網織紅細胞的數量、形態、體積、血紅蛋白含量及濃度等.對白細胞可分出三類5種并提示幼稚細胞數量,還可對核象左移、核象右移、過氧化物酶染色強度作定量描述,而且還能分析淋巴細胞亞群等。
此類綜合型儀器的性能代表了當今血液細胞分析儀的最新發展趨勢,但價格昂貫,在臨床常規血液學檢查方面尚難普及。
⒊按儀器分類白細胞的水平分:二分群、三分群、五分群、五分群+網織紅血細胞分析儀。2.基本結構
各類型血細胞分析儀結構各不同。但大都由機械系統、電學系統、血細胞檢測系統、血紅蛋白測定系統、計算機和鍵盤控制系統等,以不同的形式組成。3.機械系統
各類型的血細胞分析儀雖結構各有差異,但均有機械裝置(如全自動進樣針、分血器、稀釋器、混勻器、定量裝置等)和真空泵,以完成樣品的吸取、稀釋、傳送、混勻,以及將樣品移入各種參數的檢測區。此外,機械系統還發揮清洗管道和排除廢液的功能。電學系統
電路中主電源、電壓元器件、控溫裝置、自動真空泵電子控制系統以及儀器的自動監控、故障報警和排除等。4.血細胞檢測系統
國內常用的血細胞分析儀,使用的檢測技術可分為電阻抗檢測和光散射檢測兩大類。
⑴電阻抗檢測技術:由信號發生器、放大器、甄別器、閾值調節器、檢測計數系統和自動補償裝置組成。這類主要用在二分類或三分類儀器中。
⑵光散射檢測技術:主要由激光光源、檢測區域裝置和檢測器組成。
⑶激光源:多采用氬離子激光器,以提供單色光。
⑷監測區域裝置:主要由鞘流形式的裝置構成,以保證細胞混懸液在檢測液流中形成單個排列的細胞流。
⑸檢測器:散射光檢測器系光電二極管,用以收集激光照射細胞后產生的散射光信號;熒光檢測器系光電倍增管,用以接受激光照射熒光染色后細胞產生的熒光信號。這類檢測技術主要應用于“五分類、五分類+網織紅”的儀器中。5.血紅蛋白測定系統
由光源(一般為540nm波長)、透鏡、濾光片、流動比色池和光電傳感器組成。6.計算機和鍵盤控制系統
使檢測過程更加快捷、方便。
四、注意事項
為了保證使用血細胞分析儀得出的結果能夠盡量反映病人的真實情況,在使用時必須注意以下幾方面:
1.血樣:由于靜脈血受外界因素影響較小,成份比較穩定,檢測結果準確度高重復性好,因此除嬰兒外,建議取血者均應采用靜脈血。如果采集未梢血時,注意不可局部過度擠壓,避免血液中混入大量的組織液,而且易激活凝血系統產生局部凝血,導致檢測結果的誤差;第一滴血由于細胞成分不穩定應棄掉,用第二滴血進行檢測。
2.抗凝:使用拘櫞酸鹽抗凝劑時間過長易結晶,細胞形態易發生變化,影響計數結果的準確性;草酸鹽易使血小板產生凝集,并可使白細胞形態發生變化,影響計數結果及分類;而肝素抗凝過量易引起白細胞凝集和血小板減少;EDTA-2Na較EDTA-2K的可溶性低,血小板凝集的可能性大。因此國際血液學標準委員會(ICSH)1993年發表的文件中建議使用EDTA-2K作為血細胞分析儀的抗凝劑,用量為1.5~2.2mg/ml血。
3.采血后用塞子密閉,室溫保存不超過6小時。4.稀釋:稀釋器、吸樣管要經過校準。吸血后吸樣管外的血液要完全擦干凈。血液稀釋后要盡快測定,否則易引起“稀釋性溶血”。
5.混勻:檢測前混勻很重要,如果無旋轉式混勻器應顛倒混勻至少8次。
6.試劑:血細胞分析儀對試劑的要求非常嚴格,要求有嚴格的滲透壓標準、穩定的導電率、高標準的純凈度以及對儀器管道和閥路無腐蝕作用。因此溶血劑、稀釋液及清洗劑等最好選用原廠配套產品。
7.白細胞分類:首先必須明確,迄今為止,世界上無論多先進的血細胞分析儀,進行的白細胞分類都只是一種過篩手段,并不能完全取代人工鏡檢分類。要堅決糾正有些單位用了血細胞分析儀就丟掉鏡檢的錯誤思想。
8.質量控制:血液分析必須建立嚴格的質量控制制度,才能保證結果的可靠性。
第五篇:五分類全自動血細胞分析儀
五分類全自動血細胞分析儀
1、白細胞五分類全自動血細胞分析儀,檢測速度CBC/Diff ≥59 標本/小時。
2、測定參數包括細胞計數,細胞分類,幼稚細胞,異型淋巴細胞等,不少于26項, 其中研究用參數不得少于6項。
★
3、血小板檢測要求有脈沖編輯、重疊校正、兩次計數等至少3項技術確保檢測準確
4、要有嗜堿細胞的檢測通道
★
5、能用末梢全血檢測白細胞五項分類,所需試劑種類為5種
6、CBC+Diff分析全血進樣量要求:≤53?L
7、有廢液報警功能
★
8、要求有原廠生產的校準品和質控品,要求校準品有溯源性,并提供溯源性證明文件。★
9、免費提供的實驗室質量保證活動(IQAP),達到實驗室與國際接軌。★
10、CAP認可的免日常維護,操作簡便。★
11、精密度要求達到 WBC RBC Hgb HCT <2% <2%(10X103細胞/μl)(5X106細胞μl)
<1%
(15g/dl)
<2% <5%(45%)(300X103細胞/μl)PLT
★
12、廠家在河南省有獨立注冊的服務機構(提供營業執照)
★
13、中標單位須在中標通知書下發三日內,攜帶中標通知書與廠家授權書(或代理商授權書)與用戶簽訂合同。肺功能檢查儀檢測(便攜式)
一、檢測項目:
用力肺活量(FVC)、肺年齡、靜息肺活量(SVC)、最大通氣量(MVV)、支氣管擴張試驗(BD)、支氣管激發試驗(PC20)
二、測量指標:
1、FVC(用力肺活量):FVC、PEF、FEV0.75、FEV1、FEV3、FEV6、FEV0.75/FVC、FEV1/FVC、FEV3/FVC、FEV6/FVC、FEV0.75/FEV6、FEV1/FEV6、EVE、LUNG AGE
2、流速容積曲線:PIE、FIVC、FIV1、FIV1/FIVC
3、呼吸峰流速:PEFT、MEF75、MEF50、MEF25、FEF75、FEF50、FEF25、MMEF、FET25、FET50、MIF75(FIF75)、MIF50(FIF50)、MIF25(FIF25)、FEF50/FIF50(R50)
4、肺齡、肺器官年齡損害程度
5、VC/SVC(靜息肺活量):VC/SVC、ERV、IRV、TV、IC、IVC
6、MVV(最大肺通氣量):MVV、MVVF、MRF
7、支氣管擴張試驗(BD):VC/SVC,FVC,MVV
8、支氣管激發試驗:PC20
三、技術性能/指標:
★
1、全中文操作界面及可選不同格式的打印報告,方便各級醫院,特別是基層醫護人員操作使用
★
2、采用可調彩色6英寸觸摸屏,薄膜按鍵方便選擇、快捷操作
3、最新的LILLY型壓差式雙向流速傳感器,測試精確度高重復性好
★
4、傳感器采用航天納米UM薄膜過濾技術,耐用且防止交叉感染,方便更換、清洗、消毒。★
5、內置自動BTPS傳感器,實時調整環境數據,實時校對傳感器有效保障測試數據的精準度
★
6、專門設有特殊人群測試指導卡通動畫,提高老齡及幼齡受測者的測試質量。
★
7、專門設有激發試驗,擴張試驗規程菜單,按不同測試要求自行編輯藥物名稱和劑量,檢查結果自動計算,結果用不同顏色曲線標識,清晰明了,無需額外高額購買激發升級軟件,檢測質量穩定,性價比高,準確安全
★
8、全面的肺通氣功能檢查和一口氣用力肺活量檢查可供選擇,醫護人員可因臨床檢查或大規模體檢的要求相互切換,提高工作效率。更適合體檢中心與疾控中心 ★
9、專門設有由全球肺創儀肺功能預計值公式專責委員鄭勁平的預計值公式。適合全球所有年齡,多民族男女。可根據測試者年齡自動采用成人或兒童預計值公式,統計數據廣泛、準確、權威。
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10、自帶高速熱敏打印機和USB輸出端口,可通過儀器熱敏打印圖文豐富的報告,或通過USB輸出端口連接計算機打印A4紙報告,中文報告顯示,隨意編輯所需的項目參數
11、測試結果自動分析并選擇最佳結果,儲存空間300份完整報告,并儲存電腦數據庫 ★
12、內置蓄電池,可交流、直流兩用。可便攜使用,方便醫生臨床,外出體檢使用。★
13、可升級心、肺功能檢測儀
14、流速:16L/WITH
精度:±5%或50ml/s(更大值適用)
15、容積范圍:0.025L-8L
容量精確度:±3%或50毫升(更大值適用)
16、產品通過CE認證,中國與美國FDA認證和ISO國際認證
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四、中標單位須在中標通知書下發三日內,攜帶中標通知書與廠家授權書(或代理商授權書)與用戶簽訂合同。