第一篇：檢驗實驗室工作總結(jié)

2014年,對我們食品室來說, 是適應(yīng)新形勢，確立新思路，采取新措施，邁上新臺階的一年，是開創(chuàng)新局面，樹立新形象的一年。一年來,在單位領(lǐng)導(dǎo)的正確領(lǐng)導(dǎo)下,我試驗室團結(jié)協(xié)作，扎實工作，積極的完成項目下達(dá)的各項工作任務(wù)。在此，我對2014年本科室的工作做一下簡要的匯報：

2014年我科室主要從事對科室人員的思想政治教育工作，科室檢驗制度建立工作、加強安全意識、食品實驗室資質(zhì)認(rèn)定和檢測工作及l(fā)ims系統(tǒng)建設(shè)和對新儀器的保養(yǎng)和培訓(xùn)工作。

一、積極參加各項政治活動和業(yè)務(wù)學(xué)習(xí)，提高自身思想認(rèn)識和服務(wù)技能，提高職的素質(zhì)，學(xué)習(xí)貫徹四中全會精神和黨的群眾路線教育實踐活動“為民務(wù)實清廉”為主題，為群眾解決實際問題。教育科室人員必須有務(wù)實的精神，必須要有切合實際的意識，加大辦實事的力度，提高辦實事的能力。尤其要切實解決好那些群眾迫切需要解決的急事，增強解決實際問題的主動性。一定要主動把群眾最難辦的事掛在心上，抓在手里，以非凡的力氣，極大的毅力予以解決。要敢于到困難最大、矛盾最集中、群眾意見最多的地方去，與人民群眾打成一片，聽取群眾的意見和建議，共同研究解決困難的辦法。全面落實2014年各項工作任務(wù)，以學(xué)習(xí)四中全會精神為核心，健全工作運行機制，有針對性的做好思想政治教育工作，營造風(fēng)清氣正、積極向上的良好氛圍，為各項工作開展提供思想和組織保證。

二、建立健全科室、個人各項規(guī)章制度及質(zhì)量控制制度，一切工作以檢驗質(zhì)量為核心，避免差錯事故的發(fā)生,堅持要求我科室人員具有高度的服務(wù)意識，全力搞好檢驗工作。結(jié)合科室實際情況對檢驗中出現(xiàn)的問題認(rèn)真加以研究和解決，年內(nèi)無檢驗事故發(fā)生。

三、安全實驗是日常的工作中的重要組成部分，為防止火災(zāi)發(fā)生，配備消防器材，加強試驗室人員的安全用電意識。每天下班前，對水、電、氣及門窗進行安全檢查，防止火災(zāi)發(fā)生。加強試劑試藥管理，對易制毒，腐蝕性試劑的領(lǐng)用做好登記，做到不少記不漏記。對未用完的藥品，根據(jù)情況進行合理處理。確保試劑試藥的安全使用。

四、在2014年，我食品室全體人員集思廣益，挖潛提效，根據(jù)我科室的具體情況，新開展了包括食品檢驗、藥品檢驗，化妝品檢驗等95個新檢驗項目，提高了科室檢查能力和個人技能，完成了食品實驗室資質(zhì)認(rèn)定，對以后的保健品、食品、化妝品檢測做出了充分的準(zhǔn)備。

五、2014年進行各種試驗檢驗

批次，其中

檢驗

批次，檢驗

批次。為了保證工作質(zhì)量，科室本年度投入

元購買了國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，在分析過程中進行質(zhì)量控制，以期達(dá)到保證質(zhì)量的目的。面對如此艱巨的任務(wù)，我食品室沒有絲毫退縮，分工明確，責(zé)任落實到人。為了及時完成工作任務(wù)主動加班，最終確保了工作的順利進展。

六、順利完成食品室lims系統(tǒng)的建設(shè)。2014年，在工程師的大力幫助下，組織全體人員進行l(wèi)ims系統(tǒng)的學(xué)習(xí)。對食品報告100多個模板進行了設(shè)計和制作。為以后lims系統(tǒng)的啟用打下了堅實的基礎(chǔ)。

七、對新儀器的保養(yǎng)及培訓(xùn)共進行

次。在培訓(xùn)過程中，我食品室全體人員認(rèn)真聽講，做了詳盡的筆記。經(jīng)過這些培訓(xùn)，更加強化了工作人員對儀器的熟悉程度，方便作好各實驗儀器的維護和保養(yǎng)工作，對出現(xiàn)各類故障，認(rèn)真研究積極應(yīng)對并及時自行解決，既保證了我科各類儀器的正常運行，又為單位節(jié)省了維修成本。為以后簡潔高效的完成實驗工作邁出了第一步。

八、加大檢驗人員業(yè)務(wù)培訓(xùn)力度。科學(xué)技術(shù)是第一生產(chǎn)力。科學(xué)技術(shù)是實驗室工作的基礎(chǔ)。今年在領(lǐng)導(dǎo)的大力支持下，我科室先后派出多名實驗人員參加培訓(xùn)，通過培訓(xùn)，我科室檢驗人員的專業(yè)知識和職業(yè)素質(zhì)有了較大提升。有效的促進了單位實驗室的建設(shè)。進一步提高業(yè)務(wù)水平，充分發(fā)揮了食品室的職能，為食品質(zhì)量安全檢驗工作的開展提供了有效的技術(shù)支撐。

盡管在2014年取得了一定的成績，但在科室勞動紀(jì)律、制度建設(shè)、等方面仍然存在一些不盡如人意之處。在2015年，我科室將對以下方面的工作加以重視：

1、進一步抓好安全工作，實現(xiàn)安全工作的目標(biāo)。

2、狠抓實驗室的各項管理，完善質(zhì)量管理體系，使實驗室管理工作上一個新臺階。

3、保質(zhì)保量按時完成實驗任務(wù)，使檢驗工作得以順利開展。

3、進一步完成實驗室方法配套工作，加強對老員工專業(yè)知識的學(xué)習(xí)，使他們在工作更好的發(fā)揮作用；加強對新員工的專業(yè)技能知識的培訓(xùn)，使他們早日成為本實驗室業(yè)務(wù)骨干。

4、做好新儀器的方法試驗安裝調(diào)試工作，更好的發(fā)揮儀器的作用。

5、加強同各兄弟單位的廣泛聯(lián)系，學(xué)習(xí)各先進實驗室的先進經(jīng)驗，使實驗室的工作邁進一個新的行列。

6、廣泛聽取各方面的建議與意見，不斷完善實驗室各方面的工作，使實驗室的工作達(dá)到盡善盡美。

第二篇：檢驗實驗室管理制度

檢驗實驗室制度

檢驗實驗室安全管理制度

1.所有藥品、標(biāo)樣、溶液都應(yīng)有標(biāo)簽，絕對不要在容器內(nèi)裝入與標(biāo)簽不相符的藥品。

2.禁止使用實驗室的器皿盛裝食物，也不要用茶杯、食具盛裝藥品，更不要用燒杯等當(dāng)茶具使用。3.濃酸、燒堿具有強烈的腐蝕性，切勿濺到皮膚和衣服上，使用濃硝酸、鹽酸、硫酸、高氯酸、氨水時，均應(yīng)在通風(fēng)廚或在通風(fēng)情況下操作，如不小心濺到皮膚或眼內(nèi)，應(yīng)立即用水沖洗，然后用5%碳酸氫納溶液（酸腐蝕時采用）或5%硼酸溶液（堿腐蝕時采用）沖洗，最后用水沖洗。

4.易燃溶劑加熱時，必須在水浴或沙浴中進行，避免使用明火。切忌將熱電爐放入實驗柜中，以免發(fā)生火災(zāi)。

5.裝過強腐蝕性、可燃性、有毒或易爆物品的器皿，應(yīng)由操作者親手洗凈。空試劑瓶要統(tǒng)一處理，不可亂扔，以免發(fā)生意外事故。

6.移動、開啟大瓶液體藥品時，不能將瓶直接放在水泥地板上，最好用橡皮布或草墊墊好，若為石膏包封的可用水泡軟后開啟，嚴(yán)禁用錘砸、打，以防破裂。

7.取下正在沸騰的溶液時，應(yīng)用瓶夾先輕搖動以后取下，以免濺出傷人。

8.將玻璃棒、玻璃管、溫度計等插入或拔出膠塞、膠布時應(yīng)墊有棉布，兩手都要靠近塞子或用甘油、甚至水，都可以將玻璃導(dǎo)管很容易插入或拔出塞孔中，切不可強行插入或拔出，以免折斷刺傷人。

9.開啟高壓氣瓶時應(yīng)緩慢，并不得將出口對人。

10.使用易燃易爆物品的實驗，要嚴(yán)禁煙火，不準(zhǔn)吸煙或動用明火，易燃易爆物品的儲存必須符合安全存放要求。使用酒精噴燈時，應(yīng)先將氣孔調(diào)小，再點燃。酒精不能加的太多，用后應(yīng)及時熄滅酒精燈。11.嚴(yán)禁用濕手去開啟電閘和電器開關(guān)，凡漏電儀器不要使用，以免觸電。12.消防器材要放在明顯位置，嚴(yán)禁將消防器材移作別用。

13.發(fā)生事故，必須按規(guī)定及時上報有關(guān)部門，重大事故要立即搶救，保護好現(xiàn)場。

14.保持實驗室環(huán)境整潔，走道暢通，設(shè)備器材擺放整齊。實驗室用的所有儀器，都應(yīng)嚴(yán)格遵守操作規(guī)程，儀器使用完畢后拔出插頭，將儀器各部旋鈕恢復(fù)到原位。實驗室人員管理制度

1.實驗人員應(yīng)嚴(yán)格掌握，認(rèn)真執(zhí)行本室相關(guān)安全制度、儀器管理、藥品管理、玻璃器皿管理制度等相關(guān)要求。

2.進入實驗室必須穿工作服，進入無菌室換無菌衣、帽、鞋、戴好口罩，非實驗室人員不得進入實驗室，嚴(yán)格執(zhí)行安全操作規(guī)程。

3.實驗室內(nèi)要經(jīng)常保持清潔衛(wèi)生，每天上下班應(yīng)進行清掃整理，桌柜等表面應(yīng)每天用消毒液擦拭，保持無塵，杜絕污染。

4.實驗室應(yīng)井然有序，物品擺放整齊、合理，并有固定位置。禁止在實驗室吸煙、進餐、會客、喧嘩，或作為學(xué)習(xí)娛樂場所，不得存放實驗室外個人用品、儀器等。嚴(yán)禁在冰箱、溫箱、烘箱、微波爐內(nèi)存放和加工私人食品。

5.隨時保持實驗室衛(wèi)生，不得亂扔紙屑等雜物，測試用過的廢棄物要倒在固定的箱桶內(nèi)，并及時處理。

6.試劑應(yīng)定期檢查并有明晰標(biāo)簽，儀器定期檢查、保養(yǎng)、檢修。各種器材應(yīng)建立請領(lǐng)消耗記錄，貴重儀器填寫使用記錄，破損遺失應(yīng)填寫報告，藥品、器材等不經(jīng)批準(zhǔn)不得擅自外借或轉(zhuǎn)讓，更不得私自拿出。

7.進行高壓、干烤、消毒等工作時，工作人員不得擅離現(xiàn)場，認(rèn)真觀察溫度、時間、壓力等。

8.嚴(yán)禁用口直接吸取藥品和菌液，按無菌操作時，如發(fā)生菌液等濺出時，應(yīng)立即用有效消毒劑進行徹底消毒，安全處理后方可離開現(xiàn)場。

9.實驗完畢，即時清理現(xiàn)場和實驗用具，對于有毒、有害、易燃、腐蝕的物品和廢棄物應(yīng)按有關(guān)要求執(zhí)行，兩手用清水肥皂洗凈，必要時用消毒液泡手，然后用水沖洗，工作服應(yīng)經(jīng)常清洗，保持整潔，必要時高壓消毒。

10.離開實驗室前，尤其節(jié)假日應(yīng)認(rèn)真檢查水、電、氣、汽和正在使用的儀器設(shè)備，關(guān)好門窗方可離去。11.部門負(fù)責(zé)人督促本制度嚴(yán)格執(zhí)行，根據(jù)情況給予獎懲，出現(xiàn)問題應(yīng)立即處理、上報。儀器使用管理制度

1.實驗室儀器安放合理，貴重儀器由專人保管，建立儀器檔案，并備有操作方法、保養(yǎng)、維修、說明書及使用登記本。

2.各儀器做到經(jīng)常維護、保養(yǎng)和檢查，精密儀器不得隨意移動，若有損壞不得私自拆動，應(yīng)及時報告通知相關(guān)人員，經(jīng)總經(jīng)理同意后送儀器維修部門。

3.實驗室所使用的儀器、容器應(yīng)符合標(biāo)準(zhǔn)要求，保證準(zhǔn)確可靠，凡計量器具須經(jīng)計量部門檢定合格方能使用。

4.易被潮濕空氣、酸液或堿液等侵蝕而生銹的儀器，用后應(yīng)及時擦洗干凈，放通風(fēng)干燥處保存。

5.易老化變粘的橡膠制品應(yīng)防止受熱、光照或與有機溶劑接觸，用后應(yīng)洗凈置于帶蓋容器或塑料袋中存放。

6.各種儀器設(shè)備（冰箱、溫箱除外），使用完畢后要立即切斷電源，旋鈕復(fù)原歸位，待仔細(xì)檢查后方可離開。

7.一切儀器設(shè)備未經(jīng)部門主管同意，不得外借，使用的按登記本內(nèi)容進行登記。微生物檢驗操作規(guī)程

1.實驗前用0.2%過氧乙酸擦凈臺面及四周，放好需用的實驗器材及各種溶液，開紫外燈消毒40-60分鐘。2.進入無菌室前應(yīng)用肥皂洗手，然后用75%酒精球棉將手擦干凈。

3.進入無菌間必須穿的專用工作服、帽及拖鞋、口罩，應(yīng)放在無菌室緩沖間，工作前經(jīng)紫外線消毒后使用。4.使用的吸管、平皿及培養(yǎng)基等必須經(jīng)消毒滅菌，打開包裝未使用的器皿，不能放置再用，消毒用器皿放置不得超過一周。

5.從包裝中取出吸管時，吸管尖部不能觸及外露部位及試管或平皿邊。

6.接種樣品必須在酒精燈前操作，接種樣品時，吸管從包裝中取出后及打開試管塞都要通過火焰消毒。7.實驗完畢，清潔瓷磚臺面。

8.用過的器材進行整理，污染細(xì)菌的器材需經(jīng)高壓滅菌或煮沸消毒。

9.實驗者在實驗后用肥皂清洗雙手或?qū)㈦p手浸泡于0.2%過氧乙酸溶液中3分鐘，用清水沖洗，再用肥皂清洗雙手。

10.換下的隔離衣、帽等進行高壓消毒，拖鞋放回原處。11.用畢，再開紫外燈消毒 40—60分鐘。12.無菌室和緩沖間每周大掃除一次，保持整潔。

13.每月進行一次紫外線對空氣消毒效果測定，如燈管發(fā)黑，超過使用期限，及時更換紫外燈管。儀器破損賠償制度

1、教師在領(lǐng)取實驗儀器、工具時，要填好實驗通知單或登記冊，歸還時做好驗收工作，如有損壞辦好賬冊注銷、簽名手續(xù)。

2、學(xué)生未經(jīng)實驗教師同意，擅自違章操作而破壞儀器，應(yīng)按價按情處理賠償。對隨手將實驗器材帶出實驗室的要加倍賠償并進行思想教育。

第三篇：實驗室檢驗和試驗管理制度

一、目的為了規(guī)范檢驗、試驗秩序和行為，實現(xiàn)生產(chǎn)分析檢驗和試驗活動的有效性和時效性，準(zhǔn)確提供質(zhì)量數(shù)據(jù)，達(dá)到質(zhì)量體系符合性要求，特制定本管理制度。

二、范圍

本管理制度適用于化驗室一切檢驗和試驗活動全過程及與之相關(guān)的活動過程。

三、管理要求

1、檢驗程序

1.1按規(guī)定要求采取樣品，并做好登記和標(biāo)識。

1.1.1對于外購化工料，依據(jù)質(zhì)量安全環(huán)保部質(zhì)檢組發(fā)下來的委托單，到現(xiàn)場核對實物，按規(guī)定采樣。

1.1.2對外購大宗原材料和內(nèi)部互供料，接到生產(chǎn)調(diào)度或有關(guān)裝置崗位人員的采樣電話通知后到現(xiàn)場采樣。

1.1.3對于過程檢驗和試驗，按《分析頻率》的規(guī)定到生產(chǎn)裝置現(xiàn)場采樣。

1.1.4對成品檢驗和試驗，按《分析頻率》或質(zhì)量管理要求到生產(chǎn)裝置現(xiàn)場或指定部位采樣。

1.1.5接到生產(chǎn)裝置或調(diào)度臨時生產(chǎn)加樣通知時，按要求到指定部位采樣。

1.1.6采樣作業(yè)，要執(zhí)行《化驗室采樣、留樣及樣品室管理制度》。

1.2采樣后，按規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)和試驗方法進行檢驗和試驗。然后，按要求備好保留樣品，并做好標(biāo)識。

1.3檢驗過程中要嚴(yán)格遵守操作規(guī)程，對那些影響檢驗結(jié)果準(zhǔn)確度的因素諸如塵埃、溫濕度、振動、噪聲等要密切注意，并嚴(yán)加控制。杜絕主觀隨意性，注意樣品處理的安全性和操作安全性以及儀器的靈敏性和穩(wěn)定性。操作時，不得擅自離開工作崗位。

1.4檢測過程中，要按方法規(guī)定進行雙平行或多平行測定，其結(jié)果應(yīng)符合方法精密度要求。數(shù)據(jù)處理與結(jié)果計算要遵循數(shù)字修約規(guī)則，有效數(shù)字不得隨意舍棄。

1.5若發(fā)現(xiàn)檢測結(jié)果異常或?qū)嶒炂钆c方法規(guī)定有偏離時，檢驗人員不要輕易下結(jié)論，應(yīng)認(rèn)真查記錄、查計算、查操作、查試劑、查方法、查樣品，找出原因后有針對性地進行復(fù)驗。

1.6要認(rèn)真及時填寫好質(zhì)量記錄。所有原始記錄必須使用專用表格，書寫工整、清楚、真實、準(zhǔn)確、完整。不準(zhǔn)用鉛筆記錄，不得隨意涂改、亂寫、亂畫和折疊。當(dāng)發(fā)生筆誤時，用“-”注銷，并在“-”上方由本人更正。對未發(fā)生的少量空白項畫斜杠，整項未發(fā)生時，應(yīng)在此項欄內(nèi)情況印上“作廢”、“檢修”、“停運”等印章。

1.7質(zhì)量記錄分為分析檢驗原始記錄、分析檢驗報告單、分析檢驗日報表、質(zhì)量監(jiān)督日報表和產(chǎn)品質(zhì)量合格證五種。化驗室涉及到原始記錄和報告單兩種。

1.8分析數(shù)據(jù)應(yīng)即時填入原始記錄，需計算的分析結(jié)果應(yīng)在確認(rèn)無誤后填寫，分析檢驗原始記錄必須由分析者本人填寫，在崗其他分析人員復(fù)核(兩檢制)，確認(rèn)無誤后，報告給組長。分析者應(yīng)對原始記錄的真實性和檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性負(fù)責(zé)，復(fù)核人員應(yīng)對計算公式及計算結(jié)果的準(zhǔn)確性負(fù)責(zé)。

1.9組長接收到分析數(shù)據(jù)，經(jīng)審核確認(rèn)無誤后(三檢制)，立即用電話報告給生產(chǎn)裝置或有關(guān)部門，對不合格數(shù)據(jù)，還要在交接班日記上做好標(biāo)識。組長要對數(shù)據(jù)報告的及時性、準(zhǔn)確性和完整性負(fù)責(zé)，對報告單的質(zhì)量負(fù)責(zé)。

2、質(zhì)量記錄要按月、季或年編目成冊，做好標(biāo)識，歸檔保管。質(zhì)量記錄一般可在分析站保留三個月，超期后將記錄送交化驗室質(zhì)量記錄存放室歸檔保存。

3、嚴(yán)格執(zhí)行國家關(guān)于質(zhì)量記錄和文件管理有關(guān)規(guī)定，妥善保管質(zhì)量記錄，中控分析原始記錄一般保存一年，原料和產(chǎn)品分析原始記錄、分析檢驗報告單、分析檢驗日報表、質(zhì)量監(jiān)督月報表和產(chǎn)品質(zhì)量合格證一般保存3年。

第四篇：實驗室檢驗和試驗管理制度 （本站推薦）

一、目的為了規(guī)范檢驗、試驗秩序和行為，實現(xiàn)生產(chǎn)分析檢驗和試驗活動的有效性和時效性，準(zhǔn)確提供質(zhì)量數(shù)據(jù)，達(dá)到質(zhì)量體系符合性要求，特制定本管理制度，實驗室檢驗和試驗管理制度。

二、范圍

本管理制度適用于化驗室一切檢驗和試驗活動全過程及與之相關(guān)的活動過程。

三、管理要求

1、檢驗程序

1.1按規(guī)定要求采取樣品，并做好登記和標(biāo)識。

1.1.1對于外購化工料，依據(jù)質(zhì)量安全環(huán)保部質(zhì)檢組發(fā)下來的委托單，到現(xiàn)場核對實物，按規(guī)定采樣。

1.1.2對外購大宗原材料和內(nèi)部互供料，接到生產(chǎn)調(diào)度或有關(guān)裝置崗位人員的采樣電話通知后到現(xiàn)場采樣。

1.1.3對于過程檢驗和試驗，按《分析頻率》的規(guī)定到生產(chǎn)裝置現(xiàn)場采樣。

1.1.4對成品檢驗和試驗，按《分析頻率》或質(zhì)量管理要求到生產(chǎn)裝置現(xiàn)場或指定部位采樣。

1.1.5接到生產(chǎn)裝置或調(diào)度臨時生產(chǎn)加樣通知時，按要求到指定部位采樣。

1.1.6采樣作業(yè)，要執(zhí)行《化驗室采樣、留樣及樣品室管理制度》。

1.2采樣后，按規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)和試驗方法進行檢驗和試驗。然后，按要求備好保留樣品，并做好標(biāo)識。

1.3檢驗過程中要嚴(yán)格遵守操作規(guī)程，對那些影響檢驗結(jié)果準(zhǔn)確度的因素諸如塵埃、溫濕度、振動、噪聲等要密切注意，并嚴(yán)加控制。杜絕主觀隨意性，注意樣品處理的安全性和操作安全性以及儀器的靈敏性和穩(wěn)定性。操作時，不得擅自離開工作崗位。

1.4檢測過程中，要按方法規(guī)定進行雙平行或多平行測定，其結(jié)果應(yīng)符合方法精密度要求。數(shù)據(jù)處理與結(jié)果計算要遵循數(shù)字修約規(guī)則，有效數(shù)字不得隨意舍棄。

1.5若發(fā)現(xiàn)檢測結(jié)果異常或?qū)嶒炂钆c方法規(guī)定有偏離時，檢驗人員不要輕易下結(jié)論，應(yīng)認(rèn)真查記錄、查計算、查操作、查試劑、查方法、查樣品，找出原因后有針對性地進行復(fù)驗，管理制度《實驗室檢驗和試驗管理制度》。

1.6要認(rèn)真及時填寫好質(zhì)量記錄。所有原始記錄必須使用專用表格，書寫工整、清楚、真實、準(zhǔn)確、完整。不準(zhǔn)用鉛筆記錄，不得隨意涂改、亂寫、亂畫和折疊。當(dāng)發(fā)生筆誤時，用“-”注銷，并在“-”上方由本人更正。對未發(fā)生的少量空白項畫斜杠，整項未發(fā)生時，應(yīng)在此項欄內(nèi)情況印上“作廢”、“檢修”、“停運”等印章。

1.7質(zhì)量記錄分為分析檢驗原始記錄、分析檢驗報告單、分析檢驗日報表、質(zhì)量監(jiān)督日報表和產(chǎn)品質(zhì)量合格證五種。化驗室涉及到原始記錄和報告單兩種。

1.8分析數(shù)據(jù)應(yīng)即時填入原始記錄，需計算的分析結(jié)果應(yīng)在確認(rèn)無誤后填寫，分析檢驗原始記錄必須由分析者本人填寫，在崗其他分析人員復(fù)核(兩檢制)，確認(rèn)無誤后，報告給組長。分析者應(yīng)對原始記錄的真實性和檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性負(fù)責(zé)，復(fù)核人員應(yīng)對計算公式及計算結(jié)果的準(zhǔn)確性負(fù)責(zé)。

1.9組長接收到分析數(shù)據(jù)，經(jīng)審核確認(rèn)無誤后(三檢制)，立即用電話報告給生產(chǎn)裝置或有關(guān)部門，對不合格數(shù)據(jù)，還要在交接班日記上做好標(biāo)識。組長要對數(shù)據(jù)報告的及時性、準(zhǔn)確性和完整性負(fù)責(zé)，對報告單的質(zhì)量負(fù)責(zé)。

2、質(zhì)量記錄要按月、季或年編目成冊，做好標(biāo)識，歸檔保管。質(zhì)量記錄一般可在分析站保留三個月，超期后將記錄送交化驗室質(zhì)量記錄存放室歸檔保存。

3、嚴(yán)格執(zhí)行國家關(guān)于質(zhì)量記錄和文件管理有關(guān)規(guī)定，妥善保管質(zhì)量記錄，中控分析原始記錄一般保存一年，原料和產(chǎn)品分析原始記錄、分析檢驗報告單、分析檢驗日報表、質(zhì)量監(jiān)督月報表和產(chǎn)品質(zhì)量合格證一般保存3年。

4、質(zhì)量記錄在保存過程中，應(yīng)防止潮濕、霉變、蟲蛀；丟失和盜用，注意防火與通風(fēng)。質(zhì)量記錄的使用與管理要遵守質(zhì)量體系程序文件的規(guī)定。

5、遵守化驗室分析檢驗、試驗工作基本規(guī)則。

6、上級抽檢時，質(zhì)量安全環(huán)保部質(zhì)檢組可以直接安排到分析站，分析站要做好登記，同時將自測數(shù)據(jù)與抽檢結(jié)果進行比對，以驗證檢驗實驗室能力和室間精密度。

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第五篇：微生物檢驗實驗室基本要求知識點

病毒是一類體積微小、結(jié)構(gòu)簡單、具有嚴(yán)格的寄生于活細(xì)胞的微小生物，它們具有下列幾種基本特征：

1、病毒的基本結(jié)構(gòu)是由核酸（基因組）與蛋白質(zhì)組成，由DNA或RNA組成核心，外有一蛋白外殼（核殼），有些病毒在核殼外面另有一層脂蛋白組成的包膜包圍著。

2、病毒只在活細(xì)胞中增殖，因為病毒缺乏完整細(xì)胞器等必要裝置，所以必須依賴宿主細(xì)胞提供高分子合成裝置和能量。

3、病毒非常微小，無細(xì)胞結(jié)構(gòu)，絕大多數(shù)不能用光學(xué)顯微鏡檢查，而必須用電子顯微鏡才能察見。核酸化學(xué)：

DNA是脫氧核糖核酸的英文縮寫。RNA與DNA差別在核糖2'位帶有一個羥基。DNA ①DNA起儲存遺傳信息作用，并以核苷酸排列順序形式儲存遺傳信息。②由4種核苷酸組成DNA分子，由堿基互補維持DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)。

③在動植物、細(xì)菌、真菌中都含有DNA，但在病毒中（非細(xì)胞型微生物）不一定含DNA。④DNA為長絲狀分子互相糾纏，其溶液十分粘稠。

⑤它對紫外線有最強的吸收，通常用260nm波長測DNA溶液濃度，它在近中性環(huán)境中帶負(fù)電核，DNA變性后OD值會升高。

⑥因DNA 不溶于乙醇，常用二倍量沉淀DNA ⑦在變性溫度時，它的粘性突然降低。

⑧ 淬火是為了保持DNA單鏈狀態(tài)。DNA變性后溶液慢慢冷卻，DNA會自動恢復(fù)雙螺旋結(jié)構(gòu)。說法錯誤的：

（1）DNA和RNA的化學(xué)結(jié)構(gòu)堿基G與C通過2對氫鍵配對構(gòu)成DNA分子說法錯誤的。（2）與DNA分子相比，RNA分子難水解的看法也不對。（3）許多質(zhì)粒可在宿主之間進行轉(zhuǎn)移的說法是不對的。形狀：

（1）TRNA二級結(jié)構(gòu)呈三草形。

（2）在細(xì)胞內(nèi)RNA分子中rRNA占比例最大。（3）DNA二級結(jié)構(gòu)中呈左手雙螺旋的是Z構(gòu)象。

DNA結(jié)構(gòu)、性質(zhì)：在真菌中網(wǎng)崎片段一般為100～200核苷酸。噬菌體核酸最常見的是雙鏈線狀DNA。反式作用因子具有的DNA識別或DNA結(jié)合域，主要有 螺旋/轉(zhuǎn)折/螺旋（T/H/T）,鋅指結(jié)構(gòu)，堿性-亮氨酸拉鏈（bZIP），堿性-螺旋/環(huán)/螺旋（bH/L/H）。

真核生物中的瑞粒酶是由RNA和蛋白質(zhì)構(gòu)成的。一般真核生物染色體上有5種主要的組蛋白，其中親和力最強的兩種是H3 H4。DNA的復(fù)制和修復(fù)：

（1）細(xì)胞每分裂一次，染色體DNA就合成一次，新DNA是按原DNA分子合成。

（2）DNA分子拆（ca）開成兩條鏈，依每一條單鏈合成一條新單鏈，成為半保留復(fù)制。（3）在合成DNA時限制性核酸內(nèi)切酶不是合成DNA的必要條件。

（4）DNA多聚酶只能結(jié)合在一長段DNA單鏈的一小段局部雙鏈結(jié)構(gòu)上，才能順利開始DNA合成。（5）在DNA合成中單核苷酸分子必須順序以共價鏈連接在已形成核酸鏈3，末端的羥基上。

（6）在合成發(fā)生錯誤時，DNA多聚酶會切除錯誤核苷酸，在那個位置上重新加一個正確核苷酸。（7）在人工合成DNA時，只加一種或兩種三磷酸單核苷酸，那么合成就會停止在缺失的核苷酸位置上。在大腸菌DNA損傷修復(fù)時填補缺口最重要的酶是DNA聚合酶Ⅰ。DNA三個終止密碼子分別是UAA、UAG、UGA。

在大腸菌中DNA復(fù)制最主要的DNA聚合酶是DNA聚合酶Ⅲ。該酶的核心聚合酶中，具有3，3?外切酶活性。DNA修復(fù)過程中尿嘧啶 糖基酶系統(tǒng)不包括Sl核酸酶。

在逆轉(zhuǎn)錄酶的RNAaseH活性是一般DNA聚合酶所不具備的。在逆轉(zhuǎn)錄酶的最終產(chǎn)物雙鏈DNA的長度較正鏈RNA稍長。轉(zhuǎn)錄：

在生物體內(nèi)，RNA合成過程稱為轉(zhuǎn)錄。它（RNA）是按照儲存在DNA上遺傳信息合成。合成RNA時DNA雙鏈也要解旋，解旋部位稱啟動子。

去掉RNA分子5，末端的磷酸，不起合成酶功能的作用。在刺激點突變，改變某些基因功能與DNA向RNA轉(zhuǎn)移無直接關(guān)系（？）

（1）大腸菌的RNA聚合酶由5個亞基，其笱腔釁舳幼饔謾￡（2）利福平作用該酶（聚合酶）庋腔稀￡

（3）RNA聚合酶Ⅰ主要是轉(zhuǎn)錄rRNA（構(gòu)成核糖體骨架的是rRNA）。Prt-mRNA內(nèi)含子的5，-末端一般是GU。

（4）RNA聚合酶Ⅱ主要是轉(zhuǎn)錄hnRNA。在真核基因啟動子近側(cè)序列元件中，對轉(zhuǎn)錄起點定位起關(guān)鍵作用的是TATA盒。

（5）放線菌素D能抑制DNA轉(zhuǎn)錄。編碼核糖體RNA的基因是一種中度重復(fù)序列的DNA序列。翻譯：

在合成各種不同RNA中：

（1）tRNA具有搬運氨基酸功能。構(gòu)成核糖體骨架的是rRNA。mRNA直接決定蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)。

（2）合成蛋白質(zhì)需4種核苷酸，排列組成遺傳信息，然后轉(zhuǎn)換成20種氨基酸，組成遺傳信息稱為翻譯。（3）3個核苷酸排列順序代表一種氨基酸密碼，表示蛋白質(zhì)合成開始的密碼有一種。（4）在細(xì)菌里，依靠rRNA和mRNA之間一段互補序列能發(fā)現(xiàn)蛋白質(zhì)合成開始的位置。

（5）在核糖體上，有兩個位置上暴露出mRNA（直接決定蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)）分子相鄰的兩個密碼子，當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)合成進行到?jīng)]有攜帶任何一種氨基酸t(yī)RNA（具有搬運功能）與其對應(yīng)，這說明合成蛋白質(zhì)結(jié)束，并已開始同一種蛋白質(zhì) 分子的合成。

（6）合成蛋白質(zhì)后，決定其空間結(jié)構(gòu)的是蛋白質(zhì)的氨基酸排列順序確定后，就能自動折疊卷曲成一定的空間形狀。

（7）在原核生物核糖體是由16 SrRNA、23 SrRNA、5 SrRNA 組成，在真核生物核糖體的五種主要的組蛋白中，H1在進化中最不保守。基因表達(dá)調(diào)空：

（1）氯霉素可與核糖體50S亞基結(jié)合并抑制蛋白質(zhì)合成。

（2）在基因5，上游基因內(nèi)或其3，下游序列中存在，能提高同一條DNA鏈上靶基因轉(zhuǎn)錄速率的遺傳控制元件是增強子。

（3）乳糖操縱（zong）子中結(jié)構(gòu)基因是LacA、LacY、LacZ。遺傳重組： 轉(zhuǎn)座子的功能有

（1）促進染色體重排（2）促進基因重復(fù)（3）促進基因擴增（4）造成缺失突變

在大腸遺傳重組中，同源重組需RecA蛋白質(zhì)。

一、核酸提取、純化、濃縮

1.用煮沸法從表達(dá)內(nèi)切酶A的大腸菌小量制備質(zhì)粒時不能省略酚-氯仿抽提。2.用煮沸法制備質(zhì)粒所用溶菌酶液是用TrisCL配制的。3.用乙醇沉淀溶于SDS中RNA時，要避免用乙酸鉀。4.小量制備DNA時不被限制酶切開，應(yīng)用酚-氯仿抽提。

5.用異丙醇沉淀核酸與用乙醇相比，最明顯優(yōu)點是可減少溶液體積。

1、質(zhì)粒DNA提取：在用堿裂解法少量提取質(zhì)粒DNA時，在緩沖液（Ⅰ液）中不含SDS。多數(shù)質(zhì)粒在自然狀態(tài)下是環(huán)狀鏈DNA。質(zhì)粒DNA純化方法有： ①離子交換分析； ②聚乙二醇分級沉淀； ③二凝膠過濾層析；

④氯化銫（se）-溴化乙錠梯度平衡離心。

質(zhì)粒具備有復(fù)制起點、抗生素抗性基因、有多種限制酶的單一切點、有較高的拷貝數(shù)。

2、NA凝膠電泳：要使大于2Kb的DNA片段在凝膠電泳中分辨率達(dá)最大，其電壓不應(yīng)超過5V/cm。在電泳中不同構(gòu)象DNA泳動率通常是：超螺旋＞線性＞切口環(huán)狀。

二、PCR擴增技術(shù)：

PCR反應(yīng)中變性、延伸溫度通常是：95℃、72℃。引物的Tm值估算每個A或T加2℃。

在PCR反應(yīng)中每一種dNTP的濃度通常是200umol/L，在PCR反應(yīng)中經(jīng)n次循環(huán)后理論上，DNA鏈的擴增數(shù)目是2n倍。

在PCR反應(yīng)中引物只與靶序列的相應(yīng)部分結(jié)合的說法是錯誤的。

再此（PCR擴增技術(shù)）反應(yīng)中礦物油不是必需的，用于擴增未知序列的PCR是反向PCR。不對稱PCR法專用于制備單鏈DNA的擴增。

在PCR反應(yīng)DNA堿基錯配率較高，原因是TaqDNA聚合酶缺乏3'5，外切酶活性的亞基是逖腔￡

在體內(nèi)染色DNA復(fù)制時必須有RNA引物。在哺（bu）乳動物細(xì)胞中負(fù)責(zé)合成線粒體DNA是DNA聚合酶r。RNA酶Tl可特異地作用于嘌呤核苷酸3，端磷酸并切割與相鄰核苷酸相連的磷酸二酯鍵。體內(nèi)DNA復(fù)制與體外PCR不同的是引發(fā)酶參與。與體內(nèi)DNA復(fù)制不相關(guān)酶是反轉(zhuǎn)錄酶。在細(xì)胞內(nèi)DNA合成正常進行是RecA蛋白，而RecA蛋白不具有蛋白酶活性。在大腸菌DNA聚合酶Ⅰ klenow片段沒有5?5，外切酶活性。PCR反應(yīng)中的引物是DNA。反應(yīng)體系中Taq酶過多及引物過多都可引起非靶序列擴增。

三、寡核苷酸探針合成、放射標(biāo)記、雜交 標(biāo)記合成寡核苷酸時dNTP的濃度不應(yīng)低于1umol/L。

探針是一段帶標(biāo)記的單鏈DNA，雙鏈DNA，cDNA，單鏈RNA。

雜交液的成分與雜交溫度間的關(guān)系正確的是甲酰胺42℃，水68℃。標(biāo)記探針的最有效簡單方法是體外轉(zhuǎn)錄法。

標(biāo)記雙鏈DNA的3，端時，常用T4噬菌體DNA聚合酶，而不是大腸菌DNA聚合酶Ⅰklenow片段，主要是因為3'-5，外切酶活性高。

Western blotting所用探針一般是Ab。Southen blotting一般是用于DNA分子的雜交技術(shù)。在核酸分子雜交技術(shù)基礎(chǔ)之上又發(fā)展了一系列檢測DNA和RNA的技術(shù)，如Southen blotting、Western blotting、Dot blotting和菌落雜交。

大腸菌的DNA聚合酶Ⅰ用在切口平移法標(biāo)記DNA。在20℃～25℃下探針與靶序列退火速率最大，比解鏈溫度低情況下進行雜交。

將外源性質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌中稱為轉(zhuǎn)化。外源性重組質(zhì)粒與感受態(tài)細(xì)菌混在一起，一般在42℃作短暫的熱刺激。cDNA基因克隆以mRNA為模板。

四、基因克隆載體：

柯(ke)斯質(zhì)粒載體具有噬菌體特性，能通過溶菌周期，形成子代噬菌體顆粒的說法是不對的。

五、DNA序列測定：

與Sanger雙脫氧鏈終止DNA測序法相比，Maxam-Gilbert法所測序列為原DNA分子，這是其特點。

六、克隆子DNA定點誘變：

Mu噬菌體DNA轉(zhuǎn)座成分不含末端反向重復(fù)序列。

改變蛋白質(zhì)密碼序列的個別密碼子最好采用寡核苷酸介導(dǎo)誘變。

七、研究DNA與蛋白質(zhì)的方法：（1）凝膠阻滯試驗（2）DhAsel足跡試驗（3）甲基化干擾試驗

（4）體內(nèi)足跡試驗都是研究DNA與蛋白質(zhì)作用的方法。

1、Ag-Ab反應(yīng)結(jié)合力： 有4種力致使Ag-Ab結(jié)合，其中一以靜電引力為最重要。

2、Ag-Ab反應(yīng)特點（1）特異性（2）階段性（兩個階段）（3）可逆性（4）比例性（Ag與Ab結(jié)合比例以3：2為最佳）（Ag=3，Ab=2）。

3、影響Ag-Ab反應(yīng)的因素：（1）溫度（多數(shù)情況下反應(yīng)適宜溫度為37℃）、（2）PH值（一般反應(yīng)適宜PH值6～8）、（3）電解質(zhì)（多用0.85%鹽水）。

當(dāng)溫度升高反應(yīng)加快，電解質(zhì)濃度加大時反應(yīng)敏感性升高，無電解質(zhì)時Ag與Ab基本上不反應(yīng)。

參加反應(yīng)的Ag也有影響，Ag濃度超出適宜量使反應(yīng)的敏感性下降，過量的Ab會使反應(yīng)出現(xiàn)前滯現(xiàn)象。（4）血清交叉反應(yīng)：出現(xiàn)血清交叉反應(yīng)是說明有共同抗原存在。

1、血清凝集反應(yīng)：采用顆粒狀A(yù)g（死菌或活菌，多用死菌）進行的血清反應(yīng)。

①玻片凝集是其中一種，有許多優(yōu)點，最重要的優(yōu)點是報告結(jié)果快，多用于快速診斷。

②試管凝集是最多用的一種方法，從溫箱中放24小時后取出反應(yīng)管在室溫放2個少時再判定為宜，判定凝集滴度以凝集程度為（+ +）而定。

③協(xié)同凝集用SPA（葡萄球菌A蛋白）與IgG的Fc結(jié)合后進行的凝集反應(yīng)。SPA與IgG結(jié)合具有種屬性，（容）易與兔血清中的IgG結(jié)合。用此試驗主要查Ag。、抗球蛋白試驗：是用檢查不完全Ab（半Ab），在試驗中所用第二Ab是雙價抗體。基本方法是以試管凝集試驗為基礎(chǔ)。

3、沉淀反應(yīng)：其中包括①環(huán)狀反應(yīng)、②絮狀反應(yīng)、③瓊脂擴散反應(yīng)等。沉淀反應(yīng)是用可溶性Ag。Ag-Ab沉淀反應(yīng)用的電泳是瓊脂電泳和對流電泳。環(huán)狀沉淀反應(yīng)的沉淀環(huán)是在Ag與Ab兩液面交界處形成，判定時間是3～7分鐘（環(huán)狀沉淀反應(yīng)）。用瓊脂擴散反應(yīng)做Ag分析時，其反應(yīng)溫度在4℃～6℃下進行為宜，一般是72小時后判定結(jié)果。（瓊脂擴散反應(yīng)）

用其進行診斷時多在18℃～22℃下進行，瓊脂濃度多在1%～2%。

4、電泳： 用電泳做診斷多為瓊脂電泳和對流電泳。這類電泳反應(yīng)本質(zhì)屬于Ag-Ab沉淀反應(yīng)。

5、CFT（補體）： 參與CFT有兩個反應(yīng)系統(tǒng) 5種成分參加。其中補體（CFT用的補體是豚tun鼠血清中補體）是此反應(yīng)的紐帶。

它（CFT）與兩個系統(tǒng)的結(jié)合是非特異性的。在CFT中用豚鼠血清中補體，常用滅活溫度是56℃ 30分鐘，不同動物的血清補體滅活溫度是不同的。CFT又分為①溫CFT、②冷CFT。

溫CFT：是指反應(yīng)溫度37℃ 30分鐘，主要是查IgG類Ab。反應(yīng)管出現(xiàn)不溶血現(xiàn)象是陽性反應(yīng)。補體是多為1：15-1：20稀釋度。

冷CFT：是在4℃～6℃（瓊脂擴散反應(yīng)做Ag分析時溫度也是4℃～6℃）進行此反應(yīng)多用于查Ag。此外，補體（CFT）還參與溶血反應(yīng)和溶菌反應(yīng)。

Ag是指能夠刺激機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答（產(chǎn)生Ab、細(xì)胞免疫等）物質(zhì)。

完全Ag是指既有免疫原性又有反應(yīng)原性的物質(zhì)，而只有反應(yīng)原性無免疫原性的物質(zhì)稱為半抗原。決定Ag特異性的最小化學(xué)亞單位稱為決定基（蔟cu），又稱為表位。依其與胸腺的關(guān)系又分Ti抗原和TD抗原。

Ti抗原刺激機體產(chǎn)生IgM抗體，TD抗原產(chǎn)生需有T細(xì)胞輔助。

蛋白質(zhì)是抗原性最強的物質(zhì)，其次是多糖、核酸、類脂是抗原性最弱物質(zhì)。人類血型抗原有A和B抗原，它們（A抗原和B抗原）刺激機體產(chǎn)生抗A和抗B抗體。人類血型抗原是同種異型抗原（同一種屬不同個體間的遺傳標(biāo)記不同）。器官移植所產(chǎn)生的排異反應(yīng)。也是因同種異型抗原所致。

佐劑在免疫中常常采用，它主要的機制是增強機體對Ag的免疫應(yīng)答。

Ag物質(zhì)刺激機體產(chǎn)生Ab，Ab本質(zhì)是Ig（免疫球蛋白）。Ig（免疫球蛋白）分為五大類：IgG、IgM、IgA、IgE、IgD。

Ig（免疫球蛋白）的基本結(jié)構(gòu)是：四條肽鏈（2條輕鏈-L鏈，2條重鏈-H鏈），由雙流鍵連接。L鏈（輕鏈）：可分為 可變部分（V）和恒定部分（C），即 V（可變部分）L（輕鏈）+ C（恒定部分）L（輕鏈）即VL + CL。

H鏈（重鏈）：也分可變部分（V）和恒定部分（C），即VH + CH，但CH（恒定部分、重鏈）部分又分為CH1、CH2、CH3。

IgM和IgE還有CH4部分。CH1與CH2區(qū) 之間為絞鏈區(qū)。

如果用木瓜酶水解后，將IgG水解2Fab和Fc。Fab是Ig與Ag結(jié)合部位，F(xiàn)c是可結(jié)晶部分。用胃蛋白酶水解IgG，可分為F(ab,)2和Fc部分，F(xiàn)(ab,)2是2個Fab連在一起的部分。

Ig（免疫球蛋白）的分類是根據(jù)H鏈（重鏈）結(jié)構(gòu)特點，主要依Fc部分（CH）。Ig同種型是指H鏈所具有的特性。

Ig（免疫球蛋白）分型是依據(jù)L鏈（輕鏈）結(jié)構(gòu)特點，可分為旰碗型。Ig的Fc段部分可與某些細(xì)胞的Fc受體結(jié)合，如巨噬細(xì)胞。

F(ab,)2部分是與Ag結(jié)合部，VH（重鏈）+ VL（V可變部分L輕鏈）是F(ab,)2中的高變區(qū)，直接與Ag能結(jié)合的部位。

人類5種Ig（免疫球蛋白）各具特色：IgG-血清中含量最高；IgM-分子量最大；

IgG：①在血清中含量最高；②它還是唯一能通過人類胎盤的；③IgG是抗感染的主要Ig(IgG抗病毒抗體)；④結(jié)合補體；

⑤起到條理作用；⑥結(jié)合SPA（葡萄球菌A蛋白）；⑦起到沉淀反應(yīng)；⑧中和反應(yīng)；⑨溶解細(xì)菌。(10)H抗原主要刺激機體產(chǎn)生IgG類抗體；(11)肥達(dá)試驗IgG類H抗體出現(xiàn)較晚；(12)IgG是人血清中的主要抗體(13)IgG是固定補體

IgM:①分子量最大；②早期多為IgM（IgM早期診斷）；③IgM是種屬發(fā)育過程中最原始的Ig（早期出現(xiàn)抗體的是IgM）；

④IgM有很高的結(jié)合價和凝集能力。⑤IgM是動物機體在受到初次抗原刺激后最早產(chǎn)生的一種抗體球蛋白。

⑥抗原刺激機體產(chǎn)生IgM類抗體。⑦肥達(dá)試驗IgM類()抗體出現(xiàn)較早。⑧IgM是感染早期出現(xiàn)的抗體 IgA：①有分泌型存在；②局部Ab；③IgA抗蛋白酶的水解作用。④IgA對大腸桿菌有一定抑制作用；⑤其含量僅次于IgG。

⑥呼吸系統(tǒng)的非特異性防御機制機械物理性防御富含IgA IgE：①與肥大細(xì)胞膜上Fc受體結(jié)合（結(jié)合肥大細(xì)胞）；②是血清中含量最少的一類Ig； IgD：①在血清中含量很少；②因其性質(zhì)很不穩(wěn)定、半衰期很短，所以對其了解尚少。

補體是存在于人和動物血清中，即可參加特異免疫又可參與非特異免疫 作用的大分子物質(zhì)。它有9種成分，11種蛋白組成。

9種成分是：C1（q.r.s）、C2 C3 C4 C5 C6 C7 C8 C9。它們對溫度很敏感，易破壞。補體系統(tǒng)包括補體及D、P、B等因子組成，約有20種成分。

補體的激活有兩個途徑：（1）傳統(tǒng)途徑（第一途徑）和旁路（第二途徑）。

傳統(tǒng)途徑（第一途徑）：可被Ag-Ab免疫復(fù)合物（IC）活化。活化順序是：C1、C4、C2、C3、C5 C6 C7 C8 C9。

1、免疫組織器官：

（1）中樞：骨髓、胸腺、法氏囊（禽類）；

（2）周圍器官：脾臟、淋巴結(jié)、皮膚免疫系統(tǒng)、黏膜免疫系統(tǒng)。

2、免疫細(xì)胞：干細(xì)胞系、淋巴細(xì)胞系（TH、TC、TS、TDH、BC、漿細(xì)胞等）、單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、肥大細(xì)胞、NK細(xì)胞等。

單核細(xì)胞及巨噬細(xì)胞產(chǎn)生IL-l。

3、免疫分子：TCR、BCR、CD、MHC、Ig、補體、細(xì)胞因子（IL-l、IL-2）

1、T細(xì)胞：是由一群細(xì)胞組成。T細(xì)胞定位于淋巴結(jié)副皮質(zhì)區(qū)。可分幾群，其中TH細(xì)胞是很重要的免疫細(xì)胞，CD+4可被PHA、ConA、PWM、花生凝集素刺激活化進行有絲分裂，幫助產(chǎn)生Ab，司管細(xì)胞免疫。TS細(xì)胞是抑制細(xì)胞，CD+8參加免疫調(diào)節(jié)。TC是細(xì)胞毒細(xì)胞。TH是成熟需要胸腺加工處理。

2、B細(xì)胞：B淋巴細(xì)胞主管體液免疫細(xì)胞。表面有抗原抗體受體（SmIg）。B細(xì)胞成熟骨髓中（相當(dāng)于禽類法氏囊）。

未成熟的B細(xì)胞最初可查到Ig的u鏈，活化B細(xì)胞可衍（yan）變成漿細(xì)胞，漿細(xì)胞能產(chǎn)生Ab和分泌Ab。PWM是可以刺激B細(xì)胞有絲分裂。人類外周血中T細(xì)胞和B細(xì)胞之比為2：1。

3、單核類細(xì)胞：無Ag受體，但能處理Ag，加工Ag，并向T細(xì)胞遞呈Ag。國際公認(rèn)的過敏反應(yīng)（變態(tài)反應(yīng)）是四個型：

Ⅰ型（速發(fā)型）、Ⅱ型（溶細(xì)胞型）、Ⅲ型（免疫復(fù)合物或血管炎型）Ⅳ型（遲發(fā)型）。

Ⅰ型（速發(fā)型）：是由IgE抗體所致，IgE與肥大細(xì)胞的IgE的Fc受體結(jié)合產(chǎn)生一系列變化，出現(xiàn)Ⅰ型過敏。

如青霉素過敏（皮內(nèi)注射過敏原），患有慢性寄生蟲感染患者。IgE抗體升高顯著。

Ⅱ型（溶細(xì)胞型）、Ⅲ型（免疫復(fù)合物或血管炎型）：過敏系由IgM、IgG抗體及補體等參與介導(dǎo)。Ⅳ型（遲發(fā)型）：過敏反應(yīng)是由T細(xì)胞中TDTH細(xì)胞釋放淋巴因子所致。如結(jié)核菌素過敏試驗（皮內(nèi)注射過敏原）

使毒素的毒力減弱，病理作用減弱，但免疫原性仍保留。

Ag是指能夠刺激機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答（產(chǎn)生Ab、細(xì)胞免疫等）物質(zhì)。

完全Ag是指既有免疫原性又有反應(yīng)原性的物質(zhì)，而只有反應(yīng)原性無免疫原性的物質(zhì)稱為半抗原。決定Ag特異性的最小化學(xué)亞單位稱為決定基（蔟cu），又稱為表位。依其與胸腺的關(guān)系又分Ti抗原和TD抗原。

Ti抗原刺激機體產(chǎn)生IgM抗體，TD抗原產(chǎn)生需有T細(xì)胞輔助。

蛋白質(zhì)是抗原性最強的物質(zhì)，其次是多糖、核酸、類脂是抗原性最弱物質(zhì)。人類血型抗原有A和B抗原，它們（A抗原和B抗原）刺激機體產(chǎn)生抗A和抗B抗體。人類血型抗原是同種異型抗原（同一種屬不同個體間的遺傳標(biāo)記不同）。器官移植所產(chǎn)生的排異反應(yīng)。也是因同種異型抗原所致。

佐劑在免疫中常常采用，它主要的機制是增強機體對Ag的免疫應(yīng)答。

Ag物質(zhì)刺激機體產(chǎn)生Ab，Ab本質(zhì)是Ig（免疫球蛋白）。Ig（免疫球蛋白）分為五大類：IgG、IgM、IgA、IgE、IgD。

Ig（免疫球蛋白）的基本結(jié)構(gòu)是：四條肽鏈（2條輕鏈-L鏈，2條重鏈-H鏈），由雙流鍵連接。L鏈（輕鏈）：可分為 可變部分（V）和恒定部分（C），即 V（可變部分）L（輕鏈）+ C（恒定部分）L（輕鏈）即VL + CL。

H鏈（重鏈）：也分可變部分（V）和恒定部分（C），即VH + CH，但CH（恒定部分、重鏈）部分又分為CH1、CH2、CH3。

IgM和IgE還有CH4部分。CH1與CH2區(qū) 之間為絞鏈區(qū)。

如果用木瓜酶水解后，將IgG水解2Fab和Fc。Fab是Ig與Ag結(jié)合部位，F(xiàn)c是可結(jié)晶部分。用胃蛋白酶水解IgG，可分為F(ab,)2和Fc部分，F(xiàn)(ab,)2是2個Fab連在一起的部分。

Ig（免疫球蛋白）的分類是根據(jù)H鏈（重鏈）結(jié)構(gòu)特點，主要依Fc部分（CH）。Ig同種型是指H鏈所具有的特性。

Ig（免疫球蛋白）分型是依據(jù)L鏈（輕鏈）結(jié)構(gòu)特點，可分為旰碗型。Ig的Fc段部分可與某些細(xì)胞的Fc受體結(jié)合，如巨噬細(xì)胞。

F(ab,)2部分是與Ag結(jié)合部，VH（重鏈）+ VL（V可變部分L輕鏈）是F(ab,)2中的高變區(qū)，直接與Ag能結(jié)合的部位。

人類5種Ig（免疫球蛋白）各具特色：IgG-血清中含量最高；IgM-分子量最大；

IgG：①在血清中含量最高；②它還是唯一能通過人類胎盤的；③IgG是抗感染的主要Ig(IgG抗病毒抗體)；④結(jié)合補體；

⑤起到條理作用；⑥結(jié)合SPA（葡萄球菌A蛋白）；⑦起到沉淀反應(yīng)；⑧中和反應(yīng)；⑨溶解細(xì)菌。(10)H抗原主要刺激機體產(chǎn)生IgG類抗體；(11)肥達(dá)試驗IgG類H抗體出現(xiàn)較晚；(12)IgG是人血清中的主要抗體(13)IgG是固定補體

IgM:①分子量最大；②早期多為IgM（IgM早期診斷）；③IgM是種屬發(fā)育過程中最原始的Ig（早期出現(xiàn)抗體的是IgM）；

④IgM有很高的結(jié)合價和凝集能力。⑤IgM是動物機體在受到初次抗原刺激后最早產(chǎn)生的一種抗體球蛋白。

⑥抗原刺激機體產(chǎn)生IgM類抗體。⑦肥達(dá)試驗IgM類()抗體出現(xiàn)較早。⑧IgM是感染早期出現(xiàn)的抗體 IgA：①有分泌型存在；②局部Ab；③IgA抗蛋白酶的水解作用。④IgA對大腸桿菌有一定抑制作用；⑤其含量僅次于IgG。

⑥呼吸系統(tǒng)的非特異性防御機制機械物理性防御富含IgA IgE：①與肥大細(xì)胞膜上Fc受體結(jié)合（結(jié)合肥大細(xì)胞）；②是血清中含量最少的一類Ig； IgD：①在血清中含量很少；②因其性質(zhì)很不穩(wěn)定、半衰期很短，所以對其了解尚少。

補體是存在于人和動物血清中，即可參加特異免疫又可參與非特異免疫 作用的大分子物質(zhì)。它有9種成分，11種蛋白組成。

9種成分是：C1（q.r.s）、C2 C3 C4 C5 C6 C7 C8 C9。它們對溫度很敏感，易破壞。補體系統(tǒng)包括補體及D、P、B等因子組成，約有20種成分。

補體的激活有兩個途徑：（1）傳統(tǒng)途徑（第一途徑）和旁路（第二途徑）。

傳統(tǒng)途徑（第一途徑）：可被Ag-Ab免疫復(fù)合物（IC）活化。活化順序是：C1、C4、C2、C3、C5 C6 C7 C8 C9。

1、T細(xì)胞：是由一群細(xì)胞組成。T細(xì)胞定位于淋巴結(jié)副皮質(zhì)區(qū)。可分幾群，其中TH細(xì)胞是很重要的免疫細(xì)胞，CD+4可被PHA、ConA、PWM、花生凝集素刺激活化進行有絲分裂，幫助產(chǎn)生Ab，司管細(xì)胞免疫。TS細(xì)胞是抑制細(xì)胞，CD+8參加免疫調(diào)節(jié)。TC是細(xì)胞毒細(xì)胞。TH是成熟需要胸腺加工處理。

2、B細(xì)胞：B淋巴細(xì)胞主管體液免疫細(xì)胞。表面有抗原抗體受體（SmIg）。B細(xì)胞成熟骨髓中（相當(dāng)于禽類法氏囊）。

未成熟的B細(xì)胞最初可查到Ig的u鏈，活化B細(xì)胞可衍（yan）變成漿細(xì)胞，漿細(xì)胞能產(chǎn)生Ab和分泌Ab。PWM是可以刺激B細(xì)胞有絲分裂。人類外周血中T細(xì)胞和B細(xì)胞之比為2：1。

3、單核類細(xì)胞：無Ag受體，但能處理Ag，加工Ag，并向T細(xì)胞遞呈Ag。國際公認(rèn)的過敏反應(yīng)（變態(tài)反應(yīng)）是四個型：

Ⅰ型（速發(fā)型）、Ⅱ型（溶細(xì)胞型）、Ⅲ型（免疫復(fù)合物或血管炎型）Ⅳ型（遲發(fā)型）。

Ⅰ型（速發(fā)型）：是由IgE抗體所致，IgE與肥大細(xì)胞的IgE的Fc受體結(jié)合產(chǎn)生一系列變化，出現(xiàn)Ⅰ型過敏。

如青霉素過敏（皮內(nèi)注射過敏原），患有慢性寄生蟲感染患者。IgE抗體升高顯著。

Ⅱ型（溶細(xì)胞型）、Ⅲ型（免疫復(fù)合物或血管炎型）：過敏系由IgM、IgG抗體及補體等參與介導(dǎo)。Ⅳ型（遲發(fā)型）：過敏反應(yīng)是由T細(xì)胞中TDTH細(xì)胞釋放淋巴因子所致。如結(jié)核菌素過敏試驗（皮內(nèi)注射過敏原）

使毒素的毒力減弱，病理作用減弱，但免疫原性仍保留。病毒屬于微生物界，其不同于其他微生物的特性如下：

1、病毒一般只含有一種核酸DNA或RNA，而其它微生物，包括細(xì)菌、支原體、衣原體、立克次體，則都同時含有兩種核酸。

2、病毒通過基因組復(fù)制和表達(dá)產(chǎn)生子代病毒的核酸和蛋白質(zhì)，隨后裝配完整的病毒粒子。

3、病毒缺乏完整的酶系統(tǒng)，不具備其他生物“產(chǎn)能”所需的遺傳信息，因此必須利用宿主細(xì)胞的酶類和產(chǎn)能機構(gòu)，并借助宿主細(xì)胞的生物合成機構(gòu)復(fù)制其核酸以及合成由其核酸編碼的蛋白質(zhì)，乃至直接利用細(xì)胞成分。

4、某些RNA病毒的RNA經(jīng)反轉(zhuǎn)錄合成互補DNA（cDNA），與細(xì)胞基因組整合，并隨細(xì)胞DNA復(fù)制而增殖，即所謂的DNA前病毒。

5、病毒沒有細(xì)胞壁，也不進行蛋白質(zhì)、糖和脂類的代謝活動，因此對于干擾微生物的這些代謝過程而影響微生物結(jié)構(gòu)和功能的抗生素，具有明顯的抵抗力。

一個簡單的病毒粒子，實質(zhì)上只是一團遺傳物質(zhì)（DNA或RNA）和它外圍的一層蛋白外殼。這層蛋白外殼就是衣殼，衣殼和核酸一起總稱為核衣殼。病毒不含氨基酸，這是病毒與其他微生物，包括細(xì)菌、衣原體、立克次體等又一明顯區(qū)別。

病毒的分類系統(tǒng)采用 目、科、亞科、屬和種的等級制度。

屬名應(yīng)是一個以“virus”結(jié)尾的單詞；亞科“virinae”； 科“viridae”；目“virales” 結(jié)尾的單詞。動物病毒“種”的名稱大多引用其所引起疾病的名稱，后加“病毒”，獸醫(yī)學(xué)上則常再加上宿主（動物的名稱）種類，也有的在病名前再加最初發(fā)現(xiàn)該病毒的地名。毒珠名稱至少應(yīng)能反映該毒珠的分離地點和時間以及該毒珠的類別。根據(jù)其病毒核酸組成還可以將病毒分成DNA病毒和RNA病毒。RNA病毒可分為（1）正鏈RNA病毒；（2）負(fù)鏈RNA病毒，正鏈RNA病毒可以直接呈現(xiàn)mRNA的作用，同時又是合成互補鏈的模板； 一般情況下，正鏈RNA病毒的基因組RNA具有感染性。

負(fù)鏈RNA病毒不能直接呈現(xiàn)mRNA的作用，即不能直接指導(dǎo)合成互補鏈。

病毒缺乏自身增殖所需的完整酶系統(tǒng)，增殖時必須依靠宿主細(xì)胞合成核酸和蛋白質(zhì)，甚至直接利用宿主細(xì)胞的某些成分，這就決定了病毒在細(xì)胞內(nèi)專性寄生的特性。

病毒的增殖過程大致可以分為：（1）吸附與侵入、（2）脫殼、（3）病毒成分的合成及裝配、（4）釋放等4個主要階段。

病毒屬于微生物界，其不同于其他微生物的特性如下：

1、病毒一般只含有一種核酸DNA或RNA，而其它微生物，包括細(xì)菌、支原體、衣原體、立克次體，則都同時含有兩種核酸。

2、病毒通過基因組復(fù)制和表達(dá)產(chǎn)生子代病毒的核酸和蛋白質(zhì)，隨后裝配完整的病毒粒子。

3、病毒缺乏完整的酶系統(tǒng)，不具備其他生物“產(chǎn)能”所需的遺傳信息，因此必須利用宿主細(xì)胞的酶類和產(chǎn)能機構(gòu)，并借助宿主細(xì)胞的生物合成機構(gòu)復(fù)制其核酸以及合成由其核酸編碼的蛋白質(zhì)，乃至直接利用細(xì)胞成分。

4、某些RNA病毒的RNA經(jīng)反轉(zhuǎn)錄合成互補DNA（cDNA），與細(xì)胞基因組整合，并隨細(xì)胞DNA復(fù)制而增殖，即所謂的DNA前病毒。

5、病毒沒有細(xì)胞壁，也不進行蛋白質(zhì)、糖和脂類的代謝活動，因此對于干擾微生物的這些代謝過程而影響微生物結(jié)構(gòu)和功能的抗生素，具有明顯的抵抗力。

一個簡單的病毒粒子，實質(zhì)上只是一團遺傳物質(zhì)（DNA或RNA）和它外圍的一層蛋白外殼。這層蛋白外殼就是衣殼，衣殼和核酸一起總稱為核衣殼。病毒不含氨基酸，這是病毒與其他微生物，包括細(xì)菌、衣原體、立克次體等又一明顯區(qū)別。

（1）實驗動物、（2）雞胚、（3）體外培養(yǎng)的器官、（4）細(xì)胞，這4種都可以作為人工增殖病毒的基本工具。

而大量病毒的，又是病毒學(xué)實驗研究以及制備疫苗和特異性診斷試劑的先決條件。

1、組織培養(yǎng)：病毒在細(xì)胞內(nèi)的增殖及其對細(xì)胞的作用，可以根據(jù)細(xì)胞病變、細(xì)胞培養(yǎng)物內(nèi)出現(xiàn)血凝素或其他病毒抗原、紅細(xì)胞吸附現(xiàn)象以及通過“指示病毒”的干擾等方法加以識別。組織培養(yǎng)用的玻璃器皿要用（硫酸、重鉻酸鉀）。

常用于組織培養(yǎng)的人工綜合營養(yǎng)液的主要成分有：氨基酸、糖類、無機鹽、維生素、輔助生長因子等。常用的人工綜合營養(yǎng)液為：MEM和RPM1640。

用人工綜合營養(yǎng)液配制細(xì)胞生長液時需要加入①適量血清和谷氨酰胺溶液，②還需要加入規(guī)定量的抗生素溶液防止細(xì)菌污染，③加入碳酸氫鈉溶液修正PH，④根據(jù)情況還可加入HEPES溶液可使生長液具有較強的PH緩沖能力。能使組織和成片細(xì)胞分散成單個細(xì)胞的化學(xué)制劑為胰蛋白酶和EDTA，EDTA使用液又可稱之為Versen溶液，其分散細(xì)胞的作用原理是EDTA可以結(jié)合鈣、鎂離子，使組織細(xì)胞分散。

動物血清中具有細(xì)胞生長所必須的各種營養(yǎng)因子，它能促進細(xì)胞的貼壁和生長，且有很強的酸堿緩沖能力。

細(xì)胞培養(yǎng)液在細(xì)胞培養(yǎng)過程中可分為（1）細(xì)胞生長液（2）細(xì)胞維持液兩種。細(xì)胞生長液：是使細(xì)胞發(fā)育增殖的液體，因此要求營養(yǎng)條件豐厚； 細(xì)胞維持液：用于延緩細(xì)胞代謝，從而延長細(xì)胞的存活時間，以利于實驗的進行。這兩種液體成分的主要區(qū)別是血清含量不同。

細(xì)胞生長適宜的PH范圍是 PH 7.2～7.6。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)全過程的關(guān)鍵是防止污染。

2、細(xì)胞株的保存是組織培養(yǎng)中一個十分重要的工作，二甲基亞砜是細(xì)胞低溫保存的良好的保護劑，含10%二甲基亞砜的血清可以作為懸浮細(xì)胞的液體在液氮中保存細(xì)胞。

3、病毒學(xué)上常用的細(xì)胞類型可分為（1）原代細(xì)胞、（2）二倍體細(xì)胞、（3）傳代細(xì)胞，三大類，原代細(xì)胞培養(yǎng)和傳代細(xì)胞培養(yǎng)的根本區(qū)別在于細(xì)胞是否能在體外無限傳代。

4、細(xì)胞的純化：細(xì)胞的純化可以用細(xì)胞克隆技術(shù)。

克隆是指用無性繁殖方法產(chǎn)生的一組遺傳上相同的細(xì)胞和生物群體的過程。

1、病毒的分離和鑒定：（P219）病毒對細(xì)胞的感染性具有嚴(yán)格的選擇性和特異性，因此用組織培養(yǎng)細(xì)胞接種病毒必須首先選擇敏感細(xì)胞。（1）病毒增殖的判定：（略）

（2）細(xì)胞病變（CPE）：大部分病毒在敏感細(xì)胞系均可出現(xiàn)CPE（細(xì)胞病變），CPE（細(xì)胞病變）可以表現(xiàn)為嚴(yán)重的細(xì)胞破壞、細(xì)胞腫大、顆粒增多、細(xì)胞融合成合胞體或無明顯的細(xì)胞變化等。CPE（細(xì)胞病變）經(jīng)常具有病毒“種”的特性，因此常常作為病毒堅定依據(jù)。

（3）病毒蝕(shi)斑技術(shù)（又稱空斑）：病毒蝕(shi)斑是指病毒在已長成的單層細(xì)胞上形成的局限性病灶，主要用于病毒的純化或病毒懸液中感染病毒含量的測定。（用病毒蝕斑技術(shù)測定含量-病毒純化或病毒懸液中感染的病毒）

（4）病毒感染力的滴定：有兩種，一種方法是用實驗動物測定LD50(半數(shù)致死量)；另一種方法是在組織細(xì)胞上測定TCID50（半數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)物感染量。

（5）病毒的保存：分離或鑒定后的病毒經(jīng)過冷凍干燥后可以長期保存。

2、免疫-血清學(xué)實驗：免疫-血清學(xué)實驗是利用抗原和抗體的特異性結(jié)合的原理進行的，主要用于兩個目的：

①從病料獲得病毒株后，應(yīng)用已知的抗病毒血清或單克隆抗體進行免疫-血清學(xué)試驗，鑒定病毒的種類乃至型別；

②由發(fā)病動物采集血清標(biāo)本，應(yīng)用全病毒或特異性病毒抗原，測定發(fā)病動物體液中的特異性抗體，或進一步比較發(fā)病動物的急性發(fā)病期和恢復(fù)期血清中的抗體效價，了解病毒性抗體是否有明顯的增長，從而判定病毒感染的存在。

（1）中和試驗：動物在受到病毒感染后，在體內(nèi)產(chǎn)生抗體，如果該抗體能與相應(yīng)的病毒粒子特異性地結(jié)合，使后者喪失感染力，這種抗體就成為中和抗體。

應(yīng)用已知的病毒或病毒抗原，可以測知患者體內(nèi)中和抗體的存在及其效價；

用已知的抗病毒血清或中和性單克隆抗體，也可以進行病毒的鑒定，因此中和試驗也常用于新分離病毒株的鑒定。

（2）血凝和血凝抑制試驗：許多病毒能夠凝集某些種類動物的紅細(xì)胞，病毒凝集的紅細(xì)胞種類隨病毒種類的不同而不同。

血凝反應(yīng)可被特異性抗體所抑制，因此血凝抑制試驗可以應(yīng)用于：

①應(yīng)用于標(biāo)準(zhǔn)病毒懸液測定血清中的相應(yīng)抗體；②應(yīng)用于特異性抗體鑒定新分離的病毒。

用枸櫞酸鈉配置的阿氏液具有抗紅細(xì)胞凝集作用，用于血凝和血凝抑制試驗中配置紅細(xì)胞懸掖。同一患者急性發(fā)病期和恢復(fù)期雙份血清（相距2～3周）的抗體效價增高4倍以上者，說明本次發(fā)病是由所測抗體相應(yīng)病毒引起的。

（3）補體結(jié)合試驗：一個抗體分子與抗原結(jié)合后，可以導(dǎo)致數(shù)百個補體分子的激活，呈現(xiàn)一定程度的放大作用，所以補體結(jié)合試驗是一個比較敏感的方法，一般用于人及動物血清中特異性抗體的定量檢測（補體結(jié)合試驗），也常用于新分離病毒的鑒定。（4）免疫熒光技術(shù)：將抗原或抗體標(biāo)記上熒光素，再進行抗原-抗體反應(yīng)，出現(xiàn)熒光就說明標(biāo)記物的存在，同時也反映了抗原或抗體的存在。

免疫熒光技術(shù)具有抗原-抗體反應(yīng)的特異性和染色技術(shù)的快速性，并可在細(xì)胞水平上進行抗原定位，故在病毒學(xué)研究和病毒病的診斷中都是一種應(yīng)用很廣的方法。熒光抗體染色技術(shù)包括（1）直接法、（2）間接法、（3）補體法、（4）SPA(葡萄球菌A蛋白)免疫熒光法。

（5）酶免疫技術(shù)：以酶作為標(biāo)記物，通過化學(xué)方法將其與抗原或抗體共價結(jié)合，形成酶標(biāo)記物，可與被檢的抗原或抗體起反應(yīng)，形成酶標(biāo)記免疫復(fù)合物。制備酶結(jié)合物的方法很多，目前應(yīng)用最廣泛的有過碘酸鹽法和戊二醛法。

酶免疫測定試驗包括：①間接法（測抗體）、②雙抗體夾心法（測抗原）、③IgM捕獲ELISA（酶鏈免疫吸附實驗）、④競爭法。IgM是動物機體在受到初次抗原刺激后最早產(chǎn)生的一種抗體球蛋白，因此IgM捕獲ELISA常應(yīng)用于多

種病毒病的早期診斷。抗u鏈抗體特異性結(jié)合IgM，可以應(yīng)用于IgM捕獲ELISA。

IgG是主要的抗病毒抗體，在第二次抗原刺激時，由于免疫回憶，發(fā)生迅速的加強反應(yīng)IgG量顯著增高（分子量大）。在病毒病的診斷中，也常將這一原理用于判斷病毒病的感染狀況，但常常需要采集恢復(fù)期和急性期雙份血清

進行抗體效價的比較如IgG水平4倍或4倍以上增加具有血清學(xué)診斷意義。

（6）膠體金免疫檢測技術(shù)：膠體金免疫檢測技術(shù)是以膠體金為載體吸附抗體和抗原，完成檢測特異性抗原或抗體的。膠體金免疫檢測技術(shù)優(yōu)于ELISA（酶鏈免疫吸附實驗）法和免疫熒光法的最主要一點是肉眼直接判定結(jié)果。

（總結(jié)：膠體金免疫檢測技術(shù)就是直接用肉眼可以觀察結(jié)果）。

3、病毒病的分子生物學(xué)診斷：分子生物學(xué)診斷的特異性取決于核酸序列的特異性，病毒病的分子生物學(xué)診斷，包括對病毒核酸和蛋白質(zhì)的測定。

PCR（全稱是聚合酶鏈反應(yīng)），是在引物、摸板DNA和4種脫氧核糖核苷酸存在的條件下依賴于DNA聚合酶的酶促合成反應(yīng)。

由于引物是按照與擴增區(qū)段兩端序列彼此互補的原則設(shè)計的，因此每一條新生鏈的合成都是從引物的退火結(jié)合位點開始，并沿著相反鏈延伸。

因此，PCR（聚合酶鏈反應(yīng)）的特異性是由人工合成的一對寡核苷酸引物所決定的。PCR（聚合酶鏈反應(yīng)）可以在數(shù)小時內(nèi)對僅有的幾個拷貝的基因放大數(shù)百萬倍，使PCR（聚合酶鏈反應(yīng)）擴增結(jié)果在瓊脂糖凝膠電泳后形成明顯可見的DNA帶。

溴化乙錠（EB）可以插入核酸分子之間并在紫外線下放射熒光，因此可以作為核酸分子電泳的指示劑。（核酸分子電泳的指示劑用溴化乙錠-EB）。

（1）RT-PCR(聚合酶鏈反應(yīng))技術(shù)：由于DNA聚合酶不能以RNA為摸板合成cDNA，所以不能對RNA病毒核酸進行直接PCR（聚合酶鏈反應(yīng)）。

首先必須提取病毒RNA。提取病毒RNA時，要注意避免RNA酶對病毒RNA的降解作用。為此，所用的試劑和用品均需要進行無Rnase處理，（Rnas必須使用無熱原質(zhì)水制備）如加入RNA酶抑制劑或高壓滅菌。加入反轉(zhuǎn)錄酶經(jīng)過逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)合成與病毒RNA互補的DNA(cDNA)，然后才能進行PCR（聚合酶鏈反應(yīng)），這就是所謂的RT-PCR（逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)）。

目前常用的逆轉(zhuǎn)錄酶（RT-PCR）包括MMV和AMV。RT-PCR（逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)）反應(yīng)的特異性取決于模板和引物，引物序列必須是被檢病毒特異的，原則上要求引物3'端堿基與模板一定要配對，對引物5'末端的堿基并沒有嚴(yán)格的限制，只要與模板DNA結(jié)合的引物長度足夠，其5'末端堿基可以不與模板DNA匹配而呈游離狀態(tài)，因此對引物5'末端可以進行自由修飾。

PCR（聚合酶鏈反應(yīng)）反應(yīng)中，引物1又稱Watson引物，是與模板正鏈互補的寡核苷酸鏈。

（2）核酸雜交檢測技術(shù)：雜交的基本原理是帶互補序列的單鏈核苷酸相遇時，會退火形成雙鏈。“用于診斷目的”雜交雙方是已知序列的病毒探針和待測樣品中的病毒核酸，如果是陽性結(jié)果說明病毒感染的存在。在核酸分子雜交技術(shù)基礎(chǔ)之上又發(fā)展了一系列檢測DNA和RNA的技術(shù)，如Southrn blotting、Western blotting、Dit blotting和菌落雜交。

聚丙烯酰胺凝膠電泳也可簡稱為PAGE（PAGE聚丙烯酰胺凝膠電泳-測雜交）DNA限制性內(nèi)切酶可以識別雙鏈DNA分子中的某種特定核苷酸序列。

利用不同的內(nèi)切酶切割病毒DNA，依據(jù)切割后的片段在凝膠電泳中泳動速率不同所形成的電泳帶型做出診斷。

（3）病毒病的免疫預(yù)防：決定疫苗免疫效果的關(guān)鍵因素是疫苗本身的質(zhì)量。

目前普遍應(yīng)用的病毒疫苗主要分為弱毒（活）疫苗和滅活疫苗兩類。弱毒（活）疫苗分解成（弱毒疫苗、弱活疫苗）。

近年來隨著分子病毒學(xué)研究的不斷深入，相繼研究出了（1）亞單位疫苗、（2）基因工程疫苗、（3）活載體疫苗、（4）分子疫苗。

蟲媒病毒是由媒介昆蟲作為病毒的傳遞者的一類病毒，由蟲媒病毒引起的疾病即為蟲媒病毒，如乙型腦炎、新疆出血熱、登革熱、黑熱病等。

類病毒沒有外殼蛋白，對各種有機溶劑有抵抗力，說明也沒有脂質(zhì)外膜，只是一個裸露的RNA分子，類病毒只出現(xiàn)于植物。

在人和動物中存在著一類被稱為亞急性海綿樣腦病的中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，如瘋牛病。瘋牛病能夠通過食物鏈傳染給人。

研究證明，這種奇特疾病的病原，即不是病毒，也不是類病毒，大體上是由蛋白質(zhì)組成，目前稱之為阮病毒。（總結(jié)：病毒-亞急性海綿樣腦病的中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，如瘋牛病）

1、病原學(xué)：流行性乙型腦炎病毒屬于黃病毒科。黃病毒科能夠致人疾病的病毒有登革熱病毒、丙型肝炎病毒和乙型腦炎病毒。

由于1924年乙型腦炎病毒首先證實于日本，故也稱其為日本乙型腦炎。C6/36細(xì)胞適合于乙型腦炎病毒的分離和培養(yǎng)。

2、流行病學(xué)：

（1）宿主動物與傳染原：由蚊為媒介而傳播，引起人畜感染的主要媒介可能是三帶啄庫蚊，其他庫蚊也有可能。

（2）傳染途徑：流行性乙型腦炎是一種自然疫源性疾病，豬是傳播乙型腦炎病毒（乙腦病毒）的主要動物宿主。

乙型腦炎病毒通過蚊-豬-蚊的循環(huán)維持自身的存在。（3）人群易感性：除人、馬和豬外，通常不呈現(xiàn)臨床癥狀。

3、臨床表現(xiàn)：流行性乙型腦炎是一種中樞神經(jīng)系統(tǒng)的急性傳染病，以高熱和狂暴或沉郁等神經(jīng)癥狀為特征。

4、預(yù)防：疫苗預(yù)防注射。

1、病原學(xué)：登革病毒屬于黃病毒科黃病毒屬含單股正鏈RNA。登革熱（DH）和登革出血熱（DHF）是由4個血清型病毒引起的兩種不同臨床類型的急性傳染病。C6/36細(xì)胞可用于登革病毒分離和培養(yǎng)。

2、流行病學(xué)：

（1）宿主動物與傳染原：中國DH/DHF的傳播媒介主要為埃及伊蚊和白紋wen伊蚊，這些蚊種主要生活在家庭儲水容器中。

（2）傳染途徑：登革熱存在城市型（人-蚊-人循環(huán)）、叢林型（猴-蚊-猴循環(huán)）兩種疫源地。中國主要為人-蚊-人循環(huán)。

（3）人群易感性：DH/DHF主要發(fā)生于熱帶和亞熱帶地區(qū)。中國從嬰兒到老人均可發(fā)病，以兒童和青壯年患病率較高。

3.臨床表現(xiàn)：潛伏期：一般為5～8天。

登革熱主要以高熱、頭痛、肌肉和關(guān)節(jié)痛為主，與登革熱的主要區(qū)別是有無嚴(yán)重出血。

DSS（登革休克綜合征）是DH/DHF的嚴(yán)重形式，其含義是登革休克綜合征。主要診斷依據(jù)為出血、休克、口唇發(fā)紺和血壓低或測不到。

（這些癥狀是登革休克綜合征臨床表現(xiàn)）世界衛(wèi)生組織(WHO)對DHF/ DSS的診斷限定了嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)。有四種主要的臨床表現(xiàn)：高熱、出血、肝腫大和循環(huán)衰竭。WHO根據(jù)疾病的嚴(yán)重程度把DHF/ DSS（登革出血熱/登革休克綜合征）

分為四個等級：Ⅰ級和Ⅱ級表現(xiàn)為DHF（登革出血熱）輕型，Ⅲ級和Ⅳ級表現(xiàn)為更嚴(yán)重的形式—DSS的（登革休克綜合征）

4、預(yù)防：防蚊滅蚊。傳染源的管理。

1、病原學(xué)：流行性出血熱病毒屬于布尼亞病毒科漢坦病毒屬，基因為負(fù)鏈分節(jié)段RNA。中國目前發(fā)現(xiàn)的流行性出血熱主要有2種類型：

HTNV型（野鼠型）和SEOV型（家鼠型）。Vero-E6細(xì)胞適合于流行性出血熱病毒的分離和培養(yǎng)。

2、流行病學(xué)：

（1）宿主動物與傳染原：在我國流行性出血熱主要傳染源和病毒宿主為嚙nie齒動物（黑線姬鼠和褐家鼠）。嚙nie-咬如蟲咬嚙。

（2）傳染途徑：接觸帶病毒的宿主動物及其排泄物可以造成感染。（3）人群易感性：普遍易感。

3、臨床表現(xiàn)：潛伏期：一般為7～14天。

典型的臨床表現(xiàn)有三大特征：發(fā)熱、出血和腎損害。流行性出血熱主要以腎臟損害為特征，故又稱之為腎綜合征出血熱。

4、預(yù)防：

（1）防鼠滅鼠。

（2）接種疫苗：目前我國所使用的流行性出血熱的疫苗是細(xì)胞培養(yǎng)滅活疫苗，可以分為3種類型（家鼠型、野鼠型、家鼠、野鼠雙價混合苗）經(jīng)過近幾年的應(yīng)用已證明在預(yù)防流行性出血熱方面有效。（3）講究衛(wèi)生。

5、診斷：流行性出血熱對于明確疫源地類型、選擇所用疫苗的種類、指導(dǎo)防治策略等都非常重要。目前流行性出血熱的分型診斷方法有多種，包括（1）免疫熒光法（2）單抗分型

（3）RT-PCR（逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)）

（4）ELISA（酶鏈免疫吸附實驗）法。鼠帶毒率調(diào)查是常用的監(jiān)測手段之一，用于流行性出血熱鼠帶毒率調(diào)查標(biāo)本制備的主要方法為鼠肺冰凍切片，鼠帶毒率調(diào)查的常用方法為免疫熒光法。、病原學(xué)：克里米亞—剛果出血熱是布尼亞病毒科、內(nèi)羅病毒屬的病毒，故又稱為新疆出血熱。病毒基因組為負(fù)鏈分節(jié)段RNA。

2、流行病學(xué)：

（1）宿主動物與傳染原：30多種蜱，特別璃眼蜱屬既是該病毒的儲存宿主又是傳播媒介；多種不同的脊椎動物既是蜱的宿主，也可能是病毒的儲存宿主。

（2）傳染途徑：人的感染是因為蜱的叮咬或密切接觸感染動物或患者。（3）人群易感性：普遍易感。

3、臨床表現(xiàn)：潛伏期：蜱叮咬至疾病發(fā)作之間的時間為潛伏期，一般為3～6天。

臨床表現(xiàn)：克里米亞—剛果出血熱是一種神經(jīng)系統(tǒng)的疾病，神經(jīng)系統(tǒng)的癥狀出現(xiàn)于血管異常造成的顯著的出血綜合征之前。

常常為突發(fā)和急性，發(fā)熱（39℃～41℃）、寒戰(zhàn)、頭痛、風(fēng)濕痛、腰痛和上腹部痛等。隨后迅速發(fā)展到短暫的、最嚴(yán)重的出血期，一般4天后在疾病高峰期導(dǎo)致死亡。

4、預(yù)防：目前尚無特異性疫苗進行接觸前的主動預(yù)防。有效的預(yù)防首先應(yīng)避免與傳染源及媒介的接觸。

1、甲型肝炎病毒：甲型肝炎病毒（HAV）可以引起甲型肝炎。在病毒分類上甲肝病毒屬于小RNA病毒科。

甲型肝炎實驗室診斷方法主要依賴于檢測患者血清中的抗HAV（甲型肝炎病毒）的IgM。

2、乙型肝炎病毒：（HBV）

（1）病原學(xué)：乙型肝炎病毒（HBV）屬于嗜肝DNA病毒科、正嗜肝DNA病毒屬，是傳染性肝炎的一個重要病因。

（2）流行病學(xué)：HBV（乙型肝炎病毒）的唯一宿主是人。嗜肝DNA病毒可以存活于那些與感染者粘膜或皮膚創(chuàng)口接觸的物品表面。

（3）診斷：HBV（乙型肝炎病毒）侵入機體后進入血液循環(huán)，主要在白細(xì)胞中進行繁殖。HBV（乙型肝炎病毒）主要有3種抗原，分別為HBsAg（乙型肝炎表面抗原）、HBcAg（乙型肝炎核心抗原）、HBeAg（乙肝e抗原）。

HBsAg（乙型肝炎表面抗原）：

①HBsAg可誘導(dǎo)機體產(chǎn)生乙型肝炎表面抗體（抗—HBs）,具有抗HBV（乙型肝炎病毒）感染的作用 ②HBsAg與病毒的中和性作用有關(guān)。

HBcAg（乙型肝炎核心抗原）：為病毒核心的主要抗原，是急性乙型肝炎病毒感染的重要診斷指標(biāo)之一，是檢測到抗HbcAgM。

HBeAg（乙肝e抗原）：在乙型肝炎潛伏期的后期出現(xiàn)并且HBeAg的存在表示HBV（乙型肝炎病毒）的存在。

HBeAg是在病毒復(fù)制活躍時的宿主血清中檢測到的一種可溶性抗原，HBeAg成分的消失和出現(xiàn)相應(yīng)的抗體，預(yù)示著乙型肝炎病毒的繁殖減弱和疾病有可能向好的方面轉(zhuǎn)化。

血清中HBV（乙型肝炎病毒）DNA聚合酶的存在，表明HBV的感染處于病毒活動復(fù)制期。

（4）預(yù)防：疫苗接種：目前用于預(yù)防接種的乙型肝炎疫苗主要有基因工程乙肝疫苗和乙型肝炎表面抗原佐劑疫苗。防止血源性污染和傳播。

3、丙型肝炎病毒：（HCV）——非甲非乙型肝炎病毒（1）病原學(xué)：

丙型肝炎病毒（HCV）屬于黃病毒科、類丙型肝炎病毒屬。病毒粒子含有一單股正鏈RNA。丙型肝炎又可稱為非甲非乙型肝炎，根據(jù)其流行病學(xué)特征、臨床表現(xiàn)和傳播方式，可以將其分為 ①腸道傳播的非甲非乙型肝炎 ②輸血后非甲非乙型肝炎。（2）流行病學(xué)：

①宿主動物與傳染源：人是丙型肝炎的自然宿主和貯zhu存者。尚未確認(rèn)別的自然宿主和非脊椎動物傳播媒介。

②傳染途徑：約60%的丙型肝炎病例都是由血液接觸引起的，而非腸道感染。③人群易感性：普遍易感。

4、丁型肝炎病毒（HDV）：丁型肝炎病毒（HDV）為缺陷型RNA病毒，必須借助乙型肝炎表面抗原（HBsAg）包裹才能成為感染性病毒顆粒，常與HBV（乙型肝炎）同時或重疊感染。HDV（丁型肝炎病毒）主要通過非腸道傳播途徑傳播。HDV感染的指標(biāo)是血液和體液中可測得HDV抗原。抗HDV抗體檢測可以反映HDV感染狀況。慢性HDV感染與多種肝臟疾病密切相關(guān)，包括重癥肝炎、肝硬化、丁型肝炎和慢性活動性肝炎。

1、病原學(xué)：流感病毒屬于正粘病毒科。按流感病毒核蛋白與基質(zhì)蛋白抗原性的不同，流感病毒又可分為甲、乙、丙3型。

流感病毒基因組為單股RNA，由8個階段組成。流感病毒基因組片段具有共同的特點：所有的RNA階段具有相同的5’端。

1980年WHO公布的流感病毒命名方法，一株流感病毒名稱中包括下面幾項內(nèi)容：型別/宿主/分離地點/毒株序號/分離年代（亞型）。

流感病毒血凝素變異性很強是造成流感病毒易發(fā)生抗原變異的主要原因。

2、流行病學(xué)：

（1）宿主動物與傳染源：

人的絕大多數(shù)甲型流感病毒能自然感染家禽、家畜，并進一步支持人甲型流感病毒新亞型可能來源于動物的觀點。

乙型流感病毒能引起人的呼吸道感染，丙型流感病毒也是感染人的病毒。（2）傳播途徑：流感病毒的主要傳播途徑是空氣飛沫。

（3）人群易感性：3個型流感病毒沒有共同抗原，都能感染人；但甲型流感病毒的感染范圍很廣，容易引起大規(guī)模流行。

3、免疫預(yù)防：由于流感病毒變異頻繁，因此疫苗注射必須有針對性，即必須針對當(dāng)前的流行株，才能取得良好的免疫效果。

4、診斷：用于流感病毒分離與鑒定的標(biāo)本應(yīng)取自患者鼻咽分必物。流感病毒的快速診斷主要依賴于檢查抗病毒血凝素抗體。

1、病原學(xué)：絲狀病毒科、絲狀病毒屬包括兩種病毒，即①埃博拉病毒和②馬爾堡病毒。研究絲狀病毒的重要意義在于：

（1）這兩種病毒均具極高的傳染性，對人類的危害極大；（2）室溫下非常穩(wěn)定；（3）埃博拉病毒

60℃1小時仍不能被完全滅火，由于特有的生物學(xué)性質(zhì)和致病力，WHO將其列為潛在的生物戰(zhàn)劑之一。（4）埃博拉病毒最初流行于扎伊爾北部的埃博拉河流域而命名為埃博拉病毒。

2、流行病學(xué)：埃博拉病毒的自然宿主尚末確定。自然條件下，人和猴都能發(fā)生嚴(yán)重感染并死亡。埃博拉病毒感染后可以引起出血的臨床表現(xiàn)，因此常將其歸為出血熱病毒。

根據(jù)埃博拉病毒的抗原性的差異，又可將埃博拉病毒分為3個血清型，不同血清型的埃博拉病毒其致病型有很大的差異。

目前認(rèn)為，埃博拉病毒的疫源地主要在非洲大陸，但1989年自菲律賓運往美國的獼猴發(fā)生了感染，泰國也有埃博拉病毒感染的血清學(xué)證據(jù)，提示東南亞地區(qū)也可能是疫源地之一。馬爾堡病毒也可引起人的嚴(yán)重出血熱，在人-人或猴-人之間傳播。

鼻病毒屬于小核糖核酸病毒科、鼻病毒屬，是與人類普遍感冒有關(guān)的病毒。流行性腮腺炎是由副粘病毒科、副粘病毒屬的腮腺炎病毒引起。流行性腮腺炎最具有流行病學(xué)意義的傳染源是亞臨床型者。

天花是痘病毒科、正痘病毒屬的天花病毒引起的一種傳播迅速的烈性傳染病。由于使用痘苗病毒疫苗預(yù)防，1977年天花在全世界流行終止。

1、病原學(xué)：狂犬病毒屬于彈狀病毒科、狂犬病毒屬。因其特有的臨床表現(xiàn)，狂犬病又可稱為“恐水病”。

從感染動物或患者中發(fā)現(xiàn)的狂犬病毒又可稱之為野毒株或街毒；狂犬病毒街毒經(jīng)過系列傳代適應(yīng)特定宿主后即為固定毒。根據(jù)對不同毒株的血清反應(yīng)和單克隆抗體分析，將狂犬病毒分成5個血清型：血清1型、血清2型、血清3型、血清4型、血清5型。

血清2、3、4、5型又稱為狂犬病相關(guān)病毒，野外分布的主要為血清2、3、4型。

在血清分型的基礎(chǔ)上，利用分子生物學(xué)技術(shù)對狂犬病毒也進行了遺傳學(xué)分型，即將狂犬病毒屬分為6種基因型：

基因型1（血清1型）、基因型2（血清2型）、基因型3（血清3型）、基因型4（血清4型）、基因型5和基因型6（血清5型）相對應(yīng)。

2、流行病學(xué)：

（1）宿主動物與傳染源：狂犬病毒幾乎可以感染所有溫血動物，但造成人類感染的主要傳染源是帶病毒犬。

（2）傳播途徑：因感染狂犬病毒的動物咬傷，感染性唾液污染傷口發(fā)生感染。（3）人群易感性：人及所有溫血動物皆能感染。

3、預(yù)防：狂犬病的預(yù)防主要包括兩個方面：（1）即控制傳染源（2）暴露后應(yīng)用免疫制劑。控制傳染源主要是家養(yǎng)犬的免疫。

狂犬病免疫制劑包括被動免疫與主動免疫兩種。

狂犬病的被動免疫制劑有動物源抗狂犬病病毒的精制血清和人源狂犬病免疫球蛋白。

主動免疫即注射狂犬疫苗。我國于1981年開始用地鼠腎細(xì)胞疫苗，近幾年又開始應(yīng)用Vero（非洲綠猴腎）細(xì)胞狂犬病疫苗。

4、診斷：狂犬病病毒或病毒抗原可以在患者身體多個部位，如角膜壓片、腦脊髓液、唾液和咬傷處皮膚組織檢測到。

實驗室診斷狂犬病最具特性的診斷依據(jù)是—感染神經(jīng)原內(nèi)的Negri小體（內(nèi)基氏小體），最常見于海馬及小腦普爾金耶組織的神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)，是狂犬病病毒的集落。

WHO推薦快速熒光灶抑制試驗取代了傳統(tǒng)的小鼠中和實驗檢測狂犬疫苗免疫后中和抗體水平。

1、病原學(xué)：輪狀病毒屬于呼腸孤病毒科、輪狀病毒屬，是各種幼齡動物非細(xì)胞性腹瀉的主要病原之一。

病毒由11個節(jié)段的雙鏈RNA組成。根據(jù)輪狀病毒RNA11個節(jié)段的聚丙烯酰胺電泳圖形不同，可以將輪狀病毒進行分型和鑒定。

絕大多數(shù)哺乳動物輪狀病毒，具有一種相同的群抗原，這些輪狀病毒被命名為A群輪狀病毒，是研究的主要對象。

2、流行病學(xué)：輪狀病毒宿主范圍甚廣，已知的有人及多種動物。據(jù)初步統(tǒng)計，全世界幼兒發(fā)生的腸炎至少有50%是由輪狀病毒引起的。（腸道病毒）。

3、預(yù)防：人用口服輪狀病毒活疫苗可是兒童獲得保護。

4、診斷：輪狀病毒感染的可靠的實驗室診斷依賴于檢出輪狀病毒或抗原，進行該項診斷應(yīng)收集糞便。培養(yǎng)輪狀病毒使用最普遍的是MA-104傳代細(xì)胞系。

輪狀病毒復(fù)制方式不同于其他呼腸孤病毒，它不是通過吞飲作用進入細(xì)胞，而是通過胞漿膜直接進入胞漿，胰蛋白酶對病毒進行處理可以使病毒變?yōu)橛懈腥拘浴?/p>

因此為了在細(xì)胞培養(yǎng)中復(fù)制輪狀病毒和連續(xù)傳代通常需要用胰蛋白酶對病毒進行處理，從而促進輪狀病毒的感染性。

皰疹病毒是一群較大的有囊膜的雙鏈DNA病毒。

根據(jù)進行該項診斷皰疹病毒的感染性質(zhì)，又可將皰疹病毒分為A群和B群兩個亞群。

A群：凡在體外培養(yǎng)時，容易從細(xì)胞內(nèi)釋放到營養(yǎng)液中的病毒為A群；B群：病毒同細(xì)胞緊密結(jié)合很難釋放到營養(yǎng)液中為B群，又名細(xì)胞結(jié)合性病毒。

皰疹病毒基因組結(jié)構(gòu)由末端重復(fù)序列和內(nèi)部重復(fù)序列所組成，重復(fù)序列的數(shù)量和長度在不同的皰疹病毒有較大的差異。

皰疹病毒的基因可以整合于細(xì)胞的基因組內(nèi)，成為細(xì)胞DNA的一部分，長遠(yuǎn)地復(fù)制下去，形成長期潛伏感染狀態(tài)。

皰疹病毒與腫瘤發(fā)生關(guān)系的機制目前已經(jīng)證明與皰疹病毒隱性感染有關(guān)。

人皰疹病毒共有5型，皰疹病毒4型，即EB病毒（EBV），EBV除引起人類皮膚和黏膜的皰疹樣病變外，還與人類鼻咽癌有密切關(guān)系。

逆轉(zhuǎn)錄病毒科最基本的特征是在其生命活動過程中有RNA到DNA的復(fù)制過程。

逆轉(zhuǎn)錄病毒病毒的基因組是單股、正鏈、線性RNA的二聚體，病毒粒子中的RNA不具備感染性。逆轉(zhuǎn)錄病毒RNA反轉(zhuǎn)錄成為DNA后，病毒DNA可以整合在宿主染色體中，這是逆轉(zhuǎn)錄病毒生命存在的一種形式，這種形式稱之為前病毒。能夠引起腫瘤的逆轉(zhuǎn)錄病毒在文獻(xiàn)中被稱之為RNA腫瘤病毒。

致瘤性逆轉(zhuǎn)錄病毒中可以引起惡性疾患，潛伏期長，并且不引起靶細(xì)胞培養(yǎng)物產(chǎn)生明顯的變化的病毒為白血病病毒。

逆轉(zhuǎn)錄病毒獨特的基因組結(jié)構(gòu)和生命周期使逆轉(zhuǎn)錄病毒在分子生物學(xué)研究和基因治療中其到了基因轉(zhuǎn)移載體的重要作用。人Ⅰ型免疫缺陷病毒（HIV-1）和人Ⅱ型免疫缺陷病毒（HIV-2）引起人的獲得性免疫缺陷綜合征。（AIDS）

1、、病原學(xué)：人Ⅰ型免疫缺陷病毒（HIV-1）和人Ⅱ型免疫缺陷病毒（HIV-2）引起人的獲得性免疫缺陷綜合征，簡稱艾滋病（AIDS）。

艾滋病病毒屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒科、慢病毒屬。

2、致病機制：HIV對CD+4細(xì)胞有選擇性的親嗜性。病毒侵入細(xì)胞后，借助反轉(zhuǎn)錄酶合成DNA，與細(xì)胞DNA整合，并利用宿主細(xì)胞的酶系統(tǒng)進行生物合成，產(chǎn)生病毒產(chǎn)物，致使宿主細(xì)胞死亡，釋放出大量新病毒，攻擊新的靶細(xì)胞，從而使T4淋巴細(xì)胞數(shù)量不斷減少；

正常的T4細(xì)胞，通過CD+4細(xì)胞結(jié)合病毒與病毒表面蛋白，而被細(xì)胞毒作用T細(xì)胞（T8）識別，進而被殺傷。

T4淋巴細(xì)胞在免疫應(yīng)答過程中起調(diào)節(jié)作用，與①單核-巨噬細(xì)胞、②細(xì)胞毒性T細(xì)胞③NK細(xì)胞、④B細(xì)胞等均有密切關(guān)系，所以T4細(xì)胞耗竭、功能下降，必將使免疫系統(tǒng)的多種功能發(fā)生缺陷。

3、傳播途徑：性接觸為最主要的傳播途徑；經(jīng)注射途徑、孕婦胎盤以及破損皮膚等均可造成感染。

4、診斷：測定HIV感染的最簡便方法是測定HIV抗體。

5、預(yù)防：切斷各種傳播途徑。

脊髓灰質(zhì)炎病毒屬于小核糖核酸病毒科，腸道病毒屬的病毒，主要經(jīng)過糞-口途徑傳播。脊髓灰質(zhì)炎病毒進入機體后，主要侵犯脊髓前角運動神經(jīng)元。目前脊髓灰質(zhì)炎在世界上許多國家，包括中國，已經(jīng)消失。

口蹄疫病毒屬于小核糖核酸病毒科、口蹄疫病毒屬，是一種主要感染偶蹄動物的烈性傳染病，人和非偶蹄動物也可感染，但癥狀相對較輕。

口蹄疫一旦發(fā)生則呈暴發(fā)性流行，可以跳躍式傳播，在適合的氣候條件下還可通過風(fēng)媒的途徑傳播。人感染口蹄疫病毒后只在口腔黏膜、手、足處皮膚出現(xiàn)水皰，可自愈，個別嚴(yán)重病例見于兒童。動物患口蹄疫后其生產(chǎn)性能急劇下降；對疫區(qū)要進行封鎖，封鎖期間疫區(qū)內(nèi)正常的畜產(chǎn)品交易和生產(chǎn)活動都不能進行；

對確診為口蹄疫的動物要立即捕殺、銷毀。所以口蹄疫暴發(fā)后對畜、牧、業(yè)生產(chǎn)乃至整個國民經(jīng)濟都會造成巨大的損失。

呼吸道合胞病毒屬于副粘病毒科、肺病毒屬。因在組織培養(yǎng)繁殖時能引起細(xì)胞融合而定為現(xiàn)在的名稱。呼吸道合胞病毒可以引起嬰幼兒產(chǎn)生嚴(yán)重的下呼吸道感染。

1、病毒的分離和鑒定：（P219）病毒對細(xì)胞的感染性具有嚴(yán)格的選擇性和特異性，因此用組織培養(yǎng)細(xì)胞接種病毒必須首先選擇敏感細(xì)胞。（1）病毒增殖的判定：（略）

（2）細(xì)胞病變（CPE）：大部分病毒在敏感細(xì)胞系均可出現(xiàn)CPE（細(xì)胞病變），CPE（細(xì)胞病變）可以表現(xiàn)為嚴(yán)重的細(xì)胞破壞、細(xì)胞腫大、顆粒增多、細(xì)胞融合成合胞體或無明顯的細(xì)胞變化等。CPE（細(xì)胞病變）經(jīng)常具有病毒“種”的特性，因此常常作為病毒堅定依據(jù)。

（3）病毒蝕(shi)斑技術(shù)（又稱空斑）：病毒蝕(shi)斑是指病毒在已長成的單層細(xì)胞上形成的局限性病灶，主要用于病毒的純化或病毒懸液中感染病毒含量的測定。（用病毒蝕斑技術(shù)測定含量-病毒純化或病毒懸液中感染的病毒）

（4）病毒感染力的滴定：有兩種，一種方法是用實驗動物測定LD50(半數(shù)致死量)；另一種方法是在組織細(xì)胞上測定TCID50（半數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)物感染量。

（5）病毒的保存：分離或鑒定后的病毒經(jīng)過冷凍干燥后可以長期保存。

2、免疫-血清學(xué)實驗：免疫-血清學(xué)實驗是利用抗原和抗體的特異性結(jié)合的原理進行的，主要用于兩個目的：

①從病料獲得病毒株后，應(yīng)用已知的抗病毒血清或單克隆抗體進行免疫-血清學(xué)試驗，鑒定病毒的種類乃至型別；

②由發(fā)病動物采集血清標(biāo)本，應(yīng)用全病毒或特異性病毒抗原，測定發(fā)病動物體液中的特異性抗體，或進一步比較發(fā)病動物的急性發(fā)病期和恢復(fù)期血清中的抗體效價，了解病毒性抗體是否有明顯的增長，從而判定病毒感染的存在。

（1）中和試驗：動物在受到病毒感染后，在體內(nèi)產(chǎn)生抗體，如果該抗體能與相應(yīng)的病毒粒子特異性地結(jié)合，使后者喪失感染力，這種抗體就成為中和抗體。

應(yīng)用已知的病毒或病毒抗原，可以測知患者體內(nèi)中和抗體的存在及其效價；

用已知的抗病毒血清或中和性單克隆抗體，也可以進行病毒的鑒定，因此中和試驗也常用于新分離病毒株的鑒定。

（2）血凝和血凝抑制試驗：許多病毒能夠凝集某些種類動物的紅細(xì)胞，病毒凝集的紅細(xì)胞種類隨病毒種類的不同而不同。

血凝反應(yīng)可被特異性抗體所抑制，因此血凝抑制試驗可以應(yīng)用于：

①應(yīng)用于標(biāo)準(zhǔn)病毒懸液測定血清中的相應(yīng)抗體；②應(yīng)用于特異性抗體鑒定新分離的病毒。

用枸櫞酸鈉配置的阿氏液具有抗紅細(xì)胞凝集作用，用于血凝和血凝抑制試驗中配置紅細(xì)胞懸掖。同一患者急性發(fā)病期和恢復(fù)期雙份血清（相距2～3周）的抗體效價增高4倍以上者，說明本次發(fā)病是由所測抗體相應(yīng)病毒引起的。

（3）補體結(jié)合試驗：一個抗體分子與抗原結(jié)合后，可以導(dǎo)致數(shù)百個補體分子的激活，呈現(xiàn)一定程度的放大作用，所以補體結(jié)合試驗是一個比較敏感的方法，一般用于人及動物血清中特異性抗體的定量檢測（補體結(jié)合試驗），也常用于新分離病毒的鑒定。

（4）免疫熒光技術(shù)：將抗原或抗體標(biāo)記上熒光素，再進行抗原-抗體反應(yīng)，出現(xiàn)熒光就說明標(biāo)記物的存在，同時也反映了抗原或抗體的存在。

免疫熒光技術(shù)具有抗原-抗體反應(yīng)的特異性和染色技術(shù)的快速性，并可在細(xì)胞水平上進行抗原定位，故在病毒學(xué)研究和病毒病的診斷中都是一種應(yīng)用很廣的方法。熒光抗體染色技術(shù)包括（1）直接法、（2）間接法、（3）補體法、（4）SPA(葡萄球菌A蛋白)免疫熒光法。

（5）酶免疫技術(shù)：以酶作為標(biāo)記物，通過化學(xué)方法將其與抗原或抗體共價結(jié)合，形成酶標(biāo)記物，可與被檢的抗原或抗體起反應(yīng)，形成酶標(biāo)記免疫復(fù)合物。制備酶結(jié)合物的方法很多，目前應(yīng)用最廣泛的有過碘酸鹽法和戊二醛法。

酶免疫測定試驗包括：①間接法（測抗體）、②雙抗體夾心法（測抗原）、③IgM捕獲ELISA（酶鏈免疫吸附實驗）、④競爭法。IgM是動物機體在受到初次抗原刺激后最早產(chǎn)生的一種抗體球蛋白，因此IgM捕獲ELISA常應(yīng)用于多

種病毒病的早期診斷。抗u鏈抗體特異性結(jié)合IgM，可以應(yīng)用于IgM捕獲ELISA。

IgG是主要的抗病毒抗體，在第二次抗原刺激時，由于免疫回憶，發(fā)生迅速的加強反應(yīng)IgG量顯著增高（分子量大）。在病毒病的診斷中，也常將這一原理用于判斷病毒病的感染狀況，但常常需要采集恢復(fù)期和急性期雙份血清

進行抗體效價的比較如IgG水平4倍或4倍以上增加具有血清學(xué)診斷意義。

（6）膠體金免疫檢測技術(shù)：膠體金免疫檢測技術(shù)是以膠體金為載體吸附抗體和抗原，完成檢測特異性抗原或抗體的。膠體金免疫檢測技術(shù)優(yōu)于ELISA（酶鏈免疫吸附實驗）法和免疫熒光法的最主要一點是肉眼直接判定結(jié)果。

（總結(jié)：膠體金免疫檢測技術(shù)就是直接用肉眼可以觀察結(jié)果）。

3、病毒病的分子生物學(xué)診斷：分子生物學(xué)診斷的特異性取決于核酸序列的特異性，病毒病的分子生物學(xué)診斷，包括對病毒核酸和蛋白質(zhì)的測定。

PCR（全稱是聚合酶鏈反應(yīng)），是在引物、摸板DNA和4種脫氧核糖核苷酸存在的條件下依賴于DNA聚合酶的酶促合成反應(yīng)。

由于引物是按照與擴增區(qū)段兩端序列彼此互補的原則設(shè)計的，因此每一條新生鏈的合成都是從引物的退火結(jié)合位點開始，并沿著相反鏈延伸。

因此，PCR（聚合酶鏈反應(yīng)）的特異性是由人工合成的一對寡核苷酸引物所決定的。PCR（聚合酶鏈反應(yīng)）可以在數(shù)小時內(nèi)對僅有的幾個拷貝的基因放大數(shù)百萬倍，使PCR（聚合酶鏈反應(yīng)）擴增結(jié)果在瓊脂糖凝膠電泳后形成明顯可見的DNA帶。

溴化乙錠（EB）可以插入核酸分子之間并在紫外線下放射熒光，因此可以作為核酸分子電泳的指示劑。（核酸分子電泳的指示劑用溴化乙錠-EB）。

（1）RT-PCR(聚合酶鏈反應(yīng))技術(shù)：由于DNA聚合酶不能以RNA為摸板合成cDNA，所以不能對RNA病毒核酸進行直接PCR（聚合酶鏈反應(yīng)）。

首先必須提取病毒RNA。提取病毒RNA時，要注意避免RNA酶對病毒RNA的降解作用。為此，所用的試劑和用品均需要進行無Rnase處理，（Rnas必須使用無熱原質(zhì)水制備）如加入RNA酶抑制劑或高壓滅菌。加入反轉(zhuǎn)錄酶經(jīng)過逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)合成與病毒RNA互補的DNA(cDNA)，然后才能進行PCR（聚合酶鏈反應(yīng)），這就是所謂的RT-PCR（逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)）。

目前常用的逆轉(zhuǎn)錄酶（RT-PCR）包括MMV和AMV。RT-PCR（逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)）反應(yīng)的特異性取決于模板和引物，引物序列必須是被檢病毒特異的，原則上要求引物3'端堿基與模板一定要配對，對引物5'末端的堿基并沒有嚴(yán)格的限制，只要與模板DNA結(jié)合的引物長度足夠，其5'末端堿基可以不與模板DNA匹配而呈游離狀態(tài)，因此對引物5'末端可以進行自由修飾。

PCR（聚合酶鏈反應(yīng)）反應(yīng)中，引物1又稱Watson引物，是與模板正鏈互補的寡核苷酸鏈。

（2）核酸雜交檢測技術(shù)：雜交的基本原理是帶互補序列的單鏈核苷酸相遇時，會退火形成雙鏈。

“用于診斷目的”雜交雙方是已知序列的病毒探針和待測樣品中的病毒核酸，如果是陽性結(jié)果說明病毒感染的存在。在核酸分子雜交技術(shù)基礎(chǔ)之上又發(fā)展了一系列檢測DNA和RNA的技術(shù)，如Southrn blotting、Western blotting、Dit blotting和菌落雜交。

聚丙烯酰胺凝膠電泳也可簡稱為PAGE（PAGE聚丙烯酰胺凝膠電泳-測雜交）DNA限制性內(nèi)切酶可以識別雙鏈DNA分子中的某種特定核苷酸序列。

利用不同的內(nèi)切酶切割病毒DNA，依據(jù)切割后的片段在凝膠電泳中泳動速率不同所形成的電泳帶型做出診斷。

（3）病毒病的免疫預(yù)防：決定疫苗免疫效果的關(guān)鍵因素是疫苗本身的質(zhì)量。

目前普遍應(yīng)用的病毒疫苗主要分為弱毒（活）疫苗和滅活疫苗兩類。弱毒（活）疫苗分解成（弱毒疫苗、弱活疫苗）。近年來隨著分子病毒學(xué)研究的不斷深入，相繼研究出了（1）亞單位疫苗、（2）基因工程疫苗、（3）活載體疫苗、（4）分子疫苗。

蟲媒病毒是由媒介昆蟲作為病毒的傳遞者的一類病毒，由蟲媒病毒引起的疾病即為蟲媒病毒，如乙型腦炎、新疆出血熱、登革熱、黑熱病等。

類病毒沒有外殼蛋白，對各種有機溶劑有抵抗力，說明也沒有脂質(zhì)外膜，只是一個裸露的RNA分子，類病毒只出現(xiàn)于植物。

在人和動物中存在著一類被稱為亞急性海綿樣腦病的中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，如瘋牛病。瘋牛病能夠通過食物鏈傳染給人。

研究證明，這種奇特疾病的病原，即不是病毒，也不是類病毒，大體上是由蛋白質(zhì)組成，目前稱之為阮病毒。（總結(jié)：病毒-亞急性海綿樣腦病的中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，如瘋牛病）

1、病原學(xué)：流行性乙型腦炎病毒屬于黃病毒科。黃病毒科能夠致人疾病的病毒有登革熱病毒、丙型肝炎病毒和乙型腦炎病毒。

由于1924年乙型腦炎病毒首先證實于日本，故也稱其為日本乙型腦炎。C6/36細(xì)胞適合于乙型腦炎病毒的分離和培養(yǎng)。

2、流行病學(xué)：

（1）宿主動物與傳染原：由蚊為媒介而傳播，引起人畜感染的主要媒介可能是三帶啄庫蚊，其他庫蚊也有可能。

（2）傳染途徑：流行性乙型腦炎是一種自然疫源性疾病，豬是傳播乙型腦炎病毒（乙腦病毒）的主要動物宿主。

乙型腦炎病毒通過蚊-豬-蚊的循環(huán)維持自身的存在。（3）人群易感性：除人、馬和豬外，通常不呈現(xiàn)臨床癥狀。

3、臨床表現(xiàn)：流行性乙型腦炎是一種中樞神經(jīng)系統(tǒng)的急性傳染病，以高熱和狂暴或沉郁等神經(jīng)癥狀為特征。

4、預(yù)防：疫苗預(yù)防注射。

1、病原學(xué)：登革病毒屬于黃病毒科黃病毒屬含單股正鏈RNA。登革熱（DH）和登革出血熱（DHF）是由4個血清型病毒引起的兩種不同臨床類型的急性傳染病。C6/36細(xì)胞可用于登革病毒分離和培養(yǎng)。

2、流行病學(xué)：

（1）宿主動物與傳染原：中國DH/DHF的傳播媒介主要為埃及伊蚊和白紋wen伊蚊，這些蚊種主要生活在家庭儲水容器中。

（2）傳染途徑：登革熱存在城市型（人-蚊-人循環(huán)）、叢林型（猴-蚊-猴循環(huán)）兩種疫源地。中國主要為人-蚊-人循環(huán)。

（3）人群易感性：DH/DHF主要發(fā)生于熱帶和亞熱帶地區(qū)。中國從嬰兒到老人均可發(fā)病，以兒童和青壯年患病率較高。

3、臨床表現(xiàn)：潛伏期：一般為5～8天。

登革熱主要以高熱、頭痛、肌肉和關(guān)節(jié)痛為主，與登革熱的主要區(qū)別是有無嚴(yán)重出血。

DSS（登革休克綜合征）是DH/DHF的嚴(yán)重形式，其含義是登革休克綜合征。主要診斷依據(jù)為出血、休克、口唇發(fā)紺和血壓低或測不到。

（這些癥狀是登革休克綜合征臨床表現(xiàn)）世界衛(wèi)生組織(WHO)對DHF/ DSS的診斷限定了嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)。有四種主要的臨床表現(xiàn)：高熱、出血、肝腫大和循環(huán)衰竭。WHO根據(jù)疾病的嚴(yán)重程度把DHF/ DSS（登革出血熱/登革休克綜合征）

分為四個等級：Ⅰ級和Ⅱ級表現(xiàn)為DHF（登革出血熱）輕型，Ⅲ級和Ⅳ級表現(xiàn)為更嚴(yán)重的形式—DSS的（登革休克綜合征）

4、預(yù)防：防蚊滅蚊。傳染源的管理。

1、病原學(xué)：流行性出血熱病毒屬于布尼亞病毒科漢坦病毒屬，基因為負(fù)鏈分節(jié)段RNA。中國目前發(fā)現(xiàn)的流行性出血熱主要有2種類型：

HTNV型（野鼠型）和SEOV型（家鼠型）。Vero-E6細(xì)胞適合于流行性出血熱病毒的分離和培養(yǎng)。

2、流行病學(xué)：

（1）宿主動物與傳染原：在我國流行性出血熱主要傳染源和病毒宿主為嚙nie齒動物（黑線姬鼠和褐家鼠）。嚙nie-咬如蟲咬嚙。

（2）傳染途徑：接觸帶病毒的宿主動物及其排泄物可以造成感染。（3）人群易感性：普遍易感。

3、臨床表現(xiàn)：潛伏期：一般為7～14天。

典型的臨床表現(xiàn)有三大特征：發(fā)熱、出血和腎損害。流行性出血熱主要以腎臟損害為特征，故又稱之為腎綜合征出血熱。

4、預(yù)防：

（1）防鼠滅鼠。

（2）接種疫苗：目前我國所使用的流行性出血熱的疫苗是細(xì)胞培養(yǎng)滅活疫苗，可以分為3種類型（家鼠型、野鼠型、家鼠、野鼠雙價混合苗）經(jīng)過近幾年的應(yīng)用已證明在預(yù)防流行性出血熱方面有效。（3）講究衛(wèi)生。

5、診斷：流行性出血熱對于明確疫源地類型、選擇所用疫苗的種類、指導(dǎo)防治策略等都非常重要。目前流行性出血熱的分型診斷方法有多種，包括（1）免疫熒光法（2）單抗分型

（3）RT-PCR（逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)）

（4）ELISA（酶鏈免疫吸附實驗）法。鼠帶毒率調(diào)查是常用的監(jiān)測手段之一，用于流行性出血熱鼠帶毒率調(diào)查標(biāo)本制備的主要方法為鼠肺冰凍切片，鼠帶毒率調(diào)查的常用方法為免疫熒光法。、病原學(xué)：克里米亞—剛果出血熱是布尼亞病毒科、內(nèi)羅病毒屬的病毒，故又稱為新疆出血熱。病毒基因組為負(fù)鏈分節(jié)段RNA。

2、流行病學(xué)：

（1）宿主動物與傳染原：30多種蜱，特別璃眼蜱屬既是該病毒的儲存宿主又是傳播媒介；多種不同的脊椎動物既是蜱的宿主，也可能是病毒的儲存宿主。

（2）傳染途徑：人的感染是因為蜱的叮咬或密切接觸感染動物或患者。（3）人群易感性：普遍易感。

3、臨床表現(xiàn)：潛伏期：蜱叮咬至疾病發(fā)作之間的時間為潛伏期，一般為3～6天。

臨床表現(xiàn)：克里米亞—剛果出血熱是一種神經(jīng)系統(tǒng)的疾病，神經(jīng)系統(tǒng)的癥狀出現(xiàn)于血管異常造成的顯著的出血綜合征之前。

常常為突發(fā)和急性，發(fā)熱（39℃～41℃）、寒戰(zhàn)、頭痛、風(fēng)濕痛、腰痛和上腹部痛等。隨后迅速發(fā)展到短暫的、最嚴(yán)重的出血期，一般4天后在疾病高峰期導(dǎo)致死亡。

4、預(yù)防：目前尚無特異性疫苗進行接觸前的主動預(yù)防。有效的預(yù)防首先應(yīng)避免與傳染源及媒介的接觸。

1、甲型肝炎病毒：甲型肝炎病毒（HAV）可以引起甲型肝炎。在病毒分類上甲肝病毒屬于小RNA病毒科。

甲型肝炎實驗室診斷方法主要依賴于檢測患者血清中的抗HAV（甲型肝炎病毒）的IgM。

2、乙型肝炎病毒：（HBV）

（1）病原學(xué)：乙型肝炎病毒（HBV）屬于嗜肝DNA病毒科、正嗜肝DNA病毒屬，是傳染性肝炎的一個重要病因。

（2）流行病學(xué)：HBV（乙型肝炎病毒）的唯一宿主是人。嗜肝DNA病毒可以存活于那些與感染者粘膜或皮膚創(chuàng)口接觸的物品表面。

（3）診斷：HBV（乙型肝炎病毒）侵入機體后進入血液循環(huán)，主要在白細(xì)胞中進行繁殖。HBV（乙型肝炎病毒）主要有3種抗原，分別為HBsAg（乙型肝炎表面抗原）、HBcAg（乙型肝炎核心抗原）、HBeAg（乙肝e抗原）。

HBsAg（乙型肝炎表面抗原）：

①HBsAg可誘導(dǎo)機體產(chǎn)生乙型肝炎表面抗體（抗—HBs）,具有抗HBV（乙型肝炎病毒）感染的作用 ②HBsAg與病毒的中和性作用有關(guān)。

HBcAg（乙型肝炎核心抗原）：為病毒核心的主要抗原，是急性乙型肝炎病毒感染的重要診斷指標(biāo)之一，是檢測到抗HbcAgM。

HBeAg（乙肝e抗原）：在乙型肝炎潛伏期的后期出現(xiàn)并且HBeAg的存在表示HBV（乙型肝炎病毒）的存在。

HBeAg是在病毒復(fù)制活躍時的宿主血清中檢測到的一種可溶性抗原，HBeAg成分的消失和出現(xiàn)相應(yīng)的抗體，預(yù)示著乙型肝炎病毒的繁殖減弱和疾病有可能向好的方面轉(zhuǎn)化。

血清中HBV（乙型肝炎病毒）DNA聚合酶的存在，表明HBV的感染處于病毒活動復(fù)制期。

（4）預(yù)防：疫苗接種：目前用于預(yù)防接種的乙型肝炎疫苗主要有基因工程乙肝疫苗和乙型肝炎表面抗原佐劑疫苗。防止血源性污染和傳播。

3、丙型肝炎病毒：（HCV）——非甲非乙型肝炎病毒（1）病原學(xué)：

丙型肝炎病毒（HCV）屬于黃病毒科、類丙型肝炎病毒屬。病毒粒子含有一單股正鏈RNA。丙型肝炎又可稱為非甲非乙型肝炎，根據(jù)其流行病學(xué)特征、臨床表現(xiàn)和傳播方式，可以將其分為 ①腸道傳播的非甲非乙型肝炎 ②輸血后非甲非乙型肝炎。（2）流行病學(xué)：

①宿主動物與傳染源：人是丙型肝炎的自然宿主和貯zhu存者。尚未確認(rèn)別的自然宿主和非脊椎動物傳播媒介。

②傳染途徑：約60%的丙型肝炎病例都是由血液接觸引起的，而非腸道感染。③人群易感性：普遍易感。

4、丁型肝炎病毒（HDV）：丁型肝炎病毒（HDV）為缺陷型RNA病毒，必須借助乙型肝炎表面抗原（HBsAg）包裹才能成為感染性病毒顆粒，常與HBV（乙型肝炎）同時或重疊感染。HDV（丁型肝炎病毒）主要通過非腸道傳播途徑傳播。HDV感染的指標(biāo)是血液和體液中可測得HDV抗原。抗HDV抗體檢測可以反映HDV感染狀況。

慢性HDV感染與多種肝臟疾病密切相關(guān)，包括重癥肝炎、肝硬化、丁型肝炎和慢性活動性肝炎。

1、病原學(xué)：流感病毒屬于正粘病毒科。按流感病毒核蛋白與基質(zhì)蛋白抗原性的不同，流感病毒又可分為甲、乙、丙3型。

流感病毒基因組為單股RNA，由8個階段組成。流感病毒基因組片段具有共同的特點：所有的RNA階段具有相同的5’端。

1980年WHO公布的流感病毒命名方法，一株流感病毒名稱中包括下面幾項內(nèi)容：型別/宿主/分離地點/毒株序號/分離年代（亞型）。

流感病毒血凝素變異性很強是造成流感病毒易發(fā)生抗原變異的主要原因。

2、流行病學(xué)：

（1）宿主動物與傳染源： 人的絕大多數(shù)甲型流感病毒能自然感染家禽、家畜，并進一步支持人甲型流感病毒新亞型可能來源于動物的觀點。

乙型流感病毒能引起人的呼吸道感染，丙型流感病毒也是感染人的病毒。（2）傳播途徑：流感病毒的主要傳播途徑是空氣飛沫。

（3）人群易感性：3個型流感病毒沒有共同抗原，都能感染人；但甲型流感病毒的感染范圍很廣，容易引起大規(guī)模流行。

3、免疫預(yù)防：由于流感病毒變異頻繁，因此疫苗注射必須有針對性，即必須針對當(dāng)前的流行株，才能取得良好的免疫效果。

4、診斷：用于流感病毒分離與鑒定的標(biāo)本應(yīng)取自患者鼻咽分必物。流感病毒的快速診斷主要依賴于檢查抗病毒血凝素抗體。

1、病原學(xué)：絲狀病毒科、絲狀病毒屬包括兩種病毒，即①埃博拉病毒和②馬爾堡病毒。研究絲狀病毒的重要意義在于：

（1）這兩種病毒均具極高的傳染性，對人類的危害極大；（2）室溫下非常穩(wěn)定；（3）埃博拉病毒

60℃1小時仍不能被完全滅火，由于特有的生物學(xué)性質(zhì)和致病力，WHO將其列為潛在的生物戰(zhàn)劑之一。（4）埃博拉病毒最初流行于扎伊爾北部的埃博拉河流域而命名為埃博拉病毒。

2、流行病學(xué)：埃博拉病毒的自然宿主尚末確定。自然條件下，人和猴都能發(fā)生嚴(yán)重感染并死亡。埃博拉病毒感染后可以引起出血的臨床表現(xiàn)，因此常將其歸為出血熱病毒。

根據(jù)埃博拉病毒的抗原性的差異，又可將埃博拉病毒分為3個血清型，不同血清型的埃博拉病毒其致病型有很大的差異。

目前認(rèn)為，埃博拉病毒的疫源地主要在非洲大陸，但1989年自菲律賓運往美國的獼猴發(fā)生了感染，泰國也有埃博拉病毒感染的血清學(xué)證據(jù)，提示東南亞地區(qū)也可能是疫源地之一。馬爾堡病毒也可引起人的嚴(yán)重出血熱，在人-人或猴-人之間傳播。

鼻病毒屬于小核糖核酸病毒科、鼻病毒屬，是與人類普遍感冒有關(guān)的病毒。流行性腮腺炎是由副粘病毒科、副粘病毒屬的腮腺炎病毒引起。流行性腮腺炎最具有流行病學(xué)意義的傳染源是亞臨床型者。

天花是痘病毒科、正痘病毒屬的天花病毒引起的一種傳播迅速的烈性傳染病。由于使用痘苗病毒疫苗預(yù)防，1977年天花在全世界流行終止。

1、病原學(xué)：狂犬病毒屬于彈狀病毒科、狂犬病毒屬。因其特有的臨床表現(xiàn)，狂犬病又可稱為“恐水病”。

從感染動物或患者中發(fā)現(xiàn)的狂犬病毒又可稱之為野毒株或街毒；狂犬病毒街毒經(jīng)過系列傳代適應(yīng)特定宿主后即為固定毒。

根據(jù)對不同毒株的血清反應(yīng)和單克隆抗體分析，將狂犬病毒分成5個血清型：血清1型、血清2型、血清3型、血清4型、血清5型。

血清2、3、4、5型又稱為狂犬病相關(guān)病毒，野外分布的主要為血清2、3、4型。

在血清分型的基礎(chǔ)上，利用分子生物學(xué)技術(shù)對狂犬病毒也進行了遺傳學(xué)分型，即將狂犬病毒屬分為6種基因型：

基因型1（血清1型）、基因型2（血清2型）、基因型3（血清3型）、基因型4（血清4型）、基因型5和基因型6（血清5型）相對應(yīng)。

2、流行病學(xué)：

（1）宿主動物與傳染源：狂犬病毒幾乎可以感染所有溫血動物，但造成人類感染的主要傳染源是帶病毒犬。（2）傳播途徑：因感染狂犬病毒的動物咬傷，感染性唾液污染傷口發(fā)生感染。（3）人群易感性：人及所有溫血動物皆能感染。

3、預(yù)防：狂犬病的預(yù)防主要包括兩個方面：（1）即控制傳染源（2）暴露后應(yīng)用免疫制劑。控制傳染源主要是家養(yǎng)犬的免疫。

狂犬病免疫制劑包括被動免疫與主動免疫兩種。

狂犬病的被動免疫制劑有動物源抗狂犬病病毒的精制血清和人源狂犬病免疫球蛋白。

主動免疫即注射狂犬疫苗。我國于1981年開始用地鼠腎細(xì)胞疫苗，近幾年又開始應(yīng)用Vero（非洲綠猴腎）細(xì)胞狂犬病疫苗。

4、診斷：狂犬病病毒或病毒抗原可以在患者身體多個部位，如角膜壓片、腦脊髓液、唾液和咬傷處皮膚組織檢測到。

實驗室診斷狂犬病最具特性的診斷依據(jù)是—感染神經(jīng)原內(nèi)的Negri小體（內(nèi)基氏小體），最常見于海馬及小腦普爾金耶組織的神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)，是狂犬病病毒的集落。

WHO推薦快速熒光灶抑制試驗取代了傳統(tǒng)的小鼠中和實驗檢測狂犬疫苗免疫后中和抗體水平。

1、病原學(xué)：輪狀病毒屬于呼腸孤病毒科、輪狀病毒屬，是各種幼齡動物非細(xì)胞性腹瀉的主要病原之一。

病毒由11個節(jié)段的雙鏈RNA組成。根據(jù)輪狀病毒RNA11個節(jié)段的聚丙烯酰胺電泳圖形不同，可以將輪狀病毒進行分型和鑒定。

絕大多數(shù)哺乳動物輪狀病毒，具有一種相同的群抗原，這些輪狀病毒被命名為A群輪狀病毒，是研究的主要對象。

2、流行病學(xué)：輪狀病毒宿主范圍甚廣，已知的有人及多種動物。據(jù)初步統(tǒng)計，全世界幼兒發(fā)生的腸炎至少有50%是由輪狀病毒引起的。（腸道病毒）。

3、預(yù)防：人用口服輪狀病毒活疫苗可是兒童獲得保護。

4、診斷：輪狀病毒感染的可靠的實驗室診斷依賴于檢出輪狀病毒或抗原，進行該項診斷應(yīng)收集糞便。培養(yǎng)輪狀病毒使用最普遍的是MA-104傳代細(xì)胞系。

輪狀病毒復(fù)制方式不同于其他呼腸孤病毒，它不是通過吞飲作用進入細(xì)胞，而是通過胞漿膜直接進入胞漿，胰蛋白酶對病毒進行處理可以使病毒變?yōu)橛懈腥拘浴?/p>

因此為了在細(xì)胞培養(yǎng)中復(fù)制輪狀病毒和連續(xù)傳代通常需要用胰蛋白酶對病毒進行處理，從而促進輪狀病毒的感染性。

皰疹病毒是一群較大的有囊膜的雙鏈DNA病毒。

根據(jù)進行該項診斷皰疹病毒的感染性質(zhì)，又可將皰疹病毒分為A群和B群兩個亞群。

A群：凡在體外培養(yǎng)時，容易從細(xì)胞內(nèi)釋放到營養(yǎng)液中的病毒為A群；B群：病毒同細(xì)胞緊密結(jié)合很難釋放到營養(yǎng)液中為B群，又名細(xì)胞結(jié)合性病毒。

皰疹病毒基因組結(jié)構(gòu)由末端重復(fù)序列和內(nèi)部重復(fù)序列所組成，重復(fù)序列的數(shù)量和長度在不同的皰疹病毒有較大的差異。

皰疹病毒的基因可以整合于細(xì)胞的基因組內(nèi)，成為細(xì)胞DNA的一部分，長遠(yuǎn)地復(fù)制下去，形成長期潛伏感染狀態(tài)。

皰疹病毒與腫瘤發(fā)生關(guān)系的機制目前已經(jīng)證明與皰疹病毒隱性感染有關(guān)。

人皰疹病毒共有5型，皰疹病毒4型，即EB病毒（EBV），EBV除引起人類皮膚和黏膜的皰疹樣病變外，還與人類鼻咽癌有密切關(guān)系。

逆轉(zhuǎn)錄病毒科最基本的特征是在其生命活動過程中有RNA到DNA的復(fù)制過程。

逆轉(zhuǎn)錄病毒病毒的基因組是單股、正鏈、線性RNA的二聚體，病毒粒子中的RNA不具備感染性。逆轉(zhuǎn)錄病毒RNA反轉(zhuǎn)錄成為DNA后，病毒DNA可以整合在宿主染色體中，這是逆轉(zhuǎn)錄病毒生命存在的一種形式，這種形式稱之為前病毒。能夠引起腫瘤的逆轉(zhuǎn)錄病毒在文獻(xiàn)中被稱之為RNA腫瘤病毒。

致瘤性逆轉(zhuǎn)錄病毒中可以引起惡性疾患，潛伏期長，并且不引起靶細(xì)胞培養(yǎng)物產(chǎn)生明顯的變化的病毒為白血病病毒。

逆轉(zhuǎn)錄病毒獨特的基因組結(jié)構(gòu)和生命周期使逆轉(zhuǎn)錄病毒在分子生物學(xué)研究和基因治療中其到了基因轉(zhuǎn)移載體的重要作用。人Ⅰ型免疫缺陷病毒（HIV-1）和人Ⅱ型免疫缺陷病毒（HIV-2）引起人的獲得性免疫缺陷綜合征。（AIDS）

1、、病原學(xué)：人Ⅰ型免疫缺陷病毒（HIV-1）和人Ⅱ型免疫缺陷病毒（HIV-2）引起人的獲得性免疫缺陷綜合征，簡稱艾滋病（AIDS）。

艾滋病病毒屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒科、慢病毒屬。

2、致病機制：HIV對CD+4細(xì)胞有選擇性的親嗜性。病毒侵入細(xì)胞后，借助反轉(zhuǎn)錄酶合成DNA，與細(xì)胞DNA整合，并利用宿主細(xì)胞的酶系統(tǒng)進行生物合成，產(chǎn)生病毒產(chǎn)物，致使宿主細(xì)胞死亡，釋放出大量新病毒，攻擊新的靶細(xì)胞，從而使T4淋巴細(xì)胞數(shù)量不斷減少；

正常的T4細(xì)胞，通過CD+4細(xì)胞結(jié)合病毒與病毒表面蛋白，而被細(xì)胞毒作用T細(xì)胞（T8）識別，進而被殺傷。

T4淋巴細(xì)胞在免疫應(yīng)答過程中起調(diào)節(jié)作用，與①單核-巨噬細(xì)胞、②細(xì)胞毒性T細(xì)胞③NK細(xì)胞、④B細(xì)胞等均有密切關(guān)系，所以T4細(xì)胞耗竭、功能下降，必將使免疫系統(tǒng)的多種功能發(fā)生缺陷。

3、傳播途徑：性接觸為最主要的傳播途徑；經(jīng)注射途徑、孕婦胎盤以及破損皮膚等均可造成感染。

4、診斷：測定HIV感染的最簡便方法是測定HIV抗體。

5、預(yù)防：切斷各種傳播途徑。

脊髓灰質(zhì)炎病毒屬于小核糖核酸病毒科，腸道病毒屬的病毒，主要經(jīng)過糞-口途徑傳播。脊髓灰質(zhì)炎病毒進入機體后，主要侵犯脊髓前角運動神經(jīng)元。目前脊髓灰質(zhì)炎在世界上許多國家，包括中國，已經(jīng)消失。

口蹄疫病毒屬于小核糖核酸病毒科、口蹄疫病毒屬，是一種主要感染偶蹄動物的烈性傳染病，人和非偶蹄動物也可感染，但癥狀相對較輕。

口蹄疫一旦發(fā)生則呈暴發(fā)性流行，可以跳躍式傳播，在適合的氣候條件下還可通過風(fēng)媒的途徑傳播。人感染口蹄疫病毒后只在口腔黏膜、手、足處皮膚出現(xiàn)水皰，可自愈，個別嚴(yán)重病例見于兒童。動物患口蹄疫后其生產(chǎn)性能急劇下降；對疫區(qū)要進行封鎖，封鎖期間疫區(qū)內(nèi)正常的畜產(chǎn)品交易和生產(chǎn)活動都不能進行；

對確診為口蹄疫的動物要立即捕殺、銷毀。所以口蹄疫暴發(fā)后對畜、牧、業(yè)生產(chǎn)乃至整個國民經(jīng)濟都會造成巨大的損失。

呼吸道合胞病毒屬于副粘病毒科、肺病毒屬。因在組織培養(yǎng)繁殖時能引起細(xì)胞融合而定為現(xiàn)在的名稱。呼吸道合胞病毒可以引起嬰幼兒產(chǎn)生嚴(yán)重的下呼吸道感染。1． 非細(xì)胞型微生物（病毒）：

（1）是最小的一類微生物，能通過除菌濾器。

（2）沒有典型的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，無產(chǎn)生能量的酶系統(tǒng)，只能在活細(xì)胞內(nèi)生長增殖。（病毒屬之）2． 原核細(xì)胞型微生物（細(xì)菌、支原體、立克次氏體衣原體、螺旋體、放線菌）：（1）僅有原始核質(zhì)，系呈裸(luo)露(lou)的環(huán)狀DNA團塊(kuai)無核膜或核仁。（2）細(xì)胞器不很完善，只有核蛋白體。

細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)包括：細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、核質(zhì)、核蛋白體等； 細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)包括：菌毛、鞭毛、莢膜等；細(xì)菌可分為自養(yǎng)菌和異養(yǎng)菌； 細(xì)菌按形態(tài)不同可分為：球菌、桿菌、螺形菌（螺菌和弧菌）。

在細(xì)菌的組成中，水為主要成分，而蛋白質(zhì)類在固體成分中的比例最高。3． 核細(xì)胞型微生物（真菌）：（1）細(xì)胞核分化程度高，有核膜和核仁；（2）細(xì)胞質(zhì)內(nèi)細(xì)胞器完整。（真菌屬之）（3）不能在活細(xì)胞內(nèi)內(nèi)生長增殖。

機體的屏障作用包括：皮膚與粘膜、血腦屏障和胎盤屏障。毒力主要由侵襲力和毒素所決定。

毒素包括：外毒素（如金黃色葡萄球菌腸毒素、產(chǎn)毒性大腸桿菌腸毒素、白喉毒素、痙攣毒素、肉毒毒素、表皮剝脫毒素、霍亂腸毒素）和內(nèi)毒素 外毒素包括：神經(jīng)毒素、細(xì)胞毒素、和腸毒素；

細(xì)菌的內(nèi)毒素為脂多糖成分，均由革蘭陰性菌產(chǎn)生、160℃，2-4小時才被破壞，其毒害效應(yīng)不具有組織器官選擇性。（毒性作用包括DIC、Shwartzman現(xiàn)象、發(fā)熱反應(yīng)、白細(xì)胞反應(yīng)、內(nèi)毒素血癥與內(nèi)毒素休克）雖毒性作用較弱，但不能像外毒素那樣經(jīng)甲醛脫毒而成為類毒素鱟（hou）。

試驗可以用對細(xì)菌內(nèi)毒素的測定。致病性螺形菌有弧菌如霍亂弧菌，和螺菌如鼠咬熱螺菌。幼齡細(xì)菌菌體較長，老齡細(xì)菌往往呈多形態(tài)性。

細(xì)菌的結(jié)構(gòu)：有些細(xì)菌在一定條件下可以發(fā)生轉(zhuǎn)化而進入休眠狀態(tài)，稱為芽孢。

其結(jié)構(gòu)和性狀與其繁殖狀態(tài)有明顯不同；還有的細(xì)菌在環(huán)境因素的用下，還可以形成L型。細(xì)菌細(xì)胞壁的主要成分是肽聚糖，又稱為粘肽、胞壁質(zhì)。肽聚糖原核型生物細(xì)胞的特有成分。肽聚糖（1）是細(xì)胞壁抗胞內(nèi)高滲透壓

（2）保護細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能完整的主體成分

（3）凡能破壞肽聚糖分子結(jié)構(gòu)或抑制其合成的物質(zhì)，都有抑菌或殺菌作用。革蘭氏陽性細(xì)菌的細(xì)胞壁：由肽聚糖及穿插于其內(nèi)磷壁酸組成。其中（1）肽聚糖不僅曾數(shù)多、含量高，占細(xì)胞壁干重50%-80%；

（2）而且質(zhì)地致密，是具有高機械強度的三維空間結(jié)構(gòu)。磷壁酸分為壁磷壁酸和膜磷壁酸兩種。磷壁酸有很強的抗原性，是G+細(xì)菌的重要表面抗原，可用以對細(xì)菌進行血清學(xué)分型。

革蘭氏陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁：依次包括肽聚糖、脂蛋白、外膜、類脂A、多糖等成分。還有胞質(zhì)周圍間隙。

肽聚糖：陰性細(xì)菌的肽聚糖僅1-2層，占細(xì)胞壁干重的10%左右。是疏松薄弱的二維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。

脂蛋白：由蛋白和脂質(zhì)組成，連接于外膜與肽聚糖之間。脂蛋白是陰性細(xì)菌含量最高的蛋白質(zhì)，其功能是穩(wěn)定外膜并將之固定于肽聚糖層。

外膜：外膜是陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁特有成分，約占細(xì)胞壁干重80%。外膜由平行排列的脂質(zhì)雙層構(gòu)成，其內(nèi)鑲嵌以具有不同功能的多種特異性蛋白；外膜還有性菌毛、噬菌體的受體。

脂多糖（LPS）:（稱為內(nèi)毒素）：是細(xì)胞壁外膜伸出于細(xì)胞表面的特殊結(jié)構(gòu)，由類脂A、核心多糖和特異性多糖組成。LPS對動物具有強烈毒性作用。LPS牢固地結(jié)合在細(xì)菌細(xì)胞表面，只在菌體溶解時才釋放，故稱為細(xì)菌內(nèi)毒素。

類脂A：類脂A耐熱，是內(nèi)毒素的主要成分和毒性部位類脂A無種屬特異性，各種細(xì)菌的類脂A都相同，故不同細(xì)菌產(chǎn)生的內(nèi)毒素的毒性作用均相似。

核心多糖：位于類脂A的外層，具有屬特異性，同一屬的細(xì)菌其核心多糖的組成是相同的。特異性多糖：具有抗原性，G?細(xì)菌的菌體抗原（O抗原）

細(xì)胞膜：細(xì)胞膜由平行排列的脂質(zhì)雙層組成，其內(nèi)鑲嵌以多種蛋白和少量多糖； 細(xì)胞膜的主要功能：

（1）物質(zhì)納泄：細(xì)胞膜具有選擇性通透作用，可選擇性地攝取營養(yǎng)物質(zhì)，排出代謝產(chǎn)物。物質(zhì)納泄是細(xì)胞膜的主動運轉(zhuǎn)過程，其中載體蛋白和酶類物質(zhì)起重要作用。

（2）生物合成：細(xì)胞膜上有多種合成酶，是細(xì)菌細(xì)胞生物合成重要場所。肽聚糖、磷壁酸、磷脂、脂多糖、莢膜、鞭毛等多種菌體成分，都是在細(xì)胞膜上合成的。（3）呼吸作用：細(xì)胞膜上有多種呼吸酶，包括細(xì)胞色素和一些脫氫酶，可以運轉(zhuǎn)電子完成氧化磷酸化，參與細(xì)胞呼吸過程，與能量的產(chǎn)生、貯（zhu）存和利用有密切關(guān)系。

（4）形成中介體：中介體是細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)陷、折疊、卷曲形成的囊狀結(jié)構(gòu)。多見于G+細(xì)菌。

細(xì)胞質(zhì)：是由細(xì)胞膜包裹著的溶膠性物質(zhì)，其基本成分是水、蛋白質(zhì)、核酸、脂類、少量糖和無機鹽等。用光鏡和電鏡觀察細(xì)胞質(zhì)，大小不等的顆粒。

（1）核糖體：核糖體是游離于細(xì)胞質(zhì)中的微小顆粒，當(dāng)mPNA連成多聚核糖體時，就成為蛋白質(zhì)的合成場所。

（2）核質(zhì)：細(xì)菌的遺傳物質(zhì)是由裸露的雙股DNA回旋、盤繞、卷曲而成的松散網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，無組蛋白包饒、無核膜、無核仁，故稱為核質(zhì)或擬核。

核質(zhì)具有細(xì)胞核功能，決定細(xì)菌性狀和遺傳特征。

（3）質(zhì)粒：質(zhì)粒是核質(zhì)之外的雙股環(huán)狀DNA，攜有遺傳信息，控制非細(xì)菌存活所必須的某些特定性質(zhì)，細(xì)菌的質(zhì)粒具有自我復(fù)制、傳給子代、可幾個質(zhì)粒共存于一個菌體、可自然丟失，以及可通過結(jié)合或轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)移至受體菌等特性。

醫(yī)學(xué)上重要的質(zhì)粒有決定細(xì)菌性菌毛的F因子，決定細(xì)菌耐藥性的R因子，決定大腸桿菌產(chǎn)生大腸菌素的col因子等。

（4）胞質(zhì)顆粒：細(xì)胞質(zhì)中的顆粒多為暫時貯存的營養(yǎng)物質(zhì)。較為常見的是異染顆粒多見于白喉桿菌、鼠疫桿菌、結(jié)核桿菌等

白喉桿菌的異染顆粒多在菌體的一端或兩端，故稱為極體，有助于鑒別細(xì)菌。特殊結(jié)構(gòu)：莢膜（粘稠性物質(zhì)）：細(xì)菌的莢膜有多種功能

（1）其中最重要的是抗吞噬作用。莢膜抗吞噬作用是構(gòu)成細(xì)菌毒力的因素之一。（2）莢膜還有抗溶菌酶，抗補體、抗干燥作用

（3）在營養(yǎng)缺乏時莢膜還可作為營養(yǎng)物質(zhì)而被吸收。莢膜具有抗原性，可以鑒別細(xì)菌和進行細(xì)菌分型。

鞭毛是由細(xì)胞質(zhì)伸出的蛋白性絲狀物。一般認(rèn)為鞭毛是細(xì)菌的運動器官，有鞭毛的細(xì)菌能活潑運動；鞭毛具有抗原性，稱“H”抗原。

菌毛許多G-細(xì)菌各別的G+細(xì)菌，細(xì)胞表面有極其纖細(xì)的蛋白性絲狀物，稱為菌毛。菌毛與細(xì)菌的運動無關(guān)，須用電鏡進行觀察。

細(xì)菌的芽孢：某些細(xì)菌在一定條件下變成為圓形或卵圓形的小體，稱為。由于芽孢在細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)形成。故常稱為內(nèi)芽孢。

（1）芽孢攜有成套的核質(zhì)、酶及合成菌體成分的各種機構(gòu)，保存有細(xì)菌的全部生命活性；（2）在適宜條件下可以發(fā)芽而形成新的繁殖體。

因此，芽孢是細(xì)菌適應(yīng)環(huán)境變化的特殊存活形式，亦即細(xì)菌的休眠狀態(tài)。

芽孢本身并不直接引起疾病，擔(dān)當(dāng)其發(fā)芽轉(zhuǎn)化成繁殖后，則可迅速大量繁殖，引起疾病。在人類，有四種常見的嚴(yán)重疾病是由能形成芽孢的細(xì)菌引起。（1）炭疽(ju)桿菌引起炭疽(ju)菌病（2）肉毒桿菌引起肉毒毒素食物中毒（3）氣性壞疽病原菌引起氣性壞疽（4）破傷風(fēng)桿菌引起破傷風(fēng)（常見）。

細(xì)菌L型：細(xì)胞壁有維持細(xì)菌形態(tài)和保護菌體內(nèi)部的重要作用。在某些因素影響下細(xì)菌可以失去細(xì)胞壁，形成細(xì)菌的細(xì)胞壁缺陷型，亦即細(xì)菌L型。

細(xì)菌L型需要高滲透壓培養(yǎng)基培養(yǎng)。細(xì)菌L型兼有多種繁殖方式，能以（1）二分裂方式（2）出芽方式（3）巨形體釋放顆粒方式進行增殖。L型菌落有三種類型：

（1）L型，呈油煎蛋樣，中心致密，透光性差，周邊透明呈顆粒狀；（2）G型，顆粒狀，整個菌落由透明顆粒組成，無核心部分；（3）F型，呈絲狀，菌落似L型，但周邊為透明性絲狀。

L型以引起慢性和反復(fù)發(fā)作性感染為其致病特點，主要致病物質(zhì)是毒素。細(xì)菌的營養(yǎng)物質(zhì)（無機鹽）：各類無機鹽的作用為：（1）構(gòu)成菌體成分；

（2）調(diào)節(jié)菌體內(nèi)外滲透壓；

（3）促進酶的活性或作為某些輔酶組分；

（4）某些元素與細(xì)菌的生長繁殖及致病作用密切相關(guān)。

生長因子：很多細(xì)菌在其生長過程中還必需一些自身不能合成的有機物質(zhì)，成為生長因子。生長因子必須從外界得以補充，其中包括維生素、某些氨基酸、脂類、嘌呤、嘧啶等。根據(jù)細(xì)菌在代謝過程中對營養(yǎng)物質(zhì)的需要，可將細(xì)菌分為自養(yǎng)菌和異養(yǎng)菌兩種營養(yǎng)類型。

自養(yǎng)菌：該類菌能以簡單的無機物為原料合成復(fù)雜的菌體成分。根據(jù)能量的來源，自養(yǎng)菌又分為（1）光能營養(yǎng)菌（2）化能營養(yǎng)菌。

異養(yǎng)菌：該類菌必須以多種有機物為原料，合成菌體原生質(zhì)及獲得能量。異養(yǎng)菌又分為（1）腐生菌（2）寄生菌。

腐生菌：以死亡生物或腐敗食物等有機物作為營養(yǎng)物質(zhì)；寄生菌：在活體的生物體內(nèi)寄生，從宿主的有機物中取得營養(yǎng)。大部分病原菌是寄生菌。

營養(yǎng)物質(zhì)進入菌體的方式有：（1）易化擴散（2）主動運轉(zhuǎn)（3）基因移位。細(xì)菌生長繁殖的條件：（1）充足的營養(yǎng)

（2）適宜的溫度：細(xì)菌生長的溫度極限為-7℃～90℃。各類細(xì)菌對溫度的要求不同，可分為嗜冷菌，最適生長溫度為（10℃～20℃）；嗜溫菌（20℃～40℃）；嗜熱菌（56℃～60℃）生長最好。病原菌均為嗜溫菌，最適溫度為人的溫度，即37℃，故實驗室一般采用37℃培養(yǎng)細(xì)菌。

（3）合適的酸堿度：多數(shù)病原菌最適pH為中性或弱堿性（pH7.2～7.6）（4）必須的氣體環(huán)境：根據(jù)細(xì)菌對氧的需要情況，可將其分為三類：

① 專性需氧菌，該類細(xì)菌僅能在有氧條件下生長； ②專性厭氧菌，只能在無氧環(huán)境下生長；

③兼性厭氧菌，大多數(shù)病原菌在有氧及無氧的條件下均能生長，稱之兼性厭氧菌。一般細(xì)菌代謝中都需要CO2，但多數(shù)細(xì)菌自身代謝所產(chǎn)生的CO2即可滿足需要。

有些細(xì)菌，如腦膜炎雙球菌、布魯氏菌，在初次分離時需要較高濃度的CO2（5%～10%）。細(xì)菌以簡單的二分裂方式無性繁殖，其突出的特點為繁殖速度快。

細(xì)菌分裂倍增的必須時間，成為代時，細(xì)菌代時決定于細(xì)菌種類又受環(huán)境條件影響，細(xì)菌代時一般為20′（分）～30′（分）。

細(xì)菌的生化反應(yīng)：吲哚（I）、甲基紅（M）、VP(V)、枸櫞酸鹽（C）四種試驗，常用于鑒定腸道桿菌，合稱之為IMViC。

大腸桿菌呈“++--”，產(chǎn)氣桿菌為“--++”。細(xì)菌通過新陳代謝能合成很多在醫(yī)學(xué)上具有重要意義的代謝產(chǎn)物。

1熱原質(zhì)：熱原質(zhì)即菌體中的脂多糖，大多是G-菌產(chǎn)生的。注入人或動物體內(nèi)能引起發(fā)熱反應(yīng)，故名熱原質(zhì)。熱原質(zhì)耐高熱，高壓蒸汽滅菌121℃20′。

不能使其破壞，除去熱原質(zhì)最好的方法是蒸餾。生物制品或注射液制成后除去熱原質(zhì)比較困難，所以，必須使用無熱原質(zhì)水制備。

2毒素與酶：細(xì)菌可產(chǎn)生內(nèi)、外毒素及侵襲性酶，與細(xì)菌的致病性密切相關(guān)。內(nèi)毒素即G-菌細(xì)胞壁的脂多糖，其毒性成分為脂質(zhì)A。菌體死亡崩解后釋放出來。

外毒素是有G+菌及少數(shù)G-菌在生長代謝過程中釋放至菌體外的蛋白質(zhì)。具有抗原性強、毒性強、作用特異性強的突出特點。

某些細(xì)菌可產(chǎn)生具有侵襲性的酶，能損傷機體組織，促使細(xì)菌的侵襲、擴散，是細(xì)菌重要的致病因素，如鏈球菌的透明質(zhì)酸酶。等

3色素：有些細(xì)菌能產(chǎn)生色素，對細(xì)菌的鑒別有一定意義。細(xì)菌色素有兩類： ① 水溶性色素，能彌（mi）散至培養(yǎng)基或周圍組織。如綠膿桿菌產(chǎn)生的綠膿色素使培養(yǎng)基或膿汁（zhi）呈綠色。

② 脂溶性色素，不溶于水，僅保持在菌落內(nèi)使之呈色而培養(yǎng)基顏色不變，如金黃色葡萄球菌色素。4抗生素：某些微生物代謝過程中可產(chǎn)生一種能抑制或殺死某些其他微生物或癌細(xì)胞的物質(zhì)，稱抗生素。

稱抗生多由放線菌和真菌產(chǎn)生，細(xì)菌僅產(chǎn)生少數(shù)幾種，如多粘菌素、桿菌肽等。

5細(xì)菌素：某些細(xì)菌能產(chǎn)生一種僅作用于有近緣關(guān)系的細(xì)菌的抗菌物質(zhì)，稱細(xì)菌素。細(xì)菌素為蛋白類物質(zhì)，抗菌范圍很窄。

實驗室中細(xì)菌的常規(guī)培養(yǎng)應(yīng)掌握以下幾點（細(xì)菌的人工培養(yǎng)）：（1）選用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基；

（2）必需的氣體環(huán)境，一般需氧及兼性厭氧置空氣中即可，專性厭氧則必須在嚴(yán)格無氧條件中培養(yǎng)。另外少數(shù)細(xì)菌在初次分離培養(yǎng)時，必須額外補充適量比例的CO2，如腦膜炎雙球菌、布魯氏菌等CO2的濃度在（5%～10%）時才生長；（3）溫度一般為37℃；

（4）培養(yǎng)時間多數(shù)為18～24小時，但根據(jù)菌種及培養(yǎng)目的應(yīng)酌情處理，如培養(yǎng)細(xì)菌進行藥敏試驗時，最好選取其對數(shù)生長期，即6～12小時培養(yǎng)較適宜。結(jié)核菌生長緩慢，需延長培養(yǎng)時間數(shù)天至數(shù)周；

（5）為獲取大量細(xì)菌或其代謝產(chǎn)物，可采用連續(xù)培養(yǎng)法。培養(yǎng)過程中不斷通入適當(dāng)氣體、更換培養(yǎng)液并校正pH值以維持細(xì)菌較長的對數(shù)生長狀態(tài)。

噬菌體：噬菌體是侵襲細(xì)菌或其他特殊微生物的病毒，它具有病毒的共同特性，噬菌體多數(shù)呈蝌蚪狀，由頭部和尾部組成，在電子顯微鏡下可見。

噬菌體中心為核酸，有尾噬菌體的核酸為雙股線狀DNA，蛋白質(zhì)組成包繞核酸的頭部外殼和尾部。噬菌體通過吸附、穿入易感細(xì)胞，毒性噬菌體在細(xì)胞內(nèi)經(jīng)生物合成、裝配，最后裂解宿主細(xì)胞，放出大量成熟子代噬菌體，渾濁菌液可變清，固體培養(yǎng)物上出現(xiàn)空斑。

溫和噬菌體感染敏感菌后并不增殖，其基因整合于宿主菌基因組中，這種帶有噬菌體基因組的細(xì)菌即溶原性細(xì)菌。

噬菌體基因可隨細(xì)菌分裂而傳到子代細(xì)菌，在一定條件下，帶噬菌體的溶原狀態(tài)可自發(fā)停止，細(xì)菌被裂解。

噬菌體的種類多，分布廣，幾乎凡是有細(xì)菌的場所，就可能有相應(yīng)噬菌體存在。

噬菌體有嚴(yán)格的宿主特異性，只寄居在易感宿主內(nèi)，故可用于未知細(xì)菌的鑒定和分型。細(xì)菌的突變：生物體表型突然發(fā)生可遺傳的變化，成為突變。突變包括兩類：

（1）基因突變：亦稱點突變，是基因內(nèi)部結(jié)構(gòu)發(fā)生微細(xì)變化，如DNA分子上排列的堿基對的變化。有堿基置換和錯碼兩種類型。

（2）染色體畸(ji)變：是指染色體的一大段發(fā)生了變化，有易位、倒位、重復(fù)或缺失等數(shù)種。

在細(xì)菌中，這些變化常是致死性的，以基因突變較常見。按其發(fā)生原因，分自發(fā)突變和誘發(fā)突變兩類。自發(fā)突變和誘發(fā)突變可能不存有質(zhì)的差別，僅是量的不同。

細(xì)菌的結(jié)構(gòu)：有些細(xì)菌在一定條件下可以發(fā)生轉(zhuǎn)化而進入休眠狀態(tài)，稱為芽孢。

其結(jié)構(gòu)和性狀與其繁殖狀態(tài)有明顯不同；還有的細(xì)菌在環(huán)境因素的用下，還可以形成L型。細(xì)菌細(xì)胞壁的主要成分是肽聚糖，又稱為粘肽、胞壁質(zhì)。肽聚糖原核型生物細(xì)胞的特有成分。肽聚糖（1）是細(xì)胞壁抗胞內(nèi)高滲透壓

（2）保護細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能完整的主體成分

（3）凡能破壞肽聚糖分子結(jié)構(gòu)或抑制其合成的物質(zhì)，都有抑菌或殺菌作用。革蘭氏陽性細(xì)菌的細(xì)胞壁：由肽聚糖及穿插于其內(nèi)磷壁酸組成。其中（1）肽聚糖不僅曾數(shù)多、含量高，占細(xì)胞壁干重50%-80%；

（2）而且質(zhì)地致密，是具有高機械強度的三維空間結(jié)構(gòu)。磷壁酸分為壁磷壁酸和膜磷壁酸兩種。磷壁酸有很強的抗原性，是G+細(xì)菌的重要表面抗原，可用以對細(xì)菌進行血清學(xué)分型。

革蘭氏陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁：依次包括肽聚糖、脂蛋白、外膜、類脂A、多糖等成分。還有胞質(zhì)周圍間隙。

肽聚糖：陰性細(xì)菌的肽聚糖僅1-2層，占細(xì)胞壁干重的10%左右。是疏松薄弱的二維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。

脂蛋白：由蛋白和脂質(zhì)組成，連接于外膜與肽聚糖之間。脂蛋白是陰性細(xì)菌含量最高的蛋白質(zhì)，其功能是穩(wěn)定外膜并將之固定于肽聚糖層。

外膜：外膜是陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁特有成分，約占細(xì)胞壁干重80%。外膜由平行排列的脂質(zhì)雙層構(gòu)成，其內(nèi)鑲嵌以具有不同功能的多種特異性蛋白；外膜還有性菌毛、噬菌體的受體。

脂多糖（LPS）:（稱為內(nèi)毒素）：是細(xì)胞壁外膜伸出于細(xì)胞表面的特殊結(jié)構(gòu)，由類脂A、核心多糖和特異性多糖組成。LPS對動物具有強烈毒性作用。LPS牢固地結(jié)合在細(xì)菌細(xì)胞表面，只在菌體溶解時才釋放，故稱為細(xì)菌內(nèi)毒素。

類脂A：類脂A耐熱，是內(nèi)毒素的主要成分和毒性部位類脂A無種屬特異性，各種細(xì)菌的類脂A都相同，故不同細(xì)菌產(chǎn)生的內(nèi)毒素的毒性作用均相似。

核心多糖：位于類脂A的外層，具有屬特異性，同一屬的細(xì)菌其核心多糖的組成是相同的。特異性多糖：具有抗原性，G?細(xì)菌的菌體抗原（O抗原）

細(xì)胞膜：細(xì)胞膜由平行排列的脂質(zhì)雙層組成，其內(nèi)鑲嵌以多種蛋白和少量多糖； 細(xì)胞膜的主要功能：

（1）物質(zhì)納泄：細(xì)胞膜具有選擇性通透作用，可選擇性地攝取營養(yǎng)物質(zhì)，排出代謝產(chǎn)物。物質(zhì)納泄是細(xì)胞膜的主動運轉(zhuǎn)過程，其中載體蛋白和酶類物質(zhì)起重要作用。

（2）生物合成：細(xì)胞膜上有多種合成酶，是細(xì)菌細(xì)胞生物合成重要場所。肽聚糖、磷壁酸、磷脂、脂多糖、莢膜、鞭毛等多種菌體成分，都是在細(xì)胞膜上合成的。

（3）呼吸作用：細(xì)胞膜上有多種呼吸酶，包括細(xì)胞色素和一些脫氫酶，可以運轉(zhuǎn)電子完成氧化磷酸化，參與細(xì)胞呼吸過程，與能量的產(chǎn)生、貯（zhu）存和利用有密切關(guān)系。

（4）形成中介體：中介體是細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)陷、折疊、卷曲形成的囊狀結(jié)構(gòu)。多見于G+細(xì)菌。

細(xì)胞質(zhì)：是由細(xì)胞膜包裹著的溶膠性物質(zhì)，其基本成分是水、蛋白質(zhì)、核酸、脂類、少量糖和無機鹽等。用光鏡和電鏡觀察細(xì)胞質(zhì)，大小不等的顆粒。

（1）核糖體：核糖體是游離于細(xì)胞質(zhì)中的微小顆粒，當(dāng)mPNA連成多聚核糖體時，就成為蛋白質(zhì)的合成場所。

（2）核質(zhì)：細(xì)菌的遺傳物質(zhì)是由裸露的雙股DNA回旋、盤繞、卷曲而成的松散網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，無組蛋白包饒、無核膜、無核仁，故稱為核質(zhì)或擬核。

核質(zhì)具有細(xì)胞核功能，決定細(xì)菌性狀和遺傳特征。

（3）質(zhì)粒：質(zhì)粒是核質(zhì)之外的雙股環(huán)狀DNA，攜有遺傳信息，控制非細(xì)菌存活所必須的某些特定性質(zhì)，細(xì)菌的質(zhì)粒具有自我復(fù)制、傳給子代、可幾個質(zhì)粒共存于一個菌體、可自然丟失，以及可通過結(jié)合或轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)移至受體菌等特性。

醫(yī)學(xué)上重要的質(zhì)粒有決定細(xì)菌性菌毛的F因子，決定細(xì)菌耐藥性的R因子，決定大腸桿菌產(chǎn)生大腸菌素的col因子等。

（4）胞質(zhì)顆粒：細(xì)胞質(zhì)中的顆粒多為暫時貯存的營養(yǎng)物質(zhì)。較為常見的是異染顆粒多見于白喉桿菌、鼠疫桿菌、結(jié)核桿菌等

白喉桿菌的異染顆粒多在菌體的一端或兩端，故稱為極體，有助于鑒別細(xì)菌。特殊結(jié)構(gòu)：莢膜（粘稠性物質(zhì)）：細(xì)菌的莢膜有多種功能

（1）其中最重要的是抗吞噬作用。莢膜抗吞噬作用是構(gòu)成細(xì)菌毒力的因素之一。（2）莢膜還有抗溶菌酶，抗補體、抗干燥作用

（3）在營養(yǎng)缺乏時莢膜還可作為營養(yǎng)物質(zhì)而被吸收。莢膜具有抗原性，可以鑒別細(xì)菌和進行細(xì)菌分型。

鞭毛是由細(xì)胞質(zhì)伸出的蛋白性絲狀物。一般認(rèn)為鞭毛是細(xì)菌的運動器官，有鞭毛的細(xì)菌能活潑運動；鞭毛具有抗原性，稱“H”抗原。

菌毛許多G-細(xì)菌各別的G+細(xì)菌，細(xì)胞表面有極其纖細(xì)的蛋白性絲狀物，稱為菌毛。菌毛與細(xì)菌的運動無關(guān)，須用電鏡進行觀察。

細(xì)菌的芽孢：某些細(xì)菌在一定條件下變成為圓形或卵圓形的小體，稱為。由于芽孢在細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)形成。故常稱為內(nèi)芽孢。

（1）芽孢攜有成套的核質(zhì)、酶及合成菌體成分的各種機構(gòu)，保存有細(xì)菌的全部生命活性；（2）在適宜條件下可以發(fā)芽而形成新的繁殖體。

因此，芽孢是細(xì)菌適應(yīng)環(huán)境變化的特殊存活形式，亦即細(xì)菌的休眠狀態(tài)。

芽孢本身并不直接引起疾病，擔(dān)當(dāng)其發(fā)芽轉(zhuǎn)化成繁殖后，則可迅速大量繁殖，引起疾病。在人類，有四種常見的嚴(yán)重疾病是由能形成芽孢的細(xì)菌引起。（1）炭疽(ju)桿菌引起炭疽(ju)菌病（2）肉毒桿菌引起肉毒毒素食物中毒（3）氣性壞疽病原菌引起氣性壞疽（4）破傷風(fēng)桿菌引起破傷風(fēng)（常見）。

細(xì)菌L型：細(xì)胞壁有維持細(xì)菌形態(tài)和保護菌體內(nèi)部的重要作用。在某些因素影響下細(xì)菌可以失去細(xì)胞壁，形成細(xì)菌的細(xì)胞壁缺陷型，亦即細(xì)菌L型。

細(xì)菌L型需要高滲透壓培養(yǎng)基培養(yǎng)。細(xì)菌L型兼有多種繁殖方式，能以（1）二分裂方式（2）出芽方式

（3）巨形體釋放顆粒方式進行增殖。L型菌落有三種類型：

（1）L型，呈油煎蛋樣，中心致密，透光性差，周邊透明呈顆粒狀；（2）G型，顆粒狀，整個菌落由透明顆粒組成，無核心部分；（3）F型，呈絲狀，菌落似L型，但周邊為透明性絲狀。

L型以引起慢性和反復(fù)發(fā)作性感染為其致病特點，主要致病物質(zhì)是毒素。

噬菌體：噬菌體是侵襲細(xì)菌或其他特殊微生物的病毒，它具有病毒的共同特性，噬菌體多數(shù)呈蝌蚪狀，由頭部和尾部組成，在電子顯微鏡下可見。

噬菌體中心為核酸，有尾噬菌體的核酸為雙股線狀DNA，蛋白質(zhì)組成包繞核酸的頭部外殼和尾部。噬菌體通過吸附、穿入易感細(xì)胞，毒性噬菌體在細(xì)胞內(nèi)經(jīng)生物合成、裝配，最后裂解宿主細(xì)胞，放出大量成熟子代噬菌體，渾濁菌液可變清，固體培養(yǎng)物上出現(xiàn)空斑。溫和噬菌體感染敏感菌后并不增殖，其基因整合于宿主菌基因組中，這種帶有噬菌體基因組的細(xì)菌即溶原性細(xì)菌。

噬菌體基因可隨細(xì)菌分裂而傳到子代細(xì)菌，在一定條件下，帶噬菌體的溶原狀態(tài)可自發(fā)停止，細(xì)菌被裂解。

噬菌體的種類多，分布廣，幾乎凡是有細(xì)菌的場所，就可能有相應(yīng)噬菌體存在。

噬菌體有嚴(yán)格的宿主特異性，只寄居在易感宿主內(nèi)，故可用于未知細(xì)菌的鑒定和分型。細(xì)菌的突變：生物體表型突然發(fā)生可遺傳的變化，成為突變。突變包括兩類：

（1）基因突變：亦稱點突變，是基因內(nèi)部結(jié)構(gòu)發(fā)生微細(xì)變化，如DNA分子上排列的堿基對的變化。有堿基置換和錯碼兩種類型。

（2）染色體畸(ji)變：是指染色體的一大段發(fā)生了變化，有易位、倒位、重復(fù)或缺失等數(shù)種。

在細(xì)菌中，這些變化常是致死性的，以基因突變較常見。按其發(fā)生原因，分自發(fā)突變和誘發(fā)突變兩類。自發(fā)突變和誘發(fā)突變可能不存有質(zhì)的差別，僅是量的不同。

1、腸桿菌科的共同生物學(xué)特性為直桿狀，革蘭染色陰性，大多數(shù)有菌毛，多數(shù)有鞭毛，以周鞭毛運動，或無鞭毛不能運動(塔特姆菌屬以極毛或側(cè)毛運動)。少數(shù)有莢膜或包膜。

2、腸桿菌的共同抗原為氨基糖聚合物，其菌體抗原(()抗原)為細(xì)胞壁的脂多糖層，鞭毛抗原(H抗原)存在于鞭毛蛋白，H抗原的特異性決定于氨基酸的排列順序和空間結(jié)構(gòu)，不耐熱，60~C 30分鐘被破壞，細(xì)菌失去鞭毛后，運動隨之消失，菌體抗原外露，發(fā)生H—()變異。

3、腸桿菌科細(xì)菌兼性厭氧，有機營養(yǎng)型，兼具呼吸型(氧化型)和發(fā)酵型代謝。不需特殊營養(yǎng)，普通培養(yǎng)基上均能生長。

大多數(shù)種在37℃生長良好，某些種于25℃~30℃生長較好并更具活力。在營養(yǎng)瓊脂平板上形成大而濕潤灰白或黃色的粘液狀菌落，液體培養(yǎng)基中均勻渾濁，有菌 膜。分解葡萄糖和其他糖類產(chǎn)酸，許多種同時產(chǎn)氣。

4、氧化酶陰性（痢疾志賀菌1型和發(fā)光致病桿菌氧化酶陽性其它的腸桿菌科氧化酶陰性）。除痢疾志賀菌1型和發(fā)光致病桿菌以外的其他致病桿菌外，觸酶陽性。

除許多歐文菌、大多數(shù)致病桿菌及肺炎克雷伯菌臭鼻亞種、多源桿菌屬和耶爾森菌屬的某些株外，能還原硝酸鹽（除這5種菌以外腸桿菌科能還原硝酸鹽）。

5、腸桿菌科的關(guān)鍵特征是：

①氧化酶陰性和觸酶陽性(個別除外)； ②硝酸鹽還原(個別除外)和葡萄糖發(fā)酵；

③有動力者為周身鞭毛，而弧菌屬(除麥?zhǔn)匣【彤a(chǎn)氣弧菌外)、氣單胞菌屬和鄰單胞菌屬均為氧化酶陽性和端極單鞭毛或叢毛。

6、鑒定腸桿菌科的基本條件是：

發(fā)酵葡萄糖、氧化酶陰性、還原硝酸鹽。

分離腸道致病菌常用麥康凱瓊脂，其他還可用中國藍(lán)瓊脂、伊紅—美藍(lán)瓊脂、HE瓊脂。

概述 ：（1）霍亂是由霍亂弧菌引起的急性腸道傳染病，以劇烈的無痛性水樣腹瀉為特點，偶有嘔吐，未經(jīng)治療的病例很快出現(xiàn)脫水、酸中毒、循環(huán)衰竭和腎衰。僅有輕刮腹瀉的病例較多見。（2）霍亂主要由01群的古典型和El Tor型以及0139群菌株引起。

（3）01群的霍亂弧菌又稱為凝集弧菌，非01群的霍亂弧菌又稱為不凝集弧菌，一般不引起腹瀉。01群霍亂弧菌依菌體中主要抗原成分A、B、C組分的不同分為不同亞群。各稱為小川型(含A、B抗原)、稻葉型（含A、C抗原）和彥島型(含A、B、C抗原)。

（4）0139群霍亂弧菌是第一個引起大范圍霍亂暴發(fā)流行的非0l群霍亂弧菌，其暴發(fā)最早出現(xiàn)于1992年在東南亞暴發(fā)和流行，并波及東南亞其他國家。0139群的一般生物學(xué)特征與01群El Tor型是比較相似的，有鞭毛，有與01群相同的霍亂毒素基因，兩者0抗原不同（①0139群和01群El To0抗原不同、②有相同的霍亂毒素基因），對0抗原的免疫血清兩者無交叉凝集.0139群霍亂弧菌的一個獨特特點是：有莢膜多糖，而01群菌株沒有。目前應(yīng)用的0139群霍亂弧菌的國際標(biāo)準(zhǔn)株為M045。

霍亂通過受到感染者糞便或嘔吐物污染的食物或水傳播，感染霍亂后的潛伏期一般為l～2天，短至數(shù)小時，長可達(dá)5天。

在高鹽、高糖食品中，霍亂弧菌存活時間短，在堿性條件下要比其他腸道菌更容易存活，對酸類極為敏感，水中的弧菌l00℃煮沸一般短至l～2分鐘后即可被殺死。霍亂弧菌可在河水及底泥中越冬。霍亂弧菌不侵入上皮細(xì)胞，其在人的小腸內(nèi)定居、增殖，并釋放霍亂毒素，從而引起霍亂病癥。霍亂毒素為A、B兩種亞基組成，每個毒素分子的A：B亞基數(shù)量之比為1：5，其中A亞單位又分為A1和A2兩部分，霍亂毒素的毒素酶活性部分在A1亞單位。

近年研究發(fā)現(xiàn)霍亂毒素基因位于溶原噬菌體基因組上，可在產(chǎn)毒與非產(chǎn)毒菌株之間轉(zhuǎn)移，而不像以前認(rèn)為的穩(wěn)定于染色體上。

霍亂毒素通過其B亞單位與人小腸上皮細(xì)胞上的GMl受體結(jié)合，因此用GMl—ELISA（酶聯(lián)免疫吸附實驗）的方法可檢測霍亂毒素的存在。

兔小腸段結(jié)扎試驗也可用來檢測霍亂弧菌是否產(chǎn)生霍亂毒素。霍亂弧菌引起的腸道局部黏膜免疫是霍亂保護性免疫的基礎(chǔ)。

針對菌體產(chǎn)生的抗菌免疫以及針對霍亂毒素的抗毒免疫是對霍亂免疫的因素。2．分離培養(yǎng)與鑒定

自患者新分離出的霍亂弧菌，在顯微鏡下觀察呈逗點狀或弧形，而經(jīng)人工培養(yǎng)傳代后，顯微鏡下觀察呈類似大腸桿菌的桿狀。

對霍亂弧菌有選擇性培養(yǎng)基可應(yīng)用自標(biāo)本中進行霍亂弧菌的選擇培養(yǎng)。

慶大霉素瓊脂、4號瓊脂等培養(yǎng)基可用于霍亂弧菌的選擇性培養(yǎng)，為強選擇性的培養(yǎng)基，堿性瓊脂、堿性膽鹽瓊脂等為弱選擇性培養(yǎng)基。

霍亂弧菌在慶大霉素瓊脂選擇培養(yǎng)基平皿上的菌落形態(tài)為帶灰色、半透明、圓形扁平稍隆起、菌落邊緣濕潤。

在處理標(biāo)本時可先進行增菌處理，增菌培養(yǎng)基一般用堿性蛋白胨水。

對于可疑霍亂感染者，取糞便進行堿胨水增菌時，在37~C培養(yǎng)至少培養(yǎng)6一8小時。

自河水、池塘水等外環(huán)境水中采水樣進行霍亂弧菌分離時，一般采集33．3cm以內(nèi)的表層水，采集的水樣分離霍亂弧菌前，先用lmol/L 的Na0H將水樣pH值調(diào)整到8.4—9.2。在用堿性蛋白胨水增菌6—8小時后，霍亂弧菌主要在培養(yǎng)液的上層增殖最多。堿性蛋白胨水可用作霍亂弧菌的運輸保存培養(yǎng)基。

霍亂弧菌檢驗中的V—P試驗和第Ⅳ組霍亂噬菌體裂解試驗可作為區(qū)分01群古典型與El Tor型菌株的參考指標(biāo)。

對0139群霍亂弧菌，則可用特異的診斷血清。

3．霍亂弧菌的①流行株與②非流行株（噬菌體型為1～6且生物型為a至f的為流行株）在中國利用噬菌體—生物分型方案，可將01群E1 Tor型霍亂弧菌區(qū)分為流行株與非流行株。噬菌體分型方案中共有5個分型噬菌體，命名為VPl、VP2、VP3、VP4和VP5。噬菌體型共有32個型，屬于流行株范疇的噬菌體型為l～6型。

分型方案中的生物分型包括：溶原性測定、對溶原性噬菌體的敏感性、山梨醇發(fā)酵試驗和溶血試驗，根據(jù)不同反應(yīng)結(jié)果將生物型分成從a至l共12個型，其中a至f屬于流行株的范疇。

由此，噬菌體型為1～6且生物型為a至f的為流行株。對于霍亂弧菌兩類菌株(流行株與非流行株)的噬菌體—生物分型試驗，最少可用兩平皿兩試管來完成。區(qū)分流行株與非流行株的溶血試驗中所用的紅細(xì)胞為綿羊紅細(xì)胞。

溶原性測定試驗中用雙層瓊脂法，其中上層半固體瓊脂的濃度為0.7％。

進行山梨醇發(fā)酵實驗時，待檢霍亂弧菌接種pH8．0的山梨醇發(fā)酵管后37℃培養(yǎng)3小時觀察結(jié)果。霍亂弧菌流行株對山梨醇為慢發(fā)酵。

4、生化反應(yīng)：兩個生物型（流行株與非流行株）的霍亂弧菌均能分解 葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、甘露醇、產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。

遲緩發(fā)酵乳糖，不分解阿拉伯糖。

氧化酶、明膠酶試驗和ONA酶試驗均陽性。

能產(chǎn)生靛基質(zhì)，霍亂紅反應(yīng)（即亞硝基靛基質(zhì)試驗）陽性。(二)其他弧菌（腸道菌疾病檢驗—腸道屬）

1．副溶血弧菌檢驗（腸道菌疾病檢驗—腸道屬）

副溶血弧菌是一種嗜鹽性弧菌。常存在于近海岸海水、海產(chǎn)品及鹽漬（zi）食品中。它是我國沿海地區(qū)最常見的食物中毒病原菌。

副溶血弧菌是一種腸道傳染病，主要癥狀有腹痛，腹瀉、脫水、畏寒、嘔吐、發(fā)熱和頭痛，糞便多呈水樣或湖狀，少數(shù)為粘液血便。病程持續(xù)1～7天，一般恢復(fù)較快。病后免疫力不強，可重復(fù)感染。副溶血弧菌已確定有12種不同的0抗原和約60種不同的K抗原。副溶血弧菌所致細(xì)菌性食物中毒的主要污染食品來自于海產(chǎn)晶。副溶血弧菌為一種噬鹽菌，可在含8％NaCl胨水中生長。

副溶血性弧菌食物中毒是由于食入未煮熟的海產(chǎn)品或污染本菌的鹽腌食物而引起。潛伏期1~26小時，一般6~10小時。

大部分致病菌能產(chǎn)生一種特征性的溶血反應(yīng)(稱為神奈川現(xiàn)象)。

致病菌株能產(chǎn)生的耐熱直接溶血素和不耐熱溶血素是副溶血弧菌的主要致病物質(zhì)。檢驗方法：（1）標(biāo)本采集：主要是患者的糞便、可疑食物。

（2）分離培養(yǎng)：首先稱取樣品25g，加225ml 3.5％滅菌鹽水，用均質(zhì)器打碎或用乳缽磨碎，接種氯化鈉瓊脂平板和嗜鹽再菌選擇性瓊脂平板各1個，同時取10ml，加入100 ml增菌液中（40g/LNaCl），放37℃8～16小時培養(yǎng)后，進行平板分離，于37 ℃18—24小時培養(yǎng)后取出觀察。（3）挑取上述可疑菌落，轉(zhuǎn)種3.5％氯化鈉三糖鐵斜面，37℃、24小時觀察結(jié)果。

（4）涂片鏡檢：將三糖鐵培養(yǎng)基反應(yīng)可疑者(底層變黃，葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，斜面不變，乳糖蔗糖不分解，有動力，不產(chǎn)生硫化氫)進行涂片革蘭染色鏡檢形態(tài)。革蘭染色鏡檢形態(tài)。

①形態(tài)染色：革蘭陰性桿菌，隨培養(yǎng)基不同菌體形態(tài)差異較大，有卵圓形、棒狀、球桿狀、梨狀、弧形等多種形態(tài)。兩極濃染。

菌體一端有單鞭毛，運動活潑。無芽孢、無莢膜。

②培養(yǎng)特性：營養(yǎng)要求不高，在普通培養(yǎng)基中加入適量NaCl即能生長。NaCl最適濃度為35g/LNaCl，在無鹽培養(yǎng)基中不生長。

生長所需 PH 7.0～9.5，最適 PH 7.7。需氧，在液體培養(yǎng)基表面形成菌膜。在厭氧環(huán)境下生長較慢。①在35g/LNaCl瓊qiong脂平板上呈蔓延生長，菌落邊緣不整齊，凸起、光滑濕潤，不透明； ②在副溶血弧菌專用選擇培養(yǎng)基上形成1~2.5mm，稍隆起、渾濁、無粘性、綠色菌落； ③在SS平板上不生長或長出1~2mm扁平無色半透明的菌落，不易挑起，挑起時呈粘絲狀。

④在羊血瓊脂平板上，形成2~3mm、圓形、隆起、濕潤、灰白色菌落，某些菌株可形成餿苧蜥溶血 ⑤在TCBS瓊脂（副溶血弧菌專用選擇培養(yǎng)基）上不發(fā)酵蔗糖，菌落綠色。

⑥生化反應(yīng)：所有用于該菌的生化反應(yīng)（副溶血弧菌）培養(yǎng)基需加入30g/LNaCl。本菌（副溶血弧菌）在70g/LNaCl培養(yǎng)基生長，在無鹽或10%NaCl以上培養(yǎng)基不生長。能分解葡萄糖、麥芽糖、甘露醇、淀粉產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，不分解乳糖、蔗糖；靛基質(zhì)，甲基紅試驗陽，V-P、H2S、尿素酶試驗陰性；

神奈川試驗是致病菌株能使人或兔紅細(xì)胞發(fā)生溶血，對馬紅細(xì)胞不溶血，稱神奈川試驗陽性。

（5）、嗜鹽性試驗 將上述可疑培養(yǎng)物分別接種于不同濃度的鹽胨水中，37℃ 24小時培養(yǎng)后觀察生長情況，在無鹽和l0％以上鹽的胨水中不生長，在7％鹽的胨水中生長良好者進行下列有關(guān)試驗。（6）生化試驗（總結(jié)）：分別接種各類生化培養(yǎng)基，放37℃，除V-P、靛基質(zhì)、甲基紅試驗培養(yǎng)48小時后加試劑觀察外，其他均可在24小時觀察。動物試驗

將上述各類反應(yīng)的副溶血性弧菌接種3.5％氯化鈉胨水，經(jīng)37℃16～18小時培養(yǎng)后，小鼠腹腔注射0.3ml，觀察2～3天，將死亡小鼠進行解剖并做分離培養(yǎng)。預(yù)防原則

預(yù)防與其他細(xì)菌性食物中毒相似。如對水產(chǎn)品及鹽漬zi（漬是臟的意思）品等應(yīng)煮熟后食用。可用復(fù)方新若明、慶大霉素、氟哌酸等抗菌藥物治療。

2、擬態(tài)弧菌（腸道菌疾病檢驗—腸道屬）“擬態(tài)弧菌與霍亂弧菌相似——形態(tài)學(xué)、培養(yǎng)特性、抗原結(jié)構(gòu)”是引起胃腸炎和某些腸外感染的病原菌。

該菌形態(tài)學(xué)和培養(yǎng)特性及抗原結(jié)構(gòu)與霍亂弧菌相似，但對01群霍亂弧菌標(biāo)準(zhǔn)診斷血清不凝集，可與霍亂弧菌相鑒別。

另外擬態(tài)弧菌與霍亂弧菌生化特性上最重要的區(qū)別在于擬態(tài)弧菌不發(fā)酵蔗糖（霍亂弧菌發(fā)酵蔗糖）。V-P試驗、酒石酸鹽及對多粘菌素B的耐藥性等也可作為區(qū)別這兩種弧菌（擬態(tài)弧菌和霍亂弧菌）的參考試驗。

3．其他（腸道菌疾病檢驗—腸道屬）①河弧菌 ②霍利斯弧菌

③弗尼斯弧菌等可引起急性胃腸炎

④創(chuàng)傷弧菌可引起重癥創(chuàng)傷性感染和原發(fā)性敗血癥，⑤海魚弧菌可引起創(chuàng)傷性及耳部感染，⑥有跡象表明溶藻弧菌與胃腸炎有關(guān)系，但還需進一步確定。大腸桿菌是人和動物腸道中的正常菌群，一般對人無害。

本菌為革蘭陰性的短桿菌，其抗原結(jié)構(gòu)有3種，即菌體抗原(O抗原)、包膜抗原(K抗原)和鞭毛抗原(H抗原)。

（1）0抗原是血清分型的基礎(chǔ)，目前已發(fā)現(xiàn)有170多種，其中一些特殊的血清型具有病原性，能引起人類腹瀉，故稱為致腹瀉性大腸桿菌，而由其引起之腸炎稱致腹瀉性大腸桿菌腸炎。世界各地廣泛存在本菌感染，嬰兒腹瀉中檢出率較高，在成人中亦可呈散在或暴發(fā)流行。臨床表現(xiàn)為：旅游者腹瀉或食物中毒。新生兒病房及托幼機構(gòu)可引起交叉感染而發(fā)生流行。

根據(jù)發(fā)病機制、臨床表現(xiàn)、流行病學(xué)特征、0抗原血清型及細(xì)菌的毒力測定可將致腹瀉性大腸桿菌分為5類：

①致病性大腸桿菌(EPEC)②腸產(chǎn)毒素性大腸桿菌(ETEC)③侵襲性大腸桿菌(EIEC)④出血性大腸桿菌(EHEC)⑤腸集聚粘附性大腸桿菌(EAggEC)。(一)病原學(xué)

①腸致病性大腸桿菌(EPEC)的主要毒力因子有菌毛、志賀樣毒素(SLTs)和LEE毒力島。②腸產(chǎn)毒性大腸桿菌(ETEC)的主要毒力因子為熱不穩(wěn)定毒素、熱穩(wěn)定毒素及與致病性相關(guān)的定居因子。

③腸侵襲性大腸桿菌(EIEC)在毒力因子和致病機制上與志賀菌基本一致。

④腸出血性大腸桿菌(EHEC)的主要毒力因子有志賀樣毒素(SLTs)、溶血素、LEE毒力島及其他未知的毒力因素。

⑤腸集聚性粘附大腸桿菌(EAggEC)是一類新發(fā)現(xiàn)的致瀉性大腸桿菌，目前已知的毒力因子有菌毛和熱穩(wěn)定腸毒素。(二)臨床表現(xiàn)

ETEC（腸產(chǎn)毒性大腸桿菌）感染的主要臨床癥狀是水樣腹瀉、腹痛、惡心和低熱；日腹瀉可達(dá)8一12次，可持續(xù)4～5天。

EPEC（腸致病性大腸桿菌）的主要臨床癥狀是發(fā)熱、不適、嘔吐、腹瀉，糞便中含有大量粘液而無血，癥狀可持續(xù)2周以上，多引起社區(qū)的小型暴發(fā)。

EIEC（腸侵襲性大腸桿菌）引起的腹瀉在臨床癥狀上與細(xì)菌性痢疾不可區(qū)分，主要是發(fā)熱、腹部劇烈疼痛與不適、毒血癥、水樣腹瀉，糞便中有少量粘液和血。

EHEC（腸出血性大腸桿菌）感染的主要臨床癥狀為突發(fā)腹部痙攣性疼痛、不適、初期水樣便，進而轉(zhuǎn)為鮮血樣糞便、不發(fā)熱或低熱，可伴有上呼吸道癥狀，白細(xì)胞計數(shù)稍高或正常。

EAggEC（腸集聚性粘附大腸桿菌）感染主要與小兒頑固性腹瀉有關(guān)，癥狀可持續(xù)2周或2周以上。(三)診斷標(biāo)準(zhǔn)

1、流行病學(xué)資料 致瀉性大腸桿菌（腸致瀉性大腸埃希菌）引起的腹瀉一年四季均可發(fā)病，夏秋季多發(fā)，有不潔飲食(水)和(或)與腹瀉患者、腹瀉動物、帶菌者接觸史。如為食物源性則常為集體發(fā)病及有共進可疑食物史。

2、臨床表現(xiàn)

腹瀉：大便每日≥3次，糞便的性狀異常，可為稀便、水樣便、粘液便、膿血便，可伴有惡心、嘔吐、食欲不振、發(fā)熱、腹痛及全身不適等。病情嚴(yán)重者會引起脫水、電解質(zhì)紊亂甚至休克。（已除外霍亂、痢疾、傷寒、副傷寒）。

3、實驗室檢查

(1)糞便常規(guī)檢查：糞便可為稀便、水樣便、粘液便、血便或膿血便，鏡檢可見多量紅白細(xì)胞，亦可有少量或無細(xì)胞。

(2)病原學(xué)檢查：糞便中可檢出腸致瀉性大腸桿菌（EPEC）或檢出特異性抗原、核酸或從血清中檢出特異性抗體。

臨床診斷：ETEC（腸產(chǎn)毒性大腸桿菌）感染的主要臨床癥狀是水樣腹瀉、腹痛、惡心和低熱；日腹瀉可達(dá)8一12次，可持續(xù)4～5天。致瀉性大腸桿菌（腸致瀉性大腸埃希菌）引起的腹瀉一年四季均可發(fā)病，夏秋季多發(fā)，有不潔飲食(水)和(或)與腹瀉患者、腹瀉動物、帶菌者接觸史。如為食物源性則常為集體發(fā)病及有共進可疑食物史。病原診斷：臨床診斷腹瀉：大便每日≥3次，糞便的性狀異常，可為稀便、水樣便、粘液便、膿血便，可伴有惡心、嘔吐、食欲不振、發(fā)熱、腹痛及全身不適等。

病情嚴(yán)重者會引起脫水、電解質(zhì)紊亂甚至休克。（已除外霍亂、痢疾、傷寒、副傷寒）。4．鑒別診斷

由腸致病性大腸桿菌（EPEC）引起的腸炎需要與下列疾病進行鑒別診斷： ①痢疾、②沙門菌腸炎、③空腸彎曲菌腸炎、④病毒性腸炎、⑤幼兒急疹等。由腸產(chǎn)毒性大腸桿菌引（ETEC）起的腸炎需要與下列疾病進行鑒別診斷 主要與①霍亂鑒別，其次需要與②病毒性腸炎以及③沙門菌腸炎鑒別。由腸侵襲性大腸桿菌（EIEC）引起的腸炎需要與下列疾病進行鑒別診斷 與細(xì)菌性痢疾非常相似（腸侵襲性大腸桿菌與細(xì)菌性痢疾非常相似），很難鑒別，確定診斷需要有EIEC（腸侵襲性大腸桿菌）血清凝集試驗陽性，同時大便培養(yǎng)所得的大腸桿菌作豚鼠角膜試驗陽性。（總結(jié)：EIEC血清凝集試驗陽性與大便培養(yǎng)所得的大腸桿菌作豚鼠角膜試驗陽性才能診斷）(四)、治療

1．腸致病性大腸桿菌（EPEC）引起的腸炎的治療采取抗菌消炎、控制腹瀉、糾正脫水酸中毒等綜合措施。

(1)飲食療法：基本同輪狀病毒腸炎。目前對腹瀉病兒多主張繼續(xù)喂養(yǎng)，在脫水較重時，可暫不喂養(yǎng)。用靜脈輸液或口服補液療法(()RS)糾正脫水及電解質(zhì)紊亂。待脫水基本糾正，病兒有食欲時即可開始母乳喂養(yǎng)，母乳中IgA對大腸桿菌有一定抑制作用。

人工喂養(yǎng)患兒可用l／2牛奶，或脫脂奶與米湯混合，定時定量喂養(yǎng)，2個月以上嬰兒，每4小時喂1次，夜間可免喂1次。

逐步提高牛奶濃度及增加總量，經(jīng)5天左右恢復(fù)至病前飲食。

病情越重、年齡越小者，腸道功能恢復(fù)越慢，計劃飲食時間需要適當(dāng)延長。

(2)液體療法：按患兒脫水程度，脫水性質(zhì)(多為等滲，少數(shù)為低滲，高滲罕見)及代謝性酸中毒輕重，制定輸液計劃，初6～8小時補充累計損失量，可分批靜脈滴人，等滲脫水的補液，總張力為1／2～2／3張，低滲脫水為2／3張至等張。

有尿后，注意鉀的補充。有佝僂病時可適當(dāng)補鈣。輕、中度脫水，也可采用()RS（口服補液療法）補液。

脫水糾正，繼之以l／3～1／4張的液體補充生理需要。

(3)抗菌藥物：成人輕型病例可不用抗生素。通過調(diào)整腸道正常菌群而白愈。嬰幼兒一般均需用敏感抗生素。既往用新霉素口服治療，療效極佳，現(xiàn)多已產(chǎn)生耐藥。口服慶大霉素或多粘菌素E有一定效果，但遠(yuǎn)不如當(dāng)初的新霉素。

目前臨床上試用①諾氟沙星、②環(huán)丙沙星或③鹽酸黃連素，另加④甲氧芐啶(TMP)等治療；療效有待進一步證實。

(4)對癥治療及支持療法：有人報道用山莨菪堿足三衛(wèi)八位封閉可減少便次。胃蛋白酶、胰酶、鞣酸蛋白、中藥肥兒散等，可促進大便性狀好轉(zhuǎn)并加強消化功能，但尚需臨床實踐證實。對于重癥及營養(yǎng)不良患兒，可少量多次輸血或白蛋白，以改善傘身狀況。

(5)護理：保持肛周皮膚清潔于燥，防止臀紅及肛周膿腫。臀紅外線局部烤干，肛周花粉、鞣酸軟膏等。

2．腸產(chǎn)毒性大腸桿菌（ETEC）引起的腸炎的治療。

ETEC為有自限性傾向的疾病，輕者可不用抗生素治療，重者使用抗生素可縮短病程及排菌時間。主要選用①環(huán)丙沙星或②諾氟沙星，合并用思密達(dá)或鹽酸黃連素。劑量同EPEC（腸致病性大腸桿菌）腸炎的治療。

本病治療重點是糾上脫水、酸中毒和低血鉀癥。輕癥可用0RS液（口服補液療法），重者需要靜脈補液．首選“5：4：1”液，即每1000ml液體加氯化鈉5g、碳酸氫鈉4g、氯化鉀1g。

3、腸侵襲性大腸桿菌（EIEC）引起的腸炎的治療，同細(xì)菌性痢疾的治療，重癥者應(yīng)用抗生素。

4、腸出血性大腸桿菌（EHEC）引起的腸炎的治療，是否應(yīng)該使用抗菌藥，學(xué)術(shù)上尚無定論。有學(xué)者提出，抗菌藥對本病不能縮短病程，不能減少并發(fā)癥的發(fā)生，甚至有可能促進釋放Vero毒素，導(dǎo)致合并溶血性尿毒癥綜合征(HUS)的發(fā)生，因此提出要避免使用抗牛素。

但也有學(xué)者提出，原則上可按其他感染性腹瀉來處理。重癥應(yīng)使用抗生素，如①環(huán)丙沙星、②鹽酸黃連素等；

輕癥，可采用腸黏膜保護劑①思密達(dá)或②微生態(tài)凋節(jié)劑。同時，注意，糾正脫水，加強支持療法。合并溶血性尿毒癥綜合征(HUS)者，按HUS（溶血性尿毒癥綜合征）搶救。HUS的治療：

(1)治療腎衰：按急性腎衰處理，保證足夠熱量，嚴(yán)格限制人量，每日液體總量為前一天的丟失量加300—500mi，兒童加400ml／m2體表面積。必要時血液透析。無尿24小時以內(nèi)者。透析效果好。(2)輸血：血紅蛋白50g/L以下者靜脈輸新鮮紅細(xì)胞，以次2.5～5ml/kg每6～12小時1次，維持血紅蛋白在7()～80g/L。必要時輸血小板。

(3)其他：肝素與激素的應(yīng)用，學(xué)術(shù)上有不同看法，應(yīng)慎用。

5．腸集聚粘附性大腸桿菌（EaggEC）引起的腸炎的治療，同腸致病性大腸桿菌（EPEC）引起的腸炎的治療。

(五)監(jiān)測：感染性腹瀉屬于中國丙類傳染病，在各省沒有監(jiān)測點，負(fù)責(zé)對包括腸致瀉性大腸桿菌性腹瀉在內(nèi)的感染性腹瀉的監(jiān)測工作。

腸致瀉性大腸桿菌（EPEC）的監(jiān)測工作主要是對腹瀉患者、重點人群、食品、糞便、蒼蠅等進行監(jiān)測。在監(jiān)測點內(nèi)對改水、糞管等措施的落實情況及其他防疫措施作出科學(xué)評價。(六)控制措施 1．預(yù)防措施

(1)健康教育：利用多種形式深入開展健康教育，宣傳講究衛(wèi)生，減少疾病發(fā)生。(2)預(yù)防接種：目前尚沒有成熟的、可供大范圍使用的疫苗。

(3)預(yù)防原則：應(yīng)以改善公共衛(wèi)生條件、切斷傳播途徑為主，同時加強對傳染源的管理，采取綜合性預(yù)防措施，對重點人群、集體單位應(yīng)特別注意預(yù)防暴發(fā)和流行。

2．患者、接觸者及其直接接觸環(huán)境的管理，發(fā)現(xiàn)患者及時報告；立即隔離及治療患者；采樣做病原學(xué)或血清學(xué)檢查，盡快查明病原；

對患者的嘔吐物、排泄物隨時消毒；對患者直接接觸的環(huán)境進行消毒；對接觸者進行管理，必要時給予預(yù)防服藥。

3、流行期措施：流行期應(yīng)采取緊急措施，加大宣傳教育的力度和范圍。

醫(yī)療機構(gòu)做到早診斷，早報告。對患者做好隔離、消毒知識的宣傳，落實各項消毒措施，防止交叉感染。

加強衛(wèi)生監(jiān)督，管好食品和集市貿(mào)易，進行飲水消毒。對暴發(fā)疫情應(yīng)立即作出疫情報告，衛(wèi)生防疫部門應(yīng)盡快查明暴發(fā)原因，采取果斷措施切斷傳播途徑，防止疫情蔓延。

一、增 菌

樣品采集后應(yīng)盡快檢驗。除了易腐食品在檢驗之前應(yīng)預(yù)冷藏外，一般不冷藏。

以無菌手續(xù)稱取檢樣25g，加在225ml營養(yǎng)肉湯中，以均質(zhì)器打碎1分鐘或用乳缽加滅菌砂磨碎。取出適量，接種乳糖膽鹽培養(yǎng)基（測大腸菌群的培養(yǎng)基），以測定大腸菌群MPN，其余的移人500ml廣口瓶內(nèi)，于36℃土1℃培養(yǎng)6小時。

挑取l環(huán)，接種于1管30ml腸道菌增菌肉湯內(nèi)，于42℃培養(yǎng)18小時。

二、分 離

將乳糖發(fā)酵陽性的乳糖膽鹽發(fā)酵管和增菌液分別劃線接種麥康凱或伊紅美藍(lán)瓊脂平板；

污染嚴(yán)重的檢樣，可將檢樣勻液直接劃線接種麥康凱或伊紅美藍(lán)平板，于36℃±1℃培養(yǎng)18～24小時，觀察菌落。

不但要注意乳糖發(fā)酵的菌落，同時也要注意乳糖不發(fā)酵和遲緩發(fā)酵的菌落。

三、生化試驗

1、自鑒別平板上直接挑取數(shù)個菌落分別接種三糖鐵瓊脂(TSI)或克氏雙糖鐵瓊脂(KI)。

同時將這些培養(yǎng)物分別接種蛋白胨水、半固體、pH7．2尿素瓊脂、KCN肉湯和賴氨酸脫羧酶試驗培養(yǎng)基。以上培養(yǎng)物均在36℃培養(yǎng)過夜。2．TSI（三糖鐵瓊脂）斜面產(chǎn)酸或不產(chǎn)酸，底層產(chǎn)酸，H2S陰性，KCN陰性和尿素陰性的培養(yǎng)物為大腸埃希菌。

TSI（三糖鐵瓊脂）底層不產(chǎn)酸，或H2S、KCN、尿素有任意一項為陽性的培養(yǎng)物，均非大腸埃希菌。必要時做氧化酶試驗和革蘭染色。

四、血清學(xué)試驗

1、假定試驗 挑取經(jīng)生化試驗證實為大腸埃希菌的瓊脂培養(yǎng)物，用①致病性大腸埃希菌、②侵襲性大腸埃希菌和③產(chǎn)腸毒素大腸埃希菌多價O血清和④出血性大腸埃希菌O157血清做玻片凝集試驗。

當(dāng)與某一種多價O血清凝集時，再與該多價血清所包含的單價O血清作試驗。如與某一個單價O血清呈現(xiàn)強凝集反應(yīng)，即為假定試驗陽性。

2、證實試驗 制備O抗原懸液，稀釋至與Mac Farland3號比濁管相當(dāng)?shù)臐舛取Ｔr為1：160～1：320的O血清，用0.5％鹽水稀釋至1：40。稀釋血清與抗 原懸液在10mm×75mm試管內(nèi)等量混合，作單管凝集試驗。

混勻后放于50℃水浴箱內(nèi)，經(jīng)16小時后觀察結(jié)果。如出現(xiàn)凝集，可證實為該O抗原。(一)病原學(xué)：

沙門菌屬是一大群寄生于人類和動物腸道中，生化反應(yīng)和抗原構(gòu)造相似的革蘭陰性桿菌。目前至少有67種O抗原和2000個以上的血清型，但對人致病的僅少數(shù)，如引起①腸熱癥的傷寒、②副傷寒甲和③乙沙門菌，以這類菌的感染最多見（①腸熱癥的傷寒、②副傷寒甲和③乙沙門菌）

其他對動物致病，有些菌種偶兒可傳染給人，引起食物中毒或敗血癥，如①鼠傷寒沙門菌（最常見）、②腸炎沙門菌、③鴨沙門菌、④豬沙門菌等，其中以鼠傷寒沙門菌最常見。

沙門菌屬除雞沙門菌和雛沙門菌，都有周身鞭毛。一般無莢膜。營養(yǎng)要求不高，在普通平板上形成中等大小、五色半透明的S型菌落。

沙門菌屬不發(fā)酵乳糖或蔗糖。大多產(chǎn)生硫化氫。對葡萄糖、麥芽糖和甘露醇發(fā)酵，除傷寒沙門菌產(chǎn)酸不產(chǎn)氣外，其他沙門菌均產(chǎn)酸產(chǎn)氣。

傷寒沙門菌(一十一一)、甲型副傷寒沙門菌(一十一一)、乙型副傷寒沙門菌(一十一V)和鼠傷寒沙門菌(一十一V)的IMViC(吲哚形成、甲基紅反應(yīng)、VP反應(yīng)和枸櫞酸鹽利用試驗)的結(jié)果分別為一十一一、一十一一、一十一V、一+一V。沙門菌的生化檢驗主要用于菌屬鑒別。

傷寒沙門菌與大腸埃希菌在糖發(fā)酵方面的主要差別之一在于傷寒沙門菌不分解乳糖。(大腸埃希菌分解乳糖)對沙門菌的選擇分離培養(yǎng)可用SS瓊脂，在SS瓊脂上其菌落呈現(xiàn)微黃色或無色。在發(fā)病早期(一般l周內(nèi))可從血液中分離到該菌，且此時從血液中的分離率最高；

l周后可從糞便或尿中分離到，發(fā)病第3周時采取糞便標(biāo)本進行病原分離率最高；骨髓培養(yǎng)是細(xì)菌學(xué)確診的最好方法，在發(fā)病第1周時也較高，檢出率可達(dá)到90％以上。膽汁標(biāo)本也可以進行分離。

沙門菌屬抗原非常復(fù)雜，其分類也很復(fù)雜。完整的血清學(xué)分類僅包括具有分類診斷意義的3類抗原：即O抗原、H抗原和K抗原，另外K抗原又有兩種，即Vi抗原和M抗原（Vi抗原和M抗原屬于K抗原）。O抗原系耐熱性菌體抗原，由多糖—磷脂復(fù)合物組成； H抗原系不耐熱抗原，存在于鞭毛中，由鞭毛素組成；

K抗原存在于莢膜或被膜中，其中Vi抗原是覆蓋在細(xì)菌細(xì)胞壁LPS（脂多糖）外的莢膜多糖抗原。傷寒沙門菌和丙型副傷寒沙門菌具有Vi抗原。

O抗原由多個成分組成，引起人類疾病的沙門菌大多數(shù)屬A—E組，O抗原刺激機體產(chǎn)生IgM類抗體。H抗原分第1相和第2相，第l相特異性高，第2相特異性低，每組內(nèi)根據(jù)H抗原不同可再分為種或型，H抗原主要刺激機體產(chǎn)生IgG類抗體。傷寒沙門菌、丙型副傷寒沙門菌等少數(shù)菌新從患者標(biāo)本中分離時有Vi抗原，存在于菌表面，可阻止O抗原與相應(yīng)抗體的凝集反應(yīng)，抗原性弱，刺激機體產(chǎn)生的抗體效價低，當(dāng)體內(nèi)有菌存在時有一定量抗體，細(xì)菌清除后，抗體隨之消失，故測定（Vi抗原屬于K抗原分類）有助于檢出傷寒帶菌者。

同一種或同一血清型的沙門菌，有時可用噬菌體進一步分為若干噬菌體型，在流行病學(xué)上可用于追蹤傳染源和調(diào)查傳播途徑。

沙門菌的抗原有時發(fā)生變異，這對菌型診斷及在制備菌苗上有重要意義，變異的類型包括○1H—O、○2S-R、○3V-W變異和位相變異。

肥達(dá)試驗為用已知的傷寒沙門菌O、H和甲、乙型副傷寒沙門菌H抗原與不同稀釋度的待檢血清作定量凝集試驗，根據(jù)抗體的含量和動態(tài)變化

以輔助臨床診斷傷寒病原菌的一種血清學(xué)試驗。在病起的第2周，血清中抗體就可有較明顯增多，恢復(fù)期達(dá)到高峰。

一般O凝集價≥l：80，H凝集價≥l：160時才有診斷價值，有時單次效價增高不能定論，病程中應(yīng)逐周復(fù)查，若效價依次遞增或恢復(fù)期效價增加≥4才有意義。IgM類O抗體出現(xiàn)較早，持續(xù)約半年，消失后不易受傷寒等病原菌的非特異性抗原刺激而重新出現(xiàn)。IgG類H抗體出現(xiàn)較晚，維持時間長達(dá)數(shù)年，消失后易受非特異性抗原刺激而能短暫重現(xiàn)。因此若O、H凝集效價均超過正常值，則傷寒或副傷寒感染的可能性大；如兩者均低，則患傷寒的可能性甚小；若O不高H高，有可能是預(yù)防接種或是非特異性回憶反應(yīng)；如O高H不高，則可能是感染早期或與傷寒沙門菌O抗原有交叉反應(yīng)的其他沙門菌(如腸炎沙門菌)。少數(shù)病例，在整個病程中，肥達(dá)試驗始終在正常范圍內(nèi)，可能是早期使用大量抗生素，或患者免疫功能低下等因素。(二)流行病學(xué)

人是傷寒副傷寒的貯主，少數(shù)情況下，家畜家禽也可能是副傷寒的貯主。該病潛伏期一般為1—3周，由患者、帶菌者的糞便或尿污染食物和水而傳播。傳播因素還包括生活用品、蒼蠅等，還可經(jīng)接觸動物傳播。

未感染過或未接種過菌苗的人或動物均易感，傷寒沙門菌為胞內(nèi)寄生菌，病愈后有較牢固免疫力。(三)臨床表現(xiàn)

1、傷寒和副傷寒沙門菌：由傷寒沙門菌，副傷寒甲、乙、丙沙門菌引起。前驅(qū)期癥狀有 發(fā)熱、不適、全身疼痛等。

主要臨床表現(xiàn)為持續(xù)高熱，出現(xiàn)相對緩脈，肝脾腫大，全身中毒癥狀顯著，皮膚出現(xiàn)玫瑰疹，外周血白細(xì)胞明顯下降。嚴(yán)重的有出血或腸穿孔并發(fā)癥。腎中的細(xì)菌可隨尿排出。以上病變在疾病的第2～3周出現(xiàn)。若無并發(fā)癥，自第2周以后病情開始好轉(zhuǎn)。

2、炎型(食物中毒)沙門菌：是最常見的沙門菌感染，由攝人大量鼠傷寒沙門菌、豬霍亂沙門菌、腸炎沙門菌等污染的食物引起。

潛伏期6—24小時。主要癥狀為發(fā)熱、惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉，一般在3～5天內(nèi)較快恢復(fù)。偶爾低熱持續(xù)，腹瀉不停，可長達(dá)10一14天。病后很少有慢性帶菌者。常為集體性食物中毒。

3、敗血癥沙門菌：多見于兒童或免疫力低下的成人。病菌以豬霍亂沙門菌、丙型副傷寒沙門菌、鼠傷寒沙門菌、腸炎沙門菌等常見。

癥狀嚴(yán)重，有高熱、寒戰(zhàn)、厭食和貧血等。腸道中的病菌人血，轉(zhuǎn)移至多個組織、器官導(dǎo)致感染，例如腦膜炎、骨髓炎、膽囊炎、心內(nèi)膜炎等，但胃腸炎很少見。(四)預(yù)防

應(yīng)切實采取以切斷傳播途徑為主導(dǎo)的綜合性措施，開展群眾性健康教育，認(rèn)真開展以“三管一滅??(管水、管食物、管糞便和消滅蒼蠅)為中心的群眾性衛(wèi)生活動，防止水源和食品污染。對傷寒的預(yù)防，疫苗的接種也是措施之一。目前我國普遍使用的（傷寒疫苗的接種）傷寒疫苗為Vi疫苗。

（五）實驗室：沙門菌檢驗

1、前增菌和增菌

凍肉、蛋品、乳品及其他加工食品均應(yīng)經(jīng)過前增菌。鮮肉、鮮蛋、鮮乳或其他未經(jīng)加工的食品不必經(jīng)過前增菌。

2、分離

取增菌液1環(huán)，劃線接種于一個亞硫酸鉍瓊脂平板和一個DHL瓊脂平板(或HE瓊脂平板、WS或LS瓊脂平板)。兩種增菌液可同時劃線接種在同一個平板上。于36℃±1分別培養(yǎng)18～24小時(DHL、HE、WS、SS)或40—48小時(BS)，觀察各個平板上生長的菌落特征。

3、生化試驗

（1）．自選擇性瓊脂平板上直接挑取數(shù)個可疑菌落，分別接種三糖鐵瓊脂。在三糖鐵瓊脂內(nèi)，腸桿菌科常見屬種的反應(yīng)結(jié)果不同。

在三糖鐵瓊脂內(nèi)只有斜面產(chǎn)酸并同時硫化氫(H2S)陰性的菌株可以排除，其他的反應(yīng)結(jié)果均有沙門菌的可能，同時也均有不是沙門菌的可能。（2）、在接種三糖鐵瓊脂的同時，再接種蛋白胨水(供作靛基質(zhì)試驗)、尿素瓊脂(pH7.2)、氰化鉀(KCN)培養(yǎng)基和賴氨酸脫羧酶試驗培養(yǎng)基及對照培養(yǎng)基各1管，于361℃±1培養(yǎng)18～24小時，必要時可延長至48小時，按表7—3判定結(jié)果。（看結(jié)果在后面）

4、血清學(xué)分型鑒定（1）抗原的準(zhǔn)備

一般采用1.5％瓊脂斜面培養(yǎng)物作為玻片凝集試驗用的抗原。

O血清不凝集時，將菌株接種在瓊脂量較高的(如2.5％～3％)培養(yǎng)基上再檢查；如果是由于Vi抗原的存在而阻止了O凝集反應(yīng)時，可挑取菌苔于1ml生理鹽水中做成濃菌液，于酒精燈火焰上煮沸后再檢查。H抗原發(fā)育不良時，將菌株種在0.7％～8％半固體瓊脂平板的中央，俟菌落蔓延生長時，在其邊緣部分取菌檢查；

或?qū)⒕晖ㄟ^裝有0.3％～0.4％半固體瓊脂的小玻管l一2次，自遠(yuǎn)端取菌培養(yǎng)后再檢查。（2）O抗原的鑒定

用A—F多價O血清做玻片凝集試驗，同時用生理鹽水做對照。在生理鹽水中自凝者為粗糙形菌株，不能分型。

被A—F多價O血清凝集者，依次是O4；O3、10；O7；O8；O9；O2 和O11因子血清做凝集試驗。根據(jù)試驗結(jié)果，判定O群。

被O3、10血清凝集的菌株，再用O10、O15、O34、O19單因子血清做凝集試驗，判定E1、E2、E3、E4各亞群，每一個O抗原成分的最后確定均應(yīng)根據(jù)O單因子血清的檢查結(jié)果，沒有O單因子血清的要用兩個O復(fù)合因子血清進行核對。

不被A～F多價O血清凝集者，先用57種或163種沙門菌因子血清中的9種多價O血清檢查，如有其中一種血清凝集，則用這種血清所包括的O群血清逐一檢查，以確定O群。（3）H抗原的鑒定

屬于A～F各O群的常見菌型，依次用H因子血清檢查第1相和第2相的H抗原。

不常見的菌型，先用163種沙門菌因子血清中的8種多價H血清檢查，如有其中一種或兩種血清凝集，則再用這一種或兩種血清所包括的各種H因子血清逐一檢查，以確定第l相和第2相的H抗原。

每一個H抗原成分的最后確定均應(yīng)根據(jù)H單因子血清的檢查結(jié)果，沒有H單因子血清的要用兩個H復(fù)合因子血清進行核對。

檢出第1相H抗原而末檢出第2相H抗原的或檢出第2相H抗原而未檢出第1相H抗原的，可在瓊脂斜面上移種1～2代后再檢查。如仍只檢出一個相的H抗原，要用位相變異的方法檢查其另一個相。單相菌不必作位相變異檢查。

位相變異試驗方法如下：(1)小玻管法：將半固體管(每管約1～2m1)在酒精燈上溶化并冷至50℃，取已知相的H因子血清0.05～0.1ml，加入溶化的半固體內(nèi)，混勻后，用毛細(xì)吸管吸取分裝于供位相變異試驗的小玻管內(nèi)，俟凝固后，用接種針挑取待檢菌，接種于一端。將小玻管平放在平皿內(nèi)，并在其旁放一團濕棉花，以防瓊脂中水分蒸發(fā)而于縮，每天檢查結(jié)果，待另一相細(xì)菌解離后，可以從另一端挑取細(xì)菌進行檢查。培養(yǎng)基內(nèi)血清的濃度應(yīng)有適當(dāng)?shù)谋壤^高時細(xì)菌不能生長，過低時同一相細(xì)菌的動力不能抑制。一般按原血清l：200～1：800的量加入。

(2)小倒管法：將兩端開口的小玻管(下端開口要留一個缺口，不要平齊)放在半固體管內(nèi)，小玻管的上端應(yīng)高出于培養(yǎng)基的表面，滅菌后備用。

臨用時在酒精燈上加熱溶化，冷至50℃，挑取因子血清1環(huán)，加入小套管中的半固體內(nèi)，略加攪動，使其混勻；

俟凝固后，將待檢菌株接種于小套管中的半固體表層內(nèi)，每天檢查結(jié)果，待另一相細(xì)菌解離后，可從套管外的半固體表面取菌檢查，或轉(zhuǎn)種1％軟瓊脂斜面，于37℃培養(yǎng)后再做凝集試驗。

簡易平板法：將0.7％～0.8％半固體瓊脂平板烘干表面水分，挑取因子血清l環(huán)，滴在半因體平板表面，放置片刻，待血清吸收到瓊脂內(nèi)，在血清部位的中央點種待檢菌株，培養(yǎng)后，在形成蔓延生長的菌苔邊緣取菌檢查。

(4)、Vi抗原的鑒定：用Vi因子血清檢查。已知具有Vi抗原的菌型有：①傷寒沙門菌，②丙型副傷寒沙門菌，③都柏林沙門菌。

5、菌型的判定和結(jié)果報告：綜合上述生化試驗和血清學(xué)分型鑒定的結(jié)果，按照常用沙門菌抗原表或有關(guān)沙門菌屬抗原表判定菌型，并報告結(jié)果。(一)病原學(xué)

志賀菌為腸桿菌科志賀菌屬，革蘭陰性，需氧，無鞭毛、不能運動，引起細(xì)菌性痢疾。

根據(jù)抗原結(jié)構(gòu)的不同，分為A、B、C、D四群，其中A群為痢疾志賀菌，B群為福氏志賀菌，C群為鮑氏志賀菌，D群為宋內(nèi)志賀菌。

志賀菌的主要毒力因素包括：○1其表面結(jié)構(gòu)脂多糖、○2細(xì)菌侵襲性以及○3分泌的志賀毒素。

志賀毒素由A和B亞單位組成，A亞單位是毒素的活性部位，能抑制蛋白合成。

志賀菌A群Ⅰ型產(chǎn)生的志賀毒素具有○1神經(jīng)毒、○2細(xì)胞毒和○3腸毒性。目前已知各群志賀菌的侵襲相關(guān)基因都位于質(zhì)粒上。

志賀菌在普通瓊脂平板上生長形成中等大小、半透明的光滑型菌落(D群的宋內(nèi)志賀菌：培養(yǎng)中常出現(xiàn)扁平的粗糙型菌落)。

其O抗原為群特異性抗原，K抗原為型特異型抗原，分解葡萄糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，不分解乳糖。

（總結(jié) 志賀菌：革蘭陰性，需氧，無鞭毛、不能運動、分解葡萄糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，不分解乳糖，在普通瓊脂平板上生長形成中等大小、半透明的光滑型菌落，D群的宋內(nèi)志賀菌：培養(yǎng)中常出現(xiàn)扁平的粗糙型菌落）(二)流行病學(xué)

志賀菌菌型較多，菌群分布隨國家、地區(qū)、年份的不同而有不同，基本上發(fā)展中國家以A、B、C群多見，而發(fā)達(dá)國家以D群感染為主。

目前在我國以B群福氏志賀菌為多，其次是D群。患者和帶菌者是傳染源，病菌隨患者或帶菌者糞便排出，通過污染食物、水、生活接觸或借蒼蠅傳播等，使易感的接觸者發(fā)病。

人對志賀菌較易感，10～200個細(xì)菌就可使10％～50％志愿者致病。志賀菌痢疾（A群為痢疾志賀菌）在中國全年均有發(fā)生，以夏秋兩季多見。

志賀菌感染的一些特點包括：（A群）痢疾志賀菌感染患者病情較重，（D群的）宋內(nèi)志賀菌多引起輕型感染，（B群）福氏志賀菌感染易轉(zhuǎn)變?yōu)槁裕患毙灾卸拘跃∫孕憾嘁姡桓腥竞竺庖咂诙獭?三)病原分離

取新鮮糞便粘液或膿血部分接種于SS瓊脂選擇培養(yǎng)基上，并按常規(guī)鑒定菌群與菌型。注意在三糖鐵培養(yǎng)基上，痢疾志賀菌與傷寒沙門菌的表現(xiàn)相似。需要增菌時，如自可疑食品中進行分離，可先用GN增菌液增菌，提高檢出率。(四)診斷標(biāo)準(zhǔn)

細(xì)菌性痢疾的（志賀菌）診斷原則為依據(jù)流行病學(xué)史、癥狀、體征及實驗室檢查進行綜合診斷，確診則需依賴于病原學(xué)檢查。

志賀菌根據(jù)癥狀體征可診斷為○1急性非典型菌痢、○2急性典型菌痢、○3急性中毒型菌痢和○4慢性菌痢。

志賀菌感染病程在2個月以上屬慢性。(五)防治原則

1．預(yù)防：應(yīng)以切斷傳播途徑為主，同時加強對傳染源管理的綜合性防治措施。對重點人群、集體單位應(yīng)特別注意預(yù)防暴發(fā)或流行。

2．治療：一般對癥治療中注意進易消化飲食，注意水電解質(zhì)平衡，可給口服補液鹽(ORS)，必要時ORS（口服補液鹽）和靜脈輸液同時應(yīng)用。

病原治療中，細(xì)菌性痢疾可以是自限性的，一般情況下可以不使用抗生素。對癥狀比較嚴(yán)重的患者，抗生素治療可縮短病程、減輕病情和縮短排菌期。

對休克型菌痢進行抗感染、抗休克處理。對腦型菌痢需抗感染、防治腦水腫和呼吸衰竭。

（六）實驗室志賀菌檢驗

1、增菌

稱取檢樣25g，加入裝有225mLGN增菌液的500ml廣口瓶內(nèi)，固體食品用均質(zhì)器以8000～10000轉(zhuǎn)／分打碎1分鐘，或用乳缽加滅菌砂磨碎，粉狀食品用金屬匙或玻璃棒研磨使其乳化，于36℃培養(yǎng)6～8小時。培養(yǎng)時間視細(xì)菌生長情況而定，當(dāng)培養(yǎng)液出現(xiàn)輕微混濁時即應(yīng)中止培養(yǎng)。

2、分離和初步生化試驗

（1）、取增菌液1環(huán)，劃線接種于HE瓊脂平板或SS瓊脂平板1個；另取l環(huán)劃線接種子麥康凱瓊脂平板或伊紅美藍(lán)瓊脂平板1個，于36℃培養(yǎng)18～24小時，志賀菌在這些培養(yǎng)基上呈現(xiàn)無色透明不發(fā)酵乳糖的菌落。

（總結(jié)：志賀菌在HE瓊脂平板或SS瓊脂平板：麥康凱瓊脂平板或伊紅美藍(lán)瓊脂平板（志賀菌）在這些培養(yǎng)基上呈現(xiàn)無色透明不發(fā)酵乳糖的菌落）。

（2）、挑取平板上的可疑菌落，接種三糖鐵瓊脂和葡萄糖半固體各1管。一般應(yīng)多挑幾個菌落，以防遺漏，經(jīng)36℃培養(yǎng)18～24小時，分別觀察結(jié)果。（3）、下述培養(yǎng)物可以棄去。

①在三糖鐵瓊脂斜面上呈蔓延生長的培養(yǎng)物。

②在18～24小時內(nèi)發(fā)酵乳糖、蔗糖的培養(yǎng)物。（因為志賀菌不發(fā)酵乳糖、蔗糖的培養(yǎng)物）

③不分解葡萄糖和只生長在半固體表面的培養(yǎng)物。（因為志賀菌分解葡萄糖和不能只生長在半固體表面的培養(yǎng)物）

④產(chǎn)氣的培養(yǎng)物。（因為志賀菌產(chǎn)酸不產(chǎn)氣）

⑤有動力的培養(yǎng)物。（因為志賀菌無鞭毛、不能運動所以無動力的培養(yǎng)物）⑥產(chǎn)生硫化氫的培養(yǎng)物。（因為志賀菌不產(chǎn)生硫化氫的培養(yǎng)物）

（4）凡是乳糖、蔗糖不發(fā)酵，葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣(福氏志賀菌6型可產(chǎn)生少量氣體)，無動力的菌株，可做血清學(xué)分型和進一步的生化試驗。

3、血清學(xué)分型和進一步的生化試驗（1）、血清學(xué)分型 挑取三糖鐵瓊脂上的培養(yǎng)物，做玻片凝集試驗。先用4種志賀菌多價血清檢查，如果由于K抗原的存在而不出現(xiàn)凝集，應(yīng)將菌液煮沸后再檢查；如果呈現(xiàn)凝集，則用A1、A2、B群多價和D群血清分別試驗。如系B群福氏志賀菌，則用群和型因子血清分別檢查。可先用群因子血清檢查，再根據(jù)群因子血清出現(xiàn)凝集的結(jié)果，依次選用型因子血清檢查。

4、種志賀菌多價血清不凝集的菌株，可用鮑氏多價1、2、3分別檢查，并進一步用1～15各型因子血清檢查。

如果鮑氏多價血清不凝集，可用痢疾志賀菌3～12型多價血清及各型因子血清檢查。（2）進一步的生化試驗

在作血清學(xué)分型的同時，應(yīng)作進一步的生化試驗，即：○1葡萄糖銨，○2西蒙檸檬酸鹽，○3賴氨酸和○4鳥氨酸脫羧酶，○5pH7.2尿素，○6KCN生長，以及○7水楊苷的分解。除宋內(nèi)菌和鮑氏13型為鳥氨酸陽性外，志賀菌屬的培養(yǎng)物均為陰性結(jié)果。必要時還應(yīng)做革蘭染色檢查和氧化酶試驗，應(yīng)為氧化酶陰性的革蘭陰性桿菌。生化反應(yīng)不符合的菌株，即使能與某種志賀菌分型血清發(fā)生凝集，仍不得判定為志賀菌屬的培養(yǎng)物。

已判定志賀菌屬的培養(yǎng)物，應(yīng)進一步作5％乳糖發(fā)酵，甘露醇、棉子糖和甘油的發(fā)酵和靛基質(zhì)試驗。志賀菌屬4個生化群的培養(yǎng)物，應(yīng)符合該群的生化特性。但福氏6型的生化特性與A群或C群相似。

3、結(jié)果報告：綜合生化和血清學(xué)的試驗結(jié)果判定菌型并作出報告。一)病原學(xué)

小腸結(jié)腸炎耶爾森菌病，是由小腸結(jié)腸炎耶爾森菌感染引起的，與鼠疫耶爾森菌和假結(jié)核耶爾森菌構(gòu)成了這個屬的3個主要致病種（小腸結(jié)腸炎耶爾森菌病、鼠疫耶爾森菌、假結(jié)核耶爾森菌），為革蘭陰性小桿菌，對營養(yǎng)要求不嚴(yán)格，在0℃～42℃時均可生長，是腸道致病菌中能在4℃生長的少數(shù)細(xì)菌之一（小腸結(jié)腸炎耶爾森菌病、鼠疫耶爾森菌、假結(jié)核耶爾森菌）。

小腸結(jié)腸炎耶爾森菌的鑒定主要依靠27種生化反應(yīng)和動力試驗，本病原體在37℃生長時無動力，而在25℃~28℃生長時有動力形成。該病原體常污染多種食品和水源。

（總結(jié)：小腸結(jié)腸炎耶爾森菌是由小腸結(jié)腸炎耶爾森菌感染引起的，該菌屬于腸桿菌科，耶爾森菌屬。小腸結(jié)腸炎耶爾森菌是 腸道致病菌中能在4℃生長的少數(shù)細(xì)菌之一，37℃生長時無動力，而在25℃~28℃生長時有動力形成。腹瀉病種之—）小腸結(jié)腸炎耶爾森菌有如下特征：

1、抗原：這種病原體有革蘭陰性腸桿菌特異性的多糖抗原和腸道菌的共同抗原，小腸結(jié)腸炎耶爾森菌血清型是根據(jù)脂多糖O抗原確定的。

現(xiàn)在國際上常報告的有57個抗原因子，將小腸結(jié)腸炎耶爾森菌分成50多個血清型。

2、V、W因子：由質(zhì)粒編碼的抗原，是—種毒力決定因子，也是毒力的標(biāo)記。小腸結(jié)腸炎耶爾森菌在37℃生長時需要鈣離子（小腸結(jié)腸炎耶爾森菌），而在25℃～28℃生長時不需要鈣離子（小腸結(jié)腸炎耶爾森菌）。

3、自凝性：小腸結(jié)腸炎耶爾森菌在含有10％小牛血清的組織培養(yǎng)液內(nèi)37℃培養(yǎng)1天，發(fā)生自凝，而在25℃則不發(fā)生自凝。

目前的研究已證實這種自凝作用是由質(zhì)粒編碼的外膜蛋白A(YOPA)引起的。（YOPA—外膜蛋白A）

4、侵襲性：小腸結(jié)腸炎耶爾森菌能侵入腸上皮細(xì)胞，并且能侵入到人工培養(yǎng)的Hep-2及Hela細(xì)胞內(nèi)，這種侵入性是由染色體編碼的侵襲素所決定的。

目前還發(fā)現(xiàn)染色體上有另一基因位點，稱作粘附侵襲位點(ail)，編碼的—種蛋白質(zhì)，是介導(dǎo)低水平的粘附侵襲作用。

5、外膜蛋白：小腸結(jié)腸炎耶爾森菌都具有一個約60kb的占力質(zhì)檢，編碼10多種外膜蛋白(YOPs)，現(xiàn)已證實這些外膜蛋白中的—些與致病密切相關(guān)。

有關(guān)小腸結(jié)腸炎耶爾森菌病原體的研究還在不斷深入。(二)臨床表現(xiàn)：

1、急性腸炎和急性胃腸炎：是小腸結(jié)腸炎耶爾森菌病最常見的臨床類別，表現(xiàn)為腹瀉和發(fā)熱，病情輕重不一，部分患者伴有腹痛和嘔吐。

2．有類似于闌尾炎的癥狀：有報道在外科手術(shù)后的闌尾內(nèi)容物中分離別小腸結(jié)腸炎耶爾森菌。

3、慢性反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎及結(jié)節(jié)性紅斑：這兩種癥狀（慢性反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎及結(jié)節(jié)性紅斑）引起的機制可能相似，很有可能都是該菌腸道感染后的遲發(fā)型免疫后遺癥。

目前的研究發(fā)現(xiàn)，小腸結(jié)腸炎耶爾森菌質(zhì)粒編碼的外膜蛋白A(YopA)是引起關(guān)節(jié)炎的關(guān)鍵因素，有學(xué)者推測該菌產(chǎn)生的超抗原也是引起這兩種癥狀（慢性反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎及結(jié)節(jié)性紅斑）另一個原因。

4、耶氏肝炎：前蘇聯(lián)和我國學(xué)者都發(fā)現(xiàn)該菌感染可引起肝炎，稱“耶氏肝炎”。這種病原體引起的與②病毒性肝炎癥狀相似。區(qū)別是前者（①肝炎）高熱、抗生素治療效果顯著，然后根據(jù)血清學(xué)和病原體檢測作出進一步診斷。

5、其他：還有一些少見癥狀，如敗血癥等全身性癥狀。這些癥狀雖然少見，但死亡率較高。(三)診斷標(biāo)準(zhǔn)

對小腸結(jié)腸炎耶爾森菌病的確診主要依靠病原體分離及血清學(xué)診斷。

在未分離到病原體之前，應(yīng)根據(jù)臨床癥狀(先有發(fā)熱、腹瀉，不久發(fā)生咽喉炎、扁桃體炎、頸部淋巴結(jié)腫大、關(guān)節(jié)炎以及結(jié)節(jié)性紅斑等)作出初步診斷。

目前還發(fā)展了一些分子生物學(xué)方法，以利于對該菌的感染作出快速診斷，如PCR技術(shù)(聚合酶鏈反應(yīng))，針對于外膜蛋白的單克隆抗體檢查技術(shù)等。但這些方法推廣卻受到一定限制。

(四)治療原則： 一般說來小腸結(jié)腸炎耶爾森菌感染癥狀較輕，主要采取支持療法，癥狀很快消失。對于一些嚴(yán)重病例，特別是一些腸外型的感染應(yīng)及時采用抗生素治療。鏈霉素和慶大霉素是臨床上常用的藥物。（小腸結(jié)腸炎耶爾森菌常用的藥物是鏈霉素和慶大霉素）

(五)監(jiān)測：小腸結(jié)腸炎耶爾森菌常存在于一些冷藏食品中，這類感染通常稱作“冰箱病”因此食品檢驗是對該菌最好的監(jiān)測方法。(六)控制措施：

1．控制傳染源：(1)發(fā)現(xiàn)和治療患者，執(zhí)行隔離制度，以免病菌擴散。(2)在我國，牛、豬等家畜是主要的傳染源，加強管理，防止排泄物污染水源和食物。(3)有一些鼠類和昆蟲也是攜帶有對人類致病性的小腸結(jié)腸炎耶爾森菌，因此消滅也是防治該病的主要環(huán)節(jié)。2． 切斷傳播途徑：(1)加強環(huán)境衛(wèi)生管理。(2)保護水源。

3． 個人防護：(1)講究個人衛(wèi)生，不食不潔食物，防止病從口入。(2)不喝牛水(水源極易被該菌污染)和未消毒的牛奶。(一)病原學(xué)：

彎曲菌為革蘭陰性菌，為嚴(yán)格的微需氧菌。鏡下觀察菌細(xì)胞末端是尖的，且形態(tài)細(xì)長，呈弧形、螺旋形或“海鷗展翅”狀，一端或兩端各有一根鞭毛。(二)流行病學(xué)：

彎曲菌為人獸共患病，與人類感染有關(guān)的主要是家禽和家畜，也是主要的傳染源，患者和帶菌者也可以成為傳染源。

最常見的傳播途徑是進食污染的食物和水。人群普遍易感。本病（空腸彎曲菌）的胃腸炎癥狀表現(xiàn)不一，可由無癥狀的帶菌、輕型腹瀉以至嚴(yán)重腹瀉，潛伏期為l一10天，多數(shù)為3～5天。主要癥狀有發(fā)熱、腹瀉和腹痛，少數(shù)有嘔吐等。與細(xì)菌性痢疾相似，但病情較輕。

空腸彎曲菌是彎曲菌中最常見的病原菌，感染后可表現(xiàn)為輕微的胃腸炎或重型的小腸結(jié)腸炎。近年報道該菌（空腸彎曲菌）感染與格林巴利綜合征的發(fā)生密切相關(guān)。(三)病原分離 取新鮮糞便標(biāo)本或肛拭子插入C—B運送培養(yǎng)基，在24小時內(nèi)或經(jīng)增菌后接種于相應(yīng)抗生素的硫乙醇酸鈉培養(yǎng)基（空腸彎曲菌），置42℃、微氧(濃度5％～10％)、高二氧化碳(3％～4％)的條件下培養(yǎng)約48小時。作生化試驗和藥敏試驗以進一步確定細(xì)菌種。(一)克雷伯菌屬（腸道菌疾病檢驗—腸道屬）

克雷伯菌屬細(xì)菌一般不致病，當(dāng)機體免疫力低下時，能引起多種感染。對人類關(guān)系密切的有①肺炎克氏菌和②臭鼻克氏菌和③鼻硬結(jié)克氏菌。

肺炎克氏菌是形態(tài)較短粗的革蘭陰性桿菌，常見端端排列，無鞭毛，多數(shù)有菌毛，有較厚的莢膜。營養(yǎng)要求不高，在普通培養(yǎng)基上生長的菌落大，呈粘液狀，相互融合，以接種環(huán)挑之易拉成絲。

肺炎克氏菌是除大腸桿菌外的最重要條件致病菌，已成為醫(yī)源性感染的重要細(xì)菌。

存在于人類腸道、呼吸道及水和谷物中，當(dāng)機體免疫力降低或應(yīng)用免疫抑制劑，也可因長期大量使用抗生素導(dǎo)致菌群失調(diào)而引起感染。

常見有支氣管炎、肺炎、泌尿道和創(chuàng)傷感染，有時導(dǎo)致嚴(yán)重的敗血癥、腦膜炎、腹膜炎等。(二)變形桿菌屬（腸道菌疾病檢驗—腸道屬）

變形桿菌屬中與醫(yī)學(xué)關(guān)系密切的包括①普通變形桿菌和②奇異變形桿菌，為多形性的革蘭陰性桿菌，可為球形或絲狀，無莢膜，幼齡培養(yǎng)物中有周身鞭毛，運動活潑。有菌毛，可粘附至植物和真菌細(xì)胞表面，但不與動物組織細(xì)胞或紅細(xì)胞表面吸附。需氧或兼性厭氧。

營養(yǎng)要求不高。在固體培養(yǎng)基上常呈擴散生長，形成以菌接種部位為中心的厚薄交替、同心圓形的層層波狀菌苔，稱為遷徙xi(遷移的意思)生長現(xiàn)象。

在血瓊脂平板上有溶血現(xiàn)象。能迅速分解尿素，是本屬的一個重要特征。個別菌株發(fā)酵乳糖。變形桿菌根據(jù)菌種抗原分群，再以鞭毛抗原分型，現(xiàn)至少分為100多個血清型。

X19、X2、和XK菌株含有特殊菌體O抗原，可與某些立克次體的部分抗原發(fā)生交叉反應(yīng)，故可替代立克次體作為抗原與患者血清進行凝集反應(yīng)，此稱為外斐試驗，以輔助診斷斑疹傷寒、恙蟲病等立克次體病。

變形桿菌屬在自然界分布廣泛，人和動物腸道也經(jīng)常存在。對人類一般不致病，在特定條件下可單獨或與其他細(xì)菌混合感染。

變形桿菌是尿道感染最常見菌之一，其尿素酶可分解尿素產(chǎn)氨，使尿液pH增高，堿性環(huán)境有利于變形桿菌的生長。

腎結(jié)石和膀胱結(jié)石的形成與變形桿菌屬可能也有關(guān)，因該菌屬可使尿堿化促進磷酸銨鎂結(jié)石的形成。變形桿菌還能引起皮膚、耳、乳突小房、眼等局部感染，以及腹膜炎、敗血癥等，有的菌株可引起食物中毒。

(三)腸桿菌屬（腸道菌疾病檢驗—腸道屬）

為革蘭陰性的桿菌或球桿菌，具周鞭毛，能運動，有些菌株有莢膜，無芽胞。兼性厭氧，無特殊營養(yǎng)要求，最適生長溫度為30℃。

在營養(yǎng)培養(yǎng)基中均勻渾濁，有菌膜。對大多數(shù)對糖類產(chǎn)酸產(chǎn)氣，但44.5℃只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，IMViC(吲哚形成、甲基紅反應(yīng)、VP反應(yīng)和枸櫞酸鹽利用試驗)反應(yīng)大多為+ +--。

是腸桿菌科中最常見的環(huán)境菌群，但不是腸道的常居菌群。在水和日常食品中比埃希菌屬更常見，常自尿道感染和敗血癥時分離出，為機會病原菌（腸桿菌）。（腸桿菌比大腸埃希菌感染更常見）(四)沙雷菌屬（腸道菌疾病檢驗—腸道屬）

與醫(yī)學(xué)有關(guān)的是①粘質(zhì)沙雷菌和②液化沙雷菌，革蘭陰性菌，具周鞭毛、能運動，一般無莢膜，不產(chǎn)芽胞。

兼性厭氧，營養(yǎng)要求不高，菌落不透明，常呈白色、粉紅色或紅色。

液體培養(yǎng)物形成菌膜。觸酶強陽性，氧化酶陰性，發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)氣或不產(chǎn)氣，VP陽性，DNA酶陽性，少數(shù)菌株可產(chǎn)生非水溶性紅色色素，臨床分離的粘質(zhì)沙雷菌35℃大多不產(chǎn)色，轉(zhuǎn)種22℃培養(yǎng)數(shù)天后可恢復(fù)產(chǎn)色。為環(huán)境常居菌群，常導(dǎo)致醫(yī)院內(nèi)感染，為機會病原菌。(五)哈夫尼菌屬（腸道菌疾病檢驗—腸道屬）

只有1個種，即蜂房哈夫尼菌。革蘭陰性桿菌，具周鞭毛，無莢膜，不產(chǎn)芽胞。兼性厭氧菌，菌落光滑、濕潤、半透明，呈灰色帶亮的表面和完整的邊緣，最適生長溫度為25℃～30℃，本菌的動力和許多生化反應(yīng)在35℃時為陰性。觸酶陽性，氧化酶陰性，發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣。

為周圍環(huán)境常居菌，常導(dǎo)致醫(yī)院內(nèi)感染，為機會性病原菌。(六)普城菌屬（腸道菌疾病檢驗—腸道屬）

革蘭陰性菌，兩端鈍圓，有多形性，有周鞭毛，運動活潑，無芽胞，無莢膜。

兼性厭氧菌，在25℃時動力比35℃時好。菌落小而透明，在含①膽鹽培養(yǎng)基上較扁平和透明，在②SS瓊脂上產(chǎn)硫化氫，中心黑色（普城菌培養(yǎng)基的生長特點SS）。

液體培養(yǎng)時，培養(yǎng)基均勻渾濁生長，表面有菌膜，管底有沉淀。尿素和苯丙氨酸酶陽性，乳糖陰性，枸櫞酸鹽和阿東醇陽性，而鳥氨酸陰性。

為常見的環(huán)境和腸道寄居的正常菌群，也是醫(yī)院內(nèi)感染常見的機會菌，常分離自腹瀉和尿道感染。(七)摩根菌屬（腸道菌疾病檢驗—腸道屬）

革蘭陰性菌，在固體和液體培養(yǎng)基上的生長特性與普城菌屬的一致。

某些株30℃以上不形成鞭毛和不能運動。尿素和苯丙氨酸酶陽性，乳糖陰性，枸櫞酸鹽和阿東醇陰性，而鳥氨酸陽性。

為常見的環(huán)境和腸道寄居的正常菌群，也是醫(yī)院內(nèi)感染常見的機會菌，常分離自腹瀉和尿道感染。(一概述人體感染某些寄生蟲后，會引起急性腹瀉和慢性腹瀉，多為慢性腹瀉，或在急性發(fā)作后經(jīng)常再發(fā)如艾滋病相關(guān)性腹瀉中，以原蟲尤其是最常見的隱孢子蟲引起的感染性腹瀉，往往病程遷延，治療困難，已成為艾滋病死亡原因之一（寄生蟲性腹瀉）。

去某些地區(qū)旅游會導(dǎo)致較高的藍(lán)氏賈第鞭毛蟲感染性腹瀉。現(xiàn)已知能引起寄生蟲性腹瀉的寄生蟲有50多種。

寄生蟲性腹瀉的發(fā)病機制主要為①滲出型、②滲透型、③分泌型、④脂肪瀉及腸外致病等。寄生蟲性腹瀉與其他腸道病原體引起的腹瀉往往難以鑒別，但有些流行病學(xué)和臨床體征方面還是有差別的，主要表現(xiàn)在（寄生蟲性腹瀉）：潛伏期長，起病緩慢；呈地方性分布特征；發(fā)熱少見；在艾滋病相關(guān)腹瀉中常見；蠕蟲性腹瀉患者外周血嗜酸性粒細(xì)胞增多；確診須依據(jù)病原學(xué)檢查；針對病原治療有效。(二)阿米巴痢疾（寄生蟲性腹瀉—腸道菌疾病檢驗）

其病原體為溶組織內(nèi)阿米巴，感染者中有90％為無癥狀的攜帶者，約10％的感染者由于阿米巴滋養(yǎng)體侵襲腸壁組織引起腹痛、腹瀉、粘液血便等癥狀。本病易復(fù)發(fā)、遷延成慢性。如病原體由腸道借血流或直接蔓延而侵入腸外組織，則產(chǎn)生相應(yīng)臟器的阿米巴病等腸外并發(fā)癥。

最常見為①阿米巴肝膿腫，其次還有②阿米巴肺膿腫、③腦膿腫及其他部位的膿腫。溶組織內(nèi)阿米巴有①滋養(yǎng)體和②包囊二期。滋養(yǎng)體又分為大小兩型

①寄生于結(jié)腸腸腔或腸壁內(nèi)，以二分裂法繁殖。主要傳染源為無癥狀帶包囊者、慢性患者和恢復(fù)期患者其糞便中不斷排出包囊。

②急性期患者主要排出包囊，故不成為主要傳染源。該病的傳播主要通過包囊污染飲水、食物等而感染。污染的手、蒼蠅、蟑螂等可攜帶包囊而傳播。糞便中檢出阿米巴滋養(yǎng)體或包囊是確診的重要依據(jù)。(三)藍(lán)氏賈第鞭毛蟲（寄生蟲性腹瀉—腸道菌疾病檢驗）

藍(lán)氏賈第鞭毛蟲屬于寄生于腸道的一種鞭毛蟲，營二分裂繁殖。其生活史分①滋養(yǎng)體和②包囊兩個時期，與之相應(yīng)，其形態(tài)也有這兩種。