第一篇:實驗動物學(xué)的學(xué)習(xí)體會
《實驗動物學(xué)》學(xué)習(xí)體會
2012級6班
學(xué)號:201220413 姓名:黃元平
實驗動物是指經(jīng)人工培育,并對其攜帶的微生物實行控制,遺傳背景明確或者來源清楚的,用于科學(xué)研究、教學(xué)、生產(chǎn)、檢定及其他科學(xué)實驗的動物。而《實驗動物學(xué)》正是以實驗動物本身為對象,專門研究實驗動物的飼養(yǎng)、馴化、監(jiān)測和開發(fā)應(yīng)用的學(xué)科。課堂上各位老師介紹了有關(guān)實驗動物與動物實驗方法學(xué)的基本理論、質(zhì)量控制、動物實驗技術(shù)等內(nèi)容,包括實驗動物分類、常用實驗動物、實驗動物環(huán)境及設(shè)施、實驗動物營養(yǎng)與飼料、實驗動物的選擇及應(yīng)用、影響實驗動物和動物實驗的因素、人類疾病動物模型、轉(zhuǎn)基因動物與克隆動物,以及動物實驗技術(shù)、動物實驗的規(guī)范化管理和動物福利等。同時,各位老師還針對當(dāng)前我們的實驗研究現(xiàn)狀重點對小鼠、大鼠、豚鼠、家兔等常見實驗動物的生物學(xué)特性及醫(yī)學(xué)生物學(xué)應(yīng)用進(jìn)行了詳細(xì)闡述,同時還耐心介紹了本校的實驗設(shè)施,為將來學(xué)生的實驗研究提供了很好的建議。
上這門課前我已經(jīng)閱讀過一些論文,并且開始跟隨師姐進(jìn)行動物實驗。然而,即使對實驗流程已經(jīng)有了一定了解,但當(dāng)時依然對一些問題產(chǎn)生困惑諸如實驗動物的選擇、麻醉,以及大鼠的飼養(yǎng)等問題。如今經(jīng)過老師一番點撥并對這一學(xué)科進(jìn)行思考才茅塞頓開。原來師姐用的麻醉藥、劑量計算、麻醉方法是從這里學(xué)習(xí)的,原來大鼠可以復(fù)制各種腫瘤模型,是腫瘤實驗研究最常用的實驗動物。也明白了實驗研究并不是隨意的家養(yǎng)的動物就可以適用。同樣的,因為實驗動物在飼養(yǎng)過程中已經(jīng)進(jìn)行了衛(wèi)生防疫,因為實驗過程雖然依舊需要小心卻不再是如履薄冰。課堂上,老師圖文并茂的向我們解說了大量動物實驗知識,對常見的實驗動物我們有了基礎(chǔ)了解,從而為我們未來的實驗研究奠定了堅實基礎(chǔ)。
在學(xué)習(xí)過程中,我也深刻體會到實驗動物在現(xiàn)代生命科學(xué)研究事業(yè)中不可替代的作用,無論是在人類的生命健康還是生物科學(xué)的探索上。因為在實驗研究中我們不能抱著理所當(dāng)然的處理實驗動物,因予以動物適當(dāng)?shù)淖鹬亍?/p>
第二篇:實驗動物學(xué)重點匯總
一、實驗動物、近交系動物、轉(zhuǎn)基因動物、屏障環(huán)境
實驗動物(Laboratory Animal): 是指經(jīng)人工飼養(yǎng)、繁育,對其攜帶的微生物及寄生蟲實行控制,遺傳背景明確或者來源清楚的,應(yīng)用于科學(xué)研究、教學(xué)、生產(chǎn)和檢定以及其他科學(xué)實驗的動物。包括四個基本內(nèi)涵:
1.遺傳背景明確(近交系、封閉群、雜交群)
2.對攜帶微生物和寄生蟲實施控制(普通動物、清潔動物、無特定病原體動物、無菌動物)3.在特定的環(huán)境條件下,人工培育而成的動物 4.應(yīng)用范圍明確
近交系(Inbred Strain)是指至少連續(xù)經(jīng)過20代以上全同胞兄妹或親子交配,品系內(nèi)所有個體都可追溯到起源于第20代或以后代數(shù)的一對共同祖先。近交系動物的近交系數(shù)(Inbreeding Coefficient)應(yīng)大于99%。近交系動物的特點:
1.基因純合性和同基因性 2.各品系均具有獨特的特性
3.研究結(jié)果的一致性
4.可作為有價值的動物模型
5.具有標(biāo)準(zhǔn)實驗材料特性
6.遺傳背景清楚
通過實驗手段將新的遺傳物質(zhì)(外源性的基因片段)導(dǎo)入到動物的胚細(xì)胞中,并能穩(wěn)定的遺傳,由此獲得的動物稱為轉(zhuǎn)基因動物。常用的方法有顯微注射法、逆轉(zhuǎn)錄病毒載體法、胚胎干細(xì)胞介導(dǎo)法、精子載體法、電轉(zhuǎn)移法、基因直接導(dǎo)入法等。
屏障環(huán)境:與外界隔離,是飼養(yǎng)清潔級動物和SPF級動物的設(shè)施。進(jìn)入實驗動物生存環(huán)境的空氣須經(jīng)過濾凈化處理,其潔凈度相對于10000級,進(jìn)入屏障內(nèi)的人、動物和物品如飼料、水、墊料及實驗用品等均需有嚴(yán)格的微生物控制。
二、實驗動物環(huán)境設(shè)施分類
實驗動物設(shè)施是指實驗動物和動物實驗設(shè)施的總和。一個設(shè)施可以大到動物中心或生產(chǎn)繁殖機(jī)構(gòu),小至某一實驗動物室。總體的原則是提供實驗動物最適宜的環(huán)境,保障實驗動物的質(zhì)量和為動物實驗的準(zhǔn)確性提供可靠保障。
(一)、按其功能分類
1.動物生產(chǎn)設(shè)施(Animal Production Facility)指用于實驗動物的飼育繁殖、生產(chǎn)的建筑物、設(shè)備以及運營管理在內(nèi)的總和。
2.動物實驗設(shè)施(Animal Experimental Facility)指用于研究、試驗、教學(xué)、生物制品、藥品生產(chǎn)、檢定等為目的進(jìn)行實驗動物飼育、試驗的建筑物、設(shè)備以及運營管理在內(nèi)的總和。
3.特殊動物實驗設(shè)施(Special Animal Experimental Facility)指用于感染、毒理動物實驗、病原微生物和細(xì)胞培養(yǎng)、重組DNA、轉(zhuǎn)基因動物實驗、克隆和胚胎干細(xì)胞、細(xì)胞實驗和應(yīng)用特殊化學(xué)物質(zhì)等進(jìn)行實驗的建筑物、設(shè)備以及包括運營管理在內(nèi)的總和。
(二)按微生物控制程度分類
1.普通環(huán)境(Open System)
直接與外界大氣相通,是飼養(yǎng)普通級實驗動物的場所。飼料、飲水要符合衛(wèi)生要求,墊料要消毒,飼養(yǎng)室內(nèi)要有防鼠、防昆蟲等措施。
2.屏障環(huán)境(Barrier System)
與外界隔離,是飼養(yǎng)清潔級動物和SPF級動物的設(shè)施。進(jìn)入實驗動物生存環(huán)境的空氣須經(jīng)過濾凈化處理,其潔凈度相對于10000級,進(jìn)入屏障內(nèi)的人、動物和物品如飼料、水、墊料及實驗用品等均需有嚴(yán)格的微生物控制。3.隔離環(huán)境(Isolation System)
與外界環(huán)境完全隔離的環(huán)境內(nèi)。工作人員通過隔離器上組裝的無菌手套進(jìn)行操作,不直接接觸動物。飼料、飲水,墊料,籠具等都應(yīng)高壓、高溫滅菌。進(jìn)入隔離器內(nèi)的一切物品均需通過傳遞艙滅菌。適合飼養(yǎng)SPF、無菌動物、動物的保種育種或同等級的動物實驗。
(三)按設(shè)施的平面布局分類
1.無走廊式(No Corridors)
用于飼養(yǎng)品種單一或以實驗為主的設(shè)施。一般飼養(yǎng)普通級動物
2.單走廊式(Single Corridors)
一般的研究機(jī)構(gòu)在進(jìn)行中、短期動物實驗。相對于雙走廊其優(yōu)點是占用空間小,設(shè)施利用率較高,維護(hù)費用低。缺點為清潔籠具和污染材料之間常常存在污染的危險,走廊相對擁擠。
3.雙走廊式(Double Corridors)
常用的一種實驗動物屏障設(shè)施類型。可以有效分割為清潔區(qū)和污染區(qū)。作為屏障設(shè)施使用,比較容易控制微生物污染。缺點是有效利用面積減少。
4.三走廊式(Three Corridors)
三走廊式壓力梯度從中間的潔凈走廊、前室、動物飼養(yǎng)室、污物走廊逐漸降低,是目前常用的動物實驗設(shè)施。
三、地鼠的習(xí)性、特點(頰囊、冬眠)地鼠的習(xí)性: 1.生活習(xí)性
中國地鼠,灰色,個體小,體長約10cm,背部中心有黑色條紋。白天基本上睡眠,行動笨拙。晝伏夜行動物,一般在夜晚8~11點最為活躍,運動時腹部著地,行動不敏捷,巧手營巢,牙齒十分堅硬,可咬斷細(xì)鐵絲,興奮時發(fā)出強(qiáng)烈的金屬性音響。地鼠好斗,雌性比雄性大而且兇猛,受驚時會咬人。除發(fā)情期外,雌鼠不易與雄鼠同居,且雄鼠易被雌鼠咬傷。
2.采食性
有很強(qiáng)的貯食習(xí)性,可將食物存貯于頰囊內(nèi)。其頰囊可充分?jǐn)U張,貯藏能力極大,便于冬眠時食用。地鼠口腔內(nèi)兩側(cè)各有一個很深的頰囊,一般深度為3.5~4.5厘米,直徑為2~3厘米,一直延續(xù)到耳后頸部。通過頰囊將大量食物搬于巢中。
3.嗜睡性
睡眠很深時,全身肌肉松弛,且不易弄醒,有時誤認(rèn)為死亡。室溫低時出現(xiàn)冬眠,一般于8~9℃時可出現(xiàn)冬眠,此時體溫、心跳、呼吸頻率、基礎(chǔ)代謝率均降低。室溫低于13℃則幼仔易于凍死,室溫最好保持20~25℃,相對濕度40~70%。
地鼠的特點:
(一)解剖學(xué)特點:
1.頭骨較長,門齒孔小,臼齒呈三棱形,齒式為2(門1/1,犬0/0,前臼0/0,臼齒3/3)=16,門齒能終生生長。
2.口腔內(nèi)兩側(cè)各有一個頰囊。頰囊缺少腺體和完整的淋巴通路,因此對外來組織不產(chǎn)生免疫排斥反應(yīng),可用于異體移植。中國地鼠頰囊容易翻脫。
3.在臀髖部有一種腺體,當(dāng)?shù)厥筇幱谛耘d奮狀態(tài)時,分泌物會使局部皮膚濕潤。雌性地鼠不如雄性發(fā)育完全,腺體外露也不明顯。
(二)生理學(xué)特點:(略看)1.地鼠生殖周期短。
金黃地鼠性周期開始出現(xiàn)年齡為30~32日齡,妊娠為16(14~17)d,為嚙齒類動物中妊娠期最短者。哺乳期20~25d,離乳后雄鼠2月齡,雌鼠 1.5月齡可配種。成熟期時除發(fā)情期以外雌鼠不許雄鼠靠近。年產(chǎn)5~7胎,每胎產(chǎn)仔約7只。平均壽命2~3年。
2.出生仔鼠體重2~3.3g,離乳時體重可達(dá)25~28g,成年體重約為150g,雌鼠體重比雄鼠稍大。成年中國地鼠體重約為35g,雄鼠則比雌鼠大。
3.地鼠對皮膚移植的反應(yīng)特別,封閉群內(nèi)個體間皮膚移植常可存活,并能長期生存下來,但不同群體間移植則100%被排斥。這一現(xiàn)象正吸引著許多免疫工作者進(jìn)行深入的研究。4.中國地鼠(黑線倉鼠)與金黃地鼠解剖生理特點基本相似,但也存在一些差異,如中國地鼠的染色體少而大,二倍體細(xì)胞 2n=22,大多數(shù)能相互簽別,定位明確,尤其Y染色體在形態(tài)上是獨特的,極易識別。無膽囊,大腸長度比金地鼠短1倍,但腦重、睪丸大均比金地鼠重近1倍。
三、實驗動物人性化及3R 至少要滿足動物五種基礎(chǔ)需要:1.足夠飲水和營養(yǎng)良好的食物;2.任何時間不受飲水的限制3.免受痛苦和疾病的折磨;4.免受焦慮和害怕的折磨;5.能夠表達(dá)正常生理學(xué)行為,如躲藏、犢和互相關(guān)照等。3R的基本內(nèi)涵:
減少 Reduction)是指在科學(xué)研究中,使用較少量的動物獲取同樣多的實驗數(shù)據(jù)或使用一定數(shù)量的動物能獲得更多實驗數(shù)據(jù)的科學(xué)方法。
替代(Replacement)是指使用其它方法而不用動物所進(jìn)行的試驗,或者說是使用沒有知覺的試驗材料代替以往使用神志清醒的活的脊椎動物進(jìn)行試驗的一種科學(xué)方法。
優(yōu)化(Refinement)是指在符合科學(xué)原則的基礎(chǔ)上,通過改進(jìn)條件,善待動物,提高動物福利或完善實驗程序和改進(jìn)實驗技術(shù),避免或減輕給動物造成的與實驗?zāi)康臒o關(guān)的疼痛和緊張不安的科學(xué)方法。
3R研究的意義:
(一)3R作為提升突破技術(shù)壁壘能力的載體和具體體現(xiàn)“標(biāo)尺”,在經(jīng)濟(jì)發(fā)展和國際貿(mào)易中發(fā)揮不可替代的重要作用
(二)為科學(xué)發(fā)展提供了新思路和新方法
(三)開展“3R”研究,從保護(hù)動物,或是關(guān)注動物福利的角度出發(fā),這也是時代發(fā)展、社會進(jìn)步在科技上的一種體現(xiàn)。
五、小鼠的行為和生理學(xué)特點
(一)行為學(xué)特點
1.性情溫順,膽小怕驚,對環(huán)境反應(yīng)敏感。
2.喜居于光線暗的安靜環(huán)境,晝伏夜動,喜歡啃咬。3.社會群居性。
(二)生理學(xué)特點
1.小鼠體型小
2.體溫與能量代謝。對小鼠需要供給充足的飲水。小鼠飲水量為4~7ml/d。
3.泌尿 小鼠尿量較小,一次排尿僅1~2滴。與其他哺乳動物不同的是,小鼠尿液中含有蛋白質(zhì)和肌酸酐。
4.生殖 生長期短、成熟早、繁殖力強(qiáng)。小鼠6~7周齡時性成熟,性周期為4~5d,妊娠期為19~21d;哺乳期為20~22d;有產(chǎn)后發(fā)情特點,每胎產(chǎn)仔數(shù)為8~15頭,一年產(chǎn)仔胎數(shù)6~10胎,繁殖率很高,生育期為1年。小鼠為全年多發(fā)情動物,發(fā)情周期可分為前期、發(fā)情期、后期和間情期四個階段,每個階段陰道粘膜均發(fā)生典型變化,通過陰道涂片可判斷處于哪個階段。交配后10~12h,雌鼠在陰道口形成一個白色的陰道栓,這是受孕的標(biāo)志。
六、近交系繁殖生產(chǎn)
近交系動物繁殖方法的選擇原則:保持近交系動物的同基因性及其基因的純合性。
(一)引種:繁殖用原種的近交系動物必須遺傳背景明確、來源清楚、有較完整的資料(包括品系名稱、近交代數(shù)、遺傳基因特點及主要生物學(xué)特征等)。引種動物必須來自近交系的基礎(chǔ)群。
(二)繁殖:近交系動物的繁殖可分為:基礎(chǔ)群(Foundation Stock)血緣擴(kuò)大群(Pedigree Expansion Stock)生產(chǎn)群(Production Stock),當(dāng)近交系動物生產(chǎn)供應(yīng)數(shù)量不是很大時,一般不設(shè)血緣擴(kuò)大群,僅設(shè)基礎(chǔ)群和生產(chǎn)群。
1.基礎(chǔ)群:嚴(yán)格以全同胞兄妹交配方式進(jìn)行繁殖;對動物個體記錄要詳細(xì),包括品系名稱、近交代數(shù)、動物編號、出生日期、雙親編號、離乳日期、交配日期、生育記錄和繁殖系譜等。基礎(chǔ)群(包括血緣擴(kuò)大群)的動物不超過5~7代都應(yīng)能追溯到一對共同祖先。基礎(chǔ)群應(yīng)定期對遺傳特性和均一性、病原微生物和寄生蟲、環(huán)境等檢查和監(jiān)測。基礎(chǔ)群動物保種方式:1.平行線式2.單線式3.綜合式。也可用于近交系動物的培育(1)平行線式:基礎(chǔ)群中的每對全同胞作為一個家系,每個家系繁殖一代后選留一對動物進(jìn)行全同胞交配,以此類推,以保持基礎(chǔ)群。(2)單線式:基礎(chǔ)群每對同胞交配繁殖一代后,選留其中一個家系,淘汰其他家系,選中的家系再留數(shù)對進(jìn)行同胞交配繁殖,下一世代仍保留其中一對的后代,淘汰其他后代,如此一代一代繁殖保種。(3)綜合式:基礎(chǔ)群中每個家系作全同胞交配,每個世代每個家系留一對繼續(xù)繁殖,若其中某一家系不能繼續(xù)繁殖下去,則由繁殖力高的一個家系補(bǔ)足,以維持?jǐn)?shù)個家系同步延續(xù),以保證種群和延續(xù)。
2.血緣擴(kuò)大群:種用動物應(yīng)該來自基礎(chǔ)群,,以全同胞兄妹交配方式進(jìn)行繁殖,設(shè)個體繁殖記錄卡,血緣擴(kuò)大群動物不超過5~7代都應(yīng)能追溯到其在基礎(chǔ)群的一對共同祖先。
3.生產(chǎn)群:種動物來自基礎(chǔ)群或血緣擴(kuò)大群。生產(chǎn)群動物一般以隨機(jī)交配方式進(jìn)行繁殖。應(yīng)設(shè)繁殖記錄卡,生產(chǎn)群動物隨機(jī)交配繁殖代數(shù)一般不應(yīng)超過4代。
七、封閉群引種
以非近親交配方式進(jìn)行繁殖生產(chǎn)的一個實驗動物種群,在不從其外部引入新個體的條件下,至少連續(xù)繁殖 4 代以上,稱為封閉群,亦稱遠(yuǎn)交群(Outbred Stock)。
引種:繁殖用原種的封閉群動物必須遺傳背景明確,來源清楚,有較完整的資料(包括種群名稱、來源、遺傳基因特點及主要生物學(xué)特性等)。一般小型嚙齒類封閉群動物引種數(shù)目不能少于25對。
哈迪-溫伯格Hardy-Weinberg定律,也稱基因平衡定律。等位基因頻率:群體中,一條染色體上某種等位基因數(shù)與該染色體上全部等位基因數(shù)之比。基因型頻率:群體中,某基因型個體數(shù)與該群體全部個體數(shù)之比。
八、大鼠解剖學(xué)特點、肝臟再生、無膽囊、環(huán)尾病、裸大鼠的免疫學(xué)特點
解剖學(xué)特點:
1.門齒終生不斷生長,需磨損維持其定。
2.食道與十二指腸相距很近,胃中有一條皺折,收縮時會堵住噴門口,這是大鼠不會嘔吐的原因。3.肝臟再生能力強(qiáng),無膽囊,來自各葉的膽管形成總膽管,開口于十二指腸的乳突上。4.肺結(jié)構(gòu)特別,左肺為1個大葉,右肺分成4葉。5.心臟和外周循環(huán)與其他哺乳動物不同。心臟的血液供給既來自冠狀動脈,也來自冠狀外動脈。6.右腎比左腎靠近頭側(cè),腎為蠶豆形,右側(cè)比左側(cè)稍高。單乳頭腎,腎臟前端有一米粒大的腎上腺。7.雌性生殖器呈圓形,有凹溝,子宮為丫型雙角子宮,左右子宮角的腔是完全分開的。兩個子宮頸獨立地開口于陰道。胸部和腹部各有3對乳頭。
大鼠無膽囊,肝臟再生能力強(qiáng),不能嘔吐,因此不能用于做催吐實驗。
當(dāng)環(huán)境濕度低于40%時,大鼠易患環(huán)尾病(環(huán)狀壞死癥)。
裸大鼠的免疫缺陷特征:①免疫器官的組織學(xué)與裸小鼠相似,幼齡裸大鼠的解剖發(fā)現(xiàn),有胸腺殘跡,內(nèi)有未分化的上皮細(xì)胞,但未見淋巴細(xì)胞;②先天性無胸腺,無T細(xì)胞,T細(xì)胞功能缺失,但B細(xì)胞功能正常,NK細(xì)胞的活力較正常鼠高。
附:裸大鼠的一般特征:
①體毛稀少,裸大鼠并不像裸小鼠一樣完全無毛,而是體毛稀少,尾根往往多毛; ②發(fā)育遲緩與裸小鼠一樣發(fā)育相對較緩慢,體重為正常大鼠的70%左右;
③繁育能力差,由于裸大鼠與裸小鼠一樣在妊娠期間乳腺發(fā)育缺損,故其繁殖方式同裸小鼠相同,即用純合子的雄鼠與雜合子的雌鼠交配方式進(jìn)行繁育;
④易患呼吸道疾病,由于其無胸腺,免疫力低下,因此易感各種疾病,特別是在環(huán)境較差時,易感潰瘍性氣管炎和化膿性支氣管炎等,生存時間約6~7個月。
九、豚鼠的補(bǔ)體、常用犬品種
豚鼠特別是老齡雌鼠的血清中含有豐富的補(bǔ)體,是所有實驗動物中補(bǔ)體含量最多的一種動物,易引起變態(tài)反應(yīng)。其補(bǔ)體非常穩(wěn)定,免疫學(xué)實驗中所用的補(bǔ)體多來源于豚鼠血清。豚鼠是速發(fā)型過敏性呼吸道疾病的動物模型,是過敏性休克和變態(tài)反應(yīng)的首選實驗動物。常用實驗動物接受致敏物質(zhì)的反應(yīng)程度不同,其順序為:豚鼠>家兔>犬>小鼠>貓>蛙。(注:變態(tài)反應(yīng)也叫超敏反應(yīng),指機(jī)體對某些抗原初次應(yīng)答后,再次接受相同抗原刺激時發(fā)生的一種以機(jī)體生理功能紊亂或組織細(xì)胞損傷為主的特異性免疫應(yīng)答。)
國際上用于醫(yī)學(xué)科學(xué)研究的常用犬主要有小獵兔犬、墨西哥無毛犬、四系雜交犬、Boxer黑白斑點短毛犬等。
十、兔解剖特點
1.口腔小,上唇分開 齒式為2(門2/1,犬0/0,前臼3/2,臼齒3/3)=28。唾液腺有4對,即腮腺、頜下腺、舌下腺和眶下腺。
2.家兔為單胃。盲腸非常大,占腹腔的1/3。在回盲處有特有的圓小囊。
3.雄兔睪丸可以自由地下降到陰囊或縮回腹腔。雌兔為雙子宮,有乳頭3~6對。兔為單乳頭腎。
4.兔的胸腔構(gòu)造:縱隔將胸腔分左右兩室,互不相通。頸神經(jīng)血管束中減壓神經(jīng)易于分離。
5.幼兔的消化道發(fā)生炎癥時,消化道壁即成為可滲透的,這樣消化道中的有害物質(zhì)易被吸收,這就是幼兔腹瀉時容易自身中毒而死亡的原因。
十一、動物飼養(yǎng)室有害氣體
主要有害氣體:氨、甲基硫醇、硫化氫、硫化甲基、甲基丁烷、三甲胺、苯乙烯、乙醛和硫化二甲基。
附:信息素(pheromone)或叫引物信息素(primer pheromone)
①Lee-Boot效應(yīng),是指小鼠群養(yǎng)時常常發(fā)生假性妊娠和發(fā)情周期混亂的現(xiàn)象。
②Whitten效應(yīng),是指由于雄性動物分泌的信息素促使雌性動物的發(fā)情周期出現(xiàn)有規(guī)律的現(xiàn)象。③Bruce效應(yīng),是指懷孕初期的雌性小鼠與交配對象以外的雄性接近或同居時產(chǎn)生的中止妊娠反應(yīng)。
十二、動物實驗前準(zhǔn)備:
準(zhǔn)備工作的內(nèi)容有: 1.飼養(yǎng)室和飼養(yǎng)器具的準(zhǔn)備 2.動物數(shù)目的確定 3.動物的購入 4.動物的稱重
5.動物的分組標(biāo)記及動物的管理等。
動物的購入時注意事項 :
1.各項實驗前的準(zhǔn)備工作是否已落實,如動物籠具數(shù)量、清潔衛(wèi)生情況、動物觀察室內(nèi)是否已消毒。
2.購入動物時應(yīng)向供應(yīng)部門索取動物的遺傳背景資料、實驗動物有效的質(zhì)量合格證、實驗動物微生物控制的檢查資料以及動物的年齡和健康等方面的資料。
3.如若是清潔級以上級別的動物,其運輸工具應(yīng)嚴(yán)格檢查密封狀況。購入動物回到實驗室的時間不宜太長。如若是長途運輸,還應(yīng)考慮到途中各種因素對動物的影響,如運輸環(huán)境的溫度、濕度、飲食等等。尤其要注意動物在途中不能被污染和引起窒息死亡。
4.動物健康檢查:應(yīng)對購入動物的健康情況進(jìn)行詳細(xì)檢查,檢查包括:(1)外觀。一般常發(fā)生異常的部位及其外觀檢查內(nèi)容有:
皮毛:有無光澤和脫毛變化。
口腔:流涎、出血、粘膜湯瘍、口臭等。
鼻腔:鼻汁、出血、干燥(有些動物鼻鏡干燥)。
眼:眼屎、流淚、白內(nèi)障、角膜損傷等。
耳:外傷、耳殼曲折、貧血、中耳炎等。
尾:彎曲、斷折等。
四肢:彎曲、脫臼、外傷、關(guān)節(jié)炎等。
肛門:下痢、血便、脫肛等。
(2)營養(yǎng)狀況。被毛逆立、精神倦怠、瘦弱或過肥等屬于營養(yǎng)不良。(3)飼料、水?dāng)z入量。有無采食減少、食欲低下、過食等。
(4)動物狀態(tài)。不活動、轉(zhuǎn)圈運動、臥地不起、跛行、痙攣等屬不正常。
十三、動物分組標(biāo)記
1.染色法
染色法是用化學(xué)試劑在動物身體明顯部位如被毛、四肢等處進(jìn)行涂染,或用不同顏色等來區(qū)別各組動物,是實驗室最常用、最容易掌握的方法。常用的標(biāo)記液有:①3%~5%苦味酸溶液(黃色)。②0.5%中性紅或品紅浴液(紅色)。③2%硝酸銀溶液(咖啡色,涂后需光照10分鐘)。④煤焦油酒精溶液(黑色)。
標(biāo)記時用標(biāo)記筆蘸取上述溶液,在動物體表不同部位涂上斑點,以示不同號碼。編號的原則是:先左后右,從前到后。2.烙印法 3.掛牌法
4.耳孔法
一般來說,小型動物適宜用耳孔法和染色法,中型動物適用掛牌法和烙印法。
十四、影響動物和實驗的因素
? 氣候因素(溫度、濕度、氣流速度等)? 理化因素(照明、聲音、氣味等)? 居住因素(房屋、籠具、墊料等)
? 同種動物間因素(飼養(yǎng)密度、社會地位、勢力范圍等)
附:
1、實驗動物科學(xué)的定義:是研究實驗動物和動物實驗的一門新興學(xué)科。
2、實驗動物:略。動物實驗:以實驗動物為材料,采用各種手段和方法在實驗動物身上進(jìn)行實驗,研究實驗過程中實驗動物的反應(yīng)、表現(xiàn)及其發(fā)生機(jī)制、發(fā)展規(guī)律,以探討生命科學(xué)的疑難問題。
3、種(Species):是生物學(xué)分類系統(tǒng)中最基本單位。同種間可相互交配且后代有繁殖能力的同一類的動物。
品種(Stock,Breed):是研究者根據(jù)不同需要而對同一“種”的動物進(jìn)行改良和選擇(即定向培育),并具有某種特定外形和生物學(xué)特征,并能較穩(wěn)定地遺傳的動物群體。
品系(Strain):指動物群體來源明確,在其內(nèi)部采用某種交配方法繁殖,個體間具有相似的外貌、群體內(nèi)都有獨特的生物學(xué)特征和基本穩(wěn)定的遺傳特性,可用于不同實驗?zāi)康牡膭游锶后w。
亞系(Substrain):是由同一個近交系分離出來的具有各不相同特性的品系。殘余雜合性和突變而導(dǎo)致部分遺傳組成的改變。
支系(Subline):是指品系或亞系經(jīng)過人工技術(shù)處理后稱為支系。
4、普通動物(conventional animal,CV;一級動物):指不攜帶主要人獸共患病病原和動物烈性傳染病病原的動物。僅可用于示教、科研的探索方法、預(yù)試之用。清潔動物(clean animal,CL;二級動物):指除普通級動物應(yīng)排除的病原外,不攜帶對動物危害大和對科學(xué)研究干擾大的病原的動物。
無特定病原體動物(specific pathogen free animal,SPF;三級動物):指除普通、清潔級動物應(yīng)排除的病原外,還不攜帶主要潛在感染或條件致病和對科學(xué)實驗干擾大的病原的動物。
無菌動物(germ free animal,GF;四級動物):指無可檢出一切生命體的動物。
悉生動物(gnotobiotic animal,GN;四級動物):又稱已知菌(叢)動物,飼養(yǎng)于隔離系統(tǒng)。具有更強(qiáng)的生活力和抵抗力,更易于飼養(yǎng)管理。
第三篇:實驗動物學(xué)實驗報告
實驗動物學(xué)實驗報告
一、實驗動物:小鼠
二、操作流程:抓取,固定,編號,給藥,取血,麻醉,絕育,解剖。
三、具體操作
1、抓取:抓取小鼠時,右手抓住小鼠尾巴,不要過于用力,以免驚嚇小鼠。左手從小鼠身體后部向前抓(以免小鼠向后縮咬傷自己),抓住小鼠頸部。固定住小鼠后,將小鼠皮膚往上抓,盡量將小鼠背部皮膚抓住。左手將小鼠腹部朝向自己,把小鼠尾巴用左手無名指和小指夾住,這時小鼠腹部皮膚緊繃,不能動彈。
2、固定: 通常使用固定器進(jìn)行固定。將固定器擰開后,抓住小鼠尾巴,使其鉆入固定器中,再將擰下的固定器部分裝好,使小鼠尾部露出,再將可旋轉(zhuǎn)的鐵片固定住即可進(jìn)行后續(xù)實驗。
3、編號:編號方式有兩種:①剪腳趾編號:把小鼠腹面朝上,在下的腳趾從左至右依次編為1~10號,剪10號腳趾加1~9號腳趾依次編為11~19號,在上的腳趾依次編為20,30,40,50,60,70,80,90號,其余編號與11~19號類似。②打耳釘編號:耳釘上均有唯一編號,通過使用耳釘鉗將耳釘打在小鼠耳朵上即可。實驗時通常使用的是第一種方式進(jìn)行編號,第二種編號通常用于需要長距離運輸?shù)膭游铩?/p>
4、給藥:常用的給藥方式有:
①口服給藥:即灌胃。將注射器裝入藥物溶液,裝上灌胃針(灌胃針有直頭和彎頭兩種,區(qū)別不大)。如上所述,抓取小鼠后,使其頭部朝上,盡量呈一直線,取灌胃針,從小鼠嘴角一側(cè)緩緩插入(保持刻度在自己能看到的位置),順著小鼠口腔食道的弧度讓小鼠將針咽入,灌胃過程中如果遇到阻礙一定要及時拔出灌胃針,不可強(qiáng)行灌胃以免傷及小鼠食道以及肺部。灌胃針順利進(jìn)入后基本與小鼠身體呈一條直線,注入適量體積后再順著食道緩緩取出灌胃針。
②靜脈注射:小鼠尾部有3條靜脈和1條動脈,3條靜脈非別位于背部,及兩側(cè)。靜脈注射時一般選取兩側(cè)靜脈,因為其相對于背部靜脈更為清晰飽滿。將小鼠固定后,用酒精擦拭其尾部靜脈,使其充血,以便注射。之后使注射器針孔處朝上,針與尾部呈約30°扎入尾部后向上輕挑,再向內(nèi)扎入部分,此過程應(yīng)該比較順暢,沒有阻礙,若阻礙較大則有可能扎入到了皮膚中。扎入后將活塞向后回抽一點可見到有血回流,則說明成功扎入靜脈當(dāng)中,注射適當(dāng)體積后迅速拔針,用酒精進(jìn)行消毒。
5、取血:有斷尾取血法和眼眶取血法兩種。本次實驗使用的是眼眶取血法。抓取小鼠,固定其頭部用手指將其上下眼瞼分開,露出其眼球并且不能閉上。用玻璃毛細(xì)管從其上眼角處扎入眼球后方毛細(xì)血管從,使血液順著毛細(xì)管留下,取血完成后快速將毛細(xì)管取下。
6、麻醉:抓取老鼠,使其頭部朝下,使其腹部臟器向胸腔靠攏,露出腹部空腔,以免刺傷臟器。將注射器豎直扎入靠近后腿部腹腔,刺入之后稍微向前傾斜但不要向前刺入,一般注入0.5mL麻醉劑即可。隨后拔出針,方向小鼠,等待幾分鐘后即可麻醉。
7、絕育:絕育手術(shù)是通過剪除雌鼠卵巢或雄鼠輸精管來實現(xiàn)的。將麻醉的雌鼠背面朝上,從其胸腔和尾部之間向下三分之一處剪開一個小口,用鑷子將其卵巢取出,上面呈現(xiàn)紅色斑點的部分即為卵巢,用剪刀將這一部分剪除,然后用縫合針線將其縫合,縫合方法為將針穿過后,將線纏繞鑷子兩圈再逆時針纏繞兩圈,再重復(fù)纏繞一遍,將鑷子夾住線頭把纏繞的線移至線頭系緊即可(縫合過程全程用鑷子和剪刀操作),里面肌肉層以及外面皮層均需縫合。雄鼠則從外生殖器向上1-2cm處剪開小口,用鑷子在其中找出輸精管(較細(xì)長的乳白色小管),盡量多減掉一些,以免其長長愈合,以上述方法縫合傷口即可。
9、解剖:以頸椎脫臼法處死小鼠,使其腹面朝上。用鑷子將其腹部皮膚夾起,然后用剪刀剪開,觀察各個器官所在位置和形態(tài),解剖完的小鼠放入尸體袋中。
第四篇:實驗動物學(xué)實驗
實驗一 常用實驗動物技術(shù)介紹
目的
了解并熟悉實驗動物實驗操作的基本方法和技術(shù)。內(nèi)容
注射方法;麻醉方法;動物編號的方法;采血;動物性別鑒定;動物的致死。學(xué)習(xí)打結(jié)、縫合、固定動物等。播放錄像《太行山獼猴》、《動物的捉拿和給藥途徑》。用品
大白鼠、小白鼠、蟾蜍、家兔,常用手術(shù)器械、注射器、小木錘、大小鼠固定器,戊巴比妥鈉,乙醚、士的寧、乙醚、氯仿、氯化鉀、一氧化碳、二氧化碳
常用實驗動物性別鑒定
1、大、小鼠的性別鑒定
離乳仔鼠性別鑒定主要以生殖器與肛門之間的距離長短及肛門與生殖器有無被毛為標(biāo)志。識別要點是:① 雄性的生殖器與肛門之間的距離較遠(yuǎn),雌鼠較近;② 雄性的生殖器與肛門之間有毛;③ 雄性的生殖器突起較雌鼠大;④ 雌鼠乳頭較雄鼠明顯。成熟后,雄性可見陰囊,雌性乳頭明顯而易于區(qū)分。
2、豚鼠的性別鑒定
豚鼠的性別鑒定主要是通過生殖器形態(tài)來判斷。雌性外生殖器陰蒂突起比較小,用拇指按住陰蒂突起,余指撥開大陰唇的皺褶,可見陰道口呈”V”形(注意發(fā)情間期的閉鎖現(xiàn)象,即一種除了發(fā)情和分娩時外,關(guān)閉陰道口的細(xì)胞結(jié)構(gòu));雄性外生殖器有包皮覆蓋的陰莖小隆起,用拇指按住其基部包皮,可見龜頭向外突出。
3、兔子的性別鑒定
幼兔的性別鑒定主要以尿道開口部與肛門之間的距離及尿道開口部的形狀來判別。哺乳期仔兔,雄性尿道開口部與肛門之間的距離較遠(yuǎn),為雌性的1.5-2倍,雌性較近。雌性尿道開口扁形,大小與肛門同;雄性圓形,略小于肛門。1月齡仔兔,雄性生殖孔呈圓形,翻出可見呈圓柱體的突起;雌性生殖孔呈Y形,翻出僅見有裂縫,裂縫及于肛門。3月齡以上成年兔,雄性陰囊明顯而雌性無陰囊;雄性頭大短而圓而雌性頭小略呈長形。
4、貓的性別鑒定
幼貓的性別是根據(jù)生殖器與肛門的距離來判斷。距離遠(yuǎn)者為雄性,距離近者為雌性。
5、猴類的性別鑒定
猴類性別的區(qū)分較為困難。首先檢查尿道開口,許多雌性動物有較大的陰蒂,其腹側(cè)形成溝狀通向尿道口,而雄性動物的尿道開口在陰莖頭上。觸摸陰囊內(nèi)是否有睪丸是確定其雌雄的最可靠辦法。
常用實驗動物處死
大鼠和小鼠的處死方法
1、脊椎脫臼法
右手抓住鼠尾用力向后拉,同時左手拇指與食指用力向下按住鼠頭,將脊髓 與腦髓拉斷,鼠便立即死亡。
2、斷頭法
實驗者戴上棉紗手套,用右手握住大鼠頭部,左手握住背部,露出頸部,助手用剪刀在鼠頸部將鼠頭剪掉。小鼠處死法相同。
3、擊打法
右手抓住鼠尾,提起,用力摔擊其頭部,鼠痙攣后立即死亡。用小木錘用力擊打鼠頭部也可致死。
4、急性大失血法
可采用鼠眼眶動脈和靜脈急性大量失血方法使大小鼠立即死亡。
5、化學(xué)致死法
吸入一氧化碳,大、小鼠在一氧化碳濃度為0.2-0.5%環(huán)境中即可致死。皮下注射士的寧,吸入乙醚、氯仿,均可致死。士的寧注射量,小鼠為0.76~2.0mg/kg體重,大鼠3.0-3.5ml/kg體重。氯化鉀處死大鼠劑量:25%溶液0.6ml/只靜脈注入。
實驗動物的處死方法很多,應(yīng)根據(jù)動物實驗?zāi)康摹嶒瀯游锲贩N(品系)、以及需要采集標(biāo)本的部位等因素,選擇不同的處死方法。無論采用哪一種方法,都應(yīng)遵循安樂死的原則。安樂死是指在不影響動物實驗結(jié)果的前提下,使實驗動物短時間無痛苦地死亡。處死實驗動物時應(yīng)注意,首先要保證實驗人員的安全;其次要確認(rèn)實驗動物已經(jīng)死亡,通過對呼吸、心跳、瞳孔、神經(jīng)反射等指征的觀察,對死亡作出綜合判斷;再者要注意環(huán)保,避免污染環(huán)境,還要妥善處理好尸體。
一、頸椎脫臼處死法
此法是將實驗動物的頸椎脫臼,斷離脊髓致死,為大、小鼠最常用的處死方法。操作時實驗人員用右手抓住鼠尾根部并將其提起,放在鼠籠蓋或其他粗糙面上,用左手拇指、食指用力向下按壓鼠頭及頸部,右手抓住鼠尾根部用力拉向后上方,造成頸椎脫臼,脊髓與腦干斷離,實驗動物立即死亡。
二、斷頭處死法
此法適用于鼠類等較小的實驗動物。操作時,實驗人員用左手按住實驗動物的背部,拇指夾住實驗動物右腋窩,食指和中指夾住左前肢,右手用剪刀在鼠頸部垂直將鼠頭剪斷,使實驗動物因腦脊髓斷離且大量出血死亡。
三、擊打頭蓋骨處死法
主要用于豚鼠和兔的處死。操作時抓住實驗動物尾部并提起,用木錘等硬物猛烈打擊實驗動物頭部,使大腦中樞遭到破壞,實驗動物痙攣并死亡。
四、放血處死法
此法適用于各種實驗動物。具體做法是將實驗動物的股動脈、頸動脈、腹主動脈剪斷或剪破、刺穿實驗動物的心臟放血,導(dǎo)致急性大出血、休克、死亡。
犬、猴等大動物應(yīng)在輕度麻醉狀態(tài)下,在股三角做橫切口,將股動脈、股靜脈全部暴露并切斷,讓血液流出。操作時用自來水不斷沖洗切口及血液,既可保持血液暢流無阻,又可保持操作臺清潔,使實驗動物急性大出血死亡。
五、空氣栓塞處死法
處死兔、貓、犬常用此法。向?qū)嶒瀯游镬o脈內(nèi)注入一定量的空氣,形成肺動脈或冠狀動脈空氣栓塞,或?qū)е滦那粌?nèi)充滿氣泡,心臟收縮時氣泡變小,心臟舒張時氣泡變大,從而影響回心血液量和心輸出量,引起循環(huán)障礙、休克、死亡。空氣栓塞處死法注入的空氣量,貓和兔為20~50ml,犬為90~160ml。
六、過量麻醉處死法
此法多用于處死豚鼠和家兔。快速過量注射非揮發(fā)性麻醉藥(投藥量為深麻醉時的30倍),或讓動物吸入過量的乙醚,使實驗動物中樞神經(jīng)經(jīng)過過度抑制,導(dǎo)致死亡。應(yīng)用戊巴比妥鈉注射麻醉致死。豚鼠可用其麻醉劑量3倍以上劑量腹腔注射。貓可采用本藥麻醉量的2~3倍藥量靜脈注射或腹腔內(nèi)注射。兔可用本藥80~100ml/kg的劑量急速注入耳緣靜脈內(nèi)。狗可用本藥100mg/kg靜脈注射。
七、毒氣處死法
讓實驗動物吸入大量CO2等氣體而中毒死亡。吸入二氧化碳,此法安全、人道、迅速,被認(rèn)為是處理嚙齒類的理想方法,國外現(xiàn)多采用此法。可將多只動物同時置入一個大箱或塑料袋內(nèi),然后充入CO2,動物在充滿CO2的容器內(nèi)l~3min內(nèi)死去。
人類為什么總拿小白鼠做實驗?
原因一:
老鼠中的小白鼠的基因序列和人類的差不多,一些醫(yī)學(xué)的科研和臨床實驗都是有小白鼠來完成的。當(dāng)中以小白鼠做遺傳學(xué)實驗很好,因為它的全基因組和人類的相似度極高,很多人類難以治愈的疾病可以在小白鼠身上找到相似性狀,從而加以實驗發(fā)現(xiàn)治病基因。
原因二:
實驗專用白鼠的生物學(xué)意義較大,純系小鼠的培育方法經(jīng)過百年探索已經(jīng)形成固定流程,培育出的小鼠幾乎完全沒有個體差異(生理上),而在一般的自然種群中,同種動物間的個體差異是很大的(盡管外表相同),主要表現(xiàn)在先天的身體素質(zhì)上。生理上沒有個體差異是否意味著氣質(zhì)上沒有差異尚不明了,不過選擇純系實驗白鼠主要還是為了盡可能的減少先天的個體差異。
原因三:
數(shù)量充足,許多實驗需要統(tǒng)計學(xué)分析,這就要求一定的數(shù)量,大白鼠和小白鼠,特別是小白鼠,在人工繁殖條件下,能滿足這一要求。種系純,好的實驗要對實驗動物的品種嚴(yán)格控制,這用小白鼠就容易解決。
還有動物等級,小白鼠好歹也是哺乳動物,除了體形小,與其它哺乳動物的進(jìn)化水平相比并不差。體形小反而成為人工繁殖喂養(yǎng)的有利條件。
原因四:
其實很多實驗用猩猩等與人更近似的動物做最好,但使用猩猩太昂貴了。許多實驗,比如認(rèn)知類的,實驗結(jié)束后時需要將動物殺死,來檢查其內(nèi)部變化的。這樣,大量的實驗肯定就不能用比較“貴重”的猩猩了。
實驗
二、常用實驗動物采血、血細(xì)胞計數(shù)
1、小白鼠的采血 目的:
了解并熟悉小白鼠的采血方法; 掌握小白鼠眼眶后靜脈叢采血。
用品: 二甲苯棉球、1%肝素溶液、1%可卡因、乙醚、刀片、無鉤彎鑷子、彎止血鉗、微量采血針、剪刀、剪毛剪、鋒利刀片、注射器。內(nèi)容:
1、剪尾采血:需血量少時可用此方法。將動物固定,顯露尾部,將尾尖剪去約5mm,從尾根部向尾端部按摩,血即從斷端流出。若用二甲苯棉球涂擦尾部或事先將鼠尾浸在45℃水中數(shù)分鐘,使尾部血管充盈,可采到較多的血,但注意二甲苯可致溶血。也可用鋒利刀片割破尾動脈或尾靜脈,讓血液自行流出,采血后,消毒,止血。如將動物麻醉取血量可更多些。小鼠每次采血約0.1ml,大鼠約0.4 ml。為了多次反復(fù)取血應(yīng)盡量從鼠尾末端開始。
2、摘眼球采血:此法常用于鼠類大量采血。用左手固定動物,壓迫眼球,盡量使眼球突出,右手用無鉤彎鑷子或彎止血鉗迅速摘除眼球,立即將鼠倒置,頭朝下,眼眶內(nèi)很快流出血液。一般只適用于一次采血。大部動物采血后可以存活,可采另一側(cè)眼球取血。
3、眼眶后靜脈叢采血:用7—10cm長的微量采血針。將取血管浸入1%肝素溶液,干燥后使用。采血時,左手拇指和食指抓住鼠兩耳之間的皮膚使鼠固定,并用中指配合,輕輕壓迫頸部兩側(cè),阻礙靜脈回流,使眼球充分外突,提示眼眶后靜脈叢充血。可用少量1%可卡因滴入動物眼內(nèi),使眼部局部麻醉。右手持取血管,將其尖端插入內(nèi)眼角與眼球之間,輕輕向眼底方向刺入,小鼠刺入約2—3mm,大鼠刺入約4—5 mm,當(dāng)感到有阻力時即停止刺入,旋轉(zhuǎn)取血管以切開靜脈叢,血液即流入取血管中,采血結(jié)束后,拔出取血管,放松左手,出血即停止。用本法短期內(nèi)可重復(fù)采血。小鼠一次可采血0.2—0.3 ml,大鼠一次可采0.5—0.1ml。
4、頸靜脈或頸動脈采血:將鼠麻醉,剪去一側(cè)頸部外側(cè)被毛,作頸靜脈或頸動脈分離手術(shù),用注射器即可抽出所需血量。也可插入導(dǎo)管,反復(fù)采血。
5、斷頭采血:操作者左手拇指和食指握住鼠頸部,頭朝下,用利剪在頭頸間1/2處迅速剪動物頭部,提起動物,血液即可流入準(zhǔn)備好的容器中。
6、心臟采血:將動物麻醉,使其仰位固定,剪去胸前區(qū)毛,消毒皮膚,在左側(cè)第3—4肋間選擇心博最強(qiáng)處穿刺,血液借心臟跳動的力量進(jìn)入注射器。亦可在動物麻醉后,切開動物胸腔,直視心臟內(nèi)抽血或剪破心臟,直接用注射器、吸管等吸血。
2、豚鼠的采血 目的
了解并熟悉豚鼠的采血方法; 用品
刀片、注射器、消毒干棉球、75%酒精棉球、20%的檸檬酸鈉溶液、紗布、脫脂棉。
方法與步驟:
1、耳緣切口采血:先將豚鼠耳消毒,用刀片割破耳緣,在切口邊緣涂上20%的檸檬酸鈉溶液,防止血凝,則血可自切口處流出。此法采血每次可采0.5ml左右。
2、背中足靜脈采血:固定豚鼠,將其右或左后肢膝關(guān)節(jié)伸直,腳背消毒,找出背中足靜脈,左手拇指和食指拉住豚鼠的趾端,右手將注射針刺入靜脈,拔針后立即出血。采血后用紗布或脫脂棉壓迫止血。
3、心臟采血:選心跳最明顯的部位把注射針刺入心臟,血液即流入針管。心臟采血時所用的針頭應(yīng)細(xì)長些,以免發(fā)生采血后穿刺孔出血。
3、家兔的采血 目的 了解并熟悉家兔的采血方法; 掌握家兔的耳緣靜脈采血方法。用品
常用手術(shù)器械、玻璃取血管、計數(shù)板、注射器、顯微鏡。內(nèi)容
1、耳緣靜脈采血:將兔固定,拔去耳緣靜脈局部的被毛,消毒,用手指輕彈兔耳,使靜脈擴(kuò)張,用針頭刺耳緣靜脈末端,血液即流出。本法為兔最常用的采血方法,可多次重復(fù)使用。
2、耳中央動脈采血:在兔耳中央有一條較粗的、顏色較鮮紅的中央動脈。用左手固定兔耳,右手持注射器,在中央動脈的末端,沿著與動脈平行的向心方向刺入動脈,即可見血液進(jìn)入針管。由于兔耳中央動脈容易痙攣,故抽血前必須讓兔耳充分充血,采血時動作要迅速。采血所用針頭不要太細(xì),一般用6號針頭,針刺部位從中央動脈末端開始,不要在近耳根部采血。
3、頸靜脈采血:將家兔麻醉,剪去一側(cè)頸部外側(cè)被毛,作頸靜脈或頸動脈分離手術(shù),用注射器即可抽出所需血量。也可插入導(dǎo)管,反復(fù)采血。
4、心臟采血:穿刺部位在第三肋間胸骨左緣1mm處,選心跳最明顯的部位把注射針刺入心臟,血液即流入針管。心臟采血時所用的針頭應(yīng)細(xì)長些,以免發(fā)生采血后穿刺孔出血。
4、小白鼠RBC、WBC計數(shù) 目的
1、復(fù)習(xí)小白鼠眼眶后靜脈叢采血;
2、學(xué)習(xí)微量采血法和紅、白細(xì)胞計數(shù)法。原理
用加有抗凝劑的溶液將定量的血液稀釋,滴入血細(xì)胞計數(shù)室內(nèi),于顯微鏡下計數(shù),求出一定容積的稀釋血液中的RBC、WBC數(shù),再將其換算成1L血液中的RBC、WBC個數(shù)。用品
血細(xì)胞計數(shù)板、計數(shù)器、顯微鏡、微量吸血管、酒精棉球、消毒脫脂棉球、RBC稀釋液(0.9%NaCl溶液)或RBC稀釋液:NaCl(維持滲透壓)0.5g,Na2SO4(使溶液比重增加,紅細(xì)胞均勻分布不易下沉)2.5g,HgCl2(固定紅細(xì)胞并防腐)0.25g,蒸餾水加至100ml。
WBC稀釋液,其成分為:冰醋酸1ml(破壞紅細(xì)胞),1%龍膽紫1ml(染白細(xì)胞核,便于計數(shù)),加蒸餾水至100ml。方法與步驟
1、熟悉血細(xì)胞計數(shù)板和微量吸血管的構(gòu)造
(1)計數(shù)板是一塊厚厚的長方形玻璃板,板的中部有四條直槽,內(nèi)側(cè)兩槽中間有一條橫槽,把中部隔成兩個長方型的平臺。此平臺比整個玻璃板的平臺低0.1mm,當(dāng)放上蓋玻片后,平臺與蓋玻片之間的高度為0.1mm,平臺中部有3mm×3mm精確劃分的9個大方格,稱為計數(shù)室,每個大方格的面積為1mm×1mm=1mm2, 體積為0.1mm3。中央的大方格則由雙線精確劃分為25個中方格,每個中方格的面積為0.2mm×0.2mm=0.04mm2,體積為0.004mm3,每個中方格又用單線精確劃分成16個小方格。適用于RBC計數(shù)。
(2)微量吸血管 一次性玻璃細(xì)管,以防交叉感染。該管長12cm,在4.5cm處和9cm處各有一定量標(biāo)記,分別10μl和20μl。在11cm處有一色標(biāo),為連 結(jié)橡膠吸頭的標(biāo)記。
2、微量采血和稀釋
(1)先準(zhǔn)確吸取3.98mlRBC稀釋液于一潔凈的試管內(nèi)。
(2)手持微量吸血管,將其管口浸入血滴,緩緩吸入血液至20μl處,如吸入血液稍過量,可用手指或干棉球輕觸管口,緩緩轉(zhuǎn)動,可使血液吸出,至恰好與刻度相符。用干棉球?qū)⒐芸谕饷娴难翰潦酶蓛簟⒀杭尤氲綔?zhǔn)備好的RBC稀釋液中。注意,應(yīng)將采血管垂直插入稀釋液底部,緩緩擠出血液使之不擴(kuò)散,輕吸上清液再擠出,使血液完全轉(zhuǎn)入到試管中。
(3)將血液和稀釋液混勻。
3、充液
取潔凈計數(shù)板及蓋玻片,將蓋玻片平放在計數(shù)板的計數(shù)室上。用干凈吸血管或小吸管吸少量混勻的RBC稀釋液,然后將管口斜置于蓋玻片邊緣的計數(shù)板毛玻璃斜面上,擠出少量稀釋液,此時液體即由于毛細(xì)管作用而進(jìn)入計數(shù)室內(nèi)。但須注意,如果計數(shù)室內(nèi)留有氣泡或稀釋液過多以致溢出室外的凹溝中,都應(yīng)該洗去,再重新充液。
4、計數(shù)
充液后應(yīng)讓計數(shù)板靜置8min,待RBC充分下沉后方可進(jìn)行計數(shù)。先在低倍顯微鏡下觀察RBC分布是否均勻,如果分布很不均勻,應(yīng)洗去重做。在低倍鏡下找到中央大方格,看清其橫、豎線后即可用高倍鏡來計數(shù)。顯微鏡的光圈應(yīng)縮小并降低聚光器使得視野較暗,這樣RBC的輪廓可更清楚些。通常選擇中央大方格四角的4個中格和中央的1個中格來計數(shù)。計數(shù)為了防止遺漏,應(yīng)按一定的順序:即第一行先從左向右數(shù)到最后一格,下一行則從右向左數(shù),以此類推。對于分布在雙線上的RBC,則可計數(shù)左側(cè)和上方線上的RBC,即按照“數(shù)上不數(shù)下,數(shù)左不數(shù)右”的原則。計數(shù)時應(yīng)將每個中格的RBC數(shù)記錄下來,若發(fā)現(xiàn)各中格之間的RBC數(shù)相差超過15個時,表示其分布不均勻,應(yīng)將計數(shù)室洗凈,重新?lián)u勻吸管中的稀釋血液,再充液進(jìn)行計數(shù)。
5、計算
RBC的稀釋倍數(shù)為200倍:(0.02ml+3.98ml)/0.02ml=200 計數(shù)室5個中格的總?cè)莘e為0.02mm3,設(shè)5個中格RBC總數(shù)為X,則1mm3稀釋液RBC總數(shù)為X×50個。由此可知,每毫升血液中實際RBC數(shù)目:X×50×200個,即10000X,再乘以106得出每升血液中的RBC數(shù)。WBC基本與RBC相同,不同之處:
1、WBC稀釋液,其成分為:冰醋酸1ml(破壞紅細(xì)胞),1%龍膽紫1ml(染白細(xì)胞核,便于計數(shù)),加蒸餾水至100ml。
2、計數(shù)板四角的四個大方格又各分為16個中方格,適用于WBC計數(shù)。
3、吸取WBC稀釋液為0.38ml,血液稀釋了20倍。
4、在計數(shù)WBC時,計數(shù)四角的4個大方格中的WBC總數(shù)。其總?cè)莘e為0.4mm3,換算成每升血液中的WBC數(shù)時,4個大方格內(nèi)WBC數(shù)×2.5×20×106=WBC數(shù)/L。
5、計數(shù)時,如發(fā)現(xiàn)大方格之間的WBC數(shù)相差超過10個時,表示W(wǎng)BC分布不均勻,應(yīng)重新充液計數(shù)。思考題:
1、在實際操作中,你認(rèn)為哪種采血方法效果好?為什么?
2、小結(jié)在操作過程中,哪些因素可能影響計數(shù)的準(zhǔn)確性? 實驗
三、常用實驗動物的給藥、胰島素驚厥
1、小白鼠的給藥 目的:
1、了解并熟悉小白鼠、豚鼠、家兔的給藥方法;
2、掌握小白鼠的皮下注射、腹腔注射。
3、了解胰島素調(diào)節(jié)血糖水平的機(jī)能。
用品:小鼠專用灌胃針、注射器、75%酒精棉球。
內(nèi)容:
1.灌胃給藥
小鼠專用灌胃針由注射器和喂管組成,喂管長約1nm,喂管尖端焊有一金屬小圓球,金屬球中空,用途是防止喂管插入時造成損傷。金屬球彎成20度角,以適應(yīng)口腔與食道之間彎曲。將喂管插頭緊緊連接在注射器的接口上,吸入定量的藥液;左手捉住小鼠,右手拿起準(zhǔn)備好的注射器。將喂管針頭尖端防放進(jìn)小鼠口咽部,順咽后壁輕輕往下推,喂管會順著食管滑入小鼠的胃,插入深度約3cm。用中指與拇指捏住針筒,食指按著針竿的頭慢慢往下壓,即可將注射器忠的藥液灌入小鼠的胃中。在插入過程中如遇到阻力或可看見1/3的針管,則江喂管取出重新插入,因為這時灌胃并沒有插入胃中。
2.注射給藥
(1)皮下注射給藥
皮下注射給藥是將藥液推入皮下結(jié)締組織,經(jīng)毛細(xì)血管、淋巴管吸收進(jìn)入血液循環(huán)的過程。作皮下注射常選項背或大腿內(nèi)側(cè)的皮膚。操作時,常規(guī)消毒注射部位皮膚,然后將皮膚提起,注射針頭取一鈍角角度刺入皮下,把針頭輕輕向左右擺動,易擺動則表示已刺入皮下,再輕輕抽吸,如無回血,可緩慢地將藥物注入皮下。拔針時左手拇、食指捏住進(jìn)針部位片刻,以防止藥物外漏。注射量約為0.1-0.3ml/10g體重。
(2)皮內(nèi)注射給藥
是將藥液注入皮膚的表皮和真皮之間,觀察皮膚血管的通透性變化或皮內(nèi)反應(yīng),接種、過敏實驗等一般作皮內(nèi)注射。先將注射部位的被毛剪掉,局部常規(guī)消毒,左手拇指和食指按住皮膚使之繃緊,在兩指之間,用結(jié)核菌素注射器連接4.5針頭穿刺,針頭進(jìn)入皮膚淺層,再向上挑起并梢刺入,將藥液注入皮內(nèi)。注射后皮膚出現(xiàn)一白色小皮丘,而皮膚上的毛孔極為明顯。注射量為0.1ml/次。
(3)肌肉注射給藥
小鼠體積小,肌肉少,很少采用肌肉注射。當(dāng)給小鼠注射不溶于水而混懸于油或其他溶劑中的藥物時,采用肌肉注射。操作時1人保定小鼠,另一人用左手抓住小鼠的1條后肢,右手拿注射器。將注射器與半腱肌呈60°角迅速插入1/4,注入藥液。用藥量:不超過0.1ml/10g體重。
(4)靜脈注射給藥
將小鼠放在金屬籠或鼠夾中,通過金屬籠或鼠夾的孔拉出尾巴,用左手抓住小鼠尾巴中部,小鼠的尾部有2條動脈和3條靜脈,2條動脈分別在尾部的背側(cè)面和腹側(cè)面,3條靜脈呈品字型分布,一般采用左右兩側(cè)的靜脈。拔去沿尾部靜脈走向的毛,置尾巴于45-50℃溫水中浸泡幾分鐘或用75%酒精棉球反復(fù)擦拭尾部,以達(dá)到消毒和使尾部血管擴(kuò)張及軟化表皮角質(zhì)的目的。當(dāng)尾部靜脈注射時,以左手拇指和食指捏住鼠尾兩惻,使靜脈更為充盈,用中指從下面托起尾巴,以無名指夾住尾巴的末梢,右手持4號針頭注射器,使針頭與靜脈平行(小于30° 角),從尾巴的下1/4處進(jìn)針,開始注入藥物時應(yīng)緩慢,仔細(xì)觀察,如果無阻力,無白色皮丘出現(xiàn),說明已刺入血管,可正式注入藥物。有的實驗需連日反復(fù)尾靜脈注射給藥,注射部位應(yīng)盡可能從尾端開始,按次序向尾根部移動,更換血管位置注射給藥。注射量為0.05-0.1ml/10g體重。拔出針頭后,用拇指按住注射部位輕壓1-2min,防止出血。
(5)腹腔注射
左手提起并固定小鼠,使鼠腹部朝上,鼠頭略低于尾部,右手持注射器將針頭在下腹部近腹白線的兩側(cè)進(jìn)行穿刺,針頭刺入皮膚后進(jìn)針3nm左右,接著使注射針頭與皮膚呈45°角刺入腹肌,穿過腹肌進(jìn)入腹膜腔,當(dāng)針尖穿過腹肌進(jìn)入腹膜腔后抵抗感消失。固定針頭,保持針尖不動,回抽針?biāo)ǎ鐭o回血、腸液和尿液后即可注射藥液。注射量為0.1-0.2ml/10g體重。
2、豚鼠的給藥
1)皮下注射給藥
皮下注射部位取頸背、腋下、側(cè)腹或豚鼠后大腿的內(nèi)側(cè),注射時以左手拇指和食指提起豚鼠皮膚,將連有5(1/2)號針頭的注射器刺入皮下。
2)肌肉注射給藥
選用大腿外側(cè)肌肉進(jìn)行注射。操作時1人保定豚鼠,另一人用左手抓住豚鼠的1條后肢,右手拿注射器。將注射器與半腱肌呈60°角迅速插入1/4,注入藥液。用藥量:不超過0.1ml/10g體重。
3、家兔的給藥
1)靜脈注射 兔耳部血管分布清晰。兔耳中央為動脈,耳外緣為靜脈。內(nèi)緣靜脈深不易固定,故不用。外緣靜脈表淺易固定,常用。先拔去注射部位的被毛,用手指彈動或輕揉兔耳,使靜脈充盈,左手食指和中指夾住靜脈的近端,拇指繃緊靜脈的遠(yuǎn)端,無名指及小指墊在下面,右手持注射器連6號針頭盡量從靜脈的遠(yuǎn)端刺入,移動拇指于針頭上以固定針頭,放開食指和中指,將藥液注入,然后拔出針頭,用手壓迫針眼片刻。
2)皮下注射 注射時以左手拇指和食指提起皮膚,將連有5(1/2)號針頭的注射器刺入皮下。皮下注射部位一般狗、貓多在大腿外側(cè),豚鼠在后大腿的內(nèi)側(cè)或小腹部;大白鼠可在側(cè)下腹部。兔在背部或耳根部注射。
3)肌肉注射
肌肉注射應(yīng)選肌肉發(fā)達(dá),無大血管通過的部位,一般多選臀部。注射時垂直迅速刺入肌肉,回抽針?biāo)ㄈ鐭o回血,即可進(jìn)行注射。
4)腹腔注射
用家兔做實驗時,進(jìn)針部位為下腹部的腹白線離開1cm處。
小白鼠胰島素驚厥
基本原理
胰島素是調(diào)節(jié)機(jī)體血糖的激素之一,當(dāng)體內(nèi)胰島素含量增高時,便引起血糖下降,動物出現(xiàn)驚厥現(xiàn)象。動物與器材
小白鼠數(shù)只、1ml注射器、鼠籠、胰島素溶液(2μ/ml)、50%葡萄糖溶液、酸性生理鹽水。方法與步驟
1.取4只小白鼠稱重后,分實驗組和對照組,每組2只。2.給實驗組動物腹腔注射胰島素溶液(0.1ml/10g體重)。3.給對照組動物腹腔注射等量的酸性生理鹽水。4.將兩組動物都放在30—37℃的環(huán)境中,并記下時間,注意觀察并比較兩組動物的神態(tài)、姿勢及活動情況。
5.當(dāng)動物出現(xiàn)角弓反張、亂滾等驚厥反應(yīng)時,記下時間,并立即皮下注射葡萄糖溶液(0.1ml/10g體重)。
6.比較對照組動物、注射葡萄糖的動物、以及出現(xiàn)驚厥而未經(jīng)搶救的動物的活動情況,并分析所得的結(jié)果。注意事項
1.動物在實驗前必須饑餓18—24h。2.一定要用pH2.5—3.5的酸性生理鹽水配制胰島素溶液。因為胰島素在酸性環(huán)境中才有效應(yīng)。
3.酸性生理鹽水的配制將10ml0.1mol/LHCl加入300ml生理鹽水中,調(diào)整其pH值在2.5—3.5,如果偏堿,可加入同樣濃度的鹽酸調(diào)整。
4.注射了胰島素的動物最好放在30—37℃環(huán)境中保溫,夏天可為室溫,冬天則應(yīng)高些,可到36—37℃。因溫度過低,反應(yīng)出現(xiàn)較慢。思考題
試分析糖尿病產(chǎn)生的原因及治療方法。
實驗
四、實驗動物的全身麻醉、損毀小白鼠小腦的效應(yīng)
1、實驗動物的全身麻醉 目的:
了解影響實驗動物麻醉的因素; 了解并熟悉實驗動物的麻醉方法; 掌握大、小白鼠的吸入麻醉法。原理:
麻醉(anesthesia)的基本任務(wù)是消除實驗過程中所至的疼痛和不適感覺,保障實驗動物的安全,使動物在實驗中服從操作,確保實驗順利進(jìn)行。
全身麻醉方法:麻醉藥經(jīng)呼吸道吸入或靜脈、肌肉注射,產(chǎn)生中樞神經(jīng)系統(tǒng)抑制,呈現(xiàn)神志消失,全身不感疼痛,肌肉松弛和反射抑制等現(xiàn)象,這種方法稱全身麻醉。其特點為抑制深淺與藥物在血液內(nèi)的濃度有關(guān),當(dāng)麻醉藥從體內(nèi)排出或在體內(nèi)代謝破壞后,動物逐漸清醒,不留后遺癥。
用品:注射器、乙醚、戊巴比妥鈉、硫噴妥鈉、氨基甲酸乙酯、內(nèi)容:實驗動物的麻醉是一項復(fù)雜系統(tǒng)的工作。正確的麻醉處理,是動物實驗成功的有力保障。而麻醉處理不當(dāng),會給實驗結(jié)果帶來難以分析的誤差。要想獲得良好的麻醉效果,除掌握實驗動物麻醉的基本知識和技術(shù)、遵循科學(xué)的麻醉程序外,還應(yīng)了解影響實驗動物麻醉的各種因素,如動物因素、環(huán)境因素等。
1、動物因素
1、年齡和體重
動物對藥物的反應(yīng)隨年齡的不同而有差異。有人將大鼠、小鼠按年齡分成幼年、成年和老年3組,觀察年齡對乙醇、戊烷和二氯乙烷等急性毒性的影響。按LD50及麻醉濃度觀察,敏感性顯示為幼年>成年>老年。
體重小的動物每單位體重的基礎(chǔ)代謝率較大動物高,因此,動物越小,每單位體重所需的麻醉藥劑量越大。一些慢性實驗,觀察時間較長,可選擇年幼、體重較小的動物做實驗。
2、性別 實驗證明,不同性別的動物對同一藥物的敏感性不同,對各種刺激的反應(yīng)也不盡一致,雌性動物性周期不同階段和懷孕、授乳時的機(jī)體反應(yīng)性有較大的改變,因此,一般情況優(yōu)先選雄性動物或雌雄各半做實驗。
3、生理和健康狀況 體瘦、肌肉發(fā)達(dá)的動物較脂肪多的動物所需麻醉藥量大,這是因為相對非代謝組織,其基礎(chǔ)代謝率較低。活動可增加代謝率,因此,好動的動物所需的麻醉量大。身體狀況差的動物,所需麻醉藥量小耐受性降低。易發(fā)生中毒現(xiàn)象。
4、動物飼養(yǎng)
保證足夠的營養(yǎng)供應(yīng)是維持動物健康的重要因素,其中飼料對動物的關(guān)系更為密切。動物的生長、發(fā)育、繁殖、抵御疾病的能力及一切生命活動都依賴于營養(yǎng)豐富的飼料。動物在麻醉之前一周應(yīng)提前到位,給于精心的飼養(yǎng)管理,使其處于良好的健康狀態(tài)。
2、環(huán)境因素
1、溫度
在一定范圍內(nèi),溫度緩慢的變化,機(jī)體可以進(jìn)行自動調(diào)節(jié)與之相適應(yīng)。但變化莫測過大或過急,對機(jī)體將產(chǎn)生行為和生理等不良影響。因此,實驗環(huán)境溫度過高或過低都能導(dǎo)致機(jī)體抵抗力下降,對麻醉藥物的敏感性升高,易發(fā)生中毒現(xiàn)象。因此影響麻醉效果。
2、濕度;
3、空氣的流速和清潔度 方法:
1.吸入麻醉法 麻醉藥以蒸氣或氣體狀態(tài)經(jīng)呼吸道吸入而產(chǎn)生麻醉者,稱吸入麻醉,常用乙醚作麻醉藥。吸入法對多數(shù)動物有良好的麻醉效果,其優(yōu)點是易于調(diào)節(jié)麻醉的深度和較快的終止麻醉,缺點是中、小型動物較適用,對大型動物如狗的吸入麻醉操作復(fù)雜,通常不用。
具體方法是:使用乙醚麻醉兔及大小鼠時,可將動物放入玻璃麻醉箱內(nèi),把裝有浸潤乙醚棉球的小燒杯放入麻醉箱,然后觀察動物。開始動物自主活動,不久動物出現(xiàn)異常興奮,不停地掙扎,隨后排出大小便。漸漸地動物由興奮轉(zhuǎn)為抑制,倒下不動,呼吸變慢。如動物四肢緊張度明顯減低,角膜反射遲鈍,皮膚痛覺消失,則表示動物已進(jìn)入麻醉,可行手術(shù)和操作。在實驗過程中應(yīng)隨時觀察動物的變化,必要時把乙醚燒杯放在動物鼻部,以維持麻醉的時間與深度。2.注射麻醉法 常用的麻醉藥有戊巴比妥鈉、硫噴妥鈉、氨基甲酸乙酯等。大、小鼠和豚鼠常采用腹腔注射法進(jìn)行全身麻醉。狗、兔等動物既可腹腔注射給藥,也可靜脈注射給藥。在麻醉興奮期出現(xiàn)時,動物掙扎不安,為防止注射針滑脫,常用吸入麻醉法進(jìn)行誘導(dǎo),待動物安靜后再行腹腔或靜脈穿刺給藥麻醉。在注射麻醉藥物時,先用麻醉藥總量的三分之二,密切觀察動物生命體征的變化,如已達(dá)到所需麻醉的程度,余下的麻醉藥則不用,避免麻醉過深抑制延腦呼吸中樞導(dǎo)致動物死亡。注意事項
1、麻醉劑的用量,除參照一般標(biāo)準(zhǔn)外,還應(yīng)考慮個體對藥物的耐受性不同,而且體重與所需劑量的關(guān)系也并不是絕對成正比的。一般說,衰弱和過胖的動物,其單位體重所需劑量較小,在使用麻醉劑過程中,隨時檢查動物的反應(yīng)情況,尤其是采用靜脈注射,絕不可將按體重計算出的用量匆忙進(jìn)行注射。
2、動物在麻醉期體溫容易下降,要采取保溫措施。
3、靜脈注射必須緩慢,同時觀察肌肉緊張、角膜反射和對皮膚夾捏的反應(yīng),當(dāng)這些活動明顯減弱或消失時,應(yīng)立即停止注射。配制的藥液濃度要適中不可過高,以免麻醉過急;但也不能過低,以減少注入溶液的體積。
4、作慢性實驗時,在寒冷冬季,麻醉劑在注射前應(yīng)加熱至動物體溫水平。思考題
小結(jié)在操作過程中,哪些因素可能影響實驗動物麻醉效果?
常用的麻醉劑
動物實驗中常用的麻醉劑分為三類,即揮發(fā)性麻醉劑、非揮發(fā)性麻醉劑和中藥麻醉劑。1.揮發(fā)性麻醉劑 這類麻藥包括乙醚、氯仿等。乙醚是常用的吸入麻醉劑,乙醚揮發(fā)性很強(qiáng),有特殊的氣味,為易燃品,適用于各種動物(雞除外),乙醚的作用是抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)。其特點是安全范圍大,肌肉能完全松弛,對肝和腎的毒性較小,麻醉的誘導(dǎo)期和蘇醒較短,動物麻醉深度容易掌握,而且麻醉后蘇醒較快。其副作用是對呼吸道和結(jié)膜刺激性強(qiáng),胃腸道反應(yīng)增高,局部刺激作用大,可引起上呼吸道黏膜液體分泌增多,易發(fā)生呼吸道阻塞,使用時應(yīng)小心。2.非揮發(fā)性麻醉劑 這類麻醉劑種類較多,包括苯巴比妥鈉、戊巴比妥鈉、硫噴妥鈉等巴比妥類的衍生物,氨基酸乙脂和水合氯醛。這些麻醉劑使用方便,一次給藥可維持較長的麻醉時間,麻醉過程較平穩(wěn),動物無明顯掙扎現(xiàn)象。但缺點是蘇醒較慢。(1)戊巴比妥鈉:為中效巴比妥類藥物。戊巴比妥鈉,是常用的麻醉劑,有獸用、人獸共用的產(chǎn)品,使用時應(yīng)注意藥品質(zhì)量。(2)硫噴妥鈉:硫噴妥鈉為超速效巴比妥類藥物,為淡黃色粉末,有硫臭,易吸水,裝在安瓶中保存。其水溶液不穩(wěn)定,故必須臨時配制,常配濃度為1%~5%,在0~4℃冰箱中保存,置7天之內(nèi),其分解甚微;在室溫中則只能保存24h。如見溶液色呈深黃、混濁,即表示已分解,不能使用。該藥麻醉誘導(dǎo)和蘇醒時間短,一次用藥僅可維持?jǐn)?shù)分鐘。因此,一般用作為誘導(dǎo)麻醉或基礎(chǔ)麻醉。其副作用:對呼吸系統(tǒng)有明顯的抑制作用,不宜與嗎啡合用。(3)氯胺酮:為中效巴比妥藥物,常用其鹽酸鹽。靜脈或肌肉給藥后,很快起到麻醉作用,但維持時間較短,一般僅10~20min。為了延長時間,可重復(fù)給藥。其副作用是心率加快,血壓升高,有時還可引起動物嘔吐等。(4)水合氯 11 醛:此藥為無色透明棱狀結(jié)晶,有穿透性的臭氣及腐蝕性苦味。其溶解度較小,常配濃度為5%~10%。配制后的溶液易沉淀,用時先在水浴鍋中適量加熱,促其融解。作用特點與巴比妥類藥物相似,似一種安全有效的鎮(zhèn)靜催眠藥,能起到全身麻醉作用,其麻醉量與中毒量很接近,故安全范圍小,使用時應(yīng)注意。其副作用為對皮膚和粘膜有較強(qiáng)的刺激作用。(5)氨基甲酸乙酯(烏拉坦):此藥是比較溫和的麻醉藥,安全度大。多數(shù)實驗動物都可使用,更使用于小動物。一般用作基礎(chǔ)麻醉,如實驗全部過程都用此藥麻醉時,動物保溫尤為重要。使用時常配成20%~25%水溶液,犬、貓、兔直腸灌注1.5g/kg體重;皮下、靜脈、腹腔注射0.75~1g/kg體重。當(dāng)與水合氯醛按1:1比例合并麻醉時,效果更好。但在作靜脈注射時必須溶在生理鹽水中,配成5%或10%的溶液,即每千克體重注射10~20ml。蛙類:2g/kg體重,由背部淋巴囊注射。鳥類:1.25g/kg體重,由肌肉注入。鼠:1.5~2g/kg體重,由腹腔注射。(6)異戊巴比妥鈉:常配成5%~10%的水溶液,作用和戊巴比妥鈉相似。使用劑量和方法:犬、貓、兔腹腔和肌肉注射80~100mg/kg體重;靜脈注射40~50mg/kg體重;直腸灌注100mg/kg體重。鼠:腹腔注射100mg/kg體重。3.中藥麻醉劑 動物實驗時有時也用到象洋金花和氫溴酸東莨菪菅堿等中藥麻醉劑,但由于其作用不夠穩(wěn)定,而且常需加佐劑麻醉效果才能理想,故在使用過程中不能得及普及,因而,多數(shù)實驗室不選用這類麻醉劑進(jìn)行麻醉。
2、豚鼠的局部麻醉 目的
1、了解并熟悉豚鼠的局部麻醉方法
2、掌握局部浸潤麻醉方法。用品
刀片、注射器、消毒干棉球、75%酒精棉球、普魯卡因、利多卡因。原理
用局部麻醉藥阻滯周圍神經(jīng)末梢或神經(jīng)干、神經(jīng)節(jié)、神經(jīng)叢的沖動傳導(dǎo),產(chǎn)生局部性的麻醉區(qū),稱為局部麻醉。其特點是動物保持清醒,對重要器官功能干擾輕微,麻醉并發(fā)癥少,是一種比較安全的麻醉方法。適用于大中型動物各種短時間內(nèi)的實驗。豚鼠對麻醉藥物很敏感。內(nèi)容
1.表面麻醉 利用局部麻醉藥的組織穿透作用,透過粘膜,阻滯表面的神經(jīng)末梢,稱表面麻醉。在口腔及鼻腔粘膜、眼結(jié)膜、尿道等部位手術(shù)時,常把麻醉藥涂敷、滴入、噴于表面上,或尿道灌注給藥,使之麻醉。
2.局部浸潤麻醉:沿手術(shù)切口逐層注射麻醉藥,靠藥液的張力彌散,浸入組織,麻醉感覺神經(jīng)末梢,稱局部浸潤麻醉。常用藥為普魯卡因。在施行局部浸 潤麻醉時,先固定好動物,用0.5~1%鹽酸普魯卡因皮內(nèi)注射,使局部皮膚表面呈現(xiàn)一桔皮樣隆起,稱皮丘,然后從皮丘進(jìn)針,向皮下分層注射,在擴(kuò)大浸潤范圍時,針尖應(yīng)從已浸潤過的部位刺入,直至要求麻醉區(qū)域的皮膚都浸潤為止。每次注射時,必須先抽注射器,以免將麻醉藥注入血管內(nèi)引起中毒反應(yīng)。3.區(qū)域阻滯麻醉:在手術(shù)區(qū)四周和底部注射麻醉藥阻斷疼痛的向心傳導(dǎo),稱區(qū)域阻斷麻醉。常用藥為普魯卡因。
4.神經(jīng)干(叢)阻滯麻醉:在神經(jīng)干(叢)的周圍注射麻醉藥,阻滯其傳導(dǎo),使其所支配的區(qū)域無疼痛,稱神經(jīng)干(叢)阻滯麻醉。常用藥為利多卡因。
3、損毀小白鼠小腦的效應(yīng) 目的:
1、掌握小白鼠的麻醉方法;
2、了解小腦的機(jī)能。基本原理
小腦具有維持身體平衡,調(diào)節(jié)肌緊張和協(xié)調(diào)肌肉運動等機(jī)能。當(dāng)小腦損傷后,隨著破壞程度的不同,可表現(xiàn)出不同程度的肌緊張失調(diào)及平衡失調(diào)。動物與器材
小白鼠、常用手術(shù)器械、大頭針、麻醉口罩、乙醚、棉花。方法與步驟
1.用乙醚麻醉小鼠(注意仔細(xì)觀察呼吸,若呼吸變慢時則表示動物已麻醉)。2.自頭頂部至耳后沿正中線剪開皮膚,將頸肌向下剝離。透過透明的顱骨即可看清小腦的位置(圖9-6)用大頭針刺穿顱骨,直達(dá)小腦(2—3mm),攪毀該側(cè)小腦(注意不可深刺,以免損傷腦干)。
3.待小鼠清醒后,可見其向一側(cè)旋轉(zhuǎn)或翻滾。如損傷較輕,小鼠向健側(cè)旋轉(zhuǎn);當(dāng)損傷重時,則向損傷側(cè)翻滾。
4.將實驗用完的小鼠拉斷頸椎處死后棄之。思考題
根據(jù)實驗結(jié)果說明小腦的生理機(jī)能。
實驗
五、家兔的熱原實驗
目的
1、練習(xí)家兔的各種注射方法;
2、了解家兔熱源反應(yīng)的基本原理。原理
家兔體溫變化十分靈敏,最易產(chǎn)生發(fā)熱反應(yīng),發(fā)熱反應(yīng)典型、恒定,因此常選用家兔進(jìn)行這方面的研究。方法與步驟
1、用體溫計測量實驗前家兔的正常體溫。
2、采用以下方法進(jìn)行熱源實驗:給家兔靜脈注射傷寒一副傷寒四聯(lián)菌苗0.5~2.0ml/kg,菌苗含量應(yīng)不低于100億/ml;皮下注射2%二硝基酚溶液(30毫克)15~20分鐘后開始發(fā)熱;肌注10%蛋白胨1.0g/Kg;皮下注射消毒脫脂牛奶3~5ml。
3、一至兩小時后,用體溫計再次測量家兔的體溫,看其有何變化。思考題
在熱源實驗操作過程中,你認(rèn)為應(yīng)注意哪些方面?
實驗
六、動物體內(nèi)常見寄生蟲卵檢查
目的
1、學(xué)習(xí)常見實驗動物蟲卵標(biāo)本的采集和檢查方法。
2、學(xué)會對不同蟲卵進(jìn)行鑒定。用品
大鼠、小鼠、獼猴的糞便、示范片、蓋玻片、載玻片、目鏡測微尺、物鏡測微尺 方法
1、直接涂片法
包括糞便、血液、腸內(nèi)容物等直接涂片檢查。取一載玻片,在其上加一滴生理鹽水,取少許糞便或腸內(nèi)容物與生理鹽水混勻后于顯微鏡下觀察。血液可直接滴于載玻片上,制成涂片,加蓋玻片觀察。
2、蟲卵收集法
a.沉淀集卵法:取糞便加適量清水,混勻后過濾,重復(fù)數(shù)次至液體清亮為止,靜止沉淀十分鐘后,取底部沉淀物作鏡檢。此法適于檢查血吸蟲卵。
b.飽和鹽水漂浮法:利用蟲卵的比重小于飽和鹽水的原理,使線蟲卵和幾種絳蟲卵或包囊漂浮于液面上,提高檢查效果。實驗步驟和內(nèi)容:
1、自然感染蠕蟲的調(diào)查
取獼猴糞便在盛有生理鹽水的培養(yǎng)皿中漂洗,直接查找寄生蟲蟲體和蟲卵,根據(jù)蟲體和蟲卵的形態(tài),簽別蟲種。
2、直接涂片法或沉淀集卵法檢查寄生蟲卵。
3、觀察蛔蟲、蟯蟲、絳蟲和血吸蟲卵標(biāo)本裝片。
注意:觀察各種蟲卵的大小、形狀、顏色、卵膜結(jié)構(gòu)等以及各種蟲卵的特征
A、蛔蟲卵(線蟲綱一蟲體線形或長圓柱形,雌雄異體)受精卵為橢圓形,大小約40-60微米(35-50×45-76),卵殼的表面有一層凸凹不平的蛋白質(zhì)膜,被膽汁染成棕黃色,整個蟲卵呈棕黃色。卵殼厚而透明。卵內(nèi)有一近圓形的卵細(xì)胞。
未受精卵多為長橢圓形,大小約40一60微米(39-40×88-94),卵殼與蛋白質(zhì)膜較薄,卵內(nèi)充滿大小不等的屈光顆粒。
無論受精卵和未受精卵其蛋白質(zhì)膜有時缺失,無蛋白質(zhì)膜的受精卵是無色透明,請注意與其它蟲卵的區(qū)別。
B、蟯蟲(線蟲綱:蟲體細(xì)小,乳白色,似一白色線頭。)蟲卵為橢圓形,兩側(cè)不對稱,一側(cè)扁平,一側(cè)稍凸。大小約25-55微米(20-30×50-60),卵殼較厚,無色透明,內(nèi)含幼蟲。
C、絳蟲(絳蟲綱:腹背扁平、帶狀、分節(jié),雌雄同體,常見的有鏈狀帶絳蟲。)蟲卵近球形,較小,大小約45-70微米,蟲卵自孕節(jié)排出時卵殼己脫落,鏡下所見是具胚膜的六鉤蚴,胚膜較厚,棕黃色有放射狀的條紋。
D、血吸蟲(吸蟲綱一多有腹背扁平,舌狀或葉狀,有吸盤,雌雄異體,常見的有日本血吸蟲等。)蟲卵為橢圓形,淡黃色。大小約74-106×55-80微米,卵殼較薄無蓋,殼 的一側(cè)有小棘,一般在鏡下不易見到。成熟的卵內(nèi)含有一個毛蚴。注意事項
1.高倍鏡下觀察必須加蓋玻片;
2.采用直接涂片法時,不要涂得太多,必須分散開,均勻; 3.觀察寄生蟲卵前,需在高倍鏡下校對目鏡每格的長度,才能算出蟲卵大小; 4.先在低倍鏡下觀察,發(fā)現(xiàn)后換為高倍鏡。實驗報告內(nèi)容
1、繪出鏡下觀察到的蛔蟲、蟯蟲、絳蟲和血吸蟲卵。
2、概括總結(jié)蛔蟲、蟯蟲、絳蟲和血吸蟲卵的形態(tài)區(qū)別要點。
3、在整過操作過程中的注意事項。
實驗
七、雌性小鼠動情周期的檢查
目的
1、學(xué)習(xí)小鼠陰道內(nèi)液體的采集方法;
2、了解在動情周期的不同階段,小鼠陰道涂片的組織學(xué)變化。原理
哺乳類的雌性動物在性成熟后,出現(xiàn)動情周期變化,其中嚙齒類動物在動情周期不同階段,陰道粘膜發(fā)生比較典型的變化。因此,根椐陰道涂片的細(xì)胞學(xué)改變,可以推斷卵巢功能的周期性變化。
未成熟的大、小白鼠尚無自然的動情周期,但當(dāng)注射絨毛膜促性腺激素后,則可使其提前出現(xiàn)。用品
顯微鏡、棉簽、載玻片、生理鹽水、堿性美藍(lán)溶液(配制:美藍(lán)0.3g,溶于95%的乙醇30ml中,再加蒸餾水至100ml及10%NaOH溶液0.1ml)等。動物
性成熟的雌性小白鼠。方法與步驟
1、小鼠陰道內(nèi)液體取法
取陰道內(nèi)液體有下列三種方法:
(1)沖洗法 將裝有消毒生理鹽水的滴管輕輕插入動物陰道內(nèi),按壓滴管橡皮頭,將生理鹽水打入陰道,然后吸出,如此2-3次。最后將滴管中的陰道沖洗液滴在載玻片上。
(2)沾取法 將消毒的細(xì)棉簽用生理鹽水潤濕,輕輕插入動物陰道內(nèi)0.5cm,慢慢轉(zhuǎn)動一下取出。
(3)刮取法 用光滑的玻璃小勺或牛角制 小刮片慢慢插入陰道內(nèi),在陰道壁輕輕刮取一點陰道內(nèi)含物。
2、涂片
將帶有陰道內(nèi)含物的細(xì)棉簽等在載玻片上均勻的轉(zhuǎn)動做成涂片,然后將涂片在空氣中自然干燥。
3、染色
用堿性美藍(lán)溶液染色5min左右,用蒸餾水沖洗剩余的美藍(lán)溶液(注意:應(yīng)從涂片邊緣慢慢沖洗,切不要把細(xì)胞沖洗掉),并使之干燥。
4、觀察結(jié)果
在顯微鏡下觀察陰道分泌物涂片的組織學(xué)變化,確定動情周期變化的不同階 段。
階段
表 小白鼠性周期陰道分泌物涂片變化 持續(xù)時卵巢變化 涂片可見 間/h 卵泡加速大量有核上皮細(xì)胞,少量角化
生長 細(xì)胞
卵泡成熟、滿視野角化上皮細(xì)胞,少量有
排卵 核上皮細(xì)胞
黃體生成 角化上皮細(xì)胞及白細(xì)胞 動情前期
動情期
動情后期
動情 黃體退化 大量白細(xì)胞及少量黏液 間期
注意事項:
1.采取陰道(下口)內(nèi)分泌物,不是腸道內(nèi)容物(上口); 2.制作涂片要均勻;
3.自然干燥后,再染色8-10min;
4.用蒸餾水沖洗剩余的美藍(lán)溶液時,應(yīng)從涂片邊緣慢慢沖洗; 5.在鏡下鏡檢(如用高倍鏡,必須加蓋玻片)。
實驗
八、小鼠下頜骨形態(tài)分析
目的與原理
小鼠的下頜骨形態(tài)有高度的遺傳穩(wěn)定性,不同品種或品系小鼠下頜骨的形態(tài)、大小不同,因此該項技術(shù)可以作為純系小鼠、純系大鼠遺傳質(zhì)量的檢測方法之一。下頜骨形態(tài)分析是一種定量技術(shù)。可闡明許多遺傳學(xué)差異。主要是對小鼠或大鼠右側(cè)下頜骨形態(tài)做對比分析,通過多變量分析,建立判別函數(shù)進(jìn)行性別判別。
常規(guī)標(biāo)本制備方法
1.隨機(jī)抽取小鼠數(shù)只(60日齡,體重相當(dāng))處死,取下頭顱。
2.投入沸水中煮約10分鐘,冷卻后把頭顱上的組織仔細(xì)剔除,放在含有木瓜蛋白酶的自來水中(下頜骨帶的殘肉與酶的比例為1:25),水的PH為4.5,消化溫度為40—60℃,最適溫度為52 ℃,保溫過夜,取出下頜骨,用小鑷子去掉殘肉和門齒,再用水洗凈。
3.自然干燥,存放于塑料袋中。
4.制作坐標(biāo)底片,用于測量下頜骨有關(guān)變量。
5.在坐標(biāo)底片上用兩個平直的玻璃細(xì)條粘成直角,成L型,與坐標(biāo)的縱軸和橫軸相吻合,壓平待用。動物
小白鼠 方法與步驟
1.下頜骨的11個測量點參見下圖。
2.將待測標(biāo)本平放在解剖鏡載物臺的標(biāo)尺上,下頜骨前端和下部邊緣與標(biāo)尺上的L型玻璃條的X及Y軸分別貼緊放平,將每個標(biāo)本11個變量的結(jié)果記錄下來,交給老師,統(tǒng)一處理。
3、打開SPSS,輸入數(shù)據(jù);定義變量;
4、操作步驟:Analyze→Classify →Discriminant →open discriminant analyze;Gender →grouping variables(define range);all variables →independent;Method →enter independent together;open statistics →function coefficients →Fisher’s,unstandardized →continue;open classify →display→summary table,casewise results;prior probabilities →All groups equal → continue →OK。結(jié)果分析:求出判別系數(shù)和判別函數(shù);
2、得到判別代結(jié)果和判別率;
3、驗證回代和新標(biāo)本判別。注意事項
1、標(biāo)本要保證完整性;
2、小白鼠雌雄的體重要分別相近;
3、突變性的標(biāo)本要舍去;
4、測量要注意準(zhǔn)確;
5、每組標(biāo)本的性別,不要混淆。
實驗
九、家兔的神經(jīng)分離、氣管插管
目的
1、學(xué)習(xí)氣管插管術(shù);
2、學(xué)習(xí)分離及識別有關(guān)的血管和神經(jīng);
3、學(xué)習(xí)測定家兔呼吸運動的方法。用品
常用手術(shù)器械、氣體插管、玻璃分針、刺激器、張力換能器、鐵夾臺、25%氨基甲酸乙酯、3%乳酸。動物
家兔 方法與步驟
1、麻醉并固定動物
每組取家兔一只,稱重,按40mg/kg體重的劑量由耳緣靜脈緩慢注射戊巴比妥鈉溶液,將動物麻醉。當(dāng)動物四肢松軟,呼吸變深變慢,角膜反射遲鈍時,表明動物己被麻醉,即可停止注射。將麻醉動物仰臥于兔體手術(shù)臺上,固定好頭部和四肢,將兔舌拉出以免阻塞呼吸道。注意:緩慢注射;兔舌拉出;頸部必須放正拉直。
2、頸部手術(shù)
用剪毛剪剪去頸部被毛,用手術(shù)刀切開頸部皮膚(5-7cm)長,分離皮下結(jié)締組織和肌肉,暴露氣管,分離氣管和食管,在氣管下穿一棉線備用。
3、頸部神經(jīng)及血管分離術(shù)
3.1 頸總動脈的分離 在頸部,神經(jīng)與頸總動脈被結(jié)締組織膜束在一起,形成血管神經(jīng)束,位于氣管的外側(cè),其腹面被胸骨舌骨肌和胸骨甲狀肌所覆蓋。用玻璃分針將氣管兩側(cè)上述肌肉分離后,用左手拇指和食指輕輕捏住分離的左側(cè)肌肉和皮膚,稍向外翻,即可將血管神經(jīng)束翻于食指之上。然后用玻璃分針分離頸總動脈外的結(jié)締組織膜,將動脈分離約4cm長,并向頭端追索到甲狀軟骨上緣,暴露頸動脈竇,在頸動脈下穿一棉線。用同樣的方法可分離右側(cè)頸總動脈。3.2 頸部神 經(jīng)的分離 輕輕提起左側(cè)頸總動脈下的線,即可清楚看到三條粗細(xì)不同的神經(jīng)。其中迷走神經(jīng)最粗,呈白色,一般位于外側(cè),易于識別;交感神經(jīng)較細(xì),略呈灰色,一般位于內(nèi)側(cè);減壓神經(jīng)最細(xì),呈白色,一般位于迷走神經(jīng)和交感神經(jīng)之間。
由于家兔品種不同及個體間的差異,三條神經(jīng)的位置有較大的變異,應(yīng)注意識別。識別準(zhǔn)確后,用玻璃分針順著神經(jīng)的方向,小心分離其外的結(jié)締組織膜,-般先分離減壓神經(jīng),然后再分離交感神經(jīng)和迷走神經(jīng),并分別在各神經(jīng)下穿不同顏色的線(雙線)備用。
4、氣管切開術(shù)
在喉頭下2-3cm處的氣管上作一“T”型切口,將與氣管口徑相近的氣管插管向心方向插入氣管中,用線結(jié)扎,并將余線固定于氣管插管的分叉處,以防氣管插管脫落。
5、腹部手術(shù)
剪去劍突部位腹部被毛,切開胸骨下端劍突部位的皮膚,并沿腹白線再切開長約2cm的切口。細(xì)心分離劍突軟骨并結(jié)扎,線的另一端連于張力換能器上,張力換能器連接于計算機(jī)BL-410的 1 通道上。
6、開機(jī)→BL-410生物機(jī)能實驗系統(tǒng)→實驗項目→呼吸實驗→呼吸運動調(diào)節(jié) 這時可看到在屏幕上顯示4個波形窗口,鼠標(biāo)左雙擊1通道窗口,即只顯示出1通道波形窗口,在屏幕右下角選實驗標(biāo)記。鼠標(biāo)點開始即可描記呼吸運動曲線。
7、觀察項目
7.1 慢速記錄正常的呼吸運動曲線,注意分清吸氣與呼氣時的曲線方向; 7.2 增加無效腔對呼吸運動的影響 將橡皮管(長約lm,內(nèi)徑0.7cm)連于氣管插管的一個側(cè)管上,用止血鉗夾閉另一側(cè)管,使無效腔增加,觀察并記錄呼吸運動的變化。當(dāng)呼吸運動出現(xiàn)明顯改變后立即去掉橡皮管使呼吸運動恢復(fù)正常;
7.3 窒息對呼吸運動的影響 將氣管插管的兩個側(cè)管同時夾閉,觀察并記錄呼吸運動的變化;
7.4 血中酸性物質(zhì)增多的效應(yīng) 取5ml注射器,由耳緣靜脈較快地注入3%乳酸溶液2m1,觀察呼吸運動的變化;
7.5 分別刺激迷走神經(jīng)中樞端和外周端,觀察并記錄呼吸運動。注意事項
1、實驗過程中,要防止動脈套管刺破頸總動脈和發(fā)生凝血現(xiàn)象;
2、剪去一段劍突軟骨時,不能剪得過深,以免傷及其下附著的膈肌,并要保證劍突軟骨與胸骨完全分離;
3、在分離神經(jīng)及穿線時,切勿損傷與其伴行的神經(jīng);
4、在頸總動脈近甲狀腺處有甲狀腺前動脈,分離時應(yīng)稍靠下方,以免損傷;
5、注射要緩慢,兔舌要拉出,頸部必須放正拉直。
實驗
十、實驗動物環(huán)境因子檢測
目的
1、正確使用環(huán)境因子檢測儀器;
2、了解噪音計、光度計、溫度計、濕度計的測定原理;
3、學(xué)習(xí)測定方法。內(nèi)容
測定各種實驗動物環(huán)境的照度、噪音、溫度和濕度。
實驗
十一、小白鼠走迷宮
目的
1.通過觀察、分析小白鼠學(xué)習(xí)和記憶過程,理解大腦在動物行為機(jī)制建立中的作用。
2.通過實驗,了解影響動物學(xué)習(xí)和記憶能力的因素。
3.通過實驗,了解數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析在科學(xué)研究中的重要作用。實驗原理
老鼠接近人類,通過老鼠的實驗可以間接地了解人腦的功能。學(xué)習(xí)和記憶是神經(jīng)系統(tǒng)高級中樞的重要機(jī)能之一。學(xué)習(xí)是神經(jīng)系統(tǒng)不斷接受環(huán)境刺激而獲得的行為習(xí)慣或經(jīng)驗;獲得的行為習(xí)慣或經(jīng)驗維持一定時間的能力就是記憶。動物的學(xué)習(xí)和記憶能力對其生存具有重要意義。
在人為設(shè)置的迷宮里,動物通過不斷感受復(fù)雜通道的結(jié)構(gòu),調(diào)整和改進(jìn)自己的行為。隨著訓(xùn)練次數(shù)的增加,條件反射逐漸建立,以至在大腦皮層形成記憶。通過記錄動物搜尋食物的時間長短可以對此加以評價。同時也可以考察一些刺激(如饑餓和化學(xué)藥劑)對記憶力的影響。
實驗材料
小白鼠。用品
由學(xué)生根據(jù)實驗需要自行準(zhǔn)備。實驗步驟
(一)實驗準(zhǔn)備
1.用硬紙板或木板構(gòu)建迷宮。高度以小白鼠不能爬上為宜,上面也可以蓋上一玻璃板。
1、選擇健康活潑的小白鼠5只,要求年齡和體重一致,實驗前饑餓一天,但提供水。另選擇一只未經(jīng)饑餓處理的小白鼠備用。在迷宮內(nèi)特定位置放置一塊面包。
(二)實驗項目
1.饑餓處理的小白鼠1只,放置在迷宮入口,記錄其找到食物所需時間。5分鐘后,重復(fù)上述步驟,同樣的間隔時間對其進(jìn)行四次實驗,每只小白鼠共計進(jìn) 行5次實驗。
2.對其余四只饑餓處理的小白鼠進(jìn)行5次實驗,記錄每只小白鼠找到食物所需時間。
3.數(shù)據(jù)處理 根據(jù)實驗數(shù)據(jù),求出5只小白鼠每次實驗找到食物所需時間的平均值。以實驗次數(shù)為橫坐標(biāo),找到食物的時間為縱坐標(biāo),建立直角坐標(biāo)系,制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。把上述平均值標(biāo)在坐標(biāo)紙上并連接各點,從而得到實驗數(shù)據(jù)與尋找時間的關(guān)系曲線。觀察圖形的變化趨勢。
4.取未經(jīng)饑餓處理的小白鼠進(jìn)行步驟1,把記錄的時間與標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行對比,分析小白鼠記憶力的變化。
5.取1只饑餓處理的小白鼠稱重,皮下注射120mg/kgNaNO2,然后讓其走迷宮,重復(fù)步驟1,將所記錄的時間與標(biāo)準(zhǔn)曲線對比,分析小白鼠記憶力的變化。
6.另取1只饑餓處理的小白鼠稱重,測試前半小時將小白鼠灌服20%-40%酒精100ml/kg。將所記錄的時間與標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行對比,分析小白鼠記憶力的變化。
7.再取1只饑餓處理的小白鼠靜脈注射乙酰膽堿,重復(fù)步驟1,將所記錄的時間與標(biāo)準(zhǔn)曲線對比,分析小白鼠記憶力的變化
實驗改進(jìn)點
1、實驗用年老的小鼠與小白鼠進(jìn)行對比考察年齡對學(xué)習(xí)和記憶力的影響。
2、實驗考察乙酰膽堿和NaNO2對小白鼠學(xué)習(xí)和記憶力的影響。
3、實驗注意事項
1、選材為活潑健康的小白鼠,不能選運動機(jī)能和記憶力差的小白鼠。
2、為了避免嗅覺對測試的影響,做每一個實驗項目前都應(yīng)對迷宮進(jìn)行清潔。實驗分工
和 負(fù)責(zé)找資料,負(fù)責(zé)整理和制作,實驗改進(jìn)點由這幾人討論。
實驗預(yù)期結(jié)果
1、隨著小白鼠學(xué)習(xí)和記憶過程的進(jìn)行,小白鼠找到食物的時間會越來越短。
2、未經(jīng)饑餓處理的小白鼠由于沒有饑餓的刺激,找到食物的時間會更長。
3、由于NaNO2是缺氧劑,會造成腦部缺氧,從而破壞記憶的保持,因此小白鼠找到食物的時間會變長。
4、測試前半小時將小白鼠灌服20%-40%酒精可以明顯干擾記憶的再現(xiàn),因此小白鼠找到食物的時間會變長。
5、小白鼠腦部乙酰膽堿的增加會增強(qiáng)記憶力,因此小白鼠找到食物的時間會變短。思考
1.小白鼠的年齡對學(xué)習(xí)和記憶有沒有影響? 2.人的大腦也和小白鼠有類似的結(jié)果嗎? 3.乙酰膽堿在該實驗中的作用機(jī)理是什么?
實驗參考資料
《實驗動物和動物實驗技術(shù)》苗明三主編中國醫(yī)藥出版社.北京.1997.6 《動物生物學(xué)實驗技術(shù)》黃詩箋主編高等教育出版社 施普林出版社2001.8:109,131,132 《實驗動物學(xué)》羅滿林、顧為望主編中國農(nóng)業(yè)出版社 2002.8P127-143.實驗十二 消化系統(tǒng)疾病動物模型建立及驗證(設(shè)計)
(一)病毒性肝炎模型
常用方法是注射乙型肝炎病人血清復(fù)制乙型肝炎模型。但大部分實驗動物對甲型肝炎病毒不易感。我國已有報導(dǎo)紅面獼猴、恒河猴、人及野生樹鼩種毒后出現(xiàn)人甲型肝炎現(xiàn)象。近年來發(fā)現(xiàn)某些鴨肝炎病毒的特征與人肝炎病毒十分相似,故用鴨作為人肝炎模型也開始增多。
(二)免疫性肝炎模型
慢性或遷延性肝炎患者體內(nèi)存在著抗肝細(xì)胞成分抗體。1959年國外有人用肝組織懸液加弗氏佐劑免疫豚鼠,成功地誘發(fā)了肝細(xì)胞變性及壞死病變。也有人報導(dǎo)肝膜蛋白(LSP)加佐劑分次注射產(chǎn)生動物免疫性肝炎模型。
(三)胃、腸道潰瘍模型
在動物身上復(fù)制胃、腸道潰瘍的方法較多,但所用的方法不同,引起的潰瘍病變也各有特點。常用的方法有:
1.應(yīng)激法 以各種強(qiáng)烈的傷害性刺激(如強(qiáng)迫制動、饑餓、寒冷等),引起動物發(fā)生應(yīng)激性潰瘍。如把動物浸入冷水中或放在應(yīng)激箱中不斷地遭受電刺激,使之劇烈不安,一晝夜即能引起胃粘膜出血及潰瘍。這種方法簡單,成功率達(dá)99%以上。
2.藥物法 給動物投服或注射一定量的組織胺、胃泌素、腎上腺類固醇、水楊酸鹽、血清素、利血平、保泰松等可造成動物胃腸潰瘍。如給豚鼠小劑量的組織胺,連續(xù)數(shù)天,可引起胃、十二指腸、食道等發(fā)生潰瘍。又如可用利血平、血清緊張素、阿斯匹林等誘發(fā)大白鼠或小白鼠的胃潰瘍。
3.燒灼法 用電極燒灼胃底部的胃壁,可造成象人的胃潰瘍病變;用濃醋酸給大鼠胃壁內(nèi)注射或涂抹于胃壁漿膜面上可造成慢性潰瘍。燒灼法復(fù)制胃、腸道潰瘍模型的優(yōu)點是方法簡便,潰瘍部位可由作者自己選擇。
4.結(jié)扎幽門法 選用大鼠、小鼠或豚鼠,麻醉后,無菌技術(shù)下在劍突下由腹正中切開腹壁皮膚及肌層,切口長約3cm,暴露胃,沿胃向右,辯清幽門和十二指腸的聯(lián)結(jié)處,避開血管,于其下穿線,將幽門完全結(jié)扎。術(shù)后絕對禁食禁水。幽門結(jié)扎后,可刺激胃液分泌并使高酸度胃液在胃中潴留,造成胃潰瘍。這類潰瘍復(fù)制方法簡單,發(fā)生快,成功率高,但病變較表淺,嚴(yán)格地說仍然屬于胃粘膜急性出血性糜爛,與人類胃潰瘍的典型病變差距較大,適于作探索抗?jié)儾∷幬镅芯亢臀笣儼l(fā)病學(xué)方面的研究。
其他還可用外科手術(shù)方法從腸道上部排除可中和胃酸的堿性膽汁、胰 液或十二指腸液造成潰瘍。還可用刺激、損傷或毀損腦組織等方法造成潰瘍。
(四)胰腺炎模型
復(fù)制胰腺炎模型可采用使胰液外分泌發(fā)生潴留;使各種胰酶在胰管系統(tǒng)內(nèi)活化;感染或某些微生物毒素的作用,影響胰腺的營養(yǎng)、代謝等。實驗動物選用狗、兔和大鼠。將狗自身膽注按0.5ml/kg體重緩慢注入狗胰腺體尾交界處的胰腺實質(zhì)內(nèi),則可引起胰腺局部組織壞死及炎性浸潤,與人類急性胰腺炎和病變相似。用大腸桿菌懸液9億/ml,按1ml/kg體重,向兔胰管內(nèi)逆進(jìn)注射可誘發(fā)急性胰腺炎。另外也可采用大鼠腹腔內(nèi)連續(xù)注射乙硫胺酸誘發(fā)成功胰腺炎模型。隨著乙硫胺酸注射時間的延長,胰腺組織可以出現(xiàn)廣泛進(jìn)行性破壞和退化及胰酶水平的持續(xù)下降。
(五)糖尿病模型
糖尿病模型的復(fù)制方法采用注射致高血糖因子;手術(shù)切除胰腺的全部或大部;用四氧嘧啶(Alloxan)破壞胰島β細(xì)胞,造成胰性糖尿病;注射根皮苷使腎小管對糖的再吸收發(fā)生障礙并破壞酯酶致使葡萄糖磷酸化過程和脫磷酸過程障礙,引起根皮苷糖皮。
四氧嘧啶復(fù)制的糖尿病動物模型是目前研究人類糖尿病較好的方法,其實驗性糖尿病近似人類糖尿病,體內(nèi)代謝障礙時有可能產(chǎn)生此種衍生物,胰島外分泌部不受損傷,幾乎所有常用實驗動物都可用來進(jìn)行實驗研究。模型胰島的β細(xì)胞不是功能消失,而是功能不同程度的降低,有利于研究胰島組織再生和功能恢復(fù),動物不必注射胰島素即可存活很久。大鼠造型劑量為12mg/100g體重,家兔為150~200mg/kg體重,狗約為50~60mg/kg體重。家兔根皮苷皮糖尿病造型劑量為0.5%根皮苷按15m/kg體重,皮下注射。注意所用四氧嘧啶和根皮苷溶液必須現(xiàn)配現(xiàn)用。
實驗
十三、骨質(zhì)疏松動物模型建立和驗證(設(shè)計)
第五篇:實驗動物學(xué)
緒論
1, 以下對實驗動物描述正確的是 A 所有用于科學(xué)實驗的動物 B 健康無病的在實驗室內(nèi)人工飼養(yǎng)的動物 C 遺傳背景明確,微生物控制嚴(yán)格,用于科學(xué)實驗的動物 D 標(biāo)準(zhǔn)化的小型實驗用動物,飼養(yǎng)在屏障系統(tǒng)中 動物屬于標(biāo)準(zhǔn)化的實驗動物 2, 以下 屬于標(biāo)準(zhǔn)化實驗動物
A 普通級 Begel 犬 B BALB/C 小鼠 C SPF 級大鼠 D 無菌裸鼠 3,我國的實驗動物工作是在 年后才真正發(fā)展起來的? A 1949 年 B 1978 年 C 1994 年 D 2002 年 4,第一個《實驗動物質(zhì)量國家標(biāo)準(zhǔn)》是 頒布的? A 1978 年 B 1988 年 C 1994 年 D 2002 年 5,實驗動物質(zhì)量國家標(biāo)準(zhǔn)是
A 實驗動物工作的指南 B 全國范圍內(nèi)實驗動物工作統(tǒng)一的技術(shù)要求 C 實驗動物工作的法規(guī)性文件 D 實驗動物強(qiáng)制性執(zhí)行的標(biāo)準(zhǔn)
6,2002 年新的實驗動物質(zhì)量國家標(biāo)準(zhǔn)有
A 4 項強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn),27 項推薦標(biāo)準(zhǔn) B 7 項強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn),71 項推薦性標(biāo)準(zhǔn) C 12 項強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn),71 項推薦性標(biāo)準(zhǔn) D 7 項強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn),27 項推薦性標(biāo)準(zhǔn)
8,從事實驗動物保種,繁育,生產(chǎn),供應(yīng),運輸,商業(yè)性經(jīng)營以及實驗動物相關(guān)產(chǎn)品生產(chǎn),供應(yīng)的單位和個人, 應(yīng)當(dāng)按照國家規(guī)定取得省科學(xué)技術(shù)行政部門頒發(fā)的 A 《實驗動物供應(yīng)許可證》 B 《實驗動物使用許可證》 C 《實驗動物經(jīng)營許可證》 D 《實驗動物生產(chǎn)許可證》
9,使用實驗動物及相關(guān)產(chǎn)品進(jìn)行科研,檢定,檢驗和以實驗動物為原料或者載體生產(chǎn)產(chǎn)品等活動的單位和個人, 應(yīng)當(dāng)按照國家規(guī)定取得省科學(xué)技術(shù)行政部門頒發(fā)的 A 《實驗動物供應(yīng)許可證》 B 《實驗動物生產(chǎn)許可證》.C 《實驗動物使用許可證》 D 《實驗動物經(jīng)營許可證》.10,實驗動物種子應(yīng)當(dāng)
A 長期封閉保種 B 保持連續(xù)近交 20 代以上 C 來源于國家實驗動物種子中心或國家認(rèn)可的種源單位 D 來源于凈化后的無菌動物
11,按照《湖北省實驗動物管理條例》規(guī)定,同一間實驗室內(nèi)
A 可以最多同時進(jìn)行同一個課題項目中的同一級別的兩種動物實驗 B 可以同時進(jìn)行多種動物實驗 C 不得同時進(jìn)行不同品種,不同等級或者互有干擾的動物實驗 D 不得同時進(jìn)行大型和小型動物的實驗 12,申報科研課題,鑒定科研成果,進(jìn)行檢定檢驗和以實驗動物為原料或載體生產(chǎn)產(chǎn)品,應(yīng)當(dāng)把 作為基 本條件.A 使用標(biāo)準(zhǔn)化的實驗動物 B 具有適應(yīng)本實驗研究的動物模型 C 實驗的重復(fù)性和科學(xué)性 D 應(yīng)用合格實驗動物和使用相應(yīng)等級的動物實驗環(huán)境 13, 全國的實驗動物工作歸 主管..A 技術(shù)監(jiān)督檢驗檢疫總局 B 科學(xué)技術(shù)部 C 衛(wèi)生部 D 經(jīng)濟(jì)發(fā)展改革委員會 14, 《實驗動物管理條例》第 29 條規(guī)定:“從事實驗動物工作的人員對實驗動物.” A 必須愛護(hù),不得戲弄或虐待 B 必須保證其有充足的飲水和食物 C 必須保證其有表達(dá)天性的自由 D 必須減少對其的傷害
.15, 取得的動物實驗結(jié)果無效,科研項目不得鑒定,評獎,生產(chǎn)的產(chǎn)品不得出售 A 使用不標(biāo)準(zhǔn)化的實驗動物 B 應(yīng)用不合格的實驗動物或者在不合格的實驗環(huán)境設(shè)施內(nèi) C 沒有合格的動物實驗設(shè)施 D 沒有取得動物實驗資格許可證 16,動物實驗的局限性表現(xiàn)在
A 動物實驗結(jié)果可以為臨床試驗提供一個簡單的結(jié)果外推.B 動物應(yīng)急反應(yīng)造成的動物實驗結(jié)果的不可靠性.C 人和動物在解剖,組織,免疫等方面存在諸多相似點.D 動物個品種,品系間對各種實驗反應(yīng)存在共同點.17,Jakson Lab 的 Little 于 1909 年采用近親交配方式培育出了第一近交系.A DBA B CBA C C3H D BALB/c 18,實驗動物按遺傳學(xué)分類為
A 相同基因類型,不同基因類型,中間基因類型動物 B近交系,封閉群,雜交群 C 同源突變系,同源導(dǎo)入系,分離近交系,重組近交系 D 遺傳限定動物,免疫缺陷動物,轉(zhuǎn)基因動物 19,在 中,首先全面系統(tǒng)提出了 3R 理論.A
.24,從事實驗動物及其相關(guān)產(chǎn)品生產(chǎn)的單位和個人,供應(yīng),出售實驗動物及相關(guān)產(chǎn)品時
.A 應(yīng)當(dāng)提供質(zhì)量合格證,并有負(fù)責(zé)人簽字,單位蓋章.B 合格證應(yīng)當(dāng)標(biāo)明實驗動物或者相關(guān)產(chǎn)品的確切名稱,級別,規(guī)格,數(shù)量, C 合格證應(yīng)當(dāng)標(biāo)明質(zhì)量檢測情況,供應(yīng)單位,日期,許可證號 D 應(yīng)無償提供符合要求的運輸包裝材料.25,運輸實驗動物應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格遵守國家有關(guān)規(guī)定.A 使用符合實驗動物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),等級要求的運輸工具和籠器具, 保證實驗動物的質(zhì)量及健康要求 B 不同品種,品系的實驗動物不得混合裝運.C 不同等級的實驗動物不得混合裝運.D 運輸過程中,應(yīng)保證實驗動物沒有應(yīng)激反應(yīng).26, 不需要辦理實驗動物使用許可證.A 使用實驗動物及相關(guān)產(chǎn)品進(jìn)行科學(xué)研究的單位和個人 B 以實驗動物為原料或者載體生產(chǎn)產(chǎn)品等活動的單位和個人 C 從事實驗動物保種,繁育,運輸?shù)膯挝缓蛡€人.D 使用實驗動物及相關(guān)產(chǎn)品進(jìn)行實驗的單位和個人 27,從事實驗動物工作的單位,應(yīng)當(dāng)加強(qiáng)實驗動物管理, A 制定嚴(yán)格的管理制度和科學(xué)的操作規(guī)程 B 組織從業(yè)人員進(jìn)行專業(yè)培訓(xùn) C 組織從業(yè)人員進(jìn)行技術(shù)等級考核,達(dá)到崗位要求.D 對于未培訓(xùn)或考核未通過者可以從事短期動物實驗工作.28,善待動物不僅僅是考慮動物的福利,也是因為受虐待的動物.A 會反抗而傷害人 B 會反抗而傷害動物自己 C 會反抗而傷害人和動物 D 精神的變化,會對實驗結(jié)果產(chǎn)生影響.動物實驗技術(shù)
1,動物實驗時,外購的動物需要經(jīng)過 天的適應(yīng)性觀察
A 1 天即可 B 立即可以做實驗 C 3-7 天 D 約需 10 天以上 2,下面哪種藥物常用于動物的靜脈麻醉
A 氯仿 B 戊巴比妥鈉 C 普魯卡因 D 利多卡因 3,下面關(guān)于灌胃給藥的描述哪種是錯誤的
A 是指借助器械將藥物直接灌入動物胃內(nèi)的方法 B 這種方法能夠準(zhǔn)確控制給藥劑量 C 灌胃針頭用普通
注射器針頭即可 D 如果操作不當(dāng)容易使動物損傷或死亡 4,下面哪種染色劑為黃色
A 2%硝酸銀溶液 B 0.5%的中性品紅 C 煤焦油的酒精溶液 D 3%-5%的苦味酸溶液 5,下面關(guān)于兔子抓取的方法哪種是正確的
A 家兔兩耳較長,可直接抓取 B 可直接拖拉家兔的四肢 C 用手抓住家兔的腰部直接提起 D 右手抓住家兔頸部皮膚,左手托起兔子的臀部.6,實驗動物局麻時常采用的藥物有
A 1%硫賁妥鈉 B 2%戊巴比妥鈉 C 鹽酸氯胺酮 D 1%鹽酸普魯卡因 7,小鼠灌胃一次能耐受的最大容量是 A 0.9ml B 0.5ml C 0.3ml D 1.5ml 8,比格犬的靜脈滴注首選部位: B.耳緣靜脈 C.后肢小隱靜脈 A.前臂內(nèi)側(cè)皮下靜脈 9,大小鼠最常用的反復(fù)多次采血方法: A 眼眶靜脈叢 B 尾靜脈采血 C 斷頭取血 D 心臟 10,豚鼠的最大安全采血量 A 1ml B 2ml C 5ml D 10ml 11,動物實驗要求每天給藥時間一致這是因為.A 考慮人的生活習(xí)慣 B 考慮動物生理上的節(jié)律性變化 C 方便管理 D 藥物配制需要
環(huán)境與營養(yǎng)考試題
1,一種會引起動物心跳,呼吸次數(shù)及血壓增加,血糖值出現(xiàn)明顯不同,白細(xì)胞數(shù),免疫機(jī)能變化,大鼠出現(xiàn)高 血壓,心臟肥大的環(huán)境因素是
A.A 噪音 B 溫度 C 濕度 D 光照
2, 一種會引起動物的姿式, 攝食量, 飲水量, 母性行為, 心跳.呼吸, 新陳代謝等出現(xiàn)相應(yīng)改變的環(huán)境因素是
B.A 噪音 B 溫度 C 濕度 D 光照
3,一種對動物的散熱率有顯著影響的環(huán)境因素是 C.A 噪音 B 溫度 C 濕度 D 光照
4,能控制垂體中促性腺激素和腎上腺皮質(zhì)激素的分泌的環(huán)境因素是 D.A 噪音 B 溫度 C 濕度 D 光照
5,與體熱的發(fā)散有關(guān)的環(huán)境因素是 A.A 風(fēng)速 B 氨濃度 C 飼養(yǎng)密度 D 粉塵
6,一種引起呼吸器官粘膜異常,發(fā)生流淚,咳嗽,粘膜發(fā)炎,肺水腫和肺炎且是動物室中臭氣物質(zhì)主要來源的 環(huán)境因素是 B.A 風(fēng)速 B 氨濃度 C 飼養(yǎng)密度 D 粉塵
7,一種引起動物群體增重慢,飼料報酬低,腸內(nèi)異常菌叢增加,并導(dǎo)致傳染病的發(fā)生率增加,動物壽命縮短的 環(huán)境因素是 C.A 風(fēng)速 B 氨濃度 C 飼養(yǎng)密度 D 粉塵
8,能形成氣溶膠,不僅刺激動物機(jī)體產(chǎn)生不良反應(yīng),也是各種病原微生物的載體,人類變態(tài)反應(yīng)的變應(yīng)元的環(huán) 境因素是 D.A 風(fēng)速 B 氨濃度 C 飼養(yǎng)密度 D 粉塵
9,光照對動物的生殖影響很大,其關(guān)鍵在于每日光照的 D.A 光通量 B 波長 C 強(qiáng)度 D 明暗周期
10,動物飼養(yǎng)室中的空氣含有大量的粉塵,它們懸浮在空氣中,這種浮游的粉塵微粒與空氣的組合稱之為 B.它 能引起人的變態(tài)反應(yīng)和導(dǎo)致疾病的傳播.A 氣流 B 氣溶膠 C 亂流 D 層流
11,光照對動物的生殖影響很大,其關(guān)鍵在于每日光照的 D.A 光通量 B 波長 C 強(qiáng)度 D 明暗周期
12,動物實驗可用 R=(A+B+C)*D+E 公式表示,其中 R 表示在動物實驗中實驗動物的總反應(yīng)而 D 表示 C.A 動物種間的共同反應(yīng) B 動物的品種品系特有反應(yīng) C 環(huán)境因素 D 實驗誤差
13,屏障環(huán)境飼育室應(yīng)安裝低效,中效,高效三級過濾器,三級過濾器的位臵分別是 B.A 低效在機(jī)房,中,高效位于飼養(yǎng)室 B 低,中效在機(jī)房,高效位于飼養(yǎng)室 C 中,高效在機(jī)房,低效位于飼養(yǎng)室 D 高效在機(jī)房,低,中效位于飼養(yǎng)室 14,根據(jù)我國國家技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布的實驗動物環(huán)境設(shè)施監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn),屏障環(huán)境空氣潔凈度指標(biāo)是 C.A 100 級 B 1000 級 C 1 萬級 D 10 萬級 15,一種可臵于開放式實驗動物飼育室,配有空氣過濾裝臵和送風(fēng)設(shè)備,空氣凈化等級達(dá)到 10000 級,適合于 清潔級大,小鼠作實驗的飼養(yǎng)設(shè)備,稱之為 C.A平板式鼠架 B 懸掛式鼠架 C 獨立通風(fēng)換氣籠具 IVC D 隔離器 16,一種可臵于開放式實驗動物飼育室,配有空氣過濾裝臵和送風(fēng)設(shè)備,空氣凈化等級達(dá)到 100 級,器內(nèi)外完 全隔斷,適合于無菌級動物繁殖的設(shè)備,稱之為 D.A平板式鼠架 B 懸掛式鼠架 C 潔凈層流架 D 隔離器 17,為了防止 SPF 級動物飼料營養(yǎng)成份遭受破壞損失,最理想有效的消毒方式是 D.A 紫外燈照射 B 烤箱烘烤 C 高壓鍋高溫高壓 D 60Co 輻照 18,需要以某種方式特別補(bǔ)充維生素 C 的實驗動物是 A.A 豚鼠 B 大鼠 C 犬 D猴 5 2,1959 年 Russell 和 Bruch 提出動物的基因型受 , 提出動物的基因型受 影響而決定其表現(xiàn)性 A 發(fā)育環(huán)境(胚胎期和哺乳期)B 周圍環(huán)境 發(fā)育環(huán)境(胚胎期和哺乳期)C 鄰近環(huán)境 D 實驗場所環(huán)境 3,實驗動物的外環(huán)境主要是指.A 實驗動物飼育場所外的周圍環(huán)境.B 實驗動物活動空間以外的環(huán)境.C 與實驗動物有關(guān)的環(huán)境以外的周圍環(huán)境.D 實驗動物飼育和實驗場所外的周圍環(huán)境 4,實驗動物環(huán)境因素包括.A 氣候因素,理化因素,居住因素,生物因素 B 氣候因素,理化因素,居住因素,營養(yǎng)因素 C 氣候因素,理化因素,居住因素,營養(yǎng)因素,生物因素,遺傳因素 D 氣候因素,理化因素,居住因素,營養(yǎng)因素,生物因素 5,動物的臨界溫度是指.A 體溫失去恒常性而開始下降或上升時的環(huán)境溫度.B 開始導(dǎo)致動物死亡的環(huán)境溫度.C 動物基礎(chǔ)代謝最少時的環(huán)境溫度.D 導(dǎo)致動物產(chǎn)生應(yīng)急反應(yīng)的環(huán)境溫度.6,溫度應(yīng)激引起生物體反應(yīng)的時間與生物體反應(yīng)量之間的關(guān)系是.A 首先出現(xiàn)器質(zhì)性變化,接著產(chǎn)生內(nèi)分泌調(diào)節(jié),最后出現(xiàn)神經(jīng)性調(diào)節(jié).B 首先出現(xiàn)內(nèi)分泌調(diào)節(jié),接著產(chǎn)生神經(jīng)性調(diào)節(jié),最后出現(xiàn)器質(zhì)性變化.C 首先出現(xiàn)神經(jīng)性調(diào)節(jié),接著產(chǎn)生內(nèi)分泌調(diào)節(jié),最后出現(xiàn)器質(zhì)性變化.D 首先出現(xiàn)神經(jīng)性調(diào)節(jié),接著產(chǎn)生器質(zhì)性變化,最后出現(xiàn)內(nèi)分泌調(diào)節(jié).7,環(huán)境溫度對動物生殖機(jī)能影響的錯誤表述是.A 環(huán)境溫度過高,常導(dǎo)致哺乳類實驗動物性周期推遲.B 溫度過高,雄性動物睪丸萎縮,產(chǎn)生精子能力下降.C 溫度過高,雌性動物性周期紊亂,泌乳能力下降,妊娠率降低.D 高溫可使胎兒的初生重下降,離乳率和成活率降低.8,環(huán)境溫度對動物實驗反應(yīng) 加書簽
實驗動物考試題庫
性的影響表現(xiàn)在.A 在 10℃-30℃氣溫環(huán)境下,小鼠的呼吸數(shù),發(fā)熱量隨著氣溫的升高而呈直線上升.B 卵白蛋白引起變態(tài)反應(yīng)所致小鼠的過敏性休克的死亡率,隨溫度升高而減少.C 藥物的 LD50 隨環(huán)境溫度而變化.D 觀察麻醉期間的心跳數(shù)和呼吸數(shù),均在低溫環(huán)境下不變.9,濕度過高對動物的影響,下述敘述錯誤的是.A 大,小鼠過敏性休克的死亡率隨濕度增加而明顯下降.B 在溫度為 21℃,發(fā)現(xiàn)鼻腔內(nèi)的細(xì)菌數(shù),濕度在 25~30%時數(shù)量最小,85-90%時最多.C 動物室空氣中的細(xì)菌數(shù)與氨氣濃度在濕度高的情況下增高.D 小鼠的仙臺病毒在高濕環(huán)境下發(fā)病率高 10,風(fēng)速的大小對實驗動物的影響表現(xiàn)在.A 濕度 40%的環(huán)境下,固定小鼠的體溫,在高溫環(huán)境下隨風(fēng)速的增加而明顯地下降.B 在 22±1℃的溫度條件下,無毛小鼠在有鋪墊物的塑料籠飼養(yǎng)組的攝食量在風(fēng)速為 67cm/s 的條件下,比 無風(fēng)狀態(tài)要增加 26%,而金屬網(wǎng)籠飼養(yǎng)組在風(fēng)速為 67cm/s 的條件下增加了 36%.C 實驗動物其單位體重的體表面積一般均與人相近,氣流對實驗動物的影響也較大.D 風(fēng)速增大對食量沒有太大影響.11,在雙走廊 SPF 設(shè)施中空氣流動方向是 ,確保病原微生物不至于侵入動物室內(nèi).A 從飼育觀察室,清潔走廊,污物走廊,淋浴室設(shè)施外,室內(nèi)處于正壓 B
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從清潔走廊,污物走廊,飼育觀察室,淋浴室設(shè)施外,室內(nèi)處于負(fù)壓 C 從清潔走廊,飼育觀察室,污物走廊,淋浴室設(shè)施外,室內(nèi)處于正壓 6 D 從清潔走廊,飼育觀察室,污物走廊,淋浴室設(shè)施外,室內(nèi)處于負(fù)壓 12,負(fù)壓環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)換氣次數(shù)的測定與 無關(guān).A 送風(fēng)口平均風(fēng)速 B 有效橫截面積 C 環(huán)境溫度 D 室內(nèi)容積 13,光照對動物的影響除 之外,與下列次級因素均有關(guān)系.,光照對動物的影響除 之外,與下列次級因素均有關(guān)系.A 光照強(qiáng)度 B 明暗交替時間 C 動物視網(wǎng)膜的近表層細(xì)胞 D 光線的波長.14,下述表述有錯誤的是 , A 桿狀體細(xì)胞感覺光線的明暗,錐狀體細(xì)胞感覺顏色.B 鳥類的錐狀體細(xì)胞占優(yōu)勢,嚙齒類是桿狀體細(xì)胞占優(yōu)勢.C 嚙齒類容易受強(qiáng)光的損害,對色彩的辨別能力差.D 綿羊,豬,狗,貓也與嚙齒類一樣對顏色無辨別能力.16,用于飼養(yǎng)清潔級和 SPF 級動物的“傳統(tǒng)的屏障系統(tǒng)”中的無菌概念大致 A 空氣經(jīng)高中低效過濾;飼料,飲水,墊料滅菌;動物籠具滅菌;人更衣或洗澡后穿無菌衣帽和帶無菌手 套操作 B 空氣經(jīng)高中效過濾;飼料,飲水,墊料滅菌;動物籠具滅菌;人更衣或洗澡后穿無菌衣帽和帶無菌手套 操作 C 空氣經(jīng)高中低效過濾;飼料,飲水滅菌;動物籠具滅菌;人更衣或洗澡后穿無菌衣帽和帶無菌手套操作.D 空氣經(jīng)高中低效過濾;飼料,墊料滅菌;動物籠具滅菌;人更衣或洗澡后穿無菌衣帽和帶無菌手套操作.17,在傳統(tǒng)的屏障系統(tǒng)空氣壓差流向是 A 依次是飼養(yǎng)間,清潔儲藏室,清潔走道,次清潔走道 B 依次是清潔儲藏室,飼養(yǎng)間,清潔走道,次清潔走道 C 依次是清潔儲藏室,清潔走道,飼養(yǎng)間,次清潔走道 D 依次是清潔走道,飼養(yǎng)間,次清潔走道,清潔儲藏室 18,在傳統(tǒng)的屏障系統(tǒng)中,人的流向是 A 一更衣室,二更衣室,風(fēng)淋室,飼養(yǎng)間,清潔儲藏室,清潔走道,次清潔走道,緩沖間(氣閘)B 一更衣室,二更衣室,風(fēng)淋室,清潔儲藏室,飼養(yǎng)間,清潔走道,次清潔走道,緩沖間(氣閘)C 一更衣室,二更衣室,風(fēng)淋室,飼養(yǎng)間,清潔儲藏室,清潔走道,次清潔走道,緩沖間(氣閘)D 一更衣室,二更衣室,風(fēng)淋室,清潔儲藏室,清潔走道,飼養(yǎng)間,次清潔走道,緩沖間(氣閘)24,下列動物中體內(nèi)缺乏葡萄糖內(nèi)酯氧化酶,自身不能合成維生素 C,必須從飼料中補(bǔ)充的動物是 A 小鼠 B 大鼠 C 豚鼠 D 地鼠.41,大多數(shù)實驗動物所需的氨基酸為 A 精氨酸,組氨酸,賴氨酸,苯丙氨酸,蘇氨酸,色氨酸,亮氨酸 B 精氨酸,甘氨酸,賴氨酸,苯丙氨酸,蘇氨酸,色氨酸,亮氨酸 C 精氨酸,組氨酸,賴氨酸,苯丙氨酸,絲氨酸,色氨酸,亮氨酸 D 精氨酸,組氨酸,賴氨酸,苯丙氨酸,蘇氨酸,色氨酸,丙氨酸 42,一種維持神經(jīng)和肌肉組織的正常功能,參與正常血液凝固的微量元素是 A 鈣 B 鈉 C 鐵 D 碘 43,一種維持實驗動物體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的必要原素,維持酸堿平衡,保持細(xì)胞內(nèi)外滲透壓的平衡,調(diào)節(jié)心臟肌肉活 動的必須物質(zhì)是.A 鈣 B 鈉 C 鐵 D 碘 44,一種與體內(nèi)紅血球構(gòu)成有關(guān),如缺乏時,動物即會出現(xiàn)貧血癥的微量元素是 A 鈣 B 鈉 C 鐵 D 碘 45,一種作為甲狀腺素的主要成份,如缺乏時,則會產(chǎn)生甲狀腺肥大的微量元素是 A 鈣 B 鈉 C 鐵 D 碘 46,一種細(xì)胞增殖生長,維持上皮的正常狀態(tài)和視網(wǎng)膜功能的重要物質(zhì).缺乏導(dǎo)致實驗動物生長不良,對疾病易 感,神經(jīng)系統(tǒng),上皮退化,眼疾,胃腸活動失常,失掉生殖能力的維生素是 A 維生素 A B 維生素 D C 維生素 E D 維生素 K 47,一種參與調(diào)節(jié)鈣,磷代謝,促成骨的生產(chǎn)和骨組織的礦質(zhì)化.缺乏時,將降低對鈣,磷的吸收利用能力,發(fā) 7 生佝樓病,軟骨病等癥狀的維生素是 A 維生素 A B 維生素 D C 維生素 E D 維生素 K 48,一種與生殖,泌乳有關(guān),缺乏后可引起動物不育癥.多含于種子的胚芽中的維生素是 A 維生素 A B 維生素 D C 維生素 E D 維生素 K 49,一種血液凝固的必須因子,缺乏時血液凝固緩漫,出血過多的維生素是上.D 維生素 K A 維生素 A B 維生素 D C 維生素 E 50,在氨基酸利用上,一般以 氨基酸能被吸收并重新合成蛋白質(zhì).A L型 B D型 C M型 D K型 51,必需氨基酸是指 的氨基酸 A 在某種動物體內(nèi)不能快速,足量合成以滿足該種動物
需要 B 在某種動物體內(nèi)能夠由其它氨基酸相互轉(zhuǎn)化 C 在某種動物體內(nèi)不能快速,足量合成以滿足該種動物需要,必須從飼料中獲得 D 在某種動物體內(nèi)由于缺乏而限制其它氨基酸利用效率 52,氨基酸組成平衡是指.A 與動物機(jī)體蛋白質(zhì)氨基酸構(gòu)成接近.B 各種氨基酸能夠被充分利用.C 氨基酸各組分比例相等.D 必需氨基酸能夠被充分利用的比例.53,植物性飼料如糧谷,油籽餅粕中容易缺乏 A 賴氨酸 B 精氨酸 C 組氨酸 D 酪氨酸 54,脂肪可促進(jìn) 的吸收和利用.B 維生素 A C 氨基酸 D 微量元素 A 維生素 B2 55,缺乏不飽和脂肪酸,如亞油酸可引起.A 中樞神經(jīng)系統(tǒng)機(jī)能障礙 B 大鼠心肌炎 C 生長停滯 D 腸道腹瀉 不易利用,可引起腸道過度發(fā)發(fā)酵和腹瀉.56,貓狗對 A 粗纖維 B 脂肪酸 C 生淀粉 D 無機(jī)鹽 57,飼料中的最適鈣磷比例為.A 1.3:1 B 2:1 C 3:1 D 4:1 58,飼料中含 氯化鈉,對大多數(shù)實驗動物的生長,繁殖,哺乳是必需的.A 0.5% B 1% C 3% D 5% 59,一般飼料中容易缺乏的維生素是 ,因此在飼料配方中添加最多.A VitC B VitE C VitD D VitA 60, 飼料蛋白質(zhì)含量顯著降低小鼠的日增重和斷奶成活率, 蛋白質(zhì)即可滿足昆明小鼠妊娠和哺乳 階段的蛋白質(zhì)需要.A 10%;14% B 14%;16% C 14%;18% D 18%;20% 61, 品系需要高蛋白高脂肪, 品系要求低蛋白飼料.A DBA;C3H B DBA;C3H C C57BL;DBA D C57BL;C3H 62,小鼠的 需要量比大鼠高.A 蛋白質(zhì) B 生物素 C VitA D 鎂 63,生長期(16 周齡)以后, 蛋白質(zhì)即可滿足成年大鼠的維持需要.A 7%-10% B 18%-20% C 16%-18% D 5%-7% 64,大鼠對 利用效率最高.A 大豆蛋白 B 酪蛋白 C 面筋蛋白 D 粗蛋白 65,飼料中鋅和錳的含量同時降低,還將使大鼠的.A 生殖機(jī)能下降 B 呈缺鐵性貧血 C 肝/體比值升高 D 腎上腺發(fā)育遲緩 的粗蛋白和 的能量使豚鼠增重最快.66, A 16%;12MJ/kg B 8%;10MJ/kg C 10%;24MJ/kg D 20%;8MJ/kg 8 67,如果采用酪蛋白作為單一的蛋白質(zhì)來源,不補(bǔ)充氨基酸,則日糧蛋白質(zhì)必須要達(dá) 時,才能保證豚鼠 生長最快.B 35% C 20% D 40% A 18% 68,豚鼠屬草食性動物,對粗纖維的消化能力較強(qiáng),日糧中要求含 的粗纖維 C 12-14% D 18-20% A 3-4% B 8-10% 69,每 100 克體重每日需要維生素 C 可滿足豚鼠生長發(fā)育需要 A 0.5-1.0mg B 0.1-0.3mg C 1.5-2.0mg D 2.0-3.0mg 70,在必需氨基酸中對兔特別重要, 是第一限制性氨基酸.A 賴氨酸 B 蛋氨酸 C 胱氨酸 D 精氨酸 71, 在初生時有很大的鐵儲備,因而不易發(fā)生貧血.A 家兔 B 大鼠 C 小鼠 D 豚鼠 72,以下對苜蓿干草描述正確的是.A 粗纖維含量為 50%-60% B 粗蛋白質(zhì)含量為 10%-20% C 鈣和胡蘿卜素含量較少 D 曬干的干草維生素 D2 損失較大 73,對脫水蔬菜的描述正確的是.A 損失成份較多,缺乏維生素 D2,在豚鼠和家兔日糧中可占 20%-30% B 損失成份較多,缺乏維生素 D2,在豚鼠和家兔日糧中可占 50%-60% C 基本上保留原有成份,但缺乏維生素 D2,在豚鼠和家兔日糧中可占 20%-30% D 基本上保留原有成份.但缺乏維生素 D2,在豚鼠和家兔日糧中可占 50%-60%.74,對禾本科籽實類飼料的營養(yǎng)特性描述正確的是 A 無氮浸出物含量高,粗纖維含量低.B 鈣,磷比例不平衡.鈣的含量在 0.1%以上,而磷的含量較少 C 維生素含量均勻.含有較豐富的維生素 B1 和維生素 E D 一切籽實中均缺乏維生素 D 和胡蘿卜素 75,豆科籽實類飼料的營養(yǎng)特性包括.①精氨酸,賴氨酸,苯丙氨酸,亮氨酸,蛋氨酸等含量均多于禾本科籽實.②粗脂肪含量高.③礦物質(zhì),維 生素含量與禾本科籽實相似.④含有抗胰蛋白酶,產(chǎn)生甲狀腺腫的物質(zhì),皂素和血凝集素等,影響動物消化 和生理過程.A ① B ①② C ②③ D ①②③④.76,對動物性飼料的營養(yǎng)特性描述錯誤的是 A 動物性飼料中粗蛋白含量高,一般都在 40%~80% B 魚粉中富含維生素 B,還含有維生素 D3 及維生素 A C 鈣與磷的比例適當(dāng),能被動物充分吸收利用.D 一般在日糧中加入 20%~30%的動物性飼料,可使蛋白質(zhì)的生物學(xué)價值大為提高..77,糠麩類飼料 A 日糧中可占 10%-20%.B 粗蛋白質(zhì)的數(shù)量和質(zhì)量均低于豆料與禾本科籽實.C 鈣,磷比例平衡,麩皮中還含有較多的鎂鹽.D 含有豐富的維生素 A,D,K,E.犬 ,猴
1,國際上通用的實驗用犬是 A 京巴犬.B 畢格犬.C 民養(yǎng)犬.D 北京犬 2,下列哺乳動物中屬于食草類動物,且其全價飼料必須含有 11%以上的粗纖維的動物是 A兔 B狗 C貓 D猴 3,在哺乳動物中卵細(xì)胞最大,在卵裂階段最容易在體內(nèi)培養(yǎng),適合胚胎移植的動物是 A 大鼠 B 兔 C 豚鼠 D猴 4, 有產(chǎn)后發(fā)情的特性.A 家兔,貓,駱駝 B 家兔,大鼠,小鼠 C 犬,家兔,大鼠 D 猴,貓,駱駝 5,我國使用的實驗猴,主要是獼猴屬中的 A 恒河猴 B 熊猴 C 斷尾猴 D 臺灣巖猴 6,廣泛用于內(nèi)分泌摘除,消化生理,消化道和腺瘺如食道瘺,腸瘺,唾液腺瘺的動物是 A兔 B狗 C貓 D猴 7,實驗猴常用于的實驗與研究是 A 藥品的熱原實驗 B 新藥臨床使用前的毒性試驗與外科實驗 C 帕金森綜合癥,脊髓灰質(zhì)炎病毒疫苗檢定 D 青霉素敏感性實驗 8,具有發(fā)達(dá)的血液循環(huán)和神經(jīng)系統(tǒng),腸道很短,雄性動物有一塊陰莖骨的動物是 B狗 C貓 D猴 A兔 9,犬常用于的實驗與研究是 A 藥品的熱原實驗 B 新藥臨床使用前的毒性試驗與外科實驗 C 生殖生理和避孕藥的研究 D 艾滋病病毒,SARS 病毒的研究 10,不會嘔吐的動物是 ,所以不宜作為嘔吐實驗的使用對象.A 兔,大鼠,犬 B 大鼠,貓,小型豬 C 兔,貓,犬 D 兔,大鼠,馬屬動物 11,下列關(guān)于犬的特性描述錯誤的是 A 智力發(fā)達(dá),記憶力強(qiáng),感情豐富.B 犬的汗腺很不發(fā)達(dá),散熱主要靠加速呼吸頻率,舌伸出口外喘式呼吸.C 視網(wǎng)膜上無黃斑,即無最清楚的視覺點,因此視覺較差.犬還是紅綠色盲.D 味覺,嗅覺和聽覺靈敏.嗅覺能力超過人的 1200 倍,聽覺比人靈敏 16 倍.12,具有頰囊,可用來貯存食物的動物是.A 獼猴,地鼠 B 狗,家兔 C 地鼠,貓 D 獼猴,家兔 13,體內(nèi)不能合成維生素 C,維生素 C 必須來源于飼料中的動物是.A 獼猴,地鼠 B 獼猴,豚鼠 C 地鼠,豚鼠 D 獼猴,家兔 14,下列動物中適宜作嘔吐反應(yīng)實驗的動物是 A 狗 B 兔 C 豚鼠 D 大鼠 15,下列動物中嘔吐反應(yīng)敏感,適宜作嘔吐實驗的動物是.A 犬 B 兔 C 豚鼠 D 大鼠 16,下列動物中嘔吐反應(yīng)敏感,適宜作嘔吐實驗的動物是 A.A 猴 B 兔 C 豚鼠 D 大鼠 17,繁殖學(xué)研究應(yīng)考慮各種動物繁殖周期.春秋二季,季節(jié)性單發(fā)情的動物是 A A 狗 B 貓 C 小鼠 D 恒河猴 18,繁殖學(xué)研究應(yīng)考慮各種動物繁殖周期.全年有月經(jīng)周期的動物是 D A 狗 B 貓 C 小鼠 D 恒河猴 19,一種視力很差,視角小,看不清正面景物,且紅綠色盲的動物是 B 狗 C 貓 D 猴 A 兔 20,一種具有發(fā)達(dá)的血液循環(huán)和神經(jīng)系統(tǒng),腸道很短,有一塊陰莖骨的動物是 10 A 兔 B 狗 C 貓 D 猴 21,一種在心血管外科,腦外科,斷肢再植,器官和組織移植等實驗外科上廣泛使用的動物是 A 兔 B 狗 C 貓 D 猴 22,一種大腦皮層定位實驗.條件反射實驗中廣泛使用的動物是 A 兔 B 狗 C 貓 D 猴 23,一種廣泛用于內(nèi)分泌摘除,消化生理,消化道和腺瘺如食道瘺,腸瘺,唾液腺瘺的動物
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