第一篇：微生物進修報告

微生物進修報告

在醫院領導的支持和幫助下，順利完成在滕州市中心人民醫院微生物室進修學習工作。半年來，在帶教老師的耐心的講解和指導下，認真學習，積極工作，通過不斷努力，自身工作能力得到了很大的提高，現就半年來的進修學習情況總結如下：

一、理論知識學習情況：

1、強化基礎知識學習。為了提高自身理論知識，在工作之余我再次重溫周庭銀主編的《臨床微生物學診斷與圖解（第3版）》、倪語星主編的《臨床微生物學檢驗》、周庭銀及倪語星主編的《臨床微生物檢驗標準化操作指導（第2版）》、陳東科主編的《實用臨床微生物學檢驗與圖譜》等相關業務理論知識，通過自學，進一步提高了自身的理論水平，為工作實踐打下了良好的基礎。

2、加強知識交流。在進修期間，盡可能的抓住一切機會，主動誠懇地向專業老師請教，積極學習，聽取滿主任講課，開闊了自己的知識視野，更加豐富了自己的理論水平。滿主任曾從事5年微生物教學工作，既有豐富的理論知識，又有嫻熟的實踐技能，省內為數不多的微生物學知名專家學者。

二、工作業務實踐情況:

經過半年來的工作學習，已經初步掌握了細菌檢驗業務技能，能夠基本獨立完成細菌檢驗工作，其中包括：

1、細菌接種方面：熟練掌握痰、尿液、血液、胸腹水、腦脊液、分泌物以及組織等方面的細菌接種和培養。

2、涂片染色方面：掌握一般細菌涂片染色、特殊細菌涂片染色和抗酸桿菌涂片染色。

3、細菌鑒定方面:能夠識別和鑒定上呼吸道等標本的正常菌群；在鏡-b+b-cc+c下能夠識別G、G、G、G、真菌孢子等細菌形態；基本掌握細菌標本的鑒別和鑒定。

三、今后工作設想：

在以后的工作中，我將繼續加強對細菌理論知識的學習，通過工作實踐努力提高自身業務素質和技能。相信在科室領導和同事的幫助下以及自身的努力，個人業務能力得到提升，進一步為醫院工作以及為患者服務作出新的貢獻。

2015年11月9號

第二篇：微生物實習報告

林業與生物技術學院

實習報告

學生姓名：婁鈞翼學號：201001220327專業名稱：生物科學—微生物班級：生物科學102班指導教師：張昕

2012-6-26

一、實習目的意義

1、通過實習過程掌握酸奶中乳酸細菌的分離純化

2、土壤中自生固N菌分離、純化、生長曲線測定 ：通過實習過程，掌握土壤中微生物的分離、純化和生長曲線測定的技術；

3、參觀臨安青山污水處理廠：參觀污水處理廠，了解其運行模式，以及在污水處理過程中微生物發揮的作用和技術；

4、參觀富陽海正藥業有限公司：了解一個大公司大企業的運行情況，以及專業方面的一些技術和應用。

二、實習地概況

1、第一個和第二個實驗是在學校學六實驗室完成的；

2、第三個實驗：臨安市青山污水處理有限公司成立于2002年3月21日，于2004年5月1日投入試運行，是一個集污水收集、處理于一體的公益事業企業。公司坐落于浙江省臨安市青山湖街道研口村發達畈，占地66畝，近期投資8082萬元，建成處理能力2萬噸/日，收集管網42公里，工藝采用MSBR法，具有脫氨除磷功能的污水處理設施。公司堅持內抓管理強素質，外創先進塑形象，通過規范化、制度化、精細化、科學化的管理來不斷提高污水處理水平，努力提升科學管理層次，切實增強企業核心競爭力。公司設備、工藝先進，技術力量雄厚，現有職工21人，其中技術人員15人。公司先后通過了ISO9000和ISO14000質量環境管理體系認證及清潔生產認證。同時被評為浙江省公眾滿意單位杭州市環境保護模范企業、臨安市花園式工廠、臨安市安全聲場先進單位、臨安市衛生先進單位、臨安市綠色企業等榮譽稱號。

3、第四個實驗：占地16000平方米，累計投資超過2.6億元，設有60多個單元實驗室，集小試、中試與研發支持為一體。始創于1956年的浙江海正藥業股份有限公司秉承“執著藥物創新，成就健康夢想”的使命和“成為廣受尊重的全球化制藥企業”的愿景，致力于整合藥物研發與生產資源，為全球客戶提供更好的產品和服務，通過美國FDA、歐盟EDQM、澳大利亞TGA、韓國KFDA等官方認證的品種達到40多個，銷往全球30多個國家和地區。

2009年，公司榮獲“全國五一勞動獎狀”，海正、HISUN及圖形被認定為“中國馳名商標”，入選“中國萬種微生物基因組計劃”和“國家重大（磅）級藥物品種產業化技術創新聯盟”。因圓滿完成“抗甲流藥物中間體生產”的國家任務，受到省政府的通令嘉獎。

2010年，公司入選浙江省醫藥工業“十強企業”，并榮獲“國內最佳產品線十佳工業企業” 稱

號，同時被譽為“金蜜蜂獎成長型企業”。

我們主要參觀了海正藥業在富陽的分公司。

三、材料方法

1、材料：乳酸細菌培養基、酸奶

原理：當乳酸菌生長代謝出乳酸后，會是PH下降而使顏色由綠變為黃綠，也由于PH

值降低，再加上抗生素及厭氧培養的作用，所以一般的微生物不容易在此培養基

上生長。因此十分容易鑒別乳酸菌。

方法 ：1.1(6月7日)配備乳酸細菌培養基(蛋白胨10.0G,牛肉膏10.0G,酵母膏5.0G,檸檬酸氫二銨2.0G,葡萄糖20.0G,吐溫801.0ML,乙酸鈉5.0G,磷酸氫二鉀2.0G,硫酸鎂0.58G,硫酸錳0.25G,瓊脂18.0G,蒸餾水1000ML,PH 6.2—6.6)

1.2(6月7日)培養基滅菌

1.3(6月8日)用滅菌后冷卻至50攝示度左右的培養基到成平板

1.4(6月8日)用滅菌過的接種環挑取酸奶在平板上劃線純化培養4天左右

1.5(6月12日)挑取平板上菌落制成臨時裝片觀察

2、材料：阿須貝無氮培養基、土壤

方法：2.1(6月12日)配備阿須貝無氮培養基(葡萄糖10.0G, 磷酸氫二鉀0.2G, 硫酸

鎂0.2G,氯化鈉0.2G,CaSO4’2H2O;0.1G,碳酸鈣5G,瓊脂18G,蒸餾水

1000ML,PH7.2)阿須貝無氮培養液(葡萄糖10.0G, 磷酸氫二鉀0.2G, 硫酸鎂

0.2G,氯化鈉0.2G,CaSO4’2H2O;0.1G,碳酸鈣5G,蒸餾水1000ML,PH7.2)

2.2(6月12日)培養基,培養液滅菌

2.3(6月12日)用滅菌后冷卻至50攝示度左右的阿須貝無氮培養基到成平板

2.4(6月12日)用滅菌過的鑷子將黃豆大小的菜園土埋入已冷凝的平板培養基上

2.5(6月12日)正面放置28度培養4天

2.6(6月18日)用滅菌過的接種環挑取菌苔在新的阿須貝平板上劃線純化32度

培養

2.7(6月20日)單菌落接入液體培養基中于12.24.36.48H后測吸光值.制備生長

曲線

四、結果分析

1.平板上有一個個單菌落.在顯微鏡下觀察單菌落就只有一種乳酸菌.酸奶中有保加利亞乳 菌與嗜熱鏈球菌二種.2.五、實習感受

通過此次實習，我學到了很多課堂上學不到的東西：親自動手配培養基，分離、純化菌類，學會使用分光光度計制作生長曲線，同時參觀了一些與微生物緊密相連的公司，了解其運行模式、實踐技術和應用。這讓我清楚地感到了自己肩上的重任，看清了自己的人生方向，也讓我認識到了科研工作應支持仔細認真的工作態度，要有一種平和的心態和不恥下問的精神，不管遇到什么事都要去思考，多聽別人的建議，不要太過急燥，要對自己所做的事去負責，不要輕易地去承諾，承諾了就要努力去兌現。實習也培養了我的實際動手能力，增加了實際的操作經驗，對實際的科研工作的有了一個新的開始，更好地為我們今后的工作積累經驗。

我知道科研工作是一項需要熱情的事業，并且要持之以恒的精神和吃苦耐勞的品質。我覺得重要的是在這段實習期間里，我第一次真正地接觸了實驗，在實踐中了解了一些科研技術，并且在此期間，我參觀了一些公司，也與社會有所接觸。利用這次難得的機會，也打開了視野，增長了見識，為我們以后進一步走向社會打下堅實的基礎。

實習期間，我從末出現無故缺勤。我認真聽取老師的指導，對于別人提出的實驗建議虛心聽取，并能夠仔細觀察、切身體驗、獨立思考、綜合分析，并努力把學到的知道應用到實際實驗操作中去，盡力做到理論和實際相結合的最佳狀態，培養了我的耐心和素質。

為期兩個多星期的實習結束了，我在兩個多星期的實習中學到了很多在課堂上根本就學不到的知識，受益匪淺。回想自己在這期間的實習情況，也有不足之處。對此我思考過，學習經驗自然是一個因素，然而更重要的是心態的轉變沒有做到位，有些實驗步驟還是停留在應付的層面上。現在發現了這個不足之處，應該還算是及時吧，因為我明白了何謂工作何謂實際。在接下來的日子里，我會朝這個方向努力，在實驗操作方面我會更加謹慎。

本次實習是我第一次親身感受了所學知識與實際的應用，理論與實際的相結合，讓我們大開 眼界，也算是對以前所學知識的一個初審吧!這次實習對于我們以后學習、找工作也真是受益匪淺。我會把這此實習作為我人生的起點，在以后的工作學習中不斷要求自己，完善自己，讓自己做的更好。

第三篇：進修報告

進修報告

首先要感謝各位領導給予這次進修的機會，在這段進修學習期間也認識到護理事業的魅力。

新疆維吾爾自治區人民醫院始建于1934年,歷經半個多世紀的滄桑巨變,經過幾代人艱苦努力和奮力拼搏,如今醫院已發展成為新疆維吾爾自治區一所學科齊全、技術力量雄厚、醫療設備精良，集醫療、教學、科研、預防、保健等于一體的大型綜合性三級甲等醫院、“愛嬰醫院”、“全國百佳醫院”、自治區“十佳醫院”。

醫院隸屬新疆維吾爾自治區衛生廳領導，現占地面積9.58萬平方米，建筑面積12萬平方米，醫院設有42個臨床科室，13個醫技檢查科室，17個行政職能科室，設有自治區級科研機構4所（急救醫院研究所、臨床藥學研究所、兒科研究所、臨床營養研究所），附屬護士學校1所，附屬社區醫院1所。目前，醫院實際開放床位1300張，年均診療60萬人次，年出院病人2.6萬余人次，年手術1萬余例，現有在職職工2025名，其中正高職稱64人，副高職稱155人，中級職稱418人。

我所在的科室是骨科和胃腸科，骨科學習了兩月后一個月都是在胃腸科骨科學習。

骨科是一個大科室有四個小科室我所在是骨一科室開放床位69張，護理人員16名，副高職稱1人，中級職稱3人，護師3人。護士3人。主要以骨科骨折內固定，全髖關節置換術.剛進科室時，在護士長的帶領下簡單的熟悉下病房，病區既安靜又整潔，護士站只有兩把椅子、有一名護士在處理醫囑，護士都在病房做各項治療，巡回病房，做基礎護理，做宣教，與病人溝通，整個科室不管是醫患，護患，醫護之間都很融洽，感覺病人看到護士就像看到親人一般。科室工作互相協作有條不紊，護士和護士之間的協作，護士和醫生之間的協作都很有緊密，表現出了一個良好的團隊協作精神。在這種印象下開始了學習，科室根據職稱，學歷，業務能力綜合素質評選了兩名護理組長，分為護甲組，護乙組，兩名組長不參與夜班，中午值班等，護甲、護乙每半年調換一次，甲，乙組各帶一名護士負責本組的工作，中午由甲、乙組帶的兩名護士值班，中午吃飯時間只有半小時。組長起到監督帶教的作用，工作一起干，自己的組員有不懂的手把手的教，每天下班之前檢查病區所有病人的的各項護理操作是否落實到位，能夠真正起到組長的作用，每天早上所有當班護士交班后開始了晨間護理，護理車上帶著床單，被套，毛巾、一床一巾，濕掃床，同時也會為臥床的病人翻身、拍背、協助患者有效的咳嗽，整理過的病房整整齊齊，幾乎看不到屬于患者的個人物品。由于是責任包干制，就開始查對醫囑開始配各組的液體，開始用移動護士站（EDA掌上電腦）查對液體，查對完了以后，開始打針，做霧化，會陰護理，肌肉針。十一點左右當天醫囑已打印出來，各責護認真核對后在執行，各責任組發放自己病人的口服藥，手術比較多，每天平均6、7臺左右，術前給病人做術前指導，全麻病人做深呼吸鍛煉，按班次給病人做胃腸道準備，發放手術衣服，打術前針。因手術量較大，手術病

人都要做標記（醫生做標記，護士要檢查，如有未做的，要及時提醒醫生）。由病房護士送到手術室和麻醉師進行術前交接（病人姓名，做手術的部位等）。病人手術期間，護士會根據病人的麻醉方式選擇麻醉床，床頭備心電監護儀，氧氣，這些和我們這里的準備是一樣的，病人手術完由麻醉室的工人送回病房，麻醉師也會到病房進行術后的交接（術中的生命體征，皮膚及各種引流管道），接心電監護，吸氧，記錄各種引流管的量，做好各種管道的標記，并寫在相應的護理記錄單上，告知家屬一些術后的相關知識，早期讓患者進行功能鍛煉。1點30分接班開始中午值班，這段時間剛好是換液體高峰，只有2名護士在值班，還要接下手術的病人，中午測量生命體征并且填寫在電腦上，打第二天的護理卡及治療卡，3點30分開始下午上班，為明日手術病人做術前宣教，告知患者練習在床上大小便、做接收新入院病人等，科室每周三組織一次業務學習，業務學習由主講護師利用休息時間自己備課，每隔一周進行一次危重病查房，業務學習由主講護師利用休息時間自己備課，危重病人查房先由主管護士簡單講解這一疾病的相關解剖，生理，病理知識，介紹病情，到病房護理查體，最后提出問題，有意見提出來大家一起討論，補充，通過大家互動，鼓勵大家多提問題，形成一種探討學習的好氛圍，從而使大家共同進步，更好的為患者服務，使患者滿意，醫生放心。在病房里，對容易墜床或是沒有家屬照看的病人，床頭都掛有“嚴防墜床”“小心跌倒”等安全防范警示語，時刻提醒護士的職責，嚴防發生事故。對各種特殊用藥，特殊操作，都有警示標示，如“膀胱沖洗，各類皮試過敏的”等等。

各組組長帶著各自的組員進行晚間護理，查對醫囑，更換飲食單，準備交班。

在胃腸外科為后一個月的學習，開放床位32張，護理人員12人。主要以胃腸外系統手術，胃穿孔，闌尾炎等。由護工人員晨間護理，嚴格執行查對制度，在進行各項護理操作過程中均有相應的流程表，這些流程均有考核標準；每年由科（室）的專科護士及護理部的人員進行討論這些操作是否需要改進；醫生護士操作前后必須進行嚴格洗手，配備洗手消毒液，在操作中，如有操作失敗，必須更換醫療物品，從不反復使用。病房所有用過的物品、器械均不在病房內洗滌浸泡，統一送供應室處理，以免造成環境污染。凡是接觸過病人血液的注射器及針頭均放入有蓋箱，無需浸泡，裝滿后送焚燒，其他物品作為一般垃圾堆填處理，無需焚燒。因為他們深知如果自己不遵守規章制度，就會增加感染的機率，從而危及其他人員的生命及健康，醫院設有獨立的感染控制部門，持續監測各科室的感染情況。

病區內，感受到醫護人員對患者的關愛是發自內心的，對病人及病人家屬非常友善，真正做到了優質服務。他們對病人提出的合理要求都盡量滿足，如果因故不能及時做到，則非常客氣地對他們說“麻煩你等等，我處理完手頭的事情就馬上與您聯系”。如果病人家屬想咨詢病情，護士會馬上聯系醫生。在語言溝通方面，她們也很講究措辭、態度、語氣和方式，說話時永遠面帶微笑，不能態度生硬。即使是患者在發怒時，也要保持職業形象。如果有患者對某護士的服務不滿意，可以投訴，在誤會解除之前，這位護士將盡量避免接觸該患者，以免加深不愉快的印象。

烏魯木齊人民醫院護士的敬業精神給我留下了非常深刻的印象。她們是帶著快樂的心情來上班。其實她們的護理工作是非常繁重而瑣碎的，除了做好大量的基礎護理以外，還要配合醫生完成很多診療性的工作，以及安排患者院外隨訪等，但是她們依然很樂觀的在自己的工作崗位上，能夠把自己主管的病人整理的

清爽干凈，她們認為“讓病人感覺舒適、愉悅！”這才是護理的意義所在，體會到護理的精髓在于體貼，在于照顧，在于人與人之間互相關懷帶來的一種認同感！

本次進修學習，開拓了視野，拓寬了思維，理念的轉變是我最大的收獲，同時也發現了自己在平時的工作中存在很多的不足，今后，我將繼續努力學習更多的知識與技能，在護理崗位上更好的為患者服務。

王海燕

2012年8月22日

第四篇：進修報告

心血管專科護士培訓心得體會

首先感謝院領導、護理部、科主任及護士長給我這次機會，我很榮幸參加為期三個月的由重慶市衛計委主辦的心血管專科護士培訓班，同時也感謝科室的護士姐妹們及新橋醫院的老師們給我的支持和幫助。通過三個月的脫產學習，于2015年6月獲得心血管專科護士資格證，現將學習收獲總結如下：

培訓包括兩個階段：第一月是理論學習，接下來兩個月是臨床實踐學習，臨床實踐基地在新橋醫院，其中輪轉了心內科病房及ccu，心外科ICU、心電圖室。

一、系統地學習理論知識及新進展

專科理論知識和相關理論知識，培訓內容包括心血管專科疾病及新技術、新進展。還涉及如何做好一個心血管專科護理、護士職業生涯規劃、護理溝通技巧、論文的撰寫、醫學文獻的檢索等等，為我們授課的老師來自第三軍醫大學的教授和新橋醫院各科室的醫學、護理專家。通過一個月的系統學習，使我的心血管專科知識有了很大的提高。

二、臨床實訓

臨床實訓的第一個科室是心內科病房，心內科共有230張床位，護士有80余人。心內科成立于1953年，分為心臟血管內科病房、心臟重癥監護室、心導管室、心電圖室和實驗室。在冠心病、心律失常、心肌病、先心病、心力衰竭和外周血管方面形成特色和優勢。心內科具有一支強大的護理隊伍，護士專業基礎知識牢固，學習氣氛也很好，團結協作精神也很強，具有豐富的臨床經驗和分析問題、解決問題的能力，注重病人的病情評估和病情觀察，并能運用有效的帶教技能言傳身教，這都是我在她們那里看到的閃亮點也是我們所要學習的重點。在心內科的每一天都是充實的，每天第一事：早晨在他們的多功能學習室參加多媒體大交班。晨交班后有學習和總結，周一是科主任對上一周的總結和點評。周二是醫生組的講課，包括最新的指南的講解，周三護理組資深老師運用PPT講課，內容豐富，獲益頗多。周五是科主任對科室本周總結和對科室下周的計劃，接下來醫生組的病歷討論。在這么一個學習氛圍濃厚的環境，只要用心，真的可以學到很多東西。病區管理也是值得我們學習的地方：在病人多，床位周轉率快，護理工作十分繁重的情況下，病區寬敞明亮，物品擺放有序；病房安靜，整潔，舒適，病區所有物品都做到五常法（常組織、常清潔、常整頓、常規范、常自律），護士管理意識非常強。在科室管理方面：護士積極參與院內的感染控制、教學、皮膚、重癥組，并負責參加院內外的相關會議和培訓，并負責傳達會議精神。培訓本科室護士相關知識和技能并進行把關。負責每月或季度對所管項目采集相關數據，進行匯總、分析、組織人員商討，對所存在的問題提出改進措施，并進行回訪。搶救車管理十分規范也是一特色：搶救車蓋上張貼打印非常醒目的目錄，下面抽屜也有醒目的標識。搶救藥品和物品分門別類放置，易拿取，無擁擠凌亂現象。里面還放置了搶救病人護理記錄單，便于搶救時記錄，快捷規范，護士長不定時抽問藥品放置順序，急救車管理員每周檢查一次。在管理新方法方面：在床位縮減、病人多，等候入院時間長的情況下，心內科率先在今年5月開展了院前管理中心，院前管理中心有各3名醫生和護士，對患者入院前評估排好入院的先后順序，作好院前為介入手術病人建立快速的綠色通道，在院前管理中心做好院前篩查，完善相關的術前檢查，預約號入院日期，手術患者入院當日可進行相關的的手術治療，縮短了患者術前等待的時間，并縮短了總的住院日，為病人減少了經濟負擔的同時也加快了床位的周轉率。在一定程度上緩解了病人在大型醫院一床難求的困局。

心外科ICU是我輪轉的第二個科室，心外科ICU8樓有24張床位，主要收治先心術后和危重的患兒。ICU9樓有15張床位，主要收治成人患者，如冠脈搭橋術、先心術后患者。走進心外科ICU的第一感覺是忙碌、安靜、整潔。病區的物品、儀器擺放有序，標識清晰。墻面張貼有各種管道護理的要點和各種儀器的操作流程、報警的原因與處理和注意事項，大多是我們工作中經常會用到或遇到的問題，非常實用，讓即使是剛上班的護士也不會覺得慌亂。備用病床的監護儀、呼吸機處于清潔、備用狀態。每個病床床頭柜有一個籃子專門放置水杯、紙巾等小物品，避免桌面的凌亂。床尾有兩個夾子來夾放胸片、CT等報告方便醫生查閱的同時也使床單元的物品擺放更加規范。在病人管道管理方面十分到位：入住心外ICU的患者都是冠脈搭橋術、各種復雜先心術后的患者，術后有心包引流管、胸腔引流管、中心靜脈置管、呼吸機、留置尿管，多通道靜脈輸液管道等繁多的管道，都有清晰的的標識，管道安放有序，無凌亂感。有排班方面：護士長在晨交班完畢后根據患者的數量和病情，靈活安排護士分管床位，新老搭配兩人一組分管5張床，對病人實行責任制整體護理，為病人提供優質的護理服務的同時保證了護理的安全和人力資源的合理利用。在病人管理方面：心外科ICU的護士老師們給我的最深的印象是專業知識扎實，十分敬業。面對冠脈搭橋等大手術或疑難心血管術后的病人從容不迫，十分有序的連接好各種管道和儀器的連接線，迅速對病人作出初步評估，制定好護理計劃和護理措施，并能準確根據病情和病人的需要作出相應的調整。管床護士對自己分管病人病情十分熟悉，并能根據血氣分析等化驗值作出準確的判斷及時匯報給醫生。壓瘡管理也非常到位：對于全麻術后的病人，壓瘡的發生率為零。交接班認真查看病人的皮膚，不放過每一個細節，并根據病人的情況及時采取的干預措施。、在心電圖室期間，有幸聆聽了鐘杭美主任、羅昭林教授的精彩講課，把心電圖知識的重點、難點用深入淺出的方法傳授給我們。通過大量的看圖，不斷的分析和總結，我的心電圖知識有了一定的進步。

培訓期間老師們對專業精益求精和敬業敬業精神感染著我們，領略了新橋醫院的護理精英們為護理事業所作出的努力與貢獻。同時也使自己對護理這份工作增添了更多的熱情，學習是一種形式，感受是一種心得和收獲，學以致用是我們的目的。在此，再次感謝醫院給我提供了這樣一次寶貴的學習機會，讓我接觸并學習了先進的護理技術及護理理念。親身體念和感受了一個具有先進管理經驗和優良的服務體系醫院的運作模式。學習是我拓寬了視野，增長了見識，我會把所學到好的方法和經驗運用到實際臨床工作中來，更好地為病人服務，把護理工作做得更好。

心內科：王建瓊

2015年6月15日

第五篇：獸醫微生物實習報告

一．實習目的為了使學生能夠理論聯系實際，通過親自實地解剖感染小鼠，對小鼠的心、肝、脾進行麥康凱瓊脂平板劃線培養，以柯赫法則為這次實習的主線，達到鑒定出小鼠感染的菌種的目的，熟練運用微生物實驗課的所涉及的實驗操作和方法，提高實驗動手能力，分析實驗過程中可能出現的問題，并解決問題。特開設微生物教學實習，掌握基本技能，加深理論部分的理解，能夠獨立診斷出傳染病病菌，獲得嚴謹的科學實驗素養。

二．實習材料

實驗動物：一只被感染小鼠，一只健康小鼠

實驗器械，主要包括：小鼠解剖工具手術剪、鑷子、蠟盤、釘子，接種棒、酒精燈、打火機、記號筆、手套、載玻片、槍頭、注射器、離心管。

實驗材料：麥康凱瓊脂平板、各種染色液（結晶紫溶液、碘溶液、酒精、沙黃水）、蒸餾水、培養基（普通肉湯培養基、蛋白胨培養基、葡萄糖蛋白胨培養基、固體培養基）、PBS重懸液、生化試驗材料（微量發酵管（葡、乳、枸、尿素、麥、甘醇、蔗、硫）、對二甲基氨基苯甲醛、乙醚、甲基紅、vp甲乙液）。

實驗主要儀器：離心機，分光光度器，溫箱，搖床，超凈工作臺

三．實習內容

以柯赫法則為主線，通過對感染小鼠的剖解采樣、分離培養、鏡檢、擴增培養，然后把得到的純培養物對健康小鼠進行再次接種以獲得被感染小鼠，再次重復以上操作，把獲得的純培養物通過鏡檢觀察和做生化實驗來鑒定出感染小鼠的致病菌。

四．實習操作進程

第一天：實驗設計、討論癥狀、分離剖解實驗設計：以小組為單位進行實驗設計，明確此次實驗主要法則是：柯赫法則。在老師的指導下確定此次實習的主要步驟，討論實驗中可能遇到的問題以及注意事項。討論癥狀：比較觀察健康小鼠與病鼠，可見到病鼠一般呈萎靡狀，不活躍。每組領取一只感染小鼠觀察癥狀，體表基本正常。分離剖解：先將麥康凱瓊脂平板分三區，依次寫上肝、脾、心。右手抓起小鼠尾巴，將小鼠搖暈，采用頸椎脫臼法將小鼠處死。將小鼠尸體仰臥固定于蠟盤上，充分露出胸腹部。先用小鼠腹部柔軟部用剪刀剪一小口，然后從該小口處往上、往下剪將皮毛剝離，剝離腹膜暴露出肝臟和脾，可觀察到有輕微的肝腫脹，顏色變淡。將肝和脾切開一小口，用接種環取樣，在麥康凱瓊脂平板的相應區域進行劃線分離。再打開胸腔觀察，可見胸腔有出血現象和凝血塊，剪開心包膜，將心臟切一小口，用接種環取樣，在麥康凱瓊脂平板的相應區域進行劃線分離。寫上班級組別，日期，置于溫箱中培養至第二天早上8點。

第二天：挑取單菌落，鏡檢，擴增培養，重懸，測OD配濃度，小鼠腹腔注射挑取單菌落：觀察麥康凱瓊脂平板上菌落的形態為圓形，邊緣整齊，表面光滑，暗紅色，圓心處顏色較邊緣淺。挑去單個菌落，畫上記號準備做后續試驗。鏡檢：選取所挑選菌落的一半進行抹片。取干凈玻片，滴半滴去離子水，用接種環挑取菌進行抹片、干燥固定、采用格蘭染色法染色：草酸銨結晶紫染色1-2’，水洗，革蘭氏碘液媒染1-2’，水洗，95%酒精脫色約30’’-1’，水洗，沙黃水溶液復染10 ’ ’-30 ’ ’，水洗。吸干，鏡檢。觀察到該菌被染成紅色，是格蘭陰性菌。擴增培養：選取剩余的菌接種到肉湯培養基中，置于溫箱培養9個小時至菌的生長對數期。4 重懸測OD值配濃度：下午5點左右，將培養的菌轉入無菌小管中離心，離心后可見菌沉

于管底，在超凈工作臺內操作，去上清液，用槍頭吸取PBS液至去了上清液的菌管中，反復吹打使其重懸，然后再次離心，去上清，重懸，通過分光光度計測得OD590的值，配成2*10^7CFU濃度的菌液。小鼠腹腔注射：每組挑選一只健康小鼠，在頭部或尾部做上記號，用右手抓住鼠尾，將其搖暈，令其前爪抓住鐵絲蓋上，然后用左手的拇指和食指捏住小鼠頭頸部皮膚，并翻轉左后使其腹部朝上，將其尾巴夾在左手掌與小指之間，右手把持注射器吸取2mL菌液，在股后側面插入針頭，先刺入皮下，后進入腹腔，注射時阻力，皮膚也無泡隆起。注射完將小鼠放回鼠籠即可。

第三天：觀察小鼠發病情況

小組成員分時間段觀察小鼠感染情況，見小鼠瀕死的盡快解剖接種分離致病菌。若 一整天未見小鼠有異常情況的等第二天解剖

第四天：剖解劃線培養

雖然小鼠未見萎靡，由于預訂的感染時間差不多，可以進行解剖接種第一天的操作，可見體表有淤血點，剖開的小鼠肝臟流出大量的血液。其余均同第一天的操作，將麥康凱瓊脂平板的上所接的菌置于溫箱中培養。

第五天：生化鑒定

觀察到平板上只有一個較小的暗紅色菌落，挑取該菌落進行擴增培養9小時至細菌生長的對數期。下午6點觀察，培養液依舊是澄清的，很可能沒有長菌。為做進一步的驗證，進行生化試驗。將該菌接入微量發酵管（）和蛋白胨以及葡萄糖蛋白胨中，培養至第二天看結果。

第六天：觀察結果，整理報告

生化試驗無任何反應，說明接的菌為雜菌或污物，整理實驗報告并分析失敗原因。

六．實驗結果與分析

此次試驗失敗

給小鼠攻毒，未能分離出致病菌，因此也無法鑒定出小鼠被感染的病原菌為何種腸桿菌科

試驗失敗原因可能有：

1、接種棒火焰消毒后，等待冷卻的時間過短，接種棒接種菌時將菌燙死

2、由于小鼠的免疫力強，使得感染小鼠的病原菌被免疫掉了，因此未接種到治病菌

3.給小鼠注射的量或濃度還不夠未能達到使小鼠感染的目的4、在第一次從小鼠體內分離出來的菌可能不是致病菌，或者麥康凱瓊脂平板上培養出來的 菌落不止一種，而我們挑選到的某一菌落恰好不是致病菌。

5、在進行腹腔注射時，可能沒有注射到腹腔，而只注射到皮下，或者其它部位。

6、采樣時可能由于接種環未完全伸入到心、肝、脾的組織中，或者伸到的組織里 恰好沒有致病菌

7、可能由于小鼠感染的時間過短，還未達到菌生長曲線的高峰期

七．思考與總結此次試驗失敗的原因有很多在我看來最有可能的原因有以下幾點：

（1）小鼠免疫:由于這些小鼠是實驗室的小鼠，長期被用來做各種致病菌的實驗，使得它們獲得一定的免疫，所以雖然注射了足夠使小鼠感染發病的劑量，但也被小鼠免疫掉了，而無法從小鼠體內獲得病料。

（2）病料不夠：從學姐那了解到，她們做攻毒實驗的動物，都是將整個組織塊磨碎以后，再接到培養基上，而我們做實驗是只是用接種棒挑取一點，接種棒上粘到的病料比較少或根本沒有，因此培養不出菌。

（3）挑取的單菌落未必是致病菌：由于平板上長出可能不止一種菌，因此挑到的單菌落，未必是致病菌。

2為什么擴增出來的菌不直接注射小鼠，而要經過離心？

因為菌可能會產生毒素，若直接注射可能就無法判斷使小鼠發病的到底是毒素作用，還是因為病菌在小鼠體內繁殖感染而造成的。腸桿菌科有哪些，特征有哪些？

學生自我鑒定：

2011年5月16號到21號期間進行了維持一周的微生物實習，在微生物實習期間，我能夠做到主動和小組成員交流、合作、解決問題，認真完成實驗操作，學會靈活運用自己的專業知識解決問題。

通過這段時期的實習，我們對無菌操作有了進一步的理解，掌握了儀器操作的基本技能，鞏固了理論部分的知識，也了解到公共衛生意識的重要性。

實習不過短短的五天，在這短暫的五天內，我們有過發現時的喜悅，有過解剖小鼠時的緊張，有過培養不出菌時的困惑，但最終我們收獲了知識，也收獲了友誼，在合作中共同進步，在困難中共同進退，一切的困難便能迎刃而解。

這次微生物實習為我們專業的繼續拓展提供了寶貴的經驗，為動物醫學本科專業的我們學習后續課程奠定扎實的基礎。