第一篇：醫院檢驗病理實驗室建設解決方案

醫院檢驗病理實驗室建設解決方案

檢驗科是醫院中接收病人血液、體液等樣本，進行檢驗分析，并向臨床醫師發出檢驗報告的一個臨床診斷科室，一個設計科學合理的實驗室，能為檢驗人員提供一個安全、高效的工作環境。

一、平面布局

1、檢驗科宜設在門診樓，并應自成一區，三甲醫院檢驗科面積宜不少于1200㎡，二甲醫院檢驗科面積宜不少于800㎡，如果檢驗科還承擔有較多的科研、教學任務，面積還應適當增加。

2、檢驗科平面布局應能清晰的分出清潔區、半污區和污染區，各域之間應有隔斷隔開。

清潔區主要由更衣室、辦公室等組成；

半污染區主要由試劑庫、制水間等輔助功能間組成；

污染區主要由采血室、檢測實驗室組成。

3、檢驗科應人物流分開，人員和物品應有獨立的出入口，特別是污物應有專用出口，且經醫院的污梯送至醫院集中的醫療廢物存放點，不得走醫院的客梯。

4、為保證檢測工作的安全，生物安全實驗室應符合BSL-2級實驗室的要求，在生物安全實驗室的出口處應設有非手動洗手裝置和緊急洗眼裝置，部分高污染風險的工作應在二級生物安全柜內進行。

基本配置：

二、潔凈裝飾要求

1、墻板、頂棚材料要求易于清洗消毒、耐擦洗、不起塵、不開裂、光滑防水，常用材料為雙面夾心彩鋼板，防火等級不低于難燃B1級。

2、地面材料要求無縫的防滑耐腐蝕地面，常用的裝飾材料為PVC或橡膠地面，鋪貼的接縫處需用同色焊條焊接并刨平。

3、實驗室對門的要求：應能自動關閉，門上宜設觀察窗，要帶門鎖和閉門器，門頭上可加裝工作狀態指示燈，標明實驗室是否有人工作。

4、實驗室對窗的要求：墻體上不宜設可開啟的外窗，可設密閉觀察窗。

5、實驗室的墻體與墻體交接處，墻體與地面交接處，墻體與頂棚的交接處均應用圓弧處理，彩鋼板拼接處均應打密封膠處理，以保證實驗室的氣密性。

6、實驗室吊頂高度以2.6m高為宜，主實驗室吊頂不能開設人孔或設備檢修孔。

7、近幾年來潔凈實驗室裝修出現的新材料：

a.雙層鋼化玻璃窗內加可調百葉：雙層8mm厚鋼化玻璃，內置有可調百葉窗，可增加大廳的采光和視覺效果，內置百葉窗無污染不需要清洗。

b.快速拼裝金屬墻板：主要用作輕質隔墻，兩側為烤漆金屬板，內填充為無機鎂質，與彩鋼板相比具有防火等級高、色彩豐富、墻面質感好等優點。

c.抗菌墻板：主要用于內墻面裝飾，在石膏板、金屬板的表面涂覆高性能氟碳涂料和陶瓷無機涂料，表面致密不起塵，耐擦洗、耐酸堿腐蝕，且有一定的抑菌作用，可用于潔凈室墻面裝修。

三、通風空調工程

1、凈化實驗室應避免多個實驗室共用一個空調機組的情況，單獨的空調機組可有效的避免交叉污染，節約運行成本。

2、實驗室空調設計參數應參照《生物安全實驗室建筑技術規范》相關要求，在設計時還應考慮到生物安全柜、離心機、培養箱等設備的熱、濕負荷。

3、空氣凈化系統應設置粗、中、高三級空氣過濾，粗效過濾器應設在新風口處，中效過濾器應在空調機組的正壓段，高效過濾器應設系統的送風末端。

4、新風口距地面高度不低于2.5m，新風口應有防雨及防鼠蟲措施，應設有易拆除清洗的過濾網。

5、實驗室的排風機應與送風機連鎖，排風機應先于送風機開啟，后于送風機關閉，室內排風管道與生物安全柜等設備的排風管道應分開設置。

6、凈化室內送排風應采用上送下排方式。室內送風口和排風口布置應使室內氣流停滯的空間降低到最小程度。

7、實驗室的各區之間應保持不小于5Pa 的壓差，保證氣流是從清潔區流向污染區，應在易于觀察的位置設置壓差表。

8、過濾器和空調機組不能使用木制材料，應耐消毒劑腐蝕、不吸水的材料，空調機組的漏風率應小于2%。

9、舒適性空調主要是采用風機盤管加新風系統，冬夏季使用醫院集中的冷熱源，如果春秋季節醫院沒有冷熱源，可自備風冷式模塊機組提供冷熱源。

四、電氣工程

檢驗科實驗室宜按一級負荷供電，并應設置不間斷電源，保證主要設備不小于30分鐘的電力供應。

1、照明系統

a.實驗室照度≥300 lx 緩沖間、準備間≥200 lx 辦公區照度≥200 lx 采血臺臺面照度≥500 lx。

b.凈化區應采用密閉燈具，普通實驗區可根據吊頂材料選用普通燈具。

c.實驗室應配紫外線滅菌燈，可按10-15㎡配備一支紫外線燈（30W）。

d.疏散指示燈、應急燈、出口指示燈的數量和位置應按消防相關規范設計。

2、動力配電系統

a.在進行電氣設計時應設置足夠多的插座，并應提前了解實驗室主要設備的用電功率，生物安全實驗室應設置專用配電箱。

b.在設計不間斷電源前應與實驗室負責人溝通，確定需要不間斷電源供電的設備及最短供電時間，不間斷電源放置的位置應通風條件良好。

3、弱電系統

a.電話網絡終端：在實驗室內應設置足夠多的電話網絡終端，滿足實驗室信息化管理的要求。

b.門禁系統：可限制非授權人員的進入，保證實驗室的安全。c.監控系統：可監控實驗室人員的出入情況、日常工作情況、視頻教學等。

d.呼叫系統：實驗室內應設置緊急呼叫分機，呼叫主機應設在值班室內。

五、給排水及供氣工程

1、給水系統

實驗室的出口處應設有洗手裝置，洗手裝置應使用非手動水龍頭，生物安全實驗室建議配自動手消毒裝置，給水材料符合國家相關要求。

2、排水系統

潔凈實驗室內不應設置地漏，實驗室排水應與生活區排水分開，應確保實驗室排水進入醫院污水處理站。

3、純水系統

實驗室主要用純水的設備是生化儀，實驗室純水系統在設計前應與實驗室負責人溝通純水的用水點，各水點的用水量。

六、實驗室配套家具

1、實驗室家具依據其使用的材質可分為全鋼家具、鋼木家具、全木家具三大類，全鋼家具外型美觀但價格偏高，鋼木家具體格適中，全木家具因其在承重、防水方面的弊端已經很少有人選用，應結合醫院的預算費用選用合適的家具。

2、實驗臺面材質主要由實芯理化板、環氧樹脂板和千思板，因檢驗科實驗室使用的高溫設備不多，推薦使用實芯理化板臺面和千思板臺面。

3、實驗臺在制作前應結合現場實際情況和工作需要來確定長度和款式，過多的家具會占用工作空間，家具數量不足又會影響工作開展。

七、建設方的準備工作

1、了解實驗室現有的檢測項目和近3年準備開展的檢測項目，了解每天門診量和醫院的床位數，以確定檢測實驗室的功能間及面積。

2、把實驗室的主要檢測設備列個清單出來，清單應包含設備名稱、數量、功率、用水量、用氣量等信息，并提供給設計師參考。

3、應給設計師提供一份建筑平面圖，并與工程設計人員協商確定檢驗科人員的出入口，清潔物品入口，污物出口，這些人物流路線不應和整個大樓的人物流路線沖突。

4、在初步設計方案確定后，應協助設計人員與行業內專家進行一次溝通，以優化設計方案。Labx.cn

第二篇：病理檢驗技術

熒光原位雜交 FISH 用DNA探針與組織切片上互補的DNA雜交，通過觀察熒光信號在染色體上的位置和顏色來反映相應基因的情況。

第一章 病理檢驗技術概述

病理學的作用：

1、研究疾病的病因、發病機制，認識

疾病的發生發展規律

2、為臨床診斷疾病、治療疾病、分析預

后提供依據等。

病理檢驗的定義：

------在臨床醫療實踐中，通過對患者病變組織或細胞進行檢查，以協助臨床診斷疾病的方法稱為病理檢驗。

一、病理檢驗的主要任務

（一）確定疾病的診斷

（二）為臨床選擇治療方案提供依據

（三）提供有關預后因素的信息。（最正確、最可靠、最后的診斷）

（四）了解疾病的發展及分析療效

（五）為科學研究積累資料

（六）為提高臨床診斷水平服務

二、病理檢驗分類

（一）細胞學檢驗（脫落細胞、細針穿刺吸取）

（二）組織學檢驗---最后的診斷

活體組織檢驗、手術標本檢驗、手術中病理檢驗

（三）尸體剖驗

病理學技術：

在病理學臨床及科學研究工作中使用的各種技術方法統稱為病理學技術。病理檢驗技術的質量和水平是臨床病理診斷工作中至關重要的因素。“技術是病理學之母?！?/p>

第二節、病理檢驗技術常規工作 收發工作

協助取材和尸體剖檢工作 制作制作切片及細胞學涂片 病理資料管理及檢索

藥品、物資的管理及儀器維護 大體標本的收集和制作

第六章 組織制片技術 P39 常規石蠟切片制作程序 組織固定→取材→固定→脫水→透明→浸蠟→包埋→切片→染色→封片→觀察

第一節 組織塊的處理

（一）組織切片制作過程中的各種操作：

1、取材與固定：合理取材、及時固定；

2、洗滌、脫水、透明；

4、浸蠟、包埋；

5、切片、貼片（展片、撈片）和染色：

6、封片：長期保存。

一、取材：

-------按照病理檢查的目的和要求，切取適當大小和數量的組織塊，用于制作組織切片的過程。

注意事項：

部位、大小、形狀、方向

二、固定和固定液

生理鹽水或10%甲醛。

固定：將組織浸入某些化學試劑，使

4、蒸汽固定法：為了固定組織中可溶性物組織細胞內的物質盡量保持在生活狀態時質、的形態結構和位置過程。

血液、細胞涂片等；

（一）固定目的：

（三）固定液的特性：

（1）防止組織、細胞的自溶與腐??；

1、滲透力強，迅速滲入組織內部

（2）凝固或沉淀細胞內物質；

2、不會使組織過度收縮或膨脹

（3）增加組織硬度，便于制片；

3、能硬化組織，保持細胞形態和位置

（4）產生不同的折光率，有利于染色后觀

4、使組織對染料產生親和力，產生折光率 察辨認。

（四）組織固定注意事項：

（二）固 定 方 法：

1、及時固定

1、浸泡固定法：病理外檢一般均用此法；

2、固定容器宜大

2、注射、灌注法：體積過大或整個臟器或

3、固定液應足量：固定組織體積的10-20尸體的固定； 倍

3、微波固定法：應用于臨床病理快速診斷，4、防止組織變形 微波固定組織溫度至關重要。微波固定介質

5、確定恰當的固定時間 可用

（五）組織固定液 常用固定液： 1、4%甲醛（福爾馬林）：配置為市售的40%甲醛1份加水9份混合即成；

2、酒精（乙醇）：高濃度組織硬化顯著，先用80%固定數小時，再用95%固定；

3、中性緩沖甲醛液：可提高免疫組化陽性率。

4、酒精-甲醛液（A-F固定液）：

5、Zenker固定液： 1、4%甲醛（福爾馬林）：

久置能產生白色沉淀（三聚甲醛），容易氧化變成甲酸，嚴重影響細胞核著色。固定陳舊多血臟器如肝脾，易產生黑色色素，叫甲醛色素。

2、酒精（乙醇）：

高濃度組織硬化顯著，先用80%固定數小時，再用95%固定；

50%以上濃度的乙醇可溶解脂肪和類脂質，也可以溶解血色素和損害其他色素。

中性甲醛液

配置：40%甲醛150-200ml，蒸餾水800-850ml，磷酸二氫鈉4g，磷酸氫二鈉13g。常用的固定液或標本保存液，是免疫組化最常用的固定液。

選擇性固定液：

1、丙酮：廣泛用于組織化學中酶的固定；

2、戊二醛固定液：廣泛用于電鏡標本的固定，應采用緩沖液配制固定液

3、醋酸：不能保存糖，也不能固定脂肪及類脂，5%醋酸pH2～3可抑制細菌和酶的活性；

4、苦味酸：強酸，易燃易爆，酒精溶液可固定糖類；

5、氯化汞：只宜固定薄片組織，2mm～3mm厚的組織需固定6～18小時；

6、重鉻酸鉀：固定高爾基體、線粒體，對酸性染料著色良好；

7、鋨酸：濃度為1%～2%水溶液用于電鏡制片；

骨組織脫鈣液：

在脫鈣前，先將骨或鈣化組織鋸成4mm～5mm厚的簿片，按常規充分固定，然后進行脫鈣。

組織脫鈣的方法及應用：

（一）酸性溶液脫鈣：

1、脫鈣液配制：

（1）5%～10%硝酸水溶液：濃硝酸5ml～10ml，蒸餾水加至100ml；（2）硝酸甲醛液：濃硝酸10ml，10%福爾馬林90ml；

（3）Schridde液：濃硝酸20ml，10%福爾馬林100ml。對組織無明顯損害，迅速、安全；（4）5%～10%甲酸水溶液：甲酸5ml～10ml，蒸餾水加至100ml（5）甲酸酒精液：脫鈣速度較硝酸慢，但破壞組織也輕。（6）Plank-Rychlo液：脫鈣比5%硝酸液快3倍。

Jenkins混合酸脫鈣液、鹽酸氯化鈉液、枸櫞酸鈉、甲酸脫鈣液等

2、脫鈣方法：骨片懸于脫鈣液中，敞開瓶口，每日更換一次新液，最好早晚各一次。

（二）螯合劑脫鈣：速度很慢，但對組織成分幾乎沒有損害。用于免疫組化染色較理想。

1、脫鈣液配制：取乙二胺四乙酸二鈉（EDTA）25g，溶解于200ml蒸餾水中，氫氧化鈉（NaOH）調整pH至7.0（大約加2.5g NaOH）。EDTA與鈣可形成一種可溶性非離子化的復合物。

2、脫鈣法：將骨片浸入脫鈣液中，每周更換一次新液。一般致密骨脫鈣需要6～8周，含有少量骨渣的組織約需一周。

（三）電解脫鈣法： 此法即在脫鈣液中通過電流，電解加速脫鈣。

1、電解脫鈣液配制：

25%鹽酸50ml，25%甲酸200ml，蒸餾水750ml；

2、脫鈣方法：直徑30cm電解槽內盛大量電解液，將骨組織放在一個四周多孔的塑料小容器內放入電解液內，此容器通入白金絲或鎢絲作陽極，在電解液內再放一白金絲或鎢絲作陰極，通入6V直流電，電流強度1A～2A，調節兩電極的距離來控制。電解液溫度不超30℃～45℃，一般2～6小時即可脫盡。

脫鈣后的處理

1、脫鈣后的組織經流水沖洗4～12小時，除去殘留的脫鈣劑；

2、修去鋸面的薄層組織，切成適當大小的組織塊，進行常規脫水、透明、浸蠟及包埋；

3、用酸性液脫鈣后的組織，蘇木素染色時間應適當延長，在伊紅中的時間應該縮短；

4、脫鈣后組織切片在染色中較易脫落，充分烤片，染色前滴加2%～5%的火棉膠液，以使之粘貼牢固。

三、洗滌、脫水、透明

（一）組織的洗滌

1、洗滌的目的：防止組織中留有較多的固定液而影響脫水劑；

2、洗滌的方法：

（1）固定劑以水配制者：常用的固定劑是甲醛溶液（10%福爾馬林溶液），用流水沖洗。大組織沖洗24小時，小組織沖洗2～4小時。

（2）固定劑含酒精者：一般不用沖洗，如需要沖洗必須用與固定劑中的酒精濃度相近或略低的酒精沖洗。

（二）組 織 脫 水

1、脫水的目的及原則：用某些溶劑逐漸將組織內吸收的水分置換出來，以利于透明劑和石蠟或火棉膠的滲入。

2、脫水劑的種類及特征：

特征：能與水在任何比例下混合；能與透明劑在任何比例下混合；

單純脫水劑：脫水后再經二甲苯透明才浸蠟；

酒精：最常見的脫水劑。脫水能力強，但易使組織收縮、脆。

單純脫水劑：脫水后再經二甲苯透明才浸蠟； 丙酮：脫水強，組織收縮嚴重，價格高。異丙醇：可代替無水酒精使用。價格貴。脫水兼透明劑：脫水后即可直接浸蠟。

正丁醇：為脫水劑兼有透明劑作用。用于植物標本的處理效果較好。叔丁醇：脫水兼透明。電鏡標本制作時常用作中間脫水劑。

（三）組織透明或媒浸

目的是使石蠟能浸入組織塊便于包埋。

1、二甲苯：最常用的透明劑，有毒、易揮發，透明力強，但組織易收縮變脆，小塊組織以30分鐘。

2、苯和甲苯：組織收縮小、不易變脆。

3、氯仿：即三氯甲烷。易發揮，透明力比二甲苯差，時間長，多用于大塊組織的透明。

4、香柏油：為柏樹樹脂，收縮小，透明時間長，常用于染色后切片的透明。

四、組織浸蠟（透蠟）P48

（一）浸蠟的目的和方法：除去組織中的透明劑而代之以石蠟，以便切片。

（二）浸蠟劑的種類：

1、石蠟：經56℃～58℃石蠟浸蠟的組織包埋，有利于組織切片的連續性，對蠟塊資料保存可靠，一般為3-4小時。

2、火棉膠：目前使用火棉膠浸入組織較少，多用于染色前的覆蓋液。

3、碳蠟；

4、明膠。

五、組 織 包 埋 P49

（一）石蠟包埋法：為最常用的包埋法。

1、常規石蠟包埋法:包埋過程、包埋面的選擇；

2、體液標本一般不做包埋和切片。

（二）快速石蠟包埋法：

1、操作過程：全程均加熱，20～30分鐘完成。（1）取材、固定：薄片1cmⅹ0.5cmⅹ0.3cm,在快速固定液（95%酒精、40%甲醛、冰醋酸）內加熱煮沸1～2分鐘。（2）脫水：組織厚度不超1.5mm，加入丙酮5 ～ 8ml，煮沸5～6分鐘。（3）透明：加二甲苯加熱1～2分鐘。（4）包埋：石蠟包埋冰水冷卻硬化。

3、碳蠟包埋法：即聚乙烯二醇。包埋熔點為38℃和52℃左右的分子量為1500和4000兩種。適用于脂肪及脂類組織的制片。

4、明膠包埋法：

5、石蠟半薄切片包埋法：常根據組織類型進行脫水、透明和浸蠟。

6、樹脂包埋法：適用于不脫鈣骨髓活檢組織、肝、腎穿刺活檢和淋巴結組織等。

第二節 切片器具與切片

一、切片機：制作組織切片的主要儀器設備。

（一）切片機的種類及使用：

1、石蠟切片機：能將石蠟包埋的組織切出一定厚薄的切片。分為旋轉式、滑動式、擺動式等。最常用的為旋轉式。

2、冷凍切片機：多為恒冷箱切片機用于組織化學、免疫組化及病理診斷。

3、火棉膠切片機：多用于眼球、內耳、脊髓和腦的切片，切片厚度可達20μm～50μ。

二、組織切片刀 P58

（一）切片刀的種類： 其長度一般有 4cm、8cm、14cm、18cm、20cm、24cm等。

1、平凹型：一側為直線，另一側為凹度，大凹度刀適用于火棉膠切片，小凹度刀適于石蠟切片。

2、雙平型：刀身兩側均無凹度，兩面是平面。適用于冷凍切片和輪轉式切片機的石蠟切片。

3、雙凹型：刀身兩側均有凹度，適用于輪轉式石蠟切片。

4、一次性刀片：需配置專用刀架。

（二）刀背套與刀柄：刀背套供磨刀時用，刀背套有金屬和塑料兩種。刀柄有木制及塑料制兩種。

（三）磨刀與被刀：

1、手工磨刀法：

①磨刀前用軟布試凈磨刀石面塵垢；

②裝上刀背和刀柄，滴磨刀油于磨刀石上；

③右手緊握刀柄，左手緊按刀背另一端，刀刃向前，逐漸推動刀片至磨刀的一端，從右到左全部磨完。

2、被刀：用被刀皮革被刀，與磨刀的動作相反；

三、石蠟切片制作 P60

（一）切片前的準備：

修整蠟塊，然后置于冷水或冰箱中冷卻，以增加硬度；

準備毛筆、眼科彎鑷子；

載玻片均勻涂上薄層蛋清甘油，占2/3；

接通攤片機電源，調節攤片（42℃～48℃）

烤片（60-70℃左右）的溫度；

（二）快速石蠟切片 P63 快速石蠟切片時，組織取材應薄，厚度一般不超過2mm，組織固定后要重新修正至1.5mm左右厚度，以利脫水，將組織塊埋入預制的蠟塊內，冷卻硬化后方可切片（取材、脫水、透明浸蠟、包埋見）。

切片撈至載波片上，用酒精燈略加烘烤，再入二甲苯脫蠟，經95%酒精后即刻入水水化，隨后即可進行常規快速蘇木素伊紅染色。

（三）冷凍切片制作 P64 組織經過冷凍后，其內的水分結冰，使組織變硬，有利于切成薄片。

一、設備要求：

（一）冷凍切片機：一般由轉輪式切片機或推拉式切片機加上制冷裝置而成：

1、二氧化碳制冷器；

2、半導體制冷器；

（二）恒冷箱冷凍卻片機：利用壓縮機通過制冷劑循環制冷。

冰凍切片機

二、制作過程

（一）取材、固定：選取有代表性的組織制片，厚度1～2mm。一般病理急診、組織化學顯示酶和免疫病理學進行熒光抗體研究等，多數都用新鮮組織直接冷凍，切片后再進行固定、染色或直接染色或孵化。采用二氧化碳冷凍設備制作須先固定。

（二）冷凍切片方法：

1、恒溫箱冷凍切片法

（1）開機預冷：切片前2～3小時，所需溫度如下： 各種新鮮組織冷凍切片參考溫度（℃）腦、淋巴結、肝、腎、脾、睪丸-12--16 肌肉、腎上腺、甲狀腺、子宮、卵巢-18--22 乳腺、皮膚、前列腺-22--28（2）放入、速凍、修整組織，待恒冷箱內溫度降至要求溫度后，將組織用OT包埋，再速凍1～2分鐘，裝于機樣本夾上，修平；（3）調節抗卷板，以與刀刃平行對齊；

（4）切片：所需厚度為4μm～8μm，用毛筆展平，貼于潔凈玻片上，晾干或吹干后染色；（5）切片后處理：清潔保養。

2、半導體冷凍切片法

3、二氧化碳冷凍切片法

（三）冷凍切片粘片法

1、蛋白甘油粘片法：

按石蠟切片的粘片法處理，但溫度不宜超過40℃?？靖珊蠹慈〕觯?0%酒精和自來水洗后即可染色。

2、Lillie明膠粘片法：切片放入1%明膠水溶液數分鐘，撈到載玻片上，5%甲醛水溶液固定5分鐘，水洗10分鐘，即可染色。

3、酒精明膠粘片法：切片浸入0.1%或0.75%明膠溶液（用40%酒精配制）數分鐘，用載玻片撈起后，室溫干燥，入氯仿1分鐘，經95%和75%酒精洗去氯仿，再經蒸餾水洗后即可染色。

三、注意事項

1、冷凍切片的組織不用固定；

2、組織盡可能新鮮，不能用濕的鹽水紗布包裹和放入10℃冰箱內緩慢冷卻，否則組織內水分可逐漸析出形成水晶，造成組織結構破壞；

3、冷凍包埋劑應適量；

4、組織太小，不能做冷凍切片；

5、冷凍時間太久的組織不能馬上切片，以免損傷切片刀；

6、一般來說骨組織和鈣化組織不能做冷凍切片。觀察

第七章組織切片染色技術

第一節 病理切片染色概述 P68

一、概念：用染液對組織切片進行處理，使組織中的不同成分被染上相應的顏色，產生不同的折射率，以利于顯微鏡觀察和分析。

三、染色的原理

染色就是染色劑和組織細胞相結合的過程。

（一）染色的化學反應：組織細胞的酸性物質與堿性染料的陽離子相結合，堿性物質與酸性染料的陰離子相結合。具有酸性的細胞核被堿性蘇木素液所染色，堿性的胞質與酸性染料伊紅所染色。

（二）染色的物理作用：

1、滲透作用：染料進入組織；

2、吸附作用：把另一種物質的分子、原子、離子集中在界面上的過程；

3、吸收作用（溶解作用）。

三、常用染料概述：

（一）染料的性質：有色的無機物或有機化合物

1、發色團：能使染料分子產生顏色的基團，叫發色團；

2、助色團：能使染料分子顏色加深，并與被染物質分子形成親和力的基團。

（二）染料的分類：

1、據染料來源：天然、合成染料和無機化合物

2、根據染料化學反應：酸性、堿性和中性染料

3、據染色對象：（1）組織染料： 1）結締組織和肌纖維染料：有膠原纖維、網狀纖維、彈力纖維和肌原纖維等染料； 2）神經組織的染料：尼氏體、神經軸突、神經髓鞘、神經膠質細胞等染料；（2）細胞染料：細胞核、細胞質染料等

常用染色劑簡介見附錄一。

五、常用染色術語的概念

一、普通染色：最常應用的是蘇木素-伊紅染色法，簡稱HE染色。

二、特殊染色：特染是為了顯示特定的組織結構或其他的特殊成分。

三、單一染色：選用一種染料染色。

四、復染色：用兩種不同性質的染料染色方法。

五、多種染色法：用兩種以上染料的染色法。

第三節 染色前后的處理 P74

一、染色前的處理：

1、脫蠟至水：必須經過二甲苯脫蠟、各級酒精（100%、95%、85%、75%）至水洗的過程。

2、脫汞鹽結晶：切片在脫蠟后用0.2%～0.5%碘酒精處理5～15分鐘，使汞鹽沉淀物溶解。

3、脫甲醛色素：在切片脫蠟至水后，用Verocay液（1%氫氧化鉀水溶液1ml，80%酒精100ml）處理10分鐘，然后流水沖洗5分鐘再常規染色。

（二）染色后的處理：

1、分化作用：必須用1%鹽酸酒精脫去所吸附的染料。

2、藍化作用：分化后，用堿性水使細胞核變成藍色。

3、染色后的脫水：低度到高度酒精逐步脫水。

4、染色后的透明：透明劑用二甲苯。

三、封固：

1、封固劑：

（1）甘油明膠封固劑

配制方法：明膠10g，蒸餾水60ml，甘油70ml，石炭酸0.25g。（用前將甘油明膠置于溫箱內融化后即可封片）。（2）中性樹膠（二甲苯樹膠液）：屬油性封固劑，組織切片需徹底脫水、透明。優良封固劑，可直接封片。

七、染色的注意事項

（1）具備實驗室基本設備和染色準備工作（2）正確完成固定、脫水、透明、脫蠟步驟；

（3）染色過程中，既要按書本的方法進行操作，又要根據實際情況進行靈活運用。

第八章 組織切片常規染色技術 第一節 常規染色的概念

一、染色原理

（一）蘇木素染色原理：蘇木紅和鋁結合形成帶正電的 藍色色精，帶負電的細胞核與帶正電的藍色色精以離子鍵或氫鍵結合而被染色。蘇木素在堿性溶液中呈藍色，所以細胞核被染成藍色。

（二）伊紅染色原理：伊紅Y是一種化學合成的酸性染料。在伊紅Y染料液中加入醋酸，使胞質中蛋白質帶正電荷，可被帶負電的伊紅染料染色，從而使細胞質及紅細胞等染成紅色或粉紅色，與藍色的細胞核形成鮮明的對比。

二、染液的配制 P80

（一）蘇木素液：從蘇木素的樹中提煉的天然染料。

1、Harris蘇木素液：最常用。

蘇木素 1g 蒸餾水 200ml 無水酒精 10ml 氧化汞 0.5g 硫酸鋁鉀 20g 配置方法見書81頁。染色3～4分鐘。保存時間為一年。

（二）伊紅染液：

0.5%伊紅酒精染液:醇溶伊紅Y0.5g，95%酒精100ml。染色時間1～3分鐘。水溶性伊紅酒精液： 沉淀酸化伊紅Y酒精液：

2、Mayer蘇木素改良配法：

（1）A液：蘇木素2g，無水酒精40ml加熱溶解；

（2）B液：硫酸鋁鉀100g，蒸餾水600ml，稍加熱使硫酸鋁鉀在水中溶解，再將A與B液混合2分鐘。用蒸餾水補足600ml，加入400mg碘酸鈉充分混勻，蘇木素染液呈紫紅色即可。染色時間為10～20分鐘。

3、Ehrlich蘇木素液：蘇木素2g，無水酒精100ml，甘油100ml，硫酸鋁鉀15g，蒸餾水100ml，冰醋酸10ml。（染色時間為10～20分鐘）。

4、Gill改良蘇木素液：蘇木素2g，無水酒精250ml，硫酸鋁鉀17.6g，蒸餾水750ml，碘酸鈉0.2g,冰醋酸20ml。染色時間為5分鐘。

（三）0.5%～1%鹽酸酒精分化液：

鹽酸 0.5ml～1ml, 75%酒精99ml。此液用一段時間后需要延長時間或更換液體，新液體分化時間要短。

（四）藍化液：“藍化”是指蘇木素液染細胞核后，通過鹽酸酒精分化，切片由酸性轉入弱堿性液體，使之變藍的過程。1、50℃溫水

2、稀氨水（1%氫氧化銨液）3 蒸餾水 100ml，氨水1ml。

三、染色方法 P83

（一）人工操作蘇木素-伊紅染色方法：

1、脫蠟至水：

（1）二甲苯Ⅰ脫蠟（脫蠟2-5分鐘）；（2）二甲苯Ⅱ（2-5分鐘）；（3）無水酒精Ⅰ（1-2分鐘）；（4）95%酒精1分鐘；（5）85%酒精1分鐘；（6）75%酒精1分鐘；（7）自來水洗2分鐘；

2、蘇木素染色：蘇木素液染色5-10分鐘；自來水洗1分鐘；

3、分化返藍：0.5%～1%鹽酸酒精分化數秒至30分鐘呈紫紅色；自來水1分鐘；用溫水(50℃)藍化5～15分鐘(或稀氨水藍化30秒，自來水洗5～10分鐘)；

4、伊紅染色：水溶性伊紅可直接入伊紅液，1分鐘；自來水洗1分鐘；

5、脫水、透明：

（1）85%酒精（20秒）；（2）95%酒精Ⅰ（1分鐘）；（3）無水酒精Ⅰ（1分鐘）；（4）二甲苯Ⅰ（1～2分鐘）；（5）二甲苯Ⅱ（1～2分鐘）。

6、封固：

（1）用中性樹膠封片；

（2）附貼標簽可書寫病理編號。

（二）冷凍切片HE染色：

冷凍切片貼片后，用95%酒精和冰醋酸5ml的混合液固定1分鐘，自來水洗30秒～1分鐘，HE染色。

（三）快速石蠟切片染色：脫蠟至水、HE染色

第三節 染色中常見問題及注意事項 P85 HE染色結果：

細胞核被蘇木素染成明顯的藍色；

細胞質被伊紅染成紅色。

第九章 組織切片特殊染色 P87 為了顯示特定的組織結構或組織細胞特殊成分，采用特定的染料和方法對組織切片進行染色。第一節 結締組織染色 P88

一、膠原纖維染色

Van Gieson染色法（簡稱VG染色）（書上無）

1、染料配制：

（1）鐵蘇木素液：見Masson三色染色（2）Van Gieson苦味酸酸性品液：

甲液：1.22%苦味酸飽和水溶液90ml，乙液 ： 1%酸性品紅水溶液10ml。

兩液提前配制，臨用前混合使用。

2、染色步驟：

（1）切片脫蠟至水（2）蒸餾水洗（3）Weigert鐵蘇木素液染5～10分鐘（4）自來水洗2分鐘

（5）據情況可用0.5%鹽酸酒精分化（6）自來水洗至變藍再用蒸餾水洗（7）Van Gieson液染色3～5分鐘（8）去染液，用95%酒精分化脫水

（9）無水酒精脫水（10）二甲苯透明（11）中性樹膠封固。

3、染色結果：膠原纖維紅色,肌纖維黃色, 細胞核黑色.4、膠原纖維染色的應用 P88（1）對梭形細胞腫瘤來源、性質提供診斷和鑒別診斷的依據；

（2）顯示各種組織、器官病變時的修復情況與纖維化程度，如肝穿組織中纖維組織的含量與分布的觀察；

（3）鑒定心肌壞死后疤痕的形成；

（4）鑒別心內膜彈力纖維增生癥與心內膜心肌纖維化。

三、網狀纖維染色 Gomori銀染法: P92

1、染液配制：銀氨溶液：甲液：硝酸銀10.2g,蒸餾水100ml；乙液:氫氧化納3.1g,蒸餾水100ml

2、染色步驟：（1）切片脫蠟至水（2）高錳酸鉀氧化液（高錳酸鉀0.5g,蒸餾水95ml,再加3%硫酸5ml)5分鐘(3)水洗1分鐘(4)2%草酸漂白2分鐘,水洗2分鐘(5)2%硫酸鐵銨媒染2分鐘(6)蒸餾水充分洗(7)氨銀溶液染色1分鐘(8)蒸餾水洗3次(9)20%福爾馬林液還原5分鐘(10)蒸餾水洗2次(11)入0.2%氯化金液中調色2分鐘,蒸餾水洗2次(12)2%硫代硫酸鈉固定2分鐘,自來水、蒸餾水洗（13）必要時用VG或伊紅復染（14）無水酒精脫水（15）二甲苯透明（16）中性樹脂封固。

3、染色結果：網狀纖維呈黑色，膠原纖維呈紅色。

4、網狀纖維染色的應用

（1）區分上皮性與非上皮性腫瘤；（2）區分血管內皮瘤與血管外皮瘤；（3）判斷原位癌與早期浸潤癌；

（4）觀察肝臟病變處的網狀支架塌陷或增生的情況，判斷病變性質、程度及發展與轉歸。

四、多色染色： P93

（一）Masson三色染色法： P93

1、染液配制：

（1）麗春紅酸性品紅液：麗春紅0.7g，酸性品紅0.3g，冰醋酸1ml，蒸餾水99ml（先配好醋酸溶液后，分別溶解麗春紅或酸性品紅）；亮綠液：亮綠1.0g，冰醋酸1ml，蒸餾水99ml。（2）苯胺藍液：苯胺藍2g，冰醋酸2ml，蒸餾水加至100ml。

（3）Weigert鐵蘇木素液：甲液：蘇木素1g，95%酒精或無水酒精100ml；乙液：29%三氯化鐵水溶液4ml，純鹽酸1ml，蒸餾水95ml（臨用前取甲、乙兩液混合即可，24小時內使用有效。）

2、Masson三色的染色步驟：（1）切片脫蠟至蒸餾水；

（2）Weigert鐵蘇木素染色5～10分鐘；（3）流水稍洗；（4）鹽酸酒精分化；（5）流水沖洗數分鐘；

（6）麗春紅酸性品紅液染色5分鐘；（7）蒸餾水稍沖洗；

（8）1%磷鉬酸水溶液處理5分鐘，鏡下見肌肉纖維呈紅色，膠原纖維呈淡紅色即可；（9）不經水而直接用苯胺藍液或亮綠液染5分鐘；（10）1%冰醋酸處理1分鐘；（11）95%酒精、無水酒精脫水；（12）二甲苯透明；（13）中性樹膠封固。

3、染色結果：膠原纖維呈藍色（用苯胺藍染）或綠色（用亮綠染），肌纖維、細胞質呈紅色，細胞核呈藍褐色。

（二）Mallory三色染色法 P94

1、染液配制：

（1）0.5%酸性品紅水溶液；

（2）苯胺藍橙黃G液：苯胺藍0.5g，橙黃G 2g，磷鎢酸1g，蒸餾水100ml。（先將1%的磷鎢酸溶液配好，一半用于溶解苯胺藍，另一半用于溶解橙黃G，加熱溶解，冷卻后分別過濾，可長期保存。臨用前將兩液混合）。（3）重鉻酸鉀液；

2、染色步驟：

（1）切片脫蠟至水；（2）Zenker固定液固定1小時；（3）充分水洗；（4）0.5%碘酒精處理5～10分鐘；（5）0.5%硫代硫酸納處理2～5分鐘；（6）充分水洗，再用蒸餾水浸洗；（7）酸性品紅液染5分鐘；（8）水洗、蒸餾水洗；（9）苯胺藍橙黃-G液染20～30分鐘；（10）直接95%酒精快速分化；（11）無水酒精脫水；（12）二甲苯透明；（13）中性樹膠封固。

3、染色結果：膠原纖維、網狀纖維呈藍色，心機纖 維橘紅色，紅細胞呈淺黃色，細胞核呈黑色。

結締組織復合染色的應用（1）區分各種纖維成分；

（2）判定各種組織、器官的病變程度和修復情況；（3）鑒別某些梭形細胞軟組織腫瘤的來源的判斷（4）用于腎小球腎炎的診斷。

第二節 肌肉組織染色 P95

（一）Mallory磷鎢酸蘇木素染色法（簡稱PTAH）：

1、染液配制

（1）磷鎢酸蘇木素：蘇木素0.1g, 磷鎢酸2g, 蒸餾水100ml。

將蘇木素加入20ml蒸餾水中,加熱溶解，再將磷鎢酸溶于80ml蒸餾水中。蘇木素冷卻后將兩液混合放置3～3月后使用。此液可保存數年。急用時可加高錳酸鉀0.15g促成熟,12～24小時即可用。

（2）酸性高錳酸鉀液：5%高錳酸鉀水溶液50ml；

0.5 硫酸水溶液50ml。

2、染色步驟：

（1）組織以Zenker液固定最佳；如用甲醛固定則先要用Zenker液處理（37℃溫箱內）3小時；

（2）切片脫蠟至水，用碘液除汞，用95%酒精脫碘；（3）充分水洗；（4）酸性高錳酸鉀液處理5～10分鐘（5）自來水洗2分鐘；（6）1%草酸漂白1分鐘；（7）自來水洗，蒸餾水洗2次；

（8）磷鎢酸蘇木素液浸染24～48小時；（9）直接用95%酒精分化；（10）無水酒精脫水；（11）二甲苯透明；（12）中性樹膠封固。

3、染色結果：橫紋肌纖維、細胞核呈紫藍色，膠原纖維、網狀纖維呈玫瑰紅色。

4、肌肉組織染色

常用于Mallory磷鎢酸-蘇木素染色法能顯示與區分：(1)橫紋肌纖維的正常與異常形態；

(2)診斷心肌損傷早期病變及全身彌漫性血管內凝血有一定參考價值；(3)用于橫紋肌肉瘤時顯示橫紋，(4)用于顯示神經膠質。

第三節 脂肪染色 P96 蘇丹Ⅲ染色法：(書上無)

1、染料配制：

（1）蘇丹Ⅲ染液：蘇丹Ⅲ 0.15g,60%～70%酒精100ml。（將蘇丹Ⅲ染料溶于60%～70%酒精形成飽和液，作長期備用液。臨時配制時需要過濾才可使用。備用液僅用上清液。密封容器存放備用液）。

（2）甘油明膠液：明膠 5g，甘油35ml，蒸餾水 35ml。（先將明膠溶于蒸餾水中加熱溶解，再加甘油充分混合，加1～2粒石炭酸。冷卻后4℃保存，用時水浴加熱）。

2、蘇丹Ⅲ染色步驟：

（1）冷凍切片厚8μm～10μm；（2）蒸餾水稍洗；（3）Harris蘇木素1～2分鐘；（4）自來水洗，鹽酸酒精分化、反藍；（5）水洗、蒸餾水洗；（6）70%酒精浸洗；

（7）蘇丹Ⅲ染液30～60分鐘（如置于56℃溫箱中可縮短時間）；（8）70%酒精分化數秒；（9）蒸餾水洗；（10）在空氣中稍晾干；（11）甘油明膠液封固。

3、注意事項：采用冰凍切片染色。蘇丹Ⅲ染液溫浸時應加蓋，防止染液中的酒精或丙酮揮發。在封固前，甘油明膠液應放置56℃溫箱中加溫，避免搖蕩，防止封固時出現氣泡。切片染色后不能長期保存，應盡快觀察或照相。

4、染色結果：脂肪呈橘紅色，脂肪酸不作色，細胞核呈淡藍色。

5、脂肪染色的應用（1）鑒別細胞內空泡的性質（水樣變性、脂肪變性或糖原）；

（2）顯示動脈粥樣斑塊病灶內的脂質沉積、脂肪栓塞。

（3）神經系統一些變性、脫髓鞘疾病的診斷有極為重要的作用。

（4）脂肪染色主要用于卵巢纖維瘤與卵泡膜細胞瘤、腎母細胞瘤、皮脂腺癌的診斷和鑒別診斷。

第四節 糖原染色與粘液染色

一、過碘酸雪夫染色法（PAS法）：P98

1、染色配制：

（1）過碘酸氧化液：過碘酸0.5g，蒸餾水100g。（此溶液應放4℃冰箱保存）。（2）Schiff液：堿性品紅 1g，1mol/L鹽酸 20ml，偏重亞硫酸鈉（鉀）1g，雙蒸餾水200ml。（先將雙蒸餾水200ml煮沸，加入1g堿性品紅，再煮沸2分鐘。冷卻至50℃加1mol/L的鹽酸20ml，待溫度降低至25℃時，加入偏重亞硫酸鈉（鉀）1g～1.5g,溫室2小時后堿稍帶紅色，5小時后為無色液體，如有顏色應加入活性炭1g～1.5g,用雙層濾紙過濾,盛于棕色磨口瓶內,放入4℃冰箱保存。

2、染色步驟：

（1）切片脫蠟至水；（2）蒸餾水洗；（3）0.5%過碘酸氧化液10～20分鐘；(4)充分蒸餾水洗；（5）進入Schiff液染色10分鐘（如室溫低于15℃可稍加溫）；（6）自來水洗10分鐘；（7）用Mayer或 Harris明礬蘇木素染細胞核3～5分鐘；（8）鹽酸酒精分化；（9）水洗；（10）無水酒精脫水；（11）二甲苯透明；（12）中性樹膠封固。

3、染色結果：糖原及其它PAS反應陽性物質 染成紅色，細胞核染成藍色。

4、糖原染色的應用

（1）用于顯示糖原，對明確細胞空泡的性質、糖原貯積病和糖尿病的診斷及某些透明細胞腫瘤的鑒別診斷方面具有重要作用。

（2）用于中性黏液物質，對低分化腺癌的診斷也有一定價值。

（3）清楚地顯示基底膜（腎炎的診斷）、網狀纖維、真菌菌絲、寄生蟲及腺泡狀軟組織肉瘤中胞質內結晶體。

（4）觀察缺血缺氧早期心肌壞死或梗死區的糖原減少情況。

粘液染色

二、奧辛藍染色法（簡稱AB染色）：P99

1、染液配制：（1）AB液：（pH 2.5)奧辛藍8GS 1g，蒸餾水97ml，冰醋酸3ml，麝香草酚2粒（防腐）。（先配好3%冰醋酸，然后溶解奧辛藍。過濾后使用。pH值2.5～3.0之間.(2)0.5%中性紅水溶液: 中性紅 0.5g,蒸餾水加至 100ml。

2、奧辛藍染色步驟：

(1）石蠟切片脫蠟至水；(2)AB液染色20～30分鐘；（3）快速蒸餾水洗；（4）0.5%中性紅染1～2分鐘；（5）快速只能流水洗；

（6）95%酒精、無水酒精脫水；（7）二甲苯透明；（8）中性樹膠封固。

3、染色結果：酸性粘液物質（及真菌菌絲、隱 球菌的夾膜）呈藍色，中性粘液呈紅色，混合 粘液呈紫紅色，細胞核呈紅色。

4、粘液染色的應用

（1）黏液性腫瘤的診斷和鑒別診斷，如黏液瘤、黏液肉瘤、脂肪瘤、胃腸道低分化腺癌、軟骨黏液樣纖維瘤；

（2）用于結締組織疾病及慢性胃炎腸上皮化生等的診斷。

第五節 病原微生物染色 P100 石炭酸品紅抗酸桿菌染色法：P101

1、染色配制：

石炭酸品紅液：堿性品紅 1g，無水酒精 10ml，石炭酸（5%）水溶液100ml。

（首先將堿性品紅溶于無水酒精，然后與石炭酸水溶液混合，臨使用前過濾）。

2、抗酸桿菌染色步驟：（1）石蠟切片脫蠟至水；

（2）將石炭酸品紅液滴切片上，文火熱至蒸氣出現，離火染15～20分鐘；（3）蒸餾水洗；

（4）1%鹽酸酒精液分化，至無紅色染料流下止；（5）蒸餾水洗；（6）1%美藍液復染2分鐘；（7）95%酒精分化，美藍脫色，以示清楚；（8）無水酒精脫水；（9）二甲苯透明；（10）中性樹膠封固。

3、染色結果：抗酸桿菌(如結核桿菌、麻風桿菌 等）呈紅色，細胞核呈淡藍色。

4、病原微生物染色的應用

用于結核病的干酪樣壞死灶及麻風病中泡沫狀細胞（瘤型麻風）內的抗酸桿菌，其形態特點是：結核分支桿菌彎曲細長，長短粗細不一；而麻風桿菌短粗成堆，數量較多（稱為麻風團）。

淀粉樣物質的染色（書上無）Bennhola剛果紅染色法：

1、染色配制：

（1）1%剛果紅水溶液： 剛果紅 1g，蒸餾水100ml。（2）碳酸鋰飽和水溶液：碳酸鋰 1.25g，蒸餾水100ml。

2、染色結果：

淀粉樣物質呈紅色，其它組織呈淺紅色，細胞核呈藍色。

3、Bennhola剛果紅染色步驟：（1）石蠟切片脫蠟至水；（2）明礬蘇木素染液淡染細胞核3～5分鐘；（3）1%鹽酸酒精液稍分化。水洗1～2分鐘；（4）充分水洗返藍；（5）蒸餾水稍洗；

（6）1%剛果紅溶液染色10～30分鐘或更長；（7）經碳酸鋰飽和溶液處理1～2分鐘；

（8）80%酒精液急速分化至無紅色染液流下為止；（9）水洗1～2分鐘；

（10）95%酒精脫水及無水酒精脫水；（11）二甲苯透明；（12）中性樹膠封固。

4、淀粉樣物質的染色的應用

（1）淀粉樣物質染色能顯示變性程度:如全身淀粉樣變性；（2）用于全身消耗性疾病的觀察:如結核病、甲狀腺髓樣癌等；（3）用于腫瘤的診斷和鑒別診斷:如內分泌腫瘤的間質常出現淀粉樣物質沉著，又如甲狀腺髓樣癌、胰島細胞瘤、肺小細胞癌等，淀粉樣物質染色陽性可作為診斷重要依據；

（4）為某些疾病的診斷與鑒別診斷提供依據:鈣化上皮瘤、聲帶息肉等常出現淀粉樣變性，可為診斷依據。

黑色素染色

Masson-Fontana染色法：

1、染液配制：

（1）Masson-Fontana染：10%硝酸銀 15ml，蒸餾水 15ml。（將濃氨水逐滴加入10%硝酸銀液中直至微乳白色，并加入蒸餾水15ml，過濾后靜置1～2小時后使用。4℃冰箱保存，恢復室溫后使用，每次使用前應重新過濾）。（2）5%硫代硫酸鈉水溶液。

2、染色結果：黑色素、嗜銀細胞顆粒呈黑色，細胞核、膠原纖維呈紅色。

3、黑色素（Masson-Fontana）染色步驟：（1）10%福爾馬林固定組織，石蠟包埋；（2）切片脫蠟至水；（3）蒸餾水充分洗；

（4）用Masson-Fontana液室溫染18～48小時；（5）蒸餾水細數次；

（6）用5%硫代硫酸鈉水溶液固定5～10分鐘；（7）蒸餾水洗數次；

（8）用0.5%中性紅對比染色1～2分鐘；（9）蒸餾水洗5～10分鐘；（10）無水酒精脫水；（11）二甲苯透明；（12）中性樹膠封固。

4、黑色素染色的應用 主要用于黑色素瘤的診斷，尤其是無色素性的分化差的黑色素瘤的診斷極為重要；對淋巴結內轉移的腫瘤細胞，證實有無黑色素的存在對腫瘤的診斷可提供有利的證據；還有一些腫瘤及疾病中也存在色素，如色素性神經瘤、透明細胞肉瘤、黑色棘皮病、老年疣等等均可提供診斷依據。

第十五章 病理檢驗技術進展 P177

一、計算機圖像分析技術

二、流式細胞儀技術

三、分子病理學技術

第十六章 病理檔案管理 P190

二、組織制片常用玻璃器具：（1）染色缸：

（2）標本瓶：用于脫水、透明及染色；（3）培養皿：盛裝蛋清甘油；

（4）配制試劑用具：量筒、量杯、燒杯、三角燒瓶、漏斗、吸管、滴管、滴瓶、試劑瓶、蒸餾水瓶、玻璃棒及研缽等；（5）酒精燈：用于染液配制等；（6）載玻片：（7）蓋玻片：

3、免疫組化常用設備：（1）微波爐或高壓鍋；（2）微量加樣器；（3）微波震蕩器；

（4）恒溫水浴箱或濕盒；

4、常用器械盒工具：

（1）標本巨檢器械：解剖刀、手術刀、手術剪、鑷子、血管鉗、不繡鋼尺、搪瓷盤等；（2）尸體剖驗器械；

三、常用玻璃器材的清洗方法

（一）新購玻璃器皿的處理: 先用洗衣粉浸泡洗刷,自來水洗后再用1%～2%鹽酸水溶液浸泡數小時后，用自來水沖洗干凈，再用蒸餾水洗2次。

（二）使用后玻璃器皿的清洗方法：

（1）自來水沖洗；

（2）毛刷蘸洗衣粉洗擦干凈；

（3）自來水沖洗；

（4）涼干后放入清潔液內浸泡24小時；

（5）自來水沖洗干凈，最后用蒸餾水洗2次；

（6）把器皿置于有孔架上涼干或溫箱中烤干，備用。

清潔液的配制：重鉻酸鉀+濃硫酸+蒸餾水

（三）新購載玻片的處理：

高質量的已經處理，可直接使用。對不凈的可放入清潔液浸泡5～12小時以上，流水沖洗，蒸餾水清洗，95%酒精浸泡，擦干備用

（四）新購蓋玻片的清洗：

投入清潔液中浸泡1～2小時左右，經流水反復沖洗，蒸餾水洗，后投入95%酒精浸泡數分鐘，再轉入純酒精中浸泡，使用前用潔凈綢布擦干或在溫箱中烤干備用。

（五）舊載玻片的清洗：

用洗衣粉液煮沸30分鐘。

（六）舊蓋玻片的清洗：

先置入1%洗衣粉液中煮沸1分鐘，離火，待沸騰水泡平下后，再行煮沸，反復2～3次即可?；鶎俞t院病理科（室）應完成：

1、常規石蠟切片：按常規，在3~5天發出報告；

2、冷凍切片或快速石蠟切片：術中快速病理診斷。

3、常用特殊染色和免疫組織化學檢查：據臨床病理診斷的需要。

4、診斷細胞學檢查：完成臨床脫落細胞學及穿刺組織涂片檢查。

5、尸體剖驗檢查：與臨床醫師密切結合，開展新生兒及成人尸檢，提高診斷治療水平。

第三篇：病理實驗室配套設備建設方案

法醫病理實驗室配套設備建設方案

1、生物組織機脫水機

完美的標本處理和最安全標本保護。密封可靠的工程設計、創新的精密機械、用戶友好的操作界面。程序編寫簡單，9套程序任意設計，令最嚴謹的用戶游刃有余。雙倍標本處理的擴充潛力--同一儀器上增加一個籃筐即可增加一倍的標本處理量。

2、生物組織石蠟包埋機

分體式獨立冷臺，溫度恒-5℃，可放70只樣品，也可用作切片前樣本預冷；自動控溫熔蠟臺，可獨立使用。

3、生物組織切片機

切片厚度、修樣厚度、切片計數電腦程控自動設定；快速修塊及自動回縮功能；切片范圍 :1-60 μm；標本回縮 :220 μm；最大標本尺寸（長 × 寬）:20 ×55mm；一次性刀架、刀片。

4、生物組織漂片機

溫度控制精確，升溫快，自動恒溫調控。

5、生物組織烘片機

溫度控制精確，升溫快，自動控溫不熔蠟。

6、生物組織染色機

全自動染色流程；每小時1000片；27個液體缸；自動清洗樣品，避免污染。

7、生物顯微鏡 三目顯微鏡、平場相差物鏡5X、10X、20X、40X、100X（油鏡）、10X/25大視野目鏡、聚光鏡、12V 100W高亮度光源、透射光大載物臺、0.63倍C型圖像接口。

8、攤片機/ 烘片機

電子控溫，溫度自動調節，便于清理。

9、病理圖像分析軟件

先進的法醫病理圖片采集處理設備；標準的法醫學數理統計分析軟件；強大的法醫學資料檢索功能；完善的圖文報告系統，亦便于進行案例遠程會診分析。

10、實驗室常規工具及試劑一批

一次性刀片、載玻片、蓋玻片、包埋盒、存片盒、曬片盒、染色架、脫水盒、取材刀、切片專用石蠟；香柏油、二甲苯、無水酒精、95%酒精、蘇木素、伊紅、丙酮。

11、玻片存儲柜、臘塊儲存柜、病理取材柜

北京畢思特聯合科技有限公司有多年的產品專業經驗，擁有專業病理工程技術人員和維修工程師，和徠卡公司共同負責儀器的安裝及進行技術培訓以及售后儀器的保養和維修服務，目前，畢思特公司已經成功的在公檢法部門建立了大批現代化的法醫病理實驗室，如：北京市高級人民法院、廣東省公安廳病理室、廣州刑科所病理室、海南省公安廳病理室、深圳市檢察院病理室、湖南省公安廳病理室、珠海市公安局病理室等，這些單位利用先進的精密儀器設備在辦案中取得了巨大的成功。

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第四篇：病理檢驗技術試題

一、名詞解釋: 1.病理檢驗技術 2.診斷細胞學 3.常規染色 4.核異質細胞 5.媒染劑

二、填空: 1.常用的組織切片法有____、____、____、樹脂包埋切片法、碳蠟切片法、塑料包 埋切片法。2.染色的物理作用有 _________、_____________、_____________。3.組織固定的常用方法有___、____、___________和 ___________。4.診斷細胞學根據細胞標本來源的不同分為______和______。

5.細胞學制片的方法有 _________、____________、___________、__________。

6.常規石蠟切片制作的程序是取材、_______、固定后處理、___、____、浸蠟、___ _、切片、貼片等。

三、單項選擇(選擇最佳答案): 1.優質切片的先決條件是 A 固定 B 染色 C 透明 D 切片

2.下列哪種溶液被推薦為病理標本的首選固定液

A 10%福爾馬林液 B 中性緩沖甲醛液 C 酒精 D Zenker固定液 3.配制中性緩沖甲醛液最好用 A 蒸餾水 B 自來水 C 磷酸鹽 D 醋酸 4.常用的組織石蠟切片的透明劑是 A 乙醇 B 丙酮 C 乙酸 D 二甲苯 5.固定的目的下列哪項正確

A 增加組織硬度 B 防止細胞自溶 C 凝固細胞內物質 D 以上都對 6.最常用的石蠟切片機是

A 骨組織切片機 B 冰凍切片機 C 旋轉式切片機 D 超薄切片機 7.具有劇毒作用的固定劑是

A 重鉻酸鉀 B 四氧化鋨 C 鉻酸 D 苦味酸 8.常用于脫鈣的酸類是 A 硝酸 B 硫酸 C 醋酸 D 磷酸

9.下列哪項不是脫落細胞涂片常用的固定液

A 丙酮 B 95%乙醇 C 10%福爾馬林 D 乙醚酒精固定液 10.在常規制片中(HE染色)細胞核的染色原理正確的是

A 細胞核帶負電荷,呈酸性,易與帶正電荷的蘇木素酸性染料結合而染色 B 細胞核帶負電荷,呈堿性,易與帶正電荷的蘇木素堿性染料結合而染色 C 細胞核帶負電荷,呈酸性,易與帶正電荷的蘇木素堿性染料結合而染色 D 細胞核帶正電荷,呈堿性,易與帶正電荷的蘇木素堿性染料結合而染色 11.組織石蠟切片過程中透明的主要作用

A 脫去多余水分 B 固定作用 C 媒介作用 D 使組織變硬 12.變移上皮主要分布在下列哪一器官 A 支氣管 B 氣管 C 膀胱 D 胸腔 13.福爾馬林色素的形成是由于

A 還原作用 B 氧化作用產生蟻酸與血紅蛋白結合 C 與粘液蛋白結合 D 與核酸結合 14.HE 染色中呈藍色的成份是

A 紅細胞 B 細胞核 C 嗜酸性顆粒 D 細胞質 15.用過碘酸雪夫染色法(PAS 法)把糖原染成 A 紅色 B 藍色 C 紫色 D 黃色 16.石蠟包埋時應注意

A 有無特殊包埋面 B 石蠟中有雜物應過濾后使用 C 包埋溫度不宜過高 D 以上都對

17.在常規 HE 染色中細胞質的著色原理是 A 細胞質著色與 PH 值無關

B PH調至大于蛋白質等電點,被帶負電荷染料染色 C PH調至蛋白質等電點時染色

D PH調至胞質等電點以下,帶正電荷,被帶負電荷染料染色 18.有關糖原的固定說法錯誤的是 A 盡可能選取小塊新鮮組織 B 注意多次更換酒精混合固定液 C 用單一乙醇固定效果最佳

D 固定不透、不均時,表現為 “流水樣人工假象” 19.冷凍切片的注意事項錯誤的是 A 一般來說骨組織不能做冷凍切片 B 送檢組織盡可能新鮮

C 做冷凍切片的組織,切片前可用酒精固定 D 組織塊復溫時應在 37℃加溫速融

20.細胞學診斷方式的間接診斷法中最常用的是 A 二級法 B 四級法 C 三級法 D 巴氏五級診斷法 21.酒精進行脫水的一般順序是: A 70%酒精、80%酒精、90%酒精、95%酒精、無水乙醇

B 70%酒精、80%酒精、90%酒精、95%酒精、95%酒精、無水乙醇、無水乙醇 C 無水乙醇、無水乙醇、95%酒精、95%酒精、90%酒精、80%酒精、70%酒精、D 無水乙醇、95%酒精、90%酒精、80%酒精、70%酒精 22.Wathin-Starry 胃幽門螺桿菌染色法,螺桿菌顯示什么顏色 A 棕黑色 B 紅色 C 綠色 D 藍色

23.Mallory 磷鎢酸蘇木素染色法主要用于顯示 A 橫紋肌 B 膠原纖維 C 彈力纖維 D 網狀纖維

24.病理大體標本脂肪組織染色,配制蘇丹染料所用的乙醇濃度為 A 30%B 50%C 95%D 70% 25.在巴氏染色的宮頸/陰道涂片中高度可疑的惡性細胞,應診斷為幾級 A V B Ⅲ C Ⅳ D II 26.乙型肝炎表面抗原(HBsAg)有豐富的雙硫鍵, 被氧化形成磺酸后, 與染色液產生較強的親和力 而著色,使用的氧化液是

A 過碘酸 B 酸性高錳酸鉀 C 磷酸 D 鉻酸 27.蘇木精成為蘇木紅要經過 A 氧化 B 媒染 C 分化 D 藍化

28.淋球菌是革蘭陰性菌,在革蘭(Gram)染色中呈 A 紅色 B 藍色 C 紫色 D 綠色 29.常規 HE 染色中分化液的配制

A 75%酒精 100ml 加 5 ml鹽酸 B 75%酒精 99ml 加 l ml鹽酸 C 無水乙醇 99ml 加 l ml鹽酸 D 50%酒精 95ml 加 5 ml鹽酸 30.在組織染色過程中促染劑的作用

A 有促進染色能力,對染料和組織都有親和力 B 直接與組織結合 C 直接與染料結合 D 增強染料的染色能力 , 不參與染色反應

四、簡答題: 1.簡述合格切片的標準? 2.簡述常規石蠟切片 HE 染色的程序? 3.細胞學檢查的優缺點有哪些? 4.單個癌細胞的形態特點主要表現在細胞核上,可歸納為哪五大特征?

第五篇：病理實驗室組建方案

病理實驗室的環境污染、室內有毒物質危害一直是困擾病理科的難題。改善基層醫院病理實驗室的工作環境,加強對工作人員的安全防護,是一個迫在眉睫的問題。

基層醫院病理實驗室用房現狀不少基層醫院病理實驗室的安全防護在規范化、標準化上差距頗大。有些醫院的病理科只有一間不到40平方米的屋子,取材、制片、診斷、檔案保存等全部在一起,沒有布局上的分區。工作環境的空氣中彌漫著甲醛、二甲苯、汽溶膠等大量的有害氣體。

按照我國實驗室的建立標準,病理實驗室布局應明確分為清潔區、半污染區和污染區,污染區和半污染區之間設立緩沖間;實驗室應有足夠的存儲空間擺放物品以方便使用,在實驗室工作區域外還應有供長期使用的存儲空間;應安裝獨立的送排風系統以控制氣流方向和壓力梯度,確保氣流由清潔區流向污染區,同時確保實驗室空氣只能通過高效過濾后經專用排風管道排出等

因此,基層醫院病理科至少應有3間工作用房:診斷室、資料室(清潔區)、實驗室(半污染區)和標本取材室(污染區)。

病理實驗室組建方案

一、病理實驗室常用儀器設備

1、取材類（取材臺、通風柜、冷藏柜、蠟塊柜、切片柜、晾片柜）

2、脫水類（組織脫水機）

3、包埋類（包埋機、冷臺、冰箱）

4、切片類（石蠟切片機、冰凍切片機）

5、漂烘類（漂片儀、烘片儀、漂烘儀）

6、染色類（組織染色機、免疫組化染色機）

7、閱片類（顯微鏡、病理圖文分析系統）

8、細胞類（離心機、制片機、快速混勻器）

二、病理實驗室常用耗材、試劑

取材：取材刀、不銹鋼尺、天平稱、電子稱、福爾馬林溶液、大鑷子 脫水：脫水盒、福爾馬林溶液、乙醇、二甲苯、切片石蠟 包埋：不銹鋼包埋模、塑料包埋盒、冷凍包埋劑 切片：一次性刀片、大號毛筆、彎頭鑷子 漂片：載玻片、展片鑷子

染色：免疫組化筆、晾片板、二甲苯、乙醇、蘇木素、鹽酸、伊紅 封片：蓋玻片、中性樹膠

其他：定時鬧鐘、電熱吹風機、涼片盒、切片存放柜、蠟塊存放柜

三、房間設置安排

1、取材室：取材臺、冷藏柜、組織脫水機、自動染色機、通風柜

2、技術室：包埋機、冷臺、石蠟切片機、漂烘儀、冰箱

3、制片室：冰凍切片機、離心機、制片機、快速混勻器

4、閱片室：顯微鏡、病理圖文系統

5、檔案室：蠟塊存儲柜、切片存儲柜、晾片柜