第一篇：微生物實(shí)驗(yàn)室氣溶膠預(yù)防與控制

濟(jì)南市兒童醫(yī)院

微生物實(shí)驗(yàn)室氣溶膠污染預(yù)防與控制

研究表明已知原因的實(shí)驗(yàn)室感染只占全部感染的18％，不明原因的實(shí)驗(yàn)室感染卻高達(dá)82％。對(duì)不明原因的實(shí)驗(yàn)室感染的研究表明，醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的許多操作可以產(chǎn)生氣溶膠，由于其氣溶膠分子小，易漂浮在空氣中，大多數(shù)可能是病原微生物形成的感染性氣溶膠在空氣擴(kuò)散而污染實(shí)驗(yàn)室的空氣，當(dāng)工作人員吸入了污染的空氣，便可以引起實(shí)驗(yàn)室相關(guān)感染。在病原微生物實(shí)驗(yàn)室中，產(chǎn)生的微生物氣溶膠可分為兩大類：一類是飛沫核氣溶膠，另一類是粉塵氣溶膠。

這兩類微生物氣溶膠對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作人員都具有嚴(yán)重的危害性，其程度取決于微生物本身的毒力、氣溶膠的濃度、氣溶膠粒子大小以及當(dāng)時(shí)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的微小氣候條件。一般來說，微生物氣溶膠顆粒越多，粒徑越小，實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境越適合微生物生存，引起實(shí)驗(yàn)室感染的可能性就越大。

在離心、燒接種環(huán)、劇烈震蕩或混勻時(shí)極易形成帶菌的氣溶膠。因此樣本的離心工作必須在開放實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行，真空采血管須在生物安全柜中打開或在離心機(jī)中靜置30min后才能打開。細(xì)菌室酒精燈火焰上應(yīng)套一個(gè)長管，使酒精燈火焰上方有充足的無菌空間，最好使用焚燒燈。

任何有可能產(chǎn)生細(xì)顆粒氣溶膠的操作步驟（如標(biāo)本編號(hào)、血清分離、細(xì)菌接種等）標(biāo)本處理原則上在有合格證的生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。對(duì)于暫無生物安全柜的實(shí)驗(yàn)室，可在超凈臺(tái)內(nèi)處理標(biāo)本，但切不可開啟排風(fēng)裝置，以減少病毒在空氣中彌散。處理標(biāo)本使用專用離心機(jī)，離心時(shí)應(yīng)使用密閉的離心機(jī)轉(zhuǎn)頭或密閉樣品杯。理想情況下，應(yīng)在生物安全柜內(nèi)取出離心機(jī)轉(zhuǎn)頭或樣品杯。離心機(jī)使用完畢，立即用含有效氯1500mg/L消毒液進(jìn)行表面消毒。因此做好醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)微生物氣溶膠的凈化工作，有助于降低院內(nèi)感染的發(fā)生，保護(hù)在場所工作的人員的安全。

一、微生物氣溶膠的定義

是指液體或固體微粒均勻地分散在氣體中形成的相對(duì)穩(wěn)定的懸浮體系。

微生物氣溶膠是一群形體微小，構(gòu)造簡單的單細(xì)胞或接近單細(xì)胞的生物懸浮于空氣中所成的膠體體系。粒子大小在0.01～100μμm，一般為0.1～30μm。

二、微生物氣溶膠的特點(diǎn)

1、生物氣溶膠無色無味、無孔不入，不易發(fā)現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)人員在自然呼吸中不知不覺吸入而造成感染。若治療控制不及時(shí)會(huì)造成嚴(yán)重后果。

2、與其自然感染的疾病相比，有些微生物氣溶膠感染的癥狀不典型，病程復(fù)雜，難以及時(shí)診治，影響預(yù)后。

3、有些氣溶膠感染只有呼吸道粘膜免疫才有預(yù)防作用，非呼吸道免疫途徑預(yù)防作用效果欠佳。現(xiàn)有常規(guī)疫苗的預(yù)防效果不理想，如肺炭疽。

4、呼吸道傳播的傳染病的微生物特別是高致病性病毒常常發(fā)生變異，尤其是其抗原性、致病性都可能發(fā)生改變，在空氣中存活力增強(qiáng)。

5、氣溶膠傳播容易發(fā)生病原體在人與人、人與動(dòng)物、動(dòng)物與動(dòng)物之間的傳播。

6、可以遠(yuǎn)距離或較遠(yuǎn)距離傳播，這是其與其他傳播途徑的顯著區(qū)別，也是氣溶膠傳播難以預(yù)防的另一重要原因。

醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室氣溶膠污染凈化的國家標(biāo)準(zhǔn)要求：

(1)低溫高速離心機(jī)或其他可能產(chǎn)生氣溶膠的設(shè)備應(yīng)置于負(fù)壓罩或其他排風(fēng)裝置（通風(fēng)櫥、排氣罩等）之中，應(yīng)將其可能產(chǎn)生的氣溶膠經(jīng)高效過濾后排出。

(2)污染區(qū)內(nèi)應(yīng)設(shè)置不排蒸汽的高壓蒸汽滅菌器或其他消毒裝置。

安全防護(hù)防止氣溶膠的擴(kuò)散與吸入 防止氣溶膠的擴(kuò)散

無論是哪一種微生物實(shí)驗(yàn)室，只要操作感染性物質(zhì)，氣溶膠的產(chǎn)生是不可避免的。因此，除了控制空氣傳播感染的第一環(huán)節(jié)，還要防止氣溶膠擴(kuò)散，這是控制空氣傳播感染的第二環(huán)節(jié)。在實(shí)驗(yàn)室中，有多種措施可以有效防止氣溶膠的擴(kuò)散，例如“圍場操作”、“屏障隔開”、“有效攔截”、“定向氣流”、“空氣消毒”等，這些防護(hù)措施的綜合利用可以獲得良好的效果。

1、圍場操作：圍場操作是把感染性物質(zhì)局限在一個(gè)盡可能小的空間(例如生物安全柜)內(nèi)進(jìn)行操作，使之不與人體直接接觸，并與開放之空氣隔離，避免人的暴露。實(shí)驗(yàn)室也是圍場，是第二道防線，可起到“雙重保護(hù)”作用。圍場大小要適宜，以達(dá)到既保證安全又經(jīng)濟(jì)合理的目的。目前，進(jìn)行圍場操作的設(shè)施設(shè)備往往組合應(yīng)用了機(jī)械、氣幕、負(fù)壓等多種防護(hù)原理。

2、屏障隔離：氣溶膠一旦產(chǎn)生并突破圍場，要靠各種屏障防止其擴(kuò)散，因此也可以視為第二層圍場。例如，生物安全實(shí)驗(yàn)室圍護(hù)結(jié)構(gòu)及其緩沖室或通道，能防止氣溶膠進(jìn)一步擴(kuò)散，保護(hù)環(huán)境和公眾健康。按國家標(biāo)準(zhǔn)《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》的要求，進(jìn)出核心實(shí)驗(yàn)室的緩沖間是必需的設(shè)置。這是因?yàn)椋?/p>

(1)避免污染擴(kuò)散，盡可能把污染限制在最小的范圍內(nèi)；

(2)一旦室內(nèi)出現(xiàn)正壓，工作人員可在緩沖室內(nèi)換氣、凈化空氣、安全撤離；

(3)退出實(shí)驗(yàn)室時(shí)可在其內(nèi)換鞋、脫去外層衣服和手套、必要的消毒，避免內(nèi)層衣服污染或污染其他房間。

3、定向氣流：對(duì)生物安全三級(jí)以上實(shí)驗(yàn)室的要求是保持定向氣流。其要求包括：

(1)實(shí)驗(yàn)室周圍的空氣應(yīng)向?qū)嶒?yàn)室內(nèi)流動(dòng)?以杜絕污染空氣向外擴(kuò)散的可能，保證不危及公眾；

(2)在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部，清潔區(qū)的空氣應(yīng)向操作區(qū)流動(dòng)，保證沒有逆流，以減少工作人員暴露的機(jī)會(huì)；(3)輕污染區(qū)的空氣應(yīng)向污染嚴(yán)重的區(qū)域流動(dòng)。

以BSL-3實(shí)驗(yàn)室為例，原則上半污染區(qū)與外界氣壓相比應(yīng)為一20Pa，核心實(shí)驗(yàn)室氣壓與半污染區(qū)相比也應(yīng)為一20Pa，感染動(dòng)物房和解剖室的氣壓應(yīng)低于普通BSL-3實(shí)驗(yàn)室核心區(qū)。

4、有效消毒滅菌：實(shí)驗(yàn)室生物安全的各個(gè)環(huán)節(jié)都少不了消毒技術(shù)的應(yīng)用，實(shí)驗(yàn)室的消毒主要包括空氣、表面、儀器、廢物、廢水等的消毒滅菌。在應(yīng)用中應(yīng)注意根據(jù)生物因子的特性和消毒對(duì)象進(jìn)行有針對(duì)性的選擇。并應(yīng)注意環(huán)境條件對(duì)消毒效果的影響。凡此種種，都應(yīng)在操作規(guī)程中有詳細(xì)規(guī)定。

5、有效攔截：是指生物安全實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的空氣在排人大氣之前，必須通過高效粒子空氣(HEPA)過濾器過濾，將其中感染性顆粒阻攔在濾材上。這種方法簡單、有效、經(jīng)濟(jì)實(shí)用。HEPA濾器的濾材是多層、網(wǎng)格交錯(cuò)排列的，因此其攔截感染性氣溶膠顆粒的原理在于：(1)過篩：直徑小于濾材網(wǎng)眼的顆粒可能通過，大于的被攔截；(2)沉降：對(duì)于直徑0．3／zm以上的氣溶膠粒子作用較強(qiáng)。氣溶膠粒子直徑雖然小于網(wǎng)眼，由于粒子的重力和熱沉降或靜電沉降作用也可能被阻攔在濾材上；

(3)慣性撞擊：氣溶膠粒子直徑雖然小于網(wǎng)眼，由于粒子的慣性撞擊作用也可能阻攔在濾材上；

(4)粒子擴(kuò)散：對(duì)于直徑小于o．1Um的氣溶膠粒子作用較強(qiáng)，氣溶膠粒子雖然小于網(wǎng)眼，由于粒子的擴(kuò)散作用也可能被阻攔在濾材上。

依照上述原理，最不容易濾除的粒子是0．1～0．3ｕｍ的粒子。防止氣溶膠的吸入

盡管采取了上述防止氣溶膠擴(kuò)散的種種措施，但由于氣溶膠具有很強(qiáng)的擴(kuò)散能力，還是不可避免地污染實(shí)驗(yàn)室的空氣。所以，實(shí)驗(yàn)室工作人員仍然需要進(jìn)行個(gè)人防護(hù)，以防止氣溶膠吸人。

氣溶膠的傳染

今后在室內(nèi)生物氣溶膠重點(diǎn)應(yīng)放在應(yīng)用基礎(chǔ)上，主要有：

1、室內(nèi)生物氣溶膠的來源和危害性；

2、室內(nèi)生物氣溶膠污染與疾病的關(guān)系；

3、影響室內(nèi)生物氣溶膠的環(huán)境因素；

4、室內(nèi)微生物環(huán)境下生物氣溶膠的有益應(yīng)用；

5、控制室內(nèi)生物氣溶膠的技術(shù)；

6、研究生物氣溶膠檢測儀和大流量空氣微生物采樣器；

7、規(guī)范室內(nèi)生物氣溶膠研究方法和程序

通過以上7個(gè)方面的研究，可以從根本上預(yù)防和控制室內(nèi)生物污染，改善空氣質(zhì)量，包括工作環(huán)境的空氣質(zhì)量的居住環(huán)境的空氣質(zhì)量，從而達(dá)到預(yù)防疾病的目的。

第二篇：疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制中的“5+1”

疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制中的“5+1”

廖國東

(茂名市疾病預(yù)防控制中心，廣東茂名 525000)

【摘要】 目的 探討疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制的重要因素和關(guān)健環(huán)節(jié),最大限度地避免實(shí)驗(yàn)誤差,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果及時(shí)準(zhǔn)確和客觀公證。方法 采用回顧性分析方法，對(duì)影響疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重要因素和關(guān)健環(huán)節(jié)進(jìn)行總結(jié)和分析。結(jié)果 擁有充足優(yōu)秀的實(shí)驗(yàn)人員（人）、配備先進(jìn)優(yōu)良的實(shí)驗(yàn)設(shè)備（機(jī)）、應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)科學(xué)的實(shí)驗(yàn)方法（法）、建設(shè)規(guī)范安全的實(shí)驗(yàn)環(huán)境（環(huán)）、使用合格優(yōu)質(zhì)的實(shí)驗(yàn)材料（料），加上對(duì)實(shí)驗(yàn)全過程的規(guī)范控制（過程控制），則可以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果及時(shí)準(zhǔn)確和客觀公證。結(jié)論 “人、機(jī)、法、環(huán)、料+過程控制” 的“5+1”是疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制的重要因素和關(guān)健環(huán)節(jié)。

【關(guān)鍵詞】疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)；微生物實(shí)驗(yàn)室；質(zhì)量控制

疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室是疾病預(yù)防控制工作中一個(gè)十分重要的技術(shù)支持部門，主要承擔(dān)著各種突發(fā)公共衛(wèi)生事件的應(yīng)急檢驗(yàn)、傳染病監(jiān)測檢驗(yàn)、食品及環(huán)境衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)、醫(yī)療及托幼機(jī)構(gòu)消毒效果監(jiān)測檢驗(yàn)、生活飲用水監(jiān)測檢驗(yàn)等任務(wù)[1]，所出具的檢驗(yàn)結(jié)果是衛(wèi)生行政執(zhí)法、疾病預(yù)防控制工作的重要基礎(chǔ)和參考。如此重大的意義決定了疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室必須時(shí)刻注重實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制工作，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果及時(shí)準(zhǔn)確和客觀公證。本文就是通過對(duì)影響疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重要因素和關(guān)健環(huán)節(jié)進(jìn)行總結(jié)和分析，為各級(jí)疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制工作提供參考。材料與方法

依據(jù)ISO/IECl7025：2005《檢測和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力的通用要求》[2]、《實(shí)驗(yàn)室資質(zhì)認(rèn)定評(píng)審準(zhǔn)則》（國認(rèn)實(shí)函[2006]141號(hào)）、《食品檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)資質(zhì)認(rèn)定評(píng)審準(zhǔn)則》（國認(rèn)實(shí)[2010]49號(hào)）[4]的相關(guān)要求，結(jié)合本中心微生物實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制工作進(jìn)行回顧性總結(jié)和分析。2 結(jié)果

2.1 實(shí)驗(yàn)人員條件

2.1.1 客觀方面 微生物實(shí)驗(yàn)室專業(yè)技術(shù)人員過硬的檢驗(yàn)水平是保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的

[3][作者簡介] 廖國東(1974－),男,大學(xué)本科，醫(yī)學(xué)士，副主任技師，主要從事微生物檢驗(yàn)工作。重要條件。因此，疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)工作需要, 從專業(yè)、學(xué)歷和職稱等方面合理配置足夠的檢驗(yàn)人員,滿足實(shí)驗(yàn)的要求，如果承擔(dān)了食品檢驗(yàn)任務(wù)的疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)的食品檢驗(yàn)人員還應(yīng)是只能在一個(gè)食品檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)中執(zhí)業(yè)[4]，不得同時(shí)在其它食品檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)中兼職；所選用的實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)該是正規(guī)醫(yī)學(xué)院校檢驗(yàn)相關(guān)專業(yè)畢業(yè)的學(xué)生，較好地掌握了英語、生物化學(xué)、環(huán)境生物學(xué)、醫(yī)學(xué)生物學(xué)、醫(yī)學(xué)微生物學(xué)、醫(yī)學(xué)免疫學(xué)、醫(yī)學(xué)寄生蟲學(xué)等醫(yī)學(xué)知識(shí)；檢驗(yàn)人員上崗前應(yīng)經(jīng)過專業(yè)化的檢驗(yàn)技術(shù)和操作技能培訓(xùn)，并經(jīng)考核合格后持證上崗，上崗后還應(yīng)有不定期接受繼續(xù)醫(yī)學(xué)教育、參加學(xué)術(shù)交流會(huì)、專題討論會(huì)等外出學(xué)習(xí)交流和培訓(xùn)提高的機(jī)會(huì)。

2.1.2 主觀方面 疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室的檢驗(yàn)人員應(yīng)有高度的責(zé)任心和嚴(yán)謹(jǐn)務(wù)實(shí)的工作態(tài)度，認(rèn)真對(duì)待每一次實(shí)驗(yàn)和每一份標(biāo)本，最大限度地避免實(shí)驗(yàn)誤差, 確保檢測結(jié)果客觀公證、準(zhǔn)確可靠；此外，檢驗(yàn)人員還應(yīng)不斷提高自學(xué)能力，通過崗位自學(xué)如及時(shí)研讀近期專業(yè)學(xué)術(shù)期刊和專業(yè)書籍等途徑及時(shí)了解微生物檢驗(yàn)領(lǐng)域的新進(jìn)展和新動(dòng)態(tài)，更新和掌握微生物檢驗(yàn)新知識(shí)和新技術(shù),并應(yīng)用于實(shí)際工作中。2.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備配置

2.2.1 合理配置所需的儀器設(shè)備 先進(jìn)優(yōu)良的實(shí)驗(yàn)設(shè)備是微生物實(shí)驗(yàn)室實(shí)現(xiàn)檢驗(yàn)工作的基本硬件要求。隨著醫(yī)療器械研發(fā)水平的不斷提高，越來越多的檢測設(shè)備進(jìn)入了疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室，疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室的檢驗(yàn)手段已經(jīng)從以前的主要依靠手工操作發(fā)展為以手工操作結(jié)合先進(jìn)優(yōu)良的檢測設(shè)備來實(shí)現(xiàn)檢驗(yàn)工作。目前，疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室最常用到的儀器設(shè)備有恒溫培養(yǎng)箱、二氧化碳培養(yǎng)箱、冰箱與低溫冰箱、高壓蒸汽滅菌器、生物安全柜、實(shí)時(shí)熒光PCR擴(kuò)增儀、蛋白印跡儀、流式細(xì)胞儀、高速冷凍離心機(jī)等。因此，疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)本轄區(qū)的實(shí)際情況和檢測工作的需要正確配置所需的儀器設(shè)備,以滿足當(dāng)前疾病預(yù)防控制工作的需要，特別是要滿足食物中毒、傳染病疫情等突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急檢驗(yàn)的需要。

2.2.2 加強(qiáng)儀器設(shè)備的管理 隨著政府和社會(huì)對(duì)疾病預(yù)防控制工作的重視不斷提升和經(jīng)費(fèi)投入的不斷加大，疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室所擁有的各種實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備也越來越多。為了確保這些儀器設(shè)備能正常運(yùn)行和高效地為實(shí)驗(yàn)工作服務(wù)，應(yīng)加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備的管理工作，對(duì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的設(shè)備要進(jìn)行有效的控制，包括建立儀器設(shè)備檔案、確定儀器設(shè)備保管人、制作儀器設(shè)備操作規(guī)程（SOP文件）或作業(yè)指導(dǎo)書、加貼儀器設(shè)備狀態(tài)標(biāo)識(shí)、規(guī)范儀器設(shè)備使用和維修的登記、對(duì)儀器設(shè)備進(jìn)行檢定/校準(zhǔn)和定期維護(hù)等。2.3 實(shí)驗(yàn)方法應(yīng)用

2.3.1 盡量應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法 疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室出具的檢驗(yàn)報(bào)告是具有一定的法律效力的，因此疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)優(yōu)先選用現(xiàn)行有效的國家、行業(yè)、地方、企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的檢驗(yàn)方法，并對(duì)這類標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法進(jìn)行學(xué)習(xí)和受控，編制標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP文件），在實(shí)際工作中嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法及其標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP文件）開展實(shí)驗(yàn)工作。

2.3.2 非標(biāo)方法應(yīng)進(jìn)行驗(yàn)證和審批 有部分實(shí)驗(yàn)工作確實(shí)沒有現(xiàn)行有效的標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法時(shí)，可從知名的技術(shù)組織或有關(guān)科技文獻(xiàn)、權(quán)威期刊公布的方法中選擇合適的方法，或者自行研制實(shí)驗(yàn)方法。但這類方法在開始正式使用之前應(yīng)按相關(guān)程序?qū)υ摲椒ㄟM(jìn)行準(zhǔn)確性和精密度的驗(yàn)證和鑒定，并經(jīng)機(jī)構(gòu)學(xué)術(shù)委員會(huì)和質(zhì)量管理部門的審批同意，再經(jīng)過對(duì)方法進(jìn)行一定樣本數(shù)量的預(yù)實(shí)驗(yàn),證明實(shí)驗(yàn)室能夠重復(fù)試驗(yàn)中的指標(biāo)才可使用, 并要及時(shí)告知被檢方，從而保證得到可接受的檢測結(jié)果。2.4 實(shí)驗(yàn)環(huán)境建設(shè)

2.4.1 建設(shè)規(guī)范的生物安全實(shí)驗(yàn)室 隨著我國疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)改革事業(yè)的推進(jìn)，特別是隨著我國各種重大傳染病監(jiān)測力度的不斷加強(qiáng)，如艾滋病監(jiān)測、流感監(jiān)測、手足口病監(jiān)測等，我國疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)面臨越來越多的高生物危險(xiǎn)性標(biāo)本，這就要求疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室必須建設(shè)規(guī)范的生物安全實(shí)驗(yàn)室，實(shí)驗(yàn)室的總體布局和各部位的安排要充分考慮減少潛在的對(duì)樣本的污染和對(duì)人員的危害，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部設(shè)置明顯的分區(qū)(污染區(qū)、半污染區(qū)、清潔區(qū))標(biāo)識(shí)，采取有效的隔離措施防止交叉污染，確保標(biāo)本、實(shí)驗(yàn)人員和外環(huán)境的安全。

2.4.2 規(guī)范實(shí)驗(yàn)室的管理 根據(jù)工作流程和實(shí)驗(yàn)要求對(duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行規(guī)范化管理,室內(nèi)溫度控制在 18∽26℃, 相對(duì)濕度控制在 45∽65%，每天進(jìn)行記錄；利用沉降法定期監(jiān)測無菌室或潔凈實(shí)驗(yàn)室的空氣潔凈度及紫外線強(qiáng)度,并要進(jìn)行消毒效果監(jiān)測，以保證符合樣品檢測所需的環(huán)境要求。當(dāng)無菌效果監(jiān)測不合要求時(shí), 應(yīng)立即采取有效措施進(jìn)行徹底消毒, 直至檢查后達(dá)到要求為止，同時(shí),在此條件下的檢測結(jié)果視為無效結(jié)果, 應(yīng)重新安排檢測。2.5 實(shí)驗(yàn)材料選擇

2.5.1 選用合格的供應(yīng)商 實(shí)驗(yàn)材料是開展各種實(shí)驗(yàn)活動(dòng)和必需物資，其質(zhì)量的優(yōu)劣會(huì)直接影響到實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室需要用到的實(shí)驗(yàn)材料種類非常多，包括各種培養(yǎng)基、增菌液、診斷血清、染色液、生化及免疫試劑、標(biāo)準(zhǔn)菌株、樣本容器、試管、一次性吸嘴、一次性手套等等。這些實(shí)驗(yàn)材料的生產(chǎn)廠家多、材料質(zhì)量好差摻雜，稍 有不慎就會(huì)造成錯(cuò)誤的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。所以對(duì)實(shí)驗(yàn)材料的選擇必需謹(jǐn)慎和嚴(yán)格，一定要選擇合格的供應(yīng)商，選擇的原則是國內(nèi)外知名品牌和市場信譽(yù)度高的產(chǎn)品、有質(zhì)量保證能力和服務(wù)保證能力的企業(yè)，并且要求供應(yīng)商應(yīng)出具三證資質(zhì)證明(許可證、注冊(cè)證、經(jīng)銷證)。2.5.2 加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)材料的驗(yàn)收 驗(yàn)收人員在驗(yàn)收實(shí)驗(yàn)材料時(shí), 應(yīng)仔細(xì)核對(duì)實(shí)驗(yàn)材料名稱、數(shù)量、規(guī)格、批號(hào)、生產(chǎn)日期、保質(zhì)期及密封狀況等,做好入庫登記手續(xù)。對(duì)于一些特殊的實(shí)驗(yàn)材料還應(yīng)進(jìn)行相關(guān)的驗(yàn)收試驗(yàn)，如革蘭氏染色液應(yīng)分別用革蘭氏陽性和陰性標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行染色試驗(yàn)；診斷血清除了要檢查其透明度與色澤是否與標(biāo)準(zhǔn)相符外還要采用已知陽性及陰性菌株測試其敏感性和特異性；對(duì)各種生化試劑和培養(yǎng)基（分離培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基、增菌培養(yǎng)基、顯色培養(yǎng)基等）應(yīng)選用已知特性的標(biāo)準(zhǔn)菌株分別進(jìn)行性能試驗(yàn), 符合要求者才可使用。此外，實(shí)驗(yàn)材料還應(yīng)按各種實(shí)驗(yàn)材料的保存要求妥善規(guī)范保存，如避光、低溫、干燥等；培養(yǎng)基或試劑盒一旦打開使用, 應(yīng)及時(shí)記錄開啟日期，使用過程如發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基結(jié)塊、變色則不能使用。2.6 實(shí)驗(yàn)過程質(zhì)量控制

2.6.1 樣品的采集和流轉(zhuǎn) 實(shí)驗(yàn)開始前應(yīng)按實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的要求正確采集樣品，并規(guī)范保存和運(yùn)送，否則會(huì)對(duì)結(jié)果造成很大的影響。疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)涉及的樣品種類有食品、血液、糞便、咽拭子、空氣等，有些項(xiàng)目對(duì)標(biāo)本是有特殊要求的，如進(jìn)行艾滋病CD4檢測的血液樣品在采集時(shí)應(yīng)使用抗凝劑且不能在冰箱保存、培養(yǎng)腦膜炎雙球菌的樣品應(yīng)在室溫下運(yùn)送和保存等等，只有熟悉各類樣品的采集方法和保存方式，才能確保下一步的實(shí)驗(yàn)?zāi)茼樌M(jìn)行下去。

2.6.2 實(shí)驗(yàn)及實(shí)驗(yàn)原始記錄 要嚴(yán)格按照微生物實(shí)驗(yàn)的各項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程進(jìn)行實(shí)驗(yàn),不得隨意改動(dòng)操作程序；嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作, 避免實(shí)驗(yàn)環(huán)境中微生物污染，并要做好生物安全防護(hù)；實(shí)驗(yàn)前認(rèn)真核對(duì)樣品送檢單和樣品編號(hào)；通過對(duì)照(包括空白對(duì)照、陰性對(duì)照和陽性對(duì)照)對(duì)PCR等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)和血清學(xué)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行質(zhì)量控制，繪制室內(nèi)質(zhì)控圖,并對(duì)質(zhì)控圖進(jìn)行分析以指導(dǎo)和改進(jìn)工作；進(jìn)行細(xì)菌學(xué)實(shí)驗(yàn)的同時(shí)用標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行質(zhì)量控制。實(shí)驗(yàn)過程應(yīng)詳細(xì)書寫實(shí)驗(yàn)原始記錄,記錄的信息包括樣本的情況、檢測項(xiàng)目、檢驗(yàn)步驟、檢驗(yàn)結(jié)果、檢驗(yàn)人、檢驗(yàn)開始和結(jié)束日期、所用儀器設(shè)備、試劑、環(huán)境溫濕度等，以保證在必要時(shí)可以再現(xiàn)檢測過程。

2.6.3 數(shù)據(jù)處理及報(bào)告核發(fā) 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)出來后應(yīng)按規(guī)范進(jìn)行科學(xué)的處理，包括引用正確的計(jì)量單位、有效數(shù)字的正確修約及平均值的計(jì)算等；實(shí)驗(yàn)報(bào)告在發(fā)出之前要經(jīng)過復(fù)核, 復(fù)核內(nèi)容包括檢測人員是否按規(guī)定進(jìn)行對(duì)照試驗(yàn)、原始數(shù)據(jù)及導(dǎo)出結(jié)果是否正確、陰陽性結(jié)果 [5]是否發(fā)生偏離、原始數(shù)據(jù)記錄是否準(zhǔn)確清楚等，校核無誤后, 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)及時(shí)編制、出具實(shí)驗(yàn)報(bào)告。

2.6.4 實(shí)驗(yàn)資料歸檔 全部實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，應(yīng)及時(shí)將采樣記錄、實(shí)驗(yàn)原始記錄、留底報(bào)告等有關(guān)實(shí)驗(yàn)資料整理歸檔，按相關(guān)規(guī)定條件和期限保管。

3.討論

實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制是一項(xiàng)十分艱巨的工作，特別是對(duì)于疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室而言，由于其主要從事的是產(chǎn)品、公共場所等樣品的衛(wèi)生指標(biāo)菌檢驗(yàn)以及傳染病監(jiān)測和突發(fā)公共衛(wèi)生事件中相關(guān)病原微生物的檢驗(yàn)工作,所出具的實(shí)驗(yàn)結(jié)果是衛(wèi)生行政執(zhí)法、突發(fā)公共衛(wèi)生事件有效應(yīng)對(duì)的重要技術(shù)支持和依據(jù)，具有一定的法律效力，因而疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室必須不斷加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制工作，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果及時(shí)準(zhǔn)確和客觀公證，這樣才能確保有關(guān)衛(wèi)生行政執(zhí)法能夠順利實(shí)施和確保突發(fā)公共衛(wèi)生事件的有效應(yīng)對(duì)。實(shí)際上，在疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室的工作中,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果質(zhì)量的因素是很多的，本文所討論的“人、機(jī)、法、環(huán)、料+過程控制” 這六方面是任何一個(gè)微生物實(shí)驗(yàn)室都必須認(rèn)真抓好的質(zhì)量控制工作中的最基本的也是最關(guān)鍵的要素，只要這六方面做好了，整個(gè)實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制工作也就上檔次了。

[參 考 文 獻(xiàn)] [1] 劉曉明,潘明亮.在經(jīng)濟(jì)欠發(fā)達(dá)地區(qū)建設(shè)衛(wèi)生檢驗(yàn)中心實(shí)驗(yàn)室的設(shè)想[J].國際醫(yī)藥衛(wèi)生導(dǎo)報(bào)，2005,11（9）：124-125.[2]《檢測和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力的通用要求》(ISO/IECl7025：2005).[3]《實(shí)驗(yàn)室資質(zhì)認(rèn)定評(píng)審準(zhǔn)則》（國認(rèn)實(shí)函[2006]141號(hào)）.[4]《食品檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)資質(zhì)認(rèn)定評(píng)審準(zhǔn)則》（國認(rèn)實(shí)[2010]49號(hào)）.[5] 臧格,彭俊云,梁國明,等.細(xì)菌檢驗(yàn)室間質(zhì)評(píng)工作體會(huì)[J].國際醫(yī)藥衛(wèi)生導(dǎo)報(bào)，2004,10(24)：78.附：作者通信地址：廣東省茂名市茂南開發(fā)區(qū)天橋路318號(hào)（郵政編碼：525000）

作者聯(lián)系電話：***

（2012-03-09）

第三篇：微生物實(shí)驗(yàn)室守則

微生物實(shí)驗(yàn)室守則

1.須著長及膝蓋之實(shí)驗(yàn)衣，並穿著長褲，若有長髮應(yīng)予以適當(dāng)束結(jié)，嚴(yán)禁穿著拖鞋或涼鞋。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)嚴(yán)禁喧嘩嬉鬧、追逐、抽煙及吃食等行為。

2.非必要物品勿置於實(shí)驗(yàn)室之桌面，實(shí)驗(yàn)結(jié)束後，需加以清理，物品並應(yīng)歸於原位。

3.實(shí)驗(yàn)前後消毒桌面及手部，實(shí)驗(yàn)時(shí)操作桌面應(yīng)隨時(shí)保持乾淨(jìng)。

4.應(yīng)熟悉實(shí)驗(yàn)室內(nèi)所有設(shè)備，配置及正確操作方法。

5.顯微鏡使用後應(yīng)清理乾淨(jìng)，並清點(diǎn)附件是否齊備，關(guān)閉電源後再拔掉插頭，並歸定位，發(fā)現(xiàn)有任何異狀，即報(bào)告指導(dǎo)老師處理，任何配件或裝置避免任意交換或拆卸。

6.不可於點(diǎn)燃酒精燈時(shí)噴酒精，並隨時(shí)注意自己及他人之安全，酒精燈不用時(shí)應(yīng)即熄滅。

7.實(shí)驗(yàn)所用之菌體有些為致病菌，故須以無菌操作且避免用手及口的動(dòng)作，如咬手指或用舌頭舔濕標(biāo)籤。

8.實(shí)驗(yàn)用之所有菌體或器具未經(jīng)許可嚴(yán)禁攜出室外。9.接種針（環(huán)）於接菌前後務(wù)必以酒精燈滅菌。

10.含菌體之容器，應(yīng)妥予加蓋，非必要時(shí)切勿任意打開。

11.實(shí)驗(yàn)後待丟棄物品應(yīng)妥善包裹或予殺菌處理再丟棄；固體培養(yǎng)基則不得倒入水槽中。

12.實(shí)驗(yàn)結(jié)束後，應(yīng)確實(shí)關(guān)閉所有不用之電源。

13.任何意外事件，應(yīng)即報(bào)告助教及指導(dǎo)老師，亦應(yīng)熟知其應(yīng)變措施。

14.實(shí)驗(yàn)操作過程中必須隨時(shí)注意自身及他人之安全，若有危及自身及他人安全之事件或違反實(shí)驗(yàn)守則者，本實(shí)驗(yàn)課成績一律以零分計(jì)。

微生物實(shí)驗(yàn)室守則

1.須著長及膝蓋之實(shí)驗(yàn)衣，並穿著長褲，若有長髮應(yīng)予以適當(dāng)束結(jié)，嚴(yán)禁穿著拖鞋或涼鞋。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)嚴(yán)禁喧嘩嬉鬧、追逐、抽煙及吃食等行為。

2.非必要物品勿置於實(shí)驗(yàn)室之桌面，實(shí)驗(yàn)結(jié)束後，需加以清理，物品並應(yīng)歸於原位。3.實(shí)驗(yàn)前後消毒桌面及手部，實(shí)驗(yàn)時(shí)操作桌面應(yīng)隨時(shí)保持乾淨(jìng)。

4.應(yīng)熟悉實(shí)驗(yàn)室內(nèi)所有設(shè)備，配置及正確操作方法。

5.顯微鏡使用後應(yīng)清理乾淨(jìng)，並清點(diǎn)附件是否齊備，關(guān)閉電源後再拔掉插頭，並歸定位，發(fā)現(xiàn)有任何異狀，即報(bào)告指導(dǎo)老師處理，任何配件或裝置避免任意交換或拆卸。

6.於點(diǎn)燃酒精燈時(shí)噴酒精，並隨時(shí)注意自己及他人之安全，酒精燈不用時(shí)應(yīng)即熄滅。

7.實(shí)驗(yàn)所用之菌體有些為致病菌，故須以無菌操作且避免用手及口的動(dòng)作，如咬手指或用舌頭舔濕標(biāo)籤。

8.實(shí)驗(yàn)用之所有菌體或器具未經(jīng)許可嚴(yán)禁攜出室外。

9.接種針（環(huán)）於接菌前後務(wù)必以酒精燈滅菌。

10.含菌體之容器，應(yīng)妥予加蓋，非必要時(shí)切勿任意打開。

11.實(shí)驗(yàn)後待丟棄物品應(yīng)妥善包裹或予殺菌處理再丟棄；固體培養(yǎng)基則不得倒入水槽中。

12.實(shí)驗(yàn)結(jié)束後，應(yīng)確實(shí)關(guān)閉所有不用之電源。13.任何意外事件，應(yīng)即報(bào)告助教及指導(dǎo)老師，亦應(yīng)熟知其應(yīng)變措施。

14.實(shí)驗(yàn)操作過程中必須隨時(shí)注意自身及他人之安全，若有危及自身及他人安全之事件或違反實(shí)驗(yàn)守則者，本實(shí)驗(yàn)課成績一律以零分計(jì)。

第四篇：微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)則

微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)則

1、進(jìn)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)穿工作服，離室時(shí)脫去放在指定處所，工作服應(yīng)定期消毒洗滌。

2、非必要物品勿帶入實(shí)驗(yàn)室。

3、實(shí)驗(yàn)室內(nèi)應(yīng)保持肅靜；不得高聲談笑；不準(zhǔn)吸煙和進(jìn)食；無菌室在工作前、工作后均須全面清掃、消毒。

4、如帶有細(xì)菌的增菌液污染桌面或地面，應(yīng)立即用消毒溶液傾覆其上，半小時(shí)后方可抹去；如有污染物污染工作服，應(yīng)立即將工作服脫去以高壓蒸汽法滅菌。

5、如有污染物污染手部，應(yīng)立即將手浸泡消毒液內(nèi)，經(jīng)5分鐘后，再用肥皂和水刷洗干凈。如有污染物吸入口內(nèi)，應(yīng)立即吐出，并以大量清水漱口，根據(jù)需要亦可服用有關(guān)藥物以防發(fā)生感染染。

6、接種環(huán)用后應(yīng)立即在酒精燈火焰上燒灼滅菌；沾菌的吸管、玻片等用后應(yīng)分別浸泡在盛有消毒液的玻璃缸內(nèi)，其他已污染的試管、平皿等亦必須置于專用容器內(nèi)，經(jīng)滅菌后再進(jìn)行洗滌。

7、用于消毒的酒精應(yīng)放在加蓋搪瓷缸內(nèi)，如不慎著火，應(yīng)立即用搪瓷蓋蓋上與空氣隔絕即可滅掉火焰。

8、工作完畢時(shí)工作臺(tái)用沾有消毒液的抹布擦拭干凈，地面應(yīng)用墩布擦拭干凈。

9、檢驗(yàn)人員應(yīng)具備高度責(zé)任感，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)態(tài)度從事檢驗(yàn)工作。

第五篇：微生物實(shí)驗(yàn)室管理制度

目 的：規(guī)范微生物室管理規(guī)范，以保證微生物實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行。范 圍：適用于微生物實(shí)驗(yàn)室

依 據(jù)：GB/T 19489-2008《實(shí)驗(yàn)室 生物安全通用要求》； 執(zhí)行部門：化驗(yàn)室微生物檢驗(yàn)室

職 責(zé)：1.微生物檢驗(yàn)員負(fù)責(zé)微生物實(shí)驗(yàn)室的管理。2.實(shí)驗(yàn)室主管負(fù)責(zé)對(duì)微生物實(shí)驗(yàn)室管理情況進(jìn)行檢查。內(nèi) 容：

本中心微生物實(shí)驗(yàn)室管理制度包括微生物實(shí)驗(yàn)室人員管理制度、微生物室出入管理 制度、微生物室環(huán)境管理制度、微生物室的使用管理制度。微生物實(shí)驗(yàn)室藥品管理制度。

1.微生物實(shí)驗(yàn)室的人員管理

1.1 微生物實(shí)驗(yàn)室由微生物檢驗(yàn)員管理及使用,其他人員須經(jīng)主管人員批準(zhǔn)后方可進(jìn)入和使 用。

1.2 微生物實(shí)驗(yàn)室的人員需經(jīng)過相關(guān)的培訓(xùn)。2.微生物實(shí)驗(yàn)室出入管理 2.1 人員出入管理：

2.1.1 人員進(jìn)入微生物實(shí)驗(yàn)室潔凈區(qū)前，需要洗手消毒；在一級(jí)緩沖室換實(shí)驗(yàn)服、戴帽子、換鞋后，進(jìn)入風(fēng)淋室，風(fēng)淋后，進(jìn)入二級(jí)緩沖室準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)。2.1.2 實(shí)驗(yàn)操作前須帶上無菌手套和口罩。2.2 物料出入管理：

2.2.1 物料進(jìn)入微生物實(shí)驗(yàn)室以前，脫去外包裝或者用酒精棉球擦拭后，放置于傳遞窗中。2.2.2 物料放置于傳遞窗后，開啟紫外0.5小時(shí)，同時(shí)將微生物實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的凈化系統(tǒng)、紫外 燈打開。

2.2.3 紫外開啟0.5小時(shí)以后，關(guān)閉紫外，并將物品轉(zhuǎn)移于實(shí)驗(yàn)操作臺(tái)上。

2.2.4 實(shí)驗(yàn)完畢后，微生物實(shí)驗(yàn)室物品經(jīng)傳遞窗傳出后，經(jīng)高溫滅菌后廢液、廢物倒入廢液桶處理。

3.微生物實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境管理 3.1 微生物實(shí)驗(yàn)室的清潔管理

微生物實(shí)驗(yàn)室的清潔分為一般清潔及徹底清潔，其具體的清潔部位、方式方法、頻率見下表所示：

3.2 微生物實(shí)驗(yàn)室常用消毒劑及其配制

4.微生物實(shí)驗(yàn)室的使用管理

4.1 微生物實(shí)驗(yàn)室使用之前，應(yīng)先開啟微生物實(shí)驗(yàn)室自凈系統(tǒng)30分鐘。每次使用前應(yīng)用消毒 液擦拭超凈工作臺(tái)及其他一切可能引起污染的死角，然后開紫外燈滅菌30分鐘，同時(shí)開啟超凈工作臺(tái)。操作完畢后，用消毒液擦拭臺(tái)面，做好衛(wèi)生，開紫外燈30分鐘，并記錄紫外燈照射時(shí)間。注：當(dāng)紫外燈使用1000小時(shí)應(yīng)更換。

4.2 微生物實(shí)驗(yàn)室使用時(shí)，應(yīng)同時(shí)進(jìn)行沉降菌監(jiān)測，將含有營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)皿在各監(jiān)測點(diǎn)正向放置，打開蓋子，暴露30分鐘，然后蓋上，將營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基放入30～35℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時(shí)，觀察結(jié)果，每皿菌落數(shù)應(yīng)≤1個(gè)，否則應(yīng)加強(qiáng)清潔消毒工作，必要時(shí)驗(yàn)證生物安全柜的性能。5.微生物實(shí)驗(yàn)室藥品及培養(yǎng)基管理制度

藥品及培養(yǎng)基是微生物試驗(yàn)的基礎(chǔ)，直接影響微生物試驗(yàn)結(jié)果。適宜的培養(yǎng)基制備方法、貯藏條件和質(zhì)量控制試驗(yàn)是提供優(yōu)質(zhì)培養(yǎng)基的保證。5.1 藥品及培養(yǎng)基的采購及接收

微生物實(shí)驗(yàn)室所用的藥品及培養(yǎng)基必須是符合國家相關(guān)資質(zhì)的公司所出產(chǎn)的。實(shí)驗(yàn)室根據(jù)檢驗(yàn)需要申購所需的培養(yǎng)基并做好相應(yīng)的接收記錄。5.1培養(yǎng)基的接收

微生物檢驗(yàn)室應(yīng)指定專人負(fù)責(zé)培養(yǎng)基的管理，在接收培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)核對(duì)培養(yǎng)基的品名、來源、批號(hào)、生產(chǎn)日期、有效期、數(shù)量，脫水培養(yǎng)基應(yīng)附有處方和使用說明，并做好接收記錄。5.2培養(yǎng)基的制備

培養(yǎng)基可按處方配制，也可使用按處方生產(chǎn)的符合規(guī)定的脫水培養(yǎng)基。在制備培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)選擇質(zhì)量符合要求的脫水培養(yǎng)基或單獨(dú)配方組分進(jìn)行配制。脫水 培養(yǎng)基應(yīng)附有處方和使用說明，配制時(shí)應(yīng)按使用說明上的要求操作以確保培養(yǎng)基的質(zhì)量符合要求，不得使用結(jié)塊或顏色發(fā)生改變的脫水培養(yǎng)基。脫水培養(yǎng)基或單獨(dú)配方組分應(yīng)在適當(dāng)?shù)臈l件下貯藏，如低溫、干燥和避光，所有的容器應(yīng)密封，尤其是盛放脫水培養(yǎng)基的容器。商品化的成品培養(yǎng)基除了應(yīng)附有處方和使用說明外，還應(yīng)注明有效期、貯藏條件、適用性檢查試驗(yàn)的質(zhì)控菌和用途。

為保證培養(yǎng)基質(zhì)量的穩(wěn)定可靠，各脫水培養(yǎng)基或各配方組分應(yīng)準(zhǔn)確稱量，并要求有一定的精確度。配制培養(yǎng)基最常用的溶劑是純化水，特殊情況下，可能需要用去離子水和蒸餾水。應(yīng)記錄各稱量物的重量和水的使用量。配制培養(yǎng)基所用容器和配套器具應(yīng)潔凈，可用純化水沖洗玻璃器皿以消除清潔劑和外來物質(zhì)的殘留，對(duì)熱敏感的培養(yǎng)基如糖發(fā)酵培養(yǎng)基其分裝容器一般應(yīng)預(yù)先進(jìn)行滅菌，以保證培養(yǎng)基的無菌性。

脫水培養(yǎng)基應(yīng)完全溶解于水中，再行分裝與滅菌。配制時(shí)若需要加熱助溶，應(yīng)注意不要過度加熱，以避免培養(yǎng)基顏色變深。如需要添加其他組分時(shí)，加入后應(yīng)充分混勻。應(yīng)按照生產(chǎn)商提供或使用者驗(yàn)證的參數(shù)進(jìn)行培養(yǎng)基的滅菌。商品化的成品培養(yǎng)基必須附有所用滅菌方法的資料。培養(yǎng)基滅菌一般采用濕熱滅菌技術(shù)，特殊培養(yǎng)基可采用薄膜過濾除菌。

培養(yǎng)基若采用不適當(dāng)?shù)募訜岷蜏缇鷹l件，有可能引起顏色變化、透明度降低、瓊脂凝固力或pH 的改變。因此，培養(yǎng)基應(yīng)采用驗(yàn)證的滅菌程序滅菌，培養(yǎng)基滅菌方法和條件，應(yīng)通過無菌性試驗(yàn)和促生長試驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證。此外，對(duì)高壓滅菌器的蒸汽循環(huán)系統(tǒng)也要加以驗(yàn)證，以保證在一定裝載方式下的正常熱分布。溫度緩慢上升的高壓滅菌器可能導(dǎo)致培養(yǎng)基的過熱，過度滅菌可能會(huì)破壞絕大多數(shù)的細(xì)菌和真菌培養(yǎng)基促生長的質(zhì)量。滅菌器中培養(yǎng)基的容積和裝載方式也將影響加熱的速度。因此，應(yīng)根據(jù)滅菌培養(yǎng)基的特性，進(jìn)行全面的滅菌程序驗(yàn)證。應(yīng)確定每批培養(yǎng)基滅菌后的pH值（冷卻至室溫25 ℃ 測定）。若培養(yǎng)基處方中未列出pH 值的范圍，除非經(jīng)驗(yàn)證表明培養(yǎng)基的pH 值允許的變化范圍很寬，否則，pH值的范圍不能超過規(guī)定值士0.2。

制成平板或分裝于試管的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行下列檢查：容器和蓋子不得破裂，裝量應(yīng)相同，盡量避免形成氣泡，固體培養(yǎng)基表面不得產(chǎn)生裂縫或漣漪，在冷藏溫度下不得形成結(jié)晶，不得污染微生物等。應(yīng)檢查和記錄批數(shù)量、有效期及培養(yǎng)基的無菌檢查。5.3 培養(yǎng)基的貯藏

自配的培養(yǎng)基應(yīng)標(biāo)記名稱、批號(hào)、配制日期等信息，并在已驗(yàn)證的條件下貯藏。商品化的成品培養(yǎng)基標(biāo)簽上應(yīng)標(biāo)有名稱、批號(hào)、生產(chǎn)日期、失效期及培養(yǎng)基的有關(guān)特性，生產(chǎn)商和使用者應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)基使用說明書上的要求進(jìn)行貯藏，所采用的貯藏和運(yùn)輸條件應(yīng)使成品培養(yǎng)基最低限度的失去水分并提供機(jī)械保護(hù)。

培養(yǎng)基滅菌后若貯藏在高壓滅菌器中，質(zhì)量可能會(huì)受影響，一般不提倡這種存放法。瓊脂培養(yǎng)基不得在O ℃ 或O ℃ 以下存放，因?yàn)槔鋬隹赡芷茐哪z特性。

培養(yǎng)基應(yīng)避光保存，若要長期保存，應(yīng)置于密閉容器中以防止水分流失。瓊脂平板最好現(xiàn)配現(xiàn)用，如置冰箱保存，一般不超過1周，且應(yīng)密閉包裝，若延長保存期限，保存期需經(jīng)驗(yàn)證確定。固體培養(yǎng)基滅菌后的再融化只允許1 次，以避免因過度受熱造成培養(yǎng)基質(zhì)量下降或微生物污染。培養(yǎng)基的再融化一般采用水浴或流通蒸汽加熱。若使用微波爐，應(yīng)避免培養(yǎng)基過度受熱及水分的蒸發(fā)，更要注意安全。融化的培養(yǎng)基應(yīng)置于45 ～50 ℃ 的水浴中，不得超過8 小時(shí)。傾注培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)擦干培養(yǎng)基容器外表面的水分，避免容器外壁的水滴進(jìn)人培養(yǎng)基中造成污染。使用過的培養(yǎng)基（包括失效的培養(yǎng)基）應(yīng)按照國家污染廢物處理相關(guān)規(guī)定進(jìn)行。5.4 質(zhì)量控制試驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對(duì)試驗(yàn)用培養(yǎng)基建立質(zhì)量控制程序，以確保所用培養(yǎng)基質(zhì)量符合相關(guān)檢測的需要。實(shí)驗(yàn)室配制或商品化的成品培養(yǎng)基的質(zhì)量依賴于其制備過程，采用不適宜方法制備的培養(yǎng)基將影響微生物的生長或復(fù)蘇，從而影響試驗(yàn)結(jié)果的可靠性。所有配制好的培養(yǎng)基均應(yīng)進(jìn)行質(zhì)量控制試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)室配制的培養(yǎng)基的常規(guī)監(jiān)控項(xiàng)目是pH、適用性檢查試驗(yàn)，定期的穩(wěn)定性檢查以確定有效期。

培養(yǎng)基在有效期內(nèi)應(yīng)依據(jù)適用性檢查試驗(yàn)確定培養(yǎng)基質(zhì)量是否符合要求。有效期的長短將取決于在一定存放條件下（包括容器特性及密封性）的培養(yǎng)基其組成成分的穩(wěn)定性。

除藥典附錄另有規(guī)定外，在實(shí)驗(yàn)室中，若采用已驗(yàn)證的配制和滅菌程序制備培養(yǎng)基且過程受控，那么同一批脫水培養(yǎng)基的適用性檢查試驗(yàn)可只進(jìn)行1 次。

如果培養(yǎng)基的制備過程未經(jīng)驗(yàn)證，那么每一批培養(yǎng)基均要進(jìn)行適用性檢查試驗(yàn)，試驗(yàn)的菌種可根據(jù)培養(yǎng)基的用途從相關(guān)附錄中進(jìn)行選擇，也可增加從生產(chǎn)環(huán)境及產(chǎn)品中常見的污染菌株。培養(yǎng)基的質(zhì)屋控制試驗(yàn)若不符合規(guī)定，應(yīng)尋找不合格的原因，以防止問題重復(fù)出現(xiàn)。任何不符合要求的培養(yǎng)基均不能使用。

用于環(huán)境監(jiān)控的培養(yǎng)基須特別防護(hù)，最好要雙層包裝和終端滅菌，如果不能采用終端滅菌的培養(yǎng)基，那么在使用前應(yīng)進(jìn)行100 ％的預(yù)培養(yǎng)以防止外來的污染物帶到環(huán)境中及避免出現(xiàn)假陽性結(jié)果。