第一篇：《儀器分析原理》大作業

江南大學現代遠程教育 考試大作業

考試科目:《儀器分析原理》

一、大作業題目（內容）：

1、帶狀光譜形成的機理。

一個電子能級的躍遷旺旺疊加許多振動能級，而一個振動能級的躍遷又可以疊加許多轉動躍遷。若分子中的原子多于兩個，躍遷的狀態就更加多樣復雜，分子發生電子能級躍遷時的這種能級多重疊現象，決定了分子光譜的形狀——帶狀光譜。

2、紫外—可見光譜理想的光源是什么，常用的光源有哪幾種？

在使用波長范圍內有足夠的輻射強度和良好的穩定性，輻射是連續的，其強度不隨波長的變化而發生明顯的變化。

紫外光源——氫燈或氘燈，波長160~375nm；可見光源——鎢燈或碘鎢燈，波長350~1000nm

3、元素的原子化。

試樣中待測元素轉變為氣態的能吸收特征輻射的基態原子的過程，為元素的原子化。

4、原子吸收光譜法的產生和過程。

產生：基于試樣蒸汽相中被測元素的基態原子對由光源發出的該原子的特征性窄頻輻射產生的共振吸收，其吸光度在一定濃度范圍內與蒸汽相中被測元素的基態原子濃度成正比，以此測定試樣中該元素含量。

過程：試液以一定的速率被燃氣和助燃氣帶入火焰原子化器中，當從空心陰極燈光源發出的某種元素的特征性銳線光產生的共振吸收，使光線減弱。火焰中基態原子的數目越多，濃度越大，吸光程度也越大，所以根據其吸光度即可測定試樣中待測的元素含量。

5、無火焰原子化裝置及原子化過程。

裝置：將試樣或試液置于石墨爐中用300A的大電流通過石墨爐并將其加熱到3000℃使試樣原子化。

過程：干燥-灰化-原子化-凈化四階段進行程序升溫

干燥：在灰化或原子化過程中，為了防止試樣突然沸騰或者滲入石墨爐壁中的試液激烈蒸發二引起飛濺，必須預干燥，溫度一般在100℃左右，每微升試液的干燥時間為1~2s。灰化：為了除去共存的有機物或低沸點無機物煙霧的干擾，灰化時間與試樣量成正比。一般低于600℃時大部分元素不會損失，所以灰化溫度應適當高一些時間短一些。原子化：一般原子化溫度每提高100%，信號峰提高百分之幾。

凈化：試樣熱分解的殘留物有時會附著在石墨爐的兩端，對下次樣品的測定存留著記憶效應，產生影響，故應在每次測定之后升高溫度，并通入惰性氣體“洗滌”，以使高溫石墨爐內部凈化

6、柱效和選擇性對色譜分離的影響。

改變流動相組成、極性（pH、強度或梯度洗脫）是改善柱效的最直接的因素，柱效影響到各組分色譜峰的峰形和它們之間的分離度。

選擇性受分離條件中流動相的組成、種類、pH、色譜柱溫度和固定相種類的影響，選擇性的大小影響到各組分的分離度。

7、從色譜圖上可以獲得哪些信息？

根據色譜峰的各種保留值，可以進行定性分析 根據色譜峰的面積、峰高，可以進行定量分析

根據色譜峰的保留值及其區域寬度，可以評價色譜柱的分離效能以及相鄰兩色譜峰的分離度 根據色譜峰兩峰的距離，可以評價固定相或流動相的選擇是否得當 根據色譜峰的個數，可以判斷樣品所含組分的最少個數

8、氣相色譜法的特點。

分離效率高（能同時分離和測定組成極其復雜的多組分混合物）、靈敏度高（檢測下限10-1

4-12 ~10g）、選擇性好（能分離性質極其相似的物質，如同位素、同分異構體、對映體組成的復雜混合物）、分析速度快（一般只需要幾分鐘幾十分鐘）、應用范圍較廣泛（在儀器允許的氣化條件下，凡能夠氣化且熱穩定的、不具腐蝕性的氣體都可以分析）

9、火焰離子化檢測器(FID)構造及工作原理。

以氫氣和空氣燃燒的火焰作為能源，利用被測組分——含碳有機物在火焰中燃燒產生離子，在外加電場作用下，使離子形成離子流，根據離子流產生的電信號強度，檢測出組份的含量。主要部件是離子室，由適應噴嘴、極化極（又稱發射極）、收集極、氣體入口和外罩組成。在離子室下部，載氣攜帶組份流出色譜柱后，在進入噴嘴前與氫氣混合，空氣由另一側導入。噴嘴用于點燃氫氣，在火焰上方桶裝收集極（作正極）和下方圓環狀極化極（作負極）間施加恒定的直流電壓，形成一個靜電場。被測組份隨載氣進入火焰，發生離子化反應，燃燒生成的正離子、電子在電場作用下向極化極和收集極做定向移動，形成電流。電流經放大，有記錄儀為色譜圖。

10、高效液相色譜的定性方法。

在定性分析中 , 采用保留值定性 , 或與其他定性能力強的儀器分析法連用 , 在定量分析 中 , 采用測量峰面積的歸一化法、內標法或外標法 等 , 但高效液相色譜在分離復雜組分式樣時 , 有些 組分常不能出峰 , 因此歸一化法定量受到限制 , 而 內標法定量則被廣泛使用。

11、蒸發光散射檢測器的原理和應用。含有溶質的溶劑流首先被霧化，并被氣流攜帶通過蒸發室。溶劑揮發掉，留下溶質顆粒形成的薄霧，它可將光散射至光敏器件。信號被放大后，一定的電壓輸出可以使我們了解通過光檢測池的溶質顆粒的濃度。

采用激光技術，具有更高的檢測靈敏度、分析效能和重現性。在制藥、藥物篩選、食品質量檢驗和化學分析應用中，是檢測半揮發性和不揮發性溶質的理想選擇。此外，低擴散和高數據輸出速率(80 Hz)使它非常適合快速液相色譜應用，尤其是采用短色譜柱的應用。

12、液相色譜與氣相色譜的相同點。

基本原理概念及理論基礎（如保留值、塔板理論、速率理論、容量因子、分離度等）相同，,都是利用物質在流動相和固定相中的分配系數的差別，從而在兩相間反復多次（1000-1000000次，甚至更多）的分配，使原來分配系數差別很小的各組分分離開來。都具有高靈敏度、高效能和高速度的特點。

二者的定性和定量分析，與氣相色譜分析相似，在定性分析中，采用保留值定性，或與其他定性能力強的儀器分析法連用；在定量分析中，采用測量峰面積的歸一化法、內標法或外標法等，但高效液相色譜在分離復雜組分式樣時，有些組分常不能出峰，因此歸一化法定量受到限制，而內標法定量則被廣泛使用。

第二篇：吉林大學作業《儀器分析》在線作業二

一、單選題(共 10 道試題,共 50 分)1.熱力學理論是以（）為代表 A.塔板理論 B.速率理論

滿分：5 分

2.下列哪項不是高效液相色譜法 A.應用范圍廣 B.靈敏度高 C.分析速度快 D.需要高柱溫

滿分：5 分

3.核磁共振的研究對象為具有磁矩的（）A.原子 B.離子 C.基態原子 D.原子核 E.電子

滿分：5 分

4.（）可用于藥物有關物質的檢查和雜質限量的檢查 A.薄層色譜 B.紙相色譜

滿分：5 分

5.由炙熱的固體或液體發出的光譜，稱為（）A.線狀光譜 B.帶狀光譜 C.連續光譜 D.斷續光譜

滿分：5 分

6.熒光光譜和原子吸收光譜常采用下列哪種光源 A.紫外光源 B.可見光源 C.紅外光源 D.金屬蒸汽燈

滿分：5 分

7.原子吸收分光光度法是基于蒸汽中的（）對特征電磁輻射的吸收來測定試樣中該元素含量的方法 A.原子 B.離子 C.基態原子 D.激發態原子 E.電子

滿分：5 分

8.下面色譜法中是以按操作形式分類的色譜有 A.氣相色譜法 B.柱色譜法 C.分配色譜法 D.吸附色譜法

滿分：5 分

9.一般按紅外線波長的不同將紅外線劃分為三個區域，請問中紅區的波長范圍是多少？ A.0.76-2.5μm B.2.5-15μm C.2.5-25μm D.>25μm

滿分：5 分

10.在固定液中，OV-101屬于 A.非極性物質 B.中等極性物質 C.極性物質

D.能形成氫鍵的物質

滿分：5 分

二、多選題(共 5 道試題,共 30 分)1.紫外—可見分光光度計的主要部件有 A.光源 B.單色器 C.吸收池 D.檢測器

E.訊號處理與顯示器

滿分：6 分

2.化學位移的影響因素有 A.局部屏蔽效應 B.磁各向異性效應 C.雜化效應 D.分子間氫鍵 E.溶劑效應

滿分：6 分

3.質譜儀的主要性能指標有 A.分辨率 B.靈敏度 C.質量范圍 D.質量精確度

滿分：6 分

4.紅外光譜儀由（）組成 A.輻射源 B.吸收池 C.單色器 D.檢測器 E.記錄儀

滿分：6 分

5.常用吸附劑有 A.硅膠 B.氧化鋁 C.聚酰胺 D.氧化鐵

滿分：6 分

三、判斷題(共 10 道試題,共 20 分)1.按照Beer定律，吸光度A與濃度c之間的關系應該是一條通過原點的直線 A.錯誤 B.正確

滿分：2 分

2.原子吸收分光光度法常用的定量分析方法有標準曲線法、標準加入法和內標法 A.錯誤 B.正確

滿分：2 分

3.色譜分離的塔板理論始于馬丁和辛格提出的塔板模型 A.錯誤 B.正確

滿分：2 分

4.毛細管柱的制備包括拉制、柱表面處理、固定液的涂漬等步驟 A.錯誤 B.正確

滿分：2 分

5.檢測器是高效液相色譜儀的三大關鍵部件之一 A.錯誤 B.正確

滿分：2 分

6.原子化的方法主要有火焰原子化法和非火焰原子化法兩種 A.錯誤 B.正確

滿分：2 分

7.氧化鋁的含水量越高，活性越強 A.錯誤 B.正確

滿分：2 分

8.在原子吸收分光光度法中，銳線光源的發射線與原子吸收線的中心頻率完全一致是用峰值吸收代替積分吸收進行定量的必要條件 A.錯誤 B.正確

滿分：2 分

9.原子吸收分光光度法中，通常選擇共振吸收線作為分析線 A.錯誤 B.正確

滿分：2 分

10.在質譜中的大多數離子峰均是根據有機物自身裂解規律形成的 A.錯誤 B.正確

滿分：2 分

第三篇：儀器分析題目

儀器分析題目 高效液相色譜儀的種類有哪些？基本組成是什么？

答：高效液相色譜儀的種類很多，根據其功能不同，主要分為分析型，制備型和專用型。但其基本組成是類似的，主要由輸液系統，進樣系統，分離系統，檢測系統，記錄及數據處理系統組成。包括溶劑貯存器，高壓泵，進樣器，色譜柱，檢測器和記錄儀等主要部件。在液相色譜中，色譜柱能在室溫下工作，不需要恒溫的原因是什么？

答：由于組分在液-液兩相的分配系數隨溫度的變化較小，因此液相色譜柱不需恒溫。高效液相色譜法的基本概念是什么？

答：在經典液相色譜的基礎上，引入了氣相色譜（GC）的理論，在技術上采用了高壓泵，高效固定相和高靈敏度檢測器，使之發展成為分離速率，高分離效率，高檢測靈敏度的高效液相色譜法，易稱為現代液相色譜法。柱外效應的解釋。

答：由色譜柱以外的因素引起的色譜峰形擴展的效應，柱外因素常指從進樣口到檢測器之間，除色譜柱以外的所有死時間，如進樣器，連接管，檢測器等的死體積，都會導致色譜峰形加寬，柱效下降。高效液相色譜法的特點是什么？

答：高效液相色譜法的分離效能高，選擇性高，檢測靈敏，分析速度快，應用范圍廣，6為什么作為高效液相色譜儀的流動相在使用前必須過濾、脫氣？常用的脫氣方法？ 答案：高效液相色譜儀所用溶劑在放入貯液罐之前必須經過0.45μm濾膜過濾，除去溶劑中的機械雜質，以防輸液管道或進樣閥產生阻塞現象。所有溶劑在上機使用前必須脫氣；因為色譜住是帶壓力操作的，檢測器是在常壓下工作。若流動相中所含有的空氣不除去，則流動相通過柱子時其中的氣泡受到壓力而壓縮，流出柱子進入檢測器時因常壓而將氣泡釋放出來，造成檢測器噪聲增大，使基線不穩，儀器不能正常工作，這在梯度洗脫時尤其突出。常用的脫氣法有以下幾種：（1）加熱脫氣法;（2）抽吸脫氣法;（3）吹氦脫氣法;（4）超聲波振蕩脫氣法。

7對液相色譜流動相有何要求? 解：用作液相色譜流動相的溶劑，其純度和化學特性必須滿足色譜過程中穩定性和重復性的要求。對樣品要有一定的溶解能力，粘度小，化學穩定性好，避免發生不可逆的化學吸附。溶劑應與檢測器相匹配，不干涉所使用檢測器的工作，制備色譜的溶劑應不干擾對分離各組分的回收。除此以外，選擇的溶劑對所給定的樣品組分具有合適的極性和良好的選擇性。8何謂梯度洗脫，適用于哪些樣品的分析?與程序升溫有什么不同?

解：梯度洗脫就是在分離過程中.讓流動相的組成、極性、ph值等按‘定程序連續變化。使樣品中各組分能在最佳的k下出峰。使保留時間短、擁擠不堪、甚至重疊的組分，保留時間過長而峰形扁平的組分獲得很好的分離，特別適合樣品中組分的k值范圍很寬的復雜樣品的分析。梯度洗脫十分類似氣相色譜的程序升溫，兩者的目的相同。不同的是程序升溫是通過程序改變柱溫。而液相色譜是通過改變流動相組成、極性、ph值來達到改變k的目的。

9什么叫正相色譜？什么叫反相色譜？各適用于分離哪些化合物？在正相色譜與反相色譜體系中，組分的出峰次序

正相色譜法：流動相極性小于固定相極性的色譜法。用于分離溶于有機溶劑的極性及中等極性的分子型物質，用于含有不同官能團物質的分離。反相色譜法：流動相極性大于固定相極性的色譜法。用于分離非極性至中等極性的分子型化合物。

在正相色譜體系中組分的出峰次序為：極性弱的組分，在流動相中溶解度較大，因此k值小，先出峰。極性強的組分，在固定相中的溶解度較大，因此k值大，后出峰。

在反相色譜中組分的出峰次序為：極性弱的組分在固定相上的溶解度大，k值大，后出峰，相反極性強的組分在流動相中溶解度大，k值小，所以先出峰。10儀器考察 1）補充完整高效液相色譜分析流程圖。2）高效液相是由哪幾部分系統構成的？ 3）什么是梯度洗脫？梯度洗脫有什么好處？

1）1

4 5 6 2）輸液系統，進樣系統，分離系統，檢測系統，記錄與數據處理。

3）梯度洗提，就是載液中含有兩種（或更多）不同極性的溶劑，在分離過程中按一定的程序連續改變載液中溶劑的配比和極性，通過載液中極性的變化來改變被分離組分的分離因素，以提高分離效果。好處：改善分離，提高分離度，加快分析速度，改善峰形，減少拖尾，利于微量分析。

1試述紫外吸收光譜，紅外吸收光譜和核磁共振波譜產生的原因。

答：價電子躍遷；分子振動或轉動；電子自旋或核自旋。或轉動；電子自旋或核自旋。

2簡述紅外吸收光譜產生的條件；是否所有的分子振動都會產生紅外吸收光譜?為什么?

答（1）輻射應具有使物質產生振動躍遷所需的能量，即必須服從νL= △V·ν

（2）輻射與物質間有相互偶合作用，偶極矩必須發生變化，即振動過程△μ≠ 0；（3）并非所有的分子振動都會產生紅外吸收光譜,具有紅外吸收活性,只有發生偶極矩的變化時才會產生紅外光譜.3.紅外光譜定性分析的基本依據是什么？簡要敘述紅外定性分析的過程。

答：基本依據：紅外對有機化合物得定性具有鮮明的特征，因為每一化合物都有特征的紅外光譜，光譜帶的數目 位置 形狀 強度均隨化合物及聚集態的不同而不同。

分析過程：（1）試樣的分離和精制；（2）了解試樣有關的資料;（3）譜圖解析；（4）與標準譜圖對照；（5）聯機檢索

4何為基團頻率？何為特征吸收峰？ 答：基團頻率和特征吸收峰物質的紅外光譜是其分子結構的反映，譜圖中的吸收峰與分子中各基團的振動形式相對應。多原子分子的紅外光譜與其結構的關系，一般是通過實驗手段得到。這就是通過比較大量已知化合物的紅外光譜，從中總結出各種基團的吸收規律。實驗表明，組成分子的各種基團，如O-H、N-H、C-H、C=C、C=OH和C= C等，都有自己的特定的紅外吸收區域，分子的其它部分對其吸收位置影響較小。通常把這種能代表及存在、并有較高強度的吸收譜帶稱為基團頻率，其所在的位置一般又稱為特征吸收峰

5伸縮振動和彎曲振動有什么區別？

答：伸縮振動 指成鍵原子沿著價鍵的方向來回地相對運動。在振動過程中，鍵角并 伸縮振動 不發生改變，如碳氫單鍵，碳氧雙鍵，碳氮三鍵之間的伸縮振動。彎曲振動又分為面內彎曲振動和面外彎曲振動，用δ、γ表示。如果彎曲振動的方向垂直于分子平面，則稱面外彎曲振動，如果彎曲振動完全位于平面上，則稱面 內彎曲振動。剪式振動和平面搖擺振動為面內彎曲振動，面外搖擺振動和扭曲變形振動為面外彎曲振動。6.影響基團頻率的因素？

答：內部因素：（1）.電子效應 包括誘導效應、共軛效應和中介效應，它們都是由于化學鍵的電子分布不均勻引起的。

（2）氫鍵的影響氫鍵的形成使電子云密度平均化，從而使伸縮振動頻率降低。

（3）振動耦合 當兩個振動頻率相同或相近的基團相鄰具有一公共原子時，由于一個鍵的振動通過公共原子使另一個鍵的長度發生改變，產生一個“微擾”，從而形成了強烈的振動!相互作用。

外部因素：（1）同一物質在不同狀態時，由于分子間相互作用力不同，所得光譜也往往不同。

（2）在溶液中測定光譜時，由于溶劑的種類、溶液的濃度和測定時的溫度不同，同一物質所測得的光譜也不相同。7簡介紅外光譜儀

答：紅外光譜儀是利用物質對不同波長的紅外輻射的吸收特性，進行分子結構和化學組成分析的儀器。紅外光譜儀通常由光源，單色器[，探測器和計算機處理信息系統組成。根據分光裝置的不同，分為色散型和干涉型。對色散型雙光路光學零位平衡紅外分光光度計而言，當樣品吸收了一定頻率的紅外輻射后，分子的振動能級發生躍遷，透過的光束中相應頻率的光被減弱，造成參比光路與樣品光路相應輻射的強度差，從而得到所測樣品的紅外光譜。

8什么是紅外光譜法？

答：紅外光譜法又稱“紅外分光光度分析法”。簡稱“IR”,分子吸收光譜的一種。利用物質對紅外光區的電磁輻射的選擇性吸收來進行結構分析及對各種吸收紅外光的化合物的定性和定量分析的一法。被測物質的分子在紅外線照射下，只吸收與其分子振動、轉動頻率相一致的紅外光譜。對紅外光譜進行剖析，可對物質進行定性分析。化合物分子中存在著許多原子團，各原子團被激發后，都會產生特征振動，其振動頻率也必然反映在紅外吸收光譜上。據此可鑒定化合物中各種原子團，也可進行定量分析。

9紅外光譜法的特點 ？

答：紅外光譜法的哇特征性強、測定快速、不破壞試樣、試樣用量少、操作簡便、能分析各種狀態的試樣、分析靈敏度較低、定量分析誤差較大.10、色譜圖上可以讀到的信息 ？

答：

1、色譜峰個數，判斷樣品中所含組份最少個數

2、定性 Tr

3、定量 A∞H

4、分離效能

5、流動相和固定相

11、紅外實際峰比理論峰少的原因？

答：

1、偶極矩的變化，△U=0,振動不產生紅外吸收 如C02 非紅外性

2、譜線振動

3、儀器分辨率，靈敏度不夠

4、泛頻峰的產生

第四篇：06儀器分析

精油的儀器分析

精油成分分析除上面提到的物理和化學法外，目前常用的是儀器分析法。在確定精油成分時，儀器分析是必要的物段。在確定某一成分化學結構前，首先要提純該樣品，然后采用多種儀器分析物段來確定該化合物的結構。通常采用兩種方法來對分離出來的組分進行鑒定，一是保留數據法，另一個是研究波譜特征法。

“保留數據法”的優點是除了色譜法所使用的儀器和知識外，不需要有另個的儀器和專門知識。此方法要求色譜條件嚴格標準化，以便有確定的保留值。而且，現在的經驗做法是選擇幾個已知化合物加入混合物中，以這此已知化合物作為保留值參考點，由插值法求未知化合物的保留值。因此在氣相色譜中，以正烷烴系列化合物作為參考化合物得到了廣泛的應用。保留值有可能與參考值偶然巧合，因而一個保留值是不足以鑒定某一物質的，兩個或兩個以上的保留值偶然巧合的情況就大減少了，因此在保留數值上作鑒定時，習慣上至少要有兩個很好選擇的不同系統：在氣液色譜中用兩個極性不同的柱子，在薄層色譜中可用雙向展開。

波譜法是大多數研究者使用的方法，用于鑒別色譜餾分的波譜中，質譜法和紅外光譜法使用得最普遍。因為對于微量樣品來說，它們解決問題迅速，而且每個有機化合物都具有其特征的質譜（MS）和紅外光譜（IR）。IR能確定分子功能基團的特征，MS一般揭示分子量和結構特征。

氣相色譜和質譜聯用（GC—MS）是芳香化合物領域中經常采用的，根據每個GC峰的質譜圖，通過對照參考圖譜，或用Varian質譜系統SS100檢索進行鑒定。在缺少參考時，根據經驗，研究者可試圖從質譜碎片圖去闡明化合物的結構。

IR與氣相色譜儀直接連接成GC—IR，它和GC-MS一樣，從氣相色譜儀流出的成分可依次測定IR光譜。

還可以用核磁共振（NMR）提供有機化合物結構的重要數據，如化學位移常數，偶合常數等。

小結

用上述儀器組全進行分析雖能按照各種成分含量多少依次測定出來，但從香氣再現這一目的來看，用這種方法也不一定能到理想的結果。因為，形成香氣的成分對于香氣的貢獻不完全由含量多少來決定，有些閾值低的成分即使含量低，對于香氣也是十分重要的。因此采用鼻子聞的方式進行官能評價是十分必要的。

第五篇：儀器分析總結

1.紫外可見光譜產生原因?有哪些特點? 原因:分子具有不同的特征能級，當分子從外界吸收能量后，就會發生相應的能級躍遷。同原子一樣，分子吸收能量具有量子化特征，記錄分子對電磁輻射的吸收程度與波長的關系可以得到吸收光譜。特點:靈敏度高準確度好選擇性好，儀器價格低廉操作簡便，快速分析速度快應用范圍廣。

2.電子躍遷有哪幾種類型?它們的能量補充范圍。從化學鍵的性質考慮，與有機化合物分子的紫外－可見吸收光譜有關的電子為：形成單鍵的σ電子，形成雙鍵的π電子以及未共享的或稱為非鍵的n電子．電子躍遷發生在電子基態分子成鍵軌道和反鍵軌道之間或基態原子的非鍵軌道和反鍵軌道之間。處于基態的電子吸收了一定的能量的光子之后，可分別發生σ→σ*,σ→π*, π → σ*, n →σ*, π →π*, n→π*等躍遷類型．π →π*, n →π*所需能量較小，吸收波長大多落在紫外和可見光區，是紫外－可見吸收光譜的主要躍遷類型．四種主要躍遷類型所需能量的大小順序為：n →π* < π →π* n →σ* < σ→σ*.一般σ→σ*躍遷波長處于遠紫外區，＜200 nm, π →π*, n →σ*躍遷位于遠紫外到近紫外區，波長大致在150~250nm之間，n →π*躍遷波長近紫外區及可見光區，波長位于250nm~800nm之間．

3.紫外可見光譜的吸收光譜帶有幾種？原因，特點。首先有機化合物紫外吸收光譜中，如果存在飽和基團，則有σ →σ*躍遷吸收帶，這是由于飽和基團存在基態和激發態的 σ電子，這類躍遷的吸收帶位于遠紫外區．如果還存在雜原子基團，則有n →σ*躍遷，這是由于電子由非鍵的n軌道向反鍵σ軌道躍遷的結果，這類躍遷位于遠紫外到近紫外區，而且躍遷峰強度比較低．如果存在不飽和C=C雙鍵，則有π →π*, n →π*躍遷，這類躍遷位于近紫外區，而且強度較高．如果分子中存在兩個以上的雙鍵共軛體系，則會有強的K吸收帶存在，吸收峰位置位于近紫外到可見光區。對于芳香族化合物，一般在185nm，204nm左右有兩個強吸收帶，分別成為E1, E2吸收帶，如果存在生色團取代基與苯環共軛，則E2吸收帶與生色團的K帶合并，并且發生紅移，而且會在230~270nm處出現較弱的精細吸收帶（B帶）．這些都是芳香族化合物的特征吸收帶。4.影響紫外分子光譜的因素有哪些？

共軛效應：分子中共軛體系形成大π鍵，使得各能級之間的能量差減小，因而產生吸收峰長移并產生深色效應的現象。助色效應：當助色團與發色團相連，由于助色團的n電子與發色團的π電子發生共軛，結果使得吸收峰長移產生深色效應的現象。超共軛效應：由于烷基的?電子與共軛體系的π電子共軛，使得吸收峰長移并產生深色效應的現象。溶劑效應：由于溶劑的極性不同引起某些化合物的吸收峰發生長移或短移的現象。

5.朗伯比爾定律成立的前提條件是什么？他在紫外可見分光光度法中的地位和意義。它的表達式說明了什么？（1）入射光為單色光。溶液為稀溶液(2)地位及意義。是吸光度法的基本定律。(3)表達式。表明在稀溶液中。物質對單色光的吸光度與吸光物質溶液的濃度和液層厚度的乘積成正比。

6.在紫外可見分光光度定量分析中，影響準確度的因素有哪些？如何減小測定誤差？

(1)樣品溶液濃度的影響:比爾定律只適用于濃度小于0.01mol/L的稀溶液,因為濃度高時吸光粒子間的平均距離減小，受粒子間電荷分布相互作用的影響，他們的摩爾吸收系數發生改變導致偏離比爾定律，因此。待測溶液的濃度應該控制在0.01mol/L以下。(2)單色光不純引起的偏離:比爾定律只適用于單側光，但一般的分光機所提供的入射光并不是純的單色光，而是波長范圍較窄的復色光，由于同一物質對不同波長光的吸收程度不同導致對比爾定律的偏離。實際上理論上的單色光是不存在的。我們所做的只能是讓入射光的光譜帶寬盡可能的小，要盡可能的靠近單色光。(3)其他原因:光通過吸收池時約有十分之一或更多光能因反射而損失。用參比溶液對比來補償。由于儀器性能限制通過吸收知道光不是平行光，而是稍稍傾斜的光束。紫外可見分光光度計主要部件類型和性能原理。光源發射強度足夠而穩定的連續入射光。

原理:電子的能級躍遷產生的，利用分子對紫外可見光的吸收特性建立起來的分析方法

儀器結構:光源－單色器－吸收池－檢測器－信號指示系統。

光源（1）鎢燈或鹵鎢燈,波長范圍350至一千納米，作為可見光源（2）氫燈或氘燈，氣體放點發光，發射150-400nm的紫外連續光譜。

單色器:將來自光源的含各種波長的復色光按波長順序色散并,從中分離所需波長的單色光。(1)色散元件，菱鏡 光柵(2)準直鏡，是以狹縫為焦點的聚焦鏡，將進入單色器的發散光變成平行光，又將發散后的單色平行光聚焦于出光狹縫(3)狹縫。為光的進出口包括進光狹縫和出光狹縫，進光狹縫限制雜散光進入，單色光由出光狹縫分出。

樣品池：用于乘裝試液，為光學玻璃池或石英池

檢測器：是一類光學電轉器，將接受的光學電訊號轉變為便于測量的電訊號，常用的有光電池，光電管及光電信增管。

信號處理與顯示：將檢測器輸出的信號放大并顯示。9.判斷在紫外可見光區，下列化合物產生幾個吸收帶。乙烯 K帶 苯乙烯 E帶，K帶 丁二烯 K帶 R帶 苯甲醛 R帶 E帶

8.舉例說明紫外可見分光光度法在定性分析中的應用?（1)紫外光源可以用于有機化合物的定性分析通過測定物質的最大吸收波長和吸光系數或者將未知化合物的紫外吸收光譜與標準譜圖對照可以確定化合物的存在。(2)可以用來推斷有機化合物的結構。(3)進行化合物純度的檢查。(4)進行有機化合物，配合物或者部分無機化合物的定量測定。

1.從原理和儀器兩方面比較分子熒光，磷光的異同點。熒光是激發單重態最低振動能級至基態各振動能級間躍遷產生的，磷光是由激發三重態的最低振動能級至基態各振動能級間躍遷產生的。/分子熒光和分子磷光屬于光致發光，但是熒光發射，在電子能量變化中不涉及電子自旋的改變，熒光的壽命較短為10-5s。磷光發射，在電子能量變化中伴隨電子自旋的改變，磷光的壽命較長，為幾秒甚至更長。/化學發光基于在化學反應過程中，生成了能產生發射光譜的激發態物質，產生的光譜不一定是分析物本身的光譜，而往往是被分析物反應生成物質的光譜，有時被分析物用作抑制劑或催化劑。3.酚酞與熒光素，哪一種的熒光量子產率高。

熒光素的熒光量子產率高。因為熒光素分子中的氧橋構成三環共面的剛性平面，而這種結構可以減少分子的振動，使分子與溶劑或其他溶質分子的相互作用減小，也就減少了碰撞去活的可能性，又含羥基等給電子基增強了兀電子共軛強度，使最低激發態單重態與基態之間的躍遷概率增加，使熒光增強。

6.為什么分子熒光光度分析法的靈敏度通常比分子吸光光度法的要高。

因為熒光是從入射光的直角方向檢測，即在黑背景下檢測熒光的發射，而且熒光的發射強度大，可以通過各種方法來增強，從而提高檢測的靈敏度，而分子吸光光度法中存在著嚴重的背景干擾，因此，分子熒光光度法靈敏度通常比分子吸光光度法的高。

7.激發光譜，熒光發射光譜和吸收光譜三者的關系。熒光發射光譜的形狀與激發光波長無關。熒光發射光譜與吸收光譜是鏡像關系。（1）吸收光譜: 當一束連續光通過透明介質時，如果光波能量和介質中從基態到激發態的能量間隔相等，介質中的狀態將由基態被激發到激發態，透過透明介質的光將因這樣的吸收而光強減弱，由于激發態不同，它們的吸收能量不一樣，這樣在記錄透過透明介質后的光強時就形成了光強隨著波長變化的譜線，即吸收光譜。吸收光譜可以給出材料基質和激活離子的激發態能級的位置和它們的分布情況。（2）熒光光譜: 固定激發波長，掃描發射波長，所得到熒光強度—發射波長的關系曲線。可用于熒光物質的鑒別，并作為熒光測定時選擇恰當的測定波長或濾光片的依據。

（3）激發光譜: 固定發射波長，掃描激發波長，而獲得熒光強度——發射波長的關系曲線。可用于熒光物質的鑒別，并在進行熒光測定時選擇適宜的激發波長。4.苯胺在PH3還是PH10時熒光更強，解釋之。

由于苯胺帶有堿性的胺基，它在PH7~12的溶液中以分子形式存在，會發出藍色的熒光，當PH為3時，溶液中的苯胺多數以離子形式存在，因此苯胺在PH10時的熒光比PH3時更強。

1、比較原子吸收與分子吸收的異同。

基態原子吸收其共振輻射，外層電子由基態躍遷至激發態而產生原子吸收光譜，原子吸收光譜位于光譜的紫外區和可見區，原子吸收光譜是線狀光譜。分子吸收光譜也叫紫外可見吸收光譜法是利用某些物質的分子吸收200~800Nm光譜區的輻射來進行分析測定的方法，這種分子吸收光譜產生于價電子和分子軌道上的電子能級間的躍遷，是帶狀光譜。

3、原子化器的類型及特點

（一）火焰原子化器（1）霧化器：利用壓縮空氣等將樣品變成高度分散狀態的細小霧滴，生成的霧滴隨氣體流動并被加速，形成粒子直徑為微米級的氣溶膠，氣溶膠粒子直徑越小，火焰中生成的基態原子越多。（2）混合室：使氣溶膠粒層更小更均勻，使燃氣助燃氣充分混合，記憶效應小。（3）燃燒器：通過火焰燃燒使試樣霧滴在火焰中經過干燥蒸發熔融和熱解毒過程，將待測原素原子化，要求原子化程度高噪聲小，火焰穩定，光路原子數目多。

化學計量焰：火焰層次清晰，溫度高，穩定，干擾小，適合多種元素測定。

復燃焰：溫度較化學計量焰較低，有還原性，適于易形成難離解氫化物的元素測定。

貧燃焰：溫度較低，有較強氧化性易于測定易離解易電離的元素。

（二）非火焰原子化器: 由電源，爐體和石墨管三部分組成，利用電熱陰級發射等離子體或激光等方法使試樣中待避元素形成基態自由原子。

4、什么是銳線光源，為什么原子吸收要使用銳線光源。銳線光源：發射線半寬度小于吸收線半寬度的光源，且發射線中心頻率與吸收線中心頻率一致的光源。

在使用銳線光源時，光源發射線半寬度很小，并且發射線和吸收線的中心頻率一致。這時發射線的輪廓可以看作一個很窄的矩形，即峰值吸收系數Kn，在此輪廓內不隨頻率改變而改變，吸收僅限于發射線輪廓內。這樣，求出一定的峰值吸收系數即可測定出一定的原子數。所以把銳線當做單色光而測量其峰值吸光度即可用朗伯－比爾定律進行定量分析。

5、用石墨爐原子化器進行測定時，為何要通惰性氣體 加熱光源供給原子化器能量，一般采用低壓、大電流的交流電，為保證爐溫恒定，要求提供的電流穩定，爐溫可在1~2s內達3000℃，為防止試樣及石墨管氧化，必須不斷通入惰性氣體，有利于難溶氧化物的原子化。

7、氘燈法校正背景存在問題

使用：先用銳線光源測定分析線的原子吸收和背景吸收的總吸光度，再用連續光源發出的輻射在同一波長下測定背景吸收，計算倆次測定吸光度之差，即可使背景吸收得到校正。

問題：只適用于波長190-350nm的吸收線，而且要求氘燈和元素空心陰極燈發出的倆光束必須嚴格重合。

8、原子吸收的干擾，如何消除。

（1）物理干擾：試樣與標準樣的黏度，表面張力，相對密度等物理性質不同時，將會使噴入火焰的速度和霧滴大小不同。由試樣和標準樣物理性質的差別所產生的干擾稱為物理干擾。消除：配置與試樣溶液組成相似的標準溶液，或采用標準加入法。

（2）電離干擾：由于很多元素在高溫火焰中產生電離，使單位體積內的基態原子數減少，靈敏度降低。消除：適當控制火焰溫度，加入消電離劑（鉀，鈉等易電離的堿金屬）

（3）化學干擾：被測元素與共存的其他元素發生化學反應，生成一種穩定化合物而影響原子化效率。

1、陽離子的干擾：部分被測元素與干擾離子形成難溶的混合晶體

2、陰離子的干擾：主要是磷酸根離子和硫酸根離子對堿金屬的干擾。消除：1.加入釋放劑，使被測元素從化合物中釋放出來。2.加入絡合保護劑，使被測元素在處于保護層的情況下進入火焰，在高溫下保護劑先被破壞而釋放出被測元素或與干擾元素生成穩定化合物，將被測元素解離出來。3.加入助熔劑，對高熔點的待測物起助熔作用，提高靈敏度。4.利用適當高溫火焰。5.沉淀、溶劑萃取、離子交換等方法。6.采用標準加入法。（4）光譜干擾1.光譜干擾：由于分析的譜線與鄰近線不能完全分開而產生光譜干擾，另一種是由于發射共振線輪廓與火焰非測定元素的吸收線輪廓相互重疊所造成的干擾。消除：采用適宜狹縫寬度，降低燈電流或采用其他分析線。2.背景干擾：產生原因見6 消除：1.臨近非共振線校正：用分析線測量總吸光度。以空心陰極燈發射的與分析線鄰近的非吸收線測量背景吸光度。2.氘燈自動背景校正：先用銳線光源測定分析線的原子吸收和背景吸收的總吸光度，再用連續光源發出的輻射在同一波長下測定背景吸收，計算兩次測定吸光度之差，即可使背景吸收得到校正。3.親曼效應背景校正：根據磁場將簡并的譜線分裂成具有不同偏振特性的成分，由譜線的磁特性和偏振特性~別被測元素和背景吸收。4.自吸收背景校正：首先使空心陰極燈在弱脈沖低電流下工作，此時發射輪廓較窄的譜線，用以測定待測~與背景吸收，再以短暫的強脈沖高電流通過空心陰極燈，使其產生自吸收并使發射線的譜線輪廓變寬，兩種條件~定的吸收光度之差，是校正了背景吸收的凈原子吸收的吸光度。

6、原子吸收光譜分子產生背景的原因及影響（1）分子吸收：在原子化過程中生成的氣體分子、氧化物、鹽類和氫氧化物等分子對光的吸收引起的干擾（減少濃度，高溫火焰）（2）光散射：在原子化過程中產生的固體微粒對光的阻擋而發生的散射現象。（3）火焰氣體吸收：火焰氣體對光譜產生吸收，波長越短，吸收越強烈（使用空氣，氫或氬氣_氫火焰）

2為什么可用分離度R作為色譜柱的總分離效能指標。分離度R為相近兩色譜峰的保留值之差與兩峰寬度平均值之比，在色譜分析時，常碰到兩個難分離的物質情況。相鄰兩組分在色譜柱中的分離情況，柱效只能說明柱子的效率高低，卻反映不出難分離物質對的分離效果，而選擇性則反映不出效率高低。分離度既可以判斷兩種物質是否完全分離，說明柱子的分離能力，同時在計算的過程中要引入半峰寬，這個指標可以反映柱效的高低，所以分離度R作為色譜柱的總分離效能指標。

9.色譜分離基本方程式的含義，對色譜分離有什么指導意義？

方程式，主要反映了分析柱的性能，它表明分離度隨體系的熱力學性質的變化而變化，同時與色譜柱條件有關。（1）當體系的熱力學性質一定時，分離度與n的平方根成正比。對于選擇柱長有一定的指導意義，增加柱長和改進分離度但過分增加柱長會顯著增長保留時間引起色譜峰擴張，同時選擇性能優良的色譜柱，并對色譜條件進行優化，也可以增加提高分離度。（2）方程式說明K值增大也對分離有力，但k值太大會延長分離時間增加分析成本。（3）提高柱效選擇性可以提高分離度分離效果越好，因此，可以通過選擇合適的固定相，增大，不同組分的分配系數差異，從而實現分離。10.色譜定性的依據是什么？主要有哪些定性方法？ 依據:根據組分在色譜柱中保留值的不同進行定性

方法：1利用標準樣品對照定性，在一定的色譜條件下。一個未知物質只有一個確定的保留時間，由此將已知樣品在相同的色譜條件下的保留時間與未知物的保留時間進行比較，就可以定性鑒別未知物2相對保留值法。在相同條件下，分別測出組份i的基準物質s的調整保留值，再計算即可，用已求出的相對保留值與文獻相對應值比較定性。3利用加入已知純物質增加峰高定性法:將純物質加入試樣中若發現有新峰或在未知峰上有不規則形狀則兩者非同種物質，若峰增高而半峰寬不相應增加則可能為同種物質。4利用文獻上保留指數，用兩個緊靠待測組分的標準正構烷烴標定，使待測主峰的保留值正好在兩個正構烷烴的保留值之間，再進行色譜實驗后計算保留指數來進行定性分析。5與化學方法配合進行定性分析，利用檢測器的選擇性進行定性分析，6與其他儀器聯用定性。

12，為什么要用定量校正分子，什么情況下可以不用？ 色譜定量分析是基于被測物質的量與其峰面積的正比關系，但由于同一檢測器對不同的物質具有不同的響應值，所以兩個相等量的不同物質的峰面積往往不想相等，這樣就不能用峰面積來直接計算物質的含量，為了使檢測器產生的響應信號能真實地反映物質的含量就要對響應值進行校正，為此引入定量校正分子，以校正峰面積，使之能真實反映組分的含量。

氣相分析中間或者溶媒一般不用定量校正因子。在歸一化法，測定同系物或性質很相近，響應值大小一樣的話或很接近，把他們的校正因子看作一時，可省略定量校正因子，測某種很純的物質的純度時，因雜質含量很小，也可省略定量校正因子來計算。

13.有哪些常用的色譜定量分析方法？比較優缺點及適用情況。

（1）歸一化法:把試樣中所有組分的含量之和按100%計算，以他們相應的色譜峰面積或峰高為定量參數，通過下列公式計算各組分含量。

優點，簡便、準確，當操作條件、進樣量、流速等變化時，對分析結果影響較小

缺點，所有組分都要出峰，而且分離良好才行。這種方法常用于常量分析，尤其適用于進樣量很少而體積不易準確測量的樣品，條件是試樣中所有組分都能流出色素柱，并在色素圖顯示色素峰。

（2）內標法:準確稱取樣品，加入一定量的某種純物質作為內標物，然后進行色譜分析，根據被測物和內標物的質量及在色譜圖上相應的峰面積比，求出某組分的含量。

優點，可消除基體帶來的干擾，消除了由人為而造成的系統誤差，定量較準確。

缺點，每次分析都要準確稱取試樣及內標物的質量，不宜做快速控制分析。

適用于試樣中各組分含量相差懸殊，或只需測定試樣中某個或某幾個組分而且試樣中所有組分不能全部出峰時

（3）外標法，將欲測組份的純物質配制成不同濃度的標準溶液，濃度與待測組分相近，取固定量的上述溶液進行色譜分析，得到標準樣品的對應色譜圖，以峰高或峰面積對濃度作圖。分析樣品時，在上述完全相同的色譜條件下，取制作標準曲線同樣量的試樣分析、測得該試樣的響應信號后，由標準曲線即可查出其百分含量。優點，操作簡單、計算方便。缺點，結果的準確度取決于進樣量的重現性和操作條件的穩定性。

此法適用于試樣中各組分濃度變化范圍不大時。（4）內標標準曲線法:不必測出校正因子，消除了某些操作條件的影響，適用于液體讀樣的常規分析。

11.何為保留指數？應用保留指數作定性指標有什么優點？如何計算？

保留指數：人為地將正構烷烴的碳數n乘以100定為其的保留指數，以正構烷為參考標準，用兩個緊靠其的標準正構烷烴來標定使待測組分的保留值正好在兩個正構烷烴的保留之間。優點，準確度高，可根據固定相和柱溫直接與文獻值對照而不必使用標準式樣。1氣象色譜的分離原理。

利用物質在流動相與固定相中分配或吸附性能等性質的差異，當兩相做相對運動時，待測組分在兩相之間進行多次反復的質量交換，使混合物中各組分達到分離，進而通過檢測器達到檢測分析的目的。2.氣相色譜儀的構成及作用。

（1）氣路系統，是一個連續運行的密閉管路系統，攜帶樣品通過色譜柱，提供樣品在柱中運行的動力。（2）進樣系統采用微量進樣器或進樣閥引入樣品，并使樣品瞬間汽化。（3）分離系統，分填充柱和毛細管柱兩種，樣品在次得到所需要的分離。（4）檢測系統，將經過色譜柱分離后的各組份的量轉變成便于記錄的電信號，然后對被分離物質的組成和含量進行鑒定和測量（5）溫度控制系統，控制并顯示汽化室、色譜柱柱效、檢測器及輔助部分的溫度。（6）記錄系統，對色譜數據進行自動處理，又可對色譜系統的參數進行自動控制。3對載體和固定液的要求。

載體：

1、多孔性，即表面積大，使固定液與試樣的接觸面較大。

2、表面是化學惰性的，即表面沒有吸附性或吸附性很弱，不與被測物質起化學反應。3，熱穩定性好，有一定的機械強度不易破碎。

4、對載體力度的要求，均勻細小又不能過細。

固定液：1，化學穩定性要好，不與被測物質起任何化學反應，2、對試樣各組分有適當的溶解能力。3，揮發性小。4，具有較高的選擇性,即對沸點相同或相近的不同物質有盡可能高的分離能力。5，熱穩定性好，在操作溫度下呈液體狀態下且不發生分解。

4.比較紅色載體與白色載體的性能，何為硅烷化載體，有什么優點？

紅色載體：由天然硅藻土直接煅燒而成，表面孔穴密集孔徑較小表面積大，涂固定液量多，在同樣大小柱中分離效率較高，結構緊密，力學性能好，但表面由許多吸附活性中心，造成極性固定液分布不均，適宜分析非極性或弱極性的樣品。白色載體：是天然硅膠涂在煅燒之前加入了助溶劑，形成較大的疏松顆粒，表面孔徑較大，表面積較小，機械強度不如紅色載體，表面極性中心顯著減少，吸附性小，可用于分析極性物質。硅烷化載體：將載體進行鈍化處理，用硅烷化試劑和載體表面的硅醇、硅醚基團起反應，消除表面氫鍵的結合能力，屏蔽活性中心后的載體。

優點:改進了載體的性能可以分析化學性質活潑的式樣。5“相似相溶”原理應用于固定液選擇的合理性及其存在的問題。

合理性：當組分與固定液分子極性相似時，固定液和被測組分兩種分子間的作用力強，被測組分在固定液中的溶解度就大，分配系數就大，也就是說被測組分在固定液中溶解度或分配系數的大小與被測組分和固定液兩種分子間的相互作用力的大小有關。

（1）分離非極性物質一般選用非極性固定液，這時試樣中各組分按沸點次序先后流出色譜柱，沸點低的先出峰，沸點高的后出峰。（2）分離極性物質，選用極性固定液，這時試樣中各組分主要按極性順序分離，極性小的流出色譜柱，極性大的后流出色譜柱。（3）分離非極性和極性化合物時一般選用極性固定液，這時非極性組分先出峰極性組分后出峰。（4）對于能形成氫鍵的試樣，如，醇酚胺，和水等的分離，一般選擇極性的或是氫鍵型的固定液，這時試樣中各組分按與固定液分子間形成氫鍵的能力大小先后流出，不易形成氫鍵的先流出，最易形成氫鍵的后流出。（5）對于復雜的難分離的物質可以用兩種或兩種以上的混合固定液。

存在問題，以上討論的僅是對固定液的大致的選擇原則，應用時有一定的局限性，事實上在色譜柱中的作用是較復雜的，因此，固定液的選擇應主要靠實踐。6.熱導檢測器的工作原理，其靈敏度的影響因素。原理:熱導池作為檢測器是基于不同的物質具有不同的熱導系數。當電流通過鎢絲時，鎢絲被加熱到一定溫度時，鎢絲的電阻值也就增加到一定位。在未進試樣時，通過熱導池的兩個池孔（參比池和測量池）的都是載氣。由于載氣的熱傳導作用，使鎢絲的溫度下降，電阻減小，此時熱導池的兩個池孔中鎢絲溫度下降和電阻減小的數值是相同的。在進入試樣組分后，載氣流經參比池，而載氣帶著試樣組分流經測量池，由于被測組分與載氣組成的混合氣體的導熱系數和載氣的導熱系數不同，因而測量池中的鎢絲散熱情況就發生變化，使兩個池孔中的兩根鎢絲電阻值之間有了差異，此差異可以利用電橋測量出來。

影響因素:橋路工作電流、熱導池體溫度、載氣性質和流速、熱敏原件阻值及熱導池死體積等對檢測器靈敏度有影響。

7.氫焰電離檢測器的工作原理，操作條件？

原理:火焰中的電離是化學電離，即有機物在火焰中熱裂解，發生自由基反應。化學電離產生的正離子和電子在外加直流電場作用下向兩極移動而產生微電流。經放大后，記錄下色譜峰。

操作條件:（1）氣體流速（2）氣體純度（3）極化電壓（4）使用溫度

1高效液相色譜與經典液相色譜有何異同？

高效 高速 高靈敏 高自動化 a在分析速度上比經典液相色譜法快數百倍。b傳質阻力小，分離效率高，在經典液相色譜法中難分離的物質，一般在高效液相色譜法中都能得到滿意的效果。C分析靈敏度比經典液相色譜有較大提高。

4薄層色譜與高效液相色譜相比，兩者在分離方法上有何優缺點？

高效液相色譜法是色譜法的一個重要分支，以液體為流動相，采用高壓輸液系統，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內各成分被分離后，進入檢測器進行檢測，從而實現對試樣的分析。

優點：分離效率高，選擇性好，檢測靈敏度高，操作自動化，應用范圍廣； 不受試樣的揮發性和熱穩定性限制，應用范圍廣；流動相種類多，可通過流動相的優化達到高的分離效率；一般在室溫下分析即可，不需高柱溫。缺點：分析成本高，液相色譜儀價格及日常維護費用貴，分析時間一般比氣相長。

薄層色譜法:系將適宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或鋁基片上，成一均勻薄層。待點樣、展開后，根據比移值(Rf)與適宜的對照物按同法所得的色譜圖的比移值(Rf)作對比，用以進行藥品的鑒別、雜質檢查或含量測定的方法.優點操作顯色比較簡單，薄層色譜法斑點集中，薄層板耐腐蝕

缺點對生物高分子的分離效果不甚理想

10什么是化學鍵合色譜？它的突出優點是什么？ 化學鍵合相是利用化學反應通過共價鍵將有機分子鍵合在載體表面形成均一，牢固的單分子薄層而構成的固定相，其分離機理為吸附和分配兩種機理兼有，對多數鍵合相來說，以分配機理為主。通常化學鍵合相的載體是硅膠，硅膠表面有硅醇基，他能與合適的有機化合物反應，獲得各種不同性能的化學鍵合相。

優點：固定相不易流失，柱的穩定性和壽命較高，能耐受各種溶劑，表面較均一，傳質快，柱效高，能鍵合不同基團以改變其選擇性。

11什么叫梯度洗脫它與氣相色譜中的程序升溫有何異同。

梯度洗脫：在分離過程中使流動相的組成隨時間改變而改變。通過連續改變色譜柱中流動相的極離子強度或PH等因素。使得被測組分的相對保留值得以改變，提高分離效率。

梯度洗脫類似程序升溫，兩者目的相同，不同的是程序升溫是通過程序改變柱溫，當流動相和固定相不變時，分配比的變化是通過溫度變化引起的，而液相色譜是通過改變流動相組成 極性ph來達到改變分配比的目的，一般柱溫保持恒定 16與GC和HPLC儀器相比SFC儀器有何不同。

1,為精確控制流動相流體的溫度。色譜柱安裝在恒溫控制的柱爐內。2,SFC儀器帶有一個限流器，用以對住維持一個合適的壓力，并且通過它流體轉化為氣體后，進入檢測器進行測量。3以超臨界流體作為流動相。十四章

1.與HPLC相比CE更具有什么優點？

1高效2高速3微量4操作模式多，分析方法開發容易5低能耗。

2.高效毛細管電泳分離的原理。

在電解質溶液中，帶電粒子在電場的作用下，以不同速度向其所帶電荷相反方向遷移，產生電涌流，在一般情況下，毛細管柱內表面帶負電，和溶液接觸時形成了一雙電層，在高壓電作用下，雙電層的水合陽離子整體朝負極方向移動產生電滲流，帶電粒子在毛細管內電解質緩沖液中的遷移速度等于電泳流和電滲流二者的矢量和，帶正電的粒子遷移方向和電滲流相同，因此首先流出，所帶正電荷越多，相對分子質量越小的正電粒子流出越快，中性粒子電泳速率為零，其遷移數率相當于電滲流速率，帶負電的粒子的電泳流方向和電滲流相反，因電滲流速率一般大于電泳流速率，故其在中性粒子之后流出，各種粒子因差速遷移而達到區帶分離。3.高效毛細管電泳的幾種模式的分離機理和應用對象有何不同。

1毛細管區帶電泳。溶質在毛細管內的背景電解質溶液中以不同速率遷移而形成一個一個獨立的溶質帶的電泳模式，應用分離出中性物質外的物質。

2毛細管凝膠電泳在毛細管中裝入凝膠做支持物進行的電泳，凝膠起篩子作用使溶質按分子大小逐一分離，應用，分離分析蛋白質和DNA分子量或堿基數。

3毛細管等電聚焦，兩性電解質在分離介質中的遷移造成的ph梯度由此可以使物質根據他們不同的等電點達到分離的目的，應用，兩性電解質。

4毛細管等速電泳，選用淌度比樣品中任何待測組分的淌度都高的電解質作為先導電解質，用淌度比樣片中任何待測組分都低的電解質作為尾隨電解質，夾在其間的樣品組分根據自己的有效淌度的不同而分離，應用，離子性物質。

5膠束電動毛細管色譜，采用CZE技術并結合色譜原理而形成的，溶質在載體與周圍介質之間的分配，同時兩項在高壓電場中具有不同的遷移，應用，非結合性溶質，4毛細管電色譜的特點，1分離效率比HPLC高五至十倍，2選擇性比毛細管電泳高，3分析速度快分析結果重復性好，能實現樣品的富集與預濃縮。

1雙聚焦質譜儀為什么能提高儀器的分辨率？

在單聚焦分析器中，離子源產生的離子在進入加速電場前，初始能量不能為零，且各不相同，具有相同質荷比的離子，初始能量存在差異，因此通過分析器后，也不能完全聚焦在一起，而雙聚焦分析器同時實現了方向聚焦和能量聚焦，解決了離子能量分散的問題，提高了儀器的分辨率。

2比較電子轟擊電離源、場致電離源及場解析電離源的特點？

電子轟擊電離源:離子化效率高，電子電離源的結構簡單，缺點是電子轟擊的能量遠遠超過普通化學鍵的鍵能，過剩的能量將引起分子多個鍵的斷裂。

場致電離源:優點，分子離子和準分子離子峰強;碎片離子峰也很豐富;適合熱不穩、難揮發性樣品分析。缺點:樣品涂在金屬板上的溶劑也被電離，使質譜圖復雜化。場解析電離源:解析所需能量遠低于汽化所需能量，故有機化合物不會發生熱分解，很少生成碎片離子。3常用的電離源有哪些？

電子轟擊電離源 場致電離源 場解析電離源 化學電離源 快原子和快離子轟擊電離源 電噴霧電離源 大氣壓化學電離 激光解吸源

4標準加入法 取相同體積的式樣溶液兩份分別移入容量瓶AB另取一定量的標準溶液加入B稀釋定容測AB吸光度值設A中待測元素濃度為Cx，B瓶加入的標準濃度為Cs，A溶液吸光度為Ax，B溶液吸光度為Ao則Cx＝（Ax÷Ao－Ax）Cs

某溶液中含有乙醇和甲苯，請根據所學的儀器分析方法，建立乙醇和甲苯的定量方法。

紫外可見光譜法（對照法）~取混合溶液與甲苯標準溶液分別稀釋一定的倍數，制成極稀溶液樣品。分別將其放入吸收池選定波長，紫外可見光照射分別測吸光度。由A樣=E樣L樣C樣，A標=E標L標C標,E樣=E標L樣=L標，所以C樣=A樣/A標*C標，即得甲苯乙醇的量。

測定蒽時的激發和熒光發射的最佳波長:400nm

在液相色譜中范氏方程中的哪一項對住效能的影響可以忽略不計:分子擴散項

對聚苯乙烯相對分子質量進行分級分析應采用哪一種液相色譜法:凝膠色譜法。

現需分離分析一氨基酸式樣，擬采用哪種色譜？

氨基酸一般采用液相色譜來分析。如果采用氣相色譜分析需衍生化處理才行。

提高液相色譜柱效的最有效途徑是什么？

選擇合適的流動相，控制相對較低的流動相相速。色譜柱填充均勻。減小固定相顆粒直徑。減小固定相液膜厚度。

在液相色譜法中梯度淋洗適用于分離何種式樣。保留時間過短或過長的試樣，樣片中有多個組分而且極性差別較大的復雜樣品。（組分復雜及容量因子值范圍很寬的樣品）

3能否根據塔板理論數來判斷分離的可能性

不能，有效塔板數僅表示柱效率的高低，柱分離能力發揮程度的標志，而分離的可能性取決于組分在固定相和流動相之間分配系數的差異

儀器分析:是通過測量表征物質的某些物理或物里化學性質的參數來確定其化學組成或結構的分析方法。量子產率：發熒光的分子數與總的激發態分子數之比，（物質吸光后發射熒光的光子數與吸收激發光的光子數的比值）。

系間跨越：不同多重態之間的一種無輻射躍遷（激發態電子改變其自旋態，分子的多重性發生改變）。

振動弛豫：被激發到激發態的分子能通過與溶劑分子的碰撞，迅速以熱的形式把多余的振動能量傳遞到周圍的分子，而自身返回該電子能級的最低振動能級的過程。重原子效應：熒光分子的芳環上被F,Cl,Br等鹵素取代后，使系間跨越加強，其化合物熒光強度隨鹵素原子質量增加而減弱，而磷光相應增強的效應。

多普勒變寬：原子在空間做無規則熱運動引起的譜線展寬。

自然變寬：沒有外界影響的譜線展寬。

光譜通帶：單色儀出射狹縫的輻射波長區間寬度。紅移:指由于化合物的結構改變，如加入助色團，發生共軛作用以及改變溶劑等，使吸收峰向長波方向移動 藍移:指當化合物的結構改變或受溶劑影響，使吸收峰向短波方向移動

增色效應:由于化合物結構改變或其他原因，使吸收強度增強

減色效應:由于化合物的結構改變或其他原因，使吸收強度減弱

程序升溫:指在一個分析周期內柱溫隨時間由低溫向高溫作線性或非線性變化，以達到用最短時間獲得最佳分離的目的

內轉換:相同多重態間的一種無輻射躍遷過程

外轉移:激發分子通過與溶劑或溶質間相互作用和能量轉換而使熒光或磷光減弱甚至消失的過程

熒光發射:分子處于單重激發態的最低震動能層時，發射分子返回基態，這一過程稱為熒光躍遷

熒光猝滅：熒光分子與溶劑或其他溶質分子之間相互作用，使熒光強度減弱的作用。

碰撞猝滅:處于激發單重態的熒光分子與猝滅劑分子碰撞，使前者以無輻射躍遷方式回到基態，產生猝滅作用

自猝滅:單重激發態分子在發射熒光之前和未激發的熒光物質分子碰撞引起自猝滅

靜態猝滅:由于部分熒光分子與猝滅劑分子生成非熒光的配合物

分配系數:在一定溫度和壓力下，組分在固定相和流動相之間的分配達到平衡時的濃度之比值

分離度R:相鄰兩組分色譜峰保留值之差與兩組分色譜峰底寬度總和一半的比值

分配比:又稱容量因子，它指在一定溫度和壓力下，組分在兩相間分配達平衡時，分配在固定相和流動相的質量比

磷光發射:當受激分子降至S1的最低振動能級后，如果經系間跨越至T1態，并經T2態的最低振動能級回S0態的各振動能級，此過程輻射的光稱為磷光發射

鏡像規則:通常熒光發射光譜與它的吸收光譜成鏡像對稱系

參比電極:與被測物質無關，電位已知且穩定，提供測量電位參考的電極

梯度淋洗:對組成復雜，含有多種不同極性組分樣品進行液相色譜分析時，通過逐漸調節溶劑非極性和極性組分的比例而改變混合溶劑的極性，根據相似相容的原則，逐漸將不同極性的組分依次洗出色譜柱而獲得良好分離的方法技術

梯度洗脫:在分離過程中使流動相的組成隨時間的改變而改變。優點，通過連續改變色譜柱中流動相的極性離子強度或ph，使被測組分的相對保留值得以改變，提高分離效率。

多普勒變寬:由于分子在空間做無規則熱運動所導致的，又稱熱變寬。

發射光譜:原來處于激發態的粒子回到低能級或基態時，往往會發生電磁輻射。

吸收光譜:物質對輻射選擇性吸收而得到的原子或分子光譜。

紫外可見吸收光譜:利用某些物質的分子在200~800nm光譜區的輻射來進行分析測量的方法。

指示電極:在點位分析中電極電位隨被測電活物質活度變化的電極。

生色團:分子中能吸收紫外線或可見光的結構單元。

選擇因子:在定性分析中，通常固定一個色譜峰作為標準，然后再求其他峰對這個峰的相對保留值。

末端吸收:在指有機化合分子中含有能產

生 或 躍遷的，能在紫外可見范圍內產生吸收的光團 積分吸收：在吸收線輪廓內，吸收系數的積分稱為積分吸收，在溫度不太高的火焰條件下，峰值吸收系數與原子濃度成正比。

峰值吸收:原子吸收線中心頻率或波長處所對應的吸收系數。

背景吸收:原子化器中連續的分子吸收，固體顆粒散射等干擾。

檢測限:以特定的分析方法，適當的置信水平被檢出最低濃度或最小值。

死時間:不同固定相吸附或溶解的物質進入色譜柱時，從進樣到出現峰極大值所需的時間。

正相液相色譜:流動相為非極性，固定相為極性的液相色譜即為正相液相色譜。分離中等極性化合物，易構體等。

反相液相色譜:流動相為極性，固定相為非極性的液相色譜即為反相液相色譜。可分離離子，離子化合物包括強堿強酸。